KR20140148096A - INNATE IMMUNE ENHANCING AND ANTIVIRAL COMPOSITION COMPRISING EXTRACT OF Cimicifuga heracleifolia Komarow - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to an innate immunity-enhancing and antiviral composition containing an extract of Cimicifuga heracleifolia Komarov, and to a method for enhancing animal innate immunity and antiviral activity, the method comprising administering an extract of Cimicifuga heracleifolia Komarov to a non-human animal in need of innate immunity enhancement. The innate immunity-enhancing and antiviral composition according to the present invention exhibits antiviral activity and innate immunity-enhancing efficacy, and thus can be applied for preventing and treating bacterial and viral infectious diseases, and can be widely used as a medicine or functional health food for enhancing and regulating immunity of immunodeficient or immunosuppressed patients, and as an innate immunity-enhancing and antiviral feed having a purpose of enhancing disease-resistance of animals. Furthermore, the innate immunity-enhancing and antiviral composition according to the present invention hardly induces toxicity or side effects, thus can be safely used despite long-term use for preventive purposes.

Description

승마 추출물을 포함하는 선천면역 증강 및 항바이러스 조성물{INNATE IMMUNE ENHANCING AND ANTIVIRAL COMPOSITION COMPRISING EXTRACT OF Cimicifuga heracleifolia Komarow}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to an innate immunity enhancing and antiviral composition comprising an equine extract,

본 발명은 선천면역 증강 및 항바이러스 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 의약, 건강기능식품 및 사료 조성물 등으로 이용될 수 있는 승마 추출물을 포함하는 선천면역 증강 및 항바이러스 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a congenital immune enhancement and antiviral composition, and more particularly to a congenital immunostimulating and antiviral composition comprising an equine extract which can be used as a medicament, a health functional food and a feed composition.

면역은 태어날 때부터 지니고 있는 선천 면역(innate immunity)과 후천적으로 생활하면서 적응되어 얻어지는 획득 면역(acquired immunity)으로 구분될 수 있다. 선천 면역은 일명 '자연 면역'이라고도 하며, 항원에 대해 비특이적으로 반응하고, 특별한 기억작용은 없는 것을 특징으로 한다.Immunity can be divided into innate immunity, which is born from birth, and acquired immunity, which is obtained by adapting to life. Congenital immunity is also called "natural immunity" and is characterized by nonspecific responses to antigens and no special memory effect.

생체내 선천적 방어 면역시스템 중 최근 가장 중요시되는 연구 분야는 인터페론(interferon)에 의해 유도되는 선천성 면역분야이며, 이러한 인터페론 매개 면역의 활성화는 다양한 전염병 병원체에 대한 근본적인 예방 방법이 될 수 있다. 따라서 인터페론 활성화 기전 연구 및 인터페론을 유도시킬 수 있는 면역조절제제의 개발 연구가 활발하다. 또한, 병원체의 감염에 따른 선천 면역의 방어기작의 하나로 면역 인자(염증 사이토카인)가 분비되고, 이들 인자들에 의해 염증반응이 유발되어 병원체에 대한 방어가 이루어진다. 따라서 적정한 수준의 염증반응 유도 역시 다양한 전염병 병원체에 대한 예방 및 치료 방법이 될 수 있으며, 이를 유도시킬 수 있는 면역증강제제의 개발 연구가 필요하다.Among the in vivo innate defense immune systems, the most important research field is the field of congenital immunity induced by interferon. Such activation of interferon-mediated immunity can be a fundamental preventive measure against various infectious pathogens. Therefore, studies on the interferon activation mechanism and development of immunoregulatory agents capable of inducing interferon have been actively conducted. In addition, immune factors (inflammatory cytokines) are secreted as a defense mechanism against congenital immune diseases caused by pathogenic infections, and inflammatory responses are induced by these factors to protect against pathogens. Therefore, induction of inflammatory response at an appropriate level may be a preventive and therapeutic method for various infectious disease pathogens, and development of an immunity enhancer that can induce the inflammatory response is needed.

바이러스(virus)란 라틴어로 독성물질을 의미하며, 세균여과지(0.22㎛)를 통과하는 일군의 감염형 병원성 입자를 의미한다. 바이러스는 숙주세포의 종류에 따라 박테리오 파지, 식물 바이러스, 동물 바이러스로 분류하기도 하며, 핵산의 종류에 따라 DNA 바이러스, RNA 바이러스로 분류할 수 있다. 최근 신종플루, AI 및 구제역 등 다양한 바이러스 질병이 사회적으로 큰 문제를 일으켰으며, 이에 따라 바이러스 질병의 효과적인 대책에 대한 고민이 사회적으로 큰 관심을 불러일으키고 있다.Virus means a toxic substance in Latin and refers to a group of infectious pathogenic particles that pass through bacterial filter paper (0.22 μm). Viruses can be classified as bacteriophages, plant viruses, and animal viruses according to the type of host cells. DNA viruses and RNA viruses can be classified according to the type of nucleic acid. Recently, various virus diseases such as H1N1, AI, and foot-and-mouth disease have caused a great social problem, and the concern about effective measures for viral diseases has raised a great interest in society.

현재 바이러스성 질병을 예방하기 위해서 가장 좋은 방법은 백신접종이다. 그럼에도 불구하고 바이러스에 의한 질병의 경우, 대체적으로 많은 바이러스 혈청형(아형) 생성 등에 따른 백신의 효율성 문제가 중요하게 제기되고 있다. 이러한 백신의 문제점을 보완해 줄 수 있는 바이러스 예방용 억제제의 개발 및 보급은 중요한 사항이며, 이를 위해 특히 바이러스에 대한 초기 방어시스템인 생체내 선천적 면역시스템을 자극하여 개체 동물의 면역력을 높여주는 예방제제의 발굴 및 개발은 중요한 제제 개발 방법이 될 수 있다.Currently, vaccination is the best way to prevent viral diseases. Nevertheless, in the case of diseases caused by viruses, the efficiency of vaccines due to the generation of many virus serotypes (subtypes) is important. The development and dissemination of antiviral inhibitors that can overcome the problems of these vaccines is an important issue. For this purpose, a preventive agent that enhances immunity of an individual animal by stimulating the in vivo innate immune system, Can be an important method of drug development.

인플루엔자 바이러스의 증식을 억제하는 대표적인 항바이러스 제제로는 아만타딘(amantadine)과 리만타딘(rimantadine)이 있으나, 이들 두 가지 항바이러스 제제들은 혈청형 A형 인플루엔자 바이러스에만 효과적이며, M2 단백질이 없는 혈청형 B형 인플루엔자 바이러스에는 효과가 없는 것으로 확인되었다. 또한 아만타딘과 리만타딘은 사용 시 인플루엔자 바이러스 M2 단백질의 이온채널기능에 영향을 미치지 못하는 변이 바이러스의 출현이 매우 쉽게 일어나는 단점이 있는 것으로 확인되고 있다. 이러한 단점을 보완하기 위하여 16종의 모든 혈청형 A형 인플루엔자 바이러스와 혈청형 B형 인플루엔자 바이러스에 효과적인 항바이러스 제제로 자나미비르(zanamivir)와 오셀타미비르(oseltamivir)가 개발되었다. 그러나 자나미비르는 흡입 및 정맥 투여해야 하는 단점이 있으며, 오셀타미비르는 경구투여가 가능하나 최근 내성 바이러스의 출현 보고와 경구투여 시 구토와 현기증 등의 부작용이 있어 단점으로 지적되고 있다.Amantadine and rimantadine are two typical antiviral agents that inhibit the proliferation of influenza virus. However, these two antiviral agents are effective only for the serotype A influenza virus and the serotype B It has been confirmed that it is not effective against influenza virus. In addition, amantadine and rimantadine have been found to have a disadvantage in that the mutant virus, which does not affect the ion channel function of the influenza virus M2 protein, appears very easily. To overcome this drawback, zanamivir and oseltamivir have been developed as antiviral agents effective against all 16 serotype A influenza viruses and serotype B influenza viruses. However, there is a disadvantage that Zanamivir should be administered by inhalation and intravenous injection. Ocelaminivir can be administered orally, but it is pointed out as a disadvantage due to recent reports of the emergence of resistant virus and side effects such as vomiting and dizziness when administered orally.

또한, 뉴캐슬병 바이러스에 대한 백신은 크게 생독 백신과 사독 백신으로 구분되는데, 가장 널리 이용되어온 대표적인 뉴캐슬병 생독 백신주인 B1주와 La Sota주(Clone주 포함)는 백신 접종 반응을 유발하는 것으로 알려져 있으며, 전 세계적으로 사용되고 있는 뉴캐슬병 사독 백신인 다가혼합 사독 오일 백신은 1회 백신 접종으로 3종 이상의 질병이 동시에 예방될 수 있으나, 산란계 농장의 경우 면역력 저하로 인한 뉴캐슬병 발생 피해 사례가 늘어나고 있다.In addition, vaccines against Newcastle Disease virus are classified into virulence vaccine and Sadox vaccine. It is known that the most widely used Newcastle disease virulence vaccine, B1 strain and La Sota strain (including Clone strain) The multivitamins combined vaccine oil vaccine, a Newcastle Disease vaccine that is used globally, can prevent three or more diseases at the same time by a single vaccination. However, in the case of laying hens farms, cases of Newcastle disease caused by immunity reduction are increasing.

또한, 수포성 구내염 바이러스(Vesicular stomatitis virus)의 주된 통제 방법은, 질병의 완전 치료가 불가능하기 때문에, 구제역과 마찬가지로 예방 및 차단 방역과 발생 지역 내 감수성 가축의 박멸이 최선의 방법이다.In addition, the main control method of vesicular stomatitis virus is the complete treatment of the disease, so as with foot-and-mouth disease, prevention and blocking prevention and eradication of susceptible domestic livestock are the best methods.

이러한 상황하에서, 최근 해외 및 국내에서 기존의 항바이러스 제제의 단점을 극복하고자 많은 노력들이 이루어지고 있으며, 그 노력 중의 하나로 국내에서는 생약 추출물 및 식물 추출물을 대상으로 항바이러스 효능에 대한 연구가 활발히 진행중이다.Under these circumstances, many efforts have recently been made to overcome the disadvantages of existing antiviral agents both in foreign countries and domestic ones. As one of the efforts, researches on antiviral efficacy of herbal medicine extracts and plant extracts are actively underway in Korea .

한편, 승마(升摩, Cimicifuga heracleifolia Komarow)는 미나리아재비과에 속하는 여러해살이풀로 끼멸가리라고도 불리며, 승마와 그 동속식물의 뿌리줄기는 약용으로 사용한다. 산지는 한국, 중국, 일본 등이며, 우리나라에서는 눈빛 승마(C. dahyrica Max.), 황새 승마(C. foetida L.), 촛대 승마(C. simplex Wormsk) 등이 있다. 뿌리 줄기는 굵은 마디 모양으로 고르지 않으며 길이 6∼8 ㎝, 지름 10∼25 ㎝이다. 바깥면은 갈색 혹은 흑색으로 뿌리줄기의 위쪽에 몇개의 큰 줄기자국이 있고, 많은 뿌리의 잔기가 붙어 있다. On the other hand, horse riding (Cimicifuga heracleifolia Komarow) is also called perennial herbaceous perennial herb belonging to the buttercups family, and the rootstock of equine and its plants are used for medicinal purposes. The mountains are Korea, China and Japan. In Korea, there are C. dahyrica Max., C. foetida L. and C. simplex Wormsk. The rootstock is uneven in the shape of thick nodule, 6 ~ 8 ㎝ in length, and 10 ~ 25 ㎝ in diameter. The outer surface is brown or black, with several large stem marks on the top of the rootstock, with many root residues attached.

한방에서는 승양, 해포, 투진, 해독의 효능을 가진 것으로 알려져 있다. 승마의 근경에는 미시푸긴(cimicifugine), 살리실산(salicylic acid), 탄닌(tannin), 레진(resin), 카페인산(caffeic acid), 페룰린산(ferulic acid), 시미틴(cimitin), 알칼로이드(alkaloid), 당류, 유기산, 글리코시드(glycosides), 이소페루라산(isoferulic acid)이 함유되어있다.(강소신의학원 편, 중약대사전, 도서출판 정담,pp3362~3372, 1998) 또한, 사이클로아르탄(cycloartane)계의 테트라사이클릭 트리테르페노이드(tetracyclic triterpenoid)를 다수 함유하고 있으나, 그 종류 및 함량은 기원식물의 종류에 따라 다르다. 그 중 눈빛 승마는 비스나진의 성분을 가지고 있고, 진경 작용이 있는 것으로 알려져 있다(생약학, 생약학교재편찬위원회, 동명사, 서울, 2000. 승마 참조). 이러한 승마의 추출물이 글루타메이트(glutamate) 형성 및 GDH (glutamate dehydrogenase)의 활성도 변화를 통해 인슐린분비를 조절한다는 보고가 있으며(Lee, KH. et al., Mol.Cells., 17(3), pp509-514, 2004), 또한 승마의 유효성분으로 알려진 비스나진은 혈압을 강하시키고 칼슘의 유입을 억제함으로써 혈관 평활근 수축을 억제하는 것으로 알려 있기도 하다(생약학, 생약학교재편찬위원회, 동명사, 서울, 2000. 승마 참조; Ito M et al., Chem Pharm Bull., 24(4), pp580-583, 1976; Duarte, J. et al., Eur J Pharmacol., 286(2), pp115-122, 1995). 하지만, 아직 승마의 면역증강 효능이나 항바이러스 효능에 대한 보고는 찾아볼수 없다. In one room, it is known to have the efficacy of winning, hunting, tinnitus and detoxification. The roots of horse riding include cimicifugine, salicylic acid, tannin, resin, caffeic acid, ferulic acid, cimitin, alkaloids, Glycosides, and isoferulic acid. (See, for example, Kagaku Shin-kai, Encyclopedia of Chinese Medicine, Book Publishing Co., pp. 3362-3372, 1998) Furthermore, cycloartane, (Tetracyclic triterpenoid), but the type and content of the tetracyclic triterpenoid differs depending on the kind of the origin plant. Among them, horse riding is known to have bisnaginous components and to have an epidermal action (see, for example, Haemophilia, Compendium of Herbal Medicine Textbook, Dongmyungsa, Seoul, 2000.). It has been reported that these horse riding extracts regulate insulin secretion through the formation of glutamate and the activity of glutamate dehydrogenase (GDH) (Lee, KH et al., Mol. Cells. 17 (3) 514, 2004). Also, it is known that visnazin, which is known as an effective ingredient of horse riding, suppresses vascular smooth muscle contraction by decreasing blood pressure and inhibiting calcium influx (Korean Journal of Pharmacology and Toxicology, Seoul, 2000) Duarte, J. et al., Eur J Pharmacol., 286 (2), pp 115-122, 1995). However, there is still no report on the immune enhancement efficacy or antiviral efficacy of horse riding.

이에, 기존의 항바이러스 제제의 단점을 극복하여 독성 및 부작용이 거의 없이 우수한 면역 증강 효과 및 항바이러스 활성을 발휘할 수 있는 승마 추출물을 이용한 조성물에 대한 요구가 여전히 존재하는 실정이다.
Therefore, there is still a need for a composition using an equine extract which can overcome the disadvantages of existing antiviral agents and exhibit excellent immunity enhancing effect and antiviral activity with little toxicity and side effects.

본 발명자들은 승마의 추출물이 선천 면역의 주요 세포인 대식 세포를 활성화시켜 다양한 바이러스의 증식을 억제시킬 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다. 본 발명은 독성 및 부작용이 거의 없어 장기간 안정성을 확보하면서, 각종 바이러스 또는 세균 감염성 질병의 예방 및 치료, 약학 조성물, 건강기능식품 또는 가축 사료 조성물 등에 효과적으로 이용될 수 있는 승마 추출물을 포함하는 면역 증강 및 항바이러스 조성물 및 동물의 면역 증강 및 항바이러스 활성 증강 방법을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
The present inventors completed the present invention by confirming that the extract of horse riding can activate macrophages which are the main cells of innate immunity and inhibit the proliferation of various viruses. The present invention relates to a method for preventing and treating various viruses or bacterial infectious diseases while ensuring long-term stability with little toxicity and side effects, and also to provide an immunological enhancer including an equine extract which can be effectively used for a pharmaceutical composition, a health functional food, It is an object of the present invention to provide an antiviral composition and a method for enhancing immunity and antiviral activity of an animal.

상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 일 측면은 승마 추출물을 포함하는 선천면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물을 제공한다.One aspect of the present invention to solve the above problems provides a concomitant immunomodulatory and antiviral pharmaceutical composition comprising a horse riding extract.

또한, 본 발명의 다른 일 측면은 승마 추출물을 포함하는 선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품을 제공한다.Another aspect of the present invention provides a congenital immunomodulating and antiviral health functional food comprising an equine horse extract.

또한, 본 발명의 또 다른 일 측면은 승마 추출물을 포함하는 선천 면역 증강 및 항바이러스용 사료 조성물을 제공한다.In addition, another aspect of the present invention provides a congenital immunostimulating and antiviral feed composition comprising an equine extract.

또한, 본 발명의 또 다른 일 측면은 승마 추출물을, 인간을 제외한 선천면역 증강이 필요한 동물에 투여하는 것을 포함하는 동물의 선천면역 증강 및 항바이러스 활성 증강을 제공한다.Yet another aspect of the present invention provides for enhancing innate immunity and enhancing antiviral activity in an animal comprising administering an equine horse extract to an animal in need of congenital immunity enhancement other than human.

본 발명에서 상기 승마 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알콜 및 이들의 혼합용매로 구성되는 군으로부터 선택되는 용매, 바람직하게는 메탄올, 에탄올, 또는 부탄올로 추출한 것을 포함한다. 또한 본 발명에서, 상기 추출물에는 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 조정제물 또는 정제물 중 어느 하나도 포함하는 것으로 한다.In the present invention, the horse riding extract includes those extracted with water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, and a mixed solvent thereof, preferably methanol, ethanol, or butanol. In addition, in the present invention, the above-mentioned extract includes any one of the extract obtained by the extraction treatment, the diluted or concentrated liquid of the extract, the dried product obtained by drying the extract, or the adjusted product or the purified product.

본 발명에서 “항바이러스”에는 예를 들어, 인플루엔자, 조류 인플루엔자, 뉴캐슬바이러스, 수포성 구내염 바이러스(Vesicular stomatitis virus), 콕사키바이러스(Cossackievirus), 수족구바이러스(Enterovirus-71), 헤르페스 심플렉스 바이러스(Herpes Simplex Virus), 구제역바이러스(Foot and mouth disease, FMD), 콜로라도참진드기열바이러스, 레오바이러스, 인간면역 결핍 바이러스, 및 간염바이러스 B형 C형, 돼지열병바이러스, 소바이러스성 설사병(Bovine Viral Diarrhea Virus), 돼지생식기호흡기증후군(.Porcine reproductive and respiratory syndrome virus), 돼지오제스키병, 로타바이러스, 파보바이러스, 돼지유행성설사(Porcine epidemic diarrhea virus)등에 적용될 수 있으나 이제 제한되지 않는다.
The term "antiviral" in the present invention includes, for example, influenza, avian influenza, Newcastle virus, Vesicular stomatitis virus, Cossackievirus, Enterovirus-71, Herpes simplex virus Herpes Simplex Virus, Foot and Mouth Disease (FMD), Colorado tick fever virus, Leovirus, Human Immunodeficiency Virus, and Hepatitis Virus Type B Type C, Pig Fever, Bovine Viral Diarrhea Virus, porcine reproductive and respiratory syndrome virus, porcine Ozski disease, rotavirus, parvovirus, porcine epidemic diarrhea virus, and the like.

본 발명에 따르면 우수한 선천 면역 증강 효능을 발휘하는 승마 추출물을 이용함으로써 각종 바이러스 및 세균 감염성 질병의 예방 및 치료에 효과적으로 적용될 수 있으며, 면역력 증진에 기여할 수 있다.According to the present invention, it is possible to effectively apply to the prevention and treatment of various viruses and bacterial infectious diseases by using an equine extract which exhibits excellent innate immune enhancing effect, and can contribute to enhancement of immunity.

또한, 본 발명에 따른 승마 추출물을 포함하는 선천면역 증강 및 항바이러스용 조성물은 독성이나 부작용을 거의 일으키지 않으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.In addition, the composition for concealed immunity enhancement and antivirus comprising the horse riding extract according to the present invention hardly causes toxicity or side effects, so that it can be safely used for prolonged use even for prophylactic purposes.

따라서, 본 발명에 따른 조성물은 박테리아 및 바이러스 감염성 질환의 예방 및 치료용으로 적용될 수 있고, 면역이 저하되거나 면역이 억제된 환자의 면역력 증강 및 조절을 위한 약학 조성물이나 건강기능식품, 및 동물의 항질병 강화를 목적으로 하는 선천면역증강용 사료 조성물 등으로 광범위하게 이용될 수 있다.Therefore, the composition according to the present invention can be applied for the prevention and treatment of bacterial and viral infectious diseases, and can be applied to pharmaceutical compositions and health functional foods for immunity enhancement and control of immunocompromised or immunosuppressed patients, Can be widely used as an innate immunity enhancing feed composition for the purpose of enhancing disease.

또한, 본 발명에 따르면 승마 추출물을 선천면역 증강에 필요한 동물에 투여함으로써 동물의 면역을 효과적으로 안전하게 증강시킬 수 있다.
Further, according to the present invention, it is possible to effectively and safely enhance the immunity of an animal by administering an equine estrogen extract to an animal necessary for innate immunity enhancement.

도 1은 본 발명에 실시예에 따른 승마 추출물의 PR8-gfp(Swine influenza virus)에 대한 항바이러스 활성 실험결과를 나타낸다.
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 승마 추출물의 VSV-gfp(Vesicular stomatitis virus)에 대한 항바이러스 활성 실험결과를 나타낸다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 승마 추출물의 NDV-gfp(Newcastle disease virus)에 대한 항바이러스 활성 실험결과를 나타낸다.
도 4은 본 발명의 실시예에 따른 승마 추출물에 의한 인터페론-β 및 전염증성 사이토카인분비 유도 실험결과를 나타낸다.
FIG. 1 shows experimental results of antiviral activity against PR8-gfp (Swine influenza virus) of horse-riding extract according to an embodiment of the present invention.
FIG. 2 shows the results of antiviral activity test for VSV-gfp (Vesicular stomatitis virus) of horse-riding extract according to an embodiment of the present invention.
FIG. 3 shows the results of an antiviral activity test for NDV-gfp (Newcastle disease virus) of the horse riding extract according to an embodiment of the present invention.
4 shows results of induction of interferon-beta and proinflammatory cytokine secretion induced by horse-riding extract according to an embodiment of the present invention.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명의 기술적 사상을 용이하게 실시할 수 있을 정도로 상세히 설명하기 위하여, 본 발명의 바람직한 실시예를 설명하기로 한다.
DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

본 발명은 선천 면역의 주요 세포인 대식 세포를 활성화시켜 다양한 바이러스의 증식을 억제시킬 수 있는 승마 추출물을 이용함으로써 면역 증강 효과를 나타내는 것을 특징으로 한다.The present invention is characterized in that it exhibits an immunostimulating effect by using an equine extract which can activate macrophages which are the main cells of innate immunity and inhibit the multiplication of various viruses.

본 발명에 이용되는 승마 추출물은 일반적으로 천연물 추출에 사용되는 다양한 용매를 이용한 추출에 의하여 형성될 수 있으며, 예를 들어, 열수 추출, 알코올 추출 및 주정 추출로 이루어진 군으로부터 선택되는 일 이상의 방법에 의하여 형성될 수 있다.The horse rid extract used in the present invention can be generally formed by extraction using various solvents used for extracting natural products, for example, by one or more methods selected from the group consisting of hot water extraction, alcohol extraction and alcohol extraction .

일 실시예에서, 승마 추출물은, 증류수를 첨가하는 단계; 20~130℃, 바람직하게는 약 105℃의 온도에서 30~480분 동안, 바람직하게는 약 150분 동안 열수 추출하는 단계; 및 여과하는 단계를 거쳐 형성될 수 있다.In one embodiment, the horse riding extract comprises: adding distilled water; Hydrothermal extraction at a temperature of 20 to 130 캜, preferably about 105 캜, for 30 to 480 minutes, preferably about 150 minutes; And filtering.

승마 추출물은 각종 바이러스, 예를 들면 인플루엔자 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 수포성 구내염 바이러스 등에 대하여 우수한 항바이러스 활성을 나타내고, 면역 인자 유도능을 강하게 나타내며, 개체의 선천 면역을 증가시켜 바이러스의 감염 및 증식을 억제하는 효과를 발휘한다.The horse riding extract shows excellent antiviral activity against various viruses such as influenza virus, Newcastle disease virus, and vesicular stomatitis virus, strongly expresses immunity factor induction ability, and increases inherent immunity of an individual to inhibit infection and proliferation of virus .

또한, 승마 추출물은 세포 독성이나 부작용을 거의 나타내지 않으므로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.In addition, the horse riding extract has little cytotoxicity or side effects, so it can be safely used for long-term use.

본 발명에 있어서는 이와 같은 효능을 발휘하는 승마 추출물을 포함하는 선천면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물, 선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품 또는 선천면역 증강 및 항바이러스용 사료 조성물 등에 적용할 수 있다.In the present invention, it can be applied to congenital immunity enhancing and antiviral pharmaceutical compositions including equine extracts exhibiting such effects, congenital immunity enhancing and antiviral health functional foods, congenital immunity enhancing and antiviral feed compositions, and the like .

본 발명의 일 측면은 승마 추출물을 포함하는 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물에 관한 것이다.One aspect of the present invention relates to a concomitant immunoconjugate and antiviral pharmaceutical composition comprising an equine extract.

일 실시예에서, 본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함한다.In one embodiment, the pharmaceutical compositions for congenital immune enhancement and antiviral of the present invention further comprise a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent.

본 발명에 이용될 수 있는 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 본 발명의 효과를 해하지 않는 한 특히 제한되지 않으며, 예를 들어 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.The pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent which can be used in the present invention is not particularly limited so long as the effect of the present invention is not impaired, and examples thereof include fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrants, surfactants, lubricants, Flavoring agents, fragrances, preservatives, and the like.

약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제의 대표적인 예로는, 락토즈, 덱스트로스, 슈크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 전분, 젤라틴, 글리세린, 아카시아 고무, 알지네이트, 칼슘포스페이트, 칼슘카보네이트, 칼슘실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 식물성 오일, 주사가능한 에스테르, 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우리지 등을 들 수 있다.Representative examples of pharmaceutically acceptable carriers, excipients or diluents include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, maltitol, starch, gelatin, glycerin, acacia rubber, alginate, calcium phosphate, calcium carbonate, calcium Methylcellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, mineral oil, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil, injectable Ester, witepsol, macrogol, tween 61, cacao paper, and laurie paper.

본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽제, 에어로졸, 외용제, 좌제 및 주사제로 이루어진 군으로부터 선택되는 형태일 수 있다.The pharmaceutical composition for congenital immune enhancement and antiviral of the present invention may be in the form selected from the group consisting of tablets, pills, powders, granules, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, external preparations, suppositories and injections.

약학 조성물의 제제화 방법은 기술분야에 공지된 통상의 방법에 따라 수행될 수 있으며, 특히 제한되지 않는다.The preparation method of the pharmaceutical composition may be carried out according to a conventional method known in the art, and is not particularly limited.

본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물은 경구 또는 비경구 투여될 수 있으며, 투여량은 투여 대상의 연령, 성별, 체중, 상태, 질병의 정도, 약물의 형태, 투여 경로 및 기간에 따라 적절히 선택될 수 있으나, 일반적으로 약 5~500㎎/㎏, 바람직하게는 약 100~250㎎/㎏을 1일 1~3회 투여할 수 있다.The pharmaceutical composition for congenital immune enhancement and antiviral use of the present invention can be administered orally or parenterally. The dosage may be adjusted depending on the age, sex, weight, condition, degree of disease, drug form, May be appropriately selected, but generally about 5 to 500 mg / kg, preferably about 100 to 250 mg / kg, can be administered one to three times a day.

본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물의 제제화 방법, 투여량, 투여 경로, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있음이 통상의 기술자에게 명백하다.It will be apparent to those skilled in the art that the method of administration, dosage, route of administration, constituents, etc. of the pharmaceutical composition for congenital immune enhancement and antiviral of the present invention can be suitably selected from conventional techniques known in the art.

본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물은 박테리아 감염성 질병 또는 바이러스 감염성 질병의 예방 및 치료에 이용될 수 있다.The pharmaceutical composition for congenital immune enhancement and antiviral of the present invention can be used for the prevention and treatment of bacterial infectious diseases or viral infectious diseases.

특히, 본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물은 독성이나 부작용을 거의 갖지 않는 승마 추출물을 유효성분으로 함유하므로, 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.In particular, the pharmaceutical composition for congenital immune enhancement and antiviral of the present invention contains a horse extract which has little toxicity or side effects as an active ingredient, so that it can be safely used for prophylactic purposes for a long time.

일 실시예에서, 본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물은 유효 성분으로 승마 추출물 외에 다른 약학적 활성 성분을 함께 포함하거나, 또는 다른 유효 성분을 포함하는 약학 조성물과 혼합되어 이용될 수 있다.In one embodiment, the pharmaceutical composition for congenital immune enhancement and antiviral use of the present invention may be used as an active ingredient in combination with a pharmaceutically active ingredient in addition to the horse rid extract or in combination with a pharmaceutical composition containing other active ingredient .

예를 들어, 본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물은 암, 특히 전립선, 결장, 폐, 유방, 난소, 두경부, 외음부, 방광 및 뇌암, 신경교종뿐 아니라 비전염성 만성 질병의 예방 또는 치료용 약학 조성물, 인플루엔자, 조류 인플루엔자, 뉴캐슬바이러스, 수포성 구내염 바이러스(Vesicular stomatitis virus), 콕사키바이러스(Cossackievirus), 수족구바이러스(Enterovirus-71), 헤르페스 심플렉스 바이러스(Herpes Simplex Virus), 구제역바이러스(Foot and mouth disease, FMD), 콜로라도참진드기열바이러스, 레오바이러스, 인간면역 결핍 바이러스, 및 간염바이러스 B형 C형, 돼지열병바이러스, 소바이러스성 설사병(Bovine Viral Diarrhea Virus), 돼지생식기호흡기증후군(.Porcine reproductive and respiratory syndrome virus), 돼지오제스키병, 로타바이러스, 파보바이러스, 돼지유행성설사(Porcine epidemic diarrhea virus)등의 예방 또는 치료용 약학 조성물, 또는 자가면역 질병의 치료용 약학 조성물 등과 함께 사용될 수 있다.For example, the pharmaceutical composition for congenital immune enhancement and antiviral of the present invention can be used for preventing or treating cancer, particularly prostate, colon, lung, breast, ovary, head and neck, vulva, bladder, The present invention relates to a pharmaceutical composition for the treatment of influenza, avian influenza, avian influenza, Newcastle virus, Vesicular stomatitis virus, Cossackievirus, Enterovirus-71, Herpes Simplex virus, Foot and mouth disease (FMD), Colorado tick fever virus, reovirus, human immunodeficiency virus, and hepatitis B virus type C, swine fever virus, bovine viral diarrhea virus, porcine respiratory syndrome .Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, porcine Ozeki disease, rotavirus, parvovirus, porcine ep idemic diarrhea virus), or a pharmaceutical composition for the treatment of autoimmune diseases, and the like.

본 발명의 다른 일 측면은 승마 추출물을 포함하는 선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to a healthy functional food for congenital immune enhancement and antiviral comprising an equine extract.

일 실시예에서, 본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품은 식품학적으로 허용가능한 식품 보조 첨가제를 더 포함한다.In one embodiment, the congenital immunomodulating and antiviral health functional food of the present invention further comprises a pharmaceutically acceptable food-aid additive.

본 발명에 이용될 수 있는 식품학적으로 허용가능한 식품 보조 첨가제는 포도당, 과당, 말토스, 슈크로스, 덱스트린, 시클로덱스트린과 같은 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올과 같은 천연 탄수화물, 타우마틴, 스테비아 추출물 등의 천연 향미제, 사카린, 아스파르탐 등의 합성 향미제, 착색제, 펙트산 또는 그의 염, 알긴산 또는 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산화제 등을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다.Food-acceptable food supplementary additives that may be used in the present invention include sugars such as glucose, fructose, maltose, sucrose, dextrin, cyclodextrins, natural carbohydrates such as sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, erythritol, Natural flavors such as martin and stevia extract, synthetic flavors such as saccharin and aspartame, colorants, pectic acid or its salts, alginic acid or its salts, organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin , Alcohols, carbonating agents, and the like.

본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품은 분말, 과립, 정제, 캡슐, 캔디, 츄잉검, 젤리 및 음료로 이루어진 군으로부터 선택되는 형태일 수 있다.The congenital immunostimulant and antiviral health functional food of the present invention may be in a form selected from the group consisting of powder, granule, tablet, capsule, candy, chewing gum, jelly and beverage.

선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품 중의 승마 추출물의 함량은 식품의 형태, 풍미, 맛 등을 고려하여 적절하게 선택될 수 있으며, 예를 들어 건강기능식품 전체 중량에 대하여 0.01~30 중량%의 범위일 수 있다.The content of the horse riding extract in the healthy immunizing and antiviral health food may be appropriately selected in consideration of the shape, flavor, taste, etc. of the food, and may be 0.01 to 30% by weight Lt; / RTI >

본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품의 형태, 조성 및 제조방법 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있음이 통상의 기술자에게 명백하다. It is obvious to a person skilled in the art that the form, composition and manufacturing method of the healthy immunocomposting and antiviral health functional food of the present invention can be suitably selected from conventional techniques known in the art.

본 발명의 또 다른 일 측면은 승마 추출물을 포함하는 선천 면역 증강 및 항바이러스용 사료 조성물에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to a congenital immunostimulating and antiviral feed composition comprising an equine extract.

선천 면역 증강 및 항바이러스용 사료 조성물 중의 승마 추출물의 함량은 급여 가축의 종, 주령, 체중, 및 사육 조건 등에 따라 적절히 선택될 수 있으며, 사료 조성물 전체 중량에 대하여 0.01~95중량%, 바람직하게는 0.1~80중량%의 비율일 수 있다.The content of the horse riding extract in the composition for conferring immunity enhancement and antiviral composition may be appropriately selected according to species, age, body weight, rearing condition and the like of the feed livestock, and is preferably 0.01 to 95% by weight, 0.1 to 80% by weight.

본 발명의 선천면역 증강 및 항바이러스용 사료 조성물은 기술분야에 공지된 사료 제조방법에 따라 제조될 수 있으며, 예를 들어, 각종 사료 원료 또는 배합사료와 본 발명의 승마 추출물을 혼합한 후, 추가적인 가공 공정, 예를 들어 펠렛 형태로의 성형 또는 과립 등의 형태로의 절단 단계 등을 더 수행함으로써 제조될 수 있다.The feed composition for congenital immunity enhancement and antiviral of the present invention can be produced according to a feed production method known in the art. For example, after mixing various feed ingredients or compound feed with the horse riding extract of the present invention, For example, a step in the form of a pellet or a step in the form of granules or the like.

본 발명의 선천 면역 증강 및 항바이러스용 사료 조성물의 구성성분, 조성, 제조방법, 급여방법 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있음이 통상의 기술자에게 명백하다.It is apparent to those skilled in the art that the composition, composition, manufacturing method, feeding method, and the like of the congenital immunostimulating and antiviral feed composition of the present invention can be appropriately selected from conventional techniques known in the art.

본 발명의 또 다른 일 측면은 승마 추출물을, 인간을 제외한 선천 면역 증강이 필요한 동물에 투여하는 것을 포함하는 동물의 선천 면역 증강 및 항바이러스 활성 증강에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to enhancing the innate immunity and antiviral activity of an animal, which comprises administering an equine horse extract to an animal in need of innate immune enhancement other than human.

본 발명의 동물의 선천 면역 증강 및 항바이러스 활성 증강에 있어서, 승마 추출물의 투여량, 투여경로, 투여시기 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있음이 통상의 기술자에게 명백하다. It is clear to the ordinarily skilled artisan that the dose, administration route, administration timing, etc. of the horse riding extract in the intestinal immunity enhancement and antiviral activity enhancement of the animal of the present invention can be appropriately selected from the ordinary skill in the art .

이와 같이 본 발명에 있어서는 대식 세포를 활성화시켜 다양한 바이러스의 증식을 억제하고, 독성이나 부작용이 거의 없는 승마 추출물을 약학 조성물, 건강기능식품 또는 사료 조성물 등에 이용함으로써, 선천 면역 증강 및 조절, 동물의 항질병 강화 효과를 발휘할 수 있으며, 나아가 동물의 선천 면역 증강 및 항바이러스 활성 증강을 제공할 수 있다.
As described above, in the present invention, it is possible to inhibit proliferation of various viruses by activating macrophages, and using the horse rid extract, which has little toxicity or side effects, in a pharmaceutical composition, a health functional food or a feed composition, Can exert a disease-strengthening effect, and can further provide an innate immunity enhancement and an antiviral activity enhancement of an animal.

이하, 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail by way of examples. However, the following examples are illustrative of the present invention, and the scope of the present invention is not limited to the following examples.

[[ 실시예Example ]]

1. 생약추출물의 제조1. Preparation of herbal medicine extract

생약 추출물은 10배수의 증류수를 첨가하여 105℃에서 150분간 열수 추출하고, 0.45㎛로 1차 여과한 후, 0.22㎛로 최종 여과하여 침전물을 제거하였다. 이어서, pH를 7.0으로 조정하여 1.5㎖ Ep-튜브에 1㎖씩 분주하고 -20℃에서 저장하여 모든 실험에 사용하였다.
The crude herbal extract was extracted with hot water at 105 ° C for 10 minutes, distilled water was extracted for 150 minutes, primary filtered at 0.45 μm and finally filtered at 0.22 μm to remove the precipitate. Subsequently, the pH was adjusted to 7.0 and 1 ml of each was dispensed into a 1.5 ml Ep-tube and stored at -20 캜 for all experiments.

2. 마우스 2. Mouse 대식세포주를Macrophage cell line 이용한 승마 추출물의 항바이러스 활성 실험 Antiviral activity test of horse riding extract

: 다양한 바이러스, 즉 인플루엔자 바이러스(Influenza virus), 뉴캐슬병 바이러스(Newcastle disease virus), 수포성 구내염 바이러스(Vesicular stomatitis virus)에 대한 승마 추출물의 항바이러스 활성 실험을 하기와 같이 수행하였다.
: The antiviral activity of horse riding extracts against various viruses, Influenza virus, Newcastle disease virus and Vesicular stomatitis virus was tested as follows.

(1) 항바이러스 활성 실험 방법(1) Antiviral activity test method

1) 마우스 대식세포주인 Raw 264.7을 키워 실험에 사용하였다(8 × 105 cell/well)1) Mouse macrophage cell line Raw 264.7 was used for the experiment (8 × 10 5 cells / well)

2) 12-웰 TC 플레이트에 세포를 배양한 후, 1% FBS가 첨가된 DMEM에 상기에서 제조된 승마 추출물(pH 조정)을 처리하였다.2) After cells were cultured on a 12-well TC plate, the horse rub extract prepared above (pH adjustment) was treated with DMEM supplemented with 1% FBS.

3) 음성 대조군은 1% FBS가 첨가된 DMEM만을 처리하였고, 양성 대조군(Positive control)은 Mouse IFN-B(500 units/㎖)를 처리하였다.3) Negative control group was treated with DMEM supplemented with 1% FBS, and positive control was treated with Mouse IFN-B (500 units / ml).

4) 승마 처리 12시간 후, PR8-gfp(MOI:0.5), VSV-gfp(MOI:0.5), NDV-gfp(MOI:0.5)를 각각 접종하였다.4) PR8-gfp (MOI: 0.5), VSV-gfp (MOI: 0.5) and NDV-gfp (MOI: 0.5) were inoculated 12 hours after the horse riding treatment.

5) 접종하고 2시간 후 접종액을 제거하고, PBS로 3회 세척하고, 8~10시간 후 바이러스 감염 정도를 측정하였다.
5) After 2 hours of inoculation, the inoculum was removed, washed three times with PBS, and the degree of virus infection was measured after 8-10 hours.

(2) 항바이러스 활성 실험결과(2) Results of antiviral activity test

1) PR8-gfp(swine influenza virus) 실험결과1) PR8-gfp (swine influenza virus) test results

도 1에 PR8-gfp에 대한 항바이러스 활성 실험결과를 나타낸다. 도 1(a)는 감염 12시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내고, 도 1(b)는 감염 24시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내고, 도 1(c)는 세포 생존율을 나타내고, 도 1(d)는 바이러스의 역가를 나타낸다.Figure 1 shows the results of the antiviral activity test for PR8-gfp. 1 (a) shows GFP (green fluorescent protein) fluorescence image after 12 hours of infection, FIG. 1 (b) shows green fluorescent protein (GFP) fluorescence image after 24 hours of infection, 1 (d) shows the activity of the virus.

도 1로부터, 승마 추출물로 전처리한 결과 인플루엔자 바이러스 감염율이 현저하게 떨어졌으며, 세포 생존율도 바이러스 감염군에 비해 상승한 것을 확인할 수 있다.
From FIG. 1, it was confirmed that the infection rate of influenza virus was remarkably decreased and the cell survival rate was also increased compared to the virus infection group as a result of pretreatment with horse riding extract.

2) VSV-gfp(Vesicular stomatitis virus) 실험결과2) Results of VSV-gfp (Vesicular stomatitis virus)

도 2에 VSV-gfp에 대한 항바이러스 활성 실험결과를 나타낸다. 도 2(a)는 감염 12시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내고, 도 2(b)는 감염 24시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내고, 도 2(c)는 세포 생존율을 나타내고, 도 2(d)는 바이러스의 역가를 나타낸다.FIG. 2 shows the results of the antiviral activity test for VSV-gfp. FIG. 2 (a) shows GFP (green fluorescent protein) fluorescence image after 12 hours of infection, FIG. 2 (b) shows green fluorescent protein (GFP) fluorescence image after 24 hours of infection, , And Fig. 2 (d) shows the titer of the virus.

도 2으로부터 확인할 수 있는 바와 같이, 승마 추출물로 전처리한 결과 수포성 구내염 바이러스 감염율이 현저하게 떨어졌으며, 바이러스 역가도 감소하였고, 세포 생존율도 바이러스 감염군에 비해 상승하였다.
As can be seen from FIG. 2, as a result of pretreatment with horse riding extract, the rate of vesicular stomatitis virus infection was remarkably decreased, the virus level was decreased, and the cell survival rate was also higher than the virus infection group.

3) NDV-gfp(newcastle disease virus) 실험결과3) NDV-gfp (newcastle disease virus)

도 3에 NDV-gfp에 대한 항바이러스 활성 실험결과를 나타낸다. 도 3(a)는 감염 12시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내고, 도 3(b)는 감염 24시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내고, 도 3(c)는 세포 생존율을 나타내고, 도 3(d)는 RT-PCR을 통한 바이러스의 역가를 나타낸다.FIG. 3 shows the results of an antiviral activity test for NDV-gfp. 3 (a) shows GFP (green fluorescent protein) fluorescence image after 12 hours of infection, FIG. 3 (b) shows green fluorescent protein (GFP) fluorescence image after 24 hours of infection, And Fig. 3 (d) shows the titer of the virus through RT-PCR.

도 3로부터 확인할 수 있는 바와 같이, 승마 추출물로 전처리한 결과 뉴캐슬병 바이러스 감염율이 현저하게 떨어졌으며, 세포 생존율도 바이러스 감염군에 비해 상승하였다.
As can be seen from FIG. 3, as a result of pre-treatment with horse riding extract, the infection rate of Newcastle disease virus was remarkably decreased and the cell survival rate was also higher than that of virus infection group.

4. 마우스 4. Mouse 대식세포주를Macrophage cell line 이용한 승마의 인터페론-β 및  Interferon-beta and 전염증성Proinflammatory 사이토카인 분비 유도 실험 Cytokine secretion induction experiment

: 승마 추출물의 면역인자 유도효과를 확인하기 위하여 하기와 같이 실험을 수행하였다.
: Experiments were conducted as follows to confirm the induction effect of the equine extract on the immune factors.

(1) (One) 전염증성Proinflammatory 사이토카인 유도 및 인터페론-β 분비 유도( Cytokine induction and interferon-beta secretion induction ( InterferonInterferon secretionsecretion InductionInduction ) 실험방법) Experimental method

1) 마우스 대식세포주인 Raw 264.7을 키워 실험에 사용하였다.1) Mouse macrophage cell line Raw 264.7 was grown and used in the experiment.

2) 6-웰 TC 플레이트에 세포를 배양한 후, 1% FBS가 첨가된 DMEM에 상기에서 제조된 승마 추출물(pH 조정)을 1% 농도로 첨가하여 처리하였다.2) Cells were cultured on a 6-well TC plate and DMEM supplemented with 1% FBS was treated with 1% concentration of the horse rid extract (pH adjusted) prepared above.

3) 음성 대조군은 1% FBS가 첨가된 DMEM만을 처리하였고, 양성 대조군은 인터페론-β를 처리하였다.3) Negative control group was treated with DMEM supplemented with 1% FBS, and positive control group was treated with interferon-β.

4) 처리 후 12시간, 24시간의 결과물에 대하여 TNF-α, IL-6 및 인터페론-β의 값을 ELISA를 이용하여 측정하였다.4) The values of TNF-α, IL-6 and interferon-β were measured by ELISA for the results of 12 hours and 24 hours after treatment.

(2) (2) 전염증성Proinflammatory 사이토카인 및 인터페론-β 분비 유도 실험결과 Results of induction of cytokine and interferon-beta secretion

도 4에 승마 추출물에 의한 전염증성 사이토카인 및 인터페론-β 분비 유도 실험결과를 나타낸다. TNF-α는 면역 및 염증반응의 매개물질로 대식세포주를 활성화시키며 다양한 사이토카인 분비를 유도하는 물질로 B-세포를 증식시키고, IL-6는 B-세포를 활성화시켜 항체생산을 증가시켜 항원특이적 면역반응을 촉진하는 중요한 사이토카인이다. 또한, 인터페론-β는 바이러스, 암세포 등의 외부 물질에 반응하여 분비되는 사이토카인으로, 세포내 항암 및 항바이러스 작용을 일으켜 면역반응을 유도하는 물질이다.Fig. 4 shows the results of induction of proinflammatory cytokine and interferon-beta secretion by horse-radish extract. TNF-α is a mediator of immune and inflammatory responses that activates macrophages and induces a variety of cytokine secretion. B-cells proliferate and IL-6 activates B-cells to increase antibody production, It is an important cytokine that stimulates the immune response. In addition, interferon-beta is a cytokine secreted in response to external substances such as viruses and cancer cells, and induces an immune response by causing intracellular anti-cancer and antiviral actions.

도 4로부터, 승마 추출물에 의하여 Raw cell로부터 TNF-α, IL-6 및 인터페론-β 유도능이 강하게 나타나는 것을 확인할 수 있다.
From FIG. 4, it can be confirmed that the TNF-α, IL-6 and interferon-β-inducing ability strongly appear from the raw cells by the horse riding extract.

8. 8. 제조예Manufacturing example

(1) 주사제(1) Injection

상기 1.에서 제조된 승마 추출물: 100 ㎎The horse-shoe extract prepared in the above 1.: 100 mg

소듐 메타비설파이트: 3.0 ㎎Sodium metabisulfite: 3.0 mg

메틸파라벤: 0.8 ㎎Methylparaben: 0.8 mg

프로필파라벤: 0.1 ㎎Propyl paraben 0.1 mg

주사용 멸균 증류수: 적량Sterile sterilized distilled water for injection:

상기 성분을 혼합하고 통상의 방법으로 최종 부피가 2 ㎖가 되도록 제조하여, 앰플에 충전하고 멸균하여 주사제를 제조하였다.
The above ingredients were mixed and made into a final volume of 2 ml by a conventional method, filled in an ampoule and sterilized to prepare an injection.

(2) 정제(2) Purification

상기 1.에서 제조된 승마 추출물: 200 ㎎The horse riding extract prepared in the above 1.: 200 mg

감자 전분: 100 ㎎Potato starch: 100 mg

락토오스: 100 ㎎Lactose: 100 mg

콜로이드성 규산: 16 ㎎Colloidal silicic acid: 16 mg

스테아린산 마그네슘: 적량Magnesium stearate:

통상의 정제 제조방법에 따라 상기 성분을 혼합하고 타정하고 정제를 제조하였다.
The ingredients were mixed and tableted according to a conventional tablet preparation method to prepare tablets.

(3) 캡슐제(3) Capsules

상기 1.에서 제조된 승마 추출물: 100 ㎎The horse-shoe extract prepared in the above 1.: 100 mg

유당: 50 ㎎Lactose: 50 mg

전분: 50 ㎎Starch: 50 mg

탈크: 2 ㎎Talc: 2 mg

스테아린산 마그네슘: 적량Magnesium stearate:

통상의 캡슐 제조방법에 따라 상기 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
The above components were mixed according to a conventional capsule manufacturing method and filled in gelatin capsules to prepare capsules.

(4) 환제(4) pillars

상기 1.에서 제조된 승마 추출물: 120 ㎎The horse riding extract prepared in the above 1.: 120 mg

옥수수 전분: 100 ㎎Corn starch: 100 mg

멸균 증류수: 적량Sterilized distilled water: suitable amount

상기 성분을 혼합하고, 통상의 환제 제조방법에 따라 적절한 크기를 갖는 구형으로 제환하여 환제를 제조하였다.
The above ingredients were mixed and pelletized to spheres of appropriate size according to conventional pellet manufacturing methods to produce pellets.

(5) 건강 기능 식품(5) health functional foods

1) 건강 음료1) Health drinks

올리고당(2%), 액상과당(0.5%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%) 등의 음료 재료에 상기 1.에서 제조된 승마 추출물을 적량 혼합하여, 살균함으로써 음료를 제조하였다.The ritual extract prepared in the above item 1 was mixed in an appropriate amount and sterilized by a drink material such as oligosaccharide (2%), liquid fructose (0.5%), sugar (2%), salt (0.5% A beverage was prepared.

2) 기능성 식품2) Functional food

상기 1.에서 제조된 승마 추출물을 각종 비타민 및 미네랄 함유 기능성 식품에 적량 혼합하여 승마 추출물이 함유된 기능성 식품을 제조하였다.
The functional food containing the horse riding extract was prepared by mixing the horse riding extract prepared in the above item 1 in appropriate amounts with various vitamins and minerals containing functional foods.

(6) 사료 조성물(6) Feed composition

동물용 배합 사료에 상기 1.에서 제조된 승마 추출물을 적량 혼합하여, 사료 조성물을 제조한 후, 펠렛화 및 과립화하였다.
The animal feed composition was mixed with an appropriate amount of the horse riding extract prepared in the above 1. to prepare a feed composition, which was then pelletized and granulated.

상기 본 발명은 전술한 실시예 및 첨부된 도면에 의해 한정되는 것이 아니고, 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 여러 가지 치환, 변형 및 변경이 가능하다는 것이 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명백할 것이다.
While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments or constructions. Various changes, substitutions and alterations can be made hereto without departing from the spirit and scope of the invention. It will be clear to those who have knowledge.

Claims (13)

승마 추출물을 포함하는 선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물.
A pharmaceutical composition for congenital immune enhancement and antiviral comprising horse riding extract.
제1항에 있어서,
상기 승마 추출물은 열수 추출, 알코올 추출 및 주정 추출로 이루어진 군으로부터 선택되는 일 이상의 방법에 의하여 형성된 것을 특징으로 하는
선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the horse riding extract is formed by one or more methods selected from the group consisting of hot water extraction, alcohol extraction and alcohol extraction
A composition for congenital immune enhancement and antiviral use.
제1항에 있어서,
약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는
선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물.
The method according to claim 1,
Characterized in that it further comprises a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent
A composition for congenital immune enhancement and antiviral use.
제1항에 있어서,
상기 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽제, 에어로졸, 외용제, 좌제 및 주사제로 이루어진 군으로부터 선택되는 형태인 것을 특징으로 하는
선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the pharmaceutical composition is in a form selected from the group consisting of tablets, pills, powders, granules, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, external preparations, suppositories and injections
A composition for congenital immune enhancement and antiviral use.
제1항에 있어서,
박테리아 감염성 질병 또는 바이러스 감염성 질병, 특히 인플루엔자, 조류 인플루엔자, 뉴캐슬바이러스, 수포성 구내염 바이러스(Vesicular stomatitis virus), 콕사키바이러스(Cossackievirus), 수족구바이러스(Enterovirus-71), 헤르페스 심플렉스 바이러스(Herpes Simplex Virus), 구제역바이러스(Foot and mouth disease, FMD), 콜로라도참진드기열바이러스, 레오바이러스, 인간면역 결핍 바이러스, 및 간염바이러스 B형 C형, 돼지열병바이러스, 소바이러스성 설사병(Bovine Viral Diarrhea Virus), 돼지생식기호흡기증후군(.Porcine reproductive and respiratory syndrome virus), 돼지오제스키병, 로타바이러스, 파보바이러스, 돼지유행성설사(Porcine epidemic diarrhea virus)등의 예방 또는 치료에 이용되는 것을 특징으로 하는
선천 면역 증강 및 항바이러스용 약학 조성물.
The method according to claim 1,
Bacterial infectious diseases or viral infectious diseases, in particular influenza, avian influenza, Newcastle virus, Vesicular stomatitis virus, Cossackievirus, Enterovirus-71, Herpes Simplex Virus ), Foot and mouth disease (FMD), Colorado spot mite fever virus, reovirus, human immunodeficiency virus, and hepatitis B virus type C, swine fever virus, bovine viral diarrhea virus, Wherein the virus is used for the prophylaxis or treatment of a porcine reproductive and respiratory syndrome virus, porcine Ozski disease, rotavirus, parvovirus, porcine epidemic diarrhea virus and the like
A composition for congenital immune enhancement and antiviral use.
승마 추출물을 포함하는 선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품.
Congenital immune enhancement and antiviral health functional food including horse riding extract.
제6항에 있어서,
상기 승마 추출물은 열수 추출, 알코올 추출 및 주정 추출로 이루어진 군으로부터 선택되는 일 이상의 방법에 의하여 형성된 것을 특징으로 하는
선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품.
The method according to claim 6,
Wherein the horse riding extract is formed by one or more methods selected from the group consisting of hot water extraction, alcohol extraction and alcohol extraction
Congenital immunity enhancement and antiviral health functional foods.
제6항에 있어서,
식품학적으로 허용가능한 식품 보조 첨가제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는
선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품.
The method according to claim 6,
Characterized in that it further comprises a food-acceptable food-aid additive
Congenital immunity enhancement and antiviral health functional foods.
제6항에 있어서,
상기 건강기능식품은 분말, 과립, 정제, 캡슐, 캔디, 츄잉검, 젤리 및 음료로 이루어진 군으로부터 선택되는 형태인 것을 특징으로 하는
선천 면역 증강 및 항바이러스용 건강기능식품.
The method according to claim 6,
Wherein the health functional food is a form selected from the group consisting of powder, granule, tablet, capsule, candy, chewing gum, jelly and beverage
Congenital immunity enhancement and antiviral health functional foods.
승마 추출물을 포함하는 선천 면역 증강 및 항바이러스용 사료 조성물.A composition for congenital immunity enhancement and antiviral feed comprising horse riding extract. 제10항에 있어서,
상기 승마 추출물은 열수 추출, 알코올 추출 및 주정 추출로 이루어진 군으로부터 선택되는 일 이상의 방법에 의하여 형성된 것을 특징으로 하는
선천 면역 증강 및 항바이러스용 사료 조성물.
11. The method of claim 10,
Wherein the horse riding extract is formed by one or more methods selected from the group consisting of hot water extraction, alcohol extraction and alcohol extraction
Composition for congenital immunity enhancement and antiviral composition.
승마 추출물을, 인간을 제외한 선천 면역 증강이 필요한 동물에 투여하는 것을 포함하는 동물의 선천 면역 증강 및 항바이러스 활성 증강 방법.
A method for enhancing innate immunity and antiviral activity in an animal, which comprises administering an equine horse extract to an animal in need of innate immune enhancement other than human.
제12항에 있어서,
상기 승마 추출물은 열수 추출, 알코올 추출 및 주정 추출로 이루어진 군으로부터 선택되는 일 이상의 방법에 의하여 형성된 것을 특징으로 하는
동물의 선천 면역 증강 및 항바이러스 활성 증강 방법.
13. The method of claim 12,
Wherein the horse riding extract is formed by one or more methods selected from the group consisting of hot water extraction, alcohol extraction and alcohol extraction
Methods for enhancing innate immunity and antiviral activity in animals.
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