KR20140144975A - 베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹 추출물을 함유하는 주름 개선, 미백 및 손상된 피부 회복 촉진용 기능성 화장용 조성물 - Google Patents

베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹 추출물을 함유하는 주름 개선, 미백 및 손상된 피부 회복 촉진용 기능성 화장용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물을 유효성분으로 함유하는 주름 개선 및 미백용 화장용 조성물에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 주름 개선용 화장용 조성물은 각 성분을 단독으로 사용한 경우에 주름 개선 및 우수한 미백효과를 나타내므로 미백용 화장용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다. 또한, 화학 물질에 의한 피부 조직 손상을 회복을 촉진시키는 효과 또한 우수하므로, 우수한 손상된 피부 조직 회복용 화장용 조성물을 제공할 수 있다. 또한, 상기 혼합추출물에 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물 등을 혼합할 경우 더욱 우수한 효과가 있다. 상기 조성물은 다양한 기능성을 나타내므로 복합 기능성 조성물로 활용될 수 있다.

Description

베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹 추출물을 함유하는 주름 개선, 미백 및 손상된 피부 회복 촉진용 기능성 화장용 조성물{The functional cosmetic composition for anti-wrinkle, skin whitening and recovery of distrupted skin containing, comprising the mixture of extract of bergamot, Lonicera japonica Thunberg, Coix lachryma-jobi var. mayuen and wheat bud}
본 발명은 주름 개선 및 미백용 화장용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 주름 개선 효과, 미백 활성 효과 및 손상된 피부 회복 촉진 효과를 갖는 베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹 추출물의 혼합물을 함유하는 주름 개선 및 미백용 화장용 조성물에 관한 것이다.
피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 기관들을 온도·습도 변화, 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해 주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 이렇게 중요한 피부 역시 인체의 다른 장기와 마찬가지로 나이가 들어감에 따라 점차 노화가 진행되게 되고, 그 결과로서 피부 탄력손실, 각질화, 주름 생성, 피부 위축 등의 현상이 나타나게 된다. 이러한 피부 노화 현상은 피부 표면의 주름 발생뿐 아니라 얼굴의 전체적인 라인의 변화를 가져 오게 된다. 피부에 주름이 생기는 것은 노화에 수반되는 현상으로 생체기능의 저하로 인한 여러 가지 구조적 변화를 나타내는데 그 발생원인은 크게 두 가지로 볼 수 있다. 즉, 연령이 증가함에 따라 발생하는 내인성 노화(intrinsicaging)와 내인성 노화에 외부인자, 특히 자외선에 의한 손상이 덧붙여져서 발생하는 광노화(photoaging)로 구분된다.
이러한 주름과 피부 탄력에 직접적으로 영향을 미치는 콜라겐의 중요성과 역할에 대해서는 많은 연구가 지속되어 오고 있다. 피부의 대부분, 피부 전체의 77%, 진피의 90%를 차지하는 콜라겐이 양적으로 풍부하고 질적으로 건강할 때, 피부 또한 주름과 처짐 현상 없이 건강하고 아름답게 유지될 수 있는 것이다. 종래에는 콜라겐을 화장품에 배합하여 제품화한 경우가 있었는데, 콜라겐을 화장품으로써 피부표면에 도포할 경우, 고분자인 콜라겐의 경피 흡수가 어려워 그 기능을 충분하게 기대할 수 없다는 문제가 있었다. 또한, 피부의 진피에 직접 콜라겐을 주입하는 방법도 있었으나, 이 방법 역시 부작용에 의해 피부주름을 개선하는 해결책이 되지 못하였다. 최근 들어, 콜라겐합성을 촉진하는 물질로서, 레티노익산(Retinoic acid), 동물 태반 유래의 단백질(일본 특개평8-231370호)등이 알려진 바 있다. 그러나, 레티노익산은 불안정하여 제형기술이 복잡하며 피부에 자극이 되는 등 안정성의 측면에서 사용에 한계가 있었고, 동물 태반 유래 단백질은 광우병에 걸린 소의 적출물을 사용할 수 있다는 치명적인 단점이 있었다.
한편, 피부의 표피층에 존재하는 색소로서, 멜라닌은 표피의 기저층에 존재하는 멜라노사이트(melanocyte)로부터 만들어져 케라티노사이트(keratinocyte)라는 표피 세포로 이동하게 된다. 생체 내에는 멜라닌을 분해하는 효소가 없고, 다만 케라티노사이트가 표피에서 떨어져나갈 때 같이 피부에서 떨어져나가는 방식으로 제거된다. 멜라닌은 생체 내에서 다양한 기능을 하고 있다. 예를 들면, 멜라닌은 햇빛 UV의 빛 에너지를 흡수하여 UV에 의한 손상으로부터 진피 이하의 피부 기관을 보호하는 역할을 하며, 피부 생체 내에서 생성된 유해산소 및 프리 라디칼 등을 제거하는 등 외부 유해인자로부터 피부를 보호해주는 등 생체 내에서 유용한 역할을 수행한다. 또한, 피부 세포 내의 멜라닌량에 따라 사람의 피부색을 결정하게 되는데, 멜라닌 색소가 많은 사람은 갈색 또는 검은 색 피부를 갖는 반면, 멜라닌 색소가 적은 사람은 흰색의 피부를 갖게 된다.
이러한 멜라닌의 생산량에 따라 다양한 질환을 유발할 수 있다. 멜라닌이 비정상적으로 적게 생산되는 경우, 백반증과 같은 피부병변이 유발된다. 이와 반대로 일광, 호르몬변화, 염증, 약제 등에 의한 멜라닌이 과도하게 합성되거나 각화작용이 원활히 이루어지지 않아 멜라닌이 축적되는 경우, 피부에 손상을 줄 뿐만 아니라 피부의 색소가 침착되어 기미, 주근깨를 형성하며, 이와 같은 병변으로부터 나아가 피부암의 원인이 되기도 한다. 따라서, 이러한 색소 침착 현상을 방지하기 위해서는 멜라닌 생성 과정의 일부분을 저해하여 멜라닌의 생성을 감소시켜야 한다.
오늘날 동양권의 여성들은 하얗고 깨끗한 피부를 선호하며 이를 미의 중요한 기준으로 삼고 있기 때문에 피부색소 이상 침착의 치료 및 미용욕구 충족을 위한 미백제에 대한 개발이 활발히 이루어지고 있다. 현재 피부미용을 위한 미백제의 개발에 있어서, 생성된 멜라닌 색소를 환원시켜 탈색하는 방법과 멜라닌 색소를 형성하는 효소인 티로시나제의 활성을 억제하는 방법이 알려져 있다. 종래의 화장품 분야에서는 미백 성분으로서, 예를 들면, 코지산(Kojic acid), 알부틴(Arbutin) 등과 같은 티로시나제 효소활성을 억제하는 물질, 하이드로퀴논(Hydroquinone), 비타민 C 및 이들의 유도체와 각종 식물 추출물이 사용되어 왔다. 그러나, 상기 미백성분들은 제제 중에서 안정성이 나빠 분해되어 착색되거나, 이취의 발생, 생체 레벨에서의 효능, 효과의 불분명 및 안정성 문제 등으로 그 사용이 제한되고 있는 실정이다.
한편, 베르가못(bergamot)은 쌍떡잎식물 이판화군 쥐손이풀목 운향과의 상록관목이다. 베르가못 정유(essential oil)는, 무색의 액체로 신선하고 톡쏘는 향을 가진 시트러스계 오일이며, 마음을 안정시켜주고 호흡기능을 돕고 정신적인 스트레스로 인한 긴장된 근육을 풀어주는 효과가 있다. 금은화는 인동과의 인동덩굴(Lonicera japonica Thunberg) 또는 그 변종의 꽃봉오리를 말한다. 금은화는 열을 내리고 가슴이 답답하고 갈증이 있을 때 사용하며 항균작용, 항염증작용, 해열작용을 하는 것으로 알려져 있다. 또한, 율무(Coix lachryma-jobi var. mayuen)는 벼과에 속하는 1년생 초본식물로서 한방에서는 의이인(薏苡仁)이라고 하며 약으로도 쓴다. 특히, 이뇨·진통·진경·강장작용이 있으므로 부종·신경통·류머티즘·방광결석 등에 약재로 사용하는 것으로 알려져 있다. 또한, 밀싹은 화본과 외떡잎 식물로서, 밀싹과 같은, 밀, 보리 등 곡류의 새싹은 마디 세포가 생겨 줄기로 자리기 전에는 채소와 같은 영양성분을 갖으며 알곡과 성분이 전혀 다르다고 알려져 있다. 또한, 밀싹에는 다양한 비타민과 82종의 미네랄과 30종의 효모, 17가지의 아미노산을 함유하고 있다고 알려져 있다.
또한, 마치현은 쇠비름과의 쇠비름(Portulaca oleracea L.)의 전초를 말하는 것으로, 해열, 해독 작용 및 항균작용이 있는 것으로 알려져 있다. 다른 이름으로는 마현, 오행초, 구두사자초, 마치채, 마치초, 산현 등으로 알려져 있다. 또한, 백출은 국화과의 삽주(Atractylodes japonica Koidzumi) 또는 백출(Atractylodes macrocephala Koidzumi)의 뿌리줄기 또는 주피를 제거하여 말린 약재를 의미한다. 약리적으로 세포 면역 기능 촉진, 항궤양, 간 기능 보호 작용 및 면역 기능 항진작용이 있는 것으로 알려져 있다. 다른 이름으로 동백출, 마계, 부계, 산강, 오출, 출 등으로 알려져 있다. 또한, 들국화는 금불초(Inula britannica var. chinensis)라고 하며 쌍떡잎식물 초롱꽃목 국화과의 여러해살이풀을 의미한다. 이 꽃을 말린 것으로 거담, 진해, 건위, 진토, 진정 등의 효능이 있는 것으로 알려져 있다
또한, 한련초(Eclipta prostrate)는 높이 10 ~ 70 cm되는 국화과의 한해살이 초본이다. 우리 나라 제주도, 남부지방, 중부지방의 콩밭에 많이 발생하는 식물이다. 예로부터 혈류량 촉진, 진통, 면역, 피부염, 모발 성장 촉진 및 피부가 갈라지는 피부염에도 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 백작약(Paeonia japonica)은 쌍떡잎식물 미나리아재비목 미나리아재비과의 여러해살이풀로서, 뿌리를 진통·진경·부인병에 사용하는 것으로 알려져 있다. 또한, 방풍(Ledebouriella seseloides)은 쌍떡잎식물 산형화목 미나리과의 세해살이풀로서, 중국 북동부, 화베이, 내몽골 원산이며 약료작물로 재배한다. 한방에서는 두해살이 뿌리를 감기와 두통, 발한과 거담에 약으로 사용하는 것으로 알려져 있다.
이에 본 발명자들은 안정성이 뛰어나면서도, 주름개선 효과가 우수하며, 멜라닌 생성을 억제하여 미백 효과가 우수한 미백용 조성물을 개발하고자 연구 노력한 결과, 베르가못 추출물과, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물을 조합할 시 주름 개선 효과 및 미백 효과가 현저하게 상승되는 점을 발견하였다. 또한, 상기 혼합 추출물이 피부 손상에도 유용하게 사용될 수 있음을 확인하여 복합 기능성 화장용 조성물을 완성하였다.
대한민국 공개특허 10-2009-0091547 요약 및 청구항
본 발명의 목적은 베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹을 유효성분으로 함유하는 주름 개선 효과, 미백 효과 및 손상된 피부 회복 효과가 있는 복합 기능성 화장용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 구체예는 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물을 함유하는 주름 개선 및 미백용 복합 기능성 화장용 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법, 즉, 통상적인 온도와 압력 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있다. 본 발명의 베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹 추출물 제조에 사용될 수 있는 추출용매로는 예를 들면, 물, 탄소수 C1 내지 C3의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜 등의 추출용매를 단독으로 또는 혼합하여 사용 가능하다. 상기 추출 용매의 적합한 양은 베르가못, 금은화, 율무 또는 밀싹 건조 중량의 1 내지 15배 정도이며, 5 내지 12배일 수 있으며, 10배일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 추출방법으로는 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등을 사용할 수 있으며, 1회 또는 다수 회 반복하여 추출시켜 사용할 수 있다. 또한, 추출온도는 베르가못, 금은화, 율무 또는 밀싹 유용성분의 유효활성이 제거되지 않을 정도의 온도이면, 특별히 제한되지 않으나, 바람직하게는 상온에서 침적시켜 추출한다.
상기 베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹 추출물은 각각 단독으로는 콜라겐 생성 효과 및 콜라게네이즈 저해 효과가 낮으나, 혼합하여 사용할 경우 주름 개선용 화장품으로 이용될 수 있다. 또한, 혼합 비율 및 함량은 당업자가 최적의 효과를 나타내기 위하여 적절히 변경할 수 있다.
상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물는 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 함유될 수 있으며, 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8의 중량비율로 함유되는 것이 바람직하다. 그러나, 함량비율은 제품의 특성에 따라 다양한 중량비로 혼합될 수 있다.
또한, 상기 혼합 추출물은 주름 개선 효능 뿐 아니라 미백 효과를 보인다.
본 명세서에 있어서, "미백"은 멜라닌의 생성이 저해됨에 따른 결과로서 이해되는데, 구체적으로는 멜라닌의 생성이 저해됨에 따라 멜라닌의 증가에서 비롯되는 증상이 예방 또는 억제됨에 따른 결과로서 이해된다. 그러한 증상으로서 전술한 바의 기미, 주근깨, 피부노화 등이 예시될 수 있지만, 본 발명의 하기 실시예 및 실험예가 보여주는 바와 같이 본 발명의 피부 미백용 조성물에 포함되는 추출물이 멜라닌의 생성을 저해하는 효과를 보여주는 것이 명백한 이상, 상기 증상은 멜라닌의 증가에서 비롯되는 증상 예방 또는 억제함으로써 피부 미백의 결과로 이어지는 모든 증상으로 이해되어야 한다.
본 발명의 피부 미백용 조성물은 유효성분인 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물 이외에, 피부 미백 효과를 상승 또는 보강시킬 수 있도록 피부 미백 효과가 있다고 이미 알려진 화합물이나 식물 추출물을 포함할 수 있고, 또한 피부 미백 효과가 있다고 알려진 여타의 공지된 화합물이나 식물 추출물을 포함할 수 있으며, 나아가 앞으로 밝혀질 피부 미백 효과를 갖는 화합물이나 식물 추출물을 포함할 수 있다.
여기서 상기 피부 미백 효과가 있다고 이미 알려진 화합물이나 식물 추출물로서는 멀캅토숙신산, 멀캅토덱스트란, 테프레논, 디하이드록시-이소퀴놀린, 인도메타신, 3-하이드록시마뉼, 비타민 K, 티아졸리돈, 키누레닌, 레몬 추출물, 오이 추출물, 오디추출물, 감초 추출물, 로즈마리 추출물, 아세로라 체리 추출물, 은행 추출물, 카롭(carob) 추출물, 제라늄(geranium) 추출물 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물은 이미 미백용 화장용 조성물로 잘 알려진 알부틴과 유사한 티로시나제 억제 활성 및 멜라닌 합성 저해 효과를 갖는 것을 확인하였다. 특히, 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 또는 밀싹 추출물을 각각 처리시에 비해, 베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹의 혼합 추출물을 처리시 티로시나제 억제 활성이 현저히 증가하였다.
또한, 본 발명의 일 구체예는 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물을 유효성분으로 함유하는 주름 개선 및 미백용 화장용 조성물을 제공한다.
상기 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물 또한 베르가못, 금은화, 율무, 또는 밀싹의 추출물을 얻는 것과 동일한 추출방법에 의하여 추출될 수 있다.
상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물의 혼합 추출물 만으로도 콜라겐 생성 효과 및 콜라게네이즈 저해 효과를 갖으므로 단독으로 주름 개선용 화장품으로 이용될 수 있다. 그러나, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물을 혼합할 경우 더욱 우수한 콜라겐 생성 효과 및 콜라게네이즈 저해 효과를 갖으므로, 함께 혼합하여 이용되는 것이 바람직하다.
또한, 상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물은 알부틴에 비하여 유사한 티로시나제 억제 효과 및 멜라닌 합성 저해 효과를 갖는 것을 확인하였다. 특히, 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물을 각각 처리시에 비해, 이의 혼합 추출물을 처리시 티로시나제 억제 활성이 현저히 증가하였다.
상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물은 1 ~ 10 : 1 ~ 10 :1 ~ 10 : 1 ~ 10 :1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 함유될 수 있으며, 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8의 중량비율로 함유되는 것이 바람직하다. 그러나, 함량비율은 제품의 특성에 따라 다양한 중량비로 혼합될 수 있다.
또한, 본 발명의 일 구체예는 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물의 혼합 추출물에 방풍 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나를 더 포함하는 혼합물을 유효성분으로 함유하는 주름 개선 및 미백용 화장용 조성물을 제공한다.
상기 방풍 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물 또한 상기 베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹 추출물을 얻는 것과 동일한 추출방법에 의하여 추출될 수 있다. 상기 베르가못, 금은화, 율무, 밀싹, 마치현, 백출 및 들국화의 혼합 추출물은 그 자체만으로도 콜라겐 생성 효과 및 콜라게네이즈 저해 효과를 갖으므로 그 자체로 주름 개선용 화장품으로 이용될 수 있다. 그러나, 방풍 추출물, 한련초 추출물 또는 백작약 추출물을 혼합할 경우 더욱 우수한 콜라겐 생성 효과 및 콜라게네이즈 저해 효과를 갖으므로, 함께 혼합하여 이용되는 것이 바람직하다.
상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물과 방풍 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물중 어느 하나는 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 함유될 수 있으며, 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8의 중량비율로 함유되는 것이 바람직하다. 그러나, 함량비율은 제품의 특성에 따라 다양한 중량비로 혼합될 수 있다.
본 발명의 또 다른 일구체예로는 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 손상된 피부 회복 촉진용 화장용 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 앞에서 기술한 바와 동일한 방법으로 추출될 수 있다. 상기 화장용 조성물은 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물을 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 포함하거나, 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8의 중량비율로 함유하거나, 4 ~ 6 : 4 ~ 6 : 4 ~ 6 : 4 ~ 6의 중량비율로 함유할 수 있다. 그러나, 함량비율은 제품의 특성에 따라 다양한 중량비로 혼합될 수 있다. 상기 베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹의 혼합 추출물은 세포는 섬유아세포(Fibroblast)의 증식효능이 우수하며, 화학 물질에 의한 피부 조직 손상의 회복을 촉진시키는 효과가 우수함을 확인하였다.
또한, 본 발명의 일구체예는 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물을 유효성분으로 포함하는 손상된 피부 회복 촉진용 화장용 조성물을 제공한다.
상기 화장용 조성물은 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물을 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 포함하거나, 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8의 중량비율로 함유하거나, 4 ~ 6 : 4 ~ 6 : 4 ~ 6 : 4 ~ 6 : 4 ~ 6 : 4 ~ 6 : 4 ~ 6의 중량비율로 함유할 수 있다. 그러나, 함량비율은 제품의 특성에 따라 다양한 중량비로 혼합될 수 있다.
상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물의 혼합 추출물은 섬유아세포(Fibroblast)의 증식효과가 단독 추출물에 비하여 현저히 우수함을 확인하였다. 또한, 화학 물질에 의한 피부 조직 손상의 회복을 촉진시키는 효과 또한 각각의 추출물에 비하여 우수함을 확인하였다.
또한, 본 발명의 일 구체예는 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물에 방풍 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나를 더 포함하는 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 손상된 피부 회복 촉진용 화장용 조성물을 제공한다.
상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물과 방풍 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물중 어느 하나는 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 함유될 수 있으며, 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8의 중량비율로 함유되는 것이 바람직하다. 그러나, 함량비율은 제품의 특성에 따라 다양한 중량비로 혼합될 수 있다.
상기 혼합 추출물은 세포는 섬유아세포의 증식효과가 단독 추출물에 비하여 현저히 우수함을 확인하였다. 또한, 화학 물질에 의한 피부 조직 손상을 회복을 촉진시키는 효과 또한 각각의 추출물에 비하여 매우 우수함을 확인하였다.
상기 본 발명의 일 구체예에 따른 혼합 추출물은 제품내에서 1 내지 30 중량%로 함유되거나, 5 내지 20 중량%로 함유될 수 있다. 상기 화장품은 유연화장수, 영양화장수, 영양에센스, 영양크림 및 팩으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있으나, 주름 개선용, 피부 미백용 또는 손상된 피부 회복용으로 이용되는 한 다양한 형태로 이용가능하다.
또한, 본 발명의 일 구체예는 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물의 혼합 추출물, 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물의 혼합 추출물, 및 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물의 혼합 추출물을 함유하는 화장품을 제공한다. 상기 혼합 추출물은 전체 중량비에서 1 내지 30 중량%로 함유될 수 있으며, 5 내지 20 중량%로 함유될 수 있다.
또한, 본 발명의 추출물을 포함하는 화장용 조성물은 상기 추출물 이외에 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있으며, 담체와 함께 제형화 할 수 있다. 본 발명의 화장용 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 아이크림, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 및 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁화제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물의 혼합 추출물은 주름 개선 효과 및 미백 효과가 우수하여, 복합 기능성 화장용 조성물로 활용될 수 있다. 또한, 화학 물질에 의한 피부 조직 손상을 회복을 촉진시키는 효과 또한 우수하다. 더욱이, 상기 혼합추출물에 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물 등을 혼합할 경우 더욱 우수한 효과가 있어, 복합 기능성 조성물로 활용될 수 있다.
도 1은 다양한 혼합 방법에 의해 제조된 혼합 추출물의 처리에 따른 콜라겐 생합성량을 나타낸 것이다.
도 2는 다양한 혼합 방법에 의해 제조된 혼합 추출물의 처리에 따른 콜라게네이즈 활성 억제 정도를 나타낸 것이다.
도 3은 다양한 혼합 방법에 의해 제조된 혼합 추출물의 처리에 따른 멜라닌 생성 정도를 나타낸 것이다.
도 4는 다양한 혼합 방법에 의해 제조된 혼합 추출물의 처리에 따른 미백 증진 효과를 나타낸 것이다.
도 5는 다양한 혼합 방법에 의해 제조된 혼합 추출물의 처리에 따른 세포 증식능 정도를 나타낸 것이다.
도 6은 다양한 혼합 방법에 의해 제조된 혼합 추출물의 처리에 따른 TEWL 정도를 나타낸 것이다.
도 7은 다양한 혼합 방법에 의해 제조된 혼합 추출물의 처리에 세포 생존율을 나타낸 것이다.
이와 같은 본 발명을 다음의 실시예 및 시험예에 의거하여 더욱 상세히 설명하나, 본 발명이 하기의 제조예, 실시예나 실험예에 한정되는 것은 아니다.
제조예 . 혼합 추출물의 제조
제조예 1. 베르가못 추출물의 제조
건조된 베르가못잎을 분쇄하고, 분쇄된 베르가못잎 500 g을 3차 증류수 5ℓ에 첨가하여, 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열을 하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 동결 건조하여 베르가못 추출물 42 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 2. 금은화 추출물의 제조
건조된 금은화를 분쇄하고, 분쇄된 금은화 500 g을 3차 증류수 5ℓ에 첨가하여, 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열을 하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 금은화 추출물 45 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 3. 율무 추출물의 제조
건조된 율무를 분쇄하고, 분쇄된 율무 분말 1 kg에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 90℃ 내지 95℃에서 3시간 동안 3회 추출하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 율무 추출물 118 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 4. 밀싹 추출물의 제조
건조 밀싹 500 g에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 밀싹 추출물 38 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 5. 마치현 추출물의 제조
건조 마치현 500 g에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 마치현 추출물 45 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 6. 백출 추출물의 제조
건조 백출 500 g에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 백출 추출물 41 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 7. 들국화 추출물의 제조
건조 들국화 500 g에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 들국화 추출물 42 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 8. 방풍 추출물의 제조
건조 방풍 500 g에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 방풍 추출물 46 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 9. 한련초 추출물의 제조
건조 한련초 500 g에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 한련초 추출물 42 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 10. 백작약 추출물의 제조
건조 백작약 500 g에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 백작약 추출물 44 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.
제조예 11. 내지 제조예 18. 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물의 혼합 추출물의 제조
베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물을 하기 표 1에 제시된 것과 같은 중량 비율로 혼합한 혼합 추출물을 얻었다. 구체적으로 제조예 1 내지 10에서 얻은 각각의 추출물을 20 ㎎/㎖의 농도로 3차 증류수에 녹인 후 각 추출물의 중량비율이 표 1이 되도록 각각의 추출물 수용액을 혼합하여 혼합 추출물을 제조하였다.
혼합 추출물에 있어서의 각 추출물 성분의 중량 비율(%)
제조예 베르가못 추출물 금은화 추출물 율무 추출물 밀싹 추출물
11 50 50 0 0
12 50 0 50 0
13 50 0 0 50
14 0 50 50 0
15 0 50 0 50
16 0 0 50 50
17 35 35 30 0
18 25 25 25 25
제조예 19. 내지 제조예 23. 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물의 혼합 추출물에 방풍 추출물, 한련초 추출물 또는 백작약 추출물을 더 포함하는 혼합 추출물의 제조
베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물을 같은 중량 비율로 혼합한 혼합 추출물을 얻었다. 구체적으로 제조예 1 내지 10에서 얻은 각각의 추출물을 20 ㎎/㎖의 농도로 3차 증류수에 녹인 후 각 추출물의 중량비율이 표 2가 되도록 각각의 추출물 수용액을 혼합하여 혼합 추출물을 제조하였다.
혼합 추출물에 있어서의 각 추출물 성분의 중량 비율(%)
제조예 베르가못 추출물 금은화 추출물 율무 추출물 밀싹 추출물 마치현 추출물 백출 추출물 들국화 추출물 방풍 추출물 한련초 추출물 백작약 추출물
19 14 14 14 14 14 14 16
20 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5
21 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5
22 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5
23 11 11 11 11 11 11 11 11.5 11.5
실험예 1. 주름 개선 효과 확인
1.1. 콜라겐 생합성 촉진 효과 실험
본 발명에 사용된 혼합 추출물의 피부주름 개선제로서의 효과를 확인하기 위해서, 양성 대조물질로서 레티노익산(Retinoic acid)을 이용하여 사람의 섬유아세포에서 콜라겐 생합성 효과를 하기와 같은 방법으로 비교 실험하였다. 먼저, 사람의 섬유아세포를 6개의 웰을 가진 플레이트에 일정수의 세포를 심은 후 24시간 동안 배양하였다. 이 배양액을 무혈청(serum-free) 배양액으로 16시간 동안 배양하고, 우태혈청(FBS ; Fetal bovine serum)이 0.05% 들어있는 각각의 웰에 시험물질을 2 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖ 및 20 ㎍/㎖의 농도로 처리한 후, 48시간 동안 다시 배양하였다.
48시간 경과 후, 세포 배지를 수집하여, 각 샘플 100 ㎕를 항체로 코팅된 플레이트의 각 웰에 넣고, 37℃에서 2시간 동안 배양하였다. 각 웰을 인산염완충용액(PBS ; Phosphate buffer solution) 400 ㎕로 세척하고, 용액 I(Antibody-Peroxidase conjugate solution)을 각 웰에 100 ㎕씩 넣고, 37℃에서 1시간 동안 배양하고, 각 웰을 다시 PBS 400 ㎕로 세척하였다. 여기에 기질용액(TMBZ, 3, 3', 5, 5'-Tetramethyl benzidine) 100 ㎕를 각 웰에 첨가한 후, 상온에서 15분간 배양하였다. 그리고 1 N 황산 100 ㎕를 각 웰에 첨가하여 잘 섞은 후, 450 ㎚에서 엘리사 판독기(ELISA reader, ELISA (효소결합 면역분석법 ; enzyme-linked immunosorbant assay)로 검출하여 분석하였다. 상기의 방법으로 양성대조군인 레티노익산과 비교하여 얻어진 결과를 표 3 및 도 1에 나타내었다.
도 1에서 음성대조군(negative control)은 주름 개선물질이 첨가되지 않았을 때, 콜라겐 생성량을 100%로 기준으로 하고 시험물질인 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물 또는 그의 혼합 추출물과 양성대조군인 레티노익산에 대해 상대적인 효과를 나타낸 것이다.
도 1에 나타난 바와 같이, 사용된 레티노익산은 10 ㎍/㎖의 농도에서 21.6%의 증가효과를 나타내었다. 반면에 혼합 추출물의 경우 10 ㎍/㎖에서는 27.2%의 증가 효과를 보여(제조예 23), 레티노익산보다 더 콜라겐 생합성을 촉진한다는 것을 확인하였다.
콜라겐 생합성 촉진 측정

콜라겐 양(대조군 대비%)
2 ㎍/㎖ 10 ㎍/㎖ 20 ㎍/㎖
제조예1 103.6 106.9 115.6
제조예2 103.1 105.8 113.8
제조예3 101.5 104.2 110.2
제조예4 101.4 103.8 105.3
제조예5 103.8 110.2 116.8
제조예6 103.4 108.2 110.2
제조예7 102.5 106.4 111.6
제조예8 102.6 104.4 109.2
제조예9 102.1 107.6 110.3
제조예10 103.3 105.2 109.4
제조예11 103.5 105.8 112.8
제조예12 102.8 105.1 111.4
제조예13 101.8 104.2 110.8
제조예14 102.8 104.8 112.7
제조예15 102.8 104.8 112.8
제조예16 102.8 104.2 108.8
제조예17 104.8 108.8 118.8
제조예18 106.2 118.8 127.2
제조예19 107.2 119.6 128.8
제조예20 107.8 120.4 130.2
제조예21 108.2 121.2 131.4
제조예22 108.0 120.8 130.8
제조예23 108.5 127.2 143.7
레티노익산 106.2 121.6 136.5
음성대조군 100 100 100
1.2. 콜라게네이즈 활성 억제 시험
본 발명에 사용된 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물 또는 이의 혼합 추출물의 피부주름 개선제로서의 효과를 확인하기 위해서, 콜라겐을 분해하여 주름생성을 촉진시키는 콜라게네이즈의 활성억제 효과를 시험하였다. 콜라게네이즈(MMP-1, matrix metal protease-1) 활성 억제 정도를 측정하는 방법으로는 콜라게네이즈의 항체를 이용하였고, 본 시험에서는 I형 콜라게네이즈 분석 키트(type I collagenase assay kit)를 이용하여 엘리사법(ELISA)으로 흡광도를 측정하였으며, 하기의 방법으로 시험하였다.
먼저 인간의 섬유아세포를 적합한 배지에서 37℃, 5% 이산화탄소 조건 하에서 배양하였다. 이후 시험을 위해 일정한 수의 세포를 다른 배양용기에 분주하고 일정시간 배양하여 세포의 부착을 확인한 후, 무혈청 배양액에서 16시간 배양하였다. 세포 배양액에 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물 또는 이의 혼합 추출물의 농도를 달리하여 2 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖, 50 ㎍/㎖과 콜라게네이즈를 활성화시키는 물질로 종양괴사인자-α(TNF-alpha ; tumor necrosis factor)를 가하여 24시간동안 배양하였다. 세포배지를 수집하여 100 ㎕를 96웰 조직배양 접시(well tissue culture plate, Corning, USA)에 넣고, 각각의 웰에 검출시약으로 효소를 첨가하여 37℃에서 90분간 배양 후, 엘리사 판독기를 이용하여 450 ㎚에서 측정하였다. 도 2에서 음성대조군으로 주름 개선 원료가 첨가되지 않았을 때와 비교하여, 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물 또는 이의 혼합 추출물의 농도증가에 따른 콜라게네이즈 억제효율(%)을 나타내었다.
도 2에 나타난 바와 같이, 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물 또는 이의 혼합 추출물의 농도가 2 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖, 50 ㎍/㎖으로 증가할수록 콜라게네이즈의 활성은 억제되었고, 제조예 23의 50 ㎍/㎖에서 최고로 62.4%의 높은 콜라게네이즈 억제효과를 보여서, 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물의 혼합 추출물이 콜라게네이즈의 활성을 억제하는 것을 확인할 수 있었다.
콜라게네이즈 활성 억제 효과 측정

콜라게네이즈 활성 억제(%)
2 ㎍/㎖ 10 ㎍/㎖ 50 ㎍/㎖
제조예1 4.8 8.4 17.8
제조예2 4.2 7.6 16.5
제조예3 2.6 6.1 13.9
제조예4 3.2 6.6 12.8
제조예5 5.1 9.1 18.7
제조예6 5.0 9.1 18.7
제조예7 3.8 7.8 16.2
제조예8 4.0 7.2 15.8
제조예9 3.8 7.8 16.2
제조예10 4.4 8.2 18.1
제조예18 10.2 20.6 44.6
제조예19 11.2 23.6 48.6
제조예20 11.8 24.8 52.2
제조예21 12.2 23.9 53.4
제조예22 12.1 24.1 52.8
제조예23 15.3 28.8 62.4
TGF -β(50 ng /㎖) 57.4
1.3. 피부 탄력 개선 효과
실제 사람의 피부에서의 탄력 개선 효과를 시험하기 위하여 효과가 우수한 것으로 판명된 제조예 18, 19 및 23의 조성물을 이용하여 다음과 같이 시험하였다. 30 ~ 50대 여성 80명을 각각 20명씩 4조로 나누어 아침 저녁 매일 2회씩 12주간 안면에 도포한 후 피부탄력측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부 탄력 개선 효과를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다. 표 5의 결과값은 피부탄력측정기의 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 의미한다. 제조예 23의 추출물의 경우 대조군에 비하여 피부탄력효과가 현저히 좋아짐을 확인하였다.
피부탄력 개선 효과 측정
실험군 피부탄력효과
제조예18 0.66
제조예19 0.76
제조예23 0.88
대조군 0.14
또한, 이와 별도로 시험을 종료한 시점에 시험대상자들로 하여금 설문지를 작성하게 하여 기기적인 평가와 동시에 주관적인 효능 평가도 실시하였다. 그 결과는 표 6에 나타내었다.
피부 탄력 개선효과 설문 조사 결과
도포군
응답자수 (인)
매우 양호 양호 보통 미흡
제조예18 4 12 4 0
제조예19 6 11 3 0
제조예23 8 10 2 0
대조군 2 5 11 2
실험예 2. 미백 효과 확인
2.1. 티로시나제 억제활성의 측정
티로시나제 활성은 포메란츠 등(Pomerants S. H., 1963 J. Biol. Chem., 238, 2351-2357)의 방법을 약간 수정하여 이용하였다. 40 ㎕의 5 mM L-DOPA 용액, 80 ㎕ 의 68 mM 인산완충용액(pH 6.8) 및 40 ㎕의 시험 샘플 용액을(제조예 1 내지 23, 및 알부틴의 시험용액농도 5 ㎎/㎖) 혼합하였다. 다음으로 40 ㎕ (100 단위/ml)의 인체 티로시나제를 첨가하여 샘플 시료를 제조하였다.
그리하여 얻어진 시험 샘플용액의 최종농도는 1 ㎎/㎖이었다. 시험용액의 최종농도가 0.5 ㎎/㎖이 되도록 하기 위해서는 40 ㎕의 5 mM L-DOPA 용액, 100 ㎕ 의 67 mM 인산완충용액(pH 6.8) 및 20 ㎕ (제조예 1 내지 23, 및 알부틴의 시험용액농도 2.5 ㎎/㎖)의 시험 샘플 용액을 혼합하였고, 다음으로 40 ㎕ (100 단위/ml)의 버섯 티로시나제가 반응 혼합액에 첨가하여 샘플 시료를 제조하였다.
상기 샘플 시료의 제조시 시험 샘플 용액을 가하지 않은 것을 대조군으로서 사용하였다. 대조군의 효소 활성을 100으로 보았을 때 대조군과 비교하여 각각의 효소 저해 활성을 %로 표시하였다. 이때 제조예 1 내지 23의 조성물의 티로시나제 저해 활성의 상대적인 강도를 관찰하기 위하여 미백 화장용에 널리 이용되는 알부틴과의 상대적인 활성을 비교하였다. 티로시나제 활성의 억제 백분율은 다음과 같이 계산되었다.
Figure pat00001
여기에서 A는 샘플시료 없이 490 nm에서의 흡광도이고, B는 샘플시료가 있을 때의 490 nm에서의 흡광도이다.
티로시나제 억제 활성 측정
시료 함유량(㎎/㎖) 저해활성(%)
알부틴
0.5 20.2
1 52.4
제조예 1 0.5 10.4
1 17.5
제조예 2
0.5 12.0
1 18.6
제조예 3 0.5 5.8
1 8.5
제조예 4
0.5 6.2
1 10.5
제조예 5
0.5 11.2
1 18.2
제조예 6
0.5 9.2
1 12.5
제조예 7
0.5 7.4
1 11.8
제조예 8 0.5 8.2
1 13.2
제조예 9
0.5 9.8
1 16.7
제조예 10
0.5 8.4
1 15.2
제조예 18 0.5 16.8
1 34.2
제조예 19 0.5 17.2
1 45.7
제조예 20 0.5 17.6
1 44.8
제조예 21 0.5 18.2
1 49.2
제조예 22 0.5 18.6
1 48.6
제조예 23 0.5 20.5
1 51.5
2.2. 멜라닌 합성량 저해 효과
2.2.1. B16 멜라노마 세포 배양
B16 멜라노마 세포는 KTCC(The Korean collection for Type Culture)에서 분양받아 사용하였다. B16 멜라노마 세포는 멜라닌을 생산하는 세포주로서 일반적으로 미백물질 스크리닝에 사용된다.
상기 세포를 배양하기 위한 배지는 10% FBS, 1% 페니실린/스트렙토마이신을 포함하는 DMEM 배지를 제조, 멸균하여 무균상태로 만들었다. 세포 배양은 37℃, 5% CO2의 인큐베이터에서 배양하였다. 멜라노마 세포를 3일 정도 배양하여 100 ㎜ 패트리 디쉬가 90% 정도 찼을때 계대하였다.
2.2.2. 흡광도 측정을 통한 멜라닌 합성 억제 효과 측정
베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물 또는 이의 혼합 추출물의 미백효과 측정을 위하여 B16 멜라노마 세포에 제조예 18 내지 23의 추출물 또는 알부틴을 각각 동일한 양을 처리한 뒤, 생성된 멜라닌 양의 변화를 측정하였다. 96웰 플레이트에 세포를 접종(seeding)하고 24시간 후 제조예 18 내지 23에서 제조한 추출물 또는 알부틴을 일정한 농도로 처리하여 다시 48시간 배양한 후, 트립신-EDTA를 이용하여 세포를 회수하였다. 회수한 세포에 10% DMSO(Dimethylsulfoxide)를 포함하는 1N NaOH를 가해 80℃에서 1시간 동안 반응시켜 멜라닌이 충분히 녹아나오도록 한 후, ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) 리더(reader)를 이용하여 파장 405 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 멜라닌 생성도는 하기 수학식 2를 이용하여 계산하였다. 그 결과, 일반적인 미백 물질로 알려진 알부틴의 경우 무처리구와 비교했을 때, 500 ㎍/㎖의 농도에서 멜라닌의 양이 73.6%이나, 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물의 혼합 추출물을 500 ㎍/㎖의 농도에서 멜라닌의 양이 낮아짐을 확인하였다. 특히 제조예 23의 경우 75.2%이 생성되었다(표 8 및 도 3).
Figure pat00002
멜라닌 합성 억제 효과 측정
함유량 알부틴 제조예18 제조예19 제조예20 제조예21 제조예22 제조예23
멜라닌 생성도
(%)
0.5 ㎎/㎖ 73.6 84.4 82.2 79.2 80.6 78.8 75.2
1 ㎎/㎖
 47.8 76.2 72.4 69.6 67.2 68.4 51.8
2.2.3. 인체 피부에 대한 미백 효과 시험
피험자로서 건강한 25세 이상의 남녀 20명을 대상으로 피검자의 윗 팔뚝 부위에 직경 2 cm의 구멍 6개가 뚫린 불투명 테이프를 부착한 뒤 각 피검자의 최소 홍반량의 1.5 ∼ 2배 정도의 자외선(UVB)을 조사하여 피부의 흑화를 유도한 뒤 시험물질들을 발라서 한 달 뒤부터 2주 마다 색차계를 이용하여 피부의 명암을 측정하였다. 각 시료들은 프로필렌글리콜/에탄올(8/2)의 비이클에 각각이 1%의 농도가 되게 녹여 하루에 2회씩(아침, 저녁) 매일 바르게 하였다.피부의 명암은 'L' 값으로 표현되며 0(검정)에서 100(순백색) 사이의 값을 나타낸다(한국인은 일반적으로 50 ∼ 70의 값을 나타냄).각 시료를 도포하면 효과가 있는 경우는 L값이 점차 증가하게 되며 시료들 사이의 비교는 ΔL(최종 L값―시료를 도포하기 직전의 값)으로 표현하였다(도 4).
인체 피부에 대한 미백 효과 측정
L값
0주 4주 6주 8주
대조군(무첨가) 57.32±2.31 57.55±2.26 57.60±2.13 57.75±2.62
알부틴 57.22±2.25 58.54±2.69 59.82±2.61 60.68±2.34
제조예18 57.62±2.42 58.48±2.51 59.02±2.42 59.48±3.12
제조예19 57.43±2.25 58.32±1.86 59.18±2.21 59.56±2.58
제조예23 57.51±2.23 58.78±2.52 59.58±2.27 60.24±2.62
* 상기 수치는 평균± 표준편차로 나타낸 것이다.
상기 표 9 및 도 4에 기재된 결과에서 알 수 있듯이, 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물의 혼합 추출물은 알부틴에 비하여 유사하거나 우수한 미백효과를 가짐을 알 수 있었다.
실험예 3. 손상된 피부 회복 능력 확인
3.1. 섬유아세포( Fibroblast )의 증식효능 측정
3.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Doubecco's Modified Eagle's Media)배지에서 배양한 인체 섬유아세포를 96웰 평판배양기(96-well microtiter plate)에 5,000세포/well가 되도록 분주하고, 시료로서 제조예 1 내지 10, 18 내지 23의 추출물 및 대조군으로서 FBS(Fetal bovin serum)을 각각 1%의 양으로 첨가한 후, 37℃ 온도에서 2일간 배양하였다. 배양 후, 0.2% MTT(3-[4,5- dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 용액을 각 웰당 50 ㎕씩 첨가하고, 다시 37℃ 온도에서 4시간 동안 배양한 후, 생성된 포르마잔(formazane)을 DMSO(Dimethylsulfoxide)로 용해시켰다. 용해된 포르마잔의 흡광도를 평판배양측정기(microplate reader)를 이용하여 570 nm에서 측정하였다. 이러한 MTT 시험을 통해 각 시료에 대한 세포증식을 평가하였다. 그 결과는 표 2와 같다.
시료 세포 증식능 (%)
대조군 30.21
제조예1 14.4
제조예2 15.3
제조예3 14.1
제조예4 16.2
제조예5 14.6
제조예6 17.3
제조예7 16.5
제조예8 17.1
제조예9 17.6
제조예10 15.9
제조예18 24.5
제조예19 26.6
제조예20 25.8
제조예21 25.5
제조예22 26.7
제조예23 28.4
표 10 및 도 5로부터, 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물의 혼합 추출물을 처리한 경우, 섬유아세포의 증식 효능이 매우 높음을 알 수 있다.
3.2. 무모생쥐 피부에서의 피부장벽기능회복 효과측정
상기 제조예 18, 19 및 23으로부터 수득한 혼합 추출물이 피부손상으로 인해 손상된 피부장벽기능의 회복에 미치는 효과 및 피부보습력 증가에 미치는 효과를 측정하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
먼저, 출생 후 8 내지 10주 경과한 무모생쥐 (Charles River, Japan)의 등에 아세톤을 1일 2회씩 5일 동안 주기적으로 도포하여 실험동물 등피부의 장벽기능 손실을 유도한 다음 증발계(Evaporimeter)로 TEWL(Transepidermal water loss, 경피수분손실)을 측정하여 40 g/m2/hr 이상의 경피 수분손실을 나타내는 피부를 가진 실험 동물만을 대상으로 시험물질로 프로필렌글리콜과 에탄올을 6:4의 비율로 혼합한 비히클(Vehicle)(비히클처리군)과 제조예 18, 19 및 23로부터 수득한 각각의 추출물 또는 이의 혼합 추출물을 각각 1% 함유한 샘플을 피부면적 5 cm2당 200 μl의 용량으로 1일 2회씩 3일 동안 연속 도포하면서 일정 시간마다 TEWL을 측정하여 그 결과를 표 11 및 도 6에 나타내었다.
시료
TEWL
0h 6h 12h 24h 48h
제조예18 48.6 46.8 43.6 34.2 28.5
제조예19 47.6 44.5 41.2 29.8 22.6
제조예23 46.8 43.8 38.5 27.8 19.8
대조군( 정제수 ) 46.2 40.8 34.8 24.8 17.5
이상의 결과로부터, 제조예 18 내지 23의 혼합추출물은 피부세포의 분화 촉진과 증식 억제 및 손상된 피부 장벽회복에 있어서 그 효과가 매우 우수한 것을 확인할 수 있었다.
실험예 4. 피부 안전성 확인
4.1. 독성 시험
제조예 18 내지 23의 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물의 혼합 추출물의 세포 독성 시험을 실시하였다. 96웰 플레이트에 세포를 접종하고 24 시간 후, 흑종초자 추출물을 일정한 농도로 처리하여 37℃, 5% CO2의 인큐베이터에서 배양하였다. 48 시간 배양 후, 배지를 제거하고 MTT(3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliu, bromide) 용액 100 ㎕을 첨가하여 37℃에서 4 시간 동안 반응시켰다. 반응이 끝난 후, 용액을 제거하고 DMSO 100 ㎕를 첨가하여 염색된 세포를 녹인 후 ELISA 리더(reader)를 이용하여 파장 540 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 세포 생존율은 하기 수학식 2를 이용하여 계산하였다. 그 결과, 제조예 18 내지 23의 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물, 백작약 추출물의 혼합 추출물(0.5 mg/㎖ 또는 1 mg/㎖)을 처리한 구는 무처리구와 비교하였을 때, 세포 생존율이 97.6% 내지 98.8%로 나타났다(표 12 및 도 7).
Figure pat00003
혼합 추출물의 세포 독성 측정
함유량 무처리군 알부틴 제조예18 제조예19 제조예20 제조예21 제조예22 제조예23
세포 생존 율
(%)
0.5 ㎎/㎖ 100 98.8 98.8 98.6 98.2 98.4 98.5 98.1
1 ㎎/㎖
 100 97.8 98.1 97.9 97.8 97.6 97.8 97.6
본 발명의 조성물은 아래와 같은 제형으로 제조할 수 있으며, 아래의 제제는 본 발명을 예시한 것일 뿐, 이에 의해 본 발명의 내용이 제한되는 것은 아니다.
4.2. 피부 안전성에 대한 평가
본 발명 조성물의 피부 안전성을 확인하기 위해 성인 여성 20명 및 남성 20명을 대상으로 제품을 도포한 첩포 시험을 진행하여 본 발명의 조성물에 대한 피부 안전성을 평가하였다.
측정 방법은 첩포를 부착한 뒤 28시간 경과 후 첩포를 제거, 30분 후에 첫 판독을 시행하였고 96시간이 경과한 후에 2차 판독을 시행하였다. 시료의 피부 자극의 강도를 알아보기 위해 피부의 양성반응의 정도에 따라 가중치를 부여하여 피부 평균 반응도를 구하여 시료의 피부 자극을 육안 판정하였다. 그 결과는 하기 표 13에 나타내었다.
시험물질 평균 반응도 판정 등급
제조예18 0.00 무자극
제조예19 0.00 무자극
제조예20 0.00 무자극
제조예23 0.00 무자극
상기 표 13에서 보는 바와 같이 제조예 18 내지 20, 및 제조예 23 모두 피부에 자극을 주지 않는 것을 알 수 있다. 따라서, 본 발명의 화장용 조성물은 피부에 대한 안전성이 우수한 것으로 판정할 수 있다.
제제예 1. 유연 화장수
본 발명에 따른, 베르가못, 금은화, 율무, 밀싹, 마치현, 백출, 들국화, 한련초, 백작약의 혼합 추출물을 함유하는 유연 화장수의 제제예는 다음 표 14의 조성과 같이 제조하였다.
성분 함량(중량%)
베르가못, 금은화, 율무, 밀싹, 마치현, 백출, 들국화, 한련초, 백작약의 혼합 추출물 4.0
폴리옥시에틸렌경화피마자유 0.4
글리신 3.5
디포타슘글리시리제이트 0.1
1,3-부틸렌 글리콜 3.0
소듐히아루로네이트 0.1
에탄올 5.0
항산화제 0.1
트리에탄올아민 0.1
EDTA 0.1
향료 0.05
정제수 잔량
제제예 2. 영양 화장수
본 발명에 따른, 베르가못, 금은화, 율무, 밀싹, 마치현, 백출, 들국화, 한련초, 백작약의 혼합 추출물을 함유하는 영양 화장수의 제제예는 다음 표 15의 조성과 같이 제조하였다.
성분 함량(중량%)
베르가못, 금은화, 율무, 밀싹, 마치현, 백출, 들국화, 한련초, 백작약의 혼합 추출물 4.0
글리세린 7.0
소르비탄스테아레이트 슈크로오즈코코에이트 2.0
미네랄 오일 4.0
트리옥타노인 1.0
스테아릭에씨드 1.0
글리세릴 스테아레이트 0.5
소르비탄모노스테아레이트 1.0
디메치콘 0.5
항산화제 0.2
트리에탄올아민 0.1
카보머 0.2
EDTA 0.1
향료 0.05
정제수 잔량
제제예 3. 영양 에센스
본 발명에 따른, 베르가못, 금은화, 율무, 밀싹, 마치현, 백출, 들국화, 한련초, 백작약의 혼합 추출물을 함유하는 영양 에센스의 제제예는 다음 표 16의 조성과 같이 제조하였다.
성분 함량(중량%)
베르가못, 금은화, 율무, 밀싹, 마치현, 백출, 들국화, 한련초, 백작약의 혼합 추출물 7.0
글리세린 5.0
1,3-부틸렌 글리콜 2.0
폴리에틸렌 글리콜 2.0
카보머 1.0
소듐하이루로네이트 0.1
글리신 3.0
폴리아크릴아마이드 2.0
히드록시에칠셀룰로우즈 0.2
에탄올 3.0
폴리옥시에틸렌경화피마자유 1.0
항산화제 0.3
트리에탄올아민 0.1
EDTA 0.1
향료 0.05
정제수 잔량
제제예 4. 영양 크림
본 발명에 따른, 베르가못, 금은화, 율무, 밀싹, 마치현, 백출, 들국화, 한련초, 백작약의 혼합 추출물을 함유하는 영양 크림의 제제예는 다음 표 17의 조성과 같이 제조하였다.
성분 함량(중량%)
베르가못, 금은화, 율무, 밀싹, 마치현, 백출, 들국화, 한련초, 백작약의 혼합 추출물 10.0
1,3-부틸렌 글리콜 3.0
글리세린 3.0
하이드로제네이티드 레시친 1.0
옥틸도데카놀 3.0
트리옥타노인 2.0
스테아릭에씨드 1.5
세토스테아릴알콜 2.0
폴리솔베이트 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 2.0
디메치콘 3.0
항산화제 0.3
산탄검 0.2
트리에탄올아민 0.1
EDTA 0.1
향료 0.05
정제수 잔량
본 발명은 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 방풍 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장용 조성물은, 주름 개선, 미백용 효과 뿐만 아니라 손상된 피부 조직 회복에도 우수하여 복합 기능성 화장용 조성물로 활용되어 산업적 이용가능성이 높을 것으로 판단된다.

Claims (12)

  1. 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물을 함유하는 주름 개선 및 미백용 복합 기능성 화장용 조성물.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물은 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 중량비율로 함유되는 것인 주름 개선 및 미백용 복합 기능성 화장용 조성물.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C3의 알코올, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출하는 것인 주름 개선 및 미백용 복합 기능성 화장용 조성물.
  4. 청구항 1에 있어서, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물을 더 포함하는 것인 주름 개선 및 미백용 복합 기능성 화장용 조성물.
  5. 청구항 4에 있어서, 방풍 추출물, 한련초 추출물 및 백작약 추출물로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나를 더 포함하는 것인 주름 개선 및 미백용 복합 기능성 화장용 조성물.
  6. 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물을 함유하는 손상된 피부 회복 촉진용 기능성 화장용 조성물.
  7. 청구항 6에 있어서, 상기 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물 및 밀싹 추출물은 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 중량비율로 함유하는 것인 손상된 피부 회복 촉진용 기능성 화장용 조성물.
  8. 청구항 6에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C3의 알코올, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출하는 것인 손상된 피부 회복 촉진용 화장용 조성물.
  9. 청구항 6에 있어서, 마치현 추출물, 백출 추출물 및 들국화 추출물을 더 포함하는 것인 손상된 피부 회복 촉진용 기능성 화장용 조성물.
  10. 청구항 9에 있어서, 방풍, 한련초 및 백작약으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나를 더 포함하는 것인 손상된 피부 회복 촉진용 기능성 화장용 조성물.
  11. 베르가못 추출물, 금은화 추출물, 율무 추출물, 밀싹 추출물, 마치현 추출물, 백출 추출물, 들국화 추출물, 한련초 추출물, 및 백작약 추출물을 포함하는 주름 개선, 미백, 및 손상된 피부 회복 촉진용 복합 기능성 화장용 조성물.
  12. 청구항 1 내지 11에 있어서, 상기 화장용 조성물은 크림, 유연화장수, 수렴화장수, 밀크 로션, 파운데이션, 비누 또는 세안폼으로 제제화된 것을 특징으로 하는 것인 화장용 조성물.
KR1020130067275A 2013-06-12 2013-06-12 베르가못, 금은화, 율무 및 밀싹 추출물을 함유하는 주름 개선, 미백 및 손상된 피부 회복 촉진용 기능성 화장용 조성물 KR101515443B1 (ko)

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20200089099A (ko) * 2019-01-16 2020-07-24 경희대학교 산학협력단 피부 개선용 화장료 조성물

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