KR20140113452A - Method for removal of sodium in salt using microorganisms traditional sauce Foods and its salt - Google Patents

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Abstract

The present invention provides salt having the taste of salt but with reduced sodium which is a harmful component. A method for producing the salt of the present invention comprises the steps of: propagating and cultivating microorganisms; injecting liquid salt in a culture medium in which the cultivated microorganisms are injected; removing sodium existing in the liquid salt by re-cultivating and fermenting the microorganisms while the liquid salt is being injected; removing the microorganisms by filtering a re-cultivated fermented liquid through a fine sieve; and collecting salt by drying a filtered liquid culture medium. When the liquid salt is injected, the microorganisms intake sodium from the liquid salt while being cultivated and fermented, so that salt including reduced sodium can be produced. Moreover, preferably, the microorganisms are traditional sauce-derived Aspergillus oryzae or Bacillus subtilis or a mixture thereof. According to the present invention, the flavor of salt is preserved, and the content of sodium which is harmful to the human body is reduced, so that a more healthy salt can be provided.

Description

전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법 및 이에 의해 생산된 소금{Method for removal of sodium in salt using microorganisms traditional sauce Foods and its salt}[0001] The present invention relates to a method for removing sodium from a salt using a microorganism,

본 발명은 소금의 성분중 인체에 유해한 나트륨을 제거하는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 전통 장류식품 유래 미생물의 발효를 이용하여 소금의 성분 중 인체에 유해한 나트륨을 선택적으로 제거하여 그 함량을 낮춤으로써 소금을 사용하되 보다 인체 유해성분을 저감시킨 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법 및 그에 의해 생산된 소금에 관한 것이다.The present invention relates to a method for removing sodium harmful to the human body among salt components, and more particularly, to a method for removing sodium harmful to the human body by using fermentation of a microorganism derived from a traditional commodity food, The present invention relates to a method for removing sodium from a salt using a conventional microorganism food microorganism, which uses salt and reduces human harmful components, and a salt produced thereby.

소금은 인류의 식생활에서 없어서는 안되는 물질로써 그 용도는 예로부터 다양하게 사용되어 왔다. 이러한 소금은 짠맛을 내는 대표적인 물질로써 나트륨(Na)이온과 염소(Cl)이온이 이온결합된 상태로 이루어져 있다. 이러한 소금은 액상에서 나트륨이온(Na+)과 염소이온(Cl-)이 해리된 상태를 유지하며, 이러한 소금의 성분중 나트륨이온(Na+)은 타 물질과 쉽게 반응하여 여러 가지 염을 형성하게 되며, 이러한 염은 인체에 유해한 것으로 알려져 있다. 따라서 소금을 사용하되, 소금성분중 이러한 나트륨 성분이 저해된 소금 또는 저염 소금이 널리 사용되고 있으며, 건강에 관한 관심이 고조될수록 이러한 나트륨 저감소금의 관심은 날로 증가하고 있다. Salt is an indispensable substance in the diet of mankind and its use has been used variously since ancient times. These salts are representative of salty taste and consist of sodium (Na) and chlorine (Cl) ions ionically bound. This salt is a sodium ion (Na +) and chlorine ion (Cl -) in the liquid phase and maintain the two sea miles state, the sodium component of such salt ions (Na +) are formed in a number of salts and easily react with other substances These salts are known to be harmful to the human body. Therefore, salt or low-salt salt with the sodium component is widely used among the salt components, and interest of the sodium-reducing salt is increasing day by day as interest in health increases.

통상 이러한 나트륨 저감소금 또는 저염소금 제조 방법의 대부분은 천연물 대체제 또는 화학첨가제를 이용한 제조방법이다. 천연물 대체제인 녹차, 다시마, 함초 등을 이용하여 제조한 나트륨 저감 소금은 맛, 풍미성 등이 일반 소금에 비하여 감소하여 소비자의 수용도가 낮은 문제점이 있다.Generally, most of the methods for producing such sodium-reduced salt or low-salt salt are a production method using a natural substance substitute or a chemical additive. There is a problem that the taste and flavor of sodium salt, which is prepared by using green tea, kelp, and green tea, which are substitutes of natural products, are lower than that of ordinary salt, resulting in low acceptance of consumers.

또한, 이와는 달리 화학적 첨가제를 사용하여 제조한 저염 소금은, 한국 공개특허(출원번호: 10-2009-7021967호)에 나타난 바와 같이, 염화칼륨, 마그네슘 등을 첨가하여 나트륨 함유량을 감소 시켰지만, 짠맛과 함께 쓴맛이 나타나므로 쓴맛을 억제 할 수 있는 또 다른 화학적 첨가물이 첨가되고 있으며, 저염으로 인한 짠맛의 상실로 기존 소금 사용량 보다 많이 첨가하여 사용하여야 하는 문제점이 있으며, 새로이 첨가된 성분이 인체에 나쁜 영향을 끼칠 수 있는 문제점이 있다.Alternatively, as shown in Korean Patent Laid-Open Publication No. 10-2009-7021967, low-salt salt prepared by using a chemical additive reduces sodium content by adding potassium chloride, magnesium and the like, Since bitterness appears, another chemical additive that can suppress the bitter taste is added, and there is a problem that it is added more than the conventional salt amount due to the loss of salty taste due to the low salt, and the newly added ingredient has a bad influence on the human body There is a problem that can be caused.

그리고, 한국공개특허(출원번호: 10-2011-0064806호: 미생물 소금 및 그 제조방법)에 따르면, 이는 미생물을 이용하되, 소금내에 유용한 미네랄이 많이 함유되도록 하는 미네랄 소금으로써, 염수에 미생물을 투입하여미생물 존재하에 소금결정핵이 생성되도록 한다. 그리고 이때 사용되는 미생물은 유산균으로 락토바실러스 속(Lactobacillus sp.), 바이셀라 속(Weissella sp.), 류코노스톡 속(Leuconostoc sp.) 및 페디오코커스 속(Pediococcus sp.)으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종을 사용하도록 하고 있으나, 이 역시 소금의 유해한 성분인 나트륨의 근본적인 제거를 수행할 수 없는 문제점이 있다.According to the Korean patent application (Application No. 10-2011-0064806: microbial salt and its production method), it is a mineral salt that uses microorganisms and contains a lot of useful minerals in the salt, So that the salt nuclei are formed in the presence of microorganisms. And the microorganism used herein is selected from the group consisting of Lactobacillus sp., Weissella sp., Leuconostoc sp. And Pediococcus sp. However, this also has a problem that it is impossible to perform the fundamental removal of sodium, which is a harmful component of the salt.

따라서 본 발명의 목적은 소금의 맛은 그대로 살리고, 유해한 성분인 나트륨이 저감된 소금을 제공하기 위하여 전통 장류식품에 존재하는 미생물을 이용하여 이를 달성하고자 한다.Accordingly, an object of the present invention is to achieve this by using a microorganism existing in a traditional soybean food in order to provide a salt with reduced taste of salt and harmful ingredient sodium.

상기의 목적을 달성하기 위한 본 발명은,미생물을 증식 배양시키는 제1단계와; 상기 배양된 미생물이 투입된 배지에 소금을 투입하는 제2단계와; 소금이 투입된 상태에서 상기 미생물을 재차 배양발효하여 배양액 중에 존재하는 소금 성분의 나트륨을 제거하는 제3단계;와 상기 재차 배양된 배양발효액을 미세망에 여과하여 미생물을 제거하는 제4단계;그리고 여과된 배양액을 건조시켜 소금을 회수하는 제5단계;로 이루어져, 상기 소금액이 투입된 상태에서 미생물의 배양발효과정중에 소금액의 나트륨을 섭취함으로써 나트륨이 저감된 소금이 이루어지는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법을 제공하는 것이다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a method for producing microorganisms, comprising: a first step of growing and culturing microorganisms; A second step of adding salt to the culture medium into which the cultured microorganism is introduced; A third step of culturing and fermenting the microorganisms in a state where the salt is added to remove the sodium component of the salt component present in the culture solution, a fourth step of filtering microorganisms by filtering the cultured fermentation broth again, And the salt is recovered by drying the culture medium. The microbial fermentation process of the present invention is characterized in that the microbial fermentation process comprises the steps of: By weight of sodium.

그리고 바람직하기로는, 상기 미생물은 전통 장류식품 유래인 곰팡류에 속하는 아스퍼질러스 속(Aspergillus sp.)과 세균류에 속하는 바실러스 속(Bacillus sp.)속의 미생물 또는 이들의 혼합이고,상기 아스퍼질러스 속(Aspergillus sp.) 미생물은 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae)이고, 바실러스 속(Bacillus sp.)속의 미생물은 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 리체니포미스 (Bacillus licheniformis), 바릴러스 코아굴란스 (Bacillus coagulans) 이도록 한다.Preferably, the microorganism is selected from the group consisting of Aspergillus sp. Belonging to fungi belonging to traditionally endangered foods and microorganism belonging to Bacillus sp. Belonging to fungi, or a mixture thereof, and the Aspergillus sp. The Aspergillus sp. Microorganism is Aspergillus oryzae and the microorganism in the Bacillus sp. Is Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Let's be Bacillus coagulans.

그리고 더욱 바람직하기로는 상기 미생물의 혼합은 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae)와 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 혼합으로 이루어지고, 배양시, 각각 별도로 최적균체수가 이루어지도록 배양한 후, 이를 혼합하여 사용되도록 하고, 상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 배양액은 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae) 배양액 중량 대비 30중량%이하가 혼합되도록 한다. More preferably, the mixing of the microorganisms is performed by mixing Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis. After culturing, the microorganisms are cultured so as to obtain optimal cell counts separately, And the culture medium of Bacillus subtilis is allowed to be mixed in an amount of 30% by weight or less based on the weight of the culture medium of Aspergillus oryzae.

또한, 미생물을 증식 배양 시키는 단계는, 탄소원, 질소원 무기염류를 주 구성성분으로 이루어지는 TSB 기본배지를 이용하거나, 또는 질소원으로 콩가루를 사용하되, 배지 전체 중량대비 1 내지 2중량% 사용되는 콩가루 배지이도록 하고, 콩가루배지상에서 배양시, 상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)는 20 내지 30시간 배양하여 최적균체수가 이루어지도록 하며, 제3단계는, 소금이 투입된 상태에서 상기 미생물을 4 내지 6시간 배양발효하여 배양액 중에 존재하는 소금 성분의 나트륨을 제거하는 단계로 이루어진다. 그리고, 상기 투입되는 소금은 소금의 포화도를 고려하여 전체 배양액 대비 30중량%이하이고, 상기 소금액이 투입된 미생물 배양액의 재차 발효시 지속적 발효를 위한 탄소원이 더 투입되도록 한다.In addition, the step of growing and culturing the microorganisms may be carried out by using a TSB basic medium composed of a carbon source, nitrogen source inorganic salts as main constituents, or using soybean flour as a nitrogen source, so that the soybean flour medium used is 1 to 2 wt% Bacillus subtilis is cultured for 20 to 30 hours to obtain optimal cell count. In the third step, the microorganism is cultured for 4 to 6 hours in a state where salt is added, Thereby removing the sodium component of the salt component present in the culture solution. The amount of the salt to be added is 30% by weight or less based on the total amount of the culture, considering the degree of saturation of the salt, so that the carbon source for the continuous fermentation of the microbial culture liquid into which the small amount of the introduced microbial culture is added is further added.

본 발명에 따르면, 소금 자체의 풍미는 그대로 살리고, 인체에 유해한 나트륨 성분이 저감되었으므로 보다 건강한 소금을 제공할 수 있는 효과가 있다.According to the present invention, since the flavor of the salt itself is preserved and the sodium component harmful to the human body is reduced, it is possible to provide a healthier salt.

도 1은 대조구로 사용된 일반 소금의 나트륨 함량을 보인 시험성적서
도 2는 본 발명에 의한 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae)을 이용하여 나트륨이 저감된 소금의 나트륨 함량을 보인 시험성적서.
도 3은 본 발명에 의한 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae)를 이용한 소금의 나트륨의 저감 비교를 보인 그래프
도 4는 본 발명에 의한 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 이용하여 나트륨이 저감된 소금의 나트륨 함량을 보인 시험성적서.
도 5는 본 발명에 의한 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 이용한 소금의 나트륨의 저감 비교를 보인 그래프.
도 6은 대조구로 사용된 일반 소금의 나트륨 함량을 보인 시험성적서
도 7은 본 발명에 의한 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae)와 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 혼합된 배양액을 이용하여 나트륨이 저감된 소금의 나트륨 함량을 보인 시험성적서.
도 8은 본 발명에 의한 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae)와 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 혼합된 배양액을 이용한 소금의 나트륨의 저감 비교를 보인 그래프.
도 9는 기본 TSB 배지와 콩가루 배지의 농도별로 각각 배양한 균수를 나타내는 그래프.
도 10은 본 발명에 의한 바실러스 코아굴란스 (Bacillus coagulans) 배양액을 이용하여 소금 투입후 5시간 경과 후, 나트륨이 저감된 소금의 나트륨 함량을 보인 시험성적서
도 11은 본 발명에 의한 바실러스 리체니포미스 (Bacillus licheniformis) 배양액을 이용하여 소금 투입후 5시간 경과 후, 을 이용하여 나트륨이 저감된 소금의 나트륨 함량을 보인 시험성적서
도 12는 본 발명에 의한 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis) 배양액을 이용하여 소금 투입후 5시간 경과 후, 을 이용하여 나트륨이 저감된 소금의 나트륨 함량을 보인 시험성적서
도 13은 기본 TSB 배지와 콩가루 최적배지에서의 각각 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis)를 나트륨이 저감된 소금의 나트륨 저감 비교를 보인 그래프
Figure 1 shows the test results showing the sodium content of common salt used as a control
2 is a test report showing the sodium content of sodium salt-reduced salt using Aspergillus oryzae according to the present invention.
FIG. 3 is a graph showing a comparison of the reduction of sodium in salt with Aspergillus oryzae according to the present invention
FIG. 4 is a test report showing the sodium content of sodium salt-reduced salt using Bacillus subtilis according to the present invention. FIG.
FIG. 5 is a graph showing a comparison of sodium reduction of salt using Bacillus subtilis according to the present invention. FIG.
Figure 6 shows the test results showing the sodium content of the common salt used as a control
FIG. 7 is a test report showing the sodium content of sodium salt-reduced salt using a mixed culture of Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis according to the present invention.
FIG. 8 is a graph showing a comparison of sodium reduction of salt using a mixed culture of Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis according to the present invention.
FIG. 9 is a graph showing the number of bacteria cultured according to the concentrations of basic TSB medium and soybean flour medium, respectively. FIG.
FIG. 10 is a graph showing a test result showing the sodium content of sodium salt reduced after 5 hours from the addition of the salt using the culture medium of Bacillus coagulans according to the present invention
FIG. 11 is a graph showing a test result showing the sodium content of sodium in which sodium is reduced by using the culture medium of Bacillus licheniformis according to the present invention and after 5 hours after the addition of the salt
FIG. 12 is a graph showing the sodium content of sodium salt-reduced salt using Bacillus subtilis culture according to the present invention after 5 hours from the addition of the salt.
FIG. 13 is a graph showing the comparison of the sodium reduction of sodium reduced with Bacillus subtilis, respectively, in the basic TSB medium and soybean flour optimum medium

이하 도시한 도면을 참조하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기로 한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the drawings.

먼저, 본 발명은 소금의 성분중 나트륨을 저감 하기 위한 것으로, 이를 달성하기 위하여 전통 장류식품에 존재하는 미생물을 이용한다. 본 발명자들의 연구결과에 따르면, 전통장류식품 유래 미생물인 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae)와 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 이용하여 소금 본래의 맛, 풍미 등의 조미역할은 유지하면서, 소금 자체의 나트륨을 제거함과 동시에 미생물 발효 시 분비되는 유용한 물질을 포함하는 나트륨 제거 소금을 제조할 수 있음을 알 수 있었다. 이하 미생물에 관하여 설명하기로 한다. First, the present invention is to reduce the sodium content of the salt, and in order to achieve this, microorganisms existing in traditional soup foods are used. According to the results of the research conducted by the present inventors, it has been found that, by using Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis, which are microorganisms derived from traditional poultry foods, while retaining the original taste and flavor, It is possible to produce a sodium-free salt containing a useful substance which is released upon fermentation of microorganisms while removing its own sodium. Hereinafter, microorganisms will be described.

전통 장류식품 미생물은 곰팡이류 압시디아 속(Absidia sp.), 라이조퍼스(Rhizopus sp.), 아스퍼질러스 속(Aspergillus sp.), 모나스커스 속(Monascus sp.), 페니실리움 속(Penicillum sp.), 세팔로스포리움 속(Cephalosporium sp.), 뉴로스포라 속 (Neurospora sp.), 더마티움 풀란스(Dematium pullans), 엑티노유코어 속 (Actinomucor sp.), 보트리오리슘 속(Botryorichum sp.), 클라도스포리움 속(Cladosporium sp.) 등이 있으며, 효모류에는 사카로마이세스 속(Saccharomyces sp.), 마이코더마 속(Mycoderma sp.). 토룰라 속(Torula sp.), 한세뉼라 속(Hansenula sp.), 피치아 속 (Pichia sp.), 스키조사카로마이세스 속 (Schizosaccharomyces sp.), 칸디다 속 (Candida sp.) 등이 있다. 또한 세균류는 마이크로코커스 속(Micrococcus sp.), 바실러스 속(Bacillus sp.), 루코노스톡 속(Leuconostoc sp.) 등이 있는 것으로 알려져 있다. 이러한 미생물들은 발효에 직간접적으로 관여하고 있으며 발효를 통하여 젖산발효, 아미노산 발효 등 인체에 유용한 물질을 생성하고 있으며 주로 된장, 간장, 고추장 등에 많이 포함되어져 있다. The traditional intestinal food microorganisms are selected from the group consisting of fungi Absidia sp., Rhizopus sp., Aspergillus sp., Monascus sp., Penicillum sp. ), Cephalosporium sp., Neurospora sp., Dematium pullans, Actinomucor sp., Borotriesium sp. Botryorichum sp.) And Cladosporium sp., And yeasts include Saccharomyces sp., Mycoderma sp. Such as Torula sp., Hansenula sp., Pichia sp., Schizosaccharomyces sp., Candida sp., And the like. The fungi are also known to be Micrococcus sp., Bacillus sp., Leuconostoc sp., And the like. These microorganisms are directly or indirectly involved in fermentation and fermentation through lactic acid fermentation, amino acid fermentation, etc., are useful materials for human body, and they are mainly included in miso, soy sauce, and kochujang.

이러한 미생물들 중 소금성분중의 나트륨을 제거하는 미생물들을 다양하게 연구한 결과, 곰팡류인 아스퍼질러스 속(Aspergillus sp.)과 세균류에 속하는 바실러스 속(Bacillus sp.)속의 미생물이 유용함을 알 수 있었으며, 이들 미생물은 대표적인 장류식품 미생물 종으로 알려져 있다. As a result of various studies on the microorganisms that remove sodium in the salt component of these microorganisms, it has been found that microorganisms belonging to the fungus Aspergillus sp. And bacteria belonging to the bacterium Bacillus sp. , These microorganisms are known to be representative typical food microorganism species.

실험결과 아스퍼질러스 속중에서 유용한 미생물은 아스퍼질러스 오리지에 임을 알 수 있었으며, 아스퍼질러스 오리지에는 누룩곰팡이의 일종으로서 단백질을 아미노산으로 분해하는 성질이 있어서 된장, 청주, 간장 등 제조에 활용되고 있는 균주 중에 하나이다. 또한 전분을 포도당으로 분해하는 특징을 가지고 있어서 술이나, 식혜, 감주, 미림 등을 만드는데 이용된다. 우리나라에서는 간장, 고추장, 된장 등 장류와 막걸리 등의 양조주 같이 발효식품 전반의 제조에 이용되며 우리나라를 비롯한 아시아권에서 양조산업 또는 발효산업상 상당히 중요한 역할을 하는 균이다. As a result of the experiment, it was found that useful microorganisms in the genus Aspergillus were Aspergillus oryzae. Aspergillus oryzae is a kind of yeast fungus and has a property of decomposing proteins into amino acids. Thus, it is used for manufacturing miso, sake, soy sauce Lt; / RTI > It also has the characteristic of decomposing starch into glucose, so it is used to make alcohol, sikhye, potato, mirin. In Korea, it is used in the manufacture of whole fermented foods such as soy sauce, kochujang, soybean paste, and brewed beverages such as makgeolli, and it plays a very important role in the brewing industry or fermentation industry in Asia including Korea.

또한, 바실러스 속에 속하는 여러 미생물중 본 발명자들은 다양한 실험을 통해 바실러스 내 활성아포형 당화균 2종, 바실러스 리체니포미스 (Bacillus licheniformis; 이하 BL로 표기)와 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis; 이하 BS로 표기) 및 바실러스(Bacillus) 속에서 유일한 유산균으로 분리되는 유포자 유산균인 바실러스 코아굴란스 (Bacillus coagulans; 이하 BC로 표기)가 유용함을 알 수 있었으며, 이중 바실러스 서브틸리스가 가장 유용함을 알 수 있엇다. 이 중 바실러스 서브틸리스는 바실러스 속의 대표 종으로서 탄수화물 분해능이 뛰어나며, 탄수화물 분해효소인 락테이스 (lactase), 아밀레이스(amylase), 말테이스(maltase) 등을 분비하고, 단백질 분해 효소인 펩신(pepsin), 펩티데이스(peptidase), 트립신(trypsin)을 분비하는 것으로 보고되어 있다.  Among the various microorganisms belonging to the genus Bacillus, the present inventors have conducted various experiments to determine the presence of two active bacillary glycated bacteria, Bacillus licheniformis (hereinafter referred to as BL) and Bacillus subtilis Bacillus coagulans (hereinafter abbreviated as BC), which is the only lactic acid bacteria isolated in the genus Bacillus, is found to be useful, and Bacillus subtilis is most useful. Among them, Bacillus subtilis is a representative species of Bacillus species. It has excellent carbohydrate decomposing ability and secretes carbohydrase enzymes such as lactase, amylase, maltase, etc., and protease enzymes such as pepsin ), Peptidase, trypsin, and the like.

이하, 본 발명에 사용되는 아스퍼질러스 오리지에와 바실러스 서브틸리스 및 기타 균주는 안전성이 확보된 전통 장류식품에서 분리한 후 과학적 동정을 거쳐 사용해도 되나, 식품의약품안전청으로부터 식품제조가공업 허가를 취득한 제조업체가 생산, 판매하는 동일한 균주를 구입하여 사용하여도 무방하다.  Aspergillus oryzae, Bacillus subtilis, and other strains used in the present invention can be isolated from traditional soy sauce foods having safety, and can be used after scientific identification. However, the product obtained from the Food and Drug Administration The same strains produced and sold by the manufacturer may be purchased and used.

거의 모든 생명체는 체내 이온 조절을 위해서 나트륨을 필요로 하는 것으로 알려져 있다. 미생물의 경우에도 K, Mg, Mn, Fe, Ca, P등 무기염류가 미량 필요한 것으로 알려져 있고, 이런 무기질들은 효소반응, 세포막 평형, 균체내의 삼투압 조절 작용을 하는 것으로 추측되고 있다.  Almost all organisms are known to require sodium to control the body's ions. Microorganisms are known to require trace amounts of inorganic salts such as K, Mg, Mn, Fe, Ca, and P, and these minerals are presumed to undergo enzymatic reaction, cell membrane equilibrium, and osmotic pressure control within the cells.

보통 10% 이상의 염분농도에서도 잘 자라는 균을 호염성균이라고 하며 염류를 필요로 하지 않는 균을 비호염성 균이라고 한다. 호염성 세균류는 염류 의존도에 따라서 저(등)도 호염균, 중도호염균, 고도호염균으로 구별할 수 있다. 호염균의 염류 요구성을 보면 일반적으로 호염균은 Na+와 Cl-를 필수로 요구하고 중등도 호염균은 Na+는 필요로 하지만 Cl-는 요구하지 않는다. Normally, bacteria that grow well even at a salt concentration of 10% or more are called basophilic bacteria, and bacteria that do not require salts are called non-toxic bacteria. The horseradish fungi can be distinguished as low (eg) hypophytic, middle hypophytic, and hyperphosphorus depending on the salt dependence. As for the salt composition of the basidiomycetes, Na + and Cl- are essential for basophile and Na + is required for moderate basophile, but Cl - is not required.

호염균을 고농도 염분농도에서 배양 할 경우에 어떤 삼투압 방벽의 존재, 염류가 세포내에 유입되어도 고농도 염분농도에서 활성을 나타내는 호염성효소의 대사, 또는 에너지를 소비하여 균체 내외의 염분농도 평형을 유지하는 능동수송계의 존재 등이 기대되었다.When the basophilic bacteria are cultured at a high concentration of salt concentration, the presence of any osmotic barriers, the metabolism of the horseradish enzyme which exhibits activity at a high salt concentration even when the salt flows into the cell, or energy is consumed, And the presence of an active transport system.

아스퍼질러스 오리지에는 호기성이며 균사체를 생성하면서 성장이 진행됨에 따라 포자를 형성하는 것으로 알려져 있어 내염성이 강한 것으로 알려져 있다. 균체의 집락은 황록색이나 오래되면 갈색으로 된다. 균사체는 처음에는 백색포자를 착생한다. 정낭은 구형 또는 플라스크(flask) 형으로 피자기를 드물게 만들며 처음에는 무색, 후에는 황록색, 지름이70~110㎛ 때로는 균핵을 만든다. It is known that Aspergillus oryzae are aerobic and are known to form spores as their growth progresses while producing mycelium, and thus they are known to be resistant to salt. The colonies of the cells are yellowish-green, but old brown. The mycelium is initially spawning white spores. The seminal vesicles are spherical or flask-shaped, making the papillae rare, colorless at first, yellowish green at the beginning, and sclerotia at 70-110 μm in diameter.

바실러스 속 미생물은 호기성이며 중도호염균으로서 15% 내지 20%의 염분농도에서도 증식이 가능한 포자형성세균으로 알려져 있다. Microorganisms of the genus Bacillus are aerobic and mildly hypophytic, and are known as spore-forming bacteria capable of proliferating at a salt concentration of 15% to 20%.

이에 본 발명에는 아스퍼질러스 오리지에와 바실러스 속 미생물의 발효를 통하여 소금의 나트륨을 제거하는 방법을 개발하기에 이르렀다. 본 발명자들은 아스퍼질러스 오리지에와 바실러스 서브틸리스 균주는 증식 후, 소금액 존재하에서 포자를 형성하면서 나트륨을 소비한다는 사실을 확인할 수 있었으며, 이는 달리 말하면 소금의 나트륨을 제거할 수 있다는 것에 착안하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.Accordingly, the present invention has developed a method for removing sodium from the salt through fermentation of Aspergillus oryzae and microorganisms of the genus Bacillus. The inventors of the present invention confirmed that Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis strain consume sodium while forming spores in the presence of a small amount of water after the proliferation. In other words, it is possible to remove sodium of the salt The present invention has been completed.

이하에서는 실시 예를 통하여 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples.

실시 예 1) 아스퍼질러스 오리지에의 최적 배양 Example 1: Optimal culture for Aspergillus oryzae

아스퍼질러스 오리지에는 균사를 형성하는 누룩균의 일종으로 주로 고형물의 표면에서 성장하기 때문에 메주 등의 숙성 등 고상발효를 통하여 이용되어 왔다. 포자를 형성하여 내염성을 가지고 있지만, 소금의 표면에서 배양되지 않는다. Aspergillus oryzae is a kind of mycelia forming mycelium, and it grows mainly on the surface of solids, and thus has been used through solid phase fermentation such as aging of meju. It forms spores and has salt resistance, but is not cultured on the surface of salt.

소금의 나트륨을 제거하기 위하여는 소금을 물에 용해시켜 이온화 형태에서 제거하여야 하기에 본 실시예에서는 액상 배양을 통한 아스퍼질러스 오리지에의 최적 조건을 검토하였다.In order to remove sodium from the salt, it is necessary to dissolve the salt in water to remove it from the ionized form. Therefore, in this embodiment, optimum conditions for the aspergillus origin by liquid culture were examined.

기본 배지는 TSB 배지를 사용하였다. 배양 온도는 30℃를 유지하였으며, 인위적으로 공기를 주입하여 호기적 조건을 만들어 주면서 배양액을 교반하여 주었다.TSB medium was used as a basic medium. The incubation temperature was maintained at 30 ° C, and the culture solution was agitated while artificial air was injected to make aerobic conditions.

일반적으로 미생물의 증식을 측정하는 방법은 분광광도계(spectrophotometer)를 이용하여 광학밀도(O.D; Optical Density) 측정을 하거나, 일정한 비율로 배양액을 희석하여 한천배지 등에 도말하여 직접 균을 계수하는 방법을 사용한다. 그러나, 아스퍼질러스 오리지에는 균사를 형성하면서 성장하여 일반적인 세포수의 측정은 불가하였다. 이에 최적 배양 시간의 판단은 배양액의 색깔 변화에 따른 균체의 증가를 현미경으로 확인하면서 결정하였다.In general, microbial growth can be measured by measuring the optical density (OD) using a spectrophotometer or by directly diluting the culture with a constant ratio and counting the bacteria directly on the agar medium do. However, in Aspergillus oryzae, it was impossible to measure the normal cell number while growing mycelium. The optimal incubation time was determined by confirming the increase of the cells with the microscope.

배양 시간에 따른 배양액의 색깔 변화 Change in color of culture medium with incubation time 배양액의 색깔Color of culture medium 갈색Brown 황녹색Yellow green 연갈색Light brown 배양시간 Incubation time 0 시간(접종 초기)0 hours (initial vaccination) 12 시간 12 hours 24시간 24 hours 현미경 관찰Microscopic observation 포자체 관찰됨Sporophyte observed 균사체 발달 및 포자낭 발달 Mycelial development and sporophyte development 균사 일부 및 포자 관찰됨Mycelia and spores were observed

표 1에 나타난 바와 같이 아스퍼질러스 오리지에는 12시간 배양 후에 배양액이 황녹색으로 되면서 최고의 균체수를 현미경으로 관찰할 수 있었다. 또한 배양 24시간 이후 급격히 색깔이 옅어지면서 포자가 관찰되었다. 이에 배양 12시간째 최대 증식이 일어남을 알 수 있었다. As shown in Table 1, after incubation for 12 hours in Aspergillus oryzae, the culture broth became yellowish green, and the best cell count was observed with a microscope. In addition, after 24 hours of incubation, the spore was observed as the color became pale. Thus, the maximum proliferation was observed at 12 hours after culture.

실시 예 2) 아스퍼질러스 오리지에의 발효 후 나트륨 제거율Example 2: Sodium removal rate after fermentation of Aspergillus oryzae

기본 배양 배지로 TSB 배지를 사용하였다. 시중에 시판중인(판매원 : 주식회사 충무발효, 2x109cfu/g) 아스퍼질러스 오리지에를 배양액 중량 2중량% 접종하였다. 발효는 30℃를 유지하면서 실시예 1)의 방법과 같이 호기적 조건으로 수행하였다. 12시간 동안 배양한 후 지속적 발효를 유지하기 위하여 탄소원을 배양액 중량대비 2중량% 추가 공급하였다. 이와 동시에 소금의 최대 포화도에 근거하여 배양액 중량대비 30중량%를 투입하였다. 이후 24시간동안 배양한 후 발효를 종료하였다. 배양액은 1㎛ 미세망에 여과하여 60℃에서 건조하였다. 건조된 소금은 국가공인검사기관인 한국분석연구원에서 나트륨 함량을 분석하였다. 나트륨 함량 분석은 유도결합 플라즈마 발광분광계(Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometer; ICP-OES)를 이용하여 분석하였다. TSB medium was used as the primary culture medium. (2 x 10 < 9 > cfu / g) Aspergillus oryzae, which is commercially available (commercial source: Chungmu Fermentation Co., Ltd.), was inoculated with 2 wt% of the culture liquid. Fermentation was carried out under aerobic conditions as in Example 1) while maintaining the temperature at 30 캜. After 12 hours of incubation, 2% by weight of carbon source was added to the culture to maintain the fermentation. At the same time, 30% by weight based on the weight of the culture liquid was added based on the maximum degree of saturation of the salt. After the incubation for 24 hours, the fermentation was terminated. The culture was filtered on a 1 μm fine mesh and dried at 60 ° C. The sodium content of dried salt was analyzed by Korea National Institute of Analytical Laboratories. Sodium content was analyzed by ICP-OES (Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometer).

나트륨 분석 방법을 좀 더 자세히 설명하자면, 분석하고자 하는 소금의 적정량을 각각 동일하게 측정하여 450 회화로에서 약 4시간 태운 뒤 잔여물을 질산에 녹여 여과 한 후 액체시료 형태로 유도결합 플라즈마 발광분광계로 분석한다. 유도결합 플라즈마 방출 분광법이란 여기상태의 원자나 이온이 방출되는 빛을 측정함으로서 정성 및 정량 분석하는 방법이다. 원자의 발광은 자유원자나 이온을 불안정한 에너지 상태로 여기시킨다. 여기된 원자와 이온들은 보다 안정한 배열이나 기저상태로 떨어지면서 그 에너지 차이만큼의 빛을 방출하게 된다. 이 때 방출되는 각 원소의 고유한 특성 파장은 분광계에 의해 분리되어 나트륨의 존재 여부를 확인할 뿐만 아니라, 검출기로 그 세기를 측정하여 각 소금에 들어있는 나트륨의 양을 측정하는 것이다.In order to explain the sodium analysis method in more detail, the appropriate amount of salt to be analyzed is measured in the same manner, and the resultant is placed in a 450-ton furnace for about 4 hours. The residue is dissolved in nitric acid and filtered. Analyze. Inductively coupled plasma emission spectroscopy is a method of qualitative and quantitative analysis by measuring the light emitted by an excited atom or ion. The emission of atoms excites free atoms or ions into an unstable energy state. The excited atoms and ions fall into a more stable arrangement or base state and emit as much light as their energy difference. The characteristic wavelength of each element released at this time is separated by a spectrometer to confirm the presence of sodium, and the intensity of sodium is measured by a detector to measure the amount of sodium contained in each salt.

도 1 내지 도3에 나타나듯이 아스퍼질러스 오리지에 발효 후 소금 내 나트륨의 저감율은 7.4%를 나타냄을 알 수 있다.As shown in Figs. 1 to 3, the reduction rate of sodium in salt after fermentation in Aspergillus oryzae is 7.4%.

실시 예 3) 바실러스 서브틸리스의 최적 배양 Example 3 Optimal Culture of Bacillus subtilis

바실러스 서브틸리스는 청국장에서 분리한 바실러스 서브틸리스 제이엔에스 (Bacillus subtilus JNS; 기탁기관: 한국미생물보존센터, 기탁번호: KCCM11289P, 기탁일: 2012. 6.25) 균주를 사용하였다. 그러나, 이에 한정하지 아니하고 시판되는 동일 균종을 사용하여도 무방하다.The Bacillus subtilis strain used was Bacillus subtilus JNS (Korean Microorganism Conservation Center, Accession No .: KCCM11289P, Date of Deposit: 2012. 6.25) isolated from Chungkookjang. However, the present invention is not limited thereto, and the same commercially available species may be used.

초기 배양 접종 농도는 광학밀도 1의 농도를 갖는 균(1x108cfu/ml)을 배양액 중량대비 1중량%로 하여 접종하였다. The initial culture inoculum concentration was inoculated with 1% by weight of the culture solution with a density of optical density 1 (1x10 8 cfu / ml).

바실러스 서브틸리스의 최적 배양을 위하여 기본 배지는 TSB배지를 사용하였다. 배양방법은 실시 예1)에 나타낸 바와 같이 호기적 조건으로 수행하였으며, 배양이 진행됨에 따라 분광광도계를 이용한 광학밀도(O.D260nm)를 측정하여 균수의 증가를 측정하였다. 이의 결과를 표3에 나타내었다.For the optimal culture of Bacillus subtilis, TSB medium was used as the basic medium. The culture was carried out under aerobic conditions as shown in Example 1), and the optical density (OD 260 nm ) using a spectrophotometer was measured as the culture progressed to measure the increase in the number of bacteria. The results are shown in Table 3.

바실러스 서브틸리스의 시간별 균체수 증가 Bacillus subtilis increased in number of cells per hour 배양시간Incubation time 00 1212 2424 3636 4848 6060 광학밀도(O.D)Optical density (OD) 0.570.57 1.931.93 2.642.64 3.073.07 3.213.21 3.073.07 균수 (cfu/ml)Number of bacteria (cfu / ml) 2.3X107 2.3X10 7 1.9X108 1.9X10 8 2.6X108 2.6X10 8 3X108 3X10 8 3.2X108 3.2X10 8 3X108 3X10 8

표 2에서 보듯이 배양 48시간에 가장 높은 균수를 나타냄을 알 수 있으며, 최소한 30시간 이상의 배양시 충분히 사용가능함을 알 수 있다. As shown in Table 2, it can be seen that the highest bacterial count is obtained at 48 hours of culture, and it can be used sufficiently for culturing for at least 30 hours or more.

실시 예 4) 바실러스 서브틸리스의 발효 후 나트륨 제거율Example 4: Sodium removal rate after fermentation of Bacillus subtilis

실시 예 3)의 방법을 기본으로 발효를 수행하였다. 배양 배지로 TSB 배지를 사용하였으며, 접종 농도는 광학밀도 1의 농도(O.D260nm=1)를 갖는 균(1x108cfu/ml)을 배양액 중량대비 1중량%로 하여 접종하였다. 발효는 30를 유지하면서 실시예 1)의 방법과 같이 호기적 조건으로 수행하였다. 48시간 동안 배양한 후 지속적 발효를 유지하기 위하여 탄소원을 배양액 중량대비 2중량% 추가 공급하였다. 이와 동시에 소금의 최대 포화도에 근거하여 배양액 중량대비 30중량%를 투입하였다. 이후 24시간동안 배양한 후 발효를 종료하였다. 배양액은 1㎛ 미세망에 여과하여 60℃에서 건조하였다. 건조된 소금은 국가공인검사기관인 한국분석연구원에서 나트륨 함량을 분석하였다. 나트륨 함량 분석은 유도결합 플라즈마 발광분광계(Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometer; ICP-OES)를 이용하여 분석하였다.Fermentation was carried out on the basis of the method of Example 3). TSB medium was used as the culture medium. Inoculation concentration was 1% by weight based on the weight of the culture liquid (1 × 10 8 cfu / ml) having an optical density of 1 (OD 260 nm = 1). The fermentation was carried out under aerobic conditions as in Example 1) while maintaining 30. After 48 hours of incubation, 2% by weight of carbon source was added to the culture to maintain the fermentation. At the same time, 30% by weight based on the weight of the culture liquid was added based on the maximum degree of saturation of the salt. After the incubation for 24 hours, the fermentation was terminated. The culture was filtered on a 1 μm fine mesh and dried at 60 ° C. The sodium content of dried salt was analyzed by Korea National Institute of Analytical Laboratories. Sodium content was analyzed by ICP-OES (Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometer).

도 1의 대조군과 도4의 본 발명에서 나타나듯이, 바실러스 서브틸리스 발효 후 소금의 나트륨 제거율은 9.3%로 나타나 아스퍼질러스 오리지에의 나트륨 제거 효율에 비하여 조금 높은 수치를 나타내었다.As shown in the control of FIG. 1 and the present invention of FIG. 4, the sodium removal rate of the salt after Bacillus subtilis fermentation was 9.3%, which was slightly higher than that of Aspergillus oryzae.

실시 예 5) 아스퍼질러스 오리지에와 바실러스 서브틸리스 병합 발효에 따른 나트륨 제거율Example 5: Sodium removal rate according to fermentation of Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis

소금중의 나트륨 제거율을 향상시키기 위하여 아스퍼질러스 오리지에와 바실러스 서브틸리스의 병합 배양을 실시하였다. 두 균종에 대하여는 일정 비율로 혼합하여 혼합배양을 시도하였으나, 성공하지 못하였다. 이는 두 균종의 혼합 배양은 상호간의 저해물질 분비에 의한 것으로 여겨진다. 일 예로서 바실러스 서브틸리스는 진균을 억제하는 박테리오신(bacteriocin)을 분비하는 것으로 알려져 있어 아스퍼질러스의 증식을 억제하는 것으로 판단되며, 바실러스 서브틸리스 또한 이의 분비에 따른 저해작용을 받아 현 발명에서 목적으로 하는 증식이 일어나지 않는 것으로 추측된다.Combination culture of Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis was performed to improve the sodium removal rate in the salt. Mixed cultures were attempted at a certain rate for both species, but they were not successful. It is considered that the mixed cultures of the two species are due to mutual inhibitory secretion. As an example, Bacillus subtilis is known to secrete bacteriocin, which inhibits fungi, and is thought to inhibit the proliferation of Aspergillus. Bacillus subtilis is also inhibited by its secretion, Is not expected to occur.

따라서 아스퍼질러스 오리지에와 바실러스 서브틸리스를 실시 예1)과 실시 예3)에 따라 각각 최적 배양한 후 소금의 투입과 동시에 혼합하는 일종의 병합 방법을 실시하기에 이르렀다.Therefore, the Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis were optimally cultured in accordance with Example 1) and Example 3, respectively, and then mixed with the salt at the same time.

이들 실시예를 자세히 설명하면 다음과 같다. 첫 번째, 바실러스 서브틸리스의 최적 배양에 이르는 시간이 48시간이므로 실시 예3의 방법에 의하여 먼저 배양하였다. 두 번째, 아스퍼질러스 오리지에의 배양은 실시 예1의 방법에 따라 상기의 바실러스 서브틸리스 배양 36시간 째에 배양을 실시하여 바실러스 서브틸리스의 48시간 배양 종료 시간에 맞추어 배양하였다. 세 번째, 48시간 배양된 바실러스 서브틸리스의 배양액을 아스퍼질러스 오리제 배양액 대비 25중량%로 투입하고, 이와 동시에 병합된 배양액 대비 2중량%로 탄소원을 공급하였다. 이때, 상기 바실러스 서브틸러스 배양액이 아스퍼질러스 오리제 배양액 대비 30중량%이상일 경우에는 오히려 역효과가 남을 알 수 있었다. 따라서 이러한 역효과를 고려하여 투입되는 배양액을 조정하였다. 각각 균 배양액의 첨가 비율은 상기에서 설명한 바실러스 서브틸리스의 박테리오신 분비에 의한 균주간 상호 저해 작용의 피해를 예방하고자 하였으며, 이들의 적정 비율에 대한 것은 좀 더 진보적 실시에 의하여 변화예측이 가능한 것이다. 네 번째, 천일염을 전체 병합된 배양액 대비 30중량%로 투입하였다. 이후 24시간 동안 배양을 실시하였다. 배양 종료 후 실시 예2와 4에서 실시한 방법으로 나트륨 제거율을 분석하였다. These embodiments will be described in detail as follows. First, since the time required for optimal culture of Bacillus subtilis was 48 hours, it was first cultured by the method of Example 3. Secondly, cultivation of Aspergillus oryzae was carried out according to the method of Example 1 at 36 hours after the cultivation of Bacillus subtilis, and cultured at the end of 48 hours of cultivation of Bacillus subtilis. Third, the culture medium of Bacillus subtilis cultured for 48 hours was added to 25% by weight of the Aspergillus oryzae culture medium, and at the same time, 2% by weight of the carbon source was supplied to the combined culture medium. At this time, when the Bacillus subtilis culture solution was 30 wt% or more of the Aspergillus oryzae culture medium, it was found that the adverse effect was adversely affected. Therefore, the added culture was adjusted in consideration of the adverse effect. In order to prevent the damage of bacterial mutual inhibition by the bacteriocin secretion of Bacillus subtilis as described above, the ratio of each of the bacterial culture solutions can be predicted by the more advanced practice. Fourth, 30% by weight of the salt solution was added to the total combined culture. Then, culture was carried out for 24 hours. After the completion of the culture, the sodium removal rate was analyzed by the methods in Examples 2 and 4.

도 6 내지 도 8에 각각 대조군과 아스퍼질러스 오리지에와 바실러스 서브틸리스의 병합 발효에 의한 나트륨 제거율을 나타내었다.6 to 8 show the sodium removal rates by the combined fermentation of the control group, Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis, respectively.

도 6 내지 도 8에서 알수 있듯이 아스퍼질러스 오리지에와 바실러스 서브틸리스의 병합 발효에 의한 나트륨 제거율은 실시예 2)와 실시예 4)에서 나타낸 단독 균주를 사용한 발효시의 나트륨 제거율보다 훨씬 높은 17,3% 의 나트륨 제거율을 보인다.As can be seen from Figs. 6 to 8, the sodium removal rate by the combined fermentation of Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis was much higher than the sodium removal rate during the fermentation using the sole strains shown in Example 2) and Example 4 , And a sodium removal rate of 3%.

이들의 병합 발효에 의한 나트륨 제거 효율 향상은 두 균주간 혼합 배양 방법이 어려운 점을 감안하면, 새로운 병합 방법을 사용한 일례라고 할 수 있을 것이다. 또한 상기의 병합 방법의 사용은 균주간 교차 사용 방법 등을 고안할 수 있는 다양한 실시예의 범위를 포함한다고 할 수 있을 것으로 기대된다.The improvement of the sodium removal efficiency by the combined fermentation can be considered as an example of using the new combination method in view of the difficulty of the two culture methods. It is expected that the use of the above-mentioned combination method includes various embodiments that can design a method of crossing the use of the bacteria.

실시 예6) 관능시험Example 6) Sensory test

아스퍼질러스 오리지에와 바실러스 서브틸리스는 발효 과정 중 아밀레아제(amylase), 프로티아제(protease)등 각종 소화효소와 가수분해 효소를 분비하는 것으로 여러 과학자들에 의해 보고되어 있다. 또한 발린(valine), 티로신(tyrosine) 등 인체내에 유용한 아미노산을 발효 부산물로 많이 분비하는 것으로 보고되어 있다. Aspergillus oryzae and Bacillus subtilis have been reported by various scientists to secrete various digestive enzymes and hydrolytic enzymes such as amylase and protease during the fermentation process. It has also been reported that amino acids useful in the body such as valine and tyrosine are secreted as fermentation by-products.

따라서 본 실시예에서는 실시 예5의 방법으로 만들어진 소금을 대상으로 관능시험을 실시하여 소금의 맛, 풍미에 관한 평가를 실시하였다. 관능 시험은 30명을 대상으로 하였으며, 20-40대 성인을 대상으로 실시하였으며, 아래 표에 나트륨이 감량된 소금의 관능시험 결과를 나타내었다.Therefore, in this Example, a sensory test was conducted on the salt made by the method of Example 5 to evaluate the taste and flavor of the salt. The sensory test was carried out on 30 adults, adults aged 20-40 years. The table below shows the sensory evaluation results of sodium salt-reduced salt.

나트륨 감량 소금의 관능시험Sensory test of sodium-depleted salt 짠 맛Salty taste 냄새 (발효냄새)Odor (fermentation odor) 풍미zest 천일염Sun salt 매우 짜다Weave very 14명 (47%)14 (47%) 심하다Severe 00 고소하다Sue 00 짜다 salty 16명 (53%)16 (53%) 약간 난다 It feels a little 00 그저 그렇다so so 23명 (73%)23 (73%) 짜지 않다Not squeeze 00 나지 않는다I do not. 30명 (100%)30 (100%) 쓴맛이 난다Bitter 7명 (27%)7 people (27%) 본 발명 소금Invention Salt 매우 짜다Weave very 12명 (40%)12 (40%) 심하다Severe 00 고소하다Sue 15명 (50%)15 (50%) 짜다 salty 18명 (60%)18 (60%) 약간 난다 It feels a little 6명 (20%)6 people (20%) 그저 그렇다so so 14명 (47%)14 (47%) 짜지 않다Not squeeze 00 나지 않는다I do not. 24명 (80%)24 (80%) 쓴맛이 난다Bitter 1명 (3%)1 person (3%)

표 3에서 나타나듯이 나트륨 감량 소금의 관능시험결과 짠 맛은 천일염과 정제염과 유사하게 느끼는 것으로 나타났다. 냄새에 있어서는 약간 나는 것으로 나타났으나, 심한 정도는 아닌 것으로 나타났다. 풍미에 있어서는 기존의 소금 대체제 첨가에 따른 쓴맛이 배제되고 각종 아미노산 등 발효 부산물이 자연스럽게 첨가된 본 발명의 소금이 고소한 맛을 가져 한층 풍미를 증진시키는 관능 시험 결과를 얻었다.As shown in Table 3, the salty taste of the sensory test of sodium depleted salt was found to be similar to that of sun saliva and refined salt. The odor was slightly extinguished, but not severe. As for the flavor, the bitterness due to the addition of the conventional salt substitute was excluded, and the taste of the salt of the present invention to which the fermentation by-products such as various amino acids were added naturally was obtained, thereby obtaining a sensory test result for improving the flavor.

한편, 본 발명자들은 다양한 실험과 연구끝에 배지의 질소원을 변경함으로써 미생물의 증식을 보다 효과적으로 이룰 수 있었으며, 또한 시간 역시 단축됨을 알 수 있었고, 이러한 미생물의 증식은 나트륨의 저감이 획기적으로 이루어짐을 알 수 있었으며, 이하 자세히 설명하기로 한다.On the other hand, the inventors of the present invention have found that the microorganism can be more effectively grown by changing the nitrogen source of the medium after various experiments and studies, and that the time is also shortened, and that the proliferation of such microorganisms is remarkably reduced And will be described in detail below.

먼저, 일반적으로 사용되는 TSB 배지의 질소원인 소이톤 대신에 콩가루를 질소원으로 대체한 콩가루배지가 가장 효과적임을 알 수 있었으며, 이때 투입되는 콩가루의 양은 전체 배지 중량대비 1 내지 2중량%가 가장 효과적임을 알 수 있었다. 즉, 도 9에 도시된 바와 같이, 콩가루의 첨가 중량비에 따른 콩가루 배지와 TSB기본배지하에서 바실러스 서브틸리스를 이용하여 각각 배양한 균수비교를 살펴보면,First, it was found that soybean flour substitution of soy flour with nitrogen source was most effective instead of nitrogen source soiton of commonly used TSB medium. The amount of soybean flour added at this time was 1 to 2 wt% Could know. That is, as shown in FIG. 9, when comparing the number of bacteria cultured using Bacillus subtilis under soybean flour medium and TSB basic medium according to the weight ratio of soy flour,

질소원으로 콩가루가 전체 배지 중량대비하여 1.5중량% 첨가된 콩가루배지의 경우 약 24시간이후부터 최대 포화 균주를 이루며, 이 역시 기본 TSB 배지보다 월등한 많은 수의 균주가 배양됨을 알 수 있으며, 이를 이용할 경우 소금의 나트륨 저감효과가 보다 월등히 뛰어남을 예측할 수 있다. 즉, 이전의 실험에서와 달리 최대 미생물 균주의 배양을 위해서는 24시간 정도면 됨으로써 배양시간의 단축을 이룰 수 있게 된다.In case of soybean flour containing 1.5% by weight of soy flour as a nitrogen source, the maximum saturation strain is formed after about 24 hours, and it is also known that a larger number of strains are cultured than the basic TSB medium It can be predicted that the sodium abatement effect of the salt is much better. In other words, unlike the previous experiment, it takes about 24 hours to cultivate the maximum microbial strain, thereby shortening the incubation time.

이하에서는 질소원으로 콩가루가 1.5중량% 첨가된 콩가루 배지를 이용한 다양한 실시예들을 설명하기로 한다.Hereinafter, various embodiments using a soy flour medium containing 1.5 wt% of soy flour as a nitrogen source will be described.

실시예7) 바실러스 속 미생물 균주를 이용한 나트륨 최적 저감 시간의 선별 Example 7 Selection of optimal sodium reduction time using a microorganism strain of the genus Bacillus

본 발명자들은 다양한 실험을 통해 바실러스 내 활성아포형 당화균 2종, 바실러스 리체니포미스 (Bacillus licheniformis; 이하 BL로 표기)와 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis; 이하 BS로 표기) 및 바실러스(Bacillus) 속에서 유일한 유산균으로 분리되는 유포자 유산균인 바릴러스 코아굴란스 (Bacillus coagulans; 이하 BC로 표기)의 나트륨 저감효과를 비교실험 하였다. 실험 방법은 실시예3)과 실시예4)에 나타난 방법으로 따르되, 배지 구성성분중 질소원은 1.5중량% 콩가루를 사용하였고, 최대증식 발효는 24시간으로 하였고, 소금액 투입후 5시간 동안 재차 발효시켜 소금을 제조하였다.The inventors of the present invention have conducted various experiments to find that two active bacillary glycated bacteria, Bacillus licheniformis (hereinafter referred to as BL), Bacillus subtilis (hereinafter referred to as BS) and Bacillus subtilis (Bacillus coagulans, hereinafter abbreviated as BC), which is the only lactic acid bacteria isolated in the present invention. The experiment was carried out according to the method shown in Example 3) and Example 4, except that 1.5% by weight of soybean powder was used as a nitrogen source in the culture medium, the maximum proliferation fermentation time was 24 hours, To prepare a salt.

그 결과 도 10 내지 도 12에서 나타나듯이, 바실러스 서브틸리스가 최대의 나트륨 저감을 일으킴을 알 수 있었다. As a result, as shown in FIG. 10 to FIG. 12, it was found that Bacillus subtilis caused maximum sodium reduction.

또한 소금 투입 후, 배양시간을 확인하기 위해 20내지 30시간동안 최대로 배양한 배양액의 30% 중량의 소금을 투입한 후, 5시간, 24시간, 48시간으로 배양시간을 조절하여 만든 각각의 소금에서 나트륨 저감 효과를 확인하였다. 결과는 아래 표5과 같다.After the addition of the salt, 30% by weight of salt was added to the culture solution which had been cultured for a maximum of 20 to 30 hours in order to confirm the incubation time, and then the culture time was adjusted to 5 hours, 24 hours, The sodium reduction effect was confirmed. The results are shown in Table 5 below.

Figure pat00001
Figure pat00001

상기 표는 바실러스 코아굴란스(BC), 바실러스 리체니포미스(BL), 바실러스 서브틸리스(BS)의 발효 후 측정된 나트륨의 제거율을 나타낸다.The table above shows the removal rates of sodium measured after fermentation of Bacillus coagulans (BC), Bacillus ricinifomis (BL), and Bacillus subtilis (BS).

상기 표에서 나타난 바와 같이, 어느 종이든 5시간이 최대의 나트륨 저감효과를 나타내며, 그 이상 시간에서는 오히려 효과가 저감됨을 알 수 있었으며, 바실러스 서브틸리스 최대 발효한 배양액에 소금 투입후, 5시간 동안 배양하여 생산한 소금의 나트륨 저감율이 22.89%로 가장 높게 확인되었다. 도13에 나타난 바와 같이, 이는 실시예3)에서 TSB 배지를 이용한 경우 나트륨저감율인 9.3%에 비하여 획기적으로 높은 나트륨 저감이 이루어짐을 알 수 있다. As shown in the above table, it was found that the effect of reducing sodium was shown to be 5 hours maximum in any species, and the effect was reduced in the longer time. In addition, after the salt was added to the fermented broth of Bacillus subtilis for 5 hours The sodium reduction rate of the salt produced by cultivation was 22.89%. As shown in Fig. 13, it can be seen that the use of the TSB medium in Example 3) significantly reduces sodium compared to the sodium reduction rate of 9.3%.

또한, 이러한 콩가루를 질소원으로 이용한 배지를 이용한 바실러스 서브틸리스와 아스퍼질러스 오리지에의 병합 발효 역시 보다 뛰어난 나트륨 저감 효과를 나타냄을 예측할 수 있다.In addition, it can be predicted that the combined fermentation of Bacillus subtilis and Aspergillus oryzae using the soybean flour as a nitrogen source also exerts a superior sodium reducing effect.

실시 예8) 관능시험Example 8) Sensory test

실시예7)에서 제조된 소금은 기본적으로 미생물의 발효배양시 질소원으로 콩가루를 사용한 것으로 이러한 콩가루 사용에 따른 맛의 변화여부를 테스트 해보았다. 기본적으로 바실러스 서브틸리스를 이용하여 제조된 소금을 대상으로 관능시험을 실시하여 소금의 맛, 풍미에 관한 평가를 실시하였다. 관능 시험은 30명을 대상으로 하였으며, 20-40대 성인을 대상으로 실시하였다.The salt prepared in Example 7) basically used soybean flour as a nitrogen source during the fermentation of microorganisms, and tested whether the taste changes according to the use of the soybean flour. The taste and flavor of salt were evaluated by sensory evaluation of salt prepared by using Bacillus subtilis. The sensory test was conducted on 30 adults and adults between 20 and 40 years.

표 6에 나트륨이 감량된 소금의 관능시험 결과를 나타내었다.Table 6 shows the results of sensory evaluation of the sodium salt-reduced salt.

Figure pat00002
Figure pat00002

상기 표는 나트륨 감량 소금의 관능시험이다.The above table is a sensory test of sodium weight loss salt.

표 5에서 나타나듯이 나트륨 감량 소금의 관능시험결과 짠 맛은 천일염과 정제염과 유사하게 느끼는 것으로 나타났다. 냄새에 있어서는 약간 나는 것으로 나타났으나, 심한 정도는 아닌 것으로 나타났다. 풍미에 있어서는 기존의 소금 대체제 첨가에 따른 쓴맛이 배제되고 각종 아미노산 등 발효 부산물이 자연스럽게 첨가된 본 발명의 소금이 고소한 맛을 가져 한층 풍미를 증진시키는 관능 시험 결과를 얻었으며, 위 표 3에서 나타난 소금의 관능시험과 별다른 차이점이 없었다.. As shown in Table 5, the salty taste of the sensory test of sodium depleted salt was found to be similar to that of sun saliva and purified saliva. The odor was slightly extinguished, but not severe. The bitterness due to the addition of the conventional salt substitute was excluded in the flavor, and the sensory test of the salt of the present invention in which the fermentation by-products such as various amino acids were added naturally was obtained to enhance the flavor. There was no difference from the sensory test.

이상에서 설명한 바는 본 발명의 일 실시예에 의한 것으로 본 발명의 기술적 사상하에 여러가지 변경이 가능함은 자명할 것이며, 이러한 것에 본 발명의 기술적 사상이 미친다고 할 것이다.
It will be apparent to those skilled in the art that various modifications and variations can be made in the present invention without departing from the spirit or scope of the invention.

Claims (11)

미생물을 증식 배양시키는 제1단계와;
상기 배양된 미생물이 투입된 배지에 소금을 투입하는 제2단계와;
소금이 투입된 상태에서 상기 미생물을 재차 배양발효하여 배양액 중에 존재하는 소금 성분의 나트륨을 제거하는 제3단계;와
상기 재차 배양된 배양발효액을 미세망에 여과하여 미생물을 제거하는 제4단계;그리고
여과된 배양액을 건조시켜 소금을 회수하는 제5단계;로 이루어져,
상기 소금액이 투입된 상태에서 미생물의 배양발효과정중에 소금액의 나트륨을 섭취함으로써 나트륨이 저감된 소금이 이루어지는 것을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법.
A first step of proliferating and culturing the microorganism;
A second step of adding salt to the culture medium into which the cultured microorganism is introduced;
A third step of culturing and fermenting the microorganisms in a state where the salt is added to remove the sodium component of the salt component present in the culture solution;
A fourth step of removing the microorganisms by filtering the cultured fermented broth again through a fine mesh;
And a fifth step of drying the filtered culture to recover the salt,
Wherein sodium salt is reduced by consuming a small amount of sodium during culturing fermentation of the microorganism in a state where the small amount of salt is added.
제 1항에 있어서,
상기 미생물은 전통 장류식품 유래인 곰팡류에 속하는 아스퍼질러스 속(Aspergillus sp.)과 세균류에 속하는 바실러스 속(Bacillus sp.)속의 미생물 또는 이들의 혼합임을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법.
The method according to claim 1,
The microorganism is selected from the group consisting of Aspergillus sp. Belonging to the fungi belonging to the traditional soybean foods and microorganisms belonging to the genus Bacillus sp. Belonging to the fungi or a mixture thereof. Sodium removal method.
제2항에 있어서,
상기 아스퍼질러스 속(Aspergillus sp.) 미생물은 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae)이고, 바실러스 속(Bacillus sp.)속의 미생물은 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 리체니포미스 (Bacillus licheniformis), 바릴러스 코아굴란스 (Bacillus coagulans) 임을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법.
3. The method of claim 2,
The Aspergillus sp. Microorganism is Aspergillus oryzae and the microorganism of the genus Bacillus sp. Is Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, , And Bacillus coagulans. The method for removing sodium from the salt using the microorganism of the present invention.
제3항에 있어서, 상기 미생물의 혼합은 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae)와 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 혼합으로 이루어지고,
배양시, 각각 별도로 최적균체수가 이루어지도록 배양한 후, 이를 혼합하여 사용하는 것을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법.
4. The method according to claim 3, wherein the mixing of the microorganisms is performed by mixing Aspergillus oryzae with Bacillus subtilis,
The method of claim 1, wherein the microorganism is selected from the group consisting of soybean oil, soybean oil, soybean oil and soybean oil.
제 4항에 있어서, 상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 배양액은 아스퍼질러스 오리지에(Aspergillus oryzae) 배양액 중량 대비 30중량%이하가 혼합되는 것을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법[Claim 5] The method according to claim 4, wherein the culture medium of Bacillus subtilis is mixed in an amount of 30% by weight or less based on the weight of the culture medium of Aspergillus oryzae. How to uninstall 제1항 내지 제5항중 어느 하나의 항에 있어서,
미생물을 증식 배양 시키는 단계는,
탄소원, 질소원 무기염류를 주 구성성분으로 이루어지는 TSB 기본배지를 이용하거나,
또는 질소원으로 콩가루를 사용하되, 배지 전체 중량대비 1 내지 2중량% 사용되는 콩가루 배지임을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법
6. The method according to any one of claims 1 to 5,
The step of proliferating the microorganism includes:
Carbon source, and nitrogen source, or a TSB basic medium composed of the main constituents,
Or soybean flour as a nitrogen source, wherein the soy flour culture medium is used in an amount of 1 to 2% by weight based on the total weight of the culture medium.
제6항에 있어서, 콩가루배지상에서 배양시,
상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)는 20 내지 30시간 배양하여 최적균체수가 이루어지도록 하는 것을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법.
7. The method according to claim 6, wherein upon culturing on a soy flour medium,
Wherein the Bacillus subtilis is cultured for 20 to 30 hours to obtain an optimal microbial count.
제 7항에 있어서, 제3단계는,
소금이 투입된 상태에서 상기 미생물을 4 내지 6시간 배양발효하여 배양액 중에 존재하는 소금 성분의 나트륨을 제거하는 단계로 이루어짐을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법.
8. The method according to claim 7,
Culturing the microorganism for 4 to 6 hours under the condition that the salt is added thereto to thereby remove the sodium component of the salt component present in the culture solution; and removing the sodium component of the salt from the microorganism.
제 8항에 있어서,
상기 투입되는 소금은 소금의 포화도를 고려하여 전체 배양액 대비 30중량%이하임을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법.
9. The method of claim 8,
Wherein the amount of salt to be added is 30% by weight or less based on the total amount of the culture in consideration of the degree of saturation of the salt.
제9항에 있어서,
상기 소금액이 투입된 미생물 배양액의 재차 발효시 지속적 발효를 위한 탄소원이 더 투입되는 것을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용한 소금의 나트륨 제거방법.
10. The method of claim 9,
Wherein a carbon source for continuous fermentation is further added when the microbial culture liquid into which the small amount is added is re-activated, wherein the sodium source is removed by using the microorganism.
청구항 1 내지 청구항5항 및 청구항7 내지 청구항10항 중 어느 하나의 방법에 의하여 제조된 것을 특징으로 하는 전통 장류식품 미생물을 이용하여 제조되는 나트륨이 저감된 소금.


A sodium-reduced salt prepared by using a microorganism which is produced by the method according to any one of claims 1 to 5 and claims 7 to 10.


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