KR20140103488A - Fermented green tea using microorganism and method for preparing the same - Google Patents

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fermentation
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이귀재
김동민
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정읍시
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Abstract

The present invention relates to fermented green tea using microorganisms and a manufacturing method thereof. According to the present invention, green tea leaves are inoculated by bacillus subtilis or saccharomyces cerevisiae and then are fermented. Therefore, the fermented green tea has: an optimized content of nitrogen, chlorophyll, polyphenols and catechins; excellent flavor; and enhanced taste.

Description

미생물을 이용한 발효 녹차 및 이의 제조 방법{Fermented green tea using microorganism and method for preparing the same}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to a fermented green tea using microorganisms and a method for preparing the same,

본 발명은 미생물을 이용한 발효 녹차 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a fermented green tea using microorganisms and a method for producing the same.

우리나라의 대부분의 차는 녹차, 홍차 위주로 개발되고 있는데, 일반적인 녹차는 그 채엽 시기가 정해져 있어서,노동력의 이용 효율이 떨어지고 생산량의 극대화를 이루기 어렵다는 단점이 있다. 반면, 미생물 발효차의 경우에는 차잎의 채취시기가 그렇게 중요하지 않기 때문에 녹차공장에서 우전차나 설록차를 제조한 후에 여유 있게 시간을 가지고 제조할 수 있어, 노동력의 이용을 효율화할 수 있는 장점이 있다.Most tea in Korea is being developed mainly with green tea and black tea. Generally, green tea has a drawback that the utilization efficiency of labor force is low and it is difficult to maximize the production amount. On the other hand, in the case of microbial fermentation tea, since the time of taking the tea leaves is not so important, it is possible to manufacture the tea or tea tea in a green tea factory with sufficient time, and thus it is possible to efficiently use the labor force.

발효차는 발효 정도에 따라서 약발효차, 반발효차(홍차, 황차 등), 후발효차(보이차, 흑차 등)로 구분된다. 세계적인 후발효차의 제조기술 보유국가는 중국 과 일본이 있는데, 중국의 호기적 발효차로 유명한 것은 녹차잎을 채취할 때 고의적으로 상처를 주고, 가열하여 볶은 후 적당량의 수분을 가하고 공기중의 미생물을 이용하여 자연 발효시키는 보이현의 보이차이며, 일본의 발효차에는 호기성 곰팡이류(Fungi)를 발효군주로 사용하고 토야마(富山)가 주요산지인 흑차와, 혐기성 락토바실러스(Lactobacillus Anaerobe)를 발효균주로 사용하고 주요산지가 아와(阿波)인 번차가 있다. 이 중 국내외적으로 인기를 끌고 있는 보이차는 보이차 원형 덩어리로부터 잎을 분리해야 되는 불편함으로 섭취가 용이하지 않고, 공기 중 낙하균에 의해 발효되기 때문에 곰팡이 냄새 또는 잡균냄새가 나며, 병원성 미생물이 포함되어 있는 경우가 의심될 수도 있다. 또한, 첫 맛이 떫은 맛이 강하고 쓴 맛도 있어서 기호도가 떨어지는 단점이 있다.Fermented tea can be classified into fermented tea, semi-fermented tea (black tea, yellow tea), post fermented tea (black tea, black tea, etc.) depending on the degree of fermentation. It is known that China has a manufacturing technology of post-fermentation tea worldwide, and China is famous for its aerobic fermentation tea. It deliberately scarifies green tea leaves, roasts them after heating, adds an appropriate amount of water, (Fungi) is used as a fermentation monarch in Japanese fermentation tea, and black tea (Toyama), which is a main producing region, and anaerobic lactobacillus (Lactobacillus anaerobe) are used as fermenting bacteria. And the main production area is Awa (Awa). Among them, Bochcha, which is popular in domestic and overseas, is not easy to ingest because of inconvenience of separating the leaves from the circular lobes of Boi tea. Because it is fermented by the airborne microorganisms, it smells of mold or germ, and contains pathogenic microorganisms There may be cases where you are suspicious. In addition, there is a disadvantage in that the first taste has a strong taste and the bitter taste is also low, so that the preference degree is lowered.

상기한 바와 같이, 다양한 발효차에 대해서 알려져 있지만, 관능적으로 우수하고 기능성이 강화된 발효녹차에 관해서는 아직까지 알려진 바 없다.As described above, although known for various fermentation tea, fermented green tea having excellent sensory properties and enhanced functionality has not yet been known.

이에 본 발명자들은 정읍 녹차잎을 미생물을 이용하여 발효시켜, 발효기간에 따른 질소, 클로로필, 폴리페놀 및 카테킨의 함량을 분석하여, 최적의 발효기간을 확임함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다. Accordingly, the present inventors have completed the present invention by confirming the optimal fermentation period by analyzing the contents of nitrogen, chlorophyll, polyphenol and catechin according to the fermentation period by fermenting Jeonup green tea leaves with microorganisms.

본 발명의 목적은 미생물을 이용한 발효 녹차 및 이의 제조 방법을 제공함에 있다.It is an object of the present invention to provide a fermented green tea using microorganisms and a method for producing the same.

본 발명은 미생물을 이용한 발효 녹차 및 이의 제조방법을 제공한다.The present invention provides a fermented green tea using microorganisms and a method for producing the same.

본 발명에 따른 발효 녹차는 녹차잎에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 또는 사카로미세스 세레비시아(sacchraromyces cerevisia)를 접종하여 발효시킴으로써, 녹차 내에 질소, 클로로필, 폴리페놀 및 카테킨 함량이 최적화되어, 향미가 우수하고, 맛이 개선된 효과가 있다.The fermented green tea according to the present invention is obtained by inoculating Bacillus subtilis or sacchraromyces cerevisiae into green tea leaves and thus fermenting the green tea leaves to optimize nitrogen, chlorophyll, polyphenol and catechin contents in the green tea, It has an excellent flavor and an improved taste.

도 1은 본 발명의 녹차잎에 수분공급과정을 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명의 녹차잎의 유념하는 과정을 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명의 녹차잎에 미생물을 접종하는 과정을 나타낸 도이다.
도 4는 본 발명의 녹차잎을 발효한 후의 발효 녹차를 나타낸 도이다.
도 5는 본 발명의 녹차잎을 발효 후, 건조한 후의 발효 녹차를 나타낸 도이다.
도 6은 본 발명의 발효 녹차의 제조과정을 나타낸 도이다.
도 7은 바실러스 서브틸리스를 이용한 경우, 발효 녹차의 발효기간에 따른 질소 함량을 나타낸 도이다.
도 8은 사카로미세스 세레비시아를 이용한 경우, 발효 녹차의 발효기간에 따른 질소 함량을 나타냉 도이다.
도 9는 바실러스 서브틸리스를 이용한 경우, 발효 녹차의 발효기간에 따른 클로로필 함량을 나타낸 도이다.
도 10은 사카로미세스 세레비시아를 이용한 경우, 발효 녹차의 발효기간에 따른 클로로필 함량을 나타낸 도이다.
도 11은 바실러스 서브틸리스를 이용한 경우, 발효 녹차의 발효기간에 따른 폴리페놀 함량을 나타낸 도이다.
도 12는 사카로미세스 세레비시아를 이용한 경우, 발효 녹차의 발효기간에 따른 폴리페놀 함량을 나타낸 도이다.
도 13은 바실러스 서브틸리스를 이용한 경우, 발효 녹차의 발효기간에 따른 카테킨 함량을 나타낸 도이다.
도 14는 사카로미세스 세레비시아를 이용한 경우, 발효 녹차의 발효기간에 따른 카테킨 함량을 나타낸 도이다.
도 15는 바실러스 서브틸리스를 이용한 경우, 발효 녹차의 색도를 나타낸 도이다.
도 16은 사카로미세스 세레비시아를 이용한 경우, 발효 녹차의 색도를 나타낸 도이다.
FIG. 1 is a view showing a process of supplying water to the green tea leaves of the present invention.
FIG. 2 is a view showing the process of keeping the green tea leaf of the present invention.
3 is a view illustrating a process of inoculating microorganisms into the green tea leaves of the present invention.
4 is a view showing a fermented green tea after fermentation of green tea leaves according to the present invention.
5 is a view showing a fermented green tea after fermentation and drying of the green tea leaves of the present invention.
6 is a view illustrating a process for manufacturing fermented green tea according to the present invention.
FIG. 7 is a graph showing the nitrogen content of fermented green tea according to the fermentation period when Bacillus subtilis is used. FIG.
8 shows the nitrogen content of fermented green tea according to fermentation period when Saccharomyces cerevisiae was used.
9 is a graph showing the content of chlorophyll in fermented green tea according to the fermentation period when Bacillus subtilis is used.
10 is a graph showing the content of chlorophyll in fermented green tea according to fermentation period when Saccharomyces cerevisiae is used.
11 is a view showing the content of polyphenols according to the fermentation period of fermented green tea when Bacillus subtilis is used.
12 is a graph showing the content of polyphenols according to the fermentation period of fermented green tea when Saccharomyces cerevisiae is used.
13 is a graph showing catechin content of fermented green tea according to the fermentation period when Bacillus subtilis is used.
14 is a graph showing the catechin content of fermented green tea according to the fermentation period when Saccharomyces cerevisiae is used.
15 is a graph showing the chromaticity of fermented green tea when Bacillus subtilis is used.
16 is a graph showing the chromaticity of fermented green tea when Saccharomyces cerevisiae is used.

본 발명은,According to the present invention,

1)녹차잎에 5~10시간동안 수분을 공급하는 단계;1) supplying green tea leaves with moisture for 5 to 10 hours;

2)상기 1)단계의 수분 공급된 녹차잎을 유념하는 단계;2) keeping the green tea leaves moistened in step 1);

3)상기 2)단계의 녹차잎에 바실러스 서브틸리스 또는 사카로미세스 세레비시아를 접종하는 단계;3) Inoculating Bacillus subtilis or Saccharomyces cerevisiae to the green tea leaves of step 2);

4)상기 미생물이 접종된 녹차잎을 통기성 조건으로 25℃ 내지 35℃에서 25 내지 35시간 동안 1차 발효시키는 단계;4) primary fermenting the green tea leaves inoculated with the microorganisms under 25 to 35 hours at 25 ° C to 35 ° C under aerobic conditions;

5)상기 제 4)단계의 발효된 녹차잎을 다시 유념하는 단계;5) reminding the fermented green tea leaves of step 4);

6)상기 제 5)단계의 녹차잎을 통기성 조건으로 35℃ 내지 45℃에서 2차 발효하는 단계;6) secondary fermentation of the green tea leaves of the fifth step at 35 ° C to 45 ° C under aerobic conditions;

7)상기 제 5)단계의 발효된 녹차잎을 유념하고, 건조하는 단계;를 포함하는 단기간 발효를 이용한 발효 녹차의 제조방법을 제공한다.7) Keeping the fermented green tea leaves of step 5) in mind and drying the fermented green tea leaves.

또한, 본 발명은,Further, according to the present invention,

a)증제, 유념 및 건조의 1차 가공된 녹차잎을 115℃ 내지 125℃에서 10분 내지 20분 동안 고압멸균 하는 단계;a) high pressure sterilization of primary processed green tea leaves, at elevated temperature, at 115 ° C to 125 ° C for 10 minutes to 20 minutes;

b)상기 a)단계의 녹차잎에 바실러스 서브틸리스 또는 사카로미세스 세레비시아를 접종하는 단계;b) Inoculating Bacillus subtilis or Saccharomyces cerevisiae to the green tea leaves of step a);

c)상기 b)단계의 녹차잎을 15일 내지 25일동안 발효시키는 단계;c) fermenting the green tea leaves of step b) for 15 to 25 days;

d)상기 c)단계의 발효된 녹차잎의 수분 함량이 5% 내지 15%가 될때까지 건조시키는 단계;를 포함하는 장기간 발효를 이용한 발효 녹차의 제조방법을 제공한다. and d) drying the fermented green tea leaves until the moisture content of the fermented green tea leaves in step c) is 5% to 15%.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 발효 녹차를 제공한다.The present invention also provides a fermented green tea produced by the above method.

이하, 본 발명에 대해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명에 따른 발효 녹차는 녹차잎에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 또는 사카로미세스 세레비시아(sacchraromyces cerevisia)를 접종하여 발효시킨 것을 특징으로 한다. The fermented green tea according to the present invention is characterized in that it is fermented by inoculating Bacillus subtilis or sacchraromyces cerevisiae into green tea leaves.

본 발명의 녹차 잎은 정읍 녹차잎인 것이 바람직하다. The green tea leaves of the present invention are preferably Jeong-eup green tea leaves.

본 발명에 따른 발효 녹차의 제조방법을 단계별로 상세히 설명한다.The process for producing fermented green tea according to the present invention will be described step by step.

먼저, 본 발명의 단기간 발효를 이용한 발효 녹차의 제조방법에서, 1)단계는 녹차잎에 수분을 공급하는 단계이고, 2)단계는 유념하는 단계로서, 유념하는 단계는 하기의 과정으로 수행된다.First, in the method for producing fermented green tea using the short-term fermentation of the present invention, step 1) is a step of supplying water to the green tea leaves, and step 2) is taken into consideration.

거즈를 바닥에 깔고 적당한 간격으로 갈대를 올려놓고, 상기 갈대위에 겨울 찻잎를 올린 후 거즈를 말아서 녹차를 비빈다. 거즈를 펼친 후, 손바닥으로 5~6잎 씩 비비고, 다시 거즈에 싸서 비닐에 넣고 25℃ 내지 35℃에서 10시간 내지 20시간 동안 보관하고, 습기가 차면 녹차잎을 병에 담아 보관한다. Put the gauze on the floor, put the reeds at appropriate intervals, put the winter tea leaves on the reed, then roll the gauze and rub the green tea. After spreading the gauze, rinse with 5 to 6 leaves on the palm of the hand, wrap it in gauze again, put it in plastic, store it at 25 ℃ ~ 35 ℃ for 10 ~ 20 hours, and if it gets wet, keep green tea leaves in a bottle.

상기 3)단계는 녹차잎에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 또는 사카로미세스 세레비시아(sacchraromyces cerevisia)를 접종하는 단계이다.The step 3) is a step of applying Bacillus subtilis subtilis ) or saccharraromyces cerevisiae .

상기 4)단계의 1차 발효하는 단계는 잎이 갈변색으로 변할때까지, 통기성 조건으로, 25℃ 내지 35℃에서 25시간 내지 35시간 동안 발효시킨다. 바람직하게는 30℃에서 30시간 동안 발효시킬 수 있다.The primary fermentation step in step 4) is fermented at 25 ° C to 35 ° C for 25 to 35 hours under aerobic conditions until the leaves turn to browning. Preferably 30 < 0 > C for 30 hours.

상기 5)단계에서는 유념과정을 재수행하고, 6)단계는 2차 발효하는 단계로 통기성 조건에서 35℃에서 45℃, 바람직하게는 40℃에서 녹차잎의 색이 빛이 바랜상태가 될때까지 발효시킨다.In step 5), the remembrance process is re-executed. In step 6), the fermentation is performed in a second fermenting step until the color of the green tea leaves becomes faded at 35 ° C, preferably 40 ° C, .

상기 7)단계는 유념과정 및 건조과정을 재수행하는 단계이다.
The step 7) is a step of re-executing the process of keeping in mind and drying.

또한, 본 발명의 장기간 발효를 이용한 발효 녹차의 제조방법에서, Further, in the method for producing fermented green tea using the long-term fermentation of the present invention,

상기 a)단계는 녹차잎을 고압멸균하는 단계로 증제, 유념 및 건조의 1차 가공된 녹차잎을 115℃ 내지 125℃에서 10분 내지 20분 동안, 바람직하게는 120℃에서 15분동안 고압멸균한다.The step a) is a step of high pressure sterilization of the green tea leaves, wherein the primary processed green tea leaves of the red, green and dry are subjected to high pressure sterilization at 115 to 125 캜 for 10 to 20 minutes, preferably at 120 캜 for 15 minutes do.

상기 b)단계는 녹차잎에 바실러스 서브틸리스 또는 사카로미세스 세레비시아를 접종하는 단계이다.The step b) is a step of inoculating Bacillus subtilis or Saccharomyces cerevisiae to green tea leaves.

상기 c)단계는 녹차잎을 발효시키는 단계로, 15일 내지 25일 동안 발효시킬 수 있고, 바람직하게는 20일동안 발효시킬 수 있다.The step c) is a step of fermenting green tea leaves, which can be fermented for 15 to 25 days, preferably for 20 days.

상기 d)단계는 발효된 녹차잎을 건조시키는 단계로, 녹차의 수분함량이 5% 내지 15%, 바람직하게는 10%가 될때까지 건조시킨다.
In the step d), the fermented green tea leaves are dried, and the green tea is dried until the moisture content of the green tea becomes 5% to 15%, preferably 10%.

본 발명의 제조방법에 따라 제조된 발효 녹차는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 또는 사카로미세스 세레비시아(sacchraromyces cerevisia)를 접종하여 발효시킴으로써, 녹차 내에 질소, 클로로필, 폴리페놀 및 카테킨 함량이 최적화되어, 향미가 우수하고, 맛이 개선된 효과가 우수하다.
The fermented green tea produced according to the production method of the present invention is a Bacillus subtilis subtilis ) or saccharraromyces cerevisiae ) and fermented, the nitrogen, chlorophyll, polyphenol and catechin contents in the green tea are optimized to provide excellent flavor and improved taste.

이하, 본 발명을 구체적인 실시예를 통해 설명하기로 한다. 본 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것으로서 본 발명의 범위가 본 실시예로 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described by way of specific examples. The present invention is not intended to be limited to the scope of the present invention.

<< 실시예Example 1>단기간 발효에 의한 발효 녹차의 제조 1> Production of fermented green tea by short-term fermentation

1.실험재료 1. Experimental material

미생물 발효차를 제조하기 위하여, 원료 잎으로 정읍시 소재 황토현다원의 녹차 밭에서 겨울 찻잎을 1창 2기의 잎만을 선별하여 사용하였다.For the fermentation of microbial fermentation tea, only 1 leaf and 2 leaves of winter tea leaf were used in the green tea field of Hwangtohyeon tea plant in Jeongeup city.

2.수분 공급 및 유념과정2. Moisture Supply and Remembrance Process

겨울 찻잎임을 감안하여 찻잎에 7시간 수분을 공급하였다. 적당히 수분 공급이 끝난 찻잎은 유념과정을 수행하였다.Considering winter tea leaves, the tea leaves were supplied with moisture for 7 hours. Tea leaves that have been adequately hydrated have been kept in mind.

유념과정은 거즈를 바닥에 깔고 적당한 간격으로 갈대를 올려놓았다. 상기 갈대위에 겨울 찻잎를 올린 후 거즈를 말아서 녹차를 비볐다. 거즈를 펼친 후, 손바닥으로 5~6잎 씩 비비고, 다시 거즈에 싸서 비닐에 넣고 30℃에서 16시간 동안 보관하였다. 습기가 차면 찻잎을 꺼내 발효병에 담았다.The note process put the gauze on the floor and put the reeds at appropriate intervals. After the winter tea leaves were placed on the reed, the green tea was sprinkled with gauze. After spreading the gauze, it was rubbed with 5 ~ 6 leaves with palms, wrapped in gauze again, put in vinyl, and stored at 30 ℃ for 16 hours. When it gets wet, the tea leaves are taken out and placed in a fermentation bottle.

상기 수분 공급 과정을 도 1 나타내었으며, 유념과정을 도 2에 나타내었다.The water supply process is shown in FIG. 1, and the care process is shown in FIG.

3.접종3. Inoculation

상기 발효병을 상온에서 냉각하여 농업유전자원세터에서 분양받은 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 사카로미세스 세레비시아(Sacchraromyces cerevisia)를 계대배양하여 각각 1mL씩 접종한 후 밀봉하였다. The fermentation bottles were cooled at room temperature to obtain Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis) subtilis and Sacchraromyces cerevisiae were subcultured and inoculated at 1 ml each, and then sealed.

상기 접종과정을 도 3에 나타내었다.The inoculation process is shown in Fig.

4.발효4. Fermentation

통기성 조건으로 30℃에서 30시간 발효시키고, 잎이 갈변색으로 변하면 발효병에서 꺼내어, 상기 2의 유념과정을 다시 수행하였다. 유념과정이 끝나면 발효병에 다시 넣고 통기성 조건에서 40℃에 보관하였다. 잎의 색이 빛 바랜 상태가 되면 유념과정을 거치고, 건조시켰다. 상기 발효 후, 건조된 발효 녹차를 도 4 및 도 5에 나타내었다.
The fermentation was carried out at 30 ° C for 30 hours under airy conditions. When the leaves became discolored, they were taken out from the fermentation bottle, and the noted process of the above 2 was carried out again. At the end of the process, they were put back into the fermentation bottle and stored at 40 ° C in a breathable condition. When the color of the leaves became faded, it was noted and dried. The dried fermented green tea after fermentation is shown in FIG. 4 and FIG. 5.

<< 실시예Example 2> 장기간 발효(20일)에 의한  2> by long-term fermentation (20 days) 발효녹차의Fermented green tea 제조 Produce

1.실험재료1. Experimental material

장기간 발효에 의한 발효차를 제조하기 위하여, 원료 잎으로 황토현다원에서 1차 가공처리한(증제, 유념, 건조)한 정읍 녹차를 구입하여 재료로 사용하였다.In order to produce fermented tea by long - term fermentation, Jeong - eup green tea which had been processed first in the Hwattohyeon tea (raw material, leaf, note, dried) was used as material.

2.멸균2. Sterilization

균을 접종하기 전에 멸균을 위하여, 녹차 10g씩 8개의 샘플을 500mL 삼각 플라스크에 담아 121℃에서 15분간 고압멸균 하였다.Before sterilization, 8 samples of 10 g green tea were placed in a 500 mL Erlenmeyer flask and autoclaved at 121 ° C for 15 minutes for sterilization.

3.접종3. Inoculation

상기 8개의 멸균된 플라스크를 상온에서 냉각하여 농업유전자원센터에서 분양받은 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 사카로미세스 세레비시아(Sacchraromyces cerevisia)를 계대배양하여 각각 1mL씩 접종하였다.The eight sterile flasks were cooled at room temperature and transferred to the Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis) subtilis and Sacchraromyces cerevisiae were subcultured and inoculated at 1 mL each.

4.발효4. Fermentation

상기 단일 균주를 처리한 군 8개, 무처리군 8개를 30℃, 80% 수분을 유지할 수 있는 항온항습기에서 30일간 발효를 실시하고 샘플은 5일 단위로 처리구 별로 각각 1개의 플라스크를 꺼내어 수분함량을 10%까지 건조하여 발효 녹차를 제조하였다. Eight groups treated with the single strain and eight untreated groups were fermented for 30 days in a constant temperature and humidity chamber maintained at 30 ° C and 80% moisture. Each sample was taken out of each flask per 5 days of treatment, The content was dried to 10% to prepare fermented green tea.

이상의 발효 녹차의 제조과정을 도 6에 나타내었다.
The production process of the above fermented green tea is shown in Fig.

<< 실험예Experimental Example 1>녹차1> Green tea 종류 및 발효 시간에 따른 기능성 성분분석 Analysis of Functional Components by Type and Fermentation Time

1.실험 재료1. Experimental material

정읍 자생차를 항온항습생장상을 이용한 발효를 수행하였다. 상기 발효는 바실러스 서브틸리스, 사카로미세스 세레비시아를 이용하여 수행하였고, 발효시간을 변화시키면서 수행하였다. 발효가 끝난 녹차를 60℃ 건조기에서 5시간 건조하여 액체질소를 이용하여 막자사발에 마쇄하고 가루를 모아 시험관에 담은 후 -20℃에 보관하여 실험에 사용하였다.
The fermentation was carried out using a constant temperature and humidity growth phase. The fermentation was carried out using Bacillus subtilis and Saccharomyces cerevisiae, and the fermentation time was varied. The fermented green tea was dried in a drier at 60 ° C for 5 hours, ground in a mortar with liquid nitrogen, collected in a test tube, and stored at -20 ° C.

2. 자외선 흡광광도법을 이용한 총 질소의 분석2. Analysis of Total Nitrogen by UV Spectrophotometry

마쇄한 시료 0.1g과 증류수 10mL을 시험관에 넣고, 80℃ 항온수조를 이용하여 1시간 동안 중탕하였다. 이 후, 원심분리기(4000rpm)를 이용하여 10분 동안 녹차건체를 가라앉친 후, 상등액 5mL을 분해병에 넣고 알칼리성 과황산칼륨용액 1mL를 넣어 마개를 닫고 흔들어 섞은 후, 고압증기멸균기에 넣고 120℃에서 30분동안 가열 분해 후 방냉하였다. 이 후, 멸균이 끝난 시료 2.5mL에 염산(1+16) 500㎕를 첨가하여 흡광도(220nm)를 측정하였다. 총 질소 농도는 하기의 수학식 1로 계산하였다.0.1 g of the crushed sample and 10 mL of distilled water were placed in a test tube, and the mixture was stirred for 1 hour using a constant temperature water bath at 80 캜. Afterwards, 5 mL of the supernatant was added to the syringe bottle, 1 mL of the alkaline potassium persulfate solution was added, the cap was closed, and the mixture was shaken. Then, the autoclave was placed in a high pressure steam sterilizer and heated at 120 ° C. Lt; / RTI &gt; for 30 minutes and then allowed to cool. Thereafter, 500 μl of hydrochloric acid (1 + 16) was added to 2.5 ml of the sterilized sample, and the absorbance (220 nm) was measured. The total nitrogen concentration was calculated by the following equation (1).

[[ 수학식Equation 1] One]

Figure pat00001
Figure pat00001

발효 녹차의 미생물 종류 및 발효기간에 따른 질소 함량을 도 7(바실러스 서브틸리스) 내지 8(사카로미세스 세레비시아)에 나타내었다.The types of microorganisms in the fermented green tea and the nitrogen content according to the fermentation period are shown in Fig. 7 (Bacillus subtilis) to 8 (Saccharomyces cerevisiae).

도 7 및 8에 나타난 바와 같이, 바실러스 서브틸리스 또는 사카로미세스 세레비시아를 이용하여 발효한 경우 모두 발효 녹차의 질소함량은 발효기간에 따라 큰 변화가 없었으며 20일까지 발효과정을 지나도 발효 녹차의 질소함량을 유지하는 것을 확인하였다.
As shown in FIGS. 7 and 8, when the fermentation was carried out using Bacillus subtilis or Saccharomyces cerevisiae, the nitrogen content of fermented green tea did not change significantly with fermentation period, It was confirmed that the nitrogen content of the green tea was maintained.

3.클로로필의 함량 분석3. Analysis of chlorophyll content

마쇄한 시료 0.5g과 70% 에탄올 50mL를 시험관에 넣고, 초음파 항온수조를 이용하여 50℃ 중탕으로 분해한 후, 원심분리기(4000rpm)를 이용하여 10분간 원심분리 후, 상등액 1mL를 취하여 흡광도(645nm, 664nm)를 측정하였다. 클로로필의 함량은 하기의 수학식 2로 계산하였다. 0.5 g of the crushed sample and 50 mL of 70% ethanol were placed in a test tube and decomposed in a 50 ° C water bath using an ultrasonic constant temperature water bath. After centrifugation for 10 minutes using a centrifuge (4000 rpm), 1 mL of the supernatant was taken and absorbance , 664 nm) were measured. The content of chlorophyll was calculated by the following formula (2).

발효 미생물 종류 및 발효기간에 다른 클로로필 함량을 도 9 내지 10에 나타내었다.The different types of fermenting microorganisms and the different chlorophyll content during the fermentation period are shown in FIGS. 9 to 10.

[[ 수학식Equation 2] 2]

클로로필-a(mg/L)=12.72×OD663-2.58×OD645Chlorophyll-a (mg / L) = 12.72 x OD663-2.58 x OD645

클로로필l-b(mg/L)=22.88×OD645-5.50×OD663Chlorophyll-b (mg / L) = 22.88 x OD645-5.50 x OD663

총 클로로필(mg/L)=7.22×OD663+20.3×OD645
Total chlorophyll (mg / L) = 7.22 x OD663 + 20.3 x OD645

도 9에 나타난 바와 같이, 바실러스 서브틸리스를 접종한 경우, 클로로필의 함량이 20일까지 증가하다가 20일 이후에는 큰 변화가 없음을 확인하였다.As shown in FIG. 9, when the Bacillus subtilis was inoculated, the content of chlorophyll was increased until 20 days, and there was no significant change after 20 days.

도 10에 나타난 바와 같이, 사카로미세스 세레비시아를 접종한 경우, 20일 이후에도 계속된 함량 증가를 보였다.
As shown in Fig. 10, when Saccharomyces cerevisiae was inoculated, the content was continuously increased after 20 days.

4.폴리페놀의 함량 분석4. Analysis of polyphenol contents

마쇄한 시료 0.5g과 70% 에탄올 50mL를 시험관에 넣고, 초음파 항온수조를 이용하여 50℃ 중탕으로 분해한 후, 원심분리기(4000rpm)를 이용하여 10분간 원심분리하였다. 상등액 1㎕에 2% Na2CO3 를 가하고, 2분동안 상온에 방치한 후, 20% 폴린페놀시약(Folin phenol reagent) 100㎕를 가하여 30분동안 차광하여, 방치 후 흡광도(750nm)를 측정하였다. 표준물질로는 Tannic acid를 사용하여 정량하였다.0.5 g of the crushed sample and 50 mL of 70% ethanol were placed in a test tube, decomposed with a 50 DEG C hot water bath using an ultrasonic constant temperature water bath, and centrifuged for 10 minutes using a centrifuge (4000 rpm). 2% Na 2 CO 3 was added to 1 μl of the supernatant, and the mixture was allowed to stand at room temperature for 2 minutes. Then, 100 μl of a 20% Folin phenol reagent was added and shaded for 30 minutes. Absorption (750 nm) Respectively. Tannic acid was used as a reference material.

상기 발효 미생물 종류 및 발효기간에 따른 폴리페놀 함량을 도 11 내지 12에 나타내었다.The types of fermenting microorganisms and the content of polyphenols according to the fermentation period are shown in Figs.

도 11에 나타난 바와 같이, 바실러스 서브틸리스를 접종하였을 경우, 폴리페놀의 양이 시간이 지날수록 점점 감소하는 경향을 보임을 확인하였다.As shown in FIG. 11, when the Bacillus subtilis was inoculated, it was confirmed that the amount of polyphenol tended to gradually decrease with time.

도 12에 나타난 바와 같이, 사카로미세스 세레비시아를 접종하였을 경우, 시간에 따라 감소하는 경향을 보였으며, 25일 이후에는 큰 변화가 없음을 확인하였다.As shown in FIG. 12, when Saccharomyces cerevisiae was inoculated, it tended to decrease with time, and it was confirmed that there was no significant change after 25 days.

5.카테킨의 함량분석5. Analysis of catechin content

마쇄한 시료 0.5g과 70% 에탄올 50mL를 시험관에 넣고, 초음파 항온수조를 이용하여 50℃ 중탕으로 분해한 후, 원심분리기(4000rpm)를 이용하여 10분간 원심분리하였다. 상등액 1mL를 0.45㎕ 멤브레인필터로 여과한 후, 바이알(vial)에 담아 HPLC(high-performance liquid chromatography)로 분석하였다. 발효 미생물 종류 및 발효기간에 따른 카테킨 함량을 도 13 내지 도 14에 나타내었다.0.5 g of the crushed sample and 50 mL of 70% ethanol were placed in a test tube, decomposed with a 50 DEG C hot water bath using an ultrasonic constant temperature water bath, and centrifuged for 10 minutes using a centrifuge (4000 rpm). The supernatant (1 mL) was filtered through a 0.45 [mu] L membrane filter, and then the supernatant was loaded into a vial and analyzed by HPLC (high-performance liquid chromatography). The types of fermenting microorganisms and catechin contents according to fermentation period are shown in Figs. 13 to 14. Fig.

도 13에 나타난 바와 같이, 바실러스 서브틸리스를 접종하였을 경우, 5일까지 증가하다가 20일까지 감소하면서, 처음과 같은 양의 카테킨이 분석이 되었고, 20일이 지나면 카테킨 양은 감소하는 경향을 보였다.As shown in FIG. 13, when the Bacillus subtilis was inoculated, the amount of catechin was increased to 5 days, decreased to 20 days, and the amount of catechin was analyzed as the first amount. After 20 days, the amount of catechin tended to decrease.

도 14에 나타난 바와 같이,사카로미세스 세레비시아를 접종하였을 경우, 카테킨 양이 발효 시간에 따라 감소하다가 25일까지 증가하였다가 감소하는 경향을 보였다.
As shown in FIG. 14, when Saccharomyces cerevisiae was inoculated, the amount of catechin decreased with fermentation time, and then increased until 25 days and then decreased.

또한, 본원 발명의 발효 녹차를 제조한 후, 색도를 확인한 결과를 도 15(바실러스 서브틸리스) 및 16(사카로미세스 세레비시아)에 나타내었다.The results of confirming the chromaticity of the fermented green tea of the present invention are shown in FIG. 15 (Bacillus subtilis) and 16 (Saccharomyces cerevisiae).

상기한 바와 같이, 여러 가지 분석 결과를 토대로 정읍시 자생차를 이용하는 경우 바실러스 서브틸리스 및 사카로미세스 세레비시아를 각각 접종하여 발효녹차를 만들기 위해서는 약 20일 정도의 발효기간이 적당한 것으로 확인하였다.As described above, based on the results of various analyzes, it was confirmed that the fermentation period of about 20 days is appropriate for producing fermented green tea by inoculating Bacillus subtilis and Saccharomyces cerevisiae respectively when using Jeongupseong spontaneous tea.

Claims (5)

1)녹차잎에 5~10시간동안 수분을 공급하는 단계;
2)상기 1)단계의 수분 공급된 녹차잎을 유념하는 단계;
3)상기 2)단계의 녹차잎에 바실러스 서브틸리스 또는 사카로미세스 세레비시아를 접종하는 단계;
4)상기 미생물이 접종된 녹차잎을 통기성 조건으로 25℃ 내지 35℃에서 25 내지 35시간 동안 1차 발효시키는 단계;
5)상기 제 4)단계의 발효된 녹차잎을 다시 유념하는 단계;
6)상기 제 5)단계의 녹차잎을 통기성 조건으로 35℃ 내지 45℃에서 2차 발효하는 단계;
7)상기 제 5)단계의 발효된 녹차잎을 유념하고, 건조하는 단계;를 포함하는 단기간 발효를 이용한 발효 녹차의 제조방법.
1) supplying green tea leaves with moisture for 5 to 10 hours;
2) keeping the green tea leaves moistened in step 1);
3) Inoculating Bacillus subtilis or Saccharomyces cerevisiae to the green tea leaves of step 2);
4) primary fermenting the green tea leaves inoculated with the microorganisms under 25 to 35 hours at 25 ° C to 35 ° C under aerobic conditions;
5) reminding the fermented green tea leaves of step 4);
6) secondary fermentation of the green tea leaves of the fifth step at 35 ° C to 45 ° C under aerobic conditions;
7) Keeping the fermented green tea leaves of step 5) in mind and drying the fermented green tea leaves.
a)증제, 유념 및 건조의 1차 가공된 녹차잎을 115℃ 내지 125℃에서 10분 내지 20분 동안 고압멸균 하는 단계;
b)상기 a)단계의 녹차잎에 바실러스 서브틸리스 또는 사카로미세스 세레비시아를 접종하는 단계;
c)상기 b)단계의 녹차잎을 15일 내지 25일동안 발효시키는 단계;
d)상기 c)단계의 발효된 녹차잎의 수분 함량이 5% 내지 15%가 될때까지 건조시키는 단계;를 포함하는 장기간 발효를 이용한 발효 녹차의 제조방법.
a) high pressure sterilization of primary processed green tea leaves, at elevated temperature, at 115 ° C to 125 ° C for 10 minutes to 20 minutes;
b) Inoculating Bacillus subtilis or Saccharomyces cerevisiae to the green tea leaves of step a);
c) fermenting the green tea leaves of step b) for 15 to 25 days;
and d) drying the fermented green tea leaves until the moisture content of the fermented green tea leaves in step c) reaches 5% to 15%.
제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 녹차잎은 정읍 녹차잎인 것을 특징으로 하는, 발효 녹차의 제조방법.3. The method for producing fermented green tea according to claim 1 or 2, wherein the green tea leaves are Jeong-eup green tea leaves. 제 1항에 있어서, 상기 2), 5) 및 7)단계에서 유념과정은 녹차의 5 내지 6 잎을 손바닥으로 비비고, 다시 거즈에 싸서 비닐에 넣고 25℃ 내지 35℃에서 10시간 내지 20시간 동안 보관하는 것을 특징으로 하는, 발효 녹차의 제조방법.[7] The method according to claim 1, wherein in steps 2), 5) and 7), 5 to 6 leaves of the green tea are rubbed with palms, wrapped in gauze and put in vinyl at 25 DEG C to 35 DEG C for 10 to 20 hours And storing the fermented green tea. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항의 방법에 의하여 제조된 발효 녹차.A fermented green tea produced by the method of any one of claims 1 to 4.
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