KR20140097728A - Wound dressing foam containing cuttlefish bone powder and method for preparing the same - Google Patents

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황대연
정영진
윤영현
김은정
김지은
곽문화
인정훈
이재원
이영주
황인식
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부산대학교 산학협력단
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Abstract

The present invention relates to wound dressing foam containing cuttlefish bone powder and a method to prepare the same. According to the present invention, the wound dressing foam containing cuttlefish bone powder has excellent absorption property compared to a conventional wound dressing foam, and has an effect of quickly treating wounds such as a cut by having excellent hemostasis and scar removal effects.

Description

갑오징어 뼈 분말을 포함하는 상처 치료용 드레싱제 및 이의 제조방법{Wound dressing foam containing cuttlefish bone powder and method for preparing the same}TECHNICAL FIELD The present invention relates to a wound dressing preparation containing cuttlefish bone powder and a method for preparing the same,

본 발명은 갑오징어 뼈 분말을 포함하는 상처 치료용 드레싱제 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a wound dressing for treating wounds containing cuttlefish bone powder and a method for producing the dressing.

갑오징어 뼈(cuttlefish bone)는 갑오징어(Sepia officinalis L.)의 내골격으로 해면질과 백악질로 이루어져 있고, 칼슘성분을 많이 포함하고 있어 앵무새 등의 애완용조류의 먹이나 치약의 원료로 사용되었다(Kim et al., 2000). 또한, 갑오징어 뼈는 종래에는 지혈작용 및 상처봉합작용제로서 사용되었지만 최근에는 천연유래성분으로 생체적합성이 뛰어나 인공 뼈 대체물질이나 바이오센서 등에 응용하기 위한 연구가 활발히 진행되고 있다.The cuttlefish bone is an endoskeleton of Sepia officinalis L. It is composed of spongy and cementous materials and contains a large amount of calcium components and is used as a raw material for food birds and toothpastes such as parrots (Kim et al ., 2000). In addition, squid bone has been conventionally used as a hemostatic agent and a wound closure agent, but in recent years, it has excellent biocompatibility as a naturally derived ingredient, and research for application to an artificial bone substitute material or a biosensor has been actively carried out.

가장 많은 연구가 진행된 분야는 조직 공학 분야로써 갑오징어 뼈의 주성분인 아라고나이트(aragonite(CaCO3))를 이용하여 의료용 스캐폴드를 제조하는 것으로 아라고나이트의 열수 추출을 통해 유도된 하이드록시아파타이트(Hydroxy apatite, HAP)는 보다 높은 다공성 특성을 가지며, 이는 골세포의 침입이나 혈관 생성을 유도하는 기능의 효율성을 극대화 할 수 있다(Ivankovic et al., 2008). 특히, 갑오징어 뼈가 가지는 고유한 공의 크기가 조직 생장 및 혈관 신생의 물리적 활성을 유도하는데 매우 적합한 크기이며, 골아세포의 증식과 분화를 촉진시킬 수 있는 적합한 환경을 제공해 준다(Rocha et al., 2005). 또한 간엽계 줄기세포 분화 실험을 통하여 갑오징어 뼈가 세포의 증식을 촉진하며 세포의 부착능을 높여준다는 것이 확인되었고, 이는 갑오징어 뼈의 세포 분화와 증식 촉진 매개물질로의 응용 가능성 및 뼈 재생 물질로도 갑오징어 뼈가 사용될 수 있다는 것을 입증하였다(Kim et al., 2011). 최근 연구결과에 따르면, HAP는 그 구성 성분이나 미세 구조가 인간의 뼈와 매우 유사하여 인공 뼈 대체 물질로 이용될 경우 생체 부작용을 유발하지 않고 안정적인 이식이 가능하여 실제로 최근 외과 수술 분야에 HAP를 사용한 의료용 스캐폴드가 많이 사용되고 있다(Kannan et al., 2006).The most studied field of tissue engineering is the production of medical scaffolds using aragonite (CaCO 3 ), which is a major component of bone squid bones. Hydroxyapatite derived from hydrothermal extraction of aragonite apatite, HAP) have higher porosity characteristics, which can maximize the efficiency of the function of inducing bone cell invasion or angiogenesis (Ivankovic et al., 2008). In particular, the size of the intrinsic pore of squid bones is a suitable size for inducing physical activity of tissue growth and angiogenesis, and provides a suitable environment for promoting osteoblast proliferation and differentiation (Rocha et al. , 2005). In addition, it has been confirmed that the squid bones promote cell proliferation and enhance cell adhesion through mesenchymal stem cell differentiation experiments, and it is confirmed that the squid bone cell differentiation and application possibility as proliferation promoting medium and bone regeneration substance (Kim et al., 2011). According to recent research results, HAP is very similar to human bone and its constituents and microstructure, so it can be used as an alternative to artificial bone substitute. Medical scaffolds have been widely used (Kannan et al., 2006).

식품이나 발효 분석 분야에서는 당류의 정량분석을 위한 바이오 센서의 응용에 갑오징어 뼈가 많이 사용되고 있다. 기존의 연구에서는 포도당 정량분석을 위해서 금나노 입자 촉매를 사용한 포도당-포도산의 산화-환원반응이 사용되었으나, 측정 용액 내 금나노 입자의 분산으로 측정 효율이 낮았다. 하지만 갑오징어 뼈의 다공성 구조 내에 금나노 입자를 조밀하게 부착함으로써 측정 효율 및 분해능 향상을 유도하여 포도당 및 기타 당류의 간접적 정량 분석의 효율성을 높였다(Xu et al., 2009).In the field of food or fermentation analysis, squid bones are widely used in biosensor applications for quantitative analysis of sugars. In the previous studies, glucose - glucose oxidation - reduction reaction using gold nanoparticle catalyst was used for quantitative analysis of glucose, but the measurement efficiency was low due to the dispersion of gold nanoparticles in the measurement solution. However, by attaching gold nanoparticles densely in the porous structure of the cuttlefish bone, induction of measurement efficiency and resolution improved the efficiency of indirect quantitative analysis of glucose and other saccharides (Xu et al., 2009).

이 외에도 의료 및 미용 산업에서는 갑오징어 뼈의 항산화능 특성이 많이 활용되고 있다. 갑오징어 뼈의 정제과정에서 생성되는 에나(ENA) 활성미네랄 A 추출액이 활성산소의 생성과 지질 과산화, CYP2E1 사이토크롬의 유도는 감소시키는 반면, 글루타티온과 과산화분해효소의 생성은 증가시켜 CCl4에 의해 유도되는 산화적 스트레스와 간 독성에 대한 항산화능을 가진다는 것이 밝혀졌다(Hong et al., 2011). 이처럼 갑오징어 뼈는 의료 및 다양한 분야에서 많은 응용이 진행되고 있으나, 현재까지 창상치료를 목적으로 하이드로콜로이드막을 개발하고 효능을 평가한 연구는 수행된 바 없었다. In addition, the antioxidant properties of cuttlefish bone are widely used in the medical and cosmetic industries. Generating the other hand, glutathione and peroxide decomposing enzyme is everywhere (ENA) activity mineral A extract solution produced by the purification process of the cuttlefish bone to reduce the generation and lipid peroxidation, induction of CYP2E1 cytochrome of active oxygen is increased by by CCl 4 Induced oxidative stress and hepatotoxicity (Hong et al., 2011). However, there have been no studies to develop a hydrocolloid membrane and evaluate its efficacy to treat wounds.

드레싱제(하이드로콜로이드 막)는 손상된 피부를 보호하고 상처를 치료하기 위한 재료로서 피부표면의 상피조직과 하부의 결합조직을 연결시켜주고, 상처를 감염으로부터 보호하며 적절한 수분을 유지하고, 산소 또는 이산화탄소 등과 같은 기체의 원활한 소통이 가능하며, 상피조직의 재생 또는 생성을 촉진할 수 있어야 한다(최진현, 2012). 하지만 과거에는 이러한 드레싱제로 일반 면이나 탈지면 등을 이용하여 단순히 창상을 건조시키는 방법이었으나, 이 같은 탈지면 드레싱의 경우 창상을 습윤하게 유지할 수 없고 과도한 삼출물이 있을 경우 이를 흡수할 수도 없으며 탈지면 섬유 사이가 너무 넓어 세균의 침입을 막을 수도 없다. 또한 창상의 신생조직들이 탈지면 안으로 자라 들어갈 수 있고 창상과 들러붙어 드레싱 교체시 창상에 외상을 주고 따라서 창상치유가 늦게되며 드레싱시 통증도 유발하게 된다. 단지 창상을 덮고 있을 뿐 기능적으로는 창상치유를 촉진하지 못한다(Han and Youn, 2011). 그러나 1962년 Winter가 습윤환경 하에서 보다 빠른 상피 형성이 이루어진다는 것을 발표한 이래 습윤환경 하에서의 상처치료용 드레싱(wound dressing)이 연구되기 시작하였다(최진현, 2012). 따라서 최근 창상 부위에 더 적합한 환경을 만들기 위하여 많은 습윤드레싱 재료들이 개발되고 있는데 시판화되고 있는 주요 제품으로는 메디폼(Ildong Pharm. Co.), 듀오덤(Boryung Pharm.Co.) 을 들 수 있다. The dressing agent (hydrocolloid membrane) protects the damaged skin and treats the wound. It connects the epithelium of the skin surface with the underlying connective tissue, protects the wound from infection, maintains proper moisture, , And to facilitate the regeneration or production of epithelial tissue (Choi, JH, 2012). However, in the past, such a dressing agent was simply used to dry a wound using a general cotton or a cotton wool. However, in such a cotton wool dressing, it is impossible to keep the wool wet. When there is excessive exudate, it can not be absorbed. It is wide and can not prevent the invasion of bacteria. In addition, new tissue of the wound can grow into the cotton wool, and when the dressing is stuck with the wound, it gives trauma to the wound, thus the wound healing becomes late and the pain during dressing is also caused. It only covers the wound, but does not functionally promote wound healing (Han and Youn, 2011). However, since 1962 Winter announced that faster epithelium formation occurs under humid conditions, wound dressing under wet conditions has begun to be studied (Choi, Jinhyun, 2012). Therefore, a number of wet dressing materials have been developed to make the environment more suitable for the wound area recently. Major products on the market include Ildong Pharm. Co., and Boryung Pharm. Co.

이처럼 습윤 드레싱제의 재료로 사용되고 있는 하이드로콜로이드는 펙틴, 젤라틴, 카르복시메틸셀룰로스가 주성분으로서 상처의 저산소증 상태를 형성하여 신생 혈관 형성 자극하고, 상처에서 분비되는 삼출물이 하이드로콜로이드와 접촉 시 반고형성 젤로 변화하여 혈병의 형성을 억제한다. 따라서 하이드로콜로이드 드레싱은 삼출물을 적절하게 흡수하고 수분 소실을 막으며, 이차적인 세균 감염을 막아 상처 치유에 도움을 주는 유용한 제제로 점차 사용이 늘고 있다(정소영).The hydrocolloid used as the wet dressing agent is pectin, gelatin, and carboxymethylcellulose, and forms hypoxia of the wound as a main component to stimulate neovascularization. When the exudate secreted from the wound contacts with the hydrocolloid, To inhibit the formation of blood clots. Therefore, hydrocolloid dressing is increasingly being used as a useful agent to properly absorb exudates, prevent water loss, and prevent secondary bacterial infections, thereby helping wound healing (Jung So-young).

따라서 흡수성이 우수하고, 지혈 및 흉터제거 효과가 탁월한 창상치료용 드레싱제를 개발하기 위한 연구의 필요성이 절실히 요구되고 있다.Therefore, there is a desperate need for research to develop a wound dressing for wound healing which is excellent in absorbability and excellent in hemostatic and scar removal effects.

본 발명자들은 창상 등의 상처를 더욱 빠르게 치료하는 드레싱제에 대해 탐색하던 중, 갑오징어 뼈 분말을 포함하여 드레싱제를 제조하는 경우에 상처를 치료하는 효과가 높아지는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.The inventors of the present invention have discovered that when treating a dressing agent for treating wounds such as wounds more quickly, the effect of treating wounds is improved when manufacturing a dressing agent including squid bone powder, and completed the present invention .

따라서, 본 발명은 갑오징어 뼈 분말을 포함하는 상처 치료용 드레싱제 및 이의 제조방법을 제공하고자 한다.Accordingly, the present invention is to provide a wound dressing agent containing cuttlefish bone powder and a method for producing the same.

본 발명은 갑오징어 뼈 분말을 포함하는 상처 치료용 드레싱제 및 이의 제조방법을 제공한다.The present invention provides a dressing for wound healing comprising squid bone powder and a method for producing the same.

본 발명에 따른 갑오징어 뼈 분말을 포함하는 상처 치료용 드레싱제는 종래의 상처 치료용 드레싱제에 비하여 흡수성이 우수하고, 지혈 및 흉터제거 효과가 우수하여 창상 등의 상처를 빠르게 치료하는 효과가 있다.The wound dressing preparation containing the cuttlefish bone powder according to the present invention is excellent in absorbability compared with the conventional dressing dressings for wound healing and has excellent hemostatic and scar removing effects and has an effect of treating wounds such as wounds quickly .

도 1은 창상 치료 중의 동물의 체중 변화 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 창상 치료 중의 동물의 창상의 크기 변화를 사진으로 나타낸 도이다.
도 3은 창상 치료 중의 동물의 창상의 크기 변화를 그래프로 나타낸 도이다.
도 4는 창상조직의 변화에 미치는 갑오징어 뼈 혼합 콜로이드막의 효과를 분석하기 위한 조직결과를 나타낸 도이다.
BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a graph showing the results of weight changes of animals during wound healing. FIG.
Fig. 2 is a photograph showing changes in the size of wound of an animal during wound healing.
FIG. 3 is a graph showing changes in the size of wound of an animal during wound healing.
Fig. 4 is a diagram showing the tissue result for analyzing the effect of the mixed squid bone colloid membrane on the change of the wound tissue.

본 발명은 갑오징어 뼈 분말을 포함하는 상처 치료용 드레싱제를 제공한다.The present invention provides a wound dressing for treating wounds containing cuttlefish bone powder.

또한, 본 발명은 In addition,

1) 반응기에 석유수지를 가하여 녹인 후, 고무 및 테트라키스메탄을 가하고 교반하여 예비중합체를 제조하는 단계;1) adding a petroleum resin to the reactor to dissolve it, adding rubber and tetrakismethane, and stirring to prepare a prepolymer;

2) 상기 예비중합체에 셀룰로오스검 및 유동파라핀을 가한 뒤 교반하여 복합체를 제조하는 단계; 및2) adding cellulose gel and liquid paraffin to the prepolymer and stirring to prepare a composite; And

3) 상기 복합체에 갑 오징어 뼈 분말을 가하여 갑오징어 뼈 복합체를 제조한 뒤, 갑오징어 뼈 복합체를 이형지 위에 도포하여 드레싱제를 제조하는 단계;3) preparing a cuttlefish bone composite by adding powdered squid bone powder to the composite, and then coating the cuttlefish bone composite on a release paper to prepare a dressing;

를 포함하는 상처치료용 드레싱제의 제조방법을 제공한다.
And a method for manufacturing a dressing for wound healing.

이하 본 발명에 대해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 상처 치료용 드레싱제는 갑오징어 뼈 분말을 드레싱제 전체 부피의 15 내지 45% 포함하는 것을 특징으로 한다.The dressing for dressing according to the present invention is characterized in that the cuttlefish bone powder contains 15 to 45% of the total volume of the dressing agent.

상기 드레싱제는 석유수지, 고무, 테트라키스메탄, 셀룰로오스검, 유동파라핀 및 갑오징어 뼈 분말을 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.The dressing agent may include, but is not limited to, petroleum resin, rubber, tetrakismethane, cellulose gum, liquid paraffin, and squid bone powder.

상기 드레싱제의 제조시 당업계에서 일반적으로 사용되는 재료 및 갑오징어 뼈 분말을 포함하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 키토산과 같은 생체적합성 고분자, 폴리에틸렌글리콜, 폴리프로필렌글리콜, 글리세린, 폴리비닐알콜 또는 폴리피롤리돈 등을 포함하고, 여기에 갑오징어 뼈 분말을 포함하여 제조할 수도 있다.
The preparation of the dressing agent may include a material commonly used in the art and a squid bone powder. For example, a biocompatible polymer such as chitosan, polyethylene glycol, polypropylene glycol, glycerin, polyvinyl alcohol, or polypyrrolidone, and may also be prepared by including squid bone powder.

본 발명에 따른 상처 치료용 드레싱제의 제조방법을 단계별로 상세히 설명하면 다음과 같다.The method of manufacturing a dressing for wound healing according to the present invention will be described step by step as follows.

본 발명의 드레싱제의 제조방법에서,In the method for producing a dressing agent of the present invention,

1)단계는 예비 중합체를 제조하는 단계로, 반응기에 석유수지 100 내지 300 g을 가하여 녹인 후, 고무 100 내지 300 g 및 테트라키스메탄 2 내지 10 g을 가하고 교반하여 예비중합체를 제조한다. Step 1) is a step of preparing a prepolymer. The prepolymer is prepared by dissolving 100 to 300 g of a petroleum resin in a reactor, adding 100 to 300 g of rubber and 2 to 10 g of tetrakismethane, and stirring to prepare a prepolymer.

2) 단계는 복합체를 제조하는 단계로, 상기 예비중합체에 셀룰로오스검 100 내지 300 g 및 유동파라핀 30 내지 150 g을 가한 뒤 교반하여 복합체를 제조한다. Step 2) is a step of preparing a composite. 100 to 300 g of cellulose gum and 30 to 150 g of liquid paraffin are added to the prepolymer, followed by stirring to prepare a composite.

3) 단계는 드레싱제를 제조하는 단계로, 상기 복합체에 복합체 부피의 15 내지 45%의 양에 해당하는 갑 오징어 뼈 분말을 가하여 갑오징어 뼈 복합체를 제조한 뒤, 갑오징어 뼈 복합체를 이형지 위에 도포하여 드레싱제를 제조한다.
Step 3) is a step of preparing a dressing agent. The cuttlefish bone powder is added to the complex by applying the powdered cuttlefish bone powder corresponding to 15 to 45% of the volume of the complex, and the cuttlefish bone composite is coated on the release paper To prepare a dressing agent.

상기 방법으로 제조된 상처 치료용 드레싱제는 0.06±0.004%의 염분 농도, 4.91±0.18의 저항값 및 506±17.37의 전기 전도도를 가지며, 중성에 가까운 pH값인 8.27±0.02을 가져 창상 치료제로서 사용되기 적절하며, 증류수에 대한 흡습성이 타 드레싱제에 비하여 우수하여 상처 치료에 우수한 효과가 있다.
The wound dressing prepared by the above method had a salinity concentration of 0.06 ± 0.004%, a resistance value of 4.91 ± 0.18, and an electrical conductivity of 506 ± 17.37, and had a neutral pH value of 8.27 ± 0.02 and was used as a wound healing agent And the hygroscopicity of the distilled water is superior to that of the other dressing agent, and thus, it has an excellent effect on wound healing.

상기한 바와 같이, 본 발명에 따른 갑오징어 뼈 분말을 포함하는 상처 치료용 드레싱제는 종래의 상처 치료용 드레싱제에 비하여 흡수성이 우수하고, 지혈 및 흉터제거 효과가 우수하여 창상 등의 상처를 빠르게 치료하는 효과가 있다.
As described above, the wound dressing preparation containing the cuttlefish bone powder according to the present invention is superior in absorbability compared to the conventional wound dressing dressings, and has excellent hemostatic and scar removing effects, There is an effect of curing.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in order to facilitate understanding of the present invention. However, the following examples are provided only for the purpose of easier understanding of the present invention, and the present invention is not limited by the examples.

실시예 1. 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막의 제조Example 1. Preparation of mixed squid bone hydrocolloid membrane

1-1. 갑오징어 뼈 분말의 제조1-1. Preparation of cuttlefish bone powder

갑오징어 뼈는 ㈜버너월드에서 구입하였으며, 갑오징어 뼈에 남아 있는 염분을 제거하기 위하여 증류수에 72시간 동안 침전시킨 후, 유성성분(기름성분)을 제거하기 위하여 공업용 메탄올(90%)에 72시간 동안 침전시켰다. 상기 침전시킨 갑오징어 뼈를 증류수에 수세한 후, 상온(20℃)에서 24시간 동안 자연건조하고 오븐(80℃)에서 5시간 동안 건조하였다. 완전히 건조된 갑오징어 뼈는 주걱(spatula)을 이용하여 1차 분쇄시킨 후 분쇄기(DE/A10, IKA-WERKE Co, Germany)를 이용하여 2차 분쇄하여 준비하였다. 분말화시킨 갑오징어 뼈는 골 구조 내에 함유된 유기물의 변성을 막기 위해 -20℃ 냉동실에서 보관하였다.The cuttlefish bones were purchased from Burner World Co., Ltd., and were precipitated in distilled water for 72 hours in order to remove the salt remaining in the cuttlefish bone. To remove the oily components (oil component), industrial methanol (90% Lt; / RTI > The precipitated squid bones were washed with distilled water, naturally dried at room temperature (20 ° C) for 24 hours, and then dried in an oven (80 ° C) for 5 hours. The completely dried squid bones were first crushed using a spatula and then ground by a pulverizer (DE / A10, IKA-WERKE Co, Germany). Powdered cuttlefish bones were stored in a -20 ° C freezer to prevent denaturation of organic matter contained in the bone structure.

1-2. 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막의 제조1-2. Preparation of mixed squid bone hydrocolloid membrane

하이드로콜로이드 반응기(㈜영케미칼)에 석유수지 200 g을 가하고 충분히 녹인 후, 고무 200 g 및 테트라키스메탄 6 g을 가하고 1시간 30분간 교반하여 예비중합체를 제조하였다. 상기 예비중합체에 셀룰로오스검 210 g 및 유동파라핀 70 g을 가한 뒤, 교반하여 충분히 분산시켜 점성복합체를 제조하였으며, 복합체 부피의 15% 및 30%의 양에 해당하는 갑오징어 뼈 분말을 분산시켜 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드 복합체를 제조하였다. 제조된 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드 복합체를 실리콘이 코팅된 이형지 위에 나이프-코터기로 450 ㎛ 두께로 도포하고, 그 위를 폴리우레탄 필름으로 덮어 최종적으로 폴리우레탄을 지지체로 한 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막(드레싱제)을 제조하였다.
After 200 g of a petroleum resin was added to a hydrocolloid reactor (Yukin Chemical Co., Ltd.) and sufficiently dissolved, 200 g of rubber and 6 g of tetrakis methane were added and stirred for 1 hour and 30 minutes to prepare a prepolymer. 210 g of cellulose wool and 70 g of liquid paraffin were added to the prepolymer, followed by sufficiently dispersing by stirring to prepare a viscous composite. The squid bone powder corresponding to 15% and 30% of the volume of the composite was dispersed, Bone mixed hydrocolloid complexes were prepared. The prepared mixed squid bone mixed hydrocolloid composite was coated on a silicon-coated release paper with a knife-coater to a thickness of 450 탆, and the top of the coated squid bone was covered with a polyurethane film to finally obtain a mixed squid bone hydrocolloid (Dressing agent) was prepared.

실험예 1. 갑오징어 뼈 분말의 생화학적 특성 분석Experimental Example 1. Biochemical characterization of bone squid powder

갑오징어 뼈 분말의 생화학적 특성을 분석하기 위하여, 갑오징어 뼈 분말의 염분농도, 전기전도도 및 pH를 측정하였다. 기기의 적정 기준에 제시된 농도에 따라, 60 ml의 증류수에 2 g의 갑오징어 뼈 분말을 분산시킨 후, 24시간 동안 교반 후에 염분농도, 전기전도도 및 pH를 측정하였다. 염분농도와 전기전도도는 염분농도측정기(EC-400L, 이스텍)를 이용하여 측정하였고, 저항과 pH는 pH meter(Mettler D20-K, 동성과학)를 이용하여 측정하였다.In order to analyze the biochemical characteristics of squid bone powder, salinity, electrical conductivity and pH of cuttlefish bone powder were measured. 2 g of squid bone powder was dispersed in 60 ml of distilled water according to the concentrations indicated in the appropriate standards of the apparatus, and then the salinity, electrical conductivity and pH were measured after stirring for 24 hours. The salinity and electrical conductivity were measured using a salt concentration meter (EC-400L, Istek), and the resistance and pH were measured using a pH meter (Mettler D20-K, same as Science).

갑오징어 뼈 분말 분산액의 염분농도를 하기 표 1에 나타내었다.Table 1 shows the salt concentration of the powder of squid bone powder.

분류Classification 염분농도(%)Salinity Concentration (%) 0.1 % NaCl 용액0.1% NaCl solution 1.13±0.121.13 + - 0.12 1% NaCl 용액1% NaCl solution 10.5±0.2110.5 ± 0.21 갑오징어 뼈 분말 분산액Cuttlefish bone powder dispersion 0.06±0.0040.06 ± 0.004

상기 표 1에 나타난 바와 같이, 갑오징어 뼈 분말 분산액의 염분농도는 약 0.06%로 0.1% NaCl용액에서 측정된 1.13%보다 19배 정도 낮았으며, 1% NaCl용액에서 측정된 10.5%보다 175배 정도 낮은 값을 나타내었다. 따라서 이러한 결과는 갑오징어 뼈 분말 분산액이 거의 0에 가까운 염분농도를 나타내므로 창상치료제로 적합함을 나타낸다.
As shown in Table 1, the salt concentration of the squid bone powder dispersion was about 0.06%, which was 19 times lower than 1.13% measured in the 0.1% NaCl solution, and about 175 times higher than the 10.5% measured in the 1% NaCl solution Respectively. Therefore, this result shows that the dispersion of squid bone powder in salted squid bone powder is close to zero and is suitable as a wound healing agent.

전기전도도 및 저항은 비교적 순도가 높은 물에 대한 척도로써 일반적으로 사용된다. 물 속에 이온이 많을수록 전류가 많아지며, 전도도가 커지게 되고 반대로 저항은 작아지게 된다(Kim et al., 1996). 따라서 갑오징어 뼈 분산액에 이물질의 함량을 분석하기 위해, 갑오징어 뼈 분산액의 저항과 전기전도도를 측정하였다. 결과를 하기 표 2에 나타내었다.Electrical conductivity and resistance are commonly used as a measure of relatively pure water. The more ions are in the water, the higher the current, the higher the conductivity, and vice versa (Kim et al., 1996). Therefore, in order to analyze the content of foreign matter in the bone squid bone dispersion, resistance and electrical conductivity of the bone squid bone dispersion were measured. The results are shown in Table 2 below.

분류Classification 저항값(Ω/cm, E+02)Resistance value (Ω / cm, E +02 ) 전기전도도(ms/cm)Electrical Conductivity (ms / cm) 증류수Distilled water 1.76±0.081.76 + 0.08 4.24±0.144.24 + 0.14 수돗물tap water 7.24±0.057.24 ± 0.05 83.58±0.5183.58 ± 0.51 갑오징어 뼈 분말 분산액Cuttlefish bone powder dispersion 4.91±0.184.91 + 0.18 506±17.37506 ± 17.37

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 갑오징어 뼈 분산액의 저항 값은 수돗물(7.24 Ω/cm) 보다 낮고, 증류수(1.76 Ω/cm) 보다 높은 4.91 Ω/cm으로 측정되었다. 하지만, 전기전도도는 저항값과 반대로 수돗물(83.58)과 증류수(4.24)보다 유의적으로 높은 506 ms/cm로 증가하였다. 이러한 결과는 갑오징어 뼈 분말 분산액에는 이물질의 함량이 적어 상처치료에 독성이나 감염성 발생 가능성이 낮은 소재임을 제시하고 있다.
As shown in the above Table 2, the resistance value of the bone squid bone dispersion was lower than tap water (7.24? / Cm) and 4.91? / Cm higher than distilled water (1.76? / Cm). However, the electrical conductivity increased to 506 ms / cm, which is significantly higher than tap water (83.58) and distilled water (4.24), as opposed to the resistance value. These results suggest that the dispersion of squid bone powder has a low content of foreign substances and is less likely to cause toxicity or infectious disease in wound healing.

또한, 갑오징어 뼈 분말 분산액의 pH 측정 결과를 하기 표 3에 나타내었다.In addition, the pH measurement results of the dispersion of squid bone powder are shown in Table 3 below.

분류Classification pHpH 증류수Distilled water 7.63±0.767.63 + - 0.76 갑오징어 뼈 분말 분산액Cuttlefish bone powder dispersion 8.27±0.028.27 ± 0.02

상기 표 3에 나타난 바와 같이, 갑오징어 뼈 분말 분산액의 pH는 비록 증류수(7.63)보다 약간 높았으나 유의성은 없었으며 중성값을 나타내었다. 이러한 특성은 창상 치료제로 적용하기에 적합한 중성의 특성이 있음을 나타낸다.
As shown in Table 3 above, the pH of the squid bone powder dispersion was slightly higher than that of distilled water (7.63), but was not significant and showed a neutral value. These properties indicate that there is a neutrality characteristic suitable for application as a wound healing agent.

실험예 2. 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막의 증류수에 대한 흡습성 분석Experimental Example 2. Hygroscopicity analysis of distilled water of mixed squid bone hydrocolloid membrane

갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막의 흡습성을 분석하기 위하여, 탈지면, 하이드로콜로이드막, 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막 각각 0.1 g 증류수에 동일한 시간 동안 침전시킨 다음 5분, 10분, 30분, 1시간 간격으로 이들의 변화를 전자저울을 이용해 측정하여 단위 부피 당 중량증가를 계산하였다.In order to analyze the hygroscopicity of mixed squid bone hydrocolloid membranes, 0.1 g of each of the hydrolyzate, hydrocolloid membrane, and mixed squid bone hydrocolloid membrane was precipitated in distilled water for 5 minutes, 10 minutes, 30 minutes, 1 hour intervals These changes were measured using an electronic balance and the weight gain per unit volume was calculated.

우수한 창상치료 재료는 1) 세균 감염 방지, 2) 삼출물 (진물) 제거 용이, 3) 새로 생성된 피부 조직과 상피화된 조직을 손상시키지 않고 드레싱 제거가 가능, 4) 상처 안으로 독성물질 침입 방지, 5) 체온과 가까운 온도의 유지 등이 필수적으로 요구된다(Han and You, 2011). 이들 특성 중에서, 삼출물을 제거하는데 필수적으로 요구되는 특성은 흡수성이다. 하이드로콜로이드는 다공성이라는 구조특성을 갖고 있어 많은 수분을 흡수하고 보유할 수 있어 삼출물의 제거에 매우 용이한 특성을 갖고 있다(최진현, 2011). 우수한 흡수성을 갖는 창상치료제는 혈병이 생기지 않고 깨끗이 상처가 아물 수 있도록 해줄 수 있을 뿐만 아니라 삼출물에 존재하는 호중구, 백혈구, 마크로 파지 등 피부재생이나 상처 치료에 필요한 인자들이 더 오랜 기간 존재할 수 있게 하여 상처를 보다 빠른 시간 내에 아물 수 있도록 유도한다(여진홍, 2004). Excellent wound healing materials are: 1) Prevention of bacterial infection, 2) Easy removal of exudates (dirt), 3) Removal of dressing without damaging newly formed skin tissue and epithelialized tissue, 4) Maintaining the temperature close to the body temperature is essential (Han and You, 2011). Among these properties, the property required to remove the exudates is absorbency. The hydrocolloid has a structure characteristic of porosity and can absorb and retain a large amount of water, so that it is very easy to remove exudates (Choi, JH, 2011). Wound healing agents with excellent absorbability can not only prevent blood clots but also help to heal wounds. In addition, factors necessary for skin regeneration and wound healing, such as neutrophils, leukocytes, and macrophages present in exudates, (Jung, Hong, 2004). In this study,

일반적으로 의료용 밴드에서 사용되는 탈지면과 본 과제에서 사용한 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막의 흡수성을 비교하기 위해 5분, 10분, 30분, 1시간에 무게를 측정하여 흡수도를 계산하였다. 결과를 하기 표 4에 나타내었다.In order to compare the absorbency of the mixed squid bone hydrocolloid membrane used in the medical band and the squid bone mixed hydrocolloid membrane used in the present invention, the absorbance was calculated by measuring the weight at 5 minutes, 10 minutes, 30 minutes and 1 hour. The results are shown in Table 4 below.

분류Classification 무게/부피 (g/cm3)Weight / Volume (g / cm 3 ) 0 min0 min 5 min5 min 10 min10 min 30 min30 min 60 min60 min 탈지면cotton wool 0.40.4 0.82(±0.05)0.82 (+/- 0.05) 0.87(±0.05)0.87 (+/- 0.05) 0.89(±0.03)0.89 (0.03) 0.98(±0.07)0.98 (0.07) 하이드로콜로이드Hydrocolloid 1One 2.23(±0.40)2.23 (+ - 0.40) 2.44(±0.20)2.44 (+/- 0.20) 2.39(±0.26)2.39 (+/- 0.26) 2.39(±0.16)2.39 (+/- 0.16) 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드(15%) Cuttlefish bone mixed hydrocolloid (15%) 1One 2.12(±0.17)2.12 (+/- 0.17) 2.01(±0.16)2.01 (+/- 0.16) 2.33(±0.23)2.33 (+ - 0.23) 2.35(±0.44)2.35 (+/- 0.44) 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드(30%) Cuttlefish bone mixed hydrocolloid (30%) 1One 2.4(±0.10)2.4 (± 0.10) 2.52(±0.36)2.52 (+ - 0.36) 2.54(±0.02)2.54 (0.02) 2.48(±0.22)2.48 (+ -0.22)

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 탈지면은 5분 경과 후 샘플의 무게보다 2배 가까운 흡수도를 보여주었고, 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막은 5분경과 후 약 2.5배의 흡수도를 나타내었다. 또한, 갑오징어 뼈 15% 혼합 하이드로콜로이드막은 하이드로콜로이드막과 유사한 흡수도를 나타내었지만 갑오징어 뼈 30% 혼합 하이드로콜로이드막은 하이드로콜로이드막보다 유의적으로 높은 흡수도를 나타내었다. 따라서, 이러한 결과는 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막은 탈지면과 유사한 높은 흡수도를 갖고 있어 상처에서 발생하는 침출물의 흡수에 용이한 소재로 활용될 수 있음을 나타낸다.
As shown in Table 4, the absorbency of the cotton wool blend hydrocolloid membrane was about 5 minutes and 2.5 times higher than that of the sample after 5 minutes. In addition, the 15% mixed hydrocolloid membrane showed a similar absorbance to the hydrocolloid membrane, but the 30% mixed hydrocolloid membrane of the squid bone showed significantly higher absorbance than the hydrocolloid membrane. Therefore, this result indicates that the mixed squid bone hydrocolloid membrane has a high absorbency similar to that of the cotton wool so that it can be utilized as an easy material for absorbing the leached material generated from the wound.

실험예 3. 창상 회복 능력 평가를 위한 동물 실험Experimental Example 3. Animal Experiment to Evaluate Wound Recovery Ability

SD랫트(6주령, 수컷)는 ㈜샘타코(Osan, Korea)에서 구입하여 방사선 조사된 사료(Purina, Missouri, USA)를 자유급식 하도록 하였고, 12 시간의 조명주기(08:00~20:00) 로 SPF 상태인 부산대학교 청정실험동물센터(온도 22℃, 상대습도 50%)에서 사육하였다. 본 연구는 부산대학교 동물실험윤리위원회(PNU-IACAU)로부터 과학성과 윤리성에 대한 심사를 거쳐 승인(승인번호: PNU2012-0181)을 받아 수행되었다. SD rats (6-week-old male) were purchased from Osan, Korea and fed with radiation (Purina, Missouri, USA) ) Were housed in a clean laboratory animal center at Pusan National University (temperature: 22 ℃, relative humidity: 50%). This study was approved by the PNU-IACAU (Pusan National University) Animal Experimental Ethics Committee (PNU2012-0181).

실험 그룹은 총 4개 그룹으로, 그룹 당 7마리 씩 총 28마리로 진행하였다. 먼저, 랫트의 등쪽에 털을 5 cm2 정도 제거한 후 생검(biopsy)으로 지름 약 10 mm 정도의 원형의 창상을 만들었다. 첫 번째 그룹은 창상을 낸 다음 멸균된 탈지면만을 처리하였고(탈지면그룹), 두 번째 그룹은 창상 위에 하이드로콜로이드막을 처리하였다(하이드로콜로이드막 그룹). 세 번째 그룹은 갑오징어 뼈 15%가 혼합된 하이드로콜로이드막을 처리하였고(갑오징어 뼈 15% 혼합 하이드로콜로이드막 그룹), 마지막 그룹은 갑오징어 뼈 30%가 혼합된 하이드로콜로이드막을 10일 동안 처리하였다(갑오징어 뼈 30% 혼합 하이드로콜로이드막 그룹). 창상부위는 10일 동안 매일 창상의 크기를 관찰하였고, 동시에 탈지면과 3가지 하이드로콜로이드막은 매일 교체하였다. The experimental group consisted of 4 groups of 7 rats per group, totaling 28 rats. First, 5 cm 2 of hair was removed from the dorsal side of the rat, and a round wound of about 10 mm in diameter was made by biopsy. The first group was treated with sterile cotton wool only (wound dressing group) after wounding, and the second group treated with hydrocolloid film on wound (hydrocolloid membrane group). The third group treated hydrocolloid membranes mixed with 15% of squid bones (15% mixed squid bone hydrocolloid membrane group) and the last group treated hydrocolloid membranes mixed with 30% of squid bone (10%) Squid bone 30% mixed hydrocolloid membrane group). The wound area was observed daily for 10 days, and at the same time, the cotton swab and the three hydrocolloid membranes were replaced daily.

갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막의 창상치료효능을 관찰하기 위해, 창상조직에 10일동안 갑오징어 뼈 혼합 하이드로콜로이드막를 처리하여 상처의 회복을 관찰하였다. In order to observe the wound healing effects of mixed squid bone hydrocolloid membranes, wound tissue was treated with mixed squid bone hydrocolloid membrane for 10 days to observe the wound healing.

먼저, 동물의 체중 변화를 도 1에 나타내었으며, 창상의 크기 변화를 도 2 및 도 3에 나타내었다. First, the body weight change of an animal is shown in FIG. 1, and the size change of the wound is shown in FIG. 2 and FIG.

도 1에 나타난 바와 같이, 체중의 변화는 비록 창상 후 10일경에는 약간 차이가 있었으나 4개 그룹에서 유의적으로 큰 차이는 없었다. As shown in Fig. 1, the change in body weight was slightly different by about 10 days after wounding but there was no significant difference in the four groups.

또한, 도 2 및 도 3에 나타난 바와 같이, 창상의 크기는 탈지면, 하이드로콜로이드막, 갑오징어 뼈 15% 혼합 하이드로콜로이드막을 처리한 그룹에서는 시간의 경과에 따라 매우 유사하게 감소하였다. 그러나, 갑오징어 뼈 30% 혼합 하이드로콜로이드막을 처리한 그룹에서는 하이드로콜로이드막을 처리한 그룹과 비교하여 창상의 크기가 시간의 경과에 따라 유의적으로 크게 감소하였다. 따라서, 이러한 결과는 갑오징어 뼈 30% 혼합 하이드로콜로이드막은 창상치료에 회복을 촉진시키고 흉터생성을 억제하는 효과가 있음을 제시하고 있다.
In addition, as shown in Figs. 2 and 3, the size of the wounds was very similarly decreased with the lapse of time in the group treated with the cotton wool, hydrocolloid membrane, and 15% mixed hydrocolloid membrane of squid bone. However, in the group treated with 30% mixed hydrocolloid membrane of cuttlefish bone, the size of wound was significantly decreased with time as compared with the group treated with hydrocolloid membrane. Therefore, these results suggest that 30% mixed hydrocolloid membrane of cuttlefish bone promotes recovery and inhibits scar formation in wound healing.

실험예 4. 조직 분석Experimental Example 4. Analysis of tissue

각각의 실험 그룹에서 적출한 창상 조직을 부검 직후 10% 포르말린 용액에 72시간 정도 고정한 후, 적당한 크기로 절단하여 카세트에 넣은 후 조직처리기(Thermo Shandon Ltd./Thermo Fisher Scientific, England)를 이용하여 고정시켰다. 고정된 조직은 파라핀 조직 포매기(Paraffin Embedding Station(Leica Microsystems Nussloch GMBH, Germany))를 사용하여 함침시킨 후, Rotary Microtome(Leica Microsystems Nussloch GMBH, Germany)을 사용하여 박절하였다. 박절된 조직은 자일렌에 3분씩 3번, 100% 알콜에 각각 2분, 1분 담근 후 95, 80, 70% 알콜에 각각 1분 30초씩 담근 후에 물로 1분 세척하고 헤마톡시린(hematoxylin)에 1분, 10% 스콧스 수돗물(scott's tap water)에 1분, 에오신(eosin)에 3분동안 처리하여 조직 염색을 실시하였다. 염색된 조직은 다시 70, 80, 95, 100% 알콜의 순서로 탈수과정을 거치고 마지막으로 자일렌에 3분씩 3번 처리하였다. 이 후 카나다발삼(kanadabalsam) 및 자일렌을 섞은 고정제를 이용하여 조직을 슬라이드에 고정시킨 후 건조하였다. 창상조직의 변화에 미치는 갑오징어 뼈 혼합 콜로이드막의 영향은 현미경을 이용하여 분석하였다. 결과를 도 4에 나타내었다.Immediately after autopsy, the wound tissues were fixed in 10% formalin solution for 72 hours, cut into appropriate size, placed in a cassette, and fixed with a tissue processor (Thermo Shandon Ltd./Thermo Fisher Scientific, England) . Immobilized tissues were impregnated using a paraffin embedding station (Leica Microsystems Nussloch GMBH, Germany) and then resected using a Rotary Microtome (Leica Microsystems Nussloch GMBH, Germany). The dissected tissue was immersed in xylenes three times for 3 minutes, 100% for 2 minutes each for 1 minute, 95%, 80% and 70% alcohol for 1 minute 30 seconds, washed with water for 1 minute, and hematoxylin, For 1 min, 10% scott's tap water for 1 min, and eosin for 3 min. The dyed tissues were dehydrated again in the order of 70, 80, 95, and 100% alcohol, and finally treated with xylenes three times for 3 minutes each. The tissue was then fixed on a slide using kanadabalsam and xylene-fixed fasteners and then dried. The effects of mixed colloid membranes of cuttlefish bone on the changes of wound tissues were analyzed using a microscope. The results are shown in Fig.

도 4에 나타난 바와 같이, 딱지(scab)는 비히클(Vehicle) 처리그룹에서는 많은 양이 관찰되었으나 하이드로콜로이드 혹은 오적골혼합 하이드로콜로이드 처리그룹에서는 매우 적어졌다. 특히, 오적골30혼합 하이드로콜로이드 처리그룹에서는 대부분의 딱지는 사라졌다. 흉터조직(scar tissue)의 길이는 오적골혼합 하이드로콜로이드 처리그룹이 대조군에 비하여 유의적으로 짧았으며, 특히 오적골30혼합 하이드로콜로이드 처리그룹이 가장 짧았다. 또한, 표피(epithelium)는 vehicle 그룹과 하이드로콜로이드막 처리그룹에서는 재생이 진행되고 있었으나 오적골혼합 하이드로콜로이드 처리그룹은 표피재생이 완전히 이루어였다. 그러나 혈관의 재생과 모낭의 생성은 오적골30혼합 하이드로콜로이드 처리그룹에서만 완벽히 재생되고 나머지그룹에서는 극히 일부만 혈관이 재생되고 있었다. 따라서, 이러한 결과는 오적골30혼합 하이드로콜로이드막이 창상조직의 회복시간을 단축시키고 흉터 생성을 억제하는 효과가 있음을 제시한다.As shown in Fig. 4, scabs were observed in the vehicle treatment group in a large amount, but in the hydrocolloid or osseous mixed hydrocolloid treatment group, the scab was greatly reduced. In particular, most of the scabs disappeared in the miscible hydrocolloid treated group. The length of scar tissue was significantly shorter than that of the control group, and the group with hydrocolloid treatment was the shortest. The epidermis (epithelium) was regenerated in the vehicle group and the hydrocolloid membrane treatment group, whereas the ossicle mixed hydrocolloid treatment group was completely regenerated. However, blood vessel regeneration and hair follicle production were completely regenerated only in the mixed hydrocolloid treatment group of the ossicular bone 30, and only a small part of the blood vessels were regenerated in the remaining group. Therefore, this result suggests that the mixed colloidal hydrocolloid membrane of the oval bone 30 has the effect of shortening the recovery time of wound tissue and suppressing scar formation.

Claims (4)

갑오징어 뼈 분말을 포함하는 상처 치료용 드레싱제.Dressing agent for treating wounds containing cuttlefish bone powder. 제1항에 있어서, 상기 갑오징어 뼈 분말은 드레싱제 전체 부피의 15 내지 45%로 포함되는 것을 특징으로 하는, 상처 치료용 드레싱제.The dressing according to claim 1, wherein the squid bone powder comprises 15 to 45% of the total volume of the dressing. 제1항에 있어서, 상기 드레싱제는 석유수지, 고무, 테트라키스메탄, 셀룰로오스검, 유동파라핀 및 갑오징어 뼈 분말을 포함하는 것을 특징으로 하는, 상처 치료용 드레싱제.The dressing according to claim 1, wherein the dressing agent comprises petroleum resin, rubber, tetrakismethane, cellulose gum, liquid paraffin, and squid bone powder. 1) 반응기에 석유수지를 가하여 녹인 후, 고무 및 테트라키스메탄을 가하고 교반하여 예비중합체를 제조하는 단계;
2) 상기 예비중합체에 셀룰로오스검 및 유동파라핀을 가한 뒤 교반하여 복합체를 제조하는 단계; 및
3) 상기 복합체에 갑 오징어 뼈 분말을 가하여 갑오징어 뼈 복합체를 제조한 뒤, 갑오징어 뼈 복합체를 이형지 위에 도포하여 드레싱제를 제조하는 단계;
를 포함하는 상처치료용 드레싱제의 제조방법.
1) adding a petroleum resin to the reactor to dissolve it, adding rubber and tetrakismethane, and stirring to prepare a prepolymer;
2) adding cellulose gel and liquid paraffin to the prepolymer and stirring to prepare a composite; And
3) preparing a cuttlefish bone composite by adding powdered squid bone powder to the composite, and then coating the cuttlefish bone composite on a release paper to prepare a dressing;
≪ / RTI >
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