KR20140070901A - Composition for prevention and treatment metabolic disorders comprising extracts of Nelumbo nucifera seed as an active ingredient - Google Patents

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유정순
김성훈
박소윤
이윤주
김소영
자오슈
김경수
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Abstract

The present invention relates to a composition to prevent and treat metabolic disorders comprising an extract of Nelumbo nucifera seed as an active ingredient. When the extract of Nelumbo nucifera seed of the present invention is processed with differentiated human fat cell and orally administered into a high fat diet Sprague-Dawley based male rat, differentiation of fat cells and expression of related genes are inhibited, thus differentiation into matured fat cells and fat accumulation are inhibited and abdominal fat decrease and blood lipid concentration are significantly improved in the high fat diet rat. Therefore, the extract of Nelumbo nucifera seed can be suitably used as a pharmaceutical composition and a health supplement to prevent and treat metabolic disorders as the active ingredient.

Description

연자육 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 및 치료용 조성물{Composition for prevention and treatment metabolic disorders comprising extracts of Nelumbo nucifera seed as an active ingredient}TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a composition for preventing and treating metabolic diseases containing an extract of green tea and livestock as an active ingredient.

본 발명은 연자육(Nelumbo nucifera seed) 추출물의 대사성 질환 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a method for the production of Nelumbo nucifera seed extract for the prevention and treatment of metabolic diseases.

대사장애는 일반적으로 심혈관 질병을 결정짓는 위험 요소로, 비만, 당뇨병, 인슐린 저항증(insulin resistance), 지질 대사 이상, 고중성지방혈증 (hypertriglyceridemia), 유리지방산의 증가, 고밀도 콜레스테롤의 감소 및 고혈압 등의 병들이 대사성 질환에 포함된다. 대사장애는 유전적인 결함으로 인해서 신체의 대사과정에 문제가 생성되어 발생된다. 대부분 대사장애의 유전적 결함은 부모로부터 유전되며, 대사장애의 원인이되는 유전자의 종류는 다양하다고 밝혀졌다. 대사과정은 신체에서 섭취한 음식물을 사용할 수 있는 에너지로 전환하는 일련의 과정을 일컫는다. 신체는 효소를 이용하여 음식물을 잘게 분해한 후 소화시킬 수 있는 간단한 형태로 만든다. 또한 세포 내의 또 다른 효소는 음식물로부터 섭취할 수 없는 형태의 물질을 에너지원으로 사용하기 위하여 생성하는 역할을 한다. 즉, 대사장애의 유전적인 결함은 대사에 필요한 효소가 정상적으로 활동할 수 없거나, 신체가 생성하는 효소의 양이 극도로 감소하거나, 없어지는 경우에 발생한다. 또한 유전적 결함으로 인해 섭취된 물질이 분해되지 않고, 신체 내에서 독성을 갖게 되는 경우도 발생하며, 신체에서 필요한 물질을 대사과정을 통해서 공급할 수 없는 결과가 초래되기도 한다.
Metabolic disorders are generally risk factors for cardiovascular disease and are associated with obesity, diabetes, insulin resistance, lipid metabolism disorders, hypertriglyceridemia, increased free fatty acids, decreased high density cholesterol, and hypertension. Are included in metabolic diseases. Metabolic disorders are caused by genetic defects that cause problems in the metabolism of the body. Most genetic defects in metabolic disorders are inherited from parents, and the types of genes responsible for metabolic disorders have been found to vary. The metabolic process refers to a series of processes that convert food taken from the body into energy that can be consumed. The body uses enzymes to make the food into a simple form that can be minced and digested. In addition, another enzyme in the cell plays a role in generating a substance of a type that can not be taken from food, as an energy source. In other words, the genetic defect of metabolic disorders occurs when enzymes required for metabolism can not function normally, or when the amount of enzyme produced by the body is extremely reduced or eliminated. In addition, due to genetic defects, the ingested material does not decompose and becomes toxic in the body, and the body may not be able to supply necessary substances through the metabolic process.

현대 사회에서 비만은 다양한 원인에 의해 체내의 지방 축적량이 증가하여 발생하고 있으며, 체내의 과도한 지방 축적의 위험에 대해서는 그리스 시대부터 알려졌다고 하나, 이로 유도되는 병에 대해서는 지난 세기 비만이 영양부족을 제치고 주요한 문제로 자리매김하면서 그 중요성이 평가되기 시작하였다. 또한, 비만은 고혈압, 당뇨병, 심장질환, 동맥경화, 고지혈증과 같은 대사성 질환으로 발전할 수 있기 때문에 그 치료와 예방이 중요하다. 또한 근래에는 비만, 당뇨병, 고지혈증 등의 증가로 비 알코올성 지방 간염이 증가하고 있으며, 일부는 간경변증으로 진행되는 것으로 알려져 있다. 더욱이 지방간이 단순한 간 질환이 아니라 대사 질환의 초기 증상으로 여겨지면서 비만으로 인한 지방간의 조기 진단과 치료의 중요성이 커지고 있다.
In modern society, obesity is caused by an increase in the amount of fat accumulation in the body due to various causes. The risk of excessive accumulation of fat in the body has been known from the Greek ages. However, Its importance has been assessed as it has become a major problem. Also, treatment and prevention are important because obesity can develop into metabolic diseases such as hypertension, diabetes, heart disease, arteriosclerosis, and hyperlipemia. Recently, nonalcoholic fatty liver disease has been increasing with obesity, diabetes and hyperlipidemia, and it is known that some of them are cirrhosis. Furthermore, since fatty liver is considered to be an early symptom of metabolic disease rather than simple liver disease, the importance of early diagnosis and treatment of fatty liver due to obesity is increasing.

연(Nelumbo nucifera)은 연못이나 논에서 재배되는 식물로 연근, 연잎, 연꽃, 연자육 등은 식용 및 약용으로 널리 쓰여지고 있다. 연은 다양한 생리활성물질을 함유하고 있는데 캠프페롤(kaempferol), 쿼세틴(quercetin), 이소쿼세틴(isoquercetin)과 같은 플라보노이드(flavonoids)와 폴리페놀(polyphenol) 화합물 등이 다량 함유되어 있는 것으로 보고되고 있다. 또한 연은 항산화 효과를 포함한 다양한 효능이 보고되어 있으므로 식품가공재료 및 생물자원으로서 개발 잠재력이 무한하나 대부분 분말, 차, 막걸리, 국수류 등 단순 가공품으로 유통되고 있어 품질의 고급화, 다양화 및 편의성을 추구하는 현대 소비자들의 욕구를 충족시키지 못하고 있는 실정이다. 연의 잎, 뿌리, 줄기, 꽃, 열매, 어린 눈 및 어린 뿌리에 이르기까지 다양한 부위가 약재로서 이용되어 왔다. 잎은 갈아서 설사를 치료하는데 사용하고, 감초와 함께 달여서 일사병을 치료하는데 사용하였다. 꽃잎은 달여서 조루증을 치료하고, 꽃 턱받침은 달여서 복부의 경련이나 하혈을 치료하는데 사용하였다. 또한, 연꽃 줄기는 위궤양이나 생리 혹은 산후 출혈이 심한 경우에 지혈을 위해서 사용되었다. 꽃의 수술은 빈뇨, 조루, 체내에서 적혈구가 붕괴하여 헤모글로빈(hemoglobin)이 혈구(血球) 밖으로 용출되는 용혈증상 혹은 여성의 하혈에 사용되었다. 열매는 달여서 불안, 열, 심장 통증에, 씨앗에는 알칼로이드(alkaloids)와 플라보노이드(flavonoids)가 함유되어 있으므로, 혈압강하, 혈관 확장 및 진정제로 사용되었다. 연의 씨앗은 콜레스테롤 수치를 낮추며, 자궁의 평활근을 이완시키며 소화장애, 장염, 만성설사, 정액루(spermatorrhoea, 精液漏), 불면증, 심박수 이상 등에 사용되었다.
Nelumbo nucifera ) is a plant cultivated in a pond or rice paddy field. Lotus root, lotus leaf, lotus flower, and livestock are widely used for edible and medicinal purposes. Kites contain a variety of physiologically active substances and are reported to contain large amounts of flavonoids and polyphenol compounds such as kaempferol, quercetin and isoquercetin. Yeast has various potentials including antioxidant effect. Therefore, it has the potential of development as a food processing material and a biological resource, but most of it is distributed as simple processed products such as powder, tea, makgeolli and noodles. The consumer is unable to meet the needs of modern consumers. Various parts ranging from kite leaves, roots, stems, flowers, fruits, young eyes and young roots have been used as medicines. Leaves were used to treat diarrhea and to treat diarrhea with licorice. The petals were duller to treat premature ejaculation, and the flower chinbum was used to treat dyspepsia or hemorrhoids. In addition, lotus stems were used for hemostasis in cases of severe ulcers, menstrual or postpartum bleeding. Surgery of flowers has been used for hemorrhoids, premature ejaculation, hemolytic symptoms in which hemoglobin dissolves out of blood cells (hemocyte), or red blood cells in the body. Fruit is duller and used as an anxiety, fever, heart pain, seeds contain alkaloids and flavonoids, so it is used as blood pressure drop, vasodilator and sedative. Kidney seeds lower cholesterol levels, relax the smooth muscle of the uterus, and have been used for digestive disorders, enteritis, chronic diarrhea, spermatorrhoea, insomnia, and heart rate problems.

연자육(Nelumbo nucifera seed)은 연꽃의 성숙한 열매 껍데기를 제거한 종자로서, 냄새는 없고 맛을 달고 약간 떫다. 연자육은 다량의 전분과 라피노스(raffinose)라는 당을 함유하고 있으며, 약리작용으로는 비장과 위장의 기능강화, 수면불안, 피부미백, 염증완화작용, 피부 상처치유 등의 효과가 알려져 있으나, 지금까지 대사성 질환에 대한 효과는 잘 알려져 있지 않다.
Nelumbo nucifera seeds are seeds from which the mature fruit husks of the lotus have been removed. They have no smell, taste and taste. The sweet potato contains a large amount of starch and a sugar called raffinose. The pharmacological effect is known to enhance the function of the spleen and stomach, sleep anxiety, skin whitening, inflammation relaxation, and skin wound healing. The effects on metabolic diseases are not well known.

이에, 본 발명자들은 연자육 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 분화된 인간 지방세포에 처리하고, 고지방 식이군 Sprague-Dawley 수컷 쥐에게 경구 투여하여 연자육 추출물의 기능을 규명한 결과, 본 발명의 연자육 추출물은 지방세포 분화 및 관련 유전자의 발현을 억제하여 성숙한 지방세포로의 분화 및 지방 축적을 억제하고, 고지방식이를 한 쥐에서 복부지방 저하와 혈중 지질농도 개선 효과를 보이므로 대사성 질환을 위한 예방 및 치료용 약학적 조성물 및 건강식품으로 유용하게 사용될 수 있음을 발견하고, 본 발명을 완성하였다.
Thus, the inventors of the present invention have studied the function of the extract of the prawn extract by treating the differentiated human adipocytes with a composition containing the extract of the prawn extract as an active ingredient and then orally administering it to the male Sprague-Dawley rats of the high fat diet group. Inhibits the differentiation and fat accumulation of mature lipopolysaccharide by inhibiting adipocyte differentiation and expression of the related gene, and exhibits the effect of lowering the abdominal fat and blood lipid concentration in the rat with high fat diet. Therefore, prevention and treatment for metabolic diseases The present invention has been completed based on this discovery.

본 발명은 연자육(Nelumbo nucifera seed) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물, 대사성 질환 예방 및 개선용 건강식품을 제공하는 것이다.
The present invention relates to a method for the production of Nelumbo nucifera seed extract as an active ingredient, and to provide a health food for preventing and improving metabolic diseases.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 연자육(Nelumbo nucifera seed) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention yeonjayuk (Nelumbo The present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of metabolic diseases containing an extract of Nucifera seed as an active ingredient.

또한, 본 발명은 연자육(Nelumbo nucifera seed) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 및 개선용 건강식품을 제공한다.
The invention also yeonjayuk (Nelumbo The present invention provides a health food for prevention and improvement of metabolic diseases containing an extract of Nucifera seed as an active ingredient.

본 발명의 연자육(Nelumbo nucifera seed) 추출물은 지방세포 분화 및 관련 유전자의 발현을 억제하여 성숙한 지방세포로의 분화 및 지방 축적을 억제하고, 고지방식이를 한 쥐에서 복부지방 저하와 혈중 지질농도를 유의적으로 개선하므로, 대사성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물 및 건강 식품의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있다.
Yeonjayuk of the present invention (Nelumbo nucifera seed extract inhibits the differentiation of adipocytes and expression of related genes to inhibit differentiation and fat accumulation into mature adipocytes and significantly improves abdominal fat and blood lipid levels in rats with high fat diet, A pharmaceutical composition for preventing and treating diseases, and an active ingredient of a health food.

도 1은 분화된 인간 지방세포에서 지질 축적에 있어서 연자육 추출물의 효과를 나타낸 도이다.
도 2는 인간 지방세포에서 PPAR-γ, 렙틴(leptin) 및 GLUT4의 발현에 있어서 연자육 추출물의 효과를 나타낸 도이다.
도 3은 고지방 식이군 쥐에 연자육 추출물을 먹인 후, 쥐의 지방조직 변화를 나타낸 도이다.
a, b, c: 일원분산분석 후, Duncan's multiple range test로 사후 검증시 유의수준 p<0.05에서 차이가 있음을 의미함.
도 4는 고지방 식이군 쥐에 연자육 추출물을 먹인 후, 쥐의 혈중 지질 변화를 나타낸 도이다.
a, b, c: 일원분산분석 후, Duncan's multiple range test로 사후 검증시 유의수준 p<0.05에서 차이가 있음을 의미함.
Brief Description of the Drawings Figure 1 is a graph showing the effect of the extract of green tea on lipid accumulation in differentiated human adipocytes.
2 is a graph showing the effect of the extract of green tea on the expression of PPAR-γ, leptin and GLUT4 in human adipocytes.
FIG. 3 is a graph showing changes in fat tissue of rats fed with pituitary extract to high fat diet group rats.
a, b, and c: Duncan's multiple range test after one-way ANOVA showed significant difference at p <0.05 in post-test.
FIG. 4 is a graph showing blood lipid changes in rats after feeding a high fat diet group rats with a pituitary extract.
a, b, and c: Duncan's multiple range test after one-way ANOVA showed significant difference at p <0.05 in post-test.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 연자육(Nelumbo nucifera seed) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.The present invention relates to a method for the production of Nelumbo The present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of metabolic diseases containing an extract of Nucifera seed as an active ingredient.

본 발명의 유효성분인 연자육 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다: The fruit juice extract as an active ingredient of the present invention is preferably, but not limited to, prepared by a method comprising the steps of:

1) 연자육에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;1) extracting pectin by adding an extraction solvent;

2) 단계 1)의 추출물을 여과하는 단계;2) filtering the extract of step 1);

3) 단계 2)의 여과물을 감압 농축하는 단계; 및3) concentrating the filtrate of step 2) under reduced pressure; And

4) 단계 3)의 농축물을 건조하는 단계.4) drying the concentrate of step 3).

본 발명의 제조방법에 있어서, 단계 1)의 연자육은 재배한 것 또는 시판되는 것을 제한없이 사용할 수 있다. In the production method of the present invention, the livestock meat of step 1) may be cultivated or commercially available.

본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 단계 1)의 추출용매는 물, 알코올 또는 이의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 알코올로는 C1 내지 C2의 저급 알코올 이용하는 것이 바람직하며, 저급 알코올로는 에탄올 또는 메탄올을 이용하는 것이 바람직하다. 추출방법으로는 진탕추출, Soxhelt 추출 또는 환류 추출을 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 상기 추출용매를 건조된 연자육 분량의 1 내지 10배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 2 내지 3배 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하다. 추출 온도는 20℃ 내지 100℃인 것이 바람직하며, 20℃ 내지 50℃인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 또한 추출시간은 1 내지 48시간이 바람직하며, 2 내지 10시간이 더욱 바람직하고, 2 내지 5시간이 가장 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 아울러 추출 횟수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 3 내지 4회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하고, 3회인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다. In the production method of the present invention, it is preferable to use water, an alcohol or a mixture thereof as the extraction solvent in the step 1). As the alcohol, C 1 to C 2 lower alcohols are preferably used, and as the lower alcohol, ethanol or methanol is preferably used. As the extraction method, it is preferable to use shaking extraction, Soxhelt extraction or reflux extraction, but not limited thereto. The extraction solvent is preferably added by 1 to 10 times the amount of the dried soft flesh, more preferably by 2 to 3 times the extraction. The extraction temperature is preferably 20 ° C to 100 ° C, and most preferably 20 ° C to 50 ° C, but is not limited thereto. The extraction time is preferably 1 to 48 hours, more preferably 2 to 10 hours, most preferably 2 to 5 hours, but is not limited thereto. The number of times of extraction is preferably 1 to 5 times, more preferably 3 to 4 times, more preferably 3 times, but is not limited thereto.

본 발명의 제조방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. In the production method of the present invention, it is preferable to use a vacuum decompression concentrator or a vacuum rotary evaporator for the decompression concentration in step 3), but it is not limited thereto. The drying is preferably performed under reduced pressure, vacuum drying, boiling, spray drying or freeze drying, but not always limited thereto.

상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 지방간, 고지혈증 및 동맥경화증으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.The metabolic disease may be any one selected from the group consisting of obesity, diabetes, fatty liver, hyperlipidemia, and arteriosclerosis, but is not limited thereto.

본 발명의 연자육 추출물의 대사성 질환 예방 및 치료용 조성물로서의 효능을 확인하기 위하여, 연자육의 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출물을 수득하였다(실시예 1 참조).In order to confirm the efficacy of the pomegranate extract of the present invention as a composition for the prevention and treatment of metabolic diseases, an extract was obtained by using alcohol as a solvent or a mixture thereof as a solvent (see Example 1).

또한, 본 발명의 연자육 추출물의 대사성 질환의 하나인 복부 비만의 예방 및 치료에의 효과를 알아보기 위하여, 본 발명의 연자육 추출물을 분화된 인간 지방세포에 처리하였을 때, 지방세포 분화시 지방생성을 억제하는 것을 확인하였다(도 1 참조). 일반적으로 지방전구세포에서 성숙지방세포로의 분화는 복잡한 단계를 거치게 되며 관련된 여러 조절인자들의 발현 촉진과정을 거치게 된다. 이러한 분화과정에서 중추적인 역할을 하는 것 중의 하나가 유전자 전사조절인자인 퍼옥시좀 증식인자 활성수용체-감마(PPAR-γ)이다. PPAR-γ는 지방세포의 성숙분화를 담당하는 유전자의 발현을 제어하고 있으며, 글루코스 수송체 4(GLUT4)와 렙틴(leptin)은 지방세포분화의 최종단계의 마커로서 알려져 있다. 본 발명의 연자육 추출물 처리시 PPAR-γ와 같은 지방세포 형성에 관여하는 전사인자와 GLUT4, leptin과 같은 지방세포 마커 유전자의 발현을 억제하는 효과를 확인하였다(도 2 참조). In addition, in order to examine the effect of the present invention on the prevention and treatment of abdominal obesity, which is one of the metabolic diseases of the present invention, when the extract of the present invention is applied to differentiated human adipocytes, (See Fig. 1). In general, the differentiation from adipocyte precursor cells into mature adipocytes leads to complicated steps and promotes the expression of various related regulators. One of the pivotal roles in this differentiation process is the peroxisome proliferator-activated receptor-gamma (PPAR-γ), a gene transcription regulator. PPAR-γ controls the expression of genes responsible for the differentiation of adipocytes. Glucose transporter 4 (GLUT4) and leptin are known as markers in the final stage of adipocyte differentiation. The effect of the present invention on the expression of transcription factors involved in adipocyte formation such as PPAR-γ and the expression of adipocyte marker genes such as GLUT4 and leptin was observed (see FIG. 2).

또한, 본 발명의 연자육 추출물을 고지방 식이군 Sprague-Dawley 수컷 쥐에게 경구 투여하고 지방 조직 무게를 측정한 결과, 부고환지방량은 고지방 식이군이 정상식이군에 비해 유의적으로 많았으나 연자육군은 고지방 식이군에 비해 유의적으로 낮았고, 후복막지방량은 고지방 식이군과 연자육군이 정상 식이군에 비해 유의적으로 많은 것을 확인하였다(도 3 참조).In addition, the extract of the present invention was orally administered to Sprague-Dawley male rats in a high fat diet group and the weight of fat tissue was measured. As a result, epididymal fat mass was significantly higher in the high fat diet group than in the normal fat group, , And the amount of retroperitoneal fat was significantly higher in the high fat diet group and the soft fat arm group than in the normal diet group (see FIG. 3).

아울러, 본 발명의 연자육 추출물을 고지방 식이군 Sprague-Dawley 수컷 쥐에게 경구 투여하고 혈중 지질 농노를 측정한 결과, 고지방 식이군의 총콜레스테롤 함량은 정상 식이군보다 유의적으로 높았으나 연자육군은 고지방 식이군에 비해 유의적으로 낮았고, 고지방 식이군의 중성지방 함량은 정상 식이군보다 유의적으로 높았으나 연자육군에서는 정상 식이군과 고지방 식이군보다 유의적으로 낮은 것을 확인하였다(도 4 참조).The total cholesterol content of the high fat diet group was significantly higher than that of the normal diet group, whereas the soft fat arm diet was higher in the high fat diet group than in the normal diet group, as a result of oral fat administration of the extract of the present invention to male Sprague-Dawley rats The triglyceride content of the high fat dietary group was significantly higher than that of the normal dietary group, but it was significantly lower in the soft arm group than in the normal dietary group and the high fat dietary group (see FIG. 4).

따라서, 본 발명의 연자육 추출물은 지방세포 분화 및 관련 유전자의 발현을 억제하여 성숙한 지방세포로의 분화 및 지방 축적을 억제하고, 고지방 식이를 한 쥐에서 복부지방 저하와 혈중 지질농도 개선 효과를 보이므로, 대사성 질환 예방 및 치료용 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
Therefore, the extract of the pineal gland of the present invention inhibits the differentiation of adipocytes and expression of related genes, inhibits differentiation into adipocytes and inhibits fat accumulation, and exhibits an effect of lowering abdominal fat and improving blood lipid concentration in a high fat diet- And may be useful as a composition for preventing and treating metabolic diseases.

발명의 조성물은 경구 또는 비경구 투여(예를 들어, 도포 또는 정맥 내, 피하, 복강 내 주사)할 수 있으나 경구 투여가 바람직하다. 비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 멸균된 수용액, 액제, 비수성용제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플 라스마제의 피부 외용 약학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다. 국소 투여의 조성물은 임상적 처방에 따라 무수형 또는 수성형일 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 연질캅셀제, 환 등이 포함된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 에어로졸 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.The compositions of the invention may be administered orally or parenterally (e. G., Coated or intravenously, subcutaneously, or intraperitoneally), but oral administration is preferred. As the agent for parenteral administration, the external preparation such as powders, granules, tablets, capsules, sterilized aqueous solutions, liquid preparations, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, syrups, suppositories and aerosols, The composition may be formulated in the form of a cream, a gel, a patch, a spray, an ointment, a warning agent, a lotion, a liniment, a pasta or a cataplasm. However, the present invention is not limited thereto. The composition for topical administration may be anhydrous or water-based, depending on the clinical formulation. Examples of the suspending agent include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like. Examples of suppository bases include witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin, glycerogelatin, and the like. Solid form preparations for oral administration include powders, granules, tablets, capsules, soft capsules, and the like. Examples of liquid formulations for oral use include suspensions, solutions, emulsions, syrups and aerosols. In addition to water and liquid paraffin, which are commonly used simple diluents, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances and preservatives .

상기 조성물은 투여를 위해서 연자육 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형 등으로 제제화할 수 있다.The composition may be prepared by incorporating at least one pharmaceutically acceptable carrier in addition to the active ingredients for parenteral administration for administration. The pharmaceutically acceptable carrier may be a mixture of saline, sterilized water, Ringer's solution, buffered saline, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol and one or more of these components. If necessary, an antioxidant, , And other conventional additives such as a bacteriostatic agent may be added. In addition, a diluent, a dispersant, a surfactant, a binder, and a lubricant may be additionally added to formulate the composition for injectable use such as an aqueous solution, a suspension or an emulsion.

본 발명에 따른 약제학적으로 허용가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1~90 중량부 포함되는 것이 바람직하다.The pharmaceutically acceptable additives according to the present invention are preferably contained in an amount of 0.1 to 90 parts by weight based on the composition.

본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 환자의 연령, 성별 및 비만의 정도에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 경구 투여제의 경우 일반적으로 성인에게 1일에 체중 1㎏당 본 발명의 조성물을 1일 0.0001 내지 100 ㎎/㎏으로, 바람직하게는 0.001 내지 100 ㎎/㎏으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.The preferred dosage of the composition of the present invention varies depending on the degree of absorption of the active ingredient in the body, the age of the patient, the sex, and the degree of obesity, but can be appropriately selected by those skilled in the art. However, in order to obtain the desired effect, in the case of an oral administration agent, it is generally practiced to administer the composition of the present invention to an adult at a dose of 0.0001 to 100 mg / kg per day, preferably 0.001 to 100 mg / kg per kilogram of body weight per day good. The administration may be carried out once a day or divided into several times. The dose is not intended to limit the scope of the invention in any way.

본 발명의 대사성 질환 치료용 조성물은 연자육 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. The composition for treating metabolic diseases of the present invention may contain one or more active ingredients which exhibit the same or similar functions in addition to the pome fruit extract.

아울러, 본 발명은 연자육 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 및 개선용 건강식품을 제공한다.In addition, the present invention provides a health food for prevention and improvement of metabolic diseases containing an extract of pomegranate juice as an active ingredient.

본 발명의 유효성분인 연자육 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다: The fruit juice extract as an active ingredient of the present invention is preferably, but not limited to, prepared by a method comprising the steps of:

1) 연자육에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;1) extracting pectin by adding an extraction solvent;

2) 단계 1)의 추출물을 여과하는 단계;2) filtering the extract of step 1);

3) 단계 2)의 여과물을 감압 농축하는 단계; 및3) concentrating the filtrate of step 2) under reduced pressure; And

4) 단계 3)의 농축물을 건조하는 단계.4) drying the concentrate of step 3).

본 발명의 제조방법에 있어서, 단계 1)의 연자육은 재배한 것 또는 시판되는 것을 제한없이 사용할 수 있다. In the production method of the present invention, the livestock meat of step 1) may be cultivated or commercially available.

본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 단계 1)의 추출용매는 물, 알코올 또는 이의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 알코올로는 C1 내지 C2의 저급 알코올 이용하는 것이 바람직하며, 저급 알코올로는 에탄올 또는 메탄올을 이용하는 것이 바람직하다. 추출방법으로는 진탕추출, Soxhelt 추출 또는 환류 추출을 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 상기 추출용매를 건조된 연자육 분량의 1 내지 10배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 2 내지 3배 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하다. 추출 온도는 20℃ 내지 100℃인 것이 바람직하며, 20℃ 내지 50℃인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 또한 추출시간은 1 내지 48시간이 바람직하며, 2 내지 10시간이 더욱 바람직하고, 2 내지 5시간이 가장 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 아울러 추출 횟수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 3 내지 4회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하고, 3회인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.In the production method of the present invention, it is preferable to use water, an alcohol or a mixture thereof as the extraction solvent in the step 1). As the alcohol, C 1 to C 2 lower alcohols are preferably used, and as the lower alcohol, ethanol or methanol is preferably used. As the extraction method, it is preferable to use shaking extraction, Soxhelt extraction or reflux extraction, but not limited thereto. The extraction solvent is preferably added by 1 to 10 times the amount of the dried soft flesh, more preferably by 2 to 3 times the extraction. The extraction temperature is preferably 20 ° C to 100 ° C, and most preferably 20 ° C to 50 ° C, but is not limited thereto. The extraction time is preferably 1 to 48 hours, more preferably 2 to 10 hours, most preferably 2 to 5 hours, but is not limited thereto. The number of times of extraction is preferably 1 to 5 times, more preferably 3 to 4 times, more preferably 3 times, but is not limited thereto.

본 발명의 제조방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.In the production method of the present invention, it is preferable to use a vacuum decompression concentrator or a vacuum rotary evaporator for the decompression concentration in step 3), but it is not limited thereto. The drying is preferably performed under reduced pressure, vacuum drying, boiling, spray drying or freeze drying, but not always limited thereto.

상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 지방간, 고지혈증 및 동맥경화증으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.The metabolic disease may be any one selected from the group consisting of obesity, diabetes, fatty liver, hyperlipidemia, and arteriosclerosis, but is not limited thereto.

본 발명의 연자육 추출물을 고지방식이와 함께 쥐에게 먹였을 때, 체중의 감소, 복부 지방 감소 효과를 보이며, 혈중의 지질 감소효과를 보이므로, 연자육 추출물을 대사성 질환 예방 및 개선용 건강식품으로 사용될 수 있다.
When the extract of the present invention is fed to rats along with high fat diet, it exhibits the effect of reducing body weight, reducing abdominal fat, and exhibiting lipid-lowering effect in blood, so that the extract of prawn is used as a health food for prevention and improvement of metabolic diseases .

본 발명의 연자육 추출물은 식품학적으로 허용된 담체와 혼합하여 식품 조성물로서 제공될 수 있다.The pomegranate extract of the present invention can be provided as a food composition by mixing with a pharmaceutically acceptable carrier.

본 발명의 연자육 추출물을 식품 또는 음료 첨가물로 사용할 경우, 상기 연자육 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 상기 연자육 추출물의 혼합양은 그의 사용목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우, 상기 연자육 추출물은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에, 장기간 복용이 가능하다. 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿류, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있다. 음료수로 제형화할 경우에 연자육 추출물 이외에 첨가되는 액체 성분으로는 이제 한정되지는 않으나, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드(예, 포도당, 과당 등), 디사카라이드(예, 말토오스, 수크로오스 등) 및 폴리사카라이드(예, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당), 및 자일리톨, 소르비톨, 에리스리톨 등의 당 알코올이다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제[타우마린, 스테비아 추출물(예, 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)] 및 합성 향미제(예, 사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.When the pomegranate extract of the present invention is used as a food or beverage additive, the pomegranate extract may be directly added or used together with other food or food ingredients, and may be suitably used according to a conventional method. The mixing amount of the livestock meat extract may be suitably determined according to its use purpose (prevention, health or therapeutic treatment). In the case of long-term intake for the purpose of health and hygiene, or for the purpose of controlling health, the above-mentioned extract of the pomegranate is safe and can be taken for a long period of time. There is no particular limitation on the kind of the food. Examples of foods to which the above substances can be added include dairy products including meat, sausage, bread, chocolate, candy, snack, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, soups, drinks, tea, , Alcoholic beverages and vitamin complexes. When formulated into beverage, the liquid ingredient to be added in addition to the extract of prawn extract is not limited to any one, but may include various flavors or natural carbohydrates as an additional ingredient such as ordinary beverages. Examples of such natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose and polysaccharides such as those commonly used in dextrin and cyclodextrins, , Sorbitol, and erythritol. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 to 20 g, preferably about 5 to 12 g per 100 ml of the composition of the present invention. Natural flavors such as taumarin and stevia extract (e.g., rebaudioside A and glycyrrhizin) and synthetic flavorings (e.g., saccharin, aspartame, etc.) can be used as flavors other than those described above .

다른 양태로서, 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 또한 본 발명의 식품 조성물은 과일 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 단독으로 또는 조합으로 사용될 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율은 조성물 전체 중량당 0.001 내지 50 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
In another aspect, the food composition of the present invention may be formulated into various flavors such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, colorants and enhancers (cheese, chocolate etc.), pectic acid and its salts, , Protective colloid thickening agents, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks, and the like. The food composition of the present invention may also contain pulp for the production of fruit and vegetable drinks. These components may be used singly or in combination, and the proportion of such additives is generally selected in the range of 0.001 to 50 parts by weight based on the total weight of the composition.

이하, 본 발명을 실시예, 실험예 및 제조예에 의하여 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples, Experimental Examples and Production Examples.

단, 하기 실시예, 실험예 및 제조예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것이며, 본 발명의 내용이 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 한정되는 것은 아니다.
However, the following Examples, Experimental Examples and Preparation Examples illustrate the present invention concretely, and the contents of the present invention are not limited by Examples, Experimental Examples and Production Examples.

<< 실시예Example 1>  1> 연자육Mature meat 추출물의 제조 Preparation of extract

건조한 연자육(경기도 시흥시에서 구입) 1.4 kg을 잘게 파쇄한 후, 2.0 g/100 ㎖의 비율로 70% 에탄올 7ℓ로 50℃의 중탕에서 2시간 동안 추출한 후, 추출물을 감압여과시킨 후, 회전식 증발기(rotary vacuum evaporator)를 이용하여 수분을 제거한 후, 건조 과정을 거쳐 6.83%의 수율로 총 96.4657g을 수득하였다. 하기 <실험예 2>에 사용할 때에는 건조한 시료를 400 ㎎/kg 체중으로 식염수에 섞어 경구투여한다.
After 1.4 kg of dry poultry meat (purchased from Siheung City, Gyeonggi-do) was finely crushed, it was extracted with 7 liters of 70% ethanol at a rate of 2.0 g / 100 ml for 2 hours in a hot water bath at 50 ° C. The extract was filtered under reduced pressure, After removing water using a rotary vacuum evaporator, the dried product was subjected to a drying process to obtain a total of 96.4657 g at a yield of 6.83%. In the following <Experimental Example 2>, a dry sample is mixed with 400 mg / kg body weight in saline and then orally administered.

<< 실험예Experimental Example 1>  1> 연자육Mature meat 추출물의 지방세포에서의 분화 및 지방 축적 억제효과 확인 Identification of the differentiation and fat accumulation inhibitory effects of the extract on fat cells

<1-1> 지방 분화 억제효과 확인<1-1> Confirmation of inhibitory effect on lipid differentiation

연자육 추출물의 지방세포에서의 분화에 대한 효과를 확인하기 위하여, 인간 지방전구세포(Human preadipocyte)를 지방세포(adipocyte)로 분화유도하면서 연자육 에탄올 추출물을 농도별로 처리하여 지방세포 분화 억제 효과를 비교하였다. In order to confirm the effects of the extracts of pine needle cultures on adipocyte differentiation, human adipocyte was induced to differentiate into human adipocyte, and the effect of ethanol extract of soft - .

인간(Human) 지방전구세포(Cell Applications Inc., 미국) 지방전구세포 배양 배지 키트(preadipocyte growth medium Kit)(Cell Applications Inc., 미국)를 이용하여 6-웰 플레이트(6-well plates)에 1.8×105 cell/well의 세포를 2 ㎖씩 분주하여 컨플루엔트(confluent) 상태가 될 때까지 37℃, 5%로 이산화탄소가 공급되는 세포배양기에서 배양하였다. 상기 지방전구 세포를 지방세포 분화를 위해 배양했던 배지를 지방세포 분화 배지(adipocyte differentiation medium)(Cell Applications Inc., 미국)로 바꾸어 2주 동안 배양하였다. 그리고, 상기 지방세포로 분화유도하면서 본 발명의 연자육 에탄올 추출물을 0, 25, 50, 100 ㎍/㎖의 농도별로 처리하여 지방세포 분화 억제 효과를 확인하였다. 또한, 분화가 완료된 지방세포에서 Oil red O 염색을 통해 지방 축적의 여부를 확인하였다. 상기 분화가 완료된 지방세포를 10% 포름알데히드(formaldehyde) 인산완충염 용액으로 1시간 동안 고정시킨 후, 상기 세포를 인산완충염 용액(PBS)로 세척하였다. 상기 고정된 세포를 Oil Red O(Sigma 사, 미국)가 있는 60% 이소프로판올(isopropanol) 용액으로 2시간동안 염색하였다. 상기 염색된 세포는 세포질내 붉은색 과립이 있는 세포를 분화된 지방세포로 간주하고, 광학현미경을 이용하여 관찰하였고 사진 촬영하였다. 또한, 상기 세포에 염색된 Oil Red O를 이소프로판올 용액으로 녹여내어 흡광기를 사용해서 510 ㎚의 분석 조건에서 흡광도 측정하였다.The cells were grown in 6-well plates using human preadipocyte growth medium kit (Cell Applications Inc., USA) in a human preadipocyte (Cell Applications Inc., USA) 1.8 Cells of × 10 5 cells / well were dispensed in 2 ml portions and cultured in a cell incubator in which carbon dioxide was supplied at 37 ° C and 5% until confluent state was obtained. The adipocyte differentiation medium (Cell Applications Inc., USA) was used to culture the adipocyte precursor cells for adipocyte differentiation and cultured for 2 weeks. Then, the ethanol extract of the present invention was treated at different concentrations of 0, 25, 50 and 100 μg / ml to induce differentiation into adipocytes, thereby confirming the effect of inhibiting adipocyte differentiation. In addition, fat accumulation was confirmed by staining Oil red O in differentiated adipocytes. The differentiated adipocytes were fixed with 10% formaldehyde phosphate buffered saline for 1 hour, and the cells were washed with phosphate buffered saline (PBS). The fixed cells were stained with 60% isopropanol solution with Oil Red O (Sigma, USA) for 2 hours. The cells stained with red granules in the cytoplasm were regarded as differentiated adipocytes and observed using an optical microscope and photographed. In addition, the cells were dyed with Oil Red O dissolved in isopropanol solution, and the absorbance was measured at 510 nm using an absorbance spectrometer.

그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 연자육 에탄올 추출물을 첨가한 실험군에서 농도 의존적으로 지방구가 감소되는 것을 확인하였다(도 1A). 지질 축적을 정량적으로 조사하기 위하여 지방구를 염색한 Oil red O 염색 성분을 용해시킨 후 흡광도를 측정한 결과도 유의적으로 농도의존적으로 흡광도가 감소하여 지질축적이 감소가 되었음을 확인하였다(도 1B).As a result, as shown in Fig. 1, it was confirmed that the fat pool was decreased in a concentration-dependent manner in the experimental group to which the ethanol extract of mature flesh was added (Fig. 1A). In order to quantitatively investigate lipid accumulation, it was confirmed that the lipid accumulation was decreased due to the decrease of the absorbance in a concentration-dependent manner as a result of measuring the absorbance after dissolving the oil red O dyeing component stained with lipid spheres (FIG. 1B) .

<1-2> 지방 형성 관련 유전자 발현 억제효과 확인<1-2> Confirmation of gene expression-related inhibitory effect on lipogenesis

연자육 추출물의 지방 형성 관련 유전자 발현 억제효과 확인하기 위하여, 상기 실시예 <1-1>의 연자육 추출물을 농도별로 처리한 분화된 지방세포에서 RT-PCR방법 (TAKARA cDNA 합성 키트)을 사용해서 지방 형성 관련 유전자 발현정도를 비교하였다. 이를 위해 먼저, 상기 연자육 추출물을 농도별로 처리한 분화된 지방세포를 Trizol(Invitrogene, 미국)시약을 이용해 총 RNA를 추출하였다. 총 RNA를 분리한 후, 랜덤 프라이머(random 9 mers)를 사용해서 첫 번째 가닥 cDNA를 역전사했고 (95℃에서 5분, 42℃에서 60분, 72℃에서 10분) 상기 cDNA는 유전자 특이적 프라이머를 사용해서 PCR (ppar-γ 유전자;95℃에서 45초, 55℃에서 45초 및 72℃에서 45초(28 cycles), leptin 유전자;95℃에서 45초, 59℃에서 45초 및 72℃에서 45초(35 cycle), GLUT4 유전자;95℃에서 45초, 62℃에서 45초 및 72℃에서 45초(35 cycle))로 PPAR-γ, Leptin, GLUT4 유전자를 증폭했다. 상기 증폭된 1의 cDNA를 하기 표 1에 기재된 서열번호 1 내지 8의 프라이머(primers)를 이용하여 PCR 반응시킨 후 1.5% 아가로스 겔(agarose gel)에 전기영동한 후 EtBr로 염색하여 UV에서 확인하였다.In order to confirm the effect of suppressing lipogenesis-related gene expression in extracts of prawn cultures, the fat-derived extracts of the cultured extract of livestock of Example <1-1> were cultured in differentiated adipocytes using an RT-PCR method (TAKARA cDNA synthesis kit) The relative gene expression levels were compared. For this purpose, the total RNA was extracted from the differentiated adipocytes obtained by treating the extracts of livestock meat with different concentrations using a Trizol (Invitrogene, USA) reagent. After isolating the total RNA, the first strand cDNA was reverse transcribed using a random primer (random 9 mers) (5 min at 95 ° C, 60 min at 42 ° C, 10 min at 72 ° C) (45 cycles of 45 seconds at 95 ° C, 45 seconds at 55 ° C and 45 seconds at 72 ° C (28 cycles), 45 seconds at 95 ° C, 45 seconds at 59 ° C and 72 ° C using the PPAR- Leptin and GLUT4 genes were amplified with 45 sec (35 cycles), GLUT4 gene; 45 sec at 95 ° C, 45 sec at 62 ° C and 35 sec at 72 sec. The amplified cDNA of 1 was PCR-amplified using primers of SEQ ID NOS: 1 to 8 shown in the following Table 1, electrophoresed on 1.5% agarose gel, stained with EtBr, Respectively.

그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 연자육 추출물 처리시 지방 형성에 관련하는 퍼옥시좀 증시인자-활성화 수용체-감마(PPAR-γ), 렙틴(leptin), 글루코스 수송체 4(GLUT4) 유전자가 모두 100 ㎍/㎖ 농도의 연자육 추출물 처리에서 유전자 mRNA의 발현이 억제됨을 확인하였다(도 2). As a result, as shown in Fig. 2, the peroxisomegaly factor-activated receptor-gamma (PPAR-gamma), leptin and glucose transporter 4 (GLUT4) It was confirmed that the expression of gene mRNA was inhibited in the treatment of pine needle extract at a concentration of 100 μg / ml (FIG. 2).

Figure pat00001
Figure pat00001

<< 실험예Experimental Example 2>  2> 연자육Mature meat 추출물의 생체 내에서의 효과 확인 Identification of the efficacy of the extract in vivo

본 발명의 연자육 추출물의 생체 내에서의 효과를 확인하기 위하여, Sprague-Dawley 수컷 쥐(4 주령)를 구입(코아텍, 한국)하여 1주일간 적응시킨 후 정상 식이군(10마리), 고지방 식이군 군(20마리)으로 나누어 7주간 사육 후, 고지방 식이군은 다시 무작위로 고지방 식이군(10마리)과 연자육군(10마리)으로 나누어 7주간 사육하였다. 상기 연자육군은 연자육 에탄올 추출물을 각 체중 당 400 ㎎/㎏의 수준으로 7주간 매일 경구 투여를 하였다. 본 발명에서 사용한 실험 식이의 기본조성은, 하기 표 2에 기재된 바와 같이, AIN-93에 기준하여 조제하였다(표 2).Sprague-Dawley male rats (4 weeks old) were purchased (Koatech, Korea) for 1 week to adjust the in vivo effects of the prawn extract of the present invention. (10 rats) and litter army (10 rats) were randomly assigned to high fat diet group (10 rats) for 7 weeks. The litter army was orally administered daily at a level of 400 mg / kg body weight of ethanol extract of mature flesh for 7 weeks. The basic composition of the experimental diet used in the present invention was prepared based on AIN-93 as shown in Table 2 (Table 2).

Figure pat00002
Figure pat00002

<< 실험예Experimental Example 3>  3> 연자육Mature meat 추출물의 지방 축적 억제효과 확인 Identification of inhibitory effect of extract on fat accumulation

연자육 추출물의 지방 축적 억제효과를 확인하기 위하여, 상기 <실시예 2>의 실험동물을 부검하여 복부 지방을 적출하여 무게를 비교하였다. 실험동물의 혈액은 실험기간 종료 전 12시간 절식시킨 후 에테르(ether)로 마취시켜 심장으로부터 채혈하였다. 채혈한 혈액은 원심분리관에 담아 3000 rpm에서 20분간 원심분리하여 혈청을 분리하였고, 분리된 혈청은 영하 70℃에서 분석시까지 냉동보관하였다. 상기의 방법에 따라 혈액을 채취한 후 즉시 부고환지방(epididymal fat)과 후복막지방(retroperitoneal fat)을 분리하여 무게 측정하였다.In order to confirm the effect of suppressing the fat accumulation of the prawn extract, the experimental animals of Example 2 were autopsied and the abdominal fat was extracted and compared. The blood of the experimental animals was fasted for 12 hours before the end of the experiment period and then anesthetized with ether to collect blood from the heart. The collected blood was centrifuged at 3000 rpm for 20 minutes in a centrifuge tube, and the serum was separated and kept frozen at minus 70 ° C until analysis. Immediately after collecting blood according to the above method, epididymal fat and retroperitoneal fat were separated and weighed.

그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, 부고환지방량은 고지방 식이군이 정상식이군에 비해 유의적으로 많았으나 연자육군은 고지방식이군에 비해 유의적으로 낮았고, 후복막지방량은 고지방 식이군과 연자육군이 정상식이군에 비해 유의적으로 많은 것을 확인하였다(도 3).
As a result, as shown in FIG. 3, the epinephrine fat mass was significantly higher in the high fat diet group than in the normal fat group, but the soft fat arm group was significantly lower than the high fat diet group, (Fig. 3).

<< 실험예Experimental Example 4>  4> 연자육Mature meat 추출물의 혈중 지질 농도 개선효과 확인 Identification of the effect of extract on blood lipid concentration

연자육 추출물의 지질 농도 개선효과를 확인하기 위하여, 상기 <실험예 3>의 방법에 따라 분리된 혈청의 지질 농도를 측정하여 확인하였다. 상기 혈청 지질의 농도는 중성지방, 총 콜레스테롤 농도를 자동분석기(Kuadro, 이탈리아)를 이용해 측정하였다.In order to confirm the effect of improving the lipid concentration of the prawn extract, the lipid concentration of the separated serum was measured and confirmed by the method of <Experiment 3>. The serum lipid concentration was measured using an automatic analyzer (Kuadro, Italy) for the concentration of triglyceride and total cholesterol.

그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, 고지방식이군의 총 콜레스테롤 함량은 정상식이군보다 유의적으로 높았으나 연자육군은 고지방식이군에 비해 유의적으로 낮았고, 고지방식이군의 중성지방 함량은 정상식이군보다 유의적으로 높았으나 연자육군에서는 정상식이군과 고지방식이군보다 유의적으로 낮은 것을 확인하였다(도 4).
As a result, as shown in FIG. 4, the total cholesterol content of the high-fat diet group was significantly higher than that of the normal diet group, but that of the soft fat arm group was significantly lower than that of the high fat diet group and the triglyceride content of the high fat diet group was in the normal diet (Fig. 4). However, it was significantly lower than that of the normal group and the high-fat group (Fig. 4).

<< 제조예Manufacturing example 1> 약학적 제제의 제조 1> Preparation of pharmaceutical preparations

<1-1> <1-1> 산제의Sanje 제조 Produce

본 발명의 연자육 추출물 2 g2 g of the prawn extract of the present invention

유당 1 gLactose 1 g

상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
The above components were mixed and packed in airtight bags to prepare powders.

<1-2> 정제의 제조<1-2> Preparation of tablets

본 발명의 연자육 추출물 100 ㎎100 mg of the pine nut extract of the present invention

옥수수전분 100 ㎎Corn starch 100 mg

유 당 100 ㎎100 mg of milk

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg of magnesium stearate

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
After mixing the above components, tablets were prepared by tableting according to a conventional method for producing tablets.

<1-3> 캡슐제의 제조&Lt; 1-3 > Preparation of capsules

본 발명의 연자육 추출물 100 ㎎100 mg of the pine nut extract of the present invention

옥수수전분 100 ㎎Corn starch 100 mg

유 당 100 ㎎100 mg of milk

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg of magnesium stearate

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
After mixing the above components, the capsules were filled in gelatin capsules according to the conventional preparation method of capsules.

<1-4> 환의 제조&Lt; 1-4 >

본 발명의 연자육 추출물 1 g1 g of the prawn extract of the present invention

유당 1.5 gLactose 1.5 g

글리세린 1 gGlycerin 1 g

자일리톨 0.5 g0.5 g of xylitol

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1 환 당 4 g이 되도록 제조하였다.
After mixing the above components, they were prepared so as to be 4 g per one ring according to a conventional method.

<1-5> 과립의 제조<1-5> Preparation of granules

본 발명의 연자육 추출물 150 ㎎150 mg of the pomegranate extract of the present invention

대두 추출물 50 ㎎Soybean extract 50 mg

포도당 200 ㎎200 mg of glucose

전분 600 ㎎600 mg of starch

상기의 성분을 혼합한 후, 30% 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 60에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.
After mixing the above components, 100 mg of 30% ethanol was added and dried at 60 to form granules, which were then filled in a capsule.

<< 제조예Manufacturing example 2> 식품의 제조 2> Manufacturing of food

<2-1> 과자 및 분식의 제조<2-1> Manufacture of confectionery products

본 발명의 연자육 추출물 0.5~5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
0.5-5.0 parts by weight of the extract of the pine needle of the present invention was added to wheat flour and the mixture was used to prepare breads, cakes, cookies, crackers and noodles to prepare foods for health promotion.

<2-2> 유제품의 제조<2-2> Manufacture of dairy products

본 발명의 연자육 추출물 5~10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
5 to 10 parts by weight of the pomegranate extract of the present invention was added to milk, and various dairy products such as butter and ice cream were prepared using the milk.

<2-3> <2-3> 선식의Solar 제조 Produce

현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다. 검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.Brown rice, barley, glutinous rice, and yulmu were dried by a known method and dried, and the mixture was granulated to a powder having a particle size of 60 mesh. Black soybeans, black sesame seeds, and perilla seeds were steamed and dried by a conventional method, and then they were prepared into powder having a particle size of 60 mesh by a pulverizer.

본 발명의 연자육 추출물을 진공 농축기에서 감압 농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다. 상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 연자육 추출물의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.The pomegranate extract of the present invention was concentrated under reduced pressure in a vacuum concentrator, dried by spraying, and dried in a hot-air drier, and pulverized to a size of 60 mesh with a pulverizer to obtain a dry powder. The dry powders of the cereal grains, seeds, and prawn extracts prepared above were blended in the following proportions.

곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부),(30 parts by weight of brown rice, 15 parts by weight of yulmu, 20 parts by weight of barley)

종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부),Seeds (7 parts by weight of perilla, 8 parts by weight of black beans, 7 parts by weight of black sesame seeds)

본 발명의 연자육 추출물의 건조분말(3 중량부),The dried powder (3 parts by weight) of the pine needle extract of the present invention,

영지(0.5 중량부), 및 지황(0.5 중량부)
(0.5 part by weight), and rhizome (0.5 part by weight)

<< 제조예Manufacturing example 3> 음료의 제조 3> Manufacturing of beverage

본 발명의 연자육 추출물 1000 ㎎1000 mg of the pine nut extract of the present invention

구연산 1000 ㎎Citric acid 1000 mg

올리고당 100 g100 g of oligosaccharide

매실농축액 2 gPlum concentrate 2 g

타우린 1 gTaurine 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖Purified water was added to a total of 900 ml

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강식품 제조에 사용한다.The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was stirred and heated at 85 ° C for about 1 hour. The resulting solution was filtered to obtain a sterilized 2-liter container, which was sealed and sterilized, It is used in the manufacture of health food of the invention.

상기 조성비는 비교적 기호 음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Although the composition ratio is a mixture of the components suitable for the preferred beverage as a preferred embodiment, the blending ratio may be arbitrarily varied according to the regional and national preferences such as the demand level, the demanding country, and the intended use.

Claims (8)

연자육(Nelumbo nucifera seed) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
Nectarine ( Nelumbo nucifera seed extract as an active ingredient for the prevention and treatment of metabolic diseases.
제 1항에 있어서, 상기 연자육 추출물은 C1 내지 C2의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것을 특징으로 하는 대사성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
2. The method of claim 1, To C 2 lower alcohol, or a mixed solvent thereof.
제 2항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 대사성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
[Claim 3] The pharmaceutical composition according to claim 2, wherein the lower alcohol is ethanol or methanol.
제 1항에 있어서, 상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 지방간, 고지혈증 및 동맥경화증으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 대사성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the metabolic disease is any one selected from the group consisting of obesity, diabetes, fatty liver, hyperlipidemia, and arteriosclerosis.
연자육 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 및 개선용 건강식품.
A health food for prevention and improvement of metabolic diseases containing extract of green tea as an active ingredient.
제 5항에 있어서, 상기 연자육 추출물은 C1 내지 C2의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것을 특징으로 하는 대사성 질환 예방 및 개선용 건강식품.
The method of claim 5, wherein the extract is C 1 yeonjayuk To C 2 lower alcohol or a mixed solvent thereof.
제 2항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 대사성 질환 예방 및 개선용 건강식품.
The health food for preventing and improving metabolic diseases according to claim 2, wherein the lower alcohol is ethanol or methanol.
제 5항에 있어서, 상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 지방간, 고지혈증 및 동맥경화증으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 대사성 질환 예방 및 개선용 건강식품.[Claim 6] The health food according to claim 5, wherein the metabolic disease is any one selected from the group consisting of obesity, diabetes, fatty liver, hyperlipidemia and arteriosclerosis.
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