KR20130102215A - 트라넥사믹산을 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 트라넥사믹산을 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 조성물은 안전하고 아토피성 피부염의 치료에 유용하다.

Description

트라넥사믹산을 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물{COMPOSITION CONTAINING TRANEXAMIC ACID FOR TREATING ATOPIC DERMATITIS}

본 발명은 트라넥사믹산을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물에 관한 것이다.

아토피성 피부염(atopic dermatitis)은 정상인에게는 해가 되지 않은 유발인자들에 피부가 과민반응상태를 보임으로써 만성적으로 피부에 염증이 생기는 질병이다. 즉 아토피성 피부염은 세균, 바이러스, 곰팡이 등에 의한 감염, 꽃가루 등과 같은 특정물질, 음식물, 인공적 화학물질 등에 면역 체계가 과민반응하여 발생하는 것으로 알려져 있다.

이러한 면역반응에는 T 세포가 관여하며 T 세포가 분비하는 사이토카인은 통상 Th1 사이토카인 및 Th2 사이토카인의 두 가지 유형으로 나뉜다. Th1 사이토카인은 세포매개형 면역반응에 관여하고 Th2 사이토카인은 항체 면역반응을 담당하는데, 아토피성 피부염이나 다른 알레르기 질환은 모두 이러한 두 사이토카인의 균형이 파괴되어 인터루킨-4(IL-4), IL-5, IL-13 등과 같은 Th2 사이토카인 분비가 과다 형성되고 이로 인해 길항적으로 Th1 세포가 분비하는 인터페론-γ(IFN-γ)과 같은 Th1 사이토카인의 분비가 감소한다(Jujo K. 등, Decreased interferone gamma and increased interleukin-4 production in atopic dermatitis promotes IgE synthesis. J Allergy Clin Immunol 1992; 90: 323-31 및 Tang ML. 등, Interleukin-4 and interferone-γ production in atopic and non-atopic children with asthma. Clin Exp Allergy 1995; 25: 515-21 참조).

또한 대부분의 아토피성 피부염 환자들의 피부에는 황색포도상구균이 매우 많이 군집하고 있는데 대략 10⁷ CFU/㎠으로서 정상인에 비해 200배나 높은 수치이다. 이러한 균 때문에 계속 면역글로불린 E(IgE)가 만들어지고, 이들 세균이 분비하는 세라미데이스(ceramidase)는 피하의 보습능력을 유지하게 하는 세라마이드(ceramide)를 분해시켜 지속적으로 가려움을 유도하기 때문에 피부염을 악화시킨다. Th2 사이토카인인 IL-4는 이들 세균이 피부에 달라붙는 것을 용이하게 하기 때문에 일단 아토피성 피부염이 시작하면 포도상구균은 겉잡을 수 없을 정도로 증식하게 된다(Donald YM. 등, Infection in atopic dermatitis. Curr Opin Pediatr 2003; 15: 399-404 및 Chos SH. 등, Preferential binding of Staphylococcus aureus to skin sites of Th2-mediated inflammation in a murine model. J Invest Dermatol 2001; 116: 658-63 참조).

이러한 아토피성 피부염을 치료하기 위하여 스테로이드제, 항히스타민제, 항생제 등이 사용되고 있으나, 부신피질 호르몬제와 같은 스테로이드제의 경우 소염작용과 면역억제 작용이 있어 효과가 우수하지만 장기간 사용할 경우 심각한 피부부작용이 생길 우려가 크고 세균의 감염이 발생할 수 있다. 또 항히스타민제는 가려움증을 일시적으로 경감시킬 수 있으나 장기간 복용시 여러 가지 부작용이 생길 수 있으며, 항생제의 경우 포도상구균 등의 2차 세균 감염을 치료하기 위해 사용되나 근본적인 치료법이라고 할 수는 없다.

최근에 타크로리무스(tacrolimus, Protopic™) 또는 피메크로리무스(pimecrolimus, Elidel™)이 아토피성 피부염 치료제로 이용되고 있는데, 이 두 가지 약물은 모두 염증성 사이토카인의 발현을 억제하는 면역억제제이기 때문에 신속한 증상완화를 가져오나 효과는 일시적이며 지속적으로 사용시 피부의 자연방어상태를 약하게 하는 단점이 있다.

상기한 바와 같이, 현재까지 아토피성 피부염 치료에 관하여 다양한 연구와 노력이 있어 왔으며, 지금까지 여러 가지 화합물들이 아토피성 피부염 치료제로 개발되었지만, 부작용의 문제가 있었고, 소기할 만한 효과를 거두지 못했으므로 당업계에서는 인체에 안전하면서도 효과가 우수한 제품의 개발이 절실하게 요구되고 있는 상황이다.

한편, 본 발명자들은 트라넥사믹산이 현재까지 아토피성 피부염에 대한 치료 효능이 알려져 있지 않았다.

이에 본 발명자들은 아토피성 피부염 치료용 조성물을 개발하고자 예의 노력한 결과, 트라넥사믹산이 Th1 사이토카인인 IFN-γ의 분비량을 증가시켜 "Th1 사이토카인/Th2 사이토카인"의 비율을 높이는데 기여함으로서 아토피성 피부염 치료에 효과가 있으며, 아토피성 피부염 환자들의 피부에서 많이 군집해 번식하는 황색포도상구균에 대한 높은 항균 활성을 나타내는 반면, 독성은 거의 없어, 상기 화합물이 아토피성 피부염의 치료에 유용하다는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 목적은 트라넥사믹산을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물을 제공하는데 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 트라넥사믹산을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물을 제공한다.

트라넥사믹산(tranexamic acid)은 트랜스-4-(아미노메틸)시클로헥산 카르복실산(trans-4-(aminomethyl)cyclohexanecarboxylic acid)로서, C₈H₁₅NO₂의 분자식을 갖는다. 상기 트라넥사믹산은 항섬유소용해 효과(antifibrinolytic effect)를 갖고 있는 것으로 알려져 있으며, 지혈제 또는 혈전용해제로 사용되고 있는 물질이다.

본 발명에 있어서, 아토피성 피부염 치료용 조성물에 유효성분으로 사용되는 화합물 트라넥사믹산은 하기 화학식 1로 표시된다:

본 발명에서는 상기 트라넥사믹산이 아토피성 피부염 환자의 피부에 상재하는 황색포도상구균의 증식을 억제할 뿐만 아니라 Th1 사이토카인인 IFN-γ의 분비량을 증가시켜 "Th1 사이토카인/Th2 사이토카인"의 비율을 높이는데 기여함으로써 아토피성 피부염의 치료 효과를 나타냄을 확인하였다.

본 발명에 따른 트라넥사믹산이 현재까지 아토피성 피부염의 치료 목적으로 사용된 경우는 전무한 실정이다.

본 발명은 일 관점에서, 트라넥사믹산을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물에 관한 것이다.

본 발명은 황색포도상구균의 생육억제와 동시에 Th2 사이토카인의 분비에 대비하여 상대적으로 Th1 사이토카인의 분비를 촉진하는 물질이 아토피성 피부염 치료에 유용하다는 사상에 기초한다.

아토피성 피부염의 치료 효능을 평가하기 위하여 in vivo, ex vivo 또는 in vitro의 여러 가지 방법이 사용될 수 있다. 예를 들어, 아토피성 피부염 환자의 혈액을 채혈한 뒤 혈액으로부터 말초혈액 단핵세포(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC)를 분리하고 이를 배양한 후 상기 트라넥사믹산을 반응시켜 사이토카인 발생의 변동 정도를 측정함으로써 아토피성 피부염 치료 효능을 평가할 수도 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 조성물의 아토피에 대한 치료 용량 범위는 중증도 및 제형에 따라 변할 수 있으며, 또한, 적용 횟수도 환자의 연령, 체중 및 체질에 따라 변할 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 약학적 조성물에 유효성분으로 사용되는 트라넥사믹산은 함유량이 조성물의 0.0001중량%보다 낮은 경우, 황색포도상구균에 대한 항균력이 없을 뿐만 아니라 Th1 사이토카인인 IFN-γ의 분비량을 증가시키지 못하며, 조성물의 30중량%보다 높은 경우 원가적 측면에서 바람직하지 않으므로, 약학적 조성물 전체 중 0.0001 내지 30중량%, 바람직하게는 0.001 내지 20중량%, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10중량%의 농도로 존재할 수 있다.

이러한 범위 내에서 상기 농도는 약학적 조성물이 적용되는 용도에 따라 결정된다. 또한, 사용하기 전에 희석해야 하는 농축 제제와 같은 특정 제제는 좀더 높은 농도를 함유할 수 있다.

상기 약학적 조성물은 실온에서 약 4,000 내지 약 9,000 cps 범위의 점도를 제제에 부여하기 위한 점증제를 함유할 수 있다. 점증제를 첨가하면, 여러 가지 온도 범위에서 제형을 유지할 수 있어 안정한 점도를 얻을 수 있고, 동시에 외용으로 피부에 사용한 때의 감촉이 좋아지는 등, 사용성이 개선되는 효과가 있다. 이러한 점증제로는 수크로즈의 알릴 에테르와 C_{10 - 30}알킬 아크릴레이트, 아크릴산 및/또는 메타크릴산의 공중합체인 카르보폴 1342가 포함된다. 이외에 사용될 수 있는 다른 점증제로는 하이드록시프로필 메틸셀룰로즈, 하이드록시에틸셀룰로즈, 카르복시메틸 셀룰로즈 등과 같은 셀룰로즈 유도체가 포함된다. 염(NaCl)의 소량 첨가는 또한 최종 제제의 점도를 조절하는 작용을 한다. 보통 염의 첨가량은 약 0.25 내지 0.6중량%이다.

상기 약학적 조성물은 pH를 3.0 내지 9.0, 바람직하게는 4.5 내지 8.0, 더욱 바람직하게는 5.0 내지 7.0로 유지하기 위해 필요한 경우 산, 염기 및 완충제를 함유한다. 이러한 pH 조정 물질의 성질 및 사용 방식은 본 분야에 잘 알려져 있다.

약학적 조성물의 제형은 특별히 한정되지 않으나, 경피투여용인 것을 특징으로 할 수 있고, 상기 경피투여용의 조성물은 연고, 크림, 파스타제(pastes), 로션, 찰제(liniments), 파스타제(pastes), 외용 액제, 틴크제, 스킨젤, 글리세로젤라틴(glycerogelatins), 외용산제, 에어로졸 및 경고제(plasters)로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형을 갖을 수 있다. 이들 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌에 기술되어 있다(Blaug et al., Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975).

상기 제형의 바람직한 양태는 연고이다. 상기 연고는 페트롤라툼(patrolatum), 화이트 페트롤라툼, 엘로우 연고, 미네랄 오일과 같은 탄화수소 기제, 친수성 페트롤라툼, 무수 라놀린, 라놀린, 콜드크림과 같은 흡수 기제, 친수성 연고와 같은 수세가 가능한 기제, 폴리에틸렌 글리콜 연고와 같은 수용성 기제 어느 것으로도 제조 가능하다. 이들의 선택 및 제조는 약물의 기제로부터의 방출속도, 기제에 의한 경피흡수의 증가기대, 기제에 의한 피부 수분 밀봉 여부, 약물의 기제 내에서의 안정성, 기제에 대한 약물의 영향과 같은 요인을 고려하여 이루어지지만 약제 제형 분야의 당업자에게는 통상적인 기술에 속한다.

상기 제형의 바람직한 양태는 크림이다. 상기 크림은 콜드크림, 에몰리엔트 크림(emollient cream)과 같은 W/O형 및 쉐이빙 크림, 바니싱 크림, 핸드크림, 린싱크림(reansing cream)과 같은 O/W형을 포함한다. 더욱 바람직한 크림은 전형적으로 물과 스테아린산을 함유하는 바니싱 크림이다. 보통 환자나 의사는 O/W 크림이 연고보다 씻어내기 쉽기 때문에 연고제보다 크림을 선호하는데 이러한 관점에서 본 발명의 약제에서 바람직한 것은 크림이다.

상기 제형의 바람직한 양태는 로션이다. 상기 로션은 현탁제, 유제, 액제 등과 같은 방법으로 조제되며 이들 또한 약제 제형 분야의 당업자에게는 통상적인 기술에 속한다. 본 발명에 있어서 더욱 바람직한 것은 화이트 로션(white lotion)이며 이 제제 또한 제형 분야의 당업자에게는 통상적인 기술에 속한다.

상기 제형의 또 다른 바람직한 양태는 찰제이다. 상기 찰제는 유성 찰제 및 에탄올성 찰제 어느 것으로 제조 가능하다. 바람직한 것은 피부에 자극이 적은 유성 찰제이다. 유성 찰제의 경우 아몬드 오일, 낙화생유, 면실유 등의 불휘발성유, 윈터그린(wintergreen), 투르펜틴(turpentine) 같은 휘발성유 또는 불휘발성유의 배합 등이 있다.

본 발명은 다른 관점에서, 트라넥사믹산을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부염 치료용 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은 화장수, 크림, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 로션, 모이스처 로션, 밀크로션, 영양로션, 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아이스트린젠트, 팩, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 스킨 젤, 스킨 오일, 스킨 토너, 훼이스 로션(face lotion), 수렴수 및 디오더런트로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형을 갖을 수 있다.

상기 화장료 조성물은 피부 세정용일 수 있고, 상기 피부 세정용의 화장료 조성물은 크림, 클렌저, 폼, 클렌징 폼, 필링젤, 바디워시, 스크럽, 비누, 오일, 에멀젼, 헤어비누, 헤어 린스, 바디클렌져, 샴푸, 유액, 고형 세정제 및 액상 세정료로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형을 갖을 수 있다.

상기 화장료 조성물에 유효성분으로 사용되는 트라넥사믹산은 함유량이 조성물의 0.0001중량%보다 낮은 경우, 황색포도상구균에 대한 항균력이 없을 뿐만 아니라 Th1 사이토카인인 IFN-γ의 분비량을 증가시키지 못하며, 조성물의 30중량%보다 높은 경우 원가적 측면에서 바람직하지 않으므로, 화장료 조성물 전체 중 0.0001 내지 30중량%, 바람직하게는 0.001 내지 20중량%, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10중량%의 농도로 존재할 수 있다. 이러한 범위 내에서 상기 농도는 화장료 조성물이 적용되는 용도에 따라 결정된다.

또한, 사용하기 전에 희석해야 하는 농축 제제와 같은 특정 제제는 좀더 높은 농도를 함유할 수 있다.

트라넥사믹산을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 계면활성제, 안정화제, 보존제, 습윤화제, 항염증제, 항산화제, 착색제, 물 및 이들의 혼합물 중 적어도 하나의 보조제를 포함할 수 있다. 이들 보조제는 전체 조성물의 약 98.0 내지 99.1중량%의 양으로 존재할 수 있다.

화장료 조성물에 사용되는 계면활성제는 음이온성, 양이온성 및 양쪽성 모두를 포함하며, 사용량은 전형적으로 30중량%이상, 바람직하게는 70중량% 이상이다. 계면활성제의 종류 및 사용량을 선택 결정하는 것은 본 분야의 당업자에 의해 용이하게 이루어질 수 있다.

화장료 조성물에 사용될 수 있는 바람직한 안정화제로는, 이로서 한정되는 것은 아니지만, 글리콜 스테아레이트가 포함된다. 안정화제가 사용되는 경우, 일반적으로, 조성물의 약 0.1 내지 5중량%이다.

화장료 조성물에 사용될 수 있는 바람직한 보존제로는, 이들로 한정되는 것은 아니지만, 테트라나트륨 에틸렌디아민 테트라아세트산(EDTA), 1-(3-클로로알릴)-3,5,7-트라아자-1-아다만탄, 파라벤, 메틸파라벤, 5-클로로-2-메틸-4-이소티아졸린-3-온과 2-메틸-4-이소티아졸린-3-온의 혼합물, 살리실산, 안식향산, 트리클로산, 페녹시에탄올, 벤질알코올, 벤조페논-4, 메틸클로로이소티아졸리논 및 메틸이소티아졸리논 또는 이들의 혼합물이 포함될 수 있다. 보존제가 사용되는 경우, 이의 양은 전형적으로 조성물의 약 0.01 내지 6중량%이고, 바람직한 양은 약 0.05 내지 4중량%, 더욱 바람직한 양은 약 0.1 내지 2중량%이다.

화장료 조성물에 사용될 수 있는 바람직한 습윤화제로는 밀 단백질(예, 라우르디모늄 하이드록시프로필 가수분해된 밀 단백질), 헤어 케라틴 아미노산, 나트륨 퍼옥실린카르볼산, 판테놀, 토코페롤(비타민 E) 및 디메티콘 또는 이들의 혼합물이 포함된다. 또한 염화나트륨이 존재할 수 있으며 특히 헤어 케라틴 아미노산이 습윤화제로서 포함되는 경우 그러하다. 습윤화제는 전형적으로 조성물의 약 0.01 내지 10중량%, 바람직하게는 약 0.05 내지 1.5 중량%, 더욱 바람직하게는 약 0.01 내지 1 중량%가 사용된다.

화장료 조성물에 사용될 수 있는 바람직한 착색제로는 FD&C 그린 3번, Ext. D&C 바이올렛 2번, FD&C 옐로우 5번 및 FD&C 레드 40번 또는 이들의 혼합물이 포함될 수 있다. 착색제는 사용되는 경우 전형적으로 조성물의 약 0.001 내지 0.1중량%, 바람직하게는 약 0.005 내지 0.05중량%이다.

화장료 조성물에 사용될 수 있는 바람직한 항염증제로는 국소적으로 투여하기에 적합하고 약학적으로 허용되는 화합물이라면 그 어느 것도 포함되며, 바람직하게는 알란토인이다. 항염증제는 사용하는 경우 염증 억제 또는 경감시키기에 충분한 양으로 사용되며 전형적으로는 조성물의 약 0.1 내지 2중량%, 바람직하게는 약 0.3 내지 1.5중량%, 더욱 바람직하게는 약 0.1 내지 1중량%이다.

화장료 조성물에 사용될 수 있는 항산화제는 효소형 항산화제와 비효소형 항산화제 모두 사용될 수 있다. 천연 효소형 항산화제의 예로는 과산화물 디스뮤타제(SOD), 카탈라제 및 글루타티온 퍼옥시다제를 들 수 있다. 적합한 비효소형 항산화제로는 비타민 E(예, 토코페롤), 비타민 C(아스코브산), 카로테노이드, 에키나코시드(Echinacoside), 카페오일 유도체, 올리고머 프로안토시아니딘, 프로안타놀(예, 포도 종자 추출물), 실리마린(예, 밀크 엉겅퀴 추출물, 실리붐 마리아늄), 은행나무(Ginkgo biloba) 및 녹차 폴리페놀 또는 이들의 혼합물이 포함될 수 있다. 카로테노이드는 강력한 항산화제이며 이의 예로는 베타-카로틴, 칸타크산틴, 제아크산틴, 라이코펜, 루테인, 크로세틴 및 캡산틴 등이 포함된다. 바람직한 항산화제는 비타민 E, 비타민 C 또는 카로테노이드이다. 항산화제는 사용되는 경우 피부에서 유리-라디칼의 영향을 억제하거나 경감시키기에 충분한 양으로 사용된다. 항산화제의 전형적인 사용량은 조성물의 약 0.001 내지 1중량%이고, 바람직한 양은 약 0.01 내지 0.5중량%이다.

화장료 조성물은 본 분야에서 통상적으로 사용되는 다른 보조제를 함유할 수 있다. 이러한 보조제의 예로는 향료, 염료(헤어를 동시에 염색하거나 색조를 부가하는 염료를 포함), 용매, 불투명화제, 펄제(pearlescent agent)(예를 들어, 지방산과 폴리올의 에스테르, 지방산의 마그네슘 염 및 아연 염), 공중합체 계 분산액, 농후화제(예를 들어, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화암모늄 및 황산나트륨), 지방산 알킬올아미드, 셀룰로즈 유도체, 천연 검, 식물 추출물, 알부민 유도체(예를 들어 젤라틴), 콜라겐 가수분해 생성물, 천연 또는 합성 폴리펩타이드, 난황, 레시틴, 라놀린 또는 라놀린 유도체, 지방, 오일, 지방 알코올, 실리콘, 디오더런트, 항균 물질, 항지루성 물질, 각질용해제(예를 들어, 황, 살리실산, 벤조일 퍼옥사이드, 셀레늄 설파이드, PG, FA, 효소) 및 각화제(예를 들어, 타르, 황, 살리실산, 셀레늄 설파이드, 항균제, 벤조일 퍼옥사이드, 클로르헥시딘, 요오드, 트리클로산, 항진균제 및 효소) 또는 이들의 혼합물을 들 수 있다.

본 발명에 따른 상기 모든 제제는 본 분야에 통상적인 기술을 사용하여 트라넥사믹산을 포함한 조성물을 원하는 형태로 제형할 수 있다. 본 발명에 따라 제조된 트라넥사믹산을 함유한 여러 제제는 통상적인 방식으로, 바람직하게는 아토피성 피부염 부위에 바르거나 마사지하여 사용할 수 있다.

본 발명은 또 다른 관점에서, 트라넥사믹산을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물에 관한 것이다.

상기 본 발명의 트라넥사믹산은 황색포도상구균(Staphyllococcus aureus) 및 황색포도상구균의 변이균주로 구성된 군에서 선택된 균주에 대해 우수한 항균효과가 있다.

상기 황색포도상구균의 변이균주는 메티실린 저항성을 갖는 변이균주인 MRSA(Methilline Resistant Staphyllococcus aureus)일 수 있다.

상기 본 발명의 트라넥사믹산은 Th1 사이토카인인 IFN-γ의 분비량을 증가시켜 "Th1 사이토카인/Th2 사이토카인"의 비율을 높이는데 있어 탁월한 효과가 있다.

따라서, 본 발명의 트라넥사믹산은 부작용이 없고, 아토피성 피부염 환자의 피부에 상재하는 황색포도상구균에 대한 항균효과가 뛰어날 뿐만 아니라 Th1 사이토카인인 IFN-γ의 분비량을 증가시켜 아토피성 피부염의 치료를 목적으로 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명의 아토피성 피부염 치료용 조성물에 유효성분으로 사용되는 트라넥사믹산은 함유량이 조성물의 0.0001중량%보다 낮은 경우, 황색포도상구균에 대한 항균력이 없을 뿐만 아니라 Th1 사이토카인인 IFN-γ의 분비량을 증가시키지 못하며, 조성물의 30중량%보다 높은 경우 원가적 측면에서 바람직하지 않으므로, 아토피성 피부염 치료용 조성물 전체 중 0.0001 내지 30중량%, 바람직하게는 0.001 내지 20중량%, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10중량%의 농도로 존재할 수 있다. 이러한 범위 내에서 상기 농도는 아토피성 피부염 치료용 조성물이 적용되는 용도에 따라 결정된다. 또한, 사용하기 전에 희석해야 하는 농축 제제와 같은 특정 제제는 좀더 높은 농도를 함유할 수 있다.

상기 트라넥사믹산을 함유하는 조성물은 아토피성 피부염의 치료를 목적으로 사용되는 것으로, 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바 없으나, 상기 조성물은 피부 외용 조성물일 수 있으며, 구체적으로 용액제, 현탁제, 스프레이제, 패취제, 패드제, 크림제, 연고제, 겔제로 이루어진 군에서 선택되는 제형으로 제조될 수 있다.

상기 용액제는 유효 화합물 이외에 통상의 부형제를 포함할 수 있으며, 예를 들어 물, 에틸알코올, 이소프로필알코올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 벤질벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 디메틸포름아미드, 오일, 면실유, 낙화생유, 동백유, 알로에베라, 글리세린, 천연옥수수 배종유, 올리브유, 피마자유, 아몬드유 및 참깨유, 글리세롤, 글리세롤 포름알코올, 테티라히드로푸르푸릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르 또는 이들 물질의 혼합물을 포함하는 용매, 가용제 및 유화제일 수 있다. 또한, 보존제로서 메틸 또는 프로필-p-히드록시벤조에이트 및 솔브산 또는 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 것을 포함할 수 있다.

현탁제는 유효 화합물 이외에 통상의 부형제, 예를 들면 액상 희석제 (예를 들어 물, 에틸알코올, 프로필렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜), 현탁제 (예를 들어 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨, 소르비탄 에스테르, 셀룰로스 유도체 및 수소화 식용유지), 미세 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 한천, 에틸올레이트 및 트라가칸트 또는 이들 물질의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 것을 함유할 수 있다.

연고제, 크림제 및 겔제는 유효 화합물 이외에 통상의 부형제, 예를 들면 동물성 및 식물성 지방, 왁스 파라핀, 전분, 타르가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 규산, 활석 및 산화 아연 또는 이들 물질의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 것을 함유할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 독성이 낮고 포도상구균에 대한 항균성이 우수할 뿐만 아니라, Th1 사이토카인인 IFN-γ의 분비량을 증가시켜 "Th1 사이토카인/Th2 사이토카인"의 비율을 높이는데 기여함으로서 아토피성 피부염의 치료 효과가 있으므로, 이를 이용한 의약 또는 화장품 생산에 적용 가능하다.

도 1은 본 발명의 트라넥사믹산의 황색포도상구균에 대한 생육억제효과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 트라넥사믹산의 항생제 내성을 지닌 황색포도상구균에 대한 생육억제효과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 트라넥사믹산의 황색포도상구균에 대한 최소억제 농도를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 트라넥사믹산의 항생제 내성을 지닌 황색포도상구균에 대한 최소억제 농도를 나타낸 것이다.
도 5a 및 5b는 본 발명의 트라넥사믹산을 함유하는 조성물을 이용한 아토피성 피부염의 치료평가 실험 전 및 후의 사진을 나타낸 것이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 하기 실시예는 화합물 트라넥사믹산의 독성시험 및 트라넥사믹산을 유효성분으로 함유한 제제의 제조를 예시한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

실시예 1: 트라넥사믹산의 항균활성 시험

(1) 황색포도상구균(Staphyllococcus aureus) 및 항생제 내성을 지닌 황색포도상구균(Methicilline Resistant Staphyllococcus Aureus)에 대한 항균 효과 확인

본 실험을 위해서 페이퍼 디스크 확산(paper disc diffusion) 방법을 사용하였다. 직경 87 ㎜ 평판에 한천배지(Yeast extract 2 g/L, Peptone 1 g/L, agar 15 g/L)를 분주하고 수평으로 고형화하였다. 황색포도상구균 ATCC 25923과 MRSA ATCC 33591 균에 대한 트라넥사믹산의 항균 효과를 관찰하기 위해서 액체 배지(Yeast extract 2 g/L, Peptone 1 g/L)를 이용하여 37℃에서 24시간 동안 진탕배양한 각각의 균을 cfu/ml 농도로 200 ㎕를 평판배지에 도말하였다. 상기 균주를 도말한 평판 배지의 물기를 제거한 후, 트라넥사믹산 50 ppm이 함유된 용액 45 ㎕를 페이퍼 디스크에 분주하고 말린 후 각각의 균이 도말된 배지 위에 얹었다. 트라넥사믹산을 함유하지 않은 것을 대조구로 하여 37℃에서 24시간 동안 호기적 조건으로 배양한 후 저지환 생성유무를 측정한 결과 항 황색포도상구균 및 항 MRSA 효과가 있는 것으로 판명되었다 (도 1과 도 2).

(2) 황색포도상구균 및 항생제 내성을 지닌 황색포도상구균에 대한 트라넥사믹산의 최소억제농도 측정

액체 배지(Yeast extract 2 g/L, Peptone 1 g/L)를 이용하여 37℃에서 24시간 동안 진탕배양한 황색포도구균 ATCC 25923과 MRSA ATCC 33591을 피검균으로 사용하였다. 트라넥사믹산 농도가 각각 10, 30, 50, 80, 100 ppm이 되도록 배지를 제조하였고 트라넥사믹산이 첨가되지 않은 배지를 대조군으로 하였다. 각 배지에 시험균주를 cfu/mL 농도로 한방울씩 접종하고 37℃에서 24시간 배양 후 집락의 수를 세어 균의 생육이 억제된 농도를 최소 억제 농도(Minimum Inhibiton Concentration: MIC)로 정하였다.

도 3과 4에 나타난 바와 같이, 트라넥사믹산의 황색포도구균 및 MRSA에 대한 최소억제 농도가 약 50 ppm인 것으로 확인되었다.

실시예 2: 트라넥사믹산의 급성경피독성시험

트라넥사믹산의 급성경피독성시험을 랫트(자성, 4주령)를 대상으로 한국식약청 기준에 의거하여 실시하였다. 시험방법은 랫트의 체모를 삭발한 후 체표면적의 10%정도에 4000 mg/kg(체중)의 농도로 균일하게 바른 후 15일간 관찰하였다.

관찰결과, 피부홍반과 가피형성 등 피부자극은 보이지 않았다. 따라서, 트라넥사믹산은 저독성 물질로 판단되었다.

실시예 3: 사이토카인 분비 평가

(1) 말초혈액 단핵세포의 배양

아토피성 피부염 환자의 혈액을 채혈하여 헤파린으로 처리된 튜브(heparinized tube)에 담았다. 이후 원심분리용 튜브에 Lymphoprep(Axis-Shield PoC AS, Oslo, 노르웨이)과 혈액을 1:2의 비율로 옮긴 다음 1000 rpm으로 20분간 원심분리를 하여 가운데 층의 세포층만을 분리하였다. 이후 인산완충생리식염수(PBS)를 넣고 추가로 3회 원심분리를 하였다. 이것을 10% FBS(fetal bovine serum)와 1%의 항생제 및 항진균제가 든 RPMI1640 배지(Invitrogen, 미국)에 현탁하였다. 상기 세포 현탁액과 트리판 블루 용액을 1:1로 혼합하여 잘 섞어준 다음 약 5분간 방치하고 트리판 블루 용액과 같은 색으로 염색이 된 죽은 세포와 전체 세포의 수를 hemocytometer로 계수하였다. 이러한 트리판 블루 분석법(trypan blue assay)으로 세포의 생존력(viability)을 결정한 후에 세포수를 1.5×10⁶/㎖로 조정하였다.

세포수가 조정된 세포 현탁액을 0.5 ㎖씩 48 웰(well)에 시딩(seeding)한 후, PHA(Phytohemagglutinin, Sigma사, Cat.#L-8902, 미국)를 50 ㎍/㎖씩 첨가하고 동시에 실시예 1에서 제조한 시료를 100 ㎍/㎖씩 첨가하였다. 48 시간 동안 배양 후 수집하고, 상등액을 원심분리한 후에 하기 사이토카인 분석 때까지 -20℃에서 보관하였다.

(2) 사이토카인 분석

Th1 사이토카인인 인터페론-γ(IFN-γ) 및 Th2 사이토카인인 인터루킨-4(IL-4)를 측정하기 위하여 ELISA 방법을 이용하였다. 먼저, 96-웰 플레이트의 각 웰을 IL-4와 IFN-γ의 포획 항체(capture antibody, Pharmingen사, 미국)로 4℃에서 하룻밤 동안 코팅하였다. 이후 3회 세척하고, 10% FBS가 함유된 인산완충생리식염수(PBS)(블로킹 완충액)를 200 ㎕/웰씩 넣고 상온에 1시간 동안 방치하여 블로킹하였다. 이것을 다시 3회 세척하여 블로킹 완충액을 완전히 제거한 후 블로킹 완충액에 희석한 샘플을 100 ㎕ 씩 분주한 후 4℃에서 하룻밤 동안 배양하였다. 이것을 5회 세척하고 비오티닐화된 검출항체(biotinylated detection antibody, Pharmingen사, 미국)를 넣고 1시간 상온에 배양한 후 7회 세척하였다. 이후 스트렙타비딘(streptavidin)-HRP 100 ㎕를 가하고, 30분 후에 1M H2SO4 50 ㎕를 첨가하였다. 그 후 마이크로플레이트 리더(Tecan사, 오스트리아)로 파장 450-570 nm에서 광학 밀도를 측정하였다.

대조군으로 트라넥사믹산을 첨가하지 않고 PHA 만을 첨가하여 광학 밀도를 측정하였으며, 사이토카인 분비는 개인차가 크므로 트라넥사믹산에 대한 IL-4와 IFN-γ의 측정 결과는 대조군의 IL-4와 IFN-γ의 양에 대한 해당 사이토카인의 증가비율로 표시하였다. 예를 들어, 하기 표에서 IFN-γ 값이 1.5일 경우 트라넥사믹산이 첨가된 웰의 사이토카인 양이 (동일한 혈액 샘플을 사용한) 트라넥사믹산이 첨가되지 않은 웰의 사이토카인 양 보다 1.5배 많은 것을 의미한다.

또한, 비교군으로 아토피 치료제인 엘리델 크림™(한국노바티스, 한국)의 주성분인 피메크로리무스(pimecrolimus)를 1 nM 함유한 용액을 사용하여 본 발명의 트라넥사믹산 조성물과 비교 평가하였다.

하기 표 1에서 "비율" 값은 IL-4의 양에 대한 IFN-γ의 양의 비율을 의미하며, 이러한 비율이 높을수록 Th2 사이토카인 분비량에 대비하여 Th1 사이토카인의 분비량이 많아 아토피성 피부염 치료에 유용할 수 있다.

시료	IFN- 값/IL-4 값 = 양 값의 비율
	n=1	n=2
피메크로리무스	1.619/0.929 = 1.743	1.209/0.760 = 1.590
트라넥사믹산	8.060/1.029 = 7.830	7.810/1.014 = 7.702

상기 표 1에 나타나는 바와 같이, 본 발명의 트라넥사믹산 조성물은 Th1 사이토카인인 IFN-γ의 분비량을 증가시켜 "Th1 사이토카인/Th2 사이토카인"의 비율을 높이는데 있어 기존의 아토피 치료제인 피메크로리무스 보다 탁월한 효과를 나타내었으며 따라서 아토피성 피부염의 치료에 보다 더 효율적일 것으로 생각된다.

실시예 4: 친수연고의 제조

아토피성 피부염의 치료효과 평가를 위하여 다음과 같이 본 발명의 조성물을 함유하는 친수연고를 제조하였다. 백색바셀린 250 g 및 스테아릴알코올 200 g을 수욕 중에서 가온 용융, 혼합하여 75℃로 하고, 이것에 파라옥시안식향산메칠 1 g, 파라옥시안식향산프로필 1 g, 프로필렌글리콜 120 g, 모노스테아린산글리세린 10 g, 폴리옥시에칠렌경화피마자유 60 40 g 및 트라넥사믹산 0.5 g을 넣고 약 75℃로 가온하여 제조한 적당량의 정제수를 첨가하고 강하게 교반하였다. 전체 무게를 1000 g으로 한 후 다시 한번 강하게 교반하여 유액으로 만든 다음 냉각하고 굳을 때까지 교반하였다.

실시예 5: 피부 자극 시험

피부 자극 시험은 젠지 이모카와 등이 발표한 논문을 참고로 행하였으며(Genji Imokawa and Yutaka Mishma, Nichihikaishi, 86(8):473, 1976), Norgesplaster A/S사의 휜 쳄버(Finn Chamber)를 이용한 클로즈드 패취 시험(closed patch test)을 실시하였다.

실시예 4에서 제조된 친수연고를 휜 쳄버(Finn Chamber)에 맞는 페이퍼 디스크(paper disc)에 10 ㎕씩 흡수시키고 휜 쳄버(Finn Chamber)에 넣어 10명의 성인 남자 피부에 48시간 부착시켰다. 48시간 후 휜 쳄버(Finn Chamber)를 즉시 떼어내고 흐르는 수돗물에 세척하여 말린 다음 2시간 후에 피부의 상태를 다음의 기준에 따라 판정하였다:

판정기준(자극강도)

- : 육안으로 보아 변화가 없다

O : 가벼운 발적

+ : 중간정도의 발적

++ : 강한 발적 및 부종

그 결과, 본 발명의 경피 제제는 피부에 아무런 자극도 주지 않음으로써 독성이 전혀 없는 것으로 나타났다.

실시예 6: 아토피성 피부염의 치료효과 평가

실시예 4에서 제조된 친수연고를 5개월 동안 시험부위에 바르게 한 후 아토피성 피부염이 개선되는 정도를 평가하였다. 도 5에서 a는 치료 시작 전의 사진결과이고, b는 치료 완료 후의 사진결과를 나타낸다.

각각의 사진결과에서 나타나는 바와 같이, 본 발명의 조성물들은 아토피성 피부염의 치료에 탁월한 효능이 있음을 알 수 있다.

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질직인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (4)

1. 트라넥사믹산(tranexamic acid)을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물.
   
2. 제1항에 있어서, 상기 트라넥사믹산의 함량은 0.0001 내지 30중량%인 것을 특징으로 하는 아토피성 피부염 치료용 조성물.
   
3. 트라넥사믹산(tranexamic acid)을 유효성분으로 함유하는 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)의 항균효과를 가지는 치료용 조성물.
   
4. 트라넥사믹산(tranexamic acid)을 유효성분으로 함유하는 Th2 사이토카인의 분비량 대비하여 Th1 사이토카인의 분비량을 향상시키는 것을 특징으로 하는 피부염 치료용 조성물.
   

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