KR20130050308A - 피부 색소침착 조절용 식품 보충제에서의 치커리산 및 락틱 박테리아의 용도 - Google Patents

피부 색소침착 조절용 식품 보충제에서의 치커리산 및 락틱 박테리아의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 일반적으로 화장품 및/또는 식품 보충제 분야에 관한 것이다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 피부톤을 개선하고 검버섯 및 비정상 색소를 특징으로 하는 기타 피부 질환과 같은 피부의 과-색소침착 및/또는 피부 색상 결함을 예방 및/또는 치료하기 위한, 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 하나 이상의 성분 및 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 미생물 및/또는 효소의 용도를 제공하려는 목적을 갖는다. 또한, 본 발명은 피부 라이트닝제를 제공하려는 목적을 갖는다.

Description

피부 색소침착 조절용 식품 보충제에서의 치커리산 및 락틱 박테리아의 용도{USE OF CHICORIC ACID AND LACTIC BACTERIUM IN FOOD SUPPLEMENT FOR REGULATING SKIN PIGMENTATION}
본 발명은 화장용 목적을 위한 식품 보충제 분야에 관한 것이다. 더욱 구체적으로는, 본 발명은 피부의 과-색소침착, 피부 색상 결함, 예컨대 검버섯 및 비정상 색소를 특징으로 하는 기타 피부 질환의 예방 및/또는 치료를 위한, 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 성분 및 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 미생물 및/또는 효소의 용도를 제공하고자 하는 것이다. 본 발명은 또한 피부톤 (skin tone) 을 개선시키는 것 뿐 아니라 피부 라이트닝제 또는 화이트닝제를 제공하려는 목적을 갖는다.
피부 색상은 피부에 존재하는 갈색 색소인 멜라닌의 양 및 유형에 의해 일차적으로 결정된다. 적은 양의 멜라닌은 밝은 피부 색상을 야기하는 반면, 많은 양의 멜라닌은 짙은 피부 색상을 야기한다. 또한, 피부 내 과-색소침착은 피부 내 멜라닌의 과 발현 또는 축적에 의해 야기된다. 그 결과, 멜라닌 생성에 관여하는 경로는 생성된 수준을 감소시키도록 하는 많은 억제제에 대한 표적이 되어 왔다. 멜라닌 경로에 관여된 주요 효소 중 하나는 티로시나아제이다.
멜라닌의 합성은 전구체 프로오피오멜라노코르틴으로부터 생성되는 멜라닌세포 자극 호르몬 (MSH) 및 부신피질자극 호르몬 (ACTH) 펩티드를 포함하는 호르몬 조절 하의 과정이다. 이것은 UVB-방사에 의해 야기되는 DNA 손상 등에 의해 촉진된다.
이후, 오랜 시간 태양에 대한 노출은 피부에서 많은 생화학적 반응을 유도하여, 예를 들어, 일광화상 및 태닝을 야기할 수 있다. 태양에 대한 노출의 다른 결과는 시간에 따라 축적된다. 상기 변화는 검버섯 발달을 야기하고 불균일한, 얼룩덜룩한 피부톤이 될 수 있다. 불행히도, 오늘날 시장에 있는 많은 시판 제품은 효과가 단지 미미하기만 하거나, 최종 제형으로 도입되는 경우 불안정하고 이들의 효능을 잃게 하는 활성제를 함유한다.
피부 내 색소 함량의 발현을 변형하기 위한, 균일한 피부톤 또는 피부톤의 라이트닝을 촉진하기 위한 능력은 오늘날 사회의 강력한 바램이다. 많은 사람들이 검버섯 등을 감소시키고, 또는 순수하게 화장 이유를 위해 그들의 피부톤을 변형하기를 희망한다.
그 결과, 효과적인 조성물을 개발하고자 하는 노력이 티로시나아제의 활성 억제제에 집중되었다. 예를 들어, 다양한 티로시나아제 억제제, 예컨대 그 중에서도 히드로퀴논, C, 시스테인, 코즈산, 아르부틴 및 글루타티온이 국소 조성물에 제안되어 왔다. 또한, 다양한 피부과학적 조성물이 기미, 주근깨, 백반증, 얼룩백색증, 페닐케톤뇨증, 등에서 관찰되는 것과 같은 색소 질환의 외양 개선을 위해, 및/또는 화장 목적을 위해 제안되어 왔다.
또한, 피부 표백 조성물의 사용이 널리 확산된다. 그러나, 이들은 멜라닌을 파괴하거나 이의 형성을 억제한다. 이중 많은 것은 퍼옥시드, 산 또는 포름알데히드, 또는 티올화 물질과 같은 유해한 화학물질을 함유한다. 덜 엄격한 요법은 다른 단점을 갖는다.
국소 레티노이드 및 국소 코르티코스테로이드는 레이저 치료 및 화학적 박피를 받은 것 같은 과-색소침착제로서 제안되나, 이들은 원하는 반응에 미치치 않는다.
다른 조성물은 일부 경우에서 피부 및 피부 영역을 표백하거나, 흰 피부의 외양을 향상시키기 위해 아시아 또는 유럽에서 사용되어 온 자연 물질의 피부에 대한 사용을 제안하였다. 여기에는 레몬, 오렌지, 오이, 은행, 캐럽, 장미 열매, 제라늄 허브, 시나몬, 스위트 마조람, 로즈마리 등의 사용이 포함된다.
비정상 색소와 관련된 질환에 대항하거나 피부톤을 라이트닝하기 위해, 피부에 국소 적용되는 경우 티로시나아제 활성을 감소시켜 따라서 멜라닌 생성을 제한할 수 있는 다양한 화합물이 제안되었다. 불행히도, 현행 이용가능한 치료는 특히 이와 자주 연관되는 부작용, 예컨대 특정 국소 작용제로의 자극성 부작용에 있어 완전히 만족스럽지 않다.
그러므로 당업계에 기재된 단점을 갖지 않는 대안적인 제제에 대한 높은 열망이 있을 것이다. 특히, 균일한 피부톤을 촉진하기 위한 또는 피부톤을 라이트닝하기 위한 개선된 안정성 및 효율을 갖는 경구 경로를 통해 투여되는 영양 화장 조성물을 개발하려는 높은 열망이 있을 것이다.
또한 피부 색소침착 질환, 특히 환경적 요인 또는 노화에 의한 질환의 치료 및/또는 예방에 효과적인 활성제에 대한 필요성이 남아있다.
본 발명의 목적은 상기 필요를 충족시키는 것이다.
본 출원인은 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 하나 이상의 성분 및 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락틱 박테리아 및/또는 효소를 포함하는 식품 보충제 조성물을 제공함으로써 상기 목적을 달성할 수 있을 것이다.
그러므로, 제 1 구현예에 따르면, 본 발명은 피부 색소침착 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 하나 이상의 성분 및 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락틱 박테리아 및/또는 효소의 화장적 용도에 관한 것이다. 이러한 피부 질환은 특히 노화 또는 환경 인자 (예를 들어, UV) 로 인한 질환, 예컨대 검버섯이다. 이것은 또한 기미, 주근깨, 백반증, 얼룩백색증, 페닐케톤뇨증 등에서 관찰되는 피부 질환일 수 있다.
본 출원인은 락틱 박테리아로 처리된 치커리산을 함유하는 성분이, 그 추출물이 티로시나아제 활성의 억제를 거의 내지 아주 보이지 않는다는 사실에도 불구하고 멜라닌의 형성, 멜라닌형성작용을 효과적으로 억제하다는 것을 발견하였다. 상기 결과는 멜라닌형성작용에서 티로시나아제의 중심적 역할 및 상기 효소를 억제하기 위한 당업계의 개발 노력의 초점을 고려하면 놀랍고도 예상 밖이다.
본 발명의 목적을 위해, 용어 "피부" 는 얼굴 또는 신체의 피부를 의미하는 것으로 의도된다.
본 발명의 목적을 위해, 용어 "유효량" 은 예상되는 효과를 수득하기에 충분한 양을 의미하는 것으로 의도된다.
본 발명의 목적을 위해, 용어 "예방하다" 는 고려 중인 질환의 징후의 발생 위험을 감소시키는 사실을 의미하는 것으로 의도된다.
본 발명은 또한 특히 피부톤 또는 피부 안색을 개선하기 위한, 피부 결함의 치료를 위한 활성제 및/또는 이의의 예방을 위한 조성물로서의, 상기 언급된 성분의 화장적 용도에 대한 것이다.
본 발명은 또한 피부 색소 결함을 치료 및/또는 예방하기 위한 활성제로서, 상기 언급된 성분의 화장적 용도에 대한 것이다. 그 결과, 안색은 피부이상변색 또는 건조 영역 없이, 밝고 더욱 균일해진다.
본 발명은 또한 피부톤의 화이트닝 또는 라이트닝을 위한 활성제로서의, 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 유효량의 하나 이상의 성분 및 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락틱 박테리아 및/또는 효소의 화장적 용도에 관한 것이다.
본 출원인은 또한 본 발명에 따른 성분이 수화 및/또는 피부 장벽 기능을 추가로 개선한다는 것을 발견하였다.
본 발명에 따른 용도는 또한 특히 본원에 하기에 기재되는 바와 같이 피부 수화 또는 피부 노화를 추가로 개선시키기 위한 유효량의 하나 이상의 활성제와 조합으로의, 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 하나 이상의 성분 및 치커리산을 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락틱 박테리아 및/또는 효소의 용도를 포함할 수 있다.
또다른 양상에 따르면, 본 발명의 주제는 개인에게, 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 하나 이상의 성분 및 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락틱 박테리아 및/또는 효소를 투여하는 하나 이상의 단계를 포함하는, 개인에서의 피부톤 결함 및 과-색소침착과 관련된 질환, 특히 심미적 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 방법, 특히 화장적 방법이다.
본 발명에 따른 조성물은 경구로 투여가능하다. 이것은 빠르고 비교적 비-제한적인 투여 방식에 의해 깊은 층 (진피, 피하조직) 에, 전체 피부 상에 전체적으로 작용하는 장점을 갖는다. 구체적으로는, 대사물질 및 다른 활성 영양분은 특히 혈류에 의해 진피 매트릭스 내로 분포된다. 경구 투여는 또한 빠르고 비교적 비-제한적인 투여 방식이라는 장점을 갖는다.
치커리산 및 또는 유도체 함유 성분
치커리산은:
Figure pct00001
이고 치커리산의 유도체는:
Figure pct00002
(R1, R2, R3 및/또는 R4 는 동일할 수 있거나 또는 서로 상이할 수 있음) 를 포함한다.
하나의 구현예에서, R1, R2, R3 및/또는 R4 는 H; CH3; C1-C3-알킬; 아릴, 예컨대 페닐, 벤질, 톨릴, o-자일릴알킬; C1-C3-아실; 아미노산; 단당류, 이당류 또는 올리고당류로 이루어지는 군으로부터 선택될 수 있다. 올리고당류는 2 개 내지 9 개의 단당류 단위를 함유한다. R1, R2, R3 및 R4 는 동일할 수 있거나 및/또는 서로 상이할 수 있다.
치커리산의 하나의 전형적인 유도체는 예를 들어 하기 화합물이다:
Figure pct00003
치커리산 및/또는 이의 유도체를 함유하는 성분은 자연적으로 또는 부가된 형태의 치커리산 및/또는 이의 유도체를 함유하는 임의의 성분일 수 있으나, 바람직하게는 자연 식품, 예컨대 상추, 치커리, 민들레, 포도, 포도 주박; 또는 이의 조합 또는 추출물이다.
구현예에서, 식물 물질은 경구용 화장 조성물에 치커리 추출물과 같은 추출물의 형태로 첨가된다. 치커리 추출물은 식물 물질의 임의의 적합한 부분으로부터 제조될 수 있고, 예를 들어, 뿌리, 펄프 등 또는 이의 조합이 포함된다.
본 발명의 목적을 위한 치커리의 적합한 추출물은 또한 시판되는 추출물, 예를 들어 Leroux MS55 (Leroux SAS, France 에서 시판됨) 이다.
본 발명의 특히 바람직한 구현예에서, 치커리의 적합한 추출물은 예를 들어, 증기 추출, 용매 추출, 증류, 압축 또는 분쇄에 의해 당업계에 공지된 임의의 수단에 의해 제조될 수 있다. 특히, 추출물은 물 추출 또는 알코올/물 추출에 의해, 예를 들어 에탄올/물 추출 또는 메탄올/물 추출에 의해 치커리 식물 물질로부터 용매로의 추출에 의해 수득가능하다. 추출물은 액체 형태 (예를 들어, Leroux MS55, Leroux MS70) 또는 분말 형태 (예를 들어, Leroux Sol B) 로 사용될 수 있다.
취급 용이성을 위해, 식물 물질은 바람직하게는 건조된 및 분쇄된 또는 분말 형태이다. 하기 기재되는 바와 같이, 공정은 건조된, 분쇄된 치커리 및/또는 이의 추출물을 이용한다. 그러나, 임의의 적합한 식물 물질은 임의의 적합한 형태로 사용될 수 있고 본 발명에 따른 생성물에 첨가될 수 있다는 것으로 이해된다.
추출물은 이의 풍미가 향상될 수 있는 식으로 가공된다. 예를 들어, 치커리와 같은 식물 물질에 전형적으로 연관된 쓴 풍미는 식물을 추출물로 가공함으로써 제거될 수 있다. 추출물은 또한 최종 추출 생성물 중의 생물활성제의 양이 바람직하게 조절될 수 있는 식으로 제조될 수 있다.
식물 물질이 다양한 상이하고 적합한 방식으로 추출물을 형성하도록 가공될 수 있다는 것이 인지되어야만 한다. 일반적으로, 식물 물질, 예컨대 치커리 뿌리는 분쇄되고, 분말화되거나, 임의의 적합한 형태로 제공된다. 이후 식물 물질은 생성 추출물을 제조하기 위한 다수의 상이한 단계로 추가로 가공될 수 있다. 구현예에서, 탈지 절차는 식물 물질로부터 제거된 지방으로부터 산출되는 추출물을 생성하기 위해 식물 물질에 대해 수행된다. 탈지 절차는 예를 들어, 헥산을 비롯한 임의의 적합한 유형 및 양의 용매로의 임의의 적합한 탈지 공정 조건 하에 수행될 수 있다.
구현예에서, 탈지 절차의 산출된 추출물은 산 가수분해를 통해 추가로 가공되어 본 발명의 영양 조성물에 첨가될 수 있는 또다른 유형의 식물 추출물을 산출할 수 있다. 산 가수분해 절차는 예를 들어, 에틸 아세테이트를 비롯한 임의의 적합한 유형 및 양의 용매로의 임의의 적합한 공정 조건 하에 수행될 수 있다.
구현예에서, 탈지 절차로부터의 추출물은 용매 추출 절차를 통해 추가로 가공될 수 있다. 용매 추출은 임의의 적합한 공정 조건 하에서 그리고 임의의 적합한 양 및 유형의 용매의 존재 하에 실시될 수 있다. 구현예에서, 용매는 1:1 부피 비로 혼합된 메탄올 ("MeOH") 및 물 용액을 포함한다. 용매 추출 절차의 산출 용액은 또다른 추출물을 제조하기 위한 적합한 조건 하에서 용매의 증발에 의해 추가로 가공될 수 있다. 대안적으로, 산출 용액은 폴리페놀을 포획하기 위한 흡착제, 예컨대 폴리비닐폴리피롤리돈 등으로 처리될 수 있다. 흡착제 처리는 임의의 적합한 공정 조건 하에서 실시될 수 있다.
생성물 중의 치커리산 또는 이를 함유하는 식물 추출물의 양은, 여러 인자, 예컨대 추출물의 특성, 식물의 상태, 치료되는 사람 또는 동물의 나이, 상태 및 크기, 빈도, 투여될 생성물 및/또는 치료 또는 예방하고자 하는 특정 종류의 피부 질환 또는 손상 또는 원하는 화장 효과에 따라 다를 것이다.
본 출원인은 본 발명에 따른 치커리산 또는 이를 함유하는 추출물의 유효성이 일반적으로 용량 의존적이고 용량 반응 곡선을 따른다는 것을 밝혔다. 일반적으로 경미한 피부 질환 또는 손상이 예방되어야 하는 경우 그리고 생성물이 자주 사용될 것인 경우, 매우 소량의 치커리산 또는 이의 추출물은 원하는 효과를 달성하는데 충분할 것이다. 심각한 피부 색소 질환이 치료되어야 하는 경우, 또한 소량으로도 효능이 있을 것임에도 불구하고 더 많은 양의 성분이 더욱 적합할 것이다.
바람직한 구현예에서, 성분은 치커리산 및/또는 이의 유도체가 풍부하다. 예를 들어, 성분 및/또는 조성물은 치커리산 및/또는 이의 유도체를 0,001-99,99 중량% 의 건조 중량, 바람직하게는 0,1-50 중량% 의 건조 중량, 가장 바람직하게는 0,1-10 중량% 의 건조 중량의 범위의 양으로 포함할 수 있다. 성분 및/또는 조성물은 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 미생물 및/또는 효소를 0,001-99,99 중량% 의 건조 중량, 바람직하게는 0,1-50 중량% 의 건조 중량, 가장 바람직하게 0,1-10 중량% 의 건조 중량의 범위의 양으로 포함할 수 있다.
일반적으로, 생성물이 치커리 또는 이의 추출물을 약 0,1 g/l 내지 10 g/l 의 범위, 바람직하게는 0,5 g/l 내지 3 g/l 생성물 범위의 양으로 함유하는 경우가 바람직하다. 생성물의 총 양이 리터로 측정될 수 없는 경우에는, 생성물이 치커리 또는 이의 추출물을 약 0,1 g/kg 내지 10 g/kg 의 범위, 바람직하게는 0,5 g/kg 내지 3 g/kg 생성물의 범위의 양으로 함유하는 경우가 바람직하다. 바람직하게는 생성물은 치커리 또는 이의 추출물을 0,01 g-100g, 바람직하게는 0,25 g-10g 의 일일 용량으로 함유한다.
치커리산 및/또는 이의 유도체를 함유하는 성분과 혼합되게 되는 성분은 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아 및/또는 효소를 포함한다. 상기 2 개의 성분은 소비 전에 간략하게 혼합될 수 있고 또는 즉석-소비 조성물로서 제공될 수 있다.
치커리산을 가수분해할 수 있는 미생물 또는 효소
치커리산 및/또는 이의 유도체는 이후 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해할 수 있는 락트산 박테리아에 의해 가수분해될 수 있다. 상기 가수분해 단계는 타르타르산 및/또는 카페산을 발생시킬 것이다.
이론에 구애됨 없이, 본 출원인은 상기 가수분해가 하기 도식에 요약된 바와 같이 일어난다는 것으로 여긴다. "효소" 에 의해 촉매화된 모든 반응 단계가 또한 본 출원에 기재된 락트산 박테리아 및/또는 락트산 박테리아 및 효소의 조합에 의해 촉매화될 수 있다는 것을 유념한다.
Figure pct00004
본 출원인은 놀랍게도 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아 또는 효소로, 치커리산 및/또는 이의 유도체를 포함하는 성분을 처리하는 것이 예를 들어 성분의 개선된 활성을 산출한다는 것을 발견하였다.
게다가, 상기 처리는 인간 또는 동물이 클로로겐산을 가수분해하여 페놀산을 발생시킬 수 있는 락트산 박테리아와 조합으로 치커리산 및/또는 이의 유도체를 포함하는 조성물을 섭취하는 경우 생체 내에서 일어날 수 있다는 것을 발견하였다.
치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 바람직한 락트산 박테리아는 에스테라아제 활성, 예컨대 클로로게네이트 에스테라아제 및/또는 페룰로일 에스테라아제를 갖는 프로바이틱 락트산 박테리아, 바람직하게는 락토바실러스 (Lactobacillus) 또는 비피도박테리움 (Bifidobacterium), 예를 들어 L. 존손니이 (L. johnsonii), B. 롱검 (B. longum), 및 B. 락티스 (B. lactis) (CNCM I-3446) 이고, 더욱 더 바람직한 것은 락토바실러스 존손니이 (Lactobacillus johnsonii) La1 (CNCM I-1225), B. 롱검 (B. longum) BB 536, 및 B. 락티스 (B. lactis) BB12 이다.
B. 롱검 (B. longum) BB 536 은 Morinaga Nutritional Foods, Inc 에서 시판된다.
B. 락티스 (B. lactis) BB12 는 예를 들어, Chr. Hansen, DK-2970 Horsholm 에서 시판된다.
본 발명의 하나의 구현예에서, 락트산 박테리아는 비-복제 형태로 사용될 수 있다.
치커리산을 가수분해하는 락트산 박테리아 또는 이의 분절의 능력은 실시예에서 L. 존손니이 (L. johnsonii) 에 대해 상세히 기재된 바와 같이 시험될 수 있다.
또다른 구현예에서, 치커리산을 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 효소가 추가로 락트산 박테리아에 첨가된다. 바람직하게는, 이러한 효소는 에스테라아제, 예컨대 클로로게네이트 에스테라아제, 탄나아제 및/또는 페룰로일 에스테라아제로 이루어지는 군으로부터 선택된다. 이것은 조성물에 존재하는 치커리산의 바람직하게는 5% 이상, 예컨대 30% 이상, 50% 이상, 또는 75% 이상과 같은 양으로 첨가될 수 있고 소비 전에 및/또는 소비 동안 가수분해된다.
본 발명의 체제에서 사용될 수 있는 적합한 효소에는 예를 들어, 에스테라아제, 예를 들어, 아스페르길루스 자포니쿠스 (Aspergillus japonicus) 유래의 클로로게네이트 에스테라아제 (Kikkoman, Japan 에서 시판됨), 아스페르길루스 오리자에 (Aspergillus oryzae) 유래의 탄나아제 (EC 3.1.1.20) (Kikkoman, Japan 에서 시판됨) 가 포함된다. 효소는 정제된 효소 (고정화된 또는 아닌) 로서 또는 예를 들어 미생물의 세포 용리액의 형태로 존재할 수 있다. 적합한 세포는 예를 들어 상기 언급된 미생물의 세포일 수 있다. 세포 용리액의 적합한 제조 방법은 당업계에 알려져 있다.
본 발명의 조성물 및/또는 성분은 락트산 박테리아 균주가 저장 동안 조성물로 발효되거나 이와 반응하지 않을 것인 식으로 제형화되어야만 한다. 이것은 예를 들어, 조성물을 건조 분말로서 제형화함으로써, 및/또는 락트산 박테리아를 캡슐화함으로써 조성물이 하나 이상의 다른 성분과 혼합되는 경우에만 또는 소화 동안 방출될 수 있게 하도록 하여 달성될 수 있다.
락트산 박테리아는 소화 동안 타르타르산 및/또는 카페산을 발생시키도록 상당한 양의 치커리산을 가수분해하는데 적합한 양으로 존재해야만 한다. 필요한 락트산 박테리아 및/또는 효소의 양은 예를 들어 처리되는 대상 또는 타르타르산 및/또는 카페산이 방출되어야만 하는 속도에 따라, 예를 들어 당업자에 의해 측정될 수 있다. 조성물에 존재하는 치커리산의 바람직하게는 5% 이상, 예컨대 30% 이상, 50% 이상, 또는 75% 이상이 소비 전에 및/또는 소비 동안 가수분해된다.
본 발명에 따른 조성물은 선택된 투여 방법에 통상 이용가능한 임의의 생약 형태일 수 있다.
생약 형태
본 발명에 따른 조성물은 선택된 투여 방법에 통상 이용가능한 임의의 생약 형태일 수 있다. 담체는 고려 중인 조성물의 유형에 따라 다양한 특성의 것일 수 있다.
경구 투여용의 식품 보충제는 캡슐, 젤라틴 캡슐, 연질 캡슐, 정제, 당의정, 알약, 페이스트 또는 파스틸 (pastille), 검 또는 음용액 또는 에멀젼, 시럽 또는 젤로 존재할 수 있다. 이러한 보충제에는 또한 감미제, 안정화제, 항산화제, 첨가제, 풍미제 및/또는 착색제가 포함될 수 있다. 이의 제형화는 당의정, 젤 캡슐, 겔, 방출 조절용 히드로겔, 에멀젼, 정제 또는 캡슐의 제조를 위한 통상적인 방법으로 실시된다. 하나의 구현예에서, 본 발명은 죽은, 살아있는 또는 반-활성 형태의 프로바이틱 미생물, 또는 수화제 또는 항-노화제를 임의로 함유하는 경구용 식품 보충제 또는 국소 조성물과 조합된, 식품 보충제로 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 하나 이상의 성분 및 치커리산을 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아 및/또는 효소를 함유하는 조성물로의 경구 치료를 포함하는, 피부 색소 질환 및/또는 피부 결함의 치료 및/또는 예방용 키트에 관한 것이다.
식품 보충제의 제조용 키트는 하기 2 가지 이상의 부분을 포함한다:
a) 치커리산 및/또는 이의 유도체 함유 성분을 포함하는 제 1 부분; 및
b) 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아 및/또는 효소를 포함하는 제 2 부분.
당업자는 본원에 기재된 본 발명의 모든 특징이, 기재된 발명의 범주를 벗어남 없이 자유롭게 조합될 수 있다는 것을 이해할 것이다. 특히, 본 발명의 용도에 대해 기재된 특징은 본 발명의 조성물 및/또는 키트에 적용될 수 있고 그 반대도 마찬가지다.
용도
본 발명의 생성물은 예를 들어, 멜라닌의 생성을 감소시켜, 피부 색소침착 질환의 치료 또는 예방을 위하여 또는 화장용으로 피부톤의 라이트닝을 위하여 효과적으로 사용될 수 있다. 실제로 프로바이틱 박테리아 La-1 로 처리된 치커리산을 함유하는 성분은 시험관 내에서 멜라닌 합성을 감소시키는 것으로 나타났다 (실시예 1, 도 1). 티로시나아제의 생성 또한 다소 감소하였는데 (도 2), 이는 멜라닌의 감소가 티로시나아제 억제에 의한 것이 아니라 상기 효소의 업스트림 또는 다운스트림로 작용하는 메카니즘에 의한 것임을 제안한다.
본 발명에 따른 조성물은 추가로 피부 장벽 강화 및 피부 수화 유지에 긍정적인 효과를 갖는다.
그 결과, 색소 결함은 감소되고, 피부이상변색 또는 건조 영역 없이 안색은 밝고 더욱 균일해진다.
따라서, 하나의 주제에 따르면, 본 발명은 피부 색소침착 질환, 특히 노화 또는 환경적인 요인, 예컨대 UV 에 의한 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 활성제로서, 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 유효량의 하나 이상의 성분 및 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락틱 박테리아 및/또는 효소의 화장용 용도에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 또한 아시아인에게 특히 바람직한, 피부톤의 화이트닝 또는 라이트닝을 위한 활성제로 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 용도는 또한, 특히 하기 기재된 바와 같은 피부 수화 또는 피부 노화의 개선을 위한, 유효량의 하나 이상의 활성제와 조합된, 조성물의 용도를 포함할 수 있다.
또 다른 양상에 따르면, 본 발명의 주제는 개인에게, 상기 기재된 조성물을 투여하는 하나 이상의 단계를 포함하는, 개인에서의 피부톤 결함 및 과-색소침착과 관련된 질환, 특히 심미적 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 방법, 특히 화장적 방법이다.
본 발명의 화장적 치료 방법은 상기 기재된 조성물을 특히 경구로 투여하여 실시될 수 있다. 경구 투여는 상기 정의된 경구 조성물을 1 회 이상 섭취량으로 섭취하는 것을 포함한다.
이것은 단일 적용을 포함할 수 있다. 또다른 구현예에 따르면, 적용은 예를 들면 1 일 이상 동안 및 일반적으로 4 주 이상 또는 심지어 1 내지 15 주의 지속된 기간 동안, 일일 2 내지 3 회 반복된다.
또한, 본 발명에 의해 정의된 바와 같은 조성물의 활성을 보충 또는 강화하기 위해, 임의로 경구 또는 국소 형태의 치료를 조합할 수 있다.
그러므로, 임의로 또다른 활성 성분, 특히 프로바이틱 미생물, 또는 죽은, 살아있는 또는 반-활성 형태의 다른 프로바이틱, 또는 수화제 또는 항-노화제를 함유하는 경구 또는 국소 조성물과 조합된, 본 발명에 따른 치커리산을 함유하는 조성물을 이용한 국소 또는 경구 치료는 키트로서 예상될 수 있다. 상기 성분은 제형화되기 전에, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있는 순서 및 조건 하에서 혼합된다.
상기 성분은 제형화되기 전에, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있는 순서 및 조건 하에서 혼합된다.
본 발명의 추가적인 장점 및 특징은 하기 실시예 및 도면에 의해 명백해진다. 따라서, 하기 실시예는 본 발명의 분야를 비제한적인 방식으로 제시한다. 이러한 실시예에서, 달리 언급되지 않는 한, 백분율 (%) 은 중량% 이고, "... 내지 ..." 의 형태로 기재된 값의 범위에는 특정된 상한 및 하한이 포함된다. 용어 "cfu" 는 "콜로니 형성 단위" 를 나타낸다. 이것은 생 박테리아를 정량하는데 사용되는 측정 단위이다.
도면
도 1: 치커리산 + La1 대 대조군 (양성 / 음성) 으로 전처리된 쥣과 멜라닌세포에 의한 멜라닌 생성.
도 2: 치커리산 + La1 대 대조군 (양성 / 음성) 으로 전처리된 쥣과 멜라닌세포에 의한 티로시나아제 생성.
도 3: 치커리산 + La1 대 대조군 (양성 / 음성) 으로 전처리된 인간 일차 표피 각질형성세포에 의한 필라그린 합성.
실시예
실시예 1: 치커리산의 가수분해
1- 클로로게네이트 에스테라아제로의 치커리산의 가수분해
100 ㎕ 인산염 완충액 (50 mM, pH 7.0) 중의 클로로게네이트 에스테라아제 (0.8 mg, 24 U/g, Kikkoman Japan) 용액을 100 ㎕ 인산염 완충액 (50 mM, pH 7.0) 중의 치커리산 (0.57 mg) 용액에 첨가하였다. 이후 혼합물을 37℃ 에서 4 h 동안 인큐베이션하였다. 반응 시간 후, 효소 활성을 열 처리 (5 분, 90℃) 에 의해 중지시키고, 혼합물을 원심분리하였다 (microcon YM10, 30 분, 14000 g). 이후 상청액을 HPLC 로 분석하였다. 대조군 반응을 효소는 없이, 동일한 반응 조건 하에서 동시에 실시하였다.
2- L. 존손니이 (L. johnsonii) (La1) 신선 세포로의 치커리산의 가수분해
L. 존손니이 (L. johnsonii) 세포 (CNCM I-1225) 를 성장시키고 (7.0 E08 cfu/ml) 원심분리하고 (5000 g, 10 분), 펠렛을 0.61 g/ml 의 농도의 인산염 완충액 (50 mM, pH 7.0) 에 재현탁하였다. 100 ㎕ 의 상기 세포 용액에, 치커리산 (12 mM) 용액 100 ㎕ 을 첨가하고, 혼합물을 37℃ 에서 인큐베이션하였다. 상이한 반응 시간에 샘플을 회수하고, 원심분리하고 (3000 g, 5 분), 0.45 ㎛ 공극 크기 주사기 필터 (Millipore SLHA 025 BS) 를 통해 여과하고, HPLC 에 의해 분석하였다.
대조군 반응을 박테리아는 없이, 동일한 반응 조건 하에서 동시에 실시하였다.
3- L. 존손니이 (L. johnsonii) 추출물 (용해된 세포) 로의 치커리산의 가수분해
L. 존손니이 (L. johnsonii) (CNCM I-1225) 세포를 성장시키고 (7.0 E08 cfu/ml) 원심분리하고 (5000 g, 10 분), 펠렛을 0.61 g/ml 의 농도로 인산염 완충액 (50 mM, pH 7.0) 에 재현탁시켰다. 이후 세포를 유리-비이드 방법을 사용하여 용해시켰다. 600 ㎕ 의 세포 제제를 1 분의 집중적인 교반을 위해 Mini-Beadbeater 내에 넣고, 빙상에서 냉각시키고, 다시 1 분 동안 Mini-Beadbeater 에 두었다. 이후 미정제 세포 추출물 (100 ㎕) 을 치커리산 (12 mM, 인산염 완충액 50 mM, pH 7.0) 용액 100 ㎕ 에 첨가하고, 혼합물을 37℃ 에서 인큐베이션하였다. 상이한 반응 시간에 샘플을 회수하고, 원심분리하고 (3000 g, 5 분), 0.45 ㎛ 공극 크기 주사기 필터 (Millipore SLHA 025 BS) 를 통해 여과하고, HPLC 에 의해 분석하였다.
4- La1 의 분무-건조 제제로의 치커리산의 가수분해
La1 (3.3 E09 cfu/g) 의 10 mg 의 분무-건조 제제를 100 ㎕ 의 인산염 완충액 (50 mM, pH 7.0) 에 용해하였다. 상기 용액에, 100 ㎕ 의 치커리산 용액 (12 mM, 인산염 완충액 50 mM, pH 7.0) 을 첨가하였다. 이후 혼합물을 37℃ 에서 인큐베이션하고, 상이한 반응 시간에 샘플을 회수하였다. 원심분리 (3000 g, 5 분) 및 여과 (0.45 ㎛ 공극 크기 주사기 필터, Millipore SLHA 025 BS) 후, 샘플을 HPLC 에 의해 분석하였다.
HPLC 분석
치커리산 및 가수분해 생성물의 HPLC-DAD 분석을 Atlantis C18 역상 컬럼 (4.6 x 100 mm, 입자 크기 3 ㎛) 및 다이오드 어레이 검출기가 구비된 Agilent 1100 시스템 상에서 수행하였다. 컬럼을 0.1 % 포름산을 함유하는 물로 평형화하였다. 주입 후, 55 % 물 및 45 % 아세토니트릴 (0.1 % 포름산 함유) 의 최종 용매 조성으로의 선형 구배를 1 ml/분의 유속으로 12 분 내에 실행하였다. 치커리산 및 카페산을 320 nm 에서 UV 에 의해 모니터링하고, 표준 보정 곡선 사용하여 정량하였다.
결과
시험된 박테리아
Figure pct00005
특히 L. 존손니이 (L. johnsonii) (La1), B. 롱검 (B. longum) BB 536, 및 B. 락티스 (B. lactis) BB12 는 치커리산을 가수분해할 수 있었다. 반응 속도 및 반응 수율에 관한 최고 결과는 L. 존손니이 (L. johnsonii) (La1) 로 수득되었다.
시험된 효소
Figure pct00006
클로로게네이트 에스테라아제, 페룰로일 에스테라아제 및 La1 에스테라아제는 치커리산을 카페산 및 타르타르산으로 가수분해할 수 있었다.
1- 클로로게네이트 에스테라아제로의 치커리산의 가수분해
표 3: 클로로게네이트 에스테라아제에 의한 치커리산의 카페산 및 카프타르산으로의 가수분해. t=0 에서의 미처리된 참조에 대한 농도(%)
Figure pct00007
2- La1 신선 세포로의 치커리산의 가수분해
4h 반응 시간 후, 모든 치커리산은 HPLC 에 의해 분석된 바와 같이 카페산 및 타르타르산으로 변형되었다.
3- La1 추출물 (용해된 세포) 로의 치커리산의 가수분해
전체 세포와 비교하여, 용해된 세포로의 치커리산의 가수분해는 반응 속도의 증가를 야기하였다. 게다가, 단지 2h 후, 모든 치커리산이 카페산 및 타르타르산으로 변형되었다.
4- La1 의 분무-건조 제제로의 치커리산의 가수분해
표 4: L. 존손니이 (L. johnsonii) (CNCM I-1225) 의 분무-건조 제제에 의한 치커리산의 카페산 및 카프타르산으로의 가수분해. t=0 에서의 미처리된 참조에 대한 농도(%)
Figure pct00008
실시예 2 : 피부 색소침착에 대한 효과
피부의 탈-색소침착 (de-pigmentation) 또는 전-색소침착 (pro-pigmentation) 에 대한 성분의 잠재적인 유익한 효과를 평가하기 위하여, 쥣과 멜라닌세포 (B16) 의 2D 배양을 사용하여, 2 가지 시험을 수행하였다: 1 - 멜라닌 생성의 평가 및 2 - 티로시나아제 생성의 평가.
1. 세포 배양 조건.
B16 세포를 37℃ 및 5% CO2 함유 습윤 챔버에서, 페놀 레드 부재하에, 10% 우태혈청이 보충된 DMEM 1 g/L 글루코오스에서 배양하였다.
2. B16 쥣과 멜라닌세포 세포주에 의한 멜라닌의 생성.
세포를 MSH 의 유사체인 NDP-MSH 의 유/무 하에서, 선택된 성분 또는 시험 참조 (400 ㎍/mL 코즈산) 과 함께 72 시간 동안 인큐베이션하였다. 멜라닌의 총 양 (세포외 및 세포내) 을 NDP-MSH 의 유/무 하에서, 멜라닌 표준에 대한 405 nm 에서의 각각의 샘플의 광학 밀도의 측정에 의해 평가하였다.
3. B16 쥣과 멜라닌세포 세포주에 의한 티로시나아제의 생성 .
세포를 선택된 성분 또는 시험 참조 (400 ㎍/mL 코즈산) 과 함께 48 시간 동안 인큐베이션하였다. 티로시나아제의 생성율을 면역표지법에 의해 평가하였다.
성분:
선택된 성분을 하기 표 1 에 열거한다. 치커리산을 교반 조건 하에서, 40℃, 열혼합기에서 24 시간 동안 La-1 [(분무 건조 배양 락토바실러스 존손니이 (Lactobacillus johnsonii) CNCM I-1225, 1.19E10 cfu/g) 로 전-처리하였다. 인큐베이션 후, 샘플을 3000 g 에서 5 분 인큐베이션하였다. 상기 처리 후, 프로바이틱은 샘플 내에 더이상 존재하지 않았으나 이의 대사물의 존재를 배제할 수는 없다. 치커리산의 시험된 농도를 또한 표 5 에 나타낸다.
Figure pct00009
결과
결과는 대조군에 대하여 백분율로 나타낸다. 시험 참조 (코즈산) 는 예상한 대로 멜라닌 함량의 감소를 유도하였다. 도 1 은 선택된 성분으로 72 시간 동안 처리된 B16 멜라닌세포에 의한 멜라닌의 생성을 나타낸다.
프로바이틱 CNCM I-1225 로 시험된 치커리산은 피부 탈-색소침착에 대해 효과적인 것으로 보였다. 게다가, 프로바이틱으로 처리된 치커리산은 멜라닌 생성을 90% 감소시켰다 (도 1). 티로시나아제의 생성 또한 이들 성분에 의해 감소하였지만, 제한된 정도로 감소하였으며 (20% 미만, 도 2), 이는 멜라닌의 감소가 티로시나아제 억제에 의한 것이 아니라 상기 효소의 업스트림 또는 다운스트림의 작용 메커니즘에 의한 것이었음을 제안한다.
실시예 3: 피부 장벽 기능 및 수화에 대한 효과
피부 장벽 기능 및 피부 수화에 대한 실시예 2 의 추출물의 잠재적인 유익한 효과를 인간 일차 표피 각질형성세포의 2D 배양을 사용하여 평가하고, 선택된 성분으로의 처리 후 필라그린의 그 합성을 평가하였다.
세포 배양 조건
인간 상피 각질형성세포를 37℃ 및 5% CO2 함유 습윤 챔버에서, 대조군 각질형성세포-SFM 배지에서 배양하였다.
인간 상피 각질형성세포에 의한 필라그린의 합성.
세포를 선택된 성분 또는 시험 참조 (1.5 mM CaCl2) 과 함께 144 시간 동안 인큐베이션하였다. 필라그린의 생성율을 면역표시법에 의해 평가하였다.
결과
결과를 도 3 에 제시한다. 치커리산 + La1 로의 세포의 전-처리는 필라그린의 상당한 증가를 보여주었으며 (대조군의 500%, 도 3), 이는 상기 추추물이 피부 장벽을 강화시킨다는 것을 암시한다. 더 강한 피부 장벽은 환경 및 병원균의 공격으로부터 양호한 신체 보호를 보장한다. 이는 또한 표피를 통한 수분의 손실을 제한함으로써 적절한 피부 수화를 보장한다.
실시예 4: 캡슐
Figure pct00010
하루에 상기 캡슐 중 1 내지 3 개를 섭취할 수 있다.
CNCM Collection nationale de cultures de micro-organismes CNCMI-1225 19920702 CNCM Collection nationale de cultures de micro-organismes CNCMI-3446 20050909

Claims (14)

  1. 피부 색소 질환 및/또는 피부 결함의 치료 및/또는 예방을 위한 경구용 식품 보충제의 제조를 위한, 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 유효량의 하나 이상의 성분 및 치커리산을 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아 및/또는 효소의 화장적 용도.
  2. 제 1 항에 있어서, 피부 질환이 기미, 주근깨, 백반증, 얼룩백색증, 페닐케톤뇨증 등 및/또는 검버섯에서 관찰되는 것을 특징으로 하는 용도.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 피부톤 및/또는 피부 안색을 향상시키기 위한 용도.
  4. 피부톤의 라이트닝 및/또는 화이트닝을 위한 경구용 식품 보충제의 제조를 위한, 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 유효량의 하나 이상의 성분 및 치커리산을 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아 및/또는 효소의 화장적 용도.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 피부의 수화 및/또는 피부 장벽 기능을 추가로 개선하는 용도.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 치커리산 함유 성분이 상추, 치커리, 민들레, 포도, 포도 주박과 같은 자연 식품; 또는 이의 조합 또는 추출물인 용도.
  7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 치커리산을 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 효소를 추가로 함유하는 용도.
  8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, 치커리산을 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아가 클로로게네이트 에스테라아제 및/또는 페룰로일 에스테라아제 활성과 같은 에스테라아제 활성을 갖는 프로바이틱 락트산 박테리아인 용도.
  9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, 락트산 박테리아가 L. 존손니이 (L. johnsonii), B. 롱검 (B. longum), 및 B. 락티스 (B. lactis), 특히 락토바실러스 존손니이 (Lactobacillus johnsonii) (CNCM I-1225), B. 롱검 (B. longum) BB 536, B. 락티스 (B. lactis) (CNCM I-3446) 및 B. 락티스 (B. lactis) BB12 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 용도.
  10. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서, 피부 수화 또는 피부 노화를 개선하기 위해 유효량의 하나 이상의 활성제와 조합되는 용도.
  11. 개인에게, 식품 보충제로 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 유효량의 하나 이상의 성분 및 치커리산을 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아 및/또는 효소를 투여하는 하나 이상의 단계를 포함하는, 피부 색소 질환 및/또는 피부 결함의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 것인 화장적 치료 방법.
  12. 죽은, 살아있는 또는 반-활성 형태의 프로바이틱 미생물을 임의로 함유하는 경구용 식품 보충제 또는 국소 조성물, 또는 수화제 또는 항-노화제와 조합된, 식품 보충제로 치커리산 및/또는 유도체를 함유하는 하나 이상의 성분 및 치커리산을 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아 및/또는 효소를 함유하는 조성물로의 경구 치료를 포함하는, 피부 색소 질환 및/또는 피부 결함의 치료 및/또는 예방용 키트.
  13. 하기 2 가지 이상의 부분을 포함하는 식품 보충제의 제조용 키트:
    a) 치커리산 및/또는 이의 유도체 함유 성분을 포함하는 제 1 부분; 및
    b) 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아 및/또는 효소를 포함하는 제 2 부분.
  14. 제 12 항에 있어서, 치커리산 및/또는 이의 유도체를 가수분해하여 타르타르산 및/또는 카페산을 생성할 수 있는 락트산 박테리아가 클로로게네이트 에스테라아제 및/또는 페룰로일 에스테라아제 활성과 같은 에스테라아제 활성을 갖는 프로바이틱 락트산 박테리아인 키트.
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