KR20120020639A - 단삼을 포함하는 전립선암 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 단삼의 신규한 용도에 관한 것이다. 구체적으로 본 발명은 단삼을 포함하는 전립선암 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 전립선암 치료용 조성물은 전립선암 세포의 성장을 억제하고 세포사멸을 유도하는 효과가 있다.
Description
본 발명은 단삼의 신규한 용도에 관한 것이다. 구체적으로 본 발명은 단삼을 포함하는 전립선암 치료제에 관한 것이다.
전립선암은 전립선에서 발생하는 악성 종양으로, 서양의 경우 남성암 중 가장 흔한 암 중 하나이며, 우리나라에서도 최근 식이습관 등의 영향으로 그 발생 빈도가 증가하는 추세이다. 전립선암은 유전적 소인 외에도 호르몬, 식이습관, 화학약품 등에 의해서도 발병하는 것으로 알려져 있다.
단삼(Salvia miltiorrhiza Bunge)의 뿌리로 만든 약재는 혈액순환을 돕고, 어혈을 제거하며 사지관절 동통을 완화시킨다. 약리작용은 관상동맥 확장, 콜레스테롤 강하, 혈압 강하, 간기능 활성화, 진정 항염, 항암, 항균작용이 보고되었다. 그러나 아직 단삼의 전립선암 억제 효과에 대해서는 알려진 바가 없다.
본 발명의 목적은 단삼을 포함하는 전립선암 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 단삼을 포함하는 전립선암 치료용 조성물을 제공한다. 본 발명의 항암 조성물은 활성성분으로서 단삼을 포함하며, 추가적으로 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기 “약제학적으로 허용가능한 담체”는 신체의 한 기관 또는 부분으로부터 신체의 다른 기관 또는 부분으로 활성 성분을 수송하는 역할을 하는 액체 또는 고체 충진제, 희석제, 부형제 또는 용매와 같은 약제학적으로 허용되는 물질, 조성물 또는 운반체(vehicle)를 의미한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 본 발명의 조성물은 단독으로 또는 방사선 요법 또는 화학 요법(세포성장정지 또는 세포독성 물질, 항생물질형 물질, 알킬화제, 항대사성 물질, 호르몬제, 면역제, 인터페론형 물질, 사이클로옥시게나제 억제제(예를 들면, COX-2 억제제), 메탈로매트릭스프로테아제 억제제, 테로머라제 억제제, 티로신 키나제 억제제, 항성장인자수용체 물질, 항-HER 물질, 항-EGFR 물질, 항-혈관생성 물질, 파르네실 트랜스퍼라제 억제제, ras-raf 시그날 전도 경로 억제제, 세포 주기 억제제, 기타 cdk 억제제, 튜불린 결합제, 토포이소머라제 I 억제제, 토포이소머라제 II 억제제 등)과 같은 다른 항암치료와 병용하여 투여할 수 있다. 예로서, 본 발명의 조성물은 리포좀 제제내에 임의로 함유된 하나 이상의 화학요법제(예를 들면, 택산, 택산 유도체, 캡슐화 택산, CPT-11, 캠프토테신 유도체, 안트라사이클린 글리코사이드, 독소루비신, 이다루비신, 에피루비신, 에
토포사이드, 나벨바인, 빈블라스틴, 카르보플라틴, 시스플라틴, 에스트라무스틴, 셀레콕시브, 슈겐 SU-5416, 슈겐 SU-6668, 헤르셉틴 등)와 병용하여 투여할 수 있다. 일정한 용량으로 제형되는 경우, 이러한 조합물은 본 발명의 조성물을 하기된 용량 범위내에서 사용하고 다른 약제학적으로 활성 물질은 승인된 용량 범위 내에서 사용한다. 본 발명의 조성물은 조합 제제가 부적절할 경우 알려진 항암제와 순차적으로 사용할 수 있다. 본 발명의 항암 조성물에서 활성 성분의 일일투여 유효량은 환자의 연령, 성별, 적용부위, 투여횟수, 투여시간, 제형, 보조제의 종류 등에 따라 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물은 항암치료를 위해 통상적으로 사용되는 경로를 통해 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 항암 조성물은 투여 형태에 따라 여러 제형으로 제조될 수 있다. 예를 들면 정제, 캡슐, 당의정 또는 필름 피막 정제, 액제 또는 현탁제의 경구 형태, 근육내, 정맥내 및/또는 척수강내 및/또는 척수내 주사 또는 주입의 비경구 형태로 투여할 수 있다. 예를 들면, 경구용 고형제는 활성 화합물과 함께 희석제(예를 들면, 락토즈, 덱스트로즈, 자당, 셀룰로즈, 옥수수 전분 또는 감자 전분), 활탁제(예를 들면, 실리카, 탈크, 스테아린산, 마그네슘 또는 칼슘 스테아레이트 및/또는 폴리에틸렌글리콜), 결합제(예를 들면, 전분, 아라빅 검, 젤라틴 메틸셀룰로즈, 카르복시메틸셀룰로즈 또는 폴리비닐 피롤리돈), 붕해제(예를 들면, 전분, 알긴산, 알기네이트 또는 나트륨 전분 글리콜레이트), 포르말 혼합물, 염료, 감미제, 습윤제(예를 들면, 레시틴, 폴리솔베이트, 라우릴설페이트) 및 일반적으로 약제에 사용되는 약물학적 불활성 물질을 함유할 수 있다. 이들 약제는 공지된 방법, 예를 들면 혼합, 과립화, 타정, 당의 또는 필름-피복 공정의 수단에 의해 제조할 수 있다. 경구 투여용 액체 분산액은 예를 들면 시럽, 유화액 및 현탁액일 수 있다. 현탁액 및 유화액은 담체로서, 예를 들면 천연 검, 한천, 나트륨 알기네이트, 펙틴, 메틸셀룰로즈, 카르복시메틸셀룰로즈 또는 폴리비닐 알코올을 함유할 수 있다. 근육내 주사를 위한 현탁액 또는 용액은 활성 화합물과 함께 약제학적으로 허용되는 담체, 예를 들면 멸균수, 올리브유, 에틸 올레에이트, 글리콜(예를 들면, 프로필렌 글리콜) 및 필요한 경우 적합한 양의 리도카인 하이드로클로라이드를 함유할 수 있다. 정맥내 주사 또는 주입용 용액은 담체로서, 예를 들면 멸균수를 함유하거나 바람직하게는 멸균, 수성, 등장성 염수 용액의 형태일 수 있거나 담체 프로필렌 글리콜을 함유할 수 있다.
본 발명자들은 단삼이 전립선암 세포의 성장을 억제하고 세포사멸을 유도한다는 것을 발견하였다. 따라서 본 발명에 따른 전립선암 치료용 조성물은 전립선암 환자의 치료에 매우 효과적일 것이다.
도 1은 인간 전립선암 세포주인 PC-3에서 단삼의 도입이 전립선암세포의 성장에 미치는 영향을 알아보기 위한 Alamar Blue 분석 결과이다.
도 2는 인간 전립선암 세포주인 DU 145에서 단삼의 도입이 전립선암세포의 성장에 미치는 영향을 알아보기 위한 Alamar Blue 분석 결과이다.
도 3은 인간 전립선암 세포주인 PC-3에서 단삼의 도입이 전립선암세포의 자멸에 미치는 영향을 알아보기 위한 유세포 분석 결과이다.
도 4는 인간 전립선암 세포주인 DU 145에서 단삼의 도입이 전립선암세포의 자멸에 미치는 영향을 알아보기 위한 유세포 분석 결과이다.
도 2는 인간 전립선암 세포주인 DU 145에서 단삼의 도입이 전립선암세포의 성장에 미치는 영향을 알아보기 위한 Alamar Blue 분석 결과이다.
도 3은 인간 전립선암 세포주인 PC-3에서 단삼의 도입이 전립선암세포의 자멸에 미치는 영향을 알아보기 위한 유세포 분석 결과이다.
도 4는 인간 전립선암 세포주인 DU 145에서 단삼의 도입이 전립선암세포의 자멸에 미치는 영향을 알아보기 위한 유세포 분석 결과이다.
이하, 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
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실시예
1>
인간 전립선암 세포주의 준비 및 처리
인간 전립선암 세포주인 PC-3와 DU 145를 ATCC(American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA)로부터 입수하였다. PC-3와 DU 145 세포주를 10%의 소태아혈청(fetal bovine serum)(Welgene)이 첨가된 배지에서 배양하였다. 상기 세포주를 37 ℃, 5% CO2의 수분이 있는 상태로 유지하고, 2-3 일 정도 계대배양하였다.
<
실시예
2>
단삼이
전립선암 세포의 성장에 미치는 영향
단삼이 전립선암 세포의 성장에 미치는 영향을 알아보기 위하여 Alamar Blue 분석을 시행하였다. Alamar Blue 분석은 MTT 분석의 변형된 형태인데, 특정 효소에 의해서 분해되는 화합물을 살아있는 세포에 처리한 후 화합물이 분해되면서 나오는 생성물의 형광 세기를 측정함으로써 약물을 처리한 후 살아있는 세포의 상대적인 숫자를 알아내는 실험방법이다.
PC-3와 DU 145 세포를 웰당 5 x 103개 정도로 96-웰 플레이트에 시딩(seeding)하고 24시간 배양하였다. 세포에 각각 0, 3.125, 6.25, 12.5, 25, 50 및 100 μg/ml의 단삼을 투여하고 48시간을 두었다. 96-웰 플레이트에서 각 웰에 채워진 0.2 ml의 세포 배양액에 20 μl의 Alamar Blue 시약을 첨가한 후 플레이트를 인큐베이터에서 2시간 동안 배양하였다. 각 웰의 세포를 고르게 반응시키기 위하여 플레이트를 천천히 흔들고, 544 nm의 파장에서 조사광을 조사하면서 590 nm에서 형광의 세기를 형광광도계(Fluorescence Microplate Reader; Molecular Devices Corp.)로 흡광도를 측정하였고, 암세포의 생존율을 도 1에 나타내었다.
그 결과, 도 1과 도 2에서 나타난 바와 같이 단삼의 처리 농도가 높을수록 암세포의 성장이 감소하였으며, 이로부터 단삼이 항암효과를 가짐을 알 수 있다.
<
실시예
3>
단삼이
전립선암 세포의 자멸에 미치는 영향
단삼이 암세포의 자멸에 미치는 영향을 알아보기 위하여 유세포분석(Flow Cytometry)을 시행하였다. 유세포분석은 유액 상태의 세포가 감지지역을 통과할 때 세포의 특징을 신속하게 특정하는 방법으로 세포의 핵을 형광물질로 염색한 후 분석할 경우 세포 자멸의 정도를 확인할 수 있는 실험방법이다.
PC-3와 DU 145 세포를 웰당 2.4 x 105개 정도로 6-웰 플레이트에 시딩(seeding)하고 24시간 배양하였다. 세포에 100 μg/ml의 단삼을 투여하고 24시간을 두었다. 6-웰 플레이트에서 각 웰에 채워진 배양액을 제거하고 PBS(phosphate-buffered saline, 인산완충염수)로 2회 세척하였다. 트립신-EDTA 용액으로 처리하여 부착된 세포를 부유시킨 후 마이크로튜브에 옮기고 원심분리하여 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 PBS로 세척하고 원심분리한 후 차가운 에탄올에 부유시켰다. 에탄올에 부유시킨 세포을 4°C에 보관하여 세포를 고정시킨 후 원심분리하고 PBS로 세척하였다. 세척한 세포를 500 μl의 PI 용액(50 μg/ml의 Propidium Iodide, 10 μg/ml의 RNase A)에 부유시킨 후 37°C에서 30분 보관하여 핵을 염색시킨 후 2ml의 PBS를 첨가하였다. 용액에 부유된 세포를 유세포분석기(FACS; BD biosciences)로 분석하였고, 암세포의 세포 자멸을 도 3과 도 4에 나타내었다.
그 결과, 도 2에서 나타난 바와 같이 단삼을 처리한 암세포는 세포 자멸 과정인 아포토시스(apoptosis) 과정이 진행 중이었으며, 이로부터 단삼이 암세포를 자멸에 이르게 함을 알 수 있다.
Claims (1)
- 단삼을 포함하는 전립선암 치료용 조성물.
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KR20180138302A (ko) * | 2017-06-21 | 2018-12-31 | 경희대학교 산학협력단 | 단삼 추출물을 포함하는 암의 예방 또는 치료용 조성물 |
KR20190110510A (ko) * | 2019-09-20 | 2019-09-30 | 경희대학교 산학협력단 | 혼합 생약 추출물을 포함하는 항암용 조성물 및 이의 용도 |
WO2021086120A1 (ko) | 2019-10-31 | 2021-05-06 | 주식회사 큐롬바이오사이언스 | 단삼(Salvia miltiorrhiza Bunge) 추출물을 유효성분으로 포함하는 전립선비대증 또는 탈모증의 치료 또는 예방용 조성물 |
KR20210052341A (ko) | 2019-10-31 | 2021-05-10 | 주식회사 큐롬바이오사이언스 | 단삼(Salvia miltiorrhiza Bunge) 추출물을 유효성분으로 포함하는 전립선비대증 또는 탈모증의 치료 또는 예방용 조성물 |
KR20220100809A (ko) | 2019-10-31 | 2022-07-18 | 주식회사 큐롬바이오사이언스 | 단삼(Salvia miltiorrhiza Bunge) 추출물을 유효성분으로 포함하는 전립선비대증 또는 탈모증의 치료 또는 예방용 조성물 |
KR20210125810A (ko) | 2020-04-09 | 2021-10-19 | 부산대학교 산학협력단 | 탄시논 ⅰ을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 조성물 |
KR20210125809A (ko) | 2020-04-09 | 2021-10-19 | 부산대학교 산학협력단 | 살비아놀산 b를 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 조성물 |
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