KR20110134849A - 세포 계량 장치, 세포 계량 방법 및 그 장치의 용도 - Google Patents

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KR20110134849A
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KR1020110055551A
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김 정태
크라우제 홀저
박 지황
벡 세바스티앙
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키스트-유로페 포르슝스게젤샤프트 엠비에치
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Abstract

본 발명은 세포 계량 장치 및 세포 계량 방법에 관련된다. 또한, 본 발명은 세포 계량 장치의 용도에 관련된다.

Description

세포 계량 장치, 세포 계량 방법 및 그 장치의 용도{Device for metering cells, method for metering cells and also use of the device}
본 발명은 세포 계량 장치 및 세포 계량 방법에 관련된다. 또한, 본 발명은 세포 계량 장치의 용도에 관련된다.
로봇-보조(robot-assisted) 계량 시스템에 의하여 하루에 10,000 이상의 스크리닝(screening)이 가능하다고 알려져 있다. 이 시험 비용을 저렴하게 하기 위하여, 한편으로 샘플 양을 최소화하고, 다른 한편으로, 시험 방법을 최적화한다. 그로 인하여 서브마이크로리터(submicrolitre) 범위로 정확하게 계량하기 위해서, HTS(고속대량스크리닝; High Throughput Screening)을 처리하는데에 종래 계량 장치에 상당한 부담을 지운다.
과거에는, 세포에 HTS 시스템을 적용하는 것이 어렵기 때문에 소위 의료연구 및 생명과학(bioscience)에서 세포-기반(cell-based) 분석(세포를 포함하는 매체의 테스트)을 함에 있어 수동으로 또는 주로 간단한 장치로 이루어졌다. 그로 인하여 샘플 내의 세포의 정확한 부피 및 정확한 수가 중요하다. 그러나 종래의 HTS 시스템은 세포의 수를 제어할 수 없고 단지 세포의 부피만 제어할 수 있을 뿐이었다. 그러나, 세포-기반(cell-based) 실험이 더 발달함에 따라, 적당한 HTS 시스템이 요구되고 있다. 100 세포에서 단지 1개의 세포를 가지고 세포-기반(cell-based) 실험을 하기 위한 사정 방법(evaluation approach)이 시중에 나와 있다.
종래의 HTS 시스템은 샘플의 부피만 제어한다. 그러나 사정 결과는 샘플 내의 세포의 수에 상당히 의존적이며, 샘플 내의 세포의 수가 적을수록 이 의존도는 커진다.
드롭(drop)을 계량할 수 있는 장치가 US 2008/0286751 A1에 공지되어 있다. 이 장치는 제1 채널, 제2 채널, 이 채널들의 교차점(intersection) 및 드롭(drop)이 나오는 개구부가 제공된다.
종래의 시스템의 경우, 부피를 계량하는 동안의 오차 확률은 2% 이하이지만, 대조적으로 세포의 수에 관련된 오차 확률은 10% 이상이다. 게다가, 단지 1개의 세포만 포함하는 샘플의 경우, 세포의 수를 정확하게 제어하는 것은 필수적이다.
본 발명의 목적은 드롭(drop)의 부피에 대한 오차 확률, 또한 드롭(drop) 내의 세포의 수에 대한 오차 확률을 낮게 세포를 계량하는 것에 관한 것이다.
이 목적은 청구항 1의 특징을 가지는 장치에 의해 이루어진다. 청구항 13은 세포 계량 방법에 관한 것이며 청구항 20은 세포 계량 장치의 용도에 관한 것이다. 종속항에 더 유리한 구체례가 포함된다.
본 발명에 따른 세포 계량 장치는 기본체(basic body)를 포함하며, 상기 기본체(basic body)의 적어도 한 평면에 적어도 하나의 캐리어 액체(carrier liquid)용 입구 채널 및 적어도 하나의 캐리어 액체용 출구 채널, 및 적어도 하나의 세정 채널(cleaning channel) 및 이 평면에 배열된 채널에 수직인 적어도 하나의 계량 매체용 입구 채널이 제공되며, 상기 채널들이 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)로 개방되어 있고, 상기 채널들은 각각 적어도 하나의 밸브 및/또는 디퓨저 구조(diffuser structure)를 포함하며, 상기 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)은 계량 밸브를 가지는 세포 출구 및 계량 과정을 개시하기 위한 제어 유닛을 포함하며, 기본체(basic body)에 배치되거나 기본체(basic body)에 위치하거나 기본체(basic body)에 통합되는 세포 탐지 장치가 제공된다.
본 발명에 따른 장치에 의하여, 특정 부피를 가지는 하나의 드롭(drop) 내의 세포의 제어된 수를 계량할 수 있다. 게다가, 본 발명에 따른 장치에 의해 세포 콜렉터(cell collector)의 역류(backwash) 기능 및 세정이 가능하기 때문에 이 드롭(drop)은 어떤 불순물 또는 바람직하지 않은 분자를 거의 포함하지 않는다. 또한, 본 발명에 따른 장치는 캐리어 액체(carrier liquid) 내의 세포의 농도 변화에 특히 민감하지 않다.
그로 인하여, 입구 채널 및 출구 채널에 있는 밸브 또는 마이크로밸브는 다음의 디자인이 가능하다: 전자기(electromagnetically) 작동식 마이크로밸브, 압전(piezoelectically) 작동식 마이크로밸브 또는 정전기(electrostatically) 작동식 마이크로밸브, 볼 마이크로밸브(ball microvalve), 압력-작동식(pressure-actuated) 밸브.
본 발명에 따른 장치의 기본체(basic body)는 다각형, 바람직하게 직사각형일 수 있다. 기본체(basic body)는 바람직하게 로봇 팔 등으로 간단한 방법으로 사용할 수 있도록, 즉, 기본체(basic body)는 잡기 쉬운 형태를 가지도록 형성된다. 또한, 기본체(basic body)가 로봇 팔의 수용 수단(receiving means)에 단단히 연결될 수 있도록 기본체(basic body)를 형성할 수 있고, 예를 들면 나사로 조일 수 있다. 게다가, 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)은 중앙에 배치될 수 있다.
장치는 바람직하게 적어도 하나의 캐리어 액체(carrier liquid)용 입구 채널로 개방되어 있는 적어도 하나의 우회 흐름(by-pass flow)용 입구 채널을 가진다. 우회 흐름에 의하여, 캐리어 액체(carrier liquid)용 입구 채널을 통해서 추가되는 세포를 분리할 수 있게 된다.
특히, 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)은 세포 콜렉터(cell collector) 및 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)으로 형성될 수 있다. 이들은 예를 들면 개별적으로 또는 모듈로서 교환될 수 있다.
바람직하게, 계량 밸브는 대응부(counterpart) 및 막에서 형성된다. 따라서, 장치의 원하지 않는 드립핑(dripping)을 피한다. 게다가, 그런 계량 밸브는 세정하기 쉽다.
본 발명에 따른 장치의 세포 콜렉터(cell collector)는 바람직하게 탄력을 가질 수 있는 막을 가지며, 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)은 특히 원뿔형, 구형 또는 원통형일 수 있는 대응부(counterpart)를 가지며, 막은 바람직하게 프리-텐션(pre-tension)으로 대응부(counterpart)에 대하여 접촉한다.
계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing), 막 및/또는 대응부(counterpart)에 적어도 부분적으로 소수성 코팅(hydrophobic coating) 또는 친수성 코팅(hydrophilic coating)이 제공될 수 있다. 또한, 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing), 막 및/또는 대응부(counterpart)를 소수성 물질(hydrophobic material) 또는 친수성 물질(hydrophilic material)로 제조할 수 있다. 따라서, 사용된 매체에 따라, 드롭(drop)을 더 잘 분리할 수 있다. 소수성 물질(hydrophobic material) 또는 친수성 물질(hydrophilic material)은 분야, 즉 예를 들면 어떤 타입의 캐리어 액체(carrier liquid) 또는 계량 매체가 사용되는지에 따라 결정된다.
따라서, 계량될 세포(현탁 배양(suspension culture), 부착 세포(adherent cell))와 사용된 매체에 따라, 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing), 막 또는 대응부(counterpart)를 위한 적당한 코팅 또는 적당한 물질을 선택할 수 있다.
계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)은 세포 콜렉터(cell collector)를 향하는 면의 중앙에 대응부(counterpart)로서 밸브 콘(valve cone) 및 세포 콜렉터 구조(cell collector structure)에 고정하기 위한 초승달 모양의 홈(crescent-like groove) 외부에 배치되는 1 내지 30개의 계량 매체를 위한 구멍(boring)을 가진다.
세포가 모이거나 장치가 세정되면 밸브 콘은 프리-텐션(pre-tension)으로 밸브 콘에 대하여 접촉하는 탄력이 있는 막과 협력하여 계량 밸브를 닫는다. 초승달 모양의 홈(crescent-like groove)은 세포 콜렉터 구조(cell collector structure)를 안정하게 고정하는 역할을 한다. 또한, 초승달 모양의 홈(crescent-like groove)은 세포 콜렉터 구조(cell collector structure)의 안정화를 위해, 그리고 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing) 및 세포 콜렉터(cell collector) 사이에서 회전이 일어나는 것에 대하여 안전 장치로서의 역할을 한다.
게다가, 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing) 및/또는 세포 콜렉터(cell collector)는 모듈 방식으로 교환될 수 있을 수 있다. 따라서, 한편으로 예를 들면 오염된 후에 세포 콜렉터(cell collector) 또는 계량 밸브를 신속하게 교환할 수 있고, 다른 한편으로, 각각 세포 크기 또는 세포 유형에 따라 다른 세포 콜렉터(cell collector)가 요구되기 때문에 세포의 다양한 유형에 따라 장치를 사용할 수 있다. 이러한 목적으로, 다른 구조를 가지는 세포 콜렉터(cell collector) 및 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)이 기본체(basic body)에 삽입될 수 있다.
게다가, 세포 콜렉터(cell collector)의 구조(geometry)는 필터 또는 세포 콜렉터 구조(cell collector structure)의 반지름을 통해 계량될 세포의 최대수를 결정할 수 있다. 이 문맥에서, 세포 콜렉터 구조 및 계량 밸브의 막에 대한 대응부(counterpart) 사이의 공간이 변할 수 있어서 계량될 세포의 최대수에 영향을 미칠 수도 있다는 것을 의미한다. 각종 세포 유형은 다른 크기를 가지므로, 세포에 따라 각 세포 콜렉터의 세포 콜렉터 구조를 채용해야 하며, 즉 세포 콜렉터 구조의 빗-형상의 돌출부(raised portion) 사이의 간격이 계량될 세포 유형에 적합해야 한다.
바람직하게 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)은 적어도 하나의 물질, 특히 폴리에틸렌글리콜(polyethyleneglycol; PEG), 폴리(2-하이드록시에틸메틸(메트)아크릴레이트(poly(2-hydroxyethylmethyl(meth)acrylate; poly(HEMA)), 실리콘(silicone), 폴리메틸(메트)아크릴레이트(polymethyl(meth)acrylate; PMMA), 폴리아크릴아미드(polyacrylamide), 생체적합성 코팅(biocompatible coating), 특히, 라미닌(laminin), 피브로넥틴(fibronectin), 콜라겐 I/Ⅲ/Ⅳ, 리신(lysin) 또는 처리된 폴리스틸렌(treated polystyrene)을 포함하는 비-부착성(non-adhesive) 코팅으로 적어도 부분적으로 코팅된다. 아마도, 예를 들면 세포 콜렉터(cell collector) 및 비-부착성(non-adhesive) 코팅 사이에 배치되는 접착층이 요구될 수 있다. 게다가, 코팅에 부가적으로 또는 코팅을 대신하여 세포 콜렉터(cell collector)를 플라스마 처리할 수 있다.
이런 코팅에 의하여, 세포 콜렉터(cell collector)에 부착하면서 성장하는 세포가 남는 것을 방지할 수 있다. 따라서, 코팅 또는 플라스마 처리는 표면을 최적화하는 역할을 하며 따라서 계량된 드롭(drop) 내의 세포의 수에 관하여 오차 확률을 줄이는 역할을 한다.
기본체(basic body)는 기본체(basic body) 내에서 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)의 회전을 방지하는 안전 장치를 가지며, 안정 장치로 인하여 기본체(basic body)에 대하여 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)이 회전하는 것을 방지할 수 있다. 이것은 특히 기본체(basic body)에서의 세포 콜렉터(cell collector) 또한 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing), 즉 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)의 안착을 개선하여 또한 시스템의 최적 실링을 가능하게 한다. 특히, 세포 콜렉터(cell collector) 또는 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)을 엉뚱한 위치에 설치할 수 없도록 회전을 방지하는 안전 장치가 형성될 수 있다.
본 발명에 따르면, 세포 계량 방법은 계량될 세포를 가지는 캐리어 액체(carrier liquid)가 세포 콜렉터의 방향으로 캐리어 액체(carrier liquid)용 입구 채널을 통해 이동하고, 세포 탐지 장치에 의해 세포의 수를 결정하고, 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)에서 세포를 축적하고, 적어도 일부의 캐리어 액체(carrier liquid)가 캐리어 액체(carrier liquid)용 출구 채널을 통해 배출되며, 캐리어 액체(carrier liquid)용 출구 채널에 있는 밸브가 열리는 동안, 세정용 출구 채널에 있는 밸브가 닫히고, 세포 수를 계량한 후에, 제어 유닛이 펄스를 계량 매체의 입구 채널로 통과시키고, 캐리어 액체(carrier liquid)용 출구 채널에 있는 밸브 및 캐리어 액체(carrier liquid)용 입구 채널에 있는 밸브가 닫히거나 디퓨저 구조(diffuser structure)가 수동 밸브로 작동하기 이전에 또는 동시에, 세정액용 출구 채널에 있는 밸브가 닫힌 채로 유지되며, 계량 매체가 계량 매체용 입구 채널을 통해 추가되고 적어도 하나의 세포가 드롭(drop)으로 배출된다.
게다가, 예를 들면 계량 매체의 압력파 또는 펄스는 전자식밸브(electrovalve) 또는 자석 밸브에 의해 압전식으로(piezoelectrically) 생성될 수 있다. 또한, 압력파 또는 펄스가 기계적으로 생성될 수도 있다.
이에 의하여 먼저 세포 콜렉터(cell collector)에서 세포를 세고 축적한다. 원하는 수의 세포가 축적되면, 1개의 드롭(drop)에 있는 세포를 계량한다. 추가적인 세정 기능을 통해 세포 콜렉터의 구조에 세포 잔류물 및 다른 불순물이 존재하지 않게 할 수 있고, 또는 세포 콜렉터에 원하는 것보다 많은 세포가 축적되면 세포 콜렉터를 헹굴 수 있다.
게다가, 세포를 분리하는 역할을 하는 다른 매체가 우회 흐름용 입구 채널을 통해서 추가될 수 있고 이어서 캐리어 액체(carrier liquid)용 입구 채널에서 세포를 배열시킨다.
그 결과, 통과된 세포 탐지 장치에 의하여 세포를 세는 것이 개선될 수 있다. 세포 탐지 장치는 광학 측량장치(optical measurement), 임피던스 측량장치(impedance measurement) 또는 용량 측량장치(capacitance measurement) 등을 통과하는 세포를 검출하고 제어 유닛으로 결과를 전달할 수 있다. 게다가, 세포 콜렉터에서 세포 탐지 장치까지의 거리 및 유량(flow rate)이 공지되어 제어 유닛에 의해 얼마나 많은 세포가 세포 콜렉터 안에서 언제 위치하는지 산출할 수 있다. 이 과정을 세포 콜렉션(cell collection)이라 한다.
세포 콜렉터(cell collector)에 원하는 수의 세포가 축적되면, 제어 유닛은 계량 과정을 개시한다. 이러한 목적으로, 밸브에 의해 캐리어 액체(carrier liquid)용 출구 채널을 닫고 펄스가 계량 매체용 입구 채널을 통과하며, 그 결과로 세포 콜렉터에 존재하는 세포가 계량 밸브에 의해 배출된다. 그로 인하여 계량 액체의 부피를 조절할 수 있어서 제어된 부피 및 제어된 세포의 수를 가지는 드롭(drop)이 생성된다. 그로 인하여 캐리어 액체(carrier liquid)용 입구 채널에 있는 디퓨저 구조(diffuser structure) 또는 밸브는 역류 방지 밸브(non-return valve)와 유사하게 작동하고 세포 콜렉터 구조에서 다시 캐리어 액체(carrier liquid)용 입구 채널로 이동하는 것을 방지하거나 압력파가 캐리어 액체(carrier liquid)용 입구 채널에서 너무 강하게 지속되는 것을 방지한다. 정상적으로, 세포는 우회 흐름에서 캐리어 액체(carrier liquid), 계량 매체 및 가능한 액체의 혼합물에서 배출된다.
그러나, 필요하다면, 예를 들면, 캐리어 액체(carrier liquid)용 출구 채널을 통과한 계량 매체를 계량하기 전에, 캐리어 매체(carrier medium) 또는 액체가 제거되거나 우회 흐름 밖으로 배출될 수도 있다.
계량 후에, 캐리어 액체(carrier liquid)용 출구 채널이 다시 열리고 세포 콜렉터는 원하는 서의 세포로 다시 채워질 수 있다.
세포의 수가 초과하면, 계량 과정에 이어서 및/또는 계량 과정 동안, 세정 단계가 실행되어, 세정액이 계량 매체용 입구 채널을 통해 도입되고, 캐리어 액체(carrier liquid)용 출구 채널의 밸브 및 계량 밸브가 닫치고 액체가 세정액용 출구 채널을 통해서 배출된다. 세정액은 또한 계량 매체 또는 캐리어 액체(carrier liquid)와 동일할 수 있다.
세포 콜렉터 또는 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)에서 세포 잔류물 또는 단백질과 같은 불순물을 없앨 때, 또한 너무 많은 세포가 세포 콜렉터에 축적되는 경우에 세포 콜렉터(cell collector)에서 세포를 제거하기 위해, 세정 단계가 요구될 수 있다. 세정에 있어, 캐리어 액체(carrier liquid)용 출구 채널이 닫히고 세정 채널이 열린다. 그러고 나서, 액체, 특히 세정액이 계량 매체용 입구 채널을 통해서 이동하고, 액체를 통해 잔류물이 세포 콜렉터 구조에서 세정 채널을 통과하여 배출된다.
본 발명에 따른 방법에 있어, 캐리어 액체(carrier liquid)로서, 세포 배양 매체, 염용액(salt solution), 버퍼 용액(buffered solution), 등장 염용액(isotonic common salt solution), 2(4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라지닐)-에탄술폰산(2(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl)-ethanesulphonic acid; HEPES)-버퍼 용액(buffered solution), 트리(하이드록시메틸)-아미노메탄(tris(hydroxymethyl)-aminomethane; TRIS)-버퍼 용액(buffered solution), 구연산 나트륨(sodium citrate)을 포함하는 용액, 트립신(trypsin)을 포함하는 용액, 에틸렌디아민테트라아세트산(ethylenediaminetetraacetic acid; EDTA)을 포함하는 용액, 항생제(antibiotics)를 포함하는 용액, 항진균제(antimycotics)를 포함하는 용액 또는 그 혼합액을 이용할 수 있다.
계량 매체로서, 세포 배양 매체, 염용액(salt solution), 등장 염용액(isotonic common salt solution), 2(4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라지닐)-에탄술폰산(2(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl)-ethanesulphonic acid; HEPES)-버퍼 용액(buffered solution), 트리(하이드록시메틸)-아미노메탄(tris(hydroxymethyl)-aminomethane; TRIS)-버퍼 용액(buffered solution), 형광 마커(fluorescence marker)를 포함하는 용액, 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라아졸이움브로마이드(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide; MTT)를 포함하는 용액 또는 그 혼합액을 이용할 수 있다.
버퍼 염용액 용액(buffered salt solutions) (균형염용액(balanced salt solution))은
- 탄수화물(글루코오스((glucose))와 함께, 세포 물질 대사의 주요 에너지원으로서 제공되며;
- 삼투압 밸런스(osmotic balance)를 유지하기 위한 수송용(transport) 매체 또는 희석(diluting) 매체로 사용되고;
- 일반 세포 물질 대사에 필수적인, 물 및 특정 무기 이온을 세포에 제공하고,
- 생리학적인 pH 범위(physiological pH range)를 얻기 위한 버퍼 시스템으로서 사용된다.
일반 염용액(common salt solutions)은 다음과 같다:
- DPBS(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline)
- Earle's Balanced Salts
- Hanks' Balanced Salts
- Tyrode's Salts
- Phosphate Buffered Saline
및 (종종 "변형(modified)"이라고 추가된) 이 용액의 많은 특정한 변형 용액, 거의 사용되지 않는 버퍼 염용액(Alsever's Solution, Gey's Balanced Salt Solution, Kreb's Henseleit Buffer Modified, 등).
표준 세포 배양 매체는 다음과 같다:
일반적인 매체
- 매체 199: 표준 조직-배양 매체; 처음으로 완전히 정의된 세포 배양용 영양원 중 하나를 제공함;
- DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium): 생쥐의 배아세포와 함께 사용하기 위한 BME(Basal Medium Eagle)의 변형체: 특정한 분야/특정한 세포계(cell line)를 위해 더 많이 변형됨;
- MEM(Minimum Essential Medium Eagle): 다양한 분야/세포 유형에서 사용하기 위한 본래 제재에 많은 수정/변형을 가지는 널리 이용되는 합성 세포 배양 매체;
- RPMI-1640 (Roswell Park Memorial Institute): 비타민 및 아미노산이 풍부한, 중탄산염(bicarbonate) 버퍼 시스템, 1차 세포, 주로 백혈구(leucocyte)를 배양하는데 자주 이용됨; 하지만 현재에는 많은 세포계의 배양에 이용됨,
및 많은 다른 매체, 또는 다음과 같은 거의 사용되지 않는 매체: Ames Media, BGJb Medium(Fitton-Jackson Modification), Click's Medium, CMRL-1066 Medium, Fischer's Medium, Glascow Minimum Essential Medium(GMEM), Iscove's Modified Dulbecco's Medium(IMDM), L-15 Medium(Leibovitz), McCoy's 5A Modified Medium, NCTC Medium, Swim's S-77 Medium, Waymouth Medium and William's Medium E.
특별한 매체
혈청 또는 글루타민을 적게 사용하는 더 개발된 매체 또는 특별한 분야를 위해 변형된 제재. 이 문맥에서, 더 많은 조성물 및 매체가 존재하므로 뒤에 오는 세포 배양 매체는 예로서 여겨야 한다.
- MCDB 매체(Ham et al.): 개별 세포계(배 배양(embryonic cultures) 등)에 조정된 특정한 제재를 가지는 저-단백질 매체 및 저-혈청 매체
혈청이 제거된 매체(serum-free media)
- 혈청(FCS 등등)과 같은 동물성 보충물이 추가되지 않고 사용될 수 있는 화학적으로 정의된 매체 및 보충물. 특정한 세포계에 따라 구성성분이 조정되어 제한된 분야에서 적용된다.
혈청이 제거된 매체가 개발된 공지된 세포계는 다음과 같다: CHO 세포(Chinese Hamster Ovary), 하이브리도마 시스템(hybridoma system) 등등
미생물, 식물 및 균류용 다른 배양 매체
미생물(효모, 박테리아, 균류)의 유형 및 그룹에 따라, 많은 유형의 매체 및 매체 제재가 있다.
박테리아 배양용 매체로서 가장 공지된 제제로 LB 매체가 있다.
본 발명에 따른 방법에 있어, 동일한 용액이 캐리어 액체(carrier liquid) 및 계량 매체로 이용될 수 있다. 게다가, 캐리어 액체(carrier liquid) 및/또는 계량 매체와 동일한 용액이 세정액으로 이용될 수 있다. 더 많은 유용한 용액 및 매체가 존재하므로 언급한 용액, 매체 등등을 선택은 예로서 간주되어야 한다.
그러나 다른 용액이 캐리어 액체(carrier liquid) 및 계량 매체로 이용될 수도 있다. 이것은 세포-손상(cell-damaging) 보충물을 사용해야 할 때 특히 중요하다. 세포-손상 보충물이 계량 매체에 추가되는 경우, 이 보충물이 캐리어 액체(carrier liquid)에 포함되는 경우에 비하여 현저하게 짧은 시간 간격 동안 이 독성 보충물과 접촉한다.
게다가, 계량 매체를 계량하여 추가하기 시작할 때부터 그리고 특정한 기질에서, 기질의 물질 대사(metabolisation)에 대한 동역학(kinetics)이 설정되도록 예정될 때, 특정 기질을 계량하여 추가할 수 있다.
본 발명에 따르면, 장치는 인간 세포, 동물 세포, 원핵세포(procaryotes), 진핵세포(eucaryotes) 및/또는 식물 세포를 계량하는데 사용된다.
예로서 여기서 언급할 것이다:
- 일차 세포계 ( primary cell lines ):
인간 또는 동물체에서 직접 제거된 모든 세포. 그들은 단지 몇 단계만으로 수시로 재배될 수 있다. 여기에 다음이 포함된다: 림프성 세포(백혈구), 간세포(hepatocytes) 등등.
그들은 부착 세포계(adherent cell line) (조직 형성) 및 현탁액 세포(수시로 혈구(blood cell))로 나뉠 수 있고, 모든 일차 세포계의 90% 이상이 부착성이다.
- 불멸화(Immortalized) 세포계
적당한 배양 조건이 유지되는 한, 이 세포계는 무한하게 생체외에서(in vitro) 성장하고 증식한다. 발암성(carcinogenic) 세포 및 종양 세포가 여기에 포함되나, 이에 한하지 않는다.
여기에 다음도 포함된다: HeLa(부착성, 비-발암성(non-carcinogenic)), MCF-7(부착성, 발암성), JURKAT(현탁액(suspension), 발암성) 등.
- 다른 모형 유기체(Mus musculus, Danio rerio)가 이용되는 경우, 유사하게 분류된다. 단세포 유기체는 제외된다.
- 저급 진핵세포(eucaryotes) (예를 들면, 균류, Saccharomyces cerevisae, 등등), 원핵세포(procaryotes) (Escherichia coli, Staphylococcus aureus 등등), 그러나 또한 많은 식물 세포도 유사하게 이용될 수 있다.
본 출원에 따른 주제를 도 1 내지 11을 참조하면서 더 상세히 설명하며, 상기 주제는 이들 변형례에 제한되지 않는다.
도 1은 본 발명에 따른 장치의 상측의 쿼터도면(isometric view)이며,
도 2는 세포 계량 장치의 밑바닥의 쿼터도면(isometric view)이고;
도 3a는 본 발명에 따른 장치의 후면도이며;
도 3b는 장치의 우측면도이고;
도 3c는 장치의 정면도이며;
도 3d는 장치의 좌측면도이고;
도 3e는 장치의 후면도이며;
도 3f는 장치의 평면도이고;
도 4a는 장치의 정면도이며;
도 4b는 세포 콜렉션 과정 동안의 장치의 수평 단면도이고;
도 5a는 장치의 정면도이며;
도 5b는 계량 과정 동안의 장치의 수평 단면도이고;
도 5c는 도 5b의 일부를 확대한 것이며;
도 6a는 본 발명에 따른 장치의 정면도이고;
도 6b는 세정 과정 동안의 본 발명에 따른 장치의 수평 단면도이며;
도 7a는 본 발명에 따른 장치의 정면도이고;
도 7b는 본 발명에 따른 장치의 수직 단면도이며;
도 8는 세포 콜렉터(cell collector)의 다양한 도면이고;
도 8a는 위에서 대각선 방향으로 본 세포 콜렉터(cell collector)이며;
도 8b는 아래에서 대각선 방향으로 본 세포 콜렉터(cell collector)이고;
도 8c는 위에서 본 세포 콜렉터(cell collector)이며;
도 8d는 도 8c의 수평 단면도이고;
도 8e는 도 8d의 일부를 확대한 것이며;
도 9는 다양한 도면의 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)이고;
도 9a는 위에서 대각선 방향으로 본 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)이며;
도 9b는 아래에서 대각선 방향으로 본 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)이고;
도 9c는 아래에서 본 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)이며;
도 9d는 도 9c의 측면도이고;
도 9e는 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)을 위에서 본 것이며;
도 10은 세포 콜렉터(cell collector) 및 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)가 없는, 아래에서 대각선 방향으로 본 기본체(basic body)이고;
도 11은 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)로서 세포 콜렉터 및 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)이 조합된 다양한 도면이고;
도 11a는 세포 콜렉터(cell collector)에 연결되는 계량 밸브 일부 하우징(metering valve partial housing)을 위에서 본 것이며;
도 11b는 도 11a의 수직 단면도이고; 및
도 11c는 도 11a의 수평 단면도이다.
도 1에서, 본 발명에 따른 장치를 위에서 대각선 방향으로 본 도면을 나타낸다. 기본체(1)는 상기 기본체(basic body)의 상부에 계량 매체용 입구 채널(5) 및 세포 탐지 장치(6)를 가진다. 우회 흐름용 입구 채널(7)이 캐리어 액체용 입구 채널(2)에 수직으로 배치되어 있다. 캐리어 액체용 입구 채널(2)의 반대 쪽에, 세정 채널의 출구(4)가 배치되어 있다. 캐리어 액체용 출구 채널(3)이 인접하는 면(abutting surface)에 배치되어 있다.
도 2는 아래에서 대각선 방향으로 본 장치를 도시한다. 계량 세포용 출구(8)가 기본체(1)의 중앙에 배치되어 있다. 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 세정 채널의 출구(4)의 반대쪽에 위치한다. 캐리어 액체용 출구 채널(3)이 그 사이에 위치한 측면에 배치되어 있다.
도 3a는 본 발명에 따른 세포 계량 장치를 아래에서 본 도면을 도시한다. 캐리어 액체용 입구 채널(2), 캐리어 액체용 출구 채널(3) 및 세정 채널(4)이 중앙에서 본 도면에서 도시되지 않은 세포 콜렉터(13)로 개방되어 있다. 계량 세포용 출구(8)는 기본체(1)에서 세포 콜렉터 모듈의 유지 플레이트(12)의 중앙에 배치되어 있다. 세포 콜렉터 모듈(23)은 세포 콜렉터(13) 및 계량 밸브 하우징(14)으로 이루어져 있다.
도 3b는 우측면도를 도시한다. 기본체(1)의 상부에, 계량 매체용 입구 채널(5), 세포 탐지 장치(6) 및 우회 흐름용 입구 채널(7)이 배치되어 있다. 기본체(1)의 밑바닥에, 세포 콜렉터 모듈을 위한 유지 플레이트(12)가 배치되어 있다. 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 왼쪽을 향하고 있다. 본 도면에서 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 정면을 향하고 있다.
도 3c에, 본 발명에 따른 세포 계량 장치의 정면도가 도시되어 있다. 기본체(1)의 상부에, 계량 매체용 입구 채널(5), 세포 탐지 장치(6) 및 우회 흐름용 입구 채널(7)이 배치되어 있다. 세정 채널용 출구(4)는 왼쪽을 향하고 있으며, 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 정면을 향하고 있고, 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 오른쪽을 향하고 있다. 세포 콜렉터 모듈을 위한 유지 플레이트(12)가 기본체(1)의 밑에 배치되어 있다.
도 3d는 좌측면도를 도시한다. 우회 흐름용 입구 채널(7), 세포 탐지 장치(6) 및 계량 매체용 입구 채널(5)이 기본체(1)의 상부에 배치되어 있다. 세정 채널의 출구(4)는 정면을 향하고 있으며 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 오른쪽을 향하고 있다. 세포 콜렉터 모듈을 위한 유지 플레이트(12)가 기본체(1)의 밑바닥에 배치되어 있다.
도 3e는 본 발명에 따른 장치의 후면도를 도시한다. 우회 흐름용 입구 채널(7), 세포 탐지 장치(6) 및 계량 매체용 입구 채널(5)이 기본체(1)의 상부에 배치되어 있다. 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 왼쪽을 향하고 있으며 세정 채널(4)은 오른쪽을 향하고 있다. 기본체(1)의 밑바닥에, 세포 콜렉터 모듈을 위한 유지 플레이트(12)가 배치되어 있다.
도 3f에서, 위에서 본 장치가 도시되어 있다. 계량 매체용 입구 채널(5)이 기본체(1)의 중앙에 배치되어 있다. 캐리어 액체용 입구 채널(2), 캐리어 액체용 출구 채널(3) 및 세정 채널(4)이 기본체로 개방되어 있다. 캐리어 액체용 입구 채널(2)에 수직으로, 우회 흐름용 입구 채널(7)이 배치되어 있다. 게다가, 본 발명에 따른 장치는 기본체의 상부에 세포 탐지 장치(6)를 비치하고 있다.
도 4a에, 본 발명에 따른 장치의 측면도를 도시한다. 계량 매체용 입구 채널(5), 세포 탐지 장치(6) 및 우회 흐름용 입구 채널(7)이 기본체(1)의 상부에 배치되어 있다. 세정 채널(4)은 왼쪽을 향하고 있고, 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 정면을 향하고 있으며, 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 오른쪽을 향하고 있다.
도 4b에, 도 4a의 수평 단면도를 도시한다. 이 도면은 세포 콜렉션 과정 동안의 밸브 위치를 도시하고 있다. 캐리어 액체용 입구 채널(2)에 의하여, 세포 콜렉터(13) 안에서 세포를 헹군다. 그로 인하여 세정액용 출구 채널에 있는 밸브(11)가 닫히고 캐리어 액체용 출구 채널에 있는 밸브(10)가 열린다. 세포 탐지 장치(6)는 캐리어 액체용 입구 채널(2) 및 세포 콜렉터(13) 사이에 배치되어 있다. 게다가, 캐리어 액체용 입구 채널(2)로 개방된 우회 흐름용 입구 채널(7)이 도시되어 있다.
도 5a는 본 발명에 따른 장치의 측면도를 도시한다. 계량 매체용 입구 채널(5), 세포 탐지 장치(6) 및 우회 흐름용 입구 채널(7)이 기본체(1)의 상부에 배치되어 있다. 세정 채널의 출구(4)는 왼쪽을 향하고 있고, 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 정면을 향하고 있으며, 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 오른쪽을 향하고 있다.
도 5b는 계량 과정 동안의 도 5a의 수평 단면도를 도시한다. 세정용 출구 채널에 있는 밸브(11) 및 캐리어 액체용 출구 채널에 있는 밸브(10)가 닫힌다. 디퓨저 구조(9)는 세포 콜렉터 구조(18)에 접촉·배치되어 있는 세포 콜렉터(13)와 일체 구성요소이다. 캐리어 액체용 입구 채널(2)에 배치되어 있는 세포 탐지 장치(6)를 통해 세포를 센다. 우회 흐름용 입구 채널(7)을 통해 세로를 분리하는 매체를 추가할 수 있다.
도 5c에, 세포 콜렉터 모듈(23)의 일부를 확대하여 도시하고 있다. 세포 콜렉터 모듈은 세포 콜렉터 구조(18)를 가진다. 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 아래쪽을 향하는 것으로 도시되어 있다. 디퓨저 구조(9)를 통해 세포 콜렉터(13)로 개방되는 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 오른쪽을 향하고 있다. 세정 채널용 출구(4)는 왼쪽을 향하고 있다.
도 6a에, 본 발명에 따른 장치의 측면도가 도시되어 있다. 계량 매체용 입구 채널(5), 세포 탐지 장치(6) 및 우회 흐름용 입구 채널(7)이 기본체(1)의 상부에 배치되어 있다. 세정 채널용 출구(4)는 왼쪽을 향하고 있고, 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 정면을 향하고 있고, 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 오른쪽을 향하고 있다.
도 6b에, 세정 과정 동안의 도 6a의 수평 단면도가 도시되어 있다. 캐리어 액체용 출구 채널에 있는 밸브(10)는 닫히고 세정용 출구 채널에 있는 밸브(11)는 열린다. 세정하는 동안, 세정 매체는 계량 매체용 입구 채널(5)을 통해서 세포 콜렉터(13) 안을 헹구고 세정 매체가 세포 콜렉터(13)를 통과한 후에, 세정 채널용 출구(4)를 통해 세정 매체가 배출된다.
도 7a는 본 발명에 따른 계량 장치의 측면도를 도시한다. 계량 매체용 입구 채널(5), 세포 탐지 장치(6) 및 우회 흐름용 입구 채널(7)이 기본체(1)의 상부에 배치되어 있다. 세정 채널(4)은 왼쪽을 향하고 있고, 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 정면을 향하고 있고, 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 오른쪽을 향하고 있다.
도 7b는 도 7a의 수직 단면도를 도시한다. 캐리어 액체용 출구 채널(3)이 오른쪽을 향하고 있다. 계량 매체용 입구 채널(5)의 밑에, 대응부(counterpart)로서의 밸브 콘(15)을 가지는 계량 밸브 일부 하우징(14)이 배치되어 있다. 막(16)은 세포 콜렉터(13)에 통합되어 있다. 막(16)은 밸브 콘(15)에 대하여 접촉하고 있다. 계량 과정의 경우에만, 펄스 후에 압력파에 의해 밸브 콘(15)에서 입구 채널(5)로 막이 상승하여 드롭(drop)이 분리될 수 있다. 계량 밸브 일부 하우징(14)에 대하여 직접 접촉하는 세포 콜렉터(13)는 세포 콜렉터 모듈의 유지 플레이트(12)를 통해 기본체(1)에 고정되어 있다. 세포 콜렉터 모듈(cell collector module)은 세포 콜렉터(13) 및 계량 밸브 일부 하우징(14)로 형성되어 있다. 계량 밸브(17)는 밸브 콘(15) 및 막(16)으로 구성된다.
도 8은 세포 콜렉터(cell collector)의 다양한 도면을 도시하고 있다.
도 8a에, 위에서 대각선 방향으로 본 장치가 도시되어 있다. 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 오른쪽을 향하고 있고 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 정면에서 왼쪽을 향하고 있다. 세정 채널용 출구(4)는 뒤에서 왼쪽을 향하고 있다. 세포 콜렉터 구조(18)는 세포 콜렉터(13)의 중앙에 도시되어 있다.
도 8b는 아래에서 대각선 방향으로 본 장치를 도시한다. 계량 세포용 출구(8)가 세포 콜렉터(13)의 중앙에 배치되어 있다.
도 8c는 위에서 본 세포 콜렉터(13)를 도시한다. 세포 출구(8)가 세포 콜렉터(13)의 중앙에 도시되어 있다. 게다가, 세포 콜렉터 구조(18)는 반원 형태로 배치되어 있다. 캐리어 액체용 입구 채널(2)은 오른쪽 위를 향하고 있고, 캐리어 액체용 출구 채널(3)은 아래를 향하고, 세정 채널의 출구(4)는 왼쪽 위를 향하고 있다.
도 8d는 도 8c의 수평 단면도를 도시한다. 세포 콜렉터(13)에 통합되어 있는 막(16)이 세포 콜렉터(13)의 중앙에 도시되어 있다.
도 8e는 도 8d에서 F로 표시된 부분을 도시한다. 세포 콜렉터(13)에 통합된 막(16)이 확대되어 있다.
도 9는 계량 밸브 일부 하우징(14)의 다양한 도면을 도시한다.
도 9a에, 위에서 대각선 방향으로 본 장치가 도시되어 있다. 계량 밸브 일부 하우징(14)은 계량 매체를 위한 구멍(19)을 가진다.
도 9b에, 본 발명에 따른 계량 밸브 일부 하우징(14)을 아래에서 대각선 방향으로 본 도면이 도시되어 있다. 여기서 계량 매체를 위한 구멍(19) 및 세포 콜렉터 구조(18)를 고정하는 역할을 하는 초승달-형상의 홈(20)을 찾을 수 있다.
도 9c에, 계량 밸브 일부 하우징(14)을 아래에서 본 도면이 도시되어 있다. 계량 매체를 위한 구멍(19)은 세포 콜렉터 구조(18)를 고정하는 초승달-형상의 홈(20)에 대하여 직접 접촉한다. 밸브 콘(15)이 중앙에 도시되어 있다.
도 9d는 도 9c의 측면도를 도시한다. 밸브 콘(15)은 계량 밸브 일부 하우징(14)의 하부 중앙에 위치한다.
도 9e는 위에서 본 계량 밸브 일부 하우징(14)을 도시한다. 여기서 계량 매체를 위한 구멍(19)을 찾을 수 있다.
도 10은 아래에서 대각선 방향으로 본 기본체(1)를 도시한다. 여기에 세포 콜렉터(13) 및 계량 밸브(14)를 형성하는 세포 콜렉터 모듈(23)을 위한 오목부가 도시되어 있다. 회전을 방지하는 안전 장치(22)는 기본체(1)에서 세포 콜렉터(13)를 안정하게 고정하는 역할을 한다.
도 11은 세포 콜렉터 모듈(23)로서 조립된 형태의 계량 밸브 일부 하우징(14) 및 세포 콜렉터(13)를 도시한다.
도 11a에, 평면도가 도시되어 있다. 계량 매체를 위한 구멍(19)을 가지는 세포 콜렉터(14)가 세포 콜렉터(13)에 배치되어 있다. 세포 콜렉터(13)는 회전을 방지하는 안전 장치(22)를 위한 오목부(21)를 가진다. 이런 식으로, 기본체(1)에 세포 콜렉터(13) 및 세포 콜렉터 모듈(23)을 안정하게 설치할 수 있다.
도 11b는 도 11a에 도시된 세포 콜렉터 모듈(23)의 수직 단면도를 도시한다. 오른쪽에 도시되어 있는 계량 밸브 일부 하우징(14)은 막(16)에 대하여 직접 접촉하는 대응부(counterpart)로서 밸브 콘(15)을 가진다. 게다가, 계량 밸브 일부 하우징(14)에 연결되는, 세포 콜렉터(13)가 도시되어 있다.
도 11c는 도 11a의 수평 단면도를 도시한다. 밸브 콘(15)을 가지는, 계량 밸브 일부 하우징(14)은 세포 콜렉터(13)의 상부에 배치되어 있다. 막(16)은 세포 콜렉터(13)의 중앙에 도시되어 있다. 계량 밸브(17)는 세포 콜렉터(13)에 통합된 막(16) 및 대응부(counterpart)로서 밸브 콘(15)으로 이루어져 있다.

Claims (20)

  1. 기본체(1)를 포함하는 세포 계량 장치로서,
    상기 기본체(1)의 적어도 한 평면에, 적어도 하나의 캐리어 액체용 입구 채널(2) 및 적어도 하나의 캐리어 액체용 출구 채널(3), 적어도 하나의 세정 채널(4) 및 상기 채널(2, 3, 4)에 수직으로 배치되어 있는 적어도 하나의 계량 매체용 입구 채널(5)을 포함하며,
    상기 채널(2, 3, 4, 5)은 세포 콜렉터 모듈(23)로 개방되어 있고,
    상기 세포 콜렉터 모듈(23)은 계량 밸브(17)를 가지는 세포 출구(8) 및 계량 과정을 개시하기 위한 제어 유닛을 포함하며,
    상기 기본체(1)에 배치되거나, 상기 기본체(1)에 위치하거나 상기 기본체(1)에 통합되는 세포 탐지 장치(6)가 제공되는 세포 계량 장치.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 채널(2, 3, 4)은 각각 적어도 하나의 밸브(10, 11) 및/또는 적어도 하나의 디퓨저 구조(9)를 가지는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 기본체(1)는 다각형, 바람직하게는 직사각형이며,
    상기 세포 콜렉터 모듈(23)은 상기 기본체(1)의 중앙에 배치되는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 계량 장치는 상기 적어도 하나의 캐리어 액체용 입구 채널(2)로 개방되는 적어도 하나의 우회 흐름용 입구 채널(7)을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 콜렉터 모듈(23)은 세로 콜렉터(13) 및 계량 밸브 일부 하우징(14)으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 계량 밸브(17)는 대응부(15) 및 막(16)으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  7. 제6항에 있어서,
    세포 콜렉터(13)는 탄력 있는 막(16)을 포함하며,
    계량 밸브 일부 하우징(14)은 원뿔형, 구형 또는 원통형인 대응부(15)를 포함하고,
    막(16)은 프리-텐션(pre-tension)으로 상기 대응부(15)에 대하여 접촉하는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서,
    계량 밸브 일부 하우징(14), 막(16) 및/또는 대응부(15)에 적어도 부분적으로 소수성 코팅 또는 친수성 코팅이 제공되며, 및/또는 계량 밸브 일부 하우징(14), 막(16) 및/또는 대응부(15)는 소수성 물질 또는 친수성 물질로 제조되는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  9. 제5항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
    계량 밸브 일부 하우징(14)은 세포 콜렉터(13)를 향하는 면의 중앙에 대응부(15)로서 밸브 콘 및 세포 콜렉터 구조(18)를 고정하기 위한 초승달-모양의 홈(20)의 외부에 배치되는 1 내지 30개의 계량 매체를 위한 구멍(19)을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  10. 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    계량 밸브 일부 하우징(14) 및/또는 세포 콜렉터(13)는 모듈 형태로 교환할 수 있는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    세로 콜렉터 모듈(23)은 적어도 하나의 물질, 특히 폴리에틸렌글리콜(polyethyleneglycol; PEG), 폴리(2-하이드록시에틸메틸(메트)아크릴레이트(poly(2-hydroxyethylmethyl(meth)acrylate; poly(HEMA)), 실리콘(silicone), 폴리메틸(메트)아크릴레이트(polymethyl(meth)acrylate; PMMA), 폴리아크릴아미드(polyacrylamide), 생체적합성 코팅(biocompatible coating), 특히, 라미닌(laminin), 피브로넥틴(fibronectin), 콜라겐 I/Ⅲ/Ⅳ, 리신(lysin), 처리된 폴리스틸렌(treated polystyrene)을 포함하는 또는 구성되는 비-부착성(non-adhesive) 코팅으로 적어도 부분적으로 코팅되고, 및/또는 세포 콜렉터(13)의 적어도 일부가 플리즈마 처리되는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 기본체(1)는 상기 기본체(1)에서 세포 콜렉터 모듈(23)이 회전하는 것을 방지하기 위한 안전 장치(22)를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 계량 장치.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 장치에 의한 세포 계량 방법으로서,
    계량될 세포를 가지는 캐리어 액체가 세포 콜렉터(13)의 방향으로 캐리어 액체용 입구 채널(2)을 통과하고, 세포 탐지 장치(6)에 의해 세포 수가 결정되며, 세포 콜렉터 모듈(23)에서 세포가 축적되고, 캐리어 액체의 적어도 일부가 캐리어 액체용 출구 채널(3)을 통해 배출되며, 캐리어 액체용 출구 채널에 있는 밸브(10)가 열리는 동안 세정용 출구 채널에 있는 밸브(11)는 닫히고, 세포 계량이 완료된 후, 제어 유닛이 펄스를 계량 매체의 입구 채널(5)로 통과시키며, 캐리어 액체용 출구 채널에 있는 밸브(10)가 닫히고 디퓨저 구조(9)가 캐리어 액체용 입구 채널(2)에서 수동 밸브로 작동하기 전에 또는 동시에, 세정액용 출구 채널(4)에 있는 밸브(11)를 닫고, 계량 매체가 계량 매체용 입구 채널(5)을 통해 추가되며 적어도 하나의 세포가 드롭(drop)으로 배출되는 세포 계량 방법.
  14. 제13항에 있어서,
    세포를 분리하는 역할을 하는 다른 매체가 우회 흐름용 입구 채널(7)을 통해 추가되고 캐리어 액체용 입구 채널(2)에서 세포를 배열시키는 것을 특징으로 하는 세포 계량 방법.
  15. 제13항 또는 제14항에 있어서,
    계량 과정에 이어서, 및/또는 계량 과정 동안, 세포 수가 초과하면, 세정 단계가 실행되고, 세정액이 계량 밸브용 입구 채널(5)을 통해 도입되고 캐리어 액체용 출구 채널(3)에 있는 밸브(10) 및 계량 밸브(17)를 닫으며, 세정액용 출구 채널(4)을 통해 세정액을 배출하는 것을 특징으로 하는 세포 계량 방법.
  16. 제13항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
    캐리어 액체로서, 세포 배양 매체, 염용액(salt solution), 버퍼 용액(buffered solution), 등장 염용액(isotonic common salt solution), 2(4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라지닐)-에탄술폰산(2(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl)-ethanesulphonic acid; HEPES)-버퍼 용액(buffered solution), 트리(하이드록시메틸)-아미노메탄(tris(hydroxymethyl)-aminomethane; TRIS)-버퍼 용액(buffered solution), 구연산 나트륨(sodium citrate)을 포함하는 용액, 트립신(trypsin)을 포함하는 용액, 에틸렌디아민테트라아세트산(ethylenediaminetetraacetic acid; EDTA)을 포함하는 용액, 항생제(antibiotics)를 포함하는 용액, 항진균제(antimycotics)를 포함하는 용액 또는 그 혼합액을 이용하는 것을 특징으로 세포 계량 방법.
  17. 제13항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    계량 매체로서, 세포 배양 매체, 염용액(salt solution), 등장 염용액(isotonic common salt solution), 2(4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라지닐)-에탄술폰산(2(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl)-ethanesulphonic acid; HEPES)-버퍼 용액(buffered solution), 트리(하이드록시메틸)-아미노메탄(tris(hydroxymethyl)-aminomethane; TRIS)-버퍼 용액(buffered solution), 형광 마커(fluorescence marker)를 포함하는 용액, 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라아졸이움브로마이드(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide; MTT)를 포함하는 용액 또는 그 혼합액을 이용하는 것을 특징으로 하는 세포 계량 방법.
  18. 제13항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서,
    캐리어 액체 및 계량 매체로서 동일한 용액이 사용되는 것을 특징으로 하는 세포 계량 방법.
  19. 제13항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서,
    캐리어 액체 및 계량 매체로서 다른 용액이 사용되는 것을 특징으로 하는 세포 계량 방법.
  20. 인간 세포, 동물 세포, 원핵세포, 진핵세포 및/또는 식물 세포를 계량하기 위한 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 세포 계량 장치의 용도.
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