KR20110130115A - Cosmetic composition containing the extract of angelica koreanum with the anti-inflammatory and antioxidative effects - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: An Angelica Koreanum extract with anti-inflammation and antioxidation and a cosmetic composition containing the same are provided to suppress the generation of NO without skin irritation. CONSTITUTION: A cosmetic composition for anti-aging contains 5-30 wt% of Angelica Koreanum extract. The extract is isolate by adding water, hydrophilic organic solvent, or mixture solvent thereof to Angelica Koreanum. The extract is prepared using purified water, anhydrous or hydrous methanol of 1-4 carbon atoms, ethanol, propyl alcohol, butyl alcohol, glycerin, propylene glycol, or butylene glycol. The cosmetic composition is manufactured in the form of a skin softener, nutrition lotion, nutritional cream, massage cream, essence, pack, emulsion, oil gel, and mask pack.

Description

항염 및 항산화 효능을 갖는 강활 추출물 및 이를 함유하는 화장료 조성물 {Cosmetic composition containing the extract of Angelica Koreanum with the Anti-inflammatory and Antioxidative effects}Active extract with anti-inflammatory and antioxidant effects and cosmetic composition containing same {Cosmetic composition containing the extract of Angelica Koreanum with the Anti-inflammatory and Antioxidative effects}

본 발명은 항염 및 항산화 효능을 갖는 강활 추출물 및 이를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 피부에 자극이 없고 안전하여 피부 질환 유발 문제가 없으며, 나이트릭옥사이드(Nitric Oxide)의 생성을 억제하여 항염 효과를 나타낼 뿐 아니라, 활성 산소종(Reactive Oxygen Species)소거능을 통한 항산화 효과를 나타내는 피부 노화 방지 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an active extract having an anti-inflammatory and antioxidant effect and a cosmetic composition containing the same, and more particularly, there is no irritation and safety on the skin, and there is no problem of inducing skin diseases, and the production of nitric oxide is suppressed. In addition to showing an anti-inflammatory effect, it relates to a skin anti-aging cosmetic composition exhibiting an antioxidant effect through the ability to eliminate reactive oxygen species (Reactive Oxygen Species).

일반적으로 화장품은 피부를 건강하고 아름답게 가꾸어 주며, 나이가 들어가면서 생기는 내인적 노화 및 외부 요인에 의해 진행되는 외인적 노화를 지연시켜 주는 역할을 한다. In general, cosmetics make skin healthy and beautiful, and play a role in delaying exogenous aging caused by endogenous aging and external factors caused by aging.

피부는 신체의 가장 외부에 존재하는 조직이며, 외부환경의 물레, 화학적 요인으로부터 신체를 보호함과 동시에 인체의 대사에 필요한 생화학적 기능을 영위하는 생명유지에 불가결한 기관이다. 구체적으로 피부는 내분비 기능, 면역기능, 흡수 및 분비기능, 보호기능 뿐만 아니라 땀과 피지, 노폐물을 분비하여 체온 조절과 피부표면의 산도를 유지함으로써 방수 역할 및 항균작용, 수분조절, 호흡기능, 비타민 D 합성 기능, 영양소 저장기능 등 매우 다양한 기능을 수행하는 중요한 역할을 한다. 이러한 피부는 물리 화학적 상해, 세균이나 곰팡이 등의 미생물 및 기생충의 감염, 자외선 노출, 대기 오염 등의 외부 환경에 의해 쉽게 손상 받게 되며 이는 피부의 노화와 밀접하게 연관된다. The skin is the most external tissue of the body, and it is an indispensable organ for maintaining the biochemical functions necessary for the metabolism of the human body while protecting the body from water and chemical factors of the external environment. Specifically, the skin secretes sweat, sebum, and waste products as well as endocrine function, immune function, absorption and secretion function, and protection function. D Plays an important role in performing a wide variety of functions, including synthesis and nutrient storage. These skins are easily damaged by external environments such as physicochemical injuries, microorganisms such as bacteria and fungi, parasite infections, UV exposure, and air pollution, which are closely related to aging of the skin.

피부가 손상을 받게 되면, 생체 조직의 손상에 대한 국소적인 보호 반응으로 혈액 성분이 혈관 벽을 통하여 조직으로 빠져나오는 현상인 염증이 발생하게 된다. 인체는 염증 반응을 통하여 다양한 단백질 분해 효소와 사이토카인(cytokine)등의 세포 생성물을 분비함으로써 염증에 대한 치료 및 방어를 할 수 있게 한다. 평상시에는 사이토카인 수용체 및 세포 부착물질 생산 관련 유전자의 발현을 촉진시키는 전사인자 NF-kB와 ikb라는 저해 단백질이 복합체의 형태로 존재한다. 하지만 자외선이나 리포폴리사카라이드 (LPS, lipopolysaccharide)를 이용하여 세포에 자극이 가해지면, IKK라는 효소가 작용을 하여 NF-kB와 ikb의 복합체를 인산화 시키게 되어 ikb가 떨어지게 된다. 세포질에서 핵 안으로 이동한 NF-kB는 염증관련 유전자의 전구체에 결합하여 그 유전자의 전사를 유도하게 되며, 이때 생성된 염증 관련 생합성 효소인 나이트릭옥사이드 합성효소(iNOS, induced nitric oxide synthase) 및 사이클로옥시다아제-2(COX-2)에 의하여 나이트릭옥사이드(Nitric Oxide)와 프로스타글란딘(Prostaglandin)이 합성되어 세포 외로 배출된다. 과도한 염증 반응은 단백질 분해 효소들에 의해 주변 세포 및 결합 조직에 손상을 입히며, 이 과정이 지속적 또는 만성적으로 계속되면 심각한 조직의 손상을 가져오게 되고 빠른 피부노화의 원인이 된다.When the skin is damaged, inflammation occurs, a phenomenon in which blood components escape through the walls of blood vessels into the tissue as a local protective response to damage to biological tissues. Through the inflammatory response, the human body secretes various cellular products such as proteolytic enzymes and cytokines, thereby treating and defending against inflammation. Usually, inhibitory proteins called transcription factors NF-kB and ikb, which promote the expression of cytokine receptors and genes involved in cell adhesion substance production, exist in the form of a complex. However, when stimulation is applied to cells using ultraviolet light or lipopolysaccharide (LPS, lipopolysaccharide), an enzyme called IKK acts to phosphorylate the complex of NF-kB and ikb, resulting in a drop in ikb. NF-kB, which migrates into the nucleus of the cytoplasm, binds to precursors of inflammation-related genes and induces transcription of the genes. In this case, induced nitric oxide synthase (iNOS) and cyclo, which are inflammation-associated biosynthetic enzymes, are produced. Nitric oxide and prostaglandin are synthesized by oxidase-2 (COX-2) and released into the cell. Excessive inflammatory reactions damage the surrounding cells and connective tissues by proteolytic enzymes, and if this process continues or chronically leads to serious tissue damage and causes rapid skin aging.

일반적으로 피부 노화는 체세포 돌연변이, 자유 라디칼의 과도한 생성, 자가 면역반응, 독성물질의 축적, 유전자 복제중 발생된 에러, 진피구성 단백질의 변형 등 (M. Rieger, Cosmetics & toiletries, 110, 94, 1994) 여러 가지 학설이 제기되고 있으며, 이 중에서 노화 (aging)와 성인병과 같은 각종 질환의 원인이 활성산소종 (reactive oxygen species)에 기인된다는 학설이 인정받음에 따라 산소나 질소로부터 유래되는 활성 산소종을 조절할 수 있는 천연 항산화제를 개발하려는 연구가 활발히 진행되고 있다. 보통 유해산소로 알려져 있는 활성 산소종은 가장 안정한 형태인 삼중항 산소 (3O2)가 환원되면서 과산화물 음이온 라디칼 (O2 ), 과산화수소 (H2O2), 히드록시 라디칼 (·OH), 과산화지질 (ROOH)이나 여기서 발생되는 자유 라디칼 (ROO·, RO·) 등의 과산화지질로서, 체내에는 이러한 활성산소종이 정상적인 상태에서도 발생을 하지만 항산화 효소인 슈퍼옥사이드 디스뮤타아제 (superoxide dismutase, SOD), 카탈라아제 (catalase), 글루타치온 퍼옥시다아제 (glutathion peroxidase, GPx) 등이 존재하여 과도한 활성 산소종의 생성을 억제하고 있다. 그러나, 이러한 활성산소종이 스트레스 및 외부 환경적인 요인에 의해 비정상적으로 과도하게 발생이 되어 소거되지 않고 체내에 존재하게 되면 자유 라디칼로 인한 산화적 스트레스 (oxidative stress)가 생체에 가해져 DNA, RNA, 단백질, 세포막 및 세포구조 손상, 암, 조직 손상, 노화 등을 유발한다고 추측된다.In general, skin aging is associated with somatic mutations, excessive production of free radicals, autoimmune reactions, accumulation of toxic substances, errors in gene duplication, and modification of dermal constituent proteins (M. Rieger, Cosmetics & toiletries, 110, 94, 1994). Various theories have been raised, and among them, active oxygen species derived from oxygen or nitrogen have been recognized as a theory that the causes of various diseases such as aging and adult diseases are caused by reactive oxygen species. Research to develop a natural antioxidant that can control the activity is actively underway. Active oxygen species, commonly known as hazardous oxygen, are the most stable forms of triplet oxygen ( 3 O 2 ) with reduced peroxide anion radicals (O 2- · ), hydrogen peroxide (H 2 O 2 ), hydroxy radicals (OH) , Lipid peroxides (ROOH) or free radicals (ROO ·, RO ·) generated here, such as free radicals in the body that occur in normal conditions, but the antioxidant enzyme superoxide dismutase (SOD) ), Catalase, glutathione peroxidase (GPx), etc. are present to inhibit the generation of excessive active oxygen species. However, when these reactive oxygen species are abnormally excessively generated due to stress and external environmental factors and exist in the body without being erased, oxidative stress caused by free radicals is applied to the living body, resulting in DNA, RNA, protein, It is estimated to cause cell membrane and cell structure damage, cancer, tissue damage, aging and the like.

현대에 급증하는 다양한 질병 및 노화의 가속화를 억제하기 위하여 이러한 활성 산소종을 조절하거나 제거할 수 있는 항산화제에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다. 대표적으로, 천연 항산화제인 토코페롤, 아스코르빈산, 카로테노이드, 플라보노이드, 글루타치온 등에 대한 효능 연구 및 이들의 안정화 기술에 대한 연구와 합성 항산화제인 부틸화된 히드록시 톨루엔 (BHT), 부틸화된 히드록시 아니졸 (BHA) 등 다양한 항산화제가 알려져 있고, 그 외 많은 항산화제에 관한 연구가 지속적으로 진행되고 있다. (E. A. Lissi et al. Free Radic. Biol. Med, 18(2), 153, 1995) (A. Ghiselli et al. Free Radic. Biol. Med, 18(1), 29, 1995) 이들 항산화제 중 토코페롤은 항산화 효과가 비교적 낮은 편이고, 효과가 우수한 BHA, BHT 등의 합성 항산화제가 의약품 및 식품분야 등에서 활용되고 있으나, 돌연변이원성 및 독성에 대한 지적이 있으며 아스코르빈산의 경우에는 안정성이 확보된 유도체 및 제형 개발이 진행되고 있어, 더욱 안정하고 효과가 우수한 천연 항산화 소재의 개발이 절실히 요구되고 있다.In order to suppress the acceleration of various diseases and aging rapidly increasing in modern times, there is an active research on antioxidants that can control or eliminate such reactive oxygen species. Typically, studies on the efficacy of natural antioxidants, tocopherol, ascorbic acid, carotenoids, flavonoids, glutathione, and the like and their stabilization techniques, and synthetic antioxidants butylated hydroxy toluene (BHT), butylated hydroxy anisol Various antioxidants such as (BHA) are known, and research on many other antioxidants is ongoing. (EA Lissi et al. Free Radic. Biol. Med, 18 (2), 153, 1995) (A. Ghiselli et al. Free Radic. Biol. Med, 18 (1), 29, 1995) Tocopherols among these antioxidants Has a relatively low antioxidant effect, and synthetic antioxidants such as BHA and BHT, which have excellent effects, have been used in medicine and food fields, but there are indications of mutagenicity and toxicity, and derivatives and formulations with stability in ascorbic acid. As development proceeds, there is an urgent need for the development of more stable and effective natural antioxidant materials.

식물이 다양한 활성성분을 포함하고 있다는 것은 익히 알려진 사실이며 많은 식물 추출물들이 통증 완화, 해독, 해열, 방부, 수렴, 항염, 항산화 등의 효능을 가지고 있는 것으로 알려져 있으며, 최근에 일고 있는 환경 친화적이고 자연지향적인 추세에 따라 화장품에 들어가는 유효성분들도 화학물질뿐만 아니라 식물 유래의 천연물이 그 유용성을 기반으로 하여 여러 가지 형태로 화장품에 배합되어 사용되고 있다.It is well known that plants contain various active ingredients, and many plant extracts are known to be effective in relieving pain, detoxifying, antipyretic, antiseptic, astringent, anti-inflammatory, and antioxidant. According to the trend, the active ingredients in cosmetics are also used in various forms in cosmetics based on their usefulness as well as chemicals and natural substances derived from plants.

본 발명은 항염 및 항산화 효능을 갖는 강활 추출물 및 이를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 피부에 자극이 없고 안전하여 피부 질환 유발 문제가 없으며, 나이트릭옥사이드(Nitric Oxide)의 생성을 억제하여 항염 효과를 나타낼 뿐 아니라, 활성 산소종(Reactive Oxygen Species)소거능을 통한 항산화 효과를 나타내는 피부 노화 방지 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.The present invention relates to an active extract having an anti-inflammatory and antioxidant effect and a cosmetic composition containing the same, and more particularly, there is no irritation and safety on the skin, and there is no problem of inducing skin diseases, and the production of nitric oxide is suppressed. In addition to showing an anti-inflammatory effect, an object of the present invention is to provide a skin anti-aging cosmetic composition exhibiting an antioxidant effect through the ability to eliminate reactive oxygen species (Reactive Oxygen Species).

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 강활 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항염 효능 및 항산화 효과에 의한 노화 방지 화장료 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention provides an anti-aging cosmetic composition according to the anti-inflammatory effect and antioxidant effect, comprising the active extract as an active ingredient.

본 발명에서 강활 추출물을 화장료 조성물에 적용한 결과, 항염 및 항산화 효능이 탁월해지는 한편, 피부에 자극을 유발하지 않는 안전성을 확보하여 이를 토대로 본 발명을 완성하게 되었다.As a result of applying the active extract to the cosmetic composition in the present invention, while excellent anti-inflammatory and antioxidant efficacy, while ensuring the safety does not cause irritation to the skin to complete the present invention.

강활(Angelica Koreanum)은 미나리과에 속하며, 우리나라 중부·북부지방(경북, 강원, 경기, 평북, 함남, 함북)의 산지 및 산야 습원지, 계곡에 자생하며, 지리적으로는 만주, 우수리에 분포한다. 특히 중부이북, 강원도 깊은 산골짜기의 넓은 잎나무 밑 그늘진 습한 곳에서 자란다. 다년생초본, 높이 2m 안팎이고, 줄기는 곧게 서고 털이 없으며, 위에서 가지가 갈라지고, 묏미나리와 비슷하지만 윗부분에서 갈라지는 것이 다르다. 꽃은 8-9월에 피고 흰색의 작은꽃이 우산모양으로 모여 피며 복산형화서(複傘形花序)는 가지끝과 원줄기끝에서 발달하고 10-30개의 소산경(小傘梗)으로 갈라져서 많은 꽃이 달리며 총포(總苞)는 1-2개로서 피침형이고 소총포(小總苞)는 6개 정도이며 선형이다. 꽃잎은 5이고 5개의 수술이 있다. 열매는 10월에 성숙되며 분과(分果)는 타원형이고 납작하며 넓은 날개가 있다. 강활 내에 함유된 성분 중, Coumarin은 뿌리에 0.26(0.98)%, 전초에 0.11%, 열매에 0.13-0.44% 들어 있다. 그리고 안겔리코레아놀, 비싸오란게론, 이소임페라토린, 옥시페우쩨다닌, 임페라토린, 오스톨, 페룰라산, 오스레놀(녹음점 126℃, 7-히드록시-8-펜테닐쿠마린), 베르갑텐, 안겔리찐, 움벨리페론, 안겔리콜이 분리되었다. 정유함량은 뿌리에 0.39%, 열매에 1.13%, 꽃이삭에 0.67%, 잎에 0.06%이다. Angelica Koreanum belongs to the Minari family, and grows in mountainous and mountainous wetlands and valleys in the central and northern regions of Korea (Gyeongbuk, Gangwon, Gyeonggi, Pyeongbuk, Hamnam, and Hambuk), and is distributed geographically in Manchuria and Ussuri. Especially, it grows in the shaded humid place under the broad leaf tree in the deep valley of north central and Gangwon-do. Perennial herb, about 2m high, stems upright, hairless, branched from above, similar to parsley, but different from upper part. Flowers bloom in August-September, small white flowers gather in an umbrella shape. Boksan-style inflorescences are developed at the end of branches and main stems, and are divided into 10-30 scattered flowers. In this run, 1-2 guns are lanceolate, and there are about 6 small guns and linear. Petals are 5 and there are 5 stamens. Fruits mature in October, branch is oval, flat, with broad wings. Among the ingredients contained in the actives, Coumarin contains 0.26 (0.98)% in the root, 0.11% in the outpost and 0.13-0.44% in the fruit. Angelicoreanol, bisorarangeron, isoimferatorin, oxyfejudtanin, imperatorin, ostol, ferulic acid, osrenol (recording point 126 ° C, 7-hydroxy-8-pentenylcoumarin), verber Gapten, Angelicin, Umbelliferon and Angelicol were isolated. The essential oil content is 0.39% in the root, 1.13% in the fruit, 0.67% in the ear of flowers and 0.06% in the leaves.

본 발명의 화장료 조성물에 사용되는 강활 추출물은, 강활 분쇄물에 95% 에탄올, 70% 에탄올 및 열수를 첨가하여 수득할 수 있으며 이때, 강활은 5 내지 30 중량% 범위로 포함되는 것이 바람직하다.The active extract used in the cosmetic composition of the present invention can be obtained by adding 95% ethanol, 70% ethanol and hot water to the active pulverized product, wherein the activity is preferably included in the range of 5 to 30% by weight.

또한 상기 1차 추출물을 얻기 위해 사용되는 추출 용매는, 정제수, 탄소수 1 내지 4인 무수 또는 함수 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 글리세린, 프로필렌글라이콜 및 부틸렌글라이콜을 포함한 용매군 중에서 선택된 하나의 순수용매 또는 둘 이상이 조합된 용매가 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 가해지는 추출용매의 양은 혼합 생약재 전체 부피 대비 1 내지 20배의 양이면 바람직하다. 이러한 추출단계는 생약재의 통상적인 추출방법을 적용하여 수행될 수 있으며, 이는 당업계의 통상적인 지식을 가진 당업자들에게 자명할 것이다.In addition, the extraction solvent used to obtain the primary extract is from a solvent group including purified water, anhydrous or hydrous methanol having 1 to 4 carbon atoms, ethanol, propyl alcohol, butyl alcohol, glycerin, propylene glycol and butylene glycol One pure solvent or two or more selected solvents may be used, but the present invention is not limited thereto. The amount of the extraction solvent added is preferably 1 to 20 times the total volume of the mixed herbal medicines. This extraction step may be performed by applying a conventional extraction method of the herbal medicine, which will be apparent to those skilled in the art having ordinary knowledge in the art.

상기와 같이 수득한 골담초 발효 추출물은 본 발명의 노화 방지 화장료 조성물에 0.1 내지 90 중량%, 바람직하게는 1 내지 80 중량% 범위로 포함될 수 있다. 그 함량이 1 중량% 미만일 경우에는 실질적인 피부 효과를 기대하기 어렵고, 80 중량%보다 높으면 화장료 제형 및 제조에 문제가 있다.The goliathic fermented extract obtained as described above may be included in the range of 0.1 to 90% by weight, preferably 1 to 80% by weight in the anti-aging cosmetic composition of the present invention. If the content is less than 1% by weight it is difficult to expect a substantial skin effect, higher than 80% by weight has problems in cosmetic formulation and manufacture.

본 발명에 따라 강활 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염, 항산화 효를 함유하는 노화 방지 화장료 조성물의 제형은 특별히 제한되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 에멀젼, 오일젤, 마스크팩 등의 제형으로 제조될 수 있다. According to the present invention, the formulation of the anti-aging and anti-aging cosmetic composition containing an active extract as an active ingredient is not particularly limited and may be appropriately selected as desired. For example, the cosmetic composition of the present invention may be prepared in formulations such as flexible cosmetics, nourishing cosmetics, nutrition cream, massage cream, essence, pack, emulsion, oil gel, mask pack.

또한, 본 발명의 피부 노화 방지 화장료 조성물은 위에 기재된 제형 이외에도 일반 피부 화장료에 배합될 수 있으며 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 또는 향료 등을 필요에 따라 각각의 제형에 적절히 배합하여 사용할 수 있다.In addition, the skin anti-aging cosmetic composition of the present invention may be formulated into general skin cosmetics in addition to the formulations described above, and may require oil, water, surfactants, moisturizers, lower alcohols, thickeners, chelating agents, pigments, preservatives, or fragrances. According to the formulation, it can be used in combination.

본 발명의 피부 보호용 조성물은 항염, 항산화, 자극 완화력의 효과를 동시에 가지고 있어 의약, 화장품, 식품 등에서 손상된 피부의 회복 및 개선 등의 피부 보호를 목적으로 광범위하게 사용될 수 있다. 구체적으로, 의약에 있어서는 항염증제나 항산화와 관련된 항노화 제품 등에 사용이 가능하다. 그러나 본 발명의 피부 보호용 조성물은 이러한 목적으로만 한정하여 사용되는 것은 아니다.Skin protection composition of the present invention has the effects of anti-inflammatory, antioxidant, stimulating relieving power at the same time can be widely used for the purpose of skin protection, such as recovery and improvement of damaged skin in medicine, cosmetics, food and the like. Specifically, in medicine, it can be used for anti-inflammatory agents and anti-aging products related to antioxidant. However, the skin protection composition of the present invention is not limited to this purpose.

본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하여 저자극성이고 피부질환 유발에 문제가 없으며 나이트릭옥사이드 생성 저해능, 하이드록실 라디칼 소거능이 우수하여 항염 및 항산화 효과를 나타내는 피부 노화방지 화장료 조성물로 제형상의 안정성이 확보된 화장품의 모든 형태로 첨가하여 사용할 수 있다.The present invention solves the problems of the prior art as described above is hypoallergenic and has no problem in inducing skin diseases, has excellent anti-nitrification and hydroxyl radical scavenging ability and exhibits anti-inflammatory and antioxidant effects in the form of a skin anti-aging cosmetic composition The stability of the cosmetics can be added and used in all forms.

도 1은 강활 추출물의 하이드록실 라디칼(Hydroxyl radical) 소거능 그래프이다.
도 2는 강활 추출물의 세포 생존능 그래프이다.
도 3은 강활 추출물의 나이트릭 옥사이드(Nitric Oxide) 생성 저해능 그래프이다.
1 is a graph showing the hydroxyl radical (Hydroxyl radical) scavenging ability of the active extract.
2 is a cell viability graph of the active extract.
Figure 3 is a graph of nitric oxide (Nitric Oxide) production inhibitory activity of the active extract.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하고자 한다. 단, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니며, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, the scope of the present invention is not limited only to the following examples, and includes modifications of equivalent technical ideas.

실시예Example 1. 강활 추출물 제조 1. Active extract manufacture

건조된 강활을 세절한 후 다시 분쇄하여 분말 상으로 수득하였다. 수득한 강활 분말에 95% 에탄올을 중량 대비 5~30배로 첨가하여 상온에서 3시간 동안 교반하여 추출한 후, 여과지를 사용하여 추출액을 회수하였다. 회수된 추출액은 회전 감압 농축기를 사용하여 추출물 내의 유효 성분을 수득하였고, 동결 건조 과정을 거친 후 시험에 사용되었다.
The dried actives were chopped and crushed again to obtain a powder. 95% ethanol was added to the obtained active powder by 5 to 30 times by weight, and extracted by stirring for 3 hours at room temperature, and the extract was recovered using a filter paper. The recovered extract was obtained by using a rotary vacuum concentrator to obtain the active ingredient in the extract, which was used for the test after undergoing a freeze drying process.

시험예Test Example 1. One. 하이드록실Hydroxyl 라디칼Radical (( HydroxylHydroxyl radicalradical ) ) 소거능Scatters

실시예 1에서 제조한 강활 추출물에 대한 하이드록실 라디칼 소거능을 전자상자공명법(Electron Paramagnetic Resonance, 강원대학교 공동실험 실습관)을 이용하여 측정하였다. 과산화수소와 2가의 철염을 첨가하면 OH 가 발생되고, 이는 다시 DMPO와 반응하여 DMPO-OH 라디칼을 생성한다. DMPO-OH 의 EPR 신호를 측정함으로써 하이드록실 라디칼에 대한 추출물의 항산화 활성을 조사할 수 가 있다. 추출물이 첨가된 실험에서 항산화 활성이 있을 경우 하이드록실 라디칼을 소거하여 EPR 신호가 약해진다. 이를 이용하여 특정물질의 하이드록실 라디칼 소거 효과를 정량적으로 측정할 수 있다. 본 발명에서는 펜톤(fenton) 반응으로 하이드록실 라디칼을 발생시킨 후 DMPO spin trap을 이용한 EPR 방법으로 정량하였다. 추출물들을 가하고 이들의 하이드록실 라디칼 제거 능력을 EPR 신호의 감소로 측정하였으며, 이 때 항산화 활성은 추출물을 넣지 않은 대조군의 EPR 신호를 기준으로, 추출물을 넣었을 때 EPR 신호를 상대적인 신호 값으로 표시하였다. 양성 대조군으로는 항산화 효능 물질인 Quercetin 을 사용하였으며, Quercetin 대비 강활 추출물의 농도별 하이드록실 라디칼 소거능(%)을 표 1에 나타내었다. The hydroxyl radical scavenging ability of the active extract prepared in Example 1 was measured using an electron paramagnetic resonance method (Electron Paramagnetic Resonance, Kangwon National University). The addition of hydrogen peroxide and divalent iron salts generates OH, which in turn reacts with DMPO to produce DMPO-OH radicals. By measuring the EPR signal of DMPO-OH, the antioxidant activity of the extract against hydroxyl radicals can be investigated. In the experiment with the extract, if there is antioxidant activity, the EPR signal is weakened by scavenging hydroxyl radicals. This can be used to quantitatively determine the hydroxyl radical scavenging effect of certain substances. In the present invention, the hydroxyl radical was generated by the Fenton reaction and then quantified by EPR method using DMPO spin trap. Extracts were added and their hydroxyl radical scavenging ability was measured by the reduction of the EPR signal, wherein the antioxidant activity was expressed relative to the EPR signal when the extract was added, based on the EPR signal of the control group without the extract. As a positive control, Quercetin, an antioxidant activity substance, was used, and the hydroxyl radical scavenging ability (%) according to the concentration of active extracts compared to Quercetin is shown in Table 1.

시료 농도(μg/ml)Sample concentration (μg / ml) Hydroxyl radical 소거능(%)
(Quercetin 100μg/ml 대비)
Hydroxyl radical scavenging ability (%)
(Quercetin 100μg / ml)
1010 14.7± 0.814.7 ± 0.8 2020 30.4± 2.330.4 ± 2.3 5050 53.2± 5.253.2 ± 5.2 100100 78.8± 6.878.8 ± 6.8

위 표 1 에서 보는 바와 같이, 실시예 1에서 제조한 강활 95% 에탄올 추출물은 양성 대조군인 Quercetin 과 비교하여 하이드록시 라디칼 소거능 이 우수함을 확인할 수 있다.
As shown in Table 1, the active 95% ethanol extract prepared in Example 1 can be confirmed that the hydroxy radical scavenging ability is excellent compared to the positive control Quercetin.

시험예Test Example 2. 세포 독성 평가  2. Cytotoxicity Assessment

실시예 1에서 제조한 강활 추출물의 세포 독성을 측정하기 위하여 쥐 유래의 대식세포(Raw264.7)를 96 웰 플레이트에 1 x 105 cells/ml의 농도로 접종하고 배양한 후, 실시예 1에서 제조한 강활 추출물을 무혈청 배지를 이용하여 각각 10, 20, 50, 100, 200㎍/ml의 농도로 희석한 후, 24시간 동안 처리하고 MTT 시약을 이용하여 세포의 생존율을 평가하였다. 이때, 대조군으로는 무혈청 배지를 사용하였다. In order to measure the cytotoxicity of the active extract prepared in Example 1 rat-derived macrophage (Raw264.7) inoculated in a 96 well plate at a concentration of 1 x 10 5 cells / ml and incubated in Example 1 The prepared active extract was diluted to 10, 20, 50, 100, 200 µg / ml concentration using serum-free medium, and then treated for 24 hours, and the survival rate of the cells was evaluated using MTT reagent. At this time, serum-free medium was used as a control.

구분division 농도(㎍/ml)Concentration (㎍ / ml) 세포 생존능(%)Cell viability (%) 대조군Control group 100.00± 5.29100.00 ± 5.29 실시예 1Example 1 1010 126.56± 8.62 126.56 ± 8.62 2020 139.63± 16.44 139.63 ± 16.44 5050 111.11± 5.10 111.11 ± 5.10 100100 71.77± 2.69 71.77 ± 2.69

상기 표 2의 결과로 실시예 1에서 제조한 강활 추출물의 경우 세포에 10~50㎍/ml의 농도까지 처리시 독성을 나타내지 않았으며, 시료처리 최고 농도인 100㎍/ml 농도를 처리한 시험군에서 약 30% 정도의 독성을 나타냈다.
As a result of Table 2, the active extracts prepared in Example 1 did not show toxicity when the cells were treated up to a concentration of 10-50 µg / ml, and the test group treated with the highest concentration of 100 µg / ml. Showed about 30% toxicity.

시험예Test Example 3.  3. 나이트릭옥사이드Nitric oxide 생성 저해 효과 Generation inhibitory effect

실시예 1에서 제조한 강활 추출물의 나이트릭옥사이드(Nitric Oxide) 생성 저해 효과를 측정하기 위하여 쥐 유래의 대식세포(Raw264.7)를 24 웰 플레이트에 5 x 105 cells/ml의 농도로 접종하고 24시간 동안 37℃의 5% CO2 조건에서 배양하였다. 배양된 세포에 실시예 1에서 제조한 강활 추출물을 적용하기 위하여, 세포를 자극하여 나이트릭옥사이드의 생성을 유도하는 것으로 알려진 LPS (Lipopolysaccharide)를 함께 처리하여 10~200㎍/ml의 농도로 희석하였다. 양성 대조군으로는 L-NMMA(N-methyl-L-arginine acetate salt)를 사용하였으며 대조군은 LPS만 함유된 배지를 처리하였다. 24시간 배양된 세포를 회수하여 12,000rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 취하여 동량의 Griess reagent와 반응 시킨후, 540nm에서 흡광을 측정하였다.
In order to measure the inhibitory effect of nitric oxide production of the active extracts prepared in Example 1, rat-derived macrophages (Raw264.7) were inoculated in 24 well plates at a concentration of 5 x 10 5 cells / ml. Incubated for 24 hours at 5% CO 2 conditions of 37 ℃. In order to apply the active extract prepared in Example 1 to the cultured cells, the cells were stimulated with LPS (Lipopolysaccharide), which is known to induce the production of nitric oxide, was diluted to a concentration of 10 ~ 200㎍ / ml . As a positive control, N-methyl-L-arginine acetate salt (L-NMMA) was used, and the control group was treated with medium containing only LPS. Cells were harvested for 24 hours, centrifuged at 12,000 rpm for 10 minutes, the supernatant was taken and reacted with the same amount of Griess reagent, and then absorbance was measured at 540 nm.

구분division 농도(㎍/ml)Concentration (㎍ / ml) NO 생성저해능(%)NO generation inhibition (%) 대조군Control group 84.32± 0.6984.32 ± 0.69 실시예 1Example 1 1010 24.65± 0.68 24.65 ± 0.68 5050 60.29± 0.19 60.29 ± 0.19 100100 81.77± 0.42 81.77 ± 0.42

상기 표 3에서 보듯이, 본 발명의 실시예 1에서 제조한 강활 추출물의 경우에 LPS에 의해 유도된 나이트릭옥사이드의 생성을 농도 의존적으로 저해하는 효과가 확인되었으며, IC50은 약 29.25㎍/ml로 측정되었다. 본 실험예를 통해 강활 추출물의 나이트릭 옥사이드 생성 저해 효과가 확인되었으며, 이는 세포 수준에서 항염 효능이 있음을 나타낸다.
As shown in Table 3, in the case of the active extract prepared in Example 1 of the present invention, the effect of inhibiting the production of LPS-induced nitric oxide concentration-dependently was confirmed, the IC 50 is about 29.25㎍ / ml Was measured. In this experimental example, it was confirmed that the inhibitory effect of nitric oxide production of the active extract, which shows the anti-inflammatory effect at the cellular level.

시험예Test Example 4. 피부 자극 유발 여부 평가 4. Evaluation of skin irritation

실시예 1에서 제조한 강활 추출물의 피부 자극 유발 여부를 평가하기 위하여 인체 첩포 시험 (Human patch test)을 통하여 인체에 대한 1차 자극 시험 및 누적 자극 시험을 수행하였다. In order to evaluate the skin irritation of the active extracts prepared in Example 1, a primary patch test and a cumulative stimulation test were performed on a human body through a human patch test.

건강한 성인 남녀 20명을 대상으로 CTFA 가이드라인 (The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association. Inc. Washington, D.C., 20036, 1991)에 따라 실시하였다. 핀 쳄버 (Finn chamber)에 시료 20㎕를 적하시킨 후, 이를 시험 부위인 인체의 팔 한쪽에 첩포하고 테이프로 고정시켰다.Twenty healthy men and women were tested according to CTFA guidelines (The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association. Inc. Washington, D.C., 20036, 1991). 20 μl of the sample was added dropwise to a Fin chamber, which was then patched on one side of the arm of the human body, which was the test site, and fixed with tape.

1차 피부 자극시험은 24시간 동안 첩포한 후, 첩포를 제거하고 다시 4시간, 24시간 경과 한 후의 시험부위의 피부 반응을 하기 표 4의 기준에 따라 판정하였다.In the first skin irritation test, the patch was removed for 24 hours, the patch was removed, and then the skin reaction of the test site after 4 hours and 24 hours was determined according to the criteria of Table 4 below.

피부 누적 자극 시험(Repeated Insult Patch Test, RIPT)은 3주간 정기적인 피부에 시료 노출을 수행한 다음 2주 후 새로운 부위에 2차 폐쇄 첩포 (challenge test)를 행하여 피부에 나타난 자극 및 알러지 유발 유무를 관찰하는 시험으로 피부 질환 병력이 없는 성인 10명을 대상으로 하여 Finn Chamber에 실시예 1을 10mg/ml의 농도로 20㎕를 적하시킨 후, 이것을 시험 부위인 양쪽 팔 안쪽에 Scanpor tape로 고정시켰다. 24시간 적용 후 patch를 제거시키고, 24시간 동안의 간격을 두고 같은 일정으로 동일한 부위에 동일한 방법으로 총 9번의 반복적인 적용을 수행하였다. 피부자극 정도는 1차 피부자극 평가기준에 의거하여 육안으로 평가하여 scoring scale list를 작성하였다.
The Repeated Insult Patch Test (RIPT) is a three-week routine skin exposure followed by a second closed challenge test on new areas two weeks later to detect irritation and allergens on the skin. As a test to observe, 10 μl of a patient without a history of skin disease was added dropwise to the Finn Chamber in Example 1 at a concentration of 10 mg / ml, and then fixed with Scanpor tape inside both arms as test sites. After 24 hours of application, the patch was removed, and a total of 9 repetitive applications were performed on the same site at the same schedule at 24 hour intervals. The degree of skin irritation was evaluated visually based on the primary skin irritation evaluation criteria, and a scoring scale list was prepared.

시료sample 피시험자수Number of test subjects 판정결과Judgment result 자극도Irritation degree ++++ ++ ±± -- 시험군Test group 2020 -- -- -- 2020 00 대조군Control group 2020 -- -- -- 2020 00 (판정기준)
- : 홍반이나 특이한 현상 없음
±: 주위보다 약간 붉어짐
+: 주위보다 현저히 붉어짐
++: 주위보다 심하게 붉어지고 부풀어 오름
(자극도 계산식)
자극도 = [{(±) 수 × 1}+{(+)수 × 2}+{(++)수 × 3}]/피시험자 수
(Criteria)
-: No erythema or unusual phenomenon
±: slightly reddish
+: Significantly redder than the surroundings
++: reddens and swells more heavily than the surroundings
(Stimulus calculation formula)
Stimulus = [{(±) Number × 1} + {(+) Number × 2} + {(++) Number × 3}] / Number of Subjects

시료sample 피시험자수Number of test subjects 유도단계Induction stage 도전단계Challenge stage 자극도Irritation degree 2020 1One 22 33 44 55 66 77 88 99 24hr24hr 48hr48hr 72hr72hr 시험군Test group 2020 -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- 00 대조군Control group -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- 00
(계산식)
자극도 = [{(±)수 × 1}+{(+)수 × 2}+ {(++)수 × 3}]/피시험자 수

(formula)
Stimulus = [{(±) Number × 1} + {(+) Number × 2} + {(++) Number × 3}] / Number of Subjects

상기 표 4과 표 5의 결과에서 알 수 있듯이, 인체에 대한 피부 자극 시험을 평가한 결과, 본 발명의 실시예 1에서 제조한 강활 추출물은 자극을 유발하지 않으며 피부에 적용하기에 안전한 소재임을 확인할 수 있었다.
As can be seen from the results of Table 4 and Table 5, as a result of evaluating the skin irritation test on the human body, the activation extract prepared in Example 1 of the present invention does not cause irritation and confirmed that the material is safe to apply to the skin Could.

제형예Formulation example 1. 화장품의 제형 1. Formulation of Cosmetics

본 발명의 강활 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 여드름 피부를 위한 화장품 및 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있으며, 제형은 임의로 선택할 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는 각종 피부에 바르는 외용제인 크림, 밀크로션, 파운데이션, 스킨 등과 같은 화장품류와 클렌징 폼, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등을 포함한다.
Cosmetic composition containing the active extract of the present invention can be used in a variety of cosmetics and cleansing agents for acne skin, the dosage form can be arbitrarily selected. Products to which the composition can be added include cosmetics such as creams, milk lotions, foundations, skins, etc., which are external preparations applied to various skins, and cleansing foams, face washes, soaps, treatments, and essences.

이하는 본 발명의 꾸지뽕나무 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 구체적인 제형예를 나타낸 것으로, 본 발명의 화장료 조성물을 포함하는 제형은 이에 한정되는 것이 아니다.
The following shows a specific formulation example of the cosmetic composition containing the kkujippung tree extract of the present invention, the formulation containing the cosmetic composition of the present invention is not limited thereto.

실시예 1의 강활 추출물을 함유한 화장료 중 유연화장수(skin toner)의 제형은 다음과 같다.
Formulation of the skin toner in the cosmetic containing the active extract of Example 1 is as follows.

배합성분Compounding ingredient 함량 (중량 %)Content (% by weight) 실시예Example 22 카르복시비닐 폴리머Carboxyvinyl Polymer 33 부틸렌글리콜Butylene glycol 44 프로필렌글리콜Propylene glycol 33 메틸페닐폴리실록산Methylphenylpolysiloxane 0.10.1 메틸파라벤Methyl paraben 0.10.1 에틸 알코올ethyl alcohol 22 트리에탄올아민Triethanolamine 0.040.04 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 정제수Purified water to 100to 100

실시예 1의 강활 추출물을 함유한 화장료 중 로션(에멀젼)의 제형은 다음과 같다.
The formulation of the lotion (emulsion) in the cosmetic containing the active extract of Example 1 is as follows.

배합성분Compounding ingredient 함량 (중량 %)Content (% by weight) 실시예Example 22 카르복시비닐 폴리머Carboxyvinyl Polymer 44 에틸 하이드로벤조에이트Ethyl hydrobenzoate 0.10.1 유동 파라핀Liquid paraffin 33 비타민 E 아세테이트Vitamin E Acetate 0.10.1 실리콘silicon 0.80.8 케틸 알코올Ketyl Alcohol 0.50.5 솔비탄 모노스테아레이트Sorbitan monostearate 1One 폴리솔베이트60Polysorbate 60 0.30.3 메틸설포닐페탄Methylsulfonylfetan 0.20.2 프로필렌글리콜Propylene glycol 22 부틸렌글리콜Butylene glycol 55 메틸파라벤Methyl paraben 0.20.2 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.030.03 정제수Purified water to 100to 100

실시예 1의 강활 추출물을 함유한 화장료 중 에센스의 제형은 다음과 같다.
Formulation of the essence in the cosmetic composition containing the active extract of Example 1 is as follows.

배합성분Compounding ingredient 함량 (중량 %)Content (% by weight) 실시예Example 22 카르복시비닐 폴리머Carboxyvinyl Polymer 1515 글리세린glycerin 66 프로필렌글리콜Propylene glycol 33 마카다미아 오일Macadamia oil 0.50.5 메틸파라벤Methyl paraben 0.10.1 에틸 알코올ethyl alcohol 22 트리에탄올아민Triethanolamine 0.150.15 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 정제수Purified water to 100to 100

Claims (3)

강활에 물, 친수성 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 첨가하여 추출된 피부 노화 방지용 강활 추출물
Active extract for skin aging extracted by adding water, hydrophilic organic solvent or mixed solvent thereof to the active
제 1항에 있어서,
상기 강활 추출물은 강활 추출물 및 강활 내의 유효 성분을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 화장료 조성물
The method of claim 1,
The active extract is a skin anti-aging cosmetic composition, characterized in that it contains active extract and active ingredient in the active
제 1항에 있어서,
상기 강활 추출물은 항염증 및 항산화 효능을 나타내는 것을 특징으로 하는 피부 노화 화장료 조성물
The method of claim 1,
The active extract is a skin aging cosmetic composition, characterized in that it exhibits anti-inflammatory and antioxidant effects
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR101451473B1 (en) * 2012-05-30 2014-10-15 삼육대학교산학협력단 Composition comprising an extract of Osterici Radix as an effective ingredient for treatment or prevention of diabetes
KR101979279B1 (en) * 2018-12-19 2019-05-16 성보경 Composition for antioxidant and skin whitening and method for producing the same

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