KR20110018587A - Method for producing protein hydrolysate and protein hydrolysate therefrom - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A producing method of a protein hydrolysate without being contaminated by various germs, and the protein hydrolysate are provided to improve the productivity by enzyme-decomposing sterilized protein materials inside a solid culture medium. CONSTITUTION: A producing method of a protein hydrolysate comprises the following steps: injecting microorganism to a sterilized solid culture medium, for obtaining solid koji in the solid culture medium; sterilizing protein materials; and inserting the sterilized protein materials to the solid culture medium, and enzyme-decomposing after mixing with the solid koji.

Description

단백질 가수분해물의 제조방법 및 이로부터 제조된 단백질 가수분해물{Method For Producing Protein Hydrolysate and Protein Hydrolysate Therefrom}Method for Producing Protein Hydrolysates and Protein Hydrolysates Prepared therefrom {Method For Producing Protein Hydrolysate and Protein Hydrolysate Therefrom}

본 발명은 분해하고자 하는 단백질 원료를 고체코지를 이용하여 효소 분해시키는 단백질 가수분해물의 제조방법 및 이를 통해 제조된 단백질 가수분해물에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a protein hydrolyzate for enzymatically decomposing a protein raw material to be degraded using a solid cardboard and a protein hydrolyzate prepared through the same.

천연적으로 유래된 식품 조미료의 생산은 통상 단백질의 가수분해를 통해 이루어진다. 단백질을 가수분해시키는 방법에는 산가수분해법, 효소가수분해법 및 산-효소가수분해법이 있다. 산가수분해법은 단순하고, 이로부터 제조된 단백질분해물은 출발 원료에 따라 달라지지만 대부분 아미노산의 정미(正味)와 감미가 제품에 영향을 미친다. 따라서, 정미성을 요하는 제품에 응용하기는 좋으나, 고온에서 장시간 반응은 대량의 에너지를 요구하며, 산분해취의 발생 및 중화에 의한 높은 함량의 염을 포함하는 단점을 가진다. 특히, 인체에 해로운 공정 중 유해성 클로로하이드린(Chlorohydrin) 화합물, 즉 3-MCPD(3-chloro-1,2-propanediol)와 2,3-DCP(2,3-dichloro-1-propanol)이 생성된다는 단점을 지닌다.The production of naturally occurring food seasonings usually takes place through hydrolysis of proteins. Methods of hydrolyzing proteins include acid hydrolysis, enzyme hydrolysis and acid-enzyme hydrolysis. Acid hydrolysis is simple, and the proteolysates produced therefrom depend on the starting material, but most of the amino acids taste and sweetness affect the product. Therefore, although it is good to apply to a product requiring fineness, long time reaction at high temperature requires a large amount of energy, and has a disadvantage of including a high content of salts by the generation and neutralization of acid decomposition odor. In particular, harmful chlorohydrin compounds, 3-MCPD (3-chloro-1,2-propanediol) and 2,3-DCP (2,3-dichloro-1-propanol), are produced during process harmful to the human body. It has the disadvantage of being.

이러한 문제점을 해결하는 가수분해방법이 효소가수분해법 및 산-효소가수분해법이다. 효소가수분해법 및 산-효소가수분해법에 액체 배지에서 국균을 배양(액체국)한 추출액 또는 고체 배지에서 국균을 배양(고체국)한 추출액을 이용할 수 있다. Hydrolysis methods to solve these problems are enzyme hydrolysis and acid-enzyme hydrolysis. In the enzyme hydrolysis method and the acid-enzyme hydrolysis method, an extract obtained by culturing the bacteria (liquid station) in a liquid medium or an extract obtained by culturing the bacteria (solid station) in a solid medium can be used.

이와 관련하여, 일본공개특허 제2004-313113호(특허 1) 및 한국공개특허 제2007-0023595호(특허 2)는 액체국을 사용하여 가수분해하는 방법을 제시한다. 그러나, 특허 1은 효소분해시 알코올을 첨가하므로 알코올이 단백질 변성을 초래하여 효소역가를 저하시키는 문제점이 있고, 특허 2는 고체국에 비해 액체국의 효소역가가 매우 떨어져 최종 산물에서의 우마미(Umami; 감칠맛)이 예상대로 나오지 않는다는 문제가 있다. 또한, 액체국을 식물성 단백질 원료와 혼합하는 경우, 식물성 단백질 원료에 거품이 형성되고, 살균/멸균시 단백질 덩어리가 형성되어 완전한 살균/멸균이 어려워지므로, 잡균의 오염 문제가 발생할 수 있다.In this regard, Japanese Patent Laid-Open No. 2004-313113 (Patent 1) and Korean Patent Laid-Open No. 2007-0023595 (Patent 2) present a method of hydrolysis using a liquid station. However, Patent 1 has a problem in that since alcohol is added during enzymatic degradation, alcohol causes protein denaturation, thereby lowering enzyme titer. Patent 2 has a very poor enzymatic titer in a liquid state compared to a solid state. There is a problem that it doesn't come out as expected. In addition, when the liquid station is mixed with the vegetable protein raw material, bubbles are formed in the vegetable protein raw material, and protein lumps are formed during sterilization / sterilization, making it difficult to completely sterilize / sterilize, which may cause contamination of various germs.

이와 같이 효소역가가 떨어지는 액체국 대신, 고체국을 사용하여 단백질을 효소 분해시키는 방법이 제시되고 있으나, 고체국 역시 목적하지 않는 부산물 처리 문제 및 잡균의 오염 문제 등이 대두되고 있어, 널리 활용되지는 못하고 있는 실정이다.Thus, a method of enzymatically decomposing a protein using a solid state has been proposed instead of a liquid state having low enzymatic activity, but a solid state has also been widely used due to undesired by-product processing problems and contamination of various germs. I can't do it.

따라서, 본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점과 과거로부터 요청되어온 기술적 과제를 해결하는 것을 목적으로 한다. Accordingly, an object of the present invention is to solve the problems of the prior art as described above and the technical problems that have been requested from the past.

이에, 본 발명의 일실시예에 따른 목적은 효소역가가 액체국에 의해 우수한 고체국을 이용하되, 잡균의 오염없이 무균상태로 단백질을 분해하는 단백질 가수분해물의 제조방법을 제공하는 것이다.Accordingly, an object according to an embodiment of the present invention is to provide a method for producing a protein hydrolyzate, which uses a solid station having an enzymatic titer with a liquid station, but decomposes the protein in a sterile state without contamination of various bacteria.

또한, 본 발명의 일실시예에 따른 목적은 유리아미노산/총아미노산 비율이 높은 단백질 가수분해물을 제공하는 것이다.In addition, an object according to an embodiment of the present invention is to provide a protein hydrolyzate having a high free amino acid / total amino acid ratio.

더욱이, 본 발명의 일실시예에 따른 목적은 단백질 가수분해물의 제조방법에 의해 제조된 단백질 가수분해물을 포함하는 우수한 품질의 식품 조미료, 소스, 드레싱 또는 장류 식품 등의 식품 조미소재를 제공하는 것이다.Furthermore, an object according to an embodiment of the present invention is to provide a food seasoning material, such as food seasonings, sauces, dressings or enteric foods of good quality, including protein hydrolysates prepared by the method for producing protein hydrolysates.

이러한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 멸균된 고체 배지에 미생물을 접종시켜 고체 배양기에서 고체코지(koji)를 제조하는 단계; 분해하고자 하는 단백질 원료를 멸균하는 단계; 및 상기 고체 배양기에 단백질 원료를 투입하고, 제조된 고체코지와 혼합하여 효소 분해시키는 단계를 포함하는 단백질 가수분해물의 제조방법을 제공한다. In order to achieve this object, the present invention comprises the steps of inoculating microorganisms in sterile solid medium to prepare a solid koji (koji) in a solid incubator; Sterilizing the protein raw material to be degraded; And it provides a method for producing a protein hydrolyzate comprising the step of adding a protein raw material to the solid incubator, and mixed with the prepared solid koji enzyme digestion.

또한, 본 발명은 제조방법에 의해 제조된 단백질 가수분해물을 제공한다. The present invention also provides a protein hydrolyzate prepared by the production method.

더욱이, 본 발명은 상기 단백질 가수분해물을 포함하는 식품 조미소재를 제 공한다.Furthermore, the present invention provides a food seasoning material comprising the protein hydrolyzate.

본 발명에 따른 단백질 가수분해물의 제조방법은 멸균된 고체 배지에 미생물을 접종시켜 고체 배양기에서 고체코지(koji)를 제조하는 단계를 포함한다. The method for producing a protein hydrolyzate according to the present invention includes inoculating microorganisms in a sterile solid medium to prepare a solid koji in a solid incubator.

용어 고체코지는 고체배양기에 의해 제조된 미생물 고체배양물을 의미하며, 본 발명에서 사용되는 고체코지는 잡균의 오염없이 무균적으로 제조된 미생물 고체배양물이다.The term solid coating means a microbial solid culture produced by a solid incubator, and the solid coating used in the present invention is a microbial solid culture produced aseptically without contamination of various bacteria.

상기 고체 배지는 미생물 배양용으로 사용될 수 있는 예를 들어, 식물성 또는 동물성 단백질 원료를 포함할 수 있다. 상기 단백질 원료는 최종 제품의 목적에 맞도록 사용될 수 있으며, 예를 들어 단일 원료를 고체 배지로 사용하여 고체코지를 제조한 후, 동일한 원료와 혼합하여 효소분해를 실시하면, 단일 원료를 사용한 제품이 제조될 수 있으므로, 최대의 단백질 함량(질량 %)을 얻을 수 있는 장점이 있다.The solid medium may include, for example, vegetable or animal protein raw materials that can be used for microbial culture. The protein raw material may be used to meet the purpose of the final product, for example, if a solid raw material is prepared using a single raw material as a solid medium, and then mixed with the same raw material and subjected to enzymatic decomposition, the product using a single raw material is Since it can be prepared, there is an advantage that the maximum protein content (mass%) can be obtained.

상기 식물성 단백질 원료로는 단백질 가수분해능이 있는 미생물이 자랄 수 있는 소재라면 특별히 제한되지 않으나, 예를 들어 콩, 옥수수, 밀, 콩단백질, 분리대두단백질, 탈지대두, 옥수수단백질, 옥분, 밀단백질 및 그 부산물들인 콩비지, 비규격 두부, 간장박 등, 해조류, 버섯류 및 채소류로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으며, 바람직하게 상기 식물성 단백질 원료는 밀단백질로서 밀글루텐일 수 있다.The vegetable protein raw material is not particularly limited as long as it is a material capable of growing protein hydrolyzable microorganisms, for example, soybean, corn, wheat, soy protein, soybean protein, skim soybean, corn protein, jade powder, wheat protein and The by-products may be one or more selected from the group consisting of soybeans, non-standard tofu, soybean meal, seaweeds, mushrooms and vegetables, preferably the vegetable protein raw material may be wheat gluten as a wheat protein.

상기 식물성 단백질 원료인 밀글루텐을 사용하는 경우, 압출(extrusion) 가 공하여 사용될 수 있다. 상기 밀글루텐은 물과 혼합하여 열을 가했을 때 점성이 강해지는 원료로, 압출 가공을 실시하여 밀글루텐 특유의 강한 점성결합을 제거할 필요가 있다. In the case of using wheat gluten, which is the vegetable protein raw material, extrusion may be used. The wheat gluten is a raw material that becomes viscous when mixed with water and heated, and needs to be extruded to remove strong viscous bonds unique to wheat gluten.

상기 동물성 단백질 원료 역시 단백질 가수분해능이 있는 미생물이 자랄 수 있는 소재라면 특별히 제한되지 않으나, 바람직하게는 어류, 조개류 및 육류로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있다.The animal protein raw material is not particularly limited as long as it is a material capable of growing a protein hydrolyzable microorganism, but preferably may be at least one selected from the group consisting of fish, shellfish and meat.

상기 단백질 원료는 국균이 적절히 생육 가능한 입도의 조건을 갖추어야 하며, 바람직하게 50㎛- 2mm의 평균 입도를 가질 수 있다. The protein raw material should have the conditions of the particle size that can be appropriately grown bacteria, and may preferably have an average particle size of 50㎛-2mm.

상기 고체 배지는 멸균된 것으로, 멸균시 고체 배지에 포함된 단백질 원료의 적정 수분 함유량은 단백질 원료 전체의 중량을 기준으로 40-80%(%질량), 바람직하게 50-60%(%질량)일 수 있다. 또한, 멸균은 100℃ 내지 130℃, 바람직하게는 100℃ 내지 121℃에서, 10분 이상, 바람직하게는 15분 이상 실시할 수 있다.The solid medium is sterilized, and during sterilization, an appropriate moisture content of the protein raw material contained in the solid medium is 40-80% (% mass), preferably 50-60% (% mass) based on the total weight of the protein raw material. Can be. In addition, sterilization can be performed at 100 ° C to 130 ° C, preferably at 100 ° C to 121 ° C for 10 minutes or more, preferably 15 minutes or more.

경우에 따라서, 멸균 과정 이후 고체 배양기에서 미생물이 생육할 수 있도록 생육적정 온도까지 냉각을 시킬 필요가 있다. 냉각 후 고체 배양기의 하부 밸브를 열어 잉여의 물을 제거해야 할 필요가 있는데, 이는 곰팡이(filamentous fungi; 사상균)의 특성상 수분이 너무 많은 곳에서는 균사체의 생육이 왕성하지 못할 뿐 아니라, 추후 오염의 가능성을 최대한 줄이기 위해서이다. In some cases, it is necessary to cool to a growth temperature so that microorganisms can grow in a solid incubator after sterilization. After cooling, it is necessary to open the lower valve of the solid incubator to remove excess water, which is not very vigorous in the growth of the mycelium where there is too much water due to the nature of the fungus (filamentous fungi). To reduce as much as possible.

또한, 고체 배지에서의 미생물 생육에 절대적으로 중요한 상대습도를 조절해야 할 필요가 있다. 바람직하게는 50-100%, 더욱 바람직하게는 80-100%의 상대습도로 고체 배양기를 유지해야 최대의 균사체 성장을 볼 수 있다.In addition, there is a need to control relative humidity, which is absolutely critical for the growth of microorganisms in solid medium. Preferably, a solid incubator should be maintained at a relative humidity of 50-100%, more preferably 80-100%, to see maximum mycelial growth.

상기 고체 배지에 접종되는 미생물은 곰팡이류(Aspergillus oryzae 또는 Aspergillus sojae), 바실러스(Bacillus)류 및 방선균류로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으며, 바람직하게는 곰팡이류의 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 또는 아스퍼질러스 소재(Aspergillus sojae)일 수 있다. Microorganism inoculated in the solid medium may be at least one selected from the group consisting of fungi (Aspergillus oryzae or Aspergillus sojae), Bacillus (Bacillus) acids and actinomycetes, preferably a fungus It may be Aspergillus oryzae or Aspergillus sojae .

하나의 실시예에서, 상기 미생물은 순수하게 분리 배양된 상태에서 접종 가능하며, 예를 들어 포자 상태로 접종하는 방법과 액체 상태로 접종하는 방법이 있다. 포자상태로 순수배양 했다면 멸균수에 포자를 현탁하여 고체 배양기에 접종할 수 있으며, 액체상태로 배양했다면 균사를 작은 크기로 그라인딩(grinding)한 후 멸균하여 고체 배양기에 접종할 수 있다. 포자로 접종하는 것이 균사로 접종하는 것보다 접종량을 1/10정도로 줄일 수는 있으나, 포자로 접종하기 위해서는 포자 발아율이 좋은 포자여야 되며, 포자에서 균사가 발아되기까지의 시간이 소요된다는 단점이 있다.In one embodiment, the microorganism can be inoculated in a purely isolated culture state, for example, there is a method of inoculation in a spore state and a method of inoculation in a liquid state. Spores can be inoculated in a solid incubator by spores in sterile water if incubated in spores, and if incubated in a liquid state, the hyphae can be inoculated into a solid incubator by grinding after sterilization to a small size. Inoculation with spores can reduce the inoculation amount by 1/10 than inoculation with mycelium. However, inoculation with spores requires a good spore germination rate and takes a long time from the spores to mycelial germination. .

상기 고체 배지에 미생물을 접종하는데 적합한 온도는 예를 들어, 20-40℃, 바람직하게는 25-35℃일 수 있다. 또한, 상기 고체 배지에 미생물을 접종 후 온도와 습도 관리가 중요하며, 위에 언급한 상대습도와 성장온도를 배양말기까지 일정하게 유지시켜야 한다. 다만, 사상균의 특성 상 일정크기의 균사가 자란 후 효소를 생산하기 시작하지만 과숙하게 되면 포자생산이 시작되므로 적절한 발효시간을 조절하는 것이 중요하다. 바람직한 발효 시간은 미생물과 선택되는 단백질 원료에 따라 달라지지만, 보통 1일-10일 정도가 적당하며, 바람직하게는 40시간에서 120시간일 수 있다. Suitable temperatures for inoculating microorganisms into the solid medium may be, for example, 20-40 ° C., preferably 25-35 ° C. In addition, temperature and humidity management after the inoculation of the microorganisms in the solid medium is important, and the relative humidity and growth temperature mentioned above must be kept constant until the end of the culture. However, due to the characteristics of filamentous fungi, a certain size of mycelium begins to produce enzymes, but when it is overcooked, spore production begins, so it is important to control the appropriate fermentation time. The preferred fermentation time depends on the microorganism and the protein source selected, but usually about 1-10 days is appropriate, preferably 40 to 120 hours.

본 발명에 따른 단백질 가수분해물의 제조방법은 또한, 분해하고자 하는 단백질 원료를 멸균하는 단계를 포함한다. The method for producing a protein hydrolyzate according to the present invention also includes sterilizing the protein raw material to be degraded.

위에서 언급한 바와 같이, 고체 배지로 사용되는 원료와 분해하고자 하는 단백질 원료를 동일하게 사용할 수 있으며, 이를 통해 단일 원료를 사용한 제품이 제조될 수 있으므로, 최대의 단백질 함량(질량 %)을 얻을 수 있다. 이 때, 상기 단백질 원료는 위에서 언급한 고체 배지와 동일하게 처리될 수 있으며, 고체 배지의 멸균 조건과 동일한 조건에서 멸균 처리하여 무균 상태로 제조될 수 있으며, 상기 멸균된 단백질 원료를 미생물 생육적정 온도인 20 내지 40℃, 바람직하게는 25 내지 35℃까지 냉각하는 단계를 더 포함할 수 있다.As mentioned above, the raw material used as the solid medium and the protein raw material to be decomposed can be used in the same way, so that a product using a single raw material can be produced, thereby obtaining the maximum protein content (mass%). . At this time, the protein raw material may be treated in the same manner as the above-mentioned solid medium, and sterilized under the same conditions as the sterilization conditions of the solid medium can be prepared in a sterile state, the sterilized protein raw material microbial growth titration temperature It may further comprise the step of cooling to 20 to 40 ℃, preferably 25 to 35 ℃ phosphorus.

이후, 본 발명에 따른 단백질 가수분해물의 제조방법은 고체 배양기에 단백질 원료를 투입하고, 제조된 고체코지와 혼합하여 효소 분해시키는 단계를 포함한다.Subsequently, the method for preparing a protein hydrolyzate according to the present invention includes the steps of adding a protein raw material to a solid incubator, and mixing the prepared solid cocoon to decompose the enzyme.

상기 고체코지와 멸균된 단백질 원료의 혼합 비율은 최종 제품에 요구되는 단백질 함량이나, 고체코지의 단백질 분해능에 따라 달라질 수 있으며, 10 ~ 90: 90 ~ 10의 비율, 바람직하게 50: 50의 비율로 혼합될 수 있다. The mixing ratio of the solid and sterilized protein raw materials may vary depending on the protein content required for the final product or the protein resolution of the solid, and the ratio of 10 to 90: 90 to 10, preferably 50: 50 Can be mixed.

상기 고체코지와 단백질 원료의 혼합은 정의된 바와 같이, 모두 고체 배양기에서 이루어진다. 종래에 고체 배양기에서 코체코지를 제조하고, 이를 이동시켜 별도의 반응기에서 효소 분해시키는 과정을 모두 거쳐 단백질 원료를 분해함으로써 단백질 가수분해물을 제조하는 공정에 비해 생산성 향상 및 원가 절감 효과가 뛰어나다. Mixing of the solid and protein raw material is all made in a solid incubator, as defined. In the prior art, manufacturing a cochecoji in a solid incubator, and by moving it through a process of enzymatic digestion in a separate reactor to decompose the protein raw material by producing a protein hydrolyzate is superior in productivity and cost reduction effect.

또한, 고체코지(고체국)을 이용한 분해방법의 특성상 무균 상태에서 발효를 실시한다 하더라도, 효소분해단계에서 다시 단백질 원료 및 물 등을 첨가하는 경우 개방형 작업이 이루어져 미생물 오염이 발생하는 결과를 초래할 수 있다. 그러나, 고체코지와 단백질 원료의 혼합을 모두 고체 배양기에서 실시함으로써, 고체코지와 같이 효소를 생산하는 미생물을 공기 중으로 개방되지 않게 하여 오염을 최소화할 수 있을 뿐 아니라, 외부 환경에 영향을 많이 받는 효소의 실활을 최대한 막을 수 있다.In addition, even if fermentation is performed in a sterile state due to the nature of the decomposition method using a solid koji (solid state), if the protein raw material and water are added again in the enzymatic decomposition step, an open operation may be performed, resulting in microbial contamination. have. However, by mixing both solid and protein raw materials in a solid incubator, microorganisms producing enzymes, such as solid coated, are not opened to the air, thereby minimizing contamination and enzymatically affected by the external environment. Can be prevented as much as possible.

상기 효소 분해하는 조건은 고체코지의 효소역가 및 단백질 원료의 종류에 따라 달라질 수 있고, 특히 목적하는 제품의 분해율에 따라 적절히 선택할 수 있다. 상기 효소 분해는 예를 들어 30℃ 내지 70℃에서 1일 내지 10일 동안, 바람직하게는 40℃ 내지 60℃에서 2일 내지 5일 동안 수행될 수 있다. The conditions for enzymatic degradation may vary depending on the enzyme titer of the solid koji and the kind of protein raw material, and may be appropriately selected according to the decomposition rate of the desired product. The enzymatic digestion can be carried out, for example, for 1 to 10 days at 30 ° C. to 70 ° C., preferably for 2 to 5 days at 40 ° C. to 60 ° C.

또한, 효소 분해에서 중요한 인자는 분해액의 pH로, 고체코지를 통해 생산되는 효소는 주로, 중성 프로테아제 특히, 엔도-펩티다제 또는 엑소-펩티다제이므로, pH는 이에 따라 5.0 내지 8.0, 바람직하게는 6.0 내지 7.0으로 조절될 수 있다.In addition, an important factor in enzymatic digestion is the pH of the digestion liquid, and the enzyme produced through the solid cocoa is mainly a neutral protease, in particular, endo-peptidase or exo-peptidase, so the pH is accordingly 5.0 to 8.0, preferably Preferably 6.0 to 7.0.

하나의 실시예에서, 상기 효소 분해는 무균 상태의 고체 배양기 내에서 수행될 수 있다. 위에서 언급한 바와 같이, 고체 배양기 내에서 고체코지와 단백질 원료의 혼합이 모두 수행되므로, 용이하게 무균 상태를 유지할 수 있다.In one embodiment, the enzymatic digestion can be performed in a solid incubator in an aseptic state. As mentioned above, since both the mixing of the solid and the protein raw material is carried out in the solid incubator, it is easy to maintain a sterile state.

또한, 상기 효소 분해는 무염(no salt) 상태의 고체 배양기 내에서 수행될 수 있다.In addition, the enzymatic digestion may be performed in a solid incubator in a no salt state.

상기 고체코지(고체국)를 효소 분해에 이용하는 경우 앞서 언급한 바와 같이 잡균의 오염문제가 발생하므로, 종래에는 이를 해결하고자 장기간 분해반응에서 염을 첨가하여 잡균의 번식을 막는 방법이 사용되어 왔다. 그러나, 염은 단백질 변성을 초래하여 효소역가의 효율성을 떨어뜨리고, 낮은 염 함량을 가진 가수분해물을 제조하고자 하는 경우 별도의 탈염 공정이 필요하게 되므로, 높은 제조단가를 형성하게 되는 단점이 있다.When the solid koji (solid state) is used for enzymatic digestion, as mentioned above, a problem of contamination of various bacteria occurs, and in order to solve this problem, a method of preventing propagation of various bacteria by adding salt in a long-term decomposition reaction has been used. However, salts cause a protein denaturation, thereby decreasing the efficiency of enzyme titer, and when a hydrolyzate having a low salt content is to be prepared, a separate desalting process is required, resulting in a high manufacturing cost.

이와 관련하여, 일본특허공개 제2004-201678호는 고체국 제조시 유산균 배양액과 국균을 순차적을 접종한 다음, 효소 반응시 무염 상태에서 가수분해물을 제조하는 방법을 개시하고 있으나, 유산균에 대한 발효를 컨트롤하는 것의 어려움, 발효공정 중 반응기의 헤드스페이스(head space)를 질소가스로 치환해서 호기성 미생물을 저해해야 하는 과정을 필수적으로 거쳐야 하는 등의 복잡한 공정으로 실제 응용이 불가능하다는 문제점이 있다.In this regard, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2004-201678 discloses a method of sequentially inoculating a lactic acid bacterium culture medium and a bacterium in the production of a solid state, and then preparing a hydrolyzate in an unsalted state during an enzyme reaction. Difficulty in controlling, complex process such as mandatory to inhibit the aerobic microorganisms by replacing the head space (head space) of the reactor with nitrogen gas during the fermentation process has a problem that the practical application is impossible.

그러나, 본 발명의 단백질 가수분해물 제조방법은 무균 고체 배양기에서 고체코지 제조 후, 멸균된 단백질 원료를 투입하고, 고체코지의 발효에 의해 생산된 효소를 통해 단백질 원료를 분해함으로써, 잡균의 번식을 방지하기 위해 염을 첨가하지 않아도 무방하다. 따라서, 무염 상태에서 단백질 변성 또는 효소역가의 저하를 일으키지 않고, 단백질 가수분해 반응을 최대의 효율로 증진시킬 수 있다.However, in the method of producing protein hydrolyzate of the present invention, after the production of a solid coke in a sterile solid incubator, the sterilized protein raw material is added, and the protein raw material is decomposed through the enzyme produced by fermentation of the solid coke, thereby preventing the propagation of various bacteria. It is not necessary to add a salt in order to do so. Therefore, the protein hydrolysis reaction can be enhanced to the maximum efficiency without causing protein denaturation or enzymatic titer in the unsalted state.

하나의 실시예에서, 효소 반응이 완료된 이후 열처리에 의해 효소를 불활성화 시키고, 필터프레스를 이용하여 비분해성 고형분을 제거할 수 있다. 상기 효소 분해 생성물은 발효취 및 색을 저감시키기 위해 탈취 및 탈색될 수 있으며, 탈색에 특이성이 있는 활성탄과 탈취에 특이성이 있는 활성탄을 각각 총 고형분 중 량의 10중량%씩 혼합하고, 50℃의 온도에서 1시간 동안 여과액에 처리함으로써 분말색 및 이취를 효율적으로 개선시킬 수 있다. 또한, 미생물의 제거를 위해 0.45㎛의 여과사이즈를 갖는 마이크로필터(MF필터)를 사용하여 분해액을 여과한 후, 40 내지 50 브릭스(Brix)로 농축하여 분말화할 수 있다.In one embodiment, the enzyme is inactivated by heat treatment after the enzyme reaction is completed, and the non-degradable solids may be removed by using a filter press. The enzymatic degradation products may be deodorized and decolorized to reduce fermentation odor and color, and each of the activated carbons specific for decolorization and the activated carbons specific for deodorization are mixed by 10% by weight of the total solids, respectively, at 50 ° C. Powder color and off-flavor can be efficiently improved by treating the filtrate for 1 hour at temperature. In addition, after the decomposition solution is filtered using a micro filter (MF filter) having a filtration size of 0.45㎛ for the removal of microorganisms, it can be concentrated to powder to 40 to 50 Brix (Brix).

본 발명은 또한, 제조방법에 의해 제조된 단백질 가수분해물에 관한 것이다. 상기 단백질 가수분해물은 아미노산 유리율(유리아미노산/총아미노산 비율)이 30 내지 70%, 바람직하게는 50-70%이다.The present invention also relates to a protein hydrolyzate produced by the production method. The protein hydrolyzate has an amino acid free ratio (free amino acid / total amino acid ratio) of 30 to 70%, preferably 50-70%.

상기 단백질 가수분해물은 또한, 분해하고자 하는 단백질 원료에 따라 매우 다르지만, 단백질 가수분해물에 포함된 유리 글루탐산(glutamic acid)의 함량은 0%(%질량) 내지 20%(%질량), 바람직하게는 10 내지 20%(%질량)일 수 있다.The protein hydrolyzate also varies greatly depending on the protein source to be degraded, but the content of free glutamic acid in the protein hydrolyzate is 0% (% mass) to 20% (% mass), preferably 10 To 20% (% mass).

본 출원의 발명자들은, 밀글루텐의 경우 제조된 최종 가수분해물에서의 글루탐산 함량이 15%(%질량) 내지 20%(%질량)로, 통상의 방법에 의해 분해된 밀글루텐 가수분해물의 글루탐산 함량에 비해 높음을 확인하였다.The inventors of the present application, the glutamic acid content in the final hydrolyzate produced in the case of wheat gluten is 15% (% mass) to 20% (% mass), the glutamic acid content of the wheat gluten hydrolyzate decomposed by a conventional method It was confirmed that the high.

본 발명은 또한, 상기 단백질 가수분해물을 포함하는 범용 식품 조미소재에 관한 것이다.The present invention also relates to a general food seasoning material comprising the protein hydrolyzate.

상기 식품 조미소재는 특별히 제한되지 않으나, 예를 들어 식품 조미료, 소스, 드레싱 또는 장류 식품일 수 있으며, 본 발명의 제조방법에 의해 제조된 단백질 가수분해물을 포함하는 식품 조미소재는 품질이 우수하고 우아미(감칠맛)이 뛰어나다.The food seasoning material is not particularly limited, but may be, for example, food seasonings, sauces, dressings or enteric foods, food seasoning material containing a protein hydrolyzate prepared by the manufacturing method of the present invention is excellent in quality and elegant (Ultimate) is excellent.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 더욱 상술하지만, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 본 발명의 범주가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples, but the following Examples are provided to illustrate the present invention, and the scope of the present invention is not limited thereto.

[실시예 1]Example 1

500 L의 회전증자관(고체배양기)에 익스트루전(extrusion: 압출)된 밀글루텐 20kg과 물 20kg을 투입한 후, 121℃에서 20분 동안 가압 멸균하였다. 에어레이션(aeration)으로 냉각 후, 하베스트 홀(harvest hole)에 고여있는 물을 제거하였다. 고형분 대비 1%에 해당하는 순수 배양 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae)를 접종한 후, 배양온도 25℃, 교반속도 5 rpm, 상대습도 100%로 유지하면서 48시간 배양하였다. 20 kg of extruded wheat gluten and 20 kg of water were added to a 500 L rotary tube (solid incubator), followed by autoclaving at 121 ° C. for 20 minutes. After cooling by aeration, water accumulated in the harvest hole was removed. After inoculation of pure culture Aspergillus oryzae corresponding to 1% of the solid content, and incubated for 48 hours while maintaining at a culture temperature of 25 ℃, stirring speed 5 rpm, 100% relative humidity.

500 L 반응기에 익스트루전(extrusion: 압출) 밀글루텐 20kg과 물 200 L를 투입한 후, 100℃에서 1시간 동안 살균하였다. 살균 후 500 L 회전증자관(고체배양기)에 투입하여 고체코지와 혼합한 다음, 온도 45℃, 50 rpm, pH 6.0-7.0, 72시간 동안 효소분해를 실시하였다. 효소분해 후 압착, 탈색 및 탈취, 농축하여 분말화하였다.20 kg of extruded wheat gluten and 200 L of water were added to a 500 L reactor, and then sterilized at 100 ° C. for 1 hour. After sterilization, the mixture was put into a 500 L rotary tube (solid incubator), mixed with a solid koji, and subjected to enzymatic degradation for a temperature of 45 ° C., 50 rpm, pH 6.0-7.0, and 72 hours. After enzymatic digestion, the mixture was compacted, decolorized, deodorized, concentrated and powdered.

배양된 고체코지를 샘플링하여 효소역가를 분석하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다. 효소역가는 2% NaCl 용액에 5%의 고체코지를 넣어 추출한 후 카제인을 이용하여 측정하였다.The enzymatic titer was analyzed by sampling the cultured solid paper, and the results are shown in FIG. 1. Enzyme titer was determined by using casein after extracting 5% solids coated in 2% NaCl solution.

도 1을 참조하면, 배양 15시간부터 효소역가를 보이기 시작하여 배양 40시간 이후 효소역가가 최대가 됨을 확인할 수 있다.Referring to Figure 1, it can be seen that the enzyme titer started to show the enzyme titer from 15 hours of cultivation to the maximum after 40 hours of cultivation.

[실시예 2][Example 2]

고체코지와 멸균된 익스트루전(extrusion: 압출) 밀글루텐을 50:50으로 혼합하여 실시예 1에서와 같이 효소분해한 다음, 분말화한 분해물의 일반분석 값을 하기 표 1에 나타내었다. The solid analysis and the sterilized extruded wheat gluten were mixed at 50:50 to enzymatic digestion as in Example 1, and then general analysis values of the powdered digests are shown in Table 1 below.

[표 1] TABLE 1

Figure 112009050317076-PAT00001
Figure 112009050317076-PAT00001

표 1을 참조하면, 단백질 함량은 60% 이상으로 원료 대비 우수한 수율을 보였다. 아미노산유리율(유리아미노산/총아미노산 비율)은 68.71%로써 쓴맛이 거의 없으며, 잡미가 느껴지지 않는 분해율을 나타낸 것으로 판단된다. 보통 시중에 판매되는 효소분해 조미소재들의 분해율이 50-60%이므로 매우 우수한 분해율을 나타내었다고 볼 수 있다.Referring to Table 1, the protein content was more than 60% showed an excellent yield compared to the raw material. The amino acid free ratio (free amino acid / total amino acid ratio) was 68.71%, which had little bitter taste and was considered to exhibit a decomposition rate without any taste. Normally, the decomposition rate of enzymatically seasoned seasoning materials on the market is 50-60%, so it can be seen that the decomposition rate is very good.

또한, 위 표 1에서 보여지는 밀글루텐 분해물의 유리아미노산 프로파일을 하기 표 2에 나타내었다.In addition, the free amino acid profile of the wheat gluten decomposition product shown in Table 1 above is shown in Table 2 below.

[표 2] TABLE 2

Figure 112009050317076-PAT00002
Figure 112009050317076-PAT00002

표 2를 참조하면, 질량대비 글루탐산(glutamic acid)의 함량이 19.5%로써 매우 높은 수치를 나타내었음을 확인할 수 있다. 이것은 고체, 액체발효 및 장류법으로 제조된 단백질 분해물 중 가장 우수한 글루탐산 함량을 보이는 것으로써, 효소역가가 우수한 고체발효물을 무염으로 효소분해 한 결과라고 사료된다. 만약 염 을 첨가하고 효소분해를 실시하였다면 분해시간을 더욱더 길게하여 비슷한 분해율에 도달하였을지라도 탈염하는 과정에서 유리아미노산 및 단백질의 손실이 심하여 위 글루탐산 수치와 같은 높은 함량을 기대할 수는 없다.Referring to Table 2, it can be seen that the content of glutamic acid (glutamic acid) to mass was very high as 19.5%. This is the best glutamic acid content among the proteolytic products prepared by solid, liquid fermentation and enteric method, and it is considered that the result of enzymatic decomposition of solid fermentation products with excellent enzymatic activity without salt. If salts were added and enzymatic digestion was performed, the decomposition time was increased even more, and even though similar decomposition rates were reached, high free amino acid and protein loss during the desalting process resulted in a high content such as glutamic acid level.

또한, 높은 유리아미노산 함량 및 글루탐산 수치로 인하여 잡미가 없으며, 높은 우마미를 낼 수가 있어 기존 장류 조미소재의 응용에 있어 한계가 되었던 장류취 및 잡미를 극복할 수 있으며, 더욱더 범용적으로 우마미를 낼 수 있는 제품에 응용 가능할 것으로 사료된다.In addition, due to the high free amino acid content and glutamic acid level, there is no taste, and high umami can be produced to overcome the odors and scavengers, which were limited in the application of conventional seasoning seasoning materials, and can produce umami more universally. It is considered to be applicable to the present product.

[실시예 3] Example 3

실시예 1에 의해 제조된 밀글루텐 분해물을 5% 용액으로 제조하여 관능평가를 실시하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다. 대조군으로는 분해 전 밀글루텐이 사용되었다. The gluten digest produced in Example 1 was prepared as a 5% solution and subjected to sensory evaluation. The results are shown in FIG. 2. Wheat gluten before degradation was used as a control.

도 2를 참조하면, 대조군에 비하여 고기풍미와 단맛이 높아졌으며, 우마미가 가장 많이 상승하였음을 확인할 수 있다. 또한, 쓴맛과 잡미는 거의 없는 것으로 나타났다. 이와 같이 효소분해 특유의 펩타이드로 인한 쓴맛은 높은 아미노산 유리율에 의해 거의 사라졌으며, 발효에 의한 불쾌취(off-flavor)가 거의 없는 범용적인 식물성 조미소재를 얻을 수 있었다.Referring to Figure 2, compared to the control meat flavor and sweetness was increased, it can be seen that the most increased umami. In addition, there was little bitterness and taste. Thus, the bitter taste due to the peculiar peptide of the enzyme was almost disappeared by the high amino acid release rate, it was possible to obtain a general vegetable seasoning material with little off-flavor by fermentation.

본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 내용을 바탕으로 본 발명의 범주내에서 다양한 응용 및 변형을 행하는 것이 가능할 것이다.Those skilled in the art to which the present invention pertains will be able to perform various applications and modifications within the scope of the present invention based on the above contents.

도 1은 본 발명의 일실시예에 따라 고체코지를 샘플링하여 효소역가를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다;1 is a graph showing the results of analyzing the enzyme titer by sampling the solid coated paper according to an embodiment of the present invention;

도 2는 본 발명의 일실시예에 따라 밀글루텐 분해물에 대한 관능 평가 결과를 나타낸 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the results of sensory evaluation for wheat gluten decomposition products according to an embodiment of the present invention.

Claims (14)

멸균된 고체 배지에 미생물을 접종시켜 고체 배양기에서 고체코지(koji)를 제조하는 단계;Inoculating microorganisms into sterilized solid medium to prepare a solid koji in a solid incubator; 분해하고자 하는 단백질 원료를 멸균하는 단계; 및Sterilizing the protein raw material to be degraded; And 상기 고체 배양기에 단백질 원료를 투입하고, 제조된 고체코지와 혼합하여 효소 분해시키는 단계를 포함하는 단백질 가수분해물의 제조방법. Method of preparing a protein hydrolyzate comprising the step of adding a protein raw material to the solid incubator, and mixed with the prepared solid koji enzyme digestion. 제 1 항에 있어서, The method of claim 1, 상기 단백질 원료는 밀글루텐인 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물의 제조방법.The protein raw material is a method of producing a protein hydrolyzate, characterized in that the wheat gluten. 제 2 항에서 있어서,The method of claim 2, 상기 단백질 원료는 압출(extrusion) 가공하여 사용되는 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물의 제조방법.The protein raw material is a method for producing a protein hydrolyzate, characterized in that it is used by extrusion processing. 제 1 항에 있어서, The method of claim 1, 상기 미생물은 곰팡이류(Aspergillus oryzae, Aspergillus sojae), 바실러스(Bacillus)류 및 방선균류로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물의 제조방법.The microorganism is a method for producing protein hydrolyzate, characterized in that at least one selected from the group consisting of fungi ( Aspergillus oryzae , Aspergillus sojae ), Bacillus ( Bacillus) and actinomycetes. 제 1 항에 있어서,The method of claim 1, 상기 멸균된 단백질 원료를 20 내지 40℃로 냉각하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물의 제조방법.Method for producing a protein hydrolyzate, further comprising the step of cooling the sterilized protein raw material to 20 to 40 ℃. 제 1 항에 있어서, The method of claim 1, 상기 고체코지(koji)와 멸균된 단백질 원료는 10 ~ 90: 90 ~ 10의 비율로 혼합되는 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물의 제조방법.The solid koji (koji) and sterilized protein raw material is a method for producing a protein hydrolyzate, characterized in that the mixture of 10 to 90: 90 to 10. 제 1 항에 있어서, The method of claim 1, 상기 효소 분해는 무염(no salt) 및 무균 상태의 고체 배양기 내에서 수행되는 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물의 제조방법.The enzymatic digestion is a method for producing a protein hydrolyzate, characterized in that it is carried out in a solid incubator of no salt and aseptic conditions. 제 1 항에 있어서, The method of claim 1, 상기 효소 분해시 pH는 5.0 내지 8.0으로 조절되는 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물의 제조방법.PH of the enzyme decomposition is a method for producing a protein hydrolyzate, characterized in that adjusted to 5.0 to 8.0. 제 1 항에 있어서, The method of claim 1, 상기 효소 분해 생성물을 살균, 여과, 탈색, 탈취, 농축 및 분말화시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물의 제조방법.Method for producing a protein hydrolyzate further comprises the step of sterilizing, filtration, decolorization, deodorization, concentration and powdering the enzyme decomposition product. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 제조방법에 의해 제조된 단백질 가수분해물.A protein hydrolyzate prepared by the process according to any one of claims 1 to 9. 제 10 항에 있어서,11. The method of claim 10, 상기 단백질 가수분해물은 유리아미노산/총아미노산 비율이 30 내지 70%인 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물.The protein hydrolyzate has a free amino acid / total amino acid ratio of 30 to 70%. 제 10 항에 있어서,11. The method of claim 10, 상기 단백질 가수분해물은 글루탐산 함유량이 0%(%질량) 내지 20%(%질량)인 것을 특징으로 하는 단백질 가수분해물.The protein hydrolyzate has a glutamic acid content of 0% (% mass) to 20% (% mass). 제 10 항의 단백질 가수분해물을 포함하는 식품 조미소재.A food seasoning material comprising the protein hydrolyzate of claim 10. 제 13 항에 있어서, 상기 식품 조미소재는 식품 조미료, 소스, 드레싱 또는 장류 식품인 것을 특징으로 하는 식품 조미소재.The food seasoning material according to claim 13, wherein the food seasoning material is food seasoning, sauce, dressing or enteric food.
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