KR20100132861A - 식물 병원균에 대한 항균 활성을 갖는 스트렙토마이세스 속 ｂｓ０６２ 및 이를 이용한 식물병 방제제 - Google Patents

식물 병원균에 대한 항균 활성을 갖는 스트렙토마이세스 속 ｂｓ０６２ 및 이를 이용한 식물병 방제제 Download PDF

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Abstract

본 발명은 식물 병원균에 대한 항균 활성을 갖는 스트렙토마이세스 속 BS062 및 이를 이용한 식물병 방제제에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 각종 작물에 발생하는 잿빛곰팡이병원균(Botrytis cinerea), 탄저병(Colletotrichum gloeosporiodes), 벼도열병원균(Magnaphorthe grisea), 토마토잎곰팡이병원균(Fulvia fulva), 푸른곰팡이병원균(Trichoderma sp.) 등에 탁월한 항균 효과를 갖는 방선균 스트렙토마이세스 속 BS062(Streptomyces sp. BS062)[KCTC10978BP]와, 상기 균주 배양물 또는 배양여액을 유효성분으로 함유하는 식물병 방제제에 관한 것이다.
특히, 본 발명의 스트렙토마이세스 속 BS062와 그 배양물은 잿빛곰팡이병균의 균사생장을 억제하고 기형화함으로써 병원성을 떨어뜨려 병 발생을 억제하는데 탁월한 효과를 보여 이를 이용하면 다양한 작물에서 잿빛곰팡이병을 효과적으로 예방하거나 방제할 수 있다.
식물 병원균, 항균, 스트렙토마이세스 속 BS062, 식물병 방제제, 잿빛곰팡이병

Description

식물 병원균에 대한 항균 활성을 갖는 스트렙토마이세스 속 ＢＳ０６２ 및 이를 이용한 식물병 방제제{A Novel Streptomyces sp. BS062 and a biocontrol agent of plant diseases with this strain}
본 발명은 식물 병원균에 대하여 신규한 작용기전의 항균 활성을 갖는 신규 스트렙토마이세스 속 BS062 및 이를 이용한 식물병 방제제에 관한 것이다.
인삼의 뿌리썩음병을 일으키는 잿빛곰팡이병은 불완전균류의 일종인 보트리티스 시네리아(Botrytis cinerea)가 병원균이다. 이 균은 매우 다범성으로 인삼을 포함한 많은 과일이나 채소류 등에 수확 전, 후 및 운송이나 저장 중에 썩음병을 일으킴으로서 막대한 경제적 손실을 야기시킨다. 또한, 잿빛곰팡이병에 의해 피해를 입은 포장에서는 탄저병 등의 발생이 용이하여 다른 포장에 비해서 더 큰 피해를 보고 있다.
이러한 잿빛곰팡이병은 저항성품종을 이용한 방제, 재배환경 조절 및 병든 식물 제거에 의한 경종적 방제, 살균제를 이용한 화학적 방제, 그리고 미생물을 이용한 생물학적 방제에 의하여 방제할 수 있다. 그러나, 저항성 품종의 이용과 경종적 방제는 거의 효과를 거두지 못하고 있는 실정이기 때문에 잿빛곰팡이병 방제는 주로 화학적 방제에 의존하고 있다. 그러나, 최근에는 기존의 화학농약에 대한 내성균이 빈번하게 출현하여 화학요법에 의한 방제가 효과가 떨어지고 있는 것이 현실이며, 일부 효과를 갖는 농약의 경우에도 잔류 독성 문제로 인하여 과일을 수확해야하는 딸기나 오이, 인삼 등에 있어서는 그 사용이 엄격하게 제한되고 있는 실정이다. 따라서, 화학농약을 대체할 수 있는 저독성의 환경친화성 생물농약 개발에 관한 연구가 활발히 수행되고 있다. 그러나, 잿빛곰팡이병 방제에 관한 연구는 주로 실험실 내에서의 항균활성 조사나 경엽 처리에 의한 방제효과 등에 그칠 뿐, 인삼, 딸기 등에 발생하는 저장성 썩음병에 관한 연구는 아직까지 미흡한 실정이다.
생물농약으로서 잿빛곰팡이병을 방제하고자하는 노력은 천연물, 미생물 등을 이용한 방법들이 제시되었으며 최근 세계적으로 10종 이상의 미생물제제가 상품화되었는데 특히 바실러스속(Bacillus spp.), 트라이코더마속(Trichoderma spp.), 이스트(yeast) 등을 활용한 미생물농약들이 세계적으로 개발되어 등록되고 있다. 외국의 경우 슈도모나스 시린지(Pseudomonas syringae)를 제제화한 상품명 바이오-세이브 텐(Bio-save 10)을 실용화하여 사용 중이며, 일본의 경우 바실러스 속의 균(Bacillus sp.)을 2003년에 잿빛곰팡이병과 흰가루병 방제제로 상품화하였다. 국내에서는 1970년대 초반부터 인삼뿌리썩음병의 생물학적 방제연구를 시작으로 잿빛곰팡이병의 생물학적 방제에 관한 연구가 계속 수행되어 왔으며, 최근 잿빛곰팡이병균의 균사생장 및 포자발아를 억제하는 바실러스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis) N1 균주를 이용한 잿빛곰팡이병 방제에 관한 연구가 보고되었다.
또한, 방선균을 이용한 잿빛곰팡이병 방제에 관한 특허 등이 많이 보고되어 있는데, 그 예로 등록번호 제735572호는 그 균이 스트렙토마이세스 파다누스(Streptomyces padanus)이고, 제869668호는 스트렙토마이세스 야텐시스 (Streptomyces yatensis)이며, 제461579호는 스트렙토마이세스 속으로 이들 균들은 모두 그 효과가 실험실 내에서의 항균 활성에 국한되어 있으며 실제 포장에서나 대상 작물에서의 방제 효과 등이 미흡한 실정이다. 또한, 벼도열병에 대한 활성을 우수하지 않았다. 이처럼 많은 연구 사례에도 불구하고 효과가 우수하고 저렴하며 안전한 잿빛곰팡이병 방제용 생물 농약은 아직까지 정착되어있지 않은 실정이다. 따라서, 항균 활성이 우수하며 농약으로서의 특성이 안정한 신규 미생물의 탐색이 요구되고 있다.
이에, 본 발명자들은 항균 활성이 우수하며 농약으로서의 특성이 안정한 신규 미생물을 탐색하던 중, 잿빛곰팡이병, 벼도열병, 토마토잎곰팡이병, 푸른곰팡이병 등의 식물병 방제 효과가 우수한 신균주 스트렙토마이세스 속 BS062(Streptomyces sp. BS062)를 분리, 동정함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명은 병원균의 균사 기형 유발에 의한 새로운 식물병 방제 기전을 지닌 신균주 스트렙토마이세스 속 BS062(Streptomyces sp. BS062)를 제공하는 데 그 목적이 있다.
또한, 본 발명은 상기 신균주의 배양물 또는 배양여액을 유효성분으로 함유하는 식물병 방제제를 제공하는데 또 다른 목적이 있다.
본 발명은 병원균의 균사 기형 유발에 의한 식물병 방제 효과가 우수한 신균주 스트렙토마이세스 속 BS062(Streptomyces sp. BS062)를 그 특징으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 신균주의 배양물 또는 배양여액을 유효성분으로 함유하는 식물병 방제제를 또 다른 특징으로 한다.
본 발명의 스트렙토마이세스 속 BS062(Streptomyces sp. BS062) 균주 및 이의 배양물 또는 배양여액을 이용하면 다양한 작물에서의 잿빛곰팡이병, 탄저병, 벼도열병, 토마토잎곰팡이병, 푸른곰팡이병 등의 식물병 발병을 효과적으로 예방할 수 있다.
특히, 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.) BS062 균주 또는 그 배양물을 작물에 처리하여 병원균의 균사 기형 유발을 통한 인삼 및 기타 작물 재배 및 저장 시 발생하여 큰 피해를 주고 있는 잿빛곰팡이병을 생물학적으로 방제할 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 인삼 및 딸기의 잿빛곰팡이병에 탁월한 효과를 나타내는 길항방선균 스트렙토마이세스 속 BS062(Streptomyces sp. BS062)[KCTC10978BP] 및 이의 배 양물 또는 배양여액을 이용한 식물병 방제제에 관한 것이다.
본 발명에 따른 신균주 스트렙토마이세스 속 BS062는 충청남도 금산군 일대의 인삼밭 토양으로부터 보트리티스 시네리아, 컬레토트리컴 그로에오스포리오데스 등에 공통적으로 강한 항균력을 가지는 미생물을 선발하여 분리하고 16S rRNA 염기서열 분석을 통하여 동정한 결과, 스트렙토마이세스 속으로 나타났다. 이를 스트렙토마이세스 속 BS062로 명명하고, 한국생명공학연구원 생물자원센터에 2006년 8월 2일자로 기탁하였으며, 수탁번호는 KCTC10978BP이다.
본 발명의 신규 스트렙토마이세스 속 BS062[KCTC10978BP]의 항균 활성 스펙트럼을 분석한 결과, 잿빛곰팡이병원균(Botrytis cinerea) 이외에 탄저병(Colletotrichum gloeosporiodes), 벼도열병원균(Magnaphorthe grisea), 토마토잎곰팡이병원균(Fulvia fulva), 푸른곰팡이병원균(Trichoderma sp.)에 대한 항균활성이 있음을 확인하였다
본 발명의 스트렙토마이세스 속 BS062는 지에스에스(GSS) 액체배지에 7일간 200 rpm으로 진탕 배양한 배양여액을 딸기, 인삼, 토마토 등에 처리 시 잿빛곰팡이병의 발생에 대하여 탁월한 방제 효과를 갖는다.
보다 구체적으로 본 발명에 의한 상기 배양물 또는 배양여액은 인삼, 오이, 토마토, 딸기 등 보트리티스 시네리에(Botrytis cinerea)에 의하여 유발되는 잿빛곰팡이병 방제용으로 사용될 수 있다.
따라서, 본 발명은 상기 스트렙토마이세스 속 BS062 배양물 또는 배양여액을 유효성분으로 함유하는 식물병 방제제를 포함한다.
상기 배양여액은 상기 균체 배양액에서 균체를 제거한 상청액으로, 원심분리 또는 여과를 통해 얻을 수 있다. 배양여액은 액상 또는 건조 후 고체상으로 식물병 방제제에 포함될 수 있다.
이러한 식물병 방제제는 스트렙토마이세스 속 BS062의 균체, 이의 배양액, 이의 배양액 추출물, 배양여액 외에 농약 제제로 사용가능한 담체를 함께 사용하여 제조될 수 있다. 담체로는 통상적으로 사용되는 농약 제형으로 허용 가능한 담체이면 모두 사용할 수 있으나, 특히 동결보존제 스킴밀크(skim milk), 효모 추출물(yeast extract), PG와 전착제 SOF70, 계면활성제 TD20A, AS65D 등을 사용하는 것이 바람직하다.
이러한 식물병 방제제는 작물을 정식한 후 발병 직전 또는 발병 직후에 식물체 지상부에 경엽 처리 방법으로 처리하거나 수확 후 저장 중에 식물병 방제를 위하여 분무 살포 처리할 수 있다.
이렇게 스트렙토마이세스 속 BS062는 식물병 방제제, 미생물 영양제, 토양 개량제 등의 전반적인 농약제로 사용될 수 있다.
이하, 본 발명을 다음 실시예에 의하여 설명한다. 하기 실시예는 본 발명을 설명하고자하는 하나의 예일 뿐 이에 의해 본 발명의 기술적 사상의 범위가 변경되거나 축소되는 것은 아니다.
실시예 1: 균주 분리 및 동정
1-1. 균주 분리
본 실시예에서는 보트리티스 시네리아, 컬레토트리컴 그로에오스포리오데스를 시험균주로 하여 이에 길항력이 있는 미생물을 분리하기 위하여, 전국 각지에서 근권 토양을 채취하였다. 채취한 시료는 1 g에 멸균수 10 ml를 혼합하여 진탕한 후 토양 희석 한천평판법으로 106 배까지 희석하여 희석액 100 ㎕를 benett's agar(Glucose 5 g, Soluble starch 5 g, Malt extract 1 g, Yeast extract 1 g, N-Z amine 1 g, agar 15 g/L, pH 7) 평판 배지에 분주하여 배지 전면에 골고루 도말한 다음, 28 ℃ 항온기에서 7일간 배양하고 진균의 단일 콜로니(single colony)를 순수 분리하여 benett's agar 사면 배지에 옮겨 4 ℃에서 보관하였다.
1-2. 분리 균주의 동정
상기에서 선별한 균주에 대한 동정을 아래와 같이 실시하였다.
가. 형태적 특성
선별한 균주는 GSS 배지에서 접종하고 28 ℃에서 7일간 배양한 후 관찰한 바, 회백색의 포자를 많이 생성하며, 배지 내에 보라색의 색소를 생산하였다.
나. 16S rDNA 염기서열 분석
상기에서 분리한 분리 균주의 동정은 동일한 배지를 사용하여 배양한 후, Hopwood 등에서 제시한 방법에 따라 BS062 균주의 DNA를 분리하였으며, 16s-rDNA의 증폭은 Bacteria의 특이적 16s rDNA 증폭용 primers를 사용하여 PCR법을 사용하여 수행하였으며[Marchesi 등, Appl. Environ. Microbiol. 64, 795-799, 1998], PCR product는 QIAEXII gel extraction kit (Qiagen 사)를 사용하여 정제하여 직접 PCR product로부터 염기서열을 분석하였다. 이 서열을 이용하여 Maximum-parsimony algorithm으로 다양한 방선균의 16S rDNA 서열정보와 비교분석하였다[도 3]. Muruamatsu 등의 연구[Muramatsu, H., S. I. Mokhtar, M. Katsuoka and M. Ezaki. 2005. Actinomyetelolgoica. 19:33-39]와 같이 BS062 균주 또한 방선균속 중에서 스트렙토마이세스 하이그로스코피커스(Streptomyces hygroscopicus)와 99% 이상의 유사도를 가지고 있었다. 그러나, BS062 균주는 회백색의 포자와 배지 내 보라색 색소를 생성하는 반면, Streptomyces hygroscopicus는 검은색의 포자를 형성하는 등 형태적으로 차이를 나타내었다. 따라서, 본 발명 균주를 스트렙토마이세스 속 BS062(Streptomyces sp. BS062)라 명명하였으며, 미생물 국제기탁기관인 한국생명공학연구원 생물자원센터에 2006년 8월 2일자로 기탁하여 수탁번호 KCTC10978BP를 부여받았다.
실시예 2 : 신균주 배양
본 발명의 스트렙토마이세스 속 BS062는 전배양 배지(Soluble starch 10 g, Glycerol 7 g, Bacto peptone 3 g, Soytone peptone 5 g, Yeast extract 3 g, Anti-form 0.5 ml)를 1리터 증류수에 넣어 녹인 후 500 ml 삼각플라스크에 100 ml씩 분주하고 1.5기압 121 ℃로 20분간 고압 살균하여 제조하였다. 제조된 배지에 플레이트 상태의 스트렙토마이세스 속 BS062를 백금이로 취하여 접종(1% 이하)한 후, 28 ℃에서 150 rpm으로 흔들어주면서 2일간 배양하여 종접종원으로 사용하 였다.
상기 균의 본 배양을 위한 배지는 지에스에스(GSS) 액체배지(Glucose 20 g, Soluble starch 10 g, Meat extract 1 g, Yeast extract 4 g, Sodium chloride 2 g, Dipotassium hydrogen phosphate 0.05 g, Soybean flour 25 g/L, pH 7)로 1L 삼각플라스크에 200 ml씩 분주하고 1.5 기압 121 ℃로 20분간 고압 살균하여 제조하였다. 제조된 배지에 종배양한 스트렙토마이세스 속 BS062 배양액을 플라스크 당 3%(v/v)의 양으로 접종한 후 28 ℃에서 200 rpm으로 7일간 진탕 배양하였다.
실시예 3 : 신균주의 항균 스펙트럼 조사
본 발명에 의한 스트렙토마이세스 속 BS062는 지에스에스(GSS) 액체배지에서 7일간 배양 후 원심분리하여 균체와 배양여액으로 나누고, 균체를 80% 아세톤용액으로 추출하여 감압농축한 후, 배양여액과 균체 추출물 각각을 페이퍼 디스크(paper disk)에 50 ㎕씩 점적하고 풍건하였다. 이 페이퍼 디스크를 미리 제작한 병원균 검정용 플레이트에 치상하여 2~3일 배양한 후 생성된 저지환의 크기를 조사하였다[표 1].
[표 1]
스트렙토마이세스 속 BS062 배양액의 항균 스펙트럼
병 원 균 항균 활성a (mm)
Bacillus subtilis 0
Salmonella typhimurium 0
Candida albicans 0
Botrytis cinerea 31
Magnaporthe grisea 38
Fusarium oxysporum 10
Fulvia fulva 32
Aspergillus niger 0
Alternaria porri 0
Alternaria mali 0
Colletotrichum gloeosporiodes 12
Alternaria panax 0
Pythium sp. 0
Cylindrocarpon destructans 10
Rhizoctonia solani 0
Trichoderma sp. 30
aPaper disk method
본 실시예에서 확인할 수 있듯이, 본 발명에 의한 스트렙토마이세스 속 BS062의 배양여액은 잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea), 벼도열병균(Magnaphorthe grisea), 토마토잎곰팡이병균(Fulvia fulva), 푸른곰팡이병균(Trichoderma sp.)에 대하여 강한 항균활성을 가지고 있다.
실시예 4 : 스트렙토마이세스 속 BS062를 이용한 잿빛곰팡이병의 생물학적 방제
가. 오이 잎절편(leaf disk)을 이용한 잿빛곰팡이병 방제 효과 시험
온실조건에서 재배중인 오이 유묘를 이용하여 잿빛곰팡이병에 대한 방제 효과를 시험하였다. 오이는 본엽 1~2엽기의 유묘를 이용하였으며, 특별한 언급이 없는 경우, 실험은 20℃, 12시간:12시간 명/암 조건의 상대습도 90%의 항온기에서 수행하였다.
처리액은 상기 실시예 1과 같이 배양한 다음, 전체 배양액을 원심분리하여 균체와 배양여액으로 나누고 각각 소정의 농도로 희석한 배양여액을 사용하였다.
소정의 농도로 희석된 처리액을 오이 유묘에 분무살포하고 풍건한 후, 직경 3~4 cm 크기의 잎절편을 만들어 병원균 포자현탁액을 점적 접종하여 20 ℃ 항온기에서 배양하면서 병 발생에 의한 괴사면적율 및 발병율을 조사하는 방식으로 방제 효과를 확인하였다.
[수학식 1]
Figure 112009035210903-PAT00001
잿빛곰팡이병균 포자는 0.1몰의 포타슘포스페이트(0.1M KH2PO4)가 첨가된 20% 브이팔(V8) 주스에 1 × 106 spore/㎖ 농도로 현탁한 후 잎절편 4잎당 100 ㎕씩 통상의 방법으로 점적 접종하였다.
가-1: 신균주의 처리시점에 따른 방제 효과
스트렙토마이세스 속 BS062의 처리시기에 따른 잿빛곰팡이병 방제 효과를 조사하기 위하여, 온실에서 생육 중인 오이 유묘의 잎절편에 병원균 접종 24시간 전(전처리) 및 24시간 후(후처리) 및 동시(동시처리)에 본 발명에 의한 스트렙토마이세스 속 BS062 배양여액을 처리하여 병 발생과 방제 효과를 조사하였다.
병원균 접종 6일 후 병 발생정도를 조사한 결과, 전처리, 동시처리 시 100%의 방제 효과를 보였으며 후처리 시에도 95.5% 이상의 높은 방제 효과를 보였다[표 2].
[표 2]
신균주 배양물의 처리시간에 따른 잿빛곰팡이병 방제 효과
Figure 112009035210903-PAT00002
가-2: 배양여액의 희석배수에 따른 방제 효과
스트렙토마이세스 속 BS062 배양여액을 멸균증류수로 20, 40배 희석하여 희석배수에 따른 잿빛곰팡이병 방제 효과를 조사하였다. 병원균은 배양여액을 분무 살포하고 풍건한 후에 점적 접종하였다. 그 결과, 접종 6일 후 40배 희석 시 90.4%의 방제 효과를 보였으며, 20배 희석액 처리 시 잿빛곰팡이병을 완전히 방제하는 것을 볼 수 있었다[표 3].
[표 3]
신균주 배양여액의 희석농도별 잿빛곰팡이병 방제 효과
Figure 112009035210903-PAT00003
나. 딸기에 대한 잿빛곰팡이병 방제 효과 시험
스트렙토마이세스 속 BS062 배양물의 딸기 잿빛곰팡이병 방제 효과를 알아보기 위해 충남 논산에 위치한 논산딸기시험장에서 재배중인 매향 품종에 배양물을 처리하고 이병과율을 조사하였다. 세부적인 시험은 상기 가. 및 다음에 기재된 바와 같이 이루어졌다.
나-1: 균 배양물의 처리시점에 따른 방제 효과
본 발명에 의한 스트렙토마이세스 속 BS062 배양물에 딸기를 15초간 침지 처리하여 풍건한 전, 후 및 동시에 전술한 가.에서와 같은 방식으로 병원균 포자 현탁액을 분무 접종하고 7일 경과 후에 이병과율과 방제 효과를 조사하였다. 그 결과, 전처리, 동시처리, 후처리 시에 모두 높은 방제 효과를 보였다[표 4].
[표 4]
신균주 배양물의 처리시간에 따른 딸기 잿빛곰팡이병 방제 효과
Figure 112009035210903-PAT00004
나-2 : 신균주 배양물의 포장조건에서 방제 효과
스트렙토마이세스 속 BS062 배양물의 포장조건에서 딸기 잿빛곰팡이병 방제 효과를 조사하기 위하여, 충남 논산에 위치한 논산딸기 시험장에서 재배중인 매향 품종에 소정 농도로 희석된 배양물을 7일 간격으로 2회 살포하고, 최종 살포 7일 후 딸기의 이병과수를 조사하였다. 본 실험은 2회 반복 실시하였다.
그 결과, 모든 처리구에서 방제 효과가 나타났으며, 특히 BS062 배양물 2배 희석액 처리 시 90.3%의 높은 방제 효과를 보였다[표 5].
[표 5]
신균주 배양물의 포장조건에서 딸기 잿빛곰팡이병 방제 효과
Figure 112009035210903-PAT00005
다. 신균주 배양물의 인삼 잿빛곰팡이병 방제 효과
잿빛곰팡이병은 저장 중 많이 발생하는데, 특히 인삼에 심하게 발생하여 큰 피해를 주고 있다. 본 실험예에서는 스트렙토마이세스 속 BS062 배양물을 이용한 인삼에서의 잿빛곰팡이병 방제를 시험하였다.
다-1: 묘삼 저장 중 발생하는 잿빛곰팡이병 방제 효과
스트렙토마이세스 속 BS062 배양물에 의한 묘삼의 저장 중 잿빛곰팡이병 방제 효과를 알아보기 위하여, 묘삼을 균 배양여액에 30초간 침지한 후, 풍건하여 비 닐팩에 넣어 냉장보관(4 ~ 7 ℃)하고 냉장보관 30일 후, 묘삼의 건전율과 부패율 및 출아 후 줄기 길이를 조사하였다. 다음 표 6의 결과로부터 볼 수 있는 바와 같이, 스트렙토마이세스 속 BS062는 인삼의 잿빛곰팡이병 방제에 탁월한 효과를 나타내었다[표 6].
[표 6]
신균주 배양물의 인삼잿빛곰팡이병 방제 효과
Figure 112009035210903-PAT00006
다-2: 처리농도별 잿빛곰팡이병 방제 효과
처리농도에 따른 방제 및 지속 효과를 알아보기 위하여, 스트렙토마이세스 속 BS062 배양물 2배 농축액, 원액, 10배 희석액 수준으로 배양여액을 준비하고 묘삼을 각각 30초간 침지한 후 풍건하여 비닐팩에 넣어 냉장보관(4 ~ 7 ℃)하고 냉장보관 30일, 60일 후 묘삼의 건전율과 부패율을 조사하였다. 실험 결과, 무처리구와 증류수를 처리한 경우에는 잿빛곰팡이병이 심하게 발생하였으나(처리 60일 후), 스트렙토마이세스 속 BS062 배양액 처리구의 경우 전반적으로 묘삼의 상태가 건전하고 50% 이상의 방제효과를 나타내었다.
[표 7]
신균주 배양물의 처리농도별 인삼잿빛곰팡이병 방제 효과
Figure 112009035210903-PAT00007
실시예 5 : 신균주의 잿빛곰팡이병원균에 대한 길항력 검정
본 발명에 의한 균주의 잿빛곰팡이병 억제 메카니즘을 알아보기 위하여, 잿빛곰팡이병균 포자현탁액을 도포한 한천 배지에 코르크 천공기(cork borer)로 구멍을 내고 스트렙토마이세스 속 BS062 배양여액 50 ㎕를 처리한 후, 균 배양물에 의한 잿빛곰팡이병균의 포자 발아 및 균사 생장 여부를 현미경 관찰을 통하여 조사하였다. 그 결과, 잿빛곰팡이병균의 포자는 정상적으로 발아하였으나 균사 생장 시 말리고 위축되는 현상(curling)에 의한 비정상적인 균사 형태가 관찰되었다[도 3]. 또한, 정상배지에서의 균사 생육 및 오이 잎에서 병원성을 조사한 결과, 스트렙토마이세스 속 BS062의 배양물에 의하여 잿빛곰팡이병균의 균사 생육 및 병원성이 완전히 소실됨을 알 수 있었다[도 4].
도 1은 스트렙토마이세스 속 BS062의 사진을 나타낸 것이다.
도 2는 스트렙토마이세스 속 BS062의 16s rDNA 염기서열 중 1393 bp를 분석한 것이다
도 3은 스트렙토마이세스 속 BS062의 계통도(phylogenetic tree)를 나타낸 것이다.
도 4는 스트렙토마이세스 속 BS062에 의한 잿빛곰팡이 병원균 균사의 기형 유발을 확인한 것이다.
도 5는 스트렙토마이세스 속 BS062에 의한 잿빛곰팡이 병원균의 생육 저해활성 검정 사진이다.
도 6은 스트렙토마이세스 속 BS062에 의한 인삼의 잿빛곰팡이병 억제 활성 사진이다.
<110> YUN, Bong-Sik <120> A Novel Streptomyces sp. BS062 and a biocontrol agent of plant diseases with this strain <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1393 <212> DNA <213> Streptomyces sp. BS062 <400> 1 aggacgaacg ctggcggcgt gcttaacaca tgcaagtcga acgatgaacc ggtttcggcc 60 ggggattagt ggcgaacggg tgagtaacac gtgggcaatc tgccctgcac tctgggacaa 120 gccctggaaa cggggtctaa taccggatat gaccaccgac cgcatggtct ggtggtggaa 180 agctccggcg gtgcaggatg agcccgcggc ctatcagctt gttggtgggg tgatggccta 240 ccaaggcgac gacgggtagc cggcctgaga gggcgaccgg ccacactggg actgagacac 300 ggcccagact cctacgggag gcagcagtgg ggaatattgc acaatgggcg aaagcctgat 360 gcagcgacgc cgcgtgaggg atgacggcct tcgggttgta aacctctttc agcagggaag 420 aagcgaaagt gacggtacct gcagaagaag cgccggctaa ctacgtgcca gcagccgcgg 480 taatacgtag ggcgcgagcg ttgtccggaa ttattgggcg taaagagctc gtaggcggct 540 tgtcacgtcg gatgtgaaag cccggggctt aaccccgggt ctgcattcga tacgggcagg 600 ctagagttcg gtaggggaga tcggaattcc tggtgtagcg gtgaaatgcg cagatatcag 660 gaggaacacc ggtggcgaag gcggatctct gggccgatac tgacgctgag gagcgaaagc 720 gtggggagcg aacaggatta gataccctgg tagtccacgc cgtaaacgtt gggaactagg 780 tgtgggcgac attccacgtt gtccgtgccg cagctaacgc attaagttcc ccgcctgggg 840 agtacggccg caaggctaaa actcaaagga attgacgggg gcccgcacaa gcggcggagc 900 atgtggctta attcgacgca acgcgaagaa ccttaccaag gcttgacata caccggaaac 960 atccagagat gggtgccccc ttgtggtcgg tgtacaggtg gtgcatggct gtcgtcagct 1020 cgtgtcgtga gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccttgtcc tgtgttgcca 1080 gcatgccctt cggggtgatg gggactcact ggagactgcc ggggtcaact cggaggaagg 1140 tggggacgac gtcaagtcat catgcccctt atgtcttggg ctgcacacgt gctacaatgg 1200 ccggtacaat gagctgcgaa gccgcgaggt ggagcgaatc tcaaaaagcc ggtctcagtt 1260 cggattgggg tctgcaactc gaccccatga agtcggagtc gctagtaatc gcagatcagc 1320 attgctgcgg tgaatacgtt cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacgt cacgaaagtc 1380 ggtaacaccc gaa 1393

Claims (4)

  1. 병원균의 균사 기형 유발에 의한 식물병 항균 효과를 갖는 스트렙토마이세스 속 BS062(Streptomyces sp. BS062)[KCTC10978BP].
  2. 스트렙토마이세스 속 BS062[KCTC10978BP]의 배양물 또는 배양여액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 식물병 방제제.
  3. 제 2 항에 있어서, 상기 식물병은 잿빛곰팡이병, 탄저병, 토마토잎곰팡이병 또는 푸른곰팡이병인 것을 특징으로 하는 식물병 방제제.
  4. 제 2 항에 있어서, 상기 식물병은 벼도열병인 것을 특징으로 하는 식물병 방제제.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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