KR20100089615A - 바이오 디스크 및 시료 측정 방법 - Google Patents

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박찬호
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엘지전자 주식회사
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Abstract

본 발명은 바이오 디스크 및 시료 측정 방법에 관한 것으로서, 특히, 디스크 및 측정기기의 편차를 해소할 수 있는 바이오 디스크 및 시료 측정 방법에 관한 것이다. 이러한 본 발명은, 바이오 디스크에 있어서, 시료가 주입되는 진단 챔버를 포함하는 적어도 하나 이상의 진단 채널을 포함하는, 데이터의 쓰기와 읽기가 방지된 진단 영역; 상기 진단 영역의 일측에 위치하며, 시약에 의한 상기 시료의 반응여부를 비교할 수 있는 표준 용액을 포함하는 표준 영역; 상기 진단 영역 및 표준 영역을 제외한 영역에 진단에 필요한 데이터의 쓰기 또는 읽기가 가능하도록 구성된 기록 영역을 포함하여 구성되는 것을 특징으로 한다.
표준 용액, 표준 영역, 디스크, 진단, 시료.

Description

바이오 디스크 및 시료 측정 방법 {Bio disc and method for measuring sample using the same}
본 발명은 바이오 디스크 및 시료 측정 방법에 관한 것으로서, 특히, 디스크 및 측정기기의 편차를 해소할 수 있는 바이오 디스크 및 시료 측정 방법에 관한 것이다.
바이오칩의 하나인 랩온어칩(Lab on a chip)은 유리, 실리콘, 또는 플라스틱으로 된 수 cm2 크기의 칩(chip) 위에 MEMS(Micro Electro Mechanical Systems) 또는 NEMS(Nano Electro Mechanical Systems) 기술을 이용하여 시료의 희석, 혼합, 반응, 분리, 정량 등 시료의 모든 전처리 및 분석을 연속적으로 수행할 수 있다.
최근, 이러한 랩온어칩 기술을 CD 모양의 디스크에서 구현한 랩온어디스크(Lab on a disc; 바이오 디스크)는 많은 시료를 빠른 시간 안에 분석할 수 있다.
또한, 랩온어칩에서는 유체의 흐름을 조절하기 위해 펌프에 의한 기계적 힘(mechanical force)과 모세관 힘(capillary force)을 이용하지만 시간에 따른 (time domain) 유체 흐름을 정확하게 조절하기 어려운데 반하여 랩온어디스크에서 는 원심력(centrifugal force), 코리올리력(coriolos force), 모세관 힘 (capillary force)을 이용하기 때문에 g-force에 따른 시료 전처리 과정이 쉽고, 유체의 흐름을 조절하는 밸브(valve) 기술, 유체 양을 조절하는 미터링 (metering) 기술, 유체 흐름과 반응을 조절하는 혼합기(mixing) 기술을 구현하기가 용이하다.
본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는, 디스크별 및 광 드라이브 진단기기 세트별 편차에 대한 보정이 가능하여 보다 정확한 측정값을 얻을 수 있는 바이오 디스크 및 시료 측정 방법을 제공하고자 한다.
상기 기술적 과제를 이루기 위한 제1관점으로서, 본 발명은, 바이오 디스크에 있어서, 시료가 주입되는 진단 챔버를 포함하는 적어도 하나 이상의 진단 채널을 포함하는, 데이터의 쓰기와 읽기가 방지된 진단 영역; 상기 진단 영역의 일측에 위치하며, 시약에 의한 상기 시료의 반응여부를 비교할 수 있는 표준 용액을 포함하는 표준 영역; 상기 진단 영역 및 표준 영역을 제외한 영역에 진단에 필요한 데이터의 쓰기 또는 읽기가 가능하도록 구성된 기록 영역을 포함하여 구성되는 것을 특징으로 한다.
상기 기술적 과제를 이루기 위한 제2관점으로서, 본 발명은, 바이오 디스크에 있어서, 시료가 주입되는 진단 챔버를 포함하는 적어도 하나 이상의 진단 채널을 포함하는, 데이터의 쓰기와 읽기가 방지된 진단 영역; 상기 진단 영역의 일측에 위치하며, 시약에 의한 상기 시료의 반응여부를 비교할 수 있는 제1흡수율을 가지는 제1표준 용액을 포함하는 제1표준 영역 및 제2흡수율을 가지는 제2표준 용액을 포함하는 제2표준 영역을 포함하는 표준 영역; 상기 진단 영역 및 표준 영역을 제외한 영역에 진단에 필요한 데이터의 쓰기 또는 읽기가 가능하도록 구성된 기록 영 역을 포함하여 구성되는 것을 특징으로 한다.
상기 기술적 과제를 이루기 위한 제3관점으로서, 본 발명은, 바이오 디스크를 이용하여 시료를 측정하는 방법에 있어서, 제1표준 용액의 흡광량을 측정하는 단계와; 제2표준 용액의 흡광량을 측정하는 단계와; 상기 제1표준 용액의 흡광량과 제2표준 용액의 흡광량을 상기 시약의 알려진 흡광량과 비교하여 기울기값을 계산함으로써 참고 검량선을 구하는 단계와; 상기 진단 영역에 위치하는 반응 시약의 흡광량을 측정하여 상기 참고 검량선에 따라 반응도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명은 다음과 같은 효과가 있는 것이다.
첫째, 본 발명은 표준(calibration) 영역을 둔 디스크를 제안함으로써 바이오 디스크를 이용한 건강 진단 시스템을 이용함에 있어서, 디스크별 및 광 드라이브 진단기기 세트별 편차를 보정하는 효과가 있다.
둘째, 이러한 방법을 이용하여 디스크 제작 시에 디스크 편차를 알아보는데 사용할 수 있다.
셋째, 시간이 흐름에 따라 특성이 변하는 시약을 대체할 수 있는 특정 시간에서 흡광도가 비슷한 표준 용액을 사용하므로 테스트를 용이하고 편리하게 하는 효과가 있다.
넷째, 이러한 표준 용액과 이 표준 용액을 포함하는 표준 영역을 포함하는 디스크를 이용하여 참고 검량선을 구함으로써 모든 농도에서의 흡광량을 몰라도 디 스크별 및 광 드라이브 진단기기 세트별 편차에 대한 보정이 가능할 뿐만 아니라 실험도 빠르고 간단하게 할 수 있다.
다섯째, 이러한 테스트 방법 및 표준화 구조는 의료 진단 뿐만 아니라 일반적으로 사용되는 화학 분석(분광광도법이 적용되는 수질 검사, 식품 검사, 화학 물질 검사)에 적용하여 효과를 볼 수 있다.
이하, 첨부된 도면을 참고하여 본 발명에 의한 실시예를 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명이 여러 가지 수정 및 변형을 허용하면서도, 그 특정 실시예들이 도면들로 예시되어 나타내어지며, 이하에서 상세히 설명될 것이다. 그러나 본 발명을 개시된 특별한 형태로 한정하려는 의도는 아니며, 오히려 본 발명은 청구항들에 의해 정의된 본 발명의 사상과 합치되는 모든 수정, 균등 및 대용을 포함한다.
층, 영역 또는 기판과 같은 요소가 다른 구성요소 "상(on)"에 존재하는 것으로 언급될 때, 이것은 직접적으로 다른 요소 상에 존재하거나 또는 그 사이에 중간 요소가 존재할 수도 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 표면과 같은 구성 요소의 일부가 '내부(inner)'라고 표현된다면 이것은 그 요소의 다른 부분들 보다도 소자의 외측으로부터 더 멀리 있다는 것을 의미한다고 이해할 수 있을 것이다.
제1, 제2 등의 용어가 여러 가지 요소들, 성분들, 영역들, 층들 및/또는 지역들을 설명하기 위해 사용될 수 있지만, 이러한 요소들, 성분들, 영역들, 층들 및/또는 지역들은 이러한 용어에 의해 한정되어서는 안 된다는 것을 이해할 것이다.
통상의 광 드라이브는 405, 650, 및 780 nm 대역의 파장을 가지고 있어 이 파장으로 시약의 빛의 흡수율을 측정하면 화학물질이나 의료 진단이 가능하다. 빛의 파장의 특성상 405 nm로는 적색 계통의 시약, 650 nm로는 파랑색이나 녹색 계열 시약의 빛의 흡수율을 측정할 수 있어서 염료전구체(chromogen) 또는 형광체(fluorophor)를 이용하면 광 드라이브 시스템에서 생화학검사 및 면역검사를 수행할 수 있다.
이러한 광 드라이브 진단기기에서의 사용 가능한 디스크 구조는 도 1과 같이, 디스크(10) 상에 다수의 진단 채널(20)을 포함하여 구성된다.
도 2에 도시된 바와 같이, 진단 채널(20)은 샘플(시료)이 주입되는 주입 챔버(21)와, 반응 시약이 포함되는 시약 챔버(22)와, 이들 샘플 및 시약의 흐름을 제어하는 밸브(23)를 포함할 수 있다.
이들 샘플 및 시약은 미터링 챔버(24)에서 미터링되어 반응 챔버(25)에서 서로 혼합되어 반응이 일어나게 된다.
이러한 디스크(10) 및 이 디스크(10)를 이용하는 광 드라이브 진단기기의 일례는 도 3에서 도시하는 바와 같다.
이중에서 바이오 디스크(10)는 진단 채널(20)이 형성된 진단채널층(11) 상에 반사층(12) 및 커버층(13)이 구성되고, 광 드라이브 진단기기의 픽업(30)이 반사층(12)을 이용하여 광 흡수율을 측정함으로써 진단이 이루어질 수 있다.
한편, 시약에 의한 반응의 하나로서, 일반적으로 효소반응을 이용한 생화학 검사의 과정은 다음과 같다.
Substrate ㅡㅡ Enzyme ㅡㅡ> Modified substrate + by-product
Chromogen + by-product ㅡㅡ Enzyme ㅡㅡ> color change
CD(780 nm)에서 사용할 수 있는 염료전구체는 TOOS (N-ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3-methylaniline) + NCP (N-methyl-N-(4-aminophenyl)-3-methoxyaniline)가 있다. DVD(650 nm)에서 사용할 수 있는 염료전구체는 TMB (3,3',5,5'-tetramethylbenzidine), ABTS (2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid)가 있다. 또한, BD(405 nm)에서 사용할 수 있는 염료전구체는 pNPP (p-Nitrophenyl phosphate), ABTS (2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid)가 있다.
항원-항체 반응을 이용한 면역검사는 항원에 연결된 형광체의 방출 파장 (emission wavelength)의 세기를 정량화해서 시료의 농도를 알 수 있다. CD (780 nm)에서 사용할 수 있는 형광체는 IRDYE800, DVD (650 nm)에서 사용할 수 있는 형광체는 Alexa Fluor 647, Allophycocyanin (APC), Cyanine 5, BD (405 nm)에서 사용할 수 있는 형광체는 Alexa Fluor 405, Cascade Blue가 있다.
보통 앞에서 언급한 방법과 같이 특정 파장대에서 반응하는 물질에 대해 빛의 흡수율을 얻어 이를 이용하여 진단을 하는 경우, 디스크(10)의 반사층(12) 두께의 편차와 광 드라이브 진단기기 자체가 갖는 기기적 특성에 대한 편차로 인해 모든 실험에서 같은 빛의 흡수율을 얻는 것는 불가능하다.
따라서 실험을 수행하기 전에 각 디스크(10)와 각 광 드라이브 진단기기에 대한 표준화(calibration)가 필요하게 되며, 이러한 표준화 과정은 도 4에서 도시하는 바와 같이, 시약의 시료에 의한 반응에 따른 특성을 가지는 표준 용액을 포함하는 표준 영역(40)을 가지는 디스크(10)에 의하여 이루어질 수 있다.
한편, 표준 영역(40)을 가지는 디스크(10)를 이용하여 어떠한 시약에 대한 진단을 실시하였을 경우, 해당 시약에 대한 참조값을 시약의 모든 농도에 대한 미리 알아두어야 하는 상황이 발생할 수 있다.
이와 같은 상황은 시약의 낭비 뿐만 아니라 실험하는데 많은 시간이 소요가 되어 개발 일정에 차질을 줄 수 있다. 이러한 상황은 특정시간에서 시약의 흡광도와 유사한 표준 용액을 사용하여 흡광도 조건에 따라 여러 단계로 기울기 값을 구분하여 저장해 둔 테이블을 이용하여 참고 검량선을 구함으로써 해결될 수 있다.
바이오 디스크로 이용되는 광 디스크(10)는 보통 반사층(12) 재료의 양과 반사층(12)의 두께에 따라 반사율이 달라지기 때문에 디스크(10) 별로 반사되는 빛의 편차가 존재할 수 있으며, 광 드라이브 진단기기의 경우도 마찬가지로 세트별로 레이저 광의 세기가 다를 수 있으므로 이러한 광에 반사되는 빛의 양이 달라질 수 있다.
이러한 이유로 시약의 농도에 따른 특성 그래프가 1차식인 경우 도 5에서와 같이 Disc A와 Disc B에 대한 특성이 실제 원하는 특성 그래프와 다르게 오프셋(offset)이 발생하게 되며 더 심한 경우에는 기울기도 달라질 수 있다.
또한 시약의 농도에 따른 특성 그래프가 2차식인 경우에도 도 6에서와 같이 Disc A와 Disc B에 대한 특성이 실제 원하는 특성 그래프와 다르게 오프셋(offset) 이 발생할 수 있으며 더 심한 경우에는 기울기도 달라지게 된다. 따라서 좀더 정확한 측정을 위해서는 디스크 내에서 표준화(Calibration) 하는 과정이 필요할 수 있다.
상술한 바 있는 도 4는 디스크(10) 내에 표준화(Calibration)가 가능한 표준 영역(40)을 포함하는 디스크(10)의 구조에 대해서 도시하고 있다. 디스크(10)를 표준화(Calibration) 할 수 있는 표준 영역(40)은 도 4에서와 같이 여러 곳이 될 수 있으며 감지(detection) 가능한 정도의 크기 이상이면 사각형과 원형을 포한한 어떤 모양의 다각형도 될 수 있다(크기도 일정 크기 이상이면 상관없음.).
표준 영역(40)의 위치 선택은 감지(detection) 영역을 감지하는 알고리즘과 연계되어 결정되는 것이 유리하다. 어떤 방식으로 감지하느냐에 따라 표준 영역(40)의 위치가 결정될 수 있다.
도 7은 시간에 따라 활성도가 변하는(빛의 흡수율이 변화하는) 시약에 대한 빛의 흡수율 그래프를 나타낸 것이다. 이러한 시약에 대해서 일반적으로 감지 시간(detection time)을 정하고, 이 시간에 빛의 흡수율을 측정하여 샘플 내에 목표 물질의 농도가 얼마나 있는지 측정할 수 있다. 그러나 이와 같이 시간에 따라 흡수율이 변화하는 시약은 감지 시간이 지나면 광 드라이브의 테스트시 사용하는데 어려울 수 있다.
도 8은 이러한 특성을 가지는 시약과 비슷한 빛의 특성을 가지는 표준 시약을 만드는 예를 설명한 것이다. 도 8과 같이 시약의 특정 감지시간(detection time)에 대한 파장에 대한 빛의 흡수율 그래프를 그리고 이를 이용하여 측정 파장 대에 대한 샘플 농도별 빛의 흡수율을 표 1과 같이 구한다.
Figure 112009006989061-PAT00001
표 1에서 Abs는 흡수율값, SD는 표준편차, 그리고 %CV는 신뢰도 값을 나타낸다.
또한, 이 값과 동일한 특성을 가지는 표준 샘플을 아래의 표 2와 같이 구하여 표 1에서 구한 값과 비슷한 빛의 흡수율을 가지는 용액(dilution)의 표준 샘플을 취할 수 있다.
Figure 112009006989061-PAT00002
이와 같은 표준 용액 제작 과정을 정리하면, 먼저, 분광 광도계를 이용하여 특정 시간에서 시약의 파장 대 빛 흡수율 그래프를 측정하고, 이후, 사용 파장대에서의 빛의 흡수율 측정한다.
이에 따라, 특정 빛의 흡수율을 가지는 잉크나 소립 입자를 이용한 표준 용액 제작하고, 시약의 빛 흡수율과 비슷한 값을 가지는 표준용액의 농도를 취득하여 표준 샘플로 이용할 수 있는 것이다.
다음에는 이러한 표준 영역을 이용하여 참고 검량선을 구하는 방법을 설명한다.
광 드라이브 진단기기에서 흡광도를 얻는 방법은, 디스크의 반사층에서의 반사율과 측정을 수행하려는 표준(calibration) 영역의 반응층에서 픽업을 스윕(sweep)하여 그때의 반사율을 얻어 흡광도를 계산할 수 있다. 즉, 반응층의 흡광도는 아래와 같은 수식을 만족한다.
반응층의 흡광도 = (반사층의 반사율 - 반응층의 반사율) / 반사층의 반사율
이와 같은 방법으로 표준 영역에 있는 낮은 농도의 표준 용액이 들어있는 제1표준 영역에서 픽업을 스윕(sweep)하여 농도가 낮은 표준 용액의 흡광량(ABS_L)을 구한다. 이를 높은 농도의 표준 용액이 들어있는 제2표준 영역에서도 반복하여 농도가 높은 표준 용액의 흡광량(ABS_H)을 구한다.
표 3은 농도에 따른 흡광도가 2차의 형태를 갖는 시약을 검사할 때 사용하기 위한 테이블을 구한것이다. 앞에서 구한 낮은 농도의 표준 용액의 흡광량과 높은 농도의 표준 용액의 흡광량을 각각 검사 시약의 낮은 농도의 참고 흡광량(REF_L)과 높은 농도의 흡광량(REF_H)과 비교하여, 그 조건에 맞는 기울기 값을 얻는다.
Figure 112009006989061-PAT00003
이와 같이, 조건에 부합되는 기울기 값을 얻은 후, 기울기 값과 낮은 농도의 표준 용액의 흡광량과 높은 농도의 표준 용액의 흡광량을 이용하여 온전한 2차식을 얻을 수 있다.
농도에 따른 흡광도가 1차의 형태를 갖는 시약을 검사할 때는 별다른 테이블 없이 낮은 농도의 표준 용액의 흡광량과 높은 농도의 표준 용액의 흡광량만으로도 기울기와 오프셋(offset)을 알아낼 수 있으므로 완전한 1차 함수를 얻을 수 있다.
도 9 및 도 10은 이와 같은 방법으로 구해진 참고 검량선과 실제 측정된 각 농도의 흡광량을 비교한 그래프이다. 도 9는 농도에 따른 흡광도가 1차식의 형태를 갖는 것으로, 직선이 실제 측정된 흡광량이고 점선이 참고 검량선을 통해 얻은 흡광량이다. 두 선을 비교함으로써 실제 측정된 흡광량과 참고 검량선을 통해 얻은 흡광량이 거의 일치함을 확인할 수 있다.
도 10은 농도에 따른 흡광도가 2차식의 형태를 갖는 것으로, 직선이 실제 측정된 흡광량이고 점선이 참고 검량선을 통해 얻은 흡광량이다. 이 또한 두 선이 거의 일치하고 있음을 알 수 있다.
본 발명에서 제안되는 표준 용액은 디스크 제작에 있어서 디스크간 편차를 확인할 때도 사용될 수 있다. 디스크에 반사층을 올릴 때 반사층의 두께가 균일하게 올라가지 않는 경우가 있다. 이를 알아보기 위해 여러 지점의 반응층에 같은 level의 용액을 주입하고 디스크의 반사층과 반응층에서 각각 신호를 얻어 그 비율을 이용하여 반사층의 균일성을 확인할 수 있다.
본 발명은 현재 사용되는 CD, DVD, BD 광 드라이브를 별도의 플랫폼 변화 없이 바로 생화학검사와 면역검사를 위한 실험에 사용할 수 있다. 또한 혈액 분석뿐만 아니라 수질 분석, 식품 분석, 화학물질 분석과 같이 광스펙트럼에 반응하는 모든 실험에 응용할 수 있다.
상기 실시예는 본 발명의 기술적 사상을 구체적으로 설명하기 위한 일례로서, 본 발명은 상기 실시예에 한정되지 않으며, 다양한 형태의 변형이 가능하고, 이러한 기술적 사상의 여러 실시 형태는 모두 본 발명의 보호범위에 속함은 당연하다.
도 1은 바이오 디스크의 일례를 나타내는 개략도이다.
도 2는 진단 채널의 일례를 나타내는 개략도이다.
도 3은 디스크를 이용하는 진단 시스템의 일례를 나타내는 개략도이다.
도 4는 표준 영역을 가지는 바이오 디스크의 일례를 나타내는 개략도이다.
도 5는 표준 용액의 농도에 따른 흡광도가 1차식인 경우를 나타내는 그래프이다.
도 6은 표준 용액의 농도에 따른 흡광도가 2차식인 경우를 나타내는 그래프이다.
도 7은 시약이 시간에 따라 빛의 흡수율이 달라지는 현상을 표시하는 그래프이다.
도 8은 특정 시약의 파장 대 빛 흡수율의 그래프이다.
도 9는 농도에 빠른 흡광도가 1차식인 경우 참고 검량선과 실제 측정값을 나타내는 그래프이다.
도 10은 농도에 빠른 흡광도가 2차식인 경우 참고 검량선과 실제 측정값을 나타내는 그래프이다.

Claims (8)

  1. 바이오 디스크에 있어서,
    시료가 주입되는 진단 챔버를 포함하는 적어도 하나 이상의 진단 채널을 포함하는, 데이터의 쓰기와 읽기가 방지된 진단 영역;
    상기 진단 영역의 일측에 위치하며, 시약에 의한 상기 시료의 반응여부를 비교할 수 있는 표준 용액을 포함하는 표준 영역;
    상기 진단 영역 및 표준 영역을 제외한 영역에 진단에 필요한 데이터의 쓰기 또는 읽기가 가능하도록 구성된 기록 영역을 포함하여 구성되는 것을 특징으로 하는 바이오 디스크.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 표준 영역에는, 상기 시약에 의한 시료의 반응상태에 따른 적어도 하나 이상의 농도를 가지는 표준 용액이 위치하는 것을 특징으로 하는 바이오 디스크.
  3. 제 2항에 있어서, 상기 표준 용액은, 상기 시약이 시료와의 반응 시간에 따라 특성이 변화하는 경우, 상기 농도는 시약의 측정시간 내에서의 농도로 맞추어지는 것을 특징으로 하는 바이오 디스크.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 표준 영역에는,
    상기 시약에 의한 시료의 제1반응상태를 나타내는 제1표준 영역과;
    상기 시약에 의한 시료의 제2반응상태를 나타내는 제2표준 영역이 포함되는 것을 특징으로 하는 바이오 디스크.
  5. 제 4항에 있어서, 상기 제1표준 영역에는 높은 농도의 표준 용액이 포함되고, 제2표준 영역에는 낮은 농도의 표준 용액이 포함된 것을 특징으로 하는 바이오 디스크.
  6. 제 1항에 있어서, 상기 표준 영역은, 상기 디스크의 내주 또는 외주를 따라 위치하거나, 상기 진단 채널의 일측에 위치하는 것을 특징으로 하는 바이오 디스크.
  7. 바이오 디스크에 있어서,
    시료가 주입되는 진단 챔버를 포함하는 적어도 하나 이상의 진단 채널을 포함하는, 데이터의 쓰기와 읽기가 방지된 진단 영역;
    상기 진단 영역의 일측에 위치하며, 시약에 의한 상기 시료의 반응여부를 비교할 수 있는 제1흡수율을 가지는 제1표준 용액을 포함하는 제1표준 영역 및 제2흡수율을 가지는 제2표준 용액을 포함하는 제2표준 영역을 포함하는 표준 영역;
    상기 진단 영역 및 표준 영역을 제외한 영역에 진단에 필요한 데이터의 쓰기 또는 읽기가 가능하도록 구성된 기록 영역을 포함하여 구성되는 것을 특징으로 하 는 바이오 디스크.
  8. 제 7항의 바이오 디스크를 이용하여 시료를 측정하는 방법에 있어서,
    제1표준 용액의 흡광량을 측정하는 단계와;
    제2표준 용액의 흡광량을 측정하는 단계와;
    상기 제1표준 용액의 흡광량과 제2표준 용액의 흡광량을 상기 시약의 알려진 흡광량과 비교하여 기울기값을 계산함으로써 참고 검량선을 구하는 단계와;
    상기 진단 영역에 위치하는 반응 시약의 흡광량을 측정하여 상기 참고 검량선에 따라 반응도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 바이오 디스크의 시료 측정 방법.
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