KR20100066799A - 대나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 살충제 조성물 - Google Patents

대나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 살충제 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 대나무(Phyllostachys nigra) 추출물을 유효성분으로 함유하는 살충제 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게 대나무 추출물의 잎, 뿌리, 줄기 및 죽순을 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출한 추출물은 살충효과를 가지는 로테논(Rotenone) 등의 플라보노이드를 다량 함유하고 있고, 살충 및 방충 효과를 가지는 푸르프랄(furfural) 및 프탈산(phthalic acid)을 일부 함유하고 있으며, 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 및 담배거세미나방 등의 다양한 해충에 대한 살충효과가 있으므로 살충제 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
대나무, 추출물, 왕대, 솜대, 맹종죽, 산대, 살충, 해충 방제

Description

대나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 살충제 조성물{Insecticide composition containing Bamboo extracts as an active ingredient}
본 발명은 대나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 살충제 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게 대나무 추출물의 잎, 뿌리, 줄기 및 죽순을 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출한 추출물을 유효성분으로 함유하는 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 또는 담배거세미나방용 살충제 조성물에 관한 것이다.
오래전부터 화학 농약의 지나친 사용으로 토양 미생물 및 천적 감소 등 생태계 교란, 수질오염 및 토양과 농산물의 농약잔류 등의 환경문제가 크게 대두되어 커다란 사회적 이슈로 부각되어 있는 상태이며, 이에 따라 친환경 농업을 실현하기 위한 저독성, 무독성 또는 무공해성의 천연 농약 또는 생물 농약의 필요성이 절실히 요구되고 있는 실정이다.
과거 수십년간 사용되어 오던 화학 농약들은 해충들에 내성이 생겨 시간이 지날수록 더 많은 양의 농약을 사용하거나 보다 치명적인 맹독성의 농약을 사용하여야만 방제효과를 얻을 수 있게 되어 환경문제를 더욱 심각하게 만들고 있을 뿐만 아니라, 농작물을 직접 섭취하는 인체에도 치명적인 위해 요인으로 작용하는 심각한 사회문제를 야기하고 있다. 이에 따라 화학 농약을 대체하기 위한 천연 농약 및 천적 미생물 등 생물농약의 연구가 활발하게 진행되고 있으나, 대부분의 천연 농약 및 천적 미생물들이 방제효과가 미약하거나 효과가 극히 제한적이며, 가격 또한 고가인 관계로 실효성 및 경제성이 없어 농민들로부터 호응을 얻지 못함으로써 친환경 농업을 실현하기 위한 화학 농약의 대체 물질로서 성공하지 못하고 있다.
플라보노이드(flavonoids)는 종류가 매우 많은 페놀성 화합물로, 그 기본 구조는 2개의 방향종 고리가 3개의 탄소로 된 연결고리에 의해 결합되어 모두 15개의 탄소를 포함하는 구조다. B고리는 시킴산경로에서 합성된 페닐알라닌으로부터 합성된 페닐프로판 단위이며, A고리는 말론산 경로에 의해 합성된 3개의 아세트산 단위에서 유래한다. 플라보노이드는 치환기의 구조와 위치에 따라 안토시아닌(anthocyanin), 플라본(flavone), 플라보놀(flavonol), 이소플라본(isoflavone)의 4종류로 나누어진다.
안토시아닌은 꽃과 과일의 붉은색, 분홍색, 자주색, 청색 등을 나타내는 색소로 동물을 유인, 식물이 화분과 종자를 퍼뜨리는 데 도움을 준다. 은 단풍은 잎의 엽록소가 파괴되고 안토시아닌이 합성되는 것에서 기인한다. 조적으로 안토시 아닌은 3번 탄소에 당이 결합한 배당체다. 당이 없는 것은 안토시아니딘(anthocyanidin)이라 하며, B고리에 있는 치환기 종류에 따라 여러 가지가 있는데 처음 분리된 식물 이름에 따라 이름을 붙였다. 안토시아닌의 색깔은 B고리의 수산기와 메톡시기(-OCH3)의 수에 의해서 우선 좌우되며, 철 알루미슘, 마그네숨 같은 금속 이온의 존재, 플라본과 플라보놀과 같은 코피그먼트(copigment)의 존재, 저장 장소인 액포의 pH등에 의해 결정된다. 이와 같이 다양한 색깔로 나타나는 안토시아닌은 카로티노이드계 색소와 함께 새나 곤충 같은 수분 매개체와 선택적으로 작용할 수 있도록 진화한 결과로 보여 진다. 한편, 식물은 색깔뿐만이 아니라 휘발성 화합물의 향기를 이용해서도 수분매개체를 유인한다.
플라본과 플라보놀은 꽃에 들어 있으며 일반적으로 안토시아닌보다 짧은 파장의 빛을 흡수한다. 따라서 이들 색소는 사람은 볼 수 없으나 자외선 영역의 빛을 볼 수 있는 벌 같은 곤충의 눈에는 보인다. 꽃의 꿀샘 주위에 이와 같은 색소가 무늬를 만들어 곤충이 꿀과 화분의 위치를 파악할 수 있도록 한다. 플라본과 플라보놀은 꽃뿐만이 아니라 녹색식물의 잎에도 들어 있는데 자외선을 흡수하고 가시광선은 통과시켜 과다한 자외선으로부터 식물을 보호하는 역할을 한다.
이소플라보노이드는 B고리의 위치가 이동된 구조의 플라보노이드다. 이소플라보노이드는 흔히 콩과식물에 들어 있으며 기능이 여러 가지다. 로테노이드(rotenoid)는 강력한 살충 작용이 있으며, 에스트로겐(estrogen)과 구조가 비슷한 이소플라보노이드는 항에스트로겐 작용이 있어서 가축의 불임을 유도하기도 한 다.
푸르프랄은 아디프산의 원료로서 나일론 합성에 사용되고 용매나 살출제로도 사용된다.
프탈산은 프탈산 자체의 용도는 적지만, 유도체인 프탈산디에틸은 향료의 용제오 사용되며, 프탈산에스테르도 가소제, 향료, 방충제 등에 사용된다.
대나무(영문명: bamboo, 학명: Phyllostachys nigra)는 한국을 비롯하여 중국, 일본 등 동남아시아 여러 나라에 대부분 분포하고 있다. 한국에서의 대표적인 재배 죽종은 왕대(Phyllostachys bambuoides siebold & Zucc .), 솜대(Phyllostachysnigra var . henonis) 및 맹종죽(Phyllostachys pubescens)이며, 왕대가 가장 많은 2,996 ha를 차지하고 있으며, 주로 전남(2,650 ha, 49.4 %)과 경남(2,039 ha, 38%)에 분포되어 있다. 대나무는 일반적으로 생장기간이 매우 짧아서 죽순이 돋아서부터 왕대는 20 ~ 40일, 솜대는 25 ~ 45일, 맹종죽은 30 ~ 50일 만에 다 자란다. 대나무의 이러한 생장특성으로 성죽은 적당히 간벌하여야 다음해에 좋은 죽순을 얻을 수 있고 이에 따라 건실하고 굵은 대나무를 얻을 수 있으며, 그렇지 않을 때에는 대나무 밭이 활력을 잃어버린다. 그러므로 대나무는 매년 벌채하더라도 매년 생장이 가능하며 재생산이 매우 빠른 환경 친화성 소재이다.
대나무는 껍질, 가지, 잎, 순, 내피인 죽여 등이 예로부터 한약재로 이용되어 왔다. 특히, 대나무 잎은 죽엽이라 하여 열 내림, 피멎이, 중풍 또는 고혈압 등에 민간요법으로 사용되어 왔고, 항산화 활성, 살균 작용, 항진균 작용 및 항암 효과가 있는 것으로 알려져 있다(구본흥, 사전식 동의보감, 한국사전연구사, 954-960, 1997; 일월서각, 과학백과사전출판사, 653-654, 1991; 공개특허 2001-0069130; 등록특허 10-390639; 공개특허 2004-79207). 또한, 대나무를 가열하여 추출한 죽력은 동의보감 및 약용식물학(Lin, C. C. S. et al., J Food Sci ., 48, 578-583, 1983) 등에서는 중풍, 경기 또는 가슴이 답답할 때 효과가 좋다고 보고된바 있다. 그러나 대나무 추출물이 해충 방제 효과가 있다는 보고는 없다.
이에 본 발명자들은 대나무 중 대표적인 왕대, 솜대, 맹종죽 및 산대를 부위별로 추출한 추출물의 이화학적 특성 분석 및 병해충 방제효능에 대하여 연구를 진행한 결과, 상기 대나무 추출물들이 살충 및 방충 효과를 가지는 것으로 잘 알려진 로테논(Rotenone), 푸르프랄(furfural) 및 프탈산(phthalic acid)을 포함하고 있으며, 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 및 담배거세미나방에 대한 살충효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다
본 발명의 목적은 대나무(Phyllostachys nigra) 추출물을 유효성분으로 함유하는 살충제 조성물, 및 이를 이용한 살충방법에 관한 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 대나무(Phyllostachys nigra) 추출물을 유효성분으로 함유하는 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 또는 담배거세미나방용 살충제 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 상기 살충제 조성물을 해충에게 투여하는 단계를 포함하는 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 또는 담배거세미나방에 대한 살충 방법을 제공한다.
본 발명의 대나무(Phyllostachys nigra) 추출물은 살충효과를 가지는 로테논(Rotenone) 등의 플라보노이드를 다량 함유하고 있고, 살충 및 방충 효과를 가지는 푸르프랄(furfural) 및 프탈산(phthalic acid)을 일부 함유하고 있으며, 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 및 담배거세미나방 등의 다양한 해충에 대한 살충효과가 있으므로 이들 해충에 대한 살충제 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 대나무(Phyllostachys nigra) 추출물을 유효성분으로 함유하는 살충제 조성물을 제공한다.
상기 살충제 조성물은 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 및 담배거세미나방으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 해충에 대해 살충 효과를 가지는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 대나무 추출물은
1) 건조한 대나무를 물, 알코올 또는 이들의 혼합물에 침지시켜 반복 추출하는 단계;
2) 단계 1)의 추출물을 감압농축하는 단계; 및
3) 단계 2)의 감압농축액을 건조시켜 건조분말을 수득하는 단계로 이루어진 제조 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 1)의 대나무는 왕대(Phyllostachys bambuoides siebold & Zucc .), 솜대(Phyllostachysnigra var . henonis), 맹종죽(Phyllostachys pubescens) 및 신이대(또는 산대, Sasa coreana Nakai)로 이루어진 군으로부터 선택된 것이 바람직하나 이에 한정되지 않으며, 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 모두 사용할 수 있다.
상기 대나무는 이의 줄기, 잎, 뿌리 및 죽순으로 이루어진 군으로부터 선택된 부위를 사용하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 알코올은 C1 내지 C4 저급 알코올을 이용하는 것이 바람직하고, 저급 알코올로는 에탄올 또는 메탄올을 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 에탄올은 20 내지 80%의 에탄올 수용액이 바람직하고 60% 에탄올 수용액(60% EtOH + 40% D.W)인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 유기물질은 100% 알코올에서 용출이 더 잘 되고 배당체는 알코올 수용액에서 용출이 더 잘 되므로 필요에 따라 알코올 또는 알코올 수용액으로 선택하여 사용할 수 있다.
추출시 용매를 건조 및 분쇄된 대나무 분량의 3 ~ 15배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 5 ~ 10배 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출온도는 40 ~ 90℃인 것이 바람직하고, 60 ~ 80℃인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출시간은 2시간 ~ 8시간인 것이 바람직하고, 3시간 ~ 5시간인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출 회수는 1 ~ 5회인 것이 바람직하며, 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 대나무 추출액의 추출방법은 열수추출, 환류추출, 진탕추출 또는 Soxhlet 추출 등이 모두 가능하며 특정 방법에 한정되지 않는다.
본 발명자들은 대나무 추출물들이 살충 효과를 가지는 성분을 포함하고 있는지 알아보기 위해, 크로마토그래피를 이용하여 대나무 추출물들의 다양한 성분을 분석하였다. 그 결과, 대나무 추출물들은 공통적으로 우수한 살충 효과를 가지는 것으로 알려진 로테논(Rotenone) 등의 플라보노이드를 다량 함유하고 있었으며, 저분자량 물질 중에서 살충 효과를 가지는 푸르프랄(furfural) 또는 프탈산(phthalic acid)를 일부 포함하고 있었다(표 1 내지 표 16 참조).
또한, 본 발명자들은 대나무 추출물들이 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 또는 담배거세미나방 등의 해충에 대한 방제 효과를 가지는지 알아보기 위해, 약제 독성 시험방법을 이용하여 각 해충에 대한 살충율을 조사하였다. 그 결과, 대나무 추출물들은 종별, 부위별 및 용매별로 일부 차이가 있었으나, 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 또는 담배거세미나방에 대해 약 25 ~ 90%의 높은 살충 효과를 나타내었다(표 17, 표 19 내지 표 25 참조).
따라서, 본 발명의 대나무 추출물들은 살충제 조성물로 이용할 수 있으며, 특히 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 또는 담배거세미나방에 대한 효과적인 살충제 조성물로 이용할 수 있음을 알 수 있다.
본 발명의 살충제 조성물은 대나무 추출물에 추가적으로 천연아로마 추출물을 함유하는 것이 바람직하고, 상기 천연아로마로는 로즈제라늄, 로즈마리, 마조람, 자스민, 펩퍼민트, 캠퍼, 사스어프라스, 라벤더, 타임, 파인, 유칼립투스 및 바질 추출물인 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명자들은 대나무 추출물에 추가적으로 로즈마리(Rosemary)와 타임(Thyme)의 허브 추출물을 포함한 혼합물의 점박이응애에 대한 방제 효과를 알아보았다. 그 결과, 로즈마리와 타임의 허브 추출물이 대나무 추출물의 0.1 내지 5% 함유시킨 혼합물은 대나무 추출물만을 처리한 경우에 비해 상기 해충에 대한 살충율이 약 5 ~ 30% 증가하였고, 특히 상기 허브 추출물의 농도가 2.5%일 때, 20 ~ 30%로 가장 높게 증가하였다(표 18 참조).
또한, 본 발명자들은 천연아로마 추출물이 세균에 대한 항균 활성 효능이 있는지 알아보았다. 그 결과, 로즈제라늄, 로즈마리, 마조람, 자스민, 펩퍼민트, 캠퍼, 사스어프라스, 라벤더, 타임, 파인, 유칼립투스 및 바질 추출물이 각각 유의성 있는 항균 활성을 나타내었다(표 31 참조).
따라서, 본 발명의 살충제 조성물은 대나무 추출물에 추가적으로 로즈마리 또는 타임 등의 허브 추출물을 포함하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 허브 추출물은 대나무 추출물에 대해 0.1 내지 10% 함유하는 것이 바람직하고, 2.5 내지 5% 함유하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 허브 추출물의 함량이 높을수록 항균력 상승의 효과가 있으나, 2.5%와 5% 허브 추출물의 항균력의 차이가 거의 나지 않으므로 경제적 측면에서 2.5%을 선택하는 것이 바람직하기 때문이다.
또한, 본 발명자들은 대나무 추출물들이 세균 및 곰팡이균에 대한 항균 활성 효능이 있는지 알아보기 위해, 잘록병균(Rhizoctonia solani), 도열병균(Magnaporthe grisea), 시들음병균(Fusarium oxysporum), 탄저병균(Collecotrichum gloeosporiodides) 및 잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea)을 대상으로 항균력을 검증하였다. 그 결과, 대나무 추출물은 잘록병균, 도열병균), 시들음병균, 탄저병균 및 잿빛곰팡이병균에 대해 유의성 있는 높은 항균 활성 효능을 가지고 있음을 알 수 있다(표 26 내지 표 30, 및 도 1 내지 도 5 참조).
따라서, 본 발명의 대나무 추출물들은 해충 방제 효능과 함께 다양한 균에 대한 높은 항균 활성 효능을 가짐으로써 우수한 살충제 조성물의 성분으로 이용될 수 있다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 상기 살충제 조성물을 해충에게 투여하는 단계를 포함하는 살충 방법을 제공한다.
상기 해충은 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 및 담배거세미나방으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 해충에 인 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 살충제 조성물은 에어로졸, 펌프 스프레이, 액제, 현탁제, 분무제, 캡슐제, 도료제 또는 젤제 등의 제형으로 사용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 상기 분무제로는 LPG, n-부탄, 이소부탄, 프로판, 이산화탄소, 프레온, HCFC, HFC, 질소 및 산소를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 상기 에어로졸 제형을 위한 분사제로는 액화천연가스와 디메틸에스테르, 압축공기, 압축질소 중에서 선택된 하나 이상의 성분을 이용할 수 있고, 이때 조성물 대 분사제의 비율은 부피비로 65 : 35 내지 40 : 60을 사용하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 살충제 조성물은 상기 대나무 추출물에 휘발성이 좋은 용제를 함께 사용할 수 있으며, 상기 휘발성이 좋은 용제로는 에탄올 또는 메탄올이 바람직 하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 살충제 조성물은 섭식독제 또는 접촉독제로 모두 사용할 수 있으며, 살충 효과를 증진시키기 위해 접촉독제로 사용하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
해충은 그 표면에 액체성분이 닿을 경우 표면장력을 이용하여 물방울이 흘러내리도록 함으로써 체내에 침투하지 못하도록 하는 자연적인 방어시스템을 지니고 있으므로, 이와 같은 현상을 방지하기 위해, 본 발명의 살충제 조성물에 침투제를 혼합 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명의 살충제 조성물의 살포에 있어서, 물과의 희석배율은 병충해가 극성을 부리거나 통상의 작물 생육기에는 4배 ~ 20배 희석하여 사용하는 것이 바람직하고, 어린묘에 살포시에는 40 ~ 100배 희석하여 사용하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 살포 시기는 병충해가 심할 경우 1주일에 1번 내지 5번 살포하는 것이 바람직하고, 통상시에는 10 내지 15일에 1번 내지 2번 살포하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 대나무 추출물의 살충성분들은 햇빛에 의해 자연 분해되는 특성을 지니고 있으므로 햇빛이 강한 오전이나 낮 시간대에 살포하면 쉽게 분해되어 살충 효능이 떨어지고 지속 시간이 짧아지므로 살포를 오후 늦은 시간대에 하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
이하, 본 발명을 하기 실시예, 실험예 및 제조예에 의하여 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예, 실험예 및 제조예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것이며, 본 발명의 내용이 하기의 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 1> 대나무 추출물의 제조
본 발명자들은 담양군 담양읍 삼다리에서 2007년 8월 ~ 2008년 6월까지 채취한 10 ~ 15㎝인 생 왕대, 솜대, 맹종죽 및 산대를 각각 증류추출장치(Rotavapor R-205, BUCHI, SWITZERLAND)를 이용하여 추출하였다.
<1-1> 왕대
<1-1-1> 왕대 열수 추출물
건조된 왕대의 잎, 줄기, 뿌리 및 죽순(각 500 g)을 각각 분쇄한 후, 8 ℓ의 용기에 넣은 다음, 5 ℓ의 물을 가하여 열수추출(80℃, 4시간)하여 시료액을 얻었다. 상기 시료액을 Whatman GF/C 47 mmØ 여과지로 여과한 다음, 감압농축하여 왕대 열수 추출물(42 g)을 수득하였다.
<1-1-2> 왕대 60% 에탄올 수용액 추출물
상기 실시예<1-1>에서, 물 대신 60% 에탄올 수용액을 가하여 추출(60% EtOH + 40% D.W, 80℃, 4시간)하는 것을 제외하고 동일하게 하여 왕대 60% 에탄올 수용액 추출물(40 g)을 수득하였다.
<1-1-3> 왕대 100% 메탄올 수용액 추출물
상기 실시예<1-1>에서, 물 대신 100% 메탄올 수용액을 가하여 추출(80℃, 4시간)하는 것을 제외하고 동일하게 하여 왕대 메탄올 추출물(38 g)을 수득하였다.
<1-2> 솜대
<1-2-1> 솜대 열수 추출물
건조된 솜대의 잎, 줄기, 뿌리 및 죽순(각 500 g)을 각각 분쇄한 후, 8 ℓ의 용기에 넣은 다음, 5 ℓ의 물을 가하여 열수추출(80℃, 4시간)하여 시료액을 얻었다. 상기 시료액을 Whatman GF/C 47 mmØ 여과지로 여과한 다음, 감압농축하여 솜대 열수 추출물(44 g)을 수득하였다.
<1-2-2> 솜대 60% 에탄올 수용액 추출물
상기 실시예<1-4>에서, 물 대신 60% 에탄올 수용액을 가하여 추출(60% EtOH + 40% D.W, 80℃, 4시간)하는 것을 제외하고 동일하게 하여 솜대 60% 에탄올 수용액 추출물(42 g)을 수득하였다.
<1-2-3> 솜대 100% 메탄올 수용액 추출물
상기 실시예<1-4>에서, 물 대신 100% 메탄올 수용액을 가하여 추출(80℃, 4시간)하는 것을 제외하고 동일하게 하여 솜대 메탄올 추출물(40 g)을 수득하였다.
<1-3> 맹종죽
<1-3-1> 맹종죽 열수 추출물
건조된 맹종죽의 잎, 줄기, 뿌리 및 죽순(각 500 g)을 각각 분쇄한 후, 8 ℓ의 용기에 넣은 다음, 5 ℓ의 물을 가하여 열수추출(80℃, 4시간)하여 시료액을 얻었다. 상기 시료액을 Whatman GF/C 47 mmØ 여과지로 여과한 다음, 감압농축하여 맹종죽 열수 추출물(43 g)을 수득하였다.
<1-3-2> 맹종죽 60% 에탄올 수용액 추출물
상기 실시예<1-7>에서, 물 대신 60% 에탄올 수용액을 가하여 추출(60% EtOH + 40% D.W, 80℃, 4시간)하는 것을 제외하고 동일하게 하여 맹종죽 60% 에탄올 수용액 추출물(41 g)을 수득하였다.
<1-3-3> 맹종죽 100% 메탄올 수용액 추출물
상기 실시예<1-7>에서, 물 대신 100% 메탄올 수용액을 가하여 추출(80℃, 4시간)하는 것을 제외하고 동일하게 하여 맹종죽 메탄올 추출물(40 g)을 수득하였다.
<1-4> 산대
<1-4-1> 산대 열수 추출물
건조된 산대의 잎, 줄기, 뿌리 및 죽순(각 500 g)을 각각 분쇄한 후, 8 ℓ의 용기에 넣은 다음, 5 ℓ의 물을 가하여 열수추출(80℃, 4시간)하여 시료액을 얻었다. 상기 시료액을 Whatman GF/C 47 mmØ 여과지로 여과한 다음, 감압농축하여 산대 열수 추출물(48 g)을 수득하였다.
<1-4-2> 산대 60% 에탄올 수용액 추출물
상기 실시예<1-10>에서, 물 대신 60% 에탄올 수용액을 가하여 추출(60% EtOH + 40% D.W, 80℃, 4시간)하는 것을 제외하고 동일하게 하여 산대 60% 에탄올 수용액 추출물(45 g)을 수득하였다.
<1-4-3> 산대 100% 메탄올 수용액 추출물
상기 실시예<1-10>에서, 물 대신 100% 메탄올 수용액을 가하여 추출(80℃, 4시간)하는 것을 제외하고 동일하게 하여 산대 메탄올 추출물(41 g)을 수득하였다.
< 실시예 2> 대나무 추출물의 성분 분석
<2-1> 무기성분 분석
상기 <실시예 1>에서 추출한 각 추출물을 105℃에서 건조시킨 후, 300℃에서 탄화시킨 다음, 분쇄하고 550℃에서 회백색의 회분이 나올 때까지 회화시켰다. 상기 회분을 방냉 후 HCl(1+2)(HCL과 H2O이 1:2 비율로 섞여 있음) 5 ㎖를 가하여 수 욕 상에서 건조시킨 후, HCl(1+4)(HCL과 H2O이 1:4 비율로 섞여 있음) 10 ㎖를 가하여 가온하면서 용해시킨 다음, 상기 용해물을 Whatman GF/C 47 mm 여과지로 여과하고, 여과된 액을 100 ㎖ 플라스크에 정용하여 무기성분(Ca, Mg, Mn, Fe, Ge, Na, K, Se) 분석용 시료로 사용하였다. P는 380 nm에서 분광광도계(ULTRA-SPEC2000)로 측정하였다. 무기질은 PerkinElmer사의 ELAN-DRC ICP-MS(Inductively Coupled plasma-Mass) 분광계로 정량하였고, 수은(Hg)은 수은분석기(Mercury Analyzen)로 분석하였으며, 황(S), 질소(N) 및 염소(Cl)는 IC(Shimadzu, Ion Chromatography)로 분석하였다. 상기 ICP-MS, 수은분석기 및 IC의 분석 조건은 하기 표 1과 같다.
무기물 분석을 위한 ICP - MS , IC 및 수은분석기 분석 조건
ICP-MS IC 수은분석기
Nebulizer Gas
Flow[NEB]
1.01 L/min 유속 1 ml/min 연소가스 150→620
Auxiliary
Gas Flow
1 L/min 시료 주입량 200 ul 분해관 850
Plasma
Gas Flow
15 L/min 오븐 온도 40 제습 150→620
Lens Voltage 7 MHz 감도
(Gain*Range)
1 us/cm * 4
ICP RF Power 1350 W 컬럼 IC-A1
<2-2> 유리당 및 유기산 함량 분석
유리당 및 유기산은 식품공전의 방법으로 정량하였다. 즉, 상기 <실시예 1>에서 추출한 각 추출물을 10 g씩 증류수 10 ㎖에 녹인 후, 0.45 ㎛ 필터로 여과한 다음, HPLC(JASCO, Japan)를 이용하여 유리당 및 유기산을 분석하였다. 상기 HPLC의 전개용매로는 아세토니트릴/증류수(75:25)를 이용하였으며, 조건은 하기 표 2와 같다. 유리당 분석을 위해 사용된 표준당으로는 글루코오스(glucose), 프룩토오스(fructose), 슈크로그(sucrose), 크실로오스(xylose), 갈락토오스(galactose)를 사용하였다.
유리당 및 유기산 함량 분석을 위한 HPLC 분석 조건
유리당 유기산
검출기 RI UV 210 nm
유속(mL/min) 0.6 0.6
이동상 H2O 4 mM H2SO4
컬럼 온도(℃) 80 35
컬럼 Bio-red HPX-87P 300*7.8 mm
또한, 상기 <실시예 1>에서 추출한 각 추출물을 10 ㎖ 취하여 증류수로 희석시킨 후, 페놀프탈레인(phenolpthalein)을 지시약으로 하여 0.1 N NaOH 용액으로 적정한 다음, 그 소비량을 하기의 식을 이용하여 구연산으로 환산하여 총산의 함량을 구하였다.
Figure 112008085044722-PAT00001
a: 0.1 N NaOH 소비량(mL); f: 0.1 N NaOH factor; 0.1 N NaOH = 0.006 g 구연산
<2-3> 유리아미노산 분석
유리아미노산 분석은 waters AccQ-tag 방법을 사용하여 분석하였다. 즉, 즉, 상기 <실시예 1>에서 추출한 각 추출물을 10 ㎕를 취하여 시험관 밑바닥에 조심스럽게 담고 여기에 AccQ-Fluor reagent kit의 1용액 70 ㎕를 넣어 혼합하였다. 상기 혼합물을 미리 55℃에서 10분간 유도체화시킨 다음, HPLC(Water Co., USA)로 아미노산을 분석하였다. HPLC의 분석조건은 하기 표 3과 같으며, 17종의 아미노산 표준품 및 완충용액은 Waters AccQ-tag chemistry 패키지를 사용하여 분석하였다.
유리아미노산 분석을 위한 HPLC 분석 조건
컬럼 AccQ-tag 컬럼
검출기 Fluence detecter
(Ex 250 nm, Em 395 nm, filter 0.5, Gain 100)
완충용액 Eluent A- Waters AccQ-tag Eluent A
Eluent B- 6% 아세토니트릴
<2-4> 플라보노이드 분석
상기 <실시예 1>에서 추출한 각 추출물을 10 ㎕를 취하여 HPLC를 이용하여 플라보노이드를 분석하였다. 상기 분석에 사용된 컬럼은 Zorbax C18(4.6 ㎝×150 mm, 5 ㎛), 검출기는 PDA(Water Co., 254 nm), 이동상은 A : 5% 포름산/물, B: 메탄올을 사용하였고, 유속은 1.0 mL/min로 하였다. 플라보노이드 표준물질은 로테논(Rotenone), 아피제닌(Apigenin) 및 에피갈로카테친(epigallocatechin)을 사용하였다.
<2-5> 폴리페놀 분석
상기 <실시예 1>에서 추출한 각 추출물을 10 ㎕를 취하여 상기 실시예<2-4>와 동일한 조건의 HPLC를 이용하여 폴리페놀을 분석하였다. 폴리페놀 표준물질은 갈산(gallic acid), 디하이드록실벤조산(dihydroxylbenzoic acid), methyl gallte, 카페인산(caffeic acid), 시링산(syringic acid), 쿠마린산(coumaric acid), 신남산(cinnamic acid), 나린진(naringin), 살리실산(salicylic aicd) 및 플라본(flavone)을 사용하였다.
<2-6> 전자공여능 분석
DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhdrazyl)의 환원성을 이용한 DPPH blios 방법에 따라 전자공여능을 측정하였다. 즉, 상기 <실시예 1>에서 추출한 각 추출물과 대조군으로서 페놀 화합물(phenolic compound)계 합성 산화방지제인 BHA를 농도가 0.1%가 되게 조제한 후, 조제액 1 ㎖와 4×10-4M DPPH 용액 3 ㎖를 시험관에서 5초동안 교반기로 혼합한 다음, 10분간 방치한 후 반응에서 형성된 팩틴질의 제거를 위해 10분 동안 7000 rpm으로 원심분리 하였다. 그런 다음, 517 nm에서 UV 분광광도계로 흡광도를 측정하였으며, 대조군은 에탄올 1 ㎖를 첨가하여 흡광도의 감소비율로 계산하였다. 전자공여능은 하기의 식을 이용하여 산출하였다.
Figure 112008085044722-PAT00002
<2-7> 저분자량 물질 분석( GC - MS )
상기 <실시예 1>에서 추출한 각 추출물을 농축장치(Rotavapor R-205, BUCHI, SWITZERLAND)를 이용하여 20배 농축하고 GC-MS(Shimadzu GC/MC QP2010 plus)로 정성 및 정량분석하였다. 칼럼은 DB-Wax(J&W, 60 m × 0.25 mm i,d. 0.25 um 필름 두께)로 오븐 온도는 40℃에서 3분간 유지시킨 후 150℃까지 분당 2℃씩 승온시켰으며, 이후 220℃까지 분당 2℃씩 승온시킨 후 220℃에서 20분간 유지하였다. 헬륨의 유속은 1 ㎖/min으로 하였고, 가속전압은 70 eV으로 하였으며, 대부분의 화합물의 추정 및 동정에는 매스 라이브러리 데이터(mass library data)를 이용하였다. 상기 GC-MS의 분석 조건은 하기 표 4에서 보는 바와 같다. 정량을 위하여 각 부위 대나무 추출물 100 g에 1 ㎖씩 첨가된 n-부틸벤젠(n-Butylbenzene)의 피크면적(peak area, %)을 이용하여 시료 1 kg에 함유된 휘발성 함황 화합물을 정량하였다. 각 화합물의 상대적인 농도(mg/시료 kg)는 하기의 식을 이용하여 산출되었다.
Figure 112008085044722-PAT00003
SG: n-부틸벤젠의 비중[0.860(20/4)]
A%: 각 시료에서 n-부틸벤젠의 피크 부위(peak area) %
B%: 각 시료에서 각 성분의 피크 부위 %
GC-MS 분석 조건
GC-MS Shimadzu GC/MS OP2010 plus
컬럼 DB-Wax(J&W, 60 m × 0.25 mm i,d. 0.25 um film thickness
운반 기체 헬륨(1.0 mL/min)
온도 프로그램 40℃(3min)-2℃/min-150℃(10min)-2℃/min-220℃(20min)
주입 온도 250℃
이온화 Electron impact ionization (EI)
이온화 전압 70 eV
질량/하전비(m/z) 41~450
주입 부피 1㎕
그 결과, 하기 표 5 ~ 표 16에서 보는 바와 같이 대나무 추출물은 살충효과가 있는 것으로 알려진 플라보노이드 성분을 다량 함유하고 있으며, 저분자량 물질 중 살균효과를 가지는 것으로 알려진 푸르프랄(furfural) 및 프탈산(phthalic acid)도 일부 함유하고 있음을 알 수 있었다.
왕대 60% 에탄올 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 1.17 2.03 1.50 9.08
P 92.89 56.68 50.62 49.21
Na 37.86 20.23 14.05 57.45
Fe 23.57 28.50 12.76 56.09
Se 1.78 1.96 5.65 6.11
Ge 2.55 1.78 1.00 2.86
유기산 (ug/L) 0.08 0.07 0.07 0.01
아미노산 이소류신 % 3.98 8.58 - 26.17 헤모글로빈생성
메티오닌 33.90 62.52 34.97 4.02 항산화제
아스팔탐산 13.90 21.71 14.74 9.18 뇌, 신경 보호
글루타민 14.67 26.71 10.41 10.69 신진대사
알라닌 22.62 30.68 22.95 4.77 단백질 형성
플라보노이드 로테논 (mg/L) 57.33 156.83 31.00 52.17
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 4.47 5.39 - 0.87
쿠마린산 10.66 8.17 4.69 -
나린진 6.48 2.49 1.84 -
전자공여능 라디칼소거능 % 69.44 83.15 67.78 60.19 BHA 91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 7.25 2.96 0.26 3.01 내부표준:
n-부틸벤젠
프로피온산 8.00 3.73 2.28 3.29
메톡시페놀 0.58 0.28 0.18 -
푸르프랄 4.39 2.64 0.62 0.69
하이드로퀴논 16.33 14.47 4.31 5.48
프탈산 0.45 2.02 0.04 0.54
왕대 열수 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 1.15 2.05 1.48 9.05
P 92.84 56.65 50.60 49.20
Na 37.80 20.24 14.05 57.44
Fe 23.55 28.50 12.76 56.08
Se 1.80 1.95 5.65 6.11
Ge 2.55 1.80 1.00 2.86
유기산 (ug/L) 0.08 0.08 0.08 0.02
아미노산 이소류신 % 3.95 8.58 - 26.08 헤모글로
빈생성
메티오닌 33.90 62.50 34.97 4.05 항산화제
아스팔탐산 13.90 21.70 14.74 9.13 뇌, 신경
보호
글루타민 14.65 26.70 10.41 10.69 신진대사
알라닌 22.62 30.68 22.95 4.72 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 58.20 155.84 32.00 52.08
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 4.45 5.37 - 0.79
쿠마린산 10.65 8.16 4.69 -
나린진 6.48 2.49 1.84 -
전자공여능 라디칼소거능 % 69.44 83.15 67.78 60.15 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 7.25 2.96 0.26 2.98 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 8.00 3.73 2.28 3.23
메톡시페놀 0.58 0.28 0.18 -
푸르프랄 4.40 2.65 0.60 0.62
하이드로퀴논 16.33 14.47 4.31 5.45
프탈산 0.44 2.03 0.05 0.54
왕대 100% 메탄올 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 1.18 2.02 1.48 9.08
P 92.85 56.68 50.60 49.22
Na 37.86 20.23 14.05 57.45
Fe 23.55 28.48 12.75 56.12
Se 1.78 1.96 5.65 6.11
Ge 2.55 1.78 1.00 2.86
유기산 (ug/L) 0.08 0.07 0.08 0.02
아미노산 이소류신 % 3.98 8.58 - 26.13 헤모글로
빈생성
메티오닌 33.90 62.52 34.97 4.01 항산화제
아스팔탐산 13.90 21.71 14.74 9.19 뇌, 신경
보호
글루타민 14.67 26.71 10.41 10.70 신진대사
알라닌 22.60 30.58 22.98 4.85 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 57.45 155.80 30.54 50.28
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 4.47 5.39 - 0.90
쿠마린산 10.66 8.17 4.69 -
나린진 6.48 2.49 1.84 -
전자공여능 라디칼소거능 % 69.44 83.15 67.78 60.11 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 7.25 2.96 0.26 3.00 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 8.00 3.73 2.28 3.24
메톡시페놀 0.58 0.28 0.18 -
푸르프랄 4.35 2.60 0.60 0.66
하이드로퀴논 16.32 14.45 4.30 5.44
프탈산 0.43 2.00 0.04 0.57
솜대 60% 에탄올 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 2.24 3.26 11.08 0.02
P 62 47.08 30.13 87.28
Na 28.29 13.35 6.74 60.70
Fe 21.39 27.74 32.25 48.96
Se 5.45 1.53 2.83 2.99
Ge 3.79 2.45 3.32 6.06
유기산 (ug/L) 0.14 0.11 0.07 0.05
아미노산 이소류신 % 10.47 10.06 6.33 20.88 헤모글로
빈생성
메티오닌 21.90 61.75 28.61 5.31 항산화제
아스팔탐산 51.34 11.59 21.64 84.90 뇌, 신경
보호
글루타민 29.13 19.65 18.26 38.21 신진대사
알라닌 28.45 26.68 22.71 7.74 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 73.50 155.33 30.33 48.67
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 7.67 2.87 3.52 2.68
쿠마린산 - 5.42 6.04 1.35
나린진 1.53 9.88 - -
전자공여능 라디칼소거능 % 80.74 81.67 64.07 54.17 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 10.36 6.50 0.15 3.55 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 14.19 8.49 - 0.06
메톡시페놀 2.03 1.95 - 0.03
푸르프랄 1.31 7.93 0.28 0.56
하이드로퀴논 8.57 26.51 0.74 2.75
프탈산 0.94 2.53 0.15 0.56
솜대 열수 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 2.22 3.25 11.10 0.02
P 62 47.08 30.12 87.25
Na 28.30 13.34 6.74 60.70
Fe 21.40 27.74 32.25 48.96
Se 5.45 1.53 2.84 2.99
Ge 3.78 2.45 3.30 6.06
유기산 (ug/L) 0.14 0.11 0.07 0.04
아미노산 이소류신 % 10.47 10.06 6.33 20.85 헤모글로
빈생성
메티오닌 21.90 61.75 28.61 5.36 항산화제
아스팔탐산 51.34 11.59 21.64 84.98 뇌, 신경
보호
글루타민 29.13 19.65 18.26 38.01 신진대사
알라닌 28.45 26.68 22.72 7.73 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 73.48 155.25 30.40 48.55
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 7.65 2.86 3.52 2.68
쿠마린산 - 5.42 6.04 1.35
나린진 1.53 9.88 - -
전자공여능 라디칼소거능 % 80.74 81.67 64.07 54.07 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 10.36 6.50 0.15 3.59 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 14.19 8.49 - 0.06
메톡시페놀 2.04 1.95 - 0.03
푸르프랄 1.32 7.90 0.30 0.66
하이드로퀴논 8.57 26.50 0.74 2.77
프탈산 0.94 2.55 0.18 0.54
솜대 100% 메 탄올 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 2.24 3.25 11.10 0.02
P 60 48.02 30.15 87.28
Na 28.30 13.35 6.74 60.70
Fe 21.38 27.68 32.30 48.96
Se 5.45 1.53 2.83 2.99
Ge 3.79 2.45 3.30 6.06
유기산 (ug/L) 0.15 0.10 0.07 0.04
아미노산 이소류신 % 10.47 10.06 6.33 20.85 헤모글로
빈생성
메티오닌 21.90 61.75 28.61 5.36 항산화제
아스팔탐산 51.34 11.59 21.64 84.98 뇌, 신경
보호
글루타민 29.13 19.65 18.26 38.02 신진대사
알라닌 28.45 26.68 22.71 7.74 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 72.88 154.30 30.42 48.65
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 7.67 2.87 3.52 2.68
쿠마린산 - 5.42 6.04 1.35
나린진 1.53 9.88 - -
전자공여능 라디칼소거능 % 80.74 81.67 64.07 54.07 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 10.36 6.50 0.15 3.58 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 14.20 8.49 - 0.05
메톡시페놀 2.02 1.95 - 0.02
푸르프랄 1.33 7.92 0.26 0.62
하이드로퀴논 8.55 26.45 0.72 2.76
프탈산 0.94 2.55 0.20 0.49
맹종죽 60% 에탄올 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 2.20 3.05 8.12 0.35
P 70.45 48.08 30.13 87.28
Na 25.21 13.35 6.74 60.70
Fe 20.22 27.54 32.25 44.96
Se 3.40 1.53 2.83 2.99
Ge 3.24 2.45 3.12 5.85
유기산 (ug/L) 0.10 0.09 0.08 0.02
아미노산 이소류신 % 4.08 8.06 6.25 20.05 헤모글로
빈생성
메티오닌 24.32 60.56 28.60 5.33 항산화제
아스팔탐산 21.04 20.45 20.64 72.82 뇌, 신경
보호
글루타민 20.12 16.65 15.24 18.55 신진대사
알라닌 22.45 28.24 20.70 5.25 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 70.12 155.34 30.25 48.63
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 6.88 2.85 4.32 2.70
쿠마린산 - 5.42 6.04 1.35
나린진 1.53 9.88 - -
전자공여능 라디칼소거능 % 80.74 81.67 64.07 54.07 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 8.35 3.65 0.20 3.12 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 10.05 4.45 - 0.06
메톡시페놀 2.03 1.95 - 0.05
푸르프랄 3.62 6.85 0.48 0.58
하이드로퀴논 10.53 16.50 0.81 2.63
프탈산 0.95 2.54 0.15 0.46
맹종죽 열수 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 2.17 2.88 8.07 0.33
P 70.44 48.08 30.13 87.28
Na 25.20 13.35 6.74 60.70
Fe 20.22 27.55 32.25 44.96
Se 3.39 1.51 2.84 2.97
Ge 3.24 2.45 3.12 5.83
유기산 (ug/L) 0.09 0.09 0.08 0.02
아미노산 이소류신 % 4.07 8.05 6.25 20.05 헤모글로
빈생성
메티오닌 24.32 60.56 28.60 5.33 항산화제
아스팔탐산 21.04 20.45 20.64 72.82 뇌, 신경
보호
글루타민 20.12 16.65 15.24 18.55 신진대사
알라닌 22.45 28.24 20.70 5.25 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 70.10 154.87 30.23 45.55
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 6.88 2.85 4.32 2.70
쿠마린산 - 5.42 6.04 1.35
나린진 1.52 9.65 - -
전자공여능 라디칼소거능 % 80.74 81.67 64.07 54.07 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 8.35 3.65 0.20 3.01 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 10.05 4.45 - 0.04
메톡시페놀 2.03 1.95 - 0.01
푸르프랄 3.60 6.87 0.45 0.51
하이드로퀴논 10.53 16.50 0.81 2.85
프탈산 0.93 2.55 0.16 0.55
맹종죽 100% 메탄올 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 2.19 3.04 8.12 0.35
P 70.45 48.08 30.13 87.28
Na 25.20 13.35 6.74 60.70
Fe 20.23 27.54 32.25 44.96
Se 3.41 1.53 2.84 2.99
Ge 3.24 2.45 3.12 5.85
유기산 (ug/L) 0.09 0.09 0.08 0.02
아미노산 이소류신 % 4.08 8.06 6.25 20.05 헤모글로
빈생성
메티오닌 24.32 60.56 28.59 5.33 항산화제
아스팔탐산 21.04 20.45 20.64 72.82 뇌, 신경
보호
글루타민 20.12 16.65 15.24 18.55 신진대사
알라닌 22.44 28.24 20.70 5.25 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 70.23 155.08 29.45 45.63
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 6.88 2.85 4.32 2.70
쿠마린산 - 5.42 6.04 1.35
나린진 1.52 9.85 - -
전자공여능 라디칼소거능 % 80.72 81.38 64.15 54.07 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 8.35 3.65 0.20 3.05 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 10.05 4.45 - 0.04
메톡시페놀 2.03 1.95 - 0.02
푸르프랄 3.58 6.69 0.50 0.52
하이드로퀴논 10.51 16.53 0.81 2.85
프탈산 0.93 2.55 0.15 0.57
산대 60% 에탄올 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 4.29 8.51 5.23 0.74
P 42.03 49.46 44.52 50.58 죽력: mg/L
Na 35.50 36.95 30.27 34.48
Fe 96.58 38.29 52.44 81.96
Se 2.38 2.14 2.33 2.35
Ge 2.80 2.56 2.20 2.11
유기산 (ug/L) 0.02 0.02 0.03 0.03
아미노산 이소류신 % 3.41 1.49 3.01 41.17 헤모글로
빈생성
메티오닌 0.59 1.25 0.88 2.81 항산화제
아스팔탐산 19.70 2.20 13.15 82.29 뇌, 신경
보호
글루타민 10.86 10.08 10.12 39.88 신진대사
알라닌 1.95 5.09 2.68 7.27 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 132.0 148.5 138.8 34.5
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 7.58 6.63 7.03 0.96
쿠마린산 18.13 7.56 10.16 1.3
나린진 5.63 5.35 5.12 0
전자공여능 라디칼소거능 % 80.00 84.44 80.24 56.30 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 1.89 1.60 1.78 0.98 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 0.03 3.26 0.16 -
메톡시페놀 0.21 0.85 0.85 0.12
푸르프랄 - - - -
하이드로퀴논 3.54 11.06 8.06 3.50
프탈산 0.05 - 0.05 0.33
산대 열수 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 4.18 8.34 5.25 0.75
P 42.02 49.35 44.50 50.48 죽력:
mg/L
Na 35.45 36.95 30.27 34.48
Fe 96.50 38.29 52.44 81.96
Se 2.35 2.14 2.33 2.35
Ge 2.78 2.55 2.20 2.11
유기산 (ug/L) 0.03 0.02 0.03 0.03
아미노산 이소류신 % 3.43 1.50 3.01 41.17 헤모글로
빈생성
메티오닌 0.55 1.25 0.88 2.81 항산화제
아스팔탐산 19.70 2.20 13.15 82.29 뇌, 신경
보호
글루타민 10.85 10.17 10.12 39.88 신진대사
알라닌 1.95 5.05 2.67 6.65 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 130.5 145.8 140.3 38.2
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 7.58 6.63 7.03 0.96
쿠마린산 18.12 7.56 10.16 1.3
나린진 5.63 5.35 5.12 0
전자공여능 라디칼소거능 % 79.65 84.37 80.15 56.30 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 1.89 1.55 1.78 0.98 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 0.03 3.26 0.16 -
메톡시페놀 0.21 0.85 0.85 0.12
푸르프랄 - - - -
하이드로퀴논 3.54 11.03 8.05 3.50
프탈산 0.05 - 0.04 0.32
산대 100% 메 탄올 추출물의 주요성분
성분군 줄기 뿌리 죽순 비고
무기물 S (mg/L) 4.28 8.52 5.23 0.74
P 42.03 49.26 44.52 50.58 죽력:
mg/L
Na 35.50 36.95 30.30 34.48
Fe 95.44 38.29 52.44 81.96
Se 2.35 2.14 2.33 2.35
Ge 2.80 2.56 2.20 2.11
유기산 (ug/L) 0.02 0.02 0.03 0.03
아미노산 이소류신 % 3.40 1.49 3.01 41.17 헤모글로
빈생성
메티오닌 0.62 1.25 0.88 2.81 항산화제
아스팔탐산 19.70 2.20 13.15 82.29 뇌, 신경
보호
글루타민 10.86 10.08 10.12 39.88 신진대사
알라닌 1.87 5.02 2.65 7.18 단백질 형
플라보노이드 로테논 (mg/L) 131.1 146.5 136.2 34.3
아피제닌
에피갈로카테친
폴리페놀 카페인산 (mg/L) 8.02 6.44 7.03 0.96
쿠마린산 18.13 7.55 10.16 1.3
나린진 5.63 5.35 5.12 0
전자공여능 라디칼소거능 % 80.00 84.44 80.24 56.30 BHA
91.11%
저분자량 물질
(GC-MS)
아세트산 (mg/kg) 1.89 1.60 1.78 0.98 내부표준:
n-부틸벤
프로피온산 0.03 3.26 0.16 -
메톡시페놀 0.21 0.85 0.85 0.12
푸르프랄 - - - -
하이드로퀴논 3.52 11.05 8.17 3.50
프탈산 0.05 - 0.05 0.32
<실시예 3> 대나무 추출물의 해충 방제 효능 분석
<3-1> 점박이응애 방제 효능
본 발명의 대나무 추출물들의 점박이응애(Tetranichus urticae)에 대한 방제효과를 검증하기 위하여, 약제 독성 시험 방법인 엽절편(leaf disk) 법을 사용하였다. 암컷 성충의 살충효과는 강낭콩을 2 × 2 cm로 잘라 물에 적신 탈지면이 깔린 샤레에 놓고, 그 위에 점박이응애 암컷 성충을 30마리씩 접종한 후 30분 정도 정착시킨 다음, 각 대나무 추출물(20배 희석)로 25 cm 거리에서 핸드스프레이(hand spray)로 5초 동안 실포한 후 음건시켰다. 상기 대나무 추출물을 처리한 샤레는 상온에 보관하면서 1일, 3일 및 5일 후에 살충율을 조사하였다. 생사판별은 해부현미경하에서 붓끝으로 충체를 접촉하여 몸길이 정도를 이동하지 못한 개체를 죽은 것으로 간주하였다.
그 결과, 대나무 추출물들은 점박이응애에 대해 시간의존적으로 높은 살충 효과를 나타내었고, 특히 추출부위로는 솜대의 잎이, 추출용매로는 60% 에탄올 추출물이 가장 높은 효과를 나타내었다(표 17).
점박이응애에 대한 살충율
추출물 살충율(%)
1일 3일 5일
왕대 줄기 60% 에탄올 추출물 43.1 50.8 59.2
왕대 잎 60% 에탄올 추출물 40.1 49.9 56.3
왕대 뿌리 60% 에탄올 추출물 37.1 37.8 38.6
왕대 죽순 60% 에탄올 추출물 44.3 50.2 64.7
왕대 줄기 열수 추출물 42.5 50.2 58.5
왕대 잎 열수 추출물 40.0 48.7 55.5
왕대 뿌리 열수 추출물 37.1 35.5 37.2
왕대 죽순 열수 추출물 44.1 49.8 62.3
왕대 줄기 메탄올 추출물 43.0 50.2 59.0
왕대 잎 메탄올 추출물 39.9 49.4 55.7
왕대 뿌리 메탄올 추출물 36.5 37.2 38.5
왕대 죽순 메탄올 추출물 44.2 49.1 62.5
솜대 줄기 60% 에탄올 추출물 26.6 27.3 27.9
솜대 잎 60% 에탄올 추출물 85.1 87.0 88.8
솜대 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.8 48.7 52.1
솜대 죽순 60% 에탄올 추출물 44.9 50.5 51.3
솜대 줄기 열수 추출물 26.5 27.1 27.5
솜대 잎 열수 추출물 84.8 86.2 87.5
솜대 뿌리 열수 추출물 45.5 48.2 50.1
솜대 죽순 열수 추출물 44.4 49.2 50.3
솜대 줄기 메탄올 추출물 25.8 27.0 27.9
솜대 잎 메탄올 추출물 83.3 85.4 88.7
솜대 뿌리 메탄올 추출물 45.8 48.7 52.1
솜대 죽순 메탄올 추출물 44.9 50.5 51.3
맹종죽 줄기 60% 에탄올 추출물 25.5 28.0 28.9
맹종죽 잎 60% 에탄올 추출물 80.1 83.3 87.2
맹종죽 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.4 48.8 52.0
맹종죽 죽순 60% 에탄올 추출물 44.5 50.5 51.3
맹종죽 줄기 열수 추출물 24.5 27.0 28.6
맹종죽 잎 열수 추출물 79.8 80.2 84.5
맹종죽 뿌리 열수 추출물 44.6 47.2 50.2
맹종죽 죽순 열수 추출물 44.1 46.5 50.1
맹종죽 줄기 메탄올 추출물 23.7 25.4 26.2
맹종죽 잎 메탄올 추출물 79.3 80.4 85.7
맹종죽 뿌리 메탄올 추출물 43.8 45.7 49.5
맹종죽 죽순 메탄올 추출물 44.2 48.9 50.3
산대 줄기 60% 에탄올 추출물 43.0 50.2 59.1
산대 잎 60% 에탄올 추출물 40.3 49.5 56.1
산대 뿌리 60% 에탄올 추출물 37.1 38.0 38.6
산대 죽순 60% 에탄올 추출물 42.3 47.5 54.3
산대 줄기 열수 추출물 42.5 50.1 58.4
산대 잎 열수 추출물 40.1 48.7 55.5
산대 뿌리 열수 추출물 36.2 36.8 37.0
산대 죽순 열수 추출물 41.5 44.8 57.3
산대 줄기 메탄올 추출물 42.0 48.1 54.0
산대 잎 메탄올 추출물 38.5 46.4 53.7
산대 뿌리 메탄올 추출물 35.5 37.0 38.3
산대 죽순 메탄올 추출물 40.9 44.8 52.4
또한, 본 발명의 대나무추출물에 추가적으로 로즈마리와 타임(전라남도 담양 읍내 시장에서 구입)의 허브 열수 추출물(80℃, 4시간)을 다양한 농도(대나무 추출물에 대해 0.1%, 1%, 2.5% 및 5%)로 첨가한 후 상기와 같은 방법으로 살충율을 조사하였다.
그 결과, 대나무 추출물에 로즈마리와 타임의 허브 추출물을 함유한 혼합물을 처리한 경우 대나무 추출만 처리한 경우에 비해 점박이응애에 대한 살충율이 약 5 내지 30% 증가하였으며, 상기 로즈마리와 타임의 허브 추출물이 대나무 추출물의 농도에 2.5%일 때 가장 높은 살충율을 나타내었다(표 18).
시료 로즈마리+타임 농도(%) 살충율
1일 3일 5일
왕대 잎 60% 에탄올 추출물
+(로즈마리+타임 추출물)
0.1 45.3 54.1 62.0
1 53.2 62.7 73.5
2.5 65.4 74.8 91.9
5 62.5 72.6 86.5
산대 잎 60% 에탄올 추출물
+(로즈마리+타임 추출물)
0.1 45.7 55.3 61.9
1 55.2 61.7 70.3
2.5 67.3 77.8 92.2
5 65.4 74.5 86.8
로즈마리+타임 only 0.1 5.3 6.8 8.2
1 11.4 14.2 16.5
2.5 20.3 23.7 28.8
5 17.3 20.8 25.5
<3-2> 진딧물 방제 효능
본 발명의 대나무 추출물들의 목화진딧물(Aphis gossypii)과 복숭아혹진딧물(Myzus persicae)에 대한 방제효과를 검증하기 위해 유묘 검정법을 사용하였다. 고추 묘에 미리 상기 진딧물을 접종한 후, 유묘 잎에 정착된 진딧물을 조사한 다음, 3번 반복하여 각 대나무 추출물을 핸드 스프레이로 살포하고 1일, 3일 및 5일 후에 살충율을 조사하였다.
그 결과, 대나무 추출물들은 진딧물들에 대해 시간의존적으로 높은 살충 효과를 나타내었고, 특히 추출부위로는 솜대의 잎이, 추출용매로는 60% 에탄올 추출물이 가장 높은 효과를 나타내었다(표 19 및 표 20).
목화진딧물에 대한 살충율
추출물 살충율(%)
1일 3일 5일
왕대 줄기 60% 에탄올 추출물 48.2 55.8 64.3
왕대 잎 60% 에탄올 추출물 45.1 54.9 61.3
왕대 뿌리 60% 에탄올 추출물 42.2 43.8 48.6
왕대 죽순 60% 에탄올 추출물 44.6 50.5 60.2
왕대 줄기 열수 추출물 47.5 50.1 58.3
왕대 잎 열수 추출물 42.0 48.2 53.4
왕대 뿌리 열수 추출물 38.4 40.5 47.2
왕대 죽순 열수 추출물 44.3 49.8 62.3
왕대 줄기 메탄올 추출물 48.0 55.1 64.2
왕대 잎 메탄올 추출물 42.9 53.4 58.5
왕대 뿌리 메탄올 추출물 39.5 40.2 43.5
왕대 죽순 메탄올 추출물 44.2 49.1 62.5
솜대 줄기 60% 에탄올 추출물 36.6 38.3 40.9
솜대 잎 60% 에탄올 추출물 83.2 87.2 90.2
솜대 뿌리 60% 에탄올 추출물 55.8 58.7 62.1
솜대 죽순 60% 에탄올 추출물 45.9 50.5 52.3
솜대 줄기 열수 추출물 36.5 37.4 37.9
솜대 잎 열수 추출물 82.8 84.2 87.4
솜대 뿌리 열수 추출물 50.5 53.2 55.1
솜대 죽순 열수 추출물 44.4 49.2 50.3
솜대 줄기 메탄올 추출물 35.3 37.0 37.9
솜대 잎 메탄올 추출물 80.7 82.5 84.2
솜대 뿌리 메탄올 추출물 45.3 48.5 50.1
솜대 죽순 메탄올 추출물 44.2 48.3 49.6
맹종죽 줄기 60% 에탄올 추출물 35.5 38.0 38.9
맹종죽 잎 60% 에탄올 추출물 80.2 83.4 87.6
맹종죽 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.4 48.8 52.0
맹종죽 죽순 60% 에탄올 추출물 49.5 52.5 55.3
맹종죽 줄기 열수 추출물 34.5 37.0 38.6
맹종죽 잎 열수 추출물 79.8 80.2 84.5
맹종죽 뿌리 열수 추출물 44.6 47.2 50.2
맹종죽 죽순 열수 추출물 46.1 48.5 50.9
맹종죽 줄기 메탄올 추출물 33.7 35.4 36.2
맹종죽 잎 메탄올 추출물 79.3 80.4 85.5
맹종죽 뿌리 메탄올 추출물 43.8 45.7 49.5
맹종죽 죽순 메탄올 추출물 44.2 48.9 50.3
산대 줄기 60% 에탄올 추출물 45.2 49.5 56.5
산대 잎 60% 에탄올 추출물 40.4 49.5 56.1
산대 뿌리 60% 에탄올 추출물 47.1 48.0 48.6
산대 죽순 60% 에탄올 추출물 47.3 52.5 59.3
산대 줄기 열수 추출물 42.5 48.3 55.4
산대 잎 열수 추출물 40.2 48.7 55.1
산대 뿌리 열수 추출물 46.2 46.8 47.3
산대 죽순 열수 추출물 45.5 49.8 58.2
산대 줄기 메탄올 추출물 42.0 48.1 54.3
산대 잎 메탄올 추출물 38.5 46.4 53.7
산대 뿌리 메탄올 추출물 45.5 47.0 48.5
산대 죽순 메탄올 추출물 40.9 44.8 52.2
복숭아혹진딧물에 대한 살충율
추출물 살충율(%)
1일 3일 5일
왕대 줄기 60% 에탄올 추출물 45.2 52.8 59.4
왕대 잎 60% 에탄올 추출물 42.1 51.5 58.3
왕대 뿌리 60% 에탄올 추출물 47.2 48.8 50.6
왕대 죽순 60% 에탄올 추출물 45.3 51.4 65.5
왕대 줄기 열수 추출물 44.5 52.2 58.9
왕대 잎 열수 추출물 41.8 50.7 57.4
왕대 뿌리 열수 추출물 47.1 48.5 50.2
왕대 죽순 열수 추출물 44.1 49.8 62.3
왕대 줄기 메탄올 추출물 43.2 50.4 59.3
왕대 잎 메탄올 추출물 40.1 49.4 55.7
왕대 뿌리 메탄올 추출물 36.5 37.2 38.5
왕대 죽순 메탄올 추출물 44.2 49.1 62.5
솜대 줄기 60% 에탄올 추출물 37.6 40.3 47.9
솜대 잎 60% 에탄올 추출물 75.0 77.6 78.8
솜대 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.4 48.7 52.1
솜대 죽순 60% 에탄올 추출물 44.5 50.3 51.9
솜대 줄기 열수 추출물 36.5 37.2 38.4
솜대 잎 열수 추출물 74.5 76.2 77.5
솜대 뿌리 열수 추출물 45.5 48.2 50.1
솜대 죽순 열수 추출물 44.4 49.2 50.3
솜대 줄기 메탄올 추출물 35.8 37.0 37.9
솜대 잎 메탄올 추출물 73.3 75.4 78.7
솜대 뿌리 메탄올 추출물 45.8 48.7 52.1
솜대 죽순 메탄올 추출물 44.9 50.5 51.3
맹종죽 줄기 60% 에탄올 추출물 35.2 38.7 40.3
맹종죽 잎 60% 에탄올 추출물 72.4 75.3 77.2
맹종죽 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.4 48.8 52.0
맹종죽 죽순 60% 에탄올 추출물 44.5 50.5 51.3
맹종죽 줄기 열수 추출물 34.5 37.4 39.6
맹종죽 잎 열수 추출물 71.8 74.2 76.5
맹종죽 뿌리 열수 추출물 44.6 47.2 50.2
맹종죽 죽순 열수 추출물 44.1 46.5 50.1
맹종죽 줄기 메탄올 추출물 33.7 35.4 36.2
맹종죽 잎 메탄올 추출물 69.3 70.4 75.7
맹종죽 뿌리 메탄올 추출물 43.5 45.7 49.5
맹종죽 죽순 메탄올 추출물 44.2 48.9 50.3
산대 줄기 60% 에탄올 추출물 43.1 50.2 59.1
산대 잎 60% 에탄올 추출물 40.5 49.5 56.1
산대 뿌리 60% 에탄올 추출물 37.4 39.7 40.6
산대 죽순 60% 에탄올 추출물 42.3 47.5 54.3
산대 줄기 열수 추출물 42.7 50.2 58.4
산대 잎 열수 추출물 40.1 48.5 55.5
산대 뿌리 열수 추출물 37.1 39.5 40.0
산대 죽순 열수 추출물 41.5 44.8 57.3
산대 줄기 메탄올 추출물 42.0 48.1 54.0
산대 잎 메탄올 추출물 36.5 45.4 53.7
산대 뿌리 메탄올 추출물 35.5 37.2 38.3
산대 죽순 메탄올 추출물 41.8 44.5 51.3
<3-3> 온실가루이 방제 효능
본 발명의 대나무 추출물들의 온실가루이(T. vaporariorum)에 대한 방제효과를 검증하기 위해 유묘 검정법을 사용하였다. 오이 유묘에 각 대나무 추출물을 농도별로 10초간 침지한 후 플라스틱 통에 삽식하였다. 이때 물을 적신 솜을 넣어 뿌리에 충분한 수분이 공급되도록 하였으며, 이를 다시 아크릴케이지(10 × 5 ㎝)에 넣은 다음 채집한 온실가루이를 접종하여 1일, 3일 및 5일 후에 살충율을 조사하였다.
그 결과, 대나무 추출물들은 온실가루이에 대해 시간의존적으로 높은 살충 효과를 나타내었고, 특히 추출부위로는 솜대의 잎이, 추출용매로는 60% 에탄올 추출물이 가장 높은 효과를 나타내었다(표 21).
온실가루이에 대한 살충율
추출물 살충율(%)
1일 3일 5일
왕대 줄기 60% 에탄올 추출물 52.2 59.8 68.2
왕대 잎 60% 에탄올 추출물 49.0 56.2 66.3
왕대 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.3 48.8 50.6
왕대 죽순 60% 에탄올 추출물 44.4 50.2 64.7
왕대 줄기 열수 추출물 52.0 58.2 67.5
왕대 잎 열수 추출물 48.2 52.6 60.5
왕대 뿌리 열수 추출물 44.4 45.5 47.3
왕대 죽순 열수 추출물 44.4 49.6 62.4
왕대 줄기 메탄올 추출물 43.7 50.2 59.0
왕대 잎 메탄올 추출물 48.0 55.4 63.8
왕대 뿌리 메탄올 추출물 44.5 47.2 48.5
왕대 죽순 메탄올 추출물 44.0 49.3 62.5
솜대 줄기 60% 에탄올 추출물 36.6 37.3 37.9
솜대 잎 60% 에탄올 추출물 85.1 87.0 91.2
솜대 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.8 48.7 52.1
솜대 죽순 60% 에탄올 추출물 44.7 50.5 51.3
솜대 줄기 열수 추출물 36.5 37.2 38.5
솜대 잎 열수 추출물 83.5 86.2 89.1
솜대 뿌리 열수 추출물 45.5 48.2 50.1
솜대 죽순 열수 추출물 44.4 49.2 50.3
솜대 줄기 메탄올 추출물 35.5 37.2 38.1
솜대 잎 메탄올 추출물 83.2 85.0 86.6
솜대 뿌리 메탄올 추출물 44.8 47.7 51.3
솜대 죽순 메탄올 추출물 44.3 49.5 51.3
맹종죽 줄기 60% 에탄올 추출물 32.5 35.0 38.9
맹종죽 잎 60% 에탄올 추출물 80.3 83.3 85.4
맹종죽 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.5 48.8 52.0
맹종죽 죽순 60% 에탄올 추출물 44.5 50.8 51.7
맹종죽 줄기 열수 추출물 31.4 34.5 37.6
맹종죽 잎 열수 추출물 79.8 80.2 83.5
맹종죽 뿌리 열수 추출물 44.6 47.2 50.2
맹종죽 죽순 열수 추출물 44.1 46.5 50.1
맹종죽 줄기 메탄올 추출물 30.5 32.4 36.2
맹종죽 잎 메탄올 추출물 79.3 80.4 83.3
맹종죽 뿌리 메탄올 추출물 43.8 45.7 49.5
맹종죽 죽순 메탄올 추출물 44.2 48.9 50.3
산대 줄기 60% 에탄올 추출물 43.0 50.2 59.1
산대 잎 60% 에탄올 추출물 40.3 49.5 56.1
산대 뿌리 60% 에탄올 추출물 37.2 38.3 39.5
산대 죽순 60% 에탄올 추출물 42.5 47.4 54.3
산대 줄기 열수 추출물 42.5 50.2 58.4
산대 잎 열수 추출물 40.0 48.7 55.5
산대 뿌리 열수 추출물 36.5 36.9 38.4
산대 죽순 열수 추출물 41.5 44.8 57.3
산대 줄기 메탄올 추출물 42.0 48.1 54.0
산대 잎 메탄올 추출물 35.7 42.4 49.5
산대 뿌리 메탄올 추출물 34.8 37.0 38.1
산대 죽순 메탄올 추출물 39.7 43.8 52.5
<3-4> 총채벌레 방제 효능
본 발명의 대나무 추출물들의 총채벌레(F. occidentalis)에 대한 방제효과를 검증하기 위해 유묘 검정법을 사용하였다. 3 ~ 4주 된 강낭콩 유묘의 잎에 미리 접종시켜놓은 총체벌레를 접종한 후 3번 반복하여 각 대나무 추출물을 핸드스프레이로 살포하고 1일, 3일 및 5일 후에 살충율을 조사하였다.
그 결과, 대나무 추출물들은 총채벌레에 대해 시간의존적으로 높은 살충 효과를 나타내었고, 특히 추출부위로는 솜대의 잎이, 추출용매로는 60% 에탄올 추출물이 가장 높은 효과를 나타내었다(표 22).
총체벌레에 대한 살충율
추출물 살충율(%)
1일 3일 5일
왕대 줄기 60% 에탄올 추출물 43.2 50.5 59.2
왕대 잎 60% 에탄올 추출물 40.4 49.1 56.3
왕대 뿌리 60% 에탄올 추출물 37.3 37.5 38.8
왕대 죽순 60% 에탄올 추출물 44.5 50.1 64.5
왕대 줄기 열수 추출물 42.5 50.2 58.5
왕대 잎 열수 추출물 39.9 48.7 55.3
왕대 뿌리 열수 추출물 37.1 35.5 37.2
왕대 죽순 열수 추출물 44.1 47.6 62.3
왕대 줄기 메탄올 추출물 43.0 50.1 59.0
왕대 잎 메탄올 추출물 39.2 49.4 55.7
왕대 뿌리 메탄올 추출물 36.5 37.2 38.5
왕대 죽순 메탄올 추출물 44.4 49.0 62.5
솜대 줄기 60% 에탄올 추출물 26.5 27.3 27.9
솜대 잎 60% 에탄올 추출물 85.0 87.0 88.1
솜대 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.7 48.7 52.1
솜대 죽순 60% 에탄올 추출물 44.9 50.5 51.3
솜대 줄기 열수 추출물 26.5 27.1 27.5
솜대 잎 열수 추출물 84.8 86.2 87.7
솜대 뿌리 열수 추출물 45.5 48.2 50.1
솜대 죽순 열수 추출물 44.4 49.2 50.3
솜대 줄기 메탄올 추출물 25.4 27.5 27.9
솜대 잎 메탄올 추출물 83.5 85.7 86.9
솜대 뿌리 메탄올 추출물 45.8 48.7 52.1
솜대 죽순 메탄올 추출물 45.0 50.5 51.3
맹종죽 줄기 60% 에탄올 추출물 26.1 28.0 28.9
맹종죽 잎 60% 에탄올 추출물 74.0 83.3 85.1
맹종죽 뿌리 60% 에탄올 추출물 45.4 48.8 52.0
맹종죽 죽순 60% 에탄올 추출물 44.5 50.5 51.3
맹종죽 줄기 열수 추출물 25.4 26.5 27.4
맹종죽 잎 열수 추출물 72.5 80.2 83.0
맹종죽 뿌리 열수 추출물 44.6 47.2 50.2
맹종죽 죽순 열수 추출물 44.1 46.5 50.1
맹종죽 줄기 메탄올 추출물 23.7 25.4 26.2
맹종죽 잎 메탄올 추출물 72.3 80.4 84.4
맹종죽 뿌리 메탄올 추출물 43.8 45.7 49.5
맹종죽 죽순 메탄올 추출물 44.2 48.9 50.3
산대 줄기 60% 에탄올 추출물 43.5 50.2 59.1
산대 잎 60% 에탄올 추출물 40.6 49.5 56.1
산대 뿌리 60% 에탄올 추출물 37.2 38.0 38.6
산대 죽순 60% 에탄올 추출물 42.8 48.2 54.4
산대 줄기 열수 추출물 42.3 49.1 57.9
산대 잎 열수 추출물 40.4 48.7 53.3
산대 뿌리 열수 추출물 36.5 37.3 38.0
산대 죽순 열수 추출물 41.5 44.8 58.6
산대 줄기 메탄올 추출물 42.0 48.1 54.2
산대 잎 메탄올 추출물 39.5 46.2 53.0
산대 뿌리 메탄올 추출물 37.2 37.9 38.6
산대 죽순 메탄올 추출물 40.6 44.5 52.9
<3-5> 배추좀나방 방제 효능
본 발명의 대나무 추출물의 배추좀나방에 대한 방제효과를 검증하기 위해 유묘 검정법을 사용하였다. 대나무 추출물을 농도별로 10초간 침지한 후 플라스틱 통에 삽식하였다. 이때 물을 적신 솜을 넣어 뿌리에 충분한 수분이 공급되도록 하였으며, 이를 다시 아크릴케이지(10 × 5 ㎝)에 넣은 다음 채집한 배추좀나방을 접종하여 1일, 3일 및 5일 후에 살충율을 조사하였다.
그 결과, 대나무 추출물은 배추좀나방에 대해 높은 살충 효과를 나타내었다(표 23).
희석배수 구분 살충율(%)
1일 3일 5일
100배 원액 26.0 26.0 26.0
정제액 16.0 20.0 20.0
숙성액 36.0 40.0 40.0
잎 추출물 42.0 44.0 44.0
대 추출물 26.0 30.0 30.0
200배 원액 10.0 14.0 14.0
정제액 16.0 18.0 18.0
숙성액 26.0 28.0 28.0
잎 추출물 18.0 20.0 20.0
대 추출물 12.0 12.0 12.0
<3-6> 별멸구 방제 효능
본 발명의 대나무 추출물(솜대 60% 에탄올 추출물)의 별멸구에 대한 방제효과를 검증하기 위해 유묘 검정법을 사용하였다. 대나무 추출물을 농도별로 10초간 침지한 후 플라스틱 통에 삽식하였다. 이때 물을 적신 솜을 넣어 뿌리에 충분한 수분이 공급되도록 하였으며, 이를 다시 아크릴케이지(10 × 5 ㎝)에 넣은 다음 채집한 별멸구를 접종하여 1일, 3일 및 5일 후에 살충율을 조사하였다.
그 결과, 대나무 추출물은 별멸구에 대해 높은 살충 효과를 나타내었다(표 24).
희석배수 구분 살충율(%)
1일 3일 5일
100배 원액 42.9 45.5 45.5
정제액 26.9 26.9 26.9
숙성액 29.1 33.9 33.9
잎 추출물 48.1 50.4 50.4
대 추출물 31.9 31.9 68.1
200배 원액 37.3 31.0 31.0
정제액 23.3 24.5 24.5
숙성액 24.3 25.7 25.7
잎 추출물 23.1 25.4 25.4
대 추출물 18.1 22.0 22.0
<3-7> 담배거세미나방 방제 효능
본 발명의 대나무 추출물들의 국부처리에 의한 담배거세미나방(S. litura)에 대한 살충효과를 알아보기 위해, 4령 유충을 국부처리기로 복부의 배면에 각 대나무 추출물을 처리한 후 26℃에서 72시간 개체사육하여 살충율을 조사하였다. 대나무 추출물을 처리한 개체수는 30마리씩이며, 살포는 3번 반복 시행하였다.
그 결과, 대나무 추출물들은 담배거세미나방에 대해 시간의존적으로 높은 살충 효과를 나타내었고, 특히 추출부위로는 솜대의 잎이, 추출용매로는 60% 에탄올 추출물이 가장 높은 효과를 나타내었다(표 25).
담배거세미나방의 사충수
추출물 살충율(%)
72시간 후
왕대 줄기 60% 에탄올 추출물 64.2
왕대 잎 60% 에탄올 추출물 61.5
왕대 뿌리 60% 에탄올 추출물 48.5
왕대 죽순 60% 에탄올 추출물 60.1
왕대 줄기 열수 추출물 59.7
왕대 잎 열수 추출물 58.4
왕대 뿌리 열수 추출물 47.2
왕대 죽순 열수 추출물 59.3
왕대 줄기 메탄올 추출물 64.1
왕대 잎 메탄올 추출물 58.5
왕대 뿌리 메탄올 추출물 46.6
왕대 죽순 메탄올 추출물 58.5
솜대 줄기 60% 에탄올 추출물 40.9
솜대 잎 60% 에탄올 추출물 79.8
솜대 뿌리 60% 에탄올 추출물 62.4
솜대 죽순 60% 에탄올 추출물 52.3
솜대 줄기 열수 추출물 37.9
솜대 잎 열수 추출물 75.5
솜대 뿌리 열수 추출물 55.2
솜대 죽순 열수 추출물 50.3
솜대 줄기 메탄올 추출물 37.9
솜대 잎 메탄올 추출물 74.2
솜대 뿌리 메탄올 추출물 50.1
솜대 죽순 메탄올 추출물 49.6
맹종죽 줄기 60% 에탄올 추출물 48.9
맹종죽 잎 60% 에탄올 추출물 77.2
맹종죽 뿌리 60% 에탄올 추출물 52.0
맹종죽 죽순 60% 에탄올 추출물 55.3
맹종죽 줄기 열수 추출물 48.6
맹종죽 잎 열수 추출물 74.5
맹종죽 뿌리 열수 추출물 50.2
맹종죽 죽순 열수 추출물 50.9
맹종죽 줄기 메탄올 추출물 46.2
맹종죽 잎 메탄올 추출물 75.7
맹종죽 뿌리 메탄올 추출물 49.5
맹종죽 죽순 메탄올 추출물 50.3
산대 줄기 60% 에탄올 추출물 56.5
산대 잎 60% 에탄올 추출물 56.1
산대 뿌리 60% 에탄올 추출물 50.6
산대 죽순 60% 에탄올 추출물 59.5
산대 줄기 열수 추출물 56.8
산대 잎 열수 추출물 55.1
산대 뿌리 열수 추출물 48.3
산대 죽순 열수 추출물 58.2
산대 줄기 메탄올 추출물 54.2
산대 잎 메탄올 추출물 53.7
산대 뿌리 메탄올 추출물 48.5
산대 죽순 메탄올 추출물 57.5
<실시예 4> 대나무 추출물의 항균 활성 분석
<4-1> 균주 및 배지
대나무 추출물에 대한 항균 활성 검증을 위하여 전남농업기술원 및 한국종균협회(KCCM)으로부터 분양 받은 대장균(Escherichia coli; AB1157), 잘록병균(Rhizoctonia solani), 도열병균(Magnaporthe grisea), 시들음병균(Fusarium oxysporum), 탄저병균(Collecotrichum gloeosporiodides), 및 잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea)을 대상으로 항균력을 검증하였다. 상기 균들의 생육배지는 세균은 Luria-Bertani medium(LB, pH 7.0, 37℃) 배지와 King's B medium(KB, pH 7.2, 27℃)에서 곰팡이는 효모 펩톤 덱스트로즈(yeast peptone dextrose)(YPD, pH 7.0, 24℃)에서 24시간 진탕 배양하였다. 희석액으로는 K2HPO4와 KH2PO4가 함유된 인산 완충용액(Phosphate buffer)을 사용하였다.
<4-2> 항균 활성 실험
PDA를 준비하고 대나무 추출물(솜대의 60% 에탄올 추출물)과 필터 페이퍼(filter paper)(peper disc, 10 mm)를 오토클레이브(autocleave)에 15분간 멸균하고 페트리디쉬(petridish)(PDA)에 균을 배양하였다. 상기 균에서의 간격을 3 cm 떨어진 곳 위치를 점으로 찍어두었다. 상기 점이 찍어진 자리에 추출물을 라벨링(labeling)하여 핀셋으로 멸균된 필터 페이퍼(paper disc)의 오목한 부분이 위로하고 점찍어진 위치에 올려 되도록 빠르게 추출물을 처리하였다. 페이퍼(50 ~ 60 ㎕)를 배지에 올려두고 늦게 추출물을 처리하면 배지의 수분이 흡수되어 추출물이 잘 흡수하지 못하므로 신속히 처리한다. 이후 26℃에서 배양하여 결과를 조사하고 페트리디쉬에 균이 다 자라면 사진을 찍었다.
그 결과, 대나무 추출물은 잘록병균, 도열병균, 시들음병균, 탄저병균, 및 잿빛곰팡이병균에 대해 높은 항균 활성 효능을 나타내었다(표 26 내지 표 30).
잘록병균에 대한 항균 활성
시료번호 추출물 목록 잘록병균(mm/72h)
1 죽순 추출물 원액 11
2 잎 추출물 원액 10
3 대 추출물 원액 10
4 대나무 정제액 11
5 대나무 숙성액 11
6 로즈마리 추출물 15
7 타임 추출물 10
8(음성 대조구) 물(BLANK) 5
9(양성 대조구) KF-1113L-P 17
도열병균에 대한 항균 활성
시료번호 추출물 목록 도열병균(mm/72h)
1 죽순 추출물 원액 10
2 잎 추출물 원액 10
3 대 추출물 원액 10
4 대나무 정제액 10
5 대나무 숙성액 10
6 로즈마리 추출물 20
7 타임 추출물 11
8(음성 대조구) 물(BLANK) 5
9(양성 대조구) KF-1113L-P 16
시들음병균에 대한 항균 활성
시료번호 추출물 목록 시들음병균(mm/72h)
1 죽순 추출물 원액 10
2 잎 추출물 원액 11
3 대 추출물 원액 11.5
4 대나무 정제액 11.5
5 대나무 숙성액 10
6 로즈마리 추출물 26
7 타임 추출물 10
8(음성 대조구) 물(BLANK) 6
탄저병균에 대한 항균 활성
시료번호 추출물 목록 탄저병균(mm/72h)
1 죽순 추출물 원액 10
2 잎 추출물 원액 11
3 대 추출물 원액 11
4 대나무 정제액 11
5 대나무 숙성액 10
6 로즈마리 추출물 25
7 타임 추출물 14
8(음성 대조구) 물(BLANK) 6
9(양성 대조구) 탑시드 13
잿빛곰팡이균에 대한 항균 활성
시료번호 추출물 목록 잿빛곰팡이균(mm/72h)
1 죽순 추출물 원액 10
2 잎 추출물 원액 10
3 대 추출물 원액 10
4 대나무 정제액 11.2
5 대나무 숙성액 10
6 로즈마리 추출물 25
7 타임 추출물 10
8(음성 대조구) 물(BLANK) 5
9(양성 대조구) 오팜가드 20
또한, 천연아로마 추출물의 대장균에 대한 항균 활성을 알아보기 위해, 필터 페이퍼(filter paper)(peper disc, 8 mm)를 이용하여 상기와 같은 방법으로 알아보았다.
그 결과, 로즈제라늄, 로즈마리, 마조람, 자스민, 펩퍼민트, 캠퍼, 사스어프라스, 라벤더, 타임, 파인, 유칼립투스 및 바질 추출물이 높은 항균 활성을 가지고 있음을 알 수 있었다(표 31).
대장균에 대한 항균 활성
시료번호 추출물 목록 대장균(mm/72h)
1 로즈제라늄 8
2 로즈마리 14.5
3 마조람 14.4
4 자스민 9.6
5 펩퍼민트 13.2
6 캠퍼 15.3
7 사스어프라스 16.1
8 라벤더 14.9
9 타임 27.7
10 파인 12.9
11 유칼립투스 14.3
12 바질 11.6
도 1은 대나무 추출물(솜대의 60% 에탄올 추출물)의 잘록병균(Rhizoctonia solani)에 대한 항균 활성을 나타내는 그림이다.
도 2는 대나무 추출물(솜대의 60% 에탄올 추출물)의 도열병균(Magnaporthe grisea)에 대한 항균 활성을 나타내는 그림이다.
도 3은 대나무 추출물(솜대의 60% 에탄올 추출물)의 시들음병균(Fusarium oxysporum)에 대한 항균 활성을 나타내는 그림이다.
도 4는 대나무 추출물(솜대의 60% 에탄올 추출물)의 탄저병균(Collecotrichum gloeosporiodides)에 대한 항균 활성을 나타내는 그림이다.
도 5는 대나무 추출물(솜대의 60% 에탄올 추출물)의 잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea)에 대한 항균 활성을 나타내는 그림이다.

Claims (12)

  1. 대나무(Phyllostachys nigra) 추출물을 유효성분으로 함유하는 살충제 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 대나무는 왕대(Phyllostachys bambuoides siebold & Zucc.), 솜대(Phyllostachysnigra var. henonis), 맹종죽(Phyllostachys pubescens) 또는 신이대(또는 산대, Sasa coreana Nakai)인 것을 특징으로 하는 살충제 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 대나무 추출물은 대나무의 줄기, 잎, 뿌리 또는 죽순 부위를 이용하는 것을 특징으로 하는 살충제 조성물.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 대나무 추출물은 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 사용하여 추출하는 것을 특징으로 하는 살충제 조성물.
  5. 제 4항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 살충제 조성물.
  6. 제 1항에 있어서, 상기 대나무 추출물은 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 및 담배거세미나방으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 해충에 대해 살충 효능을 갖는 것을 특징으로 하는 살충제 조성물.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 진딧물은 목화진딧물 또는 복숭아진딧물인 것을 특징으로 하는 살충제 조성물.
  8. 제 1항에 있어서, 상기 대나무 추출물은 항균 활성을 가지는 것을 특징으로 하는 살충제 조성물.
  9. 제 8항에 있어서, 상기 대나무 추출물은 잘록병균(Rhizoctonia solani), 도 열병균(Magnaporthe grisea), 시들음병균(Fusarium oxysporum), 탄저병균(Collecotrichum gloeosporiodides) 및 잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea)로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 균에 대해 항균 활성을 가지는 것을 특징으로 하는 살충제 조성물.
  10. 제 1항에 있어서, 상기 대나무 추출물에 추가적으로 로즈마리(Rosemary) 또는 타임(Thyme)의 허브 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 살충제 조성물.
  11. 약학적으로 유효한 양의 제 1항의 조성물을 해충에게 투여하는 단계를 포함하는 살충 방법.
  12. 제 11항에 있어서, 상기 해충은 점박이응애, 진딧물, 온실가루이, 총채벌레, 별멸구, 배추좀나방 및 담배거세미나방으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 살충 방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR101112782B1 (ko) * 2011-05-09 2012-03-13 (주)에이스나노텍 천연 식물 추출물을 이용한 살충제
CN110833076A (zh) * 2019-11-22 2020-02-25 贵州省油料研究所 一种防治植物病虫害的迷迭香精油微乳液及其制备方法

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