KR101762762B1 - 녹나무 또는 회화나무의 추출물을 유효성분으로 함유하는 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법 및 그 방법으로 제조된 조성물 - Google Patents

녹나무 또는 회화나무의 추출물을 유효성분으로 함유하는 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법 및 그 방법으로 제조된 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 녹나무를 분말화하여 에탄올용매에 혼합하여 전처리과정에서 추출물을 생성하고 이 추출물에서 추출액을 분리하여 감압농축시스템에서 감압농축한 녹나무 농축추출액(camphora oil)에 계피유(Cinnamon oil) 또는 님오일(Neem oil), 레몬그라스오일(Lemon grass oil), 유칼립투스오일(Eucalyptus oil) 등을 계면활성제와 교반하고 정제수와 회화나무추출물(matrine) 투입 및 교반하여 병해충방제 조성물을 제조하여 식물병원균에 대한 항진균효과와 딸기꽃받침절편 및 상추잎절편에 대한 항병력효과와 배추순나방에 및 진딧물에 대한 살충효과를 갖도록한 녹나무 또는 회화나무의 추출물을 이용한 병해충방제 조성물 제조방법에 관한 것이며, 더 나아가 가로수에 식재되어있는 이팝나무 녹병에 대한 약해반응은 없으면서 약효 방제가가 80%의 수준에 달하는 조성물에 관한 것이다.

Description

녹나무 또는 회화나무의 추출물을 유효성분으로 함유하는 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법 및 그 방법으로 제조된 조성물{omitted}
본 발명은 녹나무 또는 회화나무의 추출물을 이용한 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법 및 그 방법으로 제조된 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 건조된 녹나무 잎과 가지를 분쇄하여 에탄올 용매에 혼합하여 전처리를 통해 추출물을 생성하고 이 추출물에서 추출액을 분리하여 감압농축시스템에서 감압농축한 녹나무 농축추출액(camphora oil)에 계피오일(Cinnamon oil) 또는 님오일(Neem oil), 레몬그라스오일(Lemon grass oil), 유칼립투스오일(Eucalyptus oil) 등을 계면활성제와 교반하고 정제수와 회화나무추출물(matrine) 투입하여 병해충방제 조성물을 제조하여 식물병원균에 대한 항진균 효과와, 딸기꽃받침절편, 상추잎절편에 대한 항병력 효과와 배추순나방 및 진딧물에 대한 살충효과와 도로에 식재되어 있는 가로수의 녹병에 대한 효과를 갖도록 한 녹나무 또는 회화나무의 추출물을 이용한 병해충방제 조성물 제조방법 및 그 방법으로 제조된 조성물에 관한 것이다.
주지하는 바와 같이, 농작물에 발생하는 각종 병해충은 직접적으로 수량을 감소시킬 뿐만 아니라, 품질에도 나쁜 영향을 미치게 된다.
이러한 병해충을 방지하기 위하여 새로운 농약의 개발과 사용방법이 계속 연구되어 왔으며, 현재에도 각국에서 새로운 농약개발에 주력하고 있는 실정이다.
병해충의 방제법으로는 크게 유기합성농약에 의한 방제법과 최근 새롭게 대두되는 생물학적 방제법이 있다.
유기합성농약에 의한 방제법은 인간 또는 축산물에 대한 농약중독, 자연환경에 미치는 작물잔류 및 토양잔류 독성 문제가 있으므로, 최근에는 광범위한 살충효과를 갖으며 환경에는 큰 영향을 주지 않는 친환경 유기농 자재를 탐색하는 연구가 활발히 이루어지고 있다(Saxena, R. C. 1989. Insecticides from neem. In insecticides of plant origin(J. T. Arnason, B. J. R. Philogene and P. Morand, eds.). ACS Symp. Ser. No. 387. Am. Chem. Soc.Washington, D.C. pp. 110-135).
그 중에서 친환경 유기농 자재로부터 추출된 식물추출물을 이용한 환경친화형 작물보호제는 살충제, 살균제, 곤충 기피제, 섭식을 억제하는 섭식저해제로서 성공적으로 개발되고 이용되고 있다(Schmutterer, H. 1980. Natural pesticidesfrom the neem tree. Proc. 1st Int. Neem Conf. pp. 33-259.).
특히, 식물추출 생화학제는 다양한 생물활성물질을 함유하고 있으며(Wink, M. 1993. Production and application of phytochemicals from anagricultural perspective. pp. 171-213. In Phytochemistry and Agriculture. (eds. Van T. A. Beek and H.Breteler) Vol. 34. Clarendon, Oxford, UK.), 인축(人畜) 독성이 없기 때문에 친환경 농업에서 새로운 병해충방제용생화학 생물농약으로 기존의 합성농약의 대체제로 인식되고 사용되고 있다.
그러나, 상기와 같은 병해충방제용 생화학 생물농약이 대체제로 인식되나, 병해충방제 조성물을 제조하여 식물병원균에 대한 항진균효과와 딸기꽃받침절편 및 상추잎절편에 대한 항병력효과와, 배추순나방에 및 진딧물에 대한 살충효과를 동시에 갖도록 한 병해충방제 조성물이 제공되지 못하는 많은 문제점이 있었다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위해서, 본 발명은 건조된 녹나무 잎 등을 분쇄하여 에탄올 용매에 혼합하여 전처리하여 추출물을 생성하고 이 추출물에서 추출액을 분리하여 감압농축시스템에서 감압농축한 녹나무농축추출액(camphora oil)에 계피오일(Cinnamon oil) 또는 님오일(Neem oil), 레몬그라스오일(Lemon grass oil), 유칼립투스오일(Eucalyptus oil) 등을 계면활성제와 교반하고, 정제수와 회화나무추출물(matrine)을 혼합하고 교반하여 병해충방제 조성물 제조방법과 그 방법으로 조성물을 제조하여 식물병원균에 대한 항진균효과와, 딸기꽃받침절편 및 상추편에 대한 항병력효과와, 배추순나방 및 진딧물에 대한 살충효과를 제공하는데 그 목적이 있다.
이와 같은 목적을 달성하기 위해서, 본 발명에 따른 제조방법은 녹나무의 잎, 뿌리, 가지를 건조하여 분말화시킨 분말물을 준비하는 단계와; 상기 분말물을 에탄올용매에 혼합하고, 진탕배양기(shaking incubator)에서 인큐베이션(incubation)하여 추출물을 생성하는 단계와; 상기 추출물을 거즈와 여과지(filter-paper)로 추출액과 분쇄물찌꺼기를 분리하여 추출액을 생성하는 단계와; 상기 추출액을 감압농축시스템(rotary evaporator)으로 농축하여 상기 제2추출물의 부피가 1/10정도였을 때 농축과정을 중지하여 녹나무농축추출액을 생성하는 단계와; 상기 녹나무농축추출액(camphora oil)에 계피오일(Cinnamon oil) 또는 님오일(Neem oil), 레몬그라스오일(Lemon grass oil), 유칼립투스오일(Eucalyptus oil)등과, 계면활성제를 투입하여 24시간 교반하여 준 다음, 증량제인 정제수를 혼합하여 2시간동안 2차교반하고 회화나무추출물(matrine)을 투입하여 2시간 교반하여 병해충방제 조성물을 제조하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 한다.
또한, 상기 분말 200g 씩 2ℓ캡병에 넣고, 최종 부피(final vol)가 2ℓ 되도록 에탄올 용매를 혼합하는 것을 특징으로 한다.
삭제
또한, 상기 인큐베이션(incubation)하여 제1추출물을 생성하는 단계에서 상기 분말물을 에탄올용매에 잘 섞이도록 흔들어주어 혼합하고, 온도를 50∼65℃로 설정하고, 진탕배양기(shaking incubator)를 150rpm으로 셋팅(setting)하여 23 ∼25시간동안 인큐베이션(incubation)하는 것을 특징으로 한다.
또한, 상기 감압농축시스템(rotary evaporator)의 히팅 배쓰 온도(heating bath temp)는 40~60℃이고, 서큘레이션 온도(circulation temp)는 8∼11℃인 것을 특징으로 한다.
또한, 녹나무농축추출액은 녹나무분말 시료 200g에 추출용매 에탄올 1,800㎖를 혼합하여 인큐베이션, 추출분리하여 1,700㎖의 녹나무추출액을 생성하여 상기 녹나무추출물을 감압농축시스템으로 감압농축하여 녹나무농축추출액을 150㎖를 생성하는 것을 특징으로 한다.
본 발명은 녹나무를 분말화하여 에탄올용매에 혼합하여 전처리과정에서 추출물을 생성하고 이 추출물에서 추출액을 분리하여 감압농축시스템에서 감압농축한 녹나무농축추출액(camphora oil)에 계피오일(Cinnamon oil) 또는 님오일(Neem oil), 레몬그라스오일(Lemon grass oil), 유칼립투스오일(Eucalyptus oil) 등과 계면활성제, 정제수 및 회화나무추출물(matrine)과 교반하여 병해충방제 조성물을 제조하여 식물병원균에 대한 항진균 효과와 딸기꽃받침절편 및 상추잎절편에 대한 항병력효과와, 배추순나방 및 진딧물에 대한 살충효과를 갖는다.
본 발명을 충분히 이해하기 위해서 본 발명의 바람직한 실시예를 첨부 도면을 참조하여 설명한다.
본 발명의 실시예는 여러가지 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상세히 설명하는 실시예로 한정되는 것으로 해석되어서는 안된다. 본 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 안전하게 설명하기 위하여 제공되는 것이다.
따라서 도면에서의 요소의 형상 등은 보다 명확한 설명을 강조하기 위해서 과장되어 표현될 수 있다. 각 도면에서 동일한 부재는 동일한 참조부호로 도시한 경우가 있음을 유의하여야 한다.
본 발명에 따른 녹나무 또는 회화나무의 추출물을 유효성분으로 함유하는 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법은 실시예를 들어 상세하게 설명하면 다음과 같다.
[실시예]
[녹나무 분말물 준비단계]
녹나무의 잎, 뿌리, 가지를 건조하여 분말화시킨 분말물을 준비하여 준다.
또한, 상기 분말 200g씩 2ℓ캡병에 넣고, 최종부피(final vol)이 2ℓ가 되도록 에탄올 용매를 혼합하여 주는 것이 바람직하다.
상기 에탄올(EtOH)은 순도 94∼96%로 구성된 추출용매로 사용된다.
[전처리과정에서 추출물생성단계]
상기 분말물을 에탄올용매에 혼합하고, 진탕배양기(shaking incubator)에서 인큐베이션(incubation)하여 추출물을 생성하여 준다.
또한, 상기 분말물을 에탄올용매에 잘 섞이도록 흔들어주어 혼합하고, 온도를 50∼65℃로 설정하고, 진탕배양기(shaking incubator)를 150rpm으로 셋팅(setting)하여 24시간동안 진탕배양기(shaking incubator)에서 인큐베이션(incubation)하는 것이 바람직하다.
[추출물에서 추출액분리생성단계]
상기 추출물에서 거즈 및 여과지(filter paper)를 이용하여 추출액과 분쇄물찌꺼기를 분리하여 추출액만을 분리한다.
[감압농축시스템에서 녹나무농축추출액생성단계]
상기 추출물에서 추출액분리생성단계에서 분리된 추출액을 감압농축시스템(rotary evaporator)이용으로 농축하여 상기 제2추출물의 부피가 1/10정도 되었을시 농축과정을 중지하여 녹나무농축추출액을 생성하여 준다.
또한, 상기 감압농축시스템(rotary evaporator)의 히팅 배쓰 온도(heating bath temp)는 40~60℃이고, 서큘레이션 온도 (circulation temp)는 8∼11℃로 하는 것이 바람직하다.
상기 녹나무농축추출액은 녹나무분말 시료 200g에 추출용매 에탄올 1,800ml를 혼합하여 인큐베이션, 추출분리하여 1,700m1의 녹나무농축액을 생성하여 상기 녹나무농축액 감압농축시스템으로 감압농축하여 녹나무농축추출액을 150ml를 생성하였다.
[병해충방제 조성물 생성단계]
상기 녹나무농축추출액에 계피유 또는 님오일, 레몬그라스오일, 유칼립투스오일 등을 계면활성제를 투입하여 24시간 교반하여 준다.
그리고 녹나무농축추출액에 계피오일 또는 님오일, 레몬그라스오일, 유칼립투스오일 등과 계면활성제를 투입하여 24시간 교반한후에 증량제인 정제수를 혼합하여 2시간동안 2차교반하고 회화나무추출물을 투입하여 2시간 교반하여 병해충방제 조성물을 제조하여 준다.
이의 방법으로 제조된 상기 병해충방제 조성물을 사용한 실험예를 아래와 같이 상세히 설명하면 다음과 같다.
[실험예]
[본 발명에 따른 액상 조성물 혼합구성표]
시료명 혼합제 구성 비고
(성상안정도)
# 1 회화나무추출물 8% + 녹나무오일 7% + 님오일 3%
# 2 회화나무추출물 8% + 녹나무오일 7% + 레몬그라스오일 3%
# 3 회화나무추출물 8% + 녹나무오일 7% + 계피오일 3%
# 4 회화나무추출물 8% + 녹나무오일 7% + 유칼립투스오일 3%
# 5 회화나무추출물 5% + 녹나무오일 10% + T80 5% + 님오일 1%
# 6 회화나무추출물 5% + 녹나무오일 10% + T80 5% + 레몬그라스오일1%
# 7 회화나무추출물 5% + 녹나무오일 10% + T80 5% + 계피오일 1%
# 8 회화나무추출물 5% + 녹나무오일 10% + T80 5% + 유칼립투스오일 1%
# 9 회화나무추출물 20% + 녹나무오일 20% + T80 10% + 님오일 5%
# 10 회화나무추출물 30% + 녹나무오일 20% + T80 8% + 계피오일 5%
# 11 회화나무추출물 10% + 녹나무오일 10% + T80 5% + 님오일 2.5%
# 12 회화나무추출물 10% + 녹나무오일 10% + T80 5% + 계피오일 2.5%
# 13 회화나무추출물 20% + 녹나무오일 10% + T80 5% + 님오일 2.5%
# 14 회화나무추출물 20% + 녹나무오일 10% + T80 5% + 계피오일 2.5%
*T80(Polyoxyethylene sorbitan monooleate), * 성상안정도 : ⊙ 매우안정, 보통
[식물병원균에 대한 시제품의 항진균 효과 시험]
PDA((Potato starch 4.0g, Dextrose 20.0g, Agar 15.0g/1L/pH6.0)배지를 제조하여 클린벤치(Clean bench) 상에서 페트리디시(Petri-dish)에 분주하여 준비한다.
농촌진흥청 농업유전자원정보센터(http://www.genebank.go.kr)로 분양받은 각각의 병원균을 멸균한 코르크보어(cork borer)로 8mm 정도 떼어내어 PDA배지 중앙에 상치한 후 습도 50~60%, 온도 26~28℃인 조건에서 포자 형성 유도한다.
배지 중앙에 병원균이 상치되어 포자를 형성하고 있는 주위에, 멸균된 페이퍼디스크(paper disk)를 놓고, 그 위에 시료를 50㎖씩 분주하여, 26~28℃에서 일정시간 배양하여 만들어지는 저지대의 크기를 확인하여 간접적으로 병원균의 생장억제 효과를 관찰하는 방법으로 억제 효과를 조사한다.
Figure 112016060284416-pat00001
혼합 구성표에 따른 항진균 효과 시험 결과, 수도작에 발생하는 주요 병원균인 벼 문고병원균(Rhizoctonia solani AG -1(1A)과 벼 도열병원균(Pyricularia grisea)과 균핵병원균(Sclerotinia nivalis), 잿빛곰팡이병원균(Botrytis cinerea)에 대해 전반적으로 50~60%이상 효과가 있었다.
특히, 기술이전을 통하여 참여기관(전남산림자원연구소)으로부터 분양받은 이팝나무 녹병 후보 균주 중, #2, #3에 대한 회화나무추출물(matrine)과 녹나무오일(camphora oil), 님오일(neem oil), 계피오일(cinnamon oil)의 구성에서 60%이상 높은 방제효과가 있었다.
[ 병원균에대한 조성물의 항진균 효과 시험]


시료명
병원균명
Rs
벼 문고병
Pg
벼 도열병
Cg
고추탄저병
Bc
잿빛곰팡이
Sn
균핵병
Pa
피튬마름명
Ut
이팝나무녹병
# 1 - - - -
# 2 - - -
# 3 - -
# 4 - - -
# 5 -
# 6 - -
# 7 - -
# 8 - -
# 9 - - -
# 10 - -
# 11 - - - - - - -
# 12 - - - - - - -
# 13 - - -
# 14 - - -
●:very good( 60%이상 )◎:good( 50%이상 ~ 60%이하 )○:small efficacy( 50%이하 )
[ 병원균에 대한 개발 조성물의 항진균 효과시험]
Figure 112016060284416-pat00002
Figure 112016060284416-pat00003
Figure 112016060284416-pat00004
[딸기 꽃받침 절편에 대한 조성물의 항병력 효과 시험]
접종시험을 하기 위해 페트리디시 브로스(petri dish broth, PD broth)에 잿빛곰팡이 병원균(Bc, Botrytis cinerea)을 접종하여 28℃, 180rpm으로 24시간 진탕배양하여 병원균을 준비한다.
딸기 꽃받침 표면 살균을 위해 살균액은 1% sodium hypochlorite(차아염소산나트륨용액)을 사용하였으며, 딸기 꽃받침을 살균액에 담그어 15분간 정치한 후 멸균 증류수로 3~4회 헹구었다. 표면 살균된 상추는 가로, 세로 3mm~4mm의 크기로 잘라 사용하였다.
96 웰플레이트(well plate)의 대조구 웰(well)에 멸균된 페트리디시 브로스 (PD broth)를 100㎕씩 로딩(loading)하고, 잿빛곰팡이 병원균(Bc, Botrytis cinerea) 100㎕, 시험구 I(Bc; 50㎕+시제품 #10의 1/1000 희석액 100㎕ ), 시험구 II(Bc; 50㎕+병해관리용 유기농업자재; 1/1000 희석액 100㎕ ) 대로 처리하였다.
플레이트(Plate)는 7일간 25℃, 상대습도 60~65%를 유지하여 암조건으로 정치하였다.
처리구별 7일 후 달관조사해본 결과, 잿빛곰팡이 병원균에 대한 개발 시제품(#10)의 항병력 효과가 1주일 이상 지속됨을 확인할 수 있었다.
[딸기 꽃받침 절편에 대한 조성물의 항병력 시험]
Figure 112016060284416-pat00005
[상추 잎 절편에 대한 조성물의 항병력 효과 시험 ]
접종시험을 하기 위해 페트리디시 브로스(PD broth)에 균핵 병원균(Sn, Sclerotinia nivalis)을 접종하여 28℃, 180rpm으로 24시간 진탕배양하여 병원균을 준비한다.
상추 잎의 표면 살균을 위해 살균액은 1% sodium hypochlorite(차아염소산나트륨용액)을 사용하였으며, 상추 잎을 살균액에 담그어 15분간 정치한 후 멸균 증류수로 3~4회 헹구었다. 표면 살균된 상추는 가로, 세로 3mm~4mm의 크기로 잘라 사용하였다.
96웰플레이트(well plate)의 대조구 웰(well)에 멸균된 페트리디시 브로스(PD broth)를 100㎕씩 로딩(loading)하고, 균핵 병원균(Sn, Sclerotinia nivalis) 100㎕ , 시제품의 약해를 확인하기 위해 시제품 #10의 1/1000 희석액 100㎕, 시험구 I(Sn; 50㎕+시제품 #9의 1/1000 희석액 100㎕), 시험구 II(Sn; 50㎕+시제품; #10의 1/1000 희석액 100㎕), 시험구 III(Sn; 50㎕+유기농업자재 병해관리용자재; 1/1000 희석액 100㎕ )대로 처리하였다.
플레이트(Plate)는 7일간 25℃, 상대습도 60~65%를 유지하여 암조건으로 정치하였다.
처리구별 7일 후 달관 조사해본 결과, 균핵 병원균에 대한 개발 시제품(#9, 10)의 항병력 효과가 1주일 이상 지속됨을 확인할 수 있었다.
[상추 잎 절편에 대한 조성물의 항병력 시험]
Figure 112016060284416-pat00006
[ 작물해충(배추 순나방)에 대한 조성물의 살충 효과 시험]
배추 순나방은 연 2~3회 발생하며, 번데기로 겨울을 지내고, 봄에 제1회 발생은 4월이며, 십자화과 채소와 담배의 순에다 알을 낳는다. 알에서 깨어난 유충은 잎의 표면을 기어다니며 갉아먹지만 2령부터 잎을 실로 묶고 그 속에서 갉아먹는데 낮에는 실로 묶은 속에서 먹고, 밤에는 기어 나와서 갉아먹는다. 5령이 되면 가해하지 않고 실로 묶은 속에 들어 있으며 황색으로 변하여 번데기가 된다. 제2회 발생은 6월에 하며, 제3회 발생은 8월에 한다. 고온에 비가 많이 오면 발생이 많아 농작물의 피해가 심하게 된다.
이러한 배추 순나방을 현장에서 채취(전남 곡성군 오산면)하여 기주식물인 배추절편(4cmx5cm)을 준비하여 인섹트 브리딩 플레이트(insect breeding plate)에 상치하였으며, 대상해충을 10마리씩 접종하여 실험하였다.
시험 시료를 500배 또는 1000배로 희석하여 대상 해충에 충분히 접촉되도록 분무살포하여 개발 시제품의 살충효과를 검정해본 결과, 1000배 희석시료 처리구에서 60%, 500배 희석시료 처리구에서 65% 정도의 살충률을 확인할 수 있었다.
Figure 112016060284416-pat00007
[배추 순나방에 대한 조성물의 살충 효과 시험]
Figure 112016060284416-pat00008
[ 작물해충(무우테두리진딧물)에 대한 조성물의 살충 효과 시험]
무테두리진딧물은 무, 배추 등 십자화과 식물에서 주로 발생하는 진딧물로 흔하게 발생한다.
여름에는 고온으로 밀도가 일시 감소하나 9월 중순에 다시 증식하여 발생이 많으며, 여름기주에서 10여 세대를 번식하다가 온도가 내려가고, 일장이 짧아지는 10월 말이 되면 유시충이 생겨 다시 겨울기주인 십자화과 잡초 등으로 날아와 여기에서 산란성 암컷이 된다.
이러한 무우테두리진딧물을 현장에서 채취(전남 곡성군 오산면)하여 기주식물인 배추절편(가로x세로, 4cmx5cm)을 준비하여 인섹트 브리딩 플레이트(insect breeding plate)에 상치하였으며, 대상해충은 처리구별 20마리씩 접종하여 실험하였다.
500배 또는 1000배로 희석하여 대상 해충에 충분히 접촉되도록 분무 살포하여 개발 시제품의 살충효과를 검정해본 결과, 1000배 희석시료 처리구에서 60%, 500배 희석시료 처리구에서 70% 정도의 살충률을 확인할 수 있었다.
[진딧물에 대한 시제품의 살충 효과 시험]
Figure 112016060284416-pat00009
[ 작물해충(오이 목화진딧물)에 대한 조성물의 살충 효과 시험]
목화진딧물(Aphis gossypii)은 고온건조에 의해 급격하게 증식하고 하우스 재배에서는 연간 발생이 지속된다. 기주범위가 넓어 채소 외에도 많은 작물을 흡즙하여 생육을 저하시키며 각종 바이러스를 매개한다.
충남 천안시 서북구 입장면 오이재배시설(사양토)에서 발생한 목화진딧물을 대상으로 병해충방제조성물 처리 전 및 처리 3, 7일 후 20엽에 대한 생충수를 조사하여 약효검증을 한 결과, 처리 후 3일차에는 무처리 대비 68.5%의 방제가를 보였으며, 처리후 7일차에는 62.3% 방제가를 확인할 수 있었다.
○ 오이 목화진딧물에 대한 약제방제 효과(약제처리후 3일차)
시험약제
약제처리전밀도(마리)

생충률(%)
유의차
(DMRT)
방제가(%)

I 반복 Ⅱ반복 Ⅲ반복 평 균
조성물 350.7 39.4 39.7 45.9 41.7 b 68.5
무처리 365.7 136.4 12.8 131.2 132.1 a -
C.V.(%) ……………………………… 4.9
○ 오이 목화진딧물에 대한 약제방제 효과(약제처리후 7일차)
시험약제
약제처리전밀도(마리)

생충률(%)
유의차
(DMRT)
방제가(%)

I 반복 Ⅱ반복 Ⅲ반복 평 균
조성물 350.7 64.1 57.5 72.0 64.6 b 62.3
무처리 365.7 187.1 157.3 169.6 171.3 a -
C.V.(%) …………………………………8.4
[가로수 이팝나무 녹병에 대한 조성물의 약효 시험 ]
이팝나무에서 녹병은 5월 상순부터 잎 앞면에 노란 원형 병반이 나타나며, 병반 위에는 작은 흑갈색 점(녹병 정자기)이 형성되어 끈적덩이(녹병정자)가 흘러나온다. 5월 중순 ~6월 하순에 털 모양 돌기(녹포자기)가 병반 뒷면에 무리지어 나타나고, 녹포자기가 성숙하면 그 안에서 엷은 주황색 가루(녹포자)가 터져 나온다.
이팝나무 녹병 방제시험을 위한 장소는 피해가 심한 전남 강진군 성전면 영풍리 무위사 가로수를 대상으로 방제 현장 실증시험을 실시하였다.
현장 약효시험은 대조구 포함 5본을 선정 3반복으로 배치한 다음 시작일로부터 일주일 간격으로 4번 살포하였다.
병해충 방제조성물 처리 전 및 처리 후 400엽에 대한 생충수를 조사하여 약효검증을 실시한 결과, 처리후 3주 이후에 무처리구 대비 70%의 방제가를 보였으며, 처리 완료 후 80% 방제가를 확인할 수 있었다.
또한 병해충방제 조성물의 약해검증은 기준량 2배 이상을 처리하였을 때 발생되지 않았음을 확인할 수 있었다.
○가로수 이팝나무 녹병에 대한 약효 ㆍ약해 효과
시비 차 대조구 병해충방제조성물
0차
Figure 112016060284416-pat00010
Figure 112016060284416-pat00011
2차
Figure 112016060284416-pat00012
Figure 112016060284416-pat00013
4차
Figure 112016060284416-pat00014
Figure 112016060284416-pat00015
상술하는 바와 같이 실시예 및 실험예에 기술하는 바와 같이, 본 발명은 녹나무를 분말화하여 에탄올용매에 혼합하여 전처리과정에서 추출물을 생성하고 이 추출물에서 추출액을 분리하여 감압농축시스템에서 감압농축한 녹나무농축추출액에 계피오일 또는 님오일, 레몬그라스오일, 유칼립투스오일 등을 계면활성제와 교반하고 정제수와 회화나무추출물 투입하여 병해충방제 조성물을 제조하여 식물병원균(균핵병원균, 피튬마름병, 벼잎집무늬마름병원균, 벼도열병원균, 잿빛곰팡이병원균, 이팝나무 녹병균)에 대한 항진균효과와 딸기꽃받침절편 및 상추잎절편에 대한 항병력효과와 배추순나방 및 진딧물에 대한 살충효과를 갖도록 하는 것이다. 또한 가로수에 식재되어있는 이팝나무 녹병에 대한 약해반응은 없으면서 약효 방제가가 80%의 수준에 달하는 조성물에 관한 것이다.
이상에서 설명된 본 발명에 따른 실시예는 예시적인 것에 불과하며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 타 실시예가 가능하다는 점을 잘 알 수 있을 것이다. 그러므로 본 발명은 상세한 설명에서 언급되는 형태로만 한정되는 것은 아님을 잘 이해할 수 있을 것이다.
따라서 본 발명의 진정한 기술적 보호범위는 첨부된 특허청구범위의 기술적 사상에 의해 정해져야 할 것이다. 또한, 본 발명은 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 정신과 그 범위 내에 있는 모든 변형물과 균등물 및 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

Claims (7)

  1. 녹나무의 잎, 뿌리, 가지를 건조하여 분말화시킨 분말물을 준비하는 단계와;
    상기 분말물을 에탄올용매에 혼합하고, 진탕배양기(shaking incubator)에서 인큐베이션(incubation)하여 제1추출물을 생성하는 단계와;
    상기 추출물에서 거즈와 여과지(filter-paper)로 추출액과 분쇄물찌꺼기를 분리하여 제2추출물을 생성하는 단계와;
    상기 추출액을 감압농축시스템(rotary evaporator)이용하여 농축하여 상기 제2추출물의 최종부피가 1/10정도였을 때 농축과정을 중지하여 녹나무농축추출액을 생성하는 단계와;
    상기 녹나무농축추출액에 계피유와, 님오일과, 계면활성제를 투입하여 24시간 교반후, 증량제인 정제수를 혼합하여 2시간동안 2차교반하고 회화나무추출물을 투입하여 2시간 교반하여 병해충방제 조성물을 제조하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 녹나무 및 회화나무의 추출물을 유효성분으로 함유하는 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 분말 200g씩 2l캡병에 넣고, 최종 부피(final vol)가 2ℓ 되도록 에탄올 용매를 혼합하는 것을 특징으로 하는 녹나무 및 회화나무의 추출물을 유효성분으로 함유하는 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법.
  3. 삭제
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 인큐베이션(incubation)하여 제1추출물을 생성하는 단계에서 상기 분말물을 에탄올용매에 잘 섞이도록 흔들어주어 혼합하고, 온도를 50∼65℃로 설정하고, 진탕배양기(shaking incubator)를 150rpm으로 셋팅(setting)하여 23∼25시간동안 인큐베이션(incubation)하는 것을 특징으로 하는 녹나무 및 회화나무의 추출물을 유효성분으로 함유하는 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 감압농축시스템(rotary evaporator)의 히팅 배쓰 온도(heating bath temp)는 40~60℃이고, 서큘레이션 온도 (circulation temp)는 8∼11℃인 것을 특징으로 하는 녹나무 및 회화나무의 추출물을 유효성분으로 함유하는 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법.
  6. 제 5항에 있어서,
    녹나무농축추출액은 녹나무분말 시료 200g에 추출용매 에탄올 1,800㎖를 혼합하여 인큐베이션, 추출분리하여 1,700㎖의 녹나무추출액을 생성하여 상기 녹나무추출물을 감압농축시스템으로 감압농축하여 녹나무농축추출액을 150㎖를 생성하는 것을 특징으로 하는 녹나무 및 회화나무의 추출물을 유효성분으로 함유하는 병해충방제가 동시에 가능한 조성물 제조방법.
  7. 삭제
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