KR20100017112A - 젬시타빈의 제조 방법 - Google Patents

젬시타빈의 제조 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20100017112A
KR20100017112A KR1020097024035A KR20097024035A KR20100017112A KR 20100017112 A KR20100017112 A KR 20100017112A KR 1020097024035 A KR1020097024035 A KR 1020097024035A KR 20097024035 A KR20097024035 A KR 20097024035A KR 20100017112 A KR20100017112 A KR 20100017112A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
deoxy
difluorocytidine
protected
gemcitabine
anomer
Prior art date
Application number
KR1020097024035A
Other languages
English (en)
Inventor
리어 젤리코비치
오데드 프리드만
타미르 피지츠키
조세프 마나스쿠
Original Assignee
케마지스 리미티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 케마지스 리미티드 filed Critical 케마지스 리미티드
Publication of KR20100017112A publication Critical patent/KR20100017112A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

본 발명은 젬시타빈 또는 이의 염의 제조 방법으로서, 바람직하게는 3',5'-디-O-보호된-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 β-아노머를 선택적으로 침전시키는 단계, 상기 보호기를 제거하여 젬시타빈을 생성하는 단계, 및 임의로 상기 젬시타빈을 염으로 전환시키는 단계를 포함하는 제조 방법을 제공한다. 바람직하게는, 상기 3' 및 5' 보호기는 동일하거나 상이하며, 상기 3' 및 5' 보호기 중 1 이상이 신나모일, 나프토일, 나프틸메틸카르보닐, 2-메틸벤질카르보닐, 4-메틸벤질카르보닐 또는 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐이다. 또한, 3',5'-디-O-보호된-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 예를 들어 N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로-시티딘-3',5'-디에스테르, 예를 들어 3',5'-디신나모일-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 아노머 혼합물로부터 슬러리화 공정을 이용하여 β-아노머를 농후화하는 방법, 및 상기 β-아노머가 농후한 생성물을 젬시타빈 또는 이의 염으로 전환시키는 방법이 제공된다.

Description

젬시타빈의 제조 방법{GEMCITABINE PRODUCTION PROCESS}
일라이 릴리(Eli Lilly)로부터 상품명 Gemzar®로 시판되는 젬시타빈 HCl은 항암 활성을 나타내고 대사길항 물질로서 알려진 화학요법 약물의 일반적인 군에 속하는 뉴클레오시드 동족체이다. 젬시타빈은 핵산의 합성을 방해함으로써 세포가 DNA 및 RNA를 생성하는 것을 방지하고, 이로써 암 세포의 성장을 방해하며 이의 체내에서의 성장 및 전이를 늦춘다. 젬시타빈은 시토신의 합성 글루코시드 동족체이며, 이는 4-아미노-1-(2-데옥시-2,2-디플루오로-β-D-리보푸라노실)-피리미딘-2(1H)-온 또는 2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 (β 이성질체)로서 화학적으로 기술된다. 젬시타빈 HCl은 하기 구조를 가진다:
Figure 112009070794381-PCT00001
Gemzar®은 살균 동결 건조된 분말로서 아세트산나트륨(각각 12.5 mg 또는 62.5 mg) 및 만니톨(각각 200 mg 또는 1 g)로 제형화되는 200 mg 또는 1 g의 젬시타빈 HCl(유리 염기와 등가)을 함유하는 살균 형태의 정맥내 사용을 위한 염산염으로서 바이알로 공급된다. 염산 및/또는 수산화나트륨은 pH 조절용으로 첨가될 수 있다.
U.S. 특허 4,808,614호('614 특허)는 젬시타빈의 합성 제조 방법을 기술하며, 이는 일반적으로 하기 반응식 1에 예시된다.
Figure 112009070794381-PCT00002
D-글리세르알데히드 케탈 2는 활성 아연의 존재 하에 브로모디플루오로아세트산 에틸 에스테르 (BrCF2COOEt)와 반응하여 3-R 및 3-S 이성질체의 혼합물로서 에 틸 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트 3를 산출한다. 3-R 대 3-S 이성질체 비율을 약 3:1이다. 3-R 이성질체는 소정의 에리트로 (3-R) 리보스 구조를 생성하는 데 필요한 입체화학을 보유하며, 크로마토그래피에 의해 3-S 이성질체로부터 분리될 수 있다.
생성된 생성물은 산성 이온 교환 수지, 예컨대 Dowex 50W-X12 처리에 의해 고리화되어 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-에리트로-펜탄산-γ-락톤 4를 산출한다. 락톤의 히드록시기는 tert-부틸디메틸실릴(TBDMS) 보호기에 의해 보호되어 보호된 락톤 3,5-비스-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-데스옥시-2,2-디플루오로-1-옥소리보스 5를 산출하고, 상기 생성물은 환원되어 3,5-비스-(tert-부틸디메틸실릴)-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보스 6를 산출한다.
탄수화물의 1번 위치는 이탈기, 예를 들어 화합물 6를 메탄설포닐 클로라이드와 반응시켜 3,5-비스-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-1-메탄설포닐옥시-2-데스옥시-2,2-디플루오로리보스 7를 산출함으로써 형성되는 메탄설포닐옥시(메실레이트)의 도입에 의해 활성화된다. 상기 염기 고리는 반응 개시제, 예를 들어 트리플루오로메탄설포닐옥시 트리메틸실란(트리메틸실릴 트리플레이트)의 존재 하에 화합물 7의 N,O-비스-(트리메틸실릴)-시토신 8과의 반응에 의해 탄수화물에 커플링된다. 보호기의 제거 및 크로마토그래피 정제로 젬시타빈 유리 염기를 얻을 수 있다.
U.S. 특허 4,526,988호는 알킬 3-디옥솔라닐-2,2-디플루오로-3-히드록시-프로피오네이트를 온건한 산성 이온 교환 수지에 의해 가수분해시켜 고리화를 실시하는 유사한 방법을 기술한다. 문헌[Hertel et al. in J Org. Chem. 53, 2406 (1998)] 참조.
U.S. 특허 4,965,374호('374 특허)에는 하기 화학식의 중간 3,5-디벤조일 리보 보호된 락톤으로부터 젬시타빈을 제조하는 방법이 기술되어 있다:
Figure 112009070794381-PCT00003
여기서 상기 소정의 에리트로 이성질체는 에리트로 및 트레오 이성질체의 혼합물로부터 결정형으로 단리될 수 있다. '374 특허에서 기술되는 방법은 일반적으로 반응식 2로 약술된다.
Figure 112009070794381-PCT00004
화합물 3의 3-히드록시기를 3차 아민 또는 촉매, 예컨대 4-디메틸아미노피리딘 또는 4-피롤리디노피리딘의 존재 하에 염화벤조일, 브롬화벤조일, 시안화벤조일, 아지드벤조일 등(예를 들어, PhCOX, 여기서 X = Cl, Br, CN 또는 N3)과 반응시켜 벤조일 보호기에 의해 에스테르화시킴으로써 에틸 2,2-디플루오로-3-벤조일옥시-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트 9를 수득한다.
9의 이소알킬리덴 보호기를, 예를 들어 에탄올 중 농축 황산과 같은 강산을 이용하여 선택적으로 제거함으로써 에틸-2,2-디플루오로-3-벤조일옥시-4,5-디히드록시펜타노에이트 9A를 생성한다. 생성물을 락톤 10으로 고리화시키고 디벤조에이트 에스테르로 전환시켜 에리트로 및 트레오 이성질체들의 혼합물로서 락톤 2-데옥시-2,2-디플루오로펜토푸라노스-1-울로스-3,5-디벤조에이트 11를 생성한다. '374 특허는 선택적 침전에 의해 혼합물로부터 에리트로 이성질체의 적어도 일부를 단리시키는 것을 기술한다. 또한, 문헌[Chou et al., Synthesis, 565-570, (1992)] 참조.
이어서, 화합물 11은 환원되어 2-데스옥시-2,2-디플루오르펜토푸라노스-디벤조에이트 12의 α 및 β 아노머들의 혼합물을 산출하며, 이는 메탄 설포닐클로라이드에 의해 활성화되어 메실레이트, 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노실-3,5-디-O-벤조일-1-O-β-메탄설포네이트 13의 아노머 혼합물을 산출하고, N,O-비스(트리메틸실릴)-시토신 8과 커플링되어 α- 및 β-아노머들의 혼합물(약 1:1 α/β 아노머 비율)과 같은 디벤조에이트 에스테르로서 실릴 보호된 뉴클레오시드를 산출한다. 에스테르 및 실릴 보호기를 제거하여 β-아노머(젬시타빈) 및 α-아노머(약 1:1 α/β 아노머 비율)의 혼합물을 제공한다. '374 특허에는 아노머 혼합물의 염, 예를 들어 염산염 또는 브롬화수소산염을 형성함으로써 β-아노머(젬시타빈)을 선택적으로 단리시키는 것, 및 선택적으로 침전시켜 1:4 α/β 비율의 염으로서 2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘을 수득하는 것이 기술되어 있다. '374 특허에는 약간 염기성인 수용액 중 유리 염기 형태로 β-아노머를 선택적으로 침전시키는 것이 또한 기술되어 있다. 이러한 하나의 방법은 상기 1:1 α/β 아노머 혼합물을 산성 수(pH를 2.5∼5.0로 조절함)에 용해시키는 것을 포함하며, 상기 혼합물이 실질적으로 용해되자마자 pH를 7.0∼9.0로 증가시키고, 상기 용액이 냉각되도록 하여 결정을 생성하고, 이를 여과에 의해 단리시켰다.
U.S. 특허 5,521,294호('294 특허)에는 1-알킬설포닐-2,2-디플루오로-3-카르바모일 리보스 중간생성물 및 이로부터 유도된 중간 뉴클레오시드가 기술되어 있다. 상기 화합물은 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-β-시티딘 및 기타 β-아노머 뉴클레오시드 제조에 유용한 것으로 공지되어 있다. '294 특허는 특히 디플루오로리보스 중간생성물 상의 3-히드록시 카르바모일기가 소정의 β-아노머 뉴클레오시드 유도체의 형성을 증대시킬 수 있다는 것을 교시한다. '294 특허에는 락톤 4를 디벤조일 메실레이트 13으로 전환시킨 후, 3번 위치에서 탈보호시켜 5-모노벤조일 메실레이트 중간생성물 15을 산출하고, 이는 다양한 이소시아네이트와 반응하여 화학식 16의 화합물을 산출한다. 이후 단계는 상기 특허에서 기술된 것과 유사한 방법을 이용한 커플링 및 탈보호를 포함한다. 상기 방법 및 중간생성물 15 및 16은 하기 반응식 3에 의해 예시된다:
Figure 112009070794381-PCT00005
알킬설포네이트 중간생성물의 아노머 혼합물들의 분리 방법이 또한 기술되어 있다. U.S. 특허 5,256,797호 및 4,526,988호에는 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노실-1-알킬설포네이트의 아노머를 분리하는 방법이 기술되어 있으며, U.S. 특허 5,256,798호에는 α-아노머 농후한 리보푸라노실 설포네이트를 얻는 방법이 기술되어 있다.
젬시타빈 제조에 유용할 수 있는 기타 중간생성물이 개시되었다. 예를 들어, U.S. 특허 5,480,992호에는 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노실-3,5-디-O-벤조일-1-O-β-메탄설포네이트를 아지드 친핵체, 예컨대 리튬 아지드와 반응시켜 아지드를 수득함으로써 제조할 수 있는 2,2-디플루오로리보실 아지드 및 상응하는 아민 중간생성물의 아노머 혼합물이 기술되어 있다. 아지드의 환원은 상응하는 아민을 생성하고, 이는 뉴클레오시드로 합성 전환될 수 있다. 또한, U.S. 특허 5,541,345호 및 5,594,155호 참조.
기타 공지된 중간생성물로는, 예를 들어 트리틸화된 중간생성물(U.S. 특허 5,559,222호), 2-데옥시 2,2-디플루오로-β-D-리보-펜토피라노스(U.S. 특허 5,602,262호), 2-치환된-3,3-디플루오로푸란 중간생성물(U.S. 특허 5,633,367호) 및 α,α-디플루오로-β-히드록시 티올 에스테르(U.S. 특허 5,756,775호 및 5,912,366호)를 들 수 있다.
WO 2007/027564호(이후, '564 출원)에는 젬시타빈 또는 이의 염의 제조 방법이 기술되어 있으며, 이는 N4-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로-시티딘-3',5'-디에스테르를 이의 아노머 혼합물로부터 분리하는 것; 3'-에스테르, 5'-에스테르 및 N-보호기를 제거하는 것; 및 임의로 염을 형성하는 것을 포함한다. 3'-에스테르 및 5'-에스테르로는 신나모일, 나프토일, 나프틸메틸카르보닐, 2-메틸벤질카르보닐, 4-메틸벤질카르보닐 및 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐 에스테르를 들 수 있다. '564 출원은 또한 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-에리트로-펜토푸라노스-1-울로스-3,5-디에스테르 중간생성물 및 이러한 중간생성물의 제조 방법이 기술되어 있다.
젬시타빈의 제조, 구체적으로 산업적 규모 상에서 문제가 되는 경향이 있는 이성질체의 제조 및 분리를 필요로 하는 방법과 연관된 고유의 문제가 존재한다. 따라서, 특히 산업적 규모 상에서 젬시타빈의 제조를 촉진시키는, 젬시타빈 및 이의 중간생성물의 향상된 제조 방법이 필요하다. 본 발명은 이러한 방법을 제공한다.
발명의 개요
본 발명은 젬시타빈 또는 이의 염의 제조 방법을 제공하며, 이는 바람직하게는 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디-O-보호된-시티딘의 아노머 혼합물로부터 β-아노머를 선택적으로 침전시키는 단계, 보호기를 제거하여 젬시타빈을 생성하는 단계, 및 임의로 상기 젬시타빈을 염으로 전환시키는 단계를 포함한다. 본 발명의 방법에서 출발 물질로서 사용되는 N4-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디-O-보호된-시티딘은 N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디-O-보호된-시티딘인 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 전구체로서 젬시타빈과 같이 사용될 수 있는 N4-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디-O-보호된-시티딘의 예로는 화학식 17(반응식 4)의 화합물을 들 수 있으며, 여기서 R 및 R'은 동일하거나 상이하며 R 또는 R' 중 1 이상이 페닐, 2-페닐에테닐(이로써, 신나모일 에스테르 형성), 1-나프틸, 1-나프틸메틸, 2-메틸벤질, 2-메틸벤질 또는 4-메틸벤질이다. 본 발명의 예시적 방법은 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 아노머 혼합물로부터 β-아노머를 선택적으로 침전시키는 단계, 3' 및 5' 보호기를 제거하여 젬시타빈을 생성하는 단계, 및 임의로 상기 젬시타빈을 염(예를 들어, 젬시타빈 염산염)으로 전환시키는 단계를 포함한다.
N4-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디-O-보호된-시티딘 전구체가 임의의 적합한 방법으로 합성될 수 있다. 한 실시양태에서, 본 발명은 화학식 12A의 락톨로부터 젬시타빈을 제조하는 방법을 제공하며, 이는 바람직하게는
(a) 락톨 12A를 염기의 존재 하에 p-톨루엔설포닐 클로라이드(염화토실)와 반응시켜 화학식 13A의 토실레이트 중간생성물을 수득하는 단계;
(b) 화학식 13A의 화합물을 임의로 촉매의 존재 하에 유기 용매 중 N,O-비스-(트리메틸실릴)-시토신와 커플링시켜 3',5'-디-보호된-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 17의 α 및 β 아노머의 혼합물을 수득하는 단계;
(c) 트리메틸실릴기를 제거하고 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디-O-보호된-시티딘의 β-아노머를 선택적으로 침전시켜, 상기 두개의 이성질체를, 예를 들어 여과에 의해 분리되게 하는 단계;
(d) 상기 에스테르 보호기를, 예를 들어 가수분해에 의해 제거하여 젬시타빈을 수득하는 단계;
(e) 임의로 상기 젬시타빈을 이의 염으로 전환시키는 단계; 및
(f) 임의로 상기 젬시타빈 염을, 결정화에 의해 추가 정제하는 단계
를 포함한다.
따라서, 본 발명은 화학식 12A를 갖는 2-데스옥시-2,2-디플루오로펜토푸라노스-디에스테르(예를 들어, 2-데스옥시-2,2-디플루오로펜토푸라노스-디신나메이트)로부터 높은 순도 및 수율로 젬시타빈 또는 이의 염을 수득하는 방법을 제공한다. 화합물 2-데스옥시-2,2-디플루오로펜토푸라노스-디신나메이트는 본 발명에 따라 통상의 유기 용매(예를 들어, 에틸 아세테이트)을 사용하여 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 고순도 β-이성질체를 합성 및 수득하는 데 특히 유용한 중간생성물이다.
한 실시양태에서, 커플링 반응은 용매, 예컨대 1,2-디클로로에탄에서 실시된다. 임의로, 상기 커플링 반응은 적합한 촉매 시약, 예컨대 트리메틸실릴 트리플레이트(Me3SiOTf)의 존재 하에 반응을 실시함으로써 촉진시킬 수 있다.
예를 들어 가수분해 조건, 예컨대 염기성 가수분해, 예를 들어 트리메틸실릴기를 제거하기 위한 중탄산나트륨(NaHCO3)의 수용액 및 에스테르기를 제거하기 위한 메탄올 중 약 16% 암모니아를 포함할 수 있는 임의의 적합한 조건을 적용하여 보호기를 제거할 수 있다.
본 발명의 한 실시양태에서, 중탄산나트륨의 수용액에 의한 처리에 의해 N4-트리메틸실릴 보호기를 제거한 후 에틸 아세테이트로부터 미정제 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘을 침전시킴으로써 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 β:α 아노머 혼합물을 약 73:12 혼합물로 하여 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 β-아노머를 직접 주로 산출할 수 있다. 중탄산나트륨의 농축 수용액으로 처리하여 N4-트리메틸실릴 보호기를 제거한 후에 출발 물질 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노스-3,5-디신나메이트-1-p-톨루엔설포네이트의 양과 관련하여 적은 부피의 에틸 아세테이트로부터 미정제 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘을 침전시켜 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 α:β-아노머 혼합물을 높은 수율, 예를 들어 99.9%로 생성할 수 있다. 따라서, 본 발명은 선택적 침전에 의한 3,5-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 β-아노머의 분리 방법을 제공한다. 바람직하게는, 상기 선택적 침전 방법은
(a) 3,5-디-보호된-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 미정제 혼합물을 유기 용매에 용해시키고 물로 추출하는 단계;
(b) 염기를 함유하는 수용액을 유기상에 첨가하여, 임의로 혼합과 함께 침전물을 생성하는 단계;
(c) 예를 들어, 여과에 의해 침전물을 수집하는 단계; 및
(d) 임의로 상기 침전물을, 예를 들어 유기 용매로 세척하고, 예를 들어 고온에서 건조시키는 단계
를 포함한다.
본 발명은 3',5'-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 β-아노머의 함량을 농후하게 하는 방법을 제공하며, 이러한 방법은 바람직하게는
(a) 3,5-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘을 유기 용매에서 슬러리화하는 단계;
(b) 상기 고체를, 예를 들어 여과에 의해 수집하는 단계;
(c) 임의로 상기 고체를, 예를 들어 유기 용매로 세척하는 단계; 및
(d) 임의로, 예를 들어 고온에서 건조시키는 단계
를 포함한다.
본 발명에 따라서, 3',5'-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘(예를 들어, 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘)은 고수율로, 예를 들어 약 98% 이상의 수율로 수득할 수 있다. 본 발명에 따라서, 젬시타빈 또는 이의 염은 약 99% 이상, 바람직하게는 약 99.5% 이상, 더욱 바람직하게는 약 99.9% 이상의 순도로 수득된다.
발명의 상세한 설명
본 발명은 적어도 부분적으로 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디-O-보호된-시티딘 전구체의 β-아노머(예를 들어, β-아노머가 농후한 생성물)를 '역' 침전시킴으로써, 즉, 아노머 혼합물로부터 β-아노머를 선택적으로 침전시킴으로써 수득할 수 있다는 놀라운 발견을 기초로 한다. 본 발명의 선택적 침전 방법은 정제 공정에서의 용매 및 용매 부피를 조절함으로써 실시할 수 있다. '564 출원에서 확인되는 바와 같이, 미정제 3'5'-디-보호된-N4-트리메틸실릴아세틸-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 예를 들어 N4-트리메틸실릴아세틸-2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘은 디클로로에탄과 메탄올의 혼합물로부터 결정화되어 N4-트리메틸실릴아세틸-2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 α-아노머를 산출할 수 있으며, 남은 액체를 농축 건조시켜 N4-트리메틸실릴아세틸-2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 미정제 β-아노머를 수득한다.
그러나, 본 출원인은 N4-트리메틸실릴기를 중탄산나트륨의 수용액으로 처리하여 제거한 후 미정제 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 예를 들어 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘을 에틸 아세테이트로부터 침전시킴으로써, 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 미정제 β-아노머를, 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 β:α 아노머 혼합물을 약 73:12의 혼합물로 함유하는 침전물로서 직접 수득할 수 있다는 것을 확인하였다(실시예 2 참조). N4-트리메틸실릴기를 중탄산나트륨의 농축 수용액으로 처리하여 제거한 후에, 출발 물질 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노스-3,5-디신나메이트-1-p-톨루엔설포네이트의 양에 비하여 적은 부피의 에틸 아세테이트로부터 미정제 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘을 침전시키는 것은 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 α:β 아노머 혼합물(약 43:52 α:β)을 고수율로 산출할 수 있으며(실시예 3 참조), 이는, 예를 들어 본 발명에 따른 선택적('역') 침전에 의해 β 아노머를 수득하기 위한 용이한 전구체로서 사용될 수 있다는 것이 또한 확인되어 있다.
바람직한 실시양태에서, 본 발명은 젬시타빈 또는 이의 염의 제조 방법을 제공하고, 이는 바람직하게는 화학식 18의 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 β-아노머(여기서, R 및 R'은 동일하거나 상이하고 R 및 R' 중 1 이상은 페닐, 2-페닐에테닐(이로써 신나모일 에스테르 형성), 1-나프틸, 1-나프틸메틸, 2-메틸벤질, 2-메틸벤질 또는 4-메틸벤질임)를 선택적으로 침전시키는 단계, 보호기를 제거하여 젬시타빈을 생성하는 단계, 및 임의로 상기 젬시타빈을 염으로 전환시키는 단계를 포함한다. 본 발명의 방법은 고순도의 젬시타빈을 수득하는 데 용이하게 이용될 수 있고, 본 발명에 따라 사용되는 전구체는 용이하게 합성될 수 있다. 본 발명에 따른 젬시타빈의 예시적인 제조 방법은 하기 반응식 4에 상술되어 있다.
Figure 112009070794381-PCT00006
따라서, 젬시타빈은
(a) 염기의 존재 하에 락톨 중간생성물 12A를 p-톨루엔설포닐 클로라이드(염화토실)와 반응시켜 화학식 13A의 설포네이트 중간생성물을 얻는 단계;
(b) 상기 화학식 13A의 화합물을 바람직하게는 상온에서 유기 용매 중 촉매를 이용하여 N,O-비스-(트리메틸실릴)시토신과 커플링시켜 3',5'-디-보호된-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 17의 α 및 β 아노머의 혼합물을 얻는 단계;
(c) 트리메틸실릴기를 제거하고, 3',5'-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 β-아노머를 선택적으로 침전시키며, β-아노머를, 예를 들어 여과에 의해 단리시키는 단계;
(d) 보호기를, 예를 들어 가수분해에 의해 제거하여 젬시타빈을 얻는 단계;
(e) 임의로 상기 젬시타빈을 이의 염으로 전환시키는 단계; 및
(f) 임의로 상기 젬시타빈 염을, 예를 들어 결정화에 의해 정제시키는 단계
를 포함하는 방법에 의해 화학식 12A의 락톨로부터 제조할 수 있다.
따라서, 본 발명은 하기 화학식 12A를 갖는 2-데스옥시-2,2-디플루오로펜토푸라노스-디에스테르(예를 들어, 2-데스옥시-2,2-디플루오로펜토푸라노스-디신나메이트)로부터 젬시타빈 또는 이의 염을 높은 순도 및 수율로 용이하게 수득하는 방법을 제공한다. 화합물 2-데스옥시-2,2-디플루오로펜토푸라노스-디신나메이트는 본 발명에 따라 통상적으로 사용되는 유기 용매(예를 들어, 에틸 아세테이트)를 이용하여 고순도의 β-이성질체를 수득할 수 있는 높은 수율의 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘을 얻는 데 특히 유용한 중간생성물이다.
본 발명은 하기 화학식 13A의 신규한 설포네이트 중간생성물을 제공한다:
Figure 112009070794381-PCT00007
상기 식 중, R 및 R'은 동일하거나 상이하고, R 및 R' 중 1 이상은 페닐, 2- 페닐에테닐(이로써 신나모일 에스테르를 형성함), 1-나프틸, 1-나프틸메틸, 2-메틸벤질, 2-메틸벤질 또는 4-메틸벤질, 예를 들어 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노스-3,5-디신나메이트-1-p-톨루엔설포네이트이다.
예를 들어, 반응식 4에서 도시된 바와 같은 커플링 반응은 임의의 적합한 용매에서 실시할 수 있으며, 이는 아세토니트릴, 에틸 아세테이트, n-부틸 아세테이트, 클로로포름, 1,2-디클로로-에탄, 톨루엔, 크실렌 등 및 이의 혼합물로부터 선택된 1 이상의 유기 용매를 포함할 수 있다. 한 실시양태에서, 상기 커플링 반응은 1,2-디클로로에탄에서 실시된다. 임의로, 상기 커플링 반응은, 예를 들어 트리메틸실릴 트리플레이트(Me3SiOTf)와 같은 적합한 촉매 시약을 사용하여 촉진시킬 수 있다.
보호기의 제거는 임의의 적합한 조건을 적용하여 실시할 수 있으며, 이는, 예를 들어 가수분해 조건, 예를 들어 염기성 가수분해, 예를 들어 트리메틸실릴기의 제거를 위한 중탄산나트륨(NaHCO3)의 수용액 및 에스테르기의 제거를 위한 메탄 올 중 약 16% 암모니아를 포함할 수 있다.
미정제 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘을 에틸 아세테이트로부터 침전시켜 약 73:12 β:α 아노머 혼합물로 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 β-아노머를 직접 주로 산출할 수 있다. 한편, 출발 물질 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노스-3,5-디신나메이트-1-p-톨루엔설포네이트의 양에 비하여 적은 부피의 에틸 아세테이트로부터 미정제 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘을 침전시킴으로써, 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘의 α:β 혼합물을 고수율로, 예를 들어 99.9% 수율로 용이하게 산출할 수 있으며, 이는 β-아노머를 수득하기 위한 전구체로서 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명은 β-아노머를 3',5'-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 아노머 혼합물로부터 선택적 침전 방법에 의해 분리하는 방법을 제공하며, 이는 바람직하게는
(a) 3',5'-디-보호된-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 미정제 혼합물을 유기 용매에 용해시키고 물에 의해 추출하는 단계;
(b) 상기 유기상에 염기를 함유하는 수용액을 첨가하여 임의로 혼합시키면서 침전물을 생성하는 단계;
(c) 상기 침전물을, 예를 들어 여과에 의해 수집하는 단계; 및
(d) 임의로 상기 침전물을, 예를 들어 유기 용매에 의해 세척하고, 예를 들어 고온에서 건조시키는 단계
를 포함한다.
3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 침전에 사용될 수 있는 적합한 유기 용매로는, 예를 들어 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸 아세테이트, 1-프로필 아세테이트, 2-프로필 아세테이트, 부틸 아세테이트, tert-부틸 아세테이트, o-크실렌, m-크실렌, o-디클로로벤젠, 톨루엔 등, 및 이의 혼합물을 들 수 있다. 3',5'-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 β-아노머를 침전시키는 데 바람직한 용매로는 에틸 아세테이트가 있다.
본 발명의 방법에 사용될 수 있는 적합한 염기로는, 예를 들어 탄산나트륨, 중탄산나트륨, 탄산칼륨, 중탄산칼륨 등을 들 수 있다. 바람직한 염기로는 중탄산나트륨이 있다.
또다른 실시양태에서, 본 발명은 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 아노머 혼합물로부터(예를 들어, 3',5'-디-신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 아노머 혼합물로부터) β-아노머의 함량을 농후하게 하는 방법을 제공하며, 이러한 방법은 바람직하게는
(a) 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘(예를 들어, 3',5'-디-신나모일-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘)을 유기 용매에 슬러리화하는 단계;
(b) 상기 고체를, 예를 들어 여과에 의해 수집하는 단계;
(c) 임의로 상기 고체를, 예를 들어 유기 용매로 세척하는 단계; 및
(d) 임의로, 예를 들어 고온에서 건조시키는 단계
를 포함한다.
2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디-O-보호된-시티딘(예를 들어, 3',5'-신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘)의 아노머 혼합물을 슬러리화하여 β-아노머의 함량을 증가시키는 데 사용될 수 있는 적합한 용매로는 디클로로메탄, 에틸 아세테이트, 메탄올, 2-프로판올, 아세톤, 아세토니트릴 등, 및 이의 혼합물을 들 수 있다.
슬러리화 공정 중 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디-O-보호된-시티딘(예를 들어, 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘) 및 용매의 비율은, 바람직하게는 약 1:1 (g/ml) 이상, 더욱 바람직하게는 약 1:10 (g/ml) 이상이다.
본 발명의 방법에 따라(예를 들어, 본 원에서 기술되는 β-아노머의 선택적 침전에 대해서), 예시적 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 전구체로는, 예를 들어 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디나프토일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디나프틸메틸-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디-2-메틸벤질-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 및 3',5'-디-4-메틸벤질-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘을 들 수 있다. 바람직한 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 전구체로는 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘이 있다.
본 발명의 방법에 따라서(예를 들어, 본 원에서 기술되는 β-아노머의 선택적 농후화에 대해서), 예시적 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 전구체로는, 예를 들어 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디나프토일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디나프틸메틸-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디-2-메틸벤질-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 및 3',5'-디-메틸벤질-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘을 들 수 있다. 바람직한 3',5'-디-0-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 전구체로는 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘이 있다.
본 발명에 따라서, 3,5-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 예를 들어 2'-데옥시-2',2'-디플루오로-3',5'-디신나모일-시티딘은 높은 수율로, 예를 들어 약 98% 이상의 수율로 수득할 수 있다. 본 발명에 따라서, 젬시타빈 또는 이의 염은 약 99% 이상, 바람직하게는 약 99.5% 이상, 더욱 바람직하게는 약 99.9% 이상의 수율로 수득된다.
하기 실시예는 이의 일부 실시양태로 본 발명의 실시를 예시하지만, 그 실시예는 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 간주되어서는 안된다. 다른 실시양태가 본 명세서 및 실시예를 고려함으로써 당업자에게 명백하게 된다.
실시예 1
본 실시예는 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노스-3,5-디신나메이트-1-p-톨루엔설포네이트의 제조를 증명한다.
미정제 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노스-3,5-디신나메이트(2.5 g, 6 mmol)를 둥근 플라스크에서 디클로로메탄(20 ml)에 용해시키고, 디에틸아민(0.7 g, 9.6 mmol)을 첨가한 후, p-톨루엔설포닐 클로라이드(1.32 g, 6.92 mmol)를 첨가하 였으며, 이는 0∼5℃로 냉각시키면서 적가하였다. 상기 혼합물을 1 시간 동안 교반시키고, 1N HCl(15 ml), NaHCO3의 농축액(15 ml)에 의해 세척하고, MgSO4 상에서 건조시켰다. 상기 용매를 감압 하에 증류시켜 경유로서 미정제 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노스-3,5-디신나메이트-1-p-톨루엔설포네이트를 수득하였다. 산출량: 3.22 g, (5.6 mmol), 93%.
실시예 2
본 실시예는 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 제조를 증명한다.
건조 1,2-디클로로에탄(800 ml)을 질소 블랭킷 하에 N,O-비스(트리메틸실릴)-시토신(136 g, 487 mmol)에 첨가하여 맑은 용액을 생성한 후, 트리메틸실릴 트리플레이트(Me3SiOTf)(100 ml, 122.8 g, 520 mmol)를 첨가하고 30 분 동안 교반하였다. 1,2-디클로로에탄(400 ml) 중 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노스-3,5-디신나메이트-1-p-톨루엔설포네이트(128 g, 224 mmol)의 용액을 적가하고, 상기 혼합물을 밤새 환류 처리하였다. 냉각 후, 상기 용매를 증류시켜 미정제 3,5-디신나모일-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트(1600 ml)에 용해시키고, 물로 3회 세척하였다(3 x 400 ml). 에틸 아세테이트 상을 NaHCO3의 농축액(800 ml)과 함께 약 5 분 동안 혼합시킨 후, 상기 혼합물을 교반 없이 약 20 분 동안 방치하였다. 상기 두개의 층들 중 내부 상에서 침전된 상기와 같이 형성된 고체를 여과시키고, 에틸 아세테이트 60 ml로 세척하였다. 상기 고체를 감압 하에서 건조시켜 β-아노머 73.3% 및 α-아노머 11.8%를 함유하는 미정제 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 116.7 g(223 mmol, 99.5%)을 산출하였다.
실시예 3
본 실시예는 3',5'-디신나모일-2'-데옥시- 2',2'-디플루오로시티딘의 제조를 증명한다.
건조 1,2-디클로로에탄(1.5 L)을 질소 블랭킷 하에서 비스(트리메틸실릴)시토신(417 g, 1.49 mol)에 첨가하여 맑은 용액을 생성한 후, 트리메틸실릴 트리플레이트(Me3SiOTf)(300 ml, 368.4 g, 1.56 mol)를 첨가하고, 30 분 동안 교반하였다. 1,2-디클로로에탄(1.2 L) 중 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노스-3,5-디신나메이트-1-p-톨루엔설포네이트(384 g, 673 mmol)의 용액을 적가하고, 상기 혼합물을 밤새 환류 처리하였다. 냉각 후, 용매를 증류시켜 밝은 황색 고체로서 미정제 3,5-디신나모일-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘을 수득하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트(2.4 L)에 용해시키고, 물로 3회 세척하였다(3 x 1.2 L). 에틸 아세테이트 상을 NaHCO3의 농축액(1.34 L)과 함께 약 20 분 동안 혼합하였다. 상기 두개의 층들 중 내부 상에서 침전되는 상기와 같이 형성되는 고체를 여과시키고 에틸 아세테이트 180 ml에 의해 세척하였다. 상기 고체를 감압 하에 건조시켜 β-아노머 43% 및 α-아노머 52%를 함유하는 미정제 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 346.5 g(0.66 mol, 수율 99.9%)을 수득하였다.
실시예 4
본 실시예는 젬시타빈 염산염의 제조를 증명한다.
암모니아-메탄올의 용액(15.8 %, 4.57 L)에, 실시예 3의 미정제 3,5-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘(346.5 g, 0.66 mol)을 첨가하고, 상온에서 6 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 농축하여 밝은 황색 고체(306 g)를 산출하였다. 정제수(3 L)를 상기 고체에 첨가한 후, 에틸 아세테이트(1.8 L)을 첨가하고, 약 10 분 동안 교반을 유지하였다. 수성층을 분리하고 유기층을 물(1.05 L)로 추출하였다. 수성층을 배합하고, 물을 감압 하에 증발시켜 제거함으로써 오일(154.7 g)을 수득하였다. 물(660 ml)을 첨가하고, 상기 혼합물을 50∼55℃로 가열시켜 상기 고체를 용해시켰다. 혼합물을 약 1 시간 동안 5∼10℃로 냉각시키고 그 온도에서 약 16 시간 동안 혼합하였다. 이와 같이 형성된 고체를 여과시키고, 건조시켜 β-아노머 98% 및 α-아노머 1.3%을 함유하는 46.75 g(0.177 mol)을 산출하였다. 0.5N HCl(936 ml)을 첨가한 후, 교반과 함께 디클로로메탄(300 ml)을 첨가하였다. 수성상을 분리하고, 상기 수성상을 디클로로메탄(300 ml)으로 세척하였다. 여과 후에, 수성상을 감압 하에 농축 건조시켜 고체(46.9 g)로서 젬시타빈 염산염을 수득하였다. 상기 고체를 상온에서 물(187 ml)에 용해시키고, 혼합물을 50℃로 가열시켜 맑은 용액을 산출하고 실온으로 냉각시켰다. 아세톤(1.4 L)을 첨가하고, 약 1 시간 동안 교반을 유지하였다. 이어서, 침전물을 여과에 의해 수집하고, 아세톤에 의해 2회 세척하며(2 x 30 ml), 진공 하 45℃에서 건조시켜 β-아노머 99.9%를 함유하는 젬시타빈 염산염 39.2 g을 수득하였다.
실시예 5
본 실시예는 젬시타빈 염산염의 제조를 증명한다.
암모니아-메탄올의 용액(약 15.8%, 1.35 L)에, 실시예 2에서 기술된 바와 같이 제조된 미정제 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘(96 g, 183.4 mmol)을 첨가하고, 상온에서 4 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시켜 밝은 황색의 고체(80.5 g)을 산출하였다. 정제수(1 L)를 상기 고체에 첨가한 후, 에틸 아세테이트(600 ml)을 첨가하고, 약 10 분 동안 교반을 유지하였다. 수성층을 분리하고, 유기층을 물(350 ml)에 의해 추출하였다. 수성층을 배합하고, 물을 갑압 하에 증발시켜 제거함으로써 오일(46.4 g)을 산출하였다. 물(220 ml)을 첨가하고, 혼합물을 50∼55℃로 가열하여 상기 고체를 용해시켰다. 상기 혼합물을 약 1 시간 동안 0∼5℃로 냉각시키고, 그 온도에서 약 16 시간 동안 혼합하였다. 이와 같이 형성된 고체를 여과시키고, 건조시켜 젬시타빈 유리 염기 11.1 g을 산출하였다. 0.5N HCl(240 ml)을 첨가한 후, 교반과 함께 디클로로메탄(100 ml)을 첨가하였다. 수성상을 분리하고, 수성상을 디클로로메탄(300 ml)에 의해 세척하였다. 여과 후, 수성상을 감압 하에 농축 건조시켜 고체로서 젬시타빈 염산염(12.0 g)을 수득하였다. 상기 고체를 상온에서 물(48 ml)에 용해시키고, 상기 혼합물을 50℃로 가열시켜 맑은 용액을 산출하고, 상온으로 냉각시켰다. 아세톤(360 ml)을 첨가하고, 약 1 시간 동안 교반을 유지하였다. 이어서, 침전물을 여과에 의해 수집하고, 아세톤에 의해 2회 세척하며(2 x 30 ml), 진공 하에 45℃에서 건조시켜 β-아노머 99.6%를 함유하는 젬시타빈 염산염 9.9 g을 수득하였다.
실시예 6
본 실시예는 상이한 용매에서의 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 슬러리화 절차를 증명한다.
β-아노머 73.7% 및 α-아노머 17.5%를 함유하는 미정제 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 1 g을 플라스크에 투입하고, 용매 10 ml을 첨가하며, 상기 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 혼합하였다. 이어서, 고체를 여과에 의해 수득하고, 용매 5 ml로 세척하며 건조시켰다. 고체 여과 후에 수득한 액체 및 고체 세척 후에 수득한 액체를 배합하였다(이후 모액이라 함). 상기 고체 및 모액 중 β-아노머 및 α-아노머의 비율은 HPLC에 의해 측정하고, 결과는 표 1에 요약하였다.
슬러리화 용매 고체 중 β-아노머의 함량, % 고체 중 α-아노머의 함량, % ML 중 β-아노머의 함량, % ML 중 α-아노머의 함량, %
아세톤 80.1 13.6 7.9 66.0
아세토니트릴 81.3 13.6 6.8 71.8
메탄올:에틸 아세테이트 1:1 86.0 3.5 4.6 5.1
DCM:메탄올 1:1 93.9 2.8 15.4 29.8
2-프로판올 68.6 25.9 15.5 60.5
에틸 아세테이트 81.7 14.1 4.5 71.7
메탄올 80.6 5.0 0.7 0.3
DCM 85.3 11.0 18.9 64.9
DCM = 디클로로메탄, ML = 모액
본 원에서 인용된 모든 참조 문헌, 특히 공개 공보, 특허 출원 및 특허는 각각의 참조 문헌이 참조 인용되는 것으로 개별적이고 구체적으로 명시된 바와 같은 범위로, 본 원에서 이의 전체로 언급되는 것과 같은 범위로 본 원에서 참조 인용된다.
본 원의 기술과 관련하여(특히, 하기 청구의 범위와 관련하여) 단수 형태의 사용은 본 원에서 달리 명시되지 않거나 명백히 내용상 반박되지 않는 경우 단수 및 복수 모두를 포괄하는 것으로 간주되어야 한다. 용어 '포함하는', '갖는', '포괄하는' 및 '함유하는'이란 달리 주지되지 않는 한 개방형 용어(즉, '포함하나 이에 한정되지 않음'을 의미함)로서 간주되어야 한다. 본 원의 수치 범위의 언급은 단지 본 원에서 달리 언급되지 않는 한 상기 범위 내에 해당하는 각각의 개별 수치를 개별적으로 언급하는 속기 방법으로서 역할하도록 의도한 것이며, 각각의 개별 수치는 본 원에서 개별적으로 인용되는 것처럼 명세서에 인용된다. 본 원에서 기술되는 모든 방법은 본 원에서 달리 명시되거나 내용상 달리 명백하게 반박되지 않는 한 임의의 적합한 순서로 실시할 수 있다. 본 원에서 제공되는 임의의 및 모든 실시양태 또는 예시적 언어(예를 들어, '예컨대')를 사용하는 것은 단지 본 발명을 더 잘 예시하고, 달리 청구되지 않는 한 본 발명의 범위를 한정하지 않으려는 의도이다. 본 명세서의 어떠한 언어도 본 발명의 실행에 필수적인 것처럼 임의의 비청구 요소를 명시하는 것으로 간주되어서는 안된다.
본 발명을 실시하기 위해 발명자에게 공지되는 최상의 양태를 포함하는 본 발명의 바람직한 실시양태가 본 원에서 기술된다. 이러한 바람직한 실시양태의 변경예는 앞선 설명을 읽음으로써 당업자에게 명백하게 될 수 있다. 본 발명자는 당업자가 이러한 변경예를 적절하게 이용할 것으로 기대하며, 본 발명자는 본 발명이 본 원에 구체적으로 기술된 것과 달리 실시되는 것을 의도한다. 따라서, 본 발명은 현행법에 의해 허용되는 바와 같이 본 원에 첨부되는 청구의 범위에서 인용되는 본 건의 모든 수정예 및 동등예를 포함한다. 또한, 전술한 요인의 이의 모든 가능한 변경예에서의 임의의 조합은 본 원에서 달리 명시되거나 내용상 달리 명백하게 반박되지 않는 한 본 발명에 포괄된다.

Claims (23)

  1. (a) 락톨 중간생성물 12A를 염기의 존재 하에 p-톨루엔설포닐 클로라이드와 반응시켜 화학식 13A의 설포네이트 중간생성물을 수득하는 단계;
    (b) 상기 화학식 13A의 화합물을 유기 용매 중에서 촉매를 이용하여 N,O-비스-(트리메틸실릴)-시토신과 커플링시킴으로써 3',5'-디-보호된-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 17의 α 및 β 아노머의 혼합물을 얻는 단계;
    (c) 상기 트리메틸실릴기를 제거하고, 상기 3',5'-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 β 이성질체를 선택적으로 침전시키는 단계; 및
    (d) 상기 보호기를 제거하여 젬시타빈을 얻는 단계
    를 포함하는, 젬시타빈의 제조 방법.
  2. 제1항에 있어서,
    (a) 임의로 상기 젬시타빈을 염으로 전환시키는 단계; 및
    (b) 임의로 상기 젬시타빈 염을 결정화에 의해 정제하는 단계
    를 추가로 포함하는 것인 제조 방법.
  3. 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 β-아노머를 선택적으로 침전시키는 단계, 상기 보호기를 제거하여 젬시타빈을 생성하는 단계, 임의로 상기 젬시타빈을 염으로 전환시키는 단계를 포함하는, 젬시타빈 또는 이의 염의 제조 방법.
  4. 제3항에 있어서, 상기 커플링 반응은 아세토니트릴, 에틸 아세테이트, n-부틸 아세테이트, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄, 톨루엔, 1 이상의 크실렌 또는 이의 혼합물로부터 선택되는 유기 용매 중에서 실시하는 것인 제조 방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 용매는 1,2-디클로로에탄인 것인 제조 방법.
  6. 제1항에 있어서, 상기 커플링 반응은 촉매의 존재 하에 실시하는 것인 제조 방법.
  7. 제1항에 있어서, 3',5'-보호기는 염기성 가수분해에 의해 제거하는 것인 제조 방법.
  8. 하기 화학식 13A의 화합물:
    Figure 112009070794381-PCT00008
    상기 식 중, R 및 R'은 동일하거나 상이하고, R 및 R' 중 1 이상은 페닐, 2- 페닐에테닐(이로써 신나모일 에스테르를 형성함), 1-나프틸, 1-나프틸메틸, 2-메틸벤질, 2-메틸벤질 또는 4-메틸벤질이다.
  9. 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 아노머 혼합물로부터의 β-아노머의 분리 방법으로서,
    (a) 3',5'-디-O-보호된-N4-트리메틸실릴-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 미정제 아노머 혼합물을 유기 용매에 용해시키고 물에 의해 추출하는 단계;
    (b) 상기 유기상에 염기를 함유하는 수용액을 첨가하여 적어도 β-아노머가 농후한 침전물을 생성하는 단계;
    (c) 상기 침전물을 수집하는 단계; 및
    (d) 임의로 상기 침전물을 유기 용매로 세척하고 건조시키는 단계
    를 포함하는 분리 방법.
  10. 제9항에 있어서, 상기 3',5'-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘은 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디나프토일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디나프틸메틸-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디-2-메틸벤질-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 또는 3',5'-디-4-메틸벤질-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘인 것인 분리 방법.
  11. 제10항에 있어서, 상기 3',5'-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘은 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘인 것인 분리 방법.
  12. 제9항에 있어서, 상기 3',5'-디-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘을 침전시키기 위한 용매는 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸 아세테이트, 1-프로필 아세테이트, 2-프로필 아세테이트, 부틸 아세테이트, tert-부틸 아세테이트, o-크실렌, m-크실렌, o-디클로로벤젠, 톨루엔 및 이의 혼합물로부터 선택되는 것인 분리 방법.
  13. 제12항에 있어서, 상기 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘을 침전시키기 위한 용매는 에틸 아세테이트인 것인 분리 방법.
  14. 제9항에 있어서, β-아노머가 농후한 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 보호기를 제거하여 젬시타빈을 생성하는 단계, 임의로 상기 젬시타빈을 염으로 전환시키는 단계를 추가로 포함하는 것인 분리 방법.
  15. 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 아노머 혼합물로부터의 β-아노머 함량의 농후화 방법으로서,
    (a) 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 아노머 혼합물 을 유기 용매에 슬러리화하는 단계;
    (b) 상기 슬러리로부터 고체를 단리시키는 단계;
    (c) 임의로 상기 고체를 유기 용매로 세척하는 단계; 및
    (d) 임의로 상기 고체를 건조시키는 단계
    를 포함하는 농후화 방법.
  16. 제15항에 있어서, 상기 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘은 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디나프토일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디나프틸메틸-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘, 3',5'-디-2-메틸벤질-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 또는 3',5'-디-4- 메틸벤질-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘인 것인 농후화 방법.
  17. 제16항에 있어서, 상기 3',5'-디-O-보호된-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘은 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘인 것인 농후화 방법.
  18. 제17항에 있어서, 상기 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘의 아노머 혼합물을 슬러리화하는 데 사용되는 용매는 디클로로메탄, 에틸 아세테이트, 메탄올, 2-프로판올, 아세톤, 아세토니트릴 또는 이의 혼합물인 것인 농후화 방법.
  19. 제17항에 있어서, 상기 슬러리화 공정에서의 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘과 상기 용매의 비율은 약 1:1 (g/ml) 이상인 것인 농후화 방법.
  20. 제19항에 있어서, 상기 슬러리화 공정에서의 3',5'-디신나모일-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘과 상기 용매의 비율은 약 1:10 (g/ml) 이상인 것인 농후화 방법.
  21. 제3항에 있어서, 상기 젬시타빈 또는 이의 염은 약 98% 이상의 순도로 얻어지는 것인 제조 방법.
  22. 제21항에 있어서, 상기 젬시타빈 또는 이의 염은 약 99.5% 이상의 순도로 얻어지는 것인 제조 방법.
  23. 제22항에 있어서, 상기 젬시타빈 또는 이의 염은 약 99.9% 이상의 순도로 얻어지는 것인 제조 방법.
KR1020097024035A 2007-04-23 2008-04-09 젬시타빈의 제조 방법 KR20100017112A (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US11/738,949 2007-04-23
US11/738,949 US20080262215A1 (en) 2007-04-23 2007-04-23 Gemcitabine production process

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20100017112A true KR20100017112A (ko) 2010-02-16

Family

ID=39731091

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020097024035A KR20100017112A (ko) 2007-04-23 2008-04-09 젬시타빈의 제조 방법

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20080262215A1 (ko)
KR (1) KR20100017112A (ko)
TW (1) TW200906845A (ko)
WO (1) WO2008129530A1 (ko)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2641719A1 (en) * 2006-02-07 2007-08-16 Chemagis Ltd. Process for preparing gemcitabine and associated intermediates
US20070249823A1 (en) * 2006-04-20 2007-10-25 Chemagis Ltd. Process for preparing gemcitabine and associated intermediates
IT1393062B1 (it) * 2008-10-23 2012-04-11 Prime Europ Therapeuticals Procedimento per la preparazione di gemcitabina cloridrato
CN102617483B (zh) * 2011-06-30 2013-04-24 江苏豪森药业股份有限公司 盐酸吉西他滨制备过程中胞嘧啶的回收处理方法
PL2660161T3 (pl) 2012-05-04 2018-01-31 Tpresso Ag Konfekcjonowanie suszonych liści w hermetycznych kapsułkach
CN105566418A (zh) * 2014-10-09 2016-05-11 江苏笃诚医药科技股份有限公司 一种2’，3’-二-o-乙酰基-5’-脱氧-5-氟胞苷的合成方法
EP3817732A4 (en) * 2018-08-03 2022-06-08 Cellix Bio Private Limited COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF CANCER

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5159880A (en) * 1974-11-22 1976-05-25 Asahi Chemical Ind N44 ashirunukureoshidojikarubonsanesuteruno seiho
US4526988A (en) * 1983-03-10 1985-07-02 Eli Lilly And Company Difluoro antivirals and intermediate therefor
US4751221A (en) * 1985-10-18 1988-06-14 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research 2-fluoro-arabinofuranosyl purine nucleosides
US5223608A (en) * 1987-08-28 1993-06-29 Eli Lilly And Company Process for and intermediates of 2',2'-difluoronucleosides
US4965374A (en) * 1987-08-28 1990-10-23 Eli Lilly And Company Process for and intermediates of 2',2'-difluoronucleosides
UA41261C2 (uk) * 1992-06-22 2001-09-17 Елі Ліллі Енд Компані Спосіб одержання збагачених бета-аномером нуклеозидів
US5256798A (en) * 1992-06-22 1993-10-26 Eli Lilly And Company Process for preparing alpha-anomer enriched 2-deoxy-2,2-difluoro-D-ribofuranosyl sulfonates
US5371210A (en) * 1992-06-22 1994-12-06 Eli Lilly And Company Stereoselective fusion glycosylation process for preparing 2'-deoxy-2',2'-difluoronucleosides and 2'-deoxy-2'-fluoronucleosides
US5256797A (en) * 1992-06-22 1993-10-26 Eli Lilly And Company Process for separating 2-deoxy-2,2-difluoro-D-ribofuranosyl alkylsulfonate anomers
US5480992A (en) * 1993-09-16 1996-01-02 Eli Lilly And Company Anomeric fluororibosyl amines
US5521294A (en) * 1995-01-18 1996-05-28 Eli Lilly And Company 2,2-difluoro-3-carbamoyl ribose sulfonate compounds and process for the preparation of beta nucleosides
US5559222A (en) * 1995-02-03 1996-09-24 Eli Lilly And Company Preparation of 1-(2'-deoxy-2',2'-difluoro-D-ribo-pentofuranosyl)-cytosine from 2-deoxy-2,2-difluoro-β-D-ribo-pentopyranose
US5602262A (en) * 1995-02-03 1997-02-11 Eli Lilly And Company Process for the preparation of 2-deoxy-2,2-difluoro-β-D-ribo-pentopyranose
US5633367A (en) * 1995-03-24 1997-05-27 Eli Lilly And Company Process for the preparation of a 2-substituted 3,3-difluorofuran
GB9514268D0 (en) * 1995-07-13 1995-09-13 Hoffmann La Roche Pyrimidine nucleoside
US5756775A (en) * 1995-12-13 1998-05-26 Eli Lilly And Company Process to make α,α-difluoro-β-hydroxyl thiol esters
WO2006070985A1 (en) * 2004-12-30 2006-07-06 Hanmi Pharm. Co., Ltd. METHOD FOR THE PREPARATION OF 2#-DEOXY-2#,2#-DIFLUOROCYTIDINE
EP1931693A2 (en) * 2005-08-29 2008-06-18 Chemagis Ltd. Process for preparing gemcitabine and associated intermediates
JP2009519325A (ja) * 2005-12-14 2009-05-14 ドン−エー ファーム．カンパニー リミテッド ２’、２’−ジフルオロヌクレオシドと中間体の製造プロセス
CA2641719A1 (en) * 2006-02-07 2007-08-16 Chemagis Ltd. Process for preparing gemcitabine and associated intermediates
US20070249823A1 (en) * 2006-04-20 2007-10-25 Chemagis Ltd. Process for preparing gemcitabine and associated intermediates

Also Published As

Publication number Publication date
WO2008129530A1 (en) 2008-10-30
US20080262215A1 (en) 2008-10-23
TW200906845A (en) 2009-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2509687C (en) Process for the production of 2'-branched nucleosides
KR20100017112A (ko) 젬시타빈의 제조 방법
WO2004084453A2 (en) METHODS OF MANUFACTURE OF 2'-DEOXY-β-L-NUCLEOSIDES
EA011558B1 (ru) ПРОМЕЖУТОЧНОЕ СОЕДИНЕНИЕ И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОБОГАЩЕННЫХ β-АНОМЕРОМ 2-ДЕЗОКСИ-2,2-ДИФТОР-D-РИБОФУРАНОЗИЛНУКЛЕОЗИДОВ
KR20080039502A (ko) 젬시타빈 및 관련 중간체들의 제조 방법
US8193354B2 (en) Process for preparation of Gemcitabine hydrochloride
WO2004058792A1 (en) Process for the production of 3'-nucleoside prodrugs
JP2008069182A (ja) ４’−ｃ−置換−２−ハロアデノシン誘導体
JP6263645B2 (ja) クロファラビンの合成方法
JP4430307B2 (ja) ２’−ハロ−β−Ｌ−アラビノフラノシルヌクレオシドの製造方法
US20090221811A1 (en) Process for preparing gemcitabine and associated intermediates
US20070249823A1 (en) Process for preparing gemcitabine and associated intermediates
WO2007070804A2 (en) Process for preparing gemcitabine and associated intermediates
CN114456169B (zh) 3′-脱氧-3′,4′-二脱氢核糖核苷类似物及其制备方法
WO2016097989A1 (en) Process for the preparation of gemcitabine hydrochloride
RU2108339C1 (ru) Способ получения 2'-дезоксиксилотимидина, производные d-ксилофуранозы, производные ксилотимидина
KR20080090950A (ko) 젬시타빈의 제조 방법 및 관련 중간체
WO2010029574A2 (en) An improved process for the preparation of gemcitabine and its intermediates using novel protecting groups and ion exchange resins
Wu Stereoselectivity in Furanose Glycosylation
WO2018110643A1 (ja) 抗ウイルス活性を示すヌクレオシド誘導体
HU205089B (en) Process for producing new thymine derivatives and pharmaceutical compositions comprising same

Legal Events

Date Code Title Description
WITN Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid