KR20090028486A - 토마토 주 ｆｉｒ 128-1018 - Google Patents

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    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture

Abstract

본 발명은 FIR 128-1018로 명명된 토마토 주의 종자 및 식물체를 제공한다. 따라서, 본 발명은 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체, 종자 및 조직 배양물, 및 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체를 그 자신과, 또는 다른 토마토 식물체, 예컨대, 다른 토마토 주의 식물체와 교배시켜 생성된 토마토 식물체를 제조하는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 이러한 교배에 의해 제조된 종자 및 식물체에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체의 과실 및 생식체를 포함하는, 이러한 식물체의 부분에 관한 것이다.
토마토, 종자, 교배, 육종, 저장 기간, 숙성 억제자

Description

토마토 주 ＦＩＲ 128-1018 {TOMATO LINE FIR 128-1018}
본 출원은 2007년 9월 13일에 출원된 미국 가출원 제60/972,110호에 대한 우선권을 주장하며, 상기 출원의 모든 개시 내용은 참조에 의해 본원에 도입된다.
본 발명은 식물체 육종 분야, 더욱 구체적으로는, 토마토 주(株) FIR 128-1018의 개발에 관한 것이다.
식물 육종의 목적은 단일의 품종/잡종으로 다양한 바람직한 형질을 조합시키는 것이다. 이러한 바람직한 형질은 높은 수확량, 질병, 곤충 또는 다른 해충에 대한 내성, 열 및 가뭄에 대한 내성, 우수한 작물학적 품질, 높은 영양학적 가치, 향상된 성장 속도 및 개선된 과실 특성을 포함한다.
육종 기술은 식물의 수분 방법을 이용한다. 수분의 방법에는 일반적으로 2가지가 존재한다. 한 꽃의 화분이 동일한 꽃 또는 동일한 유전자형의 다른 꽃으로 전달되는 경우, 식물체는 자가 수분을 하게 된다. 화분이 상이한 유전자형의 꽃으로부터 오면, 식물체는 교차 수분을 하게 된다.
여러 세대에 걸쳐 자가 수분되고 균일한 유형으로 선별된 식물체는, 거의 모든 유전자좌에서 동형접합이 되고, 동형접합 식물체의 순계 육종 자손의 균일한 집 단을 형성한다. 품종이 상이한 동형접합 식물체 2종 간의 교배는, 많은 유전자좌가 이형접합인 잡종 식물체의 균일한 집단을 형성한다. 잡종에서 이형접합의 정도는 부모 간 유전적 거리의 함수이다. 반대로, 다수의 부위에서 각각 이형접합인 2종의 식물체를 교배시키면, 유전적으로 상이하고 균일하지 않은 잡종 식물체의 분리 집단이 형성된다. 이러한 비균일성으로 인하여 성과를 예측할 수 없게 된다.
균일한 품종의 개발은 동형접합 근친교배 식물체의 개발, 이러한 근친교배 식물체의 교배, 및 교배된 자손의 평가를 요한다. 가족도(pedigree) 육종 및 반복 선별은 육종 집단으로부터 근친교배 식물체를 개발하기 위해서 사용되어 온 육종 방법의 예들이다. 이러한 육종 방법들은 2종 이상의 식물체의 유전 배경 또는 그 외의 다양한 넓은 범위의 자원들을 육종 풀(pool)에 합하며, 이러한 풀로부터 자가수정 및 원하는 표현형의 선별에 의해서 새로운 주들이 개발된다. 새로운 주들은 그 중 어느 것이 상업적 잠재성을 지니고 있는지를 평가받게 된다.
토마토는 이러한 육종 프로그램의 대상으로서, 특히 가치있는 작물종이다. 통상의 토마토 (솔라눔 라이코페르시쿰(Solanum lycopersicum), 종래의 라이코페르시콘 에스쿨렌툼 밀. (Lycopersicon esculentum Mill.))는 국내 및 국제적으로 널리 재배된다. 미국에서 매년 재배되는 대략 500,000 에이커의 토마토 중, 약 40%는 신선한 상태로 판매되며, 나머지는 가공된다.
대부분의 재배된 토마토는 이배체이고 자기 생식력이 있고, 대부분 자웅동체 꽃에 의해 자가 수분을 한다. 상이한 배수성 수준을 갖는 토마토도 흔하며, 1920년대 및 30년대에 이미 알려졌다 (Linstrom, 1940). 1970년대 중반 이전에, 대부 분의 상업적 품종들은 순계 육종 주였다. 그 이후로, 더 우수한 잡종 품종들이 순계 육종 주를 대체해 왔다. 오늘날에는, 대부분의 상업적 품종은 잡종이다. 넓은 파종 범위 및 높은 가치로 인해, 토마토 종은 크게 개량되어, 상이한 형질을 갖는 다양한 주의 품종이 존재한다. 상이한 품종의 토마토 과실은 중량, 모양 및 색상에 있어서 상당한 편차를 보인다. 많은 품종들은 적색 과실을 갖지만, 토마토 과실은 다른 색상, 예를 들어, 황색, 오렌지색, 분홍색, 보라색, 녹색 또는 흰색일 수도 있다. 시장에서, 토마토는 통상적으로 모양과 크기에 따라, 예를 들어, 체리, 플럼, 배(pear), 표준 (또는 라운드) 및 비프스테이크 유형으로 구분된다.
지금까지 육종 노력을 통해 유익한 형질을 지닌 다수의 유용한 토마토 주 및 품종을 얻었지만, 당업계에서는 더욱 개선된 형질을 지닌 신규한 주 및 품종에 대한 요구가 존재한다. 이러한 식물체는 작물 수확량 및/또는 과실 품질가 개선됨으로써, 재배자 및 소비자 모두에게 유익할 것이다.
발명의 요약
많은 분홍색 토마토 품종들은 다른 품종에 비하여 과실의 단단함이 부족하고 저장 기간이 짧기 때문에, 분홍색 품종의 이러한 형질을 개선시킬 필요성이 있다. 숙성 억제자 (린(rin))는 다른 토마토 품종에 도입되면 과실의 단단함 및 저장 기간을 향상시키는 것으로 보고된 단일 열성 천연 숙성 돌연변이이다. 분홍색 토마토 과실 색상은 열성 형질이며, 분홍색 표현형을 얻기 위해서는 일반적으로 동형접합이 필요하다. 과실의 단단함 및 저장 기간을 증가시키기 위하여 우량한 분홍색 토마토 주에 숙성 억제자 (린(rin)) 유전자가 도입될 수 있다. 한 측면에서, 본 발명은 숙성 억제자 (린(rin)) 유전자가 도입된 근친교배 주인, FIR 128-1018로 명명된 토마토 주의 토마토 식물체를 제공한다. 또한, FIR 128-1018로 명명된 토마토 주의 모든 생리적 및 형태적 특성을 갖는 토마토 식물체를 제공한다. 본 발명은 또한, 예를 들어, 식물체의 화분, 배주, 과실, 접수, 대목 및 세포를 비롯한 토마토 식물체의 일부를 제공한다.
본 발명은 또한 토마토 주 FIR 128-1018의 종자에 관한 것이다. 본 발명의 토마토 종자는 FIR 128-1018로 명명된 주의 토마토 종자와 본질적으로 균질한 집단으로서 제공될 수 있다. 따라서, FIR 128-1018 주의 종자는 전체 종자의 적어도 약 97%, 예컨대 종자의 적어도 약 98%, 99% 이상을 형성하는 것으로 정의될 수 있다. 토마토 종자의 집단은 특히 잡종 종자를 본질적으로 포함하지 않는 것으로 정 의될 수 있다. FIR 128-1018로 명명된 토마토 식물체의 본질적으로 균질한 집단을 제공하기 위하여 종자 집단을 별도로 재배할 수 있다.
본 발명의 다른 측면에서, FIR 128-1018 주의 식물체의 재생성 세포의 조직 배양물이 제공된다. 조직 배양물은 바람직하게는 상기 토마토 주의 모든 생리적 및 형태적 특성을 발현할 수 있는 식물체를 재생할 수 있고, 그 주의 다른 식물체와 실질적으로 동일한 유전자형을 갖는 식물체를 재생할 수 있다. FIR 128-1018 주의 생리적 및 형태적 특성의 일부 예로는, 본원에 포함된 표들에 기재된 형질들을 들 수 있다. 이러한 조직 배양물에서 재생성 세포는, 예를 들어, 배(胚), 분열조직, 떡잎, 화분, 잎, 꽃밥, 뿌리, 뿌리 선단(root tip), 암술, 꽃, 종자 및 줄기(stalk)로부터 유도될 수 있다. 또한, 본 발명은 본 발명의 조직 배양물으로부터 재생된 토마토 식물체로서, FIR 128-1018 주의 모든 생리적 및 형태적 특성을 갖는 식물체를 제공한다.
본 발명의 또다른 측면에서, 일반적으로 제1 친계(parent) 토마토 식물체와 제2 친계 토마토 식물체를 교배시키는 것을 포함하며, 여기서 제1 또는 제2 친계 토마토 식물체 중 적어도 하나가 FIR 128-1018로 명명된 주의 식물체인, 토마토 종자, 식물체 및 과실의 생산 방법이 제공된다. 이러한 방법은 추가로, 제1 토마토 식물체를, 상이한 별개의 주의 제2 토마토 식물체와 교배시켜, 부모 중 하나가 토마토 식물체 FIR 128-1018 주인 잡종을 제공하는 것인, 잡종 토마토 종자 또는 식물체의 제조 방법으로 예시될 수 있다. 이러한 방법에서, 교배는 종자의 생성을 일으킨다. 종자 생산은 종자가 수집되었는지 여부와 상관없이 일어난다.
본 발명의 한 실시태양에서, "교배"의 제1 단계는 제1 및 제2 친계 토마토 식물체의 종자를 종종 근접하게 심어, 예를 들어, 곤충 운반자에 의해서 매개되어 수분이 발생하도록 하는 것을 포함한다. 다르게는, 화분을 수동으로 전달할 수 있다. 식물체가 자가 수분되는 경우, 식물체 재배 이외에 인간의 직접적인 개입이 필요없이 수분이 발생할 수 있다.
제2 단계는 제1 및 제2 친계 토마토 식물체의 종자를, 꽃을 보유하는 식물체로 재배 또는 성장시키는 것을 포함할 수 있다. 제3 단계는 예컨대 꽃의 수술 부분을 거세시켜 (예를 들어, 꽃을 처리 또는 조작하여 거세된 친계 토마토 식물체를 생성함), 식물체의 자가 수분을 방지하는 것을 포함할 수 있다. 또한 동일한 목적으로 자가-불화합성(self-incompatibility) 시스템이 일부 잡종 작물에서 사용될 수 있다. 자가-불화합성 식물체는 여전히 생존가능한 화분을 생산하고 다른 품종의 식물체를 수분시킬 수 있지만, 그들 자신 또는 동일한 주의 다른 식물체를 수분시키지는 못한다.
잡종 교배의 제4 단계는 제1 및 제2 친계 토마토 식물체 간의 교차 수분을 포함할 수 있다. 특정 실시태양에서, 화분은 수동으로 또는 곤충 운반자를 이용하여 전달될 수 있다. 또 다른 단계는 친계 토마토 식물체 중 적어도 하나로부터 종자를 수확하는 것을 포함한다. 수확된 종자를 재배하여 토마토 식물체 또는 잡종 토마토 식물체를 생산할 수 있다.
또한, 본 발명은 제1 친계 토마토 식물체와 제2 친계 토마토 식물체를 교배시키는 것을 포함하며, 여기서 제1 또는 제2 친계 토마토 식물체 중 적어도 하나가 FIR 128-1018로 명명된 주의 식물체인 방법에 의하여 생산된 토마토 종자 및 식물체를 제공한다. 본 발명의 한 실시태양에서, 상기 방법에 의해서 생산된 토마토 종자 및 식물체는 본 발명에 따른 식물체와, 다른 별개의 식물체를 교배시켜서 생산한 잡종 제1 세대 (F1)의 잡종 토마토 종자 및 식물체이다. 본 발명은 추가로, 이러한 F1 잡종 토마토 식물체의 식물체 부분 및 그의 사용 방법을 고려한다. 따라서, 본 발명의 특정한 예시적인 실시태양은 F1 잡종 토마토 식물체 및 그의 종자를 제공한다. 예를 들어, FIR 128-1018은 분홍색 린(rin )-이형접합 F1 잡종, HNS 12850218의 부계로 사용되었다. 이 잡종은 경쟁 품종인 분홍색 상업적 품종에 비하여 고도로 개선된 과실의 단단함 및 긴 저장 기간을 나타낸다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 (a) FIR 128-1018 주의 식물체와 제2 식물체를 교배시키는 것을 포함하는, FIR 128-1018 주로부터 유도된 자손 식물체를 제조하는 단계; 및 (b) 자손 식물체를 자가 수정시키거나 제2 식물체 또는 제3 식물체와 교배시켜 후속 세대 자손 식물체의 종자를 생산하는 단계를 포함하는, FIR 128-1018 주로부터 유도된 식물체 또는 종자의 생산 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 제2 또는 제3 식물체는 이배체이다. 다른 실시태양에서, 제2 또는 제3 식물체는 이배체가 아니다. 특정 실시태양에서, FIR 128-1018 주의 식물체가 모계이다.
상기 방법은 추가로, (c) 후속 세대 자손 식물체의 종자로부터 상기 후속 세대 자손 식물체를 성장시키고, 후속 세대 자손 식물체를 자가 수분시키거나 제2, 제3, 또는 추가의 식물체와 교배시키는 단계; 및 상기 단계를 추가로 3 내지 10 세 대 동안 반복하여 주 FIR 128-1018로부터 유도된 추가의 식물체를 생산하는 단계를 포함할 수 있다. FIR 128-1018 주로부터 유도된 추가의 식물체는 근친교배 주일 수 있고, 상기 언급한 반복 교배 단계는 근친교배 주를 생산하기 위하여 충분히 근친교배시키는 것을 포함하는 것으로 정의될 수 있다. 상기 방법에서, 단계 (b) 및 (c)에 따른 연속된 교배를 위하여 단계 (c)에서 형성된 특정 식물체를 선별하는 것이 바람직할 수 있다. 하나 이상의 바람직한 형질을 갖는 식물체를 선별함으로써, 주의 바람직한 형질 중 일부 및 그 외의 잠재적으로 선별된 형질을 보유한, FIR 128-1018 주로부터 유도된 식물체를 얻게 된다.
다른 실시태양에서, 본 발명은 (a) FIR 128-1018 주의 토마토 식물체의 이배체 환원체를 성장시키는 단계, (b) 상기 이배체 토마토 식물체가 자가 수분되도록 하는 단계, 및 (c) 상기 이배체 토마토 식물체로부터 종자를 수확하는 단계를 포함하는, 주 FIR 128-1018로부터 유도된 토마토 식물체의 생산 방법을 제공한다. 특정 실시태양에서, 상기 방법은 추가로 (d) 상기 이배체 토마토 식물체를 자기 자신 또는 다른 이배체 토마토 식물체와 교배시켜, 추가적인 FIR 128-1018로부터 유도된 이배체 토마토 종자를 수득하는 단계, (e) 단계 (d)의 상기 이배체 FIR 128-1018로부터 유도된 토마토 종자를 성장시켜, 추가적인 FIR 128-1018로부터 유도된 토마토 식물체를 수득하는 단계, 및 (f) 단계 (d) 및 (e)의 교배 및 성장 단계를 반복하여, 추가의 FIR 128-1018로부터 유도된 이배체 토마토 식물체를 생성하는 단계를 포함할 수 있다. 추가적인 실시태양에서, 본 발명에서 제공되는 방법은 추가로 상기 이배체 환원의 염색체 수를 배가(doubling)시키는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 토마토 주 FIR 128-1018 식물체의 영양 번식 방법에 관한 것이다. 특정 실시태양에서, 상기 방법은 (a) 토마토 주 FIR 128-1018 식물체로부터 번식가능한 조직을 수집하는 단계; (b) 상기 조직을 배양시켜 증식된 싹(shoot)을 얻는 단계; 및 (c) 상기 증식된 싹을 심어 뿌리가 난 식물소체를 얻는 단계를 포함한다. 일부 이러한 실시태양에서, 상기 방법은 상기 뿌리가 난 식물소체로부터 식물체를 성장시키는 단계를 추가로 포함한다.
본 발명의 다른 측면에서, 추가된 유전가능한 형질을 포함하는 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체가 제공된다. 유전가능한 형질은, 예를 들어, 우성 또는 열성 대립유전자인 유전자좌를 포함할 수 있다. 본 발명의 한 실시태양에서, 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체는 단일 유전자좌 전환을 포함하는 것으로 정의된다. 예를 들어, 하나 이상의 유전가능한 형질은 새로운 형질 또는 관심 형질을 부여하는 상이한 대립유전자를 사용하여 임의의 특정 부위에 이입(introgress)될 수 있다. 본 발명의 특정 실시태양에서, 단일 유전자좌 전환은 예를 들어, 제초제 내성, 곤충 내성, 질병에 대한 내성 및 식물체 대사와 대사체 프로파일의 조정과 같은 하나 이상의 형질을 부여한다. 추가의 실시태양에서, 형질은 역교배에 의해서 주의 게놈 내로 도입된 천연 발생 유전자, 천연 또는 유도된 돌연변이, 또는 유전자 형질전환 기술을 통하여 식물체 또는 그의 임의의 이전 세대의 선조 내로 도입된 형질전이 유전자(transgene)에 의해서 부여될 수 있다. 형질전환을 통하여 도입된 경우, 유전자좌는 단일 염색체 위치에 통합된 하나 이상의 유전자를 포함할 수 있다.
예를 들어, 특정 실시태양에서, 본 발명은 (a) 토마토 주 FIR 128-1018의 식 물체를, 원하는 형질을 포함하는 제2 토마토 식물체와 교배시켜 F1 자손을 얻는 단계, (b) 원하는 형질을 포함하는 F1 자손을 선별하는 단계, (c) 선별된 F1 자손을 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체와 교배시켜 역교배 자손을 생성시키는 단계, (d) 원하는 형질 및 토마토 주 FIR 128-1018의 생리적 및 형태적 특성을 포함하는 역교배 자손을 선별하는 단계, 및 (e) 단계 (c) 및 (d)를 3회 이상 연속적으로 반복하여, 동일한 환경 조건에서 재배했을 때 이배체 토마토 주 FIR 128-1018의 모든 생리적 및 형태적 특성 및 원하는 형질을 포함하는, 선별된 4세대 이상의 역교배 자손을 생성시키는 단계를 포함하는, 토마토 주 FIR 128-1018 내로의 원하는 형질의 도입 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 이러한 방법으로 생산된 토마토 식물체를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면에서, FIR 128-1018로 명명된 토마토 식물체 주의 유전적 총체가 제공된다. 용어 "유전적 총체(genetic complement)"란 뉴클레오티드 서열의 응집체를 나타내며, 본 발명에 있어서, 그의 발현은 토마토 식물체 또는 식물체의 세포 또는 조직의 표현형을 결정한다. 따라서 유전적 총체는 세포, 조직 또는 식물체의 유전 구조(makeup)를 나타내고, 잡종 유전적 총체는 잡종 세포, 조직 또는 식물체의 유전 구조를 나타낸다. 따라서 본 발명은 본원에 개시된 토마토 식물체 세포에 따른 유전적 총체를 갖는 토마토 식물체 세포 및 식물체, 및 이러한 세포를 함유하는 종자 및 식물체를 제공한다.
식물체 유전적 총체는 예를 들어, 유전자 발현 프로파일, 유전자 산물 발현 프로파일 및 동위효소 유형화 프로파일과 같은 유전적 총체의 발현 특성인 표현형 형질의 발현 및 유전 마커 프로파일에 의해서 평가할 수 있다. 토마토 주 FIR 128-1018 또는 그의 제1 세대 자손은, 예를 들어, 단순 서열 길이 다형성 (Simple Sequence Length Polymorphisms (SSLP), Williams et al., 1990), 임의 증폭 다형성 DNA (Randomly Amplified Polymorphic DNAs (RAPD)), DNA 증폭 지문법 (DNA Amplification Fingerprinting (DAF)), 서열 특성화 증폭 영역법 (Sequence Characterized Amplified Regions (SCAR)), 임의 프라이밍된 중합효소 연쇄 반응법 (Arbitrary Primed Polymerase Chain Reaction (AP-PCR)), 증폭 단편 길이 다형성 (Amplified Fragment Length Polymorphisms (AFLP)) (EP 534 858, 특히 전체로서 본원에 참고로 도입됨), 및 단일 염기 다형성 (Single Nucleotide Polymorphisms (SNP) (Wang et al, 1998))과 같은 임의의 공지된 기술에 의하여 확인될 수 있다는 것이 이해될 것이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 토마토 식물체의 반수체 유전적 총체와 제2 토마토 식물체, 바람직하게는, 또 다른 별개의 토마토 식물체의 반수체 유전적 총체의 조합으로 형성된, 토마토 식물체 세포, 조직, 식물체 및 종자로 나타나는, 잡종 유전적 총체를 제공한다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 잡종 유전적 총체를 포함하는, 조직 배양물로 재생된 토마토 식물체를 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 단단하고 성숙시 담황색인 과실, 큰꽃받침 및 투명한 표피를 포함하는 형질의 조합을 나타내는, 근친교배 토마토 주의 식물체를 제공한다. 추가적으로, 과실 숙성 단계에서 분홍색 색상은 발현되지 않지만, 분홍색 주와 교배되면 FIR 128-1018의 자손은 분홍색 과실을 갖는다. 특정 실시태양에 서, 형질의 조합은, 토마토 주 FIR 128-1018에서 발견된 형질의 조합의 발현을 위하여 유전 수단에 의해서 조절되는 것으로 정의될 수 있다
또 다른 측면에서, 본 발명은 식물체의 게놈에서 적어도 제1 다형성을 검출하는 것을 포함하는, 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체의 유전자형의 결정 방법을 제공한다. 특정 실시태양에서, 상기 방법은 식물체의 게놈에서 복수의 다형성을 검출하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 컴퓨터 판독가능한 매체 상에 복수의 다형성을 검출한 결과를 저장하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명은 이러한 방법으로 생성된 컴퓨터 판독가능한 매체를 추가로 제공한다.
특정 실시태양에서, 본 발명은 (a) 성숙하도록 재배된 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체를 얻는 단계, 및 (b) 식물체로부터 토마토를 수집하는 단계를 포함하는, 토마토 생산 방법을 제공한다.
구체적으로 표시되지 않는 한, 본원에서 논의된 본 발명의 한 측면에 대한 임의의 실시태양은 본 발명 다른 측면에도 적용된다.
용어 "약"은 수치를 측정하기 위해 사용한 장치 또는 방법의 오차의 표준 편차가 수치에 포함됨을 나타내기 위하여 사용된다. 특허청구범위에서 사용되는 용어 "또는"은, 본원이 단지 대체물들 및 "및/또는" 만을 사용하여 정의를 제공한다 하더라도, 명시적으로 대체물들만을 나타내거나 대체물들이 상호배타적이지 않는 한, "및/또는"을 의미한다. 특허청구범위에서 단어 "하나의(a, an)"는, 단어 "포함하는" 또는 다른 개방형 언어와 관련해서 사용되는 경우, 달리 나타내지 않는 한 "하나 이상의"를 나타낸다. 용어 "포함하다" 및 "갖다"는 개방형 동사이다. 하나 이상의 이러한 동사의 임의의 형태 또는 시제, 예컨대 "포함하다", "포함하는", "갖다" 및 "갖는" 역시 개방형이다. 예를 들어, 하나 또는 그 이상의 단계를 "포함하는" 또는 "갖는" 방법은 이러한 하나 또는 그 이상의 단계로 이루어진 것에 한정되지 않으며, 기재되지 않은 다른 단계도 포함한다. 유사하게, 하나 또는 그 이상의 형질을 "포함하는" 또는 "갖는" 임의의 식물체는 이러한 하나 또는 그 이상의 형질을 갖는 것에 한정되지 않으며, 기재되지 않은 다른 형질도 포함한다.
본 발명의 다른 목적, 특징 및 장점은 이하의 상세한 설명으로부터 명확해질 것이다. 그러나, 상세한 설명으로부터 본 발명의 사상 및 범위 내에서 다양한 변화 및 변형이 당업자에게 명백하므로, 상세한 설명 및 임의의 특정 예들은 본 발명의 특정 실시태양을 나타내지만, 예시의 목적으로만 기재된 것이라는 것을 이해하여야 한다.
본 발명은 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체, 식물체 부위, 종자 및 유도체에 관한 방법 및 조성물에 관한 것이다. 이러한 토마토 주는 이하에서 설명하는 형질에 대한 환경의 영향의 제한 내에서, 유전적 균일성 및 안정성 및 원예적 균일성 및 안정성을 나타낸다. 토마토 주 FIR 128-1018은 충분한 종자 수확량을 제공한다. 별개의 제2 식물체와 교배시킴으로써, 균일한 F1 잡종 자손을 얻을 수 있다. 주 FIR 128-1018은 적색 린(rin ) HNRI0369 주 및 분홍색 HNPI0205 주의 최초 교배로부터 유도된 근친교배 주이다. 주 FIR 128-1018은 단단하고 성숙시 담황색인 과실, 큰꽃받침 및 투명한 표피를 비롯한 다수의 개량된 형질을 나타낸다. 추 가적으로, FIR 128-1018 과실에서는 과실 숙성 단계에서 분홍색 색상이 발현되지 않지만, 분홍색 주와 교배되면, FIR 128-1018의 자손은 분홍색 과실을 갖게 된다.
토마토 품종은 성숙도, 즉, 종자를 심는 단계부터 과실을 수확하는 단계까지 걸리는 시간에 의해서 구분될 수 있다. 표준 성숙도는 "이름(early)", "중간(midseason)" 또는 "늦음(late-maturing)"으로 분류된다. 토마토에 대한 다른 분류는 과실이 열리는 시기이다. "유한형(determinant)" 식물체는 잎이 성장한 후, 개화, 수분 및 과실 발생의 번식기로 이행한다. 그 결과, 유한형 품종은 짧은 시간 동안에 숙성되는 과실의 비율이 높다. 계절당 1회만 수확을 하는 재배자들은 유한형 유형의 품종을 선호한다. 반대로, "무한형(indeterminate)" 유형은 잎이 성장한 후, 꽃과 과실의 발생이 새로운 잎의 성장과 함께 진행되는 긴 시기로 진입하게 된다. 동일한 식물체를 여러번 수확하는 재배자들은 무한형 품종을 선호한다. 음식물의 다양성을 요구하는 더욱 최근의 소비자의 수요에 대응하기 위하여, 토마토 재배자들은 더 넓은 범위의 과실 색상을 개발하였다. 적색 과실의 범위를 넓힌데 더하여, 아이보리색, 녹색, 황색, 금색, 오렌지색, 분홍색 및 보라색의 다양한 색상의 과실을 생산하는 품종이 개발되었다. 추가적으로, 어깨 부위가 녹색이고 대부분은 적색인 과실 계통, 및 줄무늬 및 알록달록한 색상의 과실로 예시되는 다색상 품종 등이 있다. 토마토 과실 색상을 결정하는 표준 방법은, 예를 들어, 문헌[Gull et al . (1989)] 및 문헌[Kader et al . (1978)]에 기재되어 있으며, 이들은 본원에 참조하여 포함된다.
본 발명의 한 측면에 따라서, 토마토 주 FIR 128-1018의 생리적 및 형태적 특성을 갖는 식물체가 제공된다. 토마토 주 FIR 128-1018의 생리적 및 형태적 특성은 하기 표 1에 기재되어 있다.
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상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 토마토 주 FIR 128-1018는 무한 생장형, 넓은 캐노피(canopy) 및 불규칙하게 뻗은 수세를 가진다. 잎에는 일반적으로 얕은 톱니 모양(toothed) 또는 가리비 모양(scalloped)이 있고, 주름이 많다. 꽃차례는 전형적으로 6 내지 8개의 노란색 꽃을 지닌 단순한 형태이다. 꽃밥은 보통 융합되어 있고, 큰꽃받침은 일반적으로 크고, 잎과 유사한 열편들을 갖는다. 성숙 과실은 보통 길이가 약 50 내지 55 mm, 직경이 약 65 내지 67 mm, 중량이 약 170 내지 190 g이다. 과실은 전형적으로 균일한 담황색이며, 무색이고 보통의 부드러운 표피를 갖는다. 과실 수용성 고형분 (브릭스로 표시)은 보통 5 내지 6이다.
FIR 128-1018 주를 상업용 종자 생산에 유용하게 만들기 위해 이 토마토 주를 수 세대 동안 자가수분 및 생장시켜 동형접합성 및 형태적 안정성을 얻었다. 본 토마토 주에 대해 변종 형질은 전혀 관찰되거나 예상되지 않는다.
실질적으로 동형접합성인 토마토 주 FIR 128-1018는 주의 종자를 심고, 형성된 토마토 식물체를 자가수분 또는 형제 수분(sib-pollinating) 조건 하에서 재배하고, 형성된 종자를 당업자에게 익숙한 기술을 이용하여 수확함으로써 번식시킬 수 있다.
본 발명은 숙성 억제자 (린(rin)) 유전자가 도입된 근친교배 주인, FIR 128-1018로 명명된 토마토 주의 토마토 식물체를 제공한다. 또한, FIR 128-1018로 명명된 토마토 주의 모든 생리적 및 형태적 특성을 갖는 토마토 식물체를 제공한다. 본 발명은 또한, 예를 들어, 식물체의 화분, 배주, 과실, 접수, 대목 및 세포를 비롯한 토마토 식물체의 일부를 제공한다.
A. 육종 토마토 주 FIR 128-1018
본 발명의 한 측면은 토마토 주 FIR 128-1018과 그 자신 또는 제2 식물체를 교배하는 방법, 및 이러한 방법에 의해 생산된 종자 및 식물체에 관한 것이다. 이러한 방법들은 FIR 128-1018 주의 번식에 사용되거나, 잡종 토마토 종자 및 그로부터 성장한 식물체를 생성하기 위해 사용될 수 있다. 잡종 토마토 종자는 FIR 128-1018 주와 제2의 토마토 부모 주를 교배시켜 생성된다.
신규한 품종의 개발은 FIR 128-1018 주를 교배시킨 뒤, 잘 알려진 방법에 따라 복수의 세대를 육종함으로써 이루어질 수 있다. 신규 품종은 임의의 제2 식물체와의 교배에 의해 생성될 수 있다. 신규 토마토 주를 개발하기 위한 목적으로 이러한 제2 식물체를 선택함에 있어서, 1개 이상의 선택된 바람직한 특성을 나타내거나, 잡종 조합시 원하는 특성(들)을 나타내는 식물체를 선택하는 것이 바람직할 수 있다. 초기 교배가 이루어진 뒤, 신규 품종을 얻기 위해 자가수정 및 선별을 실시한다. 균일한 토마토 주 개발을 위해서는 종종 5세대 이상의 자가수정 및 선별이 이루어진다.
신규 품종의 균일한 주는 2배-반수체(double-haploid)를 통해 개발될 수도 있다. 이 기술은 수세대의 자가수분 및 선별의 필요 없이, 순계 육종 주의 생성을 가능하게 한다. 이러한 방식으로, 순계 교배 주는 한 세대와 같이 짧은 기간 동안 생성될 수 있다. 반수체 배는 소포자, 화분, 꽃밥, 배양체 또는 씨방 배양체로부터 생성될 수 있다. 그런 다음, 반수체 배는 자발적으로, 또는 화학적 처리 (예를 들어, 콜치신 처리)에 의해 배가될 수 있다. 별법으로, 반수체 배를 반수체 식물체로 성장시켜, 염색체 배가가 유도되도록 처리될 수 있다. 어느 경우에나, 생식능력이 있는 동형접합 식물체가 얻어진다. 본 발명에 따라, FIR 128-1018 및 그의 자손과 관련하여 이러한 임의의 기술을 사용하여 동형접합 주를 얻을 수 있다.
근친교배 식물체를 개선하기 위해 역교배도 이용될 수 있다. 역교배는 한 근친교배 또는 비-근친교배원으로부터 그러한 형질이 결여된 근친교배체로 하나 이상의 유전성 형질을 전달한다. 정확한 역교배 절차는 적절한 시험 절차를 결정하도록 하는 변형된 특성(들) 또는 형질(들)에 따라 달라질 것이다. 본 발명의 내용에서 용어 "토마토 주 FIR 128-1018"가 사용되는 경우, 이는 제1의 원하는 유전성 형질을 적어도 포함하도록 변형된 식물체를 포함한다.
이는 예를 들어, 먼저 문제의 형질과 연관된 유전자좌(들)에 적절한 유전 정보 (예를 들어, 대립유전자)을 지니는 공여 근친교배체 (비-반복친)에 우세한 근친교배체 (반복친)을 교배시킴으로써 달성될 수 있다. 그후, 이러한 교배의 자손을 반복친과 다시 교배시킨 뒤, 생성된 자손 (제1 역교배 세대 (BC1))에서 비-반복친으로부터 전달되었을 바람직한 형질에 대해 선별한다. 원하는 형질에 대한 선별이 수반된 5세대 이상의 역교배 세대 후, 자손은 전달된 특성을 조절하는 유전자좌에서 이형접합이지만, 대부분 또는 거의 모든 다른 유전자좌에 대해서는 우세한 부모와 같다. 최종 역교배 세대를 자가수정시키면 전달된 형질에 대한 순종 교배 자손이 생성될 것이다.
원하는 특성(들)에 기여하는 부모 토마토 식물체를 비-반복친(non-recurrent parent)이라 하는데, 이는 역교배 절차에서 1회 사용될 수 있고, 따라서, 반복될 필요가 없기 때문이다. 비-반복친으로부터의 유전자좌(들)이 전달되는 부모 토마토 식물체는 반복친(recurrent parent)으로 알려져 있는데, 이는 역교배 절차에서 수회 동안 사용되기 때문이다.
신규한 근친교배체의 개발에서 정규적으로 선택되지 않지만, 역교배 기술에 의해 개선될 수 있는 많은 단일 유전자좌 형질이 동정되었다. 단일 유전자좌 형질은 트랜스제닉이거나 트랜스제닉이 아닐 수 있는데, 이러한 형질의 예로는 남성 불임, 제초제 내성, 미생물, 진균 또는 바이러스 질병에 대한 내성, 곤충 내성, 남성 생식력의 회복, 변형된 지방산 또는 탄수화물 대사 기작 및 강화된 영양학적 품질이 포함되나 이에 한정되지 않는다. 이들은 일반적으로 핵을 통해 유전되는 유전 자를 포함한다.
한 실시태양에서, FIR 128-1018가 반복친인 역교배의 자손 이배체 토마토 식물체는 (i) 비-반복친으로부터 유래된 원하는 형질, 및 (ii) 동일한 환경 조건에서 재배할 경우, 5% 유의 수준에서 측정된 이배체 토마토 주 FIR 128-1018의 모든 생리적 및 형태적 특성을 포함한다.
단일 유전자좌 (예: 대립유전자)이 우성인 방식으로 작용하는 경우에는 직접 선별 또는 스크리닝이 적용될 수 있다. 예를 들어, 미생물 질환에 대한 내성을 제공하는 우성 대립유전자에 대해 선별할 때, 초기 교배의 자손에 역교배 전에 미생물을 접종할 수 있다. 그러면, 접종에 의해, 내성을 가지지 않은 식물체는 제거되고, 내성 대립유전자를 가지는 식물체만 후속 역교배에 사용된다. 그런 다음, 모든 추가적인 역교배 세대에 대하여 이 과정을 반복한다.
전달되는 특성이 우성 대립유전자인 경우 역교배 방법이 단순화되지만, 열성, 공동우성 및 양적 대립유전자도 전달될 수 있다. 이 경우, 원하는 유전자좌가 성공적으로 전달되었는지 판단하기 위하여 자손에 대해 시험을 실시하는 것이 필요할 수 있다. 비-반복친 주가 동형접합이 아닌 경우, F1 자손은 동등하지 않을 것이다. 상응하는 형질이 이형접합 또는 반접합 상태에서 표현형으로 탐지가능하다면, 관심있는 유전자좌에 원하는 유전자형을 가지는 F1 식물체를 표현형을 기준으로 선별할 수 있다. 열성 대립유전자가 전달되고, 상응하는 형질이 이형접합이나 반접합 상태에서 표현형으로 탐지가능하지 않은 경우에는, 생성된 자손을 자가수정시키거나 공여자에 대해 역교배시켜 선별 목적을 위한 분리 집단을 만들 수 있다. 비-표현형 시험도 사용할 수 있다. 분리 집단에서 유래된 선별된 자손을 그후 반복친과 교배시켜, 제1 역교배 세대 (BC1)를 생산한다.
원하는 형질을 포함하고 높은 비율로 반복친의 유전적 총체를 회복한 식물체의 동정을 돕기 위해 분자 마커도 사용할 수 있다. 육종을 위한 토마토 식물체의 선별은 필수적으로 식물체의 표현형에 의존해야하는 것은 아니며, 유전자 조사를 기초로 할 수 있다. 예를 들어, 관심있는 형질에 밀접하게 유전적으로 연관된 적합한 유전자 마커를 이용할 수 있다. 이러한 마커 중 하나를 사용하여 특정 교배의 자손에게서 어떤 형질의 존재 또는 부재를 확인할 수 있다. 이 기술은 흔히 마커 보조 선별로 지칭된다. 임의의 다른 종류의 유전자 마커나, 식물체에서 관심있는 형질의 상대적 존재 또는 부재를 확인할 수 있는 다른 검정도 육종 목적을 위해 유용할 수 있다. 토마토의 육종에 적용가능한 마커 보조 선별을 위한 방법은 당업계에 잘 알려져 있다. 이러한 방법은 열성 형질 및 다양한 표현형의 경우, 또는 종래의 검정법이 보다 비싸고 시간소모적이거나 다른 단점을 가질 수 있을 경우, 특히 유용할 것이다. 본 발명에 따라 사용될 수 있는 유전자 마커의 종류는 단순 서열 길이 다형성 (SSLP) (Williams et al., 1990), 단순 서열 반복 (SSR), 임의 증폭된 다형성 DNA (RAPD), DNA 증폭 지문법 (DAF), 서열 특성화 증폭 부위 (SCAR), 임의 프라이밍된 중합효소 연쇄반응 (AP-PCR), 증폭 단편 길이 다형성 (AFLP) (유럽 특허 제534 858호, 그의 전문이 참조에 의해 본 명세서에 구체적으로 포함됨) 및 단일 염기 다형성 (SNP) (Wang et al., 1998)을 포함하나, 이에 반드시 제한되는 것은 아니다.
토마토 품종은 2종이 넘는 부모로부터 개발될 수도 있다. 변형 역교배로 알려진 기술에서는 역교배 도중 상이한 반복친들을 사용한다. 변형 역교배를 사용하여, 원래의 반복친을 특정한 보다 바람직한 특성을 가지는 품종으로 대체할 수 있거나, 각각으로부터 유래된 상이한 바람직한 특성들을 얻기 위해 복수의 부모를 사용할 수 있다.
배수성(ploidy) 수준의 조작은 근친교배 식물체를 개선하기 위해 사용될 수 있는 또 다른 기술이다. 생물체의 배수성 수준이란 각 세포에서 전형적으로 발견되는 염색체의 완벽한 세트 수를 의미한다. 배수성 수준의 자연적 변이는 많은 식물에서 흔하다. 배수성 수준이 상이한 종 간의 교배는 실패하거나 불임 자손이 생산될 수 있기 때문에, 교배하기 전 부모 중 하나의 배수성 수준을 변경하여 배수성 수준을 맞추는 것이 유리할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 한 실시태양에서, 이배체 환원에 의해 신규 토마토 품종의 균일한 주가 개발될 수 있다. 이 기술은 예를 들어 사배체의 경우, 식물체의 게놈을 이배체로 감소시키는 것을 포함한다. 배수성 수준의 감소를 위한 기술은 예를 들어, 문헌 [Kopecky et al., 2005]에서 보고된 바와 같이 꽃밥 배양을 이용한 동정생식을 포함한다. 적합한 세포로는 소포자, 화분, 꽃밥, 배양체 및 씨방 배양체가 포함될 수 있다. 이 기술에서 사용되기 위해 이러한 방법으로 생성된 식물체를 이배체 환원체라고 부른다. 그런 다음, 이배체 환원체를 다른 이배체 토마토 식물체 품종과 교배 및/또는 역교배시킬 수 있다. 배수성 조작 및또는 육종이 완료된 후, 적합한 이배체 자손 식물체의 염색체 세트 수는 원래의 배수성 수준으로 다시 증가될 수 있다 (Linstrom, 1940).
이배체 식물체의 배수성 수준을 증가시키기 위한 방법도 당업계에 잘 알려져 있다. 예를 들어, 이배체 식물체의 세포를 콜치신으로 처리하여, 사배체 식물체를 다시 얻을 수 있다. 삼배체는 예를 들어, 2배화된 반수체 배주를 반수체 화분으로 수정시켜 생산할 수 있다. 배수성 수준을 조작하기 위한 다른 기술로는 체세포 교배 또는 프로토플라스트(protoplast) 융합이 포함된다. 이러한 기술 중 어느 것이나 본 발명에 따라 사용될 수 있다.
토마토는 대목 또는 접수로서의 사용을 위해 재배된다. 전형적으로, 상이한 종류의 토마토를 접목시켜 통상적으로 접수에 의해 부여되는 작물학적 형질을 보유하면서, 통상적으로 대목에 의해 부여되는 내병성을 강화시킨다. 솔라눔 라이코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 주와, 관련된 솔라눔 종 간에 접목을 일으키는 것은 흔한 일이다. 접목 및 영양 번식 방법은 당업계에 잘 알려져 있다.
본 발명의 토마토 주 및 품종은 토마토 주의 유전적 배경의 정선된 특성을 기초로 한 신규한 주 또는 품종의 개발에 특히 적합하다. 신규 토마토 주를 개발하려는 목적으로 FIR 128-1018와 교배시킬 제2 식물체를 선별함에 있어, 잡종 조합시 하나 이상의 선택된 바람직한 특성을 나타내거나 원하는 특성을 나타내는 식물체를 선택하는 것이 전형적으로 바람직할 것이다. 바람직한 특성의 예로는 제초제 내인성, 병원체 내성 (예를 들어, 곤충 내성, 선충류 내성, 미생물, 진균 및 바이러스 질병에 대한 내성), 남성 생식력, 개선된 수확 특성, 강화된 영양학적 품질, 증가된 항산화 성분 함량, 개선된 가공 특성, 높은 수확량, 과실의 향, 질감, 크기, 모양, 내구성, 저장 기간 및 수확량과 관련된 개선된 특성, 개선된 덩굴 수세, 증가된 수용성 고형분 함량, 균일한 과실 익음, 늦은 또는 이른 과실 익음, 감소된 꽃자리 흔적 크기, 묘(seedling) 생장력, 토양 조건에 대한 적응성 및 기후 조건에 대한 적응성이 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 가공 토마토에서 바람직할 수 있는 특성들이 반드시 신선하게 판매되는 토마토에서 바람직한 것들은 아니므로, 각각의 구체적인 최종 용도에 대해 바람직한 형질의 선별 과정이 상이할 수 있다. 예를 들어, 특정 특성, 예컨대, 고형분 함량, 및 기계 수확을 용이하게 하는 단단한 과실은 가공 토마토의 개발에서 더 바람직한 반면, 과실 색의 채도 및 균일성, 흠집없는 과실 및 균일한 과실 크기와 같은 외적 특성들은 소매상 또는 소비자가 더 크게 호응할, 신선하게 판매되는 산물의 개발에 전형적으로 더 중요하다. 물론, 질병 및 해충 내성, 높은 수확량 및 집중된 과실 세트와 같은 특정 형질은 어느 종류의 토마토 주 또는 품종에서나 관심이 있는 것들이다.
B. 성능 특성
상술한 바와 같이, FIR 128-1018 주는 바람직한 작물학적 형질을 나타낸다. 주의 성능 특성은 다른 주에 대비한 그 주의 성능 형질의 객관적 분석의 대상이다. 분석 결과를 하기에 제시한다.
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상기에 나타난 바와 같이, FIR 128-1018 주는 다른 토마토 주, 예컨대, 진분홍색 주인 수퍼 모모타로(Super Momotaro)와 비교시, 단단한 과실 및 긴 저장 기간과 같은 우수한 형질을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 한 중요한 측면은 상업적 용도를 위한 품종의 종자를 제공하는 것이다.
C. 유전 공학에 의해 토마토 주 FIR 128-1018로부터 유도된 식물체
역교배에 의해, 그리고 식물체에 직접 도입될 수 있는 많은 유용한 형질은 유전적 형질전환 기술에 의해 도입된 것들이다. 따라서, 유전적 형질전환을 본 발명의 토마토 주에 선택된 형질전환 유전자를 삽입하는데 사용할 수 있거나, 또는 교배에 의해 관심있는 토마토 주로 후속적으로 전달될 수 있는 형질전환 유전자를 포함하는 토마토 주의 제조에 사용될 수 있다. 토마토를 포함하는 식물체의 형질전환 방법은 당업자에게 잘 알려져 있다. 토마토의 유전적 형질전환에 사용될 수 있는 기술은 전기천공법, 미세주입 폭격법(microprojectile bombardment), 아그로박테리움(Agrobacterium)-매개 형질전환, 화분-매개 형질전환 및 프로토플라스트에 의한 직접 DNA 흡수를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
전기천공법에 의해 형질전환을 수행하기 위해서는, 세포 또는 배형성 유합조직의 현탁 배양과 같은 무른 조직을 사용할 수 있거나, 별법으로, 미성숙 배 또는 다른 유기적 조직을 직접 형질전환시킬 수 있다. 이 기술에서, 선택된 세포의 세포벽을 펙틴-분해 효소 (펙토라이아제) 또는 기계적으로 상처낸 조직에 노출시켜 부분적으로 조절된 방식으로 분해시킨다.
화분-매개 형질전환을 수행하기 위해서는, DNA로 예비처리된 화분을 수분을 위해 토마토 식물체의 자성 생식 기관에 적용시킬 수 있다. 토마토의 형질전환을 위한 화분-매개법은 미국 특허 제6,806,399호에 개시되어 있다.
형질전환 DNA 분절을 식물 세포에 전달하기 위한 특히 효율적인 방법은 미세주입 폭격법이다. 이 방법에서는, 입자를 핵산으로 코팅하여 추진력에 의해 세포 내로 전달한다. 예시적인 입자로는 텅스텐, 백금, 바람직하게는 금으로 이루어진 것들을 들 수 있다. 폭격을 위해, 현탁액 중 세포를 필터 또는 고체 배양 배지 상에 농축한다. 별법으로, 미성숙 배 또는 다른 표적 세포를 고체 배양 배지 상에 배열할 수 있다. 폭격될 세포를 미세주입 멈춤판 밑 적절한 거리에 위치시킨다.
DNA를 식물 세포 내로 빨리 전달하기 위한 예시적인 실시태양은 바이오리스틱스(Biolistics) 입자전달계인데, 이는 DNA 또는 세포로 코팅된 입자를 스테인리스 강 또는 나이텍스(Nytex) 스크린과 같은 스크린을 통해 표적 토마토 세포로 덮인 표면 상으로 추진시키는데 사용된다. 스크린은 입자들이 큰 응집체로서 수용체 세포에 전달되지 않도록 입자들을 분산시킨다. 발사 장치와 폭격될 세포 사이에 끼인 스크린이 발사 응집물의 크기를 감소시키고, 너무 큰 발사체에 의한 수용체 세포 상에 가해지는 손상을 감소시킴으로써 더 높은 형질전환 빈도에 기여할 수 있다고 여겨진다.
미세주입 폭격법은 널리 적용가능하며, 실질적으로 모든 식물체 종을 형질전환하는데 사용될 수 있다.
아그로박테리움-매개 전달은 유전자좌를 식물 세포에 도입하는데 널리 적용가능한 다른 계이다. 이 기술의 장점은 DNA가 전체 식물체 조직으로 도입될 수 있으므로, 프로토플라스트로부터 온전한 식물체를 재생할 필요가 없다는 점이다. 현대의 아그로박테리움 형질전환 벡터는 이. 콜라이 및 아그로박테리움에서 복제 가능하여, 편리한 조작을 가능하게 한다 (Klee et al., 1985). 게다가, 아그로박테리움-맴개 유전자 전달을 위한 벡터에서의 최근의 기술적 진보는 다양한 폴리펩티드 코딩 유전자를 발현할 수 있는 벡터의 작제가 용이해지도록, 유전자 및 제한 부위의 배열을 개선하였다. 상술한 벡터는 삽입된 폴리펩티드 코딩 서열의 직접 발현을 위한 프로모터 및 폴리아데닐화 부위에 의해 플랭킹된 편리한 멀티-링커 부위를 가진다. 또한, 활성(armed) 및 불활성(disarmed) Ti 유전자를 포함하는 아그로박테리움을 형질전환에 사용할 수 있다.
이는 아그로박테리움-매개 형질전환이 효율적인 식물체 종에서, 유전자좌 전달의 손쉽고 정해진 특성 때문에 가장 선택하기 적합한 방법이다. DNA를 식물 세포에 도입하기 위해 아그로박테리움-매개 식물 통합 벡터를 사용하는 것은 당업계에 잘 알려져 있다 (Fraley et al., 1985; 미국 특허 제5,563,055호).
또한, 식물 프로토플라스트의 형질전환은 인산칼슘 침전, 폴리에틸렌 글리콜 처리, 전기천공 및 이들 처리의 조합에 기초한 방법을 이용하여 달성될 수 있다 (예를 들어, 문헌[Potrykus et al., 1985; Omirulleh et al., 1993; Fromm et al., 1986; Uchimiya et al., 1986; Marcotte et al., 1988] 참조). 식물체의 형질전환 및 외래 유전 요소의 발현은 문헌[Choi et al. (1994)] 및 문헌[Ellul et al. (2003)]에 예시되어 있다.
선별가능한 마커, 채점가능한 마커, 해충 내인성을 위한 유전자, 내병성, 영양 강화 및 다른 작물학적 관심 유전자를 포함하나 이에 한정되지 않는 임의의 관심 유전자의 발현을 위한 식물 유전자 발현에 다수의 프로모터가 유용성을 가진다. 토마토 식물체 유전자 발현에 유용한 구성적(constitutive) 프로모터의 예로는, 외떡잎 식물 (예를 들어, 문헌[Dekeyser et al., 1990; Terada and Shimamoto, 1990] 참조)을 포함하는 대부분의 식물 조직에서 구성적이고 높은 수준의 발현을 일으키는 컬리플라워 모자이크 바이러스 (CaMV) P-35S 프로모터 (예를 들어, 문헌[Odel et al., 1985] 참조); 직렬로(tandemly), 부분적으로 복제된(duplicated) 형태의 CaMV 35S 프로모터로서 강화된 35S 프로모터 (P-e35S)인 노팔린 합성효소 프로모터 (An et al., 1988), 옥토핀 합성효소 프로모터 (Fromm et al., 1989); 및 미국 특허 제5,378,619호에 기재된 현삼(figwort) 모자이크 바이러스 (P-FMV) 프로모터 및 P-FMV 프로모터 서열이 직렬로 복제된 강화된 형태의 FMV 프로모터 (P-eFMV), 컬리플라워 모자이크 바이러스 19S 프로모터, 사탕수수 간균형 바이러스 프로모터, 달개비 황색 반점 바이러스(commelina yellow mottle virus) 프로모터 및 식물 세포에서 발현되는 것으로 알려진 다른 식물 DNA 바이러스 프로모터가 포함되나 이에 한정되지 않는다.
(1) 열 (Callis et al., 1988), (2) 빛 (예를 들어, 콩 rbcS-3A 프로모터 (Kuhlemeier et al., 1989); 옥수수 rbcS 프로모터 (Schaffner and Sheen, 1991); 또는 클로로필 a/b-결합 단백질 프로모터 (Simpson et al., 1985)), (3) 호르몬, 예컨대, 아브시스산 (Marcotte et al., 1989), (4) 상처 (예를 들어, wunl; Siebertz et al., 1989), 또는 메틸 야스모네이트, 살리실산 또는 완화제(Safener)와 같은 화합물에 의해 조절되는 프로모터를 포함하는, 환경적, 호르몬, 화학적 및/또는 발생적 신호에 반응하여 조절되는 식물 유전자 프로모터의 다양성은 식물 세포에서 작동가능하게 연결된 유전자의 발현을 위해 사용될 수 있다. 또한, 기관-특이적 프로모터 (예를 들어, Roshal et al., 1987; Schernthaner et al., 1988; Bustos et al., 1989)를 사용하는 것이 유리할 수도 있다.
본 발명의 토마토 주에 도입될 수 있는 예시적인 핵산은 예를 들어, 다른 종으로부터 유래된 DNA 서열 또는 유전자, 또는 동일 종에서 비롯되거나 동일 종에 존재하나, 전통적인 생식 또는 교배 기술보다는 유전 공학 방법에 의해 수용체 세포로 혼입되는 유전자 또는 서열을 포함한다. 그러나, 용어 "외인성"은 형질전달되는 세포에 정상적으로는 존재하지 않거나, 혹은 단순히 형질전환 DNA 분절 또는 유전자에서와 같은 형태, 구조 등으로 존재하지 않는 유전자, 또는 정상적으로 존재하며 자연적인 발연 패턴과 상이한 방식으로 발현, 예를 들어, 과발현시키기 원하는 유전자를 지칭하도록 의도된다. 따라서, 용어 "외인성" 유전자 또는 DNA는 유사한 유전자가 이미 수용체 세포에 존재하는지 여부와 상관없이, 수용체 세포에 도입되는 임의의 유전자 또는 DNA 분절을 지칭하도록 의도된다. 외인성 DNA에 포함되는 DNA의 종류는 식물체 세포에 이미 존재하는 DNA, 다른 식물체로부터의 DNA, 상이한 생물체로부터의 DNA, 또는 외부적으로 생성된 DNA, 예컨대, 유전자의 안티센스 메세지를 포함하는 DNA 서열, 또는 합성되거나 변형된 형태의 유전자를 코딩하는 DNA 서열을 포함할 수 있다.
수천종 아니면 수백종의 상이한 유전자가 알려져 있고, 본 발명에 따라 토마토 식물체에 잠재적으로 도입될 수 있다. 토마토 식물체에 도입하기 위해 선택할 수 있는 특정 유전자 및 상응하는 표현형의 비제한적 예는 곤충 내인성을 위한 하나 이상의 유전자, 예컨대, 바실러스 투링기엔시스(Bacillus thuringiensis) 유전자, 해충 내인성, 예컨대, 진균성 질환 조절을 위한 유전자, 제초제 내성, 예컨대, 글리포세이트 내인성을 부여하는 유전자, 및 수확량, 영양 강화, 환경 또는 스트레스 내인성 또는 식물체 생리, 성장, 발달, 형태 또는 식물체 산물(들)에서의 임의의 바람직한 변화와 같은 질적 개선을 위한 유전자를 포함한다. 예를 들어, 구조 유전자는 그의 전문이 참조에 의해 본 명세서에 포함된 WO 99/31248, 그의 전문이 참조에 의해 본 명세서에 포함된 미국 특허 제5,689,052호, 그의 전문이 참조에 의해 본 명세서에 포함된 미국 특허 제5,500,365호 및 그의 전문이 참조에 의해 본 명세서에 포함된 미국 특허 제5,880275호에 기재된 바실러스 곤충 억제 단백질 유전자를 포함하는 곤충 내인성을 부여하는 임의의 유전자를 포함할 것이다. 다른 실시태양에서, 구조 유전자는 그의 전문이 참조에 의해 본 명세서에 포함된 미국 특허 제5,633,435호에 기재된 아그로박테리움 주 CP4 글리포세이트 내성 EPSPS 유전자 (aroA:CP4), 또는 그의 전문이 참조에 의해 본 명세서에 포함된 미국 특허 제5,463,175호에 기재된 글리포세이트 산화환원효소 유전자 (GOX)를 포함하는 유전자에 의해 부여되는 제초제 글리포세이트에 대한 내인성을 가질 수 있다.
별법으로, DNA 코딩 서열은 예를 들어, 안티센스- 또는 공동-억제-매개된 기작 (예를 들어, 문헌[Bird et al., 1991] 참조)을 통해, 내생성 유전자 발현의 표적화된 억제를 야기하는 번역불가능한 RNA 분자를 코딩시킴으로써 이러한 표현형에 영향을 미칠 수 있다. 또한, RNA는 원하는 내생성 mRNA 산물을 절단하도록 조작된 촉매적 RNA 분자 (예를 들어, 리보자임)일 수 있다 (예를 들어, 문헌[Gibson and Shillito, 1997] 참조). 따라서, 관심있는 표현형 또는 형태 변화를 발현시키는 단백질 또는 mRNA를 생성시키는 임의의 유전자가 본 발명의 실시에 유용할 수 있다.
F. 정의
본 명세서의 설명 및 표에서, 다수의 용어를 사용하였다. 명세서와 특허청구범위에 대한 명확하고 일관된 이해를 제공하기 위해, 하기 정의를 제공한다:
대립유전자 (allele): 단일 유전자의 교대되는 형태.
역교배: 육성자가 반복적으로 잡종 자손, 예를 들어, 제1 세대 잡종 (F1)을 그 잡종 자손의 부모 중 하나에 대해 역교배시키는 과정. 역교배를 이용하여 유전적 정보 (예: 대립유전자)를 하나의 유전적 배경에서 다른 곳으로 전달할 수 있다.
교배: 두 부모 식물체의 짝짓기.
교차수분: 상이한 식물체로부터의 두 생식체의 결합에 의한 수정.
이배체: 2벌의 염색체를 가지는 세포 또는 생물체.
거세: 식물체의 남성 생식 기관의 제거, 또는 남성 불임을 만드는 세포질 또는 핵의 유전적 요소 또는 화학적 제제를 이용한 상기 기관의 불활성화.
효소: 생물학적 반응에 촉매로서 작용할 수 있는 분자.
F1 잡종: 2종의 비-동종동계 식물체의 교배의 제1 세대 자손.
유전자형: 세포 또는 생물체의 유전적 구성.
반수체: 이배체에서의 2벌의 염색체 중 한 벌을 가진 세포 또는 생물체.
연관(linkage): 동일한 염색체 상의 대립유전자들이, 그들의 이동이 독립적인 경우 확률적으로 예상되는 것보다 훨씬 자주 함께 분리되는 경향이 있는 현상.
유전자좌: 염색체 상의 지정된 위치.
마커: 환경적인 변이 요소가 없고 (즉, 유전율 1), 바람직하게는 공동우성적인 방식으로 유전되는, 쉽게 탐지가능한 표현형 (이배체 이형접합체에서 유전자좌의 두 대립유전자들은 쉽게 탐지가능함).
다배체: 3벌 이상의 완전한 염색체를 포함하는 세포 또는 생물체.
표현형: 세포 또는 생물체의 탐지가능한 특성 (여기서, 특성은 유전자 발현의 징후임).
양적 형질 유전자좌 (QTL): 양적 형질 유전자좌 (QTL)란 표현형이 통상적으로 연속적으로 분포된, 어느 정도 수량적으로 표현할 수 있는 형질을 조절하는 유전자좌를 지칭한다.
재생: 조직 배양물로부터의 식물체의 발달.
내성: 본 명세서에서, 용어 "내성(resistance)" 및 "내인성(tolerance)"은 상호교환적으로, 특정된 유해생물, 병원체, 비-생물적 영향 또는 환경적 조건에 대해 증상을 나타내지 않는 식물체를 설명하는데 사용된다. 이들 용어는 또한, 약간의 증상을 보이지만, 허용가능한 수확량로 시판가능한 산물을 여전히 생산할 수 있는 식물체를 설명하는데 사용된다. 내성 또는 내인성으로 일컬어지는 몇몇 식물체는 식물체의 발육이 저지되고 수확량이 감소되었음에도 이들이 여전히 작물을 생산할 수 있다는 의미에서만 그러할 뿐이다.
자가수분: 동일한 식물체의 꽃밥으로부터 유래한 화분의 주두로의 이동.
단일 유전자좌 전환 식물체: 흔히 역교배 기술을 통해 개발되었고, 한 유전자좌에서 상이한 품종으로부터 유래된 유전 물질 (예: 대립유전자)을 포함하는 것을 제외하고는, 주어진 품종의 원하는 형태적 및 생리적 특성을 본질적으로 모두 가진 식물체. 단일 유전자좌 전환 식물체를 개발하는데 유전자 형질전환을 사용할 수 있다.
실질적으로 동등함: 비교시, 평균으로부터 통계적으로 유의한 차이 (예: p = 0.05)를 나타내지 않는 특성.
사배체: 4벌의 염색체를 가지는 세포 또는 생물체.
조직 배양물: 동일하거나 상이한 종류의 단리된 세포, 또는 식물체의 일부 내로 조직화된 이러한 세포들의 집합을 포함하는 조성물.
형질전이 유전자: 형질전환에 의해 토마토 식물체의 게놈 내로 도입된 서열을 포함하는 유전자좌.
삼배체: 3벌의 염색체를 가지는 세포 또는 생물체.
G. 기탁 정보
상기 개시되고 특허청구범위에 기재되어 있는 토마토 주 FIR 128-1018의 기탁은 어메리칸 타입 컬쳐 콜렉션 (ATCC; 10801 University Blvd., Manassas, VA 20110-2209 소재)에 이루어졌다. 기탁일은 2007년 7월 30일이다. 토마토 주 FIR 128-1018의 기탁된 종자에 대한 수탁 번호는 ATCC Accession No. PTA-8595이다. 특허 등록시, 기탁에 대한 모든 제한은 제거되고, 기탁은 37 C.F.R. §1.801-1.809의 모든 요건을 만족시키려는 의도이다. 기탁은 30년, 최후 요청 후 5년, 또는 특허 효력 기간 중 가장 긴 기간 동안 기탁된 상태로 유지될 것이며, 필요한 경우 상기 기간 중에 교체될 수 있다.
상기에 명확성 및 이해를 돕기 위한 목적으로 예증 및 예시의 방식에 의해 발명을 어느 정도 자세하게 설명하였으나, 첨부된 특허청구범위의 범위에 의해서만 한정되는 본 발명의 범위 내에서, 어떤 변경 및 변형을 수행할 수 있음이 명백할 것이다.
본 명세서에 인용된 모든 참고문헌은 명시적인 참조에 의해 본 명세서에 포함된다.
하기 참고문헌들은 예시적인 절차 또는 본 명세서에 제시된 것에 보충적인 기타 세부사항을 제공하는 한, 참조에 의해 본 명세서에 개별적으로 포함된다.
참고문헌
미국 특허 제5,463,175호
미국 특허 제5,500,365호
미국 특허 제5,563,055호
미국 특허 제5,633,435호
미국 특허 제5,689,052호
미국 특허 제5,880,275호
미국 특허 제5,378,619호
미국 특허 제6,806,399호
WO 99/31248
An et al ., Plant Physiol., 88:547, 1988.
Bird et al ., Biotech . Gen . Engin . Rev., 9:207, 1991.
Bustos et al ., Plant Cell , 1:839, 1989.
Callis et al ., Plant Physiol., 88:965, 1988.
Choi et al ., Plant Cell Rep ., 13: 344-348, 1994.
Dekeyser et al ., Plant Cell , 2:591, 1990.
Ellul et al ., Theor . Appl . Genet ., 107:462-469, 2003.
유럽 특허 제534 858호
Fraley et al ., Bio / Technology, 3:629-635, 1985.
Fromm et al ., Nature , 312:791-793, 1986.
Fromm et al ., Plant Cell , 1:977, 1989.
Gibson and Shillito, Mol . Biotech ., 7:125,1997
Gull et al., J. Amer . Soc . Hort . Sci. 114:950-954, 1989.
Kader et al ., Hort . Sci ., 13:577-578, 1978.
Klee et al ., Bio - Technology, 3(7):637-642, 1985.
Kopecky et al ., Crop Science, 45:274-281, 2005.
Kuhlemeier et al ., Plant Cell , 1:471, 1989.
Linstrom, Genetics, 26:387-397, 1940.
Marcotte et al ., Nature, 335:454, 1988.
Marcotte et al ., Plant Cell , 1:969, 1989.
Odel et al ., Nature , 313:810, 1985.
Omirulleh et al ., Plant Mol . Biol ., 21(3):415-428, 1993.
Potrykus et al ., Mol . Gen . Genet ., 199:183-188, 1985.
Roshal et al ., EMBO J., 6:1155, 1987.
Schaffner and Sheen, Plant Cell , 3:997, 1991.
Schernthaner et al ., EMBO J., 7:1249, 1988.
Siebertz et al ., Plant Cell , 1:961, 1989.
Simpson et al ., EMBO J., 4:2723, 1985.
Terada and Shimamoto, Mol . Gen . Genet ., 220:389, 1990.
Uchimiya et al ., Mol . Gen . Genet ., 204:204, 1986.
Wang et al., Science, 280:1077-1082, 1998.
Williams et al ., Nucleic Acids Res ., 1 8:6531-6535, 1990.

Claims (24)

  1. 종자 샘플이 ATCC 수탁 번호 PTA-8595로 기탁된 토마토 주(株) FIR 128-1018의 종자.
  2. 제1항의 종자로부터 성장한 식물체.
  3. 제2항의 식물체의 부분.
  4. 제3항에 있어서, 과실, 대목(rootstock), 접수(scion), 세포, 배주 및 화분으로 이루어진 군으로부터 선택된 식물체 부분.
  5. 제2항의 토마토 식물체의 생리적 및 형태적 특성을 모두 가지는 토마토 식물체 또는 그의 부분.
  6. 종자 샘플이 ATCC 수탁 번호 PTA-8595로 기탁된 토마토 주 FIR 128-1018의 재생성 세포의 조직 배양물.
  7. 제6항에 있어서, 배(胚), 분열 조직, 떡잎, 화분, 잎, 꽃밥, 뿌리, 뿌리 선단(root tip), 암술, 꽃, 종자 및 줄기(stalk)로 이루어진 군으로부터 선택된 식물 체 부분으로부터 유래된 세포 또는 프로토플라스트(protoplast)를 포함하는 조직 배양물.
  8. 종자 샘플이 ATCC 수탁 번호 PTA-8595로 기탁된 토마토 주 FIR 128-1018의 생리적 및 형태적 특성을 모두 나타내는, 제7항의 조직 배양물로부터 재생된 토마토 식물체.
  9. 제2항의 식물체를 그 자신 또는 제2의 토마토 식물체와 교배시키는 것을 포함하는, 토마토 종자의 생산 방법.
  10. 제9항의 방법에 의해 생산된 F1 잡종 종자.
  11. 제10항의 종자를 성장시켜 생산된 F1 잡종 식물체.
  12. (a) 종자 샘플이 ATCC 수탁 번호 PTA-8595로 기탁된 토마토 주 FIR 128-1018의 토마토 식물체를 제2의 토마토 식물체와 교배시키는 단계; 및
    (b) FIR 128-1018로부터 유래된 토마토 식물체의 종자가 형성되도록 하는 단계
    를 포함하는, 토마토 주 FIR 128-1018-유래 토마토 식물체의 종자의 생산 방법.
  13. 제12항에 있어서,
    (c) 상기 FIR 128-1018-유래 토마토 종자로부터 성장한 식물체를 자가수정하거나 이를 제2의 토마토 식물체와 교배시켜, 추가적인 FIR 128-1018-유래 토마토 종자를 얻는 단계;
    (d) 단계 (c)의 추가적인 FIR 128-1018-유래 토마토 식물체를 얻기 위해, 상기 추가적인 FIR 128-1018-유래 토마토 종자를 성장시키는 단계; 및
    (e) 단계 (c) 및 (d)를 반복하여 추가적인 FIR 128-1018-유래 토마토 식물체를 생성하는 단계
    를 더 포함하는 방법.
  14. (a) 종자 샘플이 ATCC 수탁 번호 PTA-8595로 기탁된 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체로부터 번식할 수 있는 조직을 수집하는 단계;
    (b) 상기 조직을 재배하여 증식된 싹(shoot)을 얻는 단계; 및
    (c) 상기 증식된 싹을 심어(root) 뿌리가 난 식물소체(plantlet)를 얻는 단계
    를 포함하는, 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체의 영양 번식 방법.
  15. 제14항에 있어서, 상기 뿌리가 난 식물소체로부터 식물체를 성장시키는 단계를 더 포함하는 방법.
  16. (a) 종자 샘플이 ATCC 수탁 번호 PTA-8595로 기탁된 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체를, 원하는 형질을 포함하는 제2 토마토 식물체와 교배시켜 F1 자손을 얻는 단계;
    (b) 원하는 형질을 포함하는 F1 자손을 선별하는 단계;
    (c) 선별된 F1 자손을 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체와 교배시켜 역교배 자손을 생성시키는 단계;
    (d) 원하는 형질 및 토마토 주 FIR 128-1018의 생리적 및 형태적 특성을 포함하는 역교배 자손을 선별하는 단계; 및
    (e) 단계 (c) 및 (d)를 3회 이상 연속적으로 반복하여, 원하는 형질을 포함하는 4세대 이상의 역교배 자손을 생산하는 단계
    를 포함하는, 토마토 주 FIR 128-1018 내로 원하는 형질을 도입시키는 방법.
  17. 제16항의 방법에 의해 생성된 토마토 식물체.
  18. 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체 내로 원하는 형질을 부여하는 형질전환 유전자를 도입하는 것을 포함하는, 종자 샘플이 ATCC 수탁 번호 PTA-8595로 기탁되고 추가된 원하는 형질을 포함하는, 토마토 주 FIR 128-1018의 식물체의 생산 방법.
  19. 단단하고 성숙시 담황색인 과실, 큰꽃받침(macro calyx) 및 투명한 표피를 포함하는 형질의 조합을 나타내고, 형질의 조합은 종자 샘플이 ATCC 수탁 번호 PTA-8595로 기탁된 토마토 주 FIR 128-1018에서 발견되는 이러한 형질의 조합의 발현을 위한 유전적 수단에 의해 조절되는, 근친교배 토마토 주의 식물체.
  20. 제19항의 식물체의 종자.
  21. 제2항의 식물체로부터 핵산 샘플을 얻고, 상기 핵산에서 복수의 다형성(polymorphism)을 탐지하는 것을 포함하는, 제2항의 식물체 또는 그의 제1 세대 자손의 유전자형의 결정 방법.
  22. 제21항에 있어서, 컴퓨터 판독가능한 매체 상에 복수의 다형성을 탐지한 결과를 저장하는 단계를 더 포함하는 방법.
  23. 제22항의 방법에 의해 생성된 컴퓨터 판독가능한 매체.
  24. (a) 성숙하도록 재배된 제2항의 식물체를 얻는 단계; 및
    (b) 식물체로부터 토마토를 수집하는 단계
    를 포함하는 토마토 생산 방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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US8178757B2 (en) * 2009-07-27 2012-05-15 Seminis Vegetable Seeds, Inc. Tomato line PSQ24-2008
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KR20120060885A (ko) * 2009-09-09 2012-06-12 리즈크 즈완 자드틸트 엔 자드한델 비.브이. 보관 수명이 개선된 토마토
US8466350B2 (en) 2010-08-30 2013-06-18 Seminis Vegetable Seed, Inc. Tomato line FIS 14-2100
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US9351453B2 (en) * 2013-01-31 2016-05-31 Seminis Vegetable Seeds, Inc. Inbred tomato line FIR-180-FAMOUS
US9795099B2 (en) * 2015-04-29 2017-10-24 Saminis Vegetable Seeds, Inc. Tomato line FIRKL 11-4118

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6787687B1 (en) 1999-07-12 2004-09-07 James Giovannoni Rin gene compositions and methods for use thereof
US6806399B1 (en) 2000-04-19 2004-10-19 Carmel-Haifa University Economic Corporation Ltd. Pollen-mediated method for transformation of maize, tomato or melon
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