KR20090025422A - 별불가사리를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증및 미백의 효능을 가지는 기능성 추출물 및 그의 제조방법 - Google Patents

별불가사리를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증및 미백의 효능을 가지는 기능성 추출물 및 그의 제조방법 Download PDF

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남병혁
최찬기
강환열
전혜영
정민호
오수정
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최유진
윤성준
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조월순
(주)생물산업연구원
전혜영
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Abstract

본 발명은 별불가사리(Asterina pectinifera (Muller et Troschel))를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 기능성 추출물 및 그의 제조 방법에 관한 것으로, 이를 더욱 상세하게 설명하면, 수거된 불가사리로부터의 추출물을 심층적으로 분획하여 분리함으로서, 피부에 대한 항산화효과, 주름개선효과, 미백효과, 항균효과, 항여드름 효능을 나타내어 기능성 화장품 신소재를 개발하고 고부가가치의 제품으로 활용하는 특성을 가진 별불가사리(Asterina pectinifera (Muller et Troschel))를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 기능성 추출물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.
별불가사리, 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증, 미백효능

Description

별불가사리를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백의 효능을 가지는 기능성 추출물 및 그의 제조방법 {Effect of antioxdant, wrinkles protection, antibacterial, anti-inflammatory and whitening from Asterina pectinifera extract}
본 발명은 별불가사리(Asterina pectinifera (Muller et Troschel))를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 기능성 추출물 및 그의 제조 방법에 관한 것으로, 이를 더욱 상세하게 설명하면, 수거된 불가사리로부터의 추출물을 심층적으로 분획하여 분리함으로서, 피부에 대한 항산화효과, 주름개선효과, 미백효과, 항균효과, 항여드름 효능을 나타내어, 이들의 특성을 파악하여 기능성화장품, 기능성 식품 및 의약품의 원료로 활용하고자 하는 기능성 추출물에 관한 것이다.
일반적으로, 불가사리는, 몸은 편평한 별모양으로 연안에서 우리가 가장 흔하게 접할 수 있는 해양동물 중의 하나로서, 전국 연안에 30여종의 불가사리가 서식하고 있으며, 번식률은 대단히 높아서 마리당 200만∼300만개를 산란하며, 극피동물문의 바다나리강, 불가사리아강, 거미불가사리아강, 성게강, 해삼강에 포함되 는 해산 무척추동물이다. 우리나라에는 불가사리류 47종이 보고 되어 있으며 남쪽에 비해 북방계의 종이 풍부하다. 이들은 북태평양에 널리 분포하는 종으로서 일본의 북부와 북미쪽에 공통해 있는 종이다. 이들을 보면 빗살판불가사리류(Ctenodiscus), 작은불가사리류(Leptychaster), 검은띠불가사리류(Luidia), 헛불가사리류(Pseudarchaster), 애기불가사리류(Henricia), 햇님불가사리류(Solaster), 입방불가사리류(Pteraster), 문어불가사리류(Plazaster), 일본불가리류(Distolasterias), 아팰불가사리류(Aphelasterias), 아므르불가사리류(Asterias), 별 불가사리 (Asterina pectinifera)등이다.
불가사리는 해양생태계에 뚜렷한 천적이 없으며, 연안오염의 증가와 더불어 급속히 불어나고 있다. 이들은 재생력이 뛰어나 구제하기가 매우 어려워 폐기처분이 어렵다는 것이며 특히 산발적으로 해녀와 잠수부들에 의해 불가사리 수거 작업이 이루어지고 있으나, 구제된 불가사리를 처리해주는 기관이나 단체가 없어 거의 대부분이 해변가에서 건조하여 제거하는 실정이고 이로 인한 악취로 어민들이 고통을 받고 있다. 또한, 불가사리류는 육식성의 적게 먹는 동물로서 먹이에 대해 아주 민감하게 반응한다. 그래서 이미패류와 고동, 굴 등의 연체동물, 작은 갑각류, 다모류, 성게, 거미불가사리 등의 극피동물이 먹이가 된다. 자망에 걸린 어류도 먹으며 굴, 홍합, 조개 양식장에는 많은 불가사리가 습격하여 피해를 주는 수가 있다.
불가사리류는 육식성의 적게 먹는 동물로서 먹이에 대해 아주 민감하게 반응한다. 그래서 이미패류와 고동, 굴 등의 연체동물, 작은 갑각류, 다모류, 성게, 거미불가사리 등의 극피동물이 먹이가 된다. 자망에 걸린 어류도 먹으며 굴, 홍합, 조개 양식장에는 많은 불가사리가 습격하여 피해를 발생하는 등의 문제점이 있다.
이에 본 발명은 수거된 불가사리로부터의 추출물을 심층적으로 분획하고 피부에 대한 다양한 작용을 검색하여, 별불가사리 추출물의 항산화(노화, 주름개선) 효능, 항염증 효능, 미백 효능, 항여드름 효능을 가지므로, 이들 각 기능성을 가진 특성을 이용하여 기능성 화장품 및 기능성식품, 의약품 등에 사용될 신소재를 개발하고 고부가가치의 제품을 통하여 불가사리의 효용 가치를 높이면서 불가사리의 퇴치와 수산양식피해를 줄이는 효과를 제공하는 데 있다.
본원 발명은 불가사리로부터의 추출물을 심층적으로 분획하고 피부에 대한 다양한 작용을 검색하여, 기능성 화장품 및 기능성 식품, 의약품 등에 사용될 신소재를 개발하고 고부가가치의 제품으로 활용하는 방안을 모색하여. 불가사리의 효용 가치를 높이면서 불가사리의 퇴치와 수산양식피해를 줄이는 효과를 동시에 추구할 수 있을 것이다.
본원 발명은 별불가사리(Asterina pectinifera (Muller et Troschel))를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 기능성 추출물 및 그의 제조방법에 관한 것으로 이를 더욱 상세하게 설명하면, 수거된 불가사리로부터의 추출물을 심층적으로 분획하여 분리함으로서, 피부에 대한 항산화효과, 주름개선효과, 미백효과, 항여드름 효능 등을 검색하여, 기능성 화장품 신소재를 개발하고 고부가가치의 제품으로 활용하는 방안을 모색하고자 하였으며, 기능성 제품의 소재로 활용하기 위해 본 발명을 완성하기에 이르렀으며, 이는 불가사리의 효용 가치를 높이면서 불가사리의 퇴치와 수산양식피해를 줄이는 효과를 동시에 추구할 수 있을 것이다.
별불가사리(Asterina pectinifera)는 극피동물로 일반 어패류에 비해서 수분함량이 적으며, 회분의 함량이 높은 것이 특징이다(일반화학성분; 수분 61.5%, 고형물 38.5%, 유기물 10.6%, 질소 1.3%, 탄수화물 2.3%, 회분 27.9%). 유기성분은 조단백질 10%, 조지방 3.7%, 그리고 탄수화물 0.2% 등으로 구성되어 있다. 무기성분으로는 칼슘이 20.3%, 인 0.5%, 칼륨 0.69%, 마그네슘 2.4%, 회분 65.4%이다. 또한 회분에 대한 칼슘의 함량은 31%로서 이를 탄산칼슘으로 환산하면 전체 회분량에 대해 75~77%까지 이른다.
이하의 실시 예 및 실험 예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 단, 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이지 이들만으로 한정하는 것이 아니며, 여러 가지로 변형이 가능하다.
[실시 예 1 ] 별불가사리 추출물의 추출방법
본 발명 별불가사리(도 1)로부터 생리활성물질을 분리 및 정제하기 위해, 남해안으로부터 채집한 별불가사리 (Asterina pectinifera)를 표면의 이물질을 제거하고 깨끗이 수세한 후, 표면의 수분을 제거한 다음 분쇄기를 이용하여 건조된 별불가사리를 균질한 분말형태로 분말화시킨 분말가루 1g 에 멸균된 정제수 5 ㎖을 넣고 충분히 현탁시킨 다음, 세포최적 파쇄조건으로 -80℃에서 얼리고, 37℃에서 녹이는 과정을 3회 반복 실시하였으며, 이는 시료를 원심분리하여 상등액을 회수하여, 상등액으로부터 DNA를 정량하여, 세포최적 파쇄조건으로 결정하였다.
[실시 예 2 ] 별불가사리 추출물의 분획화 과정
먼저, 별불가사리의 조추출물 조건을 확립하기 위하여, 준비된 별불가사리에 에탄올 농도를 95, 90, 85, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50 %로 하여 에탄올을 각각 첨가하고, 40℃에서 감압농축기를 이용하여 추출물 시료로 회수하여 동결건조하였다. 조건별 에탄올 95, 90, 85, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50%의 추출물을 이용하여 각각의 유효성평가를 통해 실험한 결과, 65 % 에탄올의 조추출물이 가장 적합한 것으로 결정되었다.
[실시 예 3 ] 별불가사리 추출물의 세포독성
별불가사리의 조건별 에탄올 조추출물로부터 세포독성 확인을 위하여, MTT (methylthiazol-2-yl-2.5 diphenyl tetrazolium bromide) 분석을 통해 각 종 세포 주, 마우스 대식세포주 (RAW264.3) 및 사람 정상피부조직에서 분리한 진피세포(Human Dermal Fibroblast)를 이용하여 항염증실험을 위해 사용할 IC 50 값을 확인하였다. 그 결과를 표 1의 별불가사리의 조건별 에탄올 조추출물로부터 마우스 대식세포주(RAW264.3)를 이용한 세포독성시험(IC 50 농도)과, 표 2의 별불가사리의 65% 에탄올 조추출물로부터 사람의 진피세포(Human Dermal Fibroblast)를 이용한 세포독성시험(IC 50 농도)에서 나타낸바와 같이, 별불가사리 65% 에탄올 조추출물에서 마우스 대식세포주(RAW264.3)에서 IC50 값은 332.1 ㎍/㎖로 확인하였고(표 1),
이와 같은 결과에 따라, 진피세포(Human Dermal Fibroblast)를 이용한 세포독성실험에서는 65 % 에탄올 조추출물만을 이용하여 IC 50 값을 결정하였다. 이 경우는 각 조추출물 결과를 넣지 않고, 65 % 에탄올 조추출물의 농도에 따른 세포생존율을 통해 50 % 생존하는 IC 50 값을 표시한 것(표 2)으로 그의 결과를 보면, 진피세포(Human Dermal Fibroblast)에서는 IC50 값은 1,000 ㎍/㎖ 결정되었다(표 2).
Figure 112007064747896-PAT00001
Figure 112007064747896-PAT00002
다음은 별불가사리의 에탄올 조추출물을 이용하여 여러 기능성을 실험한 결과를 서술한 것으로 다음과 같다.
[실시 예 4 ] 별불가사리 추출물의 항산화(노화, 주름개선) 효능
실험 1. DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical) 소거
도 2는 에탄올 추출조건에 따라 DPPH소거능을 측정한 결과를 나타낸 것으로, DPPH소거능을 측정한 결과 65% 에탄올 조추출물에서 가장 높은 소거능을 나타내었다. 상기 소거능이 뛰어난 65% 에탄올 조추출물의 농도 변화에 따른 DPPH 소거능을 알아보기 위한 실험결과에서는, 도 3에 나타난 것과 같이, 65% 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 라디칼 소거능도 증가하였다.
별불가사리로부터 에탄올 추출조건에 따라 10가지 에탄올조건의 시료(95~55 %)의 조추출물을 이용하여 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical) 소거능을 측정한 결과, 65% 에탄올 조추출물에서 가장 높은 소거능과 조추출물의 농도증가에 따라 라디칼 소거능도 증가하는 농도 의존성을 나타내었다.
실험 2. 슈퍼옥사이드 라디칼(Superoxide radical)에 대한 억제(NBT/XO assay)
별불가사리로부터 10가지 에탄올조건 (에탄올 95, 90, 85, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50%의 추출물)에 따른 조추출물을 이용하여 슈퍼옥사이드 라디칼(Superoxide radical) 소거능을 확인한 결과에서, 도 4는 에탄올 추출조건에 따라 NBT/XO 분석에 따른 슈퍼옥사이드 라디칼(Superoxide radical) 소거능을 나타낸 것으로, 65 % 에탄올 조추출물에서 가장 높은 소거능을 나타내었다.
상기 소거능이 뛰어난 65 % 에탄올 조추출물의 농도 변화에 따른 슈퍼옥사이드 라디칼(Superoxide radical)의 소거능을 알아 보기 위한 실험결과에서는, 도 5에 나 타난 것과 같이, 65% 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 슈퍼옥사이드 라디칼(Superoxide radical)소거능 소거능도 증가하였다.
슈퍼옥사이드 라디칼(Superoxide radical)에 대한 억제에 대한 실험결과, 별불가사리로부터 65 % 에탄올 조추출물에서 가장 높은 소거능과 농도 의존성을 나타내었다.
실험 3. 퍼옥실 라디칼( Peroxyl radical)에 대한 억제
별불가사리로부터 10가지 에탄올조건 (에탄올 95, 90, 85, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50%의 추출물)에 따른 조추출물을 이용하여 Peroxyl radical 소거능을 확인한 결과에서, 도 6은 에탄올 추출조건에 퍼옥실 라디칼(Peroxyl radical) 소거능의 결과를 나타낸 것으로, 65 % 에탄올 조추출물에서 가장 높은 소거능을 나타내었다. 상기 소거능이 뛰어난 65 % 에탄올 추출물의 농도 변화에 따른 퍼옥실 라디칼(Peroxyl radical) 소거능을 알아보기 위한 실험결과에서는, 도 7에 나타낸바와 같이, 65 % 에탄올 추출물의 퍼옥실 라디칼(Peroxyl radical) 소거능도 증가하였다. 퍼옥실 라디칼(Peroxyl radical)소거능에 대한 실험결과, 별불가사리로 부터 65 % 에탄올 추출물에서 가장 높은 소거능과 농도 의존성을 나타내었다.
실험 4. 자외선 조사 시험 ; 피부 주름살 감소 효과 측정(Human Dermal Fibroblast)
별불가사리로부터 10가지 에탄올조건 (에탄올 95, 90, 85, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50%의 추출물)에 따른 조추출물을 이용하여 자외선 조사 시험을 확인한 결과에서, 도 8은 별불가사리의 65 % 에탄올 추출물에 의해 자외선(UVB 290-320 nm)으로 인해 주름살 형성과 관련한 유전자인 MMP-1 및 procollagen발현량을 분석한 것을 나타낸 것으로, 그 결과는 별불가사리의 65 % 에탄올 추출물에서 자외선(UVB 290-320 nm)만 조사한 그룹(UV+/음성)과 비교할 경우, MMP-1 유전자의 발현량은 감소하였으며, 프로콜라겐(procollagen) 유전자의 발현량은 증가하는 것을 확인하였다. 또한 이들 추출물은 일반적으로 주름살 억제효과를 나타내는 ascorbic acid와 비교할 경우 유사한 활성능을 나타내었다.
상기 별불가사리의 65 % 에탄올 추출물에서 세포독성을 전혀 나타나지 않은 농도인 100 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖을 각각 처리한 후, 자외선(UVB 290-320 nm)을 조사하고 주름살 유도와 관련한 유전자인 MMP-1(matrix metallopeptidase 1) 및 프로콜라겐(procollagen) 발현량을 Real-time PCR로 측정한 결과, MMP-1 유전자 발현의 감소 및 프로콜라겐(procollagen) 유전자의 발현증가를 유도하는 것으로 나타났다(도 9).
[실시 예 5] 별불가사리 추출물의 항염증 효과
실험 1. 대식세포 nitric oxide(NO) 분비 억제 (In vitro 실험)
별불가사리로부터 10가지 에탄올조건 (에탄올 95, 90, 85, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50%의 추출물)에 따른 조추출물을 이용하여 대식세포의 nitric oxide(NO) 분비 억제능을 확인한 결과에서, 도 10에 나타낸 바와 같이, 에탄올 추출조건에 따 라 nitric oxide(NO) 분비 억제능을 확인한 결과, 별불가사리의 65 % 에탄올 추출물에서 가장 높은 활성을 나타내었다. 상기 소거능이 뛰어난 별불가사리의 65 % 에탄올 추출물의 농도 변화에 따른 nitric oxide(NO) 분비 억제능을 알아 보기 위한 실험결과에서는, 도 11에 나타낸바와 같이, 65 % 에탄올 조추출믈의 농도증가에 따라 nitric oxide(NO) 분비 억제능도 증가하였다.
따라서, nitric oxide(NO) 분비 억제능에 대한 실험결과, 별불가사리로부터 에탄올 65% 에탄올 조추출물에서 가장 높은 소거능과 농도 의존성을 나타내었다
실험 2. 대식세포의 염증 cytokine의 분비 억제 (In vitro 실험)
별불가사리의 65 % 에탄올 추출물을 이용하여 농도에 따른 염증사이토카인 억제능을 확인한 결과에서, 도 12에 나타낸 바와 같이, 65 % 조추출믈의 농도증가에 따라 IL-6 염증사이토카인의 분비량은 감소하였으나, 농도에 따른 차이는 크게 나타나지 않았다. 도 13은 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 TNF-α 염증사이토카인의 분비량을 나타내 것으로, 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 TNF-α 염증사이토카인의 분비량은 감소하였으나, 농도에 따른 차이는 크게 나타나지 않았다.
실험 3. 귀부종 억제 (In vivo 동물실험)
도 14는 마우스 귀에 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물을 도포한 후, 염증유발물질인 Arachidonic acid를 도포한 후, 귀의 두께를 측정한 결과를 나타낸 것으로, 마우스 귀에 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물을 각각 1시간과 24 시간 도포한 후 염증유발물질인 Arachidonic acid를 도포한 후, 귀의 두께를 측정한 결과, 별불가사리의 65 % 에탄올 추출물이 양성대조물질 (Nimesulide)에 비해서는 다소 낮았으나 다소 귀부종이 감소하는 것으로 나타나 염증억제 효과가 있음을 확인하였다.
[실시 예 6 ] 별불가사리 추출물의 미백 효능
1) 타이로시나아제(Tyrosinase) 활성 억제
도 15에 나타낸바와 같이, 에탄올 추출조건에 따라 타이로시나아제(Tyrosinase)활성 억제능을 확인한 결과, 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물에서 가장 높은 활성을 나타내었다.
도 16은 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 타이로시나아제(Tyrosinase) 활성 억제능을 나타낸 것으로, 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 tyrosinase 활성 억제능도 증가하였다.
그 결과는, 별불가사리로부터 65% 에탄올 조추출물에서 가장 높은 타이로시나아제(Tyrosinase) 활성억제능과 65% 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 티로시나아제(Tyrosinase)활성 억제능을 나타내는 농도 의존성을 보였다.
2) DOPA 활성 억제
도 17은 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 DOPA 활성 억제능을 나타는 것으로, 별불가사리의 65% 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 DOPA 활성 억제능과 농도 의존성을 나타내었다.
3) Melan-α 세포를 이용한 멜라닌 분비 억제
도 18은 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 멜라닌 분비 억제능을 나타는 것으로, 65% 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 멜라닌 분비 억제능과 농도의존성을 나타내었다.
[실시 예 7 ] 별불가사리 추출물의 항여드름 효과
여드름 원인균인 P. acune, S. epidermis 표준균주에 대한 항균 활성(MIC)을 나타낸 것으로, 별불가사리 에탄올 65% 조추출물 및 90% 조추출물에서 여드름 원인균 중 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균활성능이 미약하게 나타났다(표 3).
Figure 112007064747896-PAT00003
이상의 실험결과를 종합하면,
1. 별불가사리 추출물의 항산화(노화, 주름개선) 효능을 알아보기 위한 에탄올 추출물의 실험에서,
1) DPPH 소거능을 측정한 결과, 65 % 에탄올 조추출물에서 가장 높은 소거능과 조추출물의 농도증가에 따라 라디칼 소거능도 증가하는 농도 의존성을 나타내었다.
2) 슈퍼옥사이드 라디칼(Superoxide radical)에 대한 억제에 대한 실험결과, 별불가사리로부터 에탄올 65% 조추출물에서 가장 높은 소거능과 농도 의존성을 나타내었다.
3) 퍼옥실 라디칼(Peroxyl radical)소거능에 대한 실험결과, 별불가사리로 부터 65 % 에탄올 추출물에서 가장 높은 소거능과 농도 의존성을 나타내었다.
4) 자외선(UVB 290-320 nm)으로 인해 주름살 형성과 관련한 유전자인 MMP-1 및 procollagen발현량을 분석한 것을 나타낸 것으로, 그 결과는 별불가사리의 65 % 에탄올 추출물에서 자외선(UVB 290-320 nm)만 조사한 그룹(UV+/음성)과 비교할 경우, MMP-1 유전자의 발현량은 감소하였으며, 프로콜라겐(procollagen) 유전자의 발현량은 증가하는 것을 확인하였다. 또한 이들 추출물은 일반적으로 주름살 억제효과를 나타내는 ascorbic acid와 비교할 경우 유사한 활성능을 나타내었다.
2. 별불가사리 추출물의 항염증 효능을 알아보기 위한 에탄올 추출물의 실험에서,
1) 대식세포의 nitric oxide(NO) 분비 억제능에 대한 실험결과, 별불가사리로부터 에탄올 65% 에탄올 조추출물에서 가장 높은 소거능과 농도 의존성을 나타내었다
2) 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 TNF-α 염증사이토카인의 분비량은 감소하였으나, 농도에 따른 차이는 크게 나타나지 않았다.
3) 마우스 귀에 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물을 도포한 후, 염증유발물질인 Arachidonic acid를 도포한 후, 귀의 두께를 측정한 결과를 나타낸 것으로, 별불가사리의 65 % 에탄올 추출물이 양성대조물질 (Nimesulide)에 비해서는 다소 낮았으나 다소 귀부종이 감소하는 것으로 나타나 염증억제 효과가 있음을 확인하였다.
3. 별불가사리 추출물의 미백 효능을 알아보기 위한 에탄올 추출물의 실험에서,
1) 별불가사리로부터 65% 에탄올 조추출물에서 가장 높은 타이로시나아제(Tyrosinase) 활성억제능과 농도 의존성을 보였다.
2) 별불가사리의 65% 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 DOPA 활성 억제능과 농도 의존성을 나타내었다.
3) 별불가사리의 65% 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 멜라닌 분비 억제능도 농도의존성을 나타내었다.
4. 별불가사리 추출물의 항여드름 효능을 알아보기 위한 에탄올 추출물의 실험에서, 여드름 원인균인 P. acune, S. epidermis 표준균주에 대한 항균 활성(MIC)을 나타낸 것으로, 별불가사리 에탄올 65% 조추출물 및 90% 조추출물에서 여드름 원인균 중 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균활성능이 미약하게 나타났다.
따라서, 별불가사리로 부터 65% 에탄올 조추출물에서 기능성추출물의 특성을 살펴보면, 항산화 효능, 주름개선 효능, 항여드름 효능ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 것을 알 수 있었다.
이상에서 본 발명은 기재된 구체예에 대해서만 상세히 설명되었지만 본 발명의 기술사상 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속함은 당연한 것이다.
본 발명은 수거된 불가사리로부터의 추출물을 심층적으로 분획하고 피부에 대한 다양한 작용을 검색하여, 별불가사리 추출물의 항산화(노화, 주름개선) 효능, 항염증 효능, 미백 효능, 항여드름 효능을 가지고 있어, 기능성 식품이나, 건강식품, 의약품, 기능성 화장품등의 신소재를 개발하고 고부가가치의 제품을 통하여 불가사리의 효용 가치를 높여 산업적으로 이용범위의 확대시키는 효과를 제공하는 데 있다.
도 1은 별불가사리(Asterina pectinifera (Muller et Troschel))의 사진.
도 2는 에탄올 추출조건에 따라 DPPH소거능을 측정한 결과를 나타낸 그림.
도 3은 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 라디칼 소거능을 나타낸 그림.
도 4는 에탄올 추출조건에 따라 NBT/XO 분석에 따른 Superoxide radical 소거능을 나타내었다.
도 5는 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 Superoxide radical 소거능도 증가하였다.
도 6은 에탄올 추출조건에 Peroxyl radical 소거능의 결과를 나타내었다.
도 7은 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 Peroxyl radical 소거능도 증가를 나타내었다.
도 8은 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물에 의해 자외선(UV)으로 인해 주름살 형성과 관련한 유전자인 MMP-1 발현량을 분석하였다. 그 결과 자외선 조사 후 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물을 처리한 경우 농도증가에 따라 MMP-1발현량이 억제되었다.
도 9는 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물에 의해 자외선(UV)으로 인해 주름살 형성과 관련한 유전자인 procollagen 발현량을 분석하였다. 그 결과 자외선 조사 후 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물을 처리한 경우 농도증가에 따라 procollagen 발현량이 증가하였다.
도 10은 에탄올 추출조건에 따라 nitric oxide(NO) 분비 억제능을 확인한 결과를 나타내었다.
도 11은 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 nitric oxide(NO) 분비 억제능도 증가하였다.
도 12는 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 IL-6 염증사이토카인의 분비량을 나타내었다.
도 13은 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 TNF-α 염증사이토카인의 분비량을 나타내었다.
도 14는 마우스 귀에 별불가사리 65 % 에탄올 조추출물을 도포한 후 염증유발물질인 Arachidonic acid를 도포한 후 귀의 두께를 측정한 결과를 나타내었다.
도 15는 에탄올 추출조건에 따라 tyrosinase 활성 억제능을 확인한 결과를 나타내었다.
도 16은 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 tyrosinase 활성 억제능을 나타내었다
도 17은 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 DOPA 활성 억제능을 나타내었다.
도 18은 별불가사리의 65 % 에탄올 조추출물의 농도증가에 따라 멜라닌 활성 억제능을 나타내었다.

Claims (4)

  1. 별불가사리 기능성 추출물에 있어서, 별불가사리 (Asterina pectinifera)를 표면의 이물질을 제거하고 깨끗이 수세한 후, 표면의 수분을 제거한 다음, 분쇄기를 이용하여 건조된 별불가사리를 균질한 분말형태로 분말화시킨 분말가루 1g 에 멸균된 정제수 5 ㎖을 넣고 충분히 현탁시킨 후, 세포 파쇄조건으로 -80℃에서 얼리고, 37℃에서 녹이는 과정을 3회 반복 실시하였으며, 여기에 65 % 에탄올 첨가하고, 40℃에서 감압농축기를 이용하여 추출물 시료를 회수하여, 동결건조하므로 동결 건조된 65 % 에탄올 조추출물이 얻어짐을 특징으로 하는 별불가사리를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 기능성 추출물의 제조방법.
  2. 제 1항의 추출방법에 의하여 추출되어지는 것을 특징으로 하는 별불가사리를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 기능성 추출물.
  3. 제 2 항에 있어서, 별불가사리를 이용한 기능성 추출물은 주름개선 및 노화를 위한 항산화, 항염증, 미백기능, 항여드름에 효능을 가지게 됨을 특징으로 하는 별불가사리를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 기능성 추출물.
  4. 제 2 항에 있어서, 별불가사리를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 기능성 추출물은, 건강식품소재, 기능성 식품소재, 기능성 화장품 소재, 의학적 약품 소재 중에서 선택된 하나 또는 그 이상의 소재로 이용 가능한 것을 특징으로 하는 별불가사리를 이용한 항산화, 주름개선, 항여드름ㆍ항염증 및 미백효능을 가지는 기능성 추출물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR101475454B1 (ko) * 2012-06-12 2014-12-22 네비온 주식회사 불가사리 추출물 및 유근피 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 세포 성장 촉진 효과, 주름개선 효과, 콜라겐 합성 촉진 효과 및 보습 효과를 가지는 화장료 조성물
CN104434983A (zh) * 2014-12-10 2015-03-25 沈阳药科大学 海燕提取物的提取方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用
KR102453269B1 (ko) 2022-07-18 2022-10-11 주식회사 뷰티앤코스 불가사리 추출물 및 하이드롤라이즈드 콜라겐을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선 효과, 콜라겐 합성 촉진 효과 및 보습 효과를 가지는 화장료 조성물

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