KR20090007086A - 우 결핵병 진단용 면역특이단백질 항원 및 이를 이용한 우결핵균 감염을 진단하는 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 우 결핵병 진단용 면역특이 단백질 항원, 이를 이용한 우 결핵균 항체 검출용 진단키트 및 우 결핵균 감염을 진단하는 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 우 결핵균이 가지고 있는 단백질 분획 중 우 결핵균에 감염된 소의 항체와 특이적으로 면역반응을 일으키는 단백질항원, 이를 이용한 우 결핵균 항체 검출용 진단키트 및 우 결핵균 감염을 진단하는 방법에 관한 것이다.
결핵, 마이코박테리움 보비스, 효소면역측정법 (ELISA), 면역특이단백질 항원, 질량분석기, 단백질체 분석
Description
본 발명은 우 결핵병 진단용 면역특이단백질 항원, 이를 이용한 우 결핵균 항체 검출용 진단키트 및 우 결핵균 감염을 진단하는 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 우 결핵균이 가지고 있는 단백질 분획 중 우 결핵균에 감염된 소의 항체와 특이적으로 면역반응을 일으키는 단백질항원, 이를 이용한 우 결핵균 항체 검출용 진단키트 및 우 결핵균 감염을 진단하는 방법에 관한 것이다.
Mycobacterium bovis는 소, 염소, 양, 사슴, 돼지, 고양이, 개, 유인원, 동물원 동물 등의 동물과 사람에서 결핵을 일으키는 인수공통전염병이다 [de la Rua-Domenech, 2006]. 소 결핵은 M. bovis의 배양 상층액인 purified protein derivative (PPD)에 대한 감염된 개체의 지연형 과민반응을 이용한 피내검진에 의해 방제하고 있다. 그러나 피내접종은 지연형 과민반응이기 때문에 진단 시간이 비 교적 길고, 주관적인 결과판정으로 진단상 결함을 가지고 있다. 이러한 결핵 피내진단의 단점을 극복하기 위해 많은 연구자는 최신 기법, 예를 들면, ELISA, 면역크로마토그래피 등의 신속하고 객관적인 진단방법을 찾고자 연구노력해오고 있다 [재검토를 위해 Amor 일행, 2005; de la Rua-Domenech 일행, 2006; Palmer와 Waters, 2006 참조].
T 세포 면역반응이 결핵에 매우 중요하고 피내접종과 r-IFN 검사와 같은 결핵 진단에 유용한 방법으로 사용되고 있다고 하더라도, 결핵에서 B 세포 면역반응은 특히, 결핵의 중·후기에 중요하다 [de la Rua-Domenech 일행, 2006 참조]. 그러므로 결핵의 B 세포면역반응에 관련되는 특이항원을 찾는 것은 결핵진단법 개발에 있어 매우 중요하다 [재검토를 위해 Manca 일행, 1997; Lyashchenko 일행, 2001; Houghton 일행, 2002; Amor 일행, 2005; Palmer와 Waters, 2006 참조].
현재까지, 결핵진단법으로써 ELISA와 면역크로마토그래피에서 사용된 B 세포 항원은 PPD와 고전적인 면역학적 방법, 즉, 1차원 전기영동과 Western blot에 의해 동정된 몇몇 재조합 단백질들이다 [Lightbody 일행, 2000; Pollock 일행, 2005; Palmer와 Waters, 2006]. 그러나 진단법의 특이성과 민감성의 한계 때문에 그 유용성은 매우 낮다.
근래 들어, 단백질체 분석기법은 계속하여 발전해왔으며, 결핵진단의 민감성과 특이성을 높이기 위한 결핵진단의 특이한 바이오마커로서 B 세포 항원을 찾는 데 적용될 수 있다 [Mattow 일행, 2003 참조]. 본 발명은 이미 개발된 단백질체 분석기법인 1차와 2차 전기영동, Western blot, nanoLC-MS/MS, MASCOT, BLAST 등의 방법을 이용하여 결핵균의 특이단백질 항원을 찾아내었다 [Eng 일행, 1994; Perkins 일행, 1999; Lyashchenko 일행, 2001; Mattow 일행, 2003 참조].
우결핵은 우결핵균에서 유래한 단백질 항원을 소의 피내에 접종하여 지연형 과민반응 여부를 관찰하는 피내진단이 공인진단법으로 쓰이고 있다. 하지만, 피내검사에 의한 우결핵의 진단은 접종 후 72시간이 지난 다음에서야 진단될 수 있어 진단소요시간이 길다는 단점이 있고, 개체별로 피내접종과 지연형 과민반응 관찰을 위한 2회 보정이 필요한 불편성이 있었다.
더욱이 피내검사에 의한 우결핵의 진단은 우결핵 면역반응 특성상 T세포 특이적 면역반응을 관찰하는 것으로서 초기에 우결핵을 진단하는 데는 우수한 진단법이기는 하나, 우결핵균이 호흡기 또는 소화기 계통으로 배설되어 타개체로의 전파위험성이 커지는 우결핵 후기에는 피내진단에 의한 진단에서 음성으로 나타날 수 있다는 결정적인 단점을 안고 있다. 이와는 상반되게 B 세포 면역반응 결과인 특이항체 형성은 우결핵 초기에는 미약한 반면, 우결핵 후기로 진행될수록 특이항체 수준은 일반적으로 높아진다고 알려져 있다.
따라서 본 발명에서는 우결핵 후기에 주요 면역반응인 항체생성 여부를 확인할 수 있는 면역특이단백질 항원을 발견하고자 하였다.
본 발명은 상기 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 본 발명의 목적은 우 결핵균(마이코박테리움 보비스)의 배양 상층액으로부터 수득되며, 서열 1, 서열 2, 서열 3, 서열 4, 서열 5, 서열 6, 서열 7, 서열 8, 서열 9, 서열 10, 서열 11, 서열 12, 서열 13, 서열 14, 서열 15, 서열 16, 서열 17, 서열 18, 서열 19, 서열 20 및 서열 21로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 아미노산 서열로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 우 결핵균에 감염된 개체에 특이적으로 반응하는 단백질 항원을 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 단백질 항원이 각기 서로 다른 웰에 피복된 플레이트인 것을 특징으로 하는 우 결핵균 항체 검출용 진단키트를 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 우 결핵균 항체 검출용 진단키트에 우 결핵균에 감염된 개체의 혈청을 반응시키는 단계; 및 기질과의 반응에 의해서 발색을 나타내는 효소가 표지된 2차 항체 접합체(conjugate)를 가하고, 상기 효소의 기질함유 용액을 첨가하여 발색반응 시키는 단계를 포함하는 우 결핵균 감염을 진단하는 방법을 제공하는데 있다.
상기한 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 우 결핵균인 마이코박테리움 보비스의 배양 상층액으로부터 수득되며, 서열 1, 서열 2, 서열 3, 서열 4, 서열 5, 서열 6, 서열 7, 서열 8, 서열 9, 서열 10, 서열 11, 서열 12, 서열 13, 서열 14, 서열 15, 서열 16, 서열 17, 서열 18, 서열 19, 서열 20 및 서열 21로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 아미노산 서열로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 우 결핵균에 감염된 개체에 특이적으로 면역 반응하는 단백질 항원을 제공한다.
본 발명은 상기 단백질 항원이 각기 서로 다른 웰에 피복된 플레이트인 것을 특징으로 하는 우 결핵균 항체 검출용 진단키트를 제공한다.
본 발명은 상기 우 결핵균 항체 검출용 진단키트에 우 결핵균에 감염된 개체의 혈청을 반응시키는 단계; 및 기질과의 반응에 의해서 발색을 나타내는 효소가 표지된 2차 항체 접합체(conjugate)를 가하고, 상기 효소의 기질함유 용액을 첨가하여 발색 반응하는 단계를 포함하는 우 결핵균 감염을 진단하는 방법을 제공한다.
본 발명은 우 결핵균의 배양 상층액의 단백질 항원 중 우 결핵균에 감염된 개체의 혈청에 특이적으로 면역 반응하는 단백질 항원들에 대한 정보를 제공할 수 있다. 본 발명에 의한 우 결핵균에 대한 특이 단백질 항원은 우 결핵균에 대한 혈청학적 진단에 활용할 수 있는 것으로 기대된다.
본 발명은 우결핵 후기에 주요 면역반응인 항체생성 여부를 확인할 수 있는 면역특이단백질 항원을 발견하고자 하였다.
본 발명은 우결핵균 마이코박테리움 보비스의 배양상층액으로부터 우결핵균에 인공 감염시킨 혈청에 특이적으로 반응하는 단백질 항원을 얻을 수 있다.
본 발명을 위하여 우 결핵의 주 원인균인 마이코박테리움 보비스에서 유래한 단백질 항원들 중 우결핵균을 인공감염시킨 소의 혈청과 면역특이적으로 관찰된 단백질 항원들을 분리할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면 우결핵균의 주 원인균인 마이코박테리움 보비스의 주요 단백질 항원들을 2차원 전기영동으로 펼친 후, 마이코박테리움 보비스를 인공감염시킨 소의 혈청을 반응시킨 결과, 면역 특이적으로 반응하는 단백질 항원을 발견할 수 있다.
본 발명에서 면역 특이적 반응을 보인 단백질들은 질량분석기와 단백질체 분석프로그램을 이용하여 MPB70 외 20종을 동정할 수 있다. 이들 면역특이단백질들은 우 결핵균에 감염된 개체에 특이적으로 반응하므로 우결핵을 혈청학적으로 진단할 수 있는 ELISA 진단법에 적용하여 우 결핵균 감염을 진단할 수 있다.
상기에서 우 결핵균에 감염된 개체에 특이적으로 반응하는 단백질 항원은 서열 1, 서열 2, 서열 3, 서열 4, 서열 5, 서열 6, 서열 7, 서열 8, 서열 9, 서열 10, 서열 11, 서열 12, 서열 13, 서열 14, 서열 15, 서열 16, 서열 17, 서열 18, 서열 19, 서열 20 및 서열 21로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 아미노산 서열로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 한다.
본 발명은 상기 단백질 항원을 플레이트 웰에 각각 피복하여 우 결핵균 항체 검출용 진단키트를 제조할 수 있다.
본 발명은 상기 우 결핵균 항체 검출용 진단키트를 이용하여 우 결핵균 감염을 진단할 수 있다.
본 발명에서 우 결핵균 감염을 진단하는 방법은 상기 우 결핵균 항체 검출용 진단키트에 우 결핵균에 감염된 개체의 혈청을 반응시키는 단계; 및 기질과의 반응에 의해서 발색을 나타내는 효소가 표지된 2차 항체 접합체(conjugate)를 가하고, 상기 효소의 기질함유 용액을 첨가하여 발색 반응하는 단계를 통해 이루어지는 것이 바람직하다.
본 발명에 의한 우 결핵에 대한 면역특이단백질 항원을 이용하여 기존의 우 결핵 공인진단법으로 이용하고 있는 피내진단법의 진단 시술 시간과 개체 당 진단소요시간을 단축할 수 있는 보조진단법인 효소면역측정법 (ELISA)에 활용할 수 있다. 기존에 우결핵 효소면역측정법에 이용하고 있었던 항원은 피피디 (PPD; purified protein derivative), MPB70, ESAT6, CFP10 등이며, 본 발명에서는 기존의 항원이 갖고 있는 민감성과 특이성을 제고하고자 한다.
본 발명은 궁극적으로 우 결핵의 전파방지를 위해 신속하고 정확한 우 결핵 스크리닝 진단 기법을 개발함으로써 우 결핵의 확산을 미연에 방지하는 데 기여할 수 있다.
이하 본 발명의 내용을 실시예에 의해 더욱 상세하게 설명하기로 한다. 다만, 이들 실시예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이들 실시예에 한정되는 것으로 해석되는 것은 아니다.
[실시예 1] 사용 균주 및 배양
본 발명은 한국뿐만 아니라 미국, 영국, 호주 등을 비롯한 세계 여러 나라에서 소결핵 피내검진에 사용하는 정제된 단백 유도체(purified protein derivative: PPD) 튜버클린(tuberculin)의 제조를 위해 표준 균주로 사용해오고 있는 Mycobacterium bovis AN5를 사용하였다. M. bovis AN5는 소톤(Sauton) 액체 배지 상에서 37℃에서 8주간 배양하였다.
[실시예 2] 배양 상층액의 여과 및 단백질 동정
[배양 상층액의 여과]
배양된 배양액 전체를 100℃, 3시간 가열하여 멸균시켰다. 멸균된 배양산물은 Beckman L8-M 초원심분리기를 이용하여 20,000×g에서 30분간 초원심분리 하였다. 초원심분리 후 그 상층액을 암모늄 설페이트(ammonium sulfate)를 85%(w/v)가 되도록 서서히 첨가하면서 단백질을 침전시켰다. 침전된 배양상층액 단백질을 10,000×g에서 10분간 원심분리 하였으며, 그 침전물을 투석튜브 (MWCO 3,500)에 옮겼다. 침전물을 18시간 동안 0.01M PBS(phosphate buffered saline)에 투석한 다음, 0.45㎛ 여과지로 여과하였으며, BCA 단백질 분석 키트(BCA protein assay kit, Pierce Co.)를 이용하여 단백질 농도를 측정하였다.
[단백질 전기영동과 웨스턴 블럿]
1차원 전기영동은 표준방법을 따랐다. 2차원 전기영동은 1차원 전기영동은 Zoom IPG runner strip pH 4-7(invitrogen Co.)을 사용하였으며, 2차원 전기영동을 위해서는 4-12% Bis-Tris NuPAGE gel (invitrogen Co.)를 사용하였다. 2차원 전기영동 후, 하나의 젤은 코마시-R250(coomassie-R250)으로 염색하고 50% 메탄올로 탈색하고 인-젤(in-gel) 추출하여 질량분석기로 분석하였다. 다른 하나의 젤은 M. bovis 양성혈청으로 웨스턴 블럿을 실시하였다 [Lyashchenko 일행, 2001; Houghton 일행, 2002; Mattow 일행, 2003].
[NanoLC-MS/MS와 데이터베이스 검색(Database search)에 의한 단백질 동정]
웨스턴 블럿(Western blotting) 후, 웨스턴 블럿(Western blotting) 결과, 특이항원으로 확인된 각 스팟(spot)을 코마시 블루(Coomassie blue)로 염색한 젤로부터 잘라내었다. 각 스팟을 트립신(trypsin)으로 인-젤-다이제스천(in-gel digestion)한 후, 스팟들의 펩타이드들을 agilent 1100 Series nano-LC와 LTQ-mass spectrometer (Thermo Electron, San Jose, CA)에 의해 분석되었다. LC-MS/MS 분석에 사용된 Capillary 컬럼 (150㎜×0.075㎜)은 Proxeon (Odense M, Denmark)에서 구입하였으며, 슬러리는 5㎛, 100Å pore size Magic C18 stationary phase (Michrom Bioresources, Auburn, CA)로 패킹하였다.
LC 분리를 위한 이동상 A는 0.1% 포믹에시드를 함유하는 증류수(0.1% formic acid in deionized water)이었고, 이동상 B는 0.1% 포믹에시드를 함유하는 아세톤니트릴(0.1% formic acid in acetonitrile)이었다. 크로마토그래피 경사는 50분간 5% B에서 35% B 직선증가와 20분간 40% B에서 60% B의 직선증가, 5분간 60% B에서 80% B 직선증가 하는 것으로 셋업 하였다. 유속은 분리(splitting) 분당 300㎖를 유지하였다. 매스 스펙트럼(Mass spectra)은 MS/MS 스캔 후 전체 매스 스캔으로 얻은 데이터(data-dependent acquisition with full mass scan: 400 - 1800 m/z)로 얻었다. 얻어진 각각 MS/MS 스캔은 LTQ에서 1 마이크로스캔(microscans)의 평균이었다. 이온 트랜스퍼 튜브의 온도는 200℃로 맞추어졌으며, 스프레이는 1.5 - 2.0 kV이었다. 정상화된 콜리전(collision) 에너지는 MS/MS에 대해 35%로 맞추어졌다.
Sequest 소프트웨어가 펩타이드 서열을 동정하기 위해 사용되어졌다. 신뢰성 높은 결과를 얻기 위해, delatCn≥0.1과 Rsp≤4의 조건을 적용하였고, Xcorr의 경우, Charge state 1+에서는 Xcorr≥1.5을 적용하였고, charge state 2+에서는 Xcorr≥2.0, charge state 3+에서는 Xcorr≥2.5를 적용하였으며, 펩티드 확률(peptide probability) >0.1을 적용하여 단백질동정의 확정범위(cutoff)로 사용하였다. 펩타이드들은 메티오닌(methionine) 잔기에서 다양하게 산화(oxidization)되었으며, 시스테인(cystein)에서는 다양하게 카르복시아미도메틸레이션(carboxyamidomethylation)과 카르복시메틸레이션(carboxymethylation) 되었다.
각 스팟의 단백질들을 MASCOT 단백질체 분석프로그램과 National Center for Biotechnology Infromation (NCBI) 단백질서열 데이터베이스 BLAST(http://ncbi.nlm.nih.gov)를 이용하여 펩타이드 매스 핑거프린팅(peptide mass fingerprinting: PMF)에 의해 동정되었다 [Eng 일행, 1994; Perkins 일행, 1999; Mattow 일행, 2003; Amor 일행, 2005].
[실시예 3] Mycobacterium bovis 단백질체의 2차원 전기영동 프로화일과 면 역특이 단백질항원
상기 실시예 2에서 M. bovis AN5로부터 제조된 배양 상층액을 여과하여 수득한 단백질(Culture filtrate protein: CFP)을 2차원 전기영동한 결과, 35 kDa, 25 kDa, 12 kDa 크기의 단백질들의 양이 많았으며, pI 4 ~ 6 사이의 산성 단백질(acidic protein)로 주로 구성되어 있었다. 이렇게 2차원 전개된 단백질들에 대해 그 면역특이항원을 찾고자 M. bovis AN5로 인공감염시킨 소의 혈청을 이용하여 웨스턴블럿(Western blotting)을 한 결과, 60 kDa, 50 kDa, 22 kDa 주위의 단백질들이 특이적으로 반응함을 알 수 있었다. 도 1에서 CFP의 2차원 전기영동 프로화일로 나타난 바와 같이 CFP의 2차원 전기영동 프로화일 웨스턴블럿에서 면역특이적으로 반응을 보인 단백질들은 원 1, 2, 3, 4 이었다(M: Molecular weight marker, BioRad Co.).
2차원 전기영동된 M. bovis AN5 CFP를 니트로셀룰로오스(nitrocellulose: NC) 멤브레인(membrane)에 옮긴 후, M. bovis AN5로 감염시킨 소의 혈청으로 단백질이 옮겨진 NC 멤브레인에 반응시켜 특이적으로 결합하는 단백질 항원을 관찰한 결과, 원 1, 2, 3, 4의 단백질로 나타났으며, 각각 22 kDa (pI 4.0), 50 kDa (pI 5.0), 48 kDa (pI 4.3), 60 kDa (pI 5.0) 이었다(도 2).
[실시예 4] 질량분석기와 분석프로그램에 의한 면역특이단백질 동정
상기 실시예 1에서 면역특이적으로 동정된 단백질에 해당하는 스팟을 코마시 블루(Coomassie blue) 염색된 전기영동 젤에서 절개해 낸 다음, 젤 내에 있는 단백 질들을 분리하여, 단백질 분해효소인 트립신으로 단백질을 펩타이드로 분해하였다. 이렇게 준비된 펩타이드를 agilent 1100 Series nano-LC and LTQ-mass spectrometer (Thermo Electron, San Jose, CA)로 그 질량을 분석하였다. 질량분석기로 분석된 스펙트럼 정보를 MASCOT 소프트웨어를 이용하여 Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. africanum, M. microti)의 10188 서열들의 데이터베이스에서 유효하게 일치하는 펩타이드와 이에 해당하는 단백질을 동정하였다. 동정된 유효 펩타이드로 BLAST를 이용하여 일치하는 펩타이드의 우결핵균 (M. bovis)에 해당하는 단백질을 최종적으로 동정하였다(표 1-4).
<표 1> 특이 스팟 1에서 동정된 단백질
MASCOT (M. tuberculosis complex) | BLAST (M. bovis) | |||
Proteins | Mass (Da) | Score | Peptides No. | Proteins |
Mpt70 | 22467 | 248 | 4 | MPB70 |
probable cutinase precursor Cut5 | 23485 | 170 | 3 | Cut5 |
hypothetical protein MtubF_01002056 | 20505 | 162 | 4 | CFP21 |
Secreted and surface protein containing fasciclin-like repeats | 17221 | 148 | 4 | MPB83 |
<표 2> 특이 스팟 2에서 동정된 단백질
MASCOT (M. tuberculosis complex) | BLAST (M. bovis) | |||
Proteins | Mass (Da) | Score | Peptides No. | Proteins |
Chaperonin GroEL (HSP60 family) | 51181 | 426 | 10 | GroEL2 |
S-adenosylhomocysteine hydrolase | 56077 | 240 | 6 | SahH |
65 kDa heat shock protein | 12379 | 178 | 5 | GroEL2 |
Chain X, Multicopy Crystallographic Structure Of A Relaxed Glutamine Synthetase | 53438 | 140 | 4 | GlnA1 |
5-methyltetrahydropteroyltriglutamate- homocysteine methyltransferase | 81581 | 134 | 9 | MetE |
32kDa protein | 35686 | 108 | 1 | FbpA |
<표 3> 특이 스팟 3에서 동정된 단백질
MASCOT (M. tuberculosis complex) | BLAST (M. bovis) | |||
Proteins | Mass (Da) | Score | Peptides No. | Proteins |
fatty acid synthase | 303676 | 112 | 13 | Fas |
probable smc protein | 139638 | 106 | 4 | Smc |
hypothetical protein MtubF_01003451 | 134659 | 101 | 7 | PE_PGRS33 |
<표 4> 특이스팟 4에서 동정된 단백질
MASCOT (M. tuberculosis complex) | BLAST (M. bovis) | |||
Proteins | Mass (Da) | Score | Peptides No. | Proteins |
5-methyltetrahydropteroyltriglutamate-homocysteine methyltransferase | 81581 | 598 | 17 | MetE |
32kDa protein | 35686 | 459 | 10 | FbpA |
esterase, putative, antigen 85-A | 37772 | 459 | 10 | FbpA |
dnaK protein | 66828 | 450 | 14 | DnaK |
Molecular chaperone | 66830 | 428 | 11 | DnaK |
DnaK | 65606 | 403 | 10 | DnaK |
Predicted esterase | 34864 | 386 | 9 | FbpA |
Chain A, Crystal Structure Of Antigen 85c | 31195 | 345 | 9 | FbpC |
Predicted esterase | 33912 | 339 | 9 | FbpC |
aconitate hydratase | 102448 | 321 | 11 | Acn |
Probable methinyl-tRNA synthetase MetS | 58092 | 307 | 7 | MetS |
Possible conserved lipoprotein | 58634 | 302 | 6 | Lipoprotein Mb2616c |
antigen 85-B precursor | 30662 | 278 | 6 | FbpB |
hypothetical protein MT0852 | 33885 | 237 | 6 | Mb0854c |
esterase, putative, antigen 85-B | 39855 | 223 | 5 | FbpB |
secreted antigen Ag85B | 34579 | 222 | 5 | FbpB |
fatty acid synthase | 303676 | 182 | 14 | FabD |
malate synthase | 80402 | 182 | 5 | GlcB |
Chaperonin GroEL (HSP60 family)tuberculosis F11] | 56726 | 147 | 4 | GroEL2 |
Chaperonin GroEL (HSP60 family) | 51181 | 147 | 3 | GroEL2 |
상기 실시예에서 확인한 바와 같이 본 발명에서 우 결핵균에 감염된 개체에 특이적으로 면역 반응하는 단백질 항원은 다음과 같다(표 5).
<표 5> 우 결핵균에 감염된 개체에 특이적으로 면역 반응하는 단백질 항원
단백질 | Full name |
서열 1: MPB70 | mycobacterial protein of BCG 70 |
서열 2: Cut5 | cutinase precursor 5 |
서열 3: CFP21 | culture filtrate protein 21 |
서열 4: MPB83 | mycobacterial protein of BCG 83 |
서열 5: GroEL2 | heat shock protein 65 |
서열 6: SahH | S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase |
서열 7: GlnA1 | Glutamine synthetase |
서열 8: FbpA | fibronectin-binding protein A |
서열 9: Fas | fatty acid synthetase |
서열 10: Smc | chromosome partition protein |
서열 11: PE_PGRS33 | PE_PGRS family protein |
서열 12: MetE | methyltransferase |
서열 13: DnaK | heat shock protein 70 |
서열 14: FbpC | fibronectin-binding protein C |
서열 15: Acn | aconitate hydratase |
서열 16: MetS | methionyl-transynthetase |
서열 17: Mb2616c | mycobacterium bovis 2616c |
서열 18: FbpB | fibronectin-binding protein B |
서열 19: Mb0854c | mycobacterium bovis 0854c |
서열 20: FabD | manonyl CoA-acyl carrier protein transacylase |
서열 21: GlcB | malate synthetase G |
[참고문헌]
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도 1은 CFP의 2차원 전기영동 프로화일을 나타낸 것이다.
도 2는 CFP의 Western blotting한 결과 우결핵균 주요 단백질들과 마이코박테리움 보비스로 인공 감염된 소 혈청의 면역 특이적 반응을 보이는 단백질을 나타낸 것이다.
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Detection method for Mycobacterium bovis using them
<160> 21
<170> KopatentIn 1.71
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<211> 193
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 1
Met Lys Val Lys Asn Thr Ile Ala Ala Thr Ser Phe Ala Ala Ala Gly
1 5 10 15
Leu Ala Ala Leu Ala Val Ala Val Ser Pro Pro Ala Ala Ala Gly Asp
20 25 30
Leu Val Gly Pro Gly Cys Ala Glu Tyr Ala Ala Ala Asn Pro Thr Gly
35 40 45
Pro Ala Ser Val Gln Gly Met Ser Gln Asp Pro Val Ala Val Ala Ala
50 55 60
Ser Asn Asn Pro Glu Leu Thr Thr Leu Thr Ala Ala Leu Ser Gly Gln
65 70 75 80
Leu Asn Pro Gln Val Asn Leu Val Asp Thr Leu Asn Ser Gly Gln Tyr
85 90 95
Thr Val Phe Ala Pro Thr Asn Ala Ala Phe Ser Lys Leu Pro Ala Ser
100 105 110
Thr Ile Asp Glu Leu Lys Thr Asn Ser Ser Leu Leu Thr Ser Ile Leu
115 120 125
Thr Tyr His Val Val Ala Gly Gln Thr Ser Pro Ala Asn Val Val Gly
130 135 140
Thr Arg Gln Thr Leu Gln Gly Ala Ser Val Thr Val Thr Gly Gln Gly
145 150 155 160
Asn Ser Leu Lys Val Gly Asn Ala Asp Val Val Cys Gly Gly Val Ser
165 170 175
Thr Ala Asn Ala Thr Val Tyr Met Ile Asp Ser Val Leu Met Pro Pro
180 185 190
Ala
<210> 2
<211> 233
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 2
Met Asp Val Ile Arg Trp Ala Arg Arg Leu Ala Val Val Ala Gly Thr
1 5 10 15
Ala Ala Ala Val Thr Thr Pro Gly Leu Leu Ser Ala His Val Pro Met
20 25 30
Val Ser Ala Glu Pro Cys Pro Asp Val Glu Val Val Phe Ala Arg Gly
35 40 45
Thr Gly Glu Pro Pro Gly Ile Gly Ser Val Gly Gly Leu Phe Val Asp
50 55 60
Ala Leu Arg Ser Gln Val Gly Ala Lys Ser Leu Gly Val Tyr Ala Val
65 70 75 80
Asn Tyr Pro Ala Ser Asn Asp Phe Ala Ser Ser Asp Phe Pro Lys Thr
85 90 95
Val Ile Asp Gly Ile Arg Asp Ala Gly Ser His Ile Gln Ser Met Ala
100 105 110
Met Ser Cys Pro Gln Thr Arg Gln Val Leu Gly Gly Tyr Ser Gln Gly
115 120 125
Ala Ala Val Ala Gly Tyr Val Thr Ser Ala Val Val Pro Pro Ala Val
130 135 140
Pro Val Gln Ala Val Pro Ala Pro Met Ala Pro Glu Val Ala Asn His
145 150 155 160
Val Ala Ala Val Thr Leu Phe Gly Ala Pro Ser Ala Gln Phe Leu Gly
165 170 175
Gln Tyr Gly Ala Pro Pro Ile Ala Ile Gly Pro Leu Tyr Gln Pro Lys
180 185 190
Thr Leu Gln Leu Cys Ala Asp Gly Asp Ser Ile Cys Gly Asp Gly Asn
195 200 205
Ser Pro Val Ala His Gly Leu Tyr Ala Val Asn Gly Met Val Gly Gln
210 215 220
Gly Ala Asn Phe Ala Ala Ser Arg Leu
225 230
<210> 3
<211> 217
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 3
Met Thr Pro Arg Ser Leu Val Arg Ile Val Gly Val Val Val Ala Thr
1 5 10 15
Thr Leu Ala Leu Val Ser Ala Pro Ala Gly Gly Arg Ala Ala His Ala
20 25 30
Asp Pro Cys Ser Asp Ile Ala Val Val Phe Ala Arg Gly Thr His Gln
35 40 45
Ala Ser Gly Leu Gly Asp Val Gly Glu Ala Phe Val Asp Ser Leu Thr
50 55 60
Ser Gln Val Gly Gly Arg Ser Ile Gly Val Tyr Ala Val Asn Tyr Pro
65 70 75 80
Ala Ser Asp Asp Tyr Arg Ala Ser Ala Ser Asn Gly Ser Asp Asp Ala
85 90 95
Ser Ala His Ile Gln Arg Thr Val Ala Ser Cys Pro Asn Thr Arg Ile
100 105 110
Val Leu Gly Gly Tyr Ser Gln Gly Ala Thr Val Ile Asp Leu Ser Thr
115 120 125
Ser Ala Met Pro Pro Ala Val Ala Asp His Val Ala Ala Val Ala Leu
130 135 140
Phe Gly Glu Pro Ser Ser Gly Phe Ser Ser Met Leu Trp Gly Gly Gly
145 150 155 160
Ser Leu Pro Thr Ile Gly Pro Leu Tyr Ser Ser Lys Thr Ile Asn Leu
165 170 175
Cys Ala Pro Asp Asp Pro Ile Cys Thr Gly Gly Gly Asn Ile Met Ala
180 185 190
His Val Ser Tyr Val Gln Ser Gly Met Thr Ser Gln Ala Ala Thr Phe
195 200 205
Ala Ala Asn Arg Leu Asp His Ala Gly
210 215
<210> 4
<211> 220
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 4
Met Ile Asn Val Gln Ala Lys Pro Ala Ala Ala Ala Ser Leu Ala Ala
1 5 10 15
Ile Ala Ile Ala Phe Leu Ala Gly Cys Ser Ser Thr Lys Pro Val Ser
20 25 30
Gln Asp Thr Ser Pro Lys Pro Ala Thr Ser Pro Ala Ala Pro Val Thr
35 40 45
Thr Ala Ala Met Ala Asp Pro Ala Ala Asp Leu Ile Gly Arg Gly Cys
50 55 60
Ala Gln Tyr Ala Ala Gln Asn Pro Thr Gly Pro Gly Ser Val Ala Gly
65 70 75 80
Met Ala Gln Asp Pro Val Ala Thr Ala Ala Ser Asn Asn Pro Met Leu
85 90 95
Ser Thr Leu Thr Ser Ala Leu Ser Gly Lys Leu Asn Pro Asp Val Asn
100 105 110
Leu Val Asp Thr Leu Asn Gly Gly Glu Tyr Thr Val Phe Ala Pro Thr
115 120 125
Asn Ala Ala Phe Asp Lys Leu Pro Ala Ala Thr Ile Asp Gln Leu Lys
130 135 140
Thr Asp Ala Lys Leu Leu Ser Ser Ile Leu Thr Tyr His Val Ile Ala
145 150 155 160
Gly Gln Ala Ser Pro Ser Arg Ile Asp Gly Thr His Gln Thr Leu Gln
165 170 175
Gly Ala Asp Leu Thr Val Ile Gly Ala Arg Asp Asp Leu Met Val Asn
180 185 190
Asn Ala Gly Leu Val Cys Gly Gly Val His Thr Ala Asn Ala Thr Val
195 200 205
Tyr Met Ile Asp Thr Val Leu Met Pro Pro Ala Gln
210 215 220
<210> 5
<211> 540
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 5
Met Ala Lys Thr Ile Ala Tyr Asp Glu Glu Ala Arg Arg Gly Leu Glu
1 5 10 15
Arg Gly Leu Asn Ala Leu Ala Asp Ala Val Lys Val Thr Leu Gly Pro
20 25 30
Lys Gly Arg Asn Val Val Leu Glu Lys Lys Trp Gly Ala Pro Thr Ile
35 40 45
Thr Asn Asp Gly Val Ser Ile Ala Lys Glu Ile Glu Leu Glu Asp Pro
50 55 60
Tyr Glu Lys Ile Gly Ala Glu Leu Val Lys Glu Val Ala Lys Lys Thr
65 70 75 80
Asp Asp Val Ala Gly Asp Gly Thr Thr Thr Ala Thr Val Leu Ala Gln
85 90 95
Ala Leu Val Arg Glu Gly Leu Arg Asn Val Ala Ala Gly Ala Asn Pro
100 105 110
Leu Gly Leu Lys Arg Gly Ile Glu Lys Ala Val Glu Lys Val Thr Glu
115 120 125
Thr Leu Leu Lys Gly Ala Lys Glu Val Glu Thr Lys Glu Gln Ile Ala
130 135 140
Ala Thr Ala Ala Ile Ser Ala Gly Asp Gln Ser Ile Gly Asp Leu Ile
145 150 155 160
Ala Glu Ala Met Asp Lys Val Gly Asn Glu Gly Val Ile Thr Val Glu
165 170 175
Glu Ser Asn Thr Phe Gly Leu Gln Leu Glu Leu Thr Glu Gly Met Arg
180 185 190
Phe Asp Lys Gly Tyr Ile Ser Gly Tyr Phe Val Thr Asp Pro Glu Arg
195 200 205
Gln Glu Ala Val Leu Glu Asp Pro Tyr Ile Leu Leu Val Ser Ser Lys
210 215 220
Val Ser Thr Val Lys Asp Leu Leu Pro Leu Leu Glu Lys Val Ile Gly
225 230 235 240
Ala Gly Lys Pro Leu Leu Ile Ile Ala Glu Asp Val Glu Gly Glu Ala
245 250 255
Leu Ser Thr Leu Val Val Asn Lys Ile Arg Gly Thr Phe Lys Ser Val
260 265 270
Ala Val Lys Ala Pro Gly Phe Gly Asp Arg Arg Lys Ala Met Leu Gln
275 280 285
Asp Met Ala Ile Leu Thr Gly Gly Gln Val Ile Ser Glu Glu Val Gly
290 295 300
Leu Thr Leu Glu Asn Ala Asp Leu Ser Leu Leu Gly Lys Ala Arg Lys
305 310 315 320
Val Val Val Thr Lys Asp Glu Thr Thr Ile Val Glu Gly Ala Gly Asp
325 330 335
Thr Asp Ala Ile Ala Gly Arg Val Ala Gln Ile Arg Gln Glu Ile Glu
340 345 350
Asn Ser Asp Ser Asp Tyr Asp Arg Glu Lys Leu Gln Glu Arg Leu Ala
355 360 365
Lys Leu Ala Gly Gly Val Ala Val Ile Lys Ala Gly Ala Ala Thr Glu
370 375 380
Val Glu Leu Lys Glu Arg Lys His Arg Ile Glu Asp Ala Val Arg Asn
385 390 395 400
Ala Lys Ala Ala Val Glu Glu Gly Ile Val Ala Gly Gly Gly Val Thr
405 410 415
Leu Leu Gln Ala Ala Pro Thr Leu Asp Glu Leu Lys Leu Glu Gly Asp
420 425 430
Glu Ala Thr Gly Ala Asn Ile Val Lys Val Ala Leu Glu Ala Pro Leu
435 440 445
Lys Gln Ile Ala Phe Asn Ser Gly Leu Glu Pro Gly Val Val Ala Glu
450 455 460
Lys Val Arg Asn Leu Pro Ala Gly His Gly Leu Asn Ala Gln Thr Gly
465 470 475 480
Val Tyr Glu Asp Leu Leu Ala Ala Gly Val Ala Asp Pro Val Lys Val
485 490 495
Thr Arg Ser Ala Leu Gln Asn Ala Ala Ser Ile Ala Gly Leu Phe Leu
500 505 510
Thr Thr Glu Ala Val Val Ala Asp Lys Pro Glu Lys Glu Lys Ala Ser
515 520 525
Val Pro Gly Gly Gly Asp Met Gly Gly Met Asp Phe
530 535 540
<210> 6
<211> 495
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 6
Met Thr Gly Asn Leu Val Thr Lys Asn Ser Leu Thr Pro Asp Val Arg
1 5 10 15
Asn Gly Ile Asp Phe Lys Ile Ala Asp Leu Ser Leu Ala Asp Phe Gly
20 25 30
Arg Lys Glu Leu Arg Ile Ala Glu His Glu Met Pro Gly Leu Met Ser
35 40 45
Leu Arg Arg Glu Tyr Ala Glu Val Gln Pro Leu Lys Gly Ala Arg Ile
50 55 60
Ser Gly Ser Leu His Met Thr Val Gln Thr Ala Val Leu Ile Glu Thr
65 70 75 80
Leu Thr Ala Leu Gly Ala Glu Val Arg Trp Ala Ser Cys Asn Ile Phe
85 90 95
Ser Thr Gln Asp His Ala Ala Ala Ala Val Val Val Gly Pro His Gly
100 105 110
Thr Pro Asp Glu Pro Lys Gly Val Pro Val Phe Ala Trp Lys Gly Glu
115 120 125
Thr Leu Glu Glu Tyr Trp Trp Ala Ala Glu Gln Met Leu Thr Trp Pro
130 135 140
Asp Pro Asp Lys Pro Ala Asn Met Ile Leu Asp Asp Gly Gly Asp Ala
145 150 155 160
Thr Met Leu Val Leu Arg Gly Met Gln Tyr Glu Lys Ala Gly Val Val
165 170 175
Pro Pro Ala Glu Glu Asp Asp Pro Ala Glu Trp Lys Ile Phe Leu Asn
180 185 190
Leu Leu Arg Thr Arg Phe Glu Thr Asp Lys Asp Lys Trp Thr Lys Ile
195 200 205
Ala Glu Ser Val Lys Gly Val Thr Glu Glu Thr Thr Thr Gly Val Leu
210 215 220
Arg Leu Tyr Gln Phe Ala Ala Ala Gly Asp Leu Ala Phe Pro Ala Ile
225 230 235 240
Asn Val Asn Asp Ser Val Thr Lys Ser Lys Phe Asp Asn Lys Tyr Gly
245 250 255
Thr Arg His Ser Leu Ile Asp Gly Ile Asn Arg Gly Thr Asp Ala Leu
260 265 270
Ile Gly Gly Lys Lys Val Leu Ile Cys Gly Tyr Gly Asp Val Gly Lys
275 280 285
Gly Cys Ala Glu Ala Met Lys Gly Gln Gly Ala Arg Val Ser Val Thr
290 295 300
Glu Ile Asp Pro Ile Asn Ala Leu Gln Ala Met Met Glu Gly Phe Asp
305 310 315 320
Val Val Thr Val Glu Glu Ala Ile Gly Asp Ala Asp Ile Val Val Thr
325 330 335
Ala Thr Gly Asn Lys Asp Ile Ile Met Leu Glu His Ile Lys Ala Met
340 345 350
Lys Asp His Ala Ile Leu Gly Asn Ile Gly His Phe Asp Asn Glu Ile
355 360 365
Asp Met Ala Gly Leu Glu Arg Ser Gly Ala Thr Arg Val Asn Val Lys
370 375 380
Pro Gln Val Asp Leu Trp Thr Phe Gly Asp Thr Gly Arg Ser Ile Ile
385 390 395 400
Val Leu Ser Glu Gly Arg Leu Leu Asn Leu Gly Asn Ala Thr Gly His
405 410 415
Pro Ser Phe Val Met Ser Asn Ser Phe Ala Asn Gln Thr Ile Ala Gln
420 425 430
Ile Glu Leu Trp Thr Lys Asn Asp Glu Tyr Asp Asn Glu Val Tyr Arg
435 440 445
Leu Pro Lys His Leu Asp Glu Lys Val Ala Arg Ile His Val Glu Ala
450 455 460
Leu Gly Gly His Leu Thr Lys Leu Thr Lys Glu Gln Ala Glu Tyr Leu
465 470 475 480
Gly Val Asp Val Glu Gly Pro Tyr Lys Pro Asp His Tyr Arg Tyr
485 490 495
<210> 7
<211> 478
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 7
Met Thr Glu Lys Thr Pro Asp Asp Val Phe Lys Leu Ala Lys Asp Glu
1 5 10 15
Lys Val Glu Tyr Val Asp Val Arg Phe Cys Asp Leu Pro Gly Ile Met
20 25 30
Gln His Phe Thr Ile Pro Ala Ser Ala Phe Asp Lys Ser Val Phe Asp
35 40 45
Asp Gly Leu Ala Phe Asp Gly Ser Ser Ile Arg Gly Phe Gln Ser Ile
50 55 60
His Glu Ser Asp Met Leu Leu Leu Pro Asp Pro Glu Thr Ala Arg Ile
65 70 75 80
Asp Pro Phe Arg Ala Ala Lys Thr Leu Asn Ile Asn Phe Phe Val His
85 90 95
Asp Pro Phe Thr Leu Glu Pro Tyr Ser Arg Asp Pro Arg Asn Ile Ala
100 105 110
Arg Lys Ala Glu Asn Tyr Leu Ile Ser Thr Gly Ile Ala Asp Thr Ala
115 120 125
Tyr Phe Gly Ala Glu Ala Glu Phe Tyr Ile Phe Asp Ser Val Ser Phe
130 135 140
Asp Ser Arg Ala Asn Gly Ser Phe Tyr Glu Val Asp Ala Ile Ser Gly
145 150 155 160
Trp Trp Asn Thr Gly Ala Ala Thr Glu Ala Asp Gly Ser Pro Asn Arg
165 170 175
Gly Tyr Lys Val Arg His Lys Gly Gly Tyr Phe Pro Val Ala Pro Asn
180 185 190
Asp Gln Tyr Val Asp Leu Arg Asp Lys Met Leu Thr Asn Leu Ile Asn
195 200 205
Ser Gly Phe Ile Leu Glu Lys Gly His His Glu Val Gly Ser Gly Gly
210 215 220
Gln Ala Glu Ile Asn Tyr Gln Phe Asn Ser Leu Leu His Ala Ala Asp
225 230 235 240
Asp Met Gln Leu Tyr Lys Tyr Ile Ile Lys Asn Thr Ala Trp Gln Asn
245 250 255
Gly Lys Thr Val Thr Phe Met Pro Lys Pro Leu Phe Gly Asp Asn Gly
260 265 270
Ser Gly Met His Cys His Gln Ser Leu Trp Lys Asp Gly Ala Pro Leu
275 280 285
Met Tyr Asp Glu Thr Gly Tyr Ala Gly Leu Ser Asp Thr Ala Arg His
290 295 300
Tyr Ile Gly Gly Leu Leu His His Ala Pro Ser Leu Leu Ala Phe Thr
305 310 315 320
Asn Pro Thr Val Asn Ser Tyr Lys Arg Leu Val Pro Gly Tyr Glu Ala
325 330 335
Pro Ile Asn Leu Val Tyr Ser Gln Arg Asn Arg Ser Ala Cys Val Arg
340 345 350
Ile Pro Ile Thr Gly Ser Asn Pro Lys Ala Lys Arg Leu Glu Phe Arg
355 360 365
Ser Pro Asp Ser Ser Gly Asn Pro Tyr Leu Ala Phe Ser Ala Met Leu
370 375 380
Met Ala Gly Leu Asp Gly Ile Lys Asn Lys Ile Glu Pro Gln Ala Pro
385 390 395 400
Val Asp Lys Asp Leu Tyr Glu Leu Pro Pro Glu Glu Ala Ala Ser Ile
405 410 415
Pro Gln Thr Pro Thr Gln Leu Ser Asp Val Ile Asp Arg Leu Glu Ala
420 425 430
Asp His Glu Tyr Leu Thr Glu Gly Gly Val Phe Thr Asn Asp Leu Ile
435 440 445
Glu Thr Trp Ile Ser Phe Lys Arg Glu Asn Glu Ile Glu Pro Val Asn
450 455 460
Ile Arg Pro His Pro Tyr Glu Phe Ala Leu Tyr Tyr Asp Val
465 470 475
<210> 8
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Met Gln Leu Val Asp Arg Val Arg Gly Ala Val Thr Gly Met Ser Arg
1 5 10 15
Arg Leu Val Val Gly Ala Val Gly Ala Ala Leu Val Ser Gly Leu Val
20 25 30
Gly Ala Val Gly Gly Thr Ala Thr Ala Gly Ala Phe Ser Arg Pro Gly
35 40 45
Leu Pro Val Glu Tyr Leu Gln Val Pro Ser Pro Ser Met Gly Arg Asp
50 55 60
Ile Lys Val Gln Phe Gln Ser Gly Gly Ala Asn Ser Pro Ala Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Leu Asp Gly Leu Arg Ala Gln Asp Asp Phe Ser Gly Trp Asp Ile
85 90 95
Asn Thr Pro Ala Phe Glu Trp Tyr Asp Gln Ser Gly Leu Ser Val Val
100 105 110
Met Pro Val Gly Gly Gln Ser Ser Phe Tyr Ser Asp Trp Tyr Gln Pro
115 120 125
Ala Cys Gly Lys Ala Gly Cys Gln Thr Tyr Lys Trp Glu Thr Phe Leu
130 135 140
Thr Ser Glu Leu Pro Gly Trp Leu Gln Ala Asn Arg His Val Lys Pro
145 150 155 160
Thr Gly Ser Ala Val Val Gly Leu Ser Met Ala Ala Ser Ser Ala Leu
165 170 175
Thr Leu Ala Ile Tyr His Pro Gln Gln Phe Val Tyr Ala Gly Ala Met
180 185 190
Ser Gly Leu Leu Asp Pro Ser Gln Ala Met Gly Pro Thr Leu Ile Gly
195 200 205
Leu Ala Met Gly Asp Ala Gly Gly Tyr Lys Ala Ser Asp Met Trp Gly
210 215 220
Pro Lys Glu Asp Pro Ala Trp Gln Arg Asn Asp Pro Leu Leu Asn Val
225 230 235 240
Gly Lys Leu Ile Ala Asn Asn Thr Arg Val Trp Val Tyr Cys Gly Asn
245 250 255
Gly Lys Pro Ser Asp Leu Gly Gly Asn Asn Leu Pro Ala Lys Phe Leu
260 265 270
Glu Gly Phe Val Arg Thr Ser Asn Ile Lys Phe Gln Asp Ala Tyr Asn
275 280 285
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290 295 300
His Ser Trp Glu Tyr Trp Gly Ala Gln Leu Asn Ala Met Lys Pro Asp
305 310 315 320
Leu Gln Arg Ala Leu Gly Ala Thr Pro Asn Thr Gly Pro Ala Pro Gln
325 330 335
Gly Ala
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Met Thr Ile His Glu His Asp Arg Val Ser Ala Asp Arg Gly Gly Asp
1 5 10 15
Ser Pro His Thr Thr His Ala Leu Val Asp Arg Leu Met Ala Gly Glu
20 25 30
Pro Tyr Ala Val Ala Phe Gly Gly Gln Gly Ser Ala Trp Leu Glu Thr
35 40 45
Leu Glu Glu Leu Val Ser Ala Thr Gly Ile Glu Thr Glu Leu Ala Thr
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65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
Ala Leu Ala Arg Gln Gly Met Asp Leu Val Ala Thr Pro Pro Val Ala
130 135 140
Met Ala Gly His Ser Gln Gly Val Leu Ala Val Glu Ala Leu Lys Ala
145 150 155 160
Gly Gly Ala Arg Asp Val Glu Leu Phe Ala Leu Ala Gln Leu Ile Gly
165 170 175
Ala Ala Gly Thr Leu Val Ala Arg Arg Arg Gly Ile Ser Val Leu Gly
180 185 190
Asp Arg Pro Pro Met Val Ser Val Thr Asn Ala Asp Pro Glu Arg Ile
195 200 205
Gly Arg Leu Leu Asp Glu Phe Ala Gln Asp Val Arg Thr Val Leu Pro
210 215 220
Pro Val Leu Ser Ile Arg Asn Gly Arg Arg Ala Val Val Ile Thr Gly
225 230 235 240
Thr Pro Glu Gln Leu Ser Arg Phe Glu Leu Tyr Cys Arg Gln Ile Ser
245 250 255
Glu Lys Glu Glu Ala Asp Arg Lys Asn Lys Val Arg Gly Gly Asp Val
260 265 270
Phe Ser Pro Val Phe Glu Pro Val Gln Val Glu Val Gly Phe His Thr
275 280 285
Pro Arg Leu Ser Asp Gly Ile Asp Ile Val Ala Gly Trp Ala Glu Lys
290 295 300
Ala Gly Leu Asp Val Ala Leu Ala Arg Glu Leu Ala Asp Ala Ile Leu
305 310 315 320
Ile Arg Lys Val Asp Trp Val Asp Glu Ile Thr Arg Val His Ala Ala
325 330 335
Gly Ala Arg Trp Ile Leu Asp Leu Gly Pro Gly Asp Ile Leu Thr Arg
340 345 350
Leu Thr Ala Pro Val Ile Arg Gly Leu Gly Ile Gly Ile Val Pro Ala
355 360 365
Ala Thr Arg Gly Gly Gln Arg Asn Leu Phe Thr Val Gly Ala Thr Pro
370 375 380
Glu Val Ala Arg Ala Trp Ser Ser Tyr Ala Pro Thr Val Val Arg Leu
385 390 395 400
Pro Asp Gly Arg Val Lys Leu Ser Thr Lys Phe Thr Arg Leu Thr Gly
405 410 415
Arg Ser Pro Ile Leu Leu Ala Gly Met Thr Pro Thr Thr Val Asp Ala
420 425 430
Lys Ile Val Ala Ala Ala Ala Asn Ala Gly His Trp Ala Glu Leu Ala
435 440 445
Gly Gly Gly Gln Val Thr Glu Glu Ile Phe Gly Asn Arg Ile Glu Gln
450 455 460
Met Ala Gly Leu Leu Glu Pro Gly Arg Thr Tyr Gln Phe Asn Ala Leu
465 470 475 480
Phe Leu Asp Pro Tyr Leu Trp Lys Leu Gln Val Gly Gly Lys Arg Leu
485 490 495
Val Gln Lys Ala Arg Gln Ser Gly Ala Ala Ile Asp Gly Val Val Ile
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Ser Ala Gly Ile Pro Asp Leu Asp Glu Ala Val Glu Leu Ile Asp Glu
515 520 525
Leu Gly Asp Ile Gly Ile Ser His Val Val Phe Lys Pro Gly Thr Ile
530 535 540
Glu Gln Ile Arg Ser Val Ile Arg Ile Ala Thr Glu Val Pro Thr Lys
545 550 555 560
Pro Val Ile Met His Val Glu Gly Gly Arg Ala Gly Gly His His Ser
565 570 575
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580 585 590
Ser Arg Ala Asn Ile Thr Val Cys Val Gly Gly Gly Ile Gly Thr Pro
595 600 605
Arg Arg Ala Ala Glu Tyr Leu Ser Gly Arg Trp Ala Gln Ala Tyr Gly
610 615 620
Phe Pro Leu Met Pro Ile Asp Gly Ile Leu Val Gly Thr Ala Ala Met
625 630 635 640
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645 650 655
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Gly Met Ala Ser Ser Arg Ser Gln Leu Gly Ala Asp Ile His Glu Ile
675 680 685
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Asp Ala Glu Ala Val Ala Glu Arg Arg Asp Glu Ile Ile Ala Ala Met
705 710 715 720
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740 745 750
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820 825 830
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835 840 845
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850 855 860
Ala His Asp Ala Arg Tyr Asp Ala Asp Ala Val Cys Ile Ile Pro Gly
865 870 875 880
Thr Ala Ser Val Ala Gly Ile Thr Arg Met Asp Glu Pro Val Gly Glu
885 890 895
Leu Leu Asp Arg Phe Glu Gln Ala Ala Ile Asp Glu Val Leu Gly Ala
900 905 910
Gly Val Glu Pro Lys Asp Val Ala Ser Arg Arg Leu Gly Arg Ala Asp
915 920 925
Val Ala Gly Pro Leu Ala Val Val Leu Asp Ala Pro Asp Val Arg Trp
930 935 940
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965 970 975
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Val Leu Arg Val Gly Val Ala Glu Phe Arg Arg Ser Leu Asp Arg Val
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Ser Arg Arg Asn Gln Leu Leu Val Asp Leu Gly Ser Glu Leu Asn Leu
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Gly Ala Ile Asp Gly Ala Ala Glu Ser Asp Leu Ala Gly Leu Arg Ser
1825 1830 1835 1840
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1845 1850 1855
Ser Asp Ala Ile Asn Asp Gln Leu Arg Thr Val Leu Gly Pro Ser Gly
1860 1865 1870
Lys Arg Pro Gly Ala Ile Ala Glu Arg Val Lys Lys Thr Trp Glu Leu
1875 1880 1885
Gly Glu Gly Trp Ala Lys His Val Thr Val Glu Val Ala Leu Gly Thr
1890 1895 1900
Arg Glu Gly Ser Ser Val Arg Gly Gly Ala Met Gly His Leu His Glu
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Gly Ala Leu Ala Asp Ala Ala Ser Val Asp Lys Val Ile Asp Ala Ala
1925 1930 1935
Val Ala Ser Val Ala Ala Arg Gln Gly Val Ser Val Ala Leu Pro Ser
1940 1945 1950
Ala Gly Ser Gly Gly Gly Ala Thr Ile Asp Ala Ala Ala Leu Ser Glu
1955 1960 1965
Phe Thr Asp Gln Ile Thr Gly Arg Glu Gly Val Leu Ala Ser Ala Ala
1970 1975 1980
Arg Leu Val Leu Gly Gln Leu Gly Leu Asp Asp Pro Val Asn Ala Leu
1985 1990 1995 2000
Pro Ala Ala Pro Asp Ser Glu Leu Ile Asp Leu Val Thr Ala Glu Leu
2005 2010 2015
Gly Ala Asp Trp Pro Arg Leu Val Ala Pro Val Phe Asp Pro Lys Lys
2020 2025 2030
Ala Val Val Phe Asp Asp Arg Trp Ala Ser Ala Arg Glu Asp Leu Val
2035 2040 2045
Lys Leu Trp Leu Thr Asp Glu Gly Asp Ile Asp Ala Asp Trp Pro Arg
2050 2055 2060
Leu Ala Glu Arg Phe Glu Gly Ala Gly His Val Val Ala Thr Gln Ala
2065 2070 2075 2080
Thr Trp Trp Gln Gly Lys Ser Leu Ala Ala Gly Arg Gln Ile His Ala
2085 2090 2095
Ser Leu Tyr Gly Arg Ile Ala Ala Gly Ala Glu Asn Pro Glu Pro Gly
2100 2105 2110
Arg Tyr Gly Gly Glu Val Ala Val Val Thr Gly Ala Ser Lys Gly Ser
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Ile Ala Ala Ser Val Val Ala Arg Leu Leu Asp Gly Gly Ala Thr Val
2130 2135 2140
Ile Ala Thr Thr Ser Lys Leu Asp Glu Glu Arg Leu Ala Phe Tyr Arg
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Thr Leu Tyr Arg Asp His Ala Arg Tyr Gly Ala Ala Leu Trp Leu Val
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Lys Val Leu Leu Trp Ala Val Gln Arg Leu Ile Gly Gly Leu Ser Thr
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Gly Ser Pro Asn Arg Gly Met Phe Gly Gly Asp Gly Ala Tyr Gly Glu
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2340 2345 2350
Leu Leu Asp Leu Cys Asp Ala Glu Ser Lys Val Ala Ala Ala Arg Ser
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2420 2425 2430
Leu Asp Val Asp Pro Ala Asp Leu Val Val Ile Val Gly Gly Ala Glu
2435 2440 2445
Ile Gly Pro Tyr Gly Ser Ser Arg Thr Arg Phe Glu Met Glu Val Glu
2450 2455 2460
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Leu Ile Arg Trp Glu Asp Asp Pro Gln Pro Gly Trp Tyr Asp Thr Glu
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Ala Val Val Gln Arg Val Gly Ile Arg Glu Phe Val Asp Asp Gly Ala
2515 2520 2525
Ile Asp Pro Asp His Ala Ser Pro Leu Leu Val Ser Val Phe Leu Glu
2530 2535 2540
Lys Asp Phe Ala Phe Val Val Ser Ser Glu Ala Asp Ala Arg Ala Phe
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Val Glu Phe Asp Pro Glu His Thr Val Ile Arg Pro Val Pro Asp Ser
2565 2570 2575
Thr Asp Trp Gln Val Ile Arg Lys Ala Gly Thr Glu Ile Arg Val Pro
2580 2585 2590
Arg Lys Thr Lys Leu Ser Arg Val Val Gly Gly Gln Ile Pro Thr Gly
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Ser Ser Gly Phe Ser Pro Ala Glu Val Met Arg Tyr Val His Pro Ser
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Leu Val Ala Asn Thr Gln Gly Thr Gly Met Gly Gly Gly Thr Ser Met
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Ala Thr Ala Ala Val Ser Val Glu Glu Gly Val Asp Lys Ile Arg Leu
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Gly Lys Ala Gln Leu Val Val Ala Gly Gly Leu Asp Asp Leu Thr Leu
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2785 2790 2795 2800
Leu Leu Ala Arg Gly Asp Leu Ala Leu Arg Met Gly Leu Pro Val Leu
2805 2810 2815
Ala Val Val Ala Phe Ala Gln Ser Phe Gly Asp Gly Val His Thr Ser
2820 2825 2830
Ile Pro Ala Pro Gly Leu Gly Ala Leu Gly Ala Gly Arg Gly Gly Lys
2835 2840 2845
Asp Ser Pro Leu Ala Arg Ala Leu Ala Lys Leu Gly Val Ala Ala Asp
2850 2855 2860
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2885 2890 2895
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2900 2905 2910
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3060 3065
<210> 10
<211> 1205
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 10
Met Tyr Leu Lys Ser Leu Thr Leu Lys Gly Phe Lys Ser Phe Ala Ala
1 5 10 15
Pro Thr Thr Leu Arg Phe Glu Pro Gly Ile Thr Ala Val Val Gly Pro
20 25 30
Asn Gly Ser Gly Lys Ser Asn Val Val Asp Ala Leu Ala Trp Val Met
35 40 45
Gly Glu Gln Gly Ala Lys Thr Leu Arg Gly Gly Lys Met Glu Asp Val
50 55 60
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Glu Val Ser Ile Thr Arg Arg Met Phe Arg Asp Gly Ala Ser Glu Tyr
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Ile Glu Glu Ala Ala Gly Val Leu Lys His Arg Lys Arg Lys Glu Lys
165 170 175
Ala Leu Arg Lys Leu Asp Thr Met Ala Ala Asn Leu Ala Arg Leu Thr
180 185 190
Asp Leu Thr Thr Glu Leu Arg Arg Gln Leu Lys Pro Leu Gly Arg Gln
195 200 205
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Ala Arg Leu Arg Leu Ala Ala Asp Asp Leu Val Ser Arg Arg Ala Glu
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Arg Glu Ala Val Phe Gln Ala Glu Ala Ala Met Arg Arg Glu His Asp
245 250 255
Glu Ala Ala Ala Arg Leu Ala Val Ala Ser Glu Glu Leu Ala Ala His
260 265 270
Glu Ser Ala Val Ala Glu Leu Ser Thr Arg Ala Glu Ser Ile Gln His
275 280 285
Thr Trp Phe Gly Leu Ser Ala Leu Ala Glu Arg Val Asp Ala Thr Val
290 295 300
Arg Ile Ala Ser Glu Arg Ala His His Leu Asp Ile Glu Pro Val Ala
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Gln Ala Asp Gly Gly Arg Ala Val Leu Val Leu Ser Asp Trp Pro Ala
565 570 575
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Gln Trp Ala Leu Asp Leu Val Glu Ser Pro Pro Gln Leu Val Gly Ala
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Met Ile Ala Met Leu Ser Gly Val Ala Val Val Asn Asp Leu Thr Glu
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Ala Met Gly Leu Val Glu Ile Arg Pro Glu Leu Arg Ala Val Thr Val
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Asp Gly Asp Leu Val Gly Ala Gly Trp Val Ser Gly Gly Ser Asp Arg
645 650 655
Lys Leu Ser Thr Leu Glu Val Thr Ser Glu Ile Asp Lys Ala Arg Ser
660 665 670
Glu Leu Ala Ala Ala Glu Ala Leu Ala Ala Gln Leu Asn Ala Ala Leu
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Ala Gly Ala Leu Thr Glu Gln Ser Ala Gly Gln Asp Ala Ala Glu Gln
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Ala Leu Ala Ala Leu Asn Glu Ser Asp Thr Ala Ile Ser Ala Met Tyr
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<213> Mycobacterium bovis
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290 295 300
Gly Asn Ile Val Asp Pro Val Ala Leu Ala Glu Ala Leu Gly Val Asp
305 310 315 320
Gln Val Arg Tyr Phe Leu Leu Arg Glu Val Pro Phe Gly Gln Asp Gly
325 330 335
Ser Tyr Ser Asp Glu Ala Ile Val Thr Arg Ile Asn Thr Asp Leu Ala
340 345 350
Asn Glu Leu Gly Asn Leu Ala Gln Arg Ser Leu Ser Met Val Ala Lys
355 360 365
Asn Leu Asp Gly Arg Val Pro Asn Pro Gly Glu Phe Ala Asp Ala Asp
370 375 380
Ala Ala Leu Leu Ala Thr Ala Asp Gly Leu Leu Glu Arg Val Arg Gly
385 390 395 400
His Phe Asp Ala Gln Ala Met His Leu Ala Leu Glu Ala Ile Trp Leu
405 410 415
Met Leu Gly Asp Ala Asn Lys Tyr Phe Ser Val Gln Gln Pro Trp Val
420 425 430
Leu Arg Lys Ser Glu Ser Glu Ala Asp Gln Ala Arg Phe Arg Thr Thr
435 440 445
Leu Tyr Val Thr Cys Glu Val Val Arg Ile Ala Ala Leu Leu Ile Gln
450 455 460
Pro Val Met Pro Glu Ser Ala Gly Lys Ile Leu Asp Leu Leu Gly Gln
465 470 475 480
Ala Pro Asn Gln Arg Ser Phe Ala Ala Val Gly Val Arg Leu Thr Pro
485 490 495
Gly Thr Ala Leu Pro Pro Pro Thr Gly Val Phe Pro Arg Tyr Gln Pro
500 505 510
Pro Gln Pro Pro Glu Gly Lys
515
<210> 17
<211> 557
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 17
Met Ala Pro Arg Arg Arg Arg His Thr Arg Ile Ala Gly Leu Arg Val
1 5 10 15
Val Gly Thr Ala Thr Leu Val Ala Ala Thr Thr Leu Thr Ala Cys Ser
20 25 30
Gly Ser Ala Ala Ala Gln Ile Asp Tyr Val Val Asp Gly Ala Leu Val
35 40 45
Thr Tyr Asn Thr Asn Thr Val Ile Gly Ala Ala Ser Ala Gly Ala Gln
50 55 60
Ala Phe Ala Arg Thr Leu Thr Gly Phe Gly Tyr His Gly Pro Asp Gly
65 70 75 80
Gln Val Val Ala Asp Arg Asp Phe Gly Thr Val Ser Val Val Glu Gly
85 90 95
Ser Pro Leu Ile Leu Asp Tyr Gln Ile Ser Asp Asp Ala Val Tyr Ser
100 105 110
Asp Gly Arg Pro Val Thr Cys Asp Asp Leu Val Leu Ala Trp Ala Ala
115 120 125
Gln Ser Gly Arg Phe Pro Gly Phe Asp Ala Ala Thr Gln Ala Gly Tyr
130 135 140
Val Asp Ile Ala Asn Ile Glu Cys Thr Ala Gly Gln Lys Lys Ala Arg
145 150 155 160
Val Ser Phe Ile Pro Asp Arg Ser Val Val Asp His Ser Gln Leu Phe
165 170 175
Thr Ala Thr Ser Leu Met Pro Ser His Val Ile Ala Asp Gln Leu His
180 185 190
Ile Asp Val Thr Ala Ala Leu Leu Ser Asn Asn Val Ser Ala Val Glu
195 200 205
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210 215 220
Ser His Asp Glu Val Arg Ser Arg Phe Pro Ser Ser Gly Pro Tyr Lys
225 230 235 240
Ile Glu Ser Val Leu Asp Asp Gly Ala Val Val Leu Val Ala Asn Asp
245 250 255
Arg Trp Trp Gly Thr Lys Ala Ile Thr Lys Arg Ile Thr Val Trp Pro
260 265 270
Gln Gly Ala Asp Ile Gln Asp Arg Val Asn Asn Arg Ser Val Asp Val
275 280 285
Val Asp Val Ala Ala Gly Ser Ser Gly Ser Leu Val Thr Pro Asp Ser
290 295 300
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305 310 315 320
Ala Pro Gln Gly Ser Leu Ala Gln Ser Arg Thr Arg Arg Ala Leu Ala
325 330 335
Leu Cys Val Pro Arg Asp Ala Ile Ala Arg Asp Ala Gly Val Pro Ile
340 345 350
Ala Asn Ser Arg Leu Ser Pro Ala Thr Asp Asp Ala Leu Thr Asp Ala
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Asp Gly Ala Ala Glu Ala Arg Gln Phe Gly Arg Val Asp Pro Ala Ala
370 375 380
Ala Arg Asp Ala Leu Gly Gly Thr Pro Leu Thr Val Arg Ile Gly Tyr
385 390 395 400
Gly Arg Pro Asn Ala Arg Leu Ala Ala Thr Ile Gly Thr Ile Ala Asp
405 410 415
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420 425 430
Pro Gly Pro Gln Ala Leu Arg Asp Gly Lys Ile Asp Val Leu Leu Ala
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450 455 460
Asp Ala Tyr Asp Leu His Ser Gly Asn Gly Asn Asn Leu Ser Gly Tyr
465 470 475 480
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Asp Pro Ala Glu Arg Ala Arg Leu Leu Ala Glu Ala Ala Pro Val Leu
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515 520 525
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Gly Ala Gly Trp Asn Met Asp Arg Trp Ala Leu Ala Arg
545 550 555
<210> 18
<211> 325
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 18
Met Thr Asp Val Ser Arg Lys Ile Arg Ala Trp Gly Arg Arg Leu Met
1 5 10 15
Ile Gly Thr Ala Ala Ala Val Val Leu Pro Gly Leu Val Gly Leu Ala
20 25 30
Gly Gly Ala Ala Thr Ala Gly Ala Phe Ser Arg Pro Gly Leu Pro Val
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50 55 60
Gln Phe Gln Ser Gly Gly Asn Asn Ser Pro Ala Val Tyr Leu Leu Asp
65 70 75 80
Gly Leu Arg Ala Gln Asp Asp Tyr Asn Gly Trp Asp Ile Asn Thr Pro
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115 120 125
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195 200 205
Gly Asp Ala Gly Gly Tyr Lys Ala Ala Asp Met Trp Gly Pro Ser Ser
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260 265 270
Val Arg Ser Ser Asn Leu Lys Phe Gln Asp Ala Tyr Asn Ala Ala Gly
275 280 285
Gly His Asn Ala Val Phe Asn Phe Pro Pro Asn Gly Thr His Ser Trp
290 295 300
Glu Tyr Trp Gly Ala Gln Leu Asn Ala Met Lys Gly Asp Leu Gln Ser
305 310 315 320
Ser Leu Gly Ala Gly
325
<210> 19
<211> 271
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 19
Met Leu Pro Glu Thr Asn Gln Asp Glu Val Gln Pro Asn Ala Pro Val
1 5 10 15
Ala Leu Val Thr Val Glu Ile Arg His Pro Thr Thr Asp Ser Leu Thr
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Glu Ser Ala Asn Arg Glu Leu Lys His Leu Leu Ile Asn Asp Leu Pro
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Val Val Asp Ala Arg Ala Gln Val Ser Ser Ile Val Gly Leu Glu Arg
115 120 125
Ile Gly Leu Arg Phe Val Leu Glu Ile Arg Val Pro Ala Gly Val Asp
130 135 140
Gly Arg Ile Thr Trp Ser Asn Trp Ile Asp Glu Gln Leu Leu Gly Pro
145 150 155 160
Gln Arg Phe Thr Pro Gly Gly Leu Val Leu Thr Glu Trp Gln Gly Ala
165 170 175
Ala Val Tyr Arg Glu Leu Gln Pro Gly Lys Ser Leu Ile Val Arg Tyr
180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
Leu Val Ser Thr Phe Gln Asp Leu Tyr Gly Pro Ala Gln Val Val Phe
245 250 255
Gln Glu Met Ile Thr Ser Arg Leu Lys Asp Glu Leu Leu Arg Gln
260 265 270
<210> 20
<211> 302
<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 20
Met Ile Ala Leu Leu Ala Pro Gly Gln Gly Ser Gln Thr Glu Gly Met
1 5 10 15
Leu Ser Pro Trp Leu Gln Leu Pro Gly Ala Ala Asp Gln Ile Ala Ala
20 25 30
Trp Ser Lys Ala Ala Asp Leu Asp Leu Ala Arg Leu Gly Thr Thr Ala
35 40 45
Ser Thr Glu Glu Ile Thr Asp Thr Ala Val Ala Gln Pro Leu Ile Val
50 55 60
Ala Ala Thr Leu Leu Ala His Gln Glu Leu Ala Arg Arg Cys Val Leu
65 70 75 80
Ala Gly Lys Asp Val Ile Val Ala Gly His Ser Val Gly Glu Ile Ala
85 90 95
Ala Tyr Ala Ile Ala Gly Val Ile Ala Ala Asp Asp Ala Val Ala Leu
100 105 110
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115 120 125
Thr Gly Met Ser Ala Val Leu Gly Gly Asp Glu Thr Glu Val Leu Ser
130 135 140
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145 150 155 160
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165 170 175
Asp Pro Pro Ala Lys Ala Arg Val Arg Ala Leu Gly Val Ala Gly Ala
180 185 190
Phe His Thr Glu Phe Met Ala Pro Ala Leu Asp Gly Phe Ala Ala Ala
195 200 205
Ala Ala Asn Ile Ala Thr Ala Asp Pro Thr Ala Thr Leu Leu Ser Asn
210 215 220
Arg Asp Gly Lys Pro Val Thr Ser Ala Ala Ala Ala Met Asp Thr Leu
225 230 235 240
Val Ser Gln Leu Thr Gln Pro Val Arg Trp Asp Leu Cys Thr Ala Thr
245 250 255
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<212> PRT
<213> Mycobacterium bovis
<400> 21
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Tyr Asp Phe Val Asn Asn Glu Ala Leu Pro Gly Thr Asp Ile Asp Pro
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35 40 45
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Asp Lys Trp His Arg Arg Arg Val Ile Glu Pro Ile Asp Met Asp Ala
65 70 75 80
Tyr Arg Gln Phe Leu Thr Glu Ile Gly Tyr Leu Leu Pro Glu Pro Asp
85 90 95
Asp Phe Thr Ile Thr Thr Ser Gly Val Asp Ala Glu Ile Thr Thr Thr
100 105 110
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115 120 125
Asn Ala Ala Asn Ala Arg Trp Gly Ser Leu Tyr Asp Ala Leu Tyr Gly
130 135 140
Thr Asp Val Ile Pro Glu Thr Asp Gly Ala Glu Lys Gly Pro Thr Tyr
145 150 155 160
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180 185 190
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195 200 205
Thr Gly Leu Ala Asn Pro Gly Gln Phe Ala Gly Tyr Thr Gly Ala Ala
210 215 220
Glu Ser Pro Thr Ser Val Leu Leu Ile Asn His Gly Leu His Ile Glu
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Ile Leu Ile Asp Pro Glu Ser Gln Val Gly Thr Thr Asp Arg Ala Gly
245 250 255
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260 265 270
Glu Asp Ser Val Ala Ala Val Asp Ala Ala Asp Lys Val Leu Gly Tyr
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Lys Asp Gly Thr Ala Phe Leu Arg Val Leu Asn Arg Asp Arg Asn Tyr
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370 375 380
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Phe Lys Ala Arg Ala Ala Glu Lys Pro Ala Pro Ser Asp Arg Ala Gly
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Asp Asp Ala Ala Arg
740
Claims (3)
- 우 결핵균인 마이코박테리움 보비스의 배양 상층액으로부터 수득되며, 서열 1, 서열 2, 서열 3, 서열 4, 서열 5, 서열 6, 서열 7, 서열 8, 서열 9, 서열 10, 서열 11, 서열 12, 서열 13, 서열 14, 서열 15, 서열 16, 서열 17, 서열 18, 서열 19, 서열 20 및 서열 21로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 아미노산 서열로 이루어진 우 결핵균에 감염된 개체의 혈청에 면역반응을 일으키는 단백질 항원.
- 제1항의 단백질 항원이 각기 서로 다른 웰에 피복된 플레이트인 것을 특징으로 하는 우 결핵균 항체 검출용 진단키트.
- 제2항의 우 결핵균 항체 검출용 진단키트에 우 결핵균에 감염된 개체의 혈청을 반응시키는 단계; 및기질과의 반응에 의해서 발색을 나타내는 효소가 표지된 2차 항체 접합체(conjugate)를 가하고, 상기 효소의 기질함유 용액을 첨가하여 발색 반응하는 단계를 포함하는 우 결핵균의 감염을 진단하는 방법.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020070070724A KR20090007086A (ko) | 2007-07-13 | 2007-07-13 | 우 결핵병 진단용 면역특이단백질 항원 및 이를 이용한 우결핵균 감염을 진단하는 방법 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020070070724A KR20090007086A (ko) | 2007-07-13 | 2007-07-13 | 우 결핵병 진단용 면역특이단백질 항원 및 이를 이용한 우결핵균 감염을 진단하는 방법 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20090007086A true KR20090007086A (ko) | 2009-01-16 |
Family
ID=40488073
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020070070724A KR20090007086A (ko) | 2007-07-13 | 2007-07-13 | 우 결핵병 진단용 면역특이단백질 항원 및 이를 이용한 우결핵균 감염을 진단하는 방법 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR20090007086A (ko) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101140405B1 (ko) * | 2009-04-21 | 2012-05-03 | 충남대학교산학협력단 | M. abscessus 감염 진단용 마커의 스크리닝 방법 및 발굴된 단백질 항원 |
KR20170115211A (ko) * | 2016-04-06 | 2017-10-17 | 중앙대학교 산학협력단 | 우결핵 진단용 키트 및 이를 이용한 우결핵 진단 방법 |
-
2007
- 2007-07-13 KR KR1020070070724A patent/KR20090007086A/ko active Search and Examination
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101140405B1 (ko) * | 2009-04-21 | 2012-05-03 | 충남대학교산학협력단 | M. abscessus 감염 진단용 마커의 스크리닝 방법 및 발굴된 단백질 항원 |
KR20170115211A (ko) * | 2016-04-06 | 2017-10-17 | 중앙대학교 산학협력단 | 우결핵 진단용 키트 및 이를 이용한 우결핵 진단 방법 |
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