KR20080038066A - 미용 조성물에서 프로-콜라겐 합성제로서 알란토인의 용도 - Google Patents

미용 조성물에서 프로-콜라겐 합성제로서 알란토인의 용도 Download PDF

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아미 씨. 짐머만
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Abstract

알란토인과 허용가능 담체를 함유하는 조성물 및 피부에서 프로-콜라겐(pro-collagen) 합성을 증가시키기 위하여 이들 조성물을 이용하는 방법이 개시된다. 본 발명의 조성물은 주름(wrinkle)과 잔주름(fine line)과 같은 피부 노화(skin aging)를 감소시키는데 이용된다. 본 발명의 조성물은 국소 투여되거나, 경구 투여되거나, 또는 비경구 투여, 예를 들면, 주사에 의해 투여된다. 국소 투여되는 경우에, 침투 강화제, 방향제, 피부 로션과 같은 보조 성분 및 미용 어쥬번트(cosmetic adjuvant)가 본 발명의 조성물에 내포된다.
알란토인

Description

미용 조성물에서 프로-콜라겐 합성제로서 알란토인의 용도{Use of Allantoin as a pro-collagen Synthesis Agent in Cosmetic Compositions}
본 출원은 2006년 10월 27일자 제출된 U.S 가출원 제60/855,102호에 우선권을 주장하는데, 상기 출원은 본 명세서에서 참조로서 편입된다.
콜라겐은 연골, 뼈, 힘줄, 치아, 피부를 비롯한 연결 조직의 주요 단백질이다. 프로-콜라겐으로 불리는 처리 이전 형태의 콜라겐은 세포 내에서 조합되고, 사슬간 이황화 결합에 의해 안정화되는 삼중 나선 형태로 서로를 둘러싸는 3개의 폴리펩티드로 구성된다. 이러한 나선 분자는 세포 내에서 조합되고 변형된 이후, 세포외 매체 내로 분비되고 트로포콜라겐(tropocollagen)으로 알려져 있는 성숙 형태로 더욱 처리된다.
한 실례에서, 콜라겐, 특히, I형 콜라겐은 아래와 같이 형성된다: 조면 소포체(rough endoplasmic reticulum, RER)를 따라 리보좀 내에서 3개의 펩티드 사슬(2개의 알파-1 사슬과 1개의 알파-2 사슬)이 형성된다. 이들 펩티드 사슬(프리프로-콜라겐(prepro-collagen))은 등록(registration) 펩티드 및 각 말단에 부착된 신호 펩티드를 보유한다. 이들 펩티드 사슬은 RER의 내강(lumen)으로 보내지고, 여기서 신호 펩티드가 절단되어 프로-콜라겐을 형성한다. 프로-콜라겐 내에서 리신과 프롤린 아미노산의 가수분해(hydroxylation)가 상기 내강 내에서 진행된다. 이러한 과정은 보조인자(cofactor)로서 아스코르브산(비타민 C)에 의존한다. 특정의 가수분해된 아미노산의 당화(glycosylation) 역시 상기 내강 내에서 진행되는데, 이는 삼중 나선 프로-콜라겐 구조의 형성을 유도한다.
이후, 프로-콜라겐은 골지체(golgi apparatus)로 수송되는데, 여기서 이는 포장되고 세포외유출(exocytosis)에 의해 분비된다. 세포 외부에서, 등록 펩티드가 절단되고, 트로포콜라겐이 프로-콜라겐 펩티다아제에 의해 형성된다. 복수의 트로포콜라겐 분자는 콜라겐 원섬유(fibril)를 형성하고, 복수의 콜라겐 원섬유는 콜라겐 섬유를 형성한다.
성숙된 콜라겐 분자는 엇걸리고 평행하는 방식으로 세포외 공간 내에서 원섬유로 조합되는데, 여기서 상기 분자는 한 분자의 N-말단과 다른 분자의 C-말단 사이에 공유 가교-연결 결합에 의해 이러한 원섬유 패턴으로 안정화된다. 콜라겐 원섬유는 피부 내에서 얽혀지고 분지된다. 이들 얽혀지고 분지된 콜라겐 원섬유는 피부에 형상과 견고함(firmness)을 제공하는 반면, 다른 피부 단백질, 엘라스틴(elastin)은 피부에 탄력성을 제공한다. 엘라스틴은 스프링처럼 감겨지고, 피부, 혈관, 심장, 폐, 내장, 힘줄, 인대와 같은 구조의 탄력성을 담당한다. 통상적으로, 엘라스틴은 노화가 시작된 이후 인체 내에서 생성되지 않는다.
많은 구조적 특성 이외에, 콜라겐은 거의 모든 신체 조직의 성장과 회복을 위한 주요 촉매로서 기능한다. 가령, 진피 내에서 주요 세포형인 섬유아세 포(fibroblast)는 정상적인 기능을 유지하기 위하여 콜라겐 원섬유와의 상호작용을 필요로 한다. 많은 상이한 노화 질환이 이러한 극히 중요한 단백질의 신체 공급과 콜라겐 자체에서 장애에 관련된다. 실제로, 콜라겐의 체내 생산은 노화가 진행됨에 따라 급격하게 감소한다. 이에 더하여, 인체 내에서 모든 다른 단백질과 마찬가지로, 콜라겐과 엘라스틴은 지속적으로 변성되고 상실된다. 피부 내에서 콜라겐의 변성은 매끈함(smoothness), 균등성(evenness), 견고함의 상실을 유발하고, 처짐(sagging)과 주름 형성을 초래할 수 있다.
콜라겐은 여러 용도로 이용된다. 가령, 콜라겐은 피부 로션을 비롯한 많은 피부 치료제에 내포되고, 미용 성형과 화상 치료에서 흉터 형성을 감소시키는 데에도 이용된다. 하지만, 보충제로부터 획득된 콜라겐을 효과적이고 효율적으로 이용하는 데에는 많은 어려움이 존재한다. 이런 이유로, 신체 자체의 콜라겐 생산 및/또는 콜라겐의 전구체, 예를 들면, 프로-콜라겐의 생산을 증가시킴으로써 콜라겐의 상실을 억제할 수 있는 조성물은 피부의 외관(appearance), 질감(texture), 견고함을 개선하고 전반적인 피부 건강을 유지하는데 유용할 것이다.
요약
콜라겐 상실은 피부 노화를 비롯한 다수의 질환과 장애에 직접적으로 관련된다. 실제로, 콜라겐 상실은 주름 형성의 주요 원인이다. 본 발명은 알란토인을 함유하는 조성물의 투여가 콜라겐 전구체, 프로-콜라겐의 합성을 자극하고 증가시킨다는 놀라운 발견에 기초한다. 따라서, 한 실례에서, 본 발명에서는 프로-콜라겐 및/또는 콜라겐 합성을 자극하는 조성물을 제시하는데, 여기서 상기 조성물은 알란토인 및 허용가능 담체를 함유한다.
한 실례에서, 알란토인은 본 발명의 조성물 내에서, 조성물의 대략 0.05% w/w 내지 대략 2% w/w 범위의 양으로 존재한다. 다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 조성물의 대략 0.075% w/w 내지 대략 1.5% w/w 범위의 알란토인을 함유한다. 다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 조성물의 대략 0.1% w/w 내지 대략 1% w/w 범위의 알란토인을 함유한다. 다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 조성물의 대략 0.15% w/w 내지 대략 0.75% w/w 범위의 알란토인을 함유한다. 다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 조성물의 대략 0.5% w/w의 양으로 알란토인을 함유한다.
다른 실례에서, 본 발명에서는 포유동물 피부 내에서 프로-콜라겐 및/또는 콜라겐 합성을 증가시키는 방법을 제시하는데, 상기 방법은 알란토인을 함유하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실례에서, 포유동물 피부는 인간 피부이다. 다른 실례에서, 조성물은 국소 투여된다. 다른 실례에서, 조성물은 경구 투여 되거나, 또는 비경구 투여, 예를 들면, 주사에 의해 투여된다.
다른 실례에서, 본 발명에서는 포유동물 피부의 외관, 질감, 견고함을 개선하는 방법을 제시하는데, 상기 방법은 알란토인을 함유하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 조성물은 피부 내에서 프로-콜라겐 및/또는 콜라겐의 합성을 증가시킨다. 한 실례에서, 조성물은 인간 피부에 국소 투여된다. 다른 실례에서, 조성물은 경구 투여되거나, 또는 비경구 투여, 예를 들면, 주사에 의해 투여된다.
다른 실례에서, 본 발명에서는 포유동물 피부 내에서 주름 또는 잔주름의 외관 및/또는 깊이를 감소시키는 방법을 제시하는데, 상기 방법은 알란토인을 함유하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 조성물은 피부 내에서 프로-콜라겐 및/또는 콜라겐의 합성을 증가시킨다.
본 발명은 본 명세서에 기술된 특정 조성물, 방법, 또는 프로토콜에 한정되지 않는다. 더 나아가, 달리 정의하지 않는 경우에, 본 명세서에 이용된 모든 기술 용어와 과학 용어는 본 발명이 속하는 분야의 당업자에게 통상적으로 이해되는 동일한 의미를 갖는다. 또한, 본 명세서에 이용된 용어는 특정 실례를 기술하는 것을 목적으로 할뿐 본 발명의 범위를 결코 한정하지 않으며, 이러한 범위는 특허청구범위에 의해서만 한정된다.
본 발명은 알란토인(C4H6N4O3)(2,5-디옥시-4-이미다졸리디닐우레아)이 인간 피부에서 프로-콜라겐 합성을 자극한다는 놀라운 발견에 기초한다. 다음으로, 프로-콜라겐 합성에서 증가는 콜라겐 합성에서 증가를 유도한다. 이런 이유로, 본 발명은 알란토인이 인간 피부 내에서 콜라겐 합성을 자극한다는 놀라운 발견에 또한 기초한다.
알란토인은 또한, 5-우레이도히단토인(ureidohydantoin), 글리옥실디우레이드(glyoxyldiureide), 5-우레이도히단토인(ureidohydantoin), 젖통 크림(udder cream), 우레이도히단토인(ureidohydantoin), 글리옥시디우레이드(glyoxyldiureide), 헤모케인(hemocane)으로 알려져 있다. 이는 요산(uric acid)의 산화 산물이다. 일반적으로, 알란토인은 나래지치 식물(comfrey plant)의 식물성 추출물로서 획득되지만 다른 공급원으로부터 획득될 수도 있다. 알란토인은 상처와 피부 자극을 치유하고 건강한 조직의 성장을 촉진하는데 도움을 준다.
알란토인은 경미한 상처를 치유하고 건강한 피부를 촉진하는데 도움을 주는 능력에 기인한 항-여드름 제품, 일광 차단 제품, 투명화 로션에서부터 각질용해 효과(keratolytic effect) 및 연마와 수렴 특성에 기인한 피부 연화 미용 제제까지 다양한 제품에 이용된다. 구체적으로, 알란토인은 괴사 조직과 딱지 조직의 화학적 제거제(chemical debrider)로서 기능하고, 적용된 부위를 깨끗하게 한다. 알란토인은 또한, 치약, 구강세척액 및 다른 구강 위생 제품, 샴푸, 립스틱, 다양한 미용 로션과 크림, 다른 미용 제품과 약학 제품 내에 빈번하게 존재한다. 하지만, 지금까지, 알란토인이 이들 제품 내에서 프로-콜라겐 및/또는 콜라겐 합성 및/또는 생산을 증가시키는 수단으로서 이용될 수 있다는 사실은 밝혀지지 않았다.
알란토인은 제한된 용해도(solubility)를 갖는다; 전형적으로, 1 g의 알란토인을 안정화시키기 위하여 적어도 190 ㎖의 물이 필요하다. 이런 이유로, 본 발명의 조성물 내에서, 알란토인은 상대적으로 낮은 농도, 예를 들면, 조성물의 대략 0.05% w/w 내지 대략 2% w/w 범위로 존재한다. 한 실례에서, 본 발명의 조성물은 조성물의 대략 0.075% w/w 내지 대략 1.5% w/w 범위의 알란토인을 함유한다. 다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 조성물의 대략 0.1% w/w 내지 대략 1% w/w 범위의 알란토인을 함유한다. 다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 조성물의 대략 0.15% w/w 내지 대략 0.75% w/w 범위의 알란토인을 함유한다. 다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 조성물의 대략 0.5% w/w의 양으로 알란토인을 함유한다.
본 발명의 조성물은 허용가능 담체, 첨가제 및/또는 미용 어쥬번트와 함께 투여된다. 가령, 본 발명의 조성물은 겔, 로션, 크림, 강장제, 에멀젼 등의 형태로, 허용가능 담체와 함께 외부에 투여될 수 있다. 다른 실례로서, 본 발명의 조성물은 알약, 정제, 분말, 바(bar), 음료 등의 형태로, 허용가능 담체와 함께 내부에 투여될 수 있다. 따라서, 본 명세서에 기술된 조성물은 미용 제품, 약학 제품, 식품 제품, 음료 조성물을 비롯한 다양한 완성된 제품에 유용하다. 적절하게는, 이들 제품은 피부 내에서 프로-콜라겐 및/또는 콜라겐의 합성을 증가시켜 피부에 향상된 질감과 외관을 제공하는데 유용하다.
본 발명의 다른 구체예에서, 본 발명의 조성물은 용액, 겔, 로션, 크림, 연고, 수중유(oil-in-water) 에멀젼, 유중수(water-in-oil) 에멀젼, 스틱, 스프레이, 페이스트, 무스(mousse), 강장제, 또는 다른 미용적으로 국소적으로 적합한 형태로 국소 투여된다.
적절하게는, 국소 투여에 적합한 본 발명의 조성물은 허용가능 담체와 혼합된다. 허용가능 담체는 상기 조성물의 성분에 대한 용제, 담체, 희석제 또는 분산제로서 다양하게 기능할 수 있고, 적절한 농도에서 피부의 표면에 이들 성분의 균일한 적용을 가능하게 한다. 이러한 허용가능 담체는 또한, 피부 내로 조성물의 침투를 용이하게 한다.
국소 적용을 위한 본 발명의 조성물의 한 실례에서, 허용가능 담체는 중량으로 전체 조성물의 대략 80% 내지 대략 99.99%를 형성한다. 다른 실례에서, 허용가능 담체는 전체 조성물의 대략 90% 내지 대략 99%를 형성한다. 허용가능 담체는 또한, 중량으로 전체 조성물의 대략 91% 내지 대략 98%; 전체 조성물의 대략 92% 내지 대략 97%; 전체 조성물의 대략 93% 내지 대략 96%; 또는 전체 조성물의 대략 94% 내지 대략 95%를 형성한다. 허용가능 담체는 다른 미용 보조제 또는 첨가제의 부재에서, 조성물의 나머지 부분(balance)을 형성할 수 있다.
본 발명을 실시하는데 이용되는 알란토인 및 다른 성분은 허용가능 담체 내에서 가용성이거나 불용성이다. 조성물의 모든 성분이 허용가능 담체 내에서 가용성이면, 상기 운반제(vehicle)는 용제로서 기능한다. 하지만, 조성물의 모든 또는 일부 성분이 허용가능 담체 내에서 불용성이면, 이들 성분은 예로써, 현탁액, 에멀젼, 겔, 크림 또는 페이스트 등의 수단에 의해 운반제 내에 분산된다.
따라서, 당업자가 인지하는 바와 같이, 가능한 허용가능 담체의 범위는 매우 광범위하다. 가령, 허용가능 담체는 에멀젼, 로션, 크림, 또는 강장제일 수 있다. 허용가능 담체는 물, 에탄올, 부틸렌 글리콜, 또는 피부 침투를 보조하는 다른 다양한 용제를 포함할 수 있다. 적절한 운반제의 일부 실례는 U.S. Pat. No. 6,184,247과 U.S. Pat. No. 6,579,516에서 기술된다.
일반적으로, 본 발명에 따른 허용가능 담체에는 아래의 실례가 포함되지만 이들에 국한되지 않는다: 물; 피마자유; 에틸렌 글리콜 모노부틸 에테르; 디에틸렌 글리콜 모노에틸 에테르; 옥수수기름; 디메틸 술폭시드; 에틸렌 글리콜; 이소프로판올; 콩기름; 글리세린; 가용성 콜라겐; 산화아연; 산화티타늄; 또는 카올린.
한 측면에서, 본 발명을 실시하는데 이용되는 허용가능 담체는 물과 에탄올을 포함한다. 선택적으로, 허용가능 담체는 또한, 부틸렌 글리콜 및/또는 프레스콜레이트(frescolate) MGA를 포함한다. 가령, 허용가능 담체는 중량으로 조성물의 40-60% 물, 45-55% 에탄올, 5-10% 부틸렌 글리콜을 포함한다. 본 발명을 실시하는데 있어, 이러한 허용가능 담체는 가급적, 중량으로 전체 조성물의 대략 0.05% 내지 대략 2%를 형성하는 알란토인과 혼합된다.
부가적으로, 본 발명에 이용되는 허용가능 담체는 글리세린, 프탈산 디부틸; 가용성 콜라겐; 소르비톨; 또는 나트륨 2-피롤리돈-5-카르복실레이트가 포함되지만 이들에 국한되지 않는 하나이상의 보습제를 선택적으로 포함한다. 본 발명을 실시하는데 이용될 수 있는 보습제의 다른 실례는 CTFA(Cosmetic Toiletry and Fragrance Association) Cosmetic Ingredient Handbook에서 확인할 수 있는데, 상기 간행물의 관련 부분은 본 명세서에 참조로서 편입된다.
부가적으로, 본 발명에 이용되는 허용가능 담체는 이소노닐 이소노나노에이 트(isononyl isononanoate), 부탄-1,3-디올; 세틸 팔미테이트(cetyl palmitate); 디메틸폴리실록산(dimethylpolysiloxane); 글리세릴 모노리시놀레이트(glyceryl monoricinoleate); 글리세릴 모노스테아레이트(glyceryl monostearate); 이소부틸 팔미테이트(isobutyl palmitate); 이소세틸 스테아레이트(isocetyl stearate); 이소프로필 팔미테이트(isopropyl palmitate); 이소프로필 스테아레이트(isopropyl stearate); 부틸 스테아레이트(butyl stearate); 이소프로필 라우레이트(isopropyl laurate); 헥실 라우레이트(hexyl laurate); 데실 올레이트(decyl oleate); 이소프로필 미리스테이트(isopropyl myristate); 라우릴 락테이트(lauryl lactate); 옥타데칸-2-올; 카프릴릭 트리글리세리드(caprylic triglyceride); 카프릭 트리글리세리드(capric triglyceride); 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol); 프로판-1,2-디올; 트리에틸렌 글리콜(triethylene glycol); 참기름(sesame oil); 코코넛 기름(coconut oil); 잇꽃 기름(safflower oil); 이소아밀 라우레이트(isoamyl laurate); 노녹시놀-9; 판테놀(panthenol); 수소첨가된 식물성 오일(hydrogenated vegetable oil); 토코페릴 아세테이트(tocopheryl acetate); 토코페릴 리놀레이트(tocopheryl linoleate); 프로필렌 글리콜(propylene glycol); 낙화생유(arachis oil); 피마자유(castor oil); 이소스테아린산(isostearic acid); 팔미트산(palmitic acid); 이소프로필 리놀레이트(isopropyl linoleate); 라우릴 락테이트(lauryl lactate); 미리스틸 락테이트(myristyl lactate); 데실 올레이트(decyl oleate); 또는 미리스틸 미리스테이트(myristyl myristate)가 포함되지만 이들에 국한되지 않는 하나이상의 유연제를 포함한다. 본 발명을 실시하는데 이용될 수 있 는 유연제의 다른 실례는 CTFA(Cosmetic Toiletry and Fragrance Association) Cosmetic Ingredient Handbook에서 확인할 수 있는데, 상기 간행물의 관련 부분은 본 명세서에서 참조로서 편입된다.
부가적으로, 본 발명에 이용되는 허용가능 담체는 피롤리돈, 예를 들면, 2-피롤리돈; 알코올, 예를 들면, 에탄올; 알칸올, 예를 들면, 데카놀; 글리콜, 예를 들면, 프로필렌 글리콜, 디프로필렌 글리콜, 부틸렌 글리콜; 계면활성제; 또는 테르펜이 포함되지만 이들에 국한되지 않는 하나이상의 침투 강화제를 선택적으로 포함한다.
본 발명을 실시하는데 이용될 수 있는 다른 허용가능 담체는 당업자에게 명백하고, 본 발명의 범위 내에 포함된다.
가령, 허용가능 담체는 국소 적용되는 로션일 수 있다. 로션은 알란토인 이외에, 카보머(carbomer) 981, 물, 글리세린, 이소프로필 미리스테이트, 광유(mineral oil), 시어 버터(shea butter), 스테아린산, 글리콜 스테아레이트, 세틸 알코올, 디메티콘, 보존제, 차(tea)를 함유한다. 다른 실례에서, 로션은 알란토인 이외에, 물, 이소노닐 이소노나노에이트, 수소첨가된 레시틴, 부틸렌 글리콜, 글리세린, 카프릴릭/카프릭 트리글리세리드, 스테아린산, 세틸 알코올, 베헤닐 알코올(behenyl alcohol), 산탄 검(xanthan gum), 메틸파라벤(methylparaben), 클로르페네신(chlorphenesin)을 함유한다.
다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 액체 또는 고체의 형태로 경구 투여된다. 액체는 물-기초된 액체, 우유-기초된 액체, 차-기초된 액체, 과일 주스-기초된 액체, 또는 이들의 일부 조합이다. 본 발명에 따른 내부 투여를 위한 고형과 액상 조성물은 산탄 검, 카르복시메틸-셀룰로오스, 카르복시에틸셀룰로오스, 하이드록시프로필셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 미세결정성 셀룰로오스, 전분, 덱스트린, 발효된 유장, 토푸(tofu), 말토덱스트린, 당 알코올(가령, 소르비톨과 만니톨)을 비롯한 폴리올, 탄수화물(가령, 락토오스), 프로필렌 글리콜 알기네이트, 겔란 검(gellan gum), 구아(guar), 펙틴(pectin), 트래거캔스 검(tragacanth gum), 아카시아 검(gum acacia), 로커스트 콩 검(locust bean gum), 아라비아 검(gum arabic), 젤라틴 및 이들 농후제의 혼합물을 비롯한 농후제를 더욱 함유할 수 있다. 이들 농후제는 관련된 특정 농후제 및 요망되는 점성 효과(viscosity effect)에 따라, 전형적으로 최대 0.1%까지 본 발명의 조성물에 내포된다.
본 발명의 고형과 액상(식품과 음료) 조성물은 전형적으로, 탄수화물 감미료 및 천연 및/또는 인공의 무/저 칼로리 감미료를 비롯한 하나이상의 감미료의 효과량을 함유한다. 본 발명의 조성물에 이용되는 감미료의 양은 변하지만, 전형적으로, 이용되는 감미료의 유형 및 요망되는 감미료 강도에 좌우된다.
본 발명의 조성물은 투여 방식에 상관없이, 상기 조성물에 의해 제공되는 프로-콜라겐 및/또는 콜라겐의 합성에서 원하는 증가에 부정적인 영향을 주지 않는 다양한 공지된 통상적인 미용 어쥬번트를 함유할 수도 있다. 가령, 본 발명의 조성물은 당분야에 널리 공지된 하나이상의 첨가제 또는 다른 선택적 성분을 더욱 함유할 수 있는데, 여기에는 충전제(가령, 고체, 반-고체, 액체 등); 담체; 희석제; 농후제(가령, 산탄 검); 겔화제; 유화제(가령, 레시틴 또는 아카시아); 밀폐 제(occlusive agent)(가령, 카프릴릭 또는 카프릭 트리글리세리드); 비타민, 레티노이드, 레티놀(가령, 비타민 B3, 비타민 A 등); 색소; 방향제; 일광 차단제와 자외선 방지제; 항산화제와 라디칼 소거제; 유기 하이드록시산; 각질제거제; 피부 컨디셔너; 보습제(가령, 스테아린산, 세틸 알코올, 베헤닐 알코올); 세라마이드; 슈도세라마이드, 인지질, 스핑고지질, 콜레스테롤, 글루코사민, 제약학적으로 허용가능 침투제(가령, n-데실메틸 술폭시드, 레시틴 유기젤(organogel), 티로신, 리신 등); 보존제(가령, 메틸파라벤, 클로르페네신); 항균제; 트리에탄올아민 또는 수산화나트륨과 같은 염기와 함께, 프롤린, 피롤리돈 카르복실산, 이의 유도체와 염과 같은 아미노산, 단당류 아이소머레이트(saccharide isomerate), 판테놀, 완충제; 밀랍, 오조케라이트(ozokerite) 왁스, 파라핀 왁스와 같은 왁스; 알로에 베라(Aloe Vera), 수레국화(cornflower), 위치 하젤(witchhazel), 딱총나무 꽃(elderflower) 또는 오이와 같은 식물 추출물 및 이들의 조합이 포함되지만 이들에 국한되지 않는다. 다른 적합한 첨가제 및/또는 보조제는 U.S. Pat. No. 6,184,247에서 기술되는데, 이의 전체 내용은 본 명세서에서 참조로서 편입된다.
본 발명의 조성물은 계면활성제, 보조-용제, 부형제가 포함되지만 이들에 국한되지 않는 부가적인 비활성 성분을 함유할 수 있다. 계면활성제, 예를 들면, 친수성과 소수성 계면활성제가 조성물에 내포될 수 있다. 조성물의 전체 조성 및 상기 조성물의 의도된 전달에 기초하여 특정의 계면활성제가 이용될 수 있다. 유용한 계면활성제에는 폴리에톡시화(PEG) 지방산, PEG-지방산 디에스테르, PEG-지방산 모 노-와 디-에스테르 혼합물, 폴리에틸렌 글리콜 글리세롤 지방산 에스테르, 알코올-오일 에스테르교환(transesterification) 산물, 폴리글리세리화 지방산, 프로필렌 글리콜 지방산 에스테르, 프로필렌 글리콜 에스테르-글리세롤 에스테르의 혼합물, 모노-와 디-글리세리드, 스테롤과 스테롤 유도체, 폴리에틸렌 글리콜 소르비탄 지방산 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 알킬 에테르, 다당류 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 알킬 페놀, 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 블록 공중합체, 소르비탄 지방산 에스테르, 저급 알코올 지방산 에스테르, 이온 계면활성제, 이들의 혼합물이 포함된다.
본 발명의 조성물은 또한, 알코올과 폴리올, 폴리에틸렌 글리콜, 에테르, 아마이드, 에스테르, 다른 적합한 보조-용제, 이들의 혼합물과 같은 보조-용제를 함유할 수 있다. 조성물은 또한, 감미료, 향료, 착색제, 항산화제, 보존제, 킬레이트화제, 점성조절제(viscomodulator), 강장제(tonicifier), 방향제, 불투명화제(opacifier), 현탁제(suspending agent), 결합제(binder), 이들의 혼합물과 같은 부형제 또는 첨가제를 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물에 내포되는 다른 첨가제는 당업자에게 명백하고, 본 발명의 범위 내에 포함된다.
알란토인은 피부를 통하여 쉽게 흡수되는 것으로 알려져 있다. 따라서, 앞서 언급된 바와 같이, 한 실례에서, 본 발명의 조성물은 국소 전달된다. 다른 실례에서, 앞서 언급된 바와 같이, 본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구 전달된다. 전반적으로, 본 발명의 조성물은 적어도 일일 기초로 투여된다. 본 발명의 조성물의 투 여는 임의의 적당한 기간 동안 지속된다. 프로-콜라겐 및/또는 콜라겐 합성에서 증가 수준 및 이에 따른, 피부에서 외관, 견고함 또는 질감의 개선과 같은 미용 강화의 정도는 이용된 조성물의 전체량과 빈도에 따라 직접적으로 변할 것이다.
한 실례에서, 본 발명의 조성물은 적어도 일일 1회 국소 투여된다. 다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 일일 2회 투여된다. 다른 실례에서, 본 발명의 조성물은 일일 3회 내지 5회 투여된다. 다른 실례에서, 일일 투여되는 본 발명의 조성물의 양에 제한이 없다. 최적 효과를 위하여, 본 발명의 조성물은 적어도 일일 기초로, 적어도 1주 내지 수주 동안 투여된다. 본 발명의 조성물은 또한, 적어도 일일 기초로, 수주 내지 1개월 내지 수개월 내지 1년 내지 수년 동안 투여될 수도 있다. 본 발명의 조성물이 투여되는 빈도 또는 기간에는 제한이 없다.
상기한 상세한 설명은 제한이 아닌 예시로서 간주된다. 본 발명은 아래의 실험 조사와 실시예에 의해 더욱 예시되는데, 이들은 본 발명을 결코 한정하지 않는다. 본 특허에서 언급된 모든 참고문헌, 특허 및 공개된 출원의 내용은 본 명세서에서 참조로서 편입된다.
알란토인과 허용가능 담체를 함유하는 본 발명의 조성물은 피부에서 프로-콜라겐(pro-collagen) 합성을 증가시킨다. 또한, 본 발명의 조성물은 주름(wrinkle)과 잔주름(fine line)과 같은 피부 노화(skin aging)를 감소시킨다.
실시예 1: 프로-콜라겐 합성 시험관내 검사
Hs27/HEK001 세포는 96-웰 평판의 웰당 10,000/40,000개 세포로 도말한다. Hs27 세포는 포피 공급원으로부터 유래된 정상 인간 섬유아세포다. HEK100 세포는 최초에, 인간 머릿가죽 각질세포로부터 유래된 인간 상피 세포다. 96-웰 평판의 외부 웰은 가열(heating)을 향상시키고 가장자리 효과(edge effect)를 최소화하기 위하여, 세포를 보유하지 않고 완충제 단독 또는 배지 단독만을 보유한다. Hs27/HEK001 세포는 하룻밤동안 부착하도록 한다. 하룻밤 배양이후, 배지는 웰로부터 제거하고 100 ㎕ 새로운 배지로 교체한다.
알란토인 샘플의 저장 용액(stock solution)(50 ㎎/㎖)을 5:3:2 농도의 DMSO : 에탄올: dlH2O에서 제조한다. 하룻밤 배양이후, 검사 샘플을 1, 10, 100 ㎍/㎖의 최종 농도로 웰에 삼중으로 추가한다. 검사 샘플이 추가된 세포는 하룻밤동안 배양하고, Procollagen ELISA 키트(Takara Bio, Inc., Japan)를 이용한 분석을 위하여 상층액을 수집한다. 각 검사 샘플에 대한 EC50 농도를 모니터하고 기록하여 시간의 흐름에서 변이성(variability)을 평가한다.
본 검사에 대한 대조는 H27/HEK 세포에 0.1, 1, 10 ㎍/㎖ 아스코르브산과 전체-트랜스-레티노산의 투여다. 처리되지 않은 세포 역시 음성 대조(negative control)로서 이용된다. 일반적으로, 아스코르브산은 처리되지 않은 대조와 비교하여, 프로-콜라겐 합성을 대략 15-20% 정도 증가시키는 것으로 알려져 있다.
본 검사에서 각 샘플/대조 농도는 삼중 웰에서 동작시켰다. 알란토인은 알란토인의 양이 증가함에 따라, 프로-콜라겐 합성에서 용량-의존성 증가를 나타냈다. 100 ㎍/㎖ 알란토인을 투여함으로써 달성된 이들 결과의 평균은 하기 표 1에 보고된다. 본 실시예에서 알란토인의 투여는 프로-콜라겐 ELISA 키트(Takara Bio, Inc., Japan)를 이용한 측정에서, 프리-콜라겐 생산에서 현저한 증가를 결과하였다. 구체적으로, 100 ㎍/㎖에서, 알란토인은 프로-콜라겐 합성에서 24.1%의 평균 증가를 결과하였다. 글리코사미노글리칸(glycosaminoglycan) 생산과 엘라스틴 생산에서도 각각, 11.2%와 6.2%의 평균 증가가 관찰되었다.
알란토인 투여(100 ㎍/㎖에서)의 효과
알란토인 투여의 효과: 증가 비율 vs. 처리되지 않은 대조:
프로-콜라겐 합성 124.1%
글리코사미노글리칸의 합성 111.2%
엘라스틴 합성 106.2%
히알루론산 합성 79.7%
실시예 2: 세포 생존능
상층액의 수집이후 실시예 1의 웰에, 10 ㎕ WST-1 반응물과 함께 새로운 배지를 추가하여 생존능(viability)을 평가한다. 이러한 새로운 배지와 WST-1 반응물은 대략 1 시간 동안 세포와 함께 배양한다. 이후, 웰-평판을 450 nm에서 판독하여 세포 생존능(cellular viability)을 평가한다.
실시예 3: 생체내 항-주름 평가 연구
본 발명의 제제는 35-50세 연령의 25명 여성 개체에서 평가하였다. 이들 선택된 개체는 눈가(periorbital) 주름, 예를 들면, “눈꼬리 주름(crows feet)”을 보유하였는데, 이는 숙련된 피부과의사에 의한 진찰과 신체검사에 의해 확증되었다. 아래의 기준에 해당하는 개체는 본 연구에 참여가 배제되었다: 검사 부위에 피부 질환, 감염성 피부 질환, 아토피성 피부염, 최근 3개월 이내에 레티놀 또는 과일산(fruit acid)을 함유하는 항-주름 기능성 화장품의 이용, 최근 3개월 이내에 피부 스케일링(skin scaling)과 피부 관리(skin care)의 전력, 최근 6개월 이내에 화학적 박피술 또는 주름 제거의 전력, 화장품, 샴푸, 의약품, 일광 노출에 대한 과민성과 알레르기, 임신이나 수유, 영양실조, 또는 약물 남용자 또는 알코올중독자. 각 개체는 본 연구에 앞서 1주일 동안 및 본 연구의 지속 기간 동안, 아이 크림, 미백 제품, 항-주름 제품, 팩, 마사지 등을 비롯한 임의의 다른 피부 관리 제품이나 방법이 금지되었다.
개체는 두 군: A 군과 B 군으로 무작위 분할하였다. A 군 개체에서, 본 발명의 제제는 왼쪽 눈가 부위에 적용으로 조사하였다. A 군 개체는 오른쪽 눈가 부위에 위약 조성물이 적용되었다. B 군 개체에서, 본 발명의 제제는 왼쪽 눈가 부위에 적용으로 조사하였다. B 군 개체는 왼쪽 눈가 부위에 위약 조성물이 적용되었다.
본 실시예에서 조사된 본 발명의 제제는 물, 유연제, 유화제, 보습제, 밀폐제, 피부 로션, 농후제, 보존제를 비롯한 다른 성분과 함께, 대략 0.15% 알란토인을 함유하였다. 더욱 구체적으로, 상기 제제는 대략 0.15% 알란토인 및 기부 담체(base carrier)로서 물을 함유하였다. 이러한 검사 제제에서 부가적인 성분에는 이소노닐 이소노나노에이트, 수소첨가된 레시틴, 부틸렌 글리콜, 글리세린, 카프릴릭/카프릭 트리글리세리드, 스테아린산, 세틸 알코올, 베헤닐 알코올, 산탄 검, 메틸파라벤, 클로르페네신이 포함되었다.
본 연구는 12주간 지속되었다. 본 연구 동안 4가지 시점에서, 각 개체의 눈가 부위에서 피부 지형(skin topography)을 시각적으로 및 기계적으로 기록하였다. 시각적 평가를 위하여 이중 맹검 검사(double blind test)를 이용하였는데, 피부에 대한 일광손상(photodamage)의 시각적 평가에 숙련된 2명의 피부과의사가 각 개체의 눈가 주름을 평가하였다. 첫 번째 시각적 평가는 검사 제제의 적용 이전(0주)에 진행되었다. 4주, 8주, 12주 시점에 동일한 2명의 피부과의사가 각 개체의 눈가 주름을 다시 평가하였다. 이들 피부과의사는 보편적인 일광손상 스코어(0: 없음, 1: 없음/경등도, 2: 경등도, 3: 경등도/중등도, 4: 중등도, 5: 중등도/중증도, 6: 중증도, 7: 매우 중증도; Arch Dermatol vol. 137(8):1043-1051,2001 참조)를 이용하여 각 개체의 눈가 주름을 평가하였다. 이에 더하여, 각 평가 시에, 이들 피부과의사는 각 개체에 대한 눈가 부위의 사진을 촬영하였다(디지털 카메라, OLYMPUS E-1(JAPAN) 이용).
이들 숙련된 피부과의사에 의한 시각적 평가는 기록하고, 독립표본 T-검정(independent t-test) 또는 쌍체 T-검정(paired t-test)을 이용하여 검사 제제 군과 대조 군 사이의 차이를 비교하였다(유의성 설정: p<0.05). 본 연구의 결과는 하기 표 2에 보고된다.
시각적 평가
시각적 일광손상 스코어
Week 0 Week 4 Week 8 Week 12
위약 4.04 4.08 4.00 3.96
알란토인 4.13 4.04 3.96 3.75
이러한 시각적 평가는 검사 제제가 시각적 외관에서, 주름의 숫자와 깊이를 감소시킨다는 것을 입증하였다. 이러한 결과는 위약과 비교하여 유의하였다.
각 평가 시에, 이들 피부과의사는 각 개체의 기계적 평가를 또한 수행하였다. 각 개체에 대한 눈가 부위의 레플리카(replica)를 만들고, 미세주름측정기(Visiometer)(Skin-Visiometer SV 600, Courage & Khazaka, Germany)를 이용하여 평가하였다. 광 강도(light intensity)는 Lambert & Beer 법칙으로 분석하고, 피부 주름 개선의 정도를 측정한다(Iex = Iine- kd).
미세주름측정기 측정을 위하여, 독립표본 T-검정(independent t-test) 또는 쌍체 T-검정(paired t-test)을 이용하여 두 군(검사 군과 위약 군) 사이의 차이를 비교하였다(유의성 설정: p<0.05). 이 검사에 대한 결과는 하기 표 3과 4에 보고된다. 표 3에서는 12주 기간의 종결 시점에서, 각 개체에서 관찰된 평균 거칠기(average roughness)를 보고하고, 표 4에서는 각 개체에서 관찰된 최대 거칠기(maximum roughness)를 보고한다.
평균 거칠기 - 12주 결과
계산된 필드 R3 R3 R3 R3
개체 번호 공백 기준선 - 12주 결과 알란토인 기준선 - 12주 결과 공백 기준선 알란토인 기준선 공백 12주 알란토인 12주
1 0.04 0.03 0.2 0.19 0.16 0.16
2 -21.71 0.06 0.29 0.26 22 0.2
3 -0.01 0.01 0.22 0.24 0.23 0.23
4 0.06 0.06 0.27 0.27 0.21 0.21
5 0.01 0.05 0.19 0.23 0.18 0.18
6 0 0.02 0.22 0.22 0.22 0.2
7 0.04 0.01 0.22 0.18 0.18 0.17
8 0.01 0.04 0.22 0.22 0.21 0.18
9 0.02 0.03 0.22 0.21 0.2 0.18
10 0.01 0.03 0.25 0.28 0.24 0.25
11 0.03 0.05 0.25 0.27 0.22 0.22
12 0.01 -0.01 0.25 0.24 0.24 0.25
14 0.06 0.05 0.27 0.25 0.21 0.2
15 0.04 0.05 0.23 0.22 0.19 0.17
16 0 0.03 0.2 0.22 0.2 0.19
17 0.01 0.01 0.22 0.22 0.21 0.21
18 0.03 0.06 0.2 0.21 0.17 0.15
19 0.05 0.05 0.23 0.23 0.18 0.18
20 0.06 0.03 0.24 0.22 0.18 0.19
21 0.05 0.09 0.23 0.27 0.18 0.18
22 0.04 0.02 0.19 0.17 0.15 0.15
23 0.04 0.05 0.24 0.23 0.2 0.18
24 0.07 0.1 0.23 0.27 0.16 0.17
25 0.05 0.07 0.24 0.22 0.19 0.15
Avg 0.232 0.232 0.200 0.190
STD 0.026 0.029 0.020 0.030
최대 거칠기 - 12주 결과
계산된 필드 R2 R2 R2 R2
개체 번호 공백 기준선 - 12주 결과 알란토인 기준선 - 12주 결과 공백 기준선 알란토인 기준선 공백 12주 알란토인 12주
1 0.06 0.09 0.29 0.32 0.23 0.23
2 0.11 0.16 0.42 0.42 0.31 0.26
3 -0.02 0.01 0.31 0.35 0.33 0.34
4 0.09 0.09 0.38 0.38 0.29 0.29
5 0.01 0.07 0.27 0.34 0.26 0.27
6 0.03 0.05 0.32 0.33 0.29 0.28
7 0.17 0.02 0.41 0.26 0.24 0.24
8 0.01 0.04 0.33 0.31 0.32 0.27
9 0.09 0.04 0.35 0.28 0.26 0.24
10 0.02 0.06 0.36 0.41 0.34 0.35
11 0.05 0.09 0.37 0.4 0.32 0.31
12 0.01 0.03 0.36 0.38 0.35 0.35
14 0.1 0.09 0.4 0.36 0.3 0.27
15 0.01 0.17 0.35 0.41 0.34 0.24
16 0 0.04 0.29 0.3 0.29 0.26
17 0.05 0.05 0.34 0.34 0.29 0.29
18 0 0.11 0.27 0.33 0.27 0.22
19 0.05 0.15 0.33 0.41 0.28 0.26
20 0.12 0.09 0.4 0.35 0.28 0.26
21 0.07 0.16 0.34 0.39 0.27 0.23
22 0.03 0.04 0.25 0.25 0.22 0.21
23 0.07 0.13 0.33 0.37 0.26 0.24
24 0.13 0.36 0.36 0.6 0.23 0.24
25 0.08 0.18 0.37 0.39 0.29 0.21
Avg 0.343 0.361 0.290 0.270
STD 0.045 0.068 0.040 0.040
표 3과 4에 보고된 결과는 검사 제제가 시간의 흐름에서 주름의 깊이에서 유의한 감소를 달성한다는 것을 입증한다. 프로-콜라겐 또는 콜라겐 합성에서 증가는 주름의 깊이와 외관을 감소시킨다.
상기한 설명은 본 발명의 바람직한 구체예를 예시한다. 첨부된 특허청구범위에 정의된 바와 같은 본 발명의 기술적 사상과 다양한 측면을 벗어나지 않는 다수의 개변이 가능한데, 이들은 균등론(doctrine of equivalent)을 비롯한 특허법의 원리에 따라 해석되어야 한다. 단수 형태의 특정 요소에 대한 임의의 참조는 상기 요소를 단수 형태로 한정하는 것으로 간주되지 않는다.

Claims (24)

  1. 포유동물 피부에서 프로-콜라겐(pro-collagen) 합성을 증가시키는 방법에 있어서, 알란토인(allantoin)을 함유하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  2. 청구항 1에 있어서, 포유동물 피부는 인간 피부인 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 청구항 2에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.05% w/w 내지 대략 2% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 청구항 3에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.075% w/w 내지 대략 1.5% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 청구항 4에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.1% w/w 내지 대략 1% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  6. 청구항 5에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.25% w/w 내지 대략 0.75% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  7. 청구항 6에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.5% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  8. 청구항 2에 있어서, 조성물은 국소 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  9. 청구항 3에 있어서, 조성물은 크림, 로션, 겔, 페이스트, 스프레이, 강장제, 또는 에멀젼으로 국소 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  10. 청구항 1에 있어서, 조성물은 침투 강화제, 피부 로션, 방향제, 농후제, 겔화제, 비타민, 레티노이드와 레티놀, 색소, 각질제거제, 항산화제, 피부 컨디셔너 중에서 하나이상을 더욱 함유하는 것을 특징으로 하는 방법.
  11. 청구항 2에 있어서, 조성물은 경구 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  12. 청구항 11에 있어서, 조성물은 알약, 정제, 캡슐, 또는 액체의 형태로 경구 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  13. 포유동물 피부에서 주름과 잔주름의 외관과 깊이를 감소시키는 방법에 있어서, 알란토인을 함유하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 알란토인의 투여는 포유동물 피부에서 프로-콜라겐 합성을 증가시키는 것을 특징으로 하는 방 법.
  14. 청구항 13에 있어서, 포유동물 피부는 인간 피부인 것을 특징으로 하는 방법.
  15. 청구항 14에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.05% w/w 내지 대략 2% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  16. 청구항 15에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.075% w/w 내지 대략 1.5% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  17. 청구항 16에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.1% w/w 내지 대략 1% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  18. 청구항 17에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.25% w/w 내지 대략 0.75% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  19. 청구항 18에 있어서, 알란토인은 조성물의 대략 0.5% w/w를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  20. 청구항 13에 있어서, 조성물은 국소 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  21. 청구항 20에 있어서, 조성물은 크림, 로션, 겔, 페이스트, 스프레이, 강장제, 또는 에멀젼으로 국소 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  22. 청구항 13에 있어서, 조성물은 침투 강화제, 피부 로션, 방향제, 농후제, 겔화제, 비타민, 레티노이드와 레티놀, 색소, 각질제거제, 항산화제, 피부 컨디셔너 중에서 하나이상을 더욱 함유하는 것을 특징으로 하는 방법.
  23. 청구항 13에 있어서, 조성물은 경구 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  24. 청구항 23에 있어서, 조성물은 알약, 정제, 캡슐, 또는 액체의 형태로 경구 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
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