KR20050096917A - 종양세포 및 내피세포를 표적으로 하는 펩타이드, 그것의조성물 및 그것의 용도 - Google Patents

종양세포 및 내피세포를 표적으로 하는 펩타이드, 그것의조성물 및 그것의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20050096917A
KR20050096917A KR1020057009356A KR20057009356A KR20050096917A KR 20050096917 A KR20050096917 A KR 20050096917A KR 1020057009356 A KR1020057009356 A KR 1020057009356A KR 20057009356 A KR20057009356 A KR 20057009356A KR 20050096917 A KR20050096917 A KR 20050096917A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
formula
pharmaceutically acceptable
solvate
hydrate
Prior art date
Application number
KR1020057009356A
Other languages
English (en)
Inventor
아미 엘. 알랜
원 형 윤
파트리시아 엘. 글라드스톤
로버트 제이. 테르난스키
그라함 패리
페르난도 도네트
앤드류 마자르
Original Assignee
아테뉴온, 엘엘씨
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 아테뉴온, 엘엘씨 filed Critical 아테뉴온, 엘엘씨
Publication of KR20050096917A publication Critical patent/KR20050096917A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

본 발명은 종양 및 내피세포를 표적으로 하며 항-종양 활성, 항-혈관신생 활성 및 항-전이 활성을 갖는, Ac-PHSCN-NH2 펩타이드 유사체, 그것의 제조 방법, 그것의 조성물, 및 상기 펩타이드 및 그것의 약학적 조성물을 이용하여, 종양 증식, 전이 및 혈관신생의 특징을 갖는 질환을 치료, 예방 및 검출하는 방법에 관한 것이다. 상기 펩타이드 유사체는 특히 방사능 운반체, PET-활성 화합물, 독소, 형광 분자 및 PEG 분자로 제공될 수 있다.

Description

종양세포 및 내피세포를 표적으로 하는 펩타이드, 그것의 조성물 및 그것의 용도 {PEPTIDES WHICH TARGET TUMOR AND ENDOTHELIAL CELLS, COMPOSITIONS AND USES THEREOF}
본 발명은 종양 및 내피세포를 표적으로 하며 항-종양 활성, 항-혈관신생 활성 및 항-전이 활성을 갖는, Ac-PHSCN-NH2 펩타이드 유사체, 그 제조 방법, 그것의 조성물, 및 상기 펩타이드 및 그것의 약학적 조성물을 이용한 종양 증식, 전이 및 혈관신생의 특징을 갖는 질환을 치료, 예방 및 검출하는 방법에 관한 것이다. 상기 펩타이드 유사체는 특히 방사능 운반체, PET-활성 화합물, 독소, 형광 분자 및 PEG 분자로 제공될 수 있다.
인테그린(Integrin)은 헤테로다이머의 트랜스멤브레인 단백질로, 세포 부착, 운동성 및 생존에 관여한다(Geiger et al., Nat. Rev. Mol. Cell Biol 2001, 2 (11): 793- 805). 인테그린 리간드는 세포외 기질(ECM)과 기저막(basement membrane)으로 구성되어 있으며, 콜라겐, 라미닌, 피브로넥틴, 비트로넥틴 및 피브리노겐을 함유한다(Bokel, Dev. Cell 2002,3 (3):311-21; Stupack et al., J Cell Sci 2002, 115:3729-38; Bornstein et al., Curr Opin Cell Biol 2002, 14(5):608-16). 인테그린의 발현과, 특히 인테그린의 활성화 상태는 종양 조직에서 달라진다(Liu et al., Semin Oncol 2002, 29(3 Suppl 11):96-103; Hood et al., Nat. Rev. Cancer 2002 2(2):91-100; Felding-Habermaim, Clin Exp Metastasis 2003, 20(3):203-13). 따라서, αVβ3, αVβ5, α5β1를 포함하여 몇가지 인테그린은 암 치료 및 예방에 대해 입증된 치료학적 표적(Kumar, Curr Drug Targets 2003, 4(2):123-31; Kerr et al., Expert Opin Investig Drugs 2002, 11(12):1765-74; Rust et al., J Biomed Biotechnol. 2002, 2(3):124-130; Damiano, Curr Cancer Drug Targets 2002, 2(1):37-43; Tucker, Curr Opin Pharmacol 2002, 2(4):394-402)으로서, 그리고 암연구에 대한 수용체-표적화 이미지 방법의 표적으로서(Herschman, Science 2003, 302 (5645): 605-8); Aboagye et al., Invest New Drugs 2003, 21(2):169-81; Van De Wiele et al., Eur J Nucl Med Mol Imaging 2002 29(5):699-709; Glaser et al., Int J Oncol 2003, 22(2):253-67) 인식되고 있다.
인테그린 α5β1는 정상적으로는 무활동의 내피세포에서는 발현되지 않으며, 혈관신생동안 상향발현된다(Kim et al., Am J Patlzol 2000, 156(4):1345-62). α5β1는 세포외 기질과 관련되어 있을 수도 있는, 다량의 세포질 단백질인 피브로넥틴에 대한 수용체이다(Labat-Robert, Senzin Cancer Biol 2002, 12(3):187-95). 피브로넥틴은, 10th 타입 III 반복부위내 RGD 서열에 의해 매개되는 주된 유착성 상호작용으로, 몇 종의 에피토프를 통하여 α5β1과 상호작용한다. 주된 유착성 상호작용은 세포 시그널링 현상을 매개하고, 시너지 부위(즉, PHSRN)로 불리 9th 타입 III 반복부위에 위치한 제2 에피토프에 의해 강화될 수 있다(Akiyama et al., Cancer Metastasis Rev 1995, 14(3):173-89). α5β1의 길항제는 종양 혈관신생을 저해할 수 있으며, 인테그린 α5β1 표적화의 치료학적 잠재성을 입증하는 종양 퇴화를 초래할 수 있다(Kim et al., supra). 인테그린 α5β1는 또한 종양 세포의 생존과 전이에 매우 중요한 것으로 여겨진다(O'Brien et al., Exp Cell Res 1996, 224(1):208-13; Ruoslahti, Invasion Metastasis 1994-95, 14(1-6):87-9724-26); Kemperman et al., Invasion Metastasis 1994-95, 14(1-6):98-108; Tani et al., Br J Cancer 2003, 88(2):327-33).
또한, 인테그린 αVβ3의 저해제(예, 단일클론 항체, 시클릭 RGD 펩타이드 및 작은 비-펩타이드성 유기 화합물)가, 암 진행의 다중 전-임상 모델에서 효과 있는 것으로 확인되어, αVβ3는 종양 혈관신생의 저해에 있어서의 치료학적 표적물이다(Kumar, Curr Drug Targets 2003, 4(2):123-31; Varner et al., Important Adv Oncol 1996, 69-87; Brooks, J Clin Invest 1995, 96(4):1815-22). αVβ3는 상피세포에서 정상적으로 발현되지만, 종양세포에서는 상향 발현되어, 종양 세포 유착, 이동 및 침투를 일으킨다(Metzner et al., J Invest Dermatol 1996, 107(4):597- 602). αVβ3는 흑색종의 진행과 전이에 관여하며(Nip et al., Cancer Metastasis Rev 1995, 14(3):241-52), 유방, 전립선, 췌장, 신장 및 신경아교종을 포함한 다양한 종양 세포 타입에서 αVβ3 발현이 보고되고 있다(Felding-Habermann et al., Proc Natl Acad Sci USA 2001, 98(4):1853-8; Platten et al., Biochem Biopllys Res Commun 2000, 268(2):607-11; Lohr et al., Pancreas 1996, 12(3):248-59; Rabb et al., Am J Nephrol 1996, 16(5):402-8; Cooper et al., Neoplasia 2002, 4(3):191-4). 또한 αVβ3 발현은 뼈로의 전이와 관련 있다(Pecheur et al., FASEB J 2002, 16(10):1266-8 ).
Ac-PHSCN-NH2는 피브로넥틴의 시너지 서열로부터 유래된 것으로, 세포 표면상에서 활성화된 인테그린 α5β1과 αVβ3 을 표적으로 하는 것으로 알려져 있다(Livant, 미국 특허 제 6,001,965호; Livant, 미국 특허 제 6,472,369; Livant et al., Cancer Res 2000, 60(2):309-20). 더욱이, Ac-PHSCN-NH2는 렛 모델에서 DU145 침투와 MatLyLu 세포의 전이를 완벽하게 저해하고(Livant et al., supra), CT26 결장암 모델에서 5-FU와의 병용시 생존율을 향상시킨다(Stoeltzing et al., Int J Cancer 2003, 104(4):496-503). 따라서, Ac-PHSCN-NH2는 Ac-PHSCN-NH2 유도체의 시각화에의해 나타난 바와 같이, 종양과 종양세포에 영양을 공급하는 혈관을 표적으로 한다.
따라서, 종양과 종양 세포에 영양을 공급하는 혈관구조를 표적으로 함에 있어서, Ac-PHSCN-NH2 유도체의 잠재성을 충분히 조사할 수 있는, 새로운 Ac-PHSCN-NH2 펩타이드 유사체가 요구된다. 이상적으로는, 상기 펩타이드 유사체를 특히 이미지화 및 방사선 요법용 방사능 운반체로서, PET-이미지화를 위한 PET-활성 화합물, 세포 독소의 표적 전달용 독소, 시각화를 위한 형광 분자 및 약물 동력학적 특성 개선을 위한 PEG 분자로 제공될 수 있다.
3. 발명의 개요
본 발명은 종양과 내피세포를 표적으로 하며 항암 활성, 항혈관신생 활성 및 항-전이 활성을 갖는 펩타이드 유사체와, 이들 펩타이드의 제조방법, 이들의 조성물 및 이들 펩타이드와 이들 펩타이드의 약학적 조성물을 이용한 종양 증식, 전이 및 혈관신생의 특징을 갖는 질환을 치료, 예방 및 검출하는 방법을 제공함으로써, 전술한 요구와 과제를 충족시킨다. 상기 펩타이드 유사체는 특히 방사능 운반체, PET-활성 화합물, 독소, 형광성 분자 및 PEG 분자로 제공될 수 있다.
일 측면에 있어서, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물을 제공한다:
(화학식 1)
상기 화학식 1에서,
j 및 k는 독립적으로 0 또는 1이고;
p 및 q는 독립적으로 0 내지 100의 정수이고;
r 및 s는 독립적으로 0 또는 1이고;
R1은 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노 또는 치환된 이미노이고;
R2는 1개 이상의 수소 원자가 -NR6R7, -OR8, -CO2R9, -S(O)zRl0, -P(OR11)OR12, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
R6, R7, R8, R9, R10, Rll 및 R12는 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X1은 -NH(C=C)gCO-,-NH(CH2)hCO- 또는 -NHCH(CH3)CO-이고;
g 및 h는 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고;
X2는 , 또는 이고;
X3은 이고;
X4는 또는 이고;
l은 1 내지 4의 정수이고;
X5는 이고;
R13은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아실, 치환된 아실, 아릴알킬, 치환된 아릴알킬, 아릴, 치환된 아릴 또는 -S(O)xR14이고;
n은 1 내지 5의 정수이고;
R14는 알킬, 치환된 알킬, 아실, 치환된 아실, 아릴알킬, 치환된 아릴알킬, 아릴 또는 치환된 아릴이고;
y 및 x는 독립적으로 0, 1 또는 2이고
X6은 이고;
m은 1, 2, 3 또는 4의 정수이고;
X7은 -NH(C=C)dCO-, -NH(CH2)eCO- 또는 -NHCH(CH3)CO-이고;
d 및 e는 각각 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고;
R3은 1개 이상의 수소 원자가 -NR15R16, -OR17, -CO2R18, -S(O)nRl9, -P(OR20)OR21, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소, 알킬 또는 치환된 알킬이고;
R15, R16, R17, R18, R19, R20 및 R21은 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5가 수소이고 r 및 s가 0일때, R1은 아세틸이 아니다.
두번째 측면에 있어서, 본 발명은 본 발명에 따른 화합물에 대한 약학적 조성물을 제공한다. 상기 약학적 조성물은 일반적으로 본 발명의 화합물, 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 그것의 수화물 및 그것의 용매화물 중 1종 이상과, 약학적으로 허용가능한 희석제, 약학적으로 허용가능한 담체, 약학적으로 허용가능한 부형제 또는 약학적으로 허용가능한 보강제를 포함한다. 희석제, 담체, 부형제 및 보강제의 선택은 무억보다도 적합한 투여 방식에 의존적일 것이다.
세번째 측면에 있어서, 본 발명은 암과 같은 질병 및 질환을 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다. 상기 방법은, 일반적으로 본 발명의 화합물 및/또는 그것의 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로, 상기한 치료 또는 예방이 요구되는 환자에 투여하는 것을 포함한다.
네번째 측면에 있어서, 본 발명은 암과 같은 질병 및 질환을 검출하는 방법을 제공한다. 상기 방법은, 일반적으로 본 발명의 화합물 및/또는 그것의 약학적 조성물을 진단학적 유효량으로, 상기한 치료 또는 예방이 요구되는 환자에 투여하는 것을 포함한다.
4. 본 발명의 상세한 설명
4.1 정의
"본 발명의 화합물"은 본원에 개시된 화학식 1, 2, 3, 4 및 5의 화합물을 의미하며, 그 구조가 본원에 개시된 일반식 범위 내인 임의의 특정 화합물들을 포함한다. 본 발명의 화합물은 그 화학적 구조 및/또는 화학적 명칭에 의하여 확인될 수 있다. 화학적 구조 및 화학적 명칭이 상충되는 경우, 화학적 구조가 화합물 확인에 결정적이다. 본 발명의 화합물은 하나 이상의 카이럴 중심 및/또는 이중 결합을 포함할 수 있으며, 따라서 이중 결합 이성질체(즉, 기하이성질체)와 같은 입체이성질체, 거울상 이성질체 또는 부분입체이성질체로서 존재할 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 화학적 구조는 순수한 입체이성질체 형태(예컨대, 기하학적으로 순수한, 거울상 이성질체적으로 순수한 또는 부분 입체이성질체적으로 순수한) 및 거울상 이성질체 및 입체이성질체 혼합물을 포함하는 예시된 화합물의 모든 가능한 거울상 이성질체 및 입체 이성질체를 포함한다. 본 발명의 화합물은 또한 몇몇 호변이성질체(tautomeric) 형태로 존재할 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 화학적 구조는 예시된 화합물의 모든 가능한 호변이성질체 형태를 포함한다. 본 발명의 화합물은 또한 하나 이상의 원자가 자연에서 전형적으로 발견되는 원자 질량과 상이한 원자 질량을 가지는 동위원소 표지된 화합물을 포함한다. 본 발명의 화합물내로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 화합물은 용매화되지 않은 형태 및 수화된 형태를 포함하는 용매화된 형태로 또한 N-산화물로서 존재할 수 있다. 일반적으로, 수화된, 용매화된 및 N-산화물 형태는 본 발명의 범위에 속한다. 본 발명의 일부 화합물은 복수 결정성 또는 무결정성 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 모든 물리학적 형태가 본 발명에 의하여 의도되는 용도에 있어서 균등하며, 본 발명의 범위에 있는 것으로 의도된다. 또한, 본 발명의 화합물의 부분 구조가 예시된 경우, 괄호는 부분 구조의 분자의 나머지 부분에의 부착 지점인 것으로 이해되어야 한다.
"알킬"은 그 자체로 또는 다른 치환기의 일부로서, 모(parent) 알칼, 알켄 또는 알킨의 단일 탄소 원자로부터의 하나의 수소 원자의 제거에 의하여 유도된 포화 또는 불포화, 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 일가 탄화수소 라디칼을 의미한다. 전형적인 알킬기는 이에 한정되지는 않으나 메틸; 에타닐, 에테닐, 에티닐과 같은 에틸; 프로판-1-일, 프로판-2-일, 시클로프로판-1-일, 프로프-1-엔-1-일, 프로프-1-엔-2-일, 프로프-2-엔-1-일(알릴), 시클로프로프-1-엔-1-일, 시클로프로프-2-엔-1-일, 프로프-1-인-1-일, 프로프-2-인-1-일 등과 같은 프로필; 부탄-1-일, 부탄-2-일, 2-메틸-프로판-1-일, 2-메틸-프로판-2-일, 시클로부탄-1-일, 부트-1-엔-1-일, 부트-1-엔-2-일, 2-메틸-프로프-1-엔-1-일, 부트-2-엔-1-일, 부트-2-엔-2-일, 부타-1,3-디엔-1-일, 부타-1,3-디엔-2-일, 시클로부트-1-엔-1-일, 시클로부트-1-엔-3-일, 시크롤부타-1,3-디엔-1-일, 부트-1-인-1-일, 부트-1-인-3-일, 부트-3-인-1-일 등과 같은 부틸; 등을 포함한다.
"알킬"은 임의의 정도 또는 일정 수준의 포화를 가진 기, 즉 단일 탄소-탄소 결합만을 가진 기, 하나 이상의 이중 탄소-탄소 결합을 가진 기, 하나 이상의 삼중 탄소-탄소 결합을 가진 기 및 단일, 이중 및 삼중 탄소-탄소 결합의 혼합물을 포함하는 것으로 의도된다. 특정 수준의 포화가 의도되는 경우, "알카닐", "알케닐" 및 "알키닐"이 사용된다. 바람직하게, 알킬기는 1 내지 20개의 탄소 원자, 보다 바람직하게 1 내지 10 개의 탄소 원자, 가장 바람직하게 1 내지 6 개의 탄소원자를 포함한다.
"알카닐"은 그 자체로 또는 다른 치환체의 일부로서, 모 알칸의 단일 탄소 원자로부터 하나의 수소 원자의 제거에 의하여 유도된 포화 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 알킬 라디칼을 의미한다. 전형적인 알카닐기는 이에 한정되지는 않으나 메타닐; 에타닐; 프로판-1-일, 프로판-2-일(이소프로필), 시클로프로판-1-일 등과 같은 프로파닐; 부탄-1-일, 부탄-2-일(sec-부틸), 2-메틸-프로판-1-일(이소부틸), 2-메틸-프로판-2-일(t-부틸), 시클로부탄-1-일 등과 같은 부타닐;등을 포함한다.
"알케닐"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 모 알켄의 단일 탄소원자로부터 하나의 수소 원자의 제거에 의하여 유도된 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 가지는 불포화의 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 알킬 라디칼을 의미한다. 알케닐기는 이중 결합에 대하여 cis 또는 trans 형태일 수 있다. 전형적인 알케닐기는 이에 한정되지는 않으나 에테닐; 프로프-1-엔-1-일, 프로프-1-엔-2-일, 프로프-2-엔-1-일(알릴), 프로프-2-엔-2-일, 시클로프로프-1-엔-1-일, 시클로프로프-2-엔-1-일과 같은 프로페닐; 부트-1-엔-1-일, 부트-1-엔-2-일, 2-메틸-프로프-1-엔-1-일, 부트-2-엔-1-일, 부트-2-엔-1-일, 부트-2-엔-2-일, 부타-1,3-디엔-1-일, 부타-1,3-디엔-2-일, 시클로부트-1-엔-1-일, 시클로부트-1-엔-3-일, 시클로부타-1,3-디엔-1-일 등과 같은 부테닐 등을 포함한다.
"알키닐"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 모 알킨의 단일 탄소 원자로부터 하나의 수소 원자의 제거에 의하여 유도된 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합을 가지는 불포화의 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 알킬 라디칼을 의미한다. 전형적인 알키닐기는 이에 한정되지는 않으나 에티닐; 프로프-1-인-1-일, 프로프-2-인-1-일 등과 같은 프로피닐; 부트-1-인-1-일, 부트-1-인-3-일, 부트-3-인-1-일 등과 같은 부티닐을 포함한다.
"아실"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, -C(O)R30 라디칼을 의미하며, 여기서 R30은 수소, 본원에 정의된 바와 같은 알킬, 시클로알킬, 시클로헤테로알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬이다. 대표적인 예는 이에 한정되지는 않으나 포르밀, 아세틸, 시클로헥실카르보닐, 시클로헥실메틸카르보닐, 벤조일, 벤질카르보닐 등이다.
"아실 킬레이트"는 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, -C(O)R31 라디칼을 의미하며, 여기서 R31은 적절한 금속에 결합하는 킬레이팅 기로 치환된, 본원에 정의된 바와 같은 알킬, 시클로알킬, 아릴이다. 대표적인 예는 -C(O)CH2CH2-R32이며, 여기서 R32는 예를들면 DOTA, TETA, 폴리아미노 카르복실레이트(예, NODAGA, EDTA, 트리신, -C(O)CH2-DPTA, 등)
과 같은 킬레이팅 기이고, 상기 킬레이킹 기는 양전자 방출 표지물(예, 18F, 45Ti, 44Sc, 55Co, 61Cu, 64Cu, 66Ga, 75Br, 76Br, 86Y, 110In, 124I, 89Zr, 99Tc), 방사핵종(예, 137Cs, 60Co, 131I, 123I, 192Ir, 90Y, 67Ga, 99Tc, 123I, 125I, 131I, 111In, 97Ru, 67Cu, 68Ga, 72As, 89Zr, 90Y, 201Tl 등) 또는 란타니드 금속과 같은 금속에 결합한다.
"알콕시"는 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, -OR33 라디칼을 의미하며, 여기서 R33은 본원에 정의된 바와 같은 알킬 또는 시클로알킬기이다. 대표적인 예는 이에 한정되지는 않으나 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, 시클로헥실옥시 등이다.
"아릴"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 모 방향족 고리 시스템의 단일 탄소 원자로부터 하나의 수소 원자의 제거에 의하여 유도된, 일가 방향족 탄화수소 라디칼을 의미한다. 전형적인 아릴기는 이에 한정되지는 않으나 아세안트릴렌(aceanthrylene), 아세나프틸렌(acenaphthylene), 아세페난트릴렌(acephenanthrylene), 안트라센(anthracene), 아줄렌(azulene), 벤젠, 크리센(chrysene), 코로넨(coronene), 플루오르안텐(fluoranthene), 플루오렌(fluorene), 헥사센(hexacene), 헥사펜(hexaphene), 헥살렌(hexalene), as-인다센(indacene), s-인다센, 인단(indane), 인덴(indene), 나프탈렌, 옥타센(octacene), 옥타펜(octaphene), 옥탈렌(octalene), 오발렌(ovalene), 펜타-2,4-디엔, 펜타센(pentacene), 펜탈렌(penalene), 펜타펜(pentaphene), 페릴렌(perylene), 페날렌(phenalene), 페난트렌(phenanthrene), 피센(picene), 플레이아덴(pleiadene), 피렌(pyrene), 피란트렌(pyranthrene), 루비센(rubicene), 트리페닐렌, 트리나프탈렌 등을 포함한다. 바람직하게, 아릴기는 6 내지 20 탄소 원자, 보다 바람직하게 6 내지 12 탄소 원자를 포함한다.
"아릴알킬"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 탄소 원자, 전형적으로 말단 또는 sp3 탄소 원자에 결합된 탄소 원자 중 하나가 아릴기로 대체된 어시클릭 알킬 라디칼을 의미한다. 전형적인 아릴알킬기는 이에 한정되지는 않으나 벤질, 2-페닐에탄-1-일, 2-페닐에텐-1-일, 나ㅡ틸메틸, 2-나프틸에탄-1-일, 2-나프틸에텐-1-일, 나프토벤질, 2-나프토페닐에탄-1-일 등이다. 특정 알킬 모이어티가 의도되는 경우, 명명 아릴알카닐, 아릴알케닐 및/또는 아릴알키닐이 사용된다. 바람직하게, 아릴알킬기는 (C6-C30)아릴알킬, 예컨대, 아릴알킬기의 알카닐, 알케닐 또는 알키닐 모이어티는 (C1-C10)이고, 아릴 모이어티는 (C6-C20), 보다 바람직하게, 아릴알킬기는 (C6-C20)아릴알킬, 예컨대 아릴알킬기의 알카닐, 알케닐 또는 알키닐 모이어티는 (C1-C8)이고 아릴 모이어티는 (C6-C12)이다.
"시클로알킬"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 포화 또는 불포화 시클릭 알킬 라디칼을 의미한다. 특정 수준의 포화가 의도되는 경우, 명명 "시클로알카닐" 또는 "시클로알케닐"이 사용된다. 전형적인 시클로알킬기는 이에 한정되지는 않으나 시클로프로판, 시클로부탄, 시클로펜탄, 시클로헥산 등으로부터 유도된 기를 포함한다. 바람직하게, 시클로알킬기는 (C3-C10)시클로알킬, 보다 바람직하게 (C3-C7)시클로알킬이다.
"시클로헤테로알킬"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 하나 이상의 탄소 원자(및 임의의 관련 수소 원자)가 독립적으로 동일 또는 상이한 헤테로원자로 대체된 포화 또는 불포화 시클릭 알킬 라디칼을 의미한다. 탄소 원자를 대체할 전형적인 헤테로원자는 이에 한정되지는 않으나 N, P, O, S, Si 등이다. 특정 레벨의 포화가 의도되는 경우, 명명 "시클로헤테로알카닐" 또는 "시클로헤테로알케닐"이 사용된다. 전형적인 시클로헤테로알킬기는 이에 한정되지는 않으나 에폭시드, 아지린(azirine), 티이란(thiirane), 이미다졸리딘, 모르폴린, 피페라진, 피페리딘, 피라졸리딘, 피롤리딘, 퀴누클리딘(quinuclidine) 등이다.
"진단학적 유효량"은 질환 검사를 목적으로 환자에 처방하였을때 상기 질환을 검출할 수 있는 충분한 화합물 함량을 의미한다. "진단학적 유효량"은 화합물, 질병 및 병증 정도 및 환자의 나이, 몸무게 등에 따라 달라질 것이다.
"헤테로알킬, 헤테로알카닐, 헤테로알케닐 및 헤테로알키닐"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 하나 이상의 탄소 원자 (및 임의의 관련 수소 원자)가 각각 독립적으로 동일 또는 상이한 헤테로원자기로 대체된 알킬, 알카닐, 알케닐 및 알키닐 기를 의미한다. 전형적인 헤테로원자기는 이에 한정되지는 않으나 -O-, -S-, -O-O-, -S-S-, -O-S-, -MR34R35-, =N-N=, -N=N-, -N=N-NR36R37, -PR38-, -P(O)2-, -POR39, -O-P(O)2-, -SO-, -SO2-, -SnR40R41- 등을 포함하며, 여기서, R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40 및 R41은 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 아릴알킬, 치환된 아릴알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 시클로헤테로알킬, 치환된 시클로헤테로알킬, 헤테로알킬, 치환된 헤테로알킬, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 치환된 헤테로아릴알킬이다.
"헤테로아릴"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 모 헤테로방향족 고리 시스템의 단일 원자로부터 하나의 수소 원자의 제거에 의하여 유도된 일가 헤테로방향족 라디칼을 의미한다. 전형적인 헤테로아릴기는 이에 한정되지는 않으나 아크리딘, 아르스인돌(arsindole), 카르바졸, β-카르볼린, 크로만, 크로멘, 신놀린, 푸란, 이미다졸, 인다졸, 인돌, 인돌린, 인돌리진, 이소벤조푸란, 이소크로멘, 이소인돌, 이소인돌린, 이소퀴놀린, 이소티아졸, 이속사졸, 나프티리리딘, 옥사디아졸, 옥사졸, 페리미딘, 페날트리딘, 페난트롤린, 페나진, 프탈라진, 프테리딘, 푸린, 피란, 피라진, 피라졸, 피리다진, 피리딘, 피리미딘, 피롤, 피롤리진, 퀴나졸린, 퀴놀린, 퀴놀리진, 퀴녹살린, 테트라졸, 티아디아졸, 티아졸, 티오펜, 트리아졸, 크산텐 등으로부터 유도된 기이다. 바람직하게, 헤테로아릴기는 5-20원 헤테로아릴, 보다 바람직하게 5-10원 헤테로아릴이다. 바람직한 헤테로아릴기는 티오펜, 피롤, 벤조티오펜, 벤조푸란, 인돌, 피리딘, 퀴놀린, 이미다졸, 옥사졸 및 피라진으로부터 유도된 것이다.
"헤테로아릴알킬"은 그 자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 탄소원자, 전형적으로 말단 또는 sp3 탄소 원자에 결합된 수소 원자 중 하나가 헤테로아릴기로 대체된 어시클릭 알킬 라디칼을 의미한다. 특정 알킬 모이어티가 의도되는 경우, 명명 헤테로아릴알카닐, 헤테로아릴알케닐 및/또는 헤테로아릴알키닐이 사용된다. 바람직한 양태에서, 헤테로아릴알킬기는 6-30원 헤테로아릴알킬, 예컨대, 헤테로아릴알킬의 알카닐, 알케닐 또는 알키닐 모이어티는 1-10원이고 헤테로아릴 모이어티는 5-20원 헤테로아릴, 보다 바람직하게 6-20원 헤테로아릴알킬, 예컨대, 헤테로아릴알킬의 알카닐, 알케닐 또는 알키닐 모이어티는 1-8원이고 헤테로아릴 모이어티는 5-12 원 헤테로아릴이다.
"이미노"는 그자체로서 또는 다른 치환기의 일부로서, 라디컬 -C=NR42를 의미하고, 상기 R42는 분원에 정의된 바와 같이 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로헤테로알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤케로알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬이다.
"모(parent) 방향족 고리 시스템"은 공액 π 전자 시스템을 가지는 불포화 시클릭 또는 폴리시클릭 고리 시스템을 의미한다. 특히 "모 방향족 고리 시스템"의 정의에는 하나 이상의 고리가 방향족이고 하나 이상의 고리가 포화 또는 불포화인, 예컨대, 플루오렌, 인단, 인덴, 페날렌 등인 융합 고리 시스템이 포함된다. 전형적인 모 방향족 고리 시스템은 이에 한정되지는 않으나 아세안트릴렌, 아세타프틸렌, 아세페난트릴렌, 안트라센, 아줄렌, 벤젠, 크리센, 크로넨, 플루오란텐, 플루오렌, 헥사센, 헥사펜, as-인다센, s-인다센, 인단, 인덴, 나프탈렌, 옥사센, 옥사펜, 옥탈렌, 오발렌, 펜타-2,4-디엔, 펜타센, 펜탈렌, 펜타펜, 페릴렌, 페날렌, 페난트렌, 피센, 플레이아덴, 프렌피란트렌, 루비센, 트리페닐렌, 트리나프탈렌 등을 포함한다.
"모 헤테로방향족 고리 시스템"은 하나 이상의 탄소 원자(및 임의의 관련 수소 원자)가 독립적으로 동일 또는 상이한 헤테로원자로 대체된 모 방향족 고리 시스템을 의미한다. 전형적인 헤테로원자는 이에 한정되지는 않으나 N, P, O, S, Si 등이다. 특히 "모 헤테로방향족 고리 시스템"의 정의에는 하나 이상의 고리가 방향족이고 하나 이상의 고리가 포화 또는 불포화, 예컨대 아르스인돌, 벤조디옥산, 벤조푸란, 크로만, 크로멘, 인돌, 인돌린, 크산텐 등인 융합 고리 시스템이 포함된다. 전형적인 모 헤테로방향족 고리 시스템은 이에 한정되지는 않으나 아르스인돌, 카르바졸, β-카르볼린, 크로만, 크로멘, 시놀린, 푸란, 이미다졸, 인다졸, 인돌, 인돌린, 인돌리진, 이소벤조푸란, 이소크로멘, 이소인돌, 이소인돌린, 이소퀴놀린, 이소티아졸, 이속사졸, 나프티리딘, 옥사디아졸, 옥사졸, 페리미딘, 페날트리딘, 페난트롤린, 페나진, 프탈라진, 프테리딘, 푸린, 피란, 피라진, 피라졸, 피리다진, 피리딘, 피리미딘, 피롤, 피롤리진, 퀴나졸린, 퀴놀린, 퀴놀리진, 퀴녹살린, 테트라졸, 티아디아졸, 티아졸, 티오헨, 트리아졸, 크산텐 등을 포함한다.
"환자"는 인간을 포함한다. 용어 "인간" 및 "환자"는 본원에서 호환적으로 사용된다.
"약학적으로 허용가능한 염"은 모 화합물의 적합한 약학적 활성을 갖으며, 약학적으로 허용가능한 본 발명의 화합물의 염을 의미한다. 그러한 염은 (1) 염산, 브롬산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산과 형성된 산 부가염; 또는 아세트산, 프로피온산, 헥사노익 액시드, 시클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 베조산, 3-(4-히드록시벤조일)벤조산, 신남산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 1,2-에탄-디술폰산, 2-히드록시에탄술폰산, 벤젠술폰산, 4-클로로벤젠술폰산, 2-나프탈렌술폰산, 4-톨루엔술폰산, 캄포르술폰산, 3-메틸비시클로[2,2,2]-옥스-2-엔-1-카르복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로피온산, 트리메틸아세트산, tert-부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 히드록시나프토익 액시드, 살리실산, 스테아르산, 무콘산 등과 같은 유기산과 형성된 산 부가염; (2) 모 화합물에 존재하는 산성 양자가 금속 이온, 예컨대 알칼리 금속이온, 알칼리 토류 이온, 또는 알루미늄 이온에 의해 대체될 때; 또는 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, N-메틸글루카민등과 같은 유기 염기와 배위할 때 형성되는 염을 포함한다.
"약학적으로 허용가능한 비히클"은 본 발명의 화합물이 함께 투여되는 희석제, 보조제, 부형제 또는 담체를 의미한다.
"예방" 또는 "예방함"은 질병 또는 질환을 얻을(즉, 그 질환에 노출되거나 걸리기 쉬운 환자에서 발생되지 않으나 그 질환의 징후를 경험하거나 징후를 보이는 질환의 임상학적 징후의 적어도 하나를 야기할) 위험의 감소를 의미한다.
"치환된"은 하나 이상의 수소 원자가 독립적으로 동일 또는 상이한 치환기로 대체된 기를 의미한다. 전형적인 치환기는 이에 한정되지는 않으나, -M-, -R60, -O-, =O, -OR60, -SR60, -S-, =S, -NR60R61, =NR60, -CF3, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -NO2, =N2, -N3, -S(O2)O-, -S(O)2OH, -S(O)2R60, -OS(O2)O-, -OS(O)2R60, -P(O)(O-)2, -P(O)(OR60)(O-), -OP(O)(OR60)(OR61), -C(O)R60, -C(S)R60, -C(O)OR60, -C(O)MR60R61, -C(O)O-, -C(S)OR60, -NR62C(O)NR60R61, -NR62C(S)NR60R61, -NR62C(MR63)NR60R61 및 -C(NR62)NR60R61을 포함하며, 여기서 M은 독립적으로 할로겐이고; R60, R61, R62 및 R63은 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알콕시, 치환된 알콕시, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 시클로헤테로알킬, 치환된 시클로헤테로알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴이거나, 임의로 R60 및 R61은 이들이 결합된 질소원자와 함께 시클로헤테로알킬 또는 치환된 시클로헤테로알킬 고리를 형성하며; R64 및 R65는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 시클로헤테로알킬, 치환된 시클로헤테로알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴이거나, 또는 임의로 R64 및 R65는 이들이 결합된 질소원자와 함께 시클로헤테로알킬 또는 치환된 시클로헤테로알킬 고리를 형성한다. 바람직하게, 치환기는 다음을 포함한다: -M-, -R60, =O, -OR60, -SR60, -S-, =S, -NR60R61, =NR60, -CF3, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -NO2, =N2, -N3, -S(O)2R60, -OS(O2)O-, -OS(O)2R60, -P(O)(O-)2, -P(O)(OR60)(O-), -OP(O)(OR60)(OR61), -C(O)R60, -OS(O2)O-, -OS(O)2R60, -P(O)(O-)2, -P(O)(OR60)(O-), -OP(O)(OR60)(OR61), -C(O)R60, -C(S)R60, -C(O)OR60, -C(O)NR60R61, -C(O)O-, -NR62C(O)NR60R61, 보다 바람직하게, -M, -R60, =O, -OR60, -SR60, -NR60R61, -CF3, -CN, -NO2, -S(O)2R60, -P(O)(OR60)(O-), -OP(O)(OR60)(OR61), -C(O)R60, -C(O)OR60, -C(O)NR60R61, -C(O)O-, 가장 바람직하게, -M, -R60, =O, -OR60, -SR60, -NR60R61, -CF3, -CN, -NO2, -S(O)2R60, -OP(O)(OR60)(OR61), -C(O)R60, -C(O)OR60, -C(O)O-이고, 여기서 R60, R61, R62는 상기 정의한 바와 같다.
임의의 질환 또는 질병의 "치료" 또는 "치료함"은 한 양태에서 질환 또는 질병을 경감시킴(즉, 그 질환 또는 그 임상학적 징후 중 적어도 하나의 발생을 중지 또는 감소시킴)을 의미한다. 다른 양태에서, "치료"는 환자에 의하여 구별되지 않을 수 있는 적어도 하나의 물리적 패러미터를 경감시킴을 의미한다. 다른 양태에서, "치료"는 질환 또는 질병을 물리적으로 (예컨대, 구별가능한 징후의 안정화), 생리학적으로 (예컨대, 물리적 패러미터의 안정화) 억제함 또는 이들 모두를 의미한다. 다른 양태에서, "치료"는 질환 또는 질병의 개시의 지연을 의미한다.
"치료학적 유효량"은 환자에게 질병 치료를 위하여 투여되었을 때 그러한 질병 치료를 실행하기에 충분한 양을 의미한다. "치료학적으로 유효량"은 화합물, 질병 및 그 심각성, 및 환자의 연령, 체중 등에 따라 변경될 것이다.
본 발명의 바람직한 양태를 상세히 참조한다. 본 발명은 바람직학 양태에 대하여 기재되었으나, 본 발명은 바람직한 양태에 제한됨을 의도하는 것이 아님을 이해할 것이다. 이와 반대로, 청구범위에 의하여 정해지는 본 발명의 사상 및 범위 내에 속하는 변형, 수정 및 동등물을 포함하는 것으로 의도된다.
4.2 본 발명의 화합물
본 발명은 종양과 내피세포를 표적으로 하며 항암 활성, 항혈관신생 활성 및 항-전이 활성을 갖는 Ac-PHSCN-NH2 펩타이드 유사체와, 이들 펩타이드의 제조방법, 이들의 조성물 및 이들 펩타이드와 이들 펩타이드의 약학적 조성물을 이용한 종양 증식, 전이 및 혈관신생의 특징을 같는 질환을 치료, 예방 및 검출하는 방법을 제공함으로써, 이와 그외 요구들을 충족시킨다. 상기 펩타이드 유사체는 특히 방사능 운반체, PET-활성 화합물, 독소, 형광 분자 및 PEG 분자로 제공될 수 있다.
따라서, 일측면에 있어서, 본 발명은 화학식 1의 화합물 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물을 제공한다:
(화학식 1)
상기 화학식 1에서,
j 및 k는 독립적으로 0 또는 1이고;
p 및 q는 독립적으로 0 내지 100의 정수이고;
r 및 s는 독립적으로 0 또는 1이고;
R1는 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노 또는 치환된 이미노이고;
R2는 1개 이상의 수소 원자가 -NR6R7, -OR8, -CO2R9, -S(O)zRl0, -P(OR11)OR12, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
R6, R7, R8, R9, R10, Rll 및 R12는 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X1은 -NH(C=C)gCO-,-NH(CH2)hCO- 또는 -NHCH(CH3)CO-이고;
g 및 h는 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고;
X2는 , 또는 이고;
X3은 이고;
X4는 또는 이고;
l은 1 내지 4의 정수이고;
X5는 이고;
R13은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아실, 치환된 아실, 아릴알킬, 치환된 아릴알킬, 아릴, 치환된 아릴 또는 -S(O)xR14이고;
n은 1 내지 5의 정수이고;
R14는 알킬, 치환된 알킬, 아실, 치환된 아실, 아릴알킬, 치환된 아릴알킬, 아릴 또는 치환된 아릴이고;
y 및 x는 독립적으로 0, 1 또는 2이고
X6은 이고;
m은 1, 2, 3 또는 4이고;
X7은 -NH(C=C)dCO-, -NH(CH2)eCO- 또는 -NHCH(CH3)CO-이고;
d 및 e는 각각 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고;
R3은 1개 이상의 수소 원자가 -NR15R16, -OR17, -CO2R18, -S(O)nRl9, -P(OR20)OR21, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소, 알킬 또는 치환된 알킬이고;
R15, R16, R17, R18, R19, R20 및 R21은 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5가 수소이고 r 및 s가 0일때, R1은 아세틸이 아니다.
일 양태에 있어서, R4과 R5가 수소인 경우 R1은 아세틸이 아니다.
일 양태에 있어서, p와 q는 독립적으로 1 내지 50의 정수이다. 다른 양태에 있어서, p 및 q는 독립적으로 1 내지 25의 정수이다. 또 다른 양태에 있어서, p 및 q는 독립적으로 1 내지 10의 정수이다. 또 다른 양태에 있어서, p 및 q는 독립적으로 1 내지 5의 정수이다. 또 다른 양태에 있어서, p 및 q는 독립적으로 1 내지 3의 정수이다.
일 양태에 있어서, p와 q는 독립적으로 0 내지 50의 정수이다. 다른 양태에 있어서, p 및 q는 독립적으로 0 내지 25의 정수이다. 또 다른 양태에 있어서, p 및 q는 독립적으로 0 내지 10의 정수이다. 또 다른 양태에 있어서, p 및 q는 독립적으로 0 내지 5의 정수이다. 또 다른 양태에 있어서, p 및 q는 독립적으로 0 내지 3의 정수이다.
또 다른 양태에 있어서, s는 0이고 r은 1이다. 또 다른 양태에 있어서, s는 1이고 r은 0이다. 또 다른 양태에 있어서, s와 r중 하나 이상은 0이 아니다.
또 다른 양태에 있어서, R1은 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 이미노 또는 치환된 이미노이다. 또 다른 양태에 있어서, R2는 1개 이상의 수소 원자가 -NR6R7, -OR8 및 -CO2R9로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이다. 또 다른 양태에 있어서, R6, R7, R8 및 R9는 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 아미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택된다.
또 다른 양태에 있어서, X1은 -NHCH2CO- 또는 -NHCH(CH3)CO-이다. 도 다른 양태에 있어서, X2는 이다.
또 다른 양태에 있어서, l은 1이다. 또 다른 양태에 있어서, n은 1 또는 2이다. 또 다른 양태에 있어서, m은 1 또는 2이다.
또 다른 양태에 있어서, R3은 1개 이상의 수소 원자가 -NR15R16, -OR17 및 -CO2R18로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이다. 또 다른 양태에 있어서, R15, R16, R17, R18, R19, R20 및 R21은 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 이미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일 양태에 있어서, 본 발명의 화합물은 화학식 2의 구조를 갖는다:
(화학식 2)
상기 화학식 2에서,
R1은 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 이미노 또는 치환된 이미노이고;
R4는 수소이고;
R5는 수소, 알킬 또는 치환된 알킬이고; 및
R25는 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 이미노 또는 치환된 이미노이고; 및
q는 1, 2, 3, 4 또는 5이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 일 양태에 있어서,
R1은 이고,
R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이다. 일 특정 양태에 있어서, r = 0이고 R4 및 R5는 수소이다. 다른 특정 양태에 있어서, r = 1, q는 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 다른 양태에 있어서, r = 1, q는 2이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 다른 양태에 있어서, r = 0, R1은 아세틸이고, R4는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R5는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q는 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R5는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q는 2이고, R1 = 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 Cu, Ga, 111In 또는 90Y이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 Cu, Ga, 111In 또는 90Y이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이고,
M은 Cu, Ga, 111In 또는 90Y이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 Cu이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 Cu이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이고,
M은 Cu이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 111In, 90Y 또는 Ga이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 111In, 90Y 또는 Ga이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이고,
M은 111In, 90Y 또는 Ga이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 111In, 67Ga 또는 68Ga이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 111In, 67Ga 또는 68Ga이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이고,
M은 111In, 67Ga 또는 68Ga이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 Tc이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이고,
M은 Tc이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이고,
M은 Tc이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
A는 H 또는 Br이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
A는 H 또는 Br이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
A는 H 또는 Br이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
A는 H 또는 I이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
A는 H 또는 I이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
A는 H 또는 I이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 0이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
D = H 또는 I
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R4, R5 및 R25는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R1은
이다.
D = H 또는 I
화학식 1 및 2의 화합물에 대한 또 다른 양태에 있어서, r = 1이고, q = 2이고, R1은 아세틸이고, R4 및 R5는 수소이고, R14는 수소, 메틸 또는 아세틸이고, R25는
이다.
D = H 또는 I
바람직한 제1 양태는, R1이 아실 또는 치환된 아실이고, R2는 하나 이상의 수소 원자가 NR6R7, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체로 치환된 탄소수 1 내지 4의 알킬이고, R6과 R7은 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실로 이루어진 군으로부터 선택되고, X1은 -NH(CH2)hCO-이고,
X2는 이고,
X4는 이고,
X5는 이고,
R13은 수소, 아실, 치환된 아실, 알킬 또는 치환된 알킬이다.
X6은 이고,
X7은 -NH(CH2)eCO-이고, R3은 하나 이상의 수소 원자가 -NR15R16, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체로 치환된 탄소수 1 내지 4의 알킬이고, Rl5 및 R16은 독립적으로 수소, 아실 및 치환된 아실로 이루어진 군으로부터 선택되고, R4 및 R5는 수소이다. 일 양태에 있어서, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, R1은 아세틸이고, R13은 수소이고, e는 1이고, 및 R3은 -(CH2)4NH2이다. 바람직하기로는, q는 2, 4 또는 6이다. 다른 양태로서, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, R1은 아세틸이고, R13은 수소이고, e는 2, 4 또는 6이고, 및 R3은 -(CH2)4NHCO(CH2)2-Ph-(4-OH)이다. 바람직하기로는 q는 1이다. 또 다른 양태로서, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, R1은 아세틸이고, R13은 수소이고, e는 2, 4, 또는 6이고, 및 R3은 -CH2-Ph-(4-OH)이다. 바람직하기로는 q는 1이다. 또 다른 양태로서, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, R1은 아세틸이고, R13은 메틸이고, e는 1이고, 및 R3은 -(CH2)4NH2이다. 바람직하기로는 q는 2이다. 또 다른 양태로서, s는 1이고, r은 0이고, j는 1이고, R1은 아세틸이고, R13은 수소이고, h는 1이고, R2는 -CH2-Ph-(4-OH)이다. 바람직하기로는 p는 2, 4 또는 6이다. 또 다른 양태로서, s는 1이고, r은 0이고, j는 1이고, R1은 아세틸이고, R13은 수소이고, h는 2, 4, 또는 6이고, 및 R2는 -CH2-Ph-(4-OH)이다. 바람직하기로는 p는 1이다. 또 다른 양태로서, s는 1이고, r은 0이고, j는 0이고, R1은 -CO(CH2)2-Ph-(4-OH)이고, R13은 수소이고, 및 h는 1이다. 바람직하기로는, p는 2, 4 또는 6이다. 또 다른 양태로서, s는 1이고, r은 0이고, j는 0이고, R1은 -CO(CH2)2-Ph-(4-OH)이고, R13은 수소이고, 및 h는 2, 4 또는 6이다. 바람직하기로는 p는 1이다. 또 다른 양태로서, s는 0이고, r은 0이고, R1은 -(CH2)2-Ph-(4-OH)이고, 및 R13은 수소이다. 또 다른 양태로서, s는 0이고, r은 0이고, R1은 -COPh-(4-F)이고, 및 R13은 수소이다. 또 다른 양태로서, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, R1은 아세틸이고, R13은 메틸 또는 수소이고, e는 1이고, 및 R3은 -(CH2)4NHCOPh-(4-F)이다. 바람직하기로는, q는 2이다. 또 다른 양태로서, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, R1은 아세틸이고, R13은 수소이고, e는 1이고, 및 R3은 -(CH2)4NH-8-[4'-플루오로벤질아미노]서베로일 또는 -(CH2)4NHCOCH2F이다. 바람직하기로는 q는 2이다. 또 다른 양태로서, s는 1이고, r은 0이고, j는 0이고, R1은 8-[4'-플루오로벤질아미노]서베로일 또는 -COCH2F이고, R13은 수소이고, 및 h는 2이다. 바람직하기로는 p는 1이다. 또 다른 양태로서, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, R1은 아세틸이고, R13은 수소이고, 및 R3은 -CH2Ph-(3-I, 4-OH) 또는 -CH2Ph-(3,5-디I, 4-OH)이다. 바람직하기로는 q는 0이다. 바람직하기로는 q는 1이고 e는 2이다. 바람직하기로는, q는 1이고 e는 1이다. 또 다른 양태로서, s는 1이고 r은 0이고, j는 1이고, Rl은 아세틸이고, R13은 수소이고, 및 R2는 -CH2Ph-(3-I, 4-OH) 또는 -CH2Ph- (3,5-디I, 4-OH)이다. 바람직하기로는, p는 0이다. 또 다른 양태로서, s는 0이고, r은 0이고, R1은 -CO(CH2)2Ph(4-OH, 3, 5디-I)이고, 및 R13은 수소이다. 또 다른 양태로서, s는 1이고, r은 0이고, j는 0이고, R1은 -CO(CH2)2Ph(4-OH,3,5 디-I)이고, h는 2이고 및, R13은 수소이다. 바람직하기로는, p는 1이다. 또 다른 양태로서, s는 1이고, r은 0이고, j는 1이고, Rl은 아세틸이고, R2는 -CH2-Ph(4-OH, 3, 5 디-I)이고, h는 2이고, 및 R13은 수소이다. 바람직하기로는 p는 1이다. 또 다른 양태로서, s는 0이고, r은 1이고, R3은 -(CH2)4NHCO(CH2)2-Ph(4-OH, 3, 5 디-I)이고, e는 1이고, 및 R13은 수소이다. 바람직하기로는 q는 2이다.
또 다른 양태로서, R1은 아실 킬레이트이고, R2, R6, R7, X1, X2, X4, X5, R13, X6, X7, R3, R15, R16, R4 및 R5는 전술한 제1 양태에서 정의한 바와 동일하다. 일 양태로서, s는 1이고 r은 0이고, j는 0이고, R1은 DOTA-In이고, h는 2이고 및 R13은 수소이다. 바람직하기로는 p는 1이다. 다른 양태로서, s는 0이고 r은 0이고, R1은 DPTA 또는 DPTA-In이고 및 R13은 수소이다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은 하기 화학식 3의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물을 제공한다:
(화학식 3)
상기 화학식 3에서,
R20은 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노, 치환된 이미노 또는 진단성 물질;
R21는 1개 이상의 수소 원자가 -NHR22로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
R22는 수소, 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬 또는 진단성 물질이고;
j, k, p, q, r, s, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 화학식 1에서 정의된 바와 동일하며;
R20 및 R22 중 1종 이상은 진단성 물질이다.
일 양태로서, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5은 바람직한 제 1 양태에서 정의된 바와 동일하다. 일 양태로서, R20은 형광 물질이다. 바람직하기로는 R20은 5/6 카르복시 플루오레세인이고, s는 1이고, r은 0이고, j는 0이고, e는 2이고, p는 1이다. 다른 양태로서, R22는 형광 물질이다. 바람직하기로는, R21은 (CH2)4NH-이고, R22는 -5/6 카르복시 플루오레세인이고, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, e는 1이고, q는 2이다. 바람직하기로는 R21은 (CH2)4NH-이고, R22는 비오틴이고, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, e는 1이고, q는 2이다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은 하기 화학식 4의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물을 제공한다:
(화학식 4)
상기 화학식 4에서,
R23은 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노, 치환된 이미노 또는 페길화(pegylating) 물질이고;
R24는 1개 이상의 수소 원자가 -NHR28로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고; 상기 R28은 수소, 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬 또는 페길화제이고;
j, k, p, q, r, s, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 화학식 1에서 정의된 바와 동일하며;
R23 또는 R28 중 1종 이상은 페길화제이다.
일 양태로서, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 바람직한 제 1 양태에서 정의된 바와 동일하다. 바람직하기로는, R23은 m-dPEG이고, s는 1이고, r은 0이고, j는 0이고, h는 2이고, p는 1이다.
또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 하기 화학식 5의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물을 제공한다:
(화학식 5)
상기 화학식 5에서,
R29는 1개 이상의 수소 원자가 -NHR32로 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
R30은 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬 또는 치료학적 물질이고;
R31은 알킬, 치환된 알킬 또는 치료학적 물질이고;
R32는 수소, 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬 또는 치료학적 물질이고;
j, k, p, q, r, s, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 화학식 1에서 정의된 바와 동일하며;
R30, R31 및 R32 중 1종 이상은 치료학적 물질이다.
일 양태로서, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 바람직한 제 1 양태에서 정의된 바와 동일하다. 바람직하기로는, R13은 메틸 또는 아세틸이고, s는 0이고, r은 0이고, R30은 아세틸이고, R31은 치료학적 물질이다. 일 양태로서, 상기 치료학적 물질은 독소루비신이다. 또 다른 양태로서, R13은 메틸 또는 수소이고, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, e는 1이고, q는 2이고, R30은 아세틸이고, R31은 수소이고, R29는 -(CH2)4NHR32이다. 바람직하기로는, R32는 -CO(CH2)3-독소루비신 또는 프로토포르피린(protoporophyrin)이다.
본 발명에서는 특히 비천연성 아미노산의 이용을 의도한다. 따라서, 예를들면 자연적으로 생성되는 아미노산의 D-아미노산, β-알라닌, 3-아미노프로피로닉 산, 2,3 디아미노프로피오닉 산, 4-아미노부티릭 산, 등, 사코신, 오르티닌, N-메틸 글리신, 시트룰린, t-부틸 알라닌, 호모아르기닌, 등을 포함하는 다양한 화합물들은 본 발명의 범위 내에 해당된다.
본 발명의 화합물에서 하나 이상의 아미드 결합은, 공지된 -CH2-NH-,-CH2-S-,-CH2-S(O)-,-CH2-S(O)2-,-COCH2-, -CH=CH-, CH(OH)CH2와 같은 등가근(isostere)에 의해 선택적으로 치환될 수 있다(참조: 예, Spatola, "Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins, "B. Weinstein,(eds.), Marcel Dekker, New York, 1983; Spatola et al., Life Sci. 1986, 38 : 1243-1249; Almquist et al., J. Med. Chem. 1980, 23:1392; Holladay et al., Tetrahedron Lett. 1983, 24 : 4401; Hruby, Life Sci. 1982, 4;189:199; Jennings-White et al., Tetrahedron Lett. 1982, 23 : 2533; Hruby, Biopolymers 1993; 33: 1073-1082; Wiley et al., Med. Res. Rev. 1993 13:327-384; Moore et al., Adv. in Pharmacol 1995, 33:91-141 ; Giannis etal.,1997, Adv.in Drug Res. 29:1-78). 본 발명의 펩타이드는 Olson et al., J. Med. Chem. 1993, 36:3039과 Chorev et al., Science 1979, 204:1210에 개시된 것과 같은 펩타이드 모방체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화합물의 공유 결합 변경은 본 발명의 범위 내의 것으로, 용해도, 흡수도, 생물학적 반감기 등을 개선시킬 수 있다. 이러한 변경은 특정 아미노산 잔기의 유기 반응물과의 선별적 반응에 의해 성립될 수 있다. 예를 들면, 히스티딘 잔기는 pH 5.5 -7에서 디에틸피로카르보네이트와, pH 6.0에서는 p-브로포펜아실 브로마이드와 선별적으로 반응할 수 있다. 자유 아미노 기를 함유한 잔기는 카르복시 산 무수화물, 이미도에스테르, 피리독살 포스페이트, 트리니트로벤젠설포닉 산, O-메틸리소유레아, 2,4 펜탄디온, 글리옥실레이트 등과 선별적으로 반응할 수 있다. 아르기닐 잔기는 페닐글리옥살 및 다양한 디온계 화합물과 선별적으로 반응할 수 있다. 글루타미닐 및 아스파라기닐 잔기는 온화한 산성 조건하에서 탈아미노기 되어, 이에 대한 글루타밀 잔기 및 아스파르틸 잔기를 제공할 수 있다. 프롤린 및 라이신은 선별적으로 수산화될 수 있으며, 반면에 세린과 트레오닌 잔기는 선별적으로 인산화될 수 있다. 히스티딘과 라이신의 α-아미노산 기는 선별적으로 메틸화될 수 있다(Creighton, Proteins: Structure and Molecule Properties, W. H. Freeman & Co., San Francisco, pp.79-86 (1983)).
이원 기능성의 교차-연결 물질(예, 1-비스(디아졸아세틸)-2-페닐에탄, 글루타르알데하이드, N-하이드록시-숙신이미드 에스테르, 4-아지도살리실릭 산의 에스테르 화합물, 상동이원 기능성의 이미도에스테르(예, 3,3'-디티오비스(숙신이미딜프로피오네이트)와 같은 디숙신이미딜 에스테르)를 이용한 유도체화로, 이원 기능성의 말레이미드(예, 비스-N-말레이미도-1,8-옥탄 등)는, 화합물을 수-불용성 지지 기질 또는 그외 거대분자 운반체와 연결시키는데 사용될 수 있다. 광활성화성 물질들, 예컨대 메틸-3-[(p-아지도페닐)디티오]프로피오이미데이트는 또한 수-불용성 지지 기질에 화합물을 붙이는데 사용할 수 있다. 다르게, 화합물을 직접 반응성 수-불용성 기질(예, 시아노겐 브로마이드-활성화된 카르보하이드레이트)과 반응시킬 수 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물의 아미노산 서열의 반복 단위를 포함한 보다 긴 펩타이드를 함유할 수 있다. 일 양태에서, 이러한 다량체의 반복 단위는 화합물의 아미노산 서열로서, 여기서 a, b, x, y 및 z는 1이다. 다른 양태에서, 상기 반복 단위는, a, b, x, y 및 z는 0이고, 나머지는 1을 갖는, 본 발명의 화합물의 아미노산 서열이다.
다량체는, 화학식 1의 화합물의 아미노산 서열로 구성된 반복 서열을 동일하거나 또는 다른 조합으로 구성될 수 있다. 이런 다량체 펩타이드는 화학적 합성 또는 재조합 DNA 기술 중 어느 하나의 방법과, 이후 수반되는 시스테인 잔기의 화학적 변경에 의하여 제조될 수 있다. 바람직하게는, 상기 합성 다량체는 2 내지 12회의 반복을 가지며, 더욱 바람직하게는 코어 펩타이드 서열의 2 내지 8회의 반복을 갖는다. 따라서, 다량체에서 아미노산의 총 수는 약 100개의 잔기(또는 등가물, 링커 또는 스페이서를 포함하는 경우)를 초과하지 않는다.
바람직한 다량체는 식, P1 n이고, 여기서 P1은 펜타펩타이드이고, n은 2 내지 8이다. 다른 양태에서, 다량체는 식, (P1-Xm)n-P2이고, 여기서 P1 및 P2는 펜타펩타이드이다. P1 및 P2는 동일하거나 다를 수 있으며, 각 P1는 화학식 1의 다른 펜타펩타이드 유도체로 표시될 수 있다. X는 탄소수 1 내지 5의 알킬, 4개 이하의 산소 원자를 함유하는 탄소수 1 내지 5의 폴리에테르 또는 Glyz이며, 여기서 z = 1-6이고, m = 0이거나 1이고, n = 1-7이다.
재조합으로 생산된 바람직한 펩타이드 다량체는 식, (P1-Glyz)n-P2이며, 여기서 P1 및 P2는 동일하거나 다른 펜타펩타이드이고, 다량체에서 각 P1는 다른 펜타펩타이드일 수 있으며, n = 1-100이고 z = 0-6이다. 상기 다량체는 N- 및 C- 말단 모두에서 선택적으로 기능화될 수 있다.
본 발명의 화합물은, 변경에 의해 생물학적 작용이 방지 또는 저해(예, 혈관신생, 세포 침투, 세포 증식 등의 저해 또는 방지)되지 않는 한, 임의 타입의 분자의 공유 접착에 의해 변경될 수 있다. 예를들면, 본 발명의 화합물은 글루코스화, 아세틸화, 페길화, 인산화, 아미드화, 단백질분해성 절단, 세포의 리간드 또는 단백질에 연결 등에 의해 변경될 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물은 치료학적 물질 또는 진단학적 물질에 직접적으로 또는 연결 모이어티(linkage moiety)를 통하여 접합될 수 있다.
바람직하게는, 상기 연결 모이어티를 먼저 진단학적 물질 또는 치료학적 물질에 부착하여, 이후 화학식 1의 화합물에 부착하는 연결 모이어티 중간체를 형성한다. 당업자에게서 이해된 바와 같이, 또한 상기 연결 모이어티를 본 발명의 화합물에 먼저 접착시켜, 치료학적 물질 또는 진단학적 물질에 접착할 수 있는 연결 모이어티 중간체를 형성시킬 수 있다.
일반적으로, 연결 모이어티는 링커와 펩타이드에 치료학적 물질 또는 진단학적 물질을 접합시키기 위한 연결성 기(linking group)를 포함할 것이다. 상기 링커의 특성은 특정 용도에 의존적이며, 링커의 접합 형태는 친수성 또는 소수성, 길거나 짧게, 단단하거나 또는 유연할 수 있다. 상기 링커는 동일하거나 또는 다른 1종 이상의 연결성 기로 선택적으로 치환될 수 있으며, 따라서 다수의 치료학적 물질 또는 진단학적 물질을 항체에 접합시킬 수 있는, 다가(polyvalent) 연결성 모이어티를 제공한다.
아미노산 니트로 화합물로부터 유래된 스페이싱 연결성 기(spacing linking group)에 적합한, 안정한 결합으로 이루어진 매우 다양한 링커들이 공지되어 있으며, 이들로는 이에 한정되진 않으나, 아킬, 헤테로알킬, 아실릭 헤테로아토믹 분지, 아릴, 아릴아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴-헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴-헤테로알킬 등이 있다. 따라서, 상기 링커는 단일, 이중, 삼중 또는 탄소-탄소 원자 결합, 질소-질소 결합, 탄소-질소 결합, 탄소-산소 결합 및/또는 탄소-황 결합을 포함할 수 있다. 따라서 카보닐, 에테르, 티오에테르, 카르복스아미드, 설폰아미드, 유레아, 우레탄, 히드라진 등과 같은 작용기 등은 링커로 포함될 수 있다.
적합한 링커의 선택은 당업자의 역량에 속한다. 예를 들면, 경질 링커가 적절한 경우 상기 링커는 경질 폴리불포화된 알킬 또는 아릴, 바이아릴, 헤테로아릴 등일 수 있다. 연질 링커가 적절한 경우, 링커는 연질성 있는 펩타이드 즉, Gly-Gly-Gly 또는 연질성 포화 알카닐 또는 헤테로알카닐일 수 있다. 친수성 링커는, 예컨대 폴리알콜 또는 폴리에테르, 즉 폴리알킬렌글리콜일 수 있다. 소수성 링커는 예컨대 알킬 또는 아릴일 수 있다.
바람직하게는, 연결성 기는 예컨대 펩타이드의 상보적인 반응성 작용기와의 공유결합을 매개할 수 있어, 펩타이드에 접합된 치료학적 물질 또는 진단학적 물질을 제공한다. 따라서, 연결성 기는, 펩타이드의 일반적인 화학 기(예, 아미노, 설프하이드릴, 하이드록실, 카르복실레이트, 이미디잘로일, 구안디니늄, 아미드 등)와 반응하는 당업계에 공지된 모든 반응성 작용기일 수 있다. 따라서, 연결성 기는, 예컨대 광화학적으로 활성화된 기, 전기화학적으로 활성화된 기, 자유 라디칼 공여체, 자유 라디칼 수용체(acceptor), 친핵성 기 또는 친전자성 기일 수 있다. 그러나, 특정 반응 조건에서 무반응인 다양한 작용기가, 반응성 있는 상태로 활성화될 수 있음을, 당업자라면 인지할 것이다. 반응성 있는 상태로 활성화 될 수 있는 기로는, 예컨대 알콜, 카르복시 산 및 에스테르가 있으며, 이들의 염 화합물이 포함된다.
연결성 기는 -NHR1, -NH2, -OH, -SH, 할로겐, -CHO, -R1CO, -S02H, -P02H,-N3, -CN, -C02H, -S03H, -P03H, -P02(ORl)H, -C02R1, -S03R1 또는 -PO(ORl)2일 수 있으며, 상기에서 Rl은 알킬이다. 바람직하게는, 상기 연결성 기는 -NHRl, -NH2, -OH, -SH, -CHO, -CO2H, R1CO-, 할로겐 및 -CO2R1이다.
일 양태에서, 링커 및 연결성 기로, 링커가 -(CH2)n-이고 n이 1 내지 8 사이의 정수인 화합물, 연결성 기가 -NH2-, -OH, -CO2H 및 -CO2R1인 화합물과, 임의의 적합한 수소가 치환된 대응 유사체를 포함한다. 연결성 모이어티에 대한 다른 양태로서, 예컨대 D 또는 L 아미노산일 수 있는 모든 아미노산을 포함한다. 따라서 연결성 모이어티는 아미노산의 모든 조합으로 구성된 디펩타이드, 트리펩타이드 또는 테트라 펩타이드일 수 있다. 이들 펩타이드에서 펩타이드 결합의 양극단은 C-N 또는 N-C 중 어느 하나일 수 있다.
치료학적 물질 및 진단학적 물질을 당업자에게 공지된 기존의 다양한 반응을 이용하여 직접적으로 펩타이드에 연결시킬 수 있다. 예를들면, 치료학적 물질 또는 진단학적 물질의 아미노기와, 글루타믹 산, 아스파르틱 산 및 화학식 1의 화합물의 카르복시 기와 같은 카르복시 산 기간에 아미드 결합을 형성하기 위하여, 축합 반응제(예, 카르보디이미드, 카르보닐디이미다졸 등)를 사용할 수 있다.
유사한 방법을 사용함으로써, 링커 또는 연결성 기를 함유한 치료학적 물질 및 진단학적 물질을 화학식 1의 화합물에 부착시킬 수 있다. 예를들면, 링커 또는 연결성 기를 함유한 치료학적 물질 및 진단학적 물질을, 당업자에게 공지된 기존의 접근방식으로, 라이신의 아미노기, 글루타믹산 및 아스파르틱 산의 카르복시 산 기, 시스테인의 설프하이드릴 기, 트레올닌 및 세린의 하이드록실 기 및 펩타이드의 방향족 아미노산의 다양한 모이어트에 접착시킬 수 있다. 일반적으로, 진단학적 물질 또는 치료학적 물질을 직접적으로 또는 링커 및 연결성 기를 통하여 펩타이드에 접합시키는 적절한 방법 선택은 당업자의 영역내에 속한다.
펩타이드에 접합시킬 수 있는 치료학적 물질로는, 이에 한정되지 않으나, 방사핵종, 포르피린 및 광역학 요법에서의 포르피린 유도체(예, 프로토포르피린(protoporphyrin), 벤조포르피린 유도체 일산 A(benzoporphyrin derivative monoacid A), 틴-에티오 푸르푸린(tin-etio purpurin), meta-테트라하이드록시페닐클로린, HPD, 포토프린(photofrin), 프로토포리린 IX(protoporhyrin IX), Pc4, 모노 아스파르틸 클로린e6, 그외 T. Hassan et al,"PhotoDynamic Therapy of Cancer"in Cancer medicine, fifth edition, R. C. Blast et al., Ed. , B. C. Decker Inc, Canada, 2000, p. 489-502 참조, 단백질 독소(예, 리신, 슈도모나스 엑소톡신, 디프테리아 톡신, 사포린, 포크위드 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 보우가닌(bouganin) 등), 세포독성 암 약제, 캄프토테신(camptothecins) (예, 9-니트로캄토테신(9NC), 9-아미노캄프토테신(9AC), 10-아미노캄프토테신, 9-클로로캄프토테신, 10,11-메틸렌디옥시캄프토테신, 이리노테신(irinothecin), 방향족 캄프토테신 에스테르, 알킬 캄프토테신 에스테르, 토포테칸(topotecan), (1S, 9S)-1-아미노-9-에틸-5-플루오로-2,3-디하이드로-9-하이드록시-4-메틸-lH,12H-벤조[데]피라노[3',4':6,7]인돌이지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(9H,15H)-디온 메탄설포네이트 디하이드레이트(DX-8951f), 7-[(2-트리메틸-실일)에틸]-20(S)캄프토테신(BNP1350), 루비테칸, 엑사테칸, 루르토테칸, 디플로모테칸 및 그외 호모캄프토테신 등), 탁산(예, 탁솔), 에피틸온, 칼리키마이신, 하이드록시 유레아, 시타라빈, 시클로포스아미드, 이포스아미드, 니트로스유레아, 시스플라틴, 미토마이신, 메이탄신, 카르보플라틴, 다카르바진, 프로카르바진, 에토포시드, 테노포시드, 블레오마이신, 독소루비신, 2-피롤인도독소루비신, 다우노마이신, 이다루비칸, 다운노루비신, 닥티노마이신, 플리카마이신, 미토산트론, 아스파라지나제, 디하이드록시 안트라신 디온, 미트리마이신, 액시노마이신D, 1-데하이드로테스토스테론, 시토클라신, 빈플라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 파클리탁셀, 도세탁셀, 그라미시딘D, 글루코코르티코이드, 안트라시클린, 프로카인, 테라카인, 리도카인, 프로판올롤, 류로마이신, 메토트렉세이트, 6-머캅토퓨린, 6-티오구아닌, 머스타드 독소, 안티리마이신, 파클리탁셀, 알킬화제(예, 메코레메타민, 티오데파 클로람부실, 멜팔란, 카르무스틴, 로우스틴, 시클로토스파미드, 부설판, 디브로모만니톨, 스트렙토조톡신 등) 상동체 및 이등의 유사체가 있다. 일 양태에서, 상기 치료학적 물질은, 세포 독성 암 약제, 즉 예컨대 탁산, 캄프로테신, 에피틸론 또는 안트라시클린이다. 일 양태에서 상기 치료학적 물질은 독소루비신이다. 다른 양태에서, 상기 치료학적 물질은 방사핵종이다.
상기 화합물과 다양한 페길화제과의 접합 역시 본 발명에 속한다. 대표적인 페길화제는, 이에 한정되진 않으나, 아-메톡시-w-카르복시-PEG 2K & 5K1, 아-메톡시-w-N-숙신이미딜글루타레이트--PEG 2K & 5K1, 아-메톡시-w-글루타레이트-PEG 2K, 5K, 20K, 30K2, 아-메톡시-w-GGG글루타레이트-PEG 2K & 5K1, mPEG-숙신이미딜 프로피오네이트 2K, 5K, 20K, 30K2 및 m-PEG-부티rALD 2K, 5K, 20K, 30K2 (그외 페길화제는 Li et al.,Biomacromolecules, 2003, 4, 1055.1067 참조)가 있다. 일반적인 페길화제는 Nektar Therapeutics, San Carlos, CA와 같은 상업적인 공급사로부터 구입할 수 있다. 펩타이드에 다양한 PEG 기를 접착시키는 방법은 여러 가지이며, 이는 당업자에게 공지된 것이다.
용어 "진단학적으로 표지된"은 펩타이드에 진단학적으로 검출가능한 표지물이 부착되었음을 의미한다. 다양한 표지물들이 있으며, 표지방법은 당업자에게 널리 알려져 있다. 표지물의 일반적인 종류는, 본 발명에서 사용될 수 있는 것으로서, 이에 한정되진 않으나, 방사성 동위원소, 상자성체의 동위원소, 양전자 방사 토모그래피(PET)로 표현될 수 있는 화합물, 형광 또는 발색 화합물, 자기 공명으로 표현될 수 있는 화합물, 화학발광성 화합물, 생물발광성(bioluminescent) 화합물 등이 있다. 검출가능한 적절한 표지물로, 이에 한정되진 않으나, 방사성 표지물, 형광 표지물, 플루오로제닉 표지물 또는 크로모제닉 표지물을 포함한다. 이용가능한 방사표지(방사핵종)은, 감마 측정기, 신틸레이션 측정기 또는 자동방사그래피로 간단하게 검출할 수 있는 것으로서, 이에 한정되지 않으나, 3H, 1251, 13lI, 35S 및 14C가 있다.
펩타이드에 금속을 혼성시키는 방법 및 조성물은, 당업계에 알려져 있다. 상기 금속은 바람직하게는 검출가능한 금속 원소이며, 방사핵종을 포함하며, 이들은 단백질과 그외 분자와 혼성된다(참조: 미국 특허 제 5,627,286호, 제 5,618,513호, 제 5,567,408호, 제 5,443,816호 및 제 5,561,220호).
일반적인 형광 표지물은, 이에 한정되지 않으나, 플루오레신, 로다민, 단실, 피코에리트린, 피코시아닌, 알로피코시아닌, o-프탈데히드 및 플루오레사민이 있으며(Haugland, Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals, Sixth Ed., Molecular Probes, Eugene, OR, 1996), 화학식 1의 화합물 표지에 이용될 수 있다. 플루오레신, 플루오레신 유도체 및 플루오레신 유사 분자, 예컨대 Oregon Green™과 그것의 유도체들, Rhodamine Green™ 및 Rhodol Green™은, 이소티오시아네이트, 숙신이미딜 에스테르 또는 디클로로트리아지닐-반응성 기를 이용하여 아민 기에 커플시킬 수 있다. 이와 유사하게, 형광 발색단(fluorophore) 역시 말레이미드, 요도화아세트아미드 및 아지리딘-반응성 기를 이용하여 티올에 커플시킬 수 있다. 파장이 긴 로다민은, 근본적으로 질소에 치환기가 있는 Rhodamine Green™으로, 바람직한 표지 물질이다. 이러한 기로 테트라메틸로다민, X-로다민 및 Texas Red™ 유도체를 포함한다. 그외 바람직한 형광발색단은 자외선에 의해 여기되는 것이다. 예로는, 이에 한정되는 것은 아니나 케스케이드 블루, 코우마린 유도체, (단실 클로라이드 일원의) 나프탈렌, 피렌 및 피리딜로사졸 유도체가 있다.
반도체 나노결정(Bruchez, et al., 1998, Science 281:2013-2016)과 양자점, 예컨대 아연-설파이드-캡핑된 Cd 셀레나이드(Chan, et al., Science 1998, 281:2016-2018)와 같은 무기 물질 역시 진단학적 표지물로 이용될 수 있다.
펩타이드는 또한 플루오레센-방사 금속, 예컨대 152Eu 또는 그외 란타나이드 시리즈로 표지될 수 있다. 이런 금속을 디에틸렌트리아민펜타아세틱 산(DTPA), 에틸렌-디아민-테트라아세틱 산(EDTA) 등과 같은 아실 킬레이킹 기를 통하여 화학식 1의 화합물에 접착시킬 수 있다.
생체내 진단에 있어서, 방사핵종을 직접적으로 또는 DTPA 또는 EDTA와 같은 아실 킬레이킹 기를 이용하여 간접적으로 펩타이드에 접착시킬 수 있다. 킬레이트화 화학은 당업계에 공지된 것으로, 펩타이드에 대한 다양한 종류의 킬레이트화 물질을 사용하여 표지된 펩타이드를 제공할 수 있다. 물론, 표지된 펩타이드는 천연 펩타이드의 생물학적 활성을 유지하여야 한다.
진단학적 또는 치료학적 가치가 있는 모든 방사 핵종은 본 발명의 방사표지로서 사용될 수 있다. 바람직한 양태에서, 방사핵종은 감마-방사성 방사핵종 또는 β-방사성 방사핵종으로, 예컨대 요소들의 란타나이드 또는 액티나이드 시리즈로부터 선택된다. 양전자-방사성 방사핵종들, 예컨대 68Ga 또는 64Cu 또한 사용될 수 있다. 적합한 감마-방사성 방사핵종은, 진단학적 이미지화로의 사용이 가능한 것이다. 상기 감마-방사성 방사핵종은 바람직하게는 1 시간 내지 40일의 반감기를 가지며, 바람직하게는 12시간 내지 3일을 갖는다. 적합한 감마-방사성 방사핵종의 예로는, 67Ga, lllIn, 99mTc, 169Yb 및 l86Re가 잇다. 가장 바람직하게는, 상기 방사핵종은 99mTc이다.
바람직한 방사핵종의 예로는(원자 번호 순서대로), 67Cu, 67Ga, 68Ga, 72As, 89Zr, 90Y, 97Ru, 99Tc, 111In, 123I, 125I, 131I, 169Yb, 186Re 및 201Tl가 있다. 표지물로서 양전자-방사성 방사성 금속을 이용하는 것은 제한된 작업임에도 불구하고, 트랜스페린 및 인간 혈청 알부민과 같은 특정 단백질은 68Ga으로 표지되고 있다.
자기 공명 이미지화에 있어서, 유용한 다수의 (방사성 동위원소가 아닌) 금속으로는, 가돌리늄, 망간, 구리, 철, 금 및 유러퓸이 있다. 가돌리늄이 가장 바람직하다. 일반적으로, 진단학적으로 이용함에 있어서 검출에 필요한 표지된 펩타이드의 양은, 환자의 나이, 증상, 성별 및 질병 정도, 금기사항 및 그외 변수들에 의존적으로 변경될 것이며, 주치의 또는 진단학자에 의해 조절된다. 투여량은 0.01 mg/kg 내지 100 mg/kg이다.
또한 펩타이드는 당업자에게 널리 알려진 바와 같이, 인광성 화합물 또는 화학발광성 화합물과의 커플링에 의해 검출될 수 있다. 바람직한 화학발광성 화합물로는, 이에 한정되진 않으나, 루미놀, 이소루미놀, 테로마틱 아크리디늄 에스테르(theromatic acridinium ester), 이미다졸, 아크리디늄 염 및 옥살레이트 에스테르가 있다. 이와 유사하게, 생물발광성 화합물을 사용하여 항체 및/또는 그것의 접합체를 검출할 수 있으며, 그예로는 이에 한정되진 않으나 루시페린, 루시페라제 및 에쿼린을 포함한다.
높은 흡광 계수의 발색단을 가지거나, 야기하는 크로모제닉 화합물을 근간으로 한 비색 검출, 또한 화학식 1의 화합물을 검출하는데 사용될 수 있다.
4.3 합성
본 발명의 화합물은 전형적인 합성 방법에 따라 얻어질 수 있다. 본 발명의 화합물의 제조에 유용한 출발 물질 및 그 중간 물질은 상업적으로 구입가능하거나 주지된 합성 방법에 의하여 제조될 수 있다.
펩타이드는 예컨대 일반적으로 Merrifield, J.Amer. Chem. Soc. 1963, 85:2149-54에 의해 개시된 고체 상 합성, 화학 회사로부터 구입할 수 있는 자동화 장비(예, Applied Biosystems, Foster City, CA), 또는 장비 매뉴얼을 이용하여 제조될 수 있다. 고체 상 펩타이드 합성은 보호된 알파-아미노산(Boc 또는 FMOC 어느 하나로 보호된)의 적합한 수지와의 커플링에 의하여 펩타이드의 C-말단으로부터 개시될 수 있다. 이런 출발 물질은 에스테르 연결에 의해 알파-아미노-보호된 아미노산을 클로로메틸화 수지, 하이드록시메틸 수지, BHA 수지, MBHA 수지 또는 Rink 수지에 접착시킴으로써 제조될 수 있다. 이러한 방법은 당업계에 공지된 것으로, 그 예로는 미국 특허 제 5,994,309호가 있다. 다른 방법으로는, 본 발명의 화합물은 보호된 알파-아미노산을 이용한 액체 상 합성으로 제조될 수 있다(참조: Bodanszky, "Methods of Peptide Synthesis, "Springer Verlag, New York, 1984). 당업자에게 명백한 바와 같이, 비천연성 아미노산은 상기 화학적 합성의 표준방법에 쉽게 사용될 수 있으며, 당업자에게 주지된 전형적인 방법에 의해 제조될 수있다.
당업자라면 본 발명의 화합물 합성에 대한 두가지 일반적인 합성 방법이 있음을 이해할 것이다. 황 함유 아미노산을 갖는 화합물은, 상기에 언급한 바와 같이 적절한 황 함유 아미노산을 표준적인 화학적 합성 방법으로 통합함으로써 직접적으로, 또는 적절한 티올 함유 펩타이드 전구체의 선별적 기능화와 필요에 따라 제조된 티오에테르 함유 펩타이드의 선별적인 산화에 의해 간접적으로 합성할 수 있다. 본 발명의 다양한 유기 기능기에 있어서, 선별적인 자유 티올 기능성화 방법(예, 선별적 알킬화, 아실화, 디설파이드 형성 등)은 설파이드가 설폭사이드(예, NaB03, 아세토니트릴: 물, NaI04, 아세토니트릴:물 등) 및 설폰(예, H202, HCO2H)으로 산화되는 방법과 같이, 당업자에게 주지된 것이다.
4.4 본 발명의 화합물에 대한 분석
당업자는 본원에 기재된 본 발명의 화합물의 활성을 측정하는데 유용한 생체외 및 생체내 분석이 예시적인 것임을 이해할 것이다.
4.4.1 내피세포 이동 분석
내피 세포(EC) 이동에 대하여, 트랜스웰 당 200㎕의 콜라겐 용액을 첨가한 다음 37℃에서 하룻밤동안 방치하여, 트랜스웰을 타입 I 콜라겐(50㎍/㎖)으로 코팅한다. 트랜스웰을 24-웰 플레이트에서 어셈블리하고 케모어트랙턴트(예컨대, FGF-2)를 전체 부피 0.8㎖ 배지 내에 챔버 바닥에 첨가한다. 트립신을 사용하여 단일층 배양으로부터 탈착된 인간 제대 정맥혈관 내피 세포(HUVEC)와 같은 ECs를 무혈청 배지로 최종농도 약 106 세포/㎖로 희석하고, 0.2 ㎖의 세포 현탁액을 각각의 트랜스웰의 상부 챔버에 첨가한다. 실험할 억제제를 상부 및 하부 챔버에 모두 가하고, 5시간 동안 습윤 대기 내, 37℃에서 이동이 진행되도록 한다. 트랜스웰을 DiffQuik®을 사용하여 염색된 플레이트로부터 제거한다. 이동하지 않은 세포를 면 봉으로 긁어내어 상부 챔버로부터 제거하고, 막을 탈착하여 슬라이드 상에 장착하고 고전력장(400x)하에 카운트하여 이동 세포 수를 결정한다.
4.4.2 암-침투 활성에 대한 생물학적 분석
ECs 또는 종양세포(예컨대, PC-3 인간 전립선암종)과 같은 세포의 재구성된 기저막(Matrigel®)을 통하여 침투하는 능력을, Matrigel® 침투 분석으로서 알려진 분석으로 행한다(Kleinman et al., Biochemistry 1986, 25:312-318; Parish et al., Int. J. Cancer 1992, 52:378-383). Matrigel®은 타입 IV 콜라겐, 라미닌, 페르레칸과 같은 헤파란 설페이트 프로테오글리칸을 함유하는 재구성된 기저막으로, bFGF, 비트로넥틴 및 변형 성장 인자-β(TGFβ), 유로키나아제-타입 플라스미노겐 활성화제(uPA), 조직 플라스미노겐 활성화제(tPA), 및 플라스미노겐 활성화제 억제제 타입 1(PAI-1)로서 알려진 세르핀에 결합한다(Chambers et al., Canc. Res. 1995, 55:1578-1585). 세포외 수용체 또는 효소를 표적으로하는 화합물에 대한 분석 결과로 일반적인 생체내 이들 화합물의 효율성을 예측한다(Rabbani et al., 1995, Int. J. Cancer 63:740-845).
이러한 분석은 트랜스웰 조직 배양 인서트를 사용한다. 침투성 세포는 Matrigel® 및 폴리카보네이트막의 상부 측면을 가로질러 막의 바닥에 부착될 수 있는 세포로서 정의된다. 폴리카보네이트 막(8.0㎛ 기공 크기)를 함유하는 트랜스웰(Costar)을 멸균된 PBS내에서 최종 농도 75㎍/㎖(인서트 당 60 ㎕의 희석된 Matrigel®)로 희석된 Matrigel®로 코팅하고(Collaborative Research), 24-웰 플레이트의 웰 내에 배치한다. 상기 막을 생물학적으로 안전한 용기 내에서 하룻밤동안 건조한 다음, 100㎕의 DMEM 함유 항생제를 교반기 테이블 위에서 1 시간 동안 첨가함으로써 재수화한다. DMEM을 흡입에 의하여 각각의 인서트로부터 제거하고, 0.8㎖의 DMEM/10% FBS/항생제를 24-웰 플레이트의 각각의 웰에 트랜스웰 외부(하부 챔버)를 둘러싸도록 첨가한다. 신선한 DMEM/항생제(100㎕), 인간 Glu-플라스미노겐(5㎍/㎖), 및 임의의 테스트될 억제제를 트랜스웨 내부 상부에(상부 챔버) 가한다. 테스트될 세포를 트립신화하고 DMEM/항생제 내에 재현탁한 후, 트랜스웰의 상부 챔버에 최종 농도 800,000 세포/㎖로 첨가한다. 상부 챔버의 최종 부피를 200㎕로 조정한다. 어셈블리한 플레이트를 습한 5% CO2 대기에서 72 시간 동안 인큐베이션한다. 인큐베이션 후, 세포를 고정하고 DiffQuik®(Giemsa 스테인)을 사용하여 염색하고, 상부 챔버를 면봉으로 긁어내어, Matrigel®과 막을 통하여 침투하지 않은 세포를 제거한다. 막을 X-acto 블레이드를 사용하여 트랜스웰로부터 탈착하고, Permount와 커버 슬립을 사용하여 슬라이드 상에 장착한 다음, 고전력(400x)필드 하에 카운트한다. 침투된 세포의 평균을 카운트된 5-10 필드로부터 결정하고 억제제 농도의 함수로서 도시한다.
4.4.3 항-혈관신생 활성에 대한 관-형성 분석
제조 또는 상업적으로 구입가능한 내피세포, 예컨대 인간 제대 정맥혈관 내피세포(HUVEC:human umbilical vein endothelial cells) 또는 인간 미세혈관 내피세포(HMVEC:human microvascular endothelial cells)를 2 x 105 세포/㎖ 농도로 피브리노겐(인산 버퍼 식염(PBS) 내 5mg/㎖)과 1:1 (v/v) 비로 혼합한다. 트롬빈을 첨가하고(5 Unit/㎖ 최종 농도), 혼합물을 즉시 24-웰 플레이트로 이송한다(웰 당 0.5㎖). 피브린 겔이 형성되도록 하고, VEGF 및 bFGF를 테스트 화합물과 함께 웰에 첨가한다(각각 5ng/㎖ 최종 농도). 세포를 37℃에서 5% CO2 내 4 일 동안 배양한 다음, 각각의 웰 내 세포를 카운트하고 둥근것, 가지 없이 긴것, 하나의 가지를 가지고 긴 것 또는 2 개 이상의 가지를 가지고 긴 것으로서 분류한다. 결과는 화합물 각각의 농도에 대한 5개의 상이한 웰의 평균으로서 나타낸다. 일반적으로, 혈관신생 억제제의 존재하에, 세포는 둥글게 유지되거나 미분화된 관(예컨대, 0 또는 1 가지)를 형성한다. 이러한 분석은 당업계에서 생체내 혈관신생(또는 항-혈관신생) 효율성에 대한 지표로 인식된다(Min et al., Cancer Res. 1996 56:2428-2433).
대안적인 분석에서, 내피 세포를 Matrigel®상에 배양할 경우 내피 세포 관 형성이 관측된다(Schnaper et al., J. Cell Physiol. 1995 165:107-118). 내피 세포(1 x 104 세포/웰)를 Matrigel®-코팅된 24-웰 플레이트로 이송하고, 48시간 후 관 형성을 정량한다. 억제제를 내피 세포와 동시에 또는 그 후 다양한 시간 지점에서 첨가하여 테스트한다. (a) bFGF 또는 VEFG과 같은 혈관신생 성장 인자, (b) 분화 자극 제제(예컨대, PMA) 또는 이들의 조합을 첨가함으로써 관 형성 또한 자극될 수 있다.
본 분석은 내피 세포에 특정 유형의 기저막, 즉 이동 및 분화 내피세포가 처음 마주대할 것으로 예상되는 매트릭스 층을 제시함으로써 혈관신생을 모델로 한다. 결합된 성장 인자 외에, Matrigel®(및 in situ 기저막) 내에 발견되는 매트릭스 성분 또는 단백분해효소 산물 또한 내피 세포 관 형성을 자극할 수 있으며, 이는 앞서 기재한 피브린 겔 혈관신생 모델을 보완한다 (Blood et al., Biochim. Biophys. Acta 1990, 1032:89-118; Odedra et al., Pharmac. Ther. 1991, 49:111-124).
4.4.4 증식 억제에 대한 분석
본 발명의 화합물의 내피세포 증식 억제 성능을 96-웰 포맷에서 측정할 수 있다. 타입 I 콜라겐(젤라틴)을 사용하여 플레이트의 웰을 코팅한다 (PBS 내 0.1-1 mg/㎖, 상온에서 30분 동안 웰 당 0.1 ㎖). 플레이트를 세척한 후(3 x w/PBS), 내피세포 성장 배지(EGM; Clonetics)내에서 또는 0.1-2% FBS를 함유하는 M199 배지 내에서 3-6,000세포를 웰 당 접종하고 4 시간 동안(37℃/5% CO2) 부착되도록 한다. 배지 및 미부착 세포를 4 시간 후 제거하고, bFGF(1-10 ng/㎖) 또는 VEFG(1-10 ng/㎖)를 함유하는 신선한 배지를 각가의 웰에 첨가한다. 테스트할 화합물을 마지막으로 첨가하고, 플레이트를 24-48시간 동안 (37℃/5% CO2) 둔다. 각각의 웰에 MTS(Promega)를 첨가하고 1-4시간 둔다. 세포 수에 비례하는 490nm에서의 흡수를 측정하여 대조 웰과 테스트 화합물을 함유하는 것들 사이의 증식 차이를 결정한다.
유사한 분석 시스템은 배양된 부착 종양 세포로 확립할 수 있다. 그러나, 이 포맷에서 콜라겐을 생략할 수 있다. 종양 세포(예컨대, 3,000-10,000/웰)를 플레이팅하고 하룻밤동안 부착되도록 한다. 무혈청 배지를 웰에 첨가하고, 세포를 24 시간 동안 동시배양한다. 10% FBS 함유 배지를 각각의 웰에 첨가하여 증식을 자극한다. 테스트할 화합물을 일부 웰에 포함시킨다. 24시간 후, MTS를 플레이트에 가하고, 분석을 진행하고 상기한 바와 같이 판독한다.
4.4.5 세포 독성 분석
본 발명의 화합물의 항-증식 효과 및 세포독성 효과를 종양세포, ECs, 섬유아세포 및 대식세포를 포함하는 다양한 세포 유형에 대하여 측정할 수 있다. 이는 방사치료학적 또는 독소와 같은 치료학적 모이어티로 접합된 본 발명의 화합물을 실험할때 특히 유용하다. 예를들면, 131I로 요드화된 Bolton-Hunter 물질과 본 발명의 화합물 1종의 접합체는, PHSCN 결합 부위/수용체(세포자살 유도와 매우 유사하게)를 발현하는 세포의 증식을 저해할 것으로 예측된다. 종양 세포와 자극화된 내피 세포에 대한 항-증식 효과가 예상되나, 특정 환경하의 무활동성 내피세포 또는 정상적인 진피의 섬유아세포에서도 효과가 없다. 정상 세포에서 관찰되는 항-증식 효과 및 세포독성 효과는 접합체의 비특이적 독성을 나타내는 것일 수 있다.
통상적인 분석은 세포를 웰 당 5-10,000 세포의 밀도로 96-웰 플레이트에 접종하는 것을 수반한다. 테스트할 화합물을 결합 분석에서 측정된 IC50 10X의 농도(이는 접합체에 따라 변경될 것이다)로 첨가하고, 24시간 동안 세포와 함께 방치하였다. 상기 세포는 배지로 3번 세척하고, [3H]티미딘(1μCi/㎖)을 포함하는 새로운 배지를 세포에 첨가한 다음, 37 ℃의 5% 이산화탄소 조건의 배양기에서 24시간 및 48시간 배양하였다. 세포는 다양한 시점에서 1M NaOH로 용혈시키고, β-측정기를 이용하여 웰 당 카운트를 측정하였다. 증식은 MTS 시약이나 CyQuant®를 이용하여 무-방사능적으로 측정하여, 총 세포 수를 측정하기 할 수 있다. 세포독성 분석을 위해(세포 용혈 측정), Promega 96-웰 세포독성 키트를 사용한다. 항-증식 활성의 증가가 있다면, 세포자살 유도는 TumorTACS(Genzyme)으로 측정할 수 있다.
4.4.6 카 스파제-3의 활성
본 발명의 화합물의 ECs의 세포자살을 촉진시키는 활성은 카스파제-3의 활성화를 측정함으로써 결정될 수 있다. 타입 I 콜라겐(젤라틴)을 이용하여 P100 플레이트를 코팅하고, 5 x 105 내피세포를 10% FBS를 포함하는 EGM 배지에 접종한다. 24시간 후(37 ℃의 5 % 이산화탄소 하에서), 배지를 2% FBS, 10 ng/㎖ bFGF 및 테스트 화합물이 함유된 EGM 배지로 교체한다. 6시간 후 세포를 수득하고, 1% 트리톤에서 세포 용혈물을 준비한 다음, 제조사의 설명서에 따라 EnzChek®Caspase-3 분석 키트#1(Molecular Probes)로 분석한다.
4.4.7 각막 혈관신생 모델
사용한 프로토콜은 실질적으로 Volpert et al., J. Clin. Invest. 1996, 98:671-679에 기재된 것과 동일하다. 간략하게, 암컷 Fisher 렛(120-140gms)를 마취시키고, Hydron®, bFGF(150 nM) 및 테스트 화합물로 구성된 펠렛(5㎕)을 각막 가장자리로부터 1.0-1.5mm에 만들어진 미세한 절개내로 삽입한다. 신생혈관증식을 삽입후 5 일 및 7 일 후에 평가한다. 7일 째, 동물을 마취시키고 콜로이드 카본과 같은 염료를 주입하여 혈관을 염색한다. 다음, 동물을 안락사시키고, 각막을 포르말린으로 고정하고, 평편화하고 사진찍어 신생혈관증식 정도를 평가한다. 전체 혈관 영역 또는 길이를 영상화하여 또는 단순히 혈관을 카운트하여 신생혈관을 정량할 수 있다.
4.4.8 Matrigel ® 플러그 분석
본 분석을 실질적으로 Passaniti et al., Lab Invest. 1992, 67:519-528에 기재된 바와 같이 수행한다. 얼음 냉각된 Matrigel®(예컨대, 500㎕)(Collaborative Biomedical Products, Inc., Bedford, MA)을 헤파린(예컨대, 50㎍/㎖), FGF-2(예컨대, 400ng/㎖) 및 테스트 화합물과 혼합한다. 일부 분석에서, bFGF를 혈관신생 자극원으로서 종양 세포로 대체할 수 있다. Matrigel®혼합물을 4-8주된 무의식 누드 마우스의 복부 미드라인 근처 영역에 바람직하게 마우스 당 3 주입으로 피하 주입한다. 주입된 Matrigel®은 감지할 수 있는 고체 겔을 형성한다. 주입 영역을 선택하여 각각의 동물에 양성 대조 플러그(FGF-2 + 헤파린과 같이), 음성 대조 플러그(예컨대, 버퍼 + 헤파린) 및 혈관신생에 대한 효과를 테스트할 화합물을 포함하는 플러그(예컨대, FGF-2 + 헤파린 + 화합물)를 주입하였다. 모든 처리를 바람직하게 3배수로 수행한다. 동물을 주입후 약 7일째 또는 혈관신생 관측에 적합한 다른 시간에 경추 탈구에 의하여 희생시킨다. 마우스 피부를 복부 미드라인을 따라 탈착하고, Matrigel 플러그를 회수하고 즉시 고해상도에서 스캐닝한다. 다음, 플러그를 물에 분산시키고 37℃ 하룻밤동안 둔다. 헤모글로빈(Hb) 수치를 Drabkin 용액(예컨대, Sigma로부터 얻어진)을 사용하여 제조업자의 설명서에 따라 측정한다. 플러그 내 Hb 양은 샘플내 혈액 양을 반영하므로 혈관신생의 간접적인 측정이다. 부가적으로 또는 대안적으로, 동물을 희생시키기 전에 플루오로포어(fluorophore)에 접합된 고분자량 덱스트란을 함유하는 0.1㎖ 버퍼(바람직하게 PBS)를 주입한다. 분산된 플러그 내 형광발광 양을 측정하고, 이 또한 플러그 내 혈관신생 지표이다. mAb 항-CD31(CD31은 혈소판-내피 세포 부착 분자 또는 PECAM)로의 염색 또한 플러그 내 신생혈관 형성 및 미세혈관 밀도 확인에 이용할 수 있다.
4.4.9 병아리 융모요막(CAM: chorioallantoic membrane) 혈관신생 분석
본 분석은 실질적으로 Nguyen et al., Microvascular Res. 1994, 47:31-40에 기재된 바에 따라 수행한다. 혈관신생 인자(bFGF) 또는 종양세포 플러스 억제제를 함유하는 메쉬를 8-일된 병아리 배의 CAM 상으로 배치하고, 샘플의 삽입 3-9일 후 CAM을 관찰한다. 혈관을 함유하는 메쉬 내 스퀘어 백분율을 측정함으로써 혈관신생을 정량한다.
4.4.10 종양 세포를 이용한 Matrigel 플러그 분석으로 생체내 혈관신생 억제 및 항-종양 효과 평가
본 분석에서, 종양 세포, 예컨대, 3LL 루이스 폐암종 또는 렛 전립선암 세포주 MatLyLu의 1-5 x 106 세포를 Matrigel®과 혼합한 다음, 상기 B에 기재된 프로토콜을 따라 마우스의 플랭크 내로 주입한다. 종양 세포의 질량 및 강력한 혈관신생 반응을 약 5-7일 후에 플러그 내에서 관찰할 수 있다. 화합물을 플러그내에 포함시켜 실제 종양 환경내에서 화합물의 항-종양 및 항-혈관신생 활성을 평가할 수 있다. 종양 무게, Hb 수치 또는 형광발광 수치(희생 전에 주입된 덱스트란-플루오로포어 접합체)을 측정한다. Hb 또는 형광발광 측정을 위해, 플러그를 먼저 조직 균질화기로 균질화한다.
4.4.11 피하(s.c) 종양 성장의 Xenograft 모델
누드 마우스에 MDA-MB-231 세포(인간 유방암종) 및 Matrigel®(0.2 ㎖ 내 1 x 106 세포)를 동물의 오른쪽 옆구리내에 피하 접종한다. 종양을 200mm3로 스테이징하고 테스트 화합물 처리를 개시한다(100 μg/동물/일 give q.d.IP). 종양 부피를 격일로 측정하고, 동물을 처리 2 주후 희생시킨다. 종양을 절개하고, 칭량하고 파라핀으로 함침시킨다. 종양의 조직학적 부분을 H 및 E, 항-CD31, Ki-67, TUNEL, 및 CD68 염색에 의하여 분석한다.
4.4.12 전이의 Xenograft 모델
본 발명의 화합물을 또한 실험적 전이 모델을 사용하여 후기(late) 전이 억제에 대하여 테스트할 수 있다(Crowley et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1993, 90 5021-5025). 후기 전이는 종양세포의 부착 및 분출(extravasation), 국부적 침투, 정착(seeding), 증식 및 혈관신생 단계를 수반한다. 리포터 유전자, 바람직하게 그린 플루오레센트 단백질(GEP) 유전자로, 그러나 대안적으로 클로람페니콜 아세틸 트랜스퍼라아제(CAT), 루시퍼라아제 또는 LacZ를 코딩화하는 유전자로 형질전환된 인간 전립선암종 세포(PC-3)를 누드 마우스 내로 접종한다. 이는 세포의 운명에 따르는 이들 마커(GFP의 형광발광 검출 또는 효소 활성의 조직학적 발색 검출) 중 하나를 사용가능하다. 세포는 바람직하게 i.v. 주입되며, 약 14일 후, 특히 폐 내에서 그러나 또한 림프절, 대퇴부 및 뇌 내에서 전이를 동정한다. 이는 인간 전립선암에서 자연적으로 발생하는 전이의 기관 굴성(tropism)을 보완한다. 에컨대, GFP-발현 PC-3 세포(마우스 당 1 x 106 세포)를 누드(nu/nu) 마우스의 꼬리 정맥내로 i.v. 주입한다. 동물을 테스트 조성물로 100㎍/동물/일 q.d. IP로 처리한다. 단일 전이 세포 및 중심을 가시화하고 형광발광 현미경 또는 광 현미경 조직화학에 의하여 또는 조직을 그라인딩하고 검출가능한 라벨의 정량 발색 분석에 의하여 정량한다.
4.4.13 PHSCN 및 기능적 유도체에 의한 생체내 자발적 전이 억제
렛 공통 유전자형 유방암 시스템(Xing et al., Int. J. Cancer 67:423-429(1996))은 Mat BIII 렛 유방암 세포를 사용한다. 종양 세포, 예컨대 0.1㎖ PBS 내 현탁된 106 세포를 암컷 Fisher 렛의 포유류 팻 패드내로 접종한다. 접종시, 14-일 Alza 삼투 미니펌프를 복막내 삽입하여 테스트 화합물을 분산시킨다. 화합물을 PBS(예컨대, 200mM 원액)내 용해하고, 살균 여과하고 미니펌프내 배치하여 약 4mg/kg/일의 방출율을 이루게 한다. 대조 동물에 미니펌프로, 비히클(PBS)만을 또는 비히클 대조 펩타이드를 투여한다. 동물을 약 14일 째 희생시킨다. 본 발명의 화합물이 처리된 렛에서, 원발성 종양의 크기와, 지라, 폐, 간, 신장 및 림프구(분리된 병소로 계수함)에서의 전이가 현저히 감소된 것으로 관찰된다. 조직학적 분석과 면역조직학적 분석을 통하여 처리된 동물에서 증가된 세포괴사와 세포자살 신호가 확인된다. 거대한 세포괴사 부위는 신혈관 형성이 이루어지지 않은 종양 부위에서 발견된다. (펩타이드 1몰당 1 또는 2원자의) 131I 가 접합된 인간 또는 토끼 PHSCN과 그것을 유도체는 방사성치료에 효과적이며, 비접합된 폴리펩타이드에 비하여 2배 이상의 효능이 있는 것으로 확인된다. 이와는 반대로, 대조군 펩타이드 처리시에는 종양 크기 또는 전이에 현저한 변화를 초래하지 못한다.
4.4.14 3LL 루이스 폐 종양: 원발성 종양 성장
종양 세포주가 C57BL/6 마우스에서 폐 종양으로서 자연적으로 발생되었다 (Malave et al., J. Nat'l. Canc. Inst. 1979, 62:83-88). 피하 접종에 의하여 C57BL/6 마우스 내 통과에 의하여 전파되며 반동종 C57BL/6 x DBA/2F1 마우스 또는 동종 C3H 마우스 내에서 테스트된다. 일반적으로, 피하 삽입을 위해 그룹 당 여섯 마리 동물, 또는 근육 내 삽입을 위해 열 마리를 사용한다. 종양을 2-4mm 단편으로서 피하 접종에 의해 삽입하거나, 근육내 삽입 또는 약 0.5-2 x 106 세포의 현탁세포로서 피하 삽입할 수 있다. 처리를 삽입 24시간 후 시작하거나 특정 크기 (대개 약 400mg) 종양이 검출가능할 때까지 지연시킨다. 테스트 화합물을 11일 동안 ip 투여한다.
동물의 무게를 측정하고, 종양 크기를 측정한다. 미처리 대조군에서 근육내 접종후 12일째 전형적인 종양 무게는 500-2500mg이다. 전형적인 평균 생존시간은 18-28일이다. 양성 대조 화합물, 예컨대 1-11일째 일(day) 당 시클로포스파미드 20mg/kg/주입을 사용한다. 결과는 평균 동물 무게, 종양 크기, 종양 무게, 생존 시간을 포함한다. 치료 활성 확인을 위해, 테스트 조성물은 두가지 복수-투여 분석으로 실험하여야 한다.
4.4.15 3LL 루이스 폐 종양: 원발성 성장 및 자발적 전이 모델
이 모델은 공지된 것이다(Gorelik et al., 1980, J. Nat'l. Canc. Inst. 65:1257-1264; Gorelik et al., 1980, Rec. Results Canc. Res. 75:20-28; Isakov et al., Invasion Metas. 1982, 2:12-32; Talmadge et al., J. Nat'l. Canc. Inst. 1982, 69:975-980; Hilgard et al., Br. J. Cancer 1977, 35:78-860. 테스트 마우스는 2-3 개월의 수컷 C57BL/6 마우스이다. 피하, 근육내 또는 풋패드 내 삽입 후, 종양은 바람직하게 폐내에서 전이된다. 일부 종양 세포주로, 원발성 종양은 항-전이 효과를 발휘하며, 전이 단계 연구 이전에 먼저 절개되어야 한다(미국특허 제 5,639,725).
잘게 썬 종양 조직을 0.3% 트립신 처리함으로써 단일 세포 현탁액을 종양으로부터 제조한다. 세포를 3회 PBS(pH 7.4) 세척하고 PBS 내 현탁한다. 이와 같이 제조한 3LL 세포의 생존가능성은 약 95-99%(트립판 블루 염색 제외에 의함)이다. 0.05㎖ PBS내 현탁된 생존가능한 종양 세포(3 x 104 - 5 x 106)를 C57BL/6 마우스의 등 또는 하나의 풋 패드내로 피하 주입한다. 106 세포 주입 3-4일 후 가시 종양이 나타난다. 종양의 출현일 및 종양의 직경을 격일로 칼리퍼로 측정한다. 처리는 1주 당 펩타이드 또는 유도체의 1회 또는 2회 투여로서 한다. 다른 양태에서, 펩타이드를 삼투 미니펌프로 전달한다.
등 종양의 종양 절개를 수반하는 실험에서, 종양이 약 1500mm3 크기에 도달하면, 마우스를 2 그룹으로 무작위로 나눈다: (1) 원발성 종양을 완전히 절개하거나; (2) 허위 수술을 수행하고 종양을 그대로 남겨둔다. 500-3000mm3로부터의 종양이 전이 성장을 억제하나, 1500mm3이 높은 생존율로 국부적인 재성장없이 안전하게 절제될 수 있는 최대 크기의 원발성 종양이다. 21일 후, 모든 마우스를 희생시키고 부검한다.
폐를 제거하고 칭량한다. 폐를 Bouin's 용액으로 고정하고 가시 전이의 수를 기록한다. 전이 직경 또한 8X 배율로 마이크로미터 함유 접안경이 장착된 쌍안경을 사용하여 측정한다. 기록된 직경에 근거하여, 각각의 전이의 부피를 계산할 수 있다. 폐 당 전이 전체 부피 측정을 위하여, 가시 전이의 평균 수에 전이의 평균 부피를 곱한다. 추가로 전이 성장을 결정하기 위해, 125IdUrd의 폐 세포 내 혼입을 측정할 수 있다(Thakur et al., J. Lab. Clin. Med. 1977, 89:217-228). 종양 절단 10일 후, 25㎍의 플루오로디옥시우리딘을 종양 함유 (및, 사용될 경우, 종양-절제된) 마우스의 복막내로 접종한다. 30분 후, 마우스에 1μCi의 125IdUrd(요오도디옥시우리딘)을 투여한다. 1일 후, 폐와 비장을 제거하고 칭량하고, 125IdUrd 혼입 정도를 감마 카운터를 이용하여 측정한다.
풋패드 종양을 가진 마우스에서, 종양이 약 8-10 mm 직경에 이르렀을 때, 마우스를 무작위로 두 개의 군으로 나눈다: (1) 종양을 가진다리를 무릎 관절 위로 결찰 후 절단하거나; 또는 (2) 비절단 종양 함유 대조군으로서 마우스를 그대로 둔다 (종양을 가진 마우스에서 종양이 없는 다리의 절단은 후속적인 전이에 대한 영향이 없는 것으로 알려져 있으며, 이는 마취, 스트레스 또는 수술의 영향을 배제한다). 마우스를 절단 10-14일 후 희생시킨다. 전이를 상기한 바와 같이 평가한다.
통계: 전이 발생을 나타내는 수치와, 종양을 갖는 마우스의 폐에서의 그것의 증식은 정상적으로 분포되어있지 않다. 그러므로, Mann-Whitney U-Test와 같은 무-매개변수 통계가 분석시 사용될 수 있다.
Gorelik et al.(1980, supra)에 의한 이 모델의 연구에서 종양세포 접종물의 크기가 전이 증식의 크기를 결정한다는 것이 확인되었다. 조작된 마우스의 폐에서의 전이율은 원발성 종양을 가진 마우스와는 차이가 있었다. 따라서, 3LL 세포를 보다 많은 투여량(1-5 x 106)으로 접종하여 원발성 종양을 유발하고 외과적으로 제거한 마우스의 폐에서, 전이 부피가 무-조작된 대조군에 비해 크지만, 종양을 가진 무-조작 마우스에 비하여 전이 수가 낮았다. 폐 전이의 측정으로서 125IdUrd 통합을 이용하여, 종양-절개한 마우스와 106 3LL 세포로 접종한 종양을 가진 마우스 간에 현저한 차이점이 발견되었다. 105의 종양 세포의 접종에 의해 형성된 종양을 절단하면 전이 증식이 급격하게 가속화되었다. 이러한 결과는 국부 종양의 절개이후의 마우스 생존과 일치된다. 국부 종양의 절개이후에 수반되는 전이 증식의 가속화 현상은 반복적으로 관찰되었다.(예, 미국 특허 제 5,639,725호). 이러한 관찰은 암 수술을 받은 환자의 예후를 암시한다.
4.4.15 DU145 전립선 암 세포를 이용한 경쟁적 결합 분석
펩타이드 6개 집단을 사용하여 IC50을 결정할 수 있다. 본 분석은 생물학적 활성을 대변하는 표시이다. 간략하게는, DU145 세포는 트립신과의 간단한 반응으로 수거하고, 테스트할(경쟁자) 펩타이드 유도체 및 표준문질을 첨가한 다음, 현탁액은 4℃에서 2시간동안 흔들어 주었다. 상기 세포를 펠렛화하여 상층액을 제거한 후, PBS를 첨가하는 과정을 3회 반복하였다(세척). 세척의 두번째 단계의 후속으로, HPR-스트렙타비딘을 첨가하여 결합하도록 하였다. 적당한 HRP 기질을 첨가하여 미리 정해진 일련의 반응으로 발색된다.
4.4.16 인간 내피세포(HUVEC) 증식 분석
본 분석은 96웰 분석으로 수행되며 48시간동안 실시된다. 간단히, HUVECs (Cascade Biologicals)를 2% FBS가 함유된 M200에서 하룻밤동안 배양한다. 다음날, 3,000 세포를 젤라틴 코팅된 96 웰 플레이트의 각 웰에 둔다. 상기 세포 부착도도록 하고, 4 내지 6시간 배양하며, 이때 배지는 2% FBS, 1ng/㎖ FGF-2 및 다양한 농도의 테스트 화합물이 함유된 신규 배지로 교체한다. 이후 세포는 48시간 더 배양하고, Cell Titer Aqueous Cell Proliferation Assay(Promega)를 이용하여 각 웰의 세포 수를 측정한다. 이 결과는 표준 화합물과 비교가능한 IC50일 것이다. 이는 그것의 표적 세포에 대한 펩타이드 유도체의 생물학적 기능을 반영하는 분석이다.
4.4.17 투여 범위 및 동역학
펩타이드 4회 투여분(생체내 분포시 2, 4, 8 및 10μCi, 및 감마 신티그래피시에는 10, 50, 100, 및 200μCi)을 꼬리 정맥을 통하여 종양(B16F10 흑색종 세포)이 있는(200-300mm3) C57B1/6 마우스에 주사한다. 최저 투여량 및 최대 투여량을 일차 및 이차로 실험하였다. 따라서 초기 결과를 토대로 테스트 펩타이드의 투여량을 변경할 수 있다.
(그룹1, 방사량 측정 동물 3마리/투여량) 125I 표지된 펩타이드를 투여하고 2시간 후 동물을 치사시킨다. 종양(이론상 높은 카운트) 및 심장(이론상 낮은 카운트)을 분리하여 방사능을 측정한다.
(그룹2, 감마 신티그래피 동물 3마리/투여량) 125I 표지된 펩타이드를 투여하고 2시간 후 동물을 안락사시키고, 이미지(감마 신티그래피)를 구하였다. 이들 결과를 토대로 펩타이드 투여량을 선택한다.
4.4.18 이미지화 가능성
125I 표지된 펩타이드를 상기 4.4.17에서 결정된 투여량으로 종양(200-300 mm3 종양)이 있는 마우스의 꼬리 정맥에 주사한다. 시기마다 3마리의 마우스를 안락사시키고, 0.5, 1, 2, 4, 6, 24 및 48시간에 이미지화하여, 이미지화의 최적 시기를 결정한다. 대조군으로, 비표지된 펩타이드를 100 배 몰비로, 125I 표지된 펩타이드와 함께 주사하여, 양 물질의 등가를 확인한다.
4.5 재조합 DNA 법
분자생물학의 일반적인 방법은 당업계에 상세히 공지되어 있다 (Sambrook, etal., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd (or later) Edition, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989; Ausube et al., Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 2, Wiley-Interscience, New York, (currentedition); Kriegler, Gene Transfer and Expression : A Laboratory Manual (1990); Glover, DM, editor, DNA Cloning : A Practical Approach, vol. I & II, IRL Press,1985 ; Alberts et al., Molecular Biology of the Cell, 2nd (or later) Ed. , Garland Publishing, Inc. , New York, NY (1989); Watson et al., Recombinant DNA, 2nd (or later) Ed., Scientific American Books, New York, 1992; and Old etal., Principles of Gene Manipulation : An Introduction to Genetic Engineering, 2nd (or later) Ed. , University of California Press, Berkeley, CA(1981)).
별도로 표시하지 않는 경우, 특정 핵산 서열은 그것의 보존성 치환 변이체(예, 축중 코돈 치환)와 상보적인 서열을 포함하는 의도이다. 용어 "핵산"은 "폴리뉴클레오티드"와 동의어이며, 유전자, cDNA 분자, mRNA 분자와 올리고뉴클레오티드 및 나아가 그것의 동등물(하기에 상세히 설명됨)과 같은 이들 모두의 절편을 포함하는 의도이다. 핵산의 크기는 킬로베이스(kb) 또는 베이스쌍(bp) 중 어느 하나로 언급된다. 사용자에 의해 결정되거나 또는 공지된 핵산 서열의 크기는 아가로스 젤 전기영동 또는 폴리아크릴아미드 젤 전기영동(PAGE)으로 추산된다. 단백질 크기는 분자량으로는 킬로달톤(kDa)으로 또는 길이(아미노산 잔기의 수)로서 언급된다. 단백질 크기는 PAGe, 서열분석, 코딩 핵산 서열을 근간으로 하여 추정된 아미노산 서열 또는 공지된 아미노산 서열로부터 추산된다.
특히, 본 발명의 펩타이드 다량체 또는 그것의 활성형의 변이체에 대응되는, 아미노산 서열을 코드화하는 DNA 분자는 중합효소 연쇄반응(PCR)(참조: 미국 특허 제 4,683,202)에 의해 상기 단백질의 서열로부터 유래된 프라이머를 이용하여 합성될 수 있다. 이러한 cDNA 서열은 이후 진핵 발현 벡터 또는 원핵 발현 벡터내로 통합되며, 제조된 벡터는 적절한 숙주 세포, 예컨대 COS 또는 CHO 세포에서 직접적으로 융합 폴리펩타이드나 그것의 절편 또는 유도체를 합성하는데 사용될 수 있다.
본원에서 용어 "핵산"은 이러한 절편 또는 동등물을 포함하는 것으로 의도된다. 본 발명의 핵산 서열은 DNA 또는 RNA 일 수 있다. 상기 다량체를 발현하도록 형질전환 또는 형질전이된 원핵 숙주세포 또는 진핵 숙주세포는 본 발명의 범위에 해당된다. 예를들면, 펩타이드 다량체는 E.coli, 곤충 세포(바큘로바이러스), 효모 또는 중국 헴스터 난소 세포(CHO) 또는 인간 세포(이는 형질전이된 세포의 인간 치료 용도로서 바람직하다)와 같은 포유류 세포에서 발현될 수 있다. 그외 적합한 숙주는 당업자에게 주지되어 있다. 진핵 세포에서의 발현은 재조합 폴리펩타이드의 일부 또는 완전한 당화 및/또는 재조합 폴리펩타이드내 또는 간의 이황화 결합 형성을 유도한다. 효모 S. 세레비지애에서의 발현 벡터의 예로는 pYepSecl (Baldari etal., 1987, EMBO J. 6: 229-234), pMFa(Kurjan et al. 1982 Cell 30: 933-943), pJRY88(Schultz et al., 1987, Gene 54:113-123) 및 pYES2 (Invitrogen Corporation, San Diego, Calif.)가 있다. 배양된 곤충 세포(SF 9 세포)에서의 단백질 발현에 이용가능한 바큘로바이러스 벡터로는, pAc 시리즈(Smith et al., 1983, Mol. Cell Biol. 3:2156-2165)와 pVL 시리즈(Lucklow et al., (1989) Virology 170: 31-39)가 있다. 일반적으로, COS 세포(Gluzman 1981 Cell 23:175-182)는 포유류 세포에서의 일시적인 증폭/발현시 pCDM 8(Aruffoet al., supra)과 같은 벡터와 함께 사용되며, CHO(dhfr-negative CHO) 세포는 포유류 세포에서의 안정적인 증폭/발현시 pMT2PC(Kaufman et al., 1987, EMBO J. 6:187-195)와 같은 벡터와 함께 사용된다. NSO 골수종 세포 주(글루타민 합성효소 발현 시스템)은 셀텍사(Celltech Ltd)로부터 구입가능하다.
목적 코딩 서열 및 대조군 서열을 함유한 적절한 벡터 구축에, 당업계에 공지된 표준적인 삽입 기법 및 제한 기법이 이용된다. 분리된 플라스미드, DNA 서열 또는 합성된 올리고뉴클레오티드는 목적한 형태로 절단되고, 재단되고, 재연결된다. 상기 벡터를 형성하는 DNA 서열은 다수 재료로부터 이용가능하다. 벡본 벡터와 대조군 시스템은 일반적으로 구조체에서 벌크 서열로 이용되는 입수가능한 "숙주" 세포에서 발견된다. 타당한 코딩 서열로, 초기 구축은 cDNA 또는 게놈 DNA 라이브러리로부터 적절한 서열을 검색하는 일일 수 있으며 일반적인 일이다. 그러나, 서열이 개시되면 개개의 핵산 유도체로부터 출발하여 전체 서열을 생체 외에서 합성하는 것이 가능하다. 상당한 길이의, 예컨대 500-1000bp의 유전자에 대한 전체 유전자 서열은, 개개의 중복되는 상보적인 올리고뉴클레오티드를 합성하고, 데옥시리보뉴클레오티드 트리포스페이트 존재하에서 DNA 중합효소를 이용하여 중복되지 않는 부위의 단일 가닥을 충진함으로써 제조될 수 있다. 본 접근은 공지된 몇 종의 유전자의 구축에 성공적으로 이용되고 있다. 참조하면, 예를들어 Edge, Nature 1981, 292:756; Nambair et al., Science 1984, 223:1299 및 Jay, J. Biol. Chem. 1984, 259:6311가 있다.
합성 올리고뉴클레오티드는 상기 언급된 참조문헌에 기재된 포스포트리에스테르 방법이나, 또는 Beaucage et al., Tetrahedron Lett. 1981, 22:1859과 Matteucci et al.,J. Am. Chem. Soc. 1981, 103:3185에 개시된 포스포르아미디트 방법에 의해 제조되며 상업적으로 구입가능한 자동화 올리고뉴클레오티드 합성기로 제조될 수 있다. 어닐링 전이나 또는 표지를 위해 단일 가닥에 키나제 처리를 공지 방법을 이용하여 실시한다.
따라서, 목적한 벡터의 일 성분이 수득가능하면, 이들을 표준 제한 및 연결 공정으로 절단 및 연결할 수 있다. 부위-특이적 DNA 절단은, 적합한 제한 효소(또는 효소)를 당업계에서 인식된 조건에서, 상업적으로 시판되는 제한 효소의 제조사에 의해 상술된 명세서를 이용하여 처리함으로써 실시된다. 참조하며, 예컨대 New England Biolabs, 제품 카다록이 있다. 바람직하기로는, 절단 절편의 크기 분리는 표준적인 방법에 따른 폴리아크릴아미드 젤 또는 아가로스 젤 전기영동으로 수행될 수 있다. 사이즈 분리에 대한 일반적인 설명은 Metli. EizzymoL (1980) 65:499-560에서 확인된다. 변이체가 재조합에 의해 생산되는 경우, 변이체를 생산하기 위하여 코딩 서열내에 돌연변이를 도입하기 위하여, 다수의 모든 방법들이 사용된다 이러한 돌연변이로는 단순한 결실, 단순한 삽입, 조직적인 결손, 염기 크러스터의 삽입 또는 치환, 또는 단일 염기의 치환이 포함된다. DNA 서열의 변경은 부위-유발 돌연변이, 상업적으로 시판되는 시약과 실험방법에 대한 공지 기술에 의해 이루어진다(Zoller et al., Nucleic Acids Res. 1982, 10:6487-6500 and Adelman et al., DNA 1983, 2:183-193). 분리된 DNA는 제한, 및/또는 Sanger, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1977, 74: 5463, Messing, et al., Nucleic Acids Res. 1981, 9:309, 또는 Maxam et al., Meth. Enzymol., supra. 의 디데옥시 뉴클레오티드 방법에 의한 서열분석으로 분석된다.
벡터 DNA는 종래의 칼슘 포스페이트 또는 칼슘 클로라이드 공동-침전, DEAE-덱스트란-매개성 형질전이, 리포펙션 또는 전기자극과 같은 방법을 통하여 포유류 세포내로 도입될 수 있다. 숙주세포를 형질전환하는 적합한 방법은 Sambrook et al. supra 와 그외 공인된 문서에서 발견될 수 있다. 융합 발현 벡터에 있어서, 단백질분해효소에 의한 절단 부위는 리포터 그룹과 표적 단백질의 접촉부위에 도입되어, 리포터 그룹으로부터 표적 단백질을 분리할 수 있으며, 후속적인 융합 단백질 정제가 가능하다. 이러한 절단에 대한 단백질분해효소와 그것의 인식 서열로는 인자 Xa, 트롬빈 및 엔테로키나제가 있다.
4.6 치료학적 용도
본 발명에 따라, 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 혈관신생을 특징으로 하는 질병을 가지는 환자 또는 암 환자, 바람직하게 인간에게 투여된다. 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 암 또는 비정상적 혈관신생을 치료 또는 예방하는데 사용될 수 있다.
바람직하게는, 암은 모든 혈관발달성 암, 바람직하기로는 고형암을 포함하며, 이에 한정되진 않으나, 폐암, 유방암, 난소암, 위암, 췌장암, 후두암, 식도암, 고환암, 간암, 이하선암, 담즙관암, 대장암, 직장암, 경부암, 자궁암, 자궁내막암, 신장암, 방광암, 전립선암, 갑상선암, 편평세포암종, 선암종, 소세포암, 흑색종, 신경교종, 신경아세포종, 육종(예컨대, 임파육종, 연골육종)을 포함한다. 비정상적인 혈관신생의 특징을 갖는 질환으로는, 이에 한정되진 않으나, 관절염, 당뇨병, 동맥경화증, 동정맥기형(arteriovenous malformtaion), 각막 이식 신생혈관증식, 상처 치유 지연, 당뇨성 망막증, 노화성 황반변성(age-related macular degeneration), 과립화(graulation), 화상, 혈우병관절(hemophilic joint), 류마티스성 관절염, 비후성 반흔(hypertrophic scar), 신생혈관증식성 녹내장(neovascular glaucoma), 불유합 골절(nonunion fracture), 오지에르 베버 증후군(Osier Wever syndrome), 건선, 발열성 육아종(pyrogenic granuloma), 미숙아망막증(retrolental fibroplasia), 익사연(pterygium), 경피증(scleroderma), 트라코마(trachoma), 혈관 접착(vascular adhesion), 안 신생혈관증식(ocular neovascularization), 기생병(parasitic disease), 수술후 비대(hypertrophy following surgery), 체모 성장 억제, 황반 변성(습식 및 건식 모두 포함), 류마티스성 관절염 및 골다공증을 포함한다.
또한,본 발명의 화합물 및/또는 그것의 약학적 조성물의 치료학적 유효량을 대상자에게 투여하는 단계를 포함하는, 비정상적인 세포 이동, 침투 또는 증식과 관련된 질병과 증상의 환자를 치료하는 방법을 고려한다. 상기 방법에서, 환자는 암 환자이며, 혈관신생 저해는 암 크기 또는 증식율을 감소시키거나, 암을 파괴한다.
상기 방법이 효과적일 수 있는 질병 또는 증상의 그외 예로는, 고형암, 백혈병 또는 림프종, 암 침투, 암 전이, 암 전이 증식; 양성 과다증식; 죽상경화증(atherosclerosis), 심근 혈관신생; 풍선혈관성형 후 혈관 재협착, 혈관 외상후 수반되는 신생혈관내막 형성, 혈관 이식 재협착, 관상 곁가지 형성, 심한 정맥 혈전증, 허혈성 사지 혈관신생; 모세혈관확장증, 발열성 육아종, 각막 질명, 피부홍조증, 신생혈관 증식성 녹내장, 당뇨병 및 그외 망막병증, 수정체뒤 섬유증식증, 당뇨병성 신생혈관 증식, 반상 변성, 자궁내막증, 관절염, 만성 염증 증상과 관련있는 섬유증, 허혈증을 포함하는 척수의 외상 상처, 흉터형성 또는 섬유증, 폐 섬유증, 화학요법에 의한 섬유증; 흉터 형성 및 섬유증성 상처 치유, 소화궤양, 뼈 골절, 켈로이드 또는 신생혈관증식 장애, 조혈 장애, 배란 장애, 월경 장애, 임신 장애 또는 병원성 세포 침투 또는 혈관신생과 관련된 태반형성 장애가 있다.
상기 방법으로 치료되는 바람직한 질병 또는 증상은, 종양 증식, 종양 침투 또는 종양 전이이고, 바람직하게는 뇌 종양이다. 뇌 종양의 예로는 성상세포종(astrocytoma), 역형성성상세포종(anaplastic astrocytoma), 아교모세포종(glioblastoma), 다형성아교모세포종(glioblastoma multiformae), 털모양성상세포종(pilocytic astrocytoma), 다형태 황색성상세포종(pleiomorphic xanthoastrocytoma), 뇌실막밑 거대 세포 성상세포종(subependymal giant cell astrocytoma), 원섬유성 성상세포종(fibrillary astrocytoma), 팽대세포 성상세포종(gemistocytic astrocytoma), 원형질 성상세포종(protoplasmic astrocytoma), 희소돌기아교세포종(oligodendroglioma), 역형성 희소돌기아교세포종(anaplastic oligodendroglioma), 뇌실막세포종(ependymoma), 역형성 뇌실막세포종(anaplastic ependymoma), 마이소파필러리 뇌실막세포종(myxopapillary ependymoma), 뇌실막밑 세포종(subependymoma), 혼합성 핍지성상세포종(mixed oligoastrocytoma) 및 악성 혼합 핍지성상세포종(malignantoligoastrocytoma)이 있다.
상기 방법은 또한 자궁내막증과 같은 자궁 질환과, 증식성 당뇨망막병증, 신생혈관 노화-관련 반상 변성(neovascular age-related macular degeneration), 미숙망막병증, 겸상 적혈구 망막병증 또는 망막 정맥 폐색과 연관되거나 이의 원인인 병원성 안구 신생혈관증식을 치료하는데 사용될 수 있다.
또한, 일부 양태에서, 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 환자 바람직하게 인간에게 암을 포함한 비정상적 혈관신생을 특징으로 하는 다양한 질병 또는 질환에 대한 예방적 수단으로서 투여된다. 따라서, 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 비정상적인 혈관신생을 특징으로 하는 질병에 걸리기 위한 경향의 환자에 대한 예방적 수단으로 투여된다. 따라서, 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 하나의 질병 또는 장애의 예방 및 동시에 다른 질병의 치료를 위해 사용될 수 있다(예컨대, 암을 치료하면서 관절염 예방).
암과 같은 다양한 질병 또는 장애의 치료 또는 예방에서의 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물의 적합성은 당업계에 알려진 방법에 의하여 결정될 수 있다. 따라서, 당업자는 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물을 분석 및 사용하여 암과 같은 질병 또는 질환을 치료 또는 예방할 수 있을 것이다.
4.7 진단학적 이용 및 방법
본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 환자에, 바람직하게는 사람에게, 상기 5.6에서 나열한 질병을 검출하거나 또는 이미지화할 수 있는 진단학적인 유효량으로 투여된다. 또한 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은, 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물을 진단학적인 유효량으로 대상자에 투여함으로써, 상기 5.6에 나열된 바와 같은 비정상적인 세포 이동, 침투 또는 증식과 연관된 질병 또는 질환을 검출하거나 이미지화하는데 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 진단학적으로 표지될 수 있으며, 예컨대 세포 이동, 세포 침투 및 세포 증식의 검출에 사용될 수 있다. 결합중 또는 결합후에 본 발명의 화합물은 표지물을 검출하기 위하여 적절한 방법에 의해 생체 내 또는 생체 외로 배치될 수 있다. 진단학적으로 표지된 화합물은 진단과 예후를 위해, 예컨대 잠재 전이성 부위를 나타내기 위해, 또는 그외 in situ 실험을 위해 생체내에서 활용될 수 있다. 진단학적인 활용에 있어서, 본 발명의 화합물은 당업계에 공지된, 결합된 링커 모이어티를 포함할 수 있다.
표지된 화합물의 in situ 검출은 환자로부터 조직 시료를 제거하고 이를 표지물을 검출할 수 있는 적합한 조건하에서 현미경 검사를 통하여 실시될 수 있다. 당업자라면 모든 다양한 조직학적 방법을 이러한 in situ 검출을 수행하기 위하여 변경할 수 있음을 쉽게 인지할 것이다.
진단학적인 생체내 방사능 이미지화에 있어서, 이용가능한 검출 기기 타입 선택은 방사핵종 선택에 있어서 주된 인자이다. 선택된 방사핵종은 특정 기기에 의해 검출가능한 붕괴형이어야 한다. 일반적으로, 진단학적 이미지를 가시화하는 기존 방법은, 본 발명에 따라서 활용될 수 있다. 생체 외 진단에 대한 방사핵종을 선택합에 있어서 또 다른 인자는, 표지물이 표적 조직에 의해 최대로 흡수되는 시기를 검출할 수 있을 만큼 그것의 반감기는 충분히 길어야하며, 그러나 숙주에 해로운 조사가 최소될 수 있을만큼 짧아야 한다. 바람직한 일 양태에서, 생체 내 영상화에서 사용된 방사핵종은 입자를 방사하지 않지만 기존의 감마 카메라로 쉽게 검출가능한 다수의 광자를 140 - 200 keV 범위로 생성시킨다.
생체 내 이미지화는 다른 방법으로는 관찰되지 않는 잠재적 전이를 검출하는데 이용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 모든 적절한 세포, 조직, 기관 또는 목적한 동물 종의 생물학적 시료와 함께 진단, 예측 또는 연구 진행에 사용될 수 있다. 용어 "생물학적 시료"는 정상적인 또는 병든 대상자의 신체로부터 유래된 모든 체액 또는 물질, 예컨대 혈액, 혈청, 혈장, 림프, 소변, 침, 눈물, 뇌척수액, 우유, 양수, 담즙, 복수액, 고름 등을 의미한다. 또한 기관 추출물, 조직 추출물 및 대상자로부터 유래된 모든 세포 또는 조직 제조물이 배양된 상태인 배양물은 상기 용어의 의도한 범주내에 포함된다.
유익한 투여량은 특정 진단 측정에 대한 화합물의 유효량으로 정의된다. 즉, 유효량은 적합한 검출 시스템, 예컨대 자기 공명 영상 검출기, 감마 카메라 등을 이용하여 검출되기에 충분한 함량을 의미한다. 검출가능한 최소 함량은, 비특이적으로 결합되거나 또는 혈장 또는 세포외 체액에서 발견되는 표지된 화합물 함량에 대한, 암(신호)에 특이적으로 결합된 표지된 화합물의 비율에 의해 결정될 것이다.
투여되는 조성물의 함량은, 선택된 특정 화합물, 질병 또는 질환, 투여 경로 및 영상 전문가의 판단에 의존적이다. 일반적으로 진단 적용에서 검출가능성이 요구되는 화합물의 함량은, 환자의 나이, 증상, 성별 및 질환 정도, 만약의 경우 금기 및 그외 변수들에 의존적으로 변경될 것이며, 주치의 또는 진단학자에 의해 조정될 수 있다. 투여량은 0.01 mg/kg 내지 100 mg/kg으로 다양할 수 있다.
4.8 치료적/예방적 투여
본 발명의 화합물 및/또는 그 약하적 조성물은 인간 약제로서 유리하게 사용될 수 있다. 상기 4.6에 기재한 바와 같이, 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 암과 같은 다양한 질병 또는 질환의 치료 또는 예방에 유용하다.
상기 질환 또는 질환의 치료 또는 예방을 위하여 사용될 경우, 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 단독으로 또는 다른 제제와 조합 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 단독으로, 또는 본 발명의 다른 화합물을 포함하는 다른 약학적 활성 제제와 조합되어(예컨대, 다른 항-암제, 다른 항-혈관신생제, 아연, 페니실라민, 티오몰리브데이트 등과 같은 다른 킬레이터) 투여 또는 적용될 수 있다.
본 발명은 환자에게 본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 치료 및 예방 방법을 제공한다. 환자는 동물, 보다 바람직하게는 포유류, 가장 바람직하게는 인간이다.
본 발명의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물은 바람직하게 경구 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물은 또한 기타 편리한 경로, 예컨대, 주입 또는 알약 주입, 내피 또는 점막 피부 라이닝(예컨대, 구강 점막, 직장 및 장 점막 등)을 통한 흡수에 의하여 투여될 수 있다. 투여는 전신 또는 국소적일 수 있다. 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물의 투여에 사용될 수 있는 다양한 전달 시스템이 알려져 있다(예컨대, 리포좀, 마이크로입자, 마이크로캡슐, 캡슐내 캡슐화 등). 투여 방법은 이에 한정되지 않으나, 경피, 근육내, 복막내, 정맥내, 피하, 비 내, 경막외, 경구, 설하, 뇌내, 질내, 경피, 직장, 흡입, 또는 특히 귀, 코, 눈 또는 피부에 국소 투여를 포함한다. 바람직한 투여 방식은 주치의의 분별에 따르며, 의학적 상태에 부분적으로 의존할 것이다. 대부분의 경우, 투여는 화합물 및/또는 약학적 조성물의 혈류내 방출을 초래할 것이다.
특정 양태에서, 하나 이상의 화합물 및/또는 약학적 조성물을 처료를 필요로 하는 영역에 투여하는 것이 바람직하다. 이는, 예컨대 수술중 국소 주입, 예컨대 수술후 상처 드레싱과 함께 국소 적용, 주사, 카테터, 좌약, 또는, 시알라스틱 막과 같은 막 또는 섬유를 포함하는 다공성, 비다공성 또는 젤라틴성 물질인 삽입물에 의해 달성될 수 있다. 한 양태에서, 투여는 암 또는 관절염 부위(또는 이전의 부위)에 직접 주입에 의할 수 있다.
일부 양태에서, 하나 이상의 화합물 및/또는 약학적 조성물을 중추신경계로 심실내, 외피내(intrathecal), 및 경막외 주입을 포함하는 임의의 적절한 경로에 의해 도입하는 것이 바람직하다. 심실내 주입은 예컨대 Ommaya 저장소와 같은 저장소에 부착된 심실내 카테터에 의해 촉진될 수 있다.
본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물은 또한 흡입에 의해 폐에 직접 투여될 수 있다. 흡입 투여를 위해, 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물은 편리하게 상이한 기구에 의해 폐에 전달될 수 있다. 예컨대, 적절한 낮은 비등점의 프로펠런트(예컨대, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 카본 다이옥사이드 또는 기타 적절한 가스)를 함유하는 캐니스터를 이용하는 Metered Dose Ingaler(MDI)를 사용하여 본 발명의 화합물을 폐에 직접 전달할 수 있다.
대안적으로, Dry Powder Inhaler(DPI) 기구를 사용하여 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물을 폐에 투여할 수 있다. DPI 기구는 전형적으로 가스 분출과 같은 메커니즘을 사용하여 용기내 건조 파우더를 형성한 후, 이는 환자에 의하여 흡입된다. DPI 기구는 또한 당업계에 주지되어 있다. 일반적인 변형은 복수 투여 DPI(MDDPI)시스템으로, 이는 하나 이상의 치료적 투여의 전달을 허용한다. MDDPI 기구는 AstraZeneca, Glaxo Wellcome, IVAX, Schering Plough, SkyePharma 및 Vectura와 같은 회사로부터 유용가능하다. 예컨대, 흡입기 또는 취입기로 사용하기 위한 젤라틴 캡슐 및 카트리지를 본 발명의 화합물과 락토오스 또는 이들 시스템을 위한 전분과 같은 적절한 파우더 베이스의 파우더 믹스를 함유하도록 제형화될 수 있다.
본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물의 폐로의 절단에 사용될 수 있는 다른 유형의 기구는 액체 스프레이 기구로서, 예컨대 Aradigm Corporation에서 공급된 것이다. 액체 스프레이 시스템은 매우 작은 노즐 구멍을 사용하여 액상 약물 제형을 에어로졸화하며, 이는 폐내로 직접 흡입될 수 있다.
한 양태에서, 분무기를 사용하여 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물을 폐로 전달할 수 있다. 분무기는 액상 약물 제형으로부터 예컨대 초음파 에너지를 사용하여 에어로졸을 창출하여 용이하게 흡입될 수 있는 미세 입자를 형성한다(예컨대, Verschoyle et al., British J. Cancer, 1999, 80, Suppl. 2, 96, 본원에 참조로 통합). 분무기의 예는 Batelle Pulmonary Therapeutics(Columbus, OH)에서 공급된 것을 포함한다(Armer et al., 미국특허 제 5,954,047; van der Linden et al., 미국특허 제 5,950,619; van der Linden et al., 미국특허 제 5,970,974).
다른 양태에서, 일렉트로하이드로다이나믹("EHD") 에어로졸 기구를 사용하여 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물을 폐로 전달 할 수 있다. EHD 에어로졸 기구는 전기 에너지를 사용하여 액상 약물 용액 또는 현탁액을 에어로졸화한다(Noakes et al., 미국특허 제 4,765,539). 상기 제형의 전기화학적 특성은 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물의 EHD 에어로졸 기구로 폐로 전달할 경우의 최적화를 위해 중요한 패러미터이며, 그러한 최적화는 통상 당업자에 의하여 수행된다. EHD 에어로졸 기구는 현존하는 동맥 전달 기술보다 효율적으로 약물을 폐에 전달할 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물은 베시클내에, 특히 리포좀 내에 전달될 수 있다(Langer, 1990, Science, 249:1527-1533; Treat et al., in "Liposomes in the Therapy of Infectious Disease and Cancer," Lopez-Berestein and Fidler(eds.), Liss, New York, pp. 353-365(1989); 일반적으로 "Liposomes in teh Therapy of Infectious Disease and Cancer," Lopez-Berestein and Fidler(eds.), Liss, New York, pp. 353-365(1989)).
다른 양태에서, 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물은 지속 방출 시스템, 바람직하게는 경구 지속 방출 시스템을 통하여 전달될 수 있다. 한 양태에서, 펌프가 사용될 수 있다(Langer, supra; Sefton, 1987. CRC Crit Ref Biomed Eng. 14:201; Saudek et al., 1989, N. Engl. J Med. 321:574).
다른 양태에서, 중합체가 사용될 수 있다(Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise(eds.), CRC Pres., Boca Raton, Florida(1974); "Controlled Drug Bioavailability," Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball(eds.), Wiley , New York(1984); Ranger and Peppas, 1983, J Macromol. Sci. Rev. Macromol Chem. 23:61; Levy et al., 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105 참조). 다른 양태에서, 경구 지속 방출에 중합체를 사용할 수 있다. 바람직한 중합체는 소듐 카복시메틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 및 히드록시에틸셀룰로오스(가장 바람직하게, 히드록시프로필 메틸셀룰로오스)를 포함한다. 다른 바람직한 셀룰로오스 에테르가 기재되어 있다(Alderman, Int. J. Pharm. Tech. & Prod. Mfr., 1984, 5(3) 1-9). 약물 방출에 영향을 미치는 요인은 당업계에 주지되어 있으며, 당업계에 기술되어 있다(Bamba et al., Int. J. Pharma., 1979, 2, 307).
다른 양태에서, 장 코팅된 제제를 경구 지속 방출 투여를 위하여 사용할 수 있다. 바람직한 코팅 재료는 pH-의존 용해도를 가진 (즉, pH-조절 방출) 폴리머, 느린 또는 pH-의존 팽창, 용해 또는 침식 속도를 가진 폴리머(즉, 시간-조절 방출0, 효소에 의해 분해되는 폴리머(즉, 효소-조절 방출) 및 압력 증가에 의해 파괴되는 강한 층을 형성하는 폴리머(즉, 압력-조절 방출)를 포함한다.
다른 양태에서, 삼투 전달 시스템을 경구 지속 방출 투여에 사용할 수 있다(Verma et al., Drug Dev. Ind. Pharm., 2000, 26:695-708). 다른 양태에서, OROSTM 삼투 기구를 경구 지속 방출 전달 기구로 사용할 수 있다(tHEEUWES ET AL., 미국특허 제 3,845,770; Theeuwes et al., 미국특허 제 3,916,899).
다른 양태에서, 조절 방출 시스템을 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물의 표적 근처에 배치할 수 있으며, 이에 따라 단지 약간의 전신 투여가 요구된다(예컨대, Goodson, in "Medical Applications of Controoled Release", supra, vol. 2, pp. 115-138(1984)). 다른 조절 방출 시스템은 Langer, 1990, Science 249:1527-1533에 논의된다.
4.9 약학 조성물
본 발명의 약학적 조성물은 본 발명의 화합물 하나 이상을 치료학적 또는 진단학적 유효량으로 바람직하게는 순수 형태로 적절한 양의 약학적으로 허용되는 비히클과 함께 함유하여, 환자에게 적합한 투여를 위한 형태를 제공한다. 환자에게 투여될 때, 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용되는 비히클은 바람직하게 무균이다. 화합물이 정맥내 투여될 경우 물이 바람직한 비히클이다. 식염수 및 수성 덱스트로오스 및 글리세롤 용액 또한 특히 주입가능한 용액을 위한 액상 비히클로서 사용될 수 있다. 적합한 약학적 비히클은 또한 전분, 글루코오스, 락토오스, 수크로오스, 젤라틴, 말트, 쌀, 밀가루, 초오크, 실리카 겔, 소듐 스테아레이트, 글리세롤 모노스테아레이트, 탈크, 소듐 클로라이드, 건조 스킴 밀크, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등과 같은 부형제를 포함한다. 본 발명의 약학적 조성물은 원한다면 소량의 습윤 또는 에멀젼화제 또는 pH 완충제를 포함할 수 있다. 또한, 보조제, 안정화제, 증점제, 윤활제 및 착색제가 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물을 포함하는 약학적 조성물은 전형적인 혼합, 용해, 과립화, 드레지(dragee) 제조, 동질 혼합물화(levigating), 에멀젼화, 캡슐화, 인트랩(entrapping) 또는 동결건조 과정에 의해 제조될 수 있다. 약학적 조성물은 전형적인 방법으로 본 발명의 화합물의 약학적으로 사용가능한 제제로의 가공을 촉진시키는 하나 이상의 생리학적 허용 담체, 희석제, 부형제 또는 보조제를 사용하여 제형화될 수 있다. 적합한 제형은 선택되는 투여 경로에 의존한다.
본 발명의 약학적 조성물은 용액, 현탁액, 에멀젼, 정제, 필, 펠렛, 캡슐, 액체 함유 캡슐, 파우더, 서방형 제형, 좌약, 에멀젼, 에어로졸, 스프레이, 현탁액 또는 임의의 사용에 적합한 기타 형태를 취할 수 있다. 한 양태에서, 약학적으로 허용되는 비히클은 캡슐이다(예컨대, Grosswald et al., 미국특허 제 5,698,155호). 다른 적합한 약학적 비히클의 예는 당업계에 기술되어 있다(Remington's Pharmaceutical sciences, Philadephia College of Pharmacy and Science, 19th Edition, 1995).
본 발명의 화합물은 국소 투여를 위하여 용액, 겔, 연고, 크림, 현탁액 등 당업계에 공지된 바와 같이 제형화될 수 있다. 제형은 예컨대 피하, 정맥내, 근육내, 외피내, 또는 복막내 주사와 같은 주사, 및 경피, 경점막, 경구 또는 동맥 투여를 위해 고안된 것들을 포함한다. 제형은 점액의 제거를 향상시키거나 점액 점도를 감소시키는 추가 활성제제와 조합하여 제조될 수 있다. 활성 제제는 이에 한정되지 않으나 소듐 채널 차단제, 항생제, N-아세틸 시스테인, 호모시스테인 및 포스포리피드를 포함한다.
한 양태에서, 본 발명의 화합물은 인간에게의 정맥내 투여를 위한 약학적 조성물로서 통상 절차에 따라 제형화된다. 통상, 정맥내 투여를 위한 본 발명의 화합물은 무균 등장 수성 버퍼 내 용액이다. 주사를 위해, 본 발명의 화합물은 수성 용액, 바람직하게 Hnaks' 용액, Ringer's 용액과 같은 생리학적 상용가능한 버퍼, 또는 생리 식염 버퍼내에 제형화될 수 있다. 용액은 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제제를 함유할 수 있다. 필요하다면, 약학적 조성물은 또한 가용화제를 포함할 수 있다. 정맥내 투여용 약학적 조성물은 임의로 리그노카인과 같은 국부 마취제제를 포함하여 주입 부위에서 통증을 완화할 수 있다. 일반적으로, 성분은 앰퓰 또는 사세와 같은 활성화제제의 양을 지시하는 밀폐 용기 내에 예컨대 동결건조된 파우더 또는 물을 함유하지 않은 농축물로서 단위 투여 형태로 개별적으로 또는 혼합되어 공급된다. 본 발명의 화합물이 흡입에 의해 투여될 경우, 이는 예컨대 살균 약학적 등급 물 또는 식염을 함유하는 흡입 용기를 이용하여 분산될 수 있다. 본 발명의 화합물이 주사에 의하여 투여되는 경우, 주사용 살균 수 또는 식염의 앰퓰이 제공되어 성분이 투여 전에 혼합될 수 있다.
경점막 투여를 위해, 침투될 장벽에 적합한 침투제를 제형 내 사용한다. 그러한 침투제는 일반적으로 당업계 공지되어 있다.
경구 전달을 위한 약학적 조성물은 정제, 로젠지, 수성 또는 유성 현탁액, 과립, 파우더, 에멀젼, 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르 형태일 수 있다. 경구 투여 약학적 조성물은 하나 이상의 임의 제제, 예컨대, 프럭토오스, 아스파탐 또는 사카린과 같은 감미제; 페퍼민트, 윈터그린 오일와 같은 향미제; 체리 착색제 및 방부제를 함유하여 약학적으로 맛이 좋은 제제를 제공할 수 있다. 또한, 정제 또는 필 형태의 경우, 조성물은 코팅되어 붕해 및 위장관 내 흡수를 지연시킴으로써 연장된 기간에 걸쳐 지속된 활성을 제공할 수 있다. 삼투 활성 구동 화합물을 둘러싸는 선택적으로 침투가능한 막 또한 본 발명의 경구 투여 화합물에 적합하다. 플랫포옴 내에서, 캡슐을 둘러싸는 환경으로부터의 유체가 작용 화합물에 의하여 흡입되고, 화합물은 팽창하여 제제 또는 제제 조성물을 구멍을 통하여 교체시킨다. 이러한 전달 플랫포옴은 실질적으로 즉시 방출 제형의 스파이크형 프로파일과 대조되는 제로 오더(zero orde) 전달 프로파일을 제공할 수 있다. 시간 지연 물질로 글리세롤 모노스테아레이트 또는 글리세롤 스테아레이트를 사용할 수 있다. 경구 조성물은 만니톨, 락토오스, 전분, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 사카린, 셀룰로오스, 마그네슘 카보네이트 등과 같은 표준 비히클을 포함할 수 있다. 그러한 비히클은 바람직하게 약학 등급이다.
경구 액상 제제, 예컨대 현탁액, 엘릭시르 및 용액을 위하여, 적절한 담체, 부형제 또는 희석제는 물, 식염, 알킬렌글리콜(예컨대, 프로필렌 글리콜), 폴리알킬렌 글리콜(예컨대, 폴리에틸렌 글리콜)오일, 알코올, pH 4 내지 6의 약 산성 버퍼(예컨대, 약 5.0mM 내지 약 50.0mM의 아세테이트, 시트레이트, 아스코르베이트) 등을 포함한다. 부가적으로, 향미제, 방부제, 착색제, 담즙산염, 아실카르니틴 등이 첨가될 수 있다.
구강 투여를 위해, 약학적 조성물은 정제, 로젠지 등 전형적인 방식으로 제형화된 형태를 취할 수 있다.
분무기 및 액상 스프레이 기구 및 EHD 에어로졸 기구 사용에 적합한 액상 약물 제형은 전형적으로 약학적으로 허용되는 비히클과 함께 본 발명의 화합물을 포함한다. 바람직하게, 약학적으로 허용되는 비히클은 알콜, 물, 폴리에틸렌 글리콜 또는 퍼플루오로카본과 같은 액체이다. 임의로, 다른 재료가 첨가되어 본 발명의 화합물의 용액 또는 현탁액의 에어로졸 특성을 변경할 수 있다. 바람직하게, 이러한 재료는 알콜, 글리콜, 폴리글리콜 또는 지방산과 같은 액체이다. 에어로졸 기구내 사용에 적합한 액상 약물 용액 또는 현탁액 제형화를 위한 다른 방법은 당업계에 공지되어 있다(Biesalski, 미국특허 제 5,112,598호; Biesalski, 미국특허 제 5,556,611 호).
본 발명의 화합물은 또한 예컨대 코코아 버퍼 또는 기타 글리세라이와 같은 전형적인 좌약 베이스를 함유하는 좌약 또는 정체 관장(retention enema)과 같은 직장 또는 질 약학적 조성물로 제형화될 수 있다.
상기 기재된 제형 이외에, 본 발명의 화합물은 디포(depot) 제제로서 제형화될 수 있다. 그러한 장기 활성 제형은 삽입(예컨대, 피하 또는 근육내)에 의해 또는 근육내 주사에 의하여 투여될 수 있다. 따라서, 예컨대, 본 발명의 화합물은 적합한 폴리머 또는 소수성 재료(예컨대, 허용가능한 오일 내 에멀젼) 또는 이온 교환 수지, 또는 희박하게 가용성인 유도체, 예컨대 희박하게 가용성인 염과 함께 제형화될 수 있다.
본 발명의 화합물이 산성인 경우, 이는 자유 산, 약학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 수화물로서 상기 제형내 포함될 수 있다. 약학적으로 허용되는 염은 실질적으로 자유 산의 활성을 보유하며, 염기와의 반응에 의해 제조될 수 있으며, 상응하는 자유 산 형태보다 수성 및 기타 양성자성 용매 내에 보다 가용성인 경향이 있다.
4.10 투여량
본 발명의 화합물 또는 그 약학적 조성물은 일반적으로 의도하는 목적을 달성하기에 효과적인 함량으로 사용된다. 암과 같은 질병 또는 질환의 치료 또는 예방을 위해, 화학식 1의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물이 치료학적 유효량으로 투여 또는 적용된다. 암과 같은 질병 또는 질환의 검출을 위해, 화학식 1의 화합물 및/또는 그 약학적 조성물이 진단학적 유효량으로 투여 또는 적용된다.
본원에 개시된 특정 질환 또는 증상의 치료, 예방 또는 검출에 효과적일 본 발명의 화합물의 양은, 상기 질환 또는 증상의 특성에 의존적이며, 당업계에 알려진 표준 임상적 기법에 의해 결정될 수 있다. 또한, 생체 외 또는 생체내 분석을 임의로 사용하여 최적의 투여량 범위의 동정을 보조할 수 있다. 본 발명의 화합물의 투여량은 물론 무엇보다도 처리될 대상, 대상의 무게, 증상의 심각성, 투여 방식 및 주치의의 판단에 의존한다.
예컨대, 투여량은 단일 투여, 복수 적용 또는 조절 방출에 의해 약학적 조성물로 전달될 수 있다. 한 양태에서, 본 발명의 화합물은 경구 서방형 투여에 의해 전달된다. 바람직하게, 이러한 양태에서, 본 발명의 화합물은 1일 2회 투여된다(바람직하게, 1일 1회). 투여는 간헐적으로 반복될 수 있고, 다른 약물과 조합되어 또는 단독으로 제공될 수 있으며, 질병 상태 또는 질환의 효율적인 치료에 요구되는 만큼 지속될 수 있다.
경구 투여를 위하여 적합한 투여량 범위는 약물의 잠재성에 의존하나, 일반적으로 체중 1kg 당 본 발명의 화합물 약 0.001mg 내지 약 200mg이다. 투여량 범위는 당업계에 공지된 방법에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
정맥내(i.v.) 투여를 위해 적합한 투여량 범위는 체중 1kg 당 0.01mg 내지 약 100mg이다. 비 내 투여를 위해 적합한 투여량 범위는 일반적으로 체중 1kg 당 약 0.01mg 내지 약 1mg이다. 좌약은 일반적으로 체중 1kg 당 본 발명의 화합물 약 0.01mg 내지 약 50 mg을 함유하며, 활성성분을 약 0.5 중량% 내지 약 10 중량% 포함한다. 복막내, 근육내, 경피, 피하, 경막외, 설하 또는 뇌내 투여를 위해 권장되는 투여량은 체중 1kg 당 약 0.001mg 내지 약 200mg이다. 효율적인 투여량은 생체 외 또는 동물 모델 테스트 시스템으로부터 유도된 투여량-반응 곡선으로부터 추정될 수 있다. 그러한 동물 모델 및 시스템은 당업계에 공지되어 있다.
본 발명의 화합물은 바람직하게 인간내 사용전에 생체 외 및 생체내 원하는 치료학적, 예방적 도는 진단학적 활성에 대하여 분석된다. 예컨대, 생체 외 분석을 사용하여 본 발명의 특정화합물 또는 본 발명의 화합물의 조합 투여가 암의 치료, 예방 또는 진단에 바람직한지 여부를 결정할 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 동물 모델 시스템을 사용하여 효율적이고 안전한 것으로 입증될 수 있다.
바람직하게, 본 발명의 화합물의 치료학적 유효량은 실질적인 독성을 야기하지 않고 치료학적 잇점을 제공할 것이다. 이와 유사하게 본 발명의 화합물의 진단학적 유효량은 실질적인 독성을 야기하지 않고 진닥학적 잇점을 제공할 것이다. 본 발명의 화합물의 독성은 표준 약학적 절차로 결정할 수 있으며, 당업자에 의하여 용이하게 확인될 수 있다. 독성 및 치료학적 유효의 투여 비율은 치료학적 인덱스이다. 본 발명의 화합물은 바람직하게 질병 및 질환 치료에 있어 특히 높은 치료 인덱스를 보인다. 본 발명의 화합물의 투여량은 바람직하게 독성이 없거나 거의 없는 유효한 치료학적 또는 진단학적 투여량을 포함하는 순환 농도 범위 내이다.
4.11 조합 치료
본 발명의 일부 양태에서, 화합물 및/또는 약학적 조성물은 적어도 하나의 다른 치료 제제와 조합 치료에 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물 및 치료학적 제제는 부가적으로 또는 보다 바람직하게 상승적으로 작용할 수 있다. 일 양태에서, 본 발명의 화합물 또는 약학적 조성물은 본 발명의 화합물과 동일한 약학적 조성물의 일부이거나 다른 약학적 조성물일 수 있는 다른 치료 제제와 함께 투여된다. 다른 양태에서, 본 발명의 화합물의 약학적 조성물은 다른 치료학적 제제의 투여 이전 또는 후에 투여된다.
특히, 바람직한 양태에서, 본 발명의 화합물 및/또는 약학적 조성물은 다른 화학요법 제제(예컨대, 알킬화제(예컨대, 질소 머스타드(예컨대, 시클로포스파미드, 이포스파미드, 메클로레타민, 멜팔렌, 클로르암뷰실, 헥사메틸멜라민, 티오테파), 알킬 술포네이트(예컨대, 부술판), 니트로사우레아스, 트리아진), 항대사산물(예컨대, 엽산 유사체, 피리미딘 유사체(예컨대, 플루오로우라실, 플록스우리딘, 시토신 아라비노사이드 등), 퓨린 유사체(예컨대, 머캅토퓨린, 티오구나인, 펜토스타틴 등), 천연 산물(예컨대, 빈블라스틴, 빈크리트신, 에토포시드, 테르티포시드, 닥티노마이신, 다우노루비신, 독스우루비신, 블레오마이신, 미트르마이신, 미토마이신 C, L-아스파라기나아제, 인터페론 알파), 플라티늄 배위 착물(예컨대, cis-플라티늄, 카르보플라틴 등), 미톡산트론, 히드록시우레아, 프로카르바진, 호로몬 및 길항제(예컨대, 프레드니손, 히드록시프로제스테론 카프로에이트, 메드록시프로제스테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 디에틸스틸베스트롤, 에티닐 에스트라디올, 타목시펜, 테스토스테론 프로피오네이트, 플루옥시메스테론, 플루타미드, 루프로리드 등), 항-혈관신생 제제 또는 억제제(예컨대, 안지오스타틴, 레티노익 액시드 및 파클리탁셀, 에스트라디올 유도체, 티아졸로피리미딘 유도체 등), 세포사멸 유도 제제(예컨대, 세포자살을 억제하는 온코진을 블로킹하는 안티센스 뉴클레오티드, 종양 억제제, TRAIL, TRAIL 폴리펩티드, Fas-관련 팩터 1, 인터루킨-1β-전환 효소, 포스포티로신 억제제, RXR 레티노이드 수용체 아고니스트, 카르보스티릴 유도체 등) 및 킬레이터(페니실라민, 아연, 트리에틴 등)와 함께 조합 사용될 수 있다.
4.12 치료 키트
본 발명은 본 발명의 화합물 또는 약학적 조성물을 포함하는 치료 키트를 제공한다. 상기 치료 키트는 또한 다른 화합물(예컨대, 화학요법 제제, 천연 산물, 호르몬 또는 길항제, 항-혈관신생 제제 또는 억제제, 세포자살 유도 제제 또는 킬레이터) 또는 기타 화합물의 약학적 조성물을 포함할 수 있다.
치료 키트는 본 발명의 화합물 또는 약학적 조성물을 다른 성분(예컨대, 다른 화합물 또는 다른 화합물의 약학적 조성물)과 함께 또는 단독으로 포함하는 단일 용기를 가질 수 있거나, 각각의 성분에 대한 구별된 용기를 가질 수 있다. 바람직하게, 본 발명의 치료 키트는 제2 화합물(바람직하게, 화학요법 제제, 천연 산물, 호르몬 또는 길항제, 항-혈관신생 제제 또는 억제제, 세포자살-유도 제제 또는 킬레이터) 또는 그 약학적 조성물과 조합 사용을 위해 패키징된 본 발명의 화합물 또는 약학적 조성물을 포함한다. 상기 키트의 성분은 미리 혼합될 수 있거나, 각각의 성분은 환자에 투여 이전에 구분된 별개 용기 내에 있을 수 있다.
상기 키트의 성분은 하나 이상의 액체 용액, 바람직하게 수용액, 보다 바람직하게 살균 수용액 내 제공될 수 있다. 상기 키트의 성분은 또한 다른 구분된 용기내 바람직하게 제공되는 적합한 용매의 첨가에 의하여 액체로 전환될 수 있는 고체로서 제공될 수 있다.
치료 키트의 용기는 바이얼, 테스트 관, 플라스크, 병, 주가시 또는 기타 고체 또는 액체를 수용하는 수단일 수 있다. 대개, 하나 이상의 성분이 존재할 경우, 키트는 제2 바이얼 또는 기타 용기를 함유할 것이며, 이는 개별 투여를 허용한다. 상기 키트는 또한 약학적으로 허용되는 액체를 위한 다른 용기를 함유할 수 있다.
바람직하게, 치료 키트는 키트의 성분의 투여를 가능케하는 장치(예컨대, 하나 이상의 바늘, 주사기, 안 드롭퍼, 피펫 등)을 함유할 것이다.
본 발명은 이하 실시예에 의하여 추가로 정의되며, 이들 실시예는 본 발명의 화합물의 제조 및 생물학적 활성 분석 방법에 대하여 상세히 기술한다. 당업자에게 본 발명의 범위로부터 이탈됨이 없이 재료 및 방법에 대한 많은 변형이 가능함은 명백할 것이다.
하기 실시예들에서, 하기 약어는 아래 의미를 갖는다. 약어가 정의되지 않은 경우, 일반적으로 이해되는 의미를 갖는다.
AcCN = 아세토니트릴
Boc = tert-부틸옥시카르보닐
CPM = 분당 카운트수
DMF = N,N-디메틸포름아미드
DMSO = 디메틸설폭사이드
Fmoc = 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐
g = 그램
h = 시간
HBTU = O-벤조트리아졸, N, N, N, N, 테트라메틸 유로니움 헥사플루오로 포스페이트
HBSS = 한'스 완충화된 염 용액
HOBT = N-하이드록시벤소트리아졸
HPLC = 고 압력 액체 트로마코그래피
L = 리터
LC/MS = 액체 크로마토그래피/질량 스펙트로스코피
M = 몰의
min = 분
㎖ = 밀리리터
mmol = 밀리몰
NHS = N-하이드록시숙신이미드
NMM = N-메틸 모르폴린
TFA = 트리플루오로아세틱 산
TIS = 트리이소프로필실란
TLC = 박막 크로마토그래피
㎕ = 마이크로리터
μM = 마이크로몰
v/v = 부피/부피
5. 1 실시예 1: 표준 수지 결합된 아미노산 커플링
링크 아미드 AM 수지(Novabiochem)에 질소 교반 또는 질소 분위기에서 3분간 DMF에 용해된 20 % 피페리딘을 (1 ㎖당 100 mg의 수지로) 처리하고, 반응 혼합물은 여과하였다. 상기 단계를 2회 더 실시하였다. 상기 수지는 DMF로 3회, 메탄올로 3회, 디클로로메탄으로 3회 세척하였다. 보호된 적합한 Fmoc, 트리틸레이트(tritylated) 아미노산(BOC 또는 iVDde를 라이신으로 사용하였고, t-Bu는 티로신으로 사용하였다.)(3 eq), HBTU (3 eq), 및 HOBt(3 eq)를 DMF에 (1 ㎖ 당 100 mg의 수지 비율로) 용해하고, 상기 수지에 첨가한 다음 N-메틸포르폴린(NMM)(6 eq)를 첨가하고 혼합물은 1시간동안 교반하였다. 반응 혼합물은 여과하고 수지는 DMF로 세척하였다. 상기 커플링 단계를 반복한 다음 수지는 DMF로 3회, MeOH로 3회, DCM으로 3회 세척하였다. 상기한 바와 같이, 수지에 DMF에 용해된 20 % 피페라딘을 처리하여 첫번째 아미노산의 Fmoc 기를 제거하였다(각 3x3). 다음의 보호된 적합한 Fmoc, 트리틸레이트(tritylated) 아미노산(3 eq), HBTU(3 eq), 및 HOBt(3 eq)를 DMF에 (1 ㎖ 당 100 mg의 수지 비율로) 용해하고, 상기 수지에 첨가한 다음 N-메틸포르폴린(NMM)(6 eq)를 첨가하고 1시간 동안 혼합물을 교반하였다. 수지 혼합물은 여과하고 수지는 DMF로 3회, MeOH로 3회, DCM으로 3회 세척하였다. 후속 아미노산들은 유사한 방식으로 단일 커플링시켰다. N-말단에 아세틸을 포함하는 펩타이드의 경우, 하기 상업적으로 시판되는 아미노산 들, Ac-Pro-OH(3 eq) 또는 Ac-Tyr-OH(3 eq)를 이용하여, 이들을 HBTU(3 eq), HOBT(3 eq) 및 NMM(6 eq)과 1시간동안 커플링하였다. 그외 모든 실험에서, N-말단의 캡핑(capping)은 수지의 말단 아민과 적합한 산(3 eq), HBTU(3 eq), HOBT(3 eq) 및 NMM(6 eq)와 커플링함으로써 수행하였다. 완전히 조합된 링크 아미드 AM 수지상의 N-캡핑된 펩타이드는 TFA/TIS/물(95 : 2.5 : 2.5, 1 ㎖ 당 100 mg의 수지)을 처리하고, 1시간동안 질소로 교반 또는 질소 분위기하에 두었다. 반응 혼합물을 여과하고, 수지는 TFA/TIS/물로 세척한 다음 디클로로메탄으로 세척하였다. 용매는 진공하에서 제거한 후 잔류물은 에테르로 3회 미분화하였다.
5. 2 실시예 2: 펩타이드 정제
조(crude) 펩타이드를 최소량의 메탄올 및 물에 용해시키거나 또는 글라이셜 아세트 산 몇 방울에 용해시키고, Phenomenex Synergi hydro-RP C18 컬럼(250mm x 21.2 mm)으로 대용량(preparative) 역상 HPLC(Beckman)을 실시하여 정제하였다. 펩타이드는 유속 20 ㎖/min으로 30분간 3 - 100 % B의 농도 구배로 용출시켰으며, 이때 용매A는 0.1% 트리플루오로아세트산을 함유하는 물이고, 용매B는 0.1% 트리플루오로아세트산을 함유하는 아세토니트릴이다. 검출은 220 또는 254 nm에서 하였다. 3 - 100 % B의 농도 구배의 분석용 HPLC(Waters, Phenomenex hydro RP (250mm x 4.6mm over 40 minutes) 분석으로 >95% 순도를 갖는 분획을 모우고, 회전식 증발로 2-4 ㎖로 농축한 다음 동결건조하였다.
5.3 실시예 3: 수지로부터 펩타이드의 절단
수지에 질소 교반하 또는 분위기하에 3분간 DMF(1 ㎖당 100 mg의 수지)상의 2% 하이드로진을 처리하고, 반응 혼합물은 여과하였다. 상기 단계를 5회 더 반복하였다. 수지는 DMF 로 3회, 디클로로메탄으로 3회 세척하였다. 적합한 카르복시 산(4 eq), HBTU(4eq) 및 HOBt(4 eq)을 DMF(1 ㎖ 당 100 mg의 수지)에 용해시키고, 상기 수지에 첨가한 다음, N-메틸모르폴린(8 eq)을 첨가하고 1시간동안 교반하였다. 반응 혼합물은 여과한 다음 수지는 DMF로 3회, 디클로로메탄으로 3회 세척하였다. 수지에 TFA/TIS/물(95 : 2.5 : 2.5, 1 ㎖ 당 100 mg의 수지)을 처리하고, 1시간동안 질소로 교반 또는 질소 분위기하에 두었다. 반응 혼합물을 여과하고, 수지는 TFA/TIS/물로 1회 세척한 다음 디클로로메탄으로 3회 여과하고 여과물을 농축시켰다. 잔류물은 디에틸 에테르로 4회 미분화하였다.
5.4 실시예 4: 펩타이드과 독소루비신의 커플링
적합한 펩타이드(1 eq)과 독소루비신 하이드로클로라이드(0.6 - 0.7 eq)를 DMF(0.05 M)에 용해시키고, HOBt(1.2 eq)과 디이소프로필에틸아민(4 eq)를 상기 붉은 용액에 첨가하였다. 반응 혼합액은 상온에서 5분간 혼합하였고, EDAC(1.2 eq)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합액은 상온에서 17시간동안 교반하고, 용매는 진공하에서 제거하였다.
5. 5 실시예 5: 4-플루오로벤조일-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2 .
본 화합물은 실시예 1 및 2의 공정에 따라 제조하였고, 아미노산 대신 4-플루오로벤조익 산을 사용하였다. 흰색의 솜털같은 고형물(10.4 mg, 19%)을 분리하였다:
5. 6 실시예 6: Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-OH
Wang 수지(397 mg, 1.00 mmol)을 디클로로메탄으로 3회, 메탄올로 3회, 디클로로메탄으로 3회 세척하였다. Fmoc-Asn(trt)-OH(2.40 g, 4.02 mmol)과 디이소프로필카르보디이미드(0.625 ㎖, 4.01 mmol)를 4 ㎖의 디클로로메탄 및 3 ㎖의 DMF에 0℃에서 용해시킨 후 20분간 교반하였다. 디클로로메탄은 진공하에서 제거하고 용액에 3 ㎖의 DMF를 가하고, 소결 유리 깔대기(sintered glass funnel)내에서 용액을 상기 Wang 수지에 첨가하였다. 1 ㎖ DMF내의 DMAP(49 mg, 0.40 mmol)를 수지에 첨가하고, 혼합물은 1시간동안 질소하에서 교반하였다. 혼합물은 여과하고, 수지는 DMF로 3회, 디클로로메탄으로 3회 세척한 다음, 상기한 바와 같이 커플링 공정을 반복 실시하였다. 3개의 아미노산 등가물, HBTU의 3개의 등가물, HOBt의 3개의 등가물, 및 NMM의 6개의 등가물을 이용하여 실시한 Fmoc-Ser(trt)-OH와 Fmoc-His(trt)-OH 커플링을 제외시키고, 아미노산 잔류물을 실시예 1의 공정을 이용하여 첨가하였다. 실시예 2의 공정을 이용하여 펩타이드의 절단 및 정제를 실시하여, 흰색 고형물 282mg(46%)을 83:17의 두가지 화합물의 혼합물로 수득하였다:
5. 7 실시예 7: Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Gly-Gly-Lys(4-플루오로벤조일)-NH 2
트리에틸아민(17㎕, 0.12 mmol)을 DMF 1 ㎖내의 Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Gly-Gly-Lys-NH2(21 mg, 0.024 mmol) 및 4-플루오로벤조일 숙신이미드(6.2 mg, 0.026 mmol) 용액에 첨가하였고, 상온에서 3.5시간 혼합하였다. 반응 혼합물은 농축하고 대용량 HPLC(30분간 3-100% 아세토니트릴-물 농도구배)로 잔여물을 정제하여 흰색 솜털 모양의 고형물 17 mg(71%)을 정제하였다:
5. 8 실시예 8: 5-(& 6-)카르복시플루오레신-δ-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은, Rink 아미드 AM 수지로부터 실시예 1 및 2의 공정에 따라 제조하였으며, 3개의 아미노산 등가물, HBTU의 3개의 등가물, HOBt의 3개의 등가물, 및 NMM의 6개의 등가물을 이용한 Fmoc-Cys(trt)-OH 커플링은 제외하였으며, 반면에 2개의 아미노산 등가물, HBTU의 2개의 등가물, HOBt의 2개의 등가물, 및 NMM의 4개의 등가물을 이용한 Fmoc-Ser(trt)-OH, Fmoc-His(trt)-OH, Fmoc-Pro-OH 및 5-(& 6-)카르복시플루오레신 커플링을 실시하였다. 표제 화합물은 두 화합물의 혼합물인 노란색의 솜털 모양의 고형물(27 mg, 46%)로 분리하였다:
5. 9 실시예 9: Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(4-플루오로벤조일)-NH 2
이 화합물은 C 공정에 따라, Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-Gly-Gly-Lys(ivDde)-Rink 아미드 AM 수지(208 mg, loading of 0.32 mmol/g, 0.067 mmol)로부터 제조하였다. 생성물은 B 공정에 따라 절단 및 정제하여, 흰색의 솜털 모양의 고형물 28 mg(44%)을 표제 화합물로 수득하였다:
5.10 실시예 10: Ac-Tyr-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2 :
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라, Rink 아미드 AM 수지(0.100 mmol)로부터 제조하였다. 표제 화합물(54 mg, 61%)은 흰색의 솜털 모양의 고형물이며, 두 화합물이 3:1 비율인 혼합물로 분리하였다:
5.11 실시예 11: Ac-Tyr-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라, Rink 아미드 AM 수지(0.100 mmol)로부터 제조하였다. 표제 화합물(51 mg, 52%)은 흰색의 솜털 모양의 고형물이며 두 화합물이 73:27 비율인 혼합물로 분리하였다:
5.12 실시예 12: Ac-Tyr-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라, Rink 아미드 AM 수지(0.100 mmol)로부터 제조하였다. 표제 화합물(37 mg, 33%)은 흰색의 솜털 모양의 고형물이며 두 화합물이 63:37 비율인 혼합물로 분리하였다:
5.13 실시예 13: Ac-Tyr-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라, Rink 아미드 AM 수지(0.100 mmol)로부터 제조하였다. 표제 화합물(37 mg, 33%)은 흰색의 솜털 모양의 고형물이며 두 화합물이 63:37 비율인 혼합물로 분리하였다:
5.14 실시예 14: Ac-Tyr-NH-(CH 2 ) 4 -CO-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라, Rink 아미드 AM 수지(0.103 mmol)로부터 제조하였다. 표제 화합물(53 mg, 60%)은 흰색의 솜털 모양의 고형물이며 두 화합물이 66:34 비율인 혼합물로 분리하였다:
5.15 실시예 15: 3-(4-하이드록시페닐)프로피오닐-NH-(CH 2 ) 4 -CO-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라, Rink 아미드 AM 수지(0.103 mmol)로부터 제조하였다. 표제 화합물(50 mg, 60%)은 흰색의 솜털 모양의 고형물이며 두 화합물이 7:3 비율인 혼합물로 분리하였다:
5.16 실시예 16: Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Dox
이 화합물은 실시예 4의 공정에 따라 Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-OH(62 mg, 0.10 mmol)과 독소루비신 하이드로클로라이드(37 mg, 0.063 mmol)로부터 제조하였다. 결과물을 실시예 2의 공정에 따라 정제하였고, 오렌지 색의 솜털 모양의 표제 화합물(28 mg, 39%)을 수득하였다:
5.17 실시예 17: Ac-Pro-His-Ser-Cys(Ac)-Asn-Dox
이 화합물은 실시예 3의 공정에 따라 Ac-Pro-His-Ser-Cys(Ac)-Asn-OH(52 mg, 0.081 mmol)과 독소루비신 하이드로클로라이드(33 mg, 0.057 mmol)로부터 제조하였다. 결과물을 실시예 2의 공정에 따라 정제하였고, 오렌지 색의 솜털 모양의 표제 화합물(36 mg, 54%)을 수득하였다:
5.18 실시예 18: Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Gly-Gly-Lys(CO-(CH 2 ) 3 -CO-Dox)-NH 2
Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Gly-Gly-Lys-NH2(74 mg, 0.087 mmol)과 Fmoc- Dox-헤미글루타레이트(70% 순도, 74 mg, 0.059 mmol)을 상온에서 3 ㎖의 DMF에 용해시켰다. HOBt(14 mg, 0.11 mmol)과 디이소프로필에틸아민(60 ㎕, 0.34 mmol)을 상기 붉은 용액에 첨가하고, 5분간 혼합하였다. 상기 반응 혼합물에 EDAC(21 mg, 0.11 mmol)을 첨가하고 18시간 혼합하였다. 용매는 진공하에서 제거하고, 결과물 붉은 오일은 에틸 아세테이트로 3회 미분화하여 붉은 고형물을 수득하였다. 상기 붉은 고형물을 5 ㎖의 DMF 및 500 ㎕의 피페리딘에 용해시켰다. 상기 반응 혼합물은 얼음 조에서 0℃까지 냉각시키고, 여기에 450 ㎕의 TFA, 1.05 ㎖의 피리딘 및 3 ㎖의 DMF 혼합액을 가하였다. 5분 후, 상긱 용매는 진공하에서 제거하고, 잔여물은 에틸 아세테이트에서 3회, 디에틸 에테르에서 1회 미분화하여 붉은 고형물을 수득하였다. 상기 생성물은 실시예 2에 따라 정제하여, 표제 화합물(14mg, 16%)인 솜털 모양의 오렌지를 띤 고형물을 수득하였다: ES MS m/z (M+H)+ 1493.8.
5.19 실시예 19: 2-플루오로아세틸-δ-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라, Rink 아미드 AM 수지(0.111 mmol)로부터 제조하였다. 표제 화합물(30 mg, 40%)은 흰색의 솜털 모양의 고형물이며 두 화합물이 7:3 비율인 혼합물로 분리하였다:
5.20 실시예 20: Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys (2-플루오로아세틸)-NH 2
이 화합물은 실시예 3에 따라, Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn (trt)-Gly-Gly-Lys(ivDde)-Rink 아미드 AM 수지(317 mg, loading of 0.32 mmol/g, 0.101 mmol)로부터 제조하였다. 생성물은 실시예 2에 따라 정제하여 흰색의 솜털 모양인 21 mg(23%)의 표제 화합물을 수득하였다:
5.21 실시예 21: Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(8-[(4'-플루오로벤질)아미노]서베로일)-NH 2
이 화합물은, 실시예 3에 따라, Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn (trt)-Gly-Gly-Lys(ivDde)-Rink 아미드 AM 수지(312 mg, loading of 0.32 mmol/g, 0.0997 mmol)로부터 제조하였다. 생성물은 실시예 2에 따라 정제하여, 솜털 모양의 흰색 고형물로, PLG-107 3.9 mg(11%)을 수득하였다: ES MS m/z (M+H)+ 1104.0.
5.22 실시예 22: Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-β-Ala-Lys(3-(4-하이드록시페닐)프로피오닐)-NH 2
실시예 1에 따라, Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-β-Ala-Lys(ivDde)를 Rink 아미드 AM 수지(0.100 mmol)상에서 제조하였으나, 수지로부터 절단 공정은 실시하지 않았다. 표제 화합물은 실시예 3에 따라 수지 결합된 펩타이드로부터 제조하였다. 조 생성물은 실시예 2에 따라 정제하여, 39 mg (41%)의 표제 화합물을 솜털 모양의 흰색 고형물로 수득하였다:
5.23 실시예 23: Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH-(CH 2 ) 4 -CO-Lys(3-(4-하이드록시페닐)프로피오닐)-NH 2
Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-NH-(CH2)4-CO-Lys(ivDde)를 실시예 1에 따라, Rink 아미드 AM 수지(0.100 mmol)상에서 제조하였으며, 수지로부터 절단하진 않았다. 표제 화합물은 실시예 3에 따라 수지에 결합된 펩타이드로부터 제조하였다. 조 생성물은 실시예 2에 따라 정제하여, 34 mg (35%)의 표제 화합물을 솜털 모양의 흰색 고형물로 수득하였다:
5.24 실시예 24: Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH-(CH 2 ) 6 -CO-Lys(3-(4- 하이드록시페닐)프로피오닐)-NH 2
Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-NH-(CH2)6-CO-Lys(ivDde)를 실시예 1에 따라, Rink 아미드 AM 수지(0.100 mmol)상에서 제조하였으며, 수지로부터 절단하진 않았다. 표제 화합물은 실시예 3에 따라 수지에 결합된 펩타이드로부터 제조하였다. 조 생성물은 실시예 2에 따라 정제하여, 29 mg (29%)의 표제 화합물을 솜털 모양의 흰색 고형물로 수득하였다:
5.25 실시예 25: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Tyr(3-요오도)-NH 2
본 화합물은 실시예 1과 2의 공정에 따라 제조하여, 표제 화합물(32.9 mg, 16%)을 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.26 실시예 26: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Tyr(3, 5-디요오도)-NH 2
본 화합물은 실시예 1과 2의 공정에 따라 제조하여, 표제 화합물(25.0 mg, 11 %)을 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.27 실시예 27: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys(메틸)-Asn-Gly-Gly-Lys-NH 2
본 화합물은 실시예 1의 공정에 따라 제조하여, 표제 화합물(151.2 mg, 44%)을 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.28 실시예 28: 3-(4-하이드록시페닐)프로피오닐-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 커플링은 N-숙신이미딜-3-(4-하이드록시페닐)프로피오닐(4.0 eq)과 TEA (12.0 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(43.0 mg,38%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두 종이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.29 실시예 29: 아세틸-Tyr(3, 5-디요오도)-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
본 화합물은 실시예 1 및 2의 공정에 따라 제조하여, 표제 화합물(48.8 mg, 29 %)을 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.30 실시예 30: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-βAla-Tyr(3-요오도)-NH 2
본 화합물은 실시예 1 및 2의 공정에 따라 제조하여, 표제 화합물(8.1 mg, 6 %)을 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두 가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.31 실시예 31: 3-(4-하이드록시-3,5-디요오도페닐)프로피오닐-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 커플링은 3-(4-하이드록시페닐)프로피오닉 산(3.0 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(23.9 mg, 23 %)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.32 실시예 32: 아세틸-Tyr(3,5-디요오도)-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: Fmoc-β-Ala-OH 및 아세틸-Tyr(3,5-디요오도)-OH로 단일 커플링을 수행하였다. 표제 화합물(55.0 mg, 51 %)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.33 실시예 33: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-β-Ala-Tyr(3,5-디요오도)-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: 단일 커플링은 각 아미노산으로 수행하였다. 표제 화합물(14.5 mg, 9 %)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.34 실시예 34: 아세틸-Tyr(3-요오도)-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: 최종 아미노산 커플링은 Ac-Tyr(3-요오도)-OH(4 eq), HBTU(4 eq), HOBT(4 eq) 및 NMM(8 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(7.7 mg, 16%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 75:25 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5. 35 실시예 35: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(3-(4-하이드록시-3,4-디요오도페닐)프로피오닐)-NH 2
이 화합물은 실시예 3 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: 라이신상의 아미드 형성은 3-(4-하이드록시-3,4-디요오도페닐)프로피오닉 산(4 eq), HBTU (4 eq), HOBT (4 eq) 및 NMM (8 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(16.2 mg,13%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 75:25 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.36 실시예 36: 3-(4-하이드록시-3,5-디요오도페닐)프로피오닐-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 캡핑은 3-(4-하이드록시-3,4-디요오도페닐)프로피오닉 산(4 eq), HBTU (4 eq), HOBT (4 eq) 및 NMM (8 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(23.3 mg, 32 %)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.37 실시예 37: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys (5- 및 6- 카르복시플루오레신)-NH 2
이 화합물은 실시예 2 및 3의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: 라이신상의 아미드 형성은, 5-(및 6)카르복시플루오레신(3 eq), HBTU(3 eq), HOBT (3 eq) 및 NMM (6 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(10.5 mg, 18%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 이성체의 혼합물임을 나타낸다:
5.38 실시예 38: (3-(4-하이드록시페닐) 프로피오닐)-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 캡핑은 3-(4-하이드록시-3,4-디요오도페닐)프로피오닉 산(3 eq), HBTU (3 eq), HOBT (3 eq) 및 NMM (6 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(24.2 mg, 30 %)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.39 실시예 39: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(3-(4-하이드록시페닐)프로피오닐)-NH 2
이 화합물은 실시예 2 및 3의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: 라이신상의 아미드 형성은 3-(4-하이드록시-3,4-디요오도페닐)프로피오닉 산(4 eq), HBTU (4 eq), HOBT (4 eq) 및 NMM (8 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(16.2 mg, 13%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 75:25로 되었음을 나타낸다:
5.40 실시예 40: (3-(4-하이드록시페닐) 프로피오닐)-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 2 및 3의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 캡핑은 3-(4-하이드록시-3,4-디요오도페닐)프로피오닉 산(3 eq), HBTU (3 eq), HOBT (3 eq) 및 NMM (6 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(27.3 mg, 29%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.41 실시예 41: (3-(4-하이드록시페닐) 프로피오닐)-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 캡핑은 3-(4-하이드록시-3,4-디요오도페닐)프로피오닉 산(3 eq), HBTU (3 eq), HOBT (3 eq) 및 NMM (6 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(17.1 mg, 16%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 70:30 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.42 실시예 42: (3-(4-하이드록시페닐)프로피오닐)-Ahp-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 캡핑은 3-(4-하이드록시-3,4-디요오도페닐)프로피오닉 산(3 eq), HBTU (3 eq), HOBT (3 eq) 및 NMM (6 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(47.4 mg, 57%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 70:30 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.43 실시예 43: Ac-Tyr-Ahp-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: 최종 아미노산 커플링은 Ac-Tyr(3-요오도)-OH(3 eq), HBTU(3 eq), HOBT(3 eq) 및 NMM(6 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(40.9 mg, 46%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.44 실시예 44: DOTA-In-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: 최종 아미노산 커플링은, DOTA-트리스(t-부틸 에스테르)(3 eq), HBTU(3 eq), HOBT(3 eq) 및 NMM(6 eq)으로 수행하였다. 펩타이드를 정제하기 위해, 0.1M AcOH(aq.)(0.5 ㎖)내의 DOTA 화합물(22.0 mg, 0.022 mmol)을 0.2M HCl(aq.) 1.0 ㎖내에 용해된 인디움 클로라이드(48.6 mg, 0.22 mmol)에 첨가하였고, 2시간동안 혼합하였다. 실시예 2에 따라 화합물을 정제하였다. 표제 화합물(40.9 mg, 46%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 세가지 물질이 70:20:10 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5. 45 실시예 45: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Lys-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라 제조하였다. 표제 화합물(15.4 mg, 10%)은 흰색의 미세 분말로 분리하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 75:25로 혼합되었음을 나타낸다:
5.46 실시예 46: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Ava-Tyr-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라 제조하였다. 표제 화합물(56.5 mg, 44%)은 흰색의 미세 분말로 분리하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 75:25로 혼합되었음을 나타낸다:
5.47 실시예 47: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Ahp-Tyr-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2에 따라 제조하였다. 표제 화합물(49.5 mg, 37 %)은 흰색의 미세 분말로 분리하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 80:20으로 혼합되었음을 나타낸다:
5.48 실시예 48: 3-(4-하이드록시페닐)프로피오닐-bAla-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 캡핑은 3-(4-하이드록시-3,4-디요오도페닐)프로피오닉 산(3 eq), HBTU (3 eq), HOBT (3 eq) 및 NMM (6 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(61.1 mg, 53%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 75:25 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.49 실시예 49: 8-(4-플루오로베질아미노)서베로일-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 캡핑은 8-(4-플루오로벤질아미노)서베릭 산(3 eq), HBTU (3 eq), HOBT (3 eq) 및 NMM (6 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(70.8 mg, 53 %)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다. NMR 결과는 두가지 물질이 70:30 비율로 혼합되어 있음을 나타낸다:
5.50 실시예 50: m-dPEG-β-Ala-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
이 화합물은 실시예 1 및 2의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: N-말단의 캡핑은 NHS-m-dPEGTM(Quanta Biodesign, 1.9 eq)과 TEA (9 eq)으로 수행하였다. 표제 화합물(38 mg, 21%)은 미세한 흰색 분말로 수득하였다:
5.51 실시예 51: DTPA의 PHSCN와의 접합
무수화 DMF(2 ㎖)내의 수지(Rink Amide AM resin)에 결합한 PHSCN(143mg, 0.36mmol/g, 0.051 mmol), p-SCN-벤질 DTPA(66mg, 0.103mmol), NNM(120㎕, 2.1mmol) 용액을 7시간동안 상온에서 질소하에서 서서히 혼합하고, 반응 혼합물은 여과한 다음 DMF로 1회 세척하였다. 상기 단계는 2회 더 실시하였다. 수지는 DMF로 3회, 메탄올로 3회, 디클로로메탄으로 3회 세척하였다. 수득한 수지에 결합한 화합물에 TFA/TIS/물(95: 2.5 : 2.5, 1 ㎖ 당 100 mg의 수지)를 처리하고 1시간동안 질소하에서 혼합하였다. 반응 혼합물은 여과한 다음 수지를 TFA/TIS/물로 1회, 디클로로메탄으로 3회 세척하였다. 용매는 진공하에서 제거하고, 잔여물은 에테르로 미분화하였다. 수득된 흰색 분말은 실시예 2에 따라 prep HPLC를 실시하여, 생성물 15.5 mg (0.014mmol, 27.7%)을 얻었다:
5.52 실시예 52: DTPA-PHSCN에 대한 In3 + 킬레이션
DTPA-PHSCN(20mg, 0.018mmol)를 1 ㎖의 O.lM AcOH(aq) 용액에 용해시키고, InCl3(40mg, 0.18mmol)은 2 ㎖의 0.02M HCl 용액에 용해하였다. 두 용액을 혼합하여 상온에서 1시간 방치하였다. 용매는 감압하에서 증발시켜, 수득한 흰색 분말은 실시예 2에 따라 prep HPLC로 정제하여 생성물 7.1 mg(0.00588mmol, 32.6%)을 얻었다:
5.53 실시예 53: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Gly-Gly-Lys-NH 2
본 화합물은 실시예 1 및 2의 공정에 따라 Rink 아미드 AM 수지산에서 제조하였다. 표제 화합물(101 mg, 70%)은 흰색을 띄는 미세 분말로 분리하였다;
5.54 실시예 54: 아세틸-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(프로토포르피린)-NH 2
이 화합물은 실시예 2 및 3의 공정과 하기 수정된 공정에 따라 제조하였다: 라이신 상의 ivDde의 탈보호를 위한 2% 하이드라진 처리를 10회 반복하였고, 프로토프로피린 IX(2 eq), PyBOP(2 eq) 및 NMM(6 eq)로 라이신상에 아미드를 형성시켰다. 표제 화합물(7.6 mg, 5.49 μM, 8.6%)를 진한 붉은색 미세 분말로 수득하였다: MS m/z (C67H85N17O14S+H)+1385.6
5.55 실시예 55: Ac-Tyr-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH 2
본 화합물은 실시예 1 및 2의 공정에 따라 Rink 아미드 AM 수지상에서 제조하였고, 솜털 모양의 흰색을 띄는 고형물로 분리하였다: ES MS m/z (M+H)+832, (M+Na)+854.
5.56 실시예 56: Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-β-Ala-Tyr-NH 2
본 화합물은 실시예 1 및 2의 공정에 따라 Rink 아미드 AM 수지상에서 제조하였고, 솜털 모양의 흰색을 띄는 고형물로 분리하였다; ES MS m/z (M+H)+832, (M+Na)+854.
5.57 실시예 57: Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys-NH 2
본 화합물은 실시예 1 및 2의 공정에 따라 Rink 아미드 AM 수지상에서 제조하였고, 솜털 모양의 흰색을 띄는 고형물로 분리하였다: ES MS m/z (M+H)+ 840
5.58 실시예 58: Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(비오틴)-NH 2
본 화합물은 실시예 1 및 2의 공정에 따라 Rink 아미드 AM 수지상에서 제조하였고, 솜털 모양의 흰색을 띄는 고형물로 분리하였다: ES MS m/z (M+H)+1066.5.
끝으로, 본 발명을 수행하기 위한 다른 다양한 방법들이 존재한다는 것을 유의해야 한다. 따라서, 본 발명의 실시예는 본 발명을 보다 상세하게 하기 위한 것일뿐, 본 발명을 제한하지 않으며, 특허청구범위 및 특허청구범위의 동가 내에서 변형될 수 있다. 본 명세서에 인용된 출판물 및 특허는 참조 문헌으로서 본 명세서에 원용된다.
SEQUENCE LISTING <110> Attenuon, LLC. <120> Peptides Which Target Tumor and Endothelial Cells, Compositons and Uses Thereof <130> ATTE005/00WO <140> PCT/US03/37895 <141> 2003-11-25 <160> 54 <170> PatentIn version 3.2 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> MISC_FEATURE <223> Ac-Pro Asn-NH2 <400> 1 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 2 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> MISC_FEATURE <223> 4-Flurobenzol-Pro Asn-NH2 <400> 2 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 3 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> MISC_FEATURE <223> Ac-Pro Cye(Me) Asn-OH <400> 3 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> MISC_FEATURE <223> Ac-Pro Cys(Me) Lys(4-fluorobenzoyl)-NH2 <400> 4 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 5 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> MISC_FEATURE <223> 5-(&6-)Carboxyfluorescein-beta-Ala Asn-NH2 <400> 5 Ala Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> MISC_FEATURE <223> Ac-Pro Lys(4-fluorobenzoyl)-NH2 <400> 6 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 7 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> MISC_FEATURE <223> Ac-Tyr Asn-NH2 <400> 7 Tyr Gly Gly Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 8 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Tyr Asn-NH2 <400> 8 Tyr Gly Gly Gly Gly Pro His Ser Cys Asn 1 5 10 <210> 9 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Tyr Asn-NH2 <400> 9 Tyr Gly Gly Gly Gly Gly Gly Pro His Ser Cys Asn 1 5 10 <210> 10 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> MISC_FEATURE <223> Ac-Tyr NH-(CH2)4-CO-Pro Asn-NH2 <400> 10 Tyr Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 11 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> 3-(4-Hydroxyphenyl)propionyl-NH-(CH2)4-CO-Pro Asn-NH2 <400> 11 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 12 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Cys(Me) Asn-Dox <400> 12 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 13 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Cys(Ac) Asn-Dox <400> 13 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 14 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Cys(Me) Lys(CO-(CH2)3-CO-Dox)-NH2 <400> 14 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 15 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> 2-Fluoroacetyl-beta-Ala Asn-NH2 <400> 15 Ala Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 16 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Lys(2-fluoroacetyl)-NH2 <400> 16 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 17 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Lys(8-4'fluorobenzyl)amino]suberoyl)-NH2 <400> 17 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 18 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Asn-Beta-Ala Lys(3-(4-hydroxyphenyl)propionyl)-NH2 <400> 18 Pro His Ser Cys Asn Ala Lys 1 5 <210> 19 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Asn-NH-(CH2)4-CO Lys(3-(4-hydroxphenyl)propionyl)-NH2 <400> 19 Pro His Ser Cys Asn Lys 1 5 <210> 20 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Asn-NH-(CH2)6-CO Lys(3-(4-hydroxyphenyl)propionyl)-NH2 <400> 20 Pro His Ser Cys Asn Lys 1 5 <210> 21 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro Tyr-(3-iodo)-NH2 <400> 21 Pro His Ser Cys Asn Tyr 1 5 <210> 22 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Aceyl-Pro Tyr(3,5-diiodo)NH2 <400> 22 Pro His Ser Cys Asn Thr 1 5 <210> 23 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro Cys-(methyl) Lys-NH2 <400> 23 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 24 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> 3-(4hydroxyphenyl)propionyl-Pro Asn-NH2 <400> 24 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 25 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Tyr(3,5-diiodo) Asn-NH2 <400> 25 Tyr Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 26 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro betaAla Tyr(3-iodo)-NH2 <400> 26 Pro His Ser Cys Asn Ala Tyr 1 5 <210> 27 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> 3-(4-Hydroxy-3,5-diiodophenyl)propionyl-Pro Asn-NH2 <400> 27 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 28 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Tyr(3,5-diiodo)-beta-Ala Asn-NH2 <400> 28 Tyr Ala Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 29 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro Asn-beta-Ala Tyr(3,5-diiodo)-NH2 <400> 29 Pro His Ser Cys Asn Ala Tyr 1 5 <210> 30 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Tyr(3-iodo) Asn-NH2 <400> 30 Tyr Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 31 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro Lys(3-(4-hydroxy-3,4-diidophenyl)propionyl)-NH2 <400> 31 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 32 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> 3-(4-Hydroxy-3,5-diiodophenyl)propionyl-beta-Ala Asn-NH2 <400> 32 Ala Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 33 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro Lys(5-and 6-carboxyflurescein)-NH2 <400> 33 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 34 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> (3-4-hydroxyphenyl)propionyl)-Gly Asn-NH2 <400> 34 Gly Gly Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 35 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> acetyl-Pro Lys(3-4-hydroxyphenyl)propionyl)-NH2 <400> 35 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Leu 1 5 <210> 36 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> (3-(4-Hydroxyphenyl)-Gly Asn-NH2 <400> 36 Gly Gly Gly Gly Gly Pro His Ser Cys Asn 1 5 10 <210> 37 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> (3-(4-Hydroxyphenyl)propionyl)-Gly Asn-NH2 <400> 37 Gly Gly Gly Gly Gly Gly Pro His Ser Cys Asn 1 5 10 <210> 38 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> (3-(4-Hydroxyphenyl)propionyl)-7aminoheptanoic-Pro Asn-NH2 <400> 38 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 39 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Tyr 7-aminohepatanoic acid-Pro Asn-NH2 <400> 39 Tyr Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 40 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> DOTA-In-beta-Ala Asn-NH2 <400> 40 Ala Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 41 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro Lys-NH2 <400> 41 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Gly Gly Gly Gly Lys 1 5 10 <210> 42 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro 5-aminovaleric acid=Tyr <400> 42 Pro His Ser Cys Asn Tyr 1 5 <210> 43 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro Tyr-NH2 <400> 43 Pro His Ser Cys Asn Tyr 1 5 <210> 44 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> 3-(4-hydrpoxphenyl)propionyl-beta-Ala Asn-NH2 <400> 44 Ala Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 45 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> 8-(4-Fluorobenzylamino)suberoyl-beta-Ala Asn-NH2 <400> 45 Ala Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 46 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> m-dPEG-beta-Ala <400> 46 Ala His Ser Cys Asn 1 5 <210> 47 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> MISC_FEATURE <223> DTPA conjugation <400> 47 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 48 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> IN3+ chealtion to DTPA <400> 48 Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 49 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro Lys-NH2 <400> 49 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Gly Gly Lys 1 5 10 <210> 50 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Acetyl-Pro Lys(Protoporhyrin)-NH2 <400> 50 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 51 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Tyr beta-Ala Asn-NH2 <400> 51 Tyr Ala Pro His Ser Cys Asn 1 5 <210> 52 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro beta-Ala Tyr-NH2 <400> 52 Pro His Ser Cys Asn Ala Thr 1 5 <210> 53 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Lys-NH2 <400> 53 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 54 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> peptide analogs <220> <221> misc_feature <223> Ac-Pro Lys(biotin)-NH2 <400> 54 Pro His Ser Cys Asn Gly Gly Lys 1 5

Claims (74)

  1. 하기 화학식 1의 화합물, 또는
    그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물:
    (화학식 1)
    상기 화학식 1에서,
    j 및 k는 독립적으로 0 또는 1이고;
    p 및 q는 독립적으로 0 내지 100의 정수이고;
    r 및 s는 독립적으로 0 또는 1이고;
    R1은 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노 또는 치환된 이미노이고;
    R2는 1개 이상의 수소 원자가 -NR6R7, -OR8, -CO2R9, -S(O)zRl0, -P(OR11)OR12, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
    R6, R7, R8, R9, R10, Rll 및 R12는 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X1은 -NH(C=C)gCO-,-NH(CH2)hCO- 또는 -NHCH(CH3)CO-이고;
    g 및 h는 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고;
    X2는 , 또는 이고;
    X3은 이고;
    X4는 또는 이고;
    l은 1 내지 4의 정수이고;
    X5는 이고;
    R13은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아실, 치환된 아실, 아릴알킬, 치환된 아릴알킬, 아릴, 치환된 아릴 또는 -S(O)xR14이고;
    n은 1 내지 5의 정수이고;
    R14는 알킬, 치환된 알킬, 아실, 치환된 아실, 아릴알킬, 치환된 아릴알킬, 아릴 또는 치환된 아릴이고;
    y 및 x는 독립적으로 0, 1 또는 2이고
    X6은 이고;
    m은 1, 2, 3 또는 4의 정수이고;
    X7은 -NH(C=C)dCO-, -NH(CH2)eCO- 또는 -NHCH(CH3)CO-이고;
    d 및 e는 각각 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고;
    R3은 1개 이상의 수소 원자가 -NR15R16, -OR17, -CO2R18, -S(O)nRl9, -P(OR20)OR21, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
    R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소, 알킬 또는 치환된 알킬이고;
    R15, R16, R17, R18, R19, R20 및 R21은 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R4 및 R5가 수소이고 r 및 s가 0일때, R1은 아세틸이 아니다.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 R4와 R5가 수소인 경우 R1은 아세틸이 아닌 것을 특징으로 하는 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 r 또는 s 중 1종 이상은 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  4. 제 1항에 있어서, s는 1이고, r은 0인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  5. 제 1항에 있어서, s는 0이고 r은 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  6. 제 1항에 있어서, R1은 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 이미노 또는 치환된 이미노인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  7. 제 1항에 있어서, R2는 1개 이상의 수소 원자가 -NR6R7, -OR8 및 -CO2R9, 로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  8. 제 7항에 있어서, R6, R7, R8 및 R9는 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 아미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  9. 제 1항에 있어서, X1은 -NH(CH2)hCO-인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  10. 제 1항에 있어서, R3은 1개 이상의 수소 원자가 -NR15R16, -OR17 및 -CO2R18로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  11. 제 1항에 있어서, R15, R16, R17 및 R18은 각각 독립적으로 수소, 아실, 치환된 아실, 아실 킬레이트, 이미노 및 치환된 이미노로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  12. 제 1항에 있어서,
    R1은 아실 또는 치환된 아실이고;
    R2는 1개 이상의 수소 원자가 -NR6R7, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 4의 알킬이고;
    R6 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 아실 및 치환된 아실로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X1은 -NH(CH2)hCO-이고;
    X2는 이고;
    X4는 이고;
    X5는 이고;
    R13은 수소, 아실, 치환된 아실, 알킬 또는 치환된 알킬이고;
    X6은 이고;
    X7은 -NH(CH2)eCO-이고;
    R3은 1개 이상의 수소 원자가 -NR15R16, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 4의 알킬이고;
    R15 및 R16은 각각 독립적으로 수소, 아실 및 치환된 아실로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R4 및 R5는 수소인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  13. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 1이고;
    k는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 수소이고;
    e는 1이고; 및
    R3은 -(CH2)4NH2인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물..
  14. 제 13항에 있어서, q는 2, 4 또는 6인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물..
  15. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 1이고;
    k는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 수소이고;
    e는 2, 4 또는 6이고; 및
    R3은 -(CH2)4NHCO(CH2)2-Ph-(4-OH)인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  16. 제 15항에 있어서, q는 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물..
  17. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 1이고;
    k는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 수소이고;
    e는 2, 4 또는 6이고; 및
    R3은 -CH2-Ph-(4-OH)인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  18. 제 17항에 있어서, q는 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물..
  19. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 1이고;
    k는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 메틸이고;
    e는 1이고; 및
    R3은 -(CH2)4NH2인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  20. 제 19항에 있어서, q는 2인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  21. 제 12항에 있어서,
    s는 1이고 r은 0이고;
    j는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 수소이고;
    h는 1이고; 및
    R2는 -CH2-Ph-(4-OH)인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  22. 제 21항에 있어서, p는 2, 4 또는 6인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  23. 제 12항에 있어서,
    s는 1이고 r은 0이고;
    j는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 수소이고;
    h는 2, 4 또는 6이고; 및
    R2는 -CH2-Ph-(4-OH)인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  24. 제 23항에 있어서, p는 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  25. 제 12항에 있어서,
    s는 1이고 r은 0이고;
    j는 0이고;
    R1은 -CO(CH2)2-Ph-(4-OH)이고;
    R13은 수소이고; 및
    h는 1인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  26. 제 25항에 있어서, p는 2, 4 또는 6인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  27. 제 12항에 있어서,
    s는 1이고 r은 0이고;
    j는 0이고;
    R1은 -CO(CH2)2-Ph-(4-OH)이고;
    R13은 수소이고; 및
    h는 2, 4 또는 6인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  28. 제 27항에 있어서, p는 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  29. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 0이고;
    R1은 -(CH2)2-Ph-(4-OH)이고; 및
    R13은 수소인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  30. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 0이고;
    R1은 -COPh-(4-F)이고; 및
    R13은 수소인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  31. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 1이고;
    k는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 메틸 또는 수소이고;
    e는 1이고; 및
    R3은 -(CH2)4NHCOPh-(4-F)인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  32. 제 31항에 있어서, q는 2인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  33. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 1이고;
    k는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 수소이고;
    e는 1이고; 및
    R3은 -(CH2)4NH-8-[4'-플루오로벤질아미노]서베로일 또는 -(CH2)4NHCOCH2F인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  34. 제 33항에 있어서, q는 2인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  35. 제 12항에 있어서,
    s는 1이고 r은 0이고;
    j는 0이고;
    R1은 8-[4'-플루오로벤질아미노]서베로일 또는 -COCH2F이고;
    R13은 수소이고; 및
    h는 2인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  36. 제 35항에 있어서, p는 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  37. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 1이고;
    k는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 수소이고;
    R3은 -CH2Ph-(3-I, 4-OH) 또는 -CH2Ph-(3,5-디I, 4-OH)인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  38. 제 37항에 있어서, q는 0인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  39. 제 37항에 있어서, q는 1이고 e는 2인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  40. 제 37항에 있어서, q는 1이고 e는 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  41. 제 12항에 있어서,
    s는 1이고 r은 0이고;
    j는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R13은 수소이고; 및
    R2는 -CH2Ph-(3-I, 4-OH) 또는 -CH2Ph-(3,5-디I, 4-OH)인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  42. 제 41항에 있어서, p는 0인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  43. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 0이고;
    R1은 -CO(CH2)2Ph(4-OH, 3, 5 디-I)이고; 및
    R13은 수소인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  44. 제 12항에 있어서,
    s는 1이고 r은 0이고;
    j는 0이고;
    R1은 -CO(CH2)2Ph(4-OH, 3, 5 디-I)이고;
    h는 2이고; 및
    R13은 수소인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  45. 제 44항에 있어서, p는 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  46. 제 12항에 있어서,
    s는 1이고 r은 0이고;
    j는 1이고;
    R1은 아세틸이고;
    R2는 -CH2-Ph(4-OH, 3, 5 디-I)이고;
    h는 2이고; 및
    R13은 수소인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  47. 제 46항에 있어서, p는 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  48. 제 12항에 있어서,
    s는 0이고 r은 1이고;
    R3은 -(CH2)4NHCO(CH2)2-Ph(4-OH, 3, 5 디-I)이고;
    e는 1이고; 및
    R13은 수소인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  49. 제 48항에 있어서, q는 2인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  50. 제 1항에 있어서,
    R1은 아실 킬레이트이고,
    R2, R6, R7, X1, X2, X4, X5, R13, X6, X7, R3, R15, R16, R4 및 R5는 제 12항에서 정의된 바와 동일한 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  51. 제 50항에 있어서,
    s는 1이고 r은 0이고;
    j는 0이고;
    R1은 DOTA-In이고;
    h는 2이고; 및
    R13은 수소인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  52. 제 51항에 있어서, p는 1인 것을 특징으로 하는, 화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  53. 제 50항에 있어서,
    s는 0이고 r은 0이고;
    R1은 DPTA 또는 DPTA-In이고; 및
    R13은 수소인 것을 특징으로 하는,
    화학식 1의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  54. 하기 화학식 3의 화합물, 또는
    그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물:
    (화학식 3)
    상기 화학식 3에서,
    R20은 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 이미노, 치환된 이미노 또는 진단성 물질;
    R21는 1개 이상의 수소 원자가 -NHR22로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
    R22는 수소, 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬 또는 진단성 물질이고;
    j, k, p, q, r, s, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 제 1항에서 정의된 바와 동일하며;
    R20 및 R22 중 1종 이상은 진단성 물질이다.
  55. 제 54항에 있어서, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 제 12항에서 정의된 바와 동일한 것을 특징으로 하는,
    화학식 3의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  56. 제 55항에 있어서, R20은 형광 물질인 것을 특징으로 하는,
    화학식 3의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  57. 제 56항에 있어서, R20은 5/6 카르복시 플루오레신이고, s는 1이고, r은 0이고, j는 0이고, e는 2이고, p는 1인 것을 특징으로 하는,
    화학식 3의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  58. 제 55항에 있어서, R22는 형광 물질인 것을 특징으로 하는,
    화학식 3의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  59. 제 58항에 있어서, R21은 (CH2)4NH-이고, R22는 -5/6 카르복시 플루오레신이고, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, e는 1이고, q는 2인 것을 특징으로 하는,
    화학식 3의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  60. 제 55항에 있어서, R21은 (CH2)4NH-이고, R22는 비오틴이고, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, e는 1이고, q는 2인 것을 특징으로 하는,
    화학식 3의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  61. 하기 화학식 4의 화합물, 또는
    그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물:
    (화학식 4)
    상기 화학식 4에서,
    R23은 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아미노, 치환된 이미노 또는 페길화(pegylating) 물질이고;
    R24는 1개 이상의 수소 원자가 -NHR28로 이루어진 군으로부터 선택된 치환체에 의해 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고; 상기 R28은 수소, 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬 또는 페길화제(pegylating agent)이고;
    j, k, p, q, r, s, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 제 1항에서 정의된 바와 동일하며; 및
    R23 또는 R28 중 1종 이상은 페길화제이다.
  62. 제 61항에 있어서, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 제 12항에서 정의된 바와 동일한 것을 특징으로 하는,
    화학식 4의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  63. 제 62항에 있어서, R23은 m-dPEG이고, s는 1이고, r은 0이고, j는 0이고, h는 2이고, p는 1인 것을 특징으로 하는,
    화학식 4의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  64. 하기 화학식 5의 화합물, 또는
    그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물:
    (화학식 5)
    상기 화학식 5에서,
    R29는 1개 이상의 수소 원자가 -NHR32로 치환된 탄소수 1 내지 6의 알킬이고;
    R30은 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬 또는 치료학적 물질이고;
    R31은 수소, 알킬, 치환된 알킬 또는 치료학적 물질이고;
    R32는 수소, 아실, 치환된 아실, 알킬, 치환된 알킬 또는 치료학적 물질이고;
    j, k, p, q, r, s, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 제 1항에서 정의된 바와 동일하며;
    R30, R31 및 R32 중 1종 이상은 치료학적 물질이다.
  65. 제 64항에 있어서, R2, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, R4 및 R5는 제 12항에서 정의된 바와 동일한 것을 특징으로 하는,
    화학식 5의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  66. 제 65항에 있어서, R13은 메틸 또는 아세틸이고, s는 0이고, r은 0이고, R30은 아세틸이고, R31은 치료학적 물질인 것을 특징으로 하는,
    화학식 5의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  67. 제 66항에 있어서, 상기 치료학적 물질은 독소루비신(doxorubicin)인 것을 특징으로 하는, 화학식 5의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  68. 제 65항에 있어서, R13은 메틸 또는 수소이고, s는 0이고, r은 1이고, k는 1이고, e는 1이고, q는 2이고, R30은 아세틸아세틸R31은 수소이고, R29는 -(CH2)4NHR32인 것을 특징으로 하는,
    화학식 5의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  69. 제 68항에 있어서, 상기 R32는 -CO(CH2)3-독소루비신인 것을 특징으로 하는,
    화학식 5의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  70. 제 68항에 있어서, 상기 R32는 프로토포르피린(protoporphyrin)인 것을 특징으로 하는,
    화학식 5의 화합물, 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 N-산화물.
  71. 제 1항에 기재된 화합물 및 약학적으로 허용가능한 비히클(vehicle)을 포함하는, 약학적 조성물.
  72. 암의 치료 또는 예방이 요구되는 환자에게, 제 1항에 기재된 화합물을 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하는, 암을 치료하거나 또는 예방하는 방법.
  73. 암의 치료 또는 예방이 요구되는 환자에게, 제 71항에 기재된 약학적 조성물을 치료학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하는, 암을 치료하거나 또는 예방하는 방법.
  74. 암 검사가 요구되는 환자에게, 제 71항에 기재된 약학적 조성물을 진단학적 유효량으로 투여하는 것을 포함하는, 암을 검출하는 방법.
KR1020057009356A 2002-11-25 2003-11-25 종양세포 및 내피세포를 표적으로 하는 펩타이드, 그것의조성물 및 그것의 용도 KR20050096917A (ko)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US42917402P 2002-11-25 2002-11-25
US60/429,174 2002-11-25
US47553903P 2003-06-02 2003-06-02
US60/475,539 2003-06-02

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20050096917A true KR20050096917A (ko) 2005-10-06

Family

ID=32397181

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020057009356A KR20050096917A (ko) 2002-11-25 2003-11-25 종양세포 및 내피세포를 표적으로 하는 펩타이드, 그것의조성물 및 그것의 용도
KR1020057009447A KR20050097494A (ko) 2002-11-25 2003-11-25 혈관신생, 세포 이동, 세포 침투 및 증식을 저해하는펩타이드, 그것의 조성물 및 그것의 용도

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020057009447A KR20050097494A (ko) 2002-11-25 2003-11-25 혈관신생, 세포 이동, 세포 침투 및 증식을 저해하는펩타이드, 그것의 조성물 및 그것의 용도

Country Status (14)

Country Link
US (2) US20050020810A1 (ko)
EP (2) EP1569678A4 (ko)
JP (2) JP2006515866A (ko)
KR (2) KR20050096917A (ko)
AU (2) AU2003298726A1 (ko)
BR (2) BR0316550A (ko)
CA (2) CA2507045A1 (ko)
EA (2) EA200500870A1 (ko)
HR (2) HRP20050584A2 (ko)
MX (2) MXPA05005469A (ko)
NO (2) NO20053112L (ko)
NZ (2) NZ540363A (ko)
PL (2) PL377701A1 (ko)
WO (2) WO2004063213A2 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190090872A (ko) * 2011-11-21 2019-08-02 한메이 쉬 폴리에틸렌글리콜이 수식된 인테그린 차단제 hm-3 및 그 응용

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1569678A4 (en) * 2002-11-25 2008-01-02 Attenuon Llc PEPTIDES, THE TUMOR AND ENDOTHEL CELL CONTROLS, COMPOSITIONS AND ITS USES
EP1766405A1 (en) * 2004-05-21 2007-03-28 MDS Inc. doing Business Through Its MDS Pharma Services Division Method of quantifying the cell-binding properties of a medical device
US20060078535A1 (en) * 2004-10-13 2006-04-13 The Regents Of The University Of Michigan Anticancer compounds and methods
WO2006084016A1 (en) 2005-02-01 2006-08-10 Attenuon, Llc ACID ADDITION SALTS OF Ac-PHSCN-NH2
CA2596255A1 (en) * 2005-02-01 2006-08-10 Attenuon, Llc Compositions containing the anti-angiogenic phscn-peptide
AU2016213759B2 (en) * 2006-11-08 2018-03-29 Chongxi Yu Transdermal delivery systems of peptides and related compounds
CN101541743A (zh) * 2006-11-08 2009-09-23 于崇曦 多肽及相关化合物的透皮给药系统
CN108084246A (zh) 2009-05-08 2018-05-29 上海泰飞尔生化技术有限公司 多肽和多肽相关化合物的高穿透力前药组合物
KR101228668B1 (ko) 2010-09-17 2013-01-31 가톨릭대학교 산학협력단 혈관신생 억제 활성을 갖는 펩타이드 및 이의 용도
CA2839702C (en) 2011-06-23 2021-04-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Identifying peptides at the single molecule level
US11435358B2 (en) 2011-06-23 2022-09-06 Board Of Regents, The University Of Texas System Single molecule peptide sequencing
JP6206987B2 (ja) * 2012-05-11 2017-10-04 メディカス バイオサイエンシーズ，エルエルシー 網膜剥離の処置のための生体適合性ヒドロゲル製剤
US20160286801A1 (en) 2013-03-15 2016-10-06 Suncor Energy Inc. Herbicidal Compositions
JP5970439B2 (ja) * 2013-09-20 2016-08-17 チョンシー ユー ペプチド及び関連化合物の経皮送達システム
EP3194980A4 (en) 2014-09-15 2018-07-04 Board of Regents, The University of Texas System Improved single molecule peptide sequencing

Family Cites Families (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3845770A (en) * 1972-06-05 1974-11-05 Alza Corp Osmatic dispensing device for releasing beneficial agent
US3916899A (en) * 1973-04-25 1975-11-04 Alza Corp Osmotic dispensing device with maximum and minimum sizes for the passageway
EP0051682B1 (en) 1980-05-13 1984-09-05 Mitsubishi Kasei Corporation Cysteine derivatives and process for their preparation
US4440788A (en) * 1980-05-13 1984-04-03 Mitsubishi Chemical Industries, Limited Cysteine derivatives
US4394519A (en) * 1982-01-19 1983-07-19 Research Corporation Amino acid blocking agents
GB8504253D0 (en) * 1985-02-19 1985-03-20 Ici Plc Electrostatic spraying apparatus
US4683202A (en) * 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
DE3815221C2 (de) * 1988-05-04 1995-06-29 Gradinger F Hermes Pharma Verwendung einer Retinol- und/oder Retinsäureester enthaltenden pharmazeutischen Zubereitung zur Inhalation zur Einwirkung auf die Schleimhäute des Tracheo-Bronchialtraktes einschließlich der Lungenalveolen
US5091176A (en) * 1988-11-02 1992-02-25 W. R. Grace & Co.-Conn. Polymer-modified peptide drugs having enhanced biological and pharmacological activities
US5443816A (en) * 1990-08-08 1995-08-22 Rhomed Incorporated Peptide-metal ion pharmaceutical preparation and method
US5229366A (en) * 1990-10-23 1993-07-20 Fuji Photo Film Co., Ltd. Peptide-containing polyethylene glycol derivatives and application thereof
US5149801A (en) * 1990-11-21 1992-09-22 The Regents Of The University Of California Boronated porphyrin compounds
US5561220A (en) * 1991-02-08 1996-10-01 Diatech, Inc. Technetium-99m labeled peptides for imaging inflammation
US5698155A (en) * 1991-05-31 1997-12-16 Gs Technologies, Inc. Method for the manufacture of pharmaceutical cellulose capsules
US5556609A (en) * 1992-02-20 1996-09-17 Rhomed Incorporated YIGSR peptide radiopharmaceutical applications
US5608110A (en) * 1993-06-15 1997-03-04 Bracco International B.V. Heteroatom-bearing ligands and metal complexes thereof
US5639725A (en) * 1994-04-26 1997-06-17 Children's Hospital Medical Center Corp. Angiostatin protein
IL117473A (en) * 1995-03-14 2001-08-26 Siemens Ag Ultrasonic atomizer device with removable precision dosating unit
IL117474A (en) * 1995-03-14 2001-04-30 Siemens Ag Removable precise dosing unit containing inhaled drugs for a hearing aid device
US5618513A (en) * 1995-06-07 1997-04-08 Mallinckrodt Medical, Inc. Method for preparing radiolabeled peptides
MY147327A (en) * 1995-06-29 2012-11-30 Novartis Ag Somatostatin peptides
DE69734887T2 (de) * 1996-09-10 2006-08-24 The Burnham Institute, La Jolla Tumor findende moleküle, davon abstammende konjugate und verfahren zu deren verwendung
US6331409B1 (en) * 1996-11-21 2001-12-18 The Regents Of The University Of Michigan Methods and compositions for wound healing
US6025150A (en) * 1996-11-21 2000-02-15 The Regents Of The University Of Michigan Methods and compositions for wound healing
US6001965A (en) * 1996-11-21 1999-12-14 The Regents Of The University Of Michigan Anticancer compounds and methods
WO1998030538A1 (fr) * 1997-01-14 1998-07-16 Kaneka Corporation Procede servant a preparer des derives de cysteine
US5994309A (en) * 1997-07-25 1999-11-30 Angstrom Pharmaceuticals, Inc. Anti-invasive and anti-angiogenic compositions and methods
WO1999013329A1 (en) * 1997-09-10 1999-03-18 The Burnham Institute Methods of identifying molecules that home to angiogenic vasculature in tumors
NZ504021A (en) * 1997-10-17 2003-04-29 Systemic Pulmonary Delivery Lt Method and apparatus for delivering aerosolized medication having air discharged through air tube directly into plume of aerosolized medication
US6468974B1 (en) * 1998-08-14 2002-10-22 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Compounds having growth hormone releasing activity
EP1388013B1 (en) 2001-01-18 2007-07-11 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for the use of fibronectin fragments in the diagnosis of cancer
EP1569678A4 (en) * 2002-11-25 2008-01-02 Attenuon Llc PEPTIDES, THE TUMOR AND ENDOTHEL CELL CONTROLS, COMPOSITIONS AND ITS USES

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190090872A (ko) * 2011-11-21 2019-08-02 한메이 쉬 폴리에틸렌글리콜이 수식된 인테그린 차단제 hm-3 및 그 응용

Also Published As

Publication number Publication date
EP1594521A4 (en) 2008-01-09
EA200500870A1 (ru) 2006-04-28
US20040162239A1 (en) 2004-08-19
CA2507045A1 (en) 2004-06-10
BR0316523A (pt) 2005-10-18
PL377763A1 (pl) 2006-02-20
EP1569678A2 (en) 2005-09-07
EP1569678A4 (en) 2008-01-02
NO20053111L (no) 2005-08-24
WO2004063213A3 (en) 2005-03-03
AU2003297609A1 (en) 2004-06-18
AU2003298726A1 (en) 2004-08-10
NZ540363A (en) 2007-11-30
NZ540889A (en) 2008-09-26
HRP20050584A2 (hr) 2006-04-30
EA200500871A1 (ru) 2006-04-28
WO2004063213A2 (en) 2004-07-29
CA2506813A1 (en) 2004-07-29
MXPA05005545A (es) 2005-10-18
WO2004047771A2 (en) 2004-06-10
WO2004047771A3 (en) 2005-09-15
PL377701A1 (pl) 2006-02-06
EP1594521A2 (en) 2005-11-16
BR0316550A (pt) 2005-10-04
NO20053112D0 (no) 2005-06-24
HRP20050585A2 (en) 2006-02-28
NO20053111D0 (no) 2005-06-24
US7517855B2 (en) 2009-04-14
MXPA05005469A (es) 2005-09-08
KR20050097494A (ko) 2005-10-07
US20050020810A1 (en) 2005-01-27
NO20053112L (no) 2005-08-05
JP2006515866A (ja) 2006-06-08
JP2006514116A (ja) 2006-04-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20050096917A (ko) 종양세포 및 내피세포를 표적으로 하는 펩타이드, 그것의조성물 및 그것의 용도
JP2021130672A (ja) Ｍｔ１−ｍｍｐに特異的な二環性ペプチドリガンド
ES2275309T3 (es) Fragmentos de uroquinasa anti-invasinos y anti-angiogenicos y su uso.
EP1404371B1 (en) Peptide-based compounds for targeting intergin receptors
JP2021506910A (ja) ＥｐｈＡ２に特異的な二環ペプチドリガンド
ES2402918T3 (es) Agentes de unión específicos de angiopoietina-2 humana
US6277818B1 (en) Cyclic peptide ligands that target urokinase plasminogen activator receptor
ES2523654T3 (es) Constructos multivalentes para aplicaciones terapéuticas y de diagnóstico
MXPA06001090A (es) Agentes de imagenologia de peptido biciclico.
WO2022135327A1 (zh) 成纤维细胞活化蛋白抑制剂
WO2015196944A1 (zh) GnRH类似物-细胞毒分子缀合物、其制备方法及用途
US20050232924A1 (en) Antibodies and/or conjugates thereof which bind to the amino terminal fragment of urokinase, compositions and uses thereof
US20040204348A1 (en) Cyclic peptide ligands that target urokinase plasminogen activator receptor
EP1305342A2 (en) Human kininogen d5 domain polypeptides and their use
ZA200504222B (en) Peptides which inhibit angiogenesis, cell migration, cell invasion and cell proliferation, compositions and uses thereof
AU2014252354A1 (en) Potent inhibitors of human matriptase derived from McotI-II variants
US20240059740A1 (en) Cyclic peptides and uses thereof
KR20070100411A (ko) Ａｃ－ＰＨＳＣＮ－ＮＨ２의 산 부가 염
WO2023088236A1 (zh) Mt1-mmp的双环肽配体及其缀合物
KR20240082410A (ko) EphA2 비시클릭 펩티드 리간드 및 이의 접합체

Legal Events

Date Code Title Description
WITN Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid