KR20050001668A - Extracts of Oregano useful for protecting crops from plant pathogenic fungi - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은, 식물병원성 진균에 의해 발생되는 병해로부터 작물을 보호하는 데 유용한 오레가노 추출물에 관한 것이다.The present invention relates to oregano extracts useful for protecting crops from diseases caused by phytopathogenic fungi.
채소류 (오이, 고추, 당근, 배추, 상추, 가지, 피망, 토마토, 양파, 양배추, 시금치 등), 과수류 (딸기, 참외, 수박, 포도, 사과 등), 화훼류 (장미, 튤립 등), 벼 등의 작물 재배시, 수많은 식물 병원체에 의한 병해 (특히, 진균병)로부터 작물을 효과적으로 보호할 수 있는 방법의 개발은 현재 절실한 문제이다.Vegetables (cucumbers, peppers, carrots, cabbages, lettuce, eggplants, bell peppers, tomatoes, onions, cabbage, spinach, etc.), fruit trees (strawberries, melons, watermelons, grapes, apples, etc.), flowers (roses, tulips, etc.), rice, etc. In the cultivation of crops, the development of a method which can effectively protect crops from diseases caused by numerous plant pathogens (especially fungal diseases) is an urgent problem.
상기한 병해중 대표적인 것으로는, 벼 도열병, 잿빛 곰팡이병, 잎집무늬마름병 등이 있으며, 이 외에도 수많은 종류가 있다. 아래에서는 상기한 3가지의 대표적인 진균병에 대해 간단히 기술한다.Representative of the above-mentioned diseases, rice blast, gray mold, leaf blight, etc., there are many other kinds. The following briefly describes the three representative fungal diseases described above.
"벼 도열병"은, 마그나포르테 그레시아(Magnaporthe grisea)에 의해 발병되는 병해로써, 벼에 발생하는 병해 중 약 40%에 달하는 매우 심각한 병해이다. 잎, 잎혀, 마디, 이삭목, 이삭가지, 볍씨 등에 발병하며, 병징은 발생부위 또는 시기에 따라 차이가 있다. 모판에서 발병이 심한 경우에는 묘가 잘 자라지 못하며, 잎 전체가 갈변하여 말라 죽는다. 이삭목에는 이삭가지 분지점에 암갈색의 병무늬가 생기며, 이것이 점점 커져 이삭목을 둘러싸면 이삭은 여물지 못하고 흰 이삭이 된다. 병해가 심한 경우에는, 이삭의 1/3 내지 1/2 이상이 병들어 낟알이 충실치 못하게 된다. 비가 자주 오고 일조가 부족하며 냉랭하고 음습한 일기가 계속될 때, 강한 바람이 불었을 때, 토양온도가 낮을 때 (20℃), 토양의 수분함량이 적을 때, 질소 거름을 과용했을 때, 파종량이 많을 때, 이앙시기가 늦었을 때 등에 주로 발병한다. 방제 화학약제로 많이 사용되는 것으로는, 라브사이드, 부라에스, 히노산, 키타진, 후치와, 빔 등이 있다 {참조: 경기도 농업기술원 (www.nongup.gyeonggi.kr)}."Rice blast" is a disease caused by Magnaporthe grisea, which is a very serious disease of about 40% of the rice disease. Leaves, leaf tongue, node, ear tree, ear branch, rice seed, and the like, the symptoms are different depending on the site or time of occurrence. In severe cases of seedlings, the seedlings do not grow well, and the whole leaves turn brown to dry. In the earwood, dark brown pattern is formed at the branching point of the ear branch, and when it grows larger and surrounds the earwood, the ear becomes white and grows. In severe cases, more than one-third to one-half of the ear will be ill and the grains will be unsatisfactory. When there is frequent rain, lack of sunshine, cold and humid weather, strong wind blowing, low soil temperature (20 ℃), low soil moisture content, overdose of nitrogen manure, In many cases, when the rice transplanting time is late, mainly onset. Commonly used as control chemicals include labside, buraes, hinanosan, kitazine, fuchiwa, beam, etc. {Reference: Gyeonggi-do Agricultural Research and Development Institute (www.nongup.gyeonggi.kr)}.
"잎집무늬마름병"은, 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani)에 의해 발병되는 병해로써, 우리나라의 경우에는 초여름부터 발생하기 시작하여 고온다습한 8월 내지 9월 상순경에 최고조를 이루는 것으로 알려져있다. 잎집무늬마름병에 의한 피해는 벼 피해율 중에서 약 22%에 해당하고, 수도 재배 면적의 약 87%에서 발병하고 있는 실정이다. 이의 방제를 위해, 펜시쿠론, 헥사코나졸, 프루토닐 등의 화학약제를 사용하는 방법 등이 주로 사용되고 있다 {참조: 경기도 농업기술원 (www.nongup.gyeonggi.kr)}."Leather blight" is a disease caused by Rhizoctonia solani, and it is known that it occurs in early summer in Korea and peaks in the high-humidity of August to early September. The damage caused by leaf blight is about 22% of the rice damage rate, and about 87% of the water planting area. For the control, methods using chemical agents such as pencicuron, hexaconazole, and prutonyl are mainly used {reference: Gyeonggi-do Agricultural Research and Extension Services (www.nongup.gyeonggi.kr)}.
"잿빛 곰팡이병"은, 보트리티스 시네레아(Botrytis cinerea)에 의해 발병되는 병해로써, 주로 꽃과 꽃잎에 감염되어 갈색으로 변하게한다. 특히, 낙화기 이후의 과실에 부착된 꽃잎에 발생하여 어린 과실에 상처를 일으키며, 성숙한 과실에는 상처 또는 직접 침입하여 감염시킨다. 저장 과실에 감염되는 경우에는, 처음에는 암갈색 수침상 병반이 생기고, 나중에는 과실 전면에 잿빛 곰팡이가 보인다.주로시설 재배에서 발생하며, 외기온도가 낮은 11월부터 3월사이에 야간온도를 보호하기 위해 밀폐한 시설내에서 습도가 높을 때 발생이 심하다. 밀식재배할 경우 식물이 도장하여 무성하게 자라면 통풍이 나빠져 병발생이 잘된다. 20℃ 전후의 습도가 높은 환경에서 발생이 잘된다. 이 병원균은 병환부에 생긴 무수한 잿빛곰팡이 포자가 바람에 날려 공기전염을 한다. 따라서, 전염원의 증식이 대단히 강하므로 조건만 맞으면 단시일내에 전포장에 전염된다. 이의 방제를 위해, 통풍 및 배수가 잘되게 하는 등 재배시에 발병을 예방하는 조치와 함께, 디에토펜카브ㆍ가벤다수화제 등의 화학약제를 주로 사용하고 있다. 약제사용은 예방적으로 살포하는 것이 바람직하며, 약제 살포시 내성균의 출현을 방지하기 위해서 작용성이 다른 약제를 번갈아 살포하거나 혼용 살포하면 방제효과가 높다 {참조: 岸 國平. 1982. 新版 野菜の病害蟲 - 診斷と防除 -. 全國農村敎育協會 pp. 651; 農文協編. 1987. 原色 野菜病害蟲百科. 農山漁村文化協會 pp. 485}.Asymptomatic fungus is a disease caused by Botrytis cinerea, which mainly infects flowers and petals and turns brown. In particular, it occurs on the petals attached to the fruit after the inflorescence and causes a wound on the young fruit, and the mature fruit is wound or directly invaded and infected. In the case of storage fruit infections, dark brown immersion lesions first appear, and later ash gray mold on the front of the fruit, which occurs mainly in plant cultivation and protects night temperatures between November and March when the outside temperature is low. Hazards are high when the humidity is high in a closed facility. In case of planting wheat, if the plant is painted and grows lush, the ventilation is bad and the disease occurs well. It occurs well in high humidity environment around 20 ℃. The pathogen is airborne by countless gray mold spores from the affected area. Therefore, the proliferation of infectious agents is very strong, and if conditions are met, they are spread to whole packaging in a short time. To control this, chemical agents such as dietofencarb and gabenda hydrous are mainly used, with measures to prevent outbreaks during cultivation such as ventilation and drainage. It is preferable to spray the drug prophylactically. In order to prevent the emergence of resistant bacteria during the spraying of the drug, spraying a mixture of different functionalities or using a mixed spray has a high control effect. {Reference: 國 國 平. 1982. 新版 野菜 の 病 害蟲-診斷 と 防除-.全國 農村 敎 育 協會 pp. 651;農 文 協 編. 1987. 原色 野菜 病 害蟲 百科.農 山 漁村 文化 協會 pp. 485}.
하지만, 채소류, 과수류, 화훼류, 벼 등의 작물에 끼치는 병해들을 방제하는 데에 현재 주로 많이 사용되고 있는 화학약제의 경우, 화학약제에 대한 내성균이 발생할 위험 및 환경오염 등 문제점이 많이 지적되고 있다. 따라서, 이러한 문제점을 일으키지 않으면서 병해를 효과적으로 방제할 수 있는 방법, 특히 생물약제를 이용한 방법의 개발 필요성이 제기되어 왔다.However, in the case of chemicals that are currently mainly used to control diseases on crops such as vegetables, fruit trees, flowers, rice, and the like, there are many problems such as the risk of developing resistant bacteria to chemicals and environmental pollution. Therefore, there has been a need to develop a method that can effectively control the disease without causing such a problem, in particular a method using a biopharmaceutical.
한편, "오레가노[Oregano; 이의 학명은 오레가눔 불가레(Oreganum vulgare)]"는, 높이 약 30 내지 60cm이고 잎의 길이는 약 1.5cm인 꿀풀과의 여러해살이 풀로서, 원산지는 유럽과 서남 아시아이고, 분포지역은 지중해 연안의 여러나라와 미국 등이다.Meanwhile, "Oregano" (Oreganum vulgare) is a perennial herb with nectar with a height of about 30 to 60 cm and a leaf length of about 1.5 cm. Asia is distributed in many countries along the Mediterranean coast and the United States.
오레가노의 정유(essential oil)의 주성분은 전체의 약 90%를 차지하는 카르바크롤(carvacrol) 및 티몰(thymol)이며, 그 이외에 다양한 종류의 모노테르펜 탄수화물(리모넨, 테르피넨, 오시멘, 카리오필렌, 베타-바이사볼렌, p-시멘) 및 모노테르펜 알코올(리나롤, 4-테르피네올)이 함유된 것으로 보고되어 있다.The main components of oregano's essential oils are carvacrol and thymol, which make up about 90% of the total, and other types of monoterpene carbohydrates (limonene, terpinene, ossimen, cariophylene, Beta-bisabolene, p-cymene) and monoterpene alcohols (linarol, 4-terpineol) are reported to be contained.
오레가노는, 고대 그리스 시대 때부터 강장, 이뇨, 건위, 식욕 증진, 진정 및 살균 작용이 있어 약초로도 사용되어 왔으며, 차를 끓여 마시거나 포푸리ㆍ목욕제 등으로 사용되어 왔다.Oregano has been used as an herbal medicine since it was tonic, diuretic, healthy, appetite-boosting, soothing and disinfecting since ancient Greek times, and has been used to boil tea, potpourri and baths.
또한, 오레가노는, 좋은 향기와 쓴맛이 있으며 상쾌함을 주기 때문에 요리시 향신료로 많이 사용되고 있으며, 오레가노 정유(essential oil)의 식품으로서의 안전성에 대해서는 미국 FDA에서 이미 인정을 받은 상태이다. 특히, 오레가노 추출물은, 빵 제조시 향을 좋게 하고 박테리아의 활성억제효과로 인해 빵 제조 등에 있어서 식품 첨가물로서 많이 사용되고 있다 {참조: Remmal A. 등, "Inhibition of antibacterial activity of essential oils by tween 80 and ethanol in liquid medium", J.Pharm.Belg. (1993), Sep-Oct;48(5):352-6, Biotechnology Laboratory, Faculty of Sciences, Fes Morocco}.In addition, oregano has a good fragrance, bitterness and freshness, and is widely used as a spice in cooking. The oregano essential oil has already been approved by the US FDA for its safety as a food. In particular, oregano extract has been widely used as a food additive in bread production due to its good aroma in bread production and the inhibitory effect of bacteria. {Remal A. et al., "Inhibition of antibacterial activity of essential oils by tween 80 and ethanol in liquid medium ", J. Pharm. Belg. (1993), Sep-Oct; 48 (5): 352-6, Biotechnology Laboratory, Faculty of Sciences, Fes Morocco}.
하지만, 시설재배채소, 과채류 및 벼 등의 작물 재배시 발생하는 병해(특히, 식물병원성 진균에 의해 발생되는 병해)로부터 작물을 보호하기 위한 농약으로서의 용도로 오레가노 추출물을 이용하는 것에 대해서는 현재까지 알려져 있지 않았다.However, the use of oregano extract as a pesticide to protect crops from diseases caused by crop cultivation such as plant cultivation vegetables, fruit vegetables and rice (especially those caused by phytopathogenic fungi) has not been known until now. .
본 발명의 목적은, 시설재배채소, 과채류 및 벼 등의 작물 재배시 발생하는 병해(특히, 식물병원성 진균에 의해 발생되는 병해)로부터 작물을 효과적으로 보호할 수 있으며, 기존의 화학 농약이 가지는 많은 문제점들 (화학 약제에 대한 내성균 발생, 환경오염 등)을 발생시키지 않는, 생물 약제를 제공하는 것이다.An object of the present invention is to effectively protect crops from diseases (especially, diseases caused by phytopathogenic fungi) generated during crop cultivation such as plant cultivation vegetables, fruit vegetables, and rice, and many problems with conventional chemical pesticides. It is to provide a biopharmaceutical that does not cause them (tolerance of chemical drugs, generation of environmental pollution, etc.).
도 1은, 상이한 농도[무처리구, 100ppm, 150ppm (상부 좌측에서 우측 방향); 200ppm, 250ppm 및 300ppm (하부 좌측에서 우측 방향)]의 오레가노 추출물의 8가지 진균 [리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani; "1"로 표시), 피토프토라 카프시시(Phytophthora capsici; "2"로 표시), 글로에오스포리움 라에티콜로르 베르칼리(Gloeosporium laeticolor berkaley; "3"으로 표시), 마그나포르테 그리세아(Magnaporthe grisea; "4"로 표시), 보트리오스파에리아 도티데아(Botriosphaeria dothidea; "5"로 표시), 푸사리움 옥시스포룸(Fusarium oxisporum; "6"으로 표시), 보트리티스 시네레아(Botrytis cinerea; "7"로 표시) 및 모밀리니아 프룩티실라 하니(Momilinia fructicola honey; "8"로 표시)]에 대한 방제 효과를 검사한 기내(in vitro) 테스트 결과 사진도이다.1 shows different concentrations (untreated, 100 ppm, 150 ppm (upper left to right direction); 8 fungi [Rhizoctonia solani (denoted by "1"), Phytophthora capsici ("2") of oregano extracts of 200 ppm, 250 ppm and 300 ppm (lower left to right)] ), Gloosporium laeticolor berkaley (denoted "3"), Magnaporthe grisea (denoted "4"), Botriosphaeria dothidea ; Denoted "5"), Fusarium oxisporum (denoted "6"), Botrytis cinerea (denoted "7"), and Momilinia fructicola honey (Indicated by "8") is a photograph showing the results of in vitro tests that examined the effectiveness of the control.
도 2는, 상이한 농도(무처리구, 500ppm 및 700ppm)의 오레가노 추출물과 대조 화학약제(크레속심-메틸 47% 입상수화제 200ppm)의 오이 잿빛곰팡이병(보트리티스 시네레아에 의해 발병)에 대한 방제 효과를 검사한 기외(in vivo) 테스트 결과 사진도이다.FIG. 2 shows the control effects of oregano extracts of different concentrations (untreated, 500 ppm and 700 ppm) and control chemicals (cresacem-methyl 47% granulant 200 ppm) against cucumber gray mold (onset by Botritis cinerea) In vivo test results photographs are examined.
도 3은, 상이한 농도(무처리구, 300ppm 및 500ppm)의 오레가노 추출물과 대조 화학약제(페림존+트리사이클아졸 40% 수화제(상표명: 논브라) 50ppm)의 벼도열병(마그나포르테 그리세아에 의해 발병)에 대한 방제 효과를 검사한 기외(in vivo) 테스트 결과 사진도이다.FIG. 3 shows a rice febrile disease (induced by Magnaforte Grisse) of different concentrations (untreated, 300 ppm and 500 ppm) of oregano extract and a control chemical (perimzone + tricyclazole 40% hydrate (trade name: Nonbra) 50 ppm) The photograph shows the result of an in vivo test that examined the control effect against the disease.
본 발명은, 식물병원성 진균에 의해 발생되는 병해로부터 작물을 보호하는 데에 유용한 오레가노 추출물에 관한 것이다.The present invention relates to oregano extracts useful for protecting crops from diseases caused by phytopathogenic fungi.
본원에서의 용어 "식물병원성 진균"은, 본 발명의 오레가노 추출물을 사용하여 방제 효과를 얻을 수 있는, 작물에 병해를 일으키는 진균을 총칭하는 의미이다.As used herein, the term "phytopathogenic fungi" is a generic term for fungi causing disease in crops, which can obtain a control effect using the oregano extract of the present invention.
바람직하게는, 상기한 식물병원성 진균은, 리족토니아(Rhizoctonia) 속, 글로에오스포리움(Gloeosporium) 속, 피토프토라(Phytophthora) 속, 마그나포르테(Magnaporthe) 속, 푸사리움(Fusarium) 속, 보트리오스파에리아(Botriosphaeria) 속, 보트리티스(Botrytis) 속 또는 모밀리니아(Momilinia) 속에 속하며, 이에 한정되는 것은 아니다.Preferably, the above phytopathogenic fungi are Genus Rhizoctonia, Genus Gloeosporium, Phytophthora, Magnaporthe, Fusarium, Boat It belongs to the genus Botriosphaeria, Botrytis or Momilinia, but is not limited thereto.
보다 더 바람직하게는, 상기한 식물병원성 진균은, 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani), 글로에오스포리움 라에티콜로르 베르칼리(Gloeosporium laeticolor berkaley), 피토프토라 카프시시(Phytophthora capsici), 마그나포르테 그리세아(Magnaporthe grisea), 푸사리움 옥시스포룸(Fusarium oxisporum), 보트리오스파에리아 도티데아(Botriosphaeria dothidea), 보트리티스 시네레아(Botrytis cinerea) 또는 모밀리니아 프룩티콜라하니(Momilinia fructicola honey)이며, 이에 한정되는 것은 아니다.Even more preferably, the above phytopathogenic fungi include Rhizoctonia solani, Gloeosporium laeticolor berkaley, Phytophthora capsici, Magnaporthe grisea, Fusarium oxisporum, Botriosphaeria dothidea, Botrytis cinerea or Momilinia fructicola honey ), But is not limited thereto.
본원에서의 용어 "작물"은, 본 발명의 오레가노 추출물을 사용하여 방제 효과를 얻을 수 있는 작물을 총칭하는 의미로서, 채소류 (오이, 고추, 당근, 배추, 상추, 가지, 피망, 토마토, 양파, 양배추, 시금치 등), 과수류 (딸기, 참외, 수박, 포도, 사과 등), 벼 등을 모두 포함하는 광범위한 의미로서 사용되고 있다.As used herein, the term "crop" is a generic term for crops capable of obtaining a control effect by using the oregano extract of the present invention, vegetables (cucumbers, peppers, carrots, cabbage, lettuce, eggplant, bell peppers, tomatoes, onions, Cabbage, spinach, and the like), fruit trees (strawberries, melons, watermelons, grapes, apples, etc.), rice, and the like are all widely used.
본 발명의 오레가노 추출물이 방제효과를 나타내는 대표적인 병해로는, 수도잎집무늬마름병, 복숭아 탄저병, 고추역병, 벼도열병, 토마토시들음병, 사과겹무늬썩음병, 잿빛곰팡이병 및 잿빛무늬병이 포함되며, 이에 한정되는 것은 아니다.Representative diseases of the oregano extract of the present invention exhibits a control effect, including a leaf blight blight, peach anthracnose, pepper blight, rice fever, tomato wilted disease, apple leaf rot, gray mold disease and gray pattern disease, etc. It is not.
본 발명의 다른 양태는, 식물병원성 진균에 의해 발생되는 병해로부터 작물을 보호하는 데 사용되는, 방제 유효량의 오레가노 추출물 및 적합한 담체를 포함하는 조성물에 관한 것이다.Another aspect of the invention relates to a composition comprising a control effective amount of oregano extract and a suitable carrier, which are used to protect crops from diseases caused by phytopathogenic fungi.
상기한 본 발명의 조성물에 사용하기에 "적합한 담체"로는, 농약 제조시 통상적으로 사용되는 용제 및/또는 계면활성제 등이 포함되며, 특히 오레가노 추출물의 확산성/방제 효능/안전성 등을 향상시키기 위해 첨가할 수 있는 적합한 모든 종류의 용제 및/또는 계면활성제 등이 포함된다.The "suitable carrier" for use in the composition of the present invention described above includes solvents and / or surfactants commonly used in the manufacture of pesticides, and in particular to improve the diffusibility / control efficacy / safety of oregano extract All suitable solvents and / or surfactants which can be added, etc. are included.
본 발명의 조성물에 사용되는 용제의 경우, 최종 제형의 유형 (예를 들면, 유제, 액제, 액상수화제 등), 유효성분의 특성 및 상태 등에 따라 적합한 용제를 선택하여 사용할 수 있다. 이러한 적합한 용제의 선택은 당업자에게는 명백하며, 비극성 용제, 극성 용제, 또는 비극성/극성 혼합 용제일 수 있다.In the case of the solvent used in the composition of the present invention, a suitable solvent can be selected and used depending on the type of the final formulation (for example, emulsion, liquid, liquid hydrating agent, etc.), the nature and condition of the active ingredient. Selection of such a suitable solvent is apparent to those skilled in the art and may be a nonpolar solvent, a polar solvent, or a nonpolar / polar mixed solvent.
본 발명의 조성물에 사용되는 계면활성제의 경우, 최종 제형의 유형(예를 들면, 액제, 유제, 액상수화제 등), 유효성분의 상태, 사용되는 용제의 종류 및 특성 (예를 들면, 극성 유무) 등에 따라 적합한 계면활성제를 선택하여 사용할 수 있다. 이러한 적합한 계면활성제의 선택은 당업자에게는 명백할 것이다.In the case of the surfactant used in the composition of the present invention, the type of final formulation (e.g., liquid, emulsion, liquid hydrating agent, etc.), the state of the active ingredient, the type and characteristics of the solvent used (e.g., with or without polarity) A suitable surfactant can be selected and used according to the etc. Selection of such suitable surfactants will be apparent to those skilled in the art.
본 발명에서 제공하는 오레가노 추출물은, 식물병원성 진균에 의해 발병하는 각종 병해로부터 작물을 보호하는 데에 사용될 수 있으며, 기존의 화학 약제가 가지는 내성균 발생위험 및 환경오염 등의 문제가 없으면서도 기존의 화학약제와 동일하거나 유사한 방제효과를 가진다.The oregano extract provided by the present invention can be used to protect crops from various diseases caused by phytopathogenic fungi, and has no existing chemicals without problems such as resistant bacteria and environmental pollution. It has the same or similar control effect as the drug.
하기 실시예에서는, 본 발명에 따라, 소정의 식물병원성 진균 및 이에 의해 발병된 식물체에 오레가노 추출물을 투여한 결과를 분석한 시험 결과를 보여준다. 하지만, 본 발명에서의 오레가노 추출물이 하기 실시예에 특정된 식물병원성 진균에만 한정되어 효과를 발휘하는 것으로 이해해서는 안된다.In the following examples, according to the present invention, the results of the analysis of the results of administering the oregano extract to the predetermined phytopathogenic fungi and the plant caused thereby. However, it should not be understood that the oregano extract in the present invention is limited to phytopathogenic fungi specified in the following examples and exerts an effect.
실시예Example
1. 재료1. Material
(1) 오레가노 추출물(1) oregano extract
본 실시예에서 사용한 오레가노 추출물은, 오레가노 화두(flower head)를 증기 추출한 origan 정유(essential oil)(90%) [프랑스의 Robertet에서 구입]를 사용하였다As the oregano extract used in this example, origan essential oil (90%) (purchased from Robertet, France) obtained by steam extraction of oregano flower head was used.
(2) 식물병원성 진균(2) phytopathogenic fungi
본원의 실시예에서는 총 8가지의 식물병원성 진균 {리족토니아솔라니(Rhizoctonia solani), 피토프토라 카프시시(Phytophthora capsici), 글로에오스포리움 라에티콜로르 베르칼리(Gloeosporium laeticolor berkaley), 마그나포르테 그리세아(Magnaporthe grisea), 보트리오스파에리아 도티데아(Botriosphaeria dothidea), 푸사리움 옥시스포룸(Fusarium oxisporum), 보트리티스 시네레아(Botrytis cinerea) 및 모밀리니아 프룩티콜라 하니(Momilinia fructicola honey)}을 사용하여 오레가노 추출물의 방제 효과를 시험하였다.In the examples herein, a total of eight phytopathogenic fungi {Rhizoctonia solani, Phytophthora capsici, Gloeosporium laeticolor berkaley, Magnaporthe grisea, Botriosphaeria dothidea, Fusarium oxisporum, Botrytis cinerea and Momilinia fructicola honey ) To test the control effect of oregano extract.
상기한 8가지의 식물병원성 진균은, 한국생명공학연구원 유전자원센터 유전자 은행에서 입수한 것이다.The eight phytopathogenic fungi mentioned above were obtained from the Gene Bank of Korea Center for Biotechnology.
2. 기내 (In vitro) 시험2. In vitro testing
본 기내시험은, 본 발명의 오레가노 추출물을 처리한 경우, 배양배지내에서의 상기한 8가지의 식물병원성 진균 균사의 성장에 미치는 영향을 알아보는 시험이다.This in-flight test is a test to determine the effect on the growth of the eight phytopathogenic fungi mycelium in the culture medium when the oregano extract of the present invention is treated.
각 진균별로 6개의 PDA (Potato Dextrose Agar) 배지에 상이한 농도(무처리구, 100ppm, 150ppm, 200ppm, 250ppm 및 300ppm)의 오레가노 추출물 origan 정유(90%)을 각각 첨가한 후, 각 진균 균총을 상기 배지에 접종한 후, 실온 및 상대습도 60%에서 8일간 암상태에서 배양하였다.Each fungal fungus was added to six different mediums (Potato Dextrose Agar) for each fungus, each containing different concentrations (untreated, 100ppm, 150ppm, 200ppm, 250ppm and 300ppm) of oregano extract origan essential oil (90%). After inoculation, the cells were cultured in the dark for 8 days at room temperature and 60% relative humidity.
그리고나서, 상기한 각 진균에 대한 오레가노 추출물의 방제효과를 측정하기 위해, 시료 전체의 면적을 100%로 보았을 때의 병반 면적율을 %로 표시한 "발병도"를 조사한 후, 아래 식의 "저지율(%)"을 측정하였다:Then, in order to measure the control effect of the oregano extract on each of the fungi described above, after examining the "degree of incidence" expressed in% of the lesion area when the entire area of the sample was viewed as 100%, the "lowering rate" ratio (%) "Was measured:
* 저지율(%) =×100*% Block = × 100
아래 표 1에서는, 상기한 방법에 따라 측정한 저지율(%)을 보여준다.Table 1 below shows the percent blocking measured according to the method described above.
상기 표 1에 기재된 바와 같이, 푸사리움 옥시스포룸(Fusarium oxisporum) 및 보트리티스 시네레아(Botrytis cinerea)를 제외한 나머지 진균에 오레가노 추출물을 처리한 경우에 300ppm의 낮은 농도에서 100%의 저지 효과를 보였으며, 500ppm을 처리한 경우(본 실시예에서는 기재되어 있지 않음)에는 상기 8개 진균 모두에서 100%의 저지 효과를 보였다.As shown in Table 1, when the oregano extract was treated with the remaining fungi except Fusarium oxisporum and Botrytis cinerea, 100% inhibition effect was obtained at a low concentration of 300 ppm. In case of 500 ppm treatment (not described in this example), all 8 fungi exhibited 100% inhibition effect.
표 1의 결과는 도 1의 사진도를 통해서도 확인할 수 있다.The results of Table 1 can also be confirmed through the photographic diagram of FIG. 1.
3. 기외 (In vivo) 시험3. In vivo test
(1) 보트리티스 시네레아(Botrytis cinerea)에 의해 유발되는 오이 잿빛곰팡이병(1) Cucumber gray mold caused by Botrytis cinerea
가. 기주식물 준비end. Host Plant Preparation
하우스 백다다기를 기주식물로서 선택하였으며, 통기성 및 증량을 위해 원예용 부농상토 및 버미큘라이트를 3:1로 혼합한 토양을 사용하였다. 1(립/pot)로 파종하였으며, 이앙기용 묘판에 4줄×7줄로 재배열하여 백다다기가 연약해지는 것을 방지하였다. 그리고 나서, 본엽 2엽이 전개되는 시기 (약 3주) 동안 육묘를 하였다. 이러한 육묘기간동안, 유안비료 (남해화학으로부터 구입)를 0.5%로 희석하여 3회 관주하여 백다다기가 연약하게 하여 발병이 쉽게 일어나도록 유도하였다.House white tea was selected as the host plant, and a soil mixed with horticulture subconcentration and vermiculite in a 3: 1 ratio was used for breathability and increase. The seedlings were planted in 1 (lip / pot) and rearranged into 4 rows x 7 rows in rice transplanters to prevent white teats from becoming soft. Then, seedlings were seeded during the period of development (about 3 weeks) of the two main leaves. During this seedling period, yuan fertilizer (purchased from Namhae Chemical) was diluted to 0.5% and irrigated three times, causing the swelling to become weak, leading to easy onset.
나. 접종원 준비I. Vaccine preparation
PDA 배지에 보트리티스 시네레아(Botrytis cinerea) 균주를 넣고, 약 20℃ 및 암상태에서 10일 동안 배양한 후, 약 20℃ 및 광암상태에서 5일간 추가 배양하여 포자를 형성을 유도하였다. 포자가 다량 형성된 페트리 디쉬에 농도 6g/250ml의 PDB 용액을 첨가한 후, 붓으로 포자를 채취하였다. 채취한 포자를 3겹의 가아제로 여과한 후, 아래와 같은 방법을 사용하여 백다다기에 발병을 유도하였다.Botrytis cinerea strain was added to the PDA medium, and cultured for about 10 days at about 20 ° C. and in a dark state, and then further cultured at about 20 ° C. and a light cancer for 5 days to induce spore formation. After adding a 6 g / 250 ml PDB solution to a Petri dish with a large amount of spores, spores were collected by a brush. After collecting the collected spores with a three-ply gauze, the onset of white tea was induced using the following method.
다. 발병 유도All. Induction
보트리티스 시네레아(Botrytis cinerea) 균주를 상기 백다다기에 분무 접종 (24pot-트레이 당 100ml씩)한 후, 약 20℃ 및 상대습도 약 100%의 암실에서 3일간 방치하여 발병을 유도하였다.Botrytis cinerea strains were inoculated onto the white tea tree (100 ml per 24pot tray), and then left for 3 days in a dark room at about 20 ° C. and a relative humidity of about 100% to induce the onset.
라. 약제 준비la. Pharmaceutical preparation
상이한 농도(500ppm 및 700ppm)의 오레가노 추출물 origan 정유(90%), 및 대조약제로서 크레속심 메틸 (Kresoxym-methyl) 47% 입상수화제 200ppm을 사용하였다.Oregano extract origan essential oil (90%) at different concentrations (500 ppm and 700 ppm), and 200 ppm of Kresoxym-methyl 47% granular watering agent were used as control.
상기 준비된 백다다기를 하나의 트레이에 모은 후, 분무기를 이용하여 동시에 각각 약제를 처리하였다 (12pot-트레이 당 30ml).The prepared white teas were collected in one tray, and then each drug was treated simultaneously using a sprayer (30 ml per 12 pot tray).
상기한 약제의 병해 방제효과의 평균치를 얻기 위해, 상기한 약제 처리 과정을 3회 반복 실시하였다.In order to obtain the average value of the disease control effect of the drug, the drug treatment process described above was repeated three times.
마. 약효 조사hemp. Drug investigation
오이 본엽 1매 전체를 100%로 보았을 때의 병반 면적율을 %로 표시한 "발병도"를 조사한 후, 아래 식의 "방제가"를 구하였다:After examining the "degree of incidence" expressed as a percentage of the lesion area when the whole cucumber leaf was 100%, the "control value" of the following equation was obtained:
* 방제가(%) =×100* Control price = × 100
본 시험에서의 발병도 및 방제가는 다음 표 2에 기재된 바와 같다.The incidence and control values in this test are as shown in Table 2 below.
{상기에서, 발병도(%)1는 3회 반복 시험결과의 평균치이다}{In the above, the incidence (%) 1 is the average value of three repeated test results}
상기 결과는 도 2의 사진도를 통해서도 확인할 수 있다.The result can also be confirmed through the photographic diagram of FIG. 2.
(2) 마그나포르테 그리세아(Magnaporthe grisea)에 의해 유발되는 벼 도열병(2) Rice blast caused by Magnaporthe grisea
가. 기주식물 준비end. Host Plant Preparation
낙동 품종의 벼를 기주식물로서 선택하였으며, 수도용 부농상토를 토양으로사용하였다. 2일 동안 최아시킨 벼를 3(립/pot)로 삼각형 형태로 약 45°각도 및 약 5mm 깊이로 파종한 후, 종자가 보이지 않을 정도로 물을 분무하였다. 그리고 나서, 이앙기용 묘판에 상기 벼를 가득 채워서 약 3주 동안 육묘를 하였다. 이러한 육묘기간동안, 유안비료 (남해화학으로부터 구입)를 1,000배 희석하여 2회 관주하여, 벼를 연약하게 하여 발병이 쉽게 일어나도록 유도하였다.Nakdong varieties of rice were selected as host plants, and subsoils for tap water were used as soil. After two days of sowing rice seedlings 3 (rib / pot) in a triangular shape about 45 ° angle and about 5 mm depth, water was sprayed to the extent that no seeds are visible. Then, the rice seedlings were filled with rice paddy and seedlings were grown for about three weeks. During this seedling period, yuan fertilizer (purchased from Namhae Chemical) was diluted 1,000 times and irrigated twice, so that rice was soft and induced to occur easily.
나. 접종원 준비I. Vaccine preparation
우선, 계대배양용 PDA 배지, 이식 준비용 PDB (Potato Dextrose Broth) 배지, 10:6:5:500의 쌀겨:agar:덱스트로즈:물로 이루어진 포자 형성용 쌀겨 배지를 각각 준비하였다.First, a PDA medium for subculture, a PDB (Potato Dextrose Broth) medium for transplant preparation, and a rice bran medium for spore formation consisting of rice bran: agar: dextrose: water of 10: 6: 5: 500 were prepared, respectively.
PDB 100ml당 계대배양중인 함균-한천 디스크 10개 정도를 넣고, 약 27℃에서 7일간 여액 및 플라스크 전체가 검은색이 될 때까지 진탕배양하여 이식 준비용 균주를 수득하였다.About 10 passage-containing bacterium-agar discs were cultured per 100 ml of PDB and shaken for 7 days at about 27 ° C. until the filtrate and the flask became black.
이렇게 수득한 이식 준비용 균주를 살균된 용기에 넣고 균질화하여 포자 형성용으로 사용하였다. 100ml-플라스크 2개를 사용하였으며, 상층부 15ml + 하층부 15ml/쌀겨 배지 500ml 에서 균주를 균질화하였다.The transplant preparation strain thus obtained was placed in a sterile container and homogenized to be used for sporulation. Two 100 ml-flasks were used and the strains were homogenized in 15 ml upper layer + 15 ml lower layer / 500 ml of rice bran medium.
이렇게 준비된 균주를 약 27℃에서 8일간 암상태에서 배양하여, 다 자란 균사에 스트레스를 주어 형광등 하에 2일간 보관하여 포자형성을 유도하였다. 덩어리 형태로 포자형성이 된 페트리-디쉬에 살균수를 첨가한 후, 붓으로 긁어서 포자를 채취하였다. 채취한 포자를 3겹의 가아제로 여과하여, 아래와 같이 상기 준비된 벼에 접종하였다.The prepared strains were cultured in the dark at about 27 ° C. for 8 days, giving stress to the grown mycelia and storing them under fluorescent lamps for 2 days to induce sporulation. Sterile water was added to the spore-forming petri-dish in a lump form, and then spores were collected by scraping with a brush. The collected spores were filtered with three layers of gauze and inoculated into the prepared rice as follows.
다. 발병 유도All. Induction
상기한 바와 같이 준비된 마그나포르테 그리세아(Magnaporthe grisea) 균주를 벼에 분무 접종 (24pot-트레이 당 100ml씩)한 후, 약 25℃, 상대습도 약 100%의 암실에서 4일간 방치하여 발병을 유도하였다.Magnaporthe grisea strain prepared as described above was sprayed inoculated on rice (100ml per 24pot-tray), and then left for 4 days in a dark room at about 25 ° C. and a relative humidity of about 100% to induce the onset. .
라. 약제 준비la. Pharmaceutical preparation
상이한 농도(300ppm 및 500ppm)의 오레가노 추출물 origan 정유(90%), 및 대조 약제로서 "페림존(Ferimzone)+트리사이클아졸(Tricyclazole) 40% 수화제 (상표명: 논브라)" 50ppm을 사용하였다.Different concentrations (300 ppm and 500 ppm) of oregano extract origan essential oil (90%), and 50 ppm of "Ferimzone + Tricyclazole 40% hydrating agent (trade name: Nonbra)" were used as control agents.
약제처리 이전에, 250ppm의 Tween-20을 분무하여 건조시켰다. 그리고 나서, 상기 준비된 벼를 하나의 트레이에 모은 후, 분무기를 이용하여 동시에 각각 상기 약제를 처리하였다 (12pot-트레이 당 30ml).Prior to drug treatment, 250 ppm of Tween-20 was sprayed and dried. Then, the prepared rice was collected in one tray, and each of the drugs was simultaneously treated using a sprayer (30 ml per 12 pot-tray).
상기한 약제의 병해 방제 효과의 평균치를 얻기 위해, 상기한 약제 처리 과정을 3회 반복 실시하였다.In order to obtain the average value of the pest control effect of the above-mentioned drugs, the above-described drug treatment process was repeated three times.
마. 약효 조사hemp. Drug investigation
아래로부터 2번째엽 전체면적을 30%로 보았을 때의 병반 면적율을 %로 표시한 "발병도"를 조사한 후, 아래 식의 "방제가"를 구하였다:After investigating the "degree of incidence" in percent of lesion area when the total area of the second lobe was 30% from below, the "control value" of the following equation was obtained:
* 방제가(%) =×100* Control price = × 100
본 시험에서의 발병도 및 방제가는 다음 표 3에 기재된 바와 같다.The incidence and control values in this test are as shown in Table 3 below.
{상기에서, 발병도(%)1는 3회 반복 시험결과의 평균치이다}{In the above, the incidence (%) 1 is the average value of three repeated test results}
상기 결과는 도 3의 사진도를 통해서도 확인할 수 있다.The result can also be confirmed through the photographic diagram of FIG. 3.
Claims (5)
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