KR20040053906A - Method for formation of synnemata from mycelium of beauveria bassiana - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 백강균의 균사체로부터 분생자병속을 형성하는 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 각종 생리활성 촉진 효능이 우수하다고 알려진 백강잠의 원료 곰팡이인 백강균(Beauveria bassiana)의 분생포자로부터 형성된 균사체를 이용하여 분생자병속을 형성하는 방법에 관한 것으로, 백강균의 분생포자를 액체배양하고 이로부터 형성된 균사체를 본 발명에 따른 분생자병속 형성용 특수배지에 접종함으로써 백강균의 분생자병속을 형성시키는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for forming the conidia congenital from the mycelium of Bacillus Bacillus. More specifically, the present invention relates to a method for forming a conidia conidia using a mycelium formed from the conidia of spores of Beauveria bassiana , a raw fungus of Baekja, known to be excellent in promoting various physiological activities. The present invention relates to a method for forming a conidia of Bacillus pneumoniae by culturing the liquid and inoculating the mycelium formed therefrom into a special medium for forming conidia in accordance with the present invention.
동충하초를 포함하는 곤충병원성 곰팡이는 전세계적으로 약 100속 750여종이 분포하는 것으로 알려져 있다. 그 중 완전세대사, 즉 자실체를 형성하며 자낭균류 (Ascomycetes)에 속하는 곤충병원성 곰팡이로는 코디셉스속(Cordycepssp.), 시미즈마이세스속(Shimizumycessp.), 토루비엘라속(Torrubiellasp.)등 3속이 알려져 있지만 동충하초라고 할 수 있는 대표적인 속은 코디셉스속이다.Insect pathogenic fungi, including Cordyceps sinensis, are known to have about 100 genera and about 750 species worldwide. Among them, entomopathogenic fungi, which form perennials, that are fruiting bodies and belong to Ascomycetes, are Cordyceps sp., Shimizumyces sp., Torrubiella sp. The third genus is known, but the typical genus can be called Cordyceps genus is Cordyceps genus.
코디셉스속에 속하는 곤충병원성 곰팡이는 현재 전 세계적으로 300여종이 분포하는 것으로 알려져 있으며, 백강균(Beauveria bassiana), 누에동충하초 (Paecilomyces tenuipes)와 같은 불완전균강(Deuteromycetes)에 속하는 대부분의 곤충병원성 곰팡이가 코디셉스속의 불완전세대로 알려져 있다. 페실로마이세스 테뉴이페스(Paecilomyces tenuipes)는 불완전균류이기 때문에 자실체는 형성하지 못하지만 인공배지에서 분생자병속을 잘 형성하여 현재 누에동충하초라는 이름으로 상품화되고 있다. 하지만, 백강잠을 유발하는 백강균은 자실체 또는 분생자병속을 형성하지 못하고 기주표면에서 균사체와 분생포자 형태로만 성장하기 때문에 지금까지 누에동충하초처럼 분생자병속을 상품화하지 못하고 있다.Insect pathogenic fungi belonging to the genus Cody sepseu is known to currently 300 species distributed throughout the world, baekganggyun (Beauveria bassiana), silkworm Cordyceps (Paecilomyces tenuipes) and most of the insect pathogenic fungi Cody sepseu belonging to incomplete gyungang (Deuteromycetes) as It is known as the incomplete generation of the genus. Since Paecilomyces tenuipes are imperfect fungi, they do not form fruiting bodies, but they form a conidia well in artificial media and are currently commercialized under the name of silkworm cordyceps. However, the Bacillus Bacillus, which induces a white nap, does not form a fruiting body or conidia, but grows only in the form of mycelium and conidia on the host surface, and thus has not commercialized the conidia as in silkworm cordyceps.
자실체를 형성하는 일부 코디셉스속 동충하초와 불완전균류인 백강잠은 중국, 한국, 일본 등지에서 예로부터 훌륭한 한방제로 이용되어 왔다. 코디셉스속은 주로 자실체를 복용하고 있지만 백강잠은 백강균의 균사체에 감염된 누에 유충을 복용한다. 자실체를 형성하는 대표적인 동충하초 종으로는 코디셉스 시넨시스(C. sinensis)가 있는데 박쥐나방의 유충을 기주로 자실체를 형성하며 중국에서만 발견된다. 이 밖에도 코디셉스 밀리타리스(C. militaris), 코디셉스 마티아리스(C. martialis), 코디셉스 오피오글로소이디스(C. ophioglossoides), 코디셉스 소보리페라(C. soborifera), 코디셉스 호케시(C. hawkesii), 톨리포클래디엄속 (Tolypocladiumsp.), 보베리아 바시아나(B. bassiana)등이 약용으로 이용되고 있다.Some Cordyceps cordyceps and incomplete fungus Baekgangjam, which form fruiting bodies, have been used as an excellent herbal medicine since ancient times in China, Korea, and Japan. Cordyceps mainly take fruiting bodies, but leuksae take silkworm larvae infected with mycelium. Representative Cordyceps species forming fruiting bodies include Cordyceps sinensis (C. sinensis) Based on the larvae of bat moths, they form fruiting bodies and are found only in China. In addition, Codycept Militaris (C. militaris), Cordyceps Mathias (C. martialis), Cordyceps opioglosoidis (C. ophioglossoides), Cordyceps Soborifera (C. soborifera), Cordyceps Hokesh (C. hawkesii), Tolipocladium (Tolypocladiumsp.), Boberia Bassiana (B. bassiana) Is used for medical purposes.
최근에는 생명공학의 발달로 이러한 동충하초 또는 한방제로부터 유용한 생리활성물질을 탐색하기 위한 연구가 수행되고 있으며, 일부 연구를 통하여 항암효과 등 다양한 생리활성을 나타내는 뉴클레오사이드(nucleoside) 유도체인 코디세핀[Cordycepin(3'-deoxyadenosin)]의 이화학적 특성이 구명되었다. 또한, 코디셉스 시넨시스(C. sinensis)로부터 디-만니톨(D-mannitol), 스테릭 엑시드 (stearic acid), 마이코스(mycose), 에고스테롤(ergosterol), 우라실(uracil), 아데닌(adenine), 아데노신(adenosine)이 확인되었고, 코디셉스 시카데(C. cicadae)로부터 사코마(sarcoma) 180의 성장을 억제하는 다당류인 갈락토만난 (galactomannan)이 분리되었다. 이 외에도 코디셉스 오피오글로소이디스(C. ophioglossoides)로부터도 항암 활성이 있는 다당류가 분리되었다.Recently, research into the development of biotechnology has been conducted to search for useful bioactive substances from these Cordyceps sinensis or herbal medicines. Through some studies, cordycepin, a nucleoside derivative that exhibits various physiological activities such as anticancer effects, has been studied. Cordycepin (3'-deoxyadenosin)] has been characterized. In addition, D-mannitol, steric acid, mycose, ergosterol, uracil, adenine from C. sinensis Adenosine was identified and galactomannan, a polysaccharide that inhibits the growth of sarcoma 180, was isolated from C. cicadae . In addition, polysaccharides with anticancer activity were also isolated from C. ophioglossoides .
백강균은 1835년에 바시(Bassi)에 의해서 동충하초를 포함하는 곤충병원성 곰팡이 중 가장 먼저 발견된 이래로 지금까지 전세계적으로 많은 연구가 진행되어 왔다. 그 결과, 백강균으로부터 항생제 오스포린(oosporin)과 항혈액응고 효과가 있는 바시아틴(bassiatin)이 발견된 바 있다. 그러나, 백강균에 대한 연구는 백강균의 분생자병속이 자연계에서 자연적으로 형성되지 않을 뿐만 아니라 인공적으로도 형성할 수 없었기 때문에 균사체에만 국한되어 왔다. 결과적으로, 백강균의 분생자병속의 형성 및 분생자병속의 생리활성 효과 또는 생리활성 물질에 관한 연구는 전무한 실정이다.Since Baekgang was first discovered by Bassi in 1835 among insect pathogenic fungi including Cordyceps sinensis, much research has been conducted worldwide. As a result, the antibiotics oposporin and bastiatin have anticoagulant effects. However, research on leukemia has been limited to mycelium because the conidia of Leukococcus are not naturally formed in nature but could not be formed artificially. As a result, there is no research on the formation of conidia coliforms and the biologically active effects or bioactive substances of conidia coli.
이에, 상대적으로 좁은 국토면적과 빈약한 부존자원을 지닌 우리나라로서는세계적인 개방화 흐름에 적극적으로 대응할 수 있는 새로운 자원의 개발이 국가 경쟁력을 극대화시키는 최선의 방안이며, 이 같은 측면에서 국내 자생의 유용곰팡이 자원을 탐색, 발굴하여 자원화시키는 기술 개발의 중요성이 강조되고 있는 실정이다. 특히, 현재 국내외에서 연구가 전무한 백강균의 분생자병속 형성 및 유용물질의 분리, 정제, 특성분석 및 대량 생산을 실시함으로써 국내 미생물자원의 부가가치를 증대하는 것이 절실히 요구되고 있다.Therefore, for Korea, which has a relatively narrow land area and poor resources, the development of new resources that can actively respond to the global opening trend is the best way to maximize national competitiveness. The importance of developing technology to explore, discover, and resource resources is emphasized. In particular, it is urgently needed to increase the added value of domestic microbial resources by forming the conidia bottle of Bacillus bacillus, which has not been studied at home and abroad, and separating, purifying, characterizing and mass producing useful materials.
이에, 본 발명자들은 백강균을 보다 효율적으로 이용하고자 백강균의 분생자병속을 형성하는 방법에 대하여 예의 연구한 결과, 백강균(Beauveria bassiana)의 분생포자를 액체배양하여 형성된 균사체를 본 발명에 따른 분생자병속 형성용 특수배지에 접종한 다음 분생자병속의 형성을 위한 최적의 배양 조건을 탐색하여 밝히고 이러한 조건 하에서 배양한 결과, 백강균의 분생자병속을 형성할 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors have made a thorough study on the method of forming the conidia congenital pathology of Bacillus Bacillus in order to use the Bacillus bacterium more efficiently, the mycelium formed by liquid culture of the conidia of Bacillus ( Beauveria bassiana ) according to the present invention After inoculating into a special medium for forming and searching for the optimal culture conditions for the formation of the conidia congener, and found under the cultivation under these conditions, it was found that the conidia of the Bacillus bacterium can be formed and completed the present invention.
따라서, 본 발명의 목적은 동충하초의 불완전세대이며 백강잠의 원료로 곤충병원성 곰팡이인 백강균의 균사체로부터 분생자병속을 형성하는 방법을 제공하는데 있다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a method for forming conidia congenital from the mycelium of Bacillus fungus, an insect pathogenic fungus, as an incomplete generation of Cordyceps sinensis.
본 발명의 다른 목적은 현미, 번데기가루, 난황단백질, 콩가루 및 멸균수 등을 포함하여 제조된 분생자병속 형성용 특수배지 및 이를 이용하여 백강균의 분생자병속을 형성할 수 있는 최적의 배양조건을 제공하는데 있다.Another object of the present invention is a special medium for forming conidia congenital disease, including brown rice, chrysalis, egg yolk protein, soy flour and sterile water, and the optimal culture conditions that can form the conidia of Bacillus bacterium using the same. To provide.
도 1은 백강균의 분생포자 사진이다.1 is a photograph of conidia of the Bacillus.
도 2는 본 발명에 따른 백강균의 분생자병속 형성을 보이는 사진이다.Figure 2 is a photograph showing the conidia congenital formation of Bacillus bacterium according to the present invention.
본 발명은 백강잠의 원료 곰팡이인 백강균(Beauveria bassiana)의 분생포자로부터 형성된 균사체를 이용하여 분생자병속을 형성하는 방법에 관한 것으로, 백강균의 분생포자를 액체배양하고 이로부터 형성된 균사체를 본 발명에 따른 분생자병속 형성용 특수배지에 접종함으로써 백강균의 분생자병속을 형성시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.The present invention relates to a method for forming a conidia by using a mycelium formed from conidia of coliform ( Beauveria bassiana ), which is a raw mold of Bacillus japonicus. It characterized by comprising the step of inoculating into a special medium for forming the conidia of the leukemia to form the conidia of the leukemia.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
백강균에 감염되어 죽은 누에나방의 새끼벌레를 건조시킨 것을 한방에서는 예로부터 백강잠이라고 하여, 어린이들의 경련, 간질, 뇌졸증, 마비된 목의 치료를위한 약재로 이용하여 왔으며, 담이나 가래를 삭이고, 파상풍, 두통, 후두염, 편도선염, 실선증, 피부 가려움증, 단독(丹毒), 당뇨병 등의 치료에도 이용하여 왔다.Dried worms of silkworm moths infected with leukemia have been used as a medicine for the treatment of cramps, epilepsy, strokes and numb necks in children. It has been used for the treatment of headache, laryngitis, tonsillitis, adenosis, itching of the skin, solitary, and diabetes.
백강균(Beauveria bassiana)은 하늘소 등 약 700여 종의 곤충을 감염시킬 수 있을 정도로 곤충병원성 곰팡이 중 기주 범위가 가장 넓은 것으로 알려져 있다. 백강균은 기주의 표면에서 분생포자를 형성하고, 분생포자는 균사에서 분생자병을 형성한 다음, 그 위에 둥근 플라스크 모양의 파이얼라이드(phialide)를 만들며 파이얼라이드 상단에 긴 목을 형성하여 여러 개의 마디를 형성한다. 이러한 마디의 끝부분에 각각 1개씩의 분생포자가 지그재그 모양으로 발달하여 포도송이와 유사한 형태를 지니며 색깔은 무색이다. 배지 상에서 많은 양의 포자가 생성되기 때문에 육안으로는 밀가루처럼 보이는 것이 특징이다.Bacillus bassiana is known to have the broadest host range among insect pathogenic fungi that can infect about 700 species of insects, including the sky cow. Leukococcus forms conidia on the surface of the host, conidia form conidia on mycelia, then form a round flask-shaped pialide on top of it, forming a long neck at the top of the pyramid. To form. At the end of these nodes, one conidia develop in a zigzag shape and have a similar shape to grape clusters. The color is colorless. Because large amounts of spores are produced on the medium, it looks like wheat flour with the naked eye.
본 발명에서는 백강균으로 모든 종류의 기주 곤충으로부터 분리한 백강균을 이용할 수 있으며, 예를 들면 누에로부터 분리한 백강균을 이용할 수 있다. 본 발명에서와 같은 특별한 배양조건하에서 배양한 백강균은 등황색의 분생자병속을 형성하는데 그 길이가 약 10㎝ 이상이며 끝부분에서 가지처럼 갈라진다. 일정한 배양기간이 지나면 그 끝에서 다시 흰색의 균사체가 형성되며 분생포자를 형성한다. 이러한 백강균은 거의 모든 곤충군의 전 생육 단계에 걸쳐 침입하게 된다. 앞에서 기술한 바와 같이, 백강잠을 유발하는 백강균은 자실체 또는 분생자병속을 형성하지 못하고 기주표면에서 균사체와 분생포자 형태로만 성장하기 때문에 지금까지는 분생자병속을 잘 형성하는 누에동충하초처럼 분생자병속을 상품화하지 못하였으나, 본 발명에 따른 현미, 번데기가루, 난황단백질, 콩가루 및 멸균수 등을 포함하여 제조된 분생자병속 형성용 특수배지를 이용하여 백강균을 배양하는 경우, 백강균의 분생자병속, 즉 자실체 모양을 형성할 수 있게 되었다.In the present invention, the bacterium isolated from all kinds of host insects can be used as the bacterium, for example, the bacterium isolated from silkworms can be used. Bacillus cultivars cultured under special culture conditions as in the present invention form an orange-yellow conidia, the length of which is about 10 cm or more and splits like a branch at the end. After a certain incubation period, white mycelium forms at the end and forms conidia. This bacterium enters all stages of growth in almost all insect groups. As described above, the leukococcus, which induces leukemia, grows only in the form of mycelium and conidia on the surface of the host, and until now, commercializes the conidia as well as silkworm cordyceps. Although it did not, when culturing leukemia by using a special medium for forming conidia bottle prepared by using brown rice, chrysalis, egg yolk protein, soy flour and sterile water according to the present invention, the conidia of the leukemia, that is, fruiting body You can shape it.
본 발명에 따른 백강균의 분생자병속 형성 방법은 다음의,The method of forming conidia of the Bacillus bacterium according to the present invention is as follows.
(1) 백강균을 종균으로 하여 그 분생포자를 액체배양하는 단계; 및(1) liquid culture of the conidia with the Bacillus as a seed; And
(2) 상기 액체배양한 백강균의 분생포자로부터 형성된 균사체를 분생자병속 형성용 특수배지에 접종하여 백강균의 분생자병속을 형성시키는 단계;(2) inoculating a mycelium formed from the conidia of spores of the liquid culture Bacillus in a special medium for forming conidia congeners to form a conidia of Bacillus Bacillus;
를 포함한다.It includes.
상기 제 (1) 단계는 백강균의 분생포자로부터 균사체를 형성하여 획득하기 위한 단계로, 통상적으로 알려져 있는 백강균의 배양방법을 적의 선정하여 임의로 이용할 수 있다. 예를 들면, 감자한천배지(potato dextrose agar)에서 배양한 백강균의 분생포자를 감자배지(potato dextrose broth)가 들어있는 250 ㎖ 삼각플라스크에 접종한 다음, 25 ℃의 온도에서 교반회전수 150 rpm으로 약 5일간 배양할 수 있다.The step (1) is a step for obtaining the mycelium from the conidia of the Bacillus sp., And can be arbitrarily selected by appropriately selecting a known method for culturing Bacillus. For example, the conidia of Bacillus spp. Cultured in potato agar medium (potato dextrose agar) were inoculated into a 250 ml Erlenmeyer flask containing potato medium (potato dextrose broth), and then stirred at a rotation speed of 150 rpm at a temperature of 25 ° C. Incubate for about 5 days.
제 (1)단계에서 액체배양된 백강균의 균사체를 각 배지당 10∼15 %씩 접종하여 25∼27 ℃의 온도하에서 5∼10일간, 이후 18∼22 ℃의 온도하에서 20∼30일간 배양하는 것이 바람직하다.Inoculating 10 to 15% of the mycelium of Bacillus Bacillus liquid cultured in the step (1) for each medium and incubating for 5 to 10 days at a temperature of 25 to 27 ° C., and then incubating at a temperature of 18 to 22 ° C. for 20 to 30 days. desirable.
본 발명에 따른 백강균의 분생자병속 형성 방법에 있어서, 백강균의 균사체로부터 분생자병속을 형성시키기 위해서는 배지 내 수분함량은 55∼65 %이고; 공기유입량이 많지 않도록 배양병의 뚜껑을 닫은 상태이고; 온도는 18∼22 ℃이고; 조사량은 1,000∼4,000 lux인 조건 하에서 배양하는 것이 바람직하다.In the method for forming the conidia of the Bacillus mycelium according to the present invention, in order to form the conidia of the Bacillus mycelium from the mycelium, the water content in the medium is 55 to 65%; The lid of the culture bottle is closed so that the air inflow amount is not large; The temperature is 18 to 22 ° C .; It is preferable to incubate under the conditions of 1000-4,000 lux of irradiation amount.
상기 제 (2) 단계의 분생자병속 형성 유도단계에 있어서, 분생자병속 형성을 위한 특수배지는 예컨대, 850 ㎖의 버섯배양병에 현미 30∼35중량%, 번데기가루 1∼7중량%, 난황단백질 1∼3중량%, 콩가루 1∼3중량% 및 멸균수 140 ㎖를 혼합하여 제조한 복합배지를 이용할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니고, 성분 및 그 함량에 있어서, 목적 및 사용방법에 따른 변형이 가능한 것이다.In the step of inducing the formation of the conidia in the step (2), the special medium for forming the conidia conidia, for example, 30 to 35% by weight brown rice, 1 to 7% by weight of chrysalis, egg yolk in an 850 ml mushroom culture bottle A mixed medium prepared by mixing 1% to 3% by weight of protein, 1% to 3% by weight of soy flour, and 140 ml of sterile water may be used, but is not limited thereto. This would be possible.
본 발명에 따른 백강균의 분생자병속 형성 방법에 따라 백강균을 배양하면 접종 3일 후 배지 표면에 엷은 흰색의 균사가 형성되기 시작하며, 7일이 지나면 백강균의 균사체가 배지 전체에 형성된다. 이로부터 18∼22 ℃ 조건하에서 20∼30일이 경과되면 분생자병속이 완전히 자라게 되는데 이때가 수확적기로서 수확한 분생자병속의 건조 무게는 한 개의 재배병 당 5.5∼6.5g정도이다.When white Leukococcus is cultured according to the method for forming the conidia of the Bacillus bacterium according to the present invention, a pale white mycelium starts to form on the surface of the medium after 3 days of inoculation, and after 7 days, the mycelium of Bacillus is formed on the whole medium. After 20-30 days under the condition of 18-22 ℃, the conidia bottle grows completely. At this time, the dry weight of harvested conidia bottle is about 5.5-6.5g per cultivation bottle.
본 발명에 따른 백강균 분생자병속은 자연계에서 자연적으로 형성되지 않는백강균의 분생자병속을 최초로 인공적으로 형성한 것이라는데 그 특징이 있다. 이러한 분생자병속은 그 자체 또는 이로부터 유용한 물질을 분리 및 정제하여 기능성 식품, 다양한 효능의 신약 또는 의약제품으로 개발하는데 유용하게 이용할 수 있는 특징이 있다.Leprosy conidia congenital disease according to the present invention is characterized by the first artificial artificial formation of the conidia congenital bacteria of Bacillus, which is not naturally formed in nature. This conidia bottle has a feature that can be usefully used to develop a functional food, a new drug or a medicinal product of various efficacy by separating and purifying the useful material from itself or from it.
이하, 본 발명의 분생자병속 형성 방법에 관하여 하기 실시예 및 실험예를 통하여 보다 구체적으로 설명할 것이다. 그러나, 이들은 본 발명의 구현예일 뿐 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니고, 본 기술분야의 통상의 변형 및 응용 또한 본 발명의 권리범위에 포함될 수 있을 것이다.Hereinafter, the conidia bottle forming method of the present invention will be described in more detail through the following examples and experimental examples. However, these are only embodiments of the present invention and do not limit the scope of the present invention, and ordinary modifications and applications in the art may also be included in the scope of the present invention.
〔실시예〕백강균 분생자병속의 형성EXAMPLES Formation of Bacillus Bacillus Conidia
누에로부터 분리한 백강균(Beauveria bassiana)을 감자한천배지에서 배양한 다음, 이로부터 분리한 분생포자를 감자배지가 들어있는 250 ㎖ 삼각플라스크에 접종하고 25 ℃의 온도에서 교반회전수 150 rpm으로 약 5일간 배양하였다. Beauveria bassiana isolated from silkworms was incubated in potato agar medium, and then the conidia separated from the silkworm were inoculated into a 250 ml Erlenmeyer flask containing potato medium and agitated at 150 rpm for 5 rpm. Incubated daily.
분생자병속 형성을 위한 특수배지는 850 ㎖의 버섯배양병에 현미 72g, 번데기 가루 8g, 난황단백질 4g, 콩가루 4g과 멸균수 140 ㎖를 넣은 다음 121 ℃에서 50분간 멸균하여 제조하였다. 상기 액체배양된 백강균의 균사체를 상기 특수 배지당 10 %씩 접종하여 26 ℃의 온도하에서 7일간, 이후 20 ℃의 온도하에서 20∼30일간 배양하였다.Special medium for forming conidia bottle was prepared by putting 72g brown rice, chrysalis powder 8g, egg yolk protein 4g, 4g soy flour and 140ml sterilized water in 850ml mushroom culture bottle and sterilized at 121 ℃ for 50 minutes. Mycelia of the liquid cultured Bacillus bacteria were inoculated by 10% per the special medium and incubated at 26 ° C. for 7 days, and then at 20 ° C. for 20-30 days.
상기 과정에서, 백강균의 분생자병속 형성에 있어서 적용되는 배지 및 배양 조건은 하기 실험예에서와 같이 각 조건에 따라 백강균의 균사체로부터 분생자병속이 형성되는지의 여부와 분생자병속을 형성하였을 시의 동결건조기 건조중량을 조사함으로써 선정한 것이다.In the above process, the medium and culture conditions to be applied in the formation of the leukemia congenital disease bottle, whether or not the congenital disease bottle is formed from the mycelia of the bacterium according to each condition as in the following experimental example The freeze dryer was selected by examining the dry weight.
〔실험예 1〕 백강균의 분생자병속 형성을 위한 최적의 호기적 조건 탐색Experimental Example 1 Searching for Optimal Aerobic Conditions for the Formation of Conidia B.
버섯배양병 뚜껑을 이용하여 공기 유입량을 조절함으로써 백강균의 분생자병속 형성을 위한 최적의 호기적 조건을 탐색하였다.The optimal aerobic conditions for the formation of conidia bottle of Bacillus bacterium were investigated by controlling the air inflow by using the mushroom culture bottle cap.
그 결과, 표 1과 같이 뚜껑을 열고 배양하여 공기 유입량을 증가시킨 경우에는 배지 속의 수분함량이 줄어들면서 분생자병속이 형성되지 않은 반면, 뚜껑을 닫고 배양하여 공기 유입량을 감소시킨 경우에는 분생자병속이 형성되는 것으로 나타났다.As a result, as shown in Table 1, when the air inflow was increased by opening the lid, the condensation disease was not formed due to the decrease of water content in the medium. It was found that the genus was formed.
〔실험예 2〕 백강균의 분생자병속 형성을 위한 최적의 온도 조건 탐색Experimental Example 2 Investigation of Optimal Temperature Conditions for Formation of Conidia Bottles of Bacillus Bacillus
분생자병속 배양 배지의 온도를 달리하여 배양한 결과, 표 2와 같이 20 ℃ 배양 하에서만 분생자병속이 생산되었고, 15 ℃ 이하 또는 25 ℃ 이상의 온도에서는 분생자병속은 전혀 생산되지 않았고, 균사체만 생산되었다.As a result of culturing by varying the temperature of the conidia bottle culture medium, as shown in Table 2, the conidia bottle was produced only at 20 ℃ culture, the conidia bottle was not produced at any temperature below 15 ℃ or more than 25 ℃, only mycelium Produced.
〔실험예 3〕백강균의 분생자병속 형성을 위한 최적의 수분 함량 조건 탐색Experimental Example 3 Investigation of Optimum Water Content Condition for Conidia Formation of Bacillus Bacillus
분생자병속 배양 배지의 수분 함량을 각각 50 %에서 90 %까지 조절하여 배양한 다음 분생자병속을 분리하고 이를 동결건조하여 각각의 무게를 측정하였다.The water content of the conidia bottle culture medium was adjusted to 50% to 90%, and then cultured. The conidia bottle was separated and lyophilized to measure the weight of each.
그 결과, 표 3과 같이 수분 함량이 60 %일 때 가장 많은 분생자병속이 생산되었고, 50 %, 70 %, 80 %일 때는 자실체 생산이 적었으며, 90 %일 때는 분생자병속이 형성되지 않았다.As a result, as shown in Table 3, when the water content was 60%, most conidia were produced. At 50%, 70%, and 80%, fruiting bodies were produced less, and at 90%, conidia were not formed. .
〔실험예 4〕백강균의 분생자병속 형성을 위한 최적의 조사 조건 탐색Experimental Example 4 Investigation of Optimal Irradiation Conditions for Conidia Formation of Bacillus Bacillus
최적의 조사 조건을 탐색하기 위하여, 백강균의 균사체를 접종한 버섯 배양병에 각각 3000 lux, 6000 lux 및 9000 lux의 빛을 조사한 다음 배양된 분생자병속을 분리하고 이를 동결건조한 다음 각각의 무게를 측정하였다.In order to find the optimal irradiation conditions, 3000 lux, 6000 lux and 9000 lux light were irradiated to mushroom culture bottles inoculated with mycelium mycelium, and then the cultured conidia bottles were isolated, lyophilized and weighed. It was.
그 결과, 표 4와 같이 조사량이 3,000 lux일 때 가장 많은 분생자병속이 생산되었으며 그보다 더 강한 조사 조건에서는 그보다 더 적게 생산되었다. 또한, 빛을 조사하지 않은 경우, 즉 0 lux일 때는 분생자병속이 형성되지 않았다.As a result, as shown in Table 4, the highest concentration of conidia was produced when the dose was 3,000 lux, and less than that under the stronger irradiation conditions. In addition, when the light was not irradiated, that is, 0 lux, no conidia bottle was formed.
이상의 실험예 1 내지 4를 통하여 알 수 있는 바와 같이, 백강균의 분생자병속을 형성하기 위한 최적의 조건은 배지 내 수분함량은 60 % 전후로 약 55∼65 %이고, 공기 유입량이 많지 않도록 배양병의 뚜껑을 닫은 상태이고, 온도는 20 ℃ 전후로 약 18∼22 ℃이고, 조사량은 3,000 lux 전후로 약 1,000∼4,000 정도인 것을 알 수 있다.As can be seen from the above Experimental Examples 1 to 4, the optimum conditions for forming the conidia congenital pathology of Bacillus Bacillus is about 55 to 65% of the water content in the medium before and after 60%, so that the inflow of the culture bottle It turns out that a lid is closed, the temperature is about 18-22 degreeC about 20 degreeC, and the irradiation amount is about 1,000 to 4,000 degree around 3,000 lux.
이상을 통하여 설명한 바와 같이, 백강균의 균사체로부터 분생자병속을 형성하는 방법에 관한 본 발명은 각종 생리활성 촉진 효능이 우수하다고 알려진 백강잠의 원료 곰팡이인 백강균(Beauveria bassiana)의 분생포자로부터 형성된 균사체를 이용하여 분생자병속을 형성할 수 있는 효과적인 방법을 제공한다. 본 발명의 방법으로 형성된 백강균의 분생자병속은 자연계에서 자연적으로 형성되지 않는 것을 인공적으로 형성한 것으로, 백강균 분생자병속에 대한 약리적 효능과 관련하여 보다 적극적인 연구를 진행시킬 수 있고, 이로부터 유용한 물질을 분리 및 정제하여기능성 식품, 다양한 효능의 신약 또는 의약제품으로 개발하여 유용하게 이용할 수 있으며 이를 대량생산 보급할 경우 국내 농가의 소득향상과 이를 이용한 국민건강 증진 및 체력 향상 등의 효과를 기대할 수 있으므로 매우 유용한 발명인 것이다.As described above, the present invention relates to a method for forming a conidia bottle from the mycelium of Bacillus Bacillus using a mycelium formed from the conidia of the Bacillus Bacillus ( Beauveria bassiana ), a raw fungus of Baekja sleep known to be excellent in promoting various biological activities It provides an effective way to form a conidia bottle. The conidia of the Bacillus bacterium formed by the method of the present invention is artificially formed that is not naturally formed in the natural world, and more active research can be conducted with respect to the pharmacological efficacy of the Bacillus bacterium congenital disease, and useful materials therefrom. It can be usefully developed by separating and purifying functional foods, new drugs or medicinal products with various efficacy, and when it is mass-produced and distributed, it can be expected to improve the income of domestic farmers, improve national health and improve physical fitness using them. It is a very useful invention.
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Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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KR100602430B1 (en) * | 2005-05-04 | 2006-07-20 | 중앙대학교 산학협력단 | Hotwater extracting method from mycelium beauveria bassiana and the method for finding the immunostimulant of the hotwater extract obtained therefrom |
KR100854721B1 (en) * | 2006-06-02 | 2008-08-27 | 전라남도 | Novel strain of Cordyceps sp. and method of killing a long-horned beetle using the same |
KR20220073362A (en) * | 2020-11-26 | 2022-06-03 | 한국생명공학연구원 | New Beauveria bassiana HY-51 strain excellent ability to produce Bombyx batryticatus and uses thereof |
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2002
- 2002-12-16 KR KR10-2002-0080367A patent/KR100468556B1/en not_active IP Right Cessation
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