KR20020041118A - 가금류의 뉴캐슬병의 치료 및 예방 제제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 가금류의 뉴캐슬병의 치료 및 예방에 탁월한 효과를 갖는 세틸피리디늄 클로라이드를 함유하는 제제에 관한 것이다. 본 발명에 따른 세틸피리디늄 클로라이드 함유 제제는 1ppm 이상의 농도에서 뉴캐슬병을 일으키는 뉴캐슬 바이러스에 대해 탁월한 살바이러스 효과를 나타내며, 따라서 가금산업에 치명적인 경제적 손실을 가져오는 뉴캐슬병의 예방에 크게 기여할 것이다.

Description

가금류의 뉴캐슬병의 치료 및 예방 제제{Treating and Prophylactic Preparation for Poultry Newcastle Disease}

본 발명은 가금류의 뉴캐슬병의 치료 및 예방 제제에 관한 것이다. 구체적으로는, 본 발명은 뉴캐슬 바이러스에 의하여 유발되는 가금류의 뉴캐슬병의 치료 및 예방에 관한 것이다. 더 구체적으로는, 본 발명은 가금류의 뉴캐슬 바이러스에 탁월한 살바이러스 효과를 갖는 세틸피리디늄 클로라이드(cetylpyridinium chloride)를 함유하는 제제에 관한 것이다.

세틸피리디늄 클로라이드는 4원소 암모늄 화합물이며 양이온성 계면활성제 물질로서 국내외에서 30년 이상 치아에 생성되는 프라그 및 입냄새 제거를 위한 구강 청결제로 이용되어 왔던 물질로 인체에 무해한 것으로 널리 알려져 있다. 현재까지 세틸피리디늄 클로라이드가 구강내에 존재하는 박테리아들에 대한 살균효과를 나타내는 것은 알려져 있으나, 이와 상이한 가금류에 치명적인 질병인 뉴캐슬병을 일으키는 뉴캐슬 바이러스에 대하여 살바이러스 효과가 있는지는 전혀 알려져 있지 않았다.

뉴캐슬 바이러스는 가금류에 있어 뉴캐슬병을 일으키며, 뉴캐슬병은 전염성이 매우 강할 뿐만 아니라 폐사율이 100%인 가금류에 있어 가장 무서운 제 1종 법정 전염병이다. 일반적으로 닭에 있어서 뉴캐슬 바이러스는 혈구응집역가(HA unit: Hemagglutination unit)가 10 이하 숫자로 감염시켰을 때 발병을 일으키며, 64 이상이면 치사를 일으키는 매우 무서운 바이러스이다. 국내의 경우 뉴캐슬병은 닭의 경우 발생률이 계속 증가하고 있으며 일지역에 국한되지 않고 전국적으로 발생되는 경향이 있다. 따라서, 한번 발병하면 양계 농가에 커다란 피해를 주고 있으나 아직까지 이에 대한 적절한 치료 및 예방법은 없는 실정이다.

뉴캐슬병을 예방하기 위해서는 백신을 접종하거나 위생적인 사육시설 관리를 행하는 것이 필요하나, 백신접종의 경우 백신의 효율성이 매우 낮아 예방에 많은 문제점을 가지고 있다. 한편 뉴캐슬병은 그에 감염된 닭, 뉴캐슬 바이러스에 오염된 사료, 사육장, 음수, 출입차량이나 사람 등에 의해 전파되므로 위생적인 사육시설 관리를 위해서는 사육장 출입시 철저한 살바이러스 처리가 필요하다. 그러나 현재까지 뉴캐슬 바이러스에 탁월한 살바이러스 효과를 나타내는 제제의 부재로 인해 뉴캐슬병의 전염을 방지할 수 있는 위생관리가 전세계적으로 이루어지지 않고 있어 가금 농가에 막대한 피해를 입히고 있다. 한편, 현재 개발된 뉴캐슬 바이러스에 대한 살바이러스제는 낮은 살바이러스력, 인체에 대한 높은 독성, 유독한 냄새 등으로 인해 이들의 사용이 극히 제한적이다. 따라서 뉴캐슬 바이러스에 대한 높은 살바이러스 효과, 무취 및 인체에 대한 저독성의 특성을 갖는 제제의 개발이 절대적으로 필요한 실정이다.

그러므로, 본 발명의 목적은 가금류의 뉴캐슬 질병을 일으키는 뉴캐슬 바이러스에 대해 탁월한 살바이러스력을 갖는 제제를 제공하는 것이다. 또한 본 발명의 목적은 이러한 제제를 사용하여 뉴캐슬병을 치료하고 예방하는 방법을 제공하는 것이다. 이에 본 발명자는 이러한 목적을 달성하고자 예의 연구 노력한 결과, 세틸피리디늄 클로라이드가 구강내에 존재하는 박테리아와 매우 상이한 가금류의 뉴캐슬병을 일으키는 뉴캐슬 바이러스에 대하여도 탁월한 살바이러스 효과를 나타낸다는 사실을 발견함으로서 본 발명을 완성하게 되었다. 전술한 바와 같이, 세틸피리디늄 클로라이드는 구강청결제로서 냄새가 전혀 없으며, 인체에 무해한 것으로 이미 알려져 있는 물질이다.

가금류의 뉴캐슬병은 뉴캐슬 바이러스에 의하여 유발되므로 이를 치료 및 예방하기 위한 제제로는 이러한 바이러스에 대한 탁월한 살바이러스력을 갖는 것이 중요하다. 본 발명은 가금류의 뉴캐슬병의 치료 및 예방에 유효한 뉴캐슬 바이러스에 대하여 탁월한 살바이러스력을 갖는 세틸피리디늄 클로라이드를 함유하는 제제에 관한 것이다.

본 발명에 따른 제제의 유효성분인 세틸피리디늄 클로라이드(CAS No. 123-03-5)는 이미 공지된 화합물로 분자식은 C₂₁H₃₈ClN이며 다음과 같은 화학구조를 갖는다.

본 발명에 따른 가금류의 뉴캐슬 바이러스 질환 치료용 제제는 유효성분인 세틸피리디늄 클로라이드와 다른 통상의 부형제를 혼합한 다음 분말화하여 제조하거나, 세틸피리디늄 클로라이드를 물에 용해시켜 제조한다. 물에 용해시켜 제조하는 경우, 세틸피리디늄 클로라이드의 농도는 1 ppm 이상이어야 한다. 뉴캐슬병의 치료를 위해서는, 상기 살바이러스 제제를 가금류에 주사하거나, 사료에 섞어 섭취하게 하거나, 음수에 섞어 섭취하게 한다. 하루 섭취량은 증상의 정도에 따라 달라지나 대개 1 g 내지 10 g이다. 상기량은 한꺼번에 섭취하게 하거나 여러번에 나누어 섭취하게 하여도 좋다.

뉴캐슬병의 예방을 위해서는 사육 시설 자체 뿐 아니라, 상기 시설에 출입하는 사람이나 차량을 본 발명에 따른 살바이러스제로 처리함으로써 달성될 수 있다. 처리방법은 10 ppm 이상의 세틸피리디늄 클로라이드를 함유하는 제제를 사육 시설의 경우 하루 1회 이상, 출입하는 차량이나 사람의 경우는 사육시설에 출입시 차량 전체나 사람의 표면에 분사하여 소독한다.

본 발명에 따른 살바이러스제를 투여하는 가금류에는 집에서 기르는 조류가 해당되며 바람직하게는, 닭이나 오리이다.

이하 실시예를 통하여 본 발명을 좀 더 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1>

세틸피리디늄 클로라이드를 증류수에 녹여 다양한 농도(900ppm, 450ppm, 225ppm, 112ppm, 56ppm, 5ppm, 1ppm)의 살바이러스제를 제조하였다. 즉 900ppm 농도의 경우는 증류수 1000㎖에 세틸피리디늄 클로라이드 900㎎을 용해시켜 제조하였으며 다른 농도의 살바이러스제도 증류수에 용해시켜 같은 방법으로 제조하였다.

<실시예 2>

본 발명에 따른 살바이러스제의 시험관내(in vitro) 효과시험

1. 바이러스의 분리 및 동정

뉴캐슬 바이러스는 국내 양계농가에서 뉴캐슬병에 감염된 닭으로부터 직접 분리 추출한 바이러스를 사용하였으며, 분리된 바이러스의 확인은 면역학적인 방법과 유전자분석에 의해 확인하였다.

2. 바이러스 증식

뉴캐슬 바이러스를 증식하기 위해 무균상태의 수정된 계란을 37℃가 유지된 습상 부화기에서 10일간 배양하였다. 배양 후 수정란의 계태아 활력과 혈관의 발달상태를 암실에서 검란기로 확인한 후 활력이 좋은 계태아를 선발하여 혈관을 피하여 무균적으로 천공을 하고 장뇨막강에 상기 분리·확인된 뉴캐슬 바이러스를 접종하였다. 접종 후 72시간 동안 일정시간 간격으로 전란(轉卵)을 하면서 바이러스를 증식시켰으며, 바이러스의 증식여부는 혈구응집반응(hemagglutination test)으로 확인하였다.

3. 살바이러스제의 효과 측정

증식된 바이러스를 0.5% 농도의 닭 적혈구와 반응시켜 응집반응을 통하여 바이러스의 혈구응집소가(hemagglutination titer)를 결정한 후 이로부터 혈구응집역가(HA unit: hemagglutinating unit)가 512, 256, 128, 64, 32, 16으로 조정된 바이러스를 살바이러스제의 효과측정에 사용하였다.

상기 다양한 혈구응집역가를 갖는 바이러스를 실시예 1에서 제조한 무균 증류수에 용해시킨 다양한 농도의 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 혼합시켰다. 이렇게 제조된 혼합물 각각을 30개의 10일란 계태아에 접종하고, 900ppm과 450ppm 농도의 세틸피리디늄 클로라이드 함유제제를 같은 숫자의 계태아에 접종하여 음성 대조군(negative control)으로 사용하였다. 또한 양성 대조군(positive control)으로는 102.4의 혈구응집역가와 10.24 혈구응집역가를 갖는 뉴캐슬 바이러스를 같은 숫자의 계태아에 접종하여 사용하였다. 접종 후 부화기에서 37℃하에 72시간 배양하였으며 배양기간 동안 12시간 마다 검란을 실시하여 계태아의 활력을 조사하였다. 72시간 배양 후 5℃에서 하룻밤 동안 냉각(overnight chilling)을 실시한 다음 요막액(allantoic fluid)을 무균적으로 채취하여 바이러스의 증식 유무를 혈구응집반응으로 검정하였다. 실험의 오차를 줄이기 위하여 위에서 언급한 실험을 5회 반복 실시하였으며 세틸피리디늄 클로라이드 제제의 뉴캐슬 바이러스에 대한 살바이러스효과는 다음 표 1과 같다.

살바이러스제의 효과 (혈구응집 적정(HA titration) 실험결과)

처리군

가

나

다

라

마

바

사

아

자

차

카

타

파

하

1 차

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2 차

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3 차

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4 차

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5 차

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<비고>

1차-5차 : 실험 반복수,

가: 900ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 512 혈구응집역가 (HA unit) 혼합,

나: 900ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 256 혈구응집역가 혼합,

다: 900ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 128 혈구응집역가 혼합,

라: 900ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 64 혈구응집역가 혼합,

마: 450ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 512 혈구응집역가 혼합,

바: 225ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 256 혈구응집역가 혼합,

사: 112ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 128 혈구응집역가 혼합,

아: 56ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 64 혈구응집역가 혼합,

자: 5ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 32 혈구응집역가 혼합,

차: 1ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제와 뉴캐슬바이러스 16 혈구응집역가 혼합,

카: 900ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제 (음성 대조군),

타: 450ppm 세틸피리디늄 클로라이드 제제 (음성 대조군),

파: 102.4 혈구응집역가를 갖는 뉴캐슬 바이러스 (양성 대조군),

하: 10.24 혈구응집역가를 갖는 뉴캐슬 바이러스 (양성 대조군),

- : 뉴캐슬바이러스가 검출되지 않았슴,

+ : 뉴캐슬바이러스가 검출되었슴.

상기 표로부터 알수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 살바이러스제는 그 농도가 1ppm 이상에서 탁월한 효과를 나타낸다.

<실시예 3>

본 발명에 따른 살바이러스 제제의 생체내(in vivo) 효과시험

본 시험은 실시예 2에서 입증된 세틸피리디늄 클로라이드의 뉴캐슬 바이러스에 대한 살바이러스 효과를 양계에 직접 적용하여 시험하였다.

시험군을 세개로 나누고 각 시험군 당 5주에서 10주령의 닭 30 마리를 배정하였다. 시험군 1은 뉴캐슬 바이러스에 감염된 닭으로 구성하였고, 시험군 2와 3은 아무런 처리를 하지 않아 작업자를 통해 뉴캐슬 바이러스의 감염이 가능하도록 하였다. 나아가 시험군 3은 계사와 계사주변에 하루 2회 90ppm의 세틸피리디늄 클로라이드 제제를 공중 분사하였다. 또한 시험군 3은 음수에 세틸피리디늄 클로라이드가 최종 9ppm이 되도록 첨가하여 무제한 공급하였다. 시험군 1, 2, 3에 있어 작업자는 동일인으로 한 사람이 계속 처리하도록 하였다. 먼저 작업자는 뉴캐슬병에 걸린 시험군 1에서 음수공급, 사료공급, 분뇨처리등의 관리작업을 완료한 후 시험군 2 에서 작업을 실시하였다. 작업자가 시험군 2에서 작업을 완료한 후에는 90ppm의 세틸피리디늄 클로라이드를 작업복 등에 충분히 분사시켰으며 손, 얼굴, 작업화 등에 같은 농도의 세틸피리디늄 클로라이드를 적용하였다. 이와 같은 처리를 완료한 후 시험군 3에서 동일작업을 실시하게 하였다. 1주일 경과 후 시험군 2에 속한 닭들에게서 뉴캐슬병의 소견이 나타나기 시작해 15일 경과 후에는 모든 닭에서 뉴캐슬병의 소견이 나타났다. 그러나 시험군 3에서는 시험을 완료한 시점인 60일 경과후에도 전혀 뉴캐슬병의 소견이 검출되지 않아 작업자를 통한 뉴캐슬 바이러스의 전염이 이루어지지 않았다. 따라서 이는 세틸피리디늄 클로라이드가 뉴캐슬 바이러스에 대한 완벽한 살바이러스 효과를 나타내 감염이 이루어지지 않았음을 보여준다.

이상의 설명에서 알 수 있듯이, 본 발명의 세틸피리디늄 클로라이드를 함유하는 살바이러스 제제는 뉴캐슬 바이러스에 대한 완벽한 살바이러스 효과를 나타낸다. 일반적으로 10 HA unit 이하의 혈구응집역가를 갖는 뉴캐슬 바이러스로 닭이감염되었을 때 닭이 뉴캐슬병의 증상을 일으켜 2일 내지 15일 이내에 완전히 폐사하는 것으로 알려져 있으며, 64 HA unit 이상의 혈구응집역가를 갖는 뉴캐슬 바이러스로 닭이 감염되었을 때 즉시 폐사하는 것으로 알려져 있다. 따라서 본 발명의 세틸피리디늄 클로라이드로 된 뉴캐슬 바이러스에 대한 살바이러스제는 전세계적으로 만연하고 있는 뉴캐슬병의 치료 및 예방에 크게 기여할 것이다.

이상의 설명들은 본 발명을 좀 더 구체적으로 설명하기 위한 것이지, 이러한 설명들이 본 발명의 범주를 한정하는 것은 아니다.

Claims (8)

1. 유효성분으로 세틸피리디늄 클로라이드를 함유하는 가금류의 뉴캐슬병 치료 제제.
2. 제1항에 있어서, 상기 세틸피리디늄 클로라이드의 함량이 1ppm 이상인 것임을 특징으로 하는 치료 제제.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 가금류가 닭인 것을 특징으로 하는 치료 제제.
4. 제1항 또는 제2항의 제제를 가금류에 투여하는 것에 의한 뉴캐슬병의 치료 방법.
5. 제4항에 있어서, 투여가 제제 단독 또는 제제와 사료나 음수의 혼합물 형태로 이루어지는 것인 치료 방법.
6. 제1항의 제제를 가금류의 사육 시설, 그 주변 또는 사육사에 살포하는 것에 의한 가금류의 뉴캐슬병의 예방 방법.
7. 제6항에 있어서, 상기 제제에서 세틸피리디늄 클로라이드의 함량이 10 ppm 이상인 것임을 특징으로 하는 예방 방법.
8. 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 가금류가 닭인 것을 특징으로 하는 예방 방법.