KR20010029717A

KR20010029717A - 편두통의 병용 치료법

Info

Publication number: KR20010029717A
Application number: KR1020000025597A
Authority: KR
Inventors: 해리 조지 샌즈
Original assignee: 데이비드 존 우드; 화이자 프로덕츠 인크.
Priority date: 1999-05-14
Filing date: 2000-05-13
Publication date: 2001-04-16
Also published as: HUP0001889A3; EP1051994A3; IL136024A0; AU3253800A; EP1051994A2; CO5170509A1; HUP0001889A2; JP2000336031A; HU0001889D0; CA2308824A1; ZA200002343B; PE20010134A1

Abstract

본 발명은 사람을 포함하는 포유류에서 5HT₁수용체 작용제를 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제와 함께 포유류에 투여함으로써 편두통을 치료하는 방법에 관한 것이다. 또한, 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제와 함께 제약상 허용되는 담체, 5HT₁수용체 작용제를 함유하는 제약 조성물에 관한 것이다.

Description

편두통의 병용 치료법 {Combination Therapy for the Treatment of Migraine}

본 발명은 사람을 포함하는 포유류에서 5HT₁수용체 작용제를 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제와 함께 포유류에 투여함으로써 편두통을 치료하는 방법에 관한 것이다. 또한, 제약상 허용되는 담체, 5HT₁수용체 작용제 및 COX-2 억제제를 함유하는 제약 조성물에 관한 것이다. 5HT₁수용체의 작용제의 예는 5HT_1A, 5HT_1B, 5HT_1C, 5HT_1D, 5HT_1E및 5HT_1F수용체중 하나 이상의 작용제이다.

편두통의 신속한 치료를 위한 5HT₁작용제(예를 들어, 엘레트립탄, 리자트립탄, 나라트립탄, 수마트립탄, 졸미트립탄) 및 COX-2 억제제(셀레콕시브(Celecoxib) 또는 발데콕시브(Valdecoxib))의 병용은 현재 사용되는 요법보다 향상된 효능을 제공한다.

증상 치료는 편두통과 관련된 통증을 완화시키는 것을 돕는다. 돈좌성 치료는 편두통의 병태생리를 목표로 하고, 통증, 구역, 광선공포증 및 음성공포증을 포함하여 편두통의 많은 증상을 감소시킨다.

비스테로이드계 소염제(NSAIDS)가 편두통의 증상 치료에 보조하는 것을 나타내었다. 5HT₁작용제의 돈좌성 치료와 함께 하는 치료는 단독 치료보다 추가 효과를 제공하는 것으로 예측된다.

COX-2 억제제는 NSAIDS로부터 발전해 왔고, 추가의 안전성 및 내성의 효능을 갖는 것으로 예측된다. COX-2 억제제는 염증 및 통증과 관련된 COX-2 동위효소를 선택적으로 억제함으로써, COX-1 동위효소에 거의 또는 전혀 영향을 주지 않으면서 편두통의 통증을 감소시키는 것으로 예측된다. 이 동위효소는 위장 및 신장 환경을 유지한다. COX-1 동위효소에 대한 NSAIDS의 영향은 NSAIDS 치료와 관련된 위장 및 신장의 부작용의 발생에 원인이 되는 것으로 생각된다. 따라서, COX-2 억제제의 사용은 추가의 안전성 및 내성에 이점이 있다.

본 발명은 5HT₁수용체 작용제 또는 그의 제약상 허용되는 염과, (a) 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 (b) 하기 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는, 사람을 포함하는 포유류에서 편두통의 치료를 위한 제약 조성물에 관한 것이다.

식중, R¹은 술파밀이고,

R²는 할로알킬이고,

R³는 히드리도 및 알킬로 부터 선택되고,

R⁴는 아릴, 시클로알킬 및 시클로알케닐로부터 선택되고, 임의로는 치환될 수 있는 위치에서 할로, 알킬티오, 알킬술피닐, 알킬, 알킬술포닐, 시아노, 카르복실, 알콕시카르보닐, 아미도, N-모노알킬아미도, N-모노아릴아미도, N,N-디알킬아미도, N-알킬-N-아릴아미도, 할로알킬, 히드록실, 알콕시, 히드록시알킬, 할로알콕시, 술파밀, N-알킬술파밀, 아미노, N-알킬아미노, N,N-디알킬아미노, 헤테로시클릭, 니트로 및 아실아미노로부터 선택되는 하나 이상의 라디칼로 치환된다.

식중, R¹은 알킬, 카르복시알킬, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노카르보닐알킬, 알콕시카르보닐알킬, 카르복실, 알콕시, 할로알콕시, 아랄콕시, 시클로알킬알콕시, 알킬티오, 아랄킬티오, 시클로알킬알킬티오, 알콕시알킬, 아랄콕시알킬, 알킬티오알킬, 아랄킬티오알킬, 알킬아미노알킬, 아릴옥시알킬, 아릴티오알킬, 히드록실, 아미노, 히드록시알킬, 할로알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아랄킬, 할로, 알킬아미노, 아랄킬아미노, N-알킬-N-아랄킬아미노, N-알킬-N-시클로알킬알킬아미노, 아릴카르보닐옥시알킬, 아릴카르보닐티오, 알콕시카르보닐옥시알킬, 알킬아미노카르보닐옥시알킬, 알콕시카르보닐티오알킬 및 알킬아미노카르보닐티오알킬로부터 선택되고,

R³는 시클로알킬, 시클로알케닐 및 아릴로부터 선택되고, 임의로는 치환될 수 있는 위치에서 알킬, 시아노, 카르복실, 알콕시카르보닐, 할로알킬, 히드록실, 히드록시알킬, 할로알콕시, 아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 아미노알킬, 니트로, 알콕시알킬, 알킬술피닐, 알킬술포닐, 아미노술포닐, 할로, 알콕시 및 알킬티오로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 라디칼로 치환되고,

R⁴는 저급 알킬, 히드록실 및 아미노로부터 선택된다.

또한, 본 발명은 5HT₁수용체 작용제 또는 그의 제약상 허용되는 염과, (a) 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 (b) 하기 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 편두통을 치료하는데 유효한 양으로 사람을 포함하는 포유류에 투여하는 것을 포함하는, 상기 포유류의 편두통 치료 방법에 관한 것이다.

〈화학식 1〉

식중, R¹은 술파밀이고,

R²는 할로알킬이고,

R³는 히드리도 및 알킬로부터 선택되고,

〈화학식 2〉

R⁴는 저급 알킬, 히드록실 및 아미노로부터 선택된다.

또한, 본 발명은 5HT₁수용체 작용제 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제를 이 두가지 활성제의 조합이 편두통의 치료 또는 예방에 효과적이도록 하는 양으로 사람을 포함하는 포유류에 투여하는 것을 포함하는, 상기 포유류의 편두통 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명의 바람직한 실시 양태는 상기 기재된 바와 같이 편두통의 치료용 제약 조성물 및 편두통의 치료 방법에 관한 것이며, 이 때 5HT₁수용체 작용제는 엘레트립탄, 나라트립탄, 리자트립탄, 수마트립탄, 알모트립탄, 아비트립탄, 프로바트립탄, 알니디탄, 졸미트립탄, LY 334370, LY 306258, BMS-180048 및 BMS-181885로부터 선택된다.

본 발명의 다른 바람직한 실시 양태는 상기 기재된 바와 같이 편두통의 치료용 제약 조성물 및 편두통의 치료 방법에 관한 것이며, 이 때 COX-2 억제제는 셀레콕시브 또는 발델록시브이다.

본 발명의 다른 실시 양태는 상기 기재된 바와 같이 편두통의 치료용 제약 조성물 및 편두통의 치료 방법에 관한 것이며, 이 때 5HT₁수용체 작용제는 하기 화학식의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

식중, R³, R⁴및 Z는 수소, 할로(예를 들어, 클로로, 플루오로, 브로모 또는 요오도), 임의로는 1 내지 3개의 불소 원자로 치환된 (C₁-C₄) 알킬, 임의로는 1 내지 3개의 불소 원자로 치환된 (C₁-C₄)알콕시 및 (C₁-C₄)알콕시-(C₁-C₄)알킬(이때, 임의로는 알킬 잔기 각각은 1 내지 3개의 불소 원자로 치환될 수 있음)로부터 독립적으로 선택된다.

W는 알킬 잔기가 직쇄 또는 분지쇄일 수 있는 -CH₂-O-(C₁-C₆)알킬이거나, 또는

W는 -CH₂NR¹R²(여기서, R¹및 R²는 수소 및 직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₆)알킬로부터 독립적으로 선택되거나, R¹및 R²는 이들이 부착되어 있는 질소와 함께 포화 4원 모노시클릭 고리, 또는 방향족이 아닌 포화 또는 불포화 5 내지 7원 모노시클릭 고리 또는 방향족이 아닌 포화 또는 불포화 7 내지 10원 비시클릭 고리를 형성하고, 임의로는 NR¹R²의 질소이외에 1개 또는 2개의 헤테로원자를 함유할 수 있고, 이때, 헤테로원자는 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택되고, 1 내지 3개의 고리 탄소 원자, 또는 고리 질소 원자중 한 개는 임의로 및 독립적으로 직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₄)알킬, 직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₆)알콕시, 직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₃)알킬-(C₃-C₇)시클로알킬, 히드록시, 아미노, 시아노, 할로, 아릴-(직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₃)알킬) 또는 헤테로아릴-(직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₃)알킬)로 치환될 수 있고, 이 때 아릴은 페닐 및 나프틸로부터 선택되고, 헤테로아릴은 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 푸라닐, 피라졸릴, 피롤릴, 테트라졸릴, 트리아졸릴, 티에닐, 이미다졸릴, 피라지닐, 피라졸릴, 인돌릴, 이소인돌릴, 피라지닐, 신놀리닐, 피리디닐 및 피리미디닐로부터 선택되고,

단, NR¹R²에 의해 형성된 임의의 고리에서, (a) 단지 1개의 고리 산소 원자가 있을 수 있고, (b) 임의의 고리 질소 원자에 직접 결합된, 히드록시, 알콕시, 알콕시알킬, 시아노, 아미노 또는 알킬아미노 잔기가 있을 수 있고, (c) 또다른 고리 탄소에 이중 결합된 고리 탄소가 없고, 방향족 고리계의 일부는 고리 산소 원자 또는 고리 질소 원자에 결합될 수 없음)이다.

하기 특허 및 특허 출원은 본 발명의 제약 조성물 및 방법에서 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제와 함께 사용될 수 있는 5HT₁작용제를 예시하고 있으며, 이를 제조하는 방법을 언급한다: 1996년 8월 13일에 허여된 미국 특허 5,545,644, 1998년 2월 11일에 허여된 유럽 특허 776,323, 1997년 4월 8일 허여된 미국 특허 5,618,834, 미국을 지명하고 1998년 7월 1일 출원된 국제 특허 출원 PCT/EP98/04176, 1998년 6월 18일에 허여된 유럽 특허 503,440, 1989년 3월 28일에 허여된 미국 특허 4,816,470, 1994년 3월 30일에 허여된 일본 특허 9,423,197, 1988년 8월 23일에 허여된 캐나다 특허 1,241,004, 1997년 9월 24일에 허여된 유럽 특허 497,512, 1994년 4월 15일에 허여된 미국 특허 5,300,506, 1996년 5월 15일에 공개된 유럽 특허 출원 711,769, 1994년 2월 3일에 공개된 국제 특허 출원 WO 94/2460, 1996년 7월 30일에 허여된 미국 특허 5,541,180, 1994년 4월 13일에 공개된 유럽 특허 출원 591,280, 1996년 5월 15일에 허여된 유럽 특허 639,192, 1995년 10월 4일에 공개된 유럽 특허 출원 674,621 및 1997년 8월 13일에 허여된 유럽 특허 486,666. 이들 특허 및 특허 출원은 본원 명세서에 완전히 참고로 포함된다.

하기 참고 문헌은 본 발명의 바람직한 실시 양태에서 사용되는 바와 같이 상기 언급된 특정 5HT₁작용제의 약리학적 특성에 관한 것이다: Robert et al., Cephalagia 18(6), 406, 7월/8월, 1998; Marathe et al., Biopharm. Drug Dispos. 19(6), 381-94, 9월 1998; Saxena et al., Eur. J. Pharmacol. 351(3), 329-39, 26 6월 1998; Goldstein et al., Cephalagia 18(6), 410, 7월/8월, 1998; Buchan et al., Cephalagia 18(6), 410, 7월/8월 1998; Block et al., Cephalagia 18(6), 409-10, 7월/8월 1998; 및 Sheftell et al, Cephalagia 18(6), 7월/8월 1998; Perry et al., Drugs(New Zealand) 55(6), 889-922, 6월 1998; Bomhof et al., Cephalagia(Norway) 18(1), 33-7, 1월 1998; Klasson et al., Headaches(United States) 27(10), 640-5, 11월/12월 1997; Goldstein et al., Cephalagia(Norway) 16(7), 497-502, 11월 1996; Parsons et al., J. Cardiovasc. Pharmacol.(United States) 32(2), 220-4, 8월 1998; 및 Schoenen J., Curr. Opin. Neurol. 10(3), 237-43, 6월 1997. 이들 참고 문헌은 본원 명세에서 완전히 참고로 포함된다.

하기 특허 및 특허 출원은 본 발명의 제약 조성물 및 방법에서 5HT₁작용제와 함께 사용될 수 있는 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제를 예시하고 있으며, 이를 제조하는 방법을 언급한다: 1995년 11월 14일에 허여된 미국 특허 5,466,823, 1997년 5월 27일에 허여된 미국 특허 5,633,272. 상기 특허는 본원 명세서에 완전히 참고로 포함된다.

본원 명세서에 사용되는 용어 "치료하는"는 이 용어가 적용되는 장애 또는 질환, 또는 그러한 장애 또는 질환의 하나 이상의 증상의 진행을 지연시키거나 거꾸로 돌리거나 이를 완화시키거나 예방하는 것을 가리킨다. 본원 명세서에 사용되는 용어 "치료"는 상기 정의된 용어 "치료하는"과 같이 장애 또는 질환을 치료하는 행위를 가리킨다.

본 발명은 상기 제약 조성물의 부분으로서 5HT₁수용체 작용제를 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제와 함께 투여하는 편두통의 치료 방법뿐만 아니라 복합 요법의 이점을 얻기 위한 적절한 투여 지침의 부분으로서 상기 2종의 활성제를 별도로 투여하는 방법에 관한 것이다. 적절한 투여 지침, 각각의 투여량, 및 활성제의 투여사이의 간격은 사용되는 5HT₁작용제 및 COX-2 억제제, 사용되는 제약 제제의 유형, 치료되는 대상의 특성 및 편두통의 심각한 정도에 따라 달라질 것이다. 일반적으로, 본 발명의 방법을 수행할 때, 5HT₁작용제는 평균 70 kg의 성인에 일일 약 0.5 내지 약 100 mg의 양을 단일 또는 분할하여 경구로 투여될 수 있고, COX-2 억제제는 단일 또는 분할하여 투여될 수 있다. 일반적으로 COX-2 억제제는 일일 약 10 내지 약 300 mg의 양으로 투여될 수 있고, COX-2 억제제, 두통의 심각한 정도 및 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. COX-2 억제제는 경구, 비강내, 정맥내, 직장 좌약으로서 또는 "플래쉬" 제제(즉, 물을 사용할 필요가 없으면서 입에서 용해되는 의약)를 사용하여 투여될 수 있다.

하기 표는 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제와 함께 사용되는 경우 특정한 선택적 5HT₁작용제의 바람직한 투여량 범위를 예시한다.

5HT₁작용제	의약의 투여량 범위	의약의 비강내 투여량 범위(mg)
엘레트립탄	20 내지 80	-
리자트립탄	5 내지 10	-
졸미트립탄	1 내지 5	-
수마트립탄	25 내지 100	5 내지 20
나라트립탄	1 내지 5	-
디히드로에르고타민	-	0.5 내지 2
에르고타민	0.5 내지 2	-

COX-2 억제제	투여량 범위(mg) 경구
셀렐록시브(상표명)	50 내지 300
발데콕시브(상표명)	50 내지 300

본 발명의 조성물 및 방법에 사용되는 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제와 함께 5HT₁수용체 작용제 및 그의 제약상 허용되는 염을 단독(2종의 활성제를 함께 또는 별도로 투여함) 또는 제약상 허용되는 담체 또는 희석제와 함께 투여될 수 있다. 이들은 1종 이상의 제약상 허용되는 담체를 사용하여 통상적인 방식으로 제조될 수 있다. 그러한 화합물은 경구, 협측, 비강내, 비경구적(예를 들어, 정맥내, 근육내 또는 피하로) 또는 직장으로, 또는 흡입 또는 취입에 의해 투여하기에 적합한 형태로 투여될 수 있다.

경구 투여(2종의 활성제가 함께 또는 별도로 투여됨)의 경우, 제약 조성물은, 예를 들어, 결합제(예를 들어, 예비 젤라틴화 옥수수 전분, 폴리비닐피롤리돈 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로스), 충전제(예를 들어, 락토스, 미세 결정성 셀룰로스 또는 인산칼슘), 윤활제(예를 들어, 스테아르산 마그네슘, 활석 또는 실리카), 붕해제(예를 들어, 감자 전분 또는 나트륨 전분 글리콜레이트), 또는 습윤제(예를 들어, 나트륨 라우릴 술페이트)와 같은 제약상 허용되는 부형제를 사용하여 통상적인 수단에 의해 제조된 정제 또는 캡슐 형태일 수 있다. 정제는 당업계에 공지된 방법으로 코팅될 수 있다. 경구 투여용 액체 제제는, 예를 들어, 용액, 시럽 또는 현탁액의 형태일 수 있거나, 사용전 물 또는 기타 적합한 비히클로 재현되는 건조 제품으로서 제공될 수 있다. 그러한 액체 제제는 현탁화제(예를 들어, 소르비톨 시럽, 메틸 셀룰로스 또는 수소화 식용 지방), 유화제(예를 들어, 레시틴 또는 아카시아), 비-수성 비히클(예를 들어, 아몬드 오일, 오일성 에스테르 또는 에틸 알코올) 및 방부제(예를 들어, 메틸 또는 프로필 p-히드록시벤조에이트 또는 소르브산)과 같은 제약상 허용되는 첨가제를 사용하여 통상의 수단으로 제조될 수 있다.

협측 투여의 경우, 조성물(2종의 활성제는 함께 또는 별도로 투여됨)은 통상의 방식으로 제조된 정제 또는 로젠지의 형태일 수 있다.

시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제와 본 발명의 5HT₁작용제 및 그의 염을 통상의 도관법 기술 또는 주입을 사용하는 것을 포함하여 주사에 의한 비경구 투여(2종의 활성제는 함께 또는 별도로 투여됨)용으로 제조할 수 있다. 주사용 제제는 방부제를 첨가하여 단위 투여 형태, 예를 들어, 앰풀 또는 다수 투여 용기로 제공될 수 있다. 조성물은 유성 또는 수성 비히클중에 현탁액, 용액 또는 에멀젼 형태일 수 있고, 현탁화제, 안정화제 및(또는) 분산제와 같은 제제를 함유할 수 있다.

또한, 활성제(2종의 활성제는 함께 또는 별도로 투여됨)는 사용전 적합한 비히클, 예를 들어, 발열물질이 없는 멸균된 물로 재현할 수 있는 분말 형태일 수 있다.

또한, 시클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제와 본 발명의 5HT₁작용제 및 그의 염은, 예를 들어, 코코아 버터 또는 기타 글리세라이드와 같은 통상의 좌약 베이스를 함유하는 좌약 또는 보유 관장제와 같은 직장 조성물로 제조될 수 있다.

비강내 투여 또는 흡입에 의한 투여의 경우, 본 발명의 활성 화합물(2종의 활성제는 함께 또는 별도로 투여됨)은 환자에 의해 짜내거나 펌핑되는 펌프 분무 용기로부터 용액 또는 현탁액의 형태, 또는 적합한 추진제, 예를 들어, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 기타 적합한 기체를 사용하여 가압 용기 또는 분무기로부터 에어로졸 분무 형태로서 운반된다. 가압 에어로졸의 경우, 단위 투여량은 밸브를 제공하여 계량된 양을 운반함으로써 결정될 수 있다. 가압 용기 또는 분무기는 활성 화합물의 용액 또는 현탁액을 함유할 수 있다. 본 발명의 분말 혼합물, 및 락토스 또는 전분과 같은 적합한 분말 베이스를 함유하는, 흡입기 또는 통기기에 사용하기 위한 캡슐 및 카트리지(예를 들어, 젤라틴으로 제조함)가 제조될 수 있다.

평균 성인의 편두통을 치료하기 위한 에어로졸 제제(2종의 활성제는 함께 또는 별도로 투여됨)는 바람직하게는 에어로졸의 각각 계량된 투여량 또는 "퍼프(puff)"가 20 내지 1000 ㎍의 본 발명의 활성 화합물을 함유하도록 제조된다. 에어로졸를 사용하는 일일 전체 투여량은 일반적으로 약 100 ㎍ 내지 10 mg일 것이다. 투여는, 예를 들어, 매번 1, 2 또는 3회의 투여량으로 하루에 여러번, 예를 들어, 2, 3, 4 또는 8번일 수 있다.

본 발명의 화합물 또는 그의 염의 5HT₁수용체 작용제 활성은 수용체 공급원으로서 쥐 피질을 사용하고, 방사리간드로서 [³H]8-OH-DPAT를 사용하여 5-HT_1A수용체에 대해 기재된 바와 같이(D. Hoyer et al., Europ. J. Pharmacol., 1985, 118, 13), 및 수용체 공급원으로서 소 꼬리를 사용하고, 방사리간드로서 [³H]5-HT를 사용하여 5-HT_1D수용체에 대해 기재된 바와 같이(R.E. Heuring and S.J. Peroutka, J. Neuroscience, 1987, 7, 894) 생체외 수용체 결합 분석으로 측정될 수 있다.

5-HT_1D결합 부위에서 화합물의 생체외 활성은 하기 과정에 따라 측정될 수 있다. 소 꼬리 조직은 pH 7.7에서 50 mM 트리스-염산염(트리스[히드록시메틸]아미노메탄 염산염)을 함유하는 완충액 20 부피중에 균질화되고 현탁된다. 그 후, 균등액을 45,000G에서 10분 동안 원심분리한다. 그 후, 상청액을 버리고, 그 결과의 펠렛을 pH 7.7에서 50 mM 트리스-염산염 완충액 약 20 부피중에 재현탁시킨다. 그 후, 이 현탁액을 37℃에서 15분 동안 예비-보온한 후, 현탁액을 다시 45,000G에서 10분 동안 원심분리하고, 상청액을 버린다. 그 결과의 펠렛(약 1 그램)을 최종 pH 7.7에서 0.01% 아스코르브산 및 10 mM의 파르길린 및 4 mM의 염화칼슘(CaCl₂)을 함유하는 15 mM 트리스-염산염 완충액 150 ml중에 재현탁시킨다. 현탁액을 사용전 30분 이상 얼음상에 유지한다.

그 후, 억제제, 대조물 또는 비히클을 하기 과정에 따라 보온한다. 20%의 디메틸술폭시드(DMSO)/80%의 증류수 용액 50 ml에, 0.01% 아스코르브산 및 10 mM의 파르길린 및 4 mM의 염화칼슘(CaCl₂)과 100 nM의 8-히드록시-DPAT(디프로필아미노테트랄린) 및 100 nM의 메술레르긴을 함유하는 pH 7.7의 50 mM 트리스-염산염 완충액 중의 삼중수소화 5-히드록시트립타민(2 nM) 200 ml를 가한다. 이 혼합물에 750 ml의 소 꼬리 조직을 가하고, 생성된 현탁액을 교반시켜 균질한 현탁액을 확실히 한다. 그 후, 현탁액을 25℃의 진탕 수조에서 30분 동안 보온한다. 보온을 완료한 후, 현탁액을 유리 섬유 여과기(예를 들어, 와트만(Whatman) GF/B-여과기)를 사용하여 여과시킨다. 그 후, 펠렛을 pH 7.7에서 50 mM 트리스-염산염 완충액 4 ml로 3회 세척한다. 그 후, 펠렛을 5 ml의 섬광 유체(아쿠아졸 2)가 있는 섬광 유리병에 두고, 밤새도록 방치한다. 억제 백분율은 화합물의 각 투여량에 대해 계산될 수 있다. 그 후, IC₅₀값을 억제 백분율 값으로부터 계산할 수 있다.

5-HT_1A수용체에 결합하는 화합물 또는 그의 염의 능력은 하기 과정에 따라 측정될 수 있다. 쥐의 뇌 피질 조직을 균질화하고, 1 g 씩의 시료로 나누고, 0.32 M의 수크로스 용액 10부피로 희석시킨다. 그 후, 현탁액을 900G에서 10분 동안 원심분리하고, 상청액을 분리하고, 70,000G에서 15분 동안 재원심분리한다. 상청액을 버리고, 펠렛을 pH 7.5에서 15 mM 트리스-염산염 10 부피중에 재현탁한다. 현탁액을 37℃에서 15분 동안 보온한다. 예비-보온이 완료된 후, 현탁액을 70,000G에서 15분 동안 원심분리하고, 상청액을 버린다. 그 결과의 조직 펠렛을 4 mM의 염화칼슘 및 0.01% 아스코르브산을 함유하는 pH 7.7의 50 mM 트리스-염산염 완충액 중에 재현탁시킨다. 조직을 실험에 사용할 때까지 -70℃에서 저장한다. 조직을 사용전에 즉시 해동시키고, 10 mm 파르길린으로 희석시키고, 얼음상에 유지한다.

그 후, 조직을 하기 과정에 따라 보온한다. 50 ㎕의 대조물, 억제제 또는 비히클(1%의 DMSO 최종 농도)을 다양한 투여량으로 제조한다. 이 용액에, 4 mM의 염화칼슘, 0.01% 아스코르브산 및 파르길린을 함유하는 pH 7.7의 50 mM 트리스-염산염 완충액 중의 1.5 nM의 농도의 삼중수소화 DPAT 200 ml를 가한다. 그 후, 이 용액에, 750 ml의 조직을 가하고, 생성된 현탁액을 교반시켜 균질한 현탁액을 확실히 한다. 그 후, 현탁액을 37℃의 진탕 수조에서 30분 동안 보온한다. 그 후, 용액을 여과하고, 154 mM의 염화나트륨을 함유하는 pH 7.5의 10 mM 트리스-염산염 4 ml로 2회 세척한다. 억제 백분율이 화합물, 대조물 또는 비히클의 각 투여량에 대해 계산된다. IC₅₀값을 억제 백분율 값으로부터 계산한다.

5-HT_1A및 5-HT_1D수용체에서 작용제 및 길항제 활성은 하기 과정에 따라 단일 포화 농도를 사용하여 결정될 수 있다. 수컷 하트레이(Hartley) 기니피그의 목을 베고, 5-HT_1A수용체를 해마로부터 절개하는 반면, 5-HT_1D수용체를 맥클와인(Mcllwain) 조직 절단칼로 350 mM에서 절단하여 수득하고, 적절한 조각으로부터 흑질을 절개한다. 개별의 조직을 핸드-헬드 유리-테플론(Teflon)(등록상표명) 균질기를 사용하여 1 mM EGTA를 함유하는 5 mM HEPES 완충액(pH 7.5)중에 균질화시키고, 4℃에서 10분 동안 35,000×g에서 원심분리한다. 펠렛을 1 mM EGTA를 함유하는 100 mM HEPES 완충액(pH 7.5)중에서 튜브당 20 mg(해마) 또는 5 mg(흑질)의 단백질의 최종 단백질 농도로 재현탁시킨다. 하기 제제를 가하여 각 튜브에서 반응 혼합물이 2.0 mM MgCl₂, 0.5 mM ATP, 1.0 mM cAMP, 0.5 mM IBMX, 10 mM 포스포크레아틴, 0.31 mg/mL 크레아틴 포스포키나제, 100 mM GTP 및 0.5 내지 1 마이크로퀴리의 [32P]-ATP(30 Ci/mmol: NEG-003 - New England Nuclear)를 함유하도록 한다. 규소화 마이크로퓨지(microfuge) 튜브(3 개)에 조직을 가함으로써 30℃에서 15분 동안 보온을 개시한다. 각 튜브는 20 mL의 조직, 10 mL의 약물 또는 완충액(10배의 최종 농도), 10 mL의 32 nM 작용제 또는 완충액(10배의 최종 농도), 20 mL의 포르스콜린(forskolin)(3 mM 최종 농도) 및 40 mL의 상기 반응 혼합물을 수용한다. 40,000 dpm [3H]-cAMP(30 Ci/mmol: NEG-275 - New England Nuclear)를 함유하는 2% SDS, 1.3 mM cAMP, 45 mM ATP 용액 100 mL을 가하여 보온을 종결하고 칼럼으로부터 cAMP의 회수를 모니터한다. [³²P]-ATP 및 [³²P]-cAMP의 분리를 문헌(Salomon et al., Analytical Biochemistry, 1974, 58, 541-548)의 방법을 사용하여 수행한다. 방사능은 액체 섬광 계수를 이용하여 정량화한다. 최대 억제는 5-HT_1A수용체의 경우 10 mM (R)-8-OH-DPAT, 및 5-HT_1D수용체의 경우 320 nM 5-HT로 정의된다. 그 후, 시험 화합물에 의한 억제 백분율을 5-HT_1A수용체의 경우 (R)-8-OH-DPAT 또는 5-HT_1D수용체의 경우 5-HT의 억제 효과와 비교하여 계산한다. 포르스콜린-자극 아데닐레이트 시클라제 활성의 작용제 유도 억제의 반대 작용은 32 nM 작용제 효과와 비교하여 계산한다.

화합물은 하기 과정에 따라 기니피그에서 5-HT_1D작용제로 유도된 저온증의 길항 작용에 대한 생체내 활성에 대해 시험될 수 있다.

챨스 리버(Charles River)로부터 도착시 250 내지 275 그램으로 칭량되고, 시험시 300 내지 600 그램으로 칭량되는 수컷 하트레이 기니피그를 실험에서 대상물로서 사용한다. 기니피그를 실험전 적어도 7일 동안 빛을 쪼이면서 오전 7시부터 오후 7시까지 표준 실험실 조건하에 수용한다. 음식 및 물을 시험때까지 무제한으로 준다.

본 발명의 화합물을 1 ml/kg 부피의 용액으로서 투여할 수 있다. 사용되는 비히클은 화합물 용해도에 따라 달라진다. 통상, 5.6 mg/kg의 투여량으로 피하에 투여되는 1993년 6월 10일에 공개된 PCT 공개 WO93/11106에 기재된 바와 같이 제조될 수 있는 [3-(1-메틸피롤리딘-2-일메틸)-1H-인돌-5-일]-(3-니트로피리딘-3-일)-아민과 같은 5-HT_1D작용제 전에 시험 화합물을 경구(p.o.)로 60분 또는 피하로 0분동안 투여한다. 제1 온도를 읽기 전에, 각 기니피그를 목재 조각 및 금속 격자 바닥을 갖는 투명 플라스틱 구두 상자에 두고, 30분 동안 환경에 적응시킨다. 그 후, 각 온도를 읽은 후 동물을 동일한 구두 상자에 되돌린다. 각 온도 측정후, 각 동물을 30초 동안 한 손에 확실히 쥔다. 작은 동물 프로브를 사용하는 디지탈 온도계를 온도 측정에 사용한다. 프로브는 에폭시 팁(tip)과 함께 반-가요성 나일론으로 이루어져 있다. 온도 프로브를 직장내로 6 cm 삽입하고, 거기서 30초 동안 또는 안정한 기록이 달성될 때까지 고정시킨다. 그 후, 온도를 기록한다.

경구 스크리닝(screening) 실험에서, "예비-약물" 기준 온도를 90분전에 읽고, 시험 화합물을 60분 전에 투여하고, 추가로 30분 전에 읽는다. 그 후, 5-HT_1D작용제를 0분에서 투여하고, 온도를 30, 60, 120 및 240분 후 읽는다.

피하 스크리닝 실험에서, 예비-약물 기준 온도를 30분전에 읽는다. 시험 화합물 및 5-HT_1D작용제를 동시에 투여하고, 온도를 30, 60, 120 및 240분 후 읽는다.

자료를 뉴만-케울스(Newman-Keuls) 포스트 호크(post hoc) 분석에서 반복 측정을 하는 변수의 2-방향 분석으로 분석한다.

5-HT₁작용제 활성은 수용체 공급원으로서 쥐 피질을 사용하고, 방사리간드로서 [³H]8-OH-DPAT를 사용하여 5-HT_1A수용체에 대해 기재된 바와 같이(D. Hoyer et al., Eur. J. Pharm., 118, 13(1985)), 및 수용체 공급원으로서 소 꼬리를 사용하고, 방사리간드로서 [3H]세로토닌을 사용하여 5-HT_1D수용체에 대해 기재된 바와 같이(R.E. Heuring and S.J. Peroutka, J. Neuroscience, 7, 894(1987)) 생체외 수용체 결합 분석으로 측정될 수 있다.

화합물 및 염은 개의 단리된 복재 정맥 스트립을 수축하는데 있어 수마트립탄을 모방하는 정도로 시험함으로써 편두통 방지제로서 평가될 수 있다(P.P.A. Humphrey et al., Br. J. Pharmacol., 1988, 94, 1128). 이 효과는 공지된 세로토닌 길항제인 메티오테핀에 의해 차단될 수 있다. 수마트립탄은 편두통의 치료에 유용한 것으로 공지되어 있고, 마취된 개에서 경동맥 저항성을 선택적으로 증가시킨다. 이는 문헌(Fenwick et al., British Journal of Pharmacology, 1989, 96, 83)에 기재된 효능의 기초라고 제안되었다.

본 발명의 COX-2 억제제의 활성은 하기 분석으로 입증될 수 있다.

사람 세포에 근거한 COX-1 분석

사람의 말초 혈액을 건강한 지원자로부터 얻고, 3.8% 시트르산나트륨 용액을 사용하여 1/10 부피로 희석하였다. 혈소판이 풍부한 플라즈마를 즉시 얻고, 12 mM의 트리스-HCl(pH 7.4) 및 1.2 mM EDTA를 함유하는 0.14 M 염화나트륨으로 세척하였다. 그 후, 혈소판을 혈소판 완충액(0.2% BSA 및 20 mM HEPES(헤페스)를 함유하는 행크스(Hanks) 완충액(Ca가 없음))으로 세척하였다. 최종적으로, 세척된 사람의 혈소판(HWP)을 2.85×10⁸세포/ml의 농도에서 혈소판 완충액중에 현탁시키고, 사용할 때까지 실온에서 저장하였다. HWP 현탁액(70 ㎕ 분취액, 최종 2.0×10⁷세포/ml)을 96-웰 U 바닥형 플레이트에 두고, 12.6 mM CaCl₂의 10 ㎕ 분취액을 가하였다. 플레이트를 DMSO(최종 농도; 0.01% 미만)중에 용해된 시험 화합물(0.1 내지 100 μM)과 함께 A23187(최종 10 μM, Sigma)로 37℃에서 15분 동안 보온하였다. 제조업자의 과정에 따라 방사면역분석 키트(아머샴(Amersham))를 사용함으로써 정량화된 상청액중의 EDTA(최종 7.7 mM) 및 T×B2를 가하여 반응을 정지시켰다.

사람 세포에 근거한 COX-2 분석

hlL-1β에 의한 COX-2의 유도후 COX-2 활성의 억제

사람 세포에 근거한 COX-2 분석을 상기 기재된 바와 같이 수행하였다(Moore et al., Inflam. Res., 45, 54, 1996). 96-웰 U 바닥형 플레이트에서 합류하는 사람의 배꼽 정맥 내피 세포(HUVECs, Morinaga)를 2% FCS를 함유하는 RPMI1640 100 ㎕로 세척하고, 24시간 동안 37℃에서 hlL-1β(최종 농도 300 U/ml, R ＆ D Systems)로 보온하였다. 세척후, 활성화된 HUVECs를 DMSO(최종 농도; 0.01% 미만)중에 용해된 0.2% BSA, 20 mM 헤페스 및 시험 화합물(0.1 nM 내지 100 μM)을 함유하는 행크스 완충액중에 A23187(최종 30 μM)로 37℃에서 15분 동안 자극하였다. 제조업자의 과정에 따라 방사면역분석 키트(아머샴)를 사용함으로써 적절한 희석후 상청액중에 PGI2의 안정한 대사물질인 6-케토-PGF1α를 정량화하였다.

유도 단계 동안 COX-2의 억제

96-웰 U 바닥형 플레이트에서 합류하는 사람의 배꼽 정맥 내피 세포(HUVECs, Morinaga)를 DMSO(최종 농도; 0.01% 미만)중에 용해된 2% FCS 및 시험 화합물(0.1 nM 내지 100 μM)를 함유하는 RPMI1640 100 ㎕로 세척하고, 24시간 동안 37℃에서 hlL-1β(최종 농도 300 U/ml, R ＆ D Systems)로 보온하였다. 세척후, HUVECs를 0.2% BSA 및 20 mM 헤페스를 함유하는 행크스 완충액중에 A23187(최종 30 μM)로 37℃에서 15분 동안 자극하였다. 제조업자의 과정에 따라 방사면역분석 키트(아머샴)를 사용함으로써 적절한 희석후 상청액중에 PGI2의 안정한 대사물질인 6-케토-PGF1α를 정량화하였다.

생체내 분석

쥐에서 카라게난 유도된 발 부종

수컷 스프라그-돌리(Sprague-Dawley) 쥐(5주의 나이, Charles River Japan)를 밤새도록 금식시켰다. 오른쪽 뒷발의 발목위에 마커를 사용하여 선을 그리고, 발의 부피(VO)를 체적계(Muromachi)를 사용하는 물 치환으로 측정하였다. 동물에 비히클(0.1% 메틸 셀룰로스 또는 5% 트윈(Tween) 80) 또는 시험 화합물(체중 100 그램당 2.5 ml)을 경구로 투여하였다. 1시간 후, 동물에 λ-카라게난(염수중의 1% w/v 현탁액 0.1 ml, Zushikagaku)을 오른쪽 뒷발내에 경피로 주사하고(Winter et al., Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 111, 544, 1962; Lombardino et al., Arzneim. Forsch., 25, 1629, 1975), 3시간 후, 발 부피(V3)를 측정하고, 부피(V3-V0)의 증가를 계산하였다. 통상의 NSAIDs로 달성될 수 있는 최대 억제는 60 내지 70%이고, ED30 값을 계산하였다.

쥐에서 위궤양 형성

시험 화합물의 위궤양 유발도는 통상의 방법을 변형시켜 평가된다(Ezer et al., J. Pharm. Pharmacol., 28, 655, 1976; Cashin et al., J. Pharm. Pharmacol., 29, 330-336, 1977). 수컷 스프라그-돌리 쥐(5주의 나이, Charles River Japan)를 밤새도록 금식시키고, 비히클(0.1% 메틸 셀룰로스 또는 5% 트윈 80) 또는 시험 화합물(체중 100 그램당 1 ml)을 경구로 투여하였다. 6시간 후, 동물을 경부를 잘라 죽였다. 위장을 제거하고, 1% 포르말린 용액(10 ml)으로 팽창시켰다. 위장을 보다 큰 곡선을 따라 절단하여 개방시켰다. 적어도 한 개의 위의 궤양 또는 출혈성 침식(반상출혈을 포함함)을 나타내는 쥐의 수로부터, 궤양화의 빈도를 계산하였다. 동물은 실험동안 음식 또는 물을 섭취하지 않았다.

자료 분석

맥킨토시용 동계학 프로그램 패키지, 시스테트(SYSTAT)(SYSTAT, INC.) 및 스타트뷰(StatView)(Abacus Cencepts, Inc.)가 사용된다. 시험 화합물로 치료되는 군과 대조군 사이에 차이는 아노바(ANOVA)를 사용하여 시험된다. IC50(ED30) 값은 농도(투여량) 대 억제 백분율의 로그-선형 회귀선에 대한 식으로부터 계산된다.

COX-2 선택도는 COX-1 억제 대 COX-2 억제의 IC₅₀값의 비로 결정될 수 있다. 일반적으로, COX-1/COX-2 억제비가 2 이상인 화합물은 양호한 COX-2 선택도를 갖는다고 말할 수 있다.

COX-2 억제제는 염증 및 통증과 관련된 COX-2 동위효소를 선택적으로 억제함으로써, COX-1 동위효소에 거의 또는 전혀 영향을 주지 않고 편두통을 감소시키는 것으로 예측된다. COX-2 억제제의 사용은 추가 안전성 및 내성에 이점이 있다.

Claims

5HT₁수용체 작용제 또는 그의 제약상 허용되는 염과, (a) 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 (b) 하기 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는, 편두통 치료용 제약 조성물.

〈화학식 1〉

식중, R¹은 술파밀이고,

R²는 할로알킬이고,

R³는 히드리도 및 알킬로부터 선택되고,

R⁴는 아릴, 시클로알킬 및 시클로알케닐로부터 선택되고, 임의로는 치환될 수 있는 위치에서 할로, 알킬티오, 알킬술피닐, 알킬, 알킬술포닐, 시아노, 카르복실, 알콕시카르보닐, 아미도, N-모노알킬아미도, N-모노아릴아미도, N,N-디알킬아미도, N-알킬-N-아릴아미도, 할로알킬, 히드록실, 알콕시, 히드록시알킬, 할로알콕시, 술파밀, N-알킬술파밀, 아미노, N-알킬아미노, N,N-디알킬아미노, 헤테로시클릭, 니트로 및 아실아미노로부터 선택되는 하나 이상의 라디칼로 치환된다.

〈화학식 2〉

식중, R¹은 알킬, 카르복시알킬, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노카르보닐알킬, 알콕시카르보닐알킬, 카르복실, 알콕시, 할로알콕시, 아랄콕시, 시클로알킬알콕시, 알킬티오, 아랄킬티오, 시클로알킬알킬티오, 알콕시알킬, 아랄콕시알킬, 알킬티오알킬, 아랄킬티오알킬, 알킬아미노알킬, 아릴옥시알킬, 아릴티오알킬, 히드록실, 아미노, 히드록시알킬, 할로알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아랄킬, 할로, 알킬아미노, 아랄킬아미노, N-알킬-N-아랄킬아미노, N-알킬-N-시클로알킬알킬아미노, 아릴카르보닐옥시알킬, 아릴카르보닐티오, 알콕시카르보닐옥시알킬, 알킬아미노카르보닐옥시알킬, 알콕시카르보닐티오알킬 및 알킬아미노카르보닐티오알킬로부터 선택되고,

R³는 시클로알킬, 시클로알케닐 및 아릴로부터 선택되고, 임의로는 치환될 수 있는 위치에서 알킬, 시아노, 카르복실, 알콕시카르보닐, 할로알킬, 히드록실, 히드록시알킬, 할로알콕시, 아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 아미노알킬, 니트로, 알콕시알킬, 알킬술피닐, 알킬술포닐, 아미노술포닐, 할로, 알콕시 및 알킬티오로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 라디칼로 치환되고,

R⁴는 저급 알킬, 히드록실 및 아미노로부터 선택된다.
제1항에 있어서, 5HT₁수용체 작용제가 엘레트립탄, 리자트립탄, 졸미트립탄, 수마트립탄 및 나라트립탄으로부터 선택되는 제약 조성물.
제1항에 있어서, 시클로옥시게나제-2 억제제가 셀레콕시브(Celecoxib) 또는 발데콕시브(Valdecoxib)인 제약 조성물.
제1항에 있어서, 5HT₁수용체 작용제 및 시클로옥시게나제-2 억제제가 별도로 투여되는 활성제의 조합이 편두통 치료에 유효하도록 하는 투여 지침에 따라 별도로 투여되는 것인 제약 조성물.
제1항에 있어서, 5HT₁수용체 작용제 및 시클로옥시게나제-2 억제제가 함께 투여되는 활성제의 조합이 편두통 치료에 유효하도록 하는 투여 지침에 따라 함께 투여되는 것인 제약 조성물.
제1항에 있어서, 5HT₁수용체 작용제가 일일 약 0.5 내지 약 100 mg의 양으로 투여되고, 시클로옥시게나제-2 억제제가 일일 약 10 내지 약 300 mg의 양으로 투여되는 것인 제약 조성물.