KR102575452B1 - Microorganism strain having activity of improving liver function and use thereof - Google Patents

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Abstract

본 발명은 간 기능 개선 활성을 갖는 균주 및 이의 용도에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명은 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 개선용 건강식품 조성물 및 간 기능 개선용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 상기 균주는 ALT(Alanine Aminotransferase) 또는 AST(Aspartate Aminotransferase) 활성을 억제시키고, 간 내 총 콜레스테롤 또는 중성지방의 농도 증가를 억제시키며 간 내 지방 축적을 억제하는 활성이 우수하여, 간 기능 개선을 위한 식품조성물 및 약학적 조성물의 제조에 유용하게 사용될 수 있다. The present invention relates to strains having liver function improving activity and uses thereof, and specifically, the present invention relates to Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain and Lactococcus lac This relates to a health food composition for improving liver function and a pharmaceutical composition for improving liver function, comprising at least one strain selected from the group consisting of strains KF140 (accession number KCCM11673P), a lysate thereof, or a culture thereof as an active ingredient. The strain of the present invention inhibits ALT (Alanine Aminotransferase) or AST (Aspartate Aminotransferase) activity, suppresses the increase in the concentration of total cholesterol or triglyceride in the liver, and has excellent activity to inhibit fat accumulation in the liver, thereby improving liver function It can be usefully used for the preparation of food compositions and pharmaceutical compositions for.

Description

간 기능 개선 활성을 갖는 균주 및 이의 용도{Microorganism strain having activity of improving liver function and use thereof}Microorganism strain having activity of improving liver function and use thereof {Microorganism strain having activity of improving liver function and use thereof}

본 발명은 간 기능 개선 활성을 갖는 균주 및 이의 용도로서, 구체적으로 본 발명은 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 또는 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주를 이용한 간 기능 개선용 건강식품 조성물 및 약학적 조성물에 관한 것이다.The present invention is a strain having liver function improving activity and a use thereof, and specifically, the present invention relates to Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain or Lactococcus lactis KF140. (Accession No. KCCM11673P) It relates to a health food composition and pharmaceutical composition for improving liver function using a strain.

간은 인체에서 혈액 저장 및 순환, 혈액량 조절과 방어해독작용을 하며 정신적 활동과 밀접하게 관련되어 있다고 알려져 있다. 산업화에 따른 공해물질, 유독물질에 우리의 몸은 항상 노출되어 있어 우리의 간은 끊임없이 해독작용에 시달리고 있다.It is known that the liver is closely related to mental activity, performing blood storage and circulation, blood volume control and defense detoxification in the human body. Our bodies are always exposed to pollutants and toxic substances due to industrialization, so our liver is constantly suffering from detoxification.

또한, 간은 완충능력이 큰 기관으로 질환의 초기단계에서는 잘 나타나지 않고 상당히 악화되어서야 발견된다. 간경화, 간암 등은 각종 간질환이 만성적으로 진행될 경우 공통적으로 이르는 마지막 단계이다. 그 원인으로는 알코올, 약물, 화학약품, 바이러스성 간염, 담도질환, 혈색소증(hematochromatosis)과 같은 대사성 질환, 자가 면역성질환 등이 있으나 원인을 알 수 없는 경우도 많아 간은 초기의 건강관리가 매우 중요한 기관이다.In addition, the liver is an organ with a large buffering capacity, so it does not appear well in the early stages of the disease and is only discovered when it is significantly deteriorated. Liver cirrhosis, liver cancer, etc. are common last stages of chronic liver disease. Causes include alcohol, drugs, chemicals, viral hepatitis, biliary tract disease, metabolic diseases such as hemochromatosis, and autoimmune diseases. It is an institution.

최근 한국인의 건강수준에서 간암에 의한 사망률은 10만 명당 23.4명으로 세계 1위이고 만성 간질환의 경우도 28.8명으로 3번째로 조사되었다. 또한 최근 통계청에서 우리나라 40대의 경우 인구 10만 명당 56.1명이 간질환으로 가장 높은 사망원인으로 발표하여 간질환이 중요한 사회적 문제로 대두되고 있으며, 최근에는 정신적인 스트레스로 인한 간 손상도 발병수가 증가하고 있어 간 기능 개선을 위한 연구에 더욱 집중이 되고 있다.Recently, the mortality rate due to liver cancer in terms of health of Koreans is 23.4 per 100,000 people, ranking first in the world, and the case of chronic liver disease is also ranked third at 28.8. In addition, the National Statistical Office recently announced that 56.1 deaths per 100,000 people in Korea in their 40s are the highest cause of death due to liver disease, and liver disease is emerging as an important social problem. Research on improving liver function is becoming more focused.

한편, 프로바이오틱스는 오랫동안 우리 식생활에서 이용되어 왔으며, 특히 정장 작용, 항암효과 및 면역증강 효과 등의 유익한 효과가 보고되어 왔다.On the other hand, probiotics have been used in our diet for a long time, and in particular, beneficial effects such as intestinal function, anticancer effect, and immune enhancing effect have been reported.

이에 본 발명자들은 프로바이오틱스, 특히 본 발명자들이 이전 연구를 통해 신균주로 분리 및 동정한 균주인 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주에 대한 새로운 생리활성을 연구하던 중, 상기 세균들이 간 기능을 효과적으로 개선할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors have developed probiotics, in particular, Lactobacillus pentosus KF8 (accession number KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (accession number KCCM11981P) strain, and Lactococcus, which are strains isolated and identified as new strains by the present inventors through previous studies. The present invention was completed by confirming that the bacteria can effectively improve liver function while studying the new physiological activity of the lactis KF140 (accession number KCCM11673P) strain.

대한민국 공개특허 제10-2018-0103772호Republic of Korea Patent Publication No. 10-2018-0103772

따라서 본 발명의 목적은 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 개선용 건강식품 조성물을 제공하는 것이다.Therefore, an object of the present invention is at least one selected from the group consisting of Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain and Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) strain. It is to provide a health food composition for improving liver function comprising a strain, its lysate or its culture as an active ingredient.

또한 본 발명의 다른 목적은 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 개선용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is one selected from the group consisting of Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain and Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) strain. It is to provide a pharmaceutical composition for improving liver function comprising the above strain, its lysate or its culture as an active ingredient.

상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서, 본 발명은 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는, 간 기능 개선용 건강식품 조성물을 제공한다. In order to achieve the object of the present invention as described above, the present invention is Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain and Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) It provides a health food composition for improving liver function, comprising at least one strain selected from the group consisting of strains, a lysate thereof, or a culture thereof as an active ingredient.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 ALT(Alanine Aminotransferase) 또는 AST(Aspartate Aminotransferase) 활성을 억제시키고, 간 내 총 콜레스테롤 또는 중성지방의 농도 증가를 억제시키고, 또는 간 내 지방 축적을 억제할 수 있다. In one embodiment of the present invention, the composition inhibits ALT (Alanine Aminotransferase) or AST (Aspartate Aminotransferase) activity, inhibits an increase in total cholesterol or triglyceride concentration in the liver, or inhibits fat accumulation in the liver. can

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 건강식품 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the health food composition may be any one formulation selected from powder, granule, pill, tablet, capsule, candy, syrup and beverage.

또한 본 발명은 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는, 간 기능 개선용 약학적 조성물을 제공한다.In addition, the present invention is one or more strains selected from the group consisting of Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain and Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) strain, It provides a pharmaceutical composition for improving liver function, containing its lysate or its culture as an active ingredient.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은, ALT(Alanine Aminotransferase) 또는 AST(Aspartate Aminotransferase) 활성을 억제시키고, 간 내 총 콜레스테롤 또는 중성지방의 농도 증가를 억제시키고, 또는 간 내 지방 축적을 억제할 수 있다. In one embodiment of the present invention, the composition inhibits ALT (Alanine Aminotransferase) or AST (Aspartate Aminotransferase) activity, inhibits an increase in total cholesterol or triglyceride concentration in the liver, or inhibits fat accumulation in the liver can do.

본 발명은 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 개선용 건강식품 조성물 및 간 기능 개선용 약학적 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 상기 균주는 ALT(Alanine Aminotransferase) 또는 AST(Aspartate Aminotransferase) 활성을 억제시키고, 간 내 총 콜레스테롤 또는 중성지방의 농도 증가를 억제시키며 간 내 지방 축적을 억제하는 활성이 우수하여, 간 기능 개선을 위한 식품조성물 및 약학적 조성물의 제조에 유용하게 사용될 수 있다. The present invention relates to one or more strains selected from the group consisting of Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain and Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) strain, It relates to a health food composition for improving liver function and a pharmaceutical composition for improving liver function comprising a lysate or its culture as an active ingredient, wherein the strain of the present invention inhibits ALT (Alanine Aminotransferase) or AST (Aspartate Aminotransferase) activity It has an excellent activity to inhibit the increase in total cholesterol or triglyceride concentration in the liver and the accumulation of fat in the liver, so it can be usefully used in the preparation of food compositions and pharmaceutical compositions for improving liver function.

도 1은 본 발명의 일실시예에서 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주를 이용하여 제조된 간 기능 개선용 건강식품의 형태를 사진으로 나타낸 것이다.1 is prepared using Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain and Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) strain in one embodiment of the present invention. This is a picture showing the form of health food for improving liver function.

본 발명은 간 기능 개선 활성을 갖는 균주의 신규 용도에 관한 것으로, 상기 간 기능 개선 활성을 갖는 균주는 본 발명의 발명자가 이전에 최초로 분리 및 동정하여 공개된 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주이다.The present invention relates to a novel use of a strain having liver function improving activity, wherein the strain having liver function improving activity is Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) previously isolated and identified and published by the inventor of the present invention for the first time. The strains, Bacillus subtilis KF11 (accession number KCCM11981P) strain and Lactococcus lactis KF140 (accession number KCCM11673P) strain.

본 발명자들은 상기 본 발명의 균주가 간 기능을 개선할 수 있고 간을 보호하는 활성이 있는지 확인하기 위한 실험을 수행하였는데, 그 결과, 상기 균주를 분말화하여 제조된 식품 형태를 간 손상 동물 모델에 투여한 결과, 간 세포를 보호하고 간 손상 지표인 ALT 및 AST 활성을 억제하는 효과가 우수한 것을 확인하였다.The present inventors performed an experiment to confirm whether the strain of the present invention can improve liver function and has liver-protecting activity. As a result, the food form prepared by powdering the strain was used as a liver damage animal model. As a result of administration, it was confirmed that the effect of protecting liver cells and inhibiting ALT and AST activities, which are indicators of liver damage, was excellent.

상기 ALT(Aspartate Aminotransferase) 대표적인 간 손상 지표로 간, 신장, 심장, 근육 등에 있는 효소로 간에 가장 많은 양이 존재하며, 간세포 손상 시 예민하게 반응하여 그 수치가 증가하기 때문에 간질환의 지표로 사용된다. 주로 간이 다양한 이유로 손상될 경우, 혈중으로 방출되어 혈중 수치가 상승한다.ALT (Aspartate Aminotransferase) is a typical indicator of liver damage. It is an enzyme found in the liver, kidneys, heart, muscle, etc., and is present in the largest amount in the liver. It reacts sensitively to liver cell damage and increases its level, so it is used as an indicator of liver disease. . Mainly when the liver is damaged for various reasons, it is released into the blood and blood levels rise.

또한, 다른 간 손상 지표인 AST(alanine aminotransferase) 역시 간 손상 시 혈중으로 방출되어 정상 상태인 경우에 비해 혈중 수치가 상승하므로, 이러한 지표들의 함량 측정을 통해 간 손상 정도를 확인할 수 있다.In addition, since AST (alanine aminotransferase), another indicator of liver damage, is also released into the blood during liver damage and the blood level rises compared to the normal state, the degree of liver damage can be confirmed by measuring the content of these indicators.

한편, 본 발명의 균주인 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 또는 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주를 간 손상이 유발된 마우스 군에 투여한 결과, 혈중 증가된 ALT 및 AST 수치가 2배 이상으로 감소되는 효과가 있음을 확인하였다.On the other hand, the strains of the present invention, Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain or Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) strain were administered to mice with liver damage. As a result of administration to the group, it was confirmed that there was an effect of reducing the increased ALT and AST levels in the blood by more than two times.

또한 본 발명의 일실시예에서는 지방간 발병에 따른 간 내 증가된 총콜레스테롤과 중성지방의 함량을 본 발명의 균주 투여 시 감소시킬 수 있는지를 분석하였는데, 본 발명의 균주를 지방간 동물모델에 투여한 결과, 간 내 총콜레스테롤과 중성지방의 함량이 효과적으로 억제되는 것을 확인할 수 있었고, 간 내 지방 축적이 억제되는 것을 확인할 수 있었다.In addition, in one embodiment of the present invention, it was analyzed whether the increased content of total cholesterol and triglyceride in the liver due to the onset of fatty liver could be reduced when the strain of the present invention was administered. The result of administering the strain of the present invention to a fatty liver animal model , it was confirmed that the contents of total cholesterol and triglyceride in the liver were effectively suppressed, and it was confirmed that the accumulation of fat in the liver was suppressed.

지방간은 간장에서의 지질 단백질 형성 및 방출의 저해 또는 중성지방(triglyceride) 합성의 항진에 의해 발병된다고 알려져 있다. 에티오닌(Ethionine)은 RNA와 단백질의 합성을 억제하여 간에서 ATP의 생성을 감소시키고 이로 인해 중성지방의 혈장으로의 배출을 저해하며, 또한 지질단백질의 합성도 저해하여 이차적으로 간으로부터 지질의 방출을 억제하므로 에티오닌 투여시 간조직 내 중성지방이 축적되고 혈중 중성지방 및 총 콜레스테롤양은 급격히 저하되어 미세수포 지방증 (microvasicular steatosis)을 일으킨다. 따라서 에티오닌으로 유발되는 지방간 모델에서는 간조직 내 중성지방 함량 및 혈청 내 총 콜레스테롤 함량이 모델의 지표로 이용된다.Fatty liver is known to be caused by inhibition of lipoprotein formation and release in the liver or enhancement of triglyceride synthesis. Ethionine inhibits the synthesis of RNA and protein, thereby reducing the production of ATP in the liver, thereby inhibiting the release of neutral fat into the plasma, and also inhibiting the synthesis of lipoproteins, resulting in secondary depletion of lipids from the liver. Since it suppresses the release of ethionine, when ethionine is administered, triglyceride in the liver tissue accumulates, and the amount of triglyceride and total cholesterol in the blood decreases rapidly, causing microvasicular steatosis. Therefore, in the fatty liver model induced by ethionine, the triglyceride content in liver tissue and the total cholesterol content in serum are used as model indicators.

이러한 점에서 본 발명의 균주는 간 조직 내 중성지방 및 총 콜레스테롤을 감소시킬 수 있는 효과가 있음을 확인하였기에 지방간의 개선 및 치료에 유용함을 알 수 있다.In this regard, it can be seen that the strain of the present invention is useful for improving and treating fatty liver because it was confirmed that there is an effect of reducing triglyceride and total cholesterol in liver tissue.

나아가 본 발명의 다른 일실시예에서는 임상시험심사위원회(IRB)의 규정에 따라 진행된 자원된 사람들을 대상으로 임상시험을 수행한 결과, 본 발명의 균주를 이용하여 제조된 건강식품을 섭취한 군의 경우, 이를 섭취하지 않은 군에 비해 혈중 ALT 및 AST의 활성이 억제되어 간 기능을 개선하는 효과가 있는 것을 알 수 있었으며, 총 콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤의 함량도 본 발명의 균주 섭취에 의해 감소되는 것을 확인할 수 있었다.Furthermore, in another embodiment of the present invention, as a result of conducting a clinical trial on volunteers conducted according to the regulations of the Institutional Review Board (IRB), the group who consumed the health food prepared using the strain of the present invention case, it was found that the activity of ALT and AST in the blood was suppressed compared to the group that did not consume it, and it was found that there was an effect of improving liver function, and it was confirmed that the content of total cholesterol and LDL cholesterol was also reduced by ingestion of the strain of the present invention. could

따라서 이러한 결과를 통해 본 발명자들은 본 발명자들에 의해 최초로 분리 및 동정한 균주인 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 또는 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주를 간 기능 개선을 위한 용도로 사용할 수 있음을 알 수 있었다.Therefore, through these results, the present inventors found that the strains first isolated and identified by the present inventors, Lactobacillus pentosus KF8 (accession number KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (accession number KCCM11981P) strain, or Lactococcus lactis KF140 It was found that the strain (accession number KCCM11673P) could be used for improving liver function.

그러므로 본 발명은 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는, 간 기능 개선용 건강식품 조성물을 제공할 수 있다.Therefore, the present invention provides one or more strains selected from the group consisting of Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain and Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) strain, It is possible to provide a health food composition for improving liver function, including its lysate or its culture as an active ingredient.

본 발명의 상기 간 기능 개선용 건강식품 조성물에 함유될 수 있는 상기 균주의 수는 1.0×105 CFU/g~ 2.0×1015 CFU/g일 수 있으며, 본 발명의 건강식품 조성물에는 상기 균주 중, 1 종류의 균주를 포함할 수 있으며, 또는 1 종류 이상의 혼합 균주를 포함할 수 있으며, 가장 바람직하게는 상기 3종류의 균주를 모두 혼합한 혼합균주로 포함할 수 있다.The number of strains that may be contained in the health food composition for improving liver function of the present invention may be 1.0×10 5 CFU/g to 2.0×10 15 CFU/g, and the health food composition of the present invention includes among the strains. , It may include one type of strain, or may include one or more types of mixed strains, and most preferably may include a mixed strain in which all three types of strains are mixed.

본 발명의 실험에서 규명한 상기 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 또는 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주의 간 기능 개선 효과, 즉 혈중 ALT 및 AST 활성 억제, 간 조직 내 총 콜레스테롤 및 중성지방 억제, 간 내 지방축적 억제 효과는 상기 단독 균주 처리에 의해서도 유도될 수 있으며, 상기 균주를 2종 이상 혼합한 경우, 더 우수한 효과를 나타낼 수 있으며, 3가지 균주를 모두 혼합한 경우 가장 우수한 효과를 나타낼 수 있다. 본 발명에서 상기 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형의 식품 조성물은 당 업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 예를 들면, 건강식품으로는 본 발명의 균주 균주 자체, 이의 파쇄물 및 상기 균주 배양물 군 중 하나 이상을 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화 하여 섭취할 수 있다. 또한, 본 발명의 균주, 이의 파쇄물 및 배양물 군 중 하나 이상을 간 기능 개선 효과가 있다고 알려진 공지의 물질 또는 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다. 또한, 기능성 식품으로는 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말 레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명의 균주, 이의 파쇄물 및 배양물 군 중 하나 이상을 를 첨가하여 제조할 수 있다. Liver function improvement effect of the Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain or Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) strain identified in the experiments of the present invention, That is, inhibition of ALT and AST activity in blood, inhibition of total cholesterol and triglyceride in liver tissue, and inhibition of fat accumulation in liver can be induced even by the treatment of the single strain, and when two or more strains are mixed, a better effect is obtained. It can be shown, and the best effect can be shown when all three strains are mixed. In the present invention, the food composition includes all forms such as functional food, nutritional supplement, health food, and food additives. Food compositions of this type can be prepared in various forms according to conventional methods known in the art. For example, as a health food, the strain strain itself, its lysate, and at least one of the strain culture groups of the present invention are prepared in the form of tea, juice, and drink to be consumed, or granulated, encapsulated, and powdered to be consumed can do. In addition, it can be prepared in the form of a composition by mixing at least one of the strains of the present invention, their lysates and cultures with known substances or active ingredients known to have liver function improving effects. In addition, functional foods include beverages (including alcoholic beverages), fruits and their processed foods (e.g. canned fruit, bottled fruit, jam, marmalade, etc.), fish, meat and their processed foods (e.g. ham, sausage corned beef). etc.), breads and noodles (e.g. udon, buckwheat noodles, ramen, spaghetti, macaroni, etc.), fruit juice, various drinks, cookies, taffy, dairy products (e.g. butter, cheese, etc.), edible vegetable oil, margarine, vegetable protein , Retort food, frozen food, various seasonings (eg, soybean paste, soy sauce, sauce, etc.) can be prepared by adding at least one of the strain of the present invention, its lysate and culture group.

본 발명의 식품 조성물 중 상기 본 발명의 균주, 이의 파쇄물 및 배양물 등의 바람직한 함유량으로는 이에 한정되지 않지만 바람직하게는 최종적으로 제조된 식품 중 0.01 내지 50 중량%이다. 또한, 본 발명의 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물은 유효성분으로서 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다.The preferred content of the strain of the present invention, its lysate and culture in the food composition of the present invention is not limited thereto, but is preferably 0.01 to 50% by weight of the final food product. In addition, the strain of the present invention, its lysate or its culture may be prepared and used in the form of a powder or concentrate in order to be used as an active ingredient in the form of a food additive.

또한 본 발명은 락토바실러스 펜토서스 KF8(수탁번호 KCCM11997P) 균주, 바실러스 서브틸리스 KF11(수탁번호 KCCM11981P) 균주 및 락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 개선용 약학적 조성물을 제공할 수 있다.In addition, the present invention is one or more strains selected from the group consisting of Lactobacillus pentosus KF8 (Accession No. KCCM11997P) strain, Bacillus subtilis KF11 (Accession No. KCCM11981P) strain and Lactococcus lactis KF140 (Accession No. KCCM11673P) strain, It is possible to provide a pharmaceutical composition for improving liver function comprising its lysate or its culture as an active ingredient.

상기 약학적 조성물에는 약학적으로 허용 가능한 염을 단독으로 함유하거나 또는 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 함유할 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체로는 예컨대, 경구 투여용 담체 또는 비경구 투여용 담체를 추가로 포함할 수 있다. 경구 투여용 담체는 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등을 포함할 수 있다. 또한, 비경구 투여용 담체는 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코스 및 글리콜 등을 포함할 수 있으며, 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다. 그 밖의 약학적으로 허용되는 담체로는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995). The pharmaceutical composition may contain a pharmaceutically acceptable salt alone or may further contain one or more pharmaceutically acceptable carriers, excipients or diluents. A pharmaceutically acceptable carrier may further include, for example, a carrier for oral administration or a carrier for parenteral administration. Carriers for oral administration may include lactose, starch, cellulose derivatives, magnesium stearate, stearic acid and the like. In addition, the carrier for parenteral administration may include water, suitable oil, saline, aqueous glucose, glycol, and the like, and may further include a stabilizer and a preservative. Suitable stabilizers include antioxidants such as sodium bisulfite, sodium sulfite or ascorbic acid. Suitable preservatives include benzalkonium chloride, methyl- or propyl-paraben and chlorobutanol. As other pharmaceutically acceptable carriers, reference may be made to those described in the following literature (Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).

본 발명의 약학적 조성물은 인간을 비롯한 포유동물에 어떠한 방법으로도 투여할 수 있다. 예를 들면, 경구 또는 비경구적으로 투여할 수 있다. 비경구적인 투여방법으로는 이에 한정되지는 않으나, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장내 투여일 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 경피 투여될 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention can be administered to mammals including humans by any method. For example, it can be administered orally or parenterally. Parenteral administration methods include, but are not limited to, intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, intraperitoneal, intranasal, intestinal, topical, sublingual or rectal administration can be Preferably, the pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or transdermally.

본 발명의 약학적 조성물은 상술한 바와 같은 투여 경로에 따라 경구 투여용 또는 비경구 투여용 제제로 제형화 할 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention may be formulated into a preparation for oral administration or parenteral administration according to the administration route as described above.

경구 투여용 제제의 경우에 본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액 등으로 당업계에 공지된 방법을 이용하여 제형화될 수 있다. 예를 들어, 경구용 제제는 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다. 적합한 부형제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 및 말티톨 등을 포함하는 당류와 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분 및 감자 전분 등을 포함하는 전분류, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 등을 포함하는 셀룰로즈류, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 등과 같은 충전제가 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있다. 나아가, 본 발명의 약학적 조성물은 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다. In the case of preparations for oral administration, the composition of the present invention may be formulated into powders, granules, tablets, pills, dragees, capsules, solutions, gels, syrups, slurries, suspensions, etc. using a method known in the art. can For example, preparations for oral use may be obtained by combining the active ingredient with a solid excipient, which is then milled and, after adding suitable auxiliaries, processed into a mixture of granules to obtain tablets or dragees. Examples of suitable excipients include sugars including lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol and maltitol, starches including corn starch, wheat starch, rice starch and potato starch, cellulose, Celluloses including methyl cellulose, sodium carboxymethylcellulose and hydroxypropylmethyl-cellulose, and the like, fillers such as gelatin, polyvinylpyrrolidone, and the like may be included. In addition, cross-linked polyvinylpyrrolidone, agar, alginic acid or sodium alginate may be added as a disintegrant, if desired. Furthermore, the pharmaceutical composition of the present invention may further include an anticoagulant, a lubricant, a wetting agent, a flavoring agent, an emulsifier, and a preservative.

비경구 투여용 제제의 경우에는 주사제, 크림제, 로션제, 외용연고제, 오일제, 보습제, 겔제, 에어로졸 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법으로 제형화할 수 있다. 이들 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975. Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 18042, Chapter 87: Blaug, Seymour)에 기재되어 있다. In the case of preparations for parenteral administration, they may be formulated in the form of injections, creams, lotions, external ointments, oils, moisturizers, gels, aerosols, and nasal inhalants by methods known in the art. These formulations are described in Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975. Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 18042, Chapter 87: Blaug, Seymour, which is a generally known formula for all pharmaceutical chemistry.

본 발명의 균주 자체, 이의 파쇄물 및 상기 균주 배양물 등의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 질환의 정도에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 균주, 이의 파쇄물 및 배양물의 바람직한 전체 용량은 1일당 환자 체중 1 ㎏ 당 약 0.01ug 내지 1,000 mg, 가장 바람직하게는 0.1 ug 내지 100 mg일 수 있다. 그러나 상기 본 발명의 균주 자체, 이의 파쇄물 및 상기 균주 배양물 등의 용량은 약학적 조성물의 투여 경로 및 치료 횟수뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 건강 상태, 성별, 질환의 중증도, 식이 및 배설율 등 다양한 요인들을 고려하여 환자에 대한 유효 투여량이 결정되는 것이므로, 이러한 점을 고려할 때 당 분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 상기 본 발명의 균주, 이의 파쇄물 및 배양물을 면역기능 증진제로서의 특정한 용도에 따른 적절한 유효 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 효과를 보이는 한 그 제형, 투여 경로 및 투여 방법에 특별히 제한되지 아니한다.The total effective amount of the strain itself, its lysate, and the culture of the strain of the present invention can be administered to the patient in a single dose, and a fractionated treatment method in which long-term administration is performed in multiple doses. protocol). The pharmaceutical composition of the present invention may vary the content of the active ingredient according to the severity of the disease. Preferably, the preferred total dose of the strain of the present invention, its lysate and culture may be about 0.01 ug to 1,000 mg, most preferably 0.1 ug to 100 mg per kg of patient body weight per day. However, the dose of the strain itself, its lysate and the culture of the strain of the present invention depends not only on the route of administration of the pharmaceutical composition and the number of treatments, but also on the patient's age, weight, health condition, sex, severity of disease, diet and excretion rate, etc. Since the effective dosage for the patient is determined in consideration of various factors, considering this point, those with ordinary knowledge in the art can use the strain of the present invention, its lysate and culture according to specific uses as an immune function enhancer. Appropriate effective dosages will be determined. The pharmaceutical composition according to the present invention is not particularly limited in its formulation, administration route and administration method as long as it exhibits the effects of the present invention.

나아가 본 발명에서 간 기능 개선이란, 간 손상에 의한 증상의 치료, 경감, 예방을 포함하는 의미로서, 간 가능, 간 상태, 간 질환, 간 질병이 치료, 경감 또는 예방되는 것을 말한다. Further, in the present invention, improving liver function means treating, reducing, or preventing symptoms caused by liver damage, and refers to liver function, liver condition, liver disease, or treatment, reduction, or prevention of liver disease.

본 발명에서 간 손상에 의해 유발될 수 있는 간 질환은 이에 제한되지는 않으나, 자가면역성 간질환, 약물 유인성 간질환, 알코올성 간질환, 감염성 간질환, 선천성 대사성 간질환, 급성 간질환, 간염, 담즙 울체, 지방간 및 만성 간질환을 포함할 수 있다.Liver diseases that can be caused by liver damage in the present invention are not limited thereto, but are not limited thereto, autoimmune liver disease, drug-induced liver disease, alcoholic liver disease, infectious liver disease, congenital metabolic liver disease, acute liver disease, hepatitis, biliary tract disease Stasis, fatty liver and chronic liver disease.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are intended to explain the present invention in more detail, and the scope of the present invention is not limited to these examples.

<준비예><Preparation example>

<1> 본 발명의 균주를 함유한 시험용 식품제조<1> Preparation of test food containing the strain of the present invention

본 발명자들은 이전에 새로운 신균주로 분리 및 동정한 3개의 균주를 균주 기탁기관에 의뢰하여 기탁번호를 부여받았고, 기탁한 총 3개의 균주(락토바실러스 펜토서스 KF8, 바실러스 서브틸리스 KF11, 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis) KF140)을 ㈜ 메디오젠에 의뢰하여 시험용 식품을 제조하였다.The inventors of the present invention requested three strains previously isolated and identified as new strains to a strain depository institution and received an accession number, and a total of three deposited strains (Lactobacillus pentosus KF8, Bacillus subtilis KF11, Lactococco Lactococcus lactis KF140) was commissioned by Mediogen Co., Ltd. to prepare a test food.

본 발명에서 사용한 총 3개의 균주는 다음과 같다.A total of three strains used in the present invention are as follows.

-락토바실러스 펜토서스 KF8 : 국제미생물기탁기관인 한국미생물보존센터(KCCM)에 2017년 03월 24일자로 기탁하여 기탁번호 KCCM 11997P를 부여받은 균주를 이용하였다.-Lactobacillus pentosus KF8: A strain deposited with the Korea Center for Microorganisms (KCCM), an international microorganism depository, on March 24, 2017 and given accession number KCCM 11997P was used.

-바실러스 서브틸리스 KF11 : 국제미생물기탁기관인 한국미생물보존센터(KCCM)에 2017년 2월 24일자로 기탁하였으며, 기탁번호 KCCM 11981P를 부여받은 균주를 이용하였다.-Bacillus subtilis KF11: The strain deposited with the Korea Microorganism Conservation Center (KCCM), an international microorganism depository, on February 24, 2017, and given the accession number KCCM 11981P was used.

-락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis) KF140 : 국제미생물기탁기관인 한국미생물보존센터(KCCM)에 기탁하였으며, 기탁번호 KCCM 11673P를 부여받은 균주를 이용하였다. -Lactococcus lactis KF140: The strain deposited at the Korea Center for Microorganism Conservation (KCCM), an international microorganism depository, and given the accession number KCCM 11673P was used.

이들 균주를 이용한 시험용 식품의 제조는 ㈜ 메디오젠에 의뢰하여 종래 균주 형태의 제품을 제조하는 방법에 따라 제조하였고, 주요 원료는 말토덱스트린, 무수결정포도당 및 본 발명의 균주 3종 각각(2.0×109 CFU/g)을 포함하여, 1포 당 1.5g 단위로 포장하였으며 시험에 사용하지 전까지 냉장 보관하였다.The production of test foods using these strains was commissioned by Mediogen Co., Ltd. and manufactured according to the conventional method for producing strain-type products. 9 CFU/g), packaged in units of 1.5 g per pack, and stored in a refrigerator until not used for testing.

이때 상기 시험용 식품의 제조를 위해 사용한 상기 각 균주는 배양배지에서 배양하여 균주를 수득한 후, 이를 동결건조하여 분말화시킨 분말 형태의 균주를 사용하였다At this time, each of the strains used for the production of the test food was cultured in a culture medium to obtain a strain, and then a strain in the form of a powder obtained by freeze-drying and powdering was used.

상기 본 발명에서 사용하기 위해 제조한 시험용 식품의 사진은 도 1에 나타내었다. A photograph of the test food prepared for use in the present invention is shown in FIG.

<2> 시험 대상자<2> Test subjects

본 발명의 3가지 균주에 대한 간기능 개선 효과를 확인하기 위해 다음과 같은 시험 대상자들을 선별하였다.The following test subjects were selected in order to confirm the effect of improving liver function on the three strains of the present invention.

대상자는 아래의 기준에 적합한 자로 선정하였으며, 이들은 인체적용시험 대상자 모집에 자원하여 선정 기준을 통과한 자에 한하여 하기 실험을 진행하였다. 대상자는, 대구경북 지역에 거주하는 만 25세 이상 45세 이하의 성인으로 총 44명을 대상으로 선정검사를 진행하였고, 선정기준에 적합하고 제외기준에 해당되지 않는 36명이 대상자로 선정되었다.Subjects were selected as those who met the following criteria, and only those who passed the selection criteria by volunteering for human body application test subjects were selected for the following experiments. For the subjects, a total of 44 adults between the ages of 25 and 45 residing in the Daegu-Gyeongbuk region were selected, and 36 people who met the selection criteria and did not meet the exclusion criteria were selected as subjects.

대상자 선정 기준은, 시험기간 동안 추적관찰이 가능한 자, 연구의 목적, 내용 등에 관하여 충분히 설명을 듣고 자발적으로 시험동의서에 서명한 자에 한하여 선정하였다.Subject selection criteria were limited to those who could be followed up during the test period and those who voluntarily signed the consent form after receiving sufficient explanations about the purpose and content of the study.

한편, 다음과 같은 사항에 해당하는 자는 제외시켰다.Meanwhile, those who fall under the following conditions are excluded.

- 균주 제품 섭취시 과민반응 경험이 있는 자 - Those who have experienced hypersensitivity reactions when ingesting strain products

- 최근 1개월 이내에 처방 약물, 일반의약품, 건강기능식품 또는 프로바이오틱스 제품을 섭취한 자 - A person who has taken prescription drugs, over-the-counter drugs, health functional foods, or probiotics products within the past month

- 시험참가 1개월 이내에 항생제를 섭취한 자 - Those who have taken antibiotics within 1 month of participating in the test

- 시험참가 1개월 이내에 위장 또는 대장 내시경 검사를 한 자 - Those who have undergone gastroenterological or colonoscopy within 1 month of participating in the test

- BMI 20 미만 또는 35 초과인 자 - Those with a BMI of less than 20 or greater than 35

- 고혈압(수축기 혈압 160 mmHg 이거나 확장기 혈압 100 mmHg 이상)인 자 - Those with hypertension (systolic blood pressure 160 mmHg or diastolic blood pressure 100 mmHg or more)

- 공복 혈당 농도 110 초과인 자 - A person with a fasting blood glucose concentration of over 110

- ALT 또는 AST가 정상 상한의 2배를 초과하는 자 - A person whose ALT or AST exceeds twice the upper limit of normal

- 임신 또는 수유중인 여성 - Pregnant or lactating women

- 시험기간 동안 의학적으로 증명된 방법(예 : 콘돔, 루프, 페미돔 등)을 사용하는 피임에 동의하지 않는 가임기 여성 - Women of childbearing age who do not consent to contraception using medically proven methods (e.g. condoms, loops, femidoms, etc.) during the trial period

- 거식증, 우울증, 조울증, 정신과 질환 등으로 지속적인 치료가 필요한 자 - Those who need continuous treatment due to anorexia, depression, bipolar disorder, psychiatric disease, etc.

- 면역관련 질환, 중증의 간 또는 신부전, 악성종양, 폐질환, 교원질증, 다발성 경화증, 알레르기성 피부질환 및 기타 자가면역질환 등의 전신질환이 이행되고 있는 자 - Those with systemic diseases such as immune-related diseases, severe liver or kidney failure, malignant tumors, lung diseases, collagenosis, multiple sclerosis, allergic skin diseases and other autoimmune diseases

- 시험식품의 흡수에 영향을 줄 수 있는 위장관계 질환 또는 위장관계 수술(단순 맹장수술 또는 탈장수술 제외)의 과거력이 있는 자 - Those with a history of gastrointestinal disease or gastrointestinal surgery (excluding simple appendectomy or hernia surgery) that may affect the absorption of the test food

- 시험참가 3개월 이내에 다른 인체적용시험 또는 임상시험에 참여하여 시험용 제품을 섭취한 자(화장품 인체적용시험 제외) - A person who participated in another human application test or clinical trial within 3 months of participating in the test and consumed the test product (except for cosmetics human application test)

- 위의 사항들 외에 연구자의 판단으로 시험수행이 곤란하다고 판단되는 자 - In addition to the above, those who are judged to be difficult to perform the test at the discretion of the researcher

또한 입원 당일 문진으로 다음에 해당하는 대상자는 본 시험에서 제외하였다.In addition, on the day of hospitalization, the following subjects were excluded from this study.

- 입원 전 2주일 이내에 1회당 알코올 50g (소주 1병 이상 또는 맥주 2병 이상) 상당량 이상을 섭취하는 음주를 한 자 - A person who consumed alcohol in excess of 50g (more than 1 bottle of soju or more than 2 bottles of beer) per drink within 2 weeks before hospitalization

- 입원 전 1주일 이내에 1일 소주 1잔 또는 맥주 1잔을 초과하는 음주를 한 자 - A person who drank more than 1 glass of soju or 1 glass of beer per day within 1 week before hospitalization

- 입원 전 1주일 이내에 유제품, 햄버거, 피자 등 패스트푸드, 인스턴트 식품, 튀김류, 구이류 등의 섭취를 한 자 - Those who consumed dairy products, fast food such as hamburgers and pizza, instant food, fried foods, and grilled foods within 1 week before hospitalization

- 이전 방문일 이후에 항생제를 섭취한 자 - Those who have taken antibiotics since the previous visit date

- 이전 방문일 이후에 위장 또는 대장 내시경 검사를 한 자 - Those who have undergone gastrointestinal or colonoscopy after the previous visit

- 이전 방문일 이후에 처방 약품, 일반의약품 또는 건강기능식품을 복용한 자 - Those who have taken prescription drugs, over-the-counter drugs or health functional foods since the previous visit date

이러한 조건으로 선정된 대상자는, 최소 유효성분석 가능 대상자수로 실험군당 각 10명이 되도록 하였다. The subjects selected under these conditions were set to be 10 subjects per experimental group as the minimum number of subjects for efficacy analysis.

선정된 대상자들의 임상시험은 임상시험심사위원회(IRB)의 규정에 따라 진행하였다. The clinical trial of the selected subjects was conducted according to the regulations of the Institutional Review Board (IRB).

<실시예 1><Example 1>

본 발명의 균주 섭취에 따른 간기능 개선 효과 분석Analysis of liver function improvement effect according to ingestion of strain of the present invention

상기 시험 대상자를 대상으로 26일간 각각의 균주를 섭취 전과 후 채취된 혈액을 이용하여 혈액 내 AST, ALT, 총 콜레스테롤, 중성지방(Triglyceride), LDL 콜레스테롤, HDL 콜레스테롤의 변화를 측정하였다.Changes in AST, ALT, total cholesterol, triglyceride, LDL cholesterol, and HDL cholesterol in the blood were measured using blood collected before and after ingestion of each strain for 26 days for the test subjects.

분석 결과, 상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 균주인 락토바실러스 펜토서스 KF8, 바실러스 서브틸리스 KF11 및 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis) KF140을 각각 섭취시킨 군에서는 간 기능 지표인 ALT(Alanine Aminotransferase) 및 AST(Aspartate Aminotransferase)의 수치가 상기 균주를 섭취하기 이전 보다 효과적으로 억제되어 있는 것으로 나타났다.As a result of the analysis, as shown in Table 1 above, in the group ingesting the strains of the present invention, Lactobacillus pentosus KF8, Bacillus subtilis KF11 and Lactococcus lactis KF140, respectively, liver function index ALT ( It was found that the levels of Alanine Aminotransferase) and Aspartate Aminotransferase (AST) were more effectively inhibited than before ingesting the strain.

따라서 이러한 결과를 통해, 본 발명자들은 락토바실러스 펜토서스 KF8, 바실러스 서브틸리스 KF11 및 락토코쿠스 락티스 KF140의 균주를 간 기능 개선 및 간 질환의 예방과 치료를 위한 용도로 사용할 수 있음을 알 수 있었다.Therefore, through these results, the present inventors can see that the strains of Lactobacillus pentosus KF8, Bacillus subtilis KF11 and Lactococcus lactis KF140 can be used for the purpose of improving liver function and preventing and treating liver disease. there was.

<실시예 2><Example 2>

간 손상 유발 동물모델에서 본 발명의 균주 섭취에 따른 간기능 개선 효과 분석Analysis of liver function improvement effect according to ingestion of strain of the present invention in liver damage-induced animal model

실험동물로는 체중 200g의 수컷 SD(Sprague-Dawley)계 랫트(SLC, Japan)를 사용하였고, 각 실험군 당 5마씩 분배하여 실험에 사용하였고 각 실험군은 다음과 같다.Male SD (Sprague-Dawley) rats (SLC, Japan) weighing 200 g were used as experimental animals, and 5 horses were distributed to each experimental group and used in the experiment. Each experimental group is as follows.

투여내용administration content 정상군Normal group 정상 식이 섭취normal dietary intake 대조군control group 정상 식이 + 사염화탄소 복강 투여Normal diet + intraperitoneal administration of carbon tetrachloride 실험군1Experiment group 1 정상 식이 + 사염화탄소 복강 투여 + 락토바실러스 펜토서스 KF8 투여Normal diet + intraperitoneal administration of carbon tetrachloride + administration of Lactobacillus pentosus KF8 실험군2experimental group 2 정상 식이 + 사염화탄소 복강 투여 + 바실러스 서브틸리스 KF11 투여Normal diet + intraperitoneal administration of carbon tetrachloride + administration of Bacillus subtilis KF11 실험군3Experiment group 3 정상 식이 + 사염화탄소 복강 투여 + 락토코쿠스 락티스 KF140 투여Normal diet + intraperitoneal administration of carbon tetrachloride + administration of Lactococcus lactis KF140

이때, 상기 사염화탄소는 옥수수유와 혼합된 50% 용액으로 하여 랫트에게 0.75 ml/kg의 용량으로 1주일에 2회 4주간 복강 투여하였고, 상기 실험군들은 준비예에서 제조한 본 발명의 균주 함유 기능성 분말식품 50 mg/kg 씩을 1% CMC 용액에 현탁하여 1일 1회, 1주일에 6회 경구 투여하였다. 이후 상기 투여를 4주간 지속한 후 동물을 치사시켜 혈청을 얻어 사염화탄소로 유도된 간손상에 대한 본 발명에 균주의 치료효과를 알아보기 위하여, ALT 및 AST 활성을 측정하였다.At this time, the carbon tetrachloride was administered as a 50% solution mixed with corn oil intraperitoneally to rats at a dose of 0.75 ml / kg twice a week for 4 weeks, and the experimental groups were prepared in the preparation example. Functional powder containing the strain of the present invention 50 mg/kg of each food was suspended in a 1% CMC solution and orally administered once a day, 6 times a week. Then, after the administration was continued for 4 weeks, the animals were sacrificed to obtain serum, and in order to examine the therapeutic effect of the strain of the present invention on liver damage induced by carbon tetrachloride, ALT and AST activities were measured.

ALT 및 AST 농도측정 결과ALT and AST concentration measurement results ALT(U/T)ALT(U/T) AST(U/T)AST(U/T) 정상군Normal group 70±1070±10 85±2285±22 대조군control group 182±12182±12 200±42200±42 실험군1(KF8)Experimental group 1 (KF8) 92±2192±21 100±13100±13 실험군2(KF11)Experimental group 2 (KF11) 87±1787±17 98±2198±21 실험군3(KF140)Experimental group 3 (KF140) 89±2289±22 96±3596±35

분석 결과, 상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 균주를 섭취시킨 마우스군의 경우, 사염화탄소로 인해 혈청 내 상승한 ALT 및 AST가 효과적으로 억제되는 것으로 나타났다.As a result of the analysis, as shown in Table 3, in the case of the mouse group ingested the strain of the present invention, it was found that ALT and AST elevated in serum due to carbon tetrachloride were effectively suppressed.

이러한 결과는 본 발명의 락토바실러스 펜토서스 KF8, 바실러스 서브틸리스 KF11 및 락토코쿠스 락티스 KF140 균주가 간독성에 대한 간보호 효과 및 간 기능 효과 우수하다는 것을 의미한다. These results indicate that the Lactobacillus pentosus KF8, Bacillus subtilis KF11 and Lactococcus lactis KF140 strains of the present invention have excellent hepatoprotective and liver function effects against hepatotoxicity.

<실시예 3><Example 3>

지방간 동물모델에서 본 발명의 균주 섭취에 따른 개선 효과 분석Analysis of improvement effect according to ingestion of strain of the present invention in fatty liver animal model

실험동물로는 체중 20g의 수컷 C57BL/6계 마우스(중앙, Korea)를 사용하였고, 각 실험군 당 9마씩 분배하여 실험에 사용하였고 각 실험군은 다음과 같다. 지방간 유도 물질로 고지방식이(40% fat)를 펠렛 형태로 제공하고 매일 CML반응물을 10 mg/kg의 용량으로 매일 경구투여 하였다. 이후 본 발명의 균주를 각 마우스에 투여시킨 후, 지방간 개선 정도를 분석하였다.Male C57BL/6 mice (Central, Korea) weighing 20 g were used as experimental animals, and 9 mice were distributed to each experimental group and used in the experiment. Each experimental group is as follows. A high-fat diet (40% fat) was provided in the form of pellets as a substance for inducing fatty liver, and the CML reactant was orally administered daily at a dose of 10 mg/kg. Then, after administering the strain of the present invention to each mouse, the degree of fatty liver improvement was analyzed.

투여내용administration content 정상군Normal group 정상 식이 섭취normal dietary intake 대조군control group 고지방 식이 + CML 식이High-fat diet + CML diet 실험군1Experiment group 1 고지방 식이 + CML 식이 + 락토바실러스 펜토서스 KF8 투여High-fat diet + CML diet + Lactobacillus pentosus KF8 administration 실험군2experimental group 2 고지방 식이 + CML 식이 + 바실러스 서브틸리스 KF11 투여High-fat diet + CML diet + Bacillus subtilis KF11 administration 실험군3Experiment group 3 고지방 식이 + CML 식이 + 락토코쿠스 락티스 KF140 투여High-fat diet + CML diet + Lactococcus lactis KF140 administration

이때 상기 실험군들은 본 발명의 균주 1×107 CFU 씩을 0.9% saline 용액에 현탁하여 1일 1회, 1주일에 6회 경구 투여하였다. 이후 투여를 4주간 지속한 후 동물을 치사시켜 혈액을 체취한 후 간기능 관련 효소와 중성지방(Triglyceride)의 함량을 측정하였다.At this time, the experimental groups suspended 1×10 7 CFU of the strain of the present invention in a 0.9% saline solution and orally administered once a day, 6 times a week. Then, after the administration was continued for 4 weeks, the animals were sacrificed, and the blood was taken to measure the contents of enzymes related to liver function and triglyceride.

간기능 관련 효소 및 중성지방 농도측정 결과Liver function-related enzymes and triglyceride concentration measurement results AST (U/L)AST (U/L) ALT (U/L)ALT (U/L) 중성지방 (mg/g)Triglycerides (mg/g) 정상군Normal group 44.5±1.744.5±1.7 19.7±1.119.7±1.1 62.3±7.262.3±7.2 대조군control group 64.2±1.264.2±1.2 31.2±2.031.2±2.0 85.5±7.285.5±7.2 실험군1(KF8)Experimental group 1 (KF8) 48.4±2.648.4±2.6 24.4±2.824.4±2.8 68.4±5.068.4±5.0 실험군2(KF11)Experimental group 2 (KF11) 48.6±3.448.6±3.4 27.5±1.627.5±1.6 66.3±7.466.3±7.4 실험군3(KF140)Experimental group 3 (KF140) 43.1±2.543.1±2.5 24.3±1.724.3±1.7 59.5±6.859.5±6.8

분석결과, 상기 표 7에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 균주를 섭취시킨 마우스군의 경우, 간 손상에 의해 증가하는 AST와 ALT의 수치를 유의적으로 억제하였고, 추가로 중성지방의 함량도 마찬가지로 증가를 예방하는 효과를 확인하였다.As a result of the analysis, as shown in Table 7, in the case of the mouse group ingesting the strain of the present invention, the levels of AST and ALT, which increase due to liver damage, were significantly suppressed, and additionally, the content of neutral fat also increased. The preventive effect was confirmed.

이러한 결과를 통해 본 발명자들은 본 발명의 락토바실러스 펜토서스 KF8, 바실러스 서브틸리스 KF11 또는 락토코쿠스 락티스 KF140 균주가 당독소 섭취에 의한 간손상을 예방하여 지방간과 같은 간질환을 개선 및 치료하는데 효과적일 수 있음을 알 수 있었다.Through these results, the present inventors found that the Lactobacillus pentosus KF8, Bacillus subtilis KF11 or Lactococcus lactis KF140 strain of the present invention prevents liver damage caused by glucose toxin intake to improve and treat liver diseases such as fatty liver. found to be effective.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.So far, the present invention has been looked at with respect to its preferred embodiments. Those of ordinary skill in the art to which the present invention pertains will understand that the present invention can be implemented in a modified form without departing from the essential characteristics of the present invention. Therefore, the disclosed embodiments should be considered from an illustrative rather than a limiting point of view. The scope of the present invention is shown in the claims rather than the foregoing description, and all differences within the equivalent scope will be construed as being included in the present invention.

한국미생물보존센터(국외)Korea Microbial Conservation Center (Overseas) KCCM11997PKCCM11997P 2017032420170324 한국미생물보존센터(국외)Korea Microbial Conservation Center (Overseas) KCCM11981PKCCM11981P 2017022420170224 한국미생물보존센터(국외)Korea Microbial Conservation Center (Overseas) KCCM11673PKCCM11673P 2015030620150306

Claims (5)

락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는, 간 기능 개선용 건강식품 조성물.
A health food composition for improving liver function, comprising Lactococcus lactis KF140 (accession number KCCM11673P) strain, a lysate thereof or a culture thereof as an active ingredient.
제1항에 있어서,
상기 조성물은,
ALT(Alanine Aminotransferase) 또는 AST(Aspartate Aminotransferase) 활성을 억제시키고,
간 내 총 콜레스테롤 또는 중성지방의 농도 증가를 억제시키고, 또는
간 내 지방 축적을 억제하는 것을 특징으로 하는,
간 기능 개선용 건강식품 조성물.
According to claim 1,
The composition is
Inhibits ALT (Alanine Aminotransferase) or AST (Aspartate Aminotransferase) activity,
Inhibits the increase in the concentration of total cholesterol or triglycerides in the liver, or
Characterized by inhibiting fat accumulation in the liver,
Health food composition for improving liver function.
제1항에 있어서,
상기 건강식품 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는, 간 기능 개선용 건강식품 조성물.
According to claim 1,
The health food composition is a health food composition for improving liver function, characterized in that any one formulation selected from powder, granule, pill, tablet, capsule, candy, syrup and beverage.
락토코쿠스 락티스 KF140(수탁번호 KCCM11673P) 균주, 이의 파쇄물 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는, 간 기능 개선용 약학적 조성물.

Lactococcus lactis KF140 (accession number KCCM11673P) strain, a pharmaceutical composition for improving liver function, comprising a lysate thereof or a culture thereof as an active ingredient.

제4항에 있어서,
상기 조성물은,
ALT(Alanine Aminotransferase) 또는 AST(Aspartate Aminotransferase) 활성을 억제시키고,
간 내 총 콜레스테롤 또는 중성지방의 농도 증가를 억제시키고, 또는
간 내 지방 축적을 억제하는 것을 특징으로 하는,
간 기능 개선용 약학적 조성물.
According to claim 4,
The composition is
Inhibits ALT (Alanine Aminotransferase) or AST (Aspartate Aminotransferase) activity,
Inhibits the increase in the concentration of total cholesterol or triglycerides in the liver, or
Characterized by inhibiting fat accumulation in the liver,
A pharmaceutical composition for improving liver function.
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