KR102428864B1 - 자일로올리고당을 특이적으로 이용할 수 있는 신규 비피도박테리움 롱검 tsb-l1 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 신규 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P)에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 자일로올리고당(xylooligosaccharide)을 특이적으로 이용할 수 있으면서 프로바이오틱스 소재로 사용가능한 신규 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P)에 관한 것이다. 본 발명에서 선별한 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 내산성, 내담즙성 및 장관세포 부착능이 우수하고, 자일로올리고당을 자일로오스 단위로 분해하지 않고 특이적으로 이용할 수 있다. 또한, 본 발명의 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 장내 유익균의 증가 및 유지에 탁월하여 장내 균총을 개선함으로써 장 건강에 도움을 줄 수 있다.
Description
본 발명은 신규 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P)에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 자일로올리고당(xylooligosaccharide)을 특이적으로 이용할 수 있으면서 프로바이오틱스 소재로 사용가능한 신규 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P)에 관한 것이다.
프로바이오틱스(probiotics)는 건강에 이익을 제공하는 살아있는 미생물을 일컫는 것으로, 장내 균총에서 유해균을 억제하고 유익균을 증가시키는데 중요한 역할을 하게 된다. 대표적인 프로바이오틱스로는 유산균과 비피더스균(Bifidobacterium)이 있으며, 그 외 효모와 사상균 등이 있다. 유산균을 비롯한 세균들이 프로바이오틱스로 인정받기 위해서는 위산과 담즙산에서 살아남아 소장, 대장까지 도달하여 장에서 증식하고 정착하여야 하며 장관 내에서 유용한 효과를 나타내어야 하고, 독성이 없으며 비병원성이어야 한다.
한편, 올리고당은 소화흡수가 어려운 당류로서 현재 프락토올리고당, 대두올리고당, 말토올리고당, 갈락토올리고당, 이소말토올리고당, 자일로올리고당 등이 있다. 그 중 자일로올리고당(xylooligosaccharide)은 자일로오스가 β-1,4-결합으로 2 ~ 10개 이어진 올리고당으로 위, 소장에서 분해되지 않고 대장 내 세균에 의해 분해되는 난소화성 올리고당이다. 현재로서는 자일로올리고당을 자일로오스 단위로 분해하지 않고 특이적으로 이용할 수 있는 균주에 대한 연구가 미비한 실정이다. 이에 자일로올리고당을 효율적으로 이용하면서 프로바이오틱스 활성이 뛰어난 새로운 균주를 개발하는 것이 필요한 실정이다.
자일로올리고당(xylooligosaccharide)을 특이적으로 이용할 수 있으면서 프로바이오틱스 소재로 사용가능한 신규 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P) 및 이를 유효성분으로 함유하는 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명은 자일로올리고당 이용능이 우수한 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P)을 제공한다.
한편, 본 발명에 있어서, 상기 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)은, 바람직하게 내산성, 내담즙성, 장관세포 부착능 중 선택되는 하나 이상의 성질을 갖는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 선별한 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 내산성, 내담즙성 및 장관세포 부착능이 우수하고, 자일로올리고당을 자일로오스 단위로 분해하지 않고 특이적으로 이용할 수 있다.
또한, 본 발명의 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 장내 유익균의 증가 및 유지에 탁월하여 장내 균총을 개선함으로써 장 건강에 도움을 줄 수 있다.
도 1은 본 발명의 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1의 16s rRNA 유전자 염기서열 분석 결과를 나타낸 사진이다.
도 2는 본 발명의 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1의 자일로올리고당 이용률을 나타낸 결과 그래프이다. 비교를 위해 다른 비피도박테리움 균주를 사용하였다.
도 2는 본 발명의 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1의 자일로올리고당 이용률을 나타낸 결과 그래프이다. 비교를 위해 다른 비피도박테리움 균주를 사용하였다.
프로바이오틱스(probiotics)는 건강에 이익을 제공하는 살아있는 미생물을 일컫는 것으로, 장내 균총에서 유해균을 억제하고 유익균을 증가시키는데 중요한 역할을 하게 된다. 프로바이오틱스로 인정받기 위해서는 위산과 담즙산에서 살아남아 소장, 대장까지 도달하여 장에서 증식하고 정착하여야 하며 장관 내에서 유용한 효과를 나타내어야 하고, 독성이 없으며 비병원성이어야 한다.
한편, 자일로올리고당(xylooligosaccharide)은 자일로오스가 β-1,4-결합으로 2 ~ 10개 이어진 올리고당으로 위, 소장에서 분해되지 않고 대장 내 세균에 의해 분해되는 난소화성 올리고당이다. 현재로서는 자일로올리고당을 자일로오스 단위로 분해하지 않고 특이적으로 이용할 수 있는 균주에 대한 연구가 미비한 실정이다. 이에 자일로올리고당을 효율적으로 이용하면서 프로바이오틱스 활성이 뛰어난 새로운 균주를 개발하는 것이 필요한 실정이다.
이에 본 발명은 자일로올리고당 이용능이 우수한 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P)을 제공한다.
본 발명에서는 건강한 성인의 분변으로부터 균주를 선별하고자, 자일로올리고당을 함유한 배지에 접종하여 자일로올리고당을 선택적으로 가장 빠르게 이용하는 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1을 선별, 분리하였다.
한편, 본 발명에 있어서, 상기 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)은, 바람직하게 내산성, 내담즙성, 장관세포 부착능 중 선택되는 하나 이상의 성질을 갖는 것일 수 있다.
한편, 하기 실험에 의하면, 본 발명의 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 다른 비피도박테리움 균주들에 비해 자일로올리고당의 이용률이 현저하게 뛰어나는 것을 확인하였고, 다른 비피도박테리움 균주들에 비해 내산성, 내담즙성 및 장관세포 부착능도 매우 뛰어나다는 것을 확인하였다. 또한, 본 발명의 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1과 자일로올리고당을 함유한 설탕의 섭취는 장내 유익균의 증가를 유도하면서, 유익균의 증식을 지속적으로 유지시켰다. 이를 통해 본 발명의 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 자일로올리고당 이용능이 우수한 프로바이오틱스로 소재로서 활용 가능성을 확인할 수 있었다.
또한, 본 발명은 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 식품 조성물을 제공한다.
한편, 본 발명의 식품 조성물에 있어서, 상기 식품 조성물은, 일예로 일반 음료, 빵류, 스낵류, 과자류, 젤리, 아이스크림류, 알코올성 음료, 비타민 복합제 및 그 밖의 건강보조식품류 중 선택되는 어느 하나의 제형이거나, 이와 같은 제형에 첨가될 수 있다.
이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예를 통해 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
[실시예 1: 본 발명의 비피도박테리움 롱검 TSB-L1 선별 및 분리동정]
1) 자일로올리고당 특화 균주 비피도박테리움 롱검 TSB-L1 균주 선별
건강한 성인의 분변을 멸균 혐기수에 연속 희석한 후 각 희석액을 MRS 고체 배지에 부어서 혐기 조건으로 37℃에서 3일간 배양하였다. 이후, 생성된 콜로니를 다시 BL 배지에 BCP(Bromocresol purple, 0.17g/L)를 첨가한 비피도박테리움 선택배지에서 골라낸 후 같은 조건에서 3일간 배양하였다. 자일로올리고당을 함유한 프리바이오틱 최소한천배지 (2% agar, 0.5% peptone, 0.5% Sodium acetate, 0.02% MgSO4·7H2O, 0.1% tween 80, 0.1% Monopotassium phosphate, 0.3% Dipotassium phosphate, 0.05% Cysteine hydrochloride, 0.6% 자일로올리고당)에 접종 후 최종적으로 자일로올리고당을 선택적으로 가장 빠르게 이용하는 비피도박테리움 'TSB-L1'을 선별하였다. 상기 선별한 균체를 MRS 액체배지 : 글리세롤(Glycerol)이 4 : 1 비율로 포함된 냉동보관용액(Freezing solution)에 1 ml 첨가한 뒤, 크라이오튜브(Cryo-tube)에 넣어 -70℃에서 냉동보관 후 이후의 테스트를 위한 스타터로 사용하였다.
2) 자일로올리고당 특화 균주 비피도박테리움 롱검 TSB-L1 균주의 동정
상기에서 선별한 균주 TSB-L1의 동정을 위하여 16S rRNA 유전자 분석을 실시하였다. 선별 균주 TSB-L1을 MRS 액체배지에 접종하여 37℃에서 24시간 배양한 후 원심분리하여 균체를 회수하고 Accuprep 지놈 추출 키트(Bioneer, Korea)를 이용하여 지놈 DNA를 추출하였다. 추출한 DNA는 유니버셜 프라이머인 27F 및 1492R 프라이머로 합성하여 유전자 단편을 증폭시켰고 코스모진텍에 의뢰하여 염기서열을 분석한 후, 결과를 NCBI(National Center for Biotechnology Information, Bethesda, MD, USA)의 BLAST를 사용하여 GeneBank에 등록된 염기서열과 상동성을 비교하였다. 사용한 16S rRNA 염기서열은 하기 표 1과 같이 나타냈다.
명칭 | 16S rRNA 염기서열 |
선별 균주(TSB-L1) | 서열번호 1 |
분석 결과, 도 1과 같이 선별 균주 TSB-L1은 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)과 100% 일치하는 것을 확인할 수 있었다.
이에 본 발명의 발명자들은 선별 균주를 새로운 '비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1'로 명명하였고, 한국생명공학연구원 생물자원센터에서 2020년 6월 15일자로 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (기탁번호: KCTC18825P)의 기탁이 승인되었다.
[실험예 1: 신규 비피도박테리움 롱검 TSB-L1의 자일로올리고당 이용능력 측정]
본 실험예에서는 선별 균주 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1의 자일로올리고당 이용능력을 평가하고자 하였다.
프리바이오틱 최소배지(0.5% peptone, 0.5% Sodium acetate, 0.02% MgSO4·7H2O, 0.1% tween 80, 0.1% Monopotassium phosphate, 0.3% Dipotassium phosphate, 0.05% Cysteine hydrochloride, 1.0% 자일로올리고당)에 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1의 배양액을 2% 접종한 다음 37℃에서 48시간 동안 혐기 조건으로 배양 후 600nm에서 흡광도 및 HPLC를 통해 자일로올리고당의 선택적 이용능력을 확인하였다. 비교를 위해 표준균주인 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis) KCTC5854, 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) KCTC3128, 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) KCTC3202, 비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) KCTC3220와 이미 제품화된 상용균주인 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) Customprobiotics (USA)에 대해서도 동일하게 실험을 수행하였다.
실험결과, 표 2와 같이 대조군과 비교하여 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1이 자일로올리고당을 가수분해하여 축적된 자일로오스(xylose) 없이 자일로올리고당을 선택적으로 가장 우수하게 이용하였음을 확인하였다. 이에 반해 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis) KCTC5854와 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) KCTC3202의 경우 자일로올리고당을 가수분해하여 축적된 자일로오스가 배양액에 축적되어 기질을 선택적으로 이용하지 못하는 것으로 추정되었다.
균주 |
OD600 |
자일로올리고당 농도(g/L) | |||
X1a | X2b | X3c | X4d | ||
초기 자일로올리고당 농도(g/L) | |||||
0.76 | 3.54 | 2.02 | 1.35 | ||
최종 자일로올리고당 농도(g/L) | |||||
Bifidobacterium lactis KCTC5854 | 0.97 | 2.97 | 1.60 | 0.52 | 0.61 |
Bifidobacterium longum KCTC3128 | 0.31 | 0.92 | 3.03 | 2.05 | 1.12 |
Bifidobacterium longum TSB-L1 | 1.44 | 0.81 | 2.02 | 0.46 | 0.27 |
Bifidobacterium longum Customprobiotics (USA) | 0.45 | 0.80 | 2.92 | 2.05 | 1.46 |
Bifidobacterium bifidum KCTC3202 | 0.79 | 2.24 | 2.02 | 0.70 | 1.06 |
Bifidobacterium breve KCTC3220 | 0.60 | 1.15 | 3.24 | 1.95 | 0.56 |
a : xylose, b: xylobiose, c : xylotriose, d: xylotetraose
또한, 자일로올리고당 이용률을 측정한 결과, 도 2와 같이 다른 비피도박테리움 균주들의 경우 5.8 ~ 25.7% 사이의 자일로올리고당 이용률인 것에 반해 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1이 53%로 현저하게 우수한 것을 확인하였다.
[실험예 2: 신규 비피도박테리움 롱검 TSB-L1의 내산성 및 내담즙성 측정]
본 실험예에서는 선별 균주 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1의 내산성 및 내담즙성을 평가하고자 하였다. 비교를 위해 표준균주인 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) KCTC3128과 상업균주인 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) Customprobiotics (USA)에 대해서 동일하게 실험을 수행하였다.
먼저 내산성 실험은 소화관 조건과 유사한 환경에서 측정하기 위해 pH 3.0으로 조정된 MRS 배지에 최종농도가 1,000 U/ml이 되도록 펩신을 첨가한 인공 위액에서 실시하였다. MRS 액체 배지에서 37℃에서 18시간 동안 배양한 균체를 원심분리하여 균주를 침전시키고, 다시 멸균 식염수(0.85% NaCl)로 2회 세척 후 균체 현탁액을 대조균 배지와 인공 위액배지에 각각 약 107 CFU/ml 수준으로 접종시키고, 37℃에서 배양시키면서 배양 초기 및 3시간 후에 생존 균수를 측정하였다. 총균수는 KH2PO4, Na2HPO4, Cystein hydrochloride, tween 80 등이 함유된 인산완충액(pH 6.8)으로 희석하여 측정하였고, 내산성은 '초기 생균수/pH 처리후 생균수'의 비율로 나타내었다. 그 결과, 표 3과 같이 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 생리적 pH와 가까운 pH 3.0의 강산성으로 3시간 처리하여도 90% 이상의 생존율을 나타내었다. 이는 표준균주 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) KCTC3128뿐만 아니라 상용균주인 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) Customprobiotics (USA)에 비해서도 더 나은 내산성을 나타내는 결과였다.
다음으로, 내담즙성 실험은 인공 담즙에서 시행하였고, 상기 내산성 평가에서 사용된 MRS 액체 배지에 황소 담즙을 0.1, 0.3, 0.5% 첨가한 후, 상기 내산성 평가방법과 동일한 방법으로 하여 유산균을 접종 한 후 생장여부를 확인하였다. 그 결과, 표 3과 같이 장관 내 담즙산염 농도는 0.1% 내외인데 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 0.3%의 담즙이 첨가되어도 생육이 가능하여 매우 우수한 내담즙성을 나타내는 것을 확인하였다. 이는 표준균주 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) KCTC3128에 비해서 매우 우수하며, 상용균주인 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) Customprobiotics (USA)에 대해 유사한 수준의 내담즙성을 나타내는 결과였다.
균주 | 내산성(%) | 내담즙성(%) |
Bifidobacterium longum TSB-L1 | 92.6 | >0.3% 생존 |
Bifidobacterium longum Customprobiotics (USA) | 88.4 | >0.3% 생존 |
Bifidobacterium longum KCTC3128 | 0.05 | >0.1% 생존 |
상기와 같은 결과를 통해 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 상용균주인 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) Customprobiotics (USA)에 비해서도 더 나은 내산성과 유사한 수준의 내담즙성을 가지고 있어 장까지 도달할 확률이 매우 높기 때문에, 식품 또는 건강기능식품으로 섭취할 경우 유산균의 다양한 효능을 효과적으로 발휘할 수 있다.
[실험예 3: 신규 비피도박테리움 롱검 TSB-L1의 장관세포 부착능 측정]
본 실험예에서는 선별 균주 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1의 장관세포 부착능을 평가하고자 하였다. 비교를 위해 표준균주인 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) KCTC3128과 상업균주인 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) Customprobiotics (USA)에 대해서 동일하게 실험을 수행하였다.
장 상피세포 부착능 시험을 위한 동물세포로서 HT-29를 한국 세포주은행(KCLB)에서 분양받아 사용하였으며, 열 비활성화된 10% 우태아혈청(FBS), 1% L-글루타민, 페니실린 G(100 IU/mL), 그리고 스트렙토마이신(100 mg/mL)이 첨가된 RPMI 1640(Welgene, KOREA) 배지를 이용하여 5% CO2 존재 하에서 37℃에서 배양하였다. HT-29 세포는 1.0 x 105 CFU/mL의 수가 되도록 24 well-plate에 분주하였고 격일로 배지를 교환하며 완전하게 단일층을 형성할 때까지 배양하였다. 완전 단일층을 형성한 HT-29 세포에 PBS 완충용액을 이용하여 3회 세척하고 항생제가 첨가되지 않은 RPMI 1640 배지 0.5 mL를 첨가하였다. 각각 약 1.0 x 109 CFU/mL의 농도가 되도록 RPMI 1640에 현탁한 다음 상기 well-plate에 접종하고, 5% CO2 존재 하에서 37℃에서 2시간 배양을 실시하고 PBS 완충용액을 사용하여 3회 세척을 실시하였다. 세척이 완료된 후 멸균된 스크래퍼(Scraper)를 이용하여 부착되어 있는 세포를 떼어내고 펩톤수를 이용하여 연속희석법으로 MRS-agar에 평판 도말하고 37℃에서 24 시간동안 배양하여 균수를 측정하였다.
그 결과, 표 4와 같이 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 표준균주 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) KCTC3128와 상용균주인 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) Customprobiotics (USA)에 비해 2시간 경과후, 장 상피세포 부착능이 우수한 것으로 나타났으며, 특히 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) KCTC3128에 비해서는 현저히 높은 것으로 나타났다.
이를 일반적으로 미생물의 농도를 나타내는 로그 값을 취해 부착률을 계산해본 결과, 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 약 82%[(8.91 Log/7.30 Log) x 100], 2차 결과는 약 84%[(8.94 Log/7.49 Log) x 100]로 다른 비피도박테리움에 비해 매우 높은 수준이었으며, 이를 통해 본 발명의 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1은 장 상피세포에 부착하여 장내 환경을 개선하는 것에 탁월함을 확인할 수 있었다.
균주 | 횟수 | 반응이전(균주 투여농도) | 반응이후(균주 부착농도) | 부착률 (%) |
||
생균수 (CFU/mL) |
Log CFU | 생균수 (CFU/mL) |
Log CFU | |||
Bifidobacterium longum TSB-L1 | 1 | 8.3 X 108 | 8.91 | 2.7 X 107 | 7.30 | 81.9 |
2 | 8.9 X 108 | 8.94 | 3.1 X 107 | 7.49 | 83.7 | |
Bifidobacterium longum Customprobiotics (USA) | 1 | 5.8 X 108 | 8.76 | 5.4 X 106 | 6.73 | 76.8 |
2 | 4.9 X 108 | 8.69 | 1.1X 107 | 7.04 | 81.0 | |
Bifidobacterium longum KCTC3128 | 1 | 3.8 X 108 | 8.57 | 3.6X 105 | 5.55 | 64.8 |
2 | 5.2 X 108 | 8.71 | 5.0X 105 | 5.69 | 65.3 |
[실험예 4: 신규 비피도박테리움 롱검 TSB-L1의 인체 내 효능 평가]
본 실험예에서는 선별 균주 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1의 인체 내 효능을 평가하고자 하였다.
국제 임상시험기준에 준하여 임상시험 실시 기관인 국민대학교 IRB 심의절차를 거쳐 승인(KMU2019-209)을 받은 후, 건강한 성인 남녀 25명를 대상으로 하였다.
사용된 프로바이오틱스 균주는 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1로 제조원 ㈜씨티씨바이오에서 위탁 생산하였고 1일 섭취량 (10,000,000,000 CFU/일)은 건강기능식품공전에 제시된 1일 섭취량의 범주에 해당하는 함량으로 제공하였다. 사용된 프리바이오틱스는 대한제당㈜에서 판매하고 있는 자일로올리고당 함유 설탕으로 프리바이오틱스 10g을 통한 자일로올리고당 섭취량은 1일 0.7 g으로 건강기능식품의 개별인정형 원료로 허용된 1일 최대 섭취량 보다 낮은 안전한 수준으로 제공하였다.
시료 섭취 방법에 따라 신바이오틱스(프로바이오틱스+프리바이오틱스)를 2주 섭취 후, 프리바이오틱스만을 4주 더 섭취하여 총 6주간 섭취하는 군을 BL2XO6군으로, 신바이오틱스(프로바이오틱스+프리바이오틱스)를 2주간 섭취하는 군은 BL2XO2군으로 분류하였고 배변 수거는 모든 실험군에서 시료 섭취 전, 시료 섭취 후 2주, 4주, 6주 총 4회에 걸쳐 수거하였다. 균총분석은 KRIBS 한국의과학연구원(대전, 대한민국)에 의뢰하였고 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.), 클로스트리디움 속(Clostridium spp.), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)을 분석하였다.
균주 | 섭취 전 | 2 주차 | 4 주차 | 6 주차 |
생균수(Log/g feces) | ||||
BL2XO6 | ||||
Bifidobacterium spp. | 9.50±0.63 | 9.46±0.75 | 9.78±0.74 | 9.98±0.82 |
Clostridium spp. | 10.35±0.74 | 9.20±0.97 | 9.56±0.93 | 9.86±0.49 |
Bifidobacterium longum | 8.48±0.76 | 8.70±0.82 | 8.80±0.69 | 8.95±0.81 |
BL2XO2 | ||||
Bifidobacterium spp. | 9.86±0.56 | 9.48±0.49 | 9.83±0.56 | 9.64±0.95 |
Clostridium spp. | 9.97±0.91 | 9.57±0.88 | 9.99±0.83 | 9.44±1.09 |
Bifidobacterium longum | 8.52±0.72 | 8.53±0.83 | 8.76±0.70 | 8.75±0.88 |
그 결과, 표 5와 같이 신바이오틱스 섭취 후 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)은 증식되었고, 유해균인 클로스트리디움 속(Clostridium spp.)의 증식은 억제되었으며 이후 자일로올리고당만을 섭취하는 BL2XO6군에서 비피도박테리움(Bifidobacterium)은 지속적으로 증가하는 양상을 보였으며 유해균인 클로스트리디움 속(Clostridium spp.)의 증식은 둔화되었다.
반면, 신바이오틱스 섭취후 자일로올리고당을 섭취하지 않은 BL2XO2군의 경우 프로바이오틱스의 영향력이 지속되면서 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)은 증가하였으나 그 증가율이 BL2XO6군에 비해 낮았으며, 비피도박테리움(Bifidobacterium)은 시료 섭취전보다도 감소하는 추이를 보였다.
이를 통해 본 발명의 유산균 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1과 자일로올리고당을 함유한 설탕의 섭취는 장내 유익균의 증가를 유도할 뿐만 아니라, 자일로올리고당 함유 설탕만을 섭취하는 기간 동안에도 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)과 같은 유익균의 증식을 지속적으로 유지시켜 장 건강에 도움을 줄 수 있을 것으로 판단되었다.
기탁기관명 : 한국생명공학연구원
수탁번호 : KCTC18825P
수탁일자 : 20200615
<110> TS Corporation
<120> Novel Bifidobacterium longum TSB-L1 with xylooligosaccharide
specific availability
<130> YP-20-087
<160> 1
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 1214
<212> RNA
<213> Bifidobacterium longum
<400> 1
gaagacctga cccatacacc ggaatagctc ctggaaacgg gtggtaatgc cggatgctcc 60
agttgatcgc atggtcttct gggaaagctt tcgcggtatg ggatggggtc gcgtcctatc 120
agcttgacgg cggggtaacg gcccaccgtg gcttcgacgg gtagccggcc tgagagggcg 180
accggccaca ttgggactga gatacggccc agactcctac gggaggcagc agtggggaat 240
attgcacaat gggcgcaagc ctgatgcagc gacgccgcgt gagggatgga ggccttcggg 300
ttgtaaacct cttttatcgg ggagcaagcg agagtgagtt tacccgttga ataagcaccg 360
gctaactacg tgccagcagc cgcggtaata cgtagggtgc aagcgttatc cggaattatt 420
gggcgtaaag ggctcgtagg cggttcgtcg cgtccggtgt gaaagtccat cgcttaacgg 480
tggatccgcg ccgggtacgg gcgggcttga gtgcggtagg ggagactgga attcccggtg 540
taacggtgga atgtgtagat atcgggaaga acaccaatgg cgaaggcagg tctctgggcc 600
gttactgacg ctgaggagcg aaagcgtggg gagcgaacag gattagatac cctggtagtc 660
cacgccgtaa acggtggatg ctggatgtgg ggcccgttcc acgggttccg tgtcggagct 720
aacgcgttaa gcatcccgcc tggggagtac ggccgcaagg ctaaaactca aagaaattga 780
cgggggcccg cacaagcggc ggagcatgcg gattaattcg atgcaacgcg aagaacctta 840
cctgggcttg acatgttccc gacggtcgta gagatacggc ttcccttcgg ggcgggttca 900
caggtggtgc atggtcgtcg tcagctcgtg tcgtgagatg ttgggttaag tcccgcaacg 960
agcgcaaccc tcgccccgtg ttgccagcgg attatgccgg gaactcacgg gggaccgccg 1020
gggttaactc ggaggaaggt ggggatgacg tcagatcatc atgcccctta cgtccagggc 1080
ttcacgcatg ctacaatggc cggtacaacg ggatgcgacg cggcgacgcg gagcggatcc 1140
ctgaaaaccg gtctcagttc ggatcgcagt ctgcaactcg actgcgtgaa ggcggagtcg 1200
ctagtaatcg cgaa 1214
Claims (3)
- 자일로올리고당 이용능이 우수하되, 상기 자일로올리고당을 가수분해하여 축적되는 자일로스가 적은 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P).
- 제1항에 있어서,
상기 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)은,
내산성, 내담즙성, 장관세포 부착능 중 선택되는 하나 이상의 성질을 갖는 것을 특징으로 하는 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P).
- 자일로올리고당 이용능이 우수하되, 상기 자일로올리고당을 가수분해하여 축적되는 자일로스가 적은 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) TSB-L1 (KCTC 18825P)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
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Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020200077066A KR102428864B1 (ko) | 2020-06-24 | 2020-06-24 | 자일로올리고당을 특이적으로 이용할 수 있는 신규 비피도박테리움 롱검 tsb-l1 |
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KR1020200077066A KR102428864B1 (ko) | 2020-06-24 | 2020-06-24 | 자일로올리고당을 특이적으로 이용할 수 있는 신규 비피도박테리움 롱검 tsb-l1 |
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KR (1) | KR102428864B1 (ko) |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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KR100264295B1 (ko) * | 1998-07-01 | 2000-08-16 | 김정완 | 비피도박테리움 론검 mk-g7 비피더스 균주 및 이의 용도 |
-
2020
- 2020-06-24 KR KR1020200077066A patent/KR102428864B1/ko active IP Right Grant
Non-Patent Citations (1)
Title |
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류보경 등, Kor. J. Microbiol. Biotechnol., 제30권, 제4호, 380-387면(2002)* |
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