KR102391676B1 - 폐 염증의 치료 및 예방을 위한 사이클로덱스트린 및 부데소나이드 유도체를 포함하는 조성물 - Google Patents

폐 염증의 치료 및 예방을 위한 사이클로덱스트린 및 부데소나이드 유도체를 포함하는 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 폐 염증성 질환의 치료 및/또는 예방을 위한, 사이클로덱스트린 화합물 및 부데소나이드 유도체를 갖는 제형화된 신규하고 유용한 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 용액 중의 HP-β-CD의 검출 및 정량화를 위한 신규하고 유용한 분석 기술에 관한 것이다. 보다 특히, 본 발명은 액체 제형을 위한 임의의 추출 또는 분리 단계 없이 약제학적 제형에서 직접적으로 사이클로덱스트린의 검출 및 정량화를 위한 입증된 1H NMR 분석의 사용에 관한 것이다.

Description

폐 염증의 치료 및 예방을 위한 사이클로덱스트린 및 부데소나이드 유도체를 포함하는 조성물{COMPOSITION COMPRISING CYCLODEXTRIN AND BUDESONIDE DERIVATIVES FOR THE TREATMENT AND PROPHYLAXIS OF PULMONARY INFLAMMATIONS}
관련 출원
미국 특허를 위한 당해 출원은 2014년 3월 28일자로 출원되고 발명의 명칭이 "부데소나이드 유도체를 갖는 사이클로덱스트린 조성물 및 방법"인 미국 가특허 출원 제61/972,209호 및 리에주 대학(Universite de Liege)에 의해 기탁되고, 양도된 공개 제EP14162158.1호이고 발명의 명칭이 "폐 염증성 질환의 치료 및 예방을 위한 부데소나이드 유도체를 갖는 사이클로덱스트 조성물"인 유럽 출원 제EP14132158 BE호(28.03.2014)에 관한 것이고, 이는 완전하게 본원에 기재된 바와 같이 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다.
발명의 분야
본 발명은 폐 염증성 질환의 치료 및/또는 예방을 위한, 사이클로덱스트린 화합물 및 부데소나이드 유도체를 갖는 제형화된 신규하고 유용한 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 용액 중의 HP-β-CD의 검출 및 정량화를 위한 신규하고 유용한 분석 기술에 관한 것이다. 보다 특히, 본 발명은 액체 제형을 위한 임의의 추출 또는 분리 단계 없이 약제학적 제형에서 직접적으로 사이클로덱스트린의 검출 및 정량화를 위한 입증된 1H NMR 분석의 사용에 관한 것이다.
폐 염증성 질환(PID)은 완전히 가역적이지 않은 공기흐름 제한을 특징으로 하는 질환 상태이다. 공기흐름 제한은, 예를 들면, 유독한 입자(연기 및 연무에서 발견되는 것과 같은 직경 2.5 마이크로미터 이하의 미세한 입자)에 대한 폐의 비정상적인 염증성 반응과 관련이 있다.
폐 염증성 질환은 염증성 천식, 즉, 심한 단계의 천식, 만성 폐쇄성 질환(COPD), 예를 들면, 만성 기관지염, 폐쇄성 세기관지염, 폐기종, 폐 섬유증, 낭포성 섬유증 등을 포함한다.
PID 환자에서, 기관지 벽에 상당한 호중성 염증이 존재하고, 이는 프로테아제 및 산화제(산소 반응성 종)의 반복된 생성에 의해 기도 구조의 점진적인 파괴를 야기한다. 지금까지, 통상적인 치료법은 PID 환자에서 이러한 호중성 염증을 충분히 감소시키거나 예방할 수 없다. 특히, 흡입된 또는 경구 스테로이드는 호중성 염증에 대항하는 효능을 나타내지 않는 것이 잘 알려져 있다. 예를 들면, COPD 환자에서 수행된 문헌[S. Culpitt et al.: Am J Respir Crit Care Med. 160: 1635-1639(1999)]의 연구에서, COPD-관련 호중성 염증 및 호중구를 위한 화학주성 제제(인간에서 주로 IL-8)에서 고용량으로 흡입된 스테로이드의 효능 부족이 보고되었다.
PID 환자에서 최근 스테로이드 치료의 효과 없음을 고려하여, PID 환자에서 호중성 염증을 충분하게 감소시키거나 예방하는 효과적인 스테로이드 치료가 요구된다.
간단하게, 본 발명은 이러한 치료가 필요한 숙주(host) 포유동물에서 폐 염증성 질환 치료학적 치료 및/또는 예방에서 효과적인 사용을 위한 신규하고 유용한 약제학적 조성물의 발견을 통해, PID 환자에서 스테로이드 치료법의 최근 사용과 연관된 상기 언급된 결점 및 단점을 극복한다.
일반적으로 말하면, 본 발명은 폐 염증성 질환의 치료 및/또는 예방을 위한, 사이클로덱스트린 화합물 및 부데소나이드 유도체를 갖는 제형화된 신규하고 유용한 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 용액 중의 HP-β-CD의 검출 및 정량화를 위한 신규하고 유용한 분석 기술에 관한 것이다. 보다 특히, 본 발명은 액체 제형을 위한 임의의 추출 또는 분리 단계 없이 약제학적 제형에서 직접적으로 사이클로덱스트린의 검출 및 정량화를 위한 입증된 1H NMR 분석의 사용에 관한 것이다.
본 발명의 신규한 조성물 및 방법은 사이클로덱스트린 화합물 및 화학식 I의 부데소나이드 유도체를 갖는 제형화된 조성물 및 이러한 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 PID를 치료 및/또는 예방하기 위한 이의 사용을 포함한다:
Figure 112016104827148-pct00001
식 중, "R1" 및 "R2"는 각각 독립적으로 수소 원자, 할로젠, C1-5-알킬, C3-8-사이클로알킬, 하이드록시, C1-5-알콕시, C1-5-알콕시, C1-5-알킬, 임의로 할로젠 원자로 일치환 또는 다치환된 C1-5-알킬, C1-5-알콕시카보닐 또는 C1-5-알콕시카보닐-C1-6-알킬을 나타내고;
"R3", "R4", "R5" 및 "R6"은 각각 독립적으로 수소, 하이드록실 잔기, C1-5-알콕시, C1-5-알콕시카보닐, 하이드록시카보닐, 임의로 할로젠 원자로 일치환 또는 다치환된 C1-5-알킬카보닐, C1-5-알킬카보닐옥시, C3-8-사이클로알킬카보닐옥시, C1-5 알킬 티오, C1-5 알킬 설포닐, C1-5-알킬설피닐, 푸란, 푸란 카보닐옥시, 임의로 할로젠 원자로 일치환 또는 다치환된 C1-5-알킬티오카보닐 또는 프로피오닐옥시메틸카보닐을 나타내며; 그리고
"R4" 및 "R5"는 임의로 함께 3 내지 5개의 원자의 탄화수소 고리를 형성하고, 2개의 탄소 원자는 임의로 산소 원자에 의해 대체되고, 고리는 임의로 C1-5-알킬기로 치환된다. 예를 들면, 2개의 탄소 원자가 산소 원자에 의해 대체되고 임의로 프로필기와 같은 알킬기로 치환된 3 내지 5개의 원자의 비스-옥시 탄화수소 고리; 또는 이러한 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 폐 염증성 질환의 치료학적 및/또는 예방학적 치료에서 사용을 위한, 약제학적으로 허용 가능한 산 또는 염기와의 이의 염, 또는 이의 라세미 혼합물 또는 임의의 호변이성질체 형태를 포함하는, 임의의 광학 이성체 또는 광학 이성체의 혼합물.
본원에서 사용되는 바와 같이, "C1-5-알킬"은 1-5개의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소기, 예를 들면, 메틸, 프로필, 부틸, 아이소펜틸, 1-메틸부틸, 1,2-다이메틸부틸, 2-에틸부틸 등을 의미한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "C3-8-사이클로알킬"은 고리 내에 3개 이상의 탄소, 바람직하게는 3 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 포화 또는 부분 불포화 하이드로카빌기를 의미한다. 사이클로알킬기의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 등이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "C1-5-알콕시"는 또한 C1-5-알킬옥시로 나타내고, 이는 에터 산소로부터 이의 자유 원자가 결합을 갖고 1 내지 5개의 탄소 원자를 갖는, 에터 산소를 통해 연결된 C1-5-알킬을 포함하는 선형 또는 분지형 1가 치환체를 의미하고, 예를 들면, 메톡시, 에톡시, 프로필옥시, 아이소프로폭시, 부틸옥시, sec-부틸옥시, ter-부틸옥시, 2-메틸부톡시, 펜틸옥시 등이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "C1-5-알콕시-C1-5-알킬"은 산소 원자가 끼어든 2-10개의 탄소 원자를 의미하고, 예를 들면, -CH2-O-CH3, -CH2CH2O-CH3, -CH2-O-CH2CH3, -CH2-O-CH(CH3)2, CH2CH2-O-CH(CH3)2, -CH(CH3)CH2-O-CH3 등이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 단독으로 또는 조합으로, "C1-5-알킬티오"는 황 원자로부터 이의 자유 원자가 결합을 갖고 1 내지 5개의 탄소 원자를 갖는, 2가 황 원자를 통해 연결된 C1-5-알킬기를 포함하는 선형 또는 분지형 1가 치환체를 의미하고, 예를 들면, 메틸티오, 에틸티오, 프로필티오, 아이소프로필티오, 부틸티오, 펜틸티오, 3-메틸펜틸티오 등이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "C1-5-알킬설포닐"은 설포닐 기(-S(=O)2-)를 통해 연결된 C1-5-알킬기를 포함하는 1가 치환체를 의미하고, 예를 들면, 메틸설포닐, 에틸설포닐, 프로필설포닐, 아이소프로필설포닐, 부틸설포닐, 펜틸설포닐, 2-메틸펜틸설포닐 등이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "C1-5-알킬설피닐"은 설피닐기(-S(=O))를 통해 연결된 C1-5-알킬기를 포함하는 1가 치환체를 의미하고, 예를 들면, 메틸설피닐, 에틸설피닐, 프로필설피닐, 아이소프로필설피닐, tert-부틸설피닐, 펜틸설피닐, 2-에틸부틸설피닐 등이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "푸란"은 하기를 의미한다:
Figure 112016104827148-pct00002
본원에서 사용되는 바와 같이, "푸란 카보닐옥시"는 하기를 의미한다:
Figure 112016104827148-pct00003
본원에서 사용되는 바와 같이, "할로젠"은 플루오린, 염소, 브로민 또는 아이오딘을 의미한다.
"R4" 및 "R5"는 임의로 함께 2개의 탄소 원자가 임의로 산소 원자로 대체될 수 있고 고리가 임의로 C1-5 알킬기로 치환될 수 있는 3 내지 5개의 원자의 탄화수소 고리, 예를 들면, 2개의 탄소 원자가 산소 원자로 대체될 수 있고 임의로 알킬기로 치환될 수 있는 3 내지 5개의 원자의 비스 옥시 탄화수소 고리, 예를 들면, 1,3-다이옥솔란-2-일)프로필 또는
Figure 112016104827148-pct00004
를 형성할 수 있다.
본 발명에 따른 바람직한 부데소나이드 유도체는 하기 도시된 바와 같이 R3 또는 R4에서 각각 푸란 카보닐옥시기를 갖는 화학식 I로 표시된 모메타손 푸로에이트 또는 플루티카손 푸로에이트이다:
Figure 112016104827148-pct00005
모메타손 푸로에이트는 화이자(Pfizer) 및 머크(Merck)로부터 상업적으로 입수가능한 반면, 플루티카손 푸로에이트는 GSK로부터 상업적으로 입수가능하다.
본 발명에 따른 기타 바람직한 부데소나이드 유도체는 하기와 같은 R4에서 적어도 프로필카보닐옥시기 또는 프로피오네이트기를 갖는, 화학식 I로 표시된 플루티카손 프로피오네이트 또는 베클로메타손 다이프로피오네이트이다:
Figure 112016104827148-pct00006
플루티카손 프로피오네이트는 상표명 플릭소타이드(Flixotide)하에 GSK로부터 상업적으로 입수가능하고, 베클로메타손 다이프로피오네이트는 상표명 QVAR, 에코벡(Ecobec) 및 베클로파르(Beclophar)하에 UCB, SANDOZ, TEVA, 및 CHIESI로부터 상업적으로 입수가능하다.
본 발명에 따라, 가장 바람직한 부데소나이드 유도체는 부데소나이드이다. 부데소나이드는 코르티코스테로이드이고 하기와 같은 화학식 I로 표시된다:
Figure 112016104827148-pct00007
부데소나이드는 또한 부티르알데하이드를 갖는 (R,S)-11(3,16a,17,21-테트라하이드록시프레그나-1,4-다이엔-3,20-다이온 사이클릭 16,17-아세탈, 또는 16,17-(부틸리덴비스(옥시))-11,21-다이하이드록시-, (11-β,16-α)-프레그나-1,4-다이엔-3,20-다이온으로 명명된다. 부데소나이드의 화학식, 분자량 및 CAS 번호는 각각 C25H3406, MW: 430.5 및 51333-22-3이다.
부데소나이드는 2개의 부분입체이성질체 22R 및 22S의 혼합물로 이루어진 라세미체이고, 2개의 이성체(22R 및 22S)의 혼합물로서 상업적으로 제공된다.
부데소나이드의 상업적인 제형은 아스트라제네카 엘피(AstraZeneca LP, 델라웨어주의 윌밍턴에 소재)에 의해 상표명 풀미코트 레스펄스(Pulmicort Respules)®, 리노코트 아쿠아(Rhinocort® Aqua), 리노코트(Rhinocort)®하에 용액으로, 상표명 노살 인헤일러(Nasal Inhaler) 및 풀미코트 터뷰헤일러(Pulmicort® Turbuhaler)하에 분말로, 및 이의 일반명하에 제공된다. 분말 형태(원재료)의 부데소나이드는 인디스(Indis, 벨기에)에 의해 제공된다.
베타메타손이 또한 본 발명에 의해 고려된다. 부데소나이드처럼, 베타메타손은 코르티코스테로이드이고 하기와 같은 화학식으로 표시된다:
Figure 112016104827148-pct00008
베타메타손의 IUPAC 명칭은 (8S,9R,10S,11S,13S,14S,16S,17R)-9-플루오로-11,17-다이하이드록시-17-(2-하이드록시아세틸)-10,13,16-트라이메틸-6,7,8,11,12,14,15,16-옥타하이드로사이클로펜타[a]페난트렌-3-온이다. 부데소나이드의 화학식, 분자량 및 CAS ID 번호는 각각 C22H29FO5, 392.461063g/mol 및 378-44-9이다.
베타메타손의 대안적인 화학명은 셀레스톤(Celestone), 린데론 베타덱사메타손(Rinderon Betadexamethasone) 및 플루베니솔론(Flubenisolone)을 포함한다.
플루티카손은 본 발명에 의해 고려되는 또 다른 코르티코스테로이드이고 하기와 같은 화학식으로 표시된다:
Figure 112016104827148-pct00009
플루티카손의 IUPAC 명칭은 (6α,11β,16α,17α)-6,9-다이플루오로-17-{[(플루오로-메틸)티오]카보닐}-11-하이드록시-16-메틸-3-옥소안드로스타-1,4-다이엔-17-일 2-푸란카복실레이트이다. 플루티카손의 화학식, 분자량 및 CAS ID 번호는 각각 C27H29F3O6S, 538.576g/mol 및 80474-14-2이다.
사이클로덱스트린은 녹말로부터 박테리아성 분해에 의해 생성된 환형 올리고당으로 알려져 있다. 사이클로덱스트린은 6, 7 또는 8개의 α-D-글루코피라노사이드 단위로 구성되고, 이에 따라 α, β 또는 γ 사이클로덱스트린으로 명명된다.
Figure 112016104827148-pct00010
본 발명에 따른 사이클로덱스트린 화합물은 사이클로덱스트린 그 자체, 알킬-사이클로덱스트린(R-CD), 여기서 "R"이 메틸, 에틸, 프로필 또는 부틸이고; 카복시알킬-사이클로덱스트린(CR-CD), 에터화된-사이클로덱스트린(RO-CD), 하이드록시알킬-사이클로덱스트린(HR-CD), 글루코실-사이클로덱스트린, 다이 및 트라이글리세라이드-사이클로덱스트린 또는 이들의 조합물 및 이들의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하고, 이는 약 25℃에서 적어도 약 0.5gr/100㎖의 양으로 수용성이다.
본 발명에서 바람직하게 사용되는 수용성 사이클로덱스트린 화합물은 적어도 B-사이클로덱스트린의 수 용해도(약 1.85g/100㎖)를 갖는 사이클로덱스트린 화합물을 의미한다. 이러한 수용성 사이클로덱스트린 화합물의 예는 하이드록시프로필사이클로덱스트린, 말토실사이클로덱스트린 및 이의 염을 포함한다. 특히, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 말토실-β-사이클로덱스트린, 및 이의 유도체가 바람직하다.
본 발명에 따른 기타 바람직한 사이클로덱스트린 화합물은 메틸사이클로덱스트린(사이클로덱스트린 메틸화의 생성물), 예를 들면, 2-O-메틸β-사이클로덱스트린; 다이메틸사이클로덱스트린(DIMEB)(바람직하게는 2 및 6에서 치환됨), 트라이메틸사이클로덱스트린(바람직하게는 2, 3 및 6에서 치환됨), "무작위 메틸화된" 사이클로덱스트린(RAMEB 또는 RM)(바람직하게는 2, 3 및 6에서 무작위로 치환되지만, 단위 글루코피라노스에 의해 1.7 내지 1.9 메틸의 수를 갖음), 하이드록시프로필사이클로덱스트린(HPCD), 바람직하게는 2 및 3 위치에서 무작위로 주로 치환된 하이드록시프로필화된 사이클로덱스트린(HP-βCD, HP-γCD), 하이드록시에틸-사이클로덱스트린, 카복시메틸에틸사이클로덱스트린, 에틸사이클로덱스트린, 하이드록실기에서 탄화수소 쇄를 그래프팅함으로써 수득되고 나노입자를 형성할 수 있는 양친매성 사이클로덱스트린, 콜레스테롤 사이클로덱스트린 및 본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[Critical Review in Therapeutic drug Carrier Systems, Stephen D. Bruck Ed, Cyclodextrin-Enabling Excipient; their present and future use in Pharmaceuticals, D. Thomson, Volume 14, Issue 1 p1-114(1997)]에 기재된 바와 같이 (스페이서 암(spacer arm)을 갖는) 모노아민화된 사이클로덱스트린을 그래프팅함으로써 수득된 트라이글리세라이드-사이클로덱스트린을 포함한다.
본 발명에 따른 가장 바람직한 사이클로덱스트린 화합물은 임의로 글루코피라노스 단위 위에 그래프팅된 화학적 작용기를 갖는 β-사이클로덱스트린, 예를 들면, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(HPβCD), -β-사이클로덱스트린(SBEβCD), 무작위 메틸화된-β-사이클로덱스트린(RMβCD), 다이메틸-β-사이클로덱스트린(DIMEβCD), 트라이메틸-β-사이클로덱스트린(TRIMEβCD), 하이드록시부틸β-사이클로덱스트린(HBβCD), 글루코실 β-사이클로덱스트린, 말토실 β-사이클로덱스트린 2-O-메틸 β-사이클로덱스트린(크라이스멥(Crysmeb)) 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 및 이의 임의의 조합을 포함한다.
본 발명에 따른 가장 바람직한 사이클로덱스트린은 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(상기 또는 하기에서 또한 HP-β-CD 또는 HPβCD로도 지칭됨)이다.
본 발명에 따른 사이클로덱스트린 화합물은 잘 알려진 녹말의 효소적 분해, 예를 들면, 본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[Cyclodextrin Technology, J Szejtli, Kluwer Academic Publishers 1998, pp 1-78]에 기재된 방법에 의해 생성된 후, 적절한 화학적 기가 그래프팅된다. 이들은 로케뜨(Roquette, 프랑스 소재)로부터 상업적으로 입수가능하다.
가장 바람직한 약제학적 조성물은 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린 화합물을 약 1-1 내지 약 1-100, 바람직하게는 약 1:75, 가장 바람직하게는 약 1:50의 몰비로 포함한다. 부데소나이드/하이드록시프로필-β 사이클로덱스트린 농도 비율은 바람직하게는 약 1:50의 몰비이다.
사이클로덱스트린 화합물 및 부데소나이드 유도체를 포함하는 본 발명에 따른 약제학적 조성물은 분말 형태의 부데소나이드 유도체의 과량을 액체 용액 중의 사이클로덱스트린의 충분한 양에 첨가함으로써 제조될 수 있다. 액체 사이클로덱스트린 용액은 물 또는 물-알코올 또는 알코올계 용액, 예를 들면, 에탄올이다. 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린 화합물을 실온에서 연속적인 교반하에 혼합한다. 과량의 부데소나이드 유도체는 여과로 제거한다.
두 구성분을 중량 측정하여, 수득된 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린의 혼합물의 중량 농도 비율은 약 1:1500 내지 약 1:2, 바람직하게는 약 1:60 비율을 갖는다.
그 다음, 미크론화된 건조된 분말을 제조하기 위하여 액체 혼합물을 당해 분야의 잘 알려진 적절한 기술에 의해 원자화 동안 건조시킬 수 있다. 이러한 경우, 약제학적 조성물은 또한 약제학적으로 허용 가능한 부형제, 예를 들면, 캐리어, 예를 들면, 락토스, 스테아르산마그네슘, 만니톨, 폴리올, 류신 유도체 등을 포함할 수 있다.
또한 혼합 단계에서 액체 용액 중의 사이클로덱스트린의 농도와 동일한 농도의 등장성 버퍼 중의 사이클로덱스트린에 액체 혼합물을 가하여 액체 용액인 약제학적 조성물을 제조할 수 있다.
액체 용액인 약제학적 조성물은 또한 잘 알려진 약제학적으로 허용 가능한 부형제, 예를 들면, 등장성 버퍼, 보존제, 용매 또는 점도 조절제 및 보조 성분을 함유할 수 있다. 적절한 등장성 버퍼 시스템은 [http://bio.lonza.com/uploads/tx_mwaxmarketingmaterial/Lonza_BenchGuides_Phosphate_buffered_Saline_PBS.pdf]에 보고된 바와 같이 인산나트륨(PBS), 아세트산나트륨 또는 붕산나트륨을 기반으로 한다.
보존제는 사용 동안 약제학적 조성물의 미생물 오염을 방지하기 위하여 포함될 수 있다. 적합한 보존제는, 예를 들면, 벤즈알코늄 클로라이드, 클로로부탄올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 페닐에틸 알코올, 소르브산이다. 이러한 보존제는 전형적으로 약 0.01 내지 약 1% 중량/용적의 양으로 사용된다.
적합한 보조 성분 및 약제학적으로 허용 가능한 염은 본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th ed., 1980, Mack Publishing Co., edited by Oslo et al.]에 기재되어 있다.
전형적으로, 약제학적으로 허용 가능한 염의 적절한 양이 본 발명의 약제학적 조성물 중에 사용되어 조성물에 등장성을 부여한다. 약제학적으로 허용 가능한 성분의 예는 염분, 링거액 및 덱스트로스 용액을 포함한다. 본 발명에 따라, 용액의 pH는 바람직하게는 약 5 내지 약 8, 보다 바람직하게는 약 7 내지 약 7.5이다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 이러한 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 폐 염증성 질환, 바람직하게는 만성 폐쇄성 폐 질환, 예를 들면, 만성 기관지염, 폐쇄성 세기관지염, 폐기종, 폐 섬유증, 낭포성 섬유증, 가장 바람직하게는 담배-유도된 만성 폐쇄성 폐 질환 및 낭포성 섬유증 질환의 치료 및/또는 예방에 유용하다.
본 발명의 약제학적 조성물은 경구, 비경구 또는 국소 제형, 특히 에어로졸 또는 코 흡입 투여용 제형, 투여의 국소 형태로 제형화될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 용액, 현탁액, 미크론화된 분말 혼합물 등으로 전달될 수 있다. 추가로, 본 발명의 약제학적 조성물은, 예를 들면, 네블라이저, 정량 흡입기 또는 건조 분말 흡입기 또는 이러한 국소 투여를 위해 디자인된 임의의 기타 장치에 의해 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 약 0.05 내지 약 1000mcg, 바람직하게는 약 0.1 내지 약 500mcg 범위, 특히 약 50 내지 약 200mcg/일 범위의 분자 용량으로 투여될 수 있다.
본 발명에 의해 고려되는 바람직한 약제학적 조성물은 액체 용액 중의 부데소나이드 및 사이클로덱스트린, 가장 바람직하게는 부데소나이드 및 HP-β-사이클로덱스트린을 포함한다.
본 발명에 의해 고려되는 가장 바람직한 약제학적 조성물은 등장성 버퍼 중의 HP-β-사이클로덱스트린 약 20mM 용액 중의 부데소나이드 약 100㎍/㎖의 농도로 액체 용액 중의 부데소나이드 및 사이클로덱스트린을 함유한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물 중의 사이클로덱스트린 화합물과 부데소나이드 유도체의 조합은 바람직하게는 약 1:1 또는 약 2:1의 화학량론적 비율의 부데소나이드 유도체-사이클로덱스트린 화합물의 복합체이다. 특히, HP-β-사이클로덱스트린을 갖는 복합체 부데소나이드는 화학량론적 비율 약 1:1이다.
본 발명은 추가로 하기에 관한 것이다:
(1) 이러한 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 폐 염증성 질환의 치료학적 및/또는 예방학적 치료에서 사용을 위한, 사이클로덱스트린 화합물 및 하기 화학식 I의 부데소나이드 유도체, 또는 약제학적으로 허용 가능한 산 또는 염기와의 이의 염, 또는 이의 라세미 혼합물 또는 임의의 호변이성질체 형태를 포함한, 임의의 광학 이성체 또는 광학 이성체의 혼합물을 포함하는 약제학적 조성물:
Figure 112016104827148-pct00011
식 중, R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 원자, 할로젠, C1-5-알킬, C3-8-사이클로알킬, 하이드록시, C1-5-알콕시, C1-5-알콕시-C1-5-알킬, 임의로 할로젠 원자로 일치환 또는 다치환된 C1-5-알킬, C1-5-알콕시카보닐, C1-5-알콕시카보닐-C1-6-알킬을 나타내고;
R3, R4, R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소, 하이드록실, C1-5-알콕시, C1-5-알콕시카보닐, 하이드록시카보닐, 임의로 할로젠 원자로 일치환 또는 다치환된 C1-5-알킬카보닐, C1-5-알킬카보닐옥시, C3-8-사이클로알킬카보닐옥시, C1-5-알킬 티오, C1-5-알킬 설포닐, C1-5-알킬설피닐, 푸란, 푸란 카보닐옥시, 임의로 할로젠 원자로 일치환 또는 다치환된 C1-5-알킬티오카보닐을 나타내며; 그리고
R4 및 R5는 임의로 함께 3 내지 5개의 원자의 탄화수소 고리를 형성하고, 2개의 탄소 원자는 임의로 산소 원자에 의해 대체되며, 상기 고리는 임의로 C1-5 알킬기로 치환된다.
(2) 제1항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체 및 상기 사이클로덱스트린 화합물의 중량 농도 비율이 약 1:1500 내지 약 1:2인, 약제학적 조성물.
(3) 제1항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체 및 상기 사이클로덱스트린 화합물의 중량 농도 비율이 약 1:60인, 약제학적 조성물.
(4) 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 모메타손 푸로에이트, 플루티카손, 플루티카손 푸로에이트, 플루티카손 프로피오네이트, 베타메타손, 베타메타손 프로피오네이트, 베클로메타손, 부데소나이드 또는 이의 조합 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 에스터로 이루어진 군으로부터 선택되는, 약제학적 조성물.
(5) 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, R1, R2, R6이 수소이고; R3이 하이드록시에탄온기이며, R4가 R5와 함께 1,3-다이옥솔란-2-일)프로필 또는
Figure 112016104827148-pct00012
를 형성하는 부데소나이드 유도체(부데소나이드)를 포함하는, 약제학적 조성물.
(6) 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, R1이 수소이고, R2가 Cl이며, R3이 푸란카복실이고, R4가 크로로메틸카보닐이며, R5 및 R6이 수소인 부데소나이드 유도체(모메타손 푸로에이트)를 포함하는, 약제학적 조성물.
(7) 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R2가 플루오린이고, R3이 플루오로메틸티오카보닐이며, R4가 푸란카복실이고, R5 및 R6이 수소인 부데소나이드 유도체(플루티카손 푸로에이트)를 포함하는, 약제학적 조성물.
(8) 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R2가 플루오린이고, R3이 플루오로메틸티오카보닐이며, R4가 프로필카복실이고, R5 및 R6이 수소인 부데소나이드 유도체(플루티카손 프로피오네이트)를 포함하는, 약제학적 조성물.
(9) 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 염소이고, R1, R5 및 R6이 수소이며, R3이 프로피오닐옥시메틸카보닐이고, R4가 프로필카보닐옥시기이며,
Figure 112016104827148-pct00013
인 부데소나이드 유도체(베클로메타손 다이프로피오네이트)를 포함하는, 약제학적 조성물.
(10) 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 상기 사이클로덱스트린 화합물과 함께 약 1:1 화학량론적 비율의 복합체를 형성하는, 약제학적 조성물.
(11) 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 적어도 약 1.85g/100㎖의 수 용해도를 갖는 조성물.
(12) 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 β-사이클로덱스트린, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 무작위 메틸화된-β, 다이메틸-f-사이클로덱스트린, 트라이메틸-f-사이클로덱스트린, 하이드록시프로필 f-사이클로덱스트린, 하이드록시부틸 β-사이클로덱스트린, 글루코실-β-사이클로덱스트린, 말토실-β-사이클로덱스트린, 2-O-메틸-β-사이클로덱스트린 또는 이들의 조합물 및 이들의 약제학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 조성물.
(13) 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 하이드록시프로필 β-사이클로덱스트린인 조성물.
(14) 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폐 염증성 질환이 만성 폐쇄성 질환인 조성물.
(15) 폐 염증성 질환의 예방학적 치료 방법으로서, 이러한 치료가 필요한 환자에게 유효량의 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(16) 폐 염증성 질환의 치료학적 치료 방법으로서, 이러한 치료가 필요한 환자에게 유효량의 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(17) 제15항 또는 제16항에 있어서, 상기 사이클로덱스트린 화합물 및 상기 부데소나이드 유도체가 각각 약 0.1mg 및 약 25mg/용량의 명목 투여량으로 투여되는 방법.
(18) 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 상기 약제학적 조성물을 포함하는, 치료가 필요한 환자에서 폐 염증성 질환의 치료를 위한 흡입 시스템.
(19) 부데소나이드 약 250㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 20mM을 포함하는, 약제학적 조성물.
(20) 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 20mM을 포함하는, 약제학적 조성물.
(21) 부데소나이드 약 250㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM을 포함하는, 약제학적 조성물.
(22) 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM을 포함하는, 약제학적 조성물.
(23) 플루티카손 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM을 포함하는, 약제학적 조성물.
(24) 플루티카손 약 40㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM을 포함하는, 약제학적 조성물.
(25) 베클로메타손 약 40㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM을 포함하는, 약제학적 조성물.
(26) 제19항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 용액인, 약제학적 조성물.
(27) 제26항에 있어서, 상기 용액이 약 5 내지 약 8의 pH를 갖는, 약제학적 조성물.
(28) 제26항에 있어서, 상기 용액이 약 7 내지 약 7.5의 pH를 갖는, 약제학적 조성물.
(29) 제26항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 용액이고, 상기 용액이 분무 건조되어 분말을 생성하는, 약제학적 조성물.
(30) 제29항에 있어서, 상기 분말이 약 3 미크론의 입자를 포함하는, 약제학적 조성물.
(31) 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린을 포함하는 약제학적 조성물로서, 상기 부데소나이드 유도체를 약 0.05 내지 약 1000mcg 범위의 분자 용량으로 전달하기 위한 조성물.
(32) 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린을 포함하는 약제학적 조성물로서, 상기 부데소나이드 유도체를 약 0.1 내지 약 500mcg 범위의 분자 용량으로 전달하기 위한 조성물.
(33) 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린을 포함하는 약제학적 조성물로서, 상기 부데소나이드 유도체를 약 50 내지 약 200mcg/일 범위의 분자 용량으로 전달하기 위한 조성물.
(34) 제31항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 부데소나이드이고, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 HP-β-CD인, 약제학적 조성물.
(35) 제31항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 베타메타손이고, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 HP-β-CD인, 약제학적 조성물.
(36) 제31항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 플루티카손이고, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 HP-β-CD인, 약제학적 조성물.
(37) 제31항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 베클로메타손이고, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 HP-β-CD인, 약제학적 조성물.
(38) 약 1:1 내지 약 2:1의 화학량론적 비율의 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린 화합물의 복합체를 포함하는, 약제학적 조성물.
(39) 약 1:1의 화학량론적 비율의 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린 화합물의 복합체를 포함하는, 약제학적 조성물.
(40) 제38항 또는 제39항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 부데소나이드이고, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 HP-β-CD인, 약제학적 조성물.
(41) 제38항 또는 제39항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 플루티카손이고, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 HP-β-CD인, 약제학적 조성물.
(42) 제38항 또는 제39항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 베클로메타손이고, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 HP-β-CD인, 약제학적 조성물.
(43) 폐 염증성 질환의 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 폐 염증성 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 숙주 포유동물에 제1항 내지 제14항, 제19항 내지 제42항 및 제58항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(44) 폐 조직에서 염증성 세포의 감소 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 폐 조직에서 염증성 세포를 감소시키는 방법으로서, 상기 숙주 포유동물에 제1항 내지 제14항, 제19항 내지 제42항 및 제58항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(45) 폐 조직에서 오존-유도된 KC 생성의 감소 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 폐 조직에서 오존-유도된 KC 생성을 감소시키는 방법으로서, 상기 숙주 포유동물에 제1항 내지 제14항, 제19항 내지 제42항 및 제58항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(46) 알레르겐 노출 후 폐 조직에서 IL13의 감소 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 폐 조직에서 IL13을 감소시키는 방법으로서, 상기 숙주 포유동물에 제1항 내지 제14항, 제19항 내지 제42항 및 제58항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(47) 기관지 과민반응성 감소의 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 기관지 과민반응성을 감소시키는 방법으로서, 상기 숙주 포유동물에 제1항 내지 제14항, 제19항 내지 제42항 및 제58항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(48) IL17 수준 감소의 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 IL17 수준을 감소시키는 방법으로서, 상기 숙주 포유동물에 제1항 내지 제14항, 제19항 내지 제42항 및 제58항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(49) CXCL-1 수준 감소의 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 CXCL-1 수준을 감소시키는 방법으로서, 상기 숙주 포유동물에 제1항 내지 제14항, 제19항 내지 제42항 및 제58항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(50) 담배 연기 노출 후 폐 조직에서 호중구의 감소 치료가 필요한 숙주 포유동물에서 폐 조직에서 호중구를 감소시키는 방법으로서, 상기 숙주 포유동물에 제1항 내지 제14항, 제19항 내지 제42항 및 제58항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
(51) 활성 성분 및 HP-β-CD를 포함하는 조성물 중의 HP-β-CD를 상기 조성물에 대한 임의의 분리 또는 추출 단계 없이 검출하고 정량화하는 방법으로서, 상기 HP-β-CD는 하이드록시프로필기를 함유하고, 상기 HP-β-CD의 상기 하이드록시프로필기의 1H NMR 분석을 사용하여 상기 조성물 중의 HP-β-CD를 검출하고 정량화하는 것을 포함하는, 방법.
(52) 제51항에 있어서, 상기 조성물이 용액인, 방법.
(53) 제51항 또는 제52항에 있어서, 상기 활성 성분이 부데소나이드 유도체인, 방법.
(54) 제51항 또는 제52항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 부데소나이드인, 방법.
(55) 제51항 또는 제52항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 플루티카손인, 방법.
(56) 제51항 또는 제52항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 베클로메타손인, 방법.
(57) 제51항 또는 제52항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 베타메타손인, 방법.
(58) 제38항 또는 제39항에 있어서, 상기 부데소나이드 유도체가 베타메타손이고, 상기 사이클로덱스트린 화합물이 HP-β-CD인, 약제학적 조성물.
하기 실시예, 참조, 및 도면은 본 발명의 이해를 돕기 위하여 제공된다. 기재된 과정에서 본 발명을 벗어나지 않고 변형이 만들어질 수 있다는 것이 이해된다.
본 발명의 상기 및 다른 대상, 장점 및 특징, 및 이러한 것들이 달성되는 방식은 하기 도면 및 실시예를 고려하여 보다 용이하게 명백해질 것이다:
도 1은 증가하는 HP-β-사이클로덱스트린(HPβCD) 농도에 따른 수용액 중의 부데소나이드의 용해도 다이어그램에 관한 것이고;
도 2는 기도 폐색 및 염증의 모델: 조직학에서 측정된 기관지주위 염증 점수에 관한 것이고;
도 3은 폐 단백질 추출물에서 측정된 IL13 수준에 관한 것이고;
도 4는 COPD 모델: 조직학에서 측정된 기관지주위 염증 점수에 관한 것이고;
도 5는 기도 반응성 측정에 관한 것이고: 향상된 정지(Enhanced Paused)(Penh)이 위약 또는 처리의 제공 후 마우스에서 측정되었고;
도 6은 오존-노출된 마우스의 폐 단백질 추출물에서 IL17 ELISA 측정에 관한 것이고;
도 7은 오존-노출된 마우스의 폐 단백질 추출물에서 IL13 ELISA 측정에 관한 것이고;
도 8은 오존-노출된 마우스의 폐 단백질 추출물에서 KC(CXL1) ELISA 측정에 관한 것이고;
도 9는 BALF 호중구 퍼센트에 대한 부데소나이드-사이클로덱스트린의 효과에 관한 것이고;
도 10은 참조 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린 단독의 1H-RMN 스펙트럼(도 10b)과 비교하여 부데소나이드-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린 복합체의 1H-NMR 스펙트럼(도 10a)에 의한 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린을 포함하는 내포 복합체의 설명이고;
도 11은 부데소나이드-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린 복합체의 1D-COSY-NMR 스펙트럼에 의한 부데소나이드 유도체 및 사이클로덱스트린을 포함하는 내포 복합체의 설명이고;
도 12는 HP-β-CD의 화학적 구조에 관한 것이고;
도 13은 물 중의 HP-β-CD의 1H NMR 스펙트럼(δ 0.6-1.5)에 관한 것이고;
도 14는 계량된(1/X) 2차 회귀를 고려하여 수득된 정밀도 프로파일에 관한 것이고;
도 15는 위약, 부데소나이드 현탁액 및 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린-부데소나이드 복합체로 처리된 LPS-노출된 동물로부터의 BALF 중의 호중구 수 측정이고;
도 16은 LPS-노출된 마우스에서 염증 점수의 측정이고;
도 17은 LPS-노출된 마우스에서 염증 점수의 측정이고;
도 18은 위약, 크라이스멥-베타메타손 다이프로피오네이트 복합체 및 베타메타손 100㎍/㎖ 현탁액으로 처리된 LPS-노출된 동물로부터의 BALF 중의 호중구 수(%)의 측정이고;
도 19는 위약, 크라이스멥-베타메타손 다이프로피오네이트 복합체 및 베타메타손 현탁액으로 처리된 LPS-노출된 동물로부터의 BALF 중의 호중구 수의 측정이고;
도 20은 2 농도에서 위약, 베타메타손 다이프로피오네이트 또는 베타메타손 다이프로피오네이트-크라이스멥 복합체로 처리된 LPS-노출된 마우스에서 염증 점수의 측정이고;
도 21은 위약, 플루티카손 프로피오네이트 현탁액 및 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린-플루티카손 프로피오네이트 복합체로 처리된 LPS-노출된 동물로부터의 BALF 중의 호중구 수의 측정이다.
본 발명의 다양한 양태의 예는 이제 본 발명을 설명하기 위해 제공될 것이지만, 이를 제한하는 것을 의도하지 않는다. 부 및 퍼센트는 달리 특정되지 않는 한, 중량에 의한 것이다.
실시예 1
용액 중의 HPβ-사이클로덱스트린을 갖는 부데소나이드의 약제학적 조성물
부데소나이드는 인디스(벨기에)로부터 구입하고, 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린을 로케뜨(프랑스)로부터 구입한다. 약 250㎍/㎖의 상업적인 부데소나이드 현탁액(풀미코트®)은 아스트라제네카(Sweden)로부터 구입한다.
도 1에서, 분말 형태의 과량의 부데소나이드를 물 중의 약 5, 약 10, 약 25, 약 50 및 약 100mM의 정밀한 농도의 사이클로덱스트린 용액에 가하여 약제학적 조성물 용액을 제조한다(칼-피셔 적정기를 사용하여 몰 농도를 계산하여 사이클로덱스트린의 계산되고 정확하게 계량된 양을 물 함량에 대하여 보정함). 혼합 공정은 실온에서 약 350rpm의 연속 교반하에 약 24시간이 걸린다. 0.22㎛ 필터 유닛으로 수득된 혼합물을 여과하여 과량의 부데소나이드를 제거한다. 용액 중의 부데소나이드 농도를 입증된 HPLC 방법으로 확인한 다음, 혼합물을 PBS-사이클로덱스트린 용액(그 전보다 약 5, 약 10, 약 25, 약 50 및 약 100mM의 동일한 정밀한 농도에서)으로 희석하여 생체내 시험을 위해 필요한 부데소나이드 농도에 도달한다.
이러한 농도, 예를 들면, 약 100㎍/㎖ 또는 약 250㎍/㎖에서, 부데소나이드는 물/PBS 중에 가용성이고, 약제학적 조성물은 깨끗하고 투명한 흡입 용액으로 나타난다.
실시예 1a : 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM 함유
흡입 용액을 위한 바람직한 약제학적 제형은 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린 약 10mM을 포함한다. HP-β-CD 5% 물 약 0.6979g(이의 물 함량에 대하여 보정됨)을 무-발열원(pyrogen free) 정제수(또는 살균 PBS) 50㎖ 중에 용해시키고, 과량의 부데소나이드를 가하고, 실온에서 약 24시간 동안 약 350rpm으로 교반하여 용액을 제조한다. 0.22㎛ 필터 유닛을 통한 여과로 과량의 부데소나이드를 제거하고, 수득된 용액을 입증된 HPLC 방법으로 투여한다. 그 다음, 수득된 용액을 약 10mM의 HP-β-CD 용액(PBS 또는 물 중)으로 희석하여 부데소나이드 약 100㎍/㎖의 농도에 도달한다. NaCl를 가하여 등장도를 달성한다. 바람직하게는, 최종 용액을 0.22㎛ 폴리프로필렌 막을 통한 여과 또는 증기 살균 공정으로 살균한다.
실시예 1b : 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 20mM 함유
흡입 용액을 위한 제2 바람직한 약제학적 제형은 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린 약 20mM을 포함한다. HP-β-CD 약 5% 물 약 1.3958g(이의 물 함량에 대하여 보정됨)을 무-발열원 정제수(또는 살균 PBS) 약 50㎖ 중에 용해시키고, 과량의 부데소나이드를 가하고, 약 24시간 동안 약 350rpm으로 교반하여 용액을 제조한다. 0.22㎛ 필터 유닛을 통해 여과시켜 과량의 부데소나이드를 제거하고, 수득된 용액을 입증된 HPLC 방법으로 투여한다. 그 다음, 수득된 용액을 약 20mM의 HP-β-CD 용액(PBS 또는 물 중)으로 희석하여 부데소나이드 약 100㎍/㎖의 농도에 도달한다. NaCl를 가하여 등장도를 달성한다. 바람직하게는, 최종 용액을 0.22㎛ 폴리프로필렌 막을 통한 여과 또는 증기 살균 공정으로 살균한다.
실시예 1c: 부데소나이드 약 250㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 20mM 함유
흡입 용액을 위한 제3 바람직한 약제학적 제형은 부데소나이드 약 250㎍/㎖ 및 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린 약 20mM를 포함한다. HP-β-CD 약 5% 물 약 1.3958g(이의 물 함량에 대하여 보정됨)을 무-발열원 정제수(또는 살균 PBS) 약 50㎖ 중에 용해시키고, 과량의 부데소나이드를 가하고, 약 24시간 동안 약 350rpm으로 교반하여 용액을 제조한다. 0.22㎛ 필터 유닛을 통해 여과시켜 과량의 부데소나이드를 제거하고, 수득된 용액을 입증된 HPLC 방법으로 투여한다. 그 다음, 수득된 용액을 약 20mM의 HP-β-CD 용액(PBS 또는 물 중)으로 희석하여 부데소나이드 약 250㎍/㎖의 농도에 도달한다. NaCl를 가하여 등장도를 달성한다. 바람직하게는, 최종 용액을 0.22㎛ 폴리프로필렌 막을 통한 여과 또는 증기 살균 공정으로 살균한다.
실시예 1d : 플루티카손 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM 함유
흡입 용액을 위한 제4 바람직한 약제학적 제형은 플루티카손 약 100㎍/㎖ 및 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린 약 10mM을 포함한다. HP-β-CD 약 5% 물 약 0.6979g(이의 물 함량에 대하여 보정됨)을 무-발열원 정제수(또는 살균 PBS) 약 50㎖ 중에 용해시키고, 과량의 플루티카손을 가하고, 실온에서 약 24시간 동안 약 350rpm으로 교반하여 용액을 제조한다. 0.22㎛ 필터 유닛을 통해 여과시켜 과량의 플루티카손을 제거하고, 수득된 용액을 입증된 HPLC 방법으로 투여한다. 그 다음, 수득된 용액을 약 10mM의 HP-β-CD 용액(PBS 또는 물 중)으로 희석하여 플루티카손 약 100㎍/㎖의 농도에 도달한다. NaCl를 가하여 등장도를 달성한다. 바람직하게는, 최종 용액을 0.22㎛ 폴리프로필렌 막을 통한 여과 또는 증기 살균 공정으로 살균한다.
실시예 1e: 플루티카손 약 40㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM 함유
흡입 용액을 위한 제5 바람직한 약제학적 제형은 플루티카손 약 40㎍/㎖ 및 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린 약 10mM을 포함한다. HP-β-CD 약 5% 물 약 0.6979g(이의 물 함량에 대하여 보정됨)을 무-발열원 정제수(또는 살균 PBS) 약 50㎖ 중에 용해시키고, 과량의 플루티카손을 가하고, 실온에서 약 24시간 동안 약 350rpm으로 교반하여 용액을 제조한다. 0.22㎛ 필터 유닛을 통해 여과시켜 과량의 플루티카손을 제거하고, 수득된 용액을 입증된 HPLC 방법으로 투여한다. 그 다음, 수득된 용액을 약 10mM의 HP-β-CD 용액(PBS 또는 물 중)으로 희석하여 플루티카손 약 40㎍/㎖의 농도에 도달한다. NaCl를 가하여 등장도를 달성한다. 바람직하게는, 최종 용액을 0.22㎛ 폴리프로필렌 막을 통한 여과 또는 증기 살균 공정으로 살균한다.
실시예 1f: 베클로메타손 40㎍/㎖ 및 약 10m M HP-β-CD 함유
흡입 용액을 위한 제7 바람직한 약제학적 제형은 베클로메타손 약 40㎍/㎖ 및 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린 약 10mM을 포함한다. HP-β-CD 약 5% 물 약 0.6979g(이의 물 함량에 대하여 보정됨)을 무-발열원 정제수(또는 살균 PBS) 약 50㎖ 중에 용해시키고, 과량의 베클로메타손을 가하고, 실온에서 약 24시간 동안 약 350rpm으로 교반하여 용액을 제조한다. 0.22㎛ 필터 유닛을 통해 여과시켜 과량의 베클로메타손을 제거하고, 수득된 용액을 입증된 HPLC 방법으로 투여한다. 그 다음, 수득된 용액을 약 10mM의 HP-β-CD 용액(PBS 또는 물 중)으로 희석하여 베클로메타손 약 40㎍/㎖의 농도에 도달한다. NaCl를 가하여 등장도를 달성한다. 바람직하게는, 최종 용액을 0.22㎛ 폴리프로필렌 막을 통한 여과 또는 증기 살균 공정으로 살균한다.
실시예 2
분말 형태의 HP-β-사이클로덱스트린을 갖는 플루티카손의 약제학적 조성물
흡입 용액을 위한 바람직한 약제학적 제형은 ECIC로부터의 플루티카손 약 40㎍/㎖ 및 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린 약 10mM을 포함한다. HP-β-CD 약 5% 물 약 0.6979g(이의 물 함량에 대하여 보정됨)을 무-발열원 정제수 약 50㎖ 중에 용해시키고, 과량의 플루티카손을 가하고, 약 24시간 동안 약 350rpm으로 교반하여 용액을 제조한다. 0.22㎛ 필터 유닛을 통해 여과시켜 과량의 플루티카손을 제거하고, 수득된 용액을 입증된 HPLC 방법으로 투여한다. 그 다음, 수득된 용액을 약 10mM의 HP-β-CD 용액으로 희석하여 플루티카손 약 40㎍/㎖의 농도에 도달한다. 최종 용액을 최적화된 조건에서 프로셉트(ProCept) 스프레이 드라이어-칠러로 분무 건조시켜 약 3 미크론의 입자로 합당한 분말 수율(약 > 90%)을 수득한다. 분무 건조 기술은 당해 분야의 숙련가에게 잘 알려져 있다. 스프레이 드라이어-칠러 및 이의 건조 공정은 그 전문이 본원에 참조로서 인용되는 프로셉트 데이터시트 또는 [http://www.procept.be/spray-dryer-chiller]에 보고된다.
실시예 3
기도 폐색 및 염증 모델에서 실시예 1로부터의 약제학적 조성물의 평가
3a: 민감화, 알레르겐 노출 및 치료 프로토콜.
Figure 112016104827148-pct00014
여기서 IP는 복강내 주사를 의미하고, BHR은 기관지 과민반응성을 의미한다.
기도 염증의 조절을 연구하기 위하여, 0일(DO) 및 7일(D7)에 수산화알루미늄(AlumInject; Perbio, 독일 에렘보데겜에 소재) 중에 유화된 오브알부민(OVA)(Sigma Aldrich, 독일의 쉬넬도르프에 소재) 약 10㎍의 복강내 주사로 약 6 내지 약 8주 연령의 BALB/c 마우스를 민감화한다. 21일부터 25일까지, 초음파 네블라이저(Devilbiss 2000)로 약 30분 동안 발생시킨 OVA 약 1% 에어로졸의 매일 흡입으로, 후속적으로 마우스를 알레르겐에 노출시킨다. 18일부터 24일까지 비강내 주입 약 50㎕를 마우스에게 제공하고, 본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[Cataldo et al.: Am.J.Pathol. 161(2):491-498(2002)]에 이전에 보고된 바와 같이 26일에 희생시켰다. 위약 마우스에게 PBS를 비강내 주사한다.
물질 및 방법
6 내지 8주 연령의 숫컷 마우스 C57B1/6을 찰스 리버(Charles River, 독일 쾰른에 소재)로부터 구입하고, 발명자의 시설에서 사육한다. 모든 동물 실험 과정은 리에주 대학의 윤리위원회에 의해 승인된 것이다. 음식 및 물은 임의 공급한다.
물질
인산염 버퍼 식염수(PBS)는 론자(Lonza, 벨기에 베르비에에 소재)로부터 구입하고, 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린(하이드록시프로필기에 의한 치환도: 0.62)은 로케뜨(프랑스)로부터 구입하고, 부데소나이드는 인디스(벨기에)로부터 구입하고, 250㎍/㎖의 상업적인 부데소나이드 현탁액(풀미코트®)은 아스트라제네카(Sweden)로부터 구입한다. 메타콜린은 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich, 독일 소재)로부터 입수한다. 마우스 투여를 위하여, 상기 실시예 1a에 따라 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린(약 20mM)을 부데소나이드(약 250㎍/㎖) 및 부데소나이드 현탁액(약 250㎍/㎖)과 혼합한다. 모든 다른 물질은 분석용 등급이다. 살균 무-발열원 등장성 사이클로덱스트린 유도체-코르티코스테로이드 용액을 다양한 농도로 제조한다. 흡입용 살균수에 대하여 리물루스 아메보사이트 용해물(LAL)을 사용하여 FDA 35 2012의 박테리아 내독소 시험 지침에 따라 용액을 시험한다(< 약 0.5 USP 내독소 단위/㎖).
기관지폐포 세척액(BALF)
기도 반응성 평가 직후 및 마지막 알레르겐 노출 약 24시간 후, 본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[Cataldo DD, Tournoy KG, Vermaelen K et al.: Am J Pathol. 161(2):491-498(2002)]에 이전에 기재된 바와 같이, 마우스를 희생시키고 기관지폐포 세척을 PBS-EDTA 약 0.05mM(Calbiochem, 독일 다름슈타트에 소재) 4×약 1㎖를 사용하여 수행한다.
BALF 상청액을 단백질 평가를 위해 수집하고, 세포를 미분 세포수 측정을 위해 사용한다. 형태학적 기준을 기반으로 한 미분 세포수 측정은 헤마톡실린-에오신(Diff-Quick, Dade, 벨기에 소재)으로 염색 후, 세포원심분리된 제형으로 수행된다. 세포를 부드러운 수동 흡인으로 회수한다. 기관지폐포액(BALF)의 원심분리(약 4℃에서 약 10분 동안 약 1200rpm) 후, 상청액을 약 -80℃에서 단백질 평가를 위해 냉동시키고, 세포 펠렛을 약 0.05mM PBS-EDTA 약 1㎖ 중에 재현탁시킨다. 디프-퀵(Diff-Quick, Dade, 벨기에 소재)으로 염색 후, 미분 세포수 측정을 세포원심분리된 제형(사이토스핀(Cytospin))에서 수행한다.
폐 조직학 및 조직 가공
BAL 후, 흉곽을 열고 좌측 주기관지를 클램핑한다. 좌측 폐를 절개하고 단백질 추출을 위하여 약 -80℃에서 즉시 냉동한다. 우측 폐에 약 4% 파라포름알데하이드 4㎖를 주입하고, 파라핀으로 고정시키고, 조직학을 위하여 사용한다. 약 5㎛ 두께의 조각을 파라핀으로부터 잘라내고 헤마톡실린-에오신으로 염색한다. 문헌[Cataldo DD, Tournoy KG, Vermaelen K et al.: Am J Pathol. 161(2):491-498(2002)]에 이전에 기재된 바와 같이, 기관지주위 염증성 세포의 정량화에 의해 점수 계산함으로써 기관지주위 염증의 정도를 평가한다. 0 값은 염증이 검출되지 않는 경우, 1 값은 때때로 염증성 세포가 존재하는 경우, 2 값은 기관지의 대부분이 염증성 세포의 얇은 층(약 1 내지 약 5개의 세포)으로 둘러싸인 경우, 3 값은 기관지의 대부분이 염증성 세포의 두꺼운 층(약 5개 초과의 세포)으로 둘러싸인 경우로 판단된다. 마우스당 6-8개의 무작위로 선택된 조직 조각이 점수화되기 때문에, 염증 점수는 평균값으로 표현되고 그룹 간에 비교될 수 있다.
상기 기재된 바와 같이, 좌측 폐를 절개하고 약 -80℃에서 즉시 냉동한 다음, 미크로-디스멤브레이터(Mikro-Dismembrator, Braun Biotech International, Gmbh, 독일 멜성겐에 소재)를 사용하여 액체 N2 중에 붕괴시켜 균질화된 분말을 형성한다. 이러한 파괴된 폐 조직을 밤새 약 4℃에서 약 2M 우레아, 약 1M NaC1 및 약 50mM Tris를 함유하는 용액(pH 약 7.5) 중에 배양하고, 후속적으로 단백질 추출을 위하여 약 15분 동안 약 16 000xg로 원심분리시킨다.
제작사의 설명에 따라 ELISA(듀오셋 키트, R&D Systems, 영국 애빙던에 소재)로 집단화되지 않은 폐 단백질 샘플에서 IL13 수준을 측정한다.
기관지 반응성 측정
케타민(약 10mg/㎖, Merial, 벨기에의 브뤼셀 소재) 및 자일라진(약 1mg/㎖, VMD, 벨기에의 아렌돈크에 소재)의 혼합물의 복강내 주사(약 200㎕)로 마우스를 마취시킨다. 20 게이지 폴리에틸렌 카테터를 기관에 삽입하고 카테터 주위에 이를 결찰시켜 누출과 단절을 방지함으로써 기관절개술을 수행한다. 플렉시벤트(flexiVent)® 소동물 벤틸레이터(SCIREQ, 캐나다의 몬트리올에 소재)로 분당 약 250 호흡 빈도 및 일호흡량 약 10㎖/kg로 마우스를 환기시킨다. 양종말호기압은 약 2hPa으로 설정된다. 기계적 환기 약 2분 후, 측정을 시작한다. 그 다음, 사인곡선형 약 1-Hz 진동을 기관에 적용하고, 다중 선형 회귀법으로 기도의 동저항, 탄성, 및 순응성의 계산을 허용한다. 약 0.5 내지 약 19.6Hz의 주파수 범위의 약 8-s 강제된 진동 신호로 이루어진 제2 동작은 조직 댐핑(damping), 조직 탄성, 및 조직 이력성(hysteresivity)를 평가하는 임피던스의 측정을 허용한다. 기초선 폐 기능의 측정 후, 마우스를 식염수 에어로졸(PBS)에 노출시킨 후, 메타콜린(ICN Biomedicals, 벨기에의 아세 렐레젬에 소재)의 증가하는 용량(약 3, 약 6, 약 9, 약 12g/l)을 함유하는 에어로졸에 노출시킨다. 초음파 네블라이저(SYST'AM, LS 2000, Dupont Medical, 벨기에의 로드-세인트 제네스에 소재)를 사용하여 에어로졸을 생성하고, 제조사의 설명에 따라 의료용 공기의 편향 흐름을 사용하여 플렉시벤트®의 흡기선에 전달한다. 각각의 에어로졸을 약 2분 동안 전달하고, 상기 기재된 바와 같은 측정 기간은 각각의 에어로졸 후 1분 간격으로 만들어진다. 메타콜린 노출 후, 평균 기도 저항은 도전 동안 측정된 주요 파라미터이다.
통계적 분석
폐 조직학 수준의 결과는 평균 +/- SEM로서 표현되고, 그룹 간의 비교는 변수의 일방향 분석을 사용하여 수행한 후, 터키 사후시험을 수행한다. 그래프패드 프리즘 5(GraphPad Prism 5)를 사용하여 시험을 수행한다. 유의도: 알파=약 0.05(95% 신뢰 구간).
약리학적 결과
도 2는 위약, 부데소나이드 약 100㎍/㎖, 실시예 1a에 따른 약제학적 조성물 및 부데소나이드 약 250㎍/㎖을 갖는 조직학에서 측정된 기관지주위 염증 점수를 도시한다.
오브알부민 노출된 마우스(위약)는 이들의 폐 조직에서 염증성 세포 수의 유의미한 증가를 나타낸다. 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM의 복합체에 대한 노출은 위약과 비교시 염증성 세포 수의 유의미한 감소를 유도하는 것으로 나타난다. 부데소나이드(약 100㎍/㎖)-HP-β-CD(약 10mM) 복합체는 동일한 염증이 더 높은 농도(약 250㎍/㎖)에서 부데소나이드 단독보다 감소하는 것을 유도하고, 동일한 농도(약 100㎍/㎖)에서 부데소나이드 단독보다 유의미하게 효과적이다.
도 3은 폐 단백질 추출물에서 IL13 수준을 측정한 것을 도시한다.
미크로-디스멤브레이터(Braun Biotech International, Gmbh, 독일의 멜숭겐에 소재)를 사용하여 폐를 분쇄한다. 분쇄된 폐 조직을 단백질 추출을 위하여 밤새 약 4℃에서 약 1M 우레아를 함유하는 용액 중에서 배양한다. ELISA 시험을 위하여 상청액을 약 -80℃에서 저장한다.
마우스는 부데소나이드 약 250㎍/㎖-사이클로덱스트린 약 10mM 복합체로 처리된 것과 비교하여 부데소나이드 약 250㎍/㎖으로 처리되는 경우, 알레르겐 노출 후, 이들의 폐 조직에서 더 높은 IL13 수준을 나타낸다. 부데소나이드 약 100㎍/㎖로 처리된 마우스는 유사한 방식으로 부데소나이드 약 100㎍/㎖-사이클로덱스트린 약 10mM로 처리된 마우스보다 높은 IL13 수준을 나타낸다.
실시예 4
COPD 모델에서 실시예 1a, 실시예 1b 및 실시예 1c 로부터의 약제학적 조성물의 평가
2개의 상이한 마우스 모델을 모의 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD)에 사용한다. 제1 모델에서, C57BL/6 마우스를 고농도의 오존(O3)에 노출시키고, 이는 반응성이 높은 산화제 공기 오염물질이다. 동물 모델에 흡입된 O3은 기도 염증(호중성 세포에 의함) 및 과민반응성의 원인이 된다. 담배가 COPD의 주요 동인으로 알려져 있기 때문에 제2 모델은 담배 연기를 사용한다. 담배 연기 노출은 또한 호중성 세포에 의해 매개된 기도 염증을 야기한다. 오존 및 담배는 산화 스트레스의 강력한 유도물질이고, 이러한 스트레스는 장기간 연구에서 관찰되는 바와 같이 만성 염증을 야기할 수 있다.
4.A 오존 모델
오존 노출 및 치료 프로토콜
오존 노출하에 경험의 도식적 설명이 하기 보고된다:
Figure 112016104827148-pct00015
도식적 설명에서, C57BL/6 마우스를 약 3시간 동안 고농도의 오존(약 2ppm)에 노출시키기 전에, 전처리(0일과 1일 사이)로서 비강내 주사 약 50㎕로 먼저 처리한 후, 약 3시간 전에 치료적 비강내 주사 약 50㎕를 수행한다(2일과 4일 사이). 마우스를 5일에 희생시킨다. 위약 마우스에 PBS를 주사한다.
기관지폐포 세척액(BALF) 분석, 폐 조직학 분석, 기관지 반응성 측정 및 통계적 분석은 실시예 1에 상기 기재된 바와 동일하다(기도 염증 및 과민반응성). 제조사의 설명에 따라 ELISA(듀오셋 키트, R&D Systems, Abingdon, United Kingdom)로 집단화되지 않은 폐 단백질 샘플에서 IL17 및 KC(CXCL1) 수준을 측정한다.
약리학적 결과
도 4는 위약, 실시예 1a에 따른 조성물 및 부데소나이드 약 250㎍/㎖에 대하여 조직학에서 측정된 기관지주위 염증 점수를 도시한다.
오존-노출된 마우스(위약)는 다른 그룹과 비교하여, 이들의 폐 조직에서 염증성 세포 수의 유의미한 증가를 나타낸다. 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 10mM을 포함하는 복합체에 대한 노출은 위약과 비교하여 염증성 세포 수의 유의미한 감소를 유도한다. 부데소나이드(약 100㎍/㎖)-HP-β-CD(약 10mM) 복합체는 고농도(약 250㎍/㎖)의 부데소나이드 단독과 동일한 염증 감소를 유도한다.
도 5는 기도 반응성 측정을 도시하고: 향상된 정지(Penh)을 위약 또는 실시예 1a에 따라 제조된 약제학적 조성물에 의한 처리 제공 후, 마우스에서 측정한다.
다른 그룹과 비교하여, 오존 노출은 메타콜린 도전이 수행된 마우스에서 기관지 과민반응성의 예상된 유의미한 증가를 유도한다. 위약 그룹과 비교하여, 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 10mM을 포함하는 복합체는 메타콜린 약 48g/L에서 기관지 과민반응성의 유의미한 감소를 유도한다. 부데소나이드(약 100㎍/㎖)-HP-β-CD(10mM) 복합체는 고농도(약 250㎍/㎖)의 부데소나이드 단독과 동일한 기관지 과민반응성 감소를 유도한다.
도 6은 오존-노출된 마우스의 폐 단백질 추출물에서 IL17 ELISA 측정을 도시한다.
HP-β-CD 및 부데소나이드 단독 또는 조합의 상이한 처리를 비교한다. 동일한 PBS 버퍼 용액 중의 조합 혼합물(부데소나이드-HP-β-CD) 또는 각각의 활성 화합물 단독(부데소나이드 약 250㎍/㎖ 또는 HP-β-CD 약 10mM)으로 실시예 1a에 따라 약제학적 조성물을 제조한다.
부데소나이드-처리된 그룹(약 250㎍/㎖)과 비교하여, 부데소나이드 약 250㎍/㎖ 또는 약 100㎍/㎖ 또는 약 10㎍/㎖ 및 HP-β-CD 10mM을 포함하는 복합체는 IL17 수준에서 유의미한 감소를 유도한다.
IL17 수준은 오존 노출 후 증가하고, 이는 오존-유도된 호중구 염증의 발병에 참여할 수 있다. 이는 흡입에 의해 제공된 부데소나이드-사이클로덱스트린 복합체가 오존-유도된 IL17 수준을 감소시킬 수 있다는 것의 첫번째 입증이다.
도 7은 오존-노출된 마우스의 폐 단백질 추출물에서 IL13 ELISA 측정을 도시한다.
HP-β-CD 및 부데소나이드 단독 또는 조합의 상이한 처리를 비교한다. PBS 버퍼 용액 중의 조합 혼합물(부데소나이드-HP-β-CD) 또는 각각의 활성 화합물 단독(부데소나이드 약 250㎍/㎖ 또는 HP-β-CD 약 10mM)으로 실시예 1a에 따라 약제학적 조성물을 제조한다.
부데소나이드-처리된 그룹(약 250㎍/㎖)과 비교하여, 부데소나이드 약 250㎍/㎖ 또는 약 100㎍/㎖ 또는 약 10㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM을 포함하는 복합체는 IL17 수준의 감소를 유도한다.
IL13은 오존 노출 후 조절되고, 오존 노출에 후속적인 기도 기능장애에 참여하는 것으로 이미 나타났다. 예를 들면, 본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[Williams S., Nath P, Leung S, et al.: Eur Respir J. 32(3):571-8(Sep. 2008)]을 참조한다. 오존-유도된 IL13 수준이 부데소나이드를 포함하는 화합물의 흡입에 의해 유의미하게 감소되는 것으로 나타난 것은 이것이 처음이다. 부데소나이드-처리된 그룹(약 250㎍/㎖)과 비교하여, 부데소나이드 약 250㎍/㎖ 또는 약 100㎍/㎖ 또는 약 10㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM을 포함하는 복합체는 IL13 수준의 감소를 유도한다. 따라서, 부데소나이드-사이클로덱스트린 복합체의 흡입은 흡입된 부데소나이드 약 250㎍/㎖와 비교하여 IL13 수준을 감소시킨다.
도 8은 오존-노출된 마우스의 폐 단백질 추출물에서 KC(CXCL1) ELISA 측정을 도시한다.
HP-β-CD 및 부데소나이드 단독 또는 조합의 상이한 흡입 처리를 비교한다. 동일한 PBS 버퍼 용액 중의 조합 혼합물(부데소나이드-HP-β-CD) 또는 각각의 활성 화합물 단독(부데소나이드 약 250㎍/㎖ 또는 HP-β-CD 약 10mM)으로 실시예 1a에 따라 약제학적 조성물을 제조한다.
부데소나이드-처리된 그룹(약 250㎍/㎖)과 비교하여, 부데소나이드 약 250㎍/㎖ 또는 약 100㎍/㎖ 및 HP-β-CD 약 10mM을 포함하는 복합체는 KC 수준의 증가를 유도한다.
이는 자극제 또는 산화제에 대한 노출에 따른 기관지 벽에서 호중구의 장소에서 중요한 역할을 하는 시토카인인 CXCL-1이 흡입된 부데소나이드 유도체에 의해 감소될 수 있다는 것에 대한 첫번째 입증이다. 이는 오존-유도된 KC 생성을 감소시키는 부데소나이드-사이클로덱스트린 복합체 뿐이다.
4.B 담배 연기 노출 모델
담배 노출 및 치료 프로토콜
C57BL/6 마우스를 이넥스포즈(Inexpose)® 시스템(Scireq, 캐나다의 몬트리올에 소재)를 사용하여 6주 동안 주당 5일 담배 10개에 노출시킨다. 마우스를 비강내 주사 약 50㎕로 6주 동안 주당 5일 처리한다. 마우스를 43일에 희생시킨다. 모의 노출된 마우스로도 지칭되는 위약 마우스에 PBS를 주사한다.
기관지폐포 세척액(BALF) 분석은 실시예 3(기도 폐색 및 염증 모델)에 이전에 기재된 바와 동일하다.
통계적 분석
기관지폐포 세척액 중의 염증성 세포 수의 결과는 평균 +/- SEM로서 표현하고, 그룹 간의 비교는 만-휘트니(Mann-Whitney) 시험을 사용하여 수행한다. 그래프패드 프리즘 5를 사용하여 시험을 수행한다. P 값 < 0.05는 유의미한 것으로 간주된다.
약리학적 결과
본 발명의 실험에서, 약 500㎍/㎖의 부데소나이드 단독의 용액과 비교하기 위하여, 실시예 1b 및 1c에 따른 약제학적 조성물을 하기를 포함하는 특정한 흡입 용액으로서 사용한다:
ㆍ 부데소나이드 약 100㎍/㎖ 및 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린 약 20mM(실시예 1b)
ㆍ 부데소나이드 약 250㎍/㎖ 및 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린 약 20mM(실시예 1c)
도 9는 BALF 호중구 퍼센트에 대한 부데소나이드-사이클로덱스트린 혼합물의 효과를 도시한다.
BALF 중의 호중구의 퍼센트(+/- SEM )
모의-노출된 마우스 위약(PBS) 처리 부데소나이드 약 500㎍/㎖ 부데소나이드 약 100㎍/㎖
+ CD 약 20mM		 부데소나이드 약 250㎍/㎖
+ CD 약 20mM
호중구(%) 약 0.65(+/- 약 0.37) 약 6.08(+/- 약 2.51) 약 9.64(+/- 약 5.35) 약 0.62(+/- 약 0.27) 약 1.46(+/- 약 0.23)
담배 연기-노출된 마우스는 모의-노출된 마우스에 비하여, 이의 기관지폐포 세척액(BALF) 중의 호중구 수에서 유의미한 증가를 나타낸다. 모든 시험된 농도의 부데소나이드-HP-β-CD(약 20mM) 복합체에 대한 노출은, 담배 연기-노출된 마우스와 비교하여, 호중구 수에서 유의미한 감소를 유도한다. 모든 부데소나이드-HP-β-CD(약 20mM) 복합체는 고농도(약 500㎍/㎖)의 부데소나이드 단독보다 높은 감소를 유도한다. 부데소나이드 단독은 처리된 마우스의 BALF 중의 염증 수준을 감소시키는데 충분하게 유의미하게 효과적이지는 않다.
실시예 5
복합체 부데소나이드 유도체-사이클로덱스트린
HP-β-CD 탄수화물이 발색단을 함유하지 않기 때문에, UV 검출은 실현가능하지 않다. 현재까지, 약제학적 수성 용액 중의 HP-β-CD의 정량화에 대한 어떠한 기술도 설명된 적이 없었다. NMR 분광학은 CD 및 약물 사이의 상호작용을 이해하고, 치환된 글루코피라노스 단위의 수(몰 치환)를 평가하는데 광범위하게 사용되기 때문에, 1H 핵 자기 공명 분광법을 물 중의 HP-β-CD 검출 및 정량화에 적용한다.
물질
HP-β-CD(몰 치환=0.64)를 로케뜨(프랑스)로부터 친절하게 기증받는다. 트라이메틸실릴-3-프로피온산-d4(TMSP) 및 산화중수소(약 99.96% D)를 유리소토프(Eurisotop, 프랑스의 지프쉬르이베트에 소재)로부터 구입한다. 말레산을 시그마-알드리치로부터 입수한다.
샘플 제조
입증 공정을 위하여, HP-β-CD의 표준 용액을 Milli-Q® 물 중에 희석하여 약 0.05mg/㎖ 내지 약 5mg/㎖ 범위의 6개의 농도 수준에서 보정 표준을 수득한다. 이들 용액 약 500㎕에서, D20 버퍼 약 100㎕, 말레산(약 5mM) 약 100㎕ 및 TMSP 약 10㎕를 NMR 분석을 위하여 가한다.
등장성 버퍼를 D20로 교체한 것을 제외하고 실시예 1a에 따라 바람직한 약제학적 조성물 부데소나이드-HP-β-CD를 제조한다.
NMR 측정
D20 중의 부데소나이드 HP-β-CD를 양성자 신호 포착을 위하여 약 500.13MHz에서 작동되는 브루커 아밴스(Bruker Avance) 분광계에서 약 298K에서 보고한다. 장치에는 Z-구배의 5mm TCI 저온탐침이 장착된다. 물 신호를 최소화하기 위하여 1D NOESY-presat 서열(64 스캔)을 사용한다. 정량화를 위한 내부 표준 및 제로 보정을 위한 TMSP로서 말레산을 사용한다.
HP-β-CD를 특이적으로 검출하기 위하여, 하이드록시프로필기에 중점을 둔다. 따라서, 메틸 기로부터의 2중선의 피크 면적은 약 1.1ppm에서 측정되고, 이는 하이드록시프로필기의 일부이다(도 10B). 이러한 특이적인 피크는 또한 HP-β-CD가 부데소나이드의 존재하에 있을 때 정량화될 수 있다. 약 1.1ppm에서 피크는 정량화 가능하게 남아 있고, 부데소나이드가 부재한 경우와 동일한 면적을 유지한다(도 10A). 약 5.2ppm에서 피크를 포함하여 다른 피크를 HP-β-CD의 정량화를 위하여 사용할 수 있다.
방법의 입증
방법의 입증은 세 시리즈의 실험으로 수행한다. 하기 기준을 시험한다: 선택성, 특이성(β-사이클로덱스트린과 비교하여), 반응 함수(보정 곡선), 선형성, 정밀성(반복성 및 중간 정밀성), 정확성, 검출 한계(LOD), 정량화 한계(LOQ), 매트릭스 효과 및 정확도. 입증 공정에서 결정 기준으로서 전체 오차를 사용한다. 합격 한계를 약 +/- 7.5% 및 최소 확률로 설정하여 β=약 95%(β-예상 한계)로 설정된 이들 한계 내에서 미래 결과를 수득한다. 따라서 기술은 상기 기재된 범위에서 입증된다.
도 11은 HP-β-CD-부데소나이드 복합체의 1D-COSY 스펙트럼을 도시한다.
본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[K.A. Connors: Chem. Rev. 97:1325-1357(1997)]에 따라, HP-β-CD로부터의 H-3 및 H-5 양성자가 사이클로덱스트린 공동 내부에 위치하고, 이러한 양성자와의 관련성은 부데소나이드 또는 부데소나이드의 일부가 HP-β-CD 내부에 포함됨을 제시하는 것이 잘 알려져 있다.
실제로, 2개의 연관 점적(약 7.4-7.5ppm 및 약 5.8-6.1ppm에서)은 부데소나이드 방향족 고리 H-5 HP-β-CD 양성자 사이의 상호작용을 나타내고, 이는 수용성 복합체를 야기하는 내포를 제시한다.
실시예 6
품질 조절을 위한 도구로서 1H NMR 분광학에 의한 용액 중의 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린의 검출 및 정량화
사이클로덱스트린(CD)은 연결된 a-1,4-글루코피라노스 단위로 만들어진 환형 올리고당이고, 이는 소수성 공동을 포함하는 구조와 같은 원뿔대를 형성한다. 가장 많이 사용되는 천연 사이클로덱스트린은 각각 α-, β- 및 γ-사이클로덱스트린으로 일반적으로 명칭되는 6, 7 또는 8개의 글루코피라노스 단위로 구성된다. 독성을 감소시키고 수 용해도를 개선시키기 위하여, 일부 유도체를 개발한다. 이들 중에서, 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(HP-β-CD)(도 12)은 수용성 내포 복합체를 형성함으로써 소수성 약물의 수 용해도, 안정성 및 생체이용률을 개선시키기 위하여 약제학적 제형에서 광범위하게 사용된다.
USP 및 EP 지침에 따라, 약제학적 부형제의 특성화 및 정량화 방법이 정의되어야 한다. HP-β-CD 탄수화물이 발색단을 함유하지 않는다는 것을 고려하면, UV 검출은 실현가능하지 않다. 일부 기술은 따라서 CD의 정량화에 대해 기재하지만, 이들 중 어느 것도 약제학적 수성 용액 중의 HP-β-CD의 정량화에 대해 개발하지 않는다. NMR 분광학은 CD 및 약물 사이의 상호작용을 이해하고, 치환된 글루코피라노스 단위의 수(몰 치환)를 평가하는데 광범위하게 사용되기 때문에, 1H 핵 자기 공명 분광법을 물 중의 HP-β-CD 검출 및 정량화에 적용한다.
실험 방법
물질
HP-β-CD(몰 치환=0.64)를 로케뜨(프랑스)로부터 친절하게 기증받는다. 트라이메틸실릴-3-프로피온산-d4(TMSP) 및 산화중수소(약 99.96% D)를 유리소토프(프랑스의 지프쉬르이베트에 소재)로부터 구입한다. 말레산을 시그마-알드리치로부터 입수한다. 이-노발(e-noval) 소프트웨어(Arlenda, 벨기에의 리에주에 소재)를 사용하여 통계적 분석을 수행한다.
샘플 제조
입증 공정을 위하여, HP-β-CD의 표준 용액을 Milli-Q® 물 중에 희석하여 약 0.05mg/㎖ 내지 약 5mg/㎖ 범위의 6개의 농도 수준에서 보정 표준을 수득한다. 이들 용액 약 500㎕에서, D20 버퍼 약 100㎕, 말레산(약 5mM) 약 100㎕ 및 TMSP 약 10㎕를 NMR 분석을 위하여 가한다.
NMR 측정
모든 샘플을 양성자 신호 포착을 위하여 약 500.13MHz에서 작동되는 브루커 아밴스 분광계에서 약 298K에서 기록한다. 장치에는 Z-구배의 5mm TCI 저온탐침이 장착된다. 물 신호를 최소화하기 위하여 1D NOESY-presat 서열(64 스캔)을 사용한다. 정량화를 위한 내부 표준 및 제로 보정을 위한 TMSP로서 말레산을 사용한다.
결과 및 논의
물 중의 HP-β-CD의 검출 및 정량화(1H-NMR)
HP-β-CD를 특이적으로 검출하기 위하여, 하이드록시프로필기에 중점을 둔다. 따라서, 메틸 기로부터의 2중선의 피크 면적은 약 1.1ppm에서 측정되고, 이는 하이드록시프로필기의 일부이다(도 13). 이러한 특이적인 피크는 또한 HP-β-CD가 물 용액 중에 단독으로 있지 않을 때 정량화될 수 있다. 실제로, HP-β-CD 및 코르티코스테로이드를 포함하는 용액이 실현되고, 이는 사이클로덱스트린 내로 포함되며, 약 1.1ppm에서의 피크는 여전히 정량화될 수 있었고 코르티코스테로이드가 존재하지 않는 경우와 동일한 면적을 유지하였다.
방법의 입증
방법의 입증은 세 시리즈의 실험으로 수행한다. 하기 기준을 시험한다: 선택성, 특이성(β-사이클로덱스트린과 비교하여), 반응 함수(보정 곡선), 선형성, 정밀성(반복성 및 중간 정밀성), 정확성, 검출 한계(LOD), 정량화 한계(LOQ), 매트릭스 효과 및 정확도(도 3). 입증 공정에서 결정 기준으로서 전체 오차를 사용한다. 합격 한계를 약 +/- 7.5% 및 최소 확률로 설정하여 β=약 95%(β-예상 한계)로 설정된 이들 한계 내에서 미래 결과를 수득한다.
도 14에 나타낸 바와 같이, 녹색점으로 표시된 역산된 농도의 상대 오차는 상대 편향(적색선) 주위에 퍼져있고, 점선으로 표시된 베타-예상 허용 한계 사이에 포함된다. 기술은 따라서 상기 기재된 범위 내인 것으로 입증된다.
당해 연구에서, 처음으로, 용액 중의 HP-β-CD의 검출 및 정량화를 위한 신규하고 유용한 분석 기술이 개발되었다. 당해 기술은 비경구 용액과 같은 약제학적 용액의 투여량을 위하여 사용될 수 있다. 당해 방법은 적어도 2개의 주요 장점을 나타낸다: 신속성 및 편의성. 실제로, NMR 측정은 겨우 약 8분 걸리며, 샘플 제조는 물 신호를 억제하고 하이드록시프로필의 피크 면적을 정량화하기 위하여 분자의 단순한 첨가만을 필요로 한다. 측정은 따라서 임의의 분리 또는 추출 단계 없이 약제학적 용액(활성 성분 함유)에서 직접적으로 실현될 수 있다.
실시예 7
LPS/COPD 동물 모델에서 부데소나이드 효과
물질 및 방법
마우스
6 내지 8주 연령의 숫컷 C57B1/6을 찰스 리버(독일 쾰른에 소재)로부터 구입하고, 발명자의 시설에서 사육한다. 모든 동물 실험 과정은 리에주 대학의 윤리위원회에 의해 승인된 것이다. 음식 및 물은 임의 공급한다.
물질
[http://bio.lonza.com/uploads/tx_mwaxmarketingmaterial/Lonza_BenchGuides_Phosphate_Buffered_Saline_PBS.pdf]에 보고된 바와 같은 인산염 버퍼 식염수(PBS)를 론자(벨기에의 베르비에에 소재)로부터 구입하고, 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린을 로케뜨(프랑스)로부터 구입하고, 부데소나이드를 인디스(벨기에)로부터 구입하고, 약 250㎍/㎖의 상업적인 부데소나이드 현탁액(풀미코트®)을 아스트라제네카(Sweden)로부터 구입한다. 마우스 투여를 위하여, 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린(약 20mM)을 상업적 제형으로 부데소나이드(약 250㎍/㎖) 및 부데소나이드 현탁액(약 250㎍/㎖)과 복합체화시킨다.
지질다당류(LPS) 노출 검정 및 사이클로덱스트린-부데소나이드 처리
약 2.5% 이소플루란/산소 혼합물로 매일 주입 전에 마우스(n=7/그룹)를 마취시킨다. 약 250㎍/㎖(풀미코트®)에서 0, 1, 2, 3일에 인산염 버퍼 식염수(PBS)(위약 그룹) 약 50㎕ 또는 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린-부데소나이드 복합체 약 50㎕ 또는 상업적인 부데소나이드 현탁액 약 50㎕를 마우스에 주입한다. 마우스를 4일에 희생시킨다. 처리 투여 6시간 후, 마우스에 1 및 3일에 2회 LPS(약 1㎍/100㎕ PBS, 이.콜라이(E.Coli)로부터의 초순수 지질다당류, InvivoGen, 미국 캘리포니아주의 샌디에이고에 소재)를 기관내 주입한다.
폐 세포학 및 조직학
실험 프로토콜의 끝에, 동물을 희생시키고, 기관지폐포 세척액(BALF)을 4×1㎖ PBS-EDTA 용액, 약 0.05mM(Calbiochem, 독일 다름슈타트에 소재)의 기관내 주입을 통해 수행한다. BALF 상청액을 단백질 평가를 위하여 수집하고, 세포를 미분 세포수 측정을 위하여 사용한다. 형태학적 기준을 기반으로 한 미분 세포수 측정은 헤마톡실린-에오신(Diff-Quick, Dade, 벨기에)으로 염색 후 세포원심분리된 제형에서 수행한다.
BALF 후, 좌측 주요 기관지를 클램핑하고, 좌측 폐를 절개하고 약 80℃에서 보존한다. 우측 폐에 약 25cm 압력에서 약 4% 파라포름알데하이드를 주입하고 파라핀으로 고정시킨다. 약 5㎛의 6 조각을 무작위로 수집하고 헤마톡실린 및 에오신(H.E)으로 염색한다. 각각의 후속적인 조각을 이전 것과 약 50㎛ 간격으로 놓는다. 하마마츠 나노주머(Hamamatsu nanozoomer) HT 2.0를 사용하여 슬라이드를 스캐닝하고, 이전에 기재된 염증 점수화 시스템을 적용하여 디지털화된 슬라이드에서 염증을 정량화한다. 예를 들면, 본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[Cataldo et al.: Am J Pathol(2002)]을 참조한다.
결과
기관지폐포 세척 세포학
실험 동물로부터의 BALF에서 측정된 호중구의 수는, 위약-처리된 동물들과 비교하여, 부데소나이드 현탁액 및 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린-부데소나이드 복합체로 처리한 후, 유의미하게 감소한다. 도 15를 참조한다.
폐 실질에서 염증의 측정
놀랍게도, LPS에 노출되고 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린-부데소나이드 복합체로 처리된 동물은, 위약 및 부데소나이드 현탁액-처리된 동물과 비교하여, LPS-유도된 염증의 유의미한 감소를 나타낸다. 도 16을 참조한다.
실시예 8
베타메타손 다이프로피오네이트(미크론화된 출발 물질)
PBS 버퍼 중의 크라이스멥 용액 약 20mM로 용액을 제조한다. 크라이스멥 약 5.08g을 인산염 버퍼 식염수(PBS) 버퍼 중에 용해시킨다. [http://bio.lonza.com/uploads/tx_mwaxmarketingrnaterial/Lonza_BenchGuides_Phosphate_Buffered_Saline_PBS.pdf]에 보고된 바와 같은 PBS를 론자(벨기에의 베르비에에 소재)로부터 구입한다.
베타메타손 다이프로피오네이트 약 25 내지 약 30㎎(과량으로)을 가하여 용액을 포화시키고, 약 48시간 동안 약 25℃에서 부드럽게 혼합한다.
0.22 미크론을 통해 포화된 용액을 여과하고, 입증된 HPLC 방법으로 여과물 중의 베타메타손 다이프로피오네이트 함량을 검정한다.
제조된 베타메타손 다이프로피오네이트 용액의 농도는 약 147g/㎖이다.
실시예 8a : 베타메타손 다이프로피오네이트 용액 100㎍/㎖
상기 제조된 바와 같은 147㎍/㎖ 용액의 약 34㎖를 크라이스멥 약 20mM PBS 용액으로 약 50㎖로 희석시킨다(HPLC 검정=약 99.00㎍/㎖).
층 유량하에 용액을 0.22μ 여과를 통해 통과시킴으로서 희석된 용액을 살균한다. 살균된 베타메타손 다이프로피오네이트 용액의 농도는 약 100㎍/㎖이다.
실시예 8b : 베타메타손 다이프로피오네이트 용액 50㎍/㎖
상기 제조된 바와 같은 147㎍/㎖ 용액의 약 17㎖를 크라이스멥 약 20mM PBS 용액 약 50㎖로 희석시킨다(HPLC 검정=약 49.64㎍/㎖).
층 유량하에 용액을 0.22μ 여과를 통해 통과시킴으로서 희석된 용액을 살균한다. 살균된 베타메타손 다이프로피오네이트 용액의 농도는 약 50㎍/㎖이다.
실시예 8c : 참조 현탁액
상업적인 베타메타손 다이프로피오네이트 용액이 존재하지 않고; 따라서, 참조 베타메타손 다이프로피오네이트 용액을 하기 제법에 따라 제조한다:
베타메타손 다이프로피오네이트 10.0mg
트윈 80(폴리소르베이트 80) 00.1mg
PBS 버퍼 100.0㎖가 될 때까지 충분한 양
층 유량하에 형탁액을 제조한다.
주의: 베타메타손 다이프로피오네이트는 오토클레이브에서 분해되고; 따라서 제형은 사용 전에 제조되어야 한다.
실시예 9
플루티카손 프로피오네이트(미크론화된 출발 물질)
HPβCD 및 크라이스멥 둘 다는 하기 제조 방법에 따른 플루티카손 프로피오네이트(FP)를 가용화할 수 있다.
실시예 9a : 공증발된 중간체 생성물
HPβCD 약 1.5g을 순수한 에탄올 100㎖ 중에 용해시킨다. 그 후, 플루티카손 프로피오네이트 약 25mg을 순수한 에탄올 50mg 중에 용해시킨다. 용해된 후, 용액을 조합하고 진공하에 건조될 때가지 증발시킨다.
실시예 9b : 플루티카손 프로피오네이트 용액 250pg/㎖
상기 실시예 8a에서 제조된 바와 같은 공증발물을 PBS 버퍼 약 100㎖에 분산시켜 현탁액을 제조한다. 현탁액을 오토클레이브로 살균시켜 FP 약 250㎍/㎖ 및 HPβCD 약 10mM 농도의 FP 용액을 제조한다(HPLC 검정 FP, 약 238㎍/㎖).
실시예 9c: 플루티카손 프로피오네이트 용액 100㎍/㎖
상기 실시예 8b에서 제조된 바와 같은 용액 250㎍/㎖를 HPβCD 용액 약 10mM(약 8.4㎖, 238㎍/㎖ + PBS 중의 HPβCD 약 11.6㎖)으로 희석한다. 현탁액을 오토클레이브로 살균시켜 FP 약 100㎍/㎖ 및 HPβCD 약 10mM 농도의 FP 용액을 제조한다.
실시예 9d : 플루티카손 프로피오네이트 용액 50㎍/㎖
상기 실시예 8b에서 제조된 바와 같은 용액 250㎍/㎖를 HPβCD 용액 약 10mM(약 4.2㎖, 약 238㎍/㎖ + PBS 중의 HPβCD 약 15.6㎖)으로 희석한다. 현탁액을 오토클레이브로 살균시켜 FP 약 50㎍/㎖ 및 HPβCD 약 10mM 농도의 FP 용액을 제조한다.
실시예 9를 위한 참조 생성물은 플릭소타이드 현탁액이다.
실시예 10
LPS/COPD 동물 모델에서 베타메타손 다이프로피오네이트 효과
물질 및 방법
마우스
6 내지 8주 연령의 숫컷 C57B1/6을 찰스 리버(독일 쾰른에 소재)로부터 구입하고, 발명자의 시설에서 사육한다. 모든 동물 실험 과정은 리에주 대학의 윤리위원회에 의해 승인된 것이다. 음식 및 물은 임의 공급한다.
물질
[http://bio.lonza.com/uploads/tx_rnwaxmarketingmaterial/Lonza_BenchGuides_Phosphate_Buffered_Saline_PBS.pdf]에 보고된 바와 같은 인산염 버퍼 식염수(PBS)를 론자(벨기에의 베르비에에 소재)로부터 구입하고, 크라이스멥을 로케뜨(프랑스)로부터 구입하고, 베타메타손 다이프로피오네이트를 ACIC(캐나다)로부터 구입하고, 트윈 80을 시그마 알드리치를 통해 ICI로부터 구입한다. 마우스 투여를 위하여 실시예 8하에 제조된 생성물을 시험한다.
지질다당류(LPS) 노출 검정 및 사이클로덱스트린-베타메타손 다이프로피오네이트 처리
약 2.5% 이소플루란/산소 혼합물로 매일 주입 전에 마우스(n=10/그룹)를 마취시킨다. 인산염 버퍼 식염수(PBS) 약 50㎕(위약 그룹) 또는 실시예 8에 따라 제조된 바와 같은 크라이스멥-베타메타손 다이프로피오네이트 복합체 약 50㎕ 또는 베타메타손 현탁액 약 50㎕을 0, 1, 2, 3일에 마우스에 주입한다. 마우스를 4일에 희생시킨다. 처리 투여 6시간 후, 마우스에 1 및 3일에 2회 LPS(약 1㎍/100㎕ PBS, 이.콜라이로부터의 초순수 지질다당류, InvivoGen, 미국 캘리포니아주의 샌디에이고에 소재)를 기관내 주입한다.
폐 세포학 및 조직학
실험 프로토콜의 끝에, 동물을 희생시키고, 기관지폐포 세척액(BALF)을 4×1㎖ PBS-EDTA 용액, 약 0.05mM(Calbiochem, 독일 다름슈타트에 소재)의 기관내 주입을 통해 수행한다. BALF 상청액을 단백질 평가를 위하여 수집하고, 세포를 미분 세포수 측정을 위하여 사용한다. 형태학적 기준을 기반으로 한 미분 세포수 측정은 헤마톡실린-에오신(Diff-Quick, Dade, 벨기에)으로 염색 후 세포원심분리된 제형에서 수행한다.
BALF 후, 좌측 주요 기관지를 클램핑하고, 좌측 폐를 절개하고 약 -80℃에서 보존한다. 우측 폐에 약 25cm 압력에서 약 4% 파라포름알데하이드를 주입하고 파라핀으로 고정시킨다. 약 5㎛의 6 조각을 무작위로 수집하고 헤마톡실린 및 에오신(H.E)으로 염색한다. 각각의 후속적인 조각을 이전 것과 약 50㎛ 간격으로 놓는다. 하마마츠 나노주머 HT 2.0를 사용하여 슬라이드를 스캐닝하고, 이전에 기재된 염증 점수화 시스템을 적용하여 디지털화된 슬라이드에서 염증을 정량화한다. 예를 들면, 본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[Cataldo et al.: Am J Pathol(2002)]을 참조한다.
결과
기관지폐포 세척 세포학
실험 동물로부터의 BALF에서 측정된 호중구의 수는, 위약-처리된 동물들과 비교하여, 베타메타손 다이프로피오네이트 현탁액 및 크라이스멥-베타메타손 다이프로피오네이트 복합체로 처리한 후, 감소하지만 유의미하지는 않다. 도 18 및 도 19를 참조한다.
폐 실질에서 염증의 측정
놀랍게도, LPS에 노출되고 크라이스멥-베타메타손 다이프로피오네이트 복합체, 약 100㎍/㎖로 처리된 동물은, 위약 및 베타메타손(약 100㎍/㎖) 현탁액-처리된 동물과 비교하여, LPS-유도된 염증의 유의미한 감소를 나타낸다. 도 17을 참조한다.
그리고, LPS에 노출되고 크라이스멥-베타메타손 다이프로피오네이트 복합체 약 50 및 약 100㎍/㎖ 및 베타메타손 약 50㎍/㎖ 현탁액으로 처리된 동물은, 플라비소-처리된 동물과 비교하여, LPS-유도된 염증의 유의미한 감소를 나타낸다. 플루티카손 참조 약 100㎍/㎖는 또한 위약에 비해 감소 효과를 나타내지만 유의미하지는 않다. 또한 약 100㎍/㎖의 크라이스멥-베타메타손 다이프로피오네이트 복합체는, 약 100㎍/㎖의 플루티카손 참조의 염증 점수와 비교하여, 유의미하게 염증을 감소시킨다. 도 20을 참조한다.
실시예 11
LPS/COPD 동물 모델에 대한 플루티카손 프로피오네이트 효과
물질 및 방법
마우스
6 내지 8주 연령의 숫컷 C57B1/6을 찰스 리버(독일 쾰른에 소재)로부터 구입하고, 발명자의 시설에서 사육한다. 모든 동물 실험 과정은 리에주 대학의 윤리위원회에 의해 승인된 것이다. 음식 및 물은 임의 공급한다.
물질
[http://bio.lonza.com/uploads/tx_rnwaxmarketingmaterial/Lonza_BenchGuides_Phosphate_Buffered_Saline_PBS.pdf]에 보고된 바와 같은 인산염 버퍼 식염수(PBS)를 론자(벨기에의 베르비에에 소재)로부터 구입하고, 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린을 로케뜨(프랑스)로부터 구입하고, 플루티카손 프로피오네이트를 ACIC(캐나다)로부터 구입하고, 약 250㎍/㎖의 상업적인 플루티카손 프로피오네이트 현탁액(풀미코트®)을 글락소 스미스클라인(Glaxo SmithKline, UK)으로부터 구입하고. 마우스 투여를 위하여, 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린(약10mM)을 실시예 9에 따른 플루티카손 프로피오네이트(약 250㎍/㎖) 및 상업적인 제형으로서 플루티카손 프로피오네이트 현탁액(약 250㎍/㎖)과 복합체화시킨다.
지질다당류(LPS) 노출 검정 및 사이클로덱스트린-플루티카손 프로피오네이트 처리
약 2.5% 이소플루란/산소 혼합물로 매일 주입 전에 마우스(n=10/그룹)를 마취시킨다. 인산염 버퍼 식염수(PBS) 약 50㎕(위약 그룹) 또는 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린-플루티카손 프로피오네이트 복합체 약 50㎕ 또는 약 250㎍/㎖의 상업적인 플루티카손 프로피오네이트 현탁액(플릭소타이드®) 약 50㎕를 0, 1, 2, 3일에 마우스에 주입한다. 마우스를 4일에 희생시킨다. 처리 투여 6시간 후, 마우스에 1 및 3일에 2회 LPS(약 1㎍/100㎕ PBS, 이.콜라이로부터의 초순수 지질다당류, InvivoGen, 미국 캘리포니아주의 샌디에이고에 소재)를 기관내 주입한다.
폐 세포학 및 조직학
실험 프로토콜의 끝에, 동물을 희생시키고, 기관지폐포 세척액(BALF)을 4×1㎖ PBS-EDTA 용액, 약 0.05mM(Calbiochem, 독일 다름슈타트에 소재)의 기관내 주입을 통해 수행한다. BALF 상청액을 단백질 평가를 위하여 수집하고, 세포를 미분 세포수 측정을 위하여 사용한다. 형태학적 기준을 기반으로 한 미분 세포수 측정은 헤마톡실린-에오신(Diff-Quick, Dade, 벨기에)으로 염색 후 세포원심분리된 제형에서 수행한다.
BALF 후, 좌측 주요 기관지를 클램핑하고, 좌측 폐를 절개하고 약 -80℃에서 보존한다. 우측 폐에 약 25cm 압력에서 약 4% 파라포름알데하이드를 주입하고 파라핀으로 고정시킨다. 약 5㎛의 6 조각을 무작위로 수집하고 헤마톡실린 및 에오신(H.E)으로 염색한다. 각각의 후속적인 조각을 이전 것과 약 50㎛ 간격으로 놓는다. 하마마츠 나노주머 HT 2.0를 사용하여 슬라이드를 스캐닝하고, 이전에 기재된 염증 점수화 시스템을 적용하여 디지털화된 슬라이드에서 염증을 정량화한다. 예를 들면, 본원에 그 전문이 참조로서 인용되는 문헌[Cataldo et al.: Am J Pathol(2002)]을 참조한다.
결과
기관지폐포 세척 세포학
실험 동물로부터의 BALF에서 측정된 호중구의 수는 놀랍게도, 위약-처리된 동물들과 비교하여, 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린-플루티카손 프로피오네이트 복합체 약 250㎍/㎖로 처리한 후, 유의미하게 감소한다. 플루티카손 프로피오네이트 현탁액 약 250㎍/㎖의 경우, 호중구 수는 위약에 비하여 감소하지만 유의미하지는 않다. 도 21을 참조한다.
문헌
Figure 112016104827148-pct00016
본원에 언급된 모든 문헌의 완전한 기재내용은 각각이 본원에 전체적으로 기재되고 참조로서 인용되는 바와 같이 본원에 그 전문이 참조로서 인용된다.
본 발명에 대한 다양한 변형 및 변경은 본 발명의 범위 및 취지를 벗어나지 않으면서 당해 분야의 숙련가에게 명백해질 것이다. 예시적인 양태 및 실시예는 단지 예로서 제공되고 본 발명의 범위를 제한하는 것을 의도하지 않는다. 본 발명의 범위는 하기에 기재된 바와 같은 청구항에 의해서만 제한된다.

Claims (58)

  1. 인간의 폐 조직에서 염증성 세포를 감소시키는 약제학적 조성물의 제조 방법으로서,
    상기 약제학적 조성물은 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터, 및 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(HP-β-CD)으로 필수적으로 이루어지고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터 및 상기 HP-β-CD는 1:1 내지 2:1의 화학량론적 비율로 포함되고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터는 상기 약제학적 조성물 내에 유효량으로 존재하고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 상기 유효량은 0.05 mcg 내지 1000 mcg의 범위이고,
    상기 방법은 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터를 상기 HP-β-CD에 첨가하는 단계를 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  2. 인간에서 알레르겐 노출 후 폐 조직에서 IL13을 감소시키는 약제학적 조성물의 제조 방법으로서,
    상기 약제학적 조성물은 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터, 및 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(HP-β-CD)으로 필수적으로 이루어지고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터 및 상기 HP-β-CD는 1:1 내지 2:1의 화학량론적 비율로 포함되고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터는 상기 약제학적 조성물 내에 유효량으로 존재하고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 상기 유효량은 0.05 mcg 내지 1000 mcg의 범위이고,
    상기 방법은 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터를 상기 HP-β-CD에 첨가하는 단계를 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  3. 인간에서 기관지 과민반응성을 감소시키는 약제학적 조성물의 제조 방법으로서,
    상기 약제학적 조성물은 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터, 및 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(HP-β-CD)으로 필수적으로 이루어지고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터 및 상기 HP-β-CD는 1:1 내지 2:1의 화학량론적 비율로 포함되고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터는 상기 약제학적 조성물 내에 유효량으로 존재하고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 상기 유효량은 0.05 mcg 내지 1000 mcg의 범위이고,
    상기 방법은 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터를 상기 HP-β-CD에 첨가하는 단계를 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  4. 인간에서 IL17 수준을 감소시키는 약제학적 조성물의 제조 방법으로서,
    상기 약제학적 조성물은 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터, 및 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(HP-β-CD)으로 필수적으로 이루어지고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터 및 상기 HP-β-CD는 1:1 내지 2:1의 화학량론적 비율로 포함되고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터는 상기 약제학적 조성물 내에 유효량으로 존재하고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 상기 유효량은 0.05 mcg 내지 1000 mcg의 범위이고,
    상기 방법은 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터를 상기 HP-β-CD에 첨가하는 단계를 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  5. 인간에서 CXCL-1 수준을 감소시키는 약제학적 조성물의 제조 방법으로서,
    상기 약제학적 조성물은 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터, 및 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(HP-β-CD)으로 필수적으로 이루어지고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터 및 상기 HP-β-CD는 1:1 내지 2:1의 화학량론적 비율로 포함되고, 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터는 상기 약제학적 조성물 내에 유효량으로 존재하고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 상기 유효량은 0.05 mcg 내지 1000 mcg의 범위이고,
    상기 방법은 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터를 상기 HP-β-CD에 첨가하는 단계를 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  6. 인간에서 담배 연기 노출 후 폐 조직에서 호중구를 감소시키는 약제학적 조성물의 제조 방법으로서,
    상기 약제학적 조성물은 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터, 및 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(HP-β-CD)으로 필수적으로 이루어지고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터 및 상기 HP-β-CD는 1:1 내지 2:1의 화학량론적 비율로 포함되고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터는 상기 약제학적 조성물 내에 유효량으로 존재하고,
    상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 상기 유효량은 0.05 mcg 내지 1000 mcg의 범위이고,
    상기 방법은 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터를 상기 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린에 첨가하는 단계를 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 흡입 용액인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  8. 제2항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 흡입 용액인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  9. 제3항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 흡입 용액인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  10. 제4항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 흡입 용액인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  11. 제5항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 흡입 용액인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  12. 제6항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 흡입 용액인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  13. 제1항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 약제학적 분말인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  14. 제2항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 약제학적 분말인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  15. 제3항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 약제학적 분말인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  16. 제4항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 약제학적 분말인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  17. 제5항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 약제학적 분말인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  18. 제6항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 약제학적 분말인 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  19. 제1항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 0.1 내지 500mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  20. 제2항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 0.1 내지 500mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  21. 제3항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 0.1 내지 500mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  22. 제4항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 0.1 내지 500mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  23. 제5항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 0.1 내지 500mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  24. 제6항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 0.1 내지 500mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  25. 제1항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 40 내지 200mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  26. 제2항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 40 내지 200mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  27. 제3항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 40 내지 200mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  28. 제4항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 40 내지 200mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  29. 제5항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 40 내지 200mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
  30. 제6항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 40 내지 200mcg의 범위로 상기 부데소나이드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 에스터의 분자 용량을 포함하는 것인, 약제학적 조성물의 제조 방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK1512404T3 (da) * 2002-06-03 2010-01-04 Cac Corp Eksterne præparater til behandling af dermatitis
US20070020299A1 (en) * 2003-12-31 2007-01-25 Pipkin James D Inhalant formulation containing sulfoalkyl ether cyclodextrin and corticosteroid
BRPI0418386A (pt) * 2003-12-31 2007-05-22 Cydex Inc formulação inalante contendo éter sulfoalquìlico gama-ciclodextrina e corticosteróide
GB0415789D0 (en) * 2004-07-15 2004-08-18 Astrazeneca Ab Novel combination
EP1655034A1 (en) * 2004-10-10 2006-05-10 Université de Liège Use of cyclodextrin for treatment and prevention of bronchial inflammatory diseases.
EP1973550A2 (en) * 2005-12-20 2008-10-01 Tika Läkemedel AB Methods and systems for the delivery of corticosteroids having an enhanced pharmacokinetic profile
US20070249572A1 (en) * 2005-12-20 2007-10-25 Verus Pharmaceuticals, Inc. Systems and methods for the delivery of corticosteroids
CA2642577A1 (en) * 2006-02-15 2007-08-23 Tika Lakemedel Ab Methods of manufacturing corticosteroid solutions
WO2007137206A2 (en) * 2006-05-18 2007-11-29 Tika Läkemedel Ab Unit dose formulations comprising an inhalable solution of albuterol
EP1894559A1 (en) * 2006-09-01 2008-03-05 PARI Pharma GmbH Means to solubilise steroids for inhalation
ES2493641T3 (es) * 2007-06-28 2014-09-12 Cydex Pharmaceuticals, Inc. Administración nasal de soluciones acuosas de corticosteroides
CN101757625A (zh) * 2008-11-28 2010-06-30 天津金耀集团有限公司 环糊精包合皮质激素和h1受体拮抗剂的鼻用药物组合物
EP2923702A1 (en) * 2014-03-28 2015-09-30 Universite De Liege Composition of cyclodextrin with budesonide derivatives for treatment and prevention of pulmonary inflammatory disease

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