KR102391521B1 - Oligosaccharide Composition and Preparation Method of Oligosaccharide Composition - Google Patents
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Abstract
본 출원은 포도당으로 구성된 올리고당을 포함하는 당류를 포함하는 올리고당 조성물에 있어서, 난소화성 올리고당의 함량이 상기 당류 100 중량부 기준으로 6.2 내지 30 중량부인 것인 올리고당 조성물 및 수크로오스 및 말토오스를 포함하는 원료를 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 또는 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 유래의 글루칸 수크라아제와 접촉시키는 것을 포함하는 올리고당 조성물의 제조방법에 관한 것이다.The present application relates to an oligosaccharide composition containing a saccharide containing an oligosaccharide composed of glucose, wherein the content of indigestible oligosaccharide is 6.2 to 30 parts by weight based on 100 parts by weight of the saccharide, and a raw material containing sucrose and maltose. Leuconostoc ( Leuconostoc ) genus microorganisms or Leuconostoc ) It relates to a method for producing an oligosaccharide composition comprising contacting with a glucan sucrase derived from microorganisms.
Description
본 출원은 올리고당 조성물 및 올리고당 조성물의 제조방법에 관한 것이다.The present application relates to an oligosaccharide composition and a method for preparing the oligosaccharide composition.
설탕은 현재 가장 널리 사용되는 감미료로서 사탕수수나 사탕무에서 추출하여 정제한 것인데, 이용 가능성이 가장 폭넓음에도 불구하고, 음식에 있어서 높은 설탕의 함량은 인간의 비만 및 이와 관련된 건강 문제를 야기하는 가장 중요한 원인 중 하나로 인식되고 있다.Sugar is currently the most widely used sweetener, extracted and refined from sugar cane or sugar beet. Despite the widest availability, the high sugar content in food is the most common cause of obesity and related health problems in humans. recognized as one of the major causes.
이를 보완하고자 올리고당이라는 천연 감미료가 개발되었다. 올리고당은 단당류가 여러 개 결합된 다당류로서, 천연에 존재하는 천연 감미료에 해당한다. 현재 시판되는 대표적인 올리고당으로 이소말토올리고당(IMO)을 들 수 있다.To compensate for this, a natural sweetener called oligosaccharide was developed. Oligosaccharides are polysaccharides in which several monosaccharides are combined, and correspond to natural sweeteners that exist in nature. Isomaltooligosaccharide (IMO) may be mentioned as a representative oligosaccharide currently commercially available.
이 중 이소말토올리고당은 옥수수 전분으로 만들기 때문에 원당(설탕) 함량이 0%이다. 따라서 설탕의 섭취를 줄일 수 있고, 열에도 강해서 가열 시에도 유익한 성분의 파괴가 적다는 장점이 있다. 그러나 이소말토올리고당은 식이섬유가 다소 부족하고 입촉감을 요하는 제품에는 적합하지 않다는 문제가 있다.Among them, isomaltooligosaccharide is made from corn starch, so the content of raw sugar (sugar) is 0%. Therefore, it is possible to reduce the intake of sugar, and since it is strong against heat, there is an advantage that the destruction of beneficial components is small even when heated. However, isomaltooligosaccharide has a problem that it lacks a bit of dietary fiber and is not suitable for products requiring a feeling of touch.
설탕을 완벽하게 대체할 수 있는 감미료는 끊임없는 연구 대상이며, 위와 같이 현재 시판되는 이소말토올리고당 등의 감미료에 존재하는 문제점을 해소하기 위한 연구가 지속적으로 이루어지고 있다.Sweeteners that can completely replace sugar are the subject of endless research, and research is continuously being made to solve the problems that exist in sweeteners such as isomaltooligosaccharide, which are currently commercially available as above.
한국 공개특허공보 제2015-0031959호Korean Patent Publication No. 2015-0031959
한국 공개특허공보 제2015-0027467호Korean Patent Publication No. 2015-0027467
본 출원은 위와 같이 감미료로 사용되는 종래의 이소말토올리고당의 문제점을 해결하고, 궁극적으로는 설탕을 대체할 수 있을 만한 감미료를 제공하기 위한 것으로서, 난소화성 올리고당의 함량이 높으면서, 백탁 현상이 개선되고 이미(異味), 이취(異臭)를 낮추어 감미도(단맛)가 향상된 올리고당 조성물을 제공하고자 한다.The present application is to solve the problems of the conventional isomaltooligosaccharide used as a sweetener as described above, and ultimately to provide a sweetener that can replace sugar. An object of the present invention is to provide an oligosaccharide composition with improved sweetness (sweetness) by lowering the taste (異味) and off-flavor (異臭).
이에 더해 내산, 내열성을 가진 올리고당 조성물을 제공하고자 한다.In addition, an object of the present invention is to provide an oligosaccharide composition having acid resistance and heat resistance.
본 출원은 포도당으로 구성된 올리고당을 포함하는 당류를 포함하는 올리고당 조성물에 있어서, 난소화성 올리고당의 함량이 상기 당류 100 중량부 기준으로 6.2 내지 30 중량부인 것인 올리고당 조성물을 제공한다.The present application provides an oligosaccharide composition comprising a saccharide including an oligosaccharide composed of glucose, wherein the content of indigestible oligosaccharide is 6.2 to 30 parts by weight based on 100 parts by weight of the saccharide.
또한 본 출원은 수크로오스 및 말토오스를 포함하는 원료를 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 또는 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 유래의 글루칸 수크라아제와 접촉시키는 것을 포함하는 것인 올리고당 조성물의 제조방법을 제공한다.In addition, the present application provides a method for preparing an oligosaccharide composition comprising contacting a raw material containing sucrose and maltose with a glucan sucrose derived from a microorganism of the genus Leuconostoc or a microorganism of the genus Leuconostoc do.
본 출원의 올리고당 조성물은, 종래의 이소말토올리고당과 대비하여 난소화성 올리고당의 함량이 높아서, 대장암 예방, 변비 개선 등의 효과가 있으며, 칼로리 저감효과가 있다.The oligosaccharide composition of the present application has a higher content of indigestible oligosaccharide compared to the conventional isomaltooligosaccharide, and thus has effects such as prevention of colon cancer and improvement of constipation, and a calorie reduction effect.
이에 더하여 본 출원의 올리고당 조성물은 내산 안정성, 내열 안정성은 동등한 수준을 유지하면서도, 기존의 이소말토올리고당에 비하여 백탁 현상이 감소되며, 이미(異味), 이취(異臭)가 없어서 감미도가 개선된다. 또한 동일한 Bx% 기준으로 바디감이 우수하고 단맛 강도 및 단맛 지속성이 향상되는 효과가 있다.In addition, the oligosaccharide composition of the present application maintains the same level of acid resistance and heat resistance, and reduces cloudiness compared to conventional isomaltooligosaccharides, and improves sweetness because there is no odor and odor. In addition, it has an excellent body feeling based on the same Bx%, and has the effect of improving sweetness intensity and sweetness durability.
또한, 본 출원의 올리고당 조성물은 상대적으로 점도가 높아서 입촉감 등의 물성이 요구되는 유제품, 시리얼바 등에 적합하다.In addition, the oligosaccharide composition of the present application has a relatively high viscosity, and thus is suitable for dairy products, cereal bars, and the like, which require physical properties such as texture.
도 1은 본 출원의 실시예 1에 따라 제조된 올리고당 조성물의 HPLC 크로마토그램을 나타낸 도시이다.
도 2는 본 출원의 실시예 2에 따라 제조된 올리고당 조성물의 HPLC 크로마토그램을 나타낸 도시이다.
도 3은 본 출원의 실시예 3에 따라 제조된 올리고당 조성물의 HPLC 크로마토그램을 나타낸 도시이다.
도 4는 본 출원의 실험예 4에 따라 실시예 2의 올리고당 조성물과 이소말토올리고당(IMO)의 내산/내열 복합 안정성을 평가한 결과를 나타낸 도시이다.
도 5는 본 출원의 실험예 5에 따라 실시예 2의 올리고당 조성물과 전분당(F55)의 관능 프로파일을 비교한 결과를 나타낸 도시이다.
도 6은 본 출원의 실험예 5에 따라 실시예 2의 올리고당 조성물과 이소말토올리고당(IMO)의 관능 프로파일을 비교한 결과를 나타낸 도시이다.
도 7은 본 출원의 실험예 6에 따라 실시예 2의 올리고당 조성물, 이소말토올리고당(IMO), 및 전분당(F55)의 점도를 비교한 결과를 나타낸 도시이다.1 is a diagram showing an HPLC chromatogram of an oligosaccharide composition prepared according to Example 1 of the present application.
2 is a view showing the HPLC chromatogram of the oligosaccharide composition prepared according to Example 2 of the present application.
3 is a view showing the HPLC chromatogram of the oligosaccharide composition prepared according to Example 3 of the present application.
4 is a view showing the results of evaluating the acid/heat resistance composite stability of the oligosaccharide composition of Example 2 and isomaltooligosaccharide (IMO) according to Experimental Example 4 of the present application.
5 is a diagram showing the results of comparing the sensory profile of the oligosaccharide composition of Example 2 and starch sugar (F55) according to Experimental Example 5 of the present application.
6 is a view showing the results of comparing the functional profile of the oligosaccharide composition of Example 2 and isomaltooligosaccharide (IMO) according to Experimental Example 5 of the present application.
7 is a view showing the results of comparing the viscosities of the oligosaccharide composition of Example 2, isomaltooligosaccharide (IMO), and starch sugar (F55) according to Experimental Example 6 of the present application.
이하, 본 출원을 상세히 설명하고자 한다.Hereinafter, the present application will be described in detail.
본 출원은 올리고당 조성물을 제공한다.The present application provides an oligosaccharide composition.
상기 올리고당 조성물은, 포도당으로 구성된 올리고당을 포함하는 당류를 포함하며, 난소화성 올리고당의 함량이 상기 당류 100 중량부 기준으로 6.2 내지 30 중량부이다.The oligosaccharide composition includes saccharides including oligosaccharides composed of glucose, and the content of indigestible oligosaccharides is 6.2 to 30 parts by weight based on 100 parts by weight of the saccharide.
상기 포도당으로 구성된 올리고당은 α 글리코시드 결합에 의해 연결된 올리고당을 포함하는 것일 수 있다. 구체적으로는, 상기 포도당으로 구성된 올리고당은 α-1,3 글리코시드 결합 및/또는 α-1,6 글리코시드 결합이 포함된 올리고당을 포함하는 것일 수 있다. 더욱 구체적으로는 α-1,3 글리코시드 결합 및 α-1,6 글리코시드 결합이 교대로 연결된 올리고당을 포함하는 것일 수 있다.The oligosaccharide composed of glucose may include an oligosaccharide linked by an α-glycosidic bond. Specifically, the oligosaccharide composed of glucose may include an oligosaccharide having an α-1,3 glycosidic bond and/or an α-1,6 glycosidic bond. More specifically, it may include an oligosaccharide in which α-1,3 glycosidic bonds and α-1,6 glycosidic bonds are alternately linked.
상기 포도당으로 구성된 올리고당은 난소화성 올리고당을 포함하는 것일 수 있다.The oligosaccharide composed of glucose may include indigestible oligosaccharide.
상기 올리고당 조성물은 이소말토올리고당을 실질적으로 포함하지 않는 것일 수 있다. 즉, 상기 포도당으로 구성된 올리고당은 이소말토올리고당을 실질적으로 포함하지 않는 올리고당일 수 있고, 상기 당류도 이소말토올리고당을 실질적으로 포함하지 않을 수 있다.The oligosaccharide composition may be substantially free of isomaltooligosaccharide. That is, the oligosaccharide composed of glucose may be an oligosaccharide substantially free of isomaltooligosaccharide, and the saccharide may also substantially not include isomaltooligosaccharide.
상기 올리고당 조성물이 이소말토올리고당을 실질적으로 포함하지 않는다는 것의 의미는, 상기 올리고당 조성물에 이소말토올리고당이 전혀 포함되어 있지 않거나, 불순물(약 0.1 중량% 미만)로 포함되어 있는 정도를 의미한다.The meaning that the oligosaccharide composition does not substantially contain isomaltooligosaccharide means that the oligosaccharide composition does not contain isomaltooligosaccharide at all or is included as an impurity (less than about 0.1% by weight).
상기 포도당으로 구성된 올리고당은 포도당이 3개 이상 연결된 형태로서, 연결된 단당류 개수에 따라 중합도(Degree of Polymerization, DP) 3 내지 10 등으로 표시될 수 있다. 예를 들어, 단당류가 3개 연결된 형태이면 중합도(DP)는 3 이다.The oligosaccharide composed of glucose is a form in which three or more glucose is linked, and may be expressed as a degree of polymerization (DP) of 3 to 10, etc. depending on the number of linked monosaccharides. For example, if three monosaccharides are linked, the degree of polymerization (DP) is 3.
상기 포도당으로 구성된 올리고당은 중합도 3(DP3) 이상의 올리고당을 의미할 수 있으며, 상기 포도당으로 구성된 올리고당의 함량은 상기 당류 100 중량부를 기준으로 35 중량부, 40 중량부, 45 중량부, 50 중량부, 53 중량부, 55 중량부, 60 중량부 중에서 선택되는 하나의 하한선 및/또는 80 중량부, 75 중량부, 70 중량부, 65 중량부, 60 중량부 중에서 선택되는 하나의 상한선으로 구성되는 범위일 수 있고, 예를 들어 35 내지 80 중량부, 40 내지 75 중량부, 50 내지 70 중량부, 53 내지 70 중량부, 60 내지 70 중량부일 수 있다. 상기 포도당으로 구성된 올리고당(중합도 3(DP3) 이상의 올리고당)의 함량이 상기 범위를 만족하는 경우에는 올리고당 조성물이 기존의 이소말토올리고당과 대비하여 단맛 지속성 및 바디감이 개선되는 효과가 있다. 또한 이미, 이취가 낮아져서 감미도가 우수해진다.The oligosaccharide composed of glucose may mean an oligosaccharide with a polymerization degree of 3 (DP3) or higher, and the content of the oligosaccharide composed of glucose is 35 parts by weight, 40 parts by weight, 45 parts by weight, 50 parts by weight, based on 100 parts by weight of the saccharide; A range consisting of one lower limit selected from 53 parts by weight, 55 parts by weight, and 60 parts by weight and/or one upper limit selected from 80 parts by weight, 75 parts by weight, 70 parts by weight, 65 parts by weight, and 60 parts by weight. and may be, for example, 35 to 80 parts by weight, 40 to 75 parts by weight, 50 to 70 parts by weight, 53 to 70 parts by weight, 60 to 70 parts by weight. When the content of the oligosaccharide composed of glucose (oligosaccharide having a degree of polymerization of 3 (DP3) or higher) satisfies the above range, the oligosaccharide composition has an effect of improving the sweetness lasting and body feeling compared to the conventional isomaltooligosaccharide. In addition, the off-flavor is already lowered and the sweetness is excellent.
상기 난소화성 올리고당은 α-1,3 글리코시드 결합으로 연결된 올리고당을 포함하는 것일 수 있다. 상기 난소화성 올리고당은 추가로 α-1,6 글리코시드 결합으로 연결된 올리고당을 포함하는 것일 수 있다.The indigestible oligosaccharide may include an oligosaccharide linked by an α-1,3 glycosidic bond. The indigestible oligosaccharide may further include an oligosaccharide linked by an α-1,6 glycosidic bond.
상기 난소화성 올리고당은 상기 포도당으로 구성된 올리고당 중 소화 효소에 의해 분해되지 않는 것을 포함할 수 있다. 즉 사람의 체내 소화효소에 의해서는 분해되지 않는 것을 의미할 수 있으며, 이러한 난소화성 올리고당은 위장의 포만감을 유발하고, 소장 내에서의 통과속도가 빨라서 영양소 흡수율이 저하됨에 따라 당뇨병 환자에게 도움이 되고, 대장암을 예방하는 효과도 있다.The indigestible oligosaccharide may include one that is not degraded by a digestive enzyme among the oligosaccharides composed of glucose. That is, it can mean that it is not broken down by digestive enzymes in the human body, and these indigestible oligosaccharides induce a feeling of satiety in the stomach and are helpful for diabetic patients as the rate of nutrient absorption decreases due to the rapid passage in the small intestine. It also has the effect of preventing colon cancer.
상기 난소화성 올리고당은 상기 당류 100 중량부를 기준으로 6.2 중량부, 6.3 중량부, 6.4 중량부, 7 중량부, 8 중량부, 9 중량부, 10 중량부, 또는 12 중량부 중에서 선택되는 하나의 하한선 및/또는 30 중량부, 25 중량부, 20 중량부, 19 중량부, 18 중량부, 또는 15 중량부 중에서 선택되는 하나의 상한선으로 구성되는 범위의 함량으로 포함될 수 있고, 예를 들어 6.2 내지 30 중량부, 6.3 내지 25 중량부, 6.4 내지 20 중량부, 7 내지 20 중량부, 또는 10 내지 20 중량부의 함량으로 포함될 수 있다.The indigestible oligosaccharide is one lower limit selected from 6.2 parts by weight, 6.3 parts by weight, 6.4 parts by weight, 7 parts by weight, 8 parts by weight, 9 parts by weight, 10 parts by weight, or 12 parts by weight based on 100 parts by weight of the saccharide. and/or 30 parts by weight, 25 parts by weight, 20 parts by weight, 19 parts by weight, 18 parts by weight, or 15 parts by weight. It may be included in an amount of 6.3 to 25 parts by weight, 6.4 to 20 parts by weight, 7 to 20 parts by weight, or 10 to 20 parts by weight.
상기 난소화성 올리고당의 함량이 상기 범위를 만족하는 경우에는 위와 같이 대장암 예방, 변비 개선, 혈중 콜레스테롤의 감소, 당뇨병에 도움되는 등의 효과가 있으며, 칼로리 저감효과도 있다.When the content of the indigestible oligosaccharide satisfies the above range, there are effects such as preventing colon cancer, improving constipation, reducing blood cholesterol, helping diabetes, and the like, and there is also a calorie reduction effect.
상기 올리고당 조성물에는 수분 함량이 상기 올리고당 조성물 총 중량을 기준으로 18 중량%, 19 중량%, 또는 20 중량% 중에서 선택되는 하나의 하한선 및/또는 25 중량%, 24 중량%, 또는 23 중량% 중에서 선택되는 하나의 상한선으로 구성되는 범위일 수 있고, 예를 들어 18 내지 25 중량%, 19 내지 24 중량%, 또는 20 내지 23 중량%일 수 있다. 상기 수분 함량이 상기 범위를 만족하는 경우에는 올리고당 조성물의 부드러움, 바디감을 향상시키고, 감미질을 개선할 수 있다.The oligosaccharide composition has a water content, based on the total weight of the oligosaccharide composition, with one lower limit selected from 18% by weight, 19% by weight, or 20% by weight and/or selected from 25% by weight, 24% by weight, or 23% by weight It may be a range consisting of one upper limit of When the moisture content satisfies the above range, softness and body feeling of the oligosaccharide composition may be improved, and sweetness quality may be improved.
상기 올리고당 조성물의 점도는 25℃에서 점도가 400 cP, 420 cP, 440 cP, 460 cP, 480 cP, 500 cP로부터 선택되는 하나의 하한선 및/또는 5,000 cP, 3,000 cP, 2,000 cP, 1,000 cP, 800 cP, 700 cP, 650 cP, 600 cP, 550 cP로부터 선택되는 하나의 상한선으로 구성된 범위일 수 있고, 예를 들어 25℃에서 점도가 400 내지 5,000 cP일 수 있고, 420 내지 3,000 cP, 440 내지 1,000 cP, 460 내지 800 cP, 또는 480 내지 600 cP일 수 있다. 상기 올리고당 조성물의 25℃에서 점도가 상기 범위를 만족하는 경우 점성이 우수하여 입촉감이 요구되는 유제품, 시리얼바 등에 적합하다.The viscosity of the oligosaccharide composition may have a viscosity at 25° C. at one lower limit selected from 400 cP, 420 cP, 440 cP, 460 cP, 480 cP, 500 cP and/or 5,000 cP, 3,000 cP, 2,000 cP, 1,000 cP, 800 cP, 700 cP, 650 cP, 600 cP, may be a range consisting of one upper limit selected from 550 cP, for example, may have a viscosity of 400 to 5,000 cP at 25° C., 420 to 3,000 cP, 440 to 1,000 cP, 460 to 800 cP, or 480 to 600 cP. When the viscosity of the oligosaccharide composition at 25° C. satisfies the above range, it is suitable for dairy products, cereal bars, and the like, which require a feeling of mouthfeel due to excellent viscosity.
상기 올리고당 조성물은 30℃에서 점도가 240 cP, 260 cP, 280 cP, 300 cP, 320 cP, 340 cP, 350 cP로부터 선택되는 하나의 하한선 및/또는 1,000 cP, 800 cP, 600 cP, 500 cP, 400 cP로부터 선택되는 하나의 상한선으로 구성된 범위일 수 있고, 예를 들어 30℃에서 점도가 240 내지 1,000 cP일 수 있고, 260 내지 800 cP, 280 내지 600 cP, 또는 300 내지 500 cP일 수 있다. The oligosaccharide composition has a viscosity at 30° C. of one lower limit selected from 240 cP, 260 cP, 280 cP, 300 cP, 320 cP, 340 cP, 350 cP and/or 1,000 cP, 800 cP, 600 cP, 500 cP, It may be a range consisting of one upper limit selected from 400 cP, for example, may have a viscosity of 240 to 1,000 cP at 30° C., 260 to 800 cP, 280 to 600 cP, or 300 to 500 cP.
상기 올리고당 조성물은 70 Brix 및/또는 160 rpm의 회전속도에서 측정한 것일 수 있다.The oligosaccharide composition may be measured at a rotation speed of 70 Brix and/or 160 rpm.
상기 올리고당 조성물의 35℃에서 점도가 상기 범위를 만족하는 경우 점성이 우수하여 입촉감이 요구되는 유제품, 시리얼바 등에 적합하다.When the viscosity of the oligosaccharide composition satisfies the above range at 35° C., it is suitable for dairy products, cereal bars, and the like, which require a feeling of touch due to excellent viscosity.
상기 올리고당 조성물은 과당(fructose)을 추가로 포함할 수 있다. 상기 과당은 상기 당류 100 중량부를 기준으로 10 중량부, 15 중량부, 20 중량부, 25 중량부, 27 중량부, 30 중량부 중에서 선택되는 하나의 하한선 및/또는 50 중량부, 45 중량부, 40 중량부, 38 중량부, 35 중량부 중에서 선택되는 하나의 상한선으로 구성되는 범위의 함량으로 포함될 수 있고, 예를 들어 10 내지 50 중량부, 15 내지 45 중량부, 20 내지 45 중량부, 또는 27 내지 40 중량부의 함량으로 포함될 수 있다.The oligosaccharide composition may further include fructose. The fructose may contain one lower limit selected from 10 parts by weight, 15 parts by weight, 20 parts by weight, 25 parts by weight, 27 parts by weight, and 30 parts by weight and/or 50 parts by weight, 45 parts by weight, based on 100 parts by weight of the sugar; 40 parts by weight, 38 parts by weight, and 35 parts by weight may be included in a range consisting of an upper limit selected from, for example, 10 to 50 parts by weight, 15 to 45 parts by weight, 20 to 45 parts by weight, or It may be included in an amount of 27 to 40 parts by weight.
상기 과당이 상기 범위를 만족하는 경우에는 올리고당 조성물의 감미도를 개선하여서, 바디감이 우수하고 단맛 강도 및 단맛 지속성이 향상될 수 있다.When the fructose content satisfies the above range, the degree of sweetness of the oligosaccharide composition may be improved, so that the body may be excellent, and sweetness intensity and sweetness durability may be improved.
또한 상기 올리고당 조성물은 포도당(glucose)을 실질적으로 포함하지 않을 수 있다. 상기 올리고당 조성물이 포도당을 실질적으로 포함하지 않는다는 것의 의미는, 상기 올리고당 조성물에 포도당이 전혀 포함되어 있지 않거나, 불순물(약 0.1 중량% 미만)로 포함되어 있는 정도를 의미한다.Also, the oligosaccharide composition may not substantially include glucose. The meaning that the oligosaccharide composition does not substantially contain glucose means that the oligosaccharide composition does not contain glucose at all or is contained as an impurity (less than about 0.1% by weight).
상기 올리고당 조성물에는 중합도 6(DP6) 이상의 올리고당이 상기 당류 100 중량부를 기준으로 2 중량부, 2.5 중량부, 2.6 중량부, 3 중량부, 4 중량부, 5 중량부, 6 중량부, 7 중량부, 8 중량부, 9 중량부, 10 중량부 중에서 선택되는 하나의 하한선 및/또는 40 중량부, 39 중량부, 38 중량부, 35 중량부, 30 중량부, 25 중량부 중에서 선택되는 하나의 상한선으로 구성되는 범위의 함량으로 포함될 수 있고, 예를 들어 2 내지 40 중량부, 2.5 내지 39 중량부, 2.6 내지 35 중량부의 함량으로 포함될 수 있다.The oligosaccharide composition contains 2 parts by weight, 2.5 parts by weight, 2.6 parts by weight, 3 parts by weight, 4 parts by weight, 5 parts by weight, 6 parts by weight, 7 parts by weight, based on 100 parts by weight of the saccharide, an oligosaccharide having a polymerization degree of 6 (DP6) or higher. , one lower limit selected from 8 parts by weight, 9 parts by weight, and 10 parts by weight and/or one upper limit selected from 40 parts by weight, 39 parts by weight, 38 parts by weight, 35 parts by weight, 30 parts by weight, and 25 parts by weight It may be included in a content in the range consisting of, for example, may be included in an amount of 2 to 40 parts by weight, 2.5 to 39 parts by weight, 2.6 to 35 parts by weight.
상기 중합도 6(DP6) 이상의 올리고당의 함량이 상기 범위를 만족하는 경우에는 올리고당 조성물의 백탁 현상을 방지하는 효과가 있으며, 이미, 이취가 개선되어 감미도가 향상되고, 단맛 지속성이 향상될 수 있다.When the content of oligosaccharides with a degree of polymerization of 6 (DP6) or more satisfies the above range, there is an effect of preventing the turbidity of the oligosaccharide composition, and already, off-flavor is improved to improve sweetness, and sweetness durability can be improved.
또한 본 출원은 올리고당 조성물의 제조방법을 제공한다.The present application also provides a method for preparing an oligosaccharide composition.
상기 올리고당 조성물의 제조방법은, 수크로오스(자당) 및 말토오스를 포함하는 원료를 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 또는 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 유래의 글루칸 수크라아제와 접촉시키는 것을 포함할 수 있다.The method for preparing the oligosaccharide composition may include contacting a raw material containing sucrose (sucrose) and maltose with a glucan sucrose derived from a microorganism of the genus Leuconostoc or a microorganism of the genus Leuconostoc . .
상기 글루칸 수크라아제는 수크로오스의 포도당을 수크로오스 외 자유 수산기를 가진 다른 물질에 전달할 수 있는 효소로, 헥소실트렌스퍼라아제(Hexosyltransferase, EC number 2.4.1)과 혼용하여서 명명될 수 있다. 구체적으로 글루칸 수크라아제는 덱스트란 수크라아제(Dextransucrase, EC number 2.4.1.5), 또는 얼터난수크라아제(Alternansucrases, EC number 2.4.1.140)일 수 있다.The glucan sucrose is an enzyme capable of transferring the glucose of sucrose to other substances having a free hydroxyl group other than sucrose, and may be named by mixing with hexosyltransferase (EC number 2.4.1). Specifically, the glucan sucrase may be a dextran sucrase (Dextransucrase, EC number 2.4.1.5) or an alternate sucrase (Alternansucrases, EC number 2.4.1.140).
상기 류코노스톡 속 미생물은 글루칸 수크라아제를 생산할 수 있는 미생물인 경우 제한없이 이용 가능하나, 구체적으로 류코노스톡 시트리움(Leuconostoc citreum), 류코노스톡 메센테로이드(Leuconostoc mesenteroides), 또는 류코노스톡 김치아이(Leuconostoc kimchii)일 수 있다. 또한 상기 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물은 자연에서 유래한 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물에 비해 글루칸 수크라제 활성이 증가된 미생물일 수 있으며, 일례로 물리적 및/또는 화학적 방법을 통해 제조된 미생물일 수 있다.The Leuconostoc genus microorganism can be used without limitation if it is a microorganism capable of producing glucan sucrase, specifically, Leuconostoc citreum , Leuconostoc mesenteroides , or Leuconostoc mesenteroides. It may be a kimchi child ( Leuconostoc kimchii ). In addition, the Leuconostoc genus microorganism may be a microorganism having increased glucan sucrase activity compared to the naturally-derived Leuconostoc genus microorganism, for example, prepared through a physical and / or chemical method It may be a microorganism.
상기 류코노스톡 속 미생물은 글루칸 수크라제를 포함하는 당전이효소의 활성이 1 IU/mL 이상, 1.5 IU/mL 이상, 2 IU/ML 이상, 2.5 IU/mL 이상, 3 IU/mL 이상, 3.5 IU/mL 이상, 4 IU/mL 이상, 4.5 IU/mL 이상, 5 IU/mL 이상, 5.5 IU/mL 이상, 6 IU/mL 이상일 수 있고, 1 IU/mL 이상, 1.5 IU/mL 이상, 2 IU/ML 이상, 2.5 IU/mL 이상, 3 IU/mL 이상, 3.5 IU/mL 이상, 4 IU/mL 이상, 4.5 IU/mL 이상, 5 IU/mL 이상, 5.5 IU/mL 이상, 6 IU/mL 이상으로부터 선택되는 하나의 하한선 및/또는 20 IU/mL 이하, 19 IU/mL 이하, 18 IU/mL 이하, 17 IU/mL 이하, 16 IU/mL 이하, 15 IU/mL 이하, 14 IU/mL 이하, 13 IU/mL 이하, 12 IU/mL 이하, 11 IU/mL 이하, 10 IU/mL 이하, 9 IU/mL 이하, 8 IU/mL 이하, 7 IU/mL 이하로부터 선택되는 하나의 상한선으로 구성되는 범위인 류코노스톡 속 미생물일 수 있다.The leukonostok genus microorganism has an activity of glycotransferase including glucan sucrase of 1 IU/mL or more, 1.5 IU/mL or more, 2 IU/ML or more, 2.5 IU/mL or more, 3 IU/mL or more, 3.5 IU/mL or more, 4 IU/mL or more, 4.5 IU/mL or more, 5 IU/mL or more, 5.5 IU/mL or more, 6 IU/mL or more, 1 IU/mL or more, 1.5 IU/mL or more, 2 IU/mL or more, 2.5 IU/mL or more, 3 IU/mL or more, 3.5 IU/mL or more, 4 IU/mL or more, 4.5 IU/mL or more, 5 IU/mL or more, 5.5 IU/mL or more, 6 IU /mL or more and/or 20 IU/mL or less, 19 IU/mL or less, 18 IU/mL or less, 17 IU/mL or less, 16 IU/mL or less, 15 IU/mL or less, 14 IU or less /mL or less, 13 IU/mL or less, 12 IU/mL or less, 11 IU/mL or less, 10 IU/mL or less, 9 IU/mL or less, 8 IU/mL or less, 7 IU/mL or less It may be a microorganism of the genus Leukonostok, which is a range consisting of the upper limit.
상기 수크로오스와 말토오스의 건조 고형분의 혼합 중량비는 1:1 내지 15:1일 수 있다. 일례로 1:1 내지 13:1, 1:1 내지 6:1, 1:1 내지 3:1, 2:1 내지 13:1, 또는 2:1 내지 6:1일 수 있다. 상기 수크로오스와 말토오스의 건조 고형분의 혼합 중량비가 위와 같은 범위를 만족하는 경우에는 올리고당 조성물의 백탁 현상이 감소되고, 감미도가 높아질 수 있다.The mixing weight ratio of the dry solids of sucrose and maltose may be 1:1 to 15:1. For example, it may be 1:1 to 13:1, 1:1 to 6:1, 1:1 to 3:1, 2:1 to 13:1, or 2:1 to 6:1. When the mixed weight ratio of the dry solids of sucrose and maltose satisfies the above range, cloudiness of the oligosaccharide composition may be reduced and sweetness may be increased.
수크로오스(sucrose)는 자당 또는 설탕이라고도 불리는, 1 분자의 프럭토오스(fructose)와 1 분자의 글루코오스(glucose)의 글리코시드 결합으로 연결된 이당류이다. 식물에서 자연적으로 생산되고, 사탕 수수 또는 사탕무로부터 수크로오스를 추출/정제하여 얻어질 수 있다.Sucrose is a disaccharide connected by a glycosidic bond of one molecule of fructose and one molecule of glucose, also called sucrose or sugar. It is produced naturally in plants and can be obtained by extracting/refining sucrose from sugar cane or sugar beet.
말토오스(maltose)는 엿당 또는 맥아당이라고도 불리는 2 분자의 글루코오스(포도당)로서, α-1,4 글리코시드 결합으로 연결된 이당류이다. 이성질체인 이소말토오스에서는 2 분자의 포도당이 α-1,6 글리코시드 결합으로 연결되어 있다. 이러한 말토오스는 녹말을 β-아밀라아제(β-amylase)를 이용하여 분해할 때 생성되기도 하고, 발아 중인 종자에서도 발견된다.Maltose is two molecules of glucose (glucose), also called maltose or maltose, and is a disaccharide linked by α-1,4 glycosidic bonds. In isomaltose, which is an isomer, two molecules of glucose are linked by α-1,6 glycosidic bonds. Such maltose is also produced when starch is decomposed using β-amylase, and is also found in germinating seeds.
상기 말토오스는 말토오스를 주성분으로 하는 어떤 물질이든 제한없이 이용할 수 있으며, 일례로 물엿, 옥수수 시럽, 또는 하이말토오스일 수 있다.The maltose may be any material containing maltose as a main component without limitation, and may be, for example, starch syrup, corn syrup, or hymaltose.
상기 물엿은 전분을 산이나 효소로 가수분해하여 얻어질 수 있는 것으로서, 전술한 말토오스(엿당)를 주성분으로 한다. 상기 물엿은 전분을 포도당으로 분해하고 이 포도당 일부를 과당으로 이성질화하여 만드는 액상과당과는 상이하다. 상기 물엿은 포도당으로 전부 분해되지 않고, 중간에서 분해가 멈추기 때문에, 글루코오스(포도당), 덱스트린 등이 더 포함될 수도 있다.The starch syrup can be obtained by hydrolyzing starch with an acid or an enzyme, and has the aforementioned maltose (maltose) as a main component. The starch syrup is different from fructose liquid, which is made by decomposing starch into glucose and isomerizing a part of this glucose into fructose. Since the starch syrup is not completely decomposed into glucose and the decomposition stops in the middle, glucose (glucose), dextrin, and the like may be further included.
상기 물엿에는 말토오스가 상기 물엿 총 중량을 기준으로 30 중량% 이상 50 중량% 미만의 함량으로 포함되는 것일 수 있다. 구체적으로는 상기 말토오스가 상기 물엿 총 중량을 기준으로 30 중량% 이상, 35 중량% 이상, 40 중량% 이상, 45 중량% 이상, 및/또는 50 중량% 미만, 45 중량% 미만, 40 중량% 미만의 함량으로 포함될 수 있다.The starch syrup may contain maltose in an amount of 30% by weight or more and less than 50% by weight based on the total weight of the starch syrup. Specifically, the maltose content is 30% by weight or more, 35% by weight or more, 40% by weight or more, 45% by weight or more, and/or less than 50% by weight, less than 45% by weight, less than 40% by weight based on the total weight of the starch syrup. may be included in the amount of
상기 옥수수 시럽은 옥수수의 녹말로 만든 식용 시럽으로서, 상기 옥수수 시럽에는 말토오스의 함량이 제한되지 않는다.The corn syrup is an edible syrup made from corn starch, and the content of maltose in the corn syrup is not limited.
상기 하이말토오스는 말토오스를 주성분으로 하는 물엿의 일종으로서, 상기 하이말토오스에는 말토오스의 함량이 하이말토오스 총 중량을 기준으로 50 중량% 이상의 함량으로 포함되는 것일 수 있다. 구체적으로는 상기 말토오스가 상기 하이말토오스 총 중량을 기준으로 60 중량% 이상, 65 중량% 이상, 70 중량% 이상, 75 중량% 이상, 80 중량% 이상, 및/또는 99 중량% 이하, 90 중량% 이하, 80 중량% 이하일 수 있다.The high maltose is a kind of starch syrup containing maltose as a main component, and the high maltose may contain maltose in an amount of 50% by weight or more based on the total weight of the high maltose. Specifically, the maltose content is 60 wt% or more, 65 wt% or more, 70 wt% or more, 75 wt% or more, 80 wt% or more, and/or 99 wt% or less, 90 wt% based on the total weight of the hymaltose. Hereinafter, it may be 80% by weight or less.
상기 올리고당 조성물은 포도당으로 구성된 올리고당을 포함할 수 있고, 상기 포도당으로 구성된 올리고당은, 상기 수크로오스 및 말토오스를 포함하는 원료가 상기 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 또는 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 유래의 글루칸 수크라아제에 의해서 효소 전환되어 얻어질 수 있다.The oligosaccharide composition may include an oligosaccharide composed of glucose, and the oligosaccharide composed of glucose, the raw material containing the sucrose and maltose, is a microorganism of the genus Leuconostoc or a microorganism of the genus Leuconostoc . It can be obtained by enzymatic conversion by glucan sucraase.
상기와 같이 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 또는 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 유래의 글루칸 수크라아제와 같은 당전이 효소에 의해 효소 전환되어 얻어지는 포도당으로 구성된 올리고당은, α-1,3 글리코시드 결합 및/또는 α-1,6 글리코시드 결합이 포함된 올리고당을 포함하는 것일 수 있다. 구체적으로는 α-1,3 글리코시드 결합 및 α-1,6 글리코시드 결합이 교대로 연결된 올리고당을 포함하는 것일 수 있다.As described above, the oligosaccharide composed of glucose obtained by enzymatic conversion by a glycosyltransferase such as glucan sucrase derived from a microorganism of the genus Leuconostoc or a microorganism of the genus Leuconostoc is an α-1,3 glycoside It may contain an oligosaccharide having a bond and/or an α-1,6 glycosidic bond. Specifically, it may include an oligosaccharide in which α-1,3 glycosidic bonds and α-1,6 glycosidic bonds are alternately linked.
상기와 같은 당전이 효소를 이용하기 때문에, 상기 포도당으로 구성된 올리고당은 전술한 것과 같이 이소말토올리고당을 실질적으로 포함하지 않는 것일 수 있다.Since the above-described glycotransferase is used, the oligosaccharide composed of glucose may be substantially free of isomaltooligosaccharide as described above.
상기 이소말토올리고당은 포도당과 과당 사이의 1,2-글리코시드 결합이 1,6-글리코시드 결합으로 재배치되는 효소 전환에 의해 생성되는 올리고당인 반면에, 본 출원의 상기 포도당으로 구성된 올리고당은 수크로오스와 말토오스가 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 또는 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 유래의 글루칸 수크라아제에 의해 프럭토오스(fructose, 과당)와 올리고당으로 전환되어 얻어지는 것일 수 있다. 이 때 형성되는 올리고당은 전술한 바와 같이 α-1,3 글리코시드 결합 및/또는 α-1,6 글리코시드 결합을 포함하는 올리고당을 포함할 수 있다.The isomaltooligosaccharide is an oligosaccharide produced by enzymatic conversion in which a 1,2-glycosidic bond between glucose and fructose is rearranged into a 1,6-glycosidic bond, whereas the oligosaccharide composed of glucose of the present application contains sucrose and Maltose may be obtained by converting fructose (fructose, fructose) and oligosaccharides by glucan sucrase derived from a microorganism of the genus Leuconostoc or a microorganism of the genus Leuconostoc . The oligosaccharide formed at this time may include an oligosaccharide including an α-1,3 glycosidic bond and/or an α-1,6 glycosidic bond as described above.
상기 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 또는 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 유래의 글루칸 수크라아제를 수크로오스를 포함하는 원료와 접촉하는 것은, 25℃, 26℃, 27℃, 28℃, 29℃, 30℃로부터 선택되는 하나의 하한선 및/또는 50℃, 49℃, 48℃, 47℃, 46℃, 45℃, 44℃, 43℃, 42℃, 41℃, 40℃로부터 선택되는 하나의 상한선으로 구성되는 범위의 온도에서 수행되는 것일 수 있다.The leuconostoc ( Leuconostoc ) genus microorganisms or Leuconostoc ) In contact with the glucan sucrase derived from microorganisms of the genus sucrose with a raw material containing sucrose, 25 ° C., 26 ° C., 27 ° C., 28 ° C., 29 ° C., with one lower limit selected from 30 °C and/or one upper limit selected from 50 °C, 49 °C, 48 °C, 47 °C, 46 °C, 45 °C, 44 °C, 43 °C, 42 °C, 41 °C, 40 °C It may be carried out at a temperature in the configured range.
또한 상기 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 또는 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 유래의 글루칸 수크라아제를 수크로오스를 포함하는 원료와 접촉하는 것은, 1 시간, 2 시간, 3 시간, 4 시간, 5 시간, 6 시간으로부터 선택되는 하나의 하한선 및/또는 18 시간, 17 시간, 16 시간, 15 시간, 14 시간, 13 시간, 12 시간으로부터 선택되는 하나의 상한선으로 구성되는 범위의 시간 동안 수행되는 것일 수 있다.In addition, the Leuconostoc genus microorganism or Leuconostoc genus The contact of the glucan sucrase derived from the microorganism with a raw material containing sucrose is 1 hour, 2 hours, 3 hours, 4 hours, 5 hours. , one lower limit selected from 6 hours and/or one upper limit selected from 18 hours, 17 hours, 16 hours, 15 hours, 14 hours, 13 hours, 12 hours. .
상기와 같은 온도 범위 및/또는 시간 범위를 만족하는 경우에, 포도당 전이 당류의 생산능이 우수해진다.When the above temperature range and/or time range are satisfied, the ability to produce glucose transfer saccharides is excellent.
그 외 상기 포도당으로 구성된 올리고당, 당류, 및/또는 올리고당 조성물에 관해서는, 전술한 내용이 동일하게 적용될 수 있다.In addition, with respect to the oligosaccharide, saccharide, and/or oligosaccharide composition composed of the glucose, the above description may be applied in the same manner.
이하, 실시예를 통해 본 출원을 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 출원의 이해를 돕기 위한 것일 뿐 어떠한 의미로든 본 출원의 범위가 이들 실시예로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present application will be described in more detail through examples. However, these examples are only for helping the understanding of the present application, and the scope of the present application is not limited to these examples in any sense.
<제조예 1> - 균주의 선별 및 동정<Preparation Example 1> - Selection and identification of strains
1. 균주의 선별 1. Selection of strains
당전이 효소 생성능이 우수한 균주를 분리하기 위하여 다양한 김치로부터 그 액즙을 단계별로 희석하여 분리용 수크로오스 고체배지에 접종하고 28℃에서 배양한 후, 생성된 집락(colony)으로부터 점성을 가지거나 큰 집락의 균주를 폴리사카라이드 생산 균주로 선별하였다. 이들 중에서 동정을 통해 류코노스톡(Leuconostoc) 속 균주로 확인된 약 545종을 도출하였다.In order to isolate strains with excellent glycotransferase-producing ability, the juices from various kimchi are diluted step by step, inoculated on a sucrose solid medium for separation, and cultured at 28°C. The strain was selected as a polysaccharide producing strain. Among them, about 545 species identified as Leuconostoc sp. strains were derived through identification.
545종의 균주에 대해 우수한 특성을 가진 균주를 선별하기 위해 당전이 효소 활성과 식이섬유 함량을 측정하였고, 비교를 위해 표준 균주(Leuconostoc mesenteroides NRRL B-1355, Appl Environ Microbiol. 1994 Aug; 60(8): 2723-2731.)를 대조군으로 이용하였다. 구체적으로 당전이 효소 고생산 균주의 선별은 MRS 배지(sucrose 20 g/L, Yeast extract 1.5g/L, Ammonium citrate 2g/L, dipotassium phosphate 2g/L, Tween80 1g/L, Magnesium sulfate heptahydrate 0.1g/L, pH 6.5±0.2)에 접종한 후 28℃, 180 rpm 조건에서 24 시간 동안 배양하고, 배양 상등액을 취하여 200 mM 수크로오스에 반응하면서 설탕분해속도 즉, 반응시간에 따른 과당 생성량을 HPLC로 정량 분석하였다.Glycotransferase activity and dietary fiber content were measured to select strains with excellent properties for 545 strains, and for comparison, standard strains ( Leuconostoc mesenteroides NRRL B-1355, Appl Environ Microbiol. 1994 Aug; 60 (8) ): 2723-2731.) was used as a control. Specifically, the screening of high-producing strains of glycotransferase is performed on MRS medium (sucrose 20 g/L, yeast extract 1.5 g/L, Ammonium citrate 2 g/L, dipotassium phosphate 2 g/L, Tween80 1 g/L, Magnesium sulfate heptahydrate 0.1 g/L L, pH 6.5±0.2), then incubated at 28°C and 180 rpm for 24 hours, and the culture supernatant was taken and reacted with 200 mM sucrose while quantitatively analyzing the sugar decomposition rate, that is, the amount of fructose production according to the reaction time by HPLC. did
(Leuconostoc sp.)strains
( Leuconostoc sp.)
*효소 활성 : 설탕분해 속도이며, 과당 생성량을 측정함.*Enzyme activity: It is the rate of sugar decomposition, and the amount of fructose production is measured.
**식이섬유 함량 : 소화효소 처리 후 HPLC DP3+ 잔존량을 측정함.** Dietary fiber content: Measure the residual amount of HPLC DP3+ after treatment with digestive enzymes.
상기 표 1에서 선별된 JY164은 당전이 효소활성 및 식이섬유 함량이 높아 얼터난 수크라아제(alternansucrase) 발현 비율이 상대적으로 우수한 것을 판단된다. 추가로 JY164의 높은 식이섬유 함량은 그대로 유지하면서 당전이 효소가 고발현되는 변이주를 개발하기 위하여, JY164에 UV 처리에 의한 물리적 변이법 및 EMS(Ethyl Methane Sulfonate)와 같은 알킬화제를 처리하는 화학적 변이법을 순차적으로 적용하여 돌연변이를 유발하고 변이주를 선별을 반복하였고, 당전이 효소 발현량이 현저히 개선된 류코노스톡 시트리움(Leuconostoc citreum) 2B11 균주를 개발하였다. JY164와 이로부터 변이된 균주인 2B11의 효소 활성 및 식이섬유 함량을 비교한 결과를 아래 표 2에 나타내었다.JY164 selected in Table 1 is judged to be relatively excellent in the expression rate of alternative sucrase (alternansucrase) due to high glycotransferase activity and dietary fiber content. In addition, in order to develop a mutant with high expression of glycotransferase while maintaining the high dietary fiber content of JY164, physical mutation by UV treatment and chemical mutation in JY164 processing an alkylating agent such as EMS (Ethyl Methane Sulfonate) was sequentially applied to induce mutations and repeated selection of mutants, and Leuconostoc citreum 2B11 strain with significantly improved glycotransferase expression level was developed. The results of comparing the enzyme activity and dietary fiber content of JY164 and the mutated strain 2B11 are shown in Table 2 below.
(효소 1유닛은 반응 조건 1분하에서 1mM의 프럭토오스를 수크로오스로부터 생산하는 효소의 능력을 의미한다.)(1 unit of enzyme means the ability of the enzyme to produce 1 mM fructose from sucrose under the reaction conditions for 1 minute.)
상기 표 2에 따르면, 본 출원에 따른 류코노스톡 시트리움(Leuconostoc citreum) 2B11 균주는 모균주인 야생형 류코노스톡 시트리움(Leuconostoc citreum) JY164에 비해 66배 이상 효소활성이 향상되는 것이 확인되었다.According to Table 2, it was confirmed that the leuconostoc citreum 2B11 strain according to the present application improves the enzyme activity by more than 66 times compared to the parent strain, wild-type leuconostoc citreum JY164.
2. CJ-2B11 균주의 동정 2. Identification of CJ-2B11 strain
선별된 균주들을 API 시스템(API System, La Balme-les-Grottes, France)으로 동정하였다.The selected strains were identified by the API system (API System, La Balme-les-Grottes, France).
16s rRNA 염기서열을 분석한 결과 서열번호 1의 16s rRNA가 도출되었으며, 상기 16s rRNA는 류코노스톡 시트리움(Leuconostoc citreum)과 99% 동일성을 가지는 것을 확인하여, 상기 균주는 류코노스특 시트리움(Leuconostoc citreum)임을 확인하였다.As a result of analyzing the 16s rRNA nucleotide sequence, 16s rRNA of SEQ ID NO: 1 was derived, and it was confirmed that the 16s rRNA has 99% identity with Leuconostoc citreum , and the strain is Leuconostoc citrium ( Leuconostoc citreum ) was confirmed.
본 출원에서는 상기 균주를 류코노스톡 시트리움 CJ-2B11(Leuconostoc citreum CJ-2B11) 균주로 명명하고, 이를 한국미생물보존센터(Korean Culture Center of Microorganisms, KCCM)에 2019년 9월 2일자로 기탁하였다(수탁번호: KCCM12588P).In the present application, the strain is leukonostok citrium It was named CJ-2B11 ( Leuconostoc citreum CJ-2B11) strain, and it was deposited at the Korean Culture Center of Microorganisms (KCCM) on September 2, 2019 (accession number: KCCM12588P).
<제조예 2> - 효소 용액의 제조<Preparation Example 2> - Preparation of enzyme solution
수크로오스 (70 g/L), 효모 추출물 (10 g/L), K2HPO4 (20 g/L), MgSO4·7H2O (0.10 g/L), MnSO4·2H2O (0.05 g/L), 및 CaCl2·2H2O (0.01 g/L)를 함유하는 배지상에서 류코노스톡 시트리움 CJ-2B11(Leuconostoc citreum CJ-2B11) 균주를 탄수화물이 소비될 때까지 28 내지 30℃에서 배양하고 pH를 6.0으로 조절하였다(10% NaOH 포함). 일단 탄소원이 고갈되면 12,200 xg, 4℃에서 30 분간 원심 분리하여 균주를 제거하였다. 배양 상등액을 한외 여과(ultrafiltration) 2,000 분자량 컷오프(100 kD MWCO) 멤브레인을 사용하여 10배의 효소 농축액 부피로 수득하였다. (물리적 돌연변이 유발에 의한 Leuconostoc citreum CJ-2B11 균주는 수크로오스 배지에서 성장할 때 글루칸 수크라아제를 발현한다.)Sucrose (70 g/L), yeast extract (10 g/L), K 2 HPO 4 (20 g/L), MgSO 4 .7H 2 O (0.10 g/L), MnSO 4 .2H 2 O (0.05 g /L), and CaCl 2 ·2H 2 O (0.01 g / L) on a medium containing Leuconostoc citreum CJ-2B11 ( Leuconostoc citreum CJ-2B11) strain at 28 to 30 ℃ until the carbohydrate is consumed. Incubated and the pH was adjusted to 6.0 (with 10% NaOH). Once the carbon source was depleted, the strain was removed by centrifugation at 12,200 x g, 4°C for 30 minutes. The culture supernatant was obtained in 10 times the volume of the enzyme concentrate using an ultrafiltration 2,000 molecular weight cutoff (100 kD MWCO) membrane. ( Leuconostoc citreum CJ-2B11 strain by physical mutagenesis expresses glucan sucraase when grown in sucrose medium.)
<실시예 1 내지 5> - 올리고당 조성물의 제조<Examples 1 to 5> - Preparation of oligosaccharide composition
수크로오스 건조 고형분:말토오스 건조 고형분의 중량비가 각각 1:1, 2:1, 3:1, 6:1, 13:1이 되도록 수크로오스(순도 98 중량% 이상, CJ제일제당) 및 옥수수 시럽(하이말토오스; 말토오스 함량 70 중량% 이상, CJ제일제당)을 혼합하여 얻어진 혼합 원료 기질을 증류수에 용해시켜서, 50 mL 뚜껑이 있는 폴리프로필렌 테스트 튜브에 담았다. 여기에 상기 제조예 2에 따른 효소 용액 1 IU/ml를 첨가하여, 최종 농도 50 중량%의 원료 용액을 제조하였다. 이를 40℃로 설정된 수조에 넣고, 12시간 동안 반응시킨 후, 각각의 튜브에서 올리고당 조성물 샘플을 얻었다.Sucrose (purity 98% by weight or more, CJ CheilJedang) and corn syrup (Himaltose) such that the weight ratio of sucrose dry solids:maltose dry solids is 1:1, 2:1, 3:1, 6:1, and 13:1, respectively. ; Maltose content of 70% by weight or more, CJ CheilJedang) was dissolved in distilled water, and the mixed raw material was dissolved in a polypropylene test tube with a 50 mL lid. Here, 1 IU/ml of the enzyme solution according to Preparation Example 2 was added to prepare a raw material solution having a final concentration of 50% by weight. This was placed in a water bath set at 40° C., and after reacting for 12 hours, samples of the oligosaccharide composition were obtained from each tube.
<실시예 6> - 올리고당 조성물의 제조<Example 6> - Preparation of oligosaccharide composition
상기 실시예 1 내지 5에서 수크로오스 건조 고형분:말토오스 건조 고형분의 중량비가 2:1이 되도록 혼합하고, 상기 제조예 2에 따른 효소 용액 대신 류코노스톡 속 유래의 덱스트란 수크라아제(Dextran Sucrase: D9909-10UN, Sigma-Aldrich Co.)를 이용하는 것을 제외하고는, 상기 실시예 1 내지 5와 동일한 방법으로 올리고당 조성물을 제조하였다.In Examples 1 to 5, the weight ratio of sucrose dry solids: maltose dry solids was mixed so that the weight ratio was 2:1, and instead of the enzyme solution according to Preparation Example 2, dextran sucrase derived from the leukonostok genus (D9909) An oligosaccharide composition was prepared in the same manner as in Examples 1 to 5, except that -10UN, Sigma-Aldrich Co.) was used.
<실시예 7> - 올리고당 조성물의 제조<Example 7> - Preparation of oligosaccharide composition
상기 실시예 1 내지 5에서 수크로오스 건조 고형분:말토오스 건조 고형분의 중량비가 2:1이 되도록 혼합하고, 제조예 2에 따른 효소 용액 대신 공지된 류코노스톡 메센테로이드(Leuconostoc mesenteroides) NRRL B-1355 유래의 얼터난 수크라아제를 이용하는 것을 제외하고는, 상기 실시예 1 내지 5와 동일한 방법으로 올리고당 조성물을 제조하였다.In Examples 1 to 5, the weight ratio of sucrose dry solids: maltose dry solids was mixed so that the weight ratio was 2:1, and instead of the enzyme solution according to Preparation Example 2, known leuconostoc mesenteroides ) derived from NRRL B-1355 An oligosaccharide composition was prepared in the same manner as in Examples 1 to 5, except that alternative sucrase was used.
<실험예 1><Experimental Example 1>
상기 실시예 1 내지 5의 올리고당 조성물 샘플의 중합도를 아래에 기술한 바와 같이 HPLC(High-Performance Liquid Chromatography)로 분석하여 그 결과를 하기 표 3에 나타내었고, 실시예 1 내지 3에 대한 HPLC 크로마토그램(chromatogram)을 도 1 내지 도 3에 나타내었다.The polymerization degree of the oligosaccharide composition samples of Examples 1 to 5 was analyzed by High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) as described below, and the results are shown in Table 3 below, and HPLC chromatograms for Examples 1 to 3 (chromatogram) is shown in FIGS. 1 to 3 .
효소 반응 올리고당 조성물 샘플을 HPLC에 주입하기 전, 5 내지 10 중량% 농도로 증류수에 희석하고, 0.20 미크론 필터로 여과하였다. 올리고당 분리는 85℃에서 2회 BioRad Aminex HPX-42A, 300X7.8 mm, 컬럼 (Hercules, CA)을 사용하고 굴절률 검출기를 사용하여 수행하였다. 용리액으로 물을 0.4 ml/min의 유속으로 사용하였다.Before injecting the enzyme-reacted oligosaccharide composition sample to HPLC, it was diluted in distilled water to a concentration of 5 to 10 wt%, and filtered through a 0.20 micron filter. Oligosaccharide separation was performed twice at 85°C using a BioRad Aminex HPX-42A, 300X7.8 mm, column (Hercules, CA) and a refractive index detector. Water was used as the eluent at a flow rate of 0.4 ml/min.
실험예 1에 따르면, 실시예 1 내지 3의 올리고당 조성물은 수크로오스의 혼합 비율이 상대적으로 낮아서, 중합도 6 이상(DP6+)의 올리고당 함량이 적고, 류크로오스(leucrose)의 함량이 적은 것을 확인할 수 있었다.According to Experimental Example 1, it was confirmed that the oligosaccharide compositions of Examples 1 to 3 had a relatively low mixing ratio of sucrose, so that the oligosaccharide content of the
실시예 6 및 7에서도 HPLC 결과 각각 DP3 내지 DP10+의 올리고당의 총합이 43.77, 50.56, 과당의 함량이 38.22, 38.69로 확인되었다.Also in Examples 6 and 7, as a result of HPLC, it was confirmed that the total sum of oligosaccharides of DP3 to DP10+ was 43.77 and 50.56, and the content of fructose was 38.22 and 38.69, respectively.
<실험예 2><Experimental Example 2>
상기 실시예 1 내지 5의 올리고당 조성물 샘플의 탁도를 아래와 같은 방법으로 측정한 결과를 하기 표 4에 나타내었다.Table 4 shows the results of measuring the turbidity of the oligosaccharide composition samples of Examples 1 to 5 by the following method.
탁도 측정법turbidity measurement
실시예 1 내지 5에서 제조한 올리고당 원액 1 mL을 탈이온수 9 mL에 첨가하여 10 mL로 정용하여 시료액으로 사용하였다. 시료용액 1 mL을 취하고 분광광도계(UV mini-1240, Shimadzu, Tokyo, Japan)를 이용하여 720 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과를 표 4에 표시하였다.1 mL of the oligosaccharide stock solution prepared in Examples 1 to 5 was added to 9 mL of deionized water, adjusted to 10 mL, and used as a sample solution. 1 mL of the sample solution was taken and absorbance was measured at 720 nm using a spectrophotometer (UV mini-1240, Shimadzu, Tokyo, Japan). The results are shown in Table 4.
(중량%)DP6 or higher content
(weight%)
(abs, 720 ㎚)turbidity
(abs, 720 nm)
실험예 2에 따르면, 실시예 1 내지 5의 올리고당 조성물은 탁도(흡광도, 720 ㎚)가 낮은 것을 확인할 수 있으며, 특히 실시예 1 내지 3의 올리고당 조성물의 경우에는, 중합도 6(DP6) 이상의 올리고당 함량이 낮고, 탁도(흡광도, 720 ㎚)가 낮은 것을 확인할 수 있어서, 백탁 현상을 현저하게 개선할 수 있고, 실질적으로 투명 시럽 생산이 가능함에 따라 상업적 생산 측면에서 매우 개선된 효과임을 확인할 수 있다.According to Experimental Example 2, it can be seen that the oligosaccharide compositions of Examples 1 to 5 have low turbidity (absorbance, 720 nm). In particular, in the case of the oligosaccharide compositions of Examples 1 to 3, the content of oligosaccharides with a polymerization degree of 6 (DP6) or more It can be confirmed that this is low and the turbidity (absorbance, 720 nm) is low, so that the cloudiness phenomenon can be remarkably improved, and it can be confirmed that it is a very improved effect in terms of commercial production as it is possible to produce substantially transparent syrup.
<실험예 3><Experimental Example 3>
상기 실시예 1 내지 5의 올리고당 조성물 및 종래 올리고당인 IMO(청정원 올리고당, (주)대상) 샘플 각각 1 mL를 10 μL의 알파 아밀라아제(Novozymes, NBSG4698)와 혼합하고 90 ℃에서 1 시간 동안 반응시켰다. 상기 혼합액을 1 M 아세테이트 완충액으로 pH 4.5로 조정한 후, 30 μL의 글루코 아밀라아제(Novozymes, AMS30092)와 혼합하여 60℃에서 1 시간 동안 반응시켰다. 소화 효소 처리 후, 100℃ 끊는 물에 5분간 중탕하여 반응을 중단시켰다. 알파 아밀라아제 및 글루코 아밀라아제 효소 가수 분해에 의한 잔존 올리고당(DP3~DP9) 함량은 BioRad Aminex HPX-42A 컬럼을 사용하여 HPLC로 측정하였으며, 0.4 ml/min 및 85 ℃에서 증류수를 이동상으로 사용하였다. 난소화성 올리고당(식이섬유)의 함량은 소화 효소 처리후의 잔존 올리고당의 함량(중량%)으로 표시하였다. 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.1 mL of each of the oligosaccharide compositions of Examples 1 to 5 and the conventional oligosaccharide IMO (Cheongjungone Oligosaccharide, Daesang Co., Ltd.) sample was mixed with 10 μL of alpha amylase (Novozymes, NBSG4698) and reacted at 90 ° C. for 1 hour. The mixture was adjusted to pH 4.5 with 1 M acetate buffer, mixed with 30 μL of glucoamylase (Novozymes, AMS30092), and reacted at 60° C. for 1 hour. After treatment with digestive enzymes, the reaction was stopped by bathing in boiling water at 100° C. for 5 minutes. Residual oligosaccharides (DP3-DP9) content by alpha-amylase and glucoamylase enzyme hydrolysis was measured by HPLC using a BioRad Aminex HPX-42A column, and distilled water was used as a mobile phase at 0.4 ml/min and 85 °C. The content of indigestible oligosaccharides (dietary fiber) was expressed as the content (% by weight) of residual oligosaccharides after treatment with digestive enzymes. The results are shown in Table 5 below.
실험예 3에 따르면, 실시예 1 내지 5의 올리고당 조성물은 기존 판매중인 IMO에 함유된 난소화성 올리고당(식이섬유)의 함량(6.09 중량%)에 비해 높은 함량의 난소화성 올리고당(식이섬유)을 포함하는 것을 확인하였다.According to Experimental Example 3, the oligosaccharide compositions of Examples 1 to 5 contained a high content of indigestible oligosaccharide (dietary fiber) compared to the content (6.09 wt%) of indigestible oligosaccharide (dietary fiber) contained in existing commercially available IMO. confirmed that
<실험예 4><Experimental Example 4>
상기 실시예 2, 실시예 4의 올리고당 조성물 샘플과, 종래 올리고당인 IMO(청정원 올리고당, (주)대상)에 대하여, 실험예 1과 같은 방법으로 중합도를 측정하여 하기 표 6에 나타내었고, 상기 실시예 2와 종래 올리고당인 IMO에 대해서 내산/내열 복합 안정성을 평가하여 그 결과를 도 4에 나타내었다. 내산/내열 복합안정성은 pH 2, 90℃에서 안정성 평가하여 초기 대비 잔존률(%)을 평가하였다.For the oligosaccharide composition samples of Examples 2 and 4, and the conventional oligosaccharide IMO (Cheongjeongwon Oligosaccharide, Daesang Co., Ltd.), the polymerization degree was measured in the same manner as in Experimental Example 1, and is shown in Table 6 below. For Example 2 and the conventional oligosaccharide, IMO, the acid/heat resistance composite stability was evaluated, and the results are shown in FIG. 4 . The acid/heat resistance composite stability was evaluated for stability at
실험예 4에 따르면, 본 출원의 올리고당 조성물은 종래의 IMO에 비하여 감미도가 개선되고, 바디감이 우수하고 단맛 강도 및 단맛 지속성이 향상될 수 있다.According to Experimental Example 4, the oligosaccharide composition of the present application may have improved sweetness, better body, and improved sweetness intensity and sweetness continuity compared to conventional IMO.
도 4에 따르면, 본 출원의 올리고당 조성물은 pH 2, 90℃의 가혹한 가공 조건에서도 중합도 3 이상(DP3+)의 올리고당 조성물의 잔존률이 90% 이상을 유지하고 있어서, 내산/내열 복합 안정성이 기존의 이소말토올리고당(IMO)과 동등한 수준인 것을 확인할 수 있다. 즉, 유가공품 등의 다양한 가공식품으로의 적용이 가능한 것을 확인할 수 있다.According to FIG. 4, in the oligosaccharide composition of the present application, the residual ratio of the oligosaccharide composition having a degree of polymerization of 3 or more (DP3+) is maintained at 90% or more even under severe processing conditions of
<실험예 5><Experimental Example 5>
상기 실시예 2의 올리고당 조성물 샘플과, 종래 올리고당인 IMO(청정원 올리고당, (주)대상), 전분당인 F55((주)CJ제일제당)에 대하여, 동일한 건조 고형분 15 중량%의 수용액으로 제조하여 감미도, 바디감, 단맛 지속성, 이미/이취, 텁텁함, 쓴맛에 관한 관능 프로파일을 비교 분석한 결과를 도 5 및 도 6에 나타내었다.For the oligosaccharide composition sample of Example 2, the conventional oligosaccharide IMO (Cheongjungone Oligosaccharide, Daesang Co., Ltd.), and the starch sugar F55 (CJ Cheiljedang Co., Ltd.), an aqueous solution having the same dry solid content of 15 wt% was prepared. 5 and 6 show the results of comparative analysis of sensory profiles with respect to sweetness, body feeling, sweetness continuity, off-flavor, bitterness, and bitterness.
관능 평가sensory evaluation
훈련된 전문 패널 15명을 대상으로 강도 속성 6항목(단맛, 바디감, 단맛 지속성, 이미/이취, 텁텁함, 쓴맛), 기호도 속성 2항목(단맛 기호도, 전반기호도)을 평가Evaluated 6 intensity attributes (sweetness, body feeling, sweetness continuity, off-flavor, bitterness, bitter taste) and 2 preference attributes (sweetness preference, overall preference) targeting 15 trained professional panelists
도 5 및 도 6에 따르면, 본 출원의 올리고당 조성물은 전분당(F55, 액상과당)과 대비하여 단맛 지속성과 바디감이 우수한 것을 확인할 수 있었고, 이소말토올리고당(IMO)과 대비하여 감미도가 우수하고, 중량평균분자량이 더 커서 바디감이 풍부해지며, 단맛 지속성이 향상되고, 난소화성 올리고당의 함량이 높아서 텁텁함이 낮고, 이미, 이취는 줄어드는 것을 확인할 수 있었다.According to FIGS. 5 and 6, it was confirmed that the oligosaccharide composition of the present application had superior sweetness continuity and body feeling compared to starch sugar (F55, high fructose sugar), and had excellent sweetness compared to isomaltooligosaccharide (IMO), It has been confirmed that the weight average molecular weight is larger, so the body is richer, the sweetness continuity is improved, the content of indigestible oligosaccharides is high, so the stuffiness is low, and already, the off-flavor is reduced.
<실험예 6><Experimental Example 6>
상기 실시예 2의 올리고당 조성물 샘플과, 종래 올리고당인 IMO(청정원 올리고당, (주)대상), 전분당인 F55((주)CJ제일제당)에 대하여, 동일한 건조 고형분 70 Brix의 수용액으로 제조하여 온도별 점도를 비교 분석한 결과를 도 7에 나타내었다. For the oligosaccharide composition sample of Example 2, the conventional oligosaccharide IMO (Cheongjungone Oligosaccharide, Daesang Co., Ltd.), and the starch sugar F55 (CJ Cheiljedang Co., Ltd.), the same dry
점도 평가viscosity evaluation
상기 실시예 2의 올리고당, IMO, 및 F55 샘플을 각 42 g씩 담았다.Each of the oligosaccharides, IMO, and F55 samples of Example 2 were put in each of 42 g.
160 rpm에서 온도를 25℃에서 70℃까지 점진적으로 올리면서 10분 간격으로 점도계(Rapid visco analyser, PerkinElmer사)를 이용하여 점도를 측정하였다.Viscosity was measured using a viscometer (Rapid visco analyzer, PerkinElmer) at intervals of 10 minutes while gradually raising the temperature from 25°C to 70°C at 160 rpm.
도 7에 의하면, 실시예 2의 올리고당은 IMO, 및 F55 대비 점도가 약간 상승한 것을 볼 수 있었으나 유의적인 차이가 나타나지 않았다.Referring to FIG. 7 , the viscosity of the oligosaccharide of Example 2 was slightly increased compared to IMO and F55, but there was no significant difference.
즉, 종래 올리고당인 IMO, F55 대비 실시예 2의 올리고당이 가공성 측면에서 유사하거나 더 개선된 것을 확인하였다.That is, it was confirmed that the oligosaccharide of Example 2 was similar or improved in terms of processability compared to the conventional oligosaccharides IMO and F55.
<110> CJ CheilJedang Corporation <120> Oligosaccharide Composition and Preparation Method of Oligosaccharide Composition <130> 2018-DPCJ-3075 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1300 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Leuconostoc citreum CJ-2B11 <400> 1 gaacgggtga gtaacacgtg gataacctgc ctcaaggctg gggataacat ttggaaacag 60 atgctaatac cgaataaaac ttagtatcgc atgatataaa gttaaaaggc gctacggcgc 120 cacctagaga tggatccgcg gtgcattagt tagttggtgg ggtaaaggct taccaagaca 180 atgatgcata gccgagttga gagactgatc ggccacattg ggactgagac acggcccaaa 240 ctcctacggg aggctgcagt agggaatctt ccacaatggg cgcaagcctg atggagcaac 300 gccgcgtgtg tgatgaaggc tttcgggtcg taaagcactg ttgtatggga agaaatgcta 360 aaatagggaa tgattttagt ttgacggtac cataccagaa agggacggct aaatacgtgc 420 cagcagccgc ggtaatacgt atgtcccgag cgttatccgg atttattggg cgtaaagcga 480 gcgcagacgg ttgattaagt ctgatgtgaa agcccggagc tcaactccgg aatggcattg 540 gaaactggtt aacttgagtg ttgtagaggt aagtggaact ccatgtgtag cggtggaatg 600 cgtagatata tggaagaaca ccagtggcga aggcggctta ctggacaaca actgacgttg 660 aggctcgaaa gtgtgggtag caaacaggat tagataccct ggtagtccac accgtaaacg 720 atgaatacta ggtgttagga ggtttccgcc tcttagtgcc gaagctaacg cattaagtat 780 tccgcctggg gagtacgacc gcaaggttga aactcaaagg aattgacggg gacccgcaca 840 agcggtggag catgtggttt aattcgaagc aacgcgaaga accttaccag gtcttgacat 900 cctttgaagc ttttagagat agaagtgttc tcttcggaga caaagtgaca ggtggtgcat 960 ggtcgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaaccctt 1020 attgttagtt gccagcattc agttgggcac tctagcgaga ctgccggtga caaaccggag 1080 gaaggcgggg acgacgtcag atcatcatgc cccttatgac ctgggctaca cacgtgctac 1140 aatggcgtat acaacgagtt gccaacctgc gaaggtgagc taatctctta aagtacgtct 1200 cagttcggac tgcagtctgc aactcgactg cacgaagtcg gaatcgctag taatcgcgga 1260 tcagcacgcc gcggtgaata cgttcccggg tcttgtacac 1300 <110> CJ CheilJedang Corporation <120> Oligosaccharide Composition and Preparation Method of Oligosaccharide Composition <130> 2018-DPCJ-3075 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1300 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Leuconostoc citreum CJ-2B11 <400> 1 gaacgggtga gtaacacgtg gataacctgc ctcaaggctg gggataacat ttggaaacag 60 atgctaatac cgaataaaac ttagtatcgc atgatataaa gttaaaaggc gctacggcgc 120 cacctagaga tggatccgcg gtgcattagt tagttggtgg ggtaaaggct taccaagaca 180 atgatgcata gccgagttga gagactgatc ggccacattg ggactgagac acggcccaaa 240 ctcctacggg aggctgcagt agggaatctt ccacaatggg cgcaagcctg atggagcaac 300 gccgcgtgtg tgatgaaggc tttcgggtcg taaagcactg ttgtatggga agaaatgcta 360 aaatagggaa tgattttagt ttgacggtac cataccagaa agggacggct aaatacgtgc 420 cagcagccgc ggtaatacgt atgtcccgag cgttatccgg atttattggg cgtaaagcga 480 gcgcagacgg ttgattaagt ctgatgtgaa agcccggagc tcaactccgg aatggcattg 540 gaaactggtt aacttgagtg ttgtagaggt aagtggaact ccatgtgtag cggtggaatg 600 cgtagatata tggaagaaca ccagtggcga aggcggctta ctggacaaca actgacgttg 660 aggctcgaaa gtgtgggtag caaacaggat tagataccct ggtagtccac accgtaaacg 720 atgaatacta ggtgttagga ggtttccgcc tcttagtgcc gaagctaacg cattaagtat 780 tccgcctggg gagtacgacc gcaaggttga aactcaaagg aattgagggg gacccgcaca 840 agcggtggag catgtggttt aattcgaagc aacgcgaaga accttaccag gtcttgacat 900 cctttgaagc ttttagagat agaagtgttc tcttcggaga caaagtgaca ggtggtgcat 960 ggtcgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaaccctt 1020 attgttagtt gccagcattc agttgggcac tctagcgaga ctgccggtga caaaccggag 1080 gaaggcgggg acgacgtcag atcatcatgc cccttatgac ctgggctaca cacgtgctac 1140 aatggcgtat acaacgagtt gccaacctgc gaaggtgagc taatctctta aagtacgtct 1200 cagttcggac tgcagtctgc aactcgactg cacgaagtcg gaatcgctag taatcgcgga 1260 tcagcacgcc gcggtgaata cgttccggg tcttgtacac 1300
Claims (13)
상기 류코노스톡 속 미생물은 류코노스톡 시트리움 CJ-2B11(KCCM 12588P)이고,
상기 올리고당 조성물은 중합도 6 이상의 올리고당을 상기 당류 100 중량부 기준으로 2 내지 40 중량부로 포함하는, 올리고당 조성물의 제조방법.Contacting a raw material containing sucrose and maltose with glucan sucrose derived from a microorganism of the genus Leuconostoc or a microorganism of the genus Leuconostoc to produce an oligosaccharide composition containing saccharides,
The leukonostok genus microorganism is leukonostok citrium CJ-2B11 (KCCM 12588P),
The method for producing an oligosaccharide composition, wherein the oligosaccharide composition comprises 2 to 40 parts by weight of an oligosaccharide having a polymerization degree of 6 or higher based on 100 parts by weight of the saccharide.
상기 말토오스는 물엿, 옥수수 시럽 및 하이말토오스 중에서 선택되는 적어도 하나에서 유래되는 것인 올리고당 조성물의 제조방법.10. The method of claim 9,
The maltose is a method for producing an oligosaccharide composition derived from at least one selected from starch syrup, corn syrup and high maltose.
상기 올리고당 조성물은 포도당으로 구성된 올리고당을 포함하는 것인 올리고당 조성물의 제조방법.10. The method of claim 9,
The oligosaccharide composition is a method for producing an oligosaccharide composition comprising an oligosaccharide composed of glucose.
상기 포도당으로 구성된 올리고당은,
상기 수크로오스 및 말토오스를 포함하는 원료가 상기 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 또는 류코노스톡(Leuconostoc) 속 미생물 유래의 글루칸 수크라아제에 의해서 효소 전환되어 얻어지는 것인 올리고당 조성물의 제조방법.12. The method of claim 11,
The oligosaccharide composed of the glucose is
A method for producing an oligosaccharide composition, wherein the raw material containing the sucrose and maltose is obtained by enzymatic conversion by the glucan sucrase derived from the microorganisms of the genus Leuconostoc or the genus Leuconostoc .
상기 포도당으로 구성된 올리고당은 α-1,3 글리코시드 결합과 α-1,6 글리코시드 결합이 교대로 연결된 올리고당을 포함하는 것인 올리고당 조성물의 제조방법.
12. The method of claim 11,
The method for producing an oligosaccharide composition, wherein the oligosaccharide composed of glucose comprises an oligosaccharide in which α-1,3 glycosidic bonds and α-1,6 glycosidic bonds are alternately linked.
Priority Applications (2)
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