KR102379534B1 - 인지질 조성 및 미세기포와 이를 이용하여 형성된 유탁액 - Google Patents
인지질 조성 및 미세기포와 이를 이용하여 형성된 유탁액 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102379534B1 KR102379534B1 KR1020177000514A KR20177000514A KR102379534B1 KR 102379534 B1 KR102379534 B1 KR 102379534B1 KR 1020177000514 A KR1020177000514 A KR 1020177000514A KR 20177000514 A KR20177000514 A KR 20177000514A KR 102379534 B1 KR102379534 B1 KR 102379534B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- dppe
- composition
- lipid
- peg
- dppc
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 140
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 title claims abstract description 14
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 title claims description 40
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 124
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims abstract description 8
- NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N fluoromethane Chemical compound FC NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine zwitterion Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 0.000 claims description 72
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 69
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 claims description 67
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 35
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 25
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 23
- 229960004065 perflutren Drugs 0.000 claims description 16
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 14
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 claims description 10
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims description 9
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 3
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 claims 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 abstract description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 48
- SORGEQQSQGNZFI-UHFFFAOYSA-N [azido(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)(N=[N+]=[N-])OC1=CC=CC=C1 SORGEQQSQGNZFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 31
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 31
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 23
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 18
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 16
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 15
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 12
- 239000000463 material Substances 0.000 description 12
- 229960004692 perflenapent Drugs 0.000 description 12
- NJCBUSHGCBERSK-UHFFFAOYSA-N perfluoropentane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F NJCBUSHGCBERSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 10
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 10
- -1 cationic lipid Chemical class 0.000 description 9
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 9
- WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 1-oleoyl-sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 0.000 description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 8
- 208000008035 Back Pain Diseases 0.000 description 7
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- KAVGMUDTWQVPDF-UHFFFAOYSA-N perflubutane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F KAVGMUDTWQVPDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229950003332 perflubutane Drugs 0.000 description 7
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 7
- TXEYQDLBPFQVAA-UHFFFAOYSA-N tetrafluoromethane Chemical compound FC(F)(F)F TXEYQDLBPFQVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 6
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 229910018503 SF6 Inorganic materials 0.000 description 5
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 5
- PYLIXCKOHOHGKQ-UHFFFAOYSA-L disodium;hydrogen phosphate;heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O PYLIXCKOHOHGKQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 239000002961 echo contrast media Substances 0.000 description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 210000000478 neocortex Anatomy 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 229960000909 sulfur hexafluoride Drugs 0.000 description 5
- 125000004080 3-carboxypropanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C(O[H])=O 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 150000003841 chloride salts Chemical class 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 4
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- UJMWVICAENGCRF-UHFFFAOYSA-N oxygen difluoride Chemical class FOF UJMWVICAENGCRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960004624 perflexane Drugs 0.000 description 4
- ZJIJAJXFLBMLCK-UHFFFAOYSA-N perfluorohexane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F ZJIJAJXFLBMLCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 4
- BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogenphosphate monohydrate Chemical compound O.[Na+].OP(O)([O-])=O BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- SFZCNBIFKDRMGX-UHFFFAOYSA-N sulfur hexafluoride Chemical compound FS(F)(F)(F)(F)F SFZCNBIFKDRMGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229920001774 Perfluoroether Polymers 0.000 description 3
- FVJZSBGHRPJMMA-DHPKCYQYSA-N [(2r)-3-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-2-octadecanoyloxypropyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC FVJZSBGHRPJMMA-DHPKCYQYSA-N 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 3
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 3
- FIJGNIAJTZSERN-DQQGJSMTSA-N monogalactosyl-diacylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCC)CO[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O FIJGNIAJTZSERN-DQQGJSMTSA-N 0.000 description 3
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- NOPJRYAFUXTDLX-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,2,3,3-heptafluoro-3-methoxypropane Chemical compound COC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F NOPJRYAFUXTDLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 2
- KWVJHCQQUFDPLU-YEUCEMRASA-N 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC KWVJHCQQUFDPLU-YEUCEMRASA-N 0.000 description 2
- 208000002513 Flank pain Diseases 0.000 description 2
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N diphosphatidyl glycerol Natural products OP(O)(=O)OCC(OP(O)(O)=O)COP(O)(O)=O FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- UKACHOXRXFQJFN-UHFFFAOYSA-N heptafluoropropane Chemical compound FC(F)C(F)(F)C(F)(F)F UKACHOXRXFQJFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- PGISRKZDCUNMRX-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,2,3,3,4,4-nonafluoro-4-(trifluoromethoxy)butane Chemical compound FC(F)(F)OC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F PGISRKZDCUNMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKIYQFLILPKULA-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,2,3,3,4,4-nonafluoro-4-methoxybutane Chemical compound COC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F OKIYQFLILPKULA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TWKUPTMUBKZFFA-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,2,3,3,4,5,5,5-undecafluoro-4-(1,1,1,2,3,3,4,4,5,5,5-undecafluoropentan-2-yloxy)pentane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(C(F)(F)F)OC(F)(C(F)(F)F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F TWKUPTMUBKZFFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYAUGTZMGLUNPS-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-2-(1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropan-2-yloxy)propane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(C(F)(F)F)OC(F)(C(F)(F)F)C(F)(F)F OYAUGTZMGLUNPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRXXERHTOVVTQF-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-2-methoxypropane Chemical compound COC(F)(C(F)(F)F)C(F)(F)F HRXXERHTOVVTQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YFMFNYKEUDLDTL-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)C(F)(F)F YFMFNYKEUDLDTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKIMETXDACNTIE-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-dodecafluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F RKIMETXDACNTIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GQUXQQYWQKRCPL-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3-hexafluorocyclopropane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C1(F)F GQUXQQYWQKRCPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GENIHGGFTRFSOL-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3-pentafluoro-3-[1,1,2,2-tetrafluoro-2-[1,1,2,2-tetrafluoro-2-(1,2,2,3,3-pentafluorocyclopropyl)ethoxy]ethyl]cyclopropane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C1(F)C(F)(F)C(F)(F)OC(F)(F)C(F)(F)C1(F)C(F)(F)C1(F)F GENIHGGFTRFSOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VLYOFMUTBJDSGM-UHFFFAOYSA-N 1-[[difluoro-(1,2,2,3,3,4,4-heptafluorocyclobutyl)methoxy]-difluoromethyl]-1,2,2,3,3,4,4-heptafluorocyclobutane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)C(F)(F)OC(F)(F)C1(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F VLYOFMUTBJDSGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIWXPZSAOANLDR-UHFFFAOYSA-N 1-[[difluoro-(1,2,2,3,3-pentafluorocyclopropyl)methoxy]-difluoromethyl]-1,2,2,3,3-pentafluorocyclopropane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C1(F)C(F)(F)OC(F)(F)C1(F)C(F)(F)C1(F)F DIWXPZSAOANLDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DWBHMRMQBRPSRL-UHFFFAOYSA-N 2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-decafluorooxane Chemical compound FC1(F)OC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F DWBHMRMQBRPSRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NAJAHADUYXILNQ-UHFFFAOYSA-N 2,2,3,3,4,4,5-heptafluoro-5-(trifluoromethyl)oxolane Chemical compound FC(F)(F)C1(F)OC(F)(F)C(F)(F)C1(F)F NAJAHADUYXILNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 0.000 description 1
- DJXNLVJQMJNEMN-UHFFFAOYSA-N 2-[difluoro(methoxy)methyl]-1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropane Chemical compound COC(F)(F)C(F)(C(F)(F)F)C(F)(F)F DJXNLVJQMJNEMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FXZRSKONALWPBZ-UHFFFAOYSA-N 2-[difluoro-[1,1,3,3,3-pentafluoro-2,2-bis(trifluoromethyl)propoxy]methyl]-1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-(trifluoromethyl)propane Chemical compound FC(F)(F)C(C(F)(F)F)(C(F)(F)F)C(F)(F)OC(F)(F)C(C(F)(F)F)(C(F)(F)F)C(F)(F)F FXZRSKONALWPBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RMFXYVDVYHFRRQ-UHFFFAOYSA-N 2-ethoxy-1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropane Chemical compound CCOC(F)(C(F)(F)F)C(F)(F)F RMFXYVDVYHFRRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001312 Amalgam (dentistry) Inorganic materials 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000003688 G-Protein-Coupled Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000045 G-Protein-Coupled Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000008930 Low Back Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical class [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N Sodium cation Chemical compound [Na+] FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 125000004057 biotinyl group Chemical group [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 150000001841 cholesterols Chemical class 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 239000000448 dental amalgam Substances 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N dimethyl(dioctadecyl)azanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 235000021463 dry cake Nutrition 0.000 description 1
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 1
- 102000006815 folate receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020005243 folate receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- WMIYKQLTONQJES-UHFFFAOYSA-N hexafluoroethane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)F WMIYKQLTONQJES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 239000000819 hypertonic solution Substances 0.000 description 1
- 229940021223 hypertonic solution Drugs 0.000 description 1
- 239000012216 imaging agent Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- QLOAVXSYZAJECW-UHFFFAOYSA-N methane;molecular fluorine Chemical compound C.FF QLOAVXSYZAJECW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- TZBAVQKIEKDGFH-UHFFFAOYSA-N n-[2-(diethylamino)ethyl]-1-benzothiophene-2-carboxamide;hydrochloride Chemical compound [Cl-].C1=CC=C2SC(C(=O)NCC[NH+](CC)CC)=CC2=C1 TZBAVQKIEKDGFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- ABCVHPIKBGRCJA-UHFFFAOYSA-N nonyl 8-[(8-heptadecan-9-yloxy-8-oxooctyl)-(2-hydroxyethyl)amino]octanoate Chemical compound OCCN(CCCCCCCC(=O)OC(CCCCCCCC)CCCCCCCC)CCCCCCCC(=O)OCCCCCCCCC ABCVHPIKBGRCJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BCCOBQSFUDVTJQ-UHFFFAOYSA-N octafluorocyclobutane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F BCCOBQSFUDVTJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019407 octafluorocyclobutane Nutrition 0.000 description 1
- 238000003921 particle size analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000009894 physiological stress Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 1
- 239000012905 visible particle Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
- A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
- A61K49/223—Microbubbles, hollow microspheres, free gas bubbles, gas microspheres
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
- A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
- A61K49/227—Liposomes, lipoprotein vesicles, e.g. LDL or HDL lipoproteins, micelles, e.g. phospholipidic or polymeric
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Acoustics & Sound (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
Abstract
플루오르화탄소 유탁액의 안정화를 위한 조성물로서, 그러한 조성물은 포스파티딜콜린(phosphatidylcholine), 포스파티딜에탄올아민(phosphatidylethanolamine)-PEG 및 원추상 지질을 포함한다.
Description
인지질 조성이 공개되어 있다. 특정 실시 예에서는 인지질 조성을 초음파 조영제("USCA")로 사용할 수 있으나, 이 경우 USCA는 장기 보관 수명과 환자의 내약성을 저해한다.
초음파 조영제(USCA)는 초음파 영상의 진단 정확도를 향상시키기 위해 사용된다. 또한 USCA는 뇌졸중 및 심장발작의 치료에 유용한 초음파혈전용해술과 같은 요법의 공동 핵(cavitation nuclei)으로도 사용되어 왔다. 그러나 현재, USCA의 주 용도는 진단이다.
한 가지 선행기술 초음파조영제는 현재 DEFINITY라는 상표로 시판되고 있다. DEFINITY는 "DPPC"(dipalmitoylphosphatidylcholine), dipalmitoylphosphatidylethanolamine-PEG(5,000)("DPPE-PEG5,000") 및 "DPPA"(dipalmitoylphosphatidic acid)로 이루어진 인지질계 초음파 조영제이다.
DEFINITY의 보관 수명은 4-8℃에서 2년이다. 지질의 가수분해는 제품열화의 주 원인이다. DEFINITY를 임상적으로 이용하는 경우 요통의 부작용을 유발하는 것으로 알려져 있다. DEFINITY의 처방 정보는 약 1.2%의 환자에게서 요통이 나타난다는 것을 명시적으로 보여준다. 그러한 요통이 나타나는 경우, 그 부작용은 환자에게 매우 불편할 수 있으며 30분 또는 1시간까지 지속될 수 있다.
본 발명의 목적은 인지질 조성 및 미세기포와 이를 이용하여 형성된 유탁액을 제공하는 것에 있다.
출원인의 조성은 플루오르화탄소의 미세기포 및 유탁액의 안정화에 유용한 중성 pH(즉, pH = 7.0)에서 실질적으로 중성 전하인 다수의 지질로 구성되어 있다. 이 제제형은 phosphatidylcholine과 페그화(PEG'ylated) 지질 및 원추상 지질인 세 번째 지질로 이루어져 있다. 일부 실시 예에서는, 원추상 지질이 phosphatidylethanolamine이다. 이 제제형은 향상된 보관 안정성과 부작용 감소 경향을 보이는 유탁액과 미세기포를 생성할 수 있다. 일부 실시예에서는, 이관능성 페그화 지질인 네 번째 지질이 출원인의 조성에 포함될 수도 있다. 출원인의 조성으로 준비된 미세기포와 유탁액의 나노입자는 전반적으로 중성 전하이기 때문에, 그러한 미세기포/유탁액은 생물학적으로 적절한 에피토프 및 생물표지자를 목표로 하는 향상된 특성을 이룬다.
본 발명은 다음과 같은 그림과 참조 지정자를 사용하여 원소가 지정되어 있는 도면과 함께 아래의 상세한 설명을 읽어보면 이해를 한층 더 제고할 수 있을 것이다:
그림 1은 다양한 pH에서 dipalmitoylphosphatidic acid의 이온화를 보여준다;
그림 2에는 원추상 지질과 원통형 지질이 예시되어 있다;
그림 3에는 두 가지 다른 제제형에 대한 입자크기 측정이 도표로 예시되어 있다;
그림 4에는 콜레스테롤이 함유된 조성에 대한 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 5에는 팔미트산이 함유된 조성에 대한 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 6에는 MVT-100 및 DEFINITY 등가물의 입자 수 대 입자 직경이 도표로 예시되어 있다;
그림 7에는 다양한 희석제 비율에 대한 DEFINITY 등가물과 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 8에는 다양한 희석제 비율에 대한 DEFINITY 등가물과 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 9에는 다양한 희석제 비율에 대한 DEFINITY 등가물과 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 10에는 세 가지의 지질과 다양한 희석제의 비율에 대한 DEFINITY 등가물과 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 11에는 DPPA가 포함된 DEFINITY 등가물과 DPPA 대신에 DPPE가 함유된 MVT-100에 대한 안정성 데이터가 도표로 예시되어 있다;
그림 12에는 각각의 제제형에 원추상 지질과 결합된 양이온성 지질이 포함되어 있는 두 가지 제제형과 양이온성 지질이 원추상 지질인 DPPE를 대체하는 세 번째 제제형에 대하여 측정된 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 13에는 활성화 후 4분이 경과한 시점의 Draw# 대비 명시된 각각의 제제형에 대한 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 14에는 활성화 후 4분이 경과한 시점의 82 몰 백분율 DPPC, 10 몰 백분율 DSTAP 및 8 몰 백분율 DPPE-M PEG-5K 제제형에 대한 미세기포 크기 데이터가 도표로 예시되어 있다;
그림 15에는 활성화 후 64분이 경과한 시점의 Draw# 대비 명시된 각각의 제제형에 대한 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 16에는 활성화 후 64분이 경과한 시점의 82 몰 백분율 DPPC, 10 몰 백분율 DSTAP 및 8 몰 백분율 DPPE-M PEG-5K 제제형에 대한 미세기포 크기 데이터가 도표로 예시되어 있다;
그림 17에는 Definity 등가물이 MVT-100에 비해 3배 이상의 잔여 미세기포가 신피질에 축적된, 신피질의 잔여 미세기포와 관련된 초음파 영상 데이터가 도표로 나와있다.
그림 1은 다양한 pH에서 dipalmitoylphosphatidic acid의 이온화를 보여준다;
그림 2에는 원추상 지질과 원통형 지질이 예시되어 있다;
그림 3에는 두 가지 다른 제제형에 대한 입자크기 측정이 도표로 예시되어 있다;
그림 4에는 콜레스테롤이 함유된 조성에 대한 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 5에는 팔미트산이 함유된 조성에 대한 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 6에는 MVT-100 및 DEFINITY 등가물의 입자 수 대 입자 직경이 도표로 예시되어 있다;
그림 7에는 다양한 희석제 비율에 대한 DEFINITY 등가물과 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 8에는 다양한 희석제 비율에 대한 DEFINITY 등가물과 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 9에는 다양한 희석제 비율에 대한 DEFINITY 등가물과 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 10에는 세 가지의 지질과 다양한 희석제의 비율에 대한 DEFINITY 등가물과 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 11에는 DPPA가 포함된 DEFINITY 등가물과 DPPA 대신에 DPPE가 함유된 MVT-100에 대한 안정성 데이터가 도표로 예시되어 있다;
그림 12에는 각각의 제제형에 원추상 지질과 결합된 양이온성 지질이 포함되어 있는 두 가지 제제형과 양이온성 지질이 원추상 지질인 DPPE를 대체하는 세 번째 제제형에 대하여 측정된 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 13에는 활성화 후 4분이 경과한 시점의 Draw# 대비 명시된 각각의 제제형에 대한 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 14에는 활성화 후 4분이 경과한 시점의 82 몰 백분율 DPPC, 10 몰 백분율 DSTAP 및 8 몰 백분율 DPPE-M PEG-5K 제제형에 대한 미세기포 크기 데이터가 도표로 예시되어 있다;
그림 15에는 활성화 후 64분이 경과한 시점의 Draw# 대비 명시된 각각의 제제형에 대한 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다;
그림 16에는 활성화 후 64분이 경과한 시점의 82 몰 백분율 DPPC, 10 몰 백분율 DSTAP 및 8 몰 백분율 DPPE-M PEG-5K 제제형에 대한 미세기포 크기 데이터가 도표로 예시되어 있다;
그림 17에는 Definity 등가물이 MVT-100에 비해 3배 이상의 잔여 미세기포가 신피질에 축적된, 신피질의 잔여 미세기포와 관련된 초음파 영상 데이터가 도표로 나와있다.
본 발명은 번호가 동일하거나 유사한 원소를 나타내는 그림에 관한 다음의 설명으로 최선 실시 예에 설명되어 있다. 본 명세서 전반에 언급되어 있는 "한 가지 실시 예(one embodiment)," "어느 실시 예(an embodiment)" 또는 유사한 문구는 실시 예와 관련하여 기술되어 있는 특정 기능, 구조 또는 특성이 본 발명의 최소 한 가지 실시 예에 포함되어 있음을 의미한다. 따라서, 본 명세서 전반에 나오는 "한 가지 실시 예에서(in one embodiment)," "어느 실시 예에서(in an embodiment)" 및 유사한 문구는 모두 경우에 해당되지는 아닐지라도 동일한 실시 예를 지칭할 수 있다.
본 발명에 명시되어 있는 특징, 구조 또는 특성을 한 가지 이상의 실시 예에서 적절한 방식으로 조합할 수 있다. 다음의 설명에는, 발명의 실시 예에 대한 완전한 이해를 제고하기 위해 다양한 구체적인 세부내역이 열거되어 있다. 그러나 관련 기술에 능통한 사람은 한 가지 이상의 구체적인 세부내역 없이도 본 발명을 실시하거나 다른 방법, 구성요소, 재질 등으로 실시할 수 있을 것이다.
그 외 다른 경우에는 발명의 불명료한 측면을 피하기 위해, 주지의 구조, 재료 또는 작업 과정이 상세하게 나와있지 않거나 기술되어 있지 않다.
일부 실시 예에서는, 출원인의 인지질 조성이 하나 이상의 실질적으로 중성 전하인 인지질을 구성하며, 이 경우 출원인의 인지질 조성을 구성하는 지질 코팅 미세기포 형성 유탁액은 보관 안정성을 향상시키며, 출원인의 미세기포 형성 유탁액에서 형성된 지질 코팅 미세기포는 임상적으로 이용할 때 요통과 같은 생물학적 효과와 관련이 있다. 일부 실시 예에서는, 출원인의 한 가지 이상의 인지질이 전반적으로 중성 전하인 쌍성 이온성 화합물을 구성한다.
일부 실시 예에서는, 출원인의 인지질 조성이 "DPPC"(dipalmitoylphosphatidylcholine), phospholipid l을 구성한다. DPPC는 쌍성 이온성 화합물로서, 실질적으로 중성 인지질이다.
1
일부 실시 예에서는, 출원인의 인지질 조성이 350 톨턴 이상인 다가헤드기(head group/headgroup)를 이루는 두 번째 인지질 2를 구성하며, 이 경우 M+ 은 Na+, K+, Li+ 및 NH4 +로 이루어진 기에서 선택된다.
2
일부 실시 예에서는, 출원인의 인지질 2 가 나트륨 양이온 및 인산기 부분과 결합된 글리세롤 헤드기로 이루어진 인지질 3 을 구성한다.
3
인지질 4는 암모늄 반대이온 및 인산기 부분과 결합된 "PEG"(polyethylene glycol) 헤드기를 구성한다. 일부 실시 예에서는, 출원인의 조성이 페그화 지질을 구성한다. 일부 실시 예에서, PEG 기의 분자량(MW)은 약 1,000-10,000 돌턴이다. 일부 실시 예에서는, PEG 기의 MW가 약 2,000-5,000 돌턴이다. 일부 실시 예에서는, PEG 기의 MW가 약 5,000 돌턴이다.
일부 실시 예에서는, 출원인의 지질 조성에 다음 중 한 가지 이상의 페그화지질이 포함되어 있다: 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N- [methoxy(polyethylene glycol)-1000] (암모늄 염), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-1000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-1000] (암모늄 염), 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-1000] (암모늄 염), 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N- [methoxy(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-dioleoyl-sn-glycero- 3-phosphoethanolamine-N-[ methoxy(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-3000] (암모늄 염), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[ methoxy(polyethylene glycol)-3000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N[methoxy(polyethylene glycol)-3000] (암모늄 염), 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-3000] (암모늄 염), 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N- [methoxy(polyethylene glycol)-5000] (암모늄 염), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-5000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-5000] (암모늄 염) 및 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[ methoxy(polyethylene glycol)-5000] (암모늄 염).
4
5
위에 나와있는 인지질 5는 DPPE(dipalmitoylphosphatidylethanolamine)를 나타낸다. PE, 특히 DPPE는 본 발명에 바람직한 지질이며 5-20 몰 백분율(10 몰 백분율이 가장 적절)의 농도인 여타 제제형에 바람직하다.
일부 실시 예에서는, 출원인의 인지질 조성에 포스파티딘산 6 ("DPPA")이 함유되어 있지 않다.
6
관련 기술에 능통한 사람들이 이해하듯이, DPPA는 두 개의 산성 양성자로 이루어져 있다. 두 번째 산성 양성자의 pKa는 약 7.9이다. 그림 1에는 pH의 함수인 DPPA의 이온화가 도표로 설명되어 있다. 곡선 110은 존재하는 단일 음이온 6 의 백분율을 나타내며, 곡선 120은 존재하는 이음이온 7 의 백분율을 나타낸다. 약 4 이상의 pH에서, 단일음이7과이음이온8을 합친 백분율은총 100이다.
7
8
약 7.9의 pH에서, DPPA는 약 50%의 단일 음이온 7과 약 50%의 이음이온 8로 이루어져 있다. 약 7.0의 pH에서는, DPPA가 약 85%의 단일 음이온 7과 약 15%의 이음이온 8로 이루어져 있다.
포스파티드산 DPPA는 여타 지질의 생합성에 전구물질로 사용되거나, 그 생물리학적 특성을 이용하여 소포 분열/융합을 촉진하며 신호 지질의 기능을 하는 등 세포의 기능에 여러 가지 역할을 한다. 모노아실 유도체인 LPA(lysophosphatidic acid)는 고친화성 G단백질 결합 수용체(이전의 EDG2, EDG4 및 EDG7이었던 LPA1, LPA2 및 LPA3과 최근에 확인된 LPA4, LPA5 및 LPA6)의 활성화를 통해 잠재적인 신호 분자의 역할을 한다. DPPA로 이루어진 선행 기술 인지질 조성(예: DEFINITY)은 노화되고 DPPA의 가수분해가 일어나며, 모노아실 유도체의 존재가 증가하여 임상적 이용에서 바람직하지 않은 생물학적 효과를 더 크게 유발할 수 있다.
표 1에는 DPPA로 이루어진 인지질 조성을 4-8?C에서 보관할 때의 안정성이 나와있다. 개별 지질 성분의 비율은 선행 기술 제품인 DEFINITY에 사용된 비율이다. 저온 보관 38 개월 후에 DPPC의 방출 수준은 여전히 86.4%이다. DPPE-PEG 5,000은 방출 수준이 81.6%이며 DPPA는 방출 수준이 78.4%이다.
그러나 48 개월 후에, DPPA는 그 사양 이하로 내려가는 반면에 DPPC 및 DPPE-PEG는 사양 내로 유지되었다. 출원인은 포스파티드산 DPPA가 DPPA와 결합된 다수의 인지질로 이루어진 인지질 조성의 냉장 보관 안정성에 대한 제한 인자임을 확인하였다. 아울러, 출원인은 여타 지질이 DPPA가 없는 제제형에서 보다 안정적임을 발견하였다. DPPA는 제제형의 지질 가수분해를 촉진하거나 촉매 작용을 하는 것으로 보인다.
| 시험 파라미터 | 보관 수명 사양 |
시점 | ||||
| 방출 | 14 개월 |
38 개월 |
||||
| 외관 (n = 6) | 균일하게 투명하거나 반투명, 무색, 액체 | 합격 |
합격 |
합격 |
||
| 미립자 (n = 6) | 가시 입자가 없을 것 | 합격 | 합격 | 합격 | ||
| pH (n =2) | 5.5 - 7.5 | 7.00 | 7.01 | 7.02 | ||
| 옥타플루오로프로판 분석 (mg/ml) (n=5) | ≥5.5 mg/ml | 7.60 | 6.91 | 6.619 | ||
| 지질 분석 (mg/ml) (n=2) | DPPC | 0.864 - 1.296 | 1.116 | 1.090 | 0.964 | |
| DPPE-MPEG 5000 | 0.640 - 0.960 | 0.881 | 0.815 | 0.719 | ||
| DPPA | 0.096 - 0.144 | 0.125 | 0.109 | 0.098 | ||
| 총 지질 (mg/ml) | 1.60 - 2.40 | 2.12 | 2.01 | 1.781 | ||
| 입도 분포 (입자/ml) (n = 6) |
0.56 ㎛ ~ 1.06 ㎛ | 보고 전용 | 2.65E+1 | 1.95E+1 | 8.21E+0 | |
| 1.06 ㎛ ~ 2.03 ㎛ | ≥ 1.0 X 108 | 8.lOE+0 | 6.96E+0 | 3.96E+0 | ||
| 2.03 ㎛ ~ 5.99 ㎛ | ≥ 1.0 X 107 | 6.00E+0 | 4.38E+0 | 2.62E+0 | ||
| 5.99 ㎛ ~ 10.27 ㎛ | 보고 전용 | 6.96E+0 | 4.96E+0 | 1.75E+0 | ||
| ≥ 10.27 ㎛ | ≤ 5.0 X 108 | 4.40E+0 | 4.20E+0 | 2.85E+0 | ||
| 계 | 보고 전용 | 3.52E+1 | 2.69E+1 | 1.24E+1 | ||
| 내독소 | ≤ 80 EU/vial | 합격 | NR | NR | ||
| 무균성 | 무균 | 합격 | NR | 합격 | ||
DPPA는 미세기포의 잠재적 응집을 방지하기 위해 선행 기술 인지질계 영상 작용제에 포함되었다. DPPA의 이음이온성 구조는 지질 코팅 미세기포의 정전기 척력을 증가시켜, 그로 인해 미세기포 응집 가능성을 줄이는 것으로 여겨졌다.
놀랍게도, 출원인은 DPPA가 없는 다수의 인지질에서 준비된 지질 코팅 미세기포가 바람직하지 않은 응집을 일으키지 않는다는 것을 발견하였다. 아울러, DPPA가 없는 한 가지 이상의 인지질에서 준비된 지질 코팅 미세기포는 입자 크기가 DEFINITY와 유사하다.
일부 실시 예에서는, 출원인의 인지질 조성이 주사 현탁액을 구성한다. 출원인의 주사제 조성용 바이알은 활성화 시에 플루오르화탄소 가스를 캡슐화하는 다수의 인지질 코팅 미세구를 생성한다. 이러한 인지질 코팅 미세구는 특정 지시 초음파 심박동 기록기 절차의 조영 증강을 위해 사용되는 진단약을 구성한다.
출원인의 인지질 조성은 투명한 무색, 무균의 비발열성 고장액을 구성하며, 활성화 시에 플루오르화탄소 가스를 캡슐화하는 인지질 코팅 미세구의 균질한 불투명 젖빛 주사 현탁액을 제공한다. 일부 실시 예에서, 그 현탁액은 정맥 주사로 투여된다.
이제 그림 2와 관련하여, 일부 실시 예에서 출원인의 발명에는 하나 이상의 원추상 또는 육각형 HII를 형성하는 지질이 포함되어 있다. 본 발명에 유용한 지질 210과 같은 원추상 지질로는 MGDG(monogalactosyldiacylglycerol), MGDG(monoglucosyldiacylglycerol), 카르디올리핀이라고도 하는 DPG(diphosphatidylglycerol), PS(phosphatidylserine), PE(phosphatidylethanolamine) 및 diacylglycerol 등이 있다. 포스파티드산(PA) 역시 원추상 지질이지만, 가수분해 성향과 생물학적 효과를 유발할 가능성 때문에 적합하지 않다. 가장 바람직한 원추상 인지질은 PE(phosphatidylethanolamine)이다.
원추상 지질 210은 헤드기 212에서 바깥쪽으로 연장된 펜던트기 214에 비해 더 적은 체적을 차지하는 헤드기 212를 구성한다.
원통형 지질 220은 헤드기 222에서 바깥쪽으로 연장된 펜던트기 224에 의해 정의된 체적과 유사한 체적을 차지하는 헤드기 222를 구성한다. 또한, 출원인은 양이온성, 즉당해 양이온성 지질의 헤드기가 꼬리보다 작을 경우에는 양이온성, 즉 양전하 지질을 원추상 지질로 사용할 수 있다는 것을 발견하였다.
잠재적으로 유용한 원추상 양이온성 지질의 예로는 1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium-propane (염화물 염), 1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium-propane (황산메틸 염), 1,2-dimyristoyl-3-trimethylammonium-propane (염화물 염), 1,2-dipalmitoyl-3-trimethylammonium-propane (염화물 염), 1,2-distearoyl-3-trimethylammonium-propane (염화물 염), 1,2-dioleoyl-3-dimethylammonium-propane, 1,2-dimyristoyl-3-dimethylammonium-propane, 1,2-dipalmitoyl-3-dimethylammonium-propane, 1,2-distearoyl-3-dimethylammonium-propane, Dimethyldioctadecylammonium 및 1,2-di-O-octadecenyl-3-trimethylammonium propane (염화물 염), 0,0-di-O-octadecenyl-3-ta-trimethylammonioacetyl-diethanolamine 등이 있으며, 이에 국한되지 않는다.
이제 그림 3과 관련하여, 발명자는 세 번째 지질(원추상 지질, 특히 DPPE)로 준비된 미세기포가 이러한 세 번째 지질이 없는 제제형에 비해 더 나은 미세기포 안정성과 기포 수를 제공한다는 것을 발견하였다. 원추상 지질은 약 5-20 몰 백분율의 농도, 보다 바람직하게는 약 8-15 몰 백분율의 농도이며 가장 바람직하게는 제제형의 총 지질이 약 10 %인 제제형 내에 제공되어 있다.
그림 3에 나와있는 바와 같이, DPPA가 없는 제제형과 원추상 지질이 없는 제제형. 일례로, 0.75 mg/ml의 지질 조성을 이루는 제제형은 아주 적은 미세기포를 생성한다. 1.50 mg/ml의 지질 조성을 이루는 제제형은 Definity 등가물과 유사한 미세기포 입자 수를 생성하지 못하였다.
일부 실시 예에서는, 출원인의 인지질 조성이 (R)-4-hydroxy-N,N,N-trimethyl-10-oxo-7-[(l-oxohexadecyl)oxy]-3,4,9-trioxa-4-phosphapentacosan-l-aminium, 4-oxide, 분자 내염(예: DPPC)와 (R)-a-[6- hydroxy-6-oxido-9-[(1-oxohexadecyl)oxy]5,7,ll-trioxa-2-aza-6-phosphahexacos-l-yl]-w-methoxypoly(ox-1,2-ethanediyl), 일나트륨 염(예: DPPE PEG5000), 지질 5를 포함하는 인지질 4 DPPE로 이루어진 지질 외각에 캡슐화된 octafluoropropane을 구성한다.
DPPE-PEG5000의 분자량은 약 5750 돌턴이다.
mL 단위의 투명한 주사 수액에는 0.75 mg의 지질 혼합물(0.046 mg DPPE, 0.400 mg DPPC 및 0.304 mg MPEG5000-DPPE로 구성), 103.5 mg의 propylene glycol, 126.2 mg의 glycerin, 2.34 mg의 sodium phosphate monobasic monohydrate, 2.16mg의 sodium phosphate dibasic heptahydrate 및 4.87 mg의 sodium chloride가 함유되어 있다. pH는 6.2-6.8이다.
활성화 후에, 플루오르화탄소 가스를 캡슐화하는 출원인의 인지질 코팅 미세구의 각 mL 단위는 본질적으로 최대 1.2 X 1010의 지질 코팅 미세구와 약 150 microL/mL(1.1 mg/mL) octafluoropropane으로 이루어진 유백색 현탁액을 구성한다. 미세구 입자 크기 파라미터는 아래에 명시되어 있으며, DEFINITY의 파라미터와 동일하다:
평균 입자크기 1.1-3.3 mm
10 ㎛ 미만인 입자 98%
최대 직경 20 ㎛
출원인의 인지질 조성과 선행 기술 DEFINITY 제품의 정량적인 조성 비교는 아래 표 2에 나와있다.
일부 실시 예에서는 출원인의 인지질 조성에 DPPA가 전혀 포함되지 있지 않으며 등몰의 DPPE 양이 DPPA로 대체되었다는 점을 제외하고, 출원인의 인지질 조성이 DEFINITY와 동일하다. 지질 혼합물의 여타 성분(DPPC, DPPE PEG5000 및 DPPE)은 총 지질 혼합물을 0.75 mg으로 유지하기 위해 비례적으로 증가시켰다.
| 출원인의 조성 | DEFINITY |
| Octafluoropropane 활성화 전: 바이알 윗공간 활성화 후: 지질 미세구의 1.1 mg/mL |
Octafluoropropane 활성화 전: 바이알 윗공간 활성화 후: 지질 미세구의 1.1 mg/mL |
| 0.75 mg 지질 혼합물 (0.046 mg DPPE, 0.400 mg DPPC 및 0.304 mg MPEG5000-DPPE로 구성) | 0.75 mg 지질 혼합물 (0.045 mg DPPA, 0.401 mg DPPC 및 0.304mg MPEG5000-DPPE로 구성) |
| 103.5 mg propylene glycol | 103.5 mg propylene glycol |
| 126.2 mg glycerin | 126.2 mg glycerin |
| 2.34 mg sodium phosphate monobasic monohydrate | 2.34 mg sodium phosphate monobasic monohydrate |
| 2.16 mg sodium phosphate dibasic heptahydrate | 2.16 mg sodium phosphate dibasic heptahydrate |
| 4.87 mg sodium chloride | 4.87 mg sodium chloride |
| NaOH 또는 HCl로 pH를 6.2 - 6.8로 조정 | NaOH 또는 HCl로 pH를 6.2 - 6.8로 조정 |
| Qs to 1 mL | Qs to 1 mL |
네 번째 지질의 경우, 이관능성 페그화(PEG'ylated) 지질을 이용할 수 있다. 이관능성 페그화 지질로는 DSPE-PEG(2000) Succinyl 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N- (암모늄 염), DSPE-PEG(2000) Maleimide l,2-distearoly-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[maleimide(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), DSPE-PEG(2000) Biotin 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[maleimide(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), DSPE-PEG(2000) Cyanur 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[cyanur(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), DSPE-PEG(2000) Amine 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[amino(polyethyleneglycol)-2000] (암모늄 염), DPPE-PEG(5,000)-maleimide, 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanoIamine-N-[dibenzocyclooctynyl (polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), l,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N- [azido(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[succinyl(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[carboxy(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[ maleimide(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[PDP(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[amino(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[biotinyl(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3- phosphoethanolamine-N-[cyanur(polyethylene glycol)-2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[folate(polyethylene glycol)- 2000] (암모늄 염), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[folate(polyethylene glycol)-5000] (암모늄), N-palmitoyl-sphingosine-1-{succinyl[methoxy(polyethylene glycol)2000]} 및 N-palmitoyl-sphingosine-1-{succinyl[methoxy(polyethylene glycol)5000]} 등이 있으며, 이에 국한되지 않는다.
이관능성 지질은 항체, 펩티드, 비타민, 당펩티드 및 여타 표적 리간드를 미세기포에 부착하는 데 사용할 수도 있다. PEG 사슬의 MW는 세 번째 지질에서 약 1,000-5,000 돌턴으로 달라질 수 있다. 일부 실시 예에서는, PEG 사슬 MW가 약 2,000-5,000 돌턴이다.
본 발명에 사용된 지질의 지질 사슬은 길이가 약 14-20개 탄소로 다를 수 있다. 가장 바람직한 사슬 길이는 약 16-18개 탄소이다. 사슬은 포화 또는 불포화 상태일 수 있지만 포화 상태가 바람직하다. 또한 중성이거나 생물학적 환경으로부터의 전하를 차폐하기 위해 음전하와 병치된 약 350 MW 이상의 헤드기가 음전하에 포함되어 있을 경우, 콜레스테롤 및 콜레스테롤 유도체를 본 발명에 사용할 수 있다.
다양한 실시 예에서, 미세기포 중자 가스는 질소, 산소, sulfur hexafluoride, perfluoropropane, perfluorobutane, perfluoropentane, perfluorohexane 또는 그 혼합물이다. 영상 및 약물 전달의 목적상, 이상적인 미세기포 중자 가스는 체온미만의 비등점과 결부된 수용해도가 낮다. 이로 인해 미세기포의 순환 기간과 가용 수명이 길어지며, 에코 발생 품질이 우수해진다.
출원인의 기체 전구물질로는 perfluorocarbon, sulfur hexafluoride, perfluoro ethers 및 그 화합물 등이 있다. 숙련된 기술자는 이해할 수 있듯이, sulfur hexafluoride, perfluorocarbon 또는 perfluoro ether와 같은 특정 플루오르화 화합물이 조성을 처음 제조할 때 액체 상태로 존재할 수 있으며, 따라서 기체 전구물질로 사용된다. 플루오르화 화합물이 액체인지 여부는 일반적으로 그 액체/기체상 전이 온도 또는 비등점에 따라 결정된다. 일례로, 바람직한 perfluorocarbon, perfluoropentane의 액체/기체상 전이 온도(비등점)는 29.5℃이다. 이는 perfluoropentane이 일반적으로 실온(약 25℃)에서 액체이지만, 정상 온도가 perfluoropentane의 전이 온도 이상인 약 37℃의 인체 내에서는 기체로 변환된다는 것을 의미한다. 따라서 정상 상황 하에서는, perfluoropentane이 기체 전구물질이다. 이 기술에 능통한 사람에게 알려져 있듯이, 물질의 유효 비등점은 물질이 노출되는 압력과 관련이 있을 수 있다. 이 관계는 이상 기체 법칙의 예가 된다: PV=nRT, 여기서 P는 압력, V는 체적, n은 물질의 몰, R은 기체 상수, T온도 (단위: ?K)이다. 이상 기체 법칙은 압력이 증가하면 유효 비등점도 증가함을 나타낸다. 번대로, 압력이 감소하면, 유효 비등점도 감소한다.
본 발명의 조성에 기체 전구물질로 사용되는 fluorocarbon은 부분 또는 전체가 플루오르화된 탄소, 바람직하게는 포화, 불포화 또는 주기성 perfluorocarbon 등이 있다. 일례로 바람직한 perfluorocarbon으로는 perfluoromethane, perfluoroethane, perfluoropropane, perfluorocyclopropane, perfluorobutane, perfluorocyclobutane, perfluoropentane, perfluorocylcopentane, perfluorohexane, perfluorocyclohexane 및 그 혼합물이 있다. 보다 바람직한 perfluorocarbon은 perfluorohexane, perfluoropentane, perfluoropropane 또는 perfluorobutane이다.
바람직한 에테르로는 부분 또는 전체가 플루오르화된 에테르, 바람직하게는 비등점이 약 36℃-60℃인 과불화 에테르가 있다.
불화 에테르는 하나 이상의 수소 원자가 불소 원자로 대체된 에테르이다. 본 발명에 기체 전구물질로 사용하기에 적절한 과불화 에테르로는 예를 들면 perfluorotetrahydropyran, perfluoromethyltetrahydrofuran, perfluorobutylmethyl ether(예: perfluoro t-butylmethyl ether, perfluoro isobutyl methyl ether, perfluoro n-butyl methyl ether), perfluoropropylethyl ether(예: perfluoro isopropyl ethyl ether, perfluoro n-propyl ethyl other), perfluorocyclobutylmethyl ether, perfluorocyclopropylethyl ether, perfluoropropylmethyl ether(예: perfluoro isopropyl methyl ether, perfluoro n-propyl methyl ether), perfluorodiethyl ether, perfluorocyclopropylmethyl ether, perfluoromethylethyl ether 및 perfluorodimethyl ether 등이 있다.
그 외 다른 바람직한 perfluoroether 유사물질에는 4-6 개의 탄소 원자가 포함되어 있으며, 선택적으로 하나의 할로겐, 되도록이면 브롬이 포함될 수 있다. 일례로, Cn Fy Hx OBr의 구조인 화합물(여기서 n은 1-6의 정수, y는 0-13의 정수, x는 0-13의 정수)은 기체 전구물질로 유용하다.
본 발명에 기체 전구물질로 사용하기에 적절한 그 외 다른 플루오르화 화합물은 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropane 및 그 이성질체, 1,1,2,2,3,3,3-heptafluoropropane을 포함한 sulfur hexafluoride 및 heptafluoropropane이다. 플루오르화 화합물의 혼합물(예: perfluorocarbon 또는 perfluoroether)과 같은 화합물과 또 다른 유형의 기체 또는 기체 전구물질의 혼합물도 본 발명의 조성에 사용할 수도 있다. 그 외 다른 기체 및 기체 전구물질은 이 기술에 능통한 사람들에게 널리 알려져 있다.
일반적으로, 적합한 기체 전구물질은 약 57℃까지의 온도, 즉 약 20℃-52℃ 온도, 바람직하게는 약 37℃-50℃, 보다 바람직하게는 약 38℃-48℃, 그 보다 더 바람직하게는 38℃-46℃, 한층 더 바람직하게는 약 38℃-44℃, 그 보다 한층 더 바람직하게는 약 38℃-42℃의 온도에서 기체로의 상 전이를 거친다. 가장 바람직하게는, 기체 전구물질이 약 40℃ 미만의 온도에서 기체로의 상 전이를 거친다. 이 기술에 능통한 기술자들이 인정하듯이, 특정 용례에 사용되는 기체 전구물질의 최적 상 전이 온도는일례로 특정 환자, 대상 조직, 온도 증가를 유발하는 생리학적 스트레스 상태의 특성(예: 질환, 감염 또는 염증 등), 사용된 안정화 물질/투여되는 생물제제 등과 같은 고려사항에 따라 좌우될 것이다.
또한, 이 기술에 능통한 기술자는 화합물의 상 전이 온도가 국소 압력(예: 세포내 압력, 세포간 압력 또는 부위의 기타 압력)과 같은 조직 내의 국소 조건에 따라 영향을 받는다는 것을 인정할 것이다. 일례로 조직 내의 압력이 주변 압력보다 높을 경우, 이로 인해 상 전이 온도가 상승할 것으로 예상된다. 이러한 영향의 정도는 샤를의 법칙 및 보일의 법칙과 같은 표준 기체 법칙으로 추정할 수 있을 것이다. 근사치로, 액체-기체 상 전이 온도가 약 30℃-50℃인 화합물은 25 mm Hg 단위로 압력이 증가할 때 상 전이 온도가 약 1℃ 증가할 것으로 예상할 수 있다. 일례로 약 760 mm Hg의 표준 압력에서 perfluoropentane의 액체-기체 상 전이 온도(비등점)는 29.5℃이지만, 795 mm Hg의 세포내 압력에서는 비등점이 약 30.5℃이다.
본 서에 설명되어 있는 기체 전구물질의 안정화에 쓰이는 물질도 기체 전구물질의 상 전이 온도에 영향을 미칠 수 있다. 일반적으로, 안정화 물질은 기체 전구물질의 상 전이 온도를 증가시킬 것으로 예상된다. 특히, polycyanomethacrylate와 같이 비교적 강성인 중합체 물질은 기체 전구물질의 상 전이 온도에 상당한 영향을 미칠 수 있다. 기체 전구물질과 안정화 물질을 선택할 때는 반드시 이러한 영향을 고려해야 한다. 기체 전구물질/기체는 조성의 물리적 특성에 무관하게 안정화 물질/소수포에 우선적으로 포함된다.
따라서, 기체 전구물질/기체는 일례로 유탁액, 분산 또는 현탁액과 같이 안정화 물질이 무작위로 응집되는 안정화 물질 외에도 미셀 및 리포솜과 같이 지질에서 형성되는 소수포에 포함될 수 있을 것으로 여겨진다. 안정화물질/소수포에 기체/기체 전구물질을 포함시키는 방법은 매우 다양하다.
용어 "안정(stable)" 또는 "안정화(stabilized)"는 일례로 소수포 구조 또는 캡슐화된 기체/기체 전구물질/생리활성 물질의 상실과 같은 열화에 대하여 유효 기간 동안 소수포가 상당한 내성을 지닐 수 있음을 의미한다. 일반적으로, 본 발명에 사용된 소수포는 보관 수명이 길며, 정상 분위기 조건 하에서 적어도 약 2-3주 동안 원래 구조의 체적 대비 최소 약 90% 이상을 흔히 유지한다. 바람직한 형태의 소수포는 최소 약 1 개월 동안 안정적이며, 보다 바람직하게는 최소 약 2 개월, 보다 더 바람직하게는 최소 약 6 개월, 그 보다 더 바람직하게는 최소 약 18 개월, 훨씬 더 바람직하게는 최소 약 3 년 동안 안정적이다. 기체/기체 전구물질로 충전된 소수포를 비롯하여 본 서에 설명되어 있는 소수포는 정상적인 분위기 조건 하에서 노출되는 온도 및 압력 이상이거나 미만인 가혹한 조건 하에서도 안정적일 수 있다.
본 발명에 유용한 기체가 아래의 표 3에 나와있다.
| 화합물 | 분자량 | 수용해도 (오스트발트 계수) | 비등점 ?C |
| 질소 | 28 | 18071 | -196 |
| 산소 | 32 | 4865 | -183 |
| Sulfur Hexafluoride | 146 | 5950 | -64 |
| Perfluoropropane | 188 | 583 | -36.7 |
| Perfluorobutane | 238 | <500 | -1.7 |
| Perfluoropentane | 288 | >24 ~ <500 | 29 |
| Perfluorohexane | 338 | 24 | 56.6 |
다음의 예는 이 기술에 능통한 기술자들이 본 발명을 활용하는 방법을 보다 자세히 설명한다. 그러한 이러한 예는 본 발명의 적용범위를 제한하는 취지가 아니다.
예 1
propylene glycol에 DPPC 및 DPPE-MPEG-5000이 함유된 지질 혼합물을 부유시켜 지질의 혼합물을 준비하였다. propylene glycol의 지질이 완전히 용해될 때까지 지질 현탁액을 65±5℃로 가열하였다. 그런 다음 지질 용액을 염화나트륨, 인산염 완충액 및 글리세롤이 함유된 수용액에 추가하고 서서히 저으면서 완전히 혼합시켰다. 그 결과로 얻은 지질 혼합물의 ml 단위에는 0.75 mg의 총 지질(0.43 mg DPPC 및 0.32 mg DPPE-MPEG-5000으로 구성)이 포함되어 있었다. 또한 ml 단위의 주사 수액용 지질 혼합물에는 103.5 mg의 propylene glycol, 126.2 mg의 glycerin, 2.34 mg의 sodium phosphate monobasic rnonohydrate, 2.16 mg의 sodium phosphate dibasic heptahydrate와 4.87 mg의 sodium chloride도 포함되어 있었다. pH는 6.2-6.8이었다. 이 물질을 밀봉 바이알에 넣고 윗공간에는 OFP(octafluoropropane) 가스(>80%)와 공기로 채웠다.
본 출원서의 이전 및 후속 부분에 명시된 제제형으로 생성된 미세기포의 입도 분포 및 농도 측정은 다음과 같은 방식으로 수행하였다. VialMix 수정 치과용 아말감혼합기를 사용하여 바이알을 활성화시키고 4 분 간 방치한 다음, 적절한 용기에 소량의 미세기포 현탁액을 여과 생리식염수로 희석하였다. 미세기포 용액의 활성화 및 희석(l x E-6) 후에, 128 채널의 Nicomp 780 (입도분포 측정 시스템) 샘플링을 사용하여 미세기포 입도 분포를 측정하였다. 본 출원서에 명시된 지질 제제형에서 얻은 미세기포 입도 분포의 측정 결과를 Definity 등가물 표준용액과 비교하였다. 이 표준용액에는 단락 [00058]에 명시된 중성 제제형과 동일한 완충 조용매 식염수에 용해된 약 82 mol% DPPC, 10 mol% DPPA 및 8 mol% DPPE-MPEG-5000이 함유되어 있다.
예 2 - 다른 제제형의 준비
표 4에 나와있는 바와 같이 DPPC : DPPE-MPEG-5K의 몰 백분율 비를 총 0.75 mg/ml 기준으로 91.16:8.84에서 94.00:6.00으로 조절하였으며, 표 4에 나와있는 바와 같이 92.55:7.45일 때가 더 안정적이었다. 안정성은 활성화 후 바이알의 불투명도에 근거하였다.
| 제제형 | DPPC | MPEG-5K-DPPE | 총 지질 |
| 01 | 91.16 | 8.84 | 0.75 (mg/ml) |
| 02 | 92.00 | 8.00 | 0.75 (mg/ml) |
| 03 | 92.55 | 7.44 | 0.75 (mg/ml) |
| 04 | 94.00 | 6.00 | 0.75 (mg/ml) |
또한 propylene glycol과 glycerol의 체적 백분율도 0에서 20%로 조절하였으며, 이 때 두 지질 혼합물이 가장 안정적이었다. 이는 미세기포 안정성에 아무런 영향을 미치지 않았다.
콜레스테롤이 함유된 지질 혼합물은 표 5 및 표 6에 나와있다. 0.75 및 1.50 mg/ml 총 지질에서 콜레스테롤, DPPC 및 DPPE-MPEG-5000이 함유된 지질 혼합물 제제형은 Definity 표준 제제형보다 낮은 미세기포 농도를 보였다 (그림 4). 콜레스테롤이 함유된 네 가지 제제형 중에서, 81 mol% DPPC, 11 mol% DPPE-MPEG-5000 및 8% 콜레스테롤이 함유된 지질 혼합물은 가장 높은 미세기포 농도를 보였다.
그림 5와 관련하여, 팔미트산, DPPC 및 DPPE-MPEG-5000이 함유된 제제형은 한결같이 DPPC 및 DPPE-MPEG-5000만이 함유된 제제형보다 더 높은 미세기포 농도를 보였다. Definity 표준용액에 비교하였을 때, 이러한 제제형은 건강 위험을 야기할 수 있는 더 큰 입자 크기의 기포 농도가 더 높았다. 기타 성분을 두 지질 혼합물에 추가하여 미세기포의 이입도 분포 및 농도를 최적화시켰다. 이러한 부형제에는 스테아르산, Pluronic F68 및 DSPG(1,2- Distearoyl-sn-glycero-3-phosphoglycerol)가 포함되어 있었다. DSPG 및 스테아르산이 함유된 제제형은 DPPC 및 DPPE-MPEG-5000이 함유된 제제형보다 높은 미세기포 농도를 보였지만, DPPE가 함유된 제제형에 미칠 정도는 아니었다 (예 3 참조). 두 지질 혼합물에 추가된 Pluronic F68은미세기포의 농도를 현저히 증가시키지 않았다.
| MOL % 지질 | 미세기포 평균 입도 | |||||
| 제제형 | DPPC | DPPE-MPEG-5K | 콜레스테롤 | Vol Wt | Num Wt | |
| 13 | 80.93 | 7.88 | 10.55 | 0.75 mg/ml | 76.28 | 1.09 |
| 18 | 81.53 | 7.92 | 10.57 | 1.50 mg/ml | 77.93 | 1.58 |
| 20 | 77.22 | 7.45 | 15.32 | 1.50 mg/ml | 38.54 | 1.80 |
| 22 | 77.22 | 7.45 | 15.32 | 0.75 mg/ml | 435.67 | 1.87 |
| MOL % LIPID | 미세기포 평균 입도 | |||||
| 제제형 | DPPC | DPPE-MPEG-5K | 콜레스테롤 | Vol Wt | Num Wt | |
| 17 | 80.93 | 7.88 | 11.19 | 0.75 mg/ml | 432.26 | 0.89 |
| 19 | 80.53 | 7.88 | 11.19 | 0.50 mg/ml | 23.04 | 0.89 |
| 21 | 73.16 | 6.61 | 20.23 | 0.75 mg/ml | 12.60 | 0.88 |
| 23 | 73.16 | 6.61 | 23.23 | 1.50 mg/ml | 389.41 | 0.93 |
예 3
MVT-100(DPPE가 함유된 제제형)의 준비
예 1에 명시된 방법과 유사한 방법을 사용하여 DPPC, DPPE 및 DPPE-MPEG-5000이 함유된 지질 혼합물을 준비하였다. propylene glycol에 부유시킨 지질을 용해될 때까지 70±5℃로 가열하였다. 그런 다음 지질 용액을 염화나트륨, 인산염 완충액 및 글리세롤이 함유된 수용액에 추가하고 저으면서 완전히 혼합시켰다. 그 결과로 얻은 지질 혼합물의 각 ml 단위에는 0.75 mg의 총 지질(0.400 mg DPPC, 0.046 mg DPPE 및 0.32 mg MPEG-5000-DPPE로 구성)이 포함되어 있었다. 또한 주사 수액 지질 혼합물의 각 ml 단위에는 103.5 mg propylene glycol, 126.2 mg glycerin, 2.34 mg sodium phosphate monobasic monohydrate, 2. 16 mg sodium phosphate dibasic heptahydrate 및 4.87 mg sodium chloride도 포함되어 있었다. pH는 6.2-6.8이었다. 이 물질을 밀봉 바이알에 넣고 윗공간에는 OFP(octafluoropropane) 가스(>80%)와 나머지는 공기로 채웠다.
그림 6에는 DEFINITY 등가 표준용액 및 MVT-100으로 생성된 미세기포의 입도 프로파일이 도표로 예시되어 있다. MVT-100의 DPPE가 DPPA로 대체된 것을 제외하고, 두 제제형은 지질 농도 및 조성이 동일하다. MVT-100 제제형으로 생성된 미세기포는 생리식염수에 부유시켰을 때에도 장시간 동안 농도 및 입도 분포가 안정적이었다. 이제 그림 7, 8, 9 및 10을 살펴보자. 다양한 지질 혼합물DPPC, DPPE 및 DPPE-MPEG-5000이 함유된 지질 혼합물을 다양한 비율의 조용매 propylene glycol(PGOH), glycerol(GLOH)과 인산염 완충액 및 염화나트륨이 함유된 물(H2O)로 준비하였다. 명시된 조용매 백분율 비는 % (v/v)의 체적 백분율로 기재되어 있다. 일례로 10:10:80은 10 % (v/v)의 propylene glycol, 10 %> (v/v)의 glycerol 및 80 % (v/v)의 인산염 완충액 및 염화나트륨이 함유된 물에 해당한다. 지질 혼합물이 아래 표 7에 명시되어 있다.
| Mol% 지질 비 | Vol% 조용매 비 | 총 지질 원추상 |
바이알충전량 |
| 82:10:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 10:10:80 PGOH:GLOH:H 20 | 0.75mq/ml | 1.5ml |
| 82:10:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 15:05:80 PGOH:GLOH:H 20 | 0.75mq/ml | 1.5ml |
| 82: 10:08 DPPC: DPPE: DPPE-MPEG-5K | 20:80 PGOH:H2 0 | 0.75mq/ml | 1.5ml |
| 77:15:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 10:10:80 PGOH:GLOH:H 20 | 0.75mq/ml | 1.5ml |
| 77:15:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 15:05:80 PGOH:GLOH:H 20 | 0.75ma/ml | 1.5ml |
| 77: 15:08 DPPC: DPPE: DPPE-MPEG-5K | 20:80 PGOH:H2 0 | 0.75ma/ml | 1.5ml |
| 72:20:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 10:10:80 PGOH:GLOH:H 20 | 0.75ma/ml | 1.5ml |
| 72:20:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 15:05:80 PGOH:GLOH:H 20 | 0.75mq/ml | 1.5ml |
| 72:20:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 20:80 PGOH:H2 0 | 0.75mq/ml | 1.5ml |
| 82:10:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 10:10:80 PGOH:GLOH:H 20 | 0.75mq/ml | 1.0ml |
| 82:10:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 15:05:80 PGOH:GLOH:H 20 | 0.75mq/ml | 1.0ml |
| 82:10:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 10:10:80 PGOH:GLOH:H 20 | 1.00mq/mL | 1.5ml |
| 82:10:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 10:10:80 PGOH:GLOH:H 20 | 1.50ma/ml | 1.5ml |
| 77:15:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 10:10:80 PGOH:GLOH:H 20 | 1.00ma/mL | 1.0ml |
| 77:15:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 10:10:80 PGOH:GLOH:H 20 | 1.50ma/ml | 1.0ml |
| 77:15:08 DPPC:DPPE:DPPE-MPEG-5K | 15:05:80 PGOH:GLOH:H 20 | 1.00ma/mL | 1.0ml |
82 mol% DPPC, 10 mol% DPPE 및 8% DPPE-MPEG-5000이 함유된 지질 혼합물을 인산나트륨 완충액 및 히스티딘-글루타민산 완충액으로 준비하였다. 또한 약 5 및 25mM의 인산나트륨 완충액을 사용하여 지질 혼합물을 준비하였다. 구연산과 같은 pKa가 5.8-7.8 범위인 비경구 제제형용으로 승인된 여타 완충액을 사용할 수도 있다. 완제품의 기체 충전은 35% 공기와 65% perfluoropropane을 사용할 수 있다. 그러나 이 실험에서는 모든 시료에 대하여 매니폴드를 사용하여 90%를 상회하는 perfluoropropane을 바이알에 주입하였다.
그림 7에는 다양한 농도의 조용매와 동일한 농도의 지질(82 mol% DPPC, 10 mol% DPPE, 8 mol% DPPE-MPEG-5000)이 함유된 여러 제제형이 비교되어 있다. 10:10:80 및 15:5:80 % (v/v)의 PGOH:GLOH:H2O가 함유된 제제형은 10:10:80 % (v/v)의 PGOH:GLOH:H2O가 함유된 Definity 등가 표준용액과 유사한 미세기포 농도를 보였다. 20:80 % (v/v)의 PGOH:H2O가 함유된 제제형은 10:10:80 및 15:5:80 % (v/v)의 PGOH:GLOH:H2O가 함유된 지질 혼합물 및 Definity 등가 표준용액보다 낮은 미세기포 농도를 보였다.
그림 8에는 다양한 농도의 조용매와 동일한 농도의 지질(77 mol% DPPC, 15 mol% DPPE, 8 mol% DPPE-MPEG-5000)이 함유된 여러 제제형이 비교되어 있다. 조용매의 체적 분율 변화는 지질 혼합물로 생성된 미세기포의 농도에 그다지 영향을 미치지 않았다.
그림 9에는 다양한 농도의 조용매와 동일한 농도의 지질(72 mol% DPPC, 20 mol% DPPE, 8 mol% DPPE-MPEG-5000)이 함유된 여러 제제형이 비교되어 있다. DPPE의 백분율을 20 mole%로 증가시키면 미세기포의 수가 10-15 mole% DPPE에 비해 감소한다. 조용매의 체적 분율 변화는 지질 혼합물로 생성된 미세기포의 농도에 그다지 영향을 미치지 않았다.
그림 10에는 그림 7, 8 및 9에 나와있는 제제형이 요약되어 있다.
예 4
예 #1 및 #3에 기술되어 있는 바와 같이 Definity 등가물 및 MVT-100 지질 혼합물의 시료를 준비하였다. HPLC를 사용하여 DPPC, DPPE-MPEG-5000, DPPA, DPPE 및 팔미트산(가수분해에 의한 인지질의 분해산물)의 농도 특성을 규명하였다. 시료를 4℃ 및 40℃에서 31일 동안 보관한 후에 분석하였다. 표 8 및 표 9와 관련하여, Definity 등가물에 함유된 3가지 지질(DPPA, DPPC, DPPE-MPEG-5K)의 분해는 MVT-100 제제형에 함유된 3가지 지질(DPPC, DPPE, DPPE-MPEG-5000)의 분해보다 훨씬 더 높았다. 표 8의 하단에나와있는 바와 같이, Definity 등가물의 지질 중에서는 40?C에서 31일 간 보관 후에 90% 이상의 역가를 유지한 지질이 없었으며 단 하나의 지질만이 88% 이상의 역가였다. 이에 비해 MVT-100의 모든 지질은 표 9의 하단에 나와있는 바와 같이 95%를 상회하는 역가를 유지하였다. 이 지질 분해율의 차이가 그림 11에 설명되어 있다.
[표 8]
[표 9]
예 5
신피질의 보체매개 미세기포 유지는 Definity의 부작용으로 나타나는 요통/옆구리 통증의 원인으로 추정된다. 야생형 쥐에 Definity 등가물과 MVT-100을 사용한 연구를 수행하였다. 생쥐에 Definity 등가물(n = 10) 또는 MVT-100(n = 10)을 5 x 105 미세기포의 투여량으로 정맥 주사하였다. 미세기포 주사하고 혈액 풀이 미세기포를 제거하는 데 충분한 시간인8 분이 경과한 후에 초음파영상을 촬영하였다. 이제 그림 17과 관련하여, 신피질의 잔여 미세기포를 초음파로 검출하였다. Definity 등가물은 MVT-100이 비해 3배 이상으로 신피질에 축적되어 있었다. 그림 17에 도표로 예시되어 있는 데이터는 MVT-100이 Definity 등가물에 비해 신장 잔류가 적음을 보여주며, 따라서 MVT-100이 Definity에 비해 요통/옆구리 통증 유발 가능성이 낮음을암시한다.
그림 12에 나와있는 바와 같이, Definity는 MVT-100(Mb-neutr)에 비해 훨씬 더 지연된 신장 증강을 야기한다.
예 6
5마리의 돼지에서 심초음파검사를 수행하였다. 돼지에게 무작위로 Definity 또는 MVT-100을 주사하였다. 초음파 파라미터는 주파수 = 2 MHz, MI = 0.18 또는 0.35였다. 각각의 바이알을 100ml 식염수 주머니에 혼합하였다. 각 바이알의 대략적인 양은 1.5-1.6ml였다. 모든 돼지에 분당 3.6-5.0mL의 속도로 주입하였다. 돼지의 무게는 ~27-30kg이었다.
1.5ml 미세기포/l00ml = 5 uL MB/ml 용액 x 3.6 mL/min = 54 uL/min으로 가정하고, 30kg으로 나누면 1.8 uL/kg/min이 된다. 심실 및 심근의 조영 증강에 대하여 조작자가 영상을 평가하였다.
돼지의 혈압, 심박수 및 paO2를 모니터링하였다. 영상 대비는 MVT-100 및 Definity와 유사한 것으로 판단되었다. 여느 조영제 주사 후에 혈압, 심박수 또는 paO2의 변화는 없었다. 영상은 MVT-100 및 Definity와 유사하였다.
예 7
양이온성 지질 사용
예 1에서와 같이, 특히 원추상 중성 지질 MPEG-5K-DPPE와 결합된 양이온성 지질 1,2-Distearoyl-3-trimethylammonium-propane chloride 9 (DSTAP) 가 함유된 지질 혼합물을 준비하였다.
9
표 10에는 활성화 후 4분 및 활성화 후 64분이 경과한 두 시점에서 3가지 조성에 대한 입도 데이터가 요약되어 있다.
| 시료 ID | 활성화 후 시간 (min) | 평균 | 0.51 - 10 ㎛ | 1 - 25 ㎛ | > 25 ㎛ | ||||
| Num Wt | Vol Wt | 수 | % | 수 | % | 수 | % | ||
| 82:10:8 DPPC : DPPE : DSTAP : MPEG5K-DPPE | 4 | 0.96 | 13.79 | 8.12E+9 | 99.9914 | 6.67E+5 | 0.0082 | 1.30E+5 | 0.0016 |
| 82:10:8 DPPC : DPPE : DSTAP : MPEG5K-DPPE | 64 | 1.05 | 17.09 | 7.37E+9 | 99.9440 | 5.26E+6 | 0.0713 | 1.16E+5 | 0.0016 |
| 82:10:8 DPPC:DPPE:DSTAP:MPEG5K-DPPE | 4 | 0.93 | 156.32 | 8.08E+9 | 99.9912 | 6.81E+5 | 0.0084 | 1.30E+5 | 0.0016 |
| 82:10:8 DPPC : DPPE : DSTAP : MPEG5K-DPPE | 64 | 1.01 | 33.80 | 7.10E+9 | 99.9725 | 2.38E+6 | 0.0335 | 2.03E+5 | 0.0029 |
| 82:10:8 DPPC : DSTAP : MPEG5K-DPPE | 4 | 0.91 | 15.13 | 9.75E+9 | 99.9948 | 4.20E+5 | 0.0043 | 1.16E+5 | 0.0012 |
| 82:10:8 DPPC : DSTAP : MPEG5K-DPPE | 64 | 1.02 | 28.18 | 9.79E+9 | 99.9201 | 8.30E+6 | 0.0847 | 9.86E+5 | 0.0101 |
| 식염수 | N/A | 0.89 | 32.89 | 1.94E+7 | 99.7017 | 4.35E+4 | 0.2237 | 4.35E+4 | 0.2237 |
그림 12에는 표 10에 명시된 3가지 조성 외에 62 mol% DPPC, 10 mol% DPPE, 20 mol% DSTAP 및 8 mol% DPPE-MPEG-5K가 함유된 제제형에 대하여 측정된 총 미세기포 수가 도표로 예시되어 있다. 표 10 참조. 82 몰 백분율의 DPPC, 10 몰 백분율의 DSTAP 및 8 몰 백분율의 MPEG-5K-DPPE로 이루어진 제제형은 활성화 후 4분 및 활성화 후 64분이 경과한 두 시점에서 더 많은 수의 미세기포를 보였다.
가상 실시 예 8
수천 명의 환자에게 상기 예 1에 기술되어 있는 출원인의 미세기포 조성을 투여한다. DEFINITY의 임상적 이용에 비해, 예 2의 출원인의 미세기포 조성을 사용하면 요통의 발생빈도가 낮다.
가상 실시 예9
실온에서의 안정성 연구를 수행한다. HPLC를 사용하여 지질의 분해산물을 모니터링 한다. 시료를 주기적으로 VialMix에서 교반시켜 미세기포를 생성한다. 미세기포의 수와 크기를 입도 측정 시스템으로 조사한다. 출원인의 미세기포 조성은 예 4에서 확인된 바와 같이, 실온에서 DEFINITY보다 보관 수명이 더 길다.
가상 실시 예10
예 3과 동일한 비율로 DPPC, DPPE-PEG(5000) 및 DPPE를 바닥이 둥근 플라스크에서 교반하면서 가열하여 클로로포름에 완전히 용해시킨다. 저압 하에서 가열하여 클로로포름을 증발시켜 건조한 지질 막을 얻는다. 이 지질을 Macrogol 4000이 함유된 물 혼합물에 다시 수화시킨다. 지질이 균일하게 부유할 때까지 이 물질을 교반시킨다. 이 현탁액을 바이알에 넣고 동결건조시킨다. 바이알에는 윗공간이 PFB(perfluorobutane) 가스와 질소(65%PFB/35% 질소)로 충전된 PEG가 함유된 지질의 건조 케이크가 들어있다. 바이알을 밀봉하고 4시간 동안 38?C로 가열한다. 임상 영상 촬영용으로, 생리식염수를 바이알에 주입하고 손으로 서서히 흔들어 미세기포를 준비한다.
가상 실시 예11
1/10의 DPPE-PEG(5000)를 DPPE-PEG(5000)-Folate로 대체하는 점을 제외하고, 예 2의 상당 부분을 반복한다. 그 결과로 얻은 지질 현탁액에는 1.75mg의 지질 혼합물(0.046mg DPPE, 0.400mg DPPC 및 0.274mg MPEG5000 DPPE로 구성)과 0.030mg의 DPPE (PEG5000) Folate가 들어있다. 따라서 이 지질 현탁액은 엽산염 수용체를 발현하는 표적 세포(예: 암 세포)에 대한 미세기포를 준비하는 데 유용하다. 포스파티드산이 함유된 미세기포에 비해, DPPE가 함유된 상기 조성으로 준비된 미세기포는 표적 및 세포 섭취를 향상시켰다.
가상 실시 예12
예 2에 사용된 지질을 사용하여 perfluoropentane을 에멀젼화한다. Perfluoropentane의 최종 농도는 2% w/vol이며 지질은 3mg/ml이다. 냉장 물질을 바이알에 옮기고 음압을 사용하여 윗공간의 공기를 바이알에서 제거한다. 바이알을 밀봉한다. 그런 다음 미세기포를 생성하기 위해, 예 2에 기술된 바와 같이 밀봉된 바이알을 VialMix에서 교반시킨다.
가상 실시 예13
4℃에서 고압 하의 고압 균질화를 이용하여 지질을 DDFP와 균질화시키는 방식으로 DPPC/DPPE-PEG(5,000)/DPPE를 사용하여 Perfluoropentane의 유탁액을 준비한다. 그 결과로 얻은 유탁액에는 2% w/vol의 DDFP와 0.3% w/vol의 지질이 들어있다. DPPE가 없는 DPPC/DPPE-PEG로 유사한유탁액을 준비한다. 시료를 바이알에 밀봉하여 실온에 보관한다. 입도 분석은 DPPE가 함유된 제제형이 입자 수가 증가하며 입도 유지가 우수함을 보여준다.
본 발명의 최선 실시 예가 자세히 예시되어 있지만, 이 기술에 능통한 기술자는 본 서에 규정되어 있는 본 발명의 적용범위를 벗어나지 않고 이러한 실시 예에 대한 수정 및 적응을 할 수 있을 것이라는 점은 분명할 것이다.
Claims (17)
- 플루오르화탄소 에멀젼 조성물로서,
옥타플루오르프로판;
포스파티딜콜린;
포스파티딜에탄올아민-폴리에틸렌 글리콜(PEG); 및
디팔미토일포스파티딜에탄올아민(DPPE)를 포함하고,
상기 조성물은 디팔미토일포스파티딘산(DPPA)을 포함하지 않으며,
상기 조성물은 6.2 내지 6.8의 pH를 가지며,
상기 디팔미토일포스파티딜에탄올아민(DPPE)은 상기 조성물의 5 내지 20 몰 % 농도인 조성물. - 제1항에 있어서, 상기 옥타플루오로프로판은 1.1 ㎛ 내지 3.3 ㎛ 의 평균 입자 크기를 가지며, 10 ㎛ 미만인 입자가 98 %이며, 20 ㎛ 의 최대 직경을 갖는 인지질 코팅된 마이크로스피어내에 캡슐화되는 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민-PEG 및 디팔미토일포스파티딜에탄올아민(DPPE)은 0.75 mg/ml 내지 1.5 mg/ml의 총(aggregate) 농도를 포함하는 조성물.
- 제2항에 있어서, 75 내지 85 몰 %의 포스파티딜콜린; 5 내지 15 몰 %의 포스파티딜에탄올아민-PEG; 및 5 내지 15 몰 %의 디팔미토일포스파티딜에탄올아민(DPPE)을 포함하는 조성물.
- 제4항에 있어서, 82 몰 %의 포스파티딜콜린; 8 몰 %의 포스파티딜에탄올아민-PEG; 및 10 몰 %의 디팔미토일포스파티딜에탄올아민(DPPE)을 포함하는 조성물.
- 제5항에 있어서, 82 몰 %의 디팔미토일포스파티딜콜린(DPPC); 8 몰 %의 디팔미토일포스파티딜에탄올아민-PEG(5,000)(DPPE-PEG(5,000)); 및 10 몰 %의 디팔미토일포스파티딜에탄올아민(DPPE)을 포함하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민-PEG 및 디팔미토일포스파티딜에탄올아민(DPPE)은 0.75 mg/ml 내지 5 mg/ml의 총 농도를 포함하는 조성물.
- 제7항에 있어서, 상기 포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민-PEG 및 디팔미토일포스파티딜에탄올아민(DPPE)은 0.75 mg/ml 내지 1.5 mg/ml의 총 농도를 포함하는 조성물.
- 제1항에 있어서, DPPE-PEG의 이작용성(bifunctional) PEG화된(PEG'ylated) 모이어티를 더 포함하고; 상기 DPPE-PEG의 이작용성 PEG화된 모이어티는 총 PEG화된 지질의 1 몰 % 내지 20 몰 % 범위의 양으로 존재하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 물을 추가로 포함하고, 상기 조성물은 수성 현탁액을 포함하는 조성물.
- 제10항에 있어서, 프로필렌 글리콜, 글리세롤 및 식염수를 더 포함하는 조성물.
- 제11항에 있어서, 완충제를 추가로 포함하는 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201462011469P | 2014-06-12 | 2014-06-12 | |
| US62/011,469 | 2014-06-12 | ||
| PCT/US2015/035681 WO2015192093A1 (en) | 2014-06-12 | 2015-06-12 | Phospholipid composition and microbubbles and emulsions formed using same |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20170016462A KR20170016462A (ko) | 2017-02-13 |
| KR102379534B1 true KR102379534B1 (ko) | 2022-03-25 |
Family
ID=54834464
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020177000514A KR102379534B1 (ko) | 2014-06-12 | 2015-06-12 | 인지질 조성 및 미세기포와 이를 이용하여 형성된 유탁액 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US9801959B2 (ko) |
| EP (1) | EP3154591B1 (ko) |
| JP (1) | JP6594909B2 (ko) |
| KR (1) | KR102379534B1 (ko) |
| CN (1) | CN107106692B (ko) |
| AU (1) | AU2015274259B2 (ko) |
| CA (1) | CA2951922C (ko) |
| WO (1) | WO2015192093A1 (ko) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107206111B (zh) | 2014-12-31 | 2021-04-27 | 蓝瑟斯医学影像公司 | 脂质封装的气体微球组合物及相关方法 |
| CN118662440A (zh) * | 2015-12-21 | 2024-09-20 | 努沃克斯制药有限责任公司 | 氟碳化合物纳米乳液的组合物及其制备方法和用途 |
| CN109641068B (zh) | 2016-05-04 | 2022-09-30 | 蓝瑟斯医学影像公司 | 用于制备超声波造影剂的方法及装置 |
| US9789210B1 (en) | 2016-07-06 | 2017-10-17 | Lantheus Medical Imaging, Inc. | Methods for making ultrasound contrast agents |
| EP3530266A1 (en) * | 2018-02-27 | 2019-08-28 | LipoCoat B.V. | A lipid-based coating composition, and an object having a lipid-based coating |
| KR20210018789A (ko) * | 2018-03-29 | 2021-02-18 | 마이크로바스큘러 테라퓨틱스 엘엘씨 | 알츠하이머 병을 검출하고 치료하기 위한 조성물 및 방법 |
| WO2019191557A1 (en) * | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Case Wester Reserve University | Stabilized nanobubbles and microbubbles for diagnostic and therapeutic applications |
| US11717570B2 (en) | 2019-05-15 | 2023-08-08 | Bracco Suisse Sa | Gas-filled microvesicles |
| US20200360289A1 (en) | 2019-05-15 | 2020-11-19 | Bracco Suisse Sa | Freeze-dried product and gas-filled microvesicles suspension |
| CN111729094B (zh) * | 2020-07-23 | 2021-07-02 | 四川大学华西医院 | 类磷脂两亲性嵌段共聚物基超声造影剂及其制备方法 |
| NL2027237B1 (en) | 2020-12-27 | 2022-07-21 | Solstice Pharmaceuticals B V | Process for controlled manufacturing of mono-disperse microbubbles |
| EP4267203A1 (en) | 2020-12-27 | 2023-11-01 | Solstice Pharmaceuticals B.V. | A cartridge for mixing a phospholipid composition intended for intracorporeal use |
| AU2023217725A1 (en) * | 2022-02-09 | 2024-08-15 | Lantheus Medical Imaging, Inc. | Gas nano/micro-bubble compositions and uses thereof |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010133700A1 (en) | 2009-05-22 | 2010-11-25 | Ludwig-Maximilians-Universität München | Pharmaceutical composition comprising microbubbles for targeted tumor therapy |
| US20130022550A1 (en) | 2011-07-19 | 2013-01-24 | Unger Evan C | Microbubble Compositions, Method of Making Same, and Method Using Same |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5733572A (en) * | 1989-12-22 | 1998-03-31 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Gas and gaseous precursor filled microspheres as topical and subcutaneous delivery vehicles |
| US7083572B2 (en) * | 1993-11-30 | 2006-08-01 | Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. | Therapeutic delivery systems |
| EP0833608A2 (en) * | 1995-06-07 | 1998-04-08 | Alliance Pharmaceutical Corporation | Reverse fluorocarbon emulsion compositions for drug delivery |
| ES2189974T3 (es) * | 1996-09-11 | 2003-07-16 | Imarx Pharmaceutical Corp | Procedimientos mejorados para la obtencion de imagenes de diagnostico usando un agente de contraste y un vasodilatador. |
| US5846517A (en) * | 1996-09-11 | 1998-12-08 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods for diagnostic imaging using a renal contrast agent and a vasodilator |
| US6572840B1 (en) * | 1999-07-28 | 2003-06-03 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Stable microbubbles comprised of a perfluoropropane encapsulated lipid moiety for use as an ultrasound contrast agent |
| US7357937B2 (en) | 2002-09-24 | 2008-04-15 | Therox, Inc. | Perfluorocarbon emulsions with non-fluorinated surfactants |
| US20050025710A1 (en) * | 2003-07-29 | 2005-02-03 | Michel Schneider | Reconstitutable formulation and aqueous suspension of gas-filled microvesicles for diagnostic imaging |
| CN101389273B (zh) | 2004-08-05 | 2012-09-05 | 贝勒研究院 | 基因或药物递送系统 |
-
2015
- 2015-06-12 AU AU2015274259A patent/AU2015274259B2/en active Active
- 2015-06-12 CA CA2951922A patent/CA2951922C/en active Active
- 2015-06-12 KR KR1020177000514A patent/KR102379534B1/ko active IP Right Grant
- 2015-06-12 EP EP15806338.8A patent/EP3154591B1/en active Active
- 2015-06-12 WO PCT/US2015/035681 patent/WO2015192093A1/en active Application Filing
- 2015-06-12 CN CN201580038940.2A patent/CN107106692B/zh active Active
- 2015-06-12 US US14/738,702 patent/US9801959B2/en active Active
- 2015-06-12 JP JP2016572258A patent/JP6594909B2/ja active Active
-
2017
- 2017-08-17 US US15/679,738 patent/US10493173B2/en active Active
-
2019
- 2019-01-26 US US16/258,581 patent/US11160885B2/en active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010133700A1 (en) | 2009-05-22 | 2010-11-25 | Ludwig-Maximilians-Universität München | Pharmaceutical composition comprising microbubbles for targeted tumor therapy |
| US20130022550A1 (en) | 2011-07-19 | 2013-01-24 | Unger Evan C | Microbubble Compositions, Method of Making Same, and Method Using Same |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3154591B1 (en) | 2023-10-11 |
| AU2015274259A1 (en) | 2017-01-05 |
| EP3154591A1 (en) | 2017-04-19 |
| US20190184038A1 (en) | 2019-06-20 |
| US9801959B2 (en) | 2017-10-31 |
| CN107106692B (zh) | 2021-01-05 |
| KR20170016462A (ko) | 2017-02-13 |
| US10493173B2 (en) | 2019-12-03 |
| EP3154591C0 (en) | 2023-10-11 |
| US11160885B2 (en) | 2021-11-02 |
| CN107106692A (zh) | 2017-08-29 |
| CA2951922C (en) | 2023-02-28 |
| JP6594909B2 (ja) | 2019-10-23 |
| US20180092995A1 (en) | 2018-04-05 |
| CA2951922A1 (en) | 2015-12-17 |
| EP3154591A4 (en) | 2018-02-14 |
| AU2015274259B2 (en) | 2019-04-18 |
| WO2015192093A1 (en) | 2015-12-17 |
| US20160000943A1 (en) | 2016-01-07 |
| JP2017517533A (ja) | 2017-06-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102379534B1 (ko) | 인지질 조성 및 미세기포와 이를 이용하여 형성된 유탁액 | |
| JP5420410B2 (ja) | ポリマー修飾脂質を含むガス封入微小胞 | |
| US12070512B2 (en) | Targeted gas-filled microvesicles formulation | |
| US20200390911A1 (en) | Lipid encapsulated gas microsphere compositions and related methods | |
| EP2934740B1 (en) | Gas-filled microvesicles | |
| WO2020127992A1 (en) | Ultrasound contrast agent and methods for use thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |