KR102379524B1 - Composition for improving, treating or preventing intestinal function or inflammarory bowel disease comprising fermented rice as an active ingredient - Google Patents

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Abstract

본 발명은 쌀 발효물을 유효성분으로 포함하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 쌀 발효물은 장내 유익균의 생장 및 증식을 유도하고, 단쇄지방산 생산을 증가 시키며, 장내 염증성 사이코카인의 발현량을 감소시키는 효과를 나타내어 독성이 낮은 새로운 장기능 또는 염증성 장질환 개선, 치료 또는 예방용 조성물에 적용할 수 있는 효과가 있다.The present invention relates to a composition for improving or preventing intestinal function or inflammatory bowel disease comprising fermented rice as an active ingredient, and more particularly, the fermented rice induces the growth and proliferation of beneficial intestinal bacteria, and produces short chain fatty acids It has an effect that can be applied to a composition for improving, treating or preventing new intestinal function or inflammatory bowel disease with low toxicity by showing the effect of reducing the expression level of inflammatory psychokines in the intestine.

Description

쌀 발효물을 유효성분으로 포함하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선, 치료 또는 예방용 조성물 {Composition for improving, treating or preventing intestinal function or inflammarory bowel disease comprising fermented rice as an active ingredient}Composition for improving, treating or preventing intestinal function or inflammarory bowel disease comprising fermented rice as an active ingredient}

본 발명은 쌀 발효물을 유효성분으로 포함하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물, 염증성 장질환 치료 또는 예방용 약학 조성물, 및 장기능 또는 염증성 장질환을 개선, 치유하는 쌀 발효물의 제조방법에 관한 것이다.The present invention provides a food composition for improving or preventing intestinal function or inflammatory bowel disease comprising fermented rice as an active ingredient, a pharmaceutical composition for treating or preventing inflammatory bowel disease, and a fermented rice product for improving and healing intestinal function or inflammatory bowel disease It relates to a manufacturing method.

천연물을 발효시켜 얻은 발효 천연물은 발효에 의한 생체전환(biotransformation) 또는 프로바이오틱(probiotic) 효과에 의해 천연물의 생리활성이 증가되는 것으로 알려짐에 따라, 발효 천연물이 새로운 기능성 식품 원료 또는 천연물 신약 등의 재료로 각광받고 있다. Fermented natural products obtained by fermenting natural products are known to increase the physiological activity of natural products by biotransformation or probiotic effects by fermentation. It is popular as a material.

특히, 식용 가능한 무해한 미생물을 발효 천연물을 발효하지 않은 원료 천연물에 비해 더 우수한 약리 효과를 내는 것으로 알려져 있다. In particular, it is known that harmless edible microorganisms have better pharmacological effects than raw natural products that are not fermented with fermented natural products.

쌀은 대표적인 곡물로, 시력을 좋게 하는 카로틴, 뼈를 튼튼하게 하는 칼슘 및 철분, 콜레스테롤 생합성을 저해하는 모나스커스 성분을 비롯하여 건강에 유익한 성분을 다량 함유하고 있다. 따라서 항암 및 소화관 보호 효과와 같은 항산화 작용을 기반으로 하는 다양한 생리활성을 나타내는 것으로 알려져 있다. 그러나 대부분의 쌀들은 도정 등의 1차 가공을 통하여 주식으로 섭취하거나 제과, 제빵 등에 소량 사용하고 있으며, 국민소득 향상에 따른 식습관의 변천과 가공식품의 부족으로 인하여 소비가 감소하고 재고가 늘고 있는 추세에 있다.Rice is a representative grain, and contains a large amount of beneficial ingredients for health, including carotene that improves eyesight, calcium and iron that strengthens bones, and monascus that inhibits cholesterol biosynthesis. Therefore, it is known to exhibit various physiological activities based on antioxidant action such as anticancer and digestive tract protective effects. However, most rice is consumed as a staple food through primary processing such as milling or is used in small amounts for confectionery and baking. is in

현재까지 발효에 의한 쌀 추출물의 항산화 효과, 혈액순환 개선, 체내 노페물이나 유해금속 배출 효과, 피부 미백 효과, 피부 영양공급 효과가 있는 것으로 알려져 있다.So far, it is known that the rice extract by fermentation has antioxidant effects, blood circulation improvement, excretion of waste products and harmful metals from the body, skin whitening effect, and skin nutrition supply effect.

그러나, 쌀 추출물을 이용하여 장기능 개선하거나, 염증성 장질환을 치료하는데 적용하는 사례는 보고되지 않고 있다. However, there have been no reports of cases of using rice extract to improve intestinal function or to treat inflammatory bowel disease.

대한민국 공개특허공보 제2013-0010430호Republic of Korea Patent Publication No. 2013-0010430

본 발명은 상기와 같은 문제점을 감안하여 안출된 것으로, 본 발명의 목적은 장기능 또는 염증성 개선에 활성을 갖는 쌀발효물 제조용 보리누룩과, 이로부터 제조된 쌀 발효물을 활용하여 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공함에 있다.The present invention has been devised in view of the above problems, and an object of the present invention is to utilize barley koji for producing fermented rice having activity in improving intestinal function or inflammation, and fermented rice prepared therefrom to improve intestinal function or inflammation. To provide a food composition for improving or preventing intestinal disease.

본 발명의 다른 목적은 쌀 발효물을 활용하여 장기능 또는 염증성 장질환 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공함에 있다.Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for treating or preventing intestinal function or inflammatory bowel disease by utilizing fermented rice.

본 발명의 또 다른 목적은 쌀 발효물을 제조하기 위한 보리누룩의 제조방법과 이를 활용하여 장기능 또는 염증성 장질환 개선, 예방 또는 치료에 효과가 있는 쌀 발효물의 제조방법을 제공함에 있다.Another object of the present invention is to provide a method for producing barley yeast for producing fermented rice and a method for producing fermented rice effective for improving, preventing or treating intestinal function or inflammatory bowel disease by using the same.

본 발명의 일 측면은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 포함하는 혼합보리가루를 발효시켜 얻어진 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 개선에 활성을 갖는 쌀발효물 제조용 보리누룩에 관한 것이다.One aspect of the present invention is a rice fermented product having activity for improving intestinal function or inflammation, characterized in that it is obtained by fermenting mixed barley powder comprising two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder. It relates to barley yeast for manufacturing.

상기 보리누룩은 메타지놈 분석시 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유할 수 있다.The barley nuruk may contain a fungal community having Rhizopus oryzae as a dominant species and a bacterial community having Pantoea agglomerans as a dominant species during metagenome analysis.

상기 균류 군집은 아스퍼질러스 플라부스(Aspergillus flavus), 아스퍼질러스 플라부스 변이주 오리제(Aspergillus flavus var. oryzae), 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 및 리조푸스 마이크로스포루스(Rhizopus microsporus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있다.The fungal community is Aspergillus flavus, Aspergillus flavus mutant oryzae (Aspergillus flavus var. oryzae), Aspergillus fumigatus (Aspergillus fumigatus) and Rhizopus microsporus It may further include any one or more selected from the group consisting of.

상기 세균 군집은 시트로박터 프룬디(Citrobacter freundii), 판토에아 가비니에(Pantoea gaviniae), 바실러스 푸밀루스(Bacillus pumilus), 바실러스 소노렌시스(Bacillus sonorensis), 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis) 및 엔테로박테리아과(Enterobacteriaceae)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있다.The bacterial community is Citrobacter freundii, Pantoea gaviniae, Bacillus pumilus, Bacillus sonorensis, Bacillus subtilis And it may further include any one or more selected from the group consisting of Enterobacteriaceae.

증자된 쌀에 보리누룩을 접종하여 발효시켜 얻은 쌀 발효물을 유효성분으로 하고, 상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 포함하는 혼합보리가루를 발효시켜 얻어진 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물에 관한 것이다.The rice fermented product obtained by inoculating and fermenting the steamed rice with barley koji is an active ingredient, and the barley koji is mixed barley powder comprising two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder. It relates to a food composition for improving or preventing intestinal function or inflammatory bowel disease, characterized in that obtained by fermentation.

상기 쌀 발효물은 상기 증자된 쌀에 보리누룩 및 물을 혼합하여 1차 발효물을 얻고, 상기 1차 발효물에 증자된 쌀과 물을 혼합하여 2차 발효시킨 것일 수 있다.The fermented rice may be obtained by mixing barley yeast and water with the steamed rice to obtain a primary fermented product, and secondary fermentation by mixing the steamed rice and water with the primary fermented product.

상기 증자된 쌀과 보리누룩의 혼합 중량비는 5:1 ~ 20:1일 수 있다.The mixing weight ratio of the steamed rice and barley yeast may be 5:1 to 20:1.

상기 쌀 발효물의 단쇄지방산 생성량은 0.08 ~ 0.10 ㎚/g일 수 있다.The short-chain fatty acid production of the rice fermented product may be 0.08 to 0.10 nm/g.

상기 보리누룩의 발효는 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 수행될 수 있다.The fermentation of the barley yeast may be carried out for 20 to 25 days at 25 ~ 35 ℃, 40 ~ 60% humidity conditions.

상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 혼합보리가루를 발효시켜 얻어진 것일 수 있고, 상기 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말의 혼합 중량비는 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5일 수 있다.The barley yeast may be obtained by fermenting mixed barley powder consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder, and the mixing weight ratio of the steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder is 1:0.5:0.5 to 1: 1.5:1.5.

상기 식품 조성물은 막걸리일 수 있다.The food composition may be makgeolli.

본 발명의 다른 측면은 증자된 쌀에 보리누룩을 접종하여 발효시켜 얻은 쌀 발효물을 유효성분으로 하고, 상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 포함하는 혼합보리가루를 발효시켜 얻어진 것을 특징으로 하는 염증성 장질환 치료 또는 예방용 약학 조성물에 관한 것이다.In another aspect of the present invention, the rice fermented product obtained by inoculating and fermenting the steamed rice with barley koji is an active ingredient, and the barley koji contains two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder. It relates to a pharmaceutical composition for treating or preventing inflammatory bowel disease, characterized in that it is obtained by fermenting mixed barley flour comprising.

상기 쌀 발효물은 상기 증자된 쌀에 보리누룩 및 물을 혼합하여 1차 발효물을 얻고, 상기 1차 발효물에 증자된 쌀과 물을 혼합하여 2차 발효시킨 것일 수 있다.The fermented rice may be obtained by mixing barley yeast and water with the steamed rice to obtain a primary fermented product, and secondary fermentation by mixing the steamed rice and water with the primary fermented product.

상기 증자된 쌀과 보리누룩의 중량비는 5:1 ~ 20:1일 수 있다.The weight ratio of the steamed rice and barley yeast may be 5:1 to 20:1.

상기 쌀 발효물의 단쇄지방산 생성량은 0.08 ~ 0.10 ㎚/g일 수 있다.The short-chain fatty acid production of the rice fermented product may be 0.08 to 0.10 nm/g.

상기 보리누룩의 발효는 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 수행될 수 있다.The fermentation of the barley yeast may be carried out for 20 to 25 days at 25 ~ 35 ℃, 40 ~ 60% humidity conditions.

상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 혼합보리가루를 발효시켜 얻어진 것일 수 있고, 상기 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말의 혼합 중량비는 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5일 수 있다.The barley yeast may be obtained by fermenting mixed barley powder consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder, and the mixing weight ratio of the steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder is 1:0.5:0.5 to 1: 1.5:1.5.

본 발명의 또 다른 측면은 아래 단계들을 포함하는 보리누룩의 제조방법에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to a method for producing barley yeast comprising the steps below.

1) 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 혼합하여 혼합보리가루를 제조하는 단계;1) preparing mixed barley powder by mixing two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder;

2) 상기 혼합보리가루를 반죽하고, 누룩 성형틀에 넣어 성형하는 단계; 및2) kneading the mixed barley flour and molding it into a mold for forming yeast; and

3) 상기 누룩 성형물을 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 발효시키는 단계.3) The step of fermenting the yeast molded product at 25 ~ 35 ℃, 40 ~ 60% humidity conditions for 20 ~ 25 days.

상기 1) 단계는 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말을 모두 혼합하여 혼합보리가루를 제조하는 것일 수 있고, 상기 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말의 혼합 중량비는 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5일 수 있다.Step 1) may be to prepare mixed barley powder by mixing all of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder, and the mixing weight ratio of the steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder is 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5.

본 발명의 또 다른 측면은 하기 단계들을 포함하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선활성을 갖는 쌀 발효물의 제조방법에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to a method for producing a fermented rice having activity for improving intestinal function or inflammatory bowel disease, comprising the following steps.

a) 상기 보리누룩, 증자된 쌀 및 물을 혼합하여 발효시키는 1차 발효 단계; 및a) a primary fermentation step of mixing and fermenting the barley yeast, steamed rice and water; and

b) 상기 1차 발효물에 증자된 쌀 및 물을 넣고 발효시키는 2차 발효 단계.b) A secondary fermentation step of adding steamed rice and water to the primary fermented product and fermenting.

상기 1 차 발효 단계는 22 ~ 24 ℃에서 5 ~ 9일간 수행될 수 있다.The primary fermentation step may be performed at 22 ~ 24 °C for 5 ~ 9 days.

상기 2 차 발효 단계는 22 ~ 24 ℃에서 10 ~ 18 일간 수행될 수 있다.The secondary fermentation step may be performed at 22 ~ 24 °C for 10 ~ 18 days.

상기 a) 단계에서 상기 증자된 쌀과 보리누룩의 중량비는 5:1 ~ 20:1일 수 있다.The weight ratio of the steamed rice and barley yeast in step a) may be 5:1 to 20:1.

상기 1차 및 2차 발효는 정치발효 또는 50rpm 이하로 발효시키는 것일 수 있다.The primary and secondary fermentation may be stationary fermentation or fermentation at 50 rpm or less.

상기 쌀 발효물은 장내 유익균의 생장 및 증식을 유도하고, 단쇄지방산 생산능을 증가 시키며, 장내 염증성 사이코카인의 발현량을 감소시키는 것일 수 있다.The fermented rice may induce the growth and proliferation of beneficial bacteria in the intestine, increase the short-chain fatty acid production capacity, and reduce the expression level of intestinal inflammatory cytokines.

본 발명의 또 다른 측면은 상기 제조방법에 따라 제조된 쌀 발효물을 유효성분으로 포함하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선활성을 갖는 발효주 또는 발효음료에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to a fermented liquor or a fermented beverage having intestinal function or inflammatory bowel disease improving activity comprising the fermented rice produced according to the above manufacturing method as an active ingredient.

본 발명의 쌀 발효물은 장내 유익균의 생장 및 증식을 유도하고, 단쇄지방산 생산을 증가 시키며, 장내 염증성 사이코카인의 발현량을 감소시키는 효과를 나타내어 독성이 낮은 새로운 장기능 또는 염증성 장질환 개선, 치료 또는 예방용 조성물에 적용할 수 있는 효과가 있다.The rice fermented product of the present invention induces the growth and proliferation of beneficial intestinal bacteria, increases the production of short-chain fatty acids, and exhibits the effect of reducing the expression level of intestinal inflammatory psychokines, thereby improving and treating new intestinal function or inflammatory bowel disease with low toxicity Or there is an effect that can be applied to the composition for prevention.

도 1은 제조예1로부터 제조된 KN-SP-2 보리누룩의 균류(fungi(ITS))에 대한 메타지놈 분석한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 비교제조예 7으로부터 제조된 KN-SP-8 누룩의 균류(fungi(ITS))에 대한 메타지놈 분석한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 제조예1로부터 제조된 KN-SP-2 보리누룩의 문(phylum) level에서의 메타지놈 분석결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 비교제조예 7으로부터 제조된 KN-SP-8 누룩의 문(phylum) level에 대한 메타지놈 분석결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 제조예1로부터 제조된 KN-SP-2 보리누룩에 대한 Bacteria(16s) species level에서의 메타지놈 분석 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 비교제조예 7으로부터 제조된 KN-SP-8 누룩에 대한 Bacteria(16s) species level에서의 메타지놈 분석결과를 나타낸 그래프이다.
도 7은 실험동물에 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2), 비교예8의 쌀 발효물(KN-SPM-9), 에탄올 용액(Vehicle) 및 물(control)을 각각 투여한 4개의 군에서 0, 7일째 채취한 분변샘플에서의 단쇄지방산 생성능을 정량한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 8은 실험동물에 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2), 에탄올 용액(Vehicle) 및 물(control)을 각각 투여한 3개의 군에서 0, 7일째 채취한 분변샘플에서의 장내미생물 균총 변화를 분석하여 나타낸 그래프이다.
도 9는 실험동물에 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2), 비교예8의 쌀 발효물(KN-SPM-9), 에탄올 용액(Vehicle) 및 물(control)을 각각 투여한 4개의 군에서 0, 7일째 채취한 혈청샘플에서의 혈청 TNF-α 생성량(pg/㎖)을 정량한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 10은 실험동물에 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2), 에탄올 용액(Vehicle) 및 물(control)을 각각 투여한 3개의 군에서 7일째 채취한 대장 조직에서의 염증성 사이토카인(TNF-α, IFN(interferon)-γ, IL(interleukin)-1α, IL-16, CCL17 및 IL-1RA) 생성량을 분석하여 나타낸 그래프이다.
1 is a graph showing the results of metagenome analysis for KN-SP-2 barley yeast fungus (fungi (ITS)) prepared in Preparation Example 1.
Figure 2 is a graph showing the results of metagenome analysis for the fungus (fungi (ITS)) of KN-SP-8 yeast prepared in Comparative Preparation Example 7.
3 is a graph showing the metagenome analysis results at the phylum level of KN-SP-2 barley yeast prepared in Preparation Example 1. FIG.
4 is a graph showing the metagenome analysis results for the phylum level of KN-SP-8 yeast prepared from Comparative Preparation Example 7.
5 is a graph showing the metagenome analysis results at the Bacteria (16s) species level for KN-SP-2 barley yeast prepared in Preparation Example 1.
6 is a graph showing the metagenome analysis results at the Bacteria (16s) species level for KN-SP-8 yeast prepared from Comparative Preparation Example 7.
7 is a fermented rice product of Example 1 (KN-SPM-2), Comparative Example 8 rice fermented product (KN-SPM-9), ethanol solution (Vehicle) and water (control) administered to the experimental animals, respectively. It is a graph showing the results of quantifying the short-chain fatty acid production ability in fecal samples collected on days 0 and 7 from 4 groups.
8 is a fermented rice product of Example 1 (KN-SPM-2), ethanol solution (Vehicle) and water (control) of Example 1 to the experimental animals, respectively, in three groups administered in the intestines in fecal samples collected on days 0 and 7 It is a graph showing the analysis of changes in the microbial flora.
9 is a fermented rice product of Example 1 (KN-SPM-2), Comparative Example 8 (KN-SPM-9), ethanol solution (Vehicle) and water (control) administered to the experimental animals, respectively. It is a graph showing the results of quantifying the amount of serum TNF-α production (pg/ml) in the serum samples collected on days 0 and 7 from 4 groups.
Figure 10 is inflammatory cytokines in colon tissue collected on the 7th day from three groups each administered with the rice fermented product (KN-SPM-2), ethanol solution (Vehicle) and water (control) of Example 1 to experimental animals; (TNF-α, IFN (interferon)-γ, IL (interleukin)-1α, IL-16, CCL17 and IL-1RA) is a graph showing the analysis of the production amount.

이하, 도면을 참조하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the drawings.

본 발명은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 포함하는 혼합보리가루의 발효물을 포함하는 보리누룩에 관한 것이다. 상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상의 혼합보리가루를 원료로하여 자연 발효시켜 제조된 전통발효 누룩으로, 외부 균주의 접종없이 자연 발효되어 제조된 것이며, 장기능 또는 염증성 개선에 활성을 갖는 쌀발효물 제조용으로 사용될 수 있다.The present invention relates to barley yeast comprising a fermented product of mixed barley flour comprising two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder. The barley yeast is a traditional fermented yeast prepared by natural fermentation of two or more mixed barley powders selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder as raw materials, and is produced by naturally fermenting without inoculation of an external strain. , can be used for preparing fermented rice with activity in improving intestinal function or inflammation.

본 발명의 보리누룩은 혼합보리가루의 자연발효과정을 통해, 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하는 것으로 메타지놈 분석을 통해 확인되었다. 후술하는 실험에를 통해 확인한 결과, 균류와 세균에서 우점종이 전혀 상이할 경우, 쌀 발효물 역시 단쇄지방산 함량이 전혀 상이함을 확인할 수 있었다. 특히 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하는 본 발명의 보리누룩으로 쌀 발효물을 제조하는 것이 가장 우수한 장기능 또는 염증성 장질환 개선, 치료 또는 예방 효과를 달성함을 알 수 있다.The barley koji of the present invention contains a fungal community with Rhizopus oryzae as the dominant species and a bacterial community with Pantoea agglomerans as the dominant species through the natural fermentation process of mixed barley flour. It was confirmed through metagenome analysis. As a result of confirming through the experiment described below, it was confirmed that the content of short-chain fatty acids in the fermented rice was also completely different when the dominant species were completely different from the fungus and the bacteria. In particular, it is best to prepare a rice fermented product with the barley koji of the present invention, which contains a fungal community with a dominant species Rhizopus oryzae and a bacterial community with Pantoea agglomerans as the dominant species. It can be seen that the improvement, treatment or prevention effect of intestinal function or inflammatory bowel disease is achieved.

바람직하게 상기 균류 군집은 아스퍼질러스 플라부스(Aspergillus flavus), 아스퍼질러스 플라부스 변이주 오리제(Aspergillus flavus var. oryzae), 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 및 리조푸스 마이크로스포루스(Rhizopus microsporus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있다.Preferably, the fungal colony is Aspergillus flavus, Aspergillus flavus var. oryzae, Aspergillus fumigatus, and Rhizopus microsporus. microsporus) may further include any one or more selected from the group consisting of.

상기 세균 군집은 시트로박터 프룬디(Citrobacter freundii), 판토에아 가비니에(Pantoea gaviniae), 바실러스 푸밀루스(Bacillus pumilus), 바실러스 소노렌시스(Bacillus sonorensis), 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis) 및 엔테로박테리아과(Enterobacteriaceae)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있고, 가장 바람직하게는 상기 균류 군집과 세균 군집을 모두 포함하는 것일 수 있다. 상기 우점종의 균주들만을 별도로 접종하여 발효시켜 누룩을 제조하는 경우보다, 상기 균주들이 포함되어 있는 것이, 추후 쌀 발효물의 특유의 냄새와 맛에 있어서, 선호도가 더욱 높아지는 장점을 갖는다.The bacterial community is Citrobacter freundii, Pantoea gaviniae, Bacillus pumilus, Bacillus sonorensis, Bacillus subtilis And it may further include any one or more selected from the group consisting of Enterobacteriaceae, and most preferably, it may include both the fungal community and the bacterial community. Rather than producing yeast by separately inoculating and fermenting only the strains of the dominant species, the fact that the strains are included has the advantage of increasing preference in the characteristic smell and taste of fermented rice later.

본 발명은 증자된 쌀에 보리누룩을 접종하여 발효시켜 얻은 쌀 발효물을 유효성분으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물에 관한 것이고, 본 발명은 증자된 쌀에 보리누룩을 접종하여 발효시켜 얻은 쌀 발효물을 유효성분으로 하는 염증성 장질환 치료 또는 예방용 약학 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a food composition for improving or preventing intestinal function or inflammatory bowel disease using, as an active ingredient, a fermented rice obtained by inoculating and fermenting steamed rice with barley koji, and the present invention is to inoculate steamed rice with barley koji to a pharmaceutical composition for treating or preventing inflammatory bowel disease using a fermented rice product obtained by fermentation as an active ingredient.

상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 포함하는 혼합보리가루를 발효시켜 얻어진 것일 수 있다.The barley yeast may be obtained by fermenting mixed barley powder containing two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder.

본 발명의 쌀 발효물은 '프리바이오틱(Prebiotic)'과 프로바이오틱(probiotic)' 효능을 통해 장건강을 개선하거나 장기능을 개선하는 효과를 갖는 것을 특징으로 한다. 또한, 상기 쌀 발효물은 장내 조직 또는 세포에서의 전염증성 사이토카인의 발현량을 유의하게 감소시키고, 항염증성 인자는 증가시키는 활성을 나타내는 바, 염증성 장질환(inflammatory bowel disease)에 대해서도 우수한 개선, 예방 또는 치료 효과를 갖는다.The fermented rice of the present invention is characterized in that it has the effect of improving intestinal health or improving intestinal function through 'prebiotic' and probiotic' effects. In addition, the rice fermented product significantly reduces the expression level of pro-inflammatory cytokines in intestinal tissues or cells, and shows an activity to increase anti-inflammatory factors, so excellent improvement in inflammatory bowel disease, It has a preventive or therapeutic effect.

상기 'Prebiotic 또는 프리바이오틱' 이란, 체내에서 잘 소화되지 않는 식품 구성성분으로, 위장관 상부에서 가수분해나 흡수가 이루어지지 않으면서, 제한된 특정 공생박테리아의 생육 또는 활성에 자극을 주어 장내 균총을 숙주의 건강에 유익한 방향으로 유도하는 물질로, 장내 유익균의 증식을 증진시키는 물질을 의미한다. 구체적으로 상기 장기능 개선용 조성물은 프리바이오틱 조성물 혹은 장내 미생물 개선용 조성물 혹은 장내 균총 개선용 조성물이라고도 하며, 이는 프로바이오틱스의 효능을 증감시키고 장건강을 개선하거나 장기능을 개선하는 효과를 갖는다.The 'prebiotic or prebiotic' is a food component that is not digested well in the body, and without hydrolysis or absorption in the upper gastrointestinal tract, it stimulates the growth or activity of limited specific symbiotic bacteria to host the intestinal flora. It is a substance that induces in a direction beneficial to the health of Specifically, the composition for improving intestinal function is also referred to as a prebiotic composition or a composition for improving intestinal microflora or a composition for improving intestinal flora, which increases or decreases the efficacy of probiotics and improves intestinal health or improves intestinal function.

앞서 말한 바와 같이 '장기능 개선' 혹은 '장내균총 개선'이란 장내 유익균의 증식 또는 생장은 촉진하고 장내 유해균의 증식 또는 생장은 억제하되, 장내 유익균과 유해균의 균형을 유지하는 것을 의미한다.As mentioned above, 'improving intestinal function' or 'improving intestinal flora' refers to promoting the growth or growth of beneficial intestinal bacteria and inhibiting the growth or growth of harmful bacteria in the intestine, while maintaining a balance between beneficial and harmful bacteria in the intestine.

장내 유익균이란, 기존에 숙주의 장내에서 서식하는 유익균 및 섭취되어 장에 도달하였을 때 장내 환경에 유익한 작용을 하는 균주를 의미한다. 이들은 위산과 담즙산에서 살아남아 소장까지 도달하여 장에서 증식하고 정착하며, 장관 내에서 유용한 효과를 나타내고, 독성이 없으며 비병원성인 조건을 만족하는 균을 의미한다. 즉, 프로바이오틱스(probiotics)로 이해될 수 있다. 예컨대, 장내 유익균은 프로바이오틱스를 포함할 수 있다. 예컨대, 상기 장내 유익균은 이에 제한되지 않고, 비피도박테리움 속(Bifidobacterium), 락토바실러스 속(Lactobacillus), 락토코커스 속(Lactococcus), 스트렙토코커스 속(Streptococcus), 아커멘시아 속(Akkermansia), 패컬리박테리움 속(Faecalibacterium), 또는 엔테로코커스 속(Enterococcus)을 포함할 수 있다.Intestinal beneficial bacteria means beneficial bacteria existing in the intestine of the host and strains that have a beneficial effect on the intestinal environment when ingested and reach the intestine. These are bacteria that survive in gastric and bile acids, reach the small intestine, multiply and settle in the intestine, exhibit useful effects in the intestine, and satisfy the non-toxic and non-pathogenic conditions. That is, it may be understood as probiotics. For example, beneficial intestinal bacteria may include probiotics. For example, the beneficial intestinal bacteria are not limited thereto, and Bifidobacterium, Lactobacillus, Lactococcus, Streptococcus, Akkermansia, and L. It may include the genus Faecalibacterium, or the genus Enterococcus.

장내 유해균이란, 장내에서 서식하고 있으면서 장염 등과 같이 인체에 해로운 효과를 미치는 미생물을 총칭할 수 있다. 예컨대, 상기 장내 유해균은 이에 제한되지 않고, 대장균 (Escherichia coli), 푸소박테리움 속(Fusobacterium), 클로스트리듐 속(Clostridium), 스타필로코쿠스 속(Staphylococcus), 또는 포피로모나스 속(Porphyromonas)을 포함할 수 있다. 예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 장내 유익균의 증식 또는 생육을 촉진하고 장내 유해균의 증식 또는 생육을 억제하는 것일 수 있다.Intestinal harmful bacteria may refer to microorganisms that live in the intestine and have harmful effects on the human body, such as enteritis. For example, the intestinal harmful bacteria are not limited thereto, and Escherichia coli, Fusobacterium, Clostridium, Staphylococcus, or Porphyromonas. ) may be included. In an exemplary embodiment, the composition may promote the growth or growth of beneficial bacteria in the intestine and inhibit the growth or growth of harmful bacteria in the intestine.

상기 쌀 발효물은 단쇄지방산 생성량 또는 함량을 증가시킬 수 있다. 단쇄지방산(Short-chain fatty acids)이란, 탄소수가 6개 이하의 탄소 원자를 포함하는 지방산을 의미한다. 상기 단쇄 지방산은 아세테이트, 프로피오네이트(propionate), 이소부티레이트(isobutyrate), 부티레이트(butyrate), 이소발레이트(isovalerate) 및 발레레이트(valerate)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 프로피오네이트(propionate) 및 부티레이트(butyrate)의 생성량 또는 함량을 현저히 증가시키며, 구체적으로 프로피오네이트(propionate) 및 부티레이트(butyrate)의 생성량이 0.08 ~ 0.10 ㎚/g로 현저함을 알 수 있다.The fermented rice may increase the amount or content of short-chain fatty acids. Short-chain fatty acids refer to fatty acids containing 6 or less carbon atoms. The short-chain fatty acid may be at least one selected from the group consisting of acetate, propionate, isobutyrate, butyrate, isovalate and valerate, preferably pro It can be seen that the production amount or content of pionate and butyrate is significantly increased, and specifically, the production amount of propionate and butyrate is remarkable as 0.08 to 0.10 nm/g.

따라서 상기 조성물은 프리바이오틱스일 수 있다. 다른 측면에서 쌀 발효물을 유효성분으로 포함하는 장내 유익균의 증식 촉진 및 장내 유해균의 생육 억제용 프리바이오틱스를 제공하며, 이는 프로바이오틱스의 효과를 증강시켜 주는 시너지 효과가 있다. 이때, 상기 프리바이오틱스는 섬유질, 올리고당, 플락토올리고당 및 갈락토올리고당으로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상을 더 포함할 수 있다.Accordingly, the composition may be a prebiotic. In another aspect, it provides prebiotics for promoting the growth of beneficial intestinal bacteria and inhibiting the growth of intestinal harmful bacteria, which include fermented rice as an active ingredient, which has a synergistic effect that enhances the effect of probiotics. In this case, the prebiotics may further include at least one selected from the group consisting of fibers, oligosaccharides, flauctooligosaccharides, and galactooligosaccharides.

프로바이오틱스란, 체내에서 건강에 좋은 영향을 미치는 미생물을 의미할 수 있다. 프리바이오틱스란, 유익균을 포함하는 미생물에 의해 이용되어 미생물의 생육이나 활성을 촉진시킴으로써 숙주의 건강에 좋은 효과를 나타내게 하는 성분을 의미할 수 있다.Probiotics may refer to microorganisms that have a beneficial effect on health in the body. Prebiotics may mean a component that is used by microorganisms including beneficial bacteria to promote the growth or activity of microorganisms, thereby exhibiting a good effect on the health of the host.

본 명세서에 개시된 조성물은 장내 유익균의 증식 또는 생장을 촉진하고 장내 유해균의 증식 또는 생장을 억제하여 장내균총을 개선함으로써 장건강, 장 기능을 향상시켜 줄 뿐만 아니라 프리바이오틱스로 작용하여 프로바이오틱스와 병용 시 프로바이오틱스의 효능을 증강시켜 주는 시너지 효과가 있다. 이러한 쌀 발효물의 효과는, 보리누룩외에 다른 종래의 방법으로 제조된 누룩을 접종한 쌀 발효물에서는 효과가 미미하고, 오로지 보리누룩을 접종하여 발효한 쌀 발효물에서만 나타난다.The composition disclosed herein not only improves intestinal health and intestinal function by improving the intestinal flora by promoting the growth or growth of beneficial intestinal bacteria and inhibiting the growth or growth of harmful bacteria in the intestine, but also acts as a prebiotic to act as a prebiotic when combined with probiotics There is a synergistic effect that enhances the efficacy of probiotics. The effect of these fermented rice products is insignificant in fermented rice inoculated with yeast prepared by other conventional methods other than barley koji, and only appears in fermented rice fermented by inoculating barley koji.

또한 본 발명의 일 실시예에서 동물모델에 쌀 발효물을 경구투여하면, 대장 조직에서 전염증성 사이토카인의 발현량이 유의하게 감소하며, 항염증성 인자는 증가하는 것을 확인한 바, 염증성 장질환(inflammatory bowel disease) 개선, 예방 또는 치료 효과가 있음을 알 수 있었다.In addition, in an embodiment of the present invention, when fermented rice is orally administered to an animal model, the expression level of pro-inflammatory cytokines in the colon tissue is significantly reduced, and it was confirmed that the anti-inflammatory factor increases, inflammatory bowel disease (inflammatory bowel disease) disease) was found to have an improvement, prevention or treatment effect.

염증성 장질환(IBD: Inflammatory Bowel Disease)는 궤양성 대장염 및 크론병으로 대표되는 대장 및 소장의 점막에 만성 염증 및/또는 궤양을 일으키는 원인 불명의 질환의 총칭으로 이에 제한되지 않으나 예를 들어, 장 병변, 궤양성 대장염, 출혈성 직장 궤양 및 회장 낭염(囊炎)일 수 있다. 대부분 10대 내지 20대로 비교적 젊은 연령에서 발증하며, 설사, 발열, 복통 등의 임상 증상이나 전신적인 염증 증상을 나타내고, 경구적으로 섭취한 음식물의 영양을 효율적으로 흡수할 수 없게 될 뿐더러, 식이 제한이나 배변 회수가 많아 사회생활이 어려움을 겪는 일이 문제로 되고 있으며, 염증성 장질환의 원인으로서 자기면역 이상설이나 장내 세균설 등이 보고되고 있다.Inflammatory Bowel Disease (IBD) is a generic term for diseases of unknown etiology that cause chronic inflammation and/or ulceration in the mucous membranes of the large intestine and small intestine, which are represented by ulcerative colitis and Crohn's disease, but are not limited thereto. lesions, ulcerative colitis, hemorrhagic rectal ulcers and ileal capsuleitis. Most of them are in their teens to 20s, and they show clinical symptoms such as diarrhea, fever, and abdominal pain or systemic inflammatory symptoms. Difficulty in social life due to frequent bowel movements is a problem, and autoimmune abnormalities and intestinal bacteria theory have been reported as the cause of inflammatory bowel disease.

상기 쌀 발효물 제조시 사용되는 누룩에 따라 '장기능 개선, 염증성 장질환'효과가 상이해지는데, 이는 후술하는 실험예를 통해 확인할 수 있다. 따라서 장기능 및/또는 염증성 장질환 개선, 예방 및 치료효과들을 갖는 본 발명의 쌀 발효물을 얻기 위해서는 보리누룩을 사용하는 것이 바람직하다.The effect of 'improving intestinal function and inflammatory bowel disease' is different depending on the yeast used in manufacturing the fermented rice, which can be confirmed through the experimental examples described below. Therefore, it is preferable to use barley koji to obtain the rice fermented product of the present invention having effects of improving, preventing and treating intestinal function and/or inflammatory bowel disease.

상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 포함하는 혼합보리가루를 발효시켜 얻어진 것이 바람직하다. 만약 일반 보리만으로 제조될 경우에는 장기능 개선 효능의 척도가 되는 단쇄지방산 생성능이 현저히 낮을 뿐만 아니라, 염증성 장질환 효과에 대해서도 유의적인 효과를 나타내지 못하므로, 상술한 바와 같이 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말 중에서 적어도 둘 이상을 포함하는 것이 바람직하고, 찐 보리분말, 볶은 보리분말 중 적어도 하나 이상이 반드시 포함되어 있는 것이 더욱 바람직하며, 가장 바람직하게는 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말을 모두 포함하는 것일 수 있다.The barley yeast is preferably obtained by fermenting mixed barley powder containing two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder. If it is prepared only from ordinary barley, the short-chain fatty acid production ability, which is a measure of the efficacy of improving intestinal function, is significantly low, and it does not show a significant effect on the effect of inflammatory bowel disease. and at least two or more of barley powder, more preferably at least one of steamed barley powder and roasted barley powder, and most preferably steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder. It may be all inclusive.

후술하는 실험예를 통해 본 발명의 보리누룩 외에 종래 다양한 전통적 방법으로 누룩(비교예 1-9)을 사용하여 제조된 쌀 발효물의 장기능, 염증성 장질환 개선, 예방 또는 치료효과를 비교하였다. 그 결과 비교예 1-9의 쌀 발효물은 생체 외(in vitro)에서 현저히 낮은 단쇄지방산 생성능과 프로바이오틱 또는 프리바이오틱 활성을 나타내었으며, 특히 실제 동물모델에 경구투여하면 그 효과가 더욱 저하되거나 거의 나타나지 않는 문제가 있음이 확인되었다. 또한 동물모델을 통한 장내 염증성 사이코카인 발현량에서도, 본 발명의 보리누룩으로 제조된 쌀 발효물이 가장 큰 효과를 나타냄을 알 수 있다.The effect of improving, preventing or treating intestinal function, inflammatory bowel disease, or improvement of fermented rice prepared by using yeast (Comparative Examples 1-9) in various traditional methods other than the barley yeast of the present invention was compared through the experimental examples described below. As a result, the fermented rice of Comparative Examples 1-9 showed significantly low short-chain fatty acid production ability and probiotic or prebiotic activity in vitro, and in particular, the effect was further reduced when orally administered to an actual animal model It was confirmed that there was a problem that did not appear or rarely appeared. In addition, it can be seen that the fermented rice produced from barley koji of the present invention exhibits the greatest effect in the expression of inflammatory psychokines in the intestine through the animal model.

상기 보리누룩의 제조에 사용되는 보리는, 일반적으로 식용가능한 보리라면 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 통보리일 수 있다.Barley used for the production of barley yeast is not particularly limited as long as it is generally edible barley, but preferably barley.

상기 보리누룩의 발효는 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 수행되는 것이 바람직한데 상기 발효온도가 25 ℃보다 낮으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 35 ℃보다 높으면 누룩이 변성될 위험이 있다. 또한 발효 기간이 20일보다 짧으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 25일보다 길면 누룩이 변성될 위험이 있다. 습도조건 역시 상기 조건범위를 벗어날 경우 누룩이 변성되거나 충분히 발효되지 않는 문제가 발생할 수 있다.The fermentation of barley yeast is preferably carried out for 20 to 25 days at 25 to 35 ℃ and 40 to 60% humidity conditions. If the fermentation temperature is lower than 25 ℃, the fermentation does not occur sufficiently, and if higher than 35 ℃, the yeast There is a risk of degeneration. In addition, if the fermentation period is shorter than 20 days, fermentation does not occur sufficiently, and if it is longer than 25 days, there is a risk of denaturation of yeast. Humidity conditions may also cause a problem that yeast is denatured or not sufficiently fermented if it is out of the above condition range.

본 발명의 일 실시예에 따르면 상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말를 모두 포함하는 혼합보리가루를 발효시켜 얻어진 것이 가장 바람직하며, 이 경우 상기 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말은 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5로 혼합하는 것이 바람직한데, 1:0.5:0.5 미만이거나 1:1.5:1.5를 초과하면 발효되는 과정에서 생기는 균의 종류나 성분에 변화가 생길 수 있다.According to an embodiment of the present invention, the barley yeast is most preferably obtained by fermenting mixed barley powder including all of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder, and in this case, the steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder It is preferable to mix silver in a ratio of 1:0.5:0.5 to 1:1.5:1.5, but if it is less than 1:0.5:0.5 or exceeds 1:1.5:1.5, there may be changes in the type or component of bacteria generated during the fermentation process. .

본 발명의 보리누룩은 혼합보리가루의 자연발효과정을 통해, 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하는 것으로 메타지놈 분석을 통해 확인되었다. 후술하는 실험에를 통해 확인한 결과, 균류와 세균에서 우점종이 전혀 상이할 경우, 쌀 발효물 역시 단쇄지방산 함량이 전혀 상이함을 확인할 수 있었다. 특히 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하는 본 발명의 보리누룩으로 쌀 발효물을 제조하는 것이 가장 우수한 장기능 또는 염증성 장질환 개선, 치료 또는 예방 효과를 달성함을 알 수 있다.The barley koji of the present invention contains a fungal community with Rhizopus oryzae as the dominant species and a bacterial community with Pantoea agglomerans as the dominant species through the natural fermentation process of mixed barley flour. It was confirmed through metagenome analysis. As a result of confirming through the experiment described below, it was confirmed that the content of short-chain fatty acids in the fermented rice was also completely different when the dominant species were completely different from the fungus and the bacteria. In particular, it is best to prepare a rice fermented product with the barley koji of the present invention, which contains a fungal community with a dominant species Rhizopus oryzae and a bacterial community with Pantoea agglomerans as the dominant species. It can be seen that the improvement, treatment or prevention effect of intestinal function or inflammatory bowel disease is achieved.

바람직하게 상기 균류 군집은 아스퍼질러스 플라부스(Aspergillus flavus), 아스퍼질러스 플라부스 변이주 오리제(Aspergillus flavus var. oryzae), 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 및 리조푸스 마이크로스포루스(Rhizopus microsporus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있다.Preferably, the fungal colony is Aspergillus flavus, Aspergillus flavus var. oryzae, Aspergillus fumigatus, and Rhizopus microsporus. microsporus) may further include any one or more selected from the group consisting of.

상기 세균 군집은 시트로박터 프룬디(Citrobacter freundii), 판토에아 가비니에(Pantoea gaviniae), 바실러스 푸밀루스(Bacillus pumilus), 바실러스 소노렌시스(Bacillus sonorensis), 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis) 및 엔테로박테리아과(Enterobacteriaceae)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있고, 가장 바람직하게는 상기 균류 군집과 세균 군집을 모두 포함하는 것일 수 있다. 상기 우점종의 균주들만을 별도로 접종하여 발효시켜 누룩을 제조하는 경우보다, 상기 균주들이 포함되어 있는 것이, 추후 쌀 발효물의 특유의 냄새와 맛에 있어서, 선호도가 더욱 높아지는 장점을 갖는다.The bacterial community is Citrobacter freundii, Pantoea gaviniae, Bacillus pumilus, Bacillus sonorensis, Bacillus subtilis And it may further include any one or more selected from the group consisting of Enterobacteriaceae, and most preferably, it may include both the fungal community and the bacterial community. Rather than producing yeast by separately inoculating and fermenting only the strains of the dominant species, the fact that the strains are included has the advantage of increasing preference in the characteristic smell and taste of fermented rice later.

상기 쌀 발효물은 상기 증자된 쌀에 상기 보리누룩 및 물을 혼합하여 1차 발효물을 얻고, 상기 1차 발효물에 증자된 쌀과 물을 혼합하여 2차 발효시켜 얻은 것일 수 있다.The rice fermented product may be obtained by mixing the steamed rice with the barley yeast and water to obtain a primary fermented product, and mixing the steamed rice and water with the primary fermented product for secondary fermentation.

본 발명은 건조된 쌀을 물에 불리고 증자하고 식힌 후, 보리누룩을 이요하여 발효시켜, 1차 발효된 쌀 발효물을 얻는다. 1차 발효는 22 ~ 24 ℃에서 5 ~ 9일이며, 발효온도가 22 ℃보다 낮으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 24 ℃보다 높으면 쌀 발효물이 변성될 위험이 있다. 또한 발효 기간이 5일보다 짧으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 9일보다 길면 발효 쌀이 변성될 위험이 있다.In the present invention, dried rice is soaked in water, steamed and cooled, and then fermented with barley koji to obtain a primary fermented rice fermented product. Primary fermentation is 5 to 9 days at 22 ~ 24 ℃. If the fermentation temperature is lower than 22 ℃, fermentation does not occur sufficiently, and if it is higher than 24 ℃, there is a risk of denaturation of the fermented rice. In addition, if the fermentation period is shorter than 5 days, sufficient fermentation does not occur, and if it is longer than 9 days, there is a risk of fermented rice being denatured.

상기 증자된 쌀과 보리누룩의 중량비는 장기능 개선 효과에 의한 단쇄지방산 생성능과 염증성 사이토카인 억제능을 고려하여 5:1 ~ 20:1일 수 있으며, 바람직하게는 5:1~10:1일 수 있다. 상기 중량비는 고형분 중량을 기준으로 한 것이다. 상기 증자된 쌀과 보리누룩의 중량비가 20:1 이상이면 쌀의 함량이 많아져 보리누룩의 생육이 어려워 1, 2차 발효에 의해 유래된 쌀 발효물의 기능성을 기대하기 어렵고, 5:1을 미만으로 포함하면 쌀의 함량이 낮아 이로부터 유래된 쌀 발효물의 기능성을 기대하기 어렵다.The weight ratio of the steamed rice and barley yeast may be 5:1 to 20:1, preferably 5:1 to 10:1, considering the short-chain fatty acid production ability and the inflammatory cytokine inhibitory ability due to the long-term improvement effect. there is. The above weight ratio is based on the solids weight. If the weight ratio of the steamed rice and barley koji is 20:1 or more, the content of rice increases and the growth of barley koji is difficult, so it is difficult to expect the functionality of the fermented rice derived from primary and secondary fermentation, and less than 5:1 It is difficult to expect the functionality of the fermented rice derived therefrom because the content of rice is low.

상기 첨가되는 물의 함량은 필요에 따라 적절히 선택하여 첨가할 수 있고, 바람직하게는 상기 증자된 쌀 1 중량부를 기준으로 0.5 내지 10 중량부 첨가될 수 있다.The content of the added water may be appropriately selected and added as needed, and preferably 0.5 to 10 parts by weight based on 1 part by weight of the steamed rice may be added.

상기 2차 발효는 22 ~ 24 ℃에서 10 ~ 18 일간 수행되며, 발효온도가 22 ℃보다 낮으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 24 ℃보다 높으면 쌀 발효물이 변성될 위험이 있다. 또한 발효 기간이 10일보다 짧으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 18일보다 길면 쌀 발효물이 변성될 위험이 있다.The secondary fermentation is carried out for 10 to 18 days at 22 ~ 24 ℃, if the fermentation temperature is lower than 22 ℃ fermentation does not occur sufficiently, if it is higher than 24 ℃, there is a risk of denaturation of the fermented rice. In addition, if the fermentation period is shorter than 10 days, sufficient fermentation does not occur, and if it is longer than 18 days, there is a risk of denaturation of the fermented rice.

상기 1차 및 2차 발효는 정치발효 또는 50rpm 이하로 발효시키는 것이 바람직하다.The primary and secondary fermentation is preferably static fermentation or fermentation at 50 rpm or less.

또한 상기 쌀 발효물은 추후 활용을 염두하여 알코올을 제거하는 공정을 더 포함할 수 있다. 알코올을 제거하기 위해서는 상기 쌀 발효물을 건조하는 것이 바람직하며, 건조 단계는 위생 천이나 기타 깨끗한 천을 사용하여 쌀 발효물을 자연 바람 상태에서 실내 또는 햇볕에 노출시켜 건조하거나, 상기 쌀 발효물을 설정된 건조 장치에 넣고 온도를 가온하면서 건조하거나, 동결 건조할 수 있으며, 동결 건조가 가장 바람직하다.In addition, the fermented rice may further include a process of removing alcohol in consideration for future use. In order to remove the alcohol, it is preferable to dry the fermented rice, and in the drying step, the fermented rice is dried by exposing it to the sun or indoors in a natural wind condition using a sanitary cloth or other clean cloth, or the rice fermented product is set It can be put in a drying device and dried while heating the temperature, or it can be freeze-dried, and freeze-drying is most preferable.

본 명세서에서 용어 ‘유효성분으로 포함하는’이란 본 발명의 쌀 발효물의 장기능 또는 염증성 장질환 개선, 치료 또는 예방 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. As used herein, the term 'comprising as an active ingredient' means including an amount sufficient to achieve intestinal function or inflammatory bowel disease improvement, treatment or prevention efficacy or activity of the rice fermented product of the present invention.

상기 식품 조성물이란, 상기 쌀 발효물을 캡슐, 정제, 분말, 과립, 액상, 환, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리 또는 바(bar) 형태로 제제화 한 것일 수 있고, 또는 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하여 일반 식품 형태로 제조한 것으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다. The food composition may be formulated in the form of capsules, tablets, powders, granules, liquids, pills, flakes, pastes, syrups, gels, jellies or bars, or beverages, teas, It is manufactured in the form of general food by adding it to food materials such as spices, gum, and confectionery, and it means that it has a specific effect on health when ingested. It has the advantage that there are no side effects that may occur.

또한 상기 식품 조성물은 보리누룩으로 제조된 기능성 전통주를 포함할 수 있고, 상기 전통주는 막걸리, 동동주, 청주, 증류식 소주 등을 포함하며, 바람직하게는 막걸리일 수 있다.In addition, the food composition may include a functional traditional liquor prepared from barley yeast, and the traditional liquor includes makgeolli, dongdongju, cheongju, distilled soju, and the like, and may preferably be makgeolli.

상기 기능성은 '장기능 개선, 장내 미생물 균총의 개선, 염증성 장질환 치료 활성'을 갖는 것을 의미한다.The functionality means having 'improving intestinal function, improving intestinal microbial flora, and treating inflammatory bowel disease'.

상기 식품 조성물은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 매우 유용하다. 이와 같은 식품 조성물에 있어서의 쌀 발효물의 첨가량은, 대상인 식품 조성물의 종류에 따라 달라 일률적으로 규정할 수 없지만, 식품 본래의 맛을 손상시키지 않는 범위에서 첨가하면 되며, 대상 식품에 대하여 통상 0.01 내지 50 중량%, 바람직하기로는 0.1 내지 20 중량%의 범위이다. 또한, 캡슐, 정제, 분말, 과립, 액상, 환, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리 또는 바(bar) 형태의 식품 조성물의 경우에는 통상 0.1 내지 100 중량% 바람직하기로는 0.5 내지 80 중량%의 범위에서 첨가하면 된다. The food composition is very useful because it can be ingested on a daily basis. The amount of the fermented rice added in such a food composition varies depending on the type of the target food composition and cannot be uniformly defined, but it may be added within a range that does not impair the original taste of the food, and is usually 0.01 to 50 for the target food % by weight, preferably in the range from 0.1 to 20% by weight. In addition, in the case of a food composition in the form of a capsule, tablet, powder, granule, liquid, pill, piece, paste, syrup, gel, jelly or bar, usually 0.1 to 100% by weight, preferably 0.5 to 80% by weight It can be added within the range of

상기 식품 조성물은 유효성분으로서 쌀 발효물 뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제와 음료류로 제조되는 경우에는 본 발명의 쌀 발효물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 및 각종 식물 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.The food composition may include not only fermented rice as an active ingredient, but also ingredients commonly added during food production, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients, seasonings and flavoring agents. Examples of the above-mentioned carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like; and polysaccharides, for example, conventional sugars such as dextrin, cyclodextrin, and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents, natural flavoring agents [taumatine, stevia extract (eg, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.)) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be used. For example, when the food composition of the present invention is prepared as a drink or beverage, citric acid, fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, fruit juice, and various plant extracts may be additionally included in addition to the fermented rice of the present invention. .

또한 쌀 발효물을 유효성분으로 포함하는 염증성 장질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물에서, 쌀 발효물은 예를 들어, 0.001 mg/kg 이상, 바람직하게는 0.1 mg/kg 이상, 보다 바람직하게는 10 mg/kg 이상, 보다 더 바람직하게는 100 mg/kg 이상, 보다 더욱 더 바람직하게는 250 mg/kg 이상, 가장 바람직하게는 0.1 g/kg 이상 포함된다. 쌀 발효물은 천연물로서 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 본 발명의 조성물 내에 포함되는 쌀 발효물의 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.In addition, in the pharmaceutical composition for the treatment or prevention of inflammatory bowel disease comprising fermented rice as an active ingredient, the fermented rice is, for example, 0.001 mg/kg or more, preferably 0.1 mg/kg or more, more preferably 10 mg/kg or more, even more preferably 100 mg/kg or more, even more preferably 250 mg/kg or more, and most preferably 0.1 g/kg or more. Since the fermented rice is a natural product and there is no side effect to the human body even when administered in excess, the upper limit of the quantity of the fermented rice contained in the composition of the present invention may be selected and implemented by those skilled in the art within an appropriate range.

상기 약학 조성물은 상기 유효 성분 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다. The pharmaceutical composition may be prepared using a pharmaceutically suitable and physiologically acceptable adjuvant in addition to the active ingredient, and the adjuvant includes an excipient, a disintegrant, a sweetener, a binder, a coating agent, a swelling agent, a lubricant, a lubricant, or A flavoring agent and the like may be used.

상기 약학 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효 성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제제화할 수 있다.The pharmaceutical composition may be formulated to include one or more pharmaceutically acceptable carriers in addition to the active ingredients described above for administration.

상기 약학 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효 성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함한다.Formulations of the pharmaceutical composition may be granules, powders, tablets, coated tablets, capsules, suppositories, solutions, syrups, juices, suspensions, emulsions, drops or injectables. For example, for formulation in the form of a tablet or capsule, the active ingredient may be combined with an orally, non-toxic, pharmaceutically acceptable inert carrier such as ethanol, glycerol, water, and the like. In addition, if desired or required, suitable binders, lubricants, disintegrants and color-developers may also be included in the mixture. Suitable binders include, but are not limited to, starch, gelatin, natural sugars such as glucose or beta-lactose, corn sweeteners, natural and synthetic gums such as acacia, tracacanth or sodium oleate, sodium stearate, magnesium stearate, sodium benzoate, sodium acetate, sodium chloride, and the like. Disintegrants include, but are not limited to, starch, methyl cellulose, agar, bentonite, xanthan gum, and the like.

액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약학 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다.In the composition formulated as a liquid solution, acceptable pharmaceutical carriers are sterile and biocompatible, and include saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, albumin injection, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol, and these One or more of the components may be mixed and used, and other conventional additives such as antioxidants, buffers, and bacteriostats may be added as needed. In addition, diluents, dispersants, surfactants, binders and lubricants may be additionally added to form an injectable formulation such as an aqueous solution, suspension, emulsion, etc., pills, capsules, granules or tablets.

더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화 할 수 있다.Furthermore, by using the method disclosed in Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA by an appropriate method in the field, it can be preferably formulated according to each disease or component.

상기 약학 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여이다.The pharmaceutical composition may be administered orally or parenterally, and in the case of parenteral administration, it may be administered by intravenous injection, subcutaneous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, transdermal administration, etc., preferably oral administration.

상기 약학 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 바람직한 구현예에 따르면, 상기 약학 조성물의 1일 투여량은 0.001-10g/㎏이다.A suitable dosage of the pharmaceutical composition varies depending on factors such as formulation method, administration mode, age, weight, sex, pathological condition, food, administration time, route of administration, excretion rate, and response sensitivity of the patient, usually skilled A trained physician can readily determine and prescribe an effective dosage for the desired treatment or prevention. According to a preferred embodiment, the daily dose of the pharmaceutical composition is 0.001-10 g/kg.

상기 약학 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition is prepared in unit dosage form by formulating using a pharmaceutically acceptable carrier and/or excipient according to a method that can be easily carried out by a person of ordinary skill in the art to which the present invention pertains. It may be prepared by introduction into a dose container. At this time, the formulation may be in the form of a solution, suspension, or emulsion in oil or aqueous medium, or may be in the form of an extract, powder, granule, tablet or capsule, and may additionally include a dispersant or stabilizer.

본 발명의 또 다른 측면은 아래 단계를 포함하는 보리누룩의 제조방법에 관한 것이다. Another aspect of the present invention relates to a method for producing barley yeast comprising the steps below.

1) 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 혼합하여 혼합보리가루를 제조하는 단계;1) preparing mixed barley powder by mixing two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder;

2) 상기 혼합보리가루를 반죽하고, 누룩 성형틀에 넣어 성형하는 단계; 및2) kneading the mixed barley flour and molding it into a mold for forming yeast; and

3) 상기 누룩 성형물을 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 발효시키는 단계.3) The step of fermenting the yeast molded product at 25 ~ 35 ℃, 40 ~ 60% humidity conditions for 20 ~ 25 days.

먼저 1) 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 혼합하여 혼합보리가루를 제조한다.First, 1) mixed barley powder is prepared by mixing two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder.

상기 찐 보리분말은 보리를 세척하고 완전히 건조시킨 후, 증기에 2 내지 4 시간 바람직하게는 3 시간 찌는 과정을 통해 제조한 다음, 이를 분쇄하여 분말화한 것일 수 있다. 오토 클레이브 등을 이용하여 압력을 가하여 찌는 경우 보리를 찌는 시간은 1~2 시간으로 단축될 수 있다.The steamed barley powder may be obtained by washing the barley and drying it completely, steaming the barley for 2 to 4 hours, preferably for 3 hours, and then pulverizing it to powder. When steaming by applying pressure using an autoclave, etc., the steaming time of barley can be shortened to 1 to 2 hours.

상기 볶은 보리분말은 보리를 세척하고 완전히 건조시킨 후, 70 ~ 300 ℃를 넘지않도록 유지하면서 골고루 저어주며 볶음 처리한 다음, 이를 분쇄하여 분말화한 것일 수 있다. 온도가 70 ℃ 이하에서는 공정 시간이 오래걸리고, 고소한 향미가 없으며, 300 ℃ 이상에서는 시간은 단축되나 원재료의 균일한 볶음 처리가 되지 않고 외부 탄화가 먼저 일어나 색상과 향미가 좋지 못하여 바람직하지 못하다. 볶음지속시간은 10분 이하에서는 균일한 볶음 처리가 충분히 이뤄지지 못하고, 20분 이상이면 경제적이지 못하며 탄화면에서 바람직하지 못하다. 또한 건조를 시키지 않고 진행할 경우에는 생산 수율면에서 경제적이지 못하다. 열원은 가스, 전열, 석유 등 특별히 이에 제한되지 않는다.The roasted barley powder may be obtained by washing and completely drying the barley, stirring it evenly while maintaining the temperature not to exceed 70 ~ 300 ℃, and then roasting it, and then pulverizing it to powder. When the temperature is below 70 ℃, the process takes a long time, there is no fragrant flavor, and at 300 ℃ or more, the time is shortened, but the uniform roasting of the raw material is not performed and external carbonization occurs first, which is not preferable because the color and flavor are not good. If the duration of stir-frying is less than 10 minutes, uniform stir-frying treatment is not sufficiently achieved, and if it is longer than 20 minutes, it is not economical and is undesirable in carbonization. In addition, if it proceeds without drying, it is not economical in terms of production yield. The heat source is not particularly limited thereto, such as gas, electric heat, or petroleum.

상기 보리분말은 충분한 물로 세척한 후, 45 ~ 55℃에서 2 ~ 3일 건조기에서 건조하거나, 자연 건조한 다음, 이를 분쇄하여 분말화한 것일 수 있다. After washing with sufficient water, the barley powder may be dried in a dryer at 45 to 55° C. for 2-3 days, or dried naturally, and then pulverized by pulverizing it.

상기 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말의 원료로는 일반적으로 식용가능한 보리라면 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 통보리일 수 있다.The raw material of the steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder is not particularly limited as long as it is generally edible barley, but preferably, it may be barley.

상기 1) 단계는 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 2 이상을 혼합하여 혼합보리가루를 제조하는 것일 수 있는데, 만약 보리분말만으로 제조될 경우에는 장기능 개선 효능의 척도가 되는 단쇄지방산 생성능이 현저히 낮을 뿐만 아니라, 염증성 장질환 효과에 대해서도 유의적인 효과를 나타내지 못하므로, 상술한 바와 같이 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말 중에서 적어도 둘 이상을 포함하는 것이 바람직하다. 또한 상기 혼합보리가루 제조시에는 찐 보리분말, 볶은 보리분말 중 적어도 하나 이상이 반드시 포함되어 있는 것이 더욱 바람직하며, 가장 바람직하게는 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말을 모두 포함하는 것일 수 있다.Step 1) may be to prepare mixed barley powder by mixing two or more selected from the group consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder. It is preferable to include at least two or more of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder, as described above, because the ability to produce short-chain fatty acids is remarkably low and does not show a significant effect on the effect of inflammatory bowel disease. In addition, it is more preferable that at least one of steamed barley powder and roasted barley powder is always included in the preparation of the mixed barley powder, and most preferably, it may include all of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder. .

본 발명의 일 실시예에 따르면 상기 1) 단계는 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말을 모두 혼합하여 혼합보리가루를 제조할 수 있고, 이 경우, 상기 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말은 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5로 혼합하는 것이 바람직한데, 1:0.5:0.5 미만이거나 1:1.5:1.5를 초과하면 발효되는 과정에서 생기는 누룩균의 종류나 성분에 변화가 생길 수 있다.According to an embodiment of the present invention, in step 1), mixed barley powder may be prepared by mixing all of the steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder. In this case, the steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder It is preferable to mix silver 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5, but if it is less than 1:0.5:0.5 or exceeds 1:1.5:1.5, there may be changes in the type or component of yeast produced during the fermentation process. .

상기 보리는 통상의 방법에 따라서 분말화할 수 있다.The barley can be pulverized according to a conventional method.

다음으로 2) 상기 혼합보리가루를 반죽하고, 누룩 성형틀에 넣어 성형하고, 3) 상기 누룩 성형물을 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 발효시켜, 보리누룩을 얻는다.Next, 2) knead the mixed barley flour, put it in a mold for molding, 3) ferment the yeast molded product at 25 ~ 35 ℃, under 40 ~ 60% humidity conditions for 20 ~ 25 days, get

상기 1) 단계로부터 제조된 혼합보리가루에 적정량의 물을 첨가하여 반죽하고, 상기 반죽을 누축 성형틀에서 성형할 수 있다. 상기 첨가되는 물의 함량은 통상적으로 반죽 제조시 사용되는 양이면 특별히 이에 제한되지 않는다.An appropriate amount of water may be added to the mixed barley flour prepared in step 1) and kneaded, and the dough may be molded in a quilt mold. The content of the added water is not particularly limited as long as it is an amount typically used in preparing the dough.

최종적으로 상기 2) 단계로부터 제조된 상기 누룩 성형물을 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 발효시키는 것이 바람직한데 상기 발효 온도가 25 ℃보다 낮으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 35 ℃보다 높으면 누룩이 변성될 위험이 있다. 또한 발효 기간이 20일보다 짧으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 25일보다 길면 누룩이 변성될 위험이 있다. 습도조건 역시 상기 조건범위를 벗어날 경우 누룩이 변성되거나 충분히 발효되지 않는 문제가 발생할 수 있다.Finally, it is preferable to ferment the yeast molded product prepared in step 2) for 20 to 25 days at 25 to 35 ° C. under 40 to 60% humidity conditions. If the fermentation temperature is lower than 25 ° C, fermentation does not occur sufficiently. , If it is higher than 35 ℃, there is a risk of denaturation of yeast. In addition, if the fermentation period is shorter than 20 days, fermentation does not occur sufficiently, and if it is longer than 25 days, there is a risk of denaturation of yeast. Humidity conditions may also cause a problem that yeast is denatured or not sufficiently fermented if it is out of the above condition range.

상기 과정을 통해 제조된 보리누룩은 필요에 따라서, 발효가 끝난 후, 이를 건조하여 균사를 제거하고 통상의 방법에 따라서 분말화할 수 있다. 건조는 통상의 방법에 의할 수 있고, 바람직하게는 15 ~ 20일간 자연 건조시키나, 이에 제한되지는 않는다. 건조 과정에서 보리누룩은 숙성되어 풍미가 더해진다.Barley yeast prepared through the above process, if necessary, after fermentation is finished, it can be dried to remove the mycelium and powdered according to a conventional method. Drying may be carried out by a conventional method, preferably, natural drying for 15 to 20 days, but is not limited thereto. During the drying process, the barley koji matures and adds flavor.

상기 보리누룩은 메타지놈 분석시 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하는 것을 확인되었다.It was confirmed that the barley nuruk contained a fungal community with Rhizopus oryzae as the dominant species and a bacterial community with Pantoea agglomerans as the dominant species during metagenome analysis.

후술하는 실험예를 통해 확인한 결과, 보리누룩과 원료 또는 제조공정이 조금이라도 상이할 경우, 균류와 세균에서 우점종이 전혀 상이하며, 이를 통해 쌀 발효물을 제조하면, 단쇄지방산 함량과 같이 쌀 발효물의 기능이 현저히 낮아짐을 확인할 수 있었다. 특히 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하는 본 발명의 보리누룩으로 쌀 발효물을 제조하는 것이 가장 우수한 장기능 또는 염증성 장질환 개선, 치료 또는 예방 효과를 달성함을 알 수 있다.As a result of confirming through the experimental examples described below, if the raw material or manufacturing process is slightly different from barley koji, the dominant species is completely different from the fungus and the bacteria. It was confirmed that the function was significantly lowered. In particular, it is best to prepare a rice fermented product with the barley koji of the present invention, which contains a fungal community with a dominant species Rhizopus oryzae and a bacterial community with Pantoea agglomerans as the dominant species. It can be seen that the improvement, treatment or prevention effect of intestinal function or inflammatory bowel disease is achieved.

바람직하게 상기 균류 군집은 아스퍼질러스 플라부스(Aspergillus flavus), 아스퍼질러스 플라부스 변이주 오리제(Aspergillus flavus var. oryzae), 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 및 리조푸스 마이크로스포루스(Rhizopus microsporus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있다. 상기 세균 군집은 시트로박터 프룬디(Citrobacter freundii), 판토에아 가비니에(Pantoea gaviniae), 바실러스 푸밀루스(Bacillus pumilus), 바실러스 소노렌시스(Bacillus sonorensis), 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis) 및 엔테로박테리아과(Enterobacteriaceae)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있다. 가장 바람직하게는 상기 균류 군집과 세균 군집을 모두 포함하는 것일 수 있다. 상기 우점종의 균주들만을 별도로 접종하여 발효시켜 누룩을 제조하는 경우보다, 상기 균주들이 포함되어 있는 것이, 추후 쌀 발효물의 특유의 냄새와 맛에 있어서, 선호도가 더욱 높아지는 장점을 갖는다.Preferably, the fungal colony is Aspergillus flavus, Aspergillus flavus var. oryzae, Aspergillus fumigatus, and Rhizopus microsporus. microsporus) may further include any one or more selected from the group consisting of. The bacterial community is Citrobacter freundii, Pantoea gaviniae, Bacillus pumilus, Bacillus sonorensis, Bacillus subtilis And it may further include any one or more selected from the group consisting of Enterobacteriaceae. Most preferably, it may include both the fungal community and the bacterial community. Rather than producing yeast by separately inoculating and fermenting only the strains of the dominant species, the fact that the strains are included has the advantage of increasing preference in the characteristic smell and taste of fermented rice later.

따라서, 상술한 공정을 통해 제조된 보리누룩은 후술하는 실험예에서와 같이, 쌀 발효물에 적용되면 단쇄지방산 생성능을 증가시키고, 장내 미생물 총균의 균형을 잡아주며, 장내 항염증 인자의 발현은 높이되 염증 인자의 발현은 억제시키는 효능을 나타낸다. 이에 반해 비교제조예 1과 같이 보리분말만을 사용하거나, 비교제조예9와 같이 찐 보리분말, 볶은 보리분말, 보리분말로 이루어진 혼합보리가루에 도꼬마리 잎 즙액을 넣어 반죽하여 누룩이 제조될 경우에는 상기 효능들이 생체외, 내에서 관찰되지 않거나 미미한 것으로 확인되었다.Therefore, when applied to fermented rice, barley nuruk produced through the above-described process increases the short-chain fatty acid production ability, balances the intestinal microflora, and increases the expression of intestinal anti-inflammatory factors. However, the expression of inflammatory factors exhibits an inhibitory effect. On the other hand, as in Comparative Preparation Example 1, only barley powder is used, or as in Comparative Preparation Example 9, steamed barley powder, roasted barley powder, and mixed barley powder consisting of barley powder is kneaded by kneading the extract of the leaves to produce yeast. Efficacy was not observed or found to be negligible in vitro or in vivo.

따라서 본 발명의 달성한 목적을 이루기 위해서 본 발명에서의 보리누룩은 상술한 단계들을 통해 얻은 것이 가장 바람직함을 알 수 있다.Therefore, in order to achieve the object of the present invention, it can be seen that the barley yeast in the present invention is most preferably obtained through the above-described steps.

본 발명의 또 다른 측면은 하기 단계를 포함하는 쌀 발효물의 제조방법에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to a method for producing a fermented rice product comprising the following steps.

a) 보리누룩, 증자된 쌀 및 물을 혼합하여 발효시키는 1차 발효 단계; 및a) a primary fermentation step of fermenting a mixture of barley koji, steamed rice and water; and

b) 상기 1차 발효물에 증자된 쌀 및 물을 넣고 발효시키는 2차 발효 단계;를 포함하는, 장기능 또는 염증성 장질환 개선활성을 갖는 쌀 발효물의 제조방법.b) a second fermentation step of fermenting the steamed rice and water into the first fermented product; a method for producing a fermented rice having intestinal function or inflammatory bowel disease improving activity, including.

이때 상기 보리누룩은 앞선 제조방법에 따라 제조된 것으로, 이하 반복되는 내용은 생략하기로 한다.At this time, the barley yeast is manufactured according to the previous manufacturing method, and repeated contents below will be omitted.

본 발명은 건조된 쌀을 물에 불리고 증자하고 식힌 후, 보리누룩을 이용하여 발효시켜, 1차 발효된 쌀 발효물을 얻는다. 1차 발효는 22 ~ 24 ℃에서 5 ~ 9일이며, 발효온도가 22 ℃보다 낮으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 24 ℃보다 높으면 쌀 발효물이 변성될 위험이 있다. 또한 발효 기간이 5일보다 짧으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 9일보다 길면 발효 쌀이 변성될 위험이 있다.In the present invention, dried rice is soaked in water, steamed and cooled, and then fermented using barley koji to obtain a fermented product of primary fermented rice. Primary fermentation is 5 to 9 days at 22 ~ 24 ℃. If the fermentation temperature is lower than 22 ℃, fermentation does not occur sufficiently, and if it is higher than 24 ℃, there is a risk of denaturation of the fermented rice. In addition, if the fermentation period is shorter than 5 days, sufficient fermentation does not occur, and if it is longer than 9 days, there is a risk of fermented rice being denatured.

상기 증자된 쌀과 보리누룩의 중량비는 장기능 개선 효과에 의한 단쇄지방산 생성능과 염증성 사이토카인 억제능을 고려하여 5:1 ~ 20:1일 수 있으며, 바람직하게는 5:1~10:1일 수 있다. 상기 중량비는 고형분 중량을 기준으로 한 것이다. 상기 증자된 쌀과 보리누룩의 중량비가 20:1 이상이면 쌀의 함량이 많아져 보리누룩의 생육이 어려워 1, 2차 발효에 의해 유래된 쌀 발효물의 기능성을 기대하기 어렵고, 5:1을 미만으로 포함하면 쌀의 함량이 낮아 이로부터 유래된 쌀 발효물의 기능성을 기대하기 어렵다.The weight ratio of the steamed rice and barley yeast may be 5:1 to 20:1, preferably 5:1 to 10:1, considering the short-chain fatty acid production ability and the inflammatory cytokine inhibitory ability due to the long-term improvement effect. there is. The above weight ratio is based on the solids weight. If the weight ratio of the steamed rice and barley koji is 20:1 or more, the content of rice increases and the growth of barley koji is difficult, so it is difficult to expect the functionality of the fermented rice derived from primary and secondary fermentation, and less than 5:1 It is difficult to expect the functionality of the fermented rice derived therefrom because the content of rice is low.

상기 첨가되는 물의 함량은 필요에 따라 적절히 선택하여 첨가할 수 있고, 바람직하게는 상기 증자된 쌀 1 중량부를 기준으로 0.5 내지 10 중량부 첨가될 수 있다.The amount of water to be added may be appropriately selected and added as needed, and preferably 0.5 to 10 parts by weight based on 1 part by weight of the steamed rice may be added.

상기 b) 단계는 상기 1차 발효된 쌀 발효물에 상기 증자된 쌀 및 물을 첨가하여 2차 발효시키는 단계이다. 상기 쌀 발효물의 중량을 기준으로 1-3 배로 증자된 쌀을 첨가하는 것이 바람직하다. 상기 2차 발효는 22 ~ 24 ℃에서 10 ~ 18 일간 수행되며, 발효온도가 22 ℃보다 낮으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 24 ℃보다 높으면 쌀 발효물이 변성될 위험이 있다. 또한 발효 기간이 10일보다 짧으면 발효가 충분히 일어나지 않고, 18일보다 길면 쌀 발효물이 변성될 위험이 있다.Step b) is a second fermentation step by adding the steamed rice and water to the first fermented rice fermented product. It is preferable to add rice that has been increased 1-3 times based on the weight of the fermented rice. The secondary fermentation is carried out for 10 to 18 days at 22 ~ 24 ℃, if the fermentation temperature is lower than 22 ℃ fermentation does not occur sufficiently, if it is higher than 24 ℃, there is a risk of denaturation of the fermented rice. In addition, if the fermentation period is shorter than 10 days, sufficient fermentation does not occur, and if it is longer than 18 days, there is a risk of denaturation of the fermented rice.

상기 1차 및 2차 발효는 정치발효 또는 50rpm 이하로 발효시키는 것이 바람직하다.The primary and secondary fermentation is preferably static fermentation or fermentation at 50 rpm or less.

상기 과정을 통해 제조된 쌀 발효물을 여과포 또는 원심분리를 통해 잔사와 불순물을 제거하는 단계를 더 포함할 수 있다. 또한 상술한 과정을 통해 제조된 쌀 발효물은 발효가 완료된 후, 110~130℃에서 10~20분간 멸균시켜 보관성을 높일 수 있다.The method may further include removing residues and impurities from the rice fermented product prepared through the above process through a filter cloth or centrifugation. In addition, the fermented rice produced through the above-described process can be sterilized at 110 to 130° C. for 10 to 20 minutes after fermentation is completed to increase storage properties.

실시예Example

이하에서 실시예 등을 통해 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 하며, 다만 이하에 실시예 등에 의해 본 발명의 범위와 내용이 축소되거나 제한되어 해석될 수 없다. 또한, 이하의 실시예를 포함한 본 발명의 개시 내용에 기초한다면, 구체적으로 실험 결과가 제시되지 않은 본 발명을 통상의 기술자가 용이하게 실시할 수 있음은 명백하다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail by way of Examples and the like, but the scope and content of the present invention may not be construed as being reduced or limited by the Examples below. In addition, based on the disclosure of the present invention including the following examples, it is apparent that a person skilled in the art can easily practice the present invention for which experimental results are not specifically presented.

제조예1: KN-SP-2 보리누룩 제조Preparation Example 1: Preparation of KN-SP-2 barley yeast

통보리를 물에 깨끗이 씻어 완전히 건조하였다. 건조한 통보리를 1/3 정도 찐 후 햇볕에 건조시켰다. 나머지 건조한 통보리 1/3은 솥에 볶았고, 마지막으로 남은 1/3은 아무 처리도 하지 않고 그대로 사용하였다. 상기 찌고, 볶고, 건조한 통보리를 각각 분쇄하여 분말화하였다.Rinse the scallion thoroughly in water and dry completely. After steaming about 1/3 of the dried gojiri, it was dried in the sun. The remaining 1/3 of the dried dried kimchi was roasted in a pot, and the last remaining 1/3 was used as it is without any treatment. Each of the steamed, roasted, and dried dried soybeans was pulverized and pulverized.

상기 각각의 분말을 섞고(1:1:1의 혼합중량비), 여기에 물 6말(108.234 L)을 첨가하여 반죽한 후, 누룩틀에 넣어 성형하였다. 가운데 구멍을 뚫은 후 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 21 일간 배양시킴으로써 KN-SP-2 보리누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.Each of the above powders was mixed (mixed weight ratio of 1:1:1), 6 malt (108.234 L) of water was added thereto and kneaded, and then put into a mold and molded. After drilling a hole in the center, KN-SP-2 barley yeast was produced by culturing for 21 days in a constant temperature and humidity chamber (incubator) maintained at 25-35 ℃ and 40-60% humidity. The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예1: KN-SP-1 누룩 제조Comparative Preparation Example 1: KN-SP-1 Yeast Preparation

통보리를 깨끗이 씻어 말린 뒤 거칠게 분쇄하고, 체를 이용해 거친 보리분말을 선별하였다. 선별된 통보리 분말 690 g에 물 180 ㎖를 서서히 첨가하며 반죽한 다음, 상기 반죽을 면보자기가 깔린 누룩틀에 단단히 다져 넣어 성형하였다. 그 위에 다시 볏짚을 깔고, 다시 반죽을 다져 층층히 쌓은 다음 볏짚으로 덮어 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 20 일 가량 배양시킴으로써 KN-SP-1 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.After washing and drying barley, coarsely pulverized, and selected coarse barley powder using a sieve. 180 ml of water was slowly added to 690 g of the selected gorilla powder and kneaded, and then the dough was tightly compacted in a koji mold lined with cotton cloth and molded. KN-SP-1 yeast is produced by culturing for about 20 days in an incubator (incubator) at a constant temperature and humidity maintained at 25~35℃ and humidity of 40~60%, covered with rice straw, and then the dough is again compacted and stacked layer by layer. did The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예2: KN-SP-3 누룩 제조Comparative Preparation Example 2: KN-SP-3 Yeast Preparation

밀가루 3 ㎏, 찹쌀가루 18.04 L를 준비하고, 상기 두 가루에 물을 뿌려가며 잘 섞어 혼합보리가루를 제조하였고, 체를 이용해 상기 혼합보리가루과 물이 고루 섞이도록 하여 반죽하였다. 상기 반죽을 면보자기가 깔린 누룩틀에 단단히 다져 넣어 성형하였다. 닥나무 잎으로 상기 누룩틀 겉을 싸고, 그 위에 다시 볏짚(새끼줄)을 깔아 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 50 일간 배양시킴으로써 KN-SP-3 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.Prepare 3 kg of wheat flour and 18.04 L of glutinous rice flour, sprinkle water on the two flours, mix well to prepare mixed barley flour, and knead the mixture by using a sieve to mix the mixed barley flour and water evenly. The dough was tightly compacted and molded in a mold covered with a cotton cloth. KN-SP-3 yeast is produced by wrapping the outside of the yeast mold with mulberry leaves, and then culturing for 50 days in a constant temperature and humidifier (incubator) maintained at 25-35 ° C and humidity of 40-60% by laying straw (coil) on it again. did The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예3: KN-SP-4 누룩 제조Comparative Preparation Example 3: KN-SP-4 Yeast Preparation

밀가루 3 ㎏, 찹쌀가루 18.04 L를 준비하고, 상기 두 가루에 물을 뿌려가며 잘 섞어 혼합보리가루를 제조하였고, 체를 이용해 상기 혼합보리가루과 물이 고루 섞이도록 하여 반죽하였다. 상기 반죽을 면보자기가 깔린 누룩틀에 단단히 다져 넣어 성형한 후, 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 50 일간 배양시킴으로써 KN-SP-4 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.Prepare 3 kg of wheat flour and 18.04 L of glutinous rice flour, sprinkle water on the two flours, mix well to prepare mixed barley flour, and knead the mixture by using a sieve to mix the mixed barley flour and water evenly. KN-SP-4 yeast was produced by culturing the dough in a mold with cotton furoshiki, then compacted and molded, and then incubated for 50 days in a constant temperature and humidifier (incubator) maintained at 25 to 35 ° C and 40 to 60% humidity. The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예4: KN-SP-5 누룩 제조Comparative Preparation Example 4: KN-SP-5 Yeast Preparation

멥쌀 18.04 L을 준비하였다. 먼저 멥쌀을 물에 침지하여 불린 후, 분쇄하고, 체를 이용하여 고운 멥쌀 분말을 선별하였다. 상기 멥쌀 가루에 물을 서서히 넣어주면서 반죽하고, 약 8-10 ㎝의 크기로 둥글게 뭉쳐 빚어 성형하였다. 누룩틀에 면보자기를 깔고, 볏짚과 상기 성형물을 넣은 후, 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 21일동안 발효시킴으로써 KN-SP-5 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.18.04 L of non-glutinous rice was prepared. First, non-glutinous rice was immersed in water and soaked, then pulverized, and fine non-glutinous rice powder was selected using a sieve. The non-glutinous rice flour was kneaded while slowly adding water to it, and was then formed into a ball with a size of about 8-10 cm. KN-SP-5 yeast was produced by laying a cotton cloth on a yeast mold, putting rice straw and the molded product in it, and fermenting it for 21 days in a constant temperature and humidity incubator (incubator) maintained at 25-35 ℃ and 40-60% humidity. The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예5: KN-SP-6 누룩 제조Comparative Preparation Example 5: KN-SP-6 Yeast Preparation

멥쌀 54.12 L을 준비하였다. 먼저 멥쌀을 물에 침지하여 불린 후, 분쇄하고, 체를 이용하여 고운 멥쌀 분말을 선별하였다. 멥쌀 가루를 약 4-6 ㎝의 크기로 둥글게 뭉쳐 빚어 성형하였다. 상기 성형물을 각각 솔잎으로 싸서 서로 닿지 않도록 하여, 종이봉투에 넣은 후, 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 20일동안 발효시킴으로써 KN-SP-6 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.54.12 L of non-glutinous rice was prepared. First, non-glutinous rice was immersed in water and soaked, then pulverized, and fine non-glutinous rice powder was selected using a sieve. The non-glutinous rice flour was formed into round balls with a size of about 4-6 cm. KN-SP-6 yeast is produced by wrapping each of the molded products with pine needles so that they do not touch each other, putting them in a paper bag, and fermenting them for 20 days in a constant temperature and humidifier (incubator) maintained at 25 to 35 ° C and 40 to 60% humidity. did The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예6: KN-SP-7 누룩 제조Comparative Preparation Example 6: KN-SP-7 Yeast Preparation

밀가루 300 g, 녹두 270 ㎖, 황미 360 ㎖, 물 280 ㎖를 준비하였다. 먼저 녹두를 분쇄하여 녹두가루와 껍질을 분리하고, 녹두껍질은 물에 침지시켜 불렸다. 황미를 분쇄하고, 황미가루와 녹두가루 및 밀가루를 섞어 혼합보리가루를 제조하였다. 상기 혼합보리가루에 녹두껍질 불린 물을 넣어 반죽하였다. 상기 반죽을 누룩틀에 넣어 성형한 후, 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 60일동안 발효시킴으로써 KN-SP-7 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.300 g of wheat flour, 270 ml of mung bean, 360 ml of yellow rice, and 280 ml of water were prepared. First, the mung bean was crushed to separate the mung bean powder and the skin, and the mung bean skin was soaked in water and soaked. Hwangmi was pulverized, and mixed barley powder was prepared by mixing yellow rice powder, mung bean powder and wheat flour. Water soaked in mung bean shells was added to the mixed barley flour and kneaded. After molding the dough into a mold, KN-SP-7 yeast was produced by fermenting it for 60 days in a constant temperature and humidifier (incubator) maintained at 25-35 ℃ and 40-60% humidity. The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예7: KN-SP-8 누룩 제조Comparative Preparation Example 7: KN-SP-8 Yeast Preparation

찹쌀 18.04 L, 생여뀌 180.39 L를 사용하여 제조한 천연여뀌즙 및 솔잎을 준비하였다. 먼저 찹쌀을 물에 침지하여 불린 후, 분쇄하고, 체를 이용하여 고운 찹쌀 분말을 선별하였다. 상기 찹쌀 가루에 천연여뀌즙을 서서히 넣어주면서 반죽하고, 약 8-10 ㎝의 크기로 둥글게 뭉쳐 빚어 성형하였다. 누룩틀에 솔잎을 깔아, 상기 성형물들이 서로 닿지 않도록 넣은 후, 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 21일동안 발효시킴으로써 KN-SP-8 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.Natural fern juice and pine needles prepared by using 18.04 L of glutinous rice and 180.39 L of raw fermented rice were prepared. First, glutinous rice was immersed in water and then soaked, pulverized, and fine glutinous rice powder was selected using a sieve. The glutinous rice flour was kneaded while slowly adding the natural sagebrush juice, and was then formed into a round shape with a size of about 8-10 cm. After laying the pine needles on the yeast mold, put the molded products in such a way that they do not touch each other, and then fermented for 21 days in a constant temperature and humidity incubator (incubator) maintained at 25 ~ 35 ℃ and 40 ~ 60% humidity to produce KN-SP-8 yeast. The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예8: KN-SP-9 누룩 제조Comparative Preparation Example 8: KN-SP-9 Yeast Preparation

찹쌀 54.12 L, 밀가루 5.41 L를 준비하였다. 먼저 여뀌잎 30 ㎏에 물 108.23 L를 넣어 중불로 오랜시간 가열한 후, 물의 양이 절반으로 줄어들면 찌꺼기를 제거하여 얻은 달인여뀌즙 54.12 L를 제조하였다. 찹쌀을 씻고, 달인여뀌즙에 밤새 침지하여 불린 후, 물기를 뺀다. 물기가 빠진 찹쌀에 밀가루를 골고루 입힌 후, 두겹의 종이봉투 안에 넣은 후 입구를 끈으로 봉쇄하고 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 60일동안 발효시킴으로써 KN-SP-9 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.54.12 L of glutinous rice and 5.41 L of wheat were prepared. First, 108.23 L of water was added to 30 kg of quince leaf, heated over medium heat for a long time, and when the amount of water was reduced to half, the residue was removed to prepare 54.12 L of decoction of sagebrush. Wash the glutinous rice, soak it overnight in decoction juice, soak it, and drain the water. Coat the drained glutinous rice with flour evenly, put it in a double paper bag, seal the entrance with string, and ferment it for 60 days in a constant temperature and humidity incubator (incubator) maintained at 25~35℃ and 40~60% humidity. SP-9 yeast was produced. The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예9: KN-SP-10 누룩 제조Comparative Preparation Example 9: KN-SP-10 Yeast Preparation

보리 2.07 ㎏, 도꼬마리잎, 제비쑥 및 볏짚을 준비하였다. 먼저 보리를 씻어 완전히 건조하였다. 건조한 보리를 1/3 정도 찐 후 식혀서 분쇄하였다. 나머지 건조한 통보리 1/3은 솥에 볶은 후 분쇄하였고, 마지막으로 남은 1/3은 아무 처리도 하지 않고 그대로 분쇄하여 분말화하였다.2.07 kg of barley, sagebrush leaves, wormwood and rice straw were prepared. First, the barley was washed and completely dried. After steaming about 1/3 of dried barley, it was cooled and ground. The remaining 1/3 of the dried dried kimchi was pulverized after roasting it in a pot, and the last remaining 1/3 was pulverized as it is without any treatment and was pulverized.

도꼬마리잎을 찧어 즙액 540 ㎖를 얻었고, 상기 찹쌀 가루에 도꼬마리 즙액을 서서히 넣어주면서 반죽하였다. 상기 반죽을 면보자기가 깔린 누룩틀에 단단히 다져 넣어 성형하였다. 상기 성형물을 제비쑥으로 위아래를 싸서 짚으로 묶어 25~35 ℃, 습도 40~60%로 유지하는 항온 항습기(배양기)에서 21 일간 배양시킴으로써 KN-SP-10 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.540 ml of a juice solution was obtained by crushing the leaves, and the mixture was kneaded while gradually adding the juice solution of the glutinous rice flour to the glutinous rice flour. The dough was tightly compacted and molded in a mold covered with a cotton cloth. KN-SP-10 yeast was produced by culturing the molded product at the top and bottom with mugwort, tied with straw, and culturing for 21 days in a constant temperature and humidifier (incubator) maintained at 25 to 35 ° C and 40 to 60% humidity. The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

비교제조예10: KN-SP-11 누룩 제조Comparative Preparation Example 10: KN-SP-11 Yeast Preparation

찹쌀 90 ㎖, 생여뀌 920 ㎖를 사용하여 제조한 천연여뀌즙 및 닥나무잎을 준비하였다. 먼저 찹쌀을 물에 침지하여 불린 후, 분쇄하고, 체를 이용하여 고운 찹쌀 분말을 선별하였다. 상기 찹쌀 가루에 천연여뀌즙을 서서히 넣어주면서 반죽하고, 약 8-10 ㎝의 지름을 갖는 둥글고 납작한 형태로 빚어 성형하였다. 상기 성형물을 닥나무잎으로 싼 다음 볏짚을 깔고, 바람드는 곳에 매달아 50일 동안 발효시킴으로써 KN-SP-11 누룩을 생산하였다. 상술한 과정을 통해 완성된 누룩은 믹서로 분쇄하여 고운가루 상태로 보관하였다.A natural extract and mulberry leaf prepared using 90 ml of glutinous rice and 920 ml of raw honeysuckle were prepared. First, glutinous rice was immersed in water and then soaked, pulverized, and fine glutinous rice powder was selected using a sieve. The glutinous rice flour was kneaded while slowly adding natural sagebrush juice, and it was molded into a round and flat shape having a diameter of about 8-10 cm. KN-SP-11 yeast was produced by wrapping the molded product with mulberry leaves, then laying on rice straw, hanging it in a windy place, and fermenting it for 50 days. The yeast completed through the above process was pulverized with a mixer and stored in a fine powder state.

실시예1: KN-SP-2 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Example 1: Preparation of fermented rice using KN-SP-2 yeast

쌀을 물로 세척한 다음 충분한 물을 부어 실온에서 4 시간 침지하고 30분간 물기를 제거한 다음 쌀을 100 ℃에서 1 시간동안 찐 후 냉각하여 원료로 사용하였다.After washing the rice with water, pour enough water, immerse it in room temperature for 4 hours, drain the water for 30 minutes, steam the rice at 100° C. for 1 hour, cool it, and use it as a raw material.

상기 찐 쌀 300 g에 제조예1로부터 제조된 KN-SP-2 보리누룩 100 g을 발효제로 넣고, 0.9 L의 물을 부어 23 ℃에서 7일간 배양하였다(1차 발효).100 g of KN-SP-2 barley yeast prepared in Preparation Example 1 was added to 300 g of the steamed rice as a fermenting agent, 0.9 L of water was poured and cultured at 23° C. for 7 days (primary fermentation).

이후 상기 1차 발효물에 상기 찐 쌀 700 g을 600 ㎖의 물과 함께 추가하여 23 ℃에서 14 일간 2차 배양하였다(2차 발효). 깨끗한 면보를 이용하여 상기 쌀 발효물로부터 균체 및 불순물을 제거하였다.Thereafter, 700 g of the steamed rice was added to the primary fermented product together with 600 ml of water, and secondary culture was performed at 23° C. for 14 days (second fermentation). Cells and impurities were removed from the fermented rice using a clean cotton cloth.

비교예1: KN-SP-1 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 1: Preparation of fermented rice using KN-SP-1 yeast

쌀을 물로 세척한 다음 충분한 물을 부어 실온에서 4 시간 침지하고 30분간 물기를 제거한 다음 쌀을 100 ℃에서 1 시간동안 찐 후 냉각하여 원료로 사용하였다.After washing the rice with water, pour enough water, immerse it in room temperature for 4 hours, drain the water for 30 minutes, steam the rice at 100° C. for 1 hour, cool it, and use it as a raw material.

상기 찐 쌀 300 g에 비교제조예1로부터 제조된 KN-SP-1 누룩 100 g을 발효제로 넣고, 0.9 L의 물을 부어 23 ℃에서 7일간 배양하였다(1차 발효).100 g of KN-SP-1 yeast prepared in Comparative Preparation Example 1 was added to 300 g of the steamed rice as a fermenting agent, 0.9 L of water was poured and cultured at 23° C. for 7 days (primary fermentation).

이후 상기 1차 발효물에 상기 찐 쌀 700 g을 600 ㎖의 물과 함께 추가하여 23 ℃에서 14 일간 2차 배양하였다(2차 발효). 깨끗한 면보를 이용하여 상기 쌀 발효물로부터 균체 및 불순물을 제거하였다.Thereafter, 700 g of the steamed rice was added to the primary fermented product together with 600 ml of water, and secondary culture was performed at 23° C. for 14 days (second fermentation). Cells and impurities were removed from the fermented rice using a clean cotton cloth.

비교예2: KN-SP-3 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 2: Preparation of fermented rice using KN-SP-3 yeast

비교예1과 동일한 방법으로 쌀 발효물을 제조하되, 누룩으로서 비교제조예 1 대신 비교제조예2에서 제조된 KN-SP-3 누룩을 이용하여 쌀 발효물을 제조하였다.A fermented rice was prepared in the same manner as in Comparative Example 1, but a fermented rice was prepared using KN-SP-3 yeast prepared in Comparative Preparation Example 2 instead of Comparative Preparation Example 1 as yeast.

비교예3: KN-SP-4 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 3: Preparation of fermented rice using KN-SP-4 yeast

비교예1과 동일한 방법으로 쌀 발효물을 제조하되, 누룩으로서 비교제조예 1 대신 비교제조예3에서 제조된 KN-SP-4 누룩을 이용하여 쌀 발효물을 제조하였다.A fermented rice was prepared in the same manner as in Comparative Example 1, but a fermented rice was prepared using KN-SP-4 yeast prepared in Comparative Preparation Example 3 instead of Comparative Preparation Example 1 as yeast.

비교예4: KN-SP-5 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 4: Preparation of fermented rice using KN-SP-5 yeast

비교예1과 동일한 방법으로 쌀 발효물을 제조하되, 누룩으로서 비교제조예 1 대신 비교제조예4에서 제조된 KN-SP-5 누룩을 이용하여 쌀 발효물을 제조하였다.A fermented rice was prepared in the same manner as in Comparative Example 1, but a fermented rice was prepared using KN-SP-5 yeast prepared in Comparative Preparation Example 4 instead of Comparative Preparation Example 1 as yeast.

비교예5: KN-SP-6 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 5: Preparation of fermented rice using KN-SP-6 yeast

비교예1과 동일한 방법으로 쌀 발효물을 제조하되, 누룩으로서 비교제조예 1 대신 비교제조예5에서 제조된 KN-SP-6 누룩을 이용하여 쌀 발효물을 제조하였다.A fermented rice was prepared in the same manner as in Comparative Example 1, but a fermented rice was prepared using KN-SP-6 yeast prepared in Comparative Preparation Example 5 instead of Comparative Preparation Example 1 as yeast.

비교예6: KN-SP-7 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 6: Preparation of fermented rice using KN-SP-7 yeast

비교예1과 동일한 방법으로 쌀 발효물을 제조하되, 누룩으로서 비교제조예 1 대신 비교제조예6에서 제조된 KN-SP-7 누룩을 이용하여 쌀 발효물을 제조하였다.A fermented rice was prepared in the same manner as in Comparative Example 1, but a fermented rice was prepared using KN-SP-7 yeast prepared in Comparative Preparation Example 6 instead of Comparative Preparation Example 1 as yeast.

비교예7: KN-SP-8 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 7: Preparation of fermented rice using KN-SP-8 yeast

비교예1과 동일한 방법으로 쌀 발효물을 제조하되, 누룩으로서 비교제조예 1 대신 비교제조예7에서 제조된 KN-SP-8 누룩을 이용하여 쌀 발효물을 제조하였다.A fermented rice was prepared in the same manner as in Comparative Example 1, but a fermented rice was prepared using KN-SP-8 yeast prepared in Comparative Preparation Example 7 instead of Comparative Preparation Example 1 as yeast.

비교예8: KN-SP-9 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 8: Preparation of fermented rice using KN-SP-9 yeast

비교예1과 동일한 방법으로 쌀 발효물을 제조하되, 누룩으로서 비교제조예 1 대신 비교제조예8에서 제조된 KN-SP-9 누룩을 이용하여 쌀 발효물을 제조하였다.A fermented rice was prepared in the same manner as in Comparative Example 1, but a fermented rice was prepared using KN-SP-9 yeast prepared in Comparative Preparation Example 8 instead of Comparative Preparation Example 1 as yeast.

비교예9: KN-SP-10 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 9: Preparation of fermented rice using KN-SP-10 yeast

비교예1과 동일한 방법으로 쌀 발효물을 제조하되, 누룩으로서 비교제조예 1 대신 비교제조예9에서 제조된 KN-SP-10 누룩을 이용하여 쌀 발효물을 제조하였다.A fermented rice was prepared in the same manner as in Comparative Example 1, but a fermented rice was prepared using KN-SP-10 yeast prepared in Comparative Preparation Example 9 instead of Comparative Preparation Example 1 as yeast.

비교예10: KN-SP-11 누룩을 이용한 쌀 발효물 제조Comparative Example 10: Preparation of fermented rice using KN-SP-11 yeast

비교예1과 동일한 방법으로 쌀 발효물을 제조하되, 누룩으로서 비교제조예 1 대신 비교제조예10에서 제조된 KN-SP-11 누룩을 이용하여 쌀 발효물을 제조하였다.A fermented rice was prepared in the same manner as in Comparative Example 1, but a fermented rice was prepared using KN-SP-11 yeast prepared in Comparative Preparation Example 10 instead of Comparative Preparation Example 1 as yeast.

실험예1-1: 누룩의 메타지놈 분석-1Experimental Example 1-1: Metagenomic analysis of yeast-1

제조예1의 KN-SP-2 보리누룩과 비교제조예 7의 KN-SP-8 누룩 제조 자체에 대한 메타지놈을 분석을 수행하고자 하였고, 상기 두 시료로부터 얻은 각각 ITS 영역을 통해 메타지놈을 분석하였다. 이는 (주) 마크로젠 의뢰하여 수행하였다.It was intended to analyze the metagenome for the KN-SP-2 barley yeast of Preparation Example 1 and the KN-SP-8 yeast production itself of Comparative Preparation Example 7, and the metagenome was analyzed through each ITS region obtained from the two samples. did This was done by requesting Macrogen Co., Ltd.

이에 대한 결과를 도 1, 2 및 하기 표 1에 나타내었다. 도 1은 제조예1로부터 제조된 KN-SP-2 보리누룩의 균류(fungi(ITS))에 대한 메타지놈 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. 도 2는 비교제조예 7으로부터 제조된 KN-SP-8 누룩의 균류(fungi(ITS))에 대한 메타지놈 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. The results are shown in FIGS. 1 and 2 and Table 1 below. 1 is a graph showing the results of metagenome analysis for KN-SP-2 barley yeast fungus (fungi (ITS)) prepared in Preparation Example 1. Figure 2 is a graph showing the results of metagenome analysis for the fungus (fungi (ITS)) of KN-SP-8 yeast prepared in Comparative Preparation Example 7.

Fungi (ITS)Fungi (ITS) 제조예 1
KN-SP-2
Preparation Example 1
KN-SP-2
비교제조예 7
KN-SP-8
Comparative Preparation Example 7
KN-SP-8
speciesspecies Aspergillus candidusAspergillus candidus 0.04%0.04% 0.00%0.00% Aspergillus flavusAspergillus flavus 7.42%7.42% 58.31%58.31% Aspergillus flavus var. oryzaeAspergillus flavus var. oryzae 6.08%6.08% 22.91%22.91% Aspergillus fumigatusAspergillus fumigatus 1.82%1.82% 0.00%0.00% Rhizopus microsporusRhizopus microsporus 2.33%2.33% 0.00%0.00% Rhizopus oryzaeRhizopus oryzae 71.18%71.18% 4.98%4.98% uncultured fungusuncultured fungus 10.55%10.55% 12.49%12.49% otherother 0.58%0.58% 1.31%1.31%

도 1, 2 및 표 1에 나타난 바와 같이 균류(Fungi)를 종(species)별로 메타지놈 분석한 결과, 제조예1의 KN-SP-2는 Rhizopus oryzae(71.2%)를 우점종으로 가지는 것을 확인되었다. 이에 반해 비교제조예7인 KN-SP-8 누룩은 Aspergillus flavus(58.3%), Aspergillus flavus var. oryzae(22.9%)가 우점종인 것으로 확인되었다. 즉 누룩에 따라 전혀 상이한 균총을 가지고 있음을 확인하였다.As a result of metagenome analysis of fungi by species as shown in FIGS. 1, 2 and Table 1, it was confirmed that KN-SP-2 of Preparation Example 1 had Rhizopus oryzae (71.2%) as the dominant species. . On the other hand, Comparative Preparation Example 7, KN-SP-8 yeast, Aspergillus flavus (58.3%), Aspergillus flavus var. oryzae (22.9%) was identified as the dominant species. That is, it was confirmed that they had a completely different flora depending on the yeast.

실험예1-2: 누룩의 메타지놈 분석-2Experimental Example 1-2: Metagenomic analysis of yeast-2

1) 16S rDNA를 활용한 bacteria 분석1) Analysis of bacteria using 16S rDNA

제조예1의 KN-SP-2 보리누룩과 비교제조예 7의 KN-SP-8 누룩 제조 자체에 대한 메타지놈을 분석을 수행하고자 하였고, 상기 두 시료로부터 각각 16s rRNA유전자를 추출한 후, 이를 바탕으로 메타지놈 분석을 수행하였다. 이는 (주)마크로젠에 의뢰하여 진행되었다.It was intended to analyze the metagenome for KN-SP-2 barley yeast of Preparation Example 1 and KN-SP-8 yeast production itself of Comparative Preparation Example 7, and after extracting the 16s rRNA gene from each of the two samples, based on this Metagenomic analysis was performed with This was commissioned by Macrogen.

이에 대한 결과를 도 3, 4 및 하기 표 2에 나타내었다. 도 3은 제조예1로부터 제조된 KN-SP-2 보리누룩의 문(phylum) level에서의 메타지놈 분석결과를 나타낸 그래프이다. 도 4는 비교제조예 7으로부터 제조된 KN-SP-8 누룩의 문(phylum) level에 대한 메타지놈 분석결과를 나타낸 그래프이다.The results are shown in FIGS. 3 and 4 and Table 2 below. 3 is a graph showing the metagenome analysis results at the phylum level of KN-SP-2 barley yeast prepared in Preparation Example 1. FIG. 4 is a graph showing the metagenome analysis results for the phylum level of KN-SP-8 yeast prepared from Comparative Preparation Example 7.

Bacteria (16s)Bacteria (16s) 제조예 1
KN-SP-2
Preparation Example 1
KN-SP-2
비교제조예 7
KN-SP-8
Comparative Preparation Example 7
KN-SP-8
phylumphylum "Proteobacteria""Proteobacteria" 87.86%87.86% 44.71%44.71% Cyanobacteria/ChloroplastCyanobacteria/Chloroplast 0.55%0.55% 36.42%36.42% FirmicutesFirmicutes 11.59%11.59% 18.87%18.87% otherother 0.00%0.00% 0.00%0.00%

도 3, 4, 및 표 2에 나타난 바와 같이, 문(phylum) level에서는 제조예1의 KN-SP-2 보리누룩은 Proteobacteria phyla를 87.9%, Firmicutes를 11.6% 가지고 있는 것으로 확인되었다. 이에 반해 비교제조예7의 KN-SP-8 누룩에서는 Proteobacteria 44.7%와 Cyanobacteria/Chloroplast 36.4%, Firmicutes 18.9%이 확인되었다. 이를 통해 본 발명의 제조예1의 보리누룩과 비교제조예7은 전혀 다른 균총으로 이루어진 것을 확인할 수 있다.As shown in FIGS. 3, 4, and Table 2, at the phylum level, it was confirmed that KN-SP-2 barley yeast of Preparation Example 1 had 87.9% of Proteobacteria phyla and 11.6% of Firmicutes. In contrast, in the KN-SP-8 yeast of Comparative Preparation Example 7, 44.7% of Proteobacteria, 36.4% of Cyanobacteria/Chloroplast, and 18.9% of Firmicutes were confirmed. Through this, it can be confirmed that the barley yeast of Preparation Example 1 and Comparative Preparation Example 7 of the present invention consist of completely different colonies.

2) Species level에서의 분석2) Analysis at the Species level

제조예1의 KN-SP-2 보리누룩과 비교제조예 7의 KN-SP-8 누룩 제조 자체에 대한 메타지놈을 분석을 수행하고자 하였고, 상기 두 시료로부터 얻은 각각 ITS 영역을 통해 메타지놈을 분석하였다. 이는 (주) 마크로젠 의뢰하여 수행하였다.It was intended to analyze the metagenome for the KN-SP-2 barley yeast of Preparation Example 1 and the KN-SP-8 yeast production itself of Comparative Preparation Example 7, and the metagenome was analyzed through each ITS region obtained from the two samples. did This was done by requesting Macrogen Co., Ltd.

이에 대한 결과를 도 5, 6 및 하기 표 3에 나타내었다. 도 5는 제조예1로부터 제조된 KN-SP-2 보리누룩에 대한 Bacteria(16s) species level에서의 메타지놈 분석 결과를 나타낸 그래프이다. 도 6은 비교제조예 7으로부터 제조된 KN-SP-8 누룩에 대한 Bacteria(16s) species level에서의 메타지놈 분석결과를 나타낸 그래프이다. The results are shown in FIGS. 5 and 6 and Table 3 below. 5 is a graph showing the metagenome analysis results at the Bacteria (16s) species level for KN-SP-2 barley yeast prepared in Preparation Example 1. 6 is a graph showing the metagenome analysis results at the Bacteria (16s) species level for KN-SP-8 yeast prepared from Comparative Preparation Example 7.

Bacteria (16s)Bacteria (16s) 제조예 1
KN-SP-2
Preparation Example 1
KN-SP-2
비교제조예 7
KN-SP-8
Comparative Preparation Example 7
KN-SP-8
speciesspecies Pantoea agglomeransPantoea agglomerans 65.48%65.48% 37.74%37.74% uncultured bacterium (Streptophyta genus)uncultured bacterium (Streptophyta genus) 0.55%0.55% 36.37%36.37% Citrobacter freundiiCitrobacter freundii 2.60%2.60% 0.79%0.79% Pantoea gaviniaePantoea gaviniae 2.50%2.50% 0.00%0.00% Bacillus pumilusBacillus pumilus 5.33%5.33% 0.00%0.00% Bacillus sonorensisBacillus sonorensis 1.22%1.22% 0.00%0.00% Bacillus subtilisBacillus subtilis 4.69%4.69% 0.00%0.00% uncultured bacterium (Escherichia/Shigella genus)uncultured bacterium (Escherichia/Shigella genus) 6.71%6.71% 5.72%5.72% uncultured bacterium (Pantoea genus)uncultured bacterium (Pantoea genus) 0.93%0.93% 0.06%0.06% uncultured bacterium (Sporacetigenium genus)uncultured bacterium (Sporacetigenium genus) 0.32%0.32% 18.87%18.87% Other (Enterobacteriaceae family)Other (Enterobacteriaceae family) 8.25%8.25% 0.26%0.26% otherother 1.41%1.41% 0.20%0.20%

도 5, 6 및 표 3에 나타난 바와 같이, Species level에서 제조예1의 KN-SP-2 보리누룩과 비교제조예7의 KN-SP-8 누룩의 균총을 살펴보았다. 우선 제조예1의 KN-SP-2 보리누룩은 Pantoea agglomerans 65.5%를 우점종으로 가지는 것을 확인하였다. 이에 반해 비교졔조예7의 KN-SP-8 누룩은 Pantoea agglomerans 37.7%와 더불어 Streptophyta genus의 uncultured bacterium을 36.4%로 가지는 것을 확인하였다. 즉, 제조예 1의 KN-SP-2 보리누룩과 비교제조예 7의 KN-SP-8 누룩을 비롯하여 이외의 누룩들에서도 미생물 분포가 전혀 상이함을 확인한 바, 제조방법과 원료의 차이에 따라, 누룩 자체에 존재하는 미생물 분포가 전혀 상이함을 알 수 있다.As shown in FIGS. 5, 6 and Table 3, the flora of KN-SP-2 barley yeast of Preparation Example 1 and KN-SP-8 yeast of Comparative Preparation Example 7 was examined at the species level. First, it was confirmed that KN-SP-2 barley yeast of Preparation Example 1 had 65.5% of Pantoea agglomerans as the dominant species. On the other hand, it was confirmed that the KN-SP-8 yeast of Comparative Example 7 had 37.7% of Pantoea agglomerans and 36.4% of uncultured bacterium of Streptophyta genus. That is, it was confirmed that the distribution of microorganisms in other yeasts, including KN-SP-2 barley yeast of Preparation Example 1 and KN-SP-8 yeast of Comparative Preparation Example 7, was completely different. , it can be seen that the distribution of microorganisms present in the yeast itself is completely different.

실험예2: 누룩에 따른 쌀 발효물의 혐기배양에 의한 단쇄지방산 생성능 분석Experimental Example 2: Analysis of short-chain fatty acid production ability by anaerobic culture of fermented rice according to yeast

생체 외(in vitro)에서 실시예1, 비교예1 내지 비교예10으로부터 제조된 각각의 쌀 발효물의 단쇄지방산 생성능을 분석하고자 하였다. 이를 위해 실시예1, 비교예1 내지 비교예10의 쌀 발효물을 DMEM 배지에서 산화환원효소제와 함께 혐기배양하였다.The short-chain fatty acid production ability of each fermented rice prepared in Example 1 and Comparative Examples 1 to 10 was analyzed in vitro . To this end, the fermented rice of Example 1 and Comparative Examples 1 to 10 were anaerobically cultured together with an oxidoreductase agent in DMEM medium.

구체적으로 혐기배양을 위하여 47 ㎖의 DMEM(GIBCO, Carlsbad, CA, USA) 배지에 1 ㎖의 산소환원효소제(Oxyrase For Broth, Mansfield, OH, USA)와 쌀 발효물 2 ㎖(실시예1, 비교예1 내지 비교예10 중에서 하나)를 넣어 실링(sealing)한 후 37 ㅀC 워터베스에서 24 시간 반응시켰다. 그 후 다른 미생물의 생장을 억제하기 위하여 황산동(copper sulfate, 0.25 g/L)을 넣어 발효를 완료시켰다. 혐기배양이 완료된 배양액에서 생성된 단쇄지방산(acetate, butyrate, propionate)을 분석하기 위하여 headspace SPME(Solid-phase microextractioin) 기술과 함께 GC-MS(GC6890 equipped with 5973 MSD, Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)를 사용하여 함량을 측정하였다.Specifically, for anaerobic culture, 1 ml of oxygen reductase (Oxyrase For Broth, Mansfield, OH, USA) and 2 ml of fermented rice in 47 ml of DMEM (GIBCO, Carlsbad, CA, USA) medium (Example 1, comparison) One of Examples 1 to 10) was put and sealed, and then reacted in a 37 °C water bath for 24 hours. Thereafter, copper sulfate (0.25 g/L) was added to inhibit the growth of other microorganisms to complete the fermentation. GC-MS (GC6890 equipped with 5973 MSD, Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA) was used to measure the content.

구체적으로 상기 배양액 중에서 5 ㎖는 단쇄지방산 생성능 분석을 위하여 20 ㎖의 유리 바이알에 넣은 후, 65 ℃에서 500 rpm의 속도로 15 분간 추출하여 단쇄지방산 성분을 headspace로 휘발시킨다. 휘발된 성분을 75 ㎛ carboxen-PDMS가 코팅된 SPME fiber(Supelco, Bellefonte, PA, USA)에 노출시켜, 흡착한 다음 GC/MS의 주입구 부분에서 250 ℃의 온도로 SPME fiber에 흡착된 성분을 탈착시키고, 250 ℃, 50 분동안 GC/MS의 컬럼에 주입해 분석하였다. 이때 GC-MS 분석은 Agilent Technologies 6890A GC과 Agilent Technologies 5973 MSD를 사용하였고, DB-624 UI(30 m × 0.25 mm × 1.4 μm)로 분석하였다.Specifically, 5 ml of the culture medium is placed in a 20 ml glass vial for short-chain fatty acid production ability analysis, and then extracted at 65° C. at 500 rpm for 15 minutes to volatilize the short-chain fatty acid component into the headspace. After exposing the volatilized component to the SPME fiber coated with 75 μm carboxen-PDMS (Supelco, Bellefonte, PA, USA), and adsorbing it, the component adsorbed on the SPME fiber is desorbed at the inlet of the GC/MS at 250 °C. and analyzed by injecting it into a column of GC/MS at 250 °C for 50 minutes. For GC-MS analysis, Agilent Technologies 6890A GC and Agilent Technologies 5973 MSD were used, and DB-624 UI (30 m × 0.25 mm × 1.4 μm) was used.

하기 표 4는 각각의 쌀 발효물에서 단쇄지방산 생성능을 측정한 결과를 나타내었다. 즉, 실시예1, 비교예1 내지 비교예10 중에서 어느 하나의 쌀 발효물, DMEM 배지, 산화환원효소제를 통해 얻은 혐기배양물에서 생성된 단쇄지방산의 피크면적(peak area)을 측정하여 나타낸 것이다. 대조군으로 쌀 발효물을 첨가하지 않은 DMEM 배지, 산화환원효소제만으로 혐기배양한 배양물을 사용하였다.Table 4 below shows the results of measuring the short-chain fatty acid production ability in each fermented rice. That is, the peak area of the short-chain fatty acids produced in the anaerobic culture obtained through the fermented rice, DMEM medium, and oxidoreductase agent of any one of Example 1 and Comparative Examples 1 to 10 was measured and shown. . As a control, DMEM medium without the addition of fermented rice and anaerobic culture only with oxidoreductase were used.

구분division peak areapeak area AcetateAcetate ButyrateButyrate 실시예 1을 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Example 1 1,803,060 1,803,060 137,792,976 137,792,976 비교예 1을 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 1 NDND tracetrace 비교예 2를 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 2 tracetrace 1,913,562 1,913,562 비교예 3을 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 3 1,991,510 1,991,510 46,258,17046,258,170 비교예 4를 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 4 NDND 1,170,938 1,170,938 비교예 5를 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 5 432,346 432,346 257,294 257,294 비교예 6을 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 6 4,094,033 4,094,033 6,063,761 6,063,761 비교예 7을 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 7 1,672,799 1,672,799 8,407,026 8,407,026 비교예 8을 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 8 3,674,327 3,674,327 44,386,294 44,386,294 비교예 9를 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 9 2,727,074 2,727,074 1,941,779 1,941,779 비교예 10을 이용한 혐기배양물Anaerobic culture using Comparative Example 10 1,137,042 1,137,042 253,166 253,166

'ND'는 검출되지 않았음을 의미하고, 'trace'는 미량 검출을 의미한다.'ND' means not detected, and 'trace' means trace detection.

표 4는 쌀을 찌고, 여기에 실시예1, 비교예1 내지 비교예10으로부터 제조된 쌀 발효물을 첨가하여 혐기배양하였을 때 생성된 단쇄지방산의 peak area를 나타낸 수치로, DMEM에서 배양시킨 해당 조건에서는 proponate 생성능이 측정되지 않았다.Table 4 shows the peak area of short-chain fatty acids produced when rice is steamed and anaerobically cultured by adding the fermented rice prepared in Example 1, Comparative Examples 1 to 10, and the corresponding cultured in DMEM. Under these conditions, the ability to produce proponate was not measured.

KN-SP-2 누룩을 이용해 제조된 실시예 1의 쌀 발효물이 비교예 1 내지 10의 쌀 발효물에 비해 butyrate 생성능이 3~100배 이상 가장 높은 것으로 확인되었다.It was confirmed that the fermented rice of Example 1 prepared using KN-SP-2 yeast had the highest butyrate producing ability 3 to 100 times or more compared to the fermented rice of Comparative Examples 1 to 10.

한편 전체적인 단쇄지방산의 생성능을 살펴보면 KN-SP-9 누룩을 이용해 제조된 비교예 8의 쌀 발효물이 비교예 1 내지 7, 9, 10의 쌀 발효물에 비해 acetate와 butyrate의 피크 면적이 모두 높은 것으로 나타났다. 따라서, 실시예1의 쌀 발효물과 비교예8의 쌀 발효물을 후보 발효물로 선택하였다.Meanwhile, looking at the overall short-chain fatty acid production ability, the fermented rice of Comparative Example 8 prepared using KN-SP-9 yeast had higher peak areas of acetate and butyrate compared to the fermented rice of Comparative Examples 1 to 7, 9, and 10. appeared to be Therefore, the fermented rice of Example 1 and the fermented rice of Comparative Example 8 were selected as candidate fermented products.

실험예 3: 동물모델에서 단쇄지방산 생성능 분석Experimental Example 3: Analysis of short-chain fatty acid production ability in animal models

3-1. 실험동물3-1. laboratory animal

실험예 1에서 선별된 실시예1 및 비교예 8로부터 제조된 쌀 발효물의 생체 내에서 단쇄지방산 생성능을 분석하고자 하였다. 이를 위한 실험동물로는 22 g의 8주령된 C57BL/6 수컷 마우스를 준비하였다. 상기 마우스는 Joongang Animal Lab(Seoul, Korea)으로부터 제공받았다. 상기 마우스는 실험에 사용되기 전에 7 일간 순화과정을 거쳤다. 또한 상기 마우스는 실험 내내 22±℃ 온도 및 55%±10% 습도가 조절된 사육실에서 자유식이로 사육되었으며 명암 주기는 12시간 주기로 조절하였다. 모든 동물실험은 한국식품연구원 동물실험운영규정에 준하여 수행하였다.It was attempted to analyze the short-chain fatty acid production ability in vivo of the fermented rice prepared from Example 1 and Comparative Example 8 selected in Experimental Example 1. As an experimental animal for this, an 8-week-old C57BL/6 male mouse weighing 22 g was prepared. The mice were provided by Joongang Animal Lab (Seoul, Korea). The mice were acclimatized for 7 days before being used in experiments. In addition, the mice were bred on a free diet in a breeding room controlled at 22±℃ temperature and 55%±10% humidity throughout the experiment, and the light-dark cycle was controlled at a 12-hour cycle. All animal experiments were performed in accordance with the Animal Experiment Operation Regulations of the Korea Food Research Institute.

3-2. 실험군3-2. experimental group

상기 실험동물을 랜덤으로 나누어 실험이 진행되었다. 실시예1의 쌀 발효물 20 g/kg/day 투여군(KN-SPM-2), 비교예8의 쌀 발효물 20 g/kg/day 투여군(KN-SPM-9), 상기 쌀 발효물과 동일한 알콜도수로 보정한 4% 에탄올 20 g/kg/day (순수 에탄올 0.8 g/㎏/day) 투여군(vehicle) 및 대조군으로서 물 20 g/㎏/day 투여군(Control) 총 4 군으로 나누었다(표 5).The experiment was carried out by randomly dividing the experimental animals. The fermented rice 20 g/kg/day administration group of Example 1 (KN-SPM-2), the fermented rice 20 g/kg/day administration group of Comparative Example 8 (KN-SPM-9), the same as the rice fermented product 4% ethanol 20 g/kg/day (pure ethanol 0.8 g/kg/day) administration group (vehicle) corrected for alcohol content and water 20 g/kg/day administration group (Control) as a control group were divided into a total of 4 groups (Table 5) .

실시예1 및 비교예8의 쌀 발효물과 에탄올 용액, 물은 총 7일간 매일 경구를 통해 강제투여하였다. 투여하기 전 후 단쇄지방산 생성과 장내미생물 균총 변화 확인하기 위해. 각각 군에서 투여하기 전/후(Day 0/Day 7)의 분변샘플을 수집하여 즉시 -80 ℃에 보관하였다.The fermented rice, ethanol solution, and water of Example 1 and Comparative Example 8 were forcibly administered orally every day for a total of 7 days. To check short-chain fatty acid production and changes in intestinal microflora before and after administration. Fecal samples before/after administration (Day 0/Day 7) were collected in each group and immediately stored at -80°C.

실험군experimental group 실험물질test substance 투여방법Administration method 대조군
control
control
control
물 투여군water administration group 멸균 증류수sterile distilled water 멸균 증류수 20 g/kg을 매일 1회씩 7일간 경구투여Oral administration of sterile distilled water 20 g/kg once a day for 7 days
VehicleVehicle 에탄올 4% 투여군Ethanol 4% administration group ethanol 4%ethanol 4% 에탄올 4% 용액 20 g/kg의 용량으로 매일 1회씩 7일간 경구투여Oral administration once daily for 7 days at a dose of 20 g/kg of 4% ethanol solution KN-SPM-2KN-SPM-2 실시예1의 쌀 발효물
투여군
Rice fermented product of Example 1
administration group
실시예1의 쌀 발효물Rice fermented product of Example 1 실시예1의 쌀 발효물 20 g/kg의 용량으로 매일 1회씩 7일간 경구투여Oral administration once a day for 7 days at a dose of 20 g/kg of fermented rice of Example 1
KN-SPM-9KN-SPM-9 비교예8의 쌀 발효물 투여군Rice fermented product administration group of Comparative Example 8 비교예8의 쌀 발효물Rice fermented product of Comparative Example 8 비교예8의 쌀 발효물 20 g/kg의 용량으로 매일 1회씩 7일간 경구투여Orally administered once a day for 7 days at a dose of 20 g/kg of fermented rice of Comparative Example 8

실험의 통계분석을 위하여 one-way ANOVA (Dunnett's test)를 사용하여 군간 평균수치 유의차를 확인하였으며, 0.05 보다 낮은 p 값을 가질 경우에 유의미한 결과로 판단하였다.For statistical analysis of the experiment, one-way ANOVA (Dunnett's test) was used to confirm the significant difference in the mean value between groups, and when it had a p value lower than 0.05, it was judged as a significant result.

3-3. 단쇄지방산 분석3-3. Short-chain fatty acid analysis

보통 단쇄지방산은 장 내부가 발효상태일 때 생겨나는 것으로 장의 발효 상태란 질 좋은 탄수화물을 적정량 먹었을 때 일어나는 현상을 일컫는 것이므로 장내 환경이 매우 좋은 상태라는 것을 의미한다. 단쇄지방산은 아세트산, 프로피온산, 부티르산이라는 탄소수 6개 이하의 유기산으로 포화지방산에 속한다. 이들은 장내 유익균들에 의해 생성되며, 면역력을 높이고 건강을 유지하고 향상시키는 매우 중요한 역할을 수행하는 데 도움이되는 효과가 있으므로, 본원발명의 쌀 발효물이 단쇄지방산을 얼마나 생성하는지 측정하는지를 하기 실험을 통해 분석하고자하였다.In general, short-chain fatty acids are produced when the intestine is in a fermented state, and the fermentation state of the intestine refers to a phenomenon that occurs when an appropriate amount of high-quality carbohydrate is eaten, which means that the intestinal environment is in a very good state. Short-chain fatty acids are organic acids with 6 or less carbon atoms, such as acetic acid, propionic acid, and butyric acid, and belong to saturated fatty acids. These are produced by beneficial intestinal bacteria, and have an effect that helps to play a very important role in increasing immunity and maintaining and improving health. was analyzed through

수집된 분변샘플은 SPME 기술과 GC-MS을 사용하여 분석하였다(실험예 1에서 단쇄지방산 분석방법 참조). 상기 분변샘플 0.1 g과 NaCl 2.0 g 및 증류수(DW) 5.0 ㎖을 20 ㎖ 유리바이알에 넣은 후 65 ℃에서 500 rpm의 속도로 15 분간 추출하여 단쇄지방산 성분을 headspace로 휘발시킨다. 휘발된 성분을 75 ㎛ carboxen-PDMS가 코팅된 SPME fiber(Supelco, Bellefonte, PA, USA)에 노출시켜, 흡착한 다음 GC/MS의 주입구 부분에서 250 ℃의 온도로 SPME fiber에 흡착된 성분을 탈착시키고, 250 ℃, 50 분동안 GC/MS의 컬럼에 주입해 분석하였다. 이때 GC-MS 분석은 Agilent Technologies 6890A GC과 Agilent Technologies 5973 MSD를 사용하였고, DB-624 UI(30 m × 0.25 mm × 1.4 μm)로 분석하였다.The collected fecal samples were analyzed using SPME technology and GC-MS (refer to the short-chain fatty acid analysis method in Experimental Example 1). 0.1 g of the fecal sample, 2.0 g of NaCl, and 5.0 ml of distilled water (DW) were put into a 20 ml glass vial, and extracted at 65° C. at a speed of 500 rpm for 15 minutes to volatilize the short-chain fatty acid component into the headspace. After exposing the volatilized component to the SPME fiber coated with 75 μm carboxen-PDMS (Supelco, Bellefonte, PA, USA), and adsorbing it, the component adsorbed on the SPME fiber is desorbed at the inlet of the GC/MS at 250 °C. and analyzed by injecting it into a column of GC/MS at 250 °C for 50 minutes. For GC-MS analysis, Agilent Technologies 6890A GC and Agilent Technologies 5973 MSD were used, and DB-624 UI (30 m × 0.25 mm × 1.4 μm) was used.

이때 단쇄지방산의 정량분석을 위하여 3 종류의 표준물질(acetic acid, propionic acid, and butyric acid)을 Sigma-Aldrich(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)로부터 구입하였다. 상기 표준물질은 다양한 농도(10-50 μM)로 희석하여 준비하였다. 최종 단쇄지방산 농도는 nmol/g로 환산하여 표기하였다.At this time, three types of standard materials (acetic acid, propionic acid, and butyric acid) were purchased from Sigma-Aldrich (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) for quantitative analysis of short-chain fatty acids. The standards were prepared by dilution to various concentrations (10-50 μM). The final short-chain fatty acid concentration was expressed in terms of nmol/g.

3-4. 각 군에서의 단쇄지방산 분석 결과3-4. Analysis of short-chain fatty acids in each group

도 7은 실험동물에 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2), 비교예8의 쌀 발효물(KN-SPM-9), 에탄올 용액(Vehicle) 및 물(control)을 각각 투여한 4개의 군에서 0, 7일째 채취한 분변샘플에서의 단쇄지방산 생성능을 정량한 결과를 나타낸 그래프이다. 도 7에서 0.05 보다 낮은 p 값을 가질 경우에 *로 표시하였고, 유의미한 결과로 고려하였다. 통계 분석은 one-way ANOVA followed by Dunnett's test를 사용하였고, 투여 전(0일째)의 데이터와 비교하였다.7 is a fermented rice product of Example 1 (KN-SPM-2), Comparative Example 8 rice fermented product (KN-SPM-9), ethanol solution (Vehicle) and water (control) administered to the experimental animals, respectively. It is a graph showing the results of quantifying the short-chain fatty acid production ability in fecal samples collected on days 0 and 7 from 4 groups. In FIG. 7, a case with a p value lower than 0.05 was marked with *, and was considered as a significant result. Statistical analysis was performed using one-way ANOVA followed by Dunnett's test, and was compared with the data before administration (day 0).

도 7에 나타난 바와 같이 투여시작 전에는 모든 군에서 대조군과 유사한 단쇄지방산 함량이 나타났다. 그 후, 투여시작일로부터 7일째에 실시예1 및 비교예8의 쌀 발효물 투여군에서는 대조군, Vehicle 군에 비해 높은 단쇄지방산 함량(특히 butyrate, propionate)의 증가가 나타났다. 또한 쌀 발효물과 동등한 정도의 알콜이 투여된 Vehicle 군에 비해 실시예1의 쌀 발효물 투여군에서 단쇄지방산 증가가 가장 유의성 있는(p<0.05) 것으로 확인되었다.As shown in Figure 7, before the start of administration, the short-chain fatty acid content was similar to that of the control group in all groups. After that, on the 7th day from the start of administration, the rice fermented product administration group of Example 1 and Comparative Example 8 showed an increase in high short-chain fatty acid content (particularly butyrate, propionate) compared to the control group and the Vehicle group. In addition, it was confirmed that the increase in short-chain fatty acid was most significant (p<0.05) in the rice fermented product administration group of Example 1 compared to the vehicle group administered with the same level of alcohol as the rice fermented product.

또한 단쇄지방산 중에서 Acetate의 경우에는 butyrate와 propionate와 비교시 상대적인 생성 농도는 전반적으로 높았으나, 투여 전과 후의 유의적인 증가를 나타내는 실험군은 확인되지 않았다.Also, among short-chain fatty acids, in the case of Acetate, the relative production concentration was generally higher than that of butyrate and propionate, but the experimental group showing a significant increase before and after administration was not identified.

실험예 4: 동물모델에서 메타지놈 분석Experimental Example 4: Metagenome analysis in animal models

4-1. 실험동물 및 실험군4-1. Experimental animals and experimental groups

비교예8의 쌀 발효물을 처리한 실험동물/실험군은 사용하지 않는 것을 제외하고는 상기 실험예 2에 따라 실험을 진행하였고, 상기 표 5에 기재된 바와 같이 각 실험군별로 규정된 실험물질 및 투여방법에 따라 투여한 다음, 0일째와 7일째 분변을 채취하여 각 실험군에서 메타지놈을 분석하였다.Experiments were carried out according to Experimental Example 2, except that the experimental animals/experimental group treated with the fermented rice of Comparative Example 8 were not used, and as described in Table 5 above, the experimental substances and administration method prescribed for each experimental group After administration, feces were collected on days 0 and 7, and metagenome was analyzed in each experimental group.

4-2 메타지놈 분석4-2 Metagenome Analysis

장내 환경에 유익한 영향을 주는지 여부를 평가하기 위하여 실시예1의 쌀 발효물을 7일간 투여하고 하기 메타지놈 분석 실험을 수행하였다. In order to evaluate whether it has a beneficial effect on the intestinal environment, the fermented rice of Example 1 was administered for 7 days, and the following metagenome analysis experiment was performed.

-80 ℃에 보관한 각 군의 분변샘플을 PowerMax Soil DNA Isolation Kit(MO BIO)를 사용하여 bacterial DNA를 추출하였다. 각각의 군으로부터 분리된 DNA(sequenced sample)에서 V3와 V4 region(59F-806R)을 증폭시키기 위하여 Illumina 16S Metagenomic Sequencing Library protocols에 따라 준비하였다. 10 ng의 gDNA를 PCR하기 위해, 바코드로 표지된 융합 프라이머(barcoded fusion primer)(341F: 5' CCTACGGGNGGCWGCAG 3', 806R: 5' GACTACHVGGGTATCTAATCC 3')를 사용하여 증폭시켰다. 증폭된 DNA를 qPCR Quatification protocol(KAPA Library Quantificatoin kits for Illumina Sequecing platforms)과 LabChip GX HT DNA High Sensitivity Kit(PerkinElmer, Massachusetts, USA)을 사용하여 정성 및 정량분석(quantifying/qualifying)하였다. Bacterial DNA was extracted from the fecal samples of each group stored at -80 °C using the PowerMax Soil DNA Isolation Kit (MO BIO). In order to amplify the V3 and V4 regions (59F-806R) from the DNA (sequenced sample) isolated from each group, it was prepared according to the Illumina 16S Metagenomic Sequencing Library protocols. For PCR, 10 ng of gDNA was amplified using barcoded fusion primers (341F: 5' CCTACGGGNGGCWGCAG 3', 806R: 5' GACTACHVGGGTATCTAATCC 3'). The amplified DNA was quantified/qualified using the qPCR Quatification protocol (KAPA Library Quantificatoin kits for Illumina Sequecing platforms) and LabChip GX HT DNA High Sensitivity Kit (PerkinElmer, Massachusetts, USA).

Paired-end(2×300 bp) 시퀀싱은 MiSeq™ 플랫폼(Illumina, San Diego, USA)을 사용하여 Macrogen에 의하여 수행되었다. 장내미생물 균총 비교를 위한 통계분석은 SIMCA-P version 14.0(Umetrics, Umeㅵ, Sweden)를 활용하여 다변량분석(mean centering scaled Principal component analysis, PCA)을 수행하였다.Paired-end (2×300 bp) sequencing was performed by Macrogen using the MiSeq™ platform (Illumina, San Diego, USA). For statistical analysis for the comparison of intestinal microflora, multivariate analysis (mean centered scaled principal component analysis, PCA) was performed using SIMCA-P version 14.0 (Umetrics, Umevi, Sweden).

4-3. 장내미생물 균총 변화 분석4-3. Analysis of changes in intestinal microflora

도 8은 실험동물에 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2), 에탄올 용액(Vehicle) 및 물(control)을 각각 투여한 3개의 군에서 0, 7일째 채취한 분변샘플에서의 장내미생물 균총 변화를 분석하여 나타낸 그래프이다.8 is a fermented rice product of Example 1 (KN-SPM-2), ethanol solution (Vehicle) and water (control) of Example 1 to the experimental animals, respectively, in three groups administered in the intestines in fecal samples collected on days 0 and 7 It is a graph showing the analysis of changes in the microbial flora.

도 8에 기재된 바와 같이 각 실험군별로 규정된 실험물질 및 투여방법에 따라 투여한 다음, 각 실험군에서 메타지놈 분석을 통한 장내미생물 균총 변화를 관찰하였다.As described in FIG. 8, after administration according to the test substances and administration methods prescribed for each experimental group, changes in the intestinal microbial flora were observed through metagenome analysis in each experimental group.

상기 도 8을 참조하면, 실시예1의 쌀 발효물 투여군은 투여 전(day 0)과 비교하여 투여시작 후 7일째(day 7)에 장내미생물 균총의 특이적 변화가 나타났다. 또한 투여기간 동안의 vehicle 군과 비교시에도 실시예1의 쌀 발효물 투여군은 특이적 장내미생물 균총의 변화가 나타남을 확인하였다. 그러나, Vehicle 투여군은 대조군과 비교하여 의미 있는 장내 미생물 균총 변화가 나타나지 않았다. Referring to FIG. 8, the fermented rice administration group of Example 1 showed specific changes in the intestinal microbial flora on the 7th day (day 7) after the start of administration compared to before administration (day 0). In addition, it was confirmed that the group administered with the fermented rice of Example 1 showed a change in specific intestinal microbial flora even when compared with the vehicle group during the administration period. However, the vehicle-administered group did not show any significant changes in the intestinal microbiota compared to the control group.

즉, 실시예1의 쌀 발효물 투여군으로부터 유도된 상술한 효과는 알콜(vehicle)이 아닌 쌀 발효물 내에 들어 있는 다른 성분들이 장내에서 프리바이오틱(prebiotics) 또는 프로바이오틱(probiotics)로서 작용하였기 때문이라 여겨진다. 실제로 실시예1의 쌀 발효물 투여군의 분변에서 분석한 장내 미생물 균총 변화를 phylum(문) level에서 살펴보면 Bacterodetes가 Vehicle 73.4 ± 2.6 % 대비 81.3 ± 1.2%로 유의적(p=0.049) 증가 추세를 보이며(Control은 87.8 ± 2.2%) Firmicutes는 Vehicle 15.5 ± 1.3 % 대비 11.7 ± 0.6 %로 감소하는 경향을 보였다(Control은 9.0 ± 2.0 %). 통상적으로 Firmicutes는 낮고, 반면에 Bacteriordes , Provotella , Ruminococcus 는 풍부한 것이 건강한 장내 미생물 조성이라 여겨진다. 따라서 상술한 결과를 통해 본 발명의 실시예1로부터 제조된 쌀 발효물이 투여될 경우 대조군(에탄올, 물)에 비해 유의적으로 더 건강한 장내 미생물 조성을 형성한다는 것을 알 수 있다.That is, the above-described effect induced from the rice fermented product administration group of Example 1 was that other ingredients contained in the rice fermented product, not alcohol, acted as prebiotics or probiotics in the intestine. It is believed to be because In fact, when looking at the changes in the intestinal microbial flora analyzed in the feces of the rice fermented product administration group of Example 1 at the phylum (phylum) level, Bacterodetes showed a significant (p=0.049) increasing trend to 81.3 ± 1.2% compared to 73.4 ± 2.6% for Vehicle. (Control is 87.8 ± 2.2%) Firmicutes tended to decrease to 11.7 ± 0.6 % compared to Vehicle 15.5 ± 1.3 % (Control was 9.0 ± 2.0 %). Generally, Firmicutes are low, whereas Bacteriordes , Provotella , and Ruminococcus are rich in healthy gut microbiota. Therefore, it can be seen from the above-described results that when the fermented rice prepared in Example 1 of the present invention is administered, it forms a significantly healthier intestinal microbial composition compared to the control group (ethanol, water).

실험예 4: 염증 개선, 예방 또는 치료 효과Experimental Example 4: Inflammation improvement, prevention or treatment effect

4-1. 실험동물 및 실험군4-1. Experimental animals and experimental groups

분변샘플이 아닌 각각의 실험동물을 마취후 복대정맥에서 혈액샘플을 얻는다는 것을 제외하고는 상기 실험예 2에 따라 실험을 진행하였고, 상기 표 2에 기재된 바와 같이 각 실험군별로 규정된 실험물질 및 투여방법에 따라 투여한 다음, 0일째와 7일째 혈액과 대장 조직 시료를 채취하여 각 실험군에서 염증 개선, 예방 또는 치료 효과를 분석하였다.Experiments were carried out according to Experimental Example 2, except that blood samples were obtained from the abdominal vena cava after anesthetizing each experimental animal rather than a fecal sample, and as described in Table 2, the test substances and administration prescribed for each experimental group After administration according to the method, blood and colon tissue samples were collected on days 0 and 7 to analyze the effect of improving, preventing, or treating inflammation in each experimental group.

상기 혈액샘플은 혈청만을 분리하여 실험 전까지 -80℃에 보관하였다.The blood samples were stored at -80 ℃ until the experiment by separating only the serum.

4-2. 혈청 TNF-α 분석4-2. Serum TNF-α assay

TNF-α(Tumor necrosis factor alpha)는 대표적인 전염증성 사이토카인 (proinflammatory cytokine)으로 특히 염증성 장질환 환자에게서 그 생성량이 증가하는 것으로 알려져 있으므로, 하기와 같이 각 군의 혈청샘플로부터 TNF-α 발현 여부를 분석하였다.TNF-α (Tumor necrosis factor alpha) is a representative proinflammatory cytokine, and it is known that its production is increased in patients with inflammatory bowel disease, especially in patients with inflammatory bowel disease. analyzed.

앞선 실험예 3을 통해 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2) 투여군에서 단쇄지방산 특히 butyrate의 생성능이 현저히 증가하였음을 확인하였다. 상기 butyrate의 증가는 대장세포(colonocyte)의 에너지원으로, 장내 환경을 개선하고 염증성 사이토카인을 감소시키는 데에 도움이 되는 것으로 알려져있다. 따라서 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2) 역시 염증성 사이토카인을 감소시킬 것으로 예상되며, 이를 비교하기 위하여 실시예1의 쌀 발효물과 비교예8의 쌀 발효물의 투여에 따른 혈청 TNF-α 생성량을 TNF-α ELISA kit(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)를 사용하여 측정하였다.Through the previous Experimental Example 3, it was confirmed that the production ability of short-chain fatty acids, particularly butyrate, was significantly increased in the fermented rice (KN-SPM-2) administration group of Example 1. The increase in butyrate is an energy source for colon cells, which is known to help improve the intestinal environment and reduce inflammatory cytokines. Therefore, the fermented rice of Example 1 (KN-SPM-2) is also expected to reduce inflammatory cytokines, and in order to compare this, the serum TNF according to the administration of the fermented rice of Example 1 and the fermented rice of Comparative Example 8 -α production was measured using a TNF-α ELISA kit (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA).

실험에 사용한 혈청은 앞서 설명한 바와 같이, 각 군으로부터 채취한 혈액에서 분리한 후, 실험 전까지 - 80 ℃에서 보관하였다. As described above, the serum used in the experiment was separated from the blood collected from each group and stored at -80°C until the experiment.

도 9는 실험동물에 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2), 비교예8의 쌀 발효물(KN-SPM-9), 에탄올 용액(Vehicle) 및 물(control)을 각각 투여한 4개의 군에서 0, 7일째 채취한 혈청샘플에서의 혈청 TNF-α 생성량(pg/㎖)을 정량한 결과를 나타낸 그래프이다. 통계 분석은 one-way ANOVA followed by Dunnett's test를 사용하였고, Vehicle 군의 데이터와 비교하였다.9 is a fermented rice product of Example 1 (KN-SPM-2), Comparative Example 8 (KN-SPM-9), ethanol solution (Vehicle) and water (control) administered to the experimental animals, respectively. It is a graph showing the results of quantifying the amount of serum TNF-α production (pg/ml) in the serum samples collected on days 0 and 7 from 4 groups. For statistical analysis, one-way ANOVA followed by Dunnett's test was used, and it was compared with the data of the Vehicle group.

도 9에 나타난 바와 같이, Vehicle 군은 대조군(Control)에 비해 유의적으로 증가하는 것으로 확인되었으며, 이는 알콜 투여시 혈액에서 염증성 사이토카인의 분비가 증가하는 것을 의미한다.As shown in FIG. 9 , it was confirmed that the Vehicle group significantly increased compared to the control group, which means that the secretion of inflammatory cytokines in the blood was increased when alcohol was administered.

한편 실시예1 및 비교예8의 쌀 발효물 투여군(KN-SPM-2, 9)은 Vehicle 군에 염증성 사이토카인이 감소하였으나, 비교예8의 쌀 발효물 투여군은 Vehicle 군과 큰 차이가 나지 않은 반면 실시예1의 쌀 발효물 투여군은 Vehicle 군에 비해 유의성 있는 감소가 확인되었다.On the other hand, the fermented rice administration group of Example 1 and Comparative Example 8 (KN-SPM-2, 9) had reduced inflammatory cytokines in the Vehicle group, but the rice fermented product administration group of Comparative Example 8 did not differ significantly from the Vehicle group. On the other hand, a significant decrease was confirmed in the fermented rice administration group of Example 1 compared to the Vehicle group.

4-3. 대장 내 염증성 사이토카인 분석4-3. Inflammatory cytokine analysis in the colon

실시예1의 쌀 발효물 투여가 직접적으로 대장 내 염증에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 상기 4-1에서 각 실험군에 규정된 실험물질 투여 전, 투여 시작일로부터 7일 째 대장 조직 시료에서 염증성 사이토카인의 수준을 분석하고자 하였다. In order to confirm the effect of the fermented rice administration of Example 1 directly on inflammation in the colon, inflammatory cytokines in the colon tissue sample on the 7th day from the start of administration, before administration of the test substances specified in each experimental group in 4-1 above to analyze the level of

상기 각 실험군에서 분리한 대장 조직 시료로부터 염증성 사이토카인 생성량을 분석하기 위하여, 300 ㎎ 대장 조직 시료를 용해(lysis)시켜 단백질을 분리하고, 상기 단백질에 antibody array kit (ARY006, R&D Systems, Minneapolis, MN, USA)을 사용하여 분석하였다. 상기 분석된 결과를 시각화하고 정량화하기 위해 Alliance Mini HD9(UVITEC, Cambridge, UK)와 Image J software(1.49v, NIH, Bethesda, MD, USA)를 활용하였다. 실험의 통계 분석에는 one-way ANOVA를 사용하였고, Dunnett multiple comparision test를 통하여 vehicle 그룹과 비교하여 그룹간 평균수치의 유의차를 검증하였다. 0.05보다 낮은 p 값을 가지는 경우에 유의미한 결과로 고려하여 *로 표시하였다.In order to analyze the amount of inflammatory cytokine production from the colon tissue samples isolated from each experimental group, 300 mg of the colon tissue sample was lysed to isolate the protein, and an antibody array kit (ARY006, R&D Systems, Minneapolis, MN) for the protein , USA) were used for analysis. Alliance Mini HD9 (UVITEC, Cambridge, UK) and Image J software (1.49v, NIH, Bethesda, MD, USA) were used to visualize and quantify the analyzed results. One-way ANOVA was used for statistical analysis of the experiment, and the significant difference of mean values between groups was verified by comparing with vehicle group through Dunnett multiple comparison test. A case with a p value lower than 0.05 was considered as a significant result and marked with *.

도 10은 실험동물에 실시예1의 쌀 발효물(KN-SPM-2), 에탄올 용액(Vehicle) 및 물(control)을 각각 투여한 3개의 군에서 7일째 채취한 대장 조직에서의 염증성 사이토카인(TNF-α, IFN(interferon)-γ, IL(interleukin)-1α, IL-16, CCL17 및 IL-1RA) 생성량을 분석하여 나타낸 그래프이다.Figure 10 is inflammatory cytokines in colon tissue collected on the 7th day from three groups each administered with fermented rice (KN-SPM-2), ethanol solution (Vehicle), and water (control) of Example 1 to experimental animals; (TNF-α, IFN (interferon)-γ, IL (interleukin)-1α, IL-16, CCL17 and IL-1RA) is a graph showing the analysis of the production amount.

도 10에 나타난 바와 같이 대조군에 비해 Vehicle 군은 오히려 전염증성 사이토카인의 생성량이 현저히 증가하였으나, 실시예1의 쌀 발효물 투여군은 Vehicle 군 및 대조군에 비해 유의성 있는 전염증성 사이토카인의 생성량 감소가 확인되었다.As shown in Figure 10, compared to the control group, the vehicle group rather significantly increased the production of pro-inflammatory cytokines, but the rice fermented product administration group of Example 1 showed a significant decrease in the production of pro-inflammatory cytokines compared to the vehicle group and the control group. became

또한, IL-1RA은 항염증성 사이토카인으로, 실시예1의 쌀 발효물 투여군은 Vehicle 군 및 대조군에 비해 IL-1RA 생성량이 유의성 있게 증가하였다. 이에 반해 Vehicle 군은 오히려 감소하였다.In addition, IL-1RA is an anti-inflammatory cytokine, and the amount of IL-1RA production was significantly increased in the rice fermented product administration group of Example 1 compared to the Vehicle group and the control group. On the other hand, the Vehicle group decreased rather.

따라서 실시예1의 쌀 발효물의 투여에 의해 대장 내 염증 반응이 Vehicle 군과 대조군에 비해 현저히 개선되는 효능이 있음을 알 수 있다.Therefore, it can be seen that the administration of the rice fermented product of Example 1 has the effect of significantly improving the inflammatory response in the colon compared to the Vehicle group and the control group.

위에서 기재한 구현예 외에도, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자라면 본 발명의 출원 당시의 기술 상식 및 본 명세서의 기재 내용에 기초하여, 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 점은 자명하다.In addition to the embodiments described above, those skilled in the art to which the present invention pertains, based on the technical common sense at the time of the filing of the present invention and the description of the present specification, the present invention may take other specific forms without changing the technical spirit or essential characteristics. It is self-evident that it can be implemented as

본 발명의 범위는 상기의 상세한 설명보다는 후술할 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.The scope of the present invention is indicated by the claims to be described later rather than the above detailed description, and all changes or modifications derived from the meaning and scope of the claims and their equivalent concepts are interpreted as being included in the scope of the present invention. should be

Claims (25)

찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말을 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5의 혼합중량비로 혼합하여 혼합보리가루를 반죽하고, 누룩 성형틀에 넣어 성형한 후, 상기 누룩 성형물을 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 발효시켜 얻어진 것으로,
메타지놈 분석시 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하는 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선에 활성을 갖는 쌀발효물 제조용 보리누룩.
Steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder are mixed in a mixing weight ratio of 1:0.5:0.5 to 1:1.5:1.5 to knead the mixed barley powder, put in a mold for molding, and then mold the yeast molded product from 25 to It is obtained by fermenting for 20 to 25 days at 35 ° C and 40 to 60% humidity.
In the improvement of intestinal function or inflammatory bowel disease, characterized in that it contains a fungal community with a dominant species of Rhizopus oryzae and a bacterial community with a dominant species of Pantoea agglomerans during metagenome analysis Barley yeast for the production of fermented rice with activity.
삭제delete 제1항에 있어서,
상기 균류 군집은 아스퍼질러스 플라부스(Aspergillus flavus), 아스퍼질러스 플라부스 변이주 오리제(Aspergillus flavus var. oryzae), 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 및 리조푸스 마이크로스포루스(Rhizopus microsporus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함하고,
상기 세균 군집은 시트로박터 프룬디(Citrobacter freundii), 판토에아 가비니에(Pantoea gaviniae), 바실러스 푸밀루스(Bacillus pumilus), 바실러스 소노렌시스(Bacillus sonorensis), 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis) 및 엔테로박테리아과(Enterobacteriaceae)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선에 활성을 갖는 쌀발효물 제조용 보리누룩.
According to claim 1,
The fungal population is Aspergillus flavus, Aspergillus flavus mutant oryzae (Aspergillus flavus var. oryzae), Aspergillus fumigatus (Aspergillus fumigatus) and Rhizopus microsporus Further comprising any one or more selected from the group consisting of,
The bacterial community is Citrobacter freundii, Pantoea gaviniae, Bacillus pumilus, Bacillus sonorensis, Bacillus subtilis And Enterobacteriaceae (Enterobacteriaceae) barley yeast for producing fermented rice having activity in improving intestinal function or inflammatory bowel disease, characterized in that it further comprises any one or more selected from the group consisting of.
증자된 쌀에 보리누룩을 접종하여 발효시켜 얻은 쌀 발효물을 유효성분으로 하고,
상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말을 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5의 혼합중량비로 혼합하여 혼합보리가루를 반죽하고, 누룩 성형틀에 넣어 성형한 후, 상기 누룩 성형물을 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 발효시켜 얻어진 것으로,
상기 보리누룩은 메타지놈 분석시 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하는 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
The fermented rice obtained by inoculating and fermenting the steamed rice with barley koji as an active ingredient,
The barley yeast is mixed barley powder by mixing steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder in a mixing weight ratio of 1:0.5:0.5 to 1:1.5:1.5, kneading the mixed barley powder, putting it in a mold for molding, and then molding the yeast It is obtained by fermenting the molded product at 25 ~ 35 ℃ and 40 ~ 60% humidity for 20 ~ 25 days,
The barley yeast is a fungal colony with a dominant species of Rhizopus oryzae and a bacterial colony with a dominant species of Pantoea agglomerans during metagenome analysis, characterized in that it contains intestinal function or inflammatory A food composition for improving or preventing intestinal disease.
제4항에 있어서,
상기 쌀 발효물은 상기 증자된 쌀에 보리누룩 및 물을 혼합하여 1차 발효물을 얻고, 상기 1차 발효물에 증자된 쌀과 물을 혼합하여 2차 발효시킨 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
5. The method of claim 4,
The rice fermented product is obtained by mixing barley yeast and water with the steamed rice to obtain a primary fermented product, and secondary fermentation by mixing the steamed rice and water with the primary fermented product. A food composition for improving or preventing intestinal disease.
제4항에 있어서,
상기 증자된 쌀과 보리누룩의 혼합 중량비는 5:1 ~ 20:1인 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
5. The method of claim 4,
A food composition for improving or preventing intestinal function or inflammatory bowel disease, characterized in that the mixed weight ratio of the steamed rice and barley yeast is 5:1 to 20:1.
제4항에 있어서,
상기 쌀 발효물의 단쇄지방산 생성량은 0.08 ~ 0.10 ㎚/g인 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
5. The method of claim 4,
The short-chain fatty acid production amount of the rice fermented product is a food composition for improving or preventing intestinal function or inflammatory bowel disease, characterized in that 0.08 to 0.10 nm/g.
삭제delete 제4항에 있어서,
상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말로 이루어진 혼합보리가루를 발효시켜 얻어진 것이고,
상기 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말의 혼합 중량비는 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5인 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
5. The method of claim 4,
The barley yeast is obtained by fermenting mixed barley powder consisting of steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder,
A food composition for improving or preventing intestinal function or inflammatory bowel disease, characterized in that the mixed weight ratio of the steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder is 1:0.5:0.5 to 1:1.5:1.5.
제4항에 있어서,
상기 식품 조성물은 막걸리인 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
5. The method of claim 4,
The food composition is a food composition for improving or preventing intestinal function or inflammatory bowel disease, characterized in that the makgeolli.
증자된 쌀에 보리누룩을 접종하여 발효시켜 얻은 쌀 발효물을 유효성분으로 하고,
상기 보리누룩은 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말을 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5의 혼합중량비로 혼합하여 혼합보리가루를 반죽하고, 누룩 성형틀에 넣어 성형한 후, 상기 누룩 성형물을 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 발효시켜 얻어진 것으로,
메타지놈 분석시 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하고,
상기 쌀 발효물의 단쇄지방산 생성량은 0.08 ~ 0.10 ㎚/g인 것을 특징으로 하는 염증성 장질환 치료 또는 예방용 약학 조성물.
The fermented rice obtained by inoculating and fermenting the steamed rice with barley koji as an active ingredient,
The barley yeast is mixed barley powder by mixing steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder in a mixing weight ratio of 1:0.5:0.5 to 1:1.5:1.5, kneading the mixed barley powder, putting it in a mold for molding, and then molding the yeast It is obtained by fermenting the molded product at 25 ~ 35 ℃ and 40 ~ 60% humidity for 20 ~ 25 days,
In metagenome analysis, it contains a fungal community with a dominant species of Rhizopus oryzae and a bacterial community with a dominant species of Pantoea agglomerans,
The short-chain fatty acid production amount of the rice fermented product is a pharmaceutical composition for treating or preventing inflammatory bowel disease, characterized in that 0.08 ~ 0.10 ㎚ / g.
제11항에 있어서,
상기 쌀 발효물은 상기 증자된 쌀에 보리누룩 및 물을 혼합하여 1차 발효물을 얻고, 상기 1차 발효물에 증자된 쌀과 물을 혼합하여 2차 발효시킨 것을 특징으로 하는 염증성 장질환 치료 또는 예방용 약학 조성물.
12. The method of claim 11,
The rice fermented product is obtained by mixing barley yeast and water with the steamed rice to obtain a primary fermented product, and inflammatory bowel disease treatment, characterized in that the secondary fermentation is performed by mixing the steamed rice and water with the primary fermented product or a pharmaceutical composition for prophylaxis.
제11항에 있어서,
상기 증자된 쌀과 통보리 누룩의 중량비는 5:1 ~ 20:1인 것을 특징으로 하는 염증성 장질환 치료 또는 예방용 약학 조성물.
12. The method of claim 11,
A pharmaceutical composition for the treatment or prevention of inflammatory bowel disease, characterized in that the weight ratio of the steamed rice and goji-ri nuruk is 5:1 to 20:1.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 1) 찐 보리분말, 볶은 보리분말 및 보리분말을 1:0.5:0.5 ~ 1:1.5:1.5의 혼합 중량비로 혼합하여 혼합보리가루를 제조하는 단계;
2) 상기 혼합보리가루를 반죽하고, 누룩 성형틀에 넣어 성형하는 단계; 및
3) 상기 누룩 성형물을 25 ~ 35 ℃에서, 40 ~ 60% 습도조건으로 20 ~ 25 일 동안 발효시켜 보리누룩을 제조하는 단계;를 포함하고,
상기 보리누룩은 메타지놈 분석시 리조퍼스 오리제(Rhizopus oryzae)를 우점종으로 하는 균류 군집과 판토에아 아글로메란스(Pantoea agglomerans)을 우점종으로 하는 세균 군집을 함유하는 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선에 활성을 갖는 쌀발효물 제조용 보리누룩의 제조방법.
1) preparing mixed barley powder by mixing steamed barley powder, roasted barley powder and barley powder in a mixing weight ratio of 1:0.5:0.5 to 1:1.5:1.5;
2) kneading the mixed barley flour and molding it into a mold for forming yeast; and
3) fermenting the yeast molded product at 25 ~ 35 ℃, under 40 ~ 60% humidity conditions for 20 ~ 25 days to prepare barley yeast;
The barley yeast is a fungal colony with a dominant species of Rhizopus oryzae and a bacterial colony with a dominant species of Pantoea agglomerans during metagenome analysis, characterized in that it contains intestinal function or inflammatory A method for producing barley yeast for the production of fermented rice having an activity to improve intestinal diseases.
삭제delete a) 제17항에 따라 제조된 보리누룩, 증자된 쌀 및 물을 혼합하여 발효시키는 1차 발효 단계; 및
b) 상기 1차 발효물에 증자된 쌀 및 물을 넣고 발효시키는 2차 발효 단계;를 포함하는, 장기능 또는 염증성 장질환 개선활성을 갖는 쌀 발효물의 제조방법.
a) a primary fermentation step of mixing and fermenting barley koji prepared according to claim 17, steamed rice and water; and
b) a second fermentation step of adding steamed rice and water to the first fermentation product and fermenting;
제19항에 있어서,
상기 1 차 발효 단계는 22 ~ 24 ℃에서 5 ~ 9일간 수행되는 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선활성을 갖는 쌀 발효물의 제조방법.
20. The method of claim 19,
The first fermentation step is a method for producing a fermented rice having intestinal function or inflammatory bowel disease improving activity, characterized in that it is carried out at 22 ~ 24 ℃ 5 ~ 9 days.
제19항에 있어서,
상기 2 차 발효 단계는 22 ~ 24 ℃에서 10 ~ 18 일간 수행되는 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선활성을 갖는 쌀 발효물의 제조방법.
20. The method of claim 19,
The second fermentation step is a method for producing a fermented rice having intestinal function or inflammatory bowel disease improving activity, characterized in that it is performed at 22 ~ 24 ℃ for 10 ~ 18 days.
제19항에 있어서,
상기 a) 단계에서 상기 증자된 쌀과 보리누룩의 중량비는 5:1 ~ 20:1인 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선활성을 갖는 쌀 발효물의 제조방법.
20. The method of claim 19,
The method for producing a fermented rice having intestinal function or inflammatory bowel disease improving activity, characterized in that the weight ratio of the steamed rice and barley nuruk in step a) is 5:1 to 20:1.
제19항에 있어서,
상기 1차 및 2차 발효는 정치발효시키는 것을 특징으로 하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선활성을 갖는 쌀 발효물의 제조방법.
20. The method of claim 19,
The primary and secondary fermentation is a method for producing a fermented rice having intestinal function or inflammatory bowel disease improving activity, characterized in that the static fermentation is carried out.
제19항에 있어서,
상기 쌀 발효물은 장내 유익균의 생장 및 증식을 유도하고, 단쇄지방산 생산능을 증가 시키며, 장내 염증성 사이코카인의 발현량을 감소시키는 것을 특징으로 하는 쌀 발효물의 제조방법.
20. The method of claim 19,
The fermented rice is a method for producing a fermented rice, characterized in that it induces the growth and proliferation of beneficial bacteria in the intestine, increases the short-chain fatty acid production ability, and reduces the expression level of intestinal inflammatory psychokines.
제19항에 따라 제조된 쌀 발효물을 유효성분으로 포함하는 장기능 또는 염증성 장질환 개선활성을 갖는 발효주.A fermented wine having intestinal function or inflammatory bowel disease improvement activity comprising the rice fermented product prepared according to claim 19 as an active ingredient.
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