KR102373965B1 - Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물 - Google Patents

Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102373965B1
KR102373965B1 KR1020200068456A KR20200068456A KR102373965B1 KR 102373965 B1 KR102373965 B1 KR 102373965B1 KR 1020200068456 A KR1020200068456 A KR 1020200068456A KR 20200068456 A KR20200068456 A KR 20200068456A KR 102373965 B1 KR102373965 B1 KR 102373965B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
leu
ser
glu
thr
lys
Prior art date
Application number
KR1020200068456A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102373965B9 (ko
KR20210151528A (ko
Inventor
남수연
장명호
고영준
Original Assignee
(주)지아이이노베이션
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to KR1020200068456A priority Critical patent/KR102373965B1/ko
Application filed by (주)지아이이노베이션 filed Critical (주)지아이이노베이션
Priority to EP21817193.2A priority patent/EP4162945A4/en
Priority to JP2022574506A priority patent/JP2023529358A/ja
Priority to PCT/KR2021/006809 priority patent/WO2021246757A1/ko
Priority to CN202180039926.XA priority patent/CN115803045A/zh
Priority to US18/008,034 priority patent/US20230233680A1/en
Priority to TW110120470A priority patent/TW202203982A/zh
Publication of KR20210151528A publication Critical patent/KR20210151528A/ko
Priority to KR1020220012346A priority patent/KR20220020304A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102373965B1 publication Critical patent/KR102373965B1/ko
Publication of KR102373965B9 publication Critical patent/KR102373965B9/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/1774—Immunoglobulin superfamily (e.g. CD2, CD4, CD8, ICAM molecules, B7 molecules, Fc-receptors, MHC-molecules)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A61K38/2013—IL-2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0038—Radiosensitizing, i.e. administration of pharmaceutical agents that enhance the effect of radiotherapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
    • A61N5/00—Radiation therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C07K14/55—IL-2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/70532—B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
    • A61N5/00—Radiation therapy
    • A61N5/10—X-ray therapy; Gamma-ray therapy; Particle-irradiation therapy
    • A61N2005/1092—Details
    • A61N2005/1098—Enhancing the effect of the particle by an injected agent or implanted device
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/31—Fusion polypeptide fusions, other than Fc, for prolonged plasma life, e.g. albumin

Abstract

본 발명은 IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물, 및 이를 이용한 암에 대한 방사선 치료 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 상기 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 조성물은 암 치료시 방사선 요법의 효과를 증대시킬 수 있다.

Description

ＩＬ-２ 단백질 및 ＣＤ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물{PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR ENHANCING RADIOTHERAPY CONTAINING FUSION PROTEIN COMPRISING IL-2 PROTEIN AND CD80 PROTEIN}
본 발명은 IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물, 및 이를 이용한 암에 대한 방사선 치료 방법에 관한 것이다.
암의 치료법은 크게 수술, 방사선 치료법, 항암화학요법으로 나눌 수 있다. 국내에서 방사선 치료를 받는 암 환자의 수가 매년 증가하고 있으며, 그에 따라 암 치료에 있어 방사선 치료의 중요성 또한 높아지고 있다.
방사선 치료는 현재 다양한 종류의 암에 필수적인 치료 방법으로 알려져 있으나, 암세포의 방사선 내성 획득, 고선량의 방사선 치료 시 정상조직의 손상 등이 방사선 치료의 효율을 저하시키는 문제점으로 지적되어 왔다. 따라서, 방사선 치료의 효율을 증진시키기 위한 방사선 치료 민감제 및 방사선 증감성 화합물에 대한 연구가 시도되고 있다(Oncogene, 23(8): 1599-1607, 2004). 다만, 현재까지 보고된 방사선 치료 민감제는 주로 항암제들로서, 예를 들어 탁솔(Taxol)과 시스플라틴(cisplatin) 등이 보고되어 있다.
상기와 같이 방사선 치료 효과를 증진시키기 위해 사용되는 항암제들을 방사선 치료와 병용할 때, 항암제의 독성이 방사선 치료시 나타나는 부작용, 즉, 방사선 치료 부위의 염증, 위장장애, 오심, 구토, 설사 등과 복합적으로 나타날 수 있기 때문에 사용에 제한이 있다는 단점이 있다.
따라서, 암세포에 대하여 방사선 민감성을 증진시키면서 부작용은 최소화시켜 방사선 요법을 최적화할 수 있는 방사선 치료 증진제의 개발이 절실히 요구되고 있다.
Oncogene, 23(8): 1599-1607, 2004
이에 본 발명자들은 암에 대한 방사선 치료를 증진시키는 효과를 가지면서도 부작용 없이 방사선 치료와 함께 사용될 수 있는 방사선 치료 증진제를 개발하기 위해 연구한 결과, IL-2 단백질과 CD80 단백질을 한 분자 내에 포함하는 융합단백질 이량체를 방사선과 병용 처리시 암 치료에 있어 시너지 효과를 나타냄을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
상기 목적 달성을 위해, 본 발명의 일 측면은, IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 암에 걸린 인간을 제외한 포유동물의 암 부위에 방사선을 조사하는 단계; 및 상기 약학적 조성물을 상기 포유동물에 투여하는 단계;를 포함하는 암에 대한 방사선 치료 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 조성물은 방사선 치료와 병용하여 방사선 치료 효과를 증진시키는데 사용될 수 있다. 따라서, 방사선에 대한 내성이 있는 암에 대해서도 방사선 치료 효율을 증진시킬 수 있다.
또한, 이러한 방사선 치료 증진 작용에 의해 방사선 치료의 선량을 낮추면서도 치료 효율적인 측면에 있어서는 고 선량의 방사선을 처리할 때 얻을 수 있는 우수한 항암 효과를 얻을 수가 있으므로, 방사선 치료 시 고선량의 방사선을 조사하는 것으로 인해 발생되는 부작용을 줄일 수 있다는 장점이 있다.
그리고, 방사선 치료에 의한 암항원의 확산(tumor antigen spreading)을 통하여, 추가적으로 IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질의 전신 항암작용을 증폭시킬 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 조성물을 방사선 치료 보조제로 활용하여 병용 치료를 하는 방향으로의 상용화가 가능할 것으로 기대된다. 특히, 방사선을 조사하지 않은 부위에서도 방사선 조사와 본 발명의 약학적 조성물 투여시 항암 효과가 우수하므로, 상업적으로 활용도가 높을 것으로 예상된다.
도 1a 내지 도 1c는 흑색종 세포주 B16F10을 이식한 후 종양이 형성된 마우스에 본 발명의 mGI-101 및/또는 방사선을 조사하여 1차 암 및 2차 암에 대한 항암 효과를 확인하여 나타낸 도면이다. 구체적으로, 종양이 형성된 마우스에 본 발명의 mGI-101 및/또는 방사선을 조사하고, 캘리퍼스를 이용하여 측정한 (a) 방사선이 조사된 우측 종양의 부피, (b) 방사선이 조사되지 않은 좌측 종양의 부피 및 (c) 양측 종양의 평균 부피를 나타낸 그래프이다.
도 2a 내지 도 2e는 종양이 형성된 마우스에 본 발명의 mGI-101 및/또는 방사선을 조사하여 1차 암에 대한 항암 효과를 확인하여 나타낸 도면이다. 구체적으로, 방사선이 조사된 우측 종양에 본 발명의 mGI-101 및/또는 방사선을 조사함에 따른 각 마우스 개체별 종양 성장을 나타낸 것이다.
도 3a 내지 도 3e는 종양이 형성된 마우스에 본 발명의 mGI-101 및/또는 방사선을 조사하여 2차 암에 대한 항암 효과, 즉 방사선을 조사하지 않은 부위에 치료 효과가 나타나는 압스코팔 효과(abscopal effect)를 확인하여 나타낸 도면이다. 구체적으로, 방사선이 조사되지 않은 좌측 종양에 본 발명의 mGI-101 및/또는 방사선을 조사함에 따른 각 마우스 개체별 종양 성장을 나타낸 것이다.
도 4a 내지 도 4c는 본 발명의 mGI-101 및/또는 방사선 조사에 의한 종양 성장 억제율을 나타낸 그래프이다. 구체적으로, (a) 방사선이 조사된 우측 종양에 대한 종양 성장 억제율, (b) 방사선이 조사되지 않은 좌측 종양에 대한 종양 성장 억제율 및 (c) 양측 종양 평균에 대한 종양 성장 억제율을 나타낸 그래프이다.
방사선 치료 증진제
본 발명의 일 측면은, IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물을 제공한다.
본 명세서에서 사용하는 용어, "암"은 정상인 조직세포가 어떤 원인으로 무제한 증식하여 그 생체의 생활현상이나 주위의 조직상태 등에 관계없이 급속한 발육을 계속하는 질환으로 구분되며, 본 발명에서의 암은 인체의 각종 암, 예컨대 위암, 간암, 폐암, 대장암, 유방암, 전립선암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 갑상선암, 후두암, 급성 골수성 백혈병, 뇌종양, 신경모세포종, 망막 모세포종, 두경부암, 침샘암 및 림프종으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 암일 수 있으나, 상기 종류에 한정되지는 않는다. 또한, 본 발명의 목적상 방사선에 저항성을 가지는 암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용하는 용어, "방사선 치료 증진"이란 방사선을 이용한 질병 치료에 있어서, 방사선에 대한 세포의 민감성을 증진시켜 궁극적으로 질병에 대한 치료 효과를 증진시키는 것을 의미한다. 특히, 암 치료시 병행처리 되면 암세포의 방사선 민감성이 증진되어 암세포의 살상 효과 및 증식 억제 효과를 낼 수 있게 된다.
상기 암에 대한 방사선 치료는 다양한 공지된 방사선요법(radiotherapy)을 포함하며, 예를 들어 X선 심부치료, 라듐요법, 코발트 60의 대량조사, 초고압방사선요법 및 방사성 동위원소 내용요법 등을 들 수 있으나 이에 한정되지는 않는다.
일 구체예에서, 본 발명의 IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질을 흑색종 세포주 B16F10을 이식한 후 종양이 형성된 마우스를 대상으로, 방사선 치료와 병용 처리한 결과, 상기 융합단백질이 종양의 성장을 보다 효과적으로 감소시킴으로써 항암 치료 병용 혹은 보조제로 사용할 수 있음을 확인하였다(도 1a 내지 도 4c).
본 발명의 IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물은 방사선 치료를 적용할 수 있는 모든 세포에 적용이 가능하며, 특히 암세포의 방사선 민감성을 증진시키는 데 이용하는 것이 바람직하다.
상기 방사선 치료 증진용 약학적 조성물은 방사선 치료와 병용하여 암 치료에 있어 시너지 효과를 나타내므로, 항암 치료 보조제, 방사선 치료 보조제, 방사선 치료 증진제, 또는 방사선 민감제와 동일한 맥락으로 사용될 수 있다.
본 명세서에서 사용하는 용어, "보조"는 치료 효과를 갖는 제제, 물질, 방법 등의 효과를 증대시켜주는 역할을 하는 것으로, 본 발명에 따른 방사선 치료 증진용 약학적 조성물의 투여 시 치료 활성을 갖는 유효성분의 항암 활성 증진 또는 부작용 감소 등을 통해 항암 활성을 높여주는 것을 의미한다. 구체적으로, 종래의 암 치료 방법인 항암제 또는 방사선 조사와 병용 시 암 치료 효과에 대하여 시너지 효과를 나타내는 것일 수 있고, 항암제 또는 방사선 조사에 대한 암세포의 민감도를 증진시키는 것일 수 있다.
상기 방사선 치료 증진용 약학적 조성물에 포함되는 IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질은 하기 기술된 바와 같다.
IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질
본 명세서에서 사용하는 용어, "IL-2" 또는 "인터루킨-2"는 달리 언급되지 않는 한, 포유동물, 예를 들어, 영장류(예, 인간) 및 설치류(예, 마우스 및 래트)를 포함하여 임의의 척추동물 공급원으로부터 수득한 임의의 야생형 IL-2를 의미한다. 상기 IL-2는 동물 세포에서 수득된 것일 수도 있으나, IL-2를 생산할 수 있는 재조합 세포로부터 수득된 것도 포함한다. 또한, 상기 IL-2는 야생형 IL-2 또는 이의 변이체일 수 있다.
본 명세서에서는 IL-2 혹은 이의 변이체를 총칭하여 "IL-2 단백질" 혹은 "IL-2 폴리펩티드"의 용어로 표현하기도 한다. IL-2, IL-2 단백질, IL-2 폴리펩티드, 및 IL-2 변이체는 예를 들어 IL-2 수용체(receptor)에 특이적으로 결합한다. 이 특이적인 결합은 당업자에게 알려진 방법을 통해 확인할 수 있다.
상기 IL-2의 일 구체예는 서열번호 35 또는 서열번호 36의 아미노산 서열을 가질 수 있다. 또한, 이때, 상기 IL-2는 성숙된 형태일 수 있다. 구체적으로, 상기 성숙된 IL-2는 신호서열을 포함하지 않는 것일 수 있으며, 서열번호 10의 아미노산 서열을 갖는 것일 수 있다. 이때, 상기 IL-2는 야생형 IL-2의 N-말단 또는 C-말단의 일부가 결실된(truncated) 단편을 포함하는 개념으로 이용될 수 있다.
또한, 상기 IL-2의 단편은 서열번호 35 또는 서열번호 36의 아미노산 서열을 가지는 단백질의 N 말단으로부터 연속적으로 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개 또는 25개의 아미노산이 결실된 형태일 수 있다. 또한 상기 IL-2의 단편은 서열번호 35 또는 서열번호 36의 아미노산 서열을 가지는 단백질의 C 말단으로부터 연속적으로 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개 또는 25개의 아미노산이 결실된 형태일 수 있다.
본 명세서에서 사용하는 용어, "IL-2 변이체"는 전장(full-length) IL-2 또는 상술한 IL-2의 단편의 아미노산 일부가 치환된 형태를 의미한다. 즉, IL-2 변이체는 야생형 IL-2 또는 이의 단편과 다른 아미노산 서열을 가질 수 있다. 그러나, 상기 IL-2 변이체는 야생형 IL-2와 동등하거나 유사한 활성을 가질 수 있다. 여기에서, "IL-2 활성"은 예를 들어 IL-2 수용체에 특이적으로 결합하는 것을 의미할 수 있으며, 이 특이적 결합은 당업자에게 알려진 방법을 통해 측정할 수 있다.
구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 야생형 IL-2의 아미노산 일부가 치환된 것일 수 있다. 아미노산 치환에 의한 IL-2 변이체의 일 구체예로는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 42번째, 45번째, 61번째 및 72번째 아미노산 중 적어도 하나가 치환된 것일 수 있다.
구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 42번째, 45번째, 61번째 또는 72번째 아미노산 중 적어도 어느 하나가 다른 아미노산으로 치환된 것일 수 있다. 뿐만 아니라, IL-2가 서열번호 35의 아미노산 서열의 N 말단의 일 부분이 결실된 형태일 경우, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 상보적으로 대응되는 위치의 아미노산이 다른 아미노산으로 치환될 수 있다. 예를 들어, IL-2가 서열번호 35의 아미노산을 서열을 가질 경우에, 상기 IL-2의 변이체는 서열번호 35의 아미노산 서열에서 58번째, 62번째, 65번째, 81번째 또는 92번째 아미노산 중 적어도 어느 하나가 다른 아미노산으로 치환된 것일 수 있다. 이들은 각각 서열번호 10의 아미노산 서열의 38번째, 42번째, 45번째, 61번째 및 72번째 아미노산 잔기에 각각 해당한다. 일 구체예에 따르면, IL-2 활성이 유지되는 한, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 혹은 10개의 아미노산이 치환될 수 있다. 또 다른 구체예에 따르면, 1개에서 5개까지의 아미노산이 치환될 수 있다.
일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 두 군데의 아미노산이 치환된 형태일 수 있다. 구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째 및 42번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째 및 45번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째 및 61번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 42번째 및 45번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 42번째 및 61번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 42번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 45번째 및 61번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 45번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 61번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다.
나아가, 상기 IL-2 변이체는 세 군데의 아미노산이 치환된 형태일 수 있다. 구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 42번째 및 45번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 42번째 및 61번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 42번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 45번째 및 61번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 45번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 61번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 42번째, 45번째 및 61번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 42번째, 45번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 45번째, 61번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다.
또한, 상기 IL-2 변이체는 네 군데의 아미노산이 치환된 형태일 수 있다. 구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 42번째, 45번째 및 61번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 42번째, 45번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 45번째, 61번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 42번째, 61번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 42번째, 45번째, 61번째 및 72번째 아미노산이 치환된 것일 수 있다.
나아가, 상기 IL-2 변이체는 다섯 군데의 아미노산이 치환된 형태일 수 있다. 구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째, 42번째, 45번째, 61번째 및 72번째 아미노산이 모두 다른 아미노산으로 치환된 것일 수 있다.
이때, 상기 치환에 의해 도입되는 "다른 아미노산"은 알라닌(alanine), 아르기닌(arginine), 아스파라긴(Asparagine), 아스파르트산(aspartic acid), 시스테인(cysteine), 글루탐산(glutamic acid), 글루타민(glutamine), 히스티딘(histidine), 이소루신(isoleucine), 루신(leucine), 리신(lysine), 메티오닌(methionine), 페닐알라닌(phenyl alanine), 프롤린(proline), 세린(serine), 트레오닌(threonine), 트립토판(tryptophan), 티로신(tyrosine) 및 발린(valine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다. 단, 상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 상기 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째는 아르기닌으로 치환될 수 없으며, 42번째는 페닐알라닌으로 치환될 수 없고, 45번째는 티로신으로 치환될 수 없으며, 61번째는 글루탐산으로 치환될 수 없고, 72번째는 루신으로 치환될 수 없다.
상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째 아미노산인 아르기닌은 아르기닌을 제외한 다른 아미노산으로 치환될 수 있다. 바람직하게는, 상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 38번째 아미노산인 아르기닌은 알라닌으로 치환(R38A)될 수 있다.
상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 42번째 아미노산인 페닐알라닌은 페닐알라닌을 제외한 다른 아미노산으로 치환될 수 있다. 바람직하게는, 상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 42번째 아미노산인 페닐알라닌은 알라닌으로 치환(F42A)될 수 있다.
상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 45번째 아미노산인 티로신은 티로신을 제외한 다른 아미노산으로 치환될 수 있다. 바람직하게는, 상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 45번째 아미노산인 티로신은 알라닌으로 치환(Y45A)될 수 있다.
상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 61번째 아미노산인 글루탐산은 글루탐산을 제외한 다른 아미노산으로 치환될 수 있다. 바람직하게는, 상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 61번째 아미노산인 글루탐산은 아르기닌으로 치환(E61A)될 수 있다.
상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 72번째 아미노산인 루신은 루신을 제외한 다른 아미노산으로 치환될 수 있다. 바람직하게는, 상기 IL-2 변이체의 아미노산 치환에 있어서, 서열번호 10의 아미노산 서열에서 72번째 아미노산인 루신은 글리신으로 치환(L72G)될 수 있다.
구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 R38A, F42A, Y45A, E61R 및 L72G로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 어느 하나의 치환이 일어난 것일 수 있다.
구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 R38A, F42A, Y45A, E61R 및 L72G로 구성된 군에서 선택되는 위치에서 두 군데, 세 군데, 네 군데 또는 다섯 군데의 위치에서 아미노산 치환이 일어날 수 있다.
또한, 상기 IL-2 변이체는 두 군데의 아미노산이 치환된 형태일 수 있다. 구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 R38A 및 F42A로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A 및 Y45A로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A 및 E61R로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 F42A 및 Y45A로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 F42A 및 E61R로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 F42A 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 E61R 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다.
나아가, 상기 IL-2 변이체는 세 군데의 아미노산이 치환된 형태일 수 있다. 구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 R38A, F42A 및 Y45A로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A, F42A 및 E61R로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A, F42A 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A, Y45A, E61R로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A, Y45A 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 F42A, Y45A 및 E61R로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 F42A, Y45A 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 F42A, E61R 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 Y45A, E61R 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다.
또한, 상기 IL-2 변이체는 네 군데의 아미노산이 치환된 형태일 수 있다. 구체적으로, 상기 IL-2 변이체는 R38A, F42A, Y45A 및 E61R로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A, F42A, Y45A 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A, F42A, E61R 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 R38A, Y45A, E61R 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다. 또한, 일 구체예로 상기 IL-2 변이체는 F42A, Y45A, E61R 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다.
나아가 상기 IL-2 변이체는 R38A, F42A, Y45A, E61R 및 L72G로 치환이 일어난 것일 수 있다.
바람직하게는, 상기 IL-2 변이체의 일 구체예는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 하기 (a) 내지 (d) 조합 중 선택되는 어느 하나의 조합의 치환이 일어난 것일 수 있다:
(a) R38A/F42A;
(b) R38A/F42A/Y45A;
(c) R38A/F42A/E61R; 또는
(d) R38A/F42A/L72G.
이때, IL-2가 서열번호 35의 아미노산 서열을 가질 경우, 서열번호 10과 상보적으로 대응되는 위치에 아미노산 치환을 가질 수 있다. 또한, IL-2가 서열번호 35의 아미노산 서열의 단편인 경우에도, 서열번호 10과 상보적으로 대응되는 위치의 아미노산이 치환될 수 있다.
구체적으로, 상기 IL-2의 변이체는 서열번호 6, 22, 23 또는 24의 아미노산 서열을 갖는 것일 수 있다.
또한, 상기 IL-2 변이체는 생체 내에서 낮은 독성을 가지는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다. 이때, 상기 생체 내에서 낮은 독성이란, IL-2가 IL-2 수용체의 알파 체인(IL-2Rα)과 결합하여 유발되는 부작용일 수 있다. 상기 IL-2와 IL-2Rα 결합에 의한 부작용을 개선시키기 위해서 다양한 IL-2 변이체가 개발되었으며, 이러한 IL-2 변이체는 미국특허 5,229,109 및 대한민국특허 1667096에 개시된 것들을 사용할 수 있다. 특히, 본 출원에서 기술되는 IL-2의 변이체는 IL-2 수용체의 알파 체인(IL-2Rα)과 결합력이 낮아 생체내 독성이 야생형 IL-2에 비해 낮다.
본 명세서에서 사용하는 용어, "CD80"은 "B7-1"로도 불리며, 수지상세포, 활성화된 B 세포 및 단핵구에 존재하는 막단백질이다. CD80은 T 세포의 활성화와 생존에 필수적인 공자극 신호를 제공한다. CD80은 T 세포 표면에 존재하는 서로 다른 두 단백질인 CD28 및 CTLA-4에 대한 리간드로 알려져 있다. CD80은 288개의 아미노산으로 구성되어 있으며, 구체적으로 서열번호 11의 아미노산 서열을 갖는 것일 수 있다. 또한, 본 명세서에서 "CD80 단백질"은 전장 CD80 또는 CD80 단편을 의미한다.
본 명세서에서 사용하는 용어, "CD80 단편"이란, CD80의 절단형을 의미한다. 또한, 상기 CD80 단편은 CD80의 세포외도메인일 수 있다. CD80 단편의 일 구체예로는 CD80의 신호서열인 N-말단으로부터 1번째 내지 34번째의 아미노산이 제외된 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 CD80 단편의 일 구체예는 서열번호 11의 35번째 내지 288번째의 아미노산으로 구성된 단백질일 수 있다. 또한, 상기 CD80 단편의 일 구체예는 서열번호 11의 35번째 내지 242번째 아미노산으로 구성된 단백질일 수 있다. 또한, 상기 CD80 단편의 일 구체예는 서열번호 11의 35번째 내지 232번째 아미노산으로 구성된 단백질일 수 있다. 또한, 상기 CD80 단편의 일 구체예는 서열번호 11의 35번째 내지 139번째 아미노산으로 구성된 단백질일 수 있다. 또한, 상기 CD80 단편의 일 구체예는 서열번호 11의 142번째 내지 242번째 아미노산으로 구성된 단백질일 수 있다. 상기 일 실시예로 CD80 단편은 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 것일 수 있다.
또한, 상기 IL-2 단백질 및 상기 CD80 단백질은 링커 혹은 캐리어(carrier)에 의해 결합된 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 IL-2 또는 이의 변이체 및 상기 CD80(B7-1) 또는 이의 단편은 링커 혹은 캐리어에 의해 결합된 것일 수 있다. 본 명세서에서 링커와 캐리어는 호환적으로 사용되기도 한다.
상기 링커는 두 개의 단백질을 연결시켜준다. 링커의 일 구체예로는 1개 내지 50개의 아미노산, 알부민 또는 이의 단편, 또는 면역글로불린의 Fc 도메인 등을 포함할 수 있다. 이때, 상기 면역글로불린의 Fc 도메인은 면역글로불린의 중쇄 불변 영역 2(CH2) 및 중쇄 불변 영역 3(CH3)을 포함하며, 면역글로불린의 중쇄 및 경쇄의 가변 영역 및 경쇄 불변 영역 1(CH1)은 포함하지 않는 단백질을 의미한다. 상기 면역글로불린은 IgG, IgA, IgE, IgD 또는 IgM일 수 있으며, 바람직하게는 IgG4일 수 있다. 이때, 야생형 면역글로불린 G4의 Fc 도메인은 서열번호 4의 아미노산 서열을 갖는 것일 수 있다.
또한, 상기 면역글로불린의 Fc 도메인은 야생형 Fc 도메인뿐만 아니라, Fc 도메인 변이체일 수 있다. 또한, 본 명세서에서 사용하는 용어 "Fc 도메인 변이체"는 야생형 Fc 도메인의 당쇄 형태(glycosylation pattern)와 다르거나, 야생형 Fc 도메인에 비해 증가된 당쇄, 야생형 Fc 도메인에 비해 감소한 당쇄, 또는 당쇄가 제거(deglycosylate)된 형태일 수 있다. 또한, 무당쇄(aglycosylated) Fc 도메인도 포함된다. Fc 도메인 혹은 변이체는 배양조건 혹은 호스트의 유전자 조작을 통해 조정된 숫자의 시알산(sialic acid), 퓨코실화(fucosylation), 당화(glycosylation)를 갖도록 한 것일 수 있다.
또한, 화학적 방법, 효소적 방법 및 미생물을 사용한 유전공학적 엔지니어링 방법 등과 같이 통상적인 방법으로 면역글로불린의 Fc 도메인의 당쇄를 변형시킬 수 있다. 또한, 상기 Fc 도메인 변이체는 면역글로불린은 IgG, IgA, IgE, IgD 또는 IgM의 Fc 영역이 혼합된 형태일 수 있다. 또한, 상기 Fc 도메인 변이체는 상기 Fc 도메인의 일부 아미노산이 다른 아미노산으로 치환된 형태일 수 있다. 상기 Fc 도메인 변이체의 일 구체예로는 서열번호 12의 아미노산 서열을 갖는 것일 수 있다.
융합단백질은 Fc 도메인을 링커(혹은 캐리어)로 하여 이의 N-말단과 C-말단에 각각 CD80과 IL-2 단백질이 연결되거나 혹은 IL-2와 CD80이 연결된 구조를 가질 수 있다. Fc 도메인의 N-말단 혹은 C-말단과 CD-80 혹은 IL-2의 연결은 임의적으로 링커 펩타이드에 의해 이루어질 수 있다.
구체적으로, 상기 융합단백질은 하기 구조식(I) 또는 (II)로 이루어진 것일 수 있다:
N'-X-[링커(1)]n-Fc 도메인-[링커(2)]m-Y-C' (I)
N'-Y-[링커(1)]n-Fc 도메인-[링커(2)]m-X-C' (II)
이때, 상기 구조식(I) 및 (II)에 있어서,
상기 N'은 융합단백질의 N-말단이고,
상기 C'는 융합단백질의 C-말단이며,
상기 X는 CD80 단백질이고,
상기 Y는 IL-2 단백질이며,
상기 링커(1) 및 링커(2)는 펩타이드 링커이고,
상기 n 및 m은 각각 독립적으로, O 또는 1이다.
바람직하게는, 상기 융합단백질은 구조식(I)로 이루어진 것일 수 있다. 상기 IL-2 단백질은 상술한 바와 같다. 또한, 상기 CD80 단백질은 상술한 바와 같다. 일 구체예에 따르면, IL-2 단백질은 야생형 IL-2와 비교하여 하나에서 다섯개까지의 아미노산이 치환된 IL-2 변이체일 수 있다. CD80 단백질은 야생형 CD80의 N-말단 혹은 C-말단으로부터 연속적으로 약 34개까지의 아미노산 잔기가 결실된(truncated) 단편일 수 있다. 혹은 CD 단백질은 T 세포 표면 수용체(T cell surface receptors) CTLA-4와 CD28에 결합하는 활성을 갖는 세포외 면역글로불린-유사 도메인일 수 있다.
구체적으로, 상기 융합단백질은 서열번호 9, 26, 28 또는 30의 아미노산 서열을 갖는 것일 수 있다. 또 다른 구체예에 따르면, 융합단백질은 서열번호 9, 26, 28 또는 30의 아미노산 서열에 대해 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 혹은 100%의 서열 동일성을 갖는 폴리펩타이드를 포함한다. 이때, 동일성은, 예를 들어, 퍼센트 상동성, NCBI(National Center of Biotechnology Information)의 BlastN software과 같은 상동성 비교 소프트웨어를 통해 결정될 수 있다.
상기 CD80 단백질과 Fc 도메인의 사이에는 펩타이드 링커(1)가 포함될 수 있다. 상기 펩타이드 링커(1)은 5 내지 80개의 연속된 아미노산, 20 내지 60개의 연속된 아미노산, 또는 25 내지 50개의 연속된 아미노산, 또는 30 내지 40개의 아미노산으로 이루어질 수 있다. 일 구체예로 펩타이드 링커(1)은 30개의 아미노산으로 이루어질 수 있다. 또한, 펩타이드 링커(1)은 적어도 하나의 시스테인을 포함할 수 있다. 구체적으로, 하나, 두 개 또는 세 개의 시스테인을 포함할 수 있다. 또한, 상기 펩타이드 링커(1)는 면역글로불린의 힌지에서 유래된 것일 수 있다. 일 구체예에서는, 상기 펩타이드 링커(1)이 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드 링커일 수 있다.
상기 펩타이드 링커(2)는 1 내지 50개의 연속된 아미노산, 또는 3 내지 30개의 연속된 아미노산, 또는 5 내지 15개의 아미노산으로 이루어질 수 있다. 일 구체예로 상기 펩타이드 링커(2)는 (G4S)n(이때, n은 1 내지 10의 정수) 일 수 있다. 이때, (G4S)n에서 n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10일 수 있다. 일 실시예로, 상기 펩타이드 링커(2)가 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드 링커일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 융합단백질은 상기 IL-2 또는 이의 변이체 및 CD80 또는 이의 단편을 포함하는 융합단백질 두 개가 결합된 이량체일 수 있다. 상기 IL-2 또는 이의 변이체 및 CD80 또는 이의 단편을 포함하는 융합단백질은 상술한 바와 같다.
이때, 이량체를 구성하는 융합단백질 간의 결합은 링커 내에 존재하는 시스테인에 의해 이황화 결합에 의해 이루어진 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 이량체를 구성하는 융합단백질은 동일한 것일 수도 있으나, 서로 상이한 융합단백질일 수 있다. 바람직하게는, 상기 이량체는 동형이량체(homodimer)인 것일 수 있다. 상기 이량체를 구성하는 융합단백질의 일 실시예는 서열번호 9의 아미노산 서열을 갖는 단백질일 수 있다.
상기 IL-2 단백질 및 CD80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 본 발명의 방사선 치료 증진용 약학적 조성물은 다른 항암제와도 추가로 병용 투여할 수 있으며, 이를 통해서 암에 대한 방사선 치료 효과를 더욱 증강시킬 수 있다.
상기 항암제는 화학항암제, 표적항암제, 또는 면역항암제일 수 있다.
구체적으로, '화학항암제'는 이에 한정되지는 않으나, 알킬화제(alkylating agent), 미세소관 억제제(microtuble inhibitor), 대사길항제(antimetbolite), 또는 토포이소머라아제 억제제(topoisomerase inhibitor)일 수 있다.
상기 알킬화제는 메클로르에타민(mechlorethamine), 시클로포스파미드(cyclophosphamide), 이포스파미드(ifosfamide), 멜팔란(melphalan), 클로람부실(chlorambucil), 티오테파(thiotepa), 알트레타민(altretamine), 프로카바진(procarbazine), 부설판(busulfan), 스트렙토조신(streptozocin), 카르무스틴(carmustine), 이오무스틴(iomustine), 다카바진(dacarbazine), 시스플라틴(cisplatin), 카보플라틴(carboplatin), 옥살리플라틴(oxaliplatin)일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 상기 미소세관 억제제는 도세탁셀(docetaxel), 빈블라스틴(vinblastine), 온코빈(Oncovin), 비노렐빈(vinorelbine)일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 상기 대사길항제는 플루오로유라실(fluorouracil), 카페시타빈(capecitabine), 시타라빈(cytarabine), 젬시타빈(gemcitabine), 플루다라빈(fludarabine), 메토트렉세이트(methotrexate), 페메트렉시드(Pemetrexed), 메르캅토퓨린(mercaptopurine)일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 상기 토포이소머라아제 억제제는 하이캄틴(hycamtin), 캠토사(camptosar), 베페시드(vepesid), 탁솔(taxol), 블레오마이신(bleomycin), 아드리아마이신(adriamycin), 세루비딘(cerubidine)일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
또한, '표적항암제'는 이에 한정되지는 않으나, 트라스투주맙(trastuzumab), 퍼투주맙(pertuzumab), 파니투무맙(panitumumab), 세툭시맙(cetuximab), 베바시주맙(bevacizumab), 라무시루맙(ramucirumab), 애플리버셉트(aflibercept), 리툭시맙(rituximab), 오비누투주맙(obinutuzumab), 다라투무맙(daratumumab), 데노수맙(denosumab), 이브루티닙(ibrutinib), 다사티닙(dasatinib), 닐로티닙(nilotinib), 이마티닙(imatinib), 보수티닙(bosutinib), 오시머티닙(osimertinib), 엘로티닙(erlotinib), 제피티닙(gefitinib), 닌테다닙(nintedanib), 수니티닙(sunitinib), 소라페닙(sorafenib), 카보잔티닙(cabozantinib), 렌바티닙(lenvatinib), 레고라페닙(regorafenib), 액시티닙(axitinib), 파조파닙(pazopanib), 카보잔티닙(cabozantinib), 트라메티닙(trametinib), 다브라페닙(dabrafenib), 아베마시클립(abemaciclib), 팔보시클립(palbociclib), 레날리도마이드(lenalidomide), 록소리티닙(ruxolitinib), 알렉티닙(alectinib), 크리조티닙(crizotinib), 올라파립(olaparib), 베네토클락스(venetoclax)일 수 있다.
또한, '면역항암제'는 이에 한정되지는 않으나, 면역관문억제제, 면역세포 치료제(CAR-T), ADC(antibody drug conjugate), 이중항체, 항암 바이러스, 또는 항암백신일 수 있다.
상기 면역관문억제제는 PD-1 항체, PD-L1 항체, CTLA-4 항체, TIM3 항체 또는 LAG3 항체일 수 있다. 상기 PD-1 항체는 펨브로리주맙(pembrolizumab), 니볼루맙(nivolumab), 세미플리맙(cemiplimab)일 수 있고, 상기 PD-L1 항체는 아테졸리주맙(atezolizumab), 아벨루맙(avelumab), 더발루맙(durvalumab)일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 상기 CTLA-4 항체는 이필리무맙(ipilimumab), 트레멜리무맙(tremelimumab)일 수 있고, 상기 TIM3 항체는 MBG452일 수 있으며, LAG3 항체는 BMS-986016, LAG525일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 상기 면역세포 치료제는 티사젠렉류셀(tisagenlecleucel), 애시카브타겐실루셀(axicabtagene ciloleucel)일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 상기 ADC는 젬투주맙 오조가미신(gemtuzumab-ozogamicin), 브렌툭시맙 베도틴(brentuximab vedotin), 트라스투주맙 엠탄신(trastuzumab emtansine), 이노츠맵 오조감신(inotuzumab ozogamicin), 에리불린 메실산염(eribulin mesylate)일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 상기 이중항체는 블리나투모맙(blinatumomab)일 수 있고, 상기 항암 바이러스는 탈리모진 라헤르파렙벡(talimogene laherparepvec)일 수 있으며, 상기 항암백신은 시풀루셀-T(sipuleucel-T)일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
상기 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체는 환자에게 전달하기에 적절한 비-독성 물질이면 어떠한 담체라도 가능하다. 증류수, 알코올, 지방, 왁스 및 비활성 고체가 담체로 포함될 수 있다. 약물학적으로 허용되는 애쥬번트(완충제, 분산제) 또한 약학적 조성물에 포함될 수 있다.
구체적으로, 상기 약학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 비경구용 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 "약제학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다.
상기 약학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사제로 제제화할 경우 적합한 담체로서는 멸균수, 에탄올, 글리세롤이나 프로필렌 글리콜 등의 폴리올 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 약제학적 조성물의 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 구체적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주된다.
한편, 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 명세서에서 사용하는 용어 "투여"란, 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며, 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 국소 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
상기 용어 "개체"란 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물을 의미한다. 바람직하게는, 인간을 포함한 포유동물일 수 있다.
상기 용어 "약학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성별, 연령, 체중, 건강상태, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로, 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 1일 0.01 ㎍/㎏ 내지 10 g/㎏ 범위, 또는 0.01 ㎎/㎏ 내지 1 g/㎏ 범위로 투여할 수 있다. 투여는 1일 1회 또는 수회로 나누어 이루어질 수 있다. 이러한 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 아니 된다.
방사선 치료 방법
본 발명의 다른 측면은, 암에 걸린 인간을 제외한 포유동물의 암 부위에 방사선을 조사하는 단계; 및 본 발명에 따른 방사선 치료 증진용 약학적 조성물을 상기 포유동물에 투여하는 단계;를 포함하는 암에 대한 방사선 치료 방법을 제공한다.
본 명세서에서 사용하는 용어, "방사선 조사"는 방사선을 조사하여 악성 세포의 DNA를 손상시키는 국소 치료 방법을 의미한다. 정상 세포는 종양 세포에 비해 이런 손상을 수선하는 능력이 더 크다. 방사선 조사는 이런 차이를 이용하는 치료를 의미하여, 통상적으로 의미하는 방사선을 이용하여 치료하는 방법을 포함한다.
상기 방사선 조사는 방사선 치료 목적에 따라 근치적 방사선 치료, 보조적 방사선 치료, 고식적 방사선 치료로 나눌 수 있다. 근치적 방사선 치료는 종양이 비교적 국소부위에 제한되어 있으며 원격전이가 없을 때, 완치를 목적으로 하는 방사선 치료를 말한다. 보조적 방사선 치료는 외과적 수술 후 국소 재발 방지를 목적으로 시행하는 방사선 치료를 말한다. 방사선 치료를 병용함으로써 단순히 재발을 줄일 뿐만 아니라 수술의 범위를 줄여 기능을 유지할 수도 있다. 고식적 방사선 치료는 암으로 인한 증상 완화를 목적으로 시행하는 방사선 치료이다. 방사선은 고에너지 방사선을 이용하여 암세포를 죽이는 치료법이나, 암세포뿐만 아니라 주위에 있는 정상 조직에도 영향을 미치므로, 치료에 따른 부작용이 발생하기도 한다. 그 예로 피부변화, 탈모, 오심 및 구토, 설사, 점막염/식도염, 구강건조증, 생식기능의 변화 등이 있다.
상기 방사선은 0.1 Gy 내지 100 Gy의 조사(irradiation)량으로 단일 조사 또는 분획 조사될 수 있다. 구체적으로, 방사선 조사량은 이에 제한되지는 않으나 0.1 Gy 내지 100 Gy, 0.5 Gy 내지 90 Gy, 0.7 Gy 내지 80 Gy, 0.9 Gy 내지 70 Gy일 수 있고, 바람직하게는 1 Gy 내지 60 Gy일 수 있다. 또한, 상기 방사선은 이에 제한되지는 않으나 1 내지 26주 기간 동안 조사될 수 있다.
본 발명에 따른 방사선 치료 증진용 약학적 조성물은 암에 대한 방사선 치료 증진 효과를 얻기 위하여, 암의 치료시 방사선 조사와 병용하여 투여될 수 있으며, 상기 "병용하여 투여"는 다양한 종류의 암세포를 치료하는 항암 과정에서 방사선 조사를 함께 투여하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어, "치료"는 치료학적 처리 및 예방적 처리를 모두 포함하는 의미로 사용될 수 있다. 이때, 예방은 개체의 병리학적 상태 또는 질환을 완화시키거나 감소시키는 의미로 사용될 수 있다. 또한, "치료"는 인간을 포함한 포유류에서 질환을 치료하기 위한 적용이나 어떠한 형태의 투약을 모두 포함한다. 상기 용어는 질환 또는 질환의 진행을 억제하거나 늦추는 것을 포함하며; 손상되거나, 결손된 기능을 회복시키거나, 수리하여, 질환을 부분적이거나 완전하게 완화시키거나; 또는 비효율적인 프로세스를 자극하거나; 심각한 질환을 완화하는 의미를 포함한다.
일 구체예에서, 용어 "치료"는 방사선을 조사하여 암 증상이 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위라면 제한없이 포함할 수 있다.
일 구체예에서, 용어 "예방"은 본 발명의 약학적 조성물을 이용하여 암 증상을 차단하거나, 암 증상의 억제 또는 지연시키는 모든 행위라면 제한없이 포함할 수 있다.
일 구체예에서, 본 발명의 방사선 치료 증진용 약학적 조성물 투여 전 후에 방사선을 조사하는 경우 시너지 효과에 따라 방사선 치료 효과를 현저히 증진시킬 수 있다. 더 나아가 항암제에 대한 내성이나, 암의 전이 또는 재발을 방지할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 약학적 조성물 및 방사선 조사의 효과가 서로 상호작용을 갖는 범위 내이기만 하면, 상기 약학적 조성물은 방사선 조사 전 또는 조사 후에 시간적 격차를 두고 투여될 수 있다.
상기 약학적 조성물의 투여 시기는 암의 종류, 암의 진행 정도, 투여 경로, 성별, 나이, 체중 등에 따라 적절히 증감될 수 있다. 또한, 방사선 조사 전 또는 조사 후뿐만 아니라 매일 정량을 규칙적으로 투여하거나, 집중적으로 많은 양을 단기간에 투여할 수 있다. 구체적으로, 상기 약학적 조성물은 이에 제한되지는 않으나 주당 1회 내지 20회, 1회 내지 18회, 1회 내지 15회, 1회 내지 10회, 1회 내지 8회, 1회 내지 5회, 또는 2회 내지 3회 투여할 수 있다.
한편, 상기 약학적 조성물은 이에 제한되지는 않으나, 방사선 조사 시점을 기준으로 6 내지 48시간 전후, 10 내지 42시간 전후, 14 내지 36시간 전후, 또는 18 내지 30시간 전후로 투여될 수 있고, 바람직하게는 20 내지 28시간 전후로 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 구체적으로, 구강, 직장, 국소, 정맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 경피, 비측내, 흡입, 안구 내 또는 피내경로를 통해 통상적인 방식으로 투여될 수 있다.
본 발명의 암에 대한 방사선 치료 방법은 본 발명에 따른 방사선 치료 증진용 약학적 조성물을 치료적 유효량으로 투여하는 것을 포함한다. 상기 치료적 유효량은 방사선에 대해 암세포 내의 종양의 민감성을 효과적으로 증진시키는 양을 의미한다. 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 일이다. 특정 환자에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료 기간, 및 조사되는 방사선량을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다. 따라서 본 발명의 목적에 적합한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물의 유효량은 전술한 사항을 고려하여 결정하는 것이 바람직하다. 또한, 경우에 따라, 본 발명의 방사선 치료 증진용 약학적 조성물과 함께 공지의 항암제를 병용 투여하여 방사선 치료 효과를 포함한 항암 효과를 증대시킬 수 있다.
또한, 본 발명의 방사선 치료 방법은 방사선 저항성이 증가될 수 있는 임의의 동물에 적용가능하다. 동물은 인간 및 영장류뿐만 아니라, 소, 돼지, 양, 말, 개 및 고양이 등의 가축을 포함한다. 또한, 본 발명의 방사선 치료 방법은 방사선 저항성이 증가된 모든 암 치료에 이용할 수 있다. 바람직하게는 위암, 간암, 폐암, 대장암, 유방암, 전립선암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 갑상선암, 후두암, 급성 골수성 백혈병, 뇌종양, 신경모세포종, 망막 모세포종, 두경부암, 침샘암 및 림프종 등의 암 치료에 이용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 방사선 치료 방법은 암세포 또는 암을 앓고 있는 개체에 본 발명의 조성물을 투여하고, 방사선을 조사하는 것을 포함하는데, 상기 방사선 조사는 이온화 방사선, 특히, 통상적으로 사용되는 선형 가속기(linear accelerators) 또는 방사핵종(radionuclides)에 의해 방사되는 감마 방사선을 의미할 수 있다. 방사선이 조사되면 생체는 전리 현상을 일으키는데, 이는 세포의 증식 및 생존에 필수적인 핵산, 세포막 등에 화학적인 변성을 초래하여 결국 암세포는 사멸하게 된다. 방사핵종에 의한 방사선 조사는 외부적 또는 내부적으로 이루어질 수 있으며, 투여되는 항암제의 양, 방사선 조사량 및 방사선 조사량의 간헐성은 종양의 종류, 위치, 화학 요법 또는 방사선 요법에 대한 환자의 반응과 같은 일련의 변수들에 의해 달라질 수 있다.
또한, 본 발명의 방사선 치료 방법은 근접치료, 방사선 핵종치료, 외부 빔 방사선 요법(external beam radiation therapy), 온열치료(냉동절제 치료 및 고열 치료를 포함), 방사선 수술, 하전입자 방사선 치료(charged-particle radiotherapy), 중성자 방사선 요법 및 광역동 치료 등을 포함할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
제조예 1. 시험물질의 제조
제조예 1.1. hCD80-Fc-IL-2 변이체(2M)의 제조: GI-101
인간 CD80 단편, Fc 도메인 및 IL-2 변이체를 포함하는 융합단백질을 생산하기 위하여, CD80 단편(서열번호 2), Ig 힌지(서열번호 3), Fc 도메인(서열번호 4), 링커(서열번호 5) 및 두 개의 아미노산이 치환된 IL-2 변이체(2M)(R38A, F42A)(서열번호 6)를 N-말단으로부터 이 순서대로 포함하는 서열번호 9의 융합단백질을 제조하였다. 구체적인 제조방법은 대한민국 공개특허공보 10-2020-0032009A에 기재된 방법으로 수행하였다. 또한, 상기 융합단백질을 "GI-101"로 명명하였다.
제조예 1.2. mCD80-Fc-IL-2 변이체(2M)의 제조: mGI-101
마우스 CD80, Fc 도메인 및 IL-2 변이체를 포함하는 융합단백질을 생산하기 위하여, mCD80 단편(서열번호 13), Ig 힌지(서열번호 3), Fc 도메인(서열번호 4), 링커(서열번호 5) 및 두 개의 아미노산이 치환된 IL-2 변이체(2M)(R38A, F42A)(서열번호 6)를 N-말단으로부터 이 순서대로 포함하는 서열번호 38의 융합단백질을 제조하였다. 상기 융합단백질을 "mGI-101"로 명명하였다.
제조예 1.3. 시험물질의 제조: mGI-101
냉동 상태의 시험물질을 실온에 두어 완전히 녹인 다음 비히클(vehicle)로서 PBS를 이용하여 투여 용량과 부피(volume)에 맞게 제조하였다. 시험물질과 PBS를 섞은 후 볼텍싱(vortexing)이나 파이펫팅(pipetting)을 하지 않고 부드럽게 손으로 교반(agitation) 후 투여하였다. 녹인 시험물질은 투여 전까지 냉장으로 지속적으로 보관하였다.
준비예 1. 마우스 종양 모델의 준비
준비예 1.1. 종양 세포주 준비
마우스 흑색종(melanoma) 세포주인 B16F10 세포주는 한국세포주은행으로부터 분양받아 10% FBS(fetal bovine serum)가 함유된 Dulbecco's modified MEM 배지를 이용하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다.
준비예 1.2. 실험 대상인 마우스의 검역 및 순화 과정
6주령의 암컷 C57BL/6 마우스를 오리엔트바이오로부터 구입하였다. 실험동물 입수 시 공급처에서 제공한 시험계의 미생물 모니터링 성적서를 참조하고, 실험동물의 외관을 관찰하여 검수 검역을 실시하였다. 외관적으로 이상이 없는 동물들을 사육 구역으로 반입하여 7일간 시험을 실시하는 동물실 내에서 순화시켰다. 7일간의 검역 및 순화 기간에 건강 상태를 평가하였고, 실험의 실시에 적합성 여부를 확인하여 건강한 마우스를 선별하였다.
준비예 1.3. 마우스 개체 및 사육 상자 식별
실험동물 입수 시에 마우스의 꼬리에 적색 유성펜을 이용하여 개체 표시(tail marking)를 하고, 사육 상자에는 검역 및 순화 기간 중 임시 개체식별카드(시험명, 개체번호, 입고시기)를 부착하였다. 군 분리 시에 마우스의 꼬리에 검정색 유성펜을 이용하여 개체 표시를 하고 각 케이지상에 개체식별카드(시험명, 군정보, 개체번호, 성별, 입고시기, 투여기간)를 부착하였다.
준비예 1.4. 종양 세포주의 이식
검역 및 순화 기간 종료 후, 선별된 건강한 C57BL/6 마우스에 대하여 5×106 cells/mL 농도로 PBS에 희석한 B16F10 세포를 개체 당 100 ㎕(5×105 cells)씩 양측 옆구리(flank)에 피하 이식되도록 하였다. 단, 우측의 경우 뒷다리에 가깝게 이식하고, 좌측의 경우 앞다리에 이식하였다.
준비예 1.5. 마우스 종양 모델의 군 분리
상기 준비예 1.4에서 B16F10 종양 세포주를 이식하고 약 7일 전후에 전자 캘리퍼스를 이용하여 C57BL/6 마우스의 종양의 크기를 측정한 후, 군 당 10 마리씩 총 5군으로 군 분리하였다. 구체적으로, 종양 세포주가 이식된 대부분 개체의 종양 부피가 약 50~120 ㎣에 도달하였을 때, 한 개체에서 양측에 이식된 종양을 측정하여 해당 평균값의 종양 크기를 기준으로 Z 배열법에 따라 군 분리를 실시하였다.
준비예 1.6. 실험 대상인 마우스의 사육
실험 대상인 C57BL/6 마우스는 200(Width, ㎜)×260(Depth, ㎜)×130(Height, ㎜) 크기의 폴리카보네이트 사육상자에서 상자 당 5 마리씩 사육하였다. 이때, 사육 온도 조건은 20℃~25℃이었으며, 습도는 50±20%이었다. 환기는 시간 당 10~15회씩 수행하였으며, 12시간 주야 사이클을 유지시켰고, 이때, 조도는 150~300 Lux이었다.
사육 시, 사료와 물은 자유롭게 섭취하도록 하였으며, 이때 물은 상수도수를 필터유수살균기로 여과 후 자외선을 조사하고, 폴리카보네이트 재질의 음수병(250 ㎖)을 이용하여 제공하였다. 한편, 사육상자 및 급이기는 1회/주, 급수병은 2회/주 빈도로 교환하였다. 사육기재는 소독액으로 세척한 후, 자외선 소독기를 이용하여 소독한 후 재사용하였다.
실험예 1. 마우스 종양 모델에서의 방사선 조사 및 mGI-101 병용 치료 효과
실험예 1.1. mGI-101 복강 투여 및 방사선 조사
시험물질로서 제조예 1에서 준비한 mGI-101을 복강 주사를 통해 마우스 종양 모델에 투여하였으며, 투여 시 마우스의 주령은 8주령이었다. 구체적으로, 실험군 G2 및 G4의 경우 mGI-101을 군 분리 당일(day 1)에 첫 투여하고, 실험군 G5의 경우 방사선 조사 다음날인 day 4에 mGI-101을 첫 투여하였다. 이후 실험군 G2, G4 및 G5에 대해 mGI-101을 주 1회, 총 2회 추가적으로 복강 투여하였다. 대조군인 G1의 경우 군 분리 당일(day 1)에 PBS를 투여하고, 이후 PBS를 주 1회, 총 2회 복강 주사를 통해 추가 투여하였다.
방사선 조사의 경우 주사 마취 하에 우측이 위로 향하게 뉘어 우측의 종양 이식 부위가 조사될 수 있게 진행하였으며, 방사선 조사는 6Gy 강도로 day 3에 단회 조사하였다. 이를 하기 표 1에 정리하여 나타내었다.
군(group) 시험물질 시험물질 투여시기* 투여용량 및 조사량 투여 부피
(volume)		 투여 경로 투여횟수 투여기간 개체수
G1
(대조군)		 PBS
(Vehicle)		 Day 1 - 10mL/㎏ 복강주사 주 1회
(총 2회)		 2주 10
G2 mGI-101 Day 1 3㎎/㎏ 10mL/㎏ 복강주사 주 1회
(총 2회)		 2주 10
G3 방사선 Day 3 6Gy - 조사 단회 - 10
G4
(병용: mGI-101→방사선)		 mGI-101 Day 1 3㎎/㎏ 10mL/㎏ 복강주사 주 1회
(총 2회)		 2주 10
방사선 Day 3 6Gy - 조사 단회
G5
(병용: 방사선→mGI-101)		 방사선 Day 3 6Gy - 조사 단회 2주 10
mGI-101 Day 4 3㎎/㎏ 10mL/㎏ 복강주사 주 1회
(총 2회)
* 군 분리일을 day 1로 설정
실험예 1.2. 마우스 종양 모델의 종양 부피 측정 및 종양 성장 억제율 분석
mGI-101 복강 투여(intraperitoneal injection) 및 방사선 조사 후, 주 2회 전자 캘리퍼스를 사용하여 마우스의 양측 옆구리에 이식된 종양의 장축(maximum length, L)과 단축(perpendicular width, W)을 측정하고, 하기 [수학식 1]에 대입하여 종양의 부피(tumor volume)를 계산하였다.
[수학식 1]
종양 부피(㎣) = [L(㎜)×W(㎜)×W(㎜)]×0.5
한편, 종양 성장 억제율(tumor growth inhibition; TGI)은 하기 [수학식 2]에 대입하여 계산하였다.
[수학식 2]
TGI = (1-(Ti-T0)/(Vi-V0))×100
Ti = 실험군의 투여 전 종양의 부피
T0 = 실험군의 투여 후 종양의 부피
Vi = 대조군의 투여 전 종양의 부피
V0 = 대조군의 투여 후 종양의 부피
각 개체의 투여 전의 종양의 부피는 군 분리 시 측정된 값으로 설정하였다.
실험예 1.3. 방사선 조사 및 mGI-101 투여에 의한 종양 성장 억제 효과
방사선이 조사된 우측 종양의 경우, G3은 15일차에 G1, G2에 비해 유의미하게 종양 성장이 억제되었고, G4 및 G5 모두 11일, 15일차에 G1, G2에 비해 유의미하게 종양 성장이 억제되었다(도 1a 및 도 2a 내지 도 2e).
방사선이 조사되지 않은 좌측 종양의 경우, G2는 15일차에 G1에 비해 유의미하게 종양 성장이 억제되었고, G4는 15일차에 G1, G3에 비해 유의미하게 종양 성장이 억제되었다. G5는 11일차에 G1, G3에 비해 유의미하게 종양 성장이 억제되고, 15일차에 G1, G2, G3에 비해 유의미하게 종양 성장이 억제되었다(도 1b 및 도 3a 내지 도 3e).
양측 종양 평균의 경우, G2는 15일차에 G1에 비해 유의미하게 종양 성장이 억제되었고, G4 및 G5 모두 11일차에 G1에 비해 유의미하게 종양 성장이 억제되고, 15일차에 G1, G2, G3에 비해 유의미하게 종양 성장이 억제되었다(도 1c).
실험예 1.4. 방사선 조사 및 mGI-101 투여에 의한 종양 성장 억제율 분석
방사선이 조사된 우측 종양에 대한 종양 성장 억제율(tumor growth inhibition; TGI)은 G1의 경우, 30% 이상 억제 1마리, 50% 이상 억제 1마리, 80% 이상 억제 0마리로 나타났고, G2의 경우, 30% 이상 억제 4마리, 50% 이상 억제 3마리, 80% 이상 억제 0마리로 나타났다. G3의 경우, 30% 이상 억제 5마리, 50% 이상 억제 4마리, 80% 이상 억제 2마리로 나타났고, G4의 경우, 30% 이상 억제 7마리, 50% 이상 억제 6마리, 80% 이상 억제 2마리로 나타났다. G5의 경우, 30% 이상 억제 10마리, 50% 이상 억제 10마리, 80% 이상 억제 4마리로 나타났다(도 4a 및 표 2).
군(group) 30% 이상 억제 50% 이상 억제 80% 이상 억제
G1 1 1 0
G2 4 3 0
G3 5 4 2
G4 7 6 2
G5 10 10 4
방사선이 조사되지 않은 좌측 종양에 대한 종양 성장 억제율은 G1의 경우, 30% 이상 억제 0마리, 50% 이상 억제 0마리, 80% 이상 억제 0마리로 나타났고, G2의 경우, 30% 이상 억제 5마리, 50% 이상 억제 2마리, 80% 이상 억제 2마리로 나타났다. G3의 경우, 30% 이상 억제 0마리, 50% 이상 억제 0마리, 80% 이상 억제 0마리로 나타났고, G4의 경우, 30% 이상 억제 6마리, 50% 이상 억제 3마리, 80% 이상 억제 0마리로 나타났다. G5의 경우, 30% 이상 억제 8마리, 50% 이상 억제 6마리, 80% 이상 억제 4마리로 나타났다(도 4b 및 표 3).
군(group) 30% 이상 억제 50% 이상 억제 80% 이상 억제
G1 0 0 0
G2 5 2 2
G3 0 0 0
G4 6 3 0
G5 8 6 4
양측 종양 평균에 대한 종양 성장 억제율은 G1의 경우, 30% 이상 억제 1마리, 50% 이상 억제 0마리, 80% 이상 억제 0마리로 나타났고, G2의 경우, 30% 이상 억제 4마리, 50% 이상 억제 2마리, 80% 이상 억제 2마리로 나타났다. G3의 경우, 30% 이상 억제 1마리, 50% 이상 억제 0마리, 80% 이상 억제 0마리로 나타났고, G4의 경우, 30% 이상 억제 6마리, 50% 이상 억제 4마리, 80% 이상 억제 0마리로 나타났다. G5의 경우, 30% 이상 억제 10마리, 50% 이상 억제 7마리, 80% 이상 억제 4마리로 나타났다(도 4c 및 표 4).
군(group) 30% 이상 억제 50% 이상 억제 80% 이상 억제
G1 1 0 0
G2 4 2 2
G3 1 0 0
G4 6 4 0
G5 10 7 4
상기 결과를 통해, GI-101과 방사선 병용 치료는 방사선을 조사하는 1차 암에서 상승 치료 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 방사선을 조사하지 않는 2차 암에서도 상승 치료 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
<110> GI Innovation, Inc. <120> PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR ENHANCING RADIOTHERAPY CONTAINING FUSION PROTEIN COMPRISING IL-2 PROTEIN AND CD80 PROTEIN <130> SPD20-077_GII <160> 38 <170> KopatentIn 3.0 <210> 1 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> signal peptide (TPA) <400> 1 Met Asp Ala Met Leu Arg Gly Leu Cys Cys Val Leu Leu Leu Cys Gly 1 5 10 15 Ala Val Phe Val Ser Pro Ser His Ala 20 25 <210> 2 <211> 208 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hB7-1:35-242 <400> 2 Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15 Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 25 30 Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 40 45 Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 55 60 Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 75 80 Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 90 95 Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser 100 105 110 Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 115 120 125 Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 130 135 140 Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu 145 150 155 160 Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr 165 170 175 Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn 180 185 190 Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 195 200 205 <210> 3 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hinge <400> 3 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 1 5 10 15 Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro 20 25 30 <210> 4 <211> 216 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> immunoglobulin fc <400> 4 Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 1 5 10 15 Pro Lys Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 25 30 Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 35 40 45 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 55 60 Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 75 80 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 90 95 Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln 100 105 110 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met 115 120 125 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 130 135 140 Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 145 150 155 160 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 165 170 175 Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val 180 185 190 Phe Ser Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 195 200 205 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 210 215 <210> 5 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> linker <400> 5 Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 6 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hIL-2M <400> 6 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 7 <211> 617 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein comprising variants of IL-2 and fragments of CD80 <400> 7 Met Asp Ala Met Leu Arg Gly Leu Cys Cys Val Leu Leu Leu Cys Gly 1 5 10 15 Ala Val Phe Val Ser Pro Ser His Ala Val Ile His Val Thr Lys Glu 20 25 30 Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys Gly His Asn Val Ser Val Glu 35 40 45 Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp Gln Lys Glu Lys Lys Met Val 50 55 60 Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn 65 70 75 80 Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala 85 90 95 Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr 100 105 110 Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser 115 120 125 Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro 130 135 140 Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro 145 150 155 160 Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile 165 170 175 Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser 180 185 190 Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr Asn His Ser Phe Met Cys Leu 195 200 205 Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr 210 215 220 Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 225 230 235 240 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly 245 250 255 Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser 260 265 270 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg 275 280 285 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro 290 295 300 Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 305 310 315 320 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 325 330 335 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 340 345 350 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr 355 360 365 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 370 375 380 Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 385 390 395 400 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 405 410 415 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 420 425 430 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser 435 440 445 Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Leu His Glu Ala 450 455 460 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Gly 465 470 475 480 Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu 485 490 495 Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile 500 505 510 Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe 515 520 525 Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu 530 535 540 Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys 545 550 555 560 Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile 565 570 575 Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala 580 585 590 Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe 595 600 605 Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 610 615 <210> 8 <211> 1857 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (GI101) <400> 8 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgtgat ccacgtgacc aaagaagtga aagaggtcgc cacactgtcc 120 tgcggccaca acgtttcagt ggaagaactg gcccagacca ggatctactg gcagaaagaa 180 aagaaaatgg tgctgaccat gatgtccggc gacatgaaca tctggcctga gtacaagaac 240 cggaccatct tcgacatcac caacaacctg tccatcgtga ttctggccct gaggccttct 300 gatgagggca cctatgagtg cgtggtgctg aagtacgaga aggacgcctt caagcgcgag 360 cacctggctg aagtgacact gtccgtgaag gccgactttc ccacaccttc catctccgac 420 ttcgagatcc ctacctccaa catccggcgg atcatctgtt ctacctctgg cggctttcct 480 gagcctcacc tgtcttggct ggaaaacggc gaggaactga acgccatcaa caccaccgtg 540 tctcaggacc ccgaaaccga gctgtacgct gtgtcctcca agctggactt caacatgacc 600 accaaccaca gcttcatgtg cctgattaag tacggccacc tgagagtgaa ccagaccttc 660 aactggaaca ccaccaagca agagcacttc cctgacaatg gatctggcgg cggaggttct 720 ggcggaggtg gaagcggagg cggaggatct gctgagtcta agtatggccc tccttgtcct 780 ccatgtcctg ctccagaagc tgctggcgga ccctctgtgt tcctgtttcc tccaaagcct 840 aaggaccagc tcatgatctc tcggacaccc gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtct 900 caagaggacc ctgaggtgca gttcaattgg tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc 960 aagaccaagc ctagagagga acagttcaac tccacctaca gagtggtgtc cgtgctgacc 1020 gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa gagtacaagt gcaaggtgtc caacaagggc 1080 ctgccttcca gcatcgaaaa gaccatctcc aaggctaagg gccagcctag ggaaccccag 1140 gtttacaccc tgcctccaag ccaagaggaa atgaccaaga accaggtgtc cctgacctgc 1200 ctggtcaagg gcttctaccc ttccgacatt gccgtggaat gggagtccaa tggccagcct 1260 gagaacaact acaagaccac acctcctgtg ctggactccg acggctcctt ctttctgtac 1320 tctcgcctga ccgtggacaa gtctagatgg caagagggca acgtgttctc ctgctctgtg 1380 ctgcacgagg ccctgcacaa tcactacacc cagaagtccc tgtctctgtc tcttggaggt 1440 ggtggcggtt ctgcccctac cagctcctct accaagaaaa cccagctcca gttggagcat 1500 ctgctgctgg acctccagat gattctgaac gggatcaaca actataagaa ccccaagctg 1560 accgccatgc tgaccgctaa gttctacatg cccaagaagg ccaccgagct gaagcacctc 1620 cagtgcctgg aagaagaact gaagcccctg gaagaggtgc tgaatctggc ccagtccaag 1680 aacttccacc tgaggccacg ggacctgatc agcaacatca acgtgatcgt gctggaactg 1740 aagggctccg agacaacctt tatgtgcgag tacgccgacg agacagccac catcgtggaa 1800 tttctgaacc ggtggatcac cttctgccag agcatcatct ccacactgac ctgatga 1857 <210> 9 <211> 592 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (GI101) <400> 9 Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15 Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 25 30 Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 40 45 Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 55 60 Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 75 80 Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 90 95 Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser 100 105 110 Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 115 120 125 Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 130 135 140 Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu 145 150 155 160 Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr 165 170 175 Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn 180 185 190 Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 195 200 205 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 210 215 220 Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 225 230 235 240 Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245 250 255 Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 260 265 270 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280 285 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 290 295 300 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 305 310 315 320 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 325 330 335 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 340 345 350 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 355 360 365 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 370 375 380 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 385 390 395 400 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 405 410 415 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 420 425 430 Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 435 440 445 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser 450 455 460 Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu 465 470 475 480 Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr 485 490 495 Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu 500 505 510 Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val 515 520 525 Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu 530 535 540 Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr 545 550 555 560 Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe 565 570 575 Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 580 585 590 <210> 10 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hIL-2 <400> 10 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 11 <211> 288 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD80 <400> 11 Met Gly His Thr Arg Arg Gln Gly Thr Ser Pro Ser Lys Cys Pro Tyr 1 5 10 15 Leu Asn Phe Phe Gln Leu Leu Val Leu Ala Gly Leu Ser His Phe Cys 20 25 30 Ser Gly Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu 35 40 45 Ser Cys Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile 50 55 60 Tyr Trp Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp 65 70 75 80 Met Asn Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr 85 90 95 Asn Asn Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly 100 105 110 Thr Tyr Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg 115 120 125 Glu His Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr 130 135 140 Pro Ser Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile 145 150 155 160 Ile Cys Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu 165 170 175 Glu Asn Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp 180 185 190 Pro Glu Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met 195 200 205 Thr Thr Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg 210 215 220 Val Asn Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro 225 230 235 240 Asp Asn Leu Leu Pro Ser Trp Ala Ile Thr Leu Ile Ser Val Asn Gly 245 250 255 Ile Phe Val Ile Cys Cys Leu Thr Tyr Cys Phe Ala Pro Arg Cys Arg 260 265 270 Glu Arg Arg Arg Asn Glu Arg Leu Arg Arg Glu Ser Val Arg Pro Val 275 280 285 <210> 12 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> modified Fc <400> 12 Ser His Thr Gln Pro Leu Gly Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 1 5 10 15 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 20 25 30 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 35 40 45 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 50 55 60 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 65 70 75 80 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 85 90 95 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 100 105 110 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 115 120 125 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 130 135 140 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 145 150 155 160 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 165 170 175 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 180 185 190 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 195 200 205 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 210 215 <210> 13 <211> 306 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> mCD80 <400> 13 Met Ala Cys Asn Cys Gln Leu Met Gln Asp Thr Pro Leu Leu Lys Phe 1 5 10 15 Pro Cys Pro Arg Leu Ile Leu Leu Phe Val Leu Leu Ile Arg Leu Ser 20 25 30 Gln Val Ser Ser Asp Val Asp Glu Gln Leu Ser Lys Ser Val Lys Asp 35 40 45 Lys Val Leu Leu Pro Cys Arg Tyr Asn Ser Pro His Glu Asp Glu Ser 50 55 60 Glu Asp Arg Ile Tyr Trp Gln Lys His Asp Lys Val Val Leu Ser Val 65 70 75 80 Ile Ala Gly Lys Leu Lys Val Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Leu 85 90 95 Tyr Asp Asn Thr Thr Tyr Ser Leu Ile Ile Leu Gly Leu Val Leu Ser 100 105 110 Asp Arg Gly Thr Tyr Ser Cys Val Val Gln Lys Lys Glu Arg Gly Thr 115 120 125 Tyr Glu Val Lys His Leu Ala Leu Val Lys Leu Ser Ile Lys Ala Asp 130 135 140 Phe Ser Thr Pro Asn Ile Thr Glu Ser Gly Asn Pro Ser Ala Asp Thr 145 150 155 160 Lys Arg Ile Thr Cys Phe Ala Ser Gly Gly Phe Pro Lys Pro Arg Phe 165 170 175 Ser Trp Leu Glu Asn Gly Arg Glu Leu Pro Gly Ile Asn Thr Thr Ile 180 185 190 Ser Gln Asp Pro Glu Ser Glu Leu Tyr Thr Ile Ser Ser Gln Leu Asp 195 200 205 Phe Asn Thr Thr Arg Asn His Thr Ile Lys Cys Leu Ile Lys Tyr Gly 210 215 220 Asp Ala His Val Ser Glu Asp Phe Thr Trp Glu Lys Pro Pro Glu Asp 225 230 235 240 Pro Pro Asp Ser Lys Asn Thr Leu Val Leu Phe Gly Ala Gly Phe Gly 245 250 255 Ala Val Ile Thr Val Val Val Ile Val Val Ile Ile Lys Cys Phe Cys 260 265 270 Lys His Arg Ser Cys Phe Arg Arg Asn Glu Ala Ser Arg Glu Thr Asn 275 280 285 Asn Ser Leu Thr Phe Gly Pro Glu Glu Ala Leu Ala Glu Gln Thr Val 290 295 300 Phe Leu 305 <210> 14 <211> 1848 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (mGI101) <400> 14 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgtgga cgagcagctc tccaagtccg tgaaggataa ggtcctgctg 120 ccttgccggt acaactctcc tcacgaggac gagtctgagg accggatcta ctggcagaaa 180 cacgacaagg tggtgctgtc cgtgatcgcc ggaaagctga aagtgtggcc tgagtacaag 240 aacaggaccc tgtacgacaa caccacctac agcctgatca tcctgggcct cgtgctgagc 300 gatagaggca cctattcttg cgtggtgcag aagaaagagc ggggcaccta cgaagtgaag 360 cacctggctc tggtcaagct gtccatcaag gccgacttca gcacccctaa catcaccgag 420 tctggcaacc cttccgccga caccaagaga atcacctgtt tcgcctctgg cggcttccct 480 aagcctcggt tctcttggct ggaaaacggc agagagctgc ccggcatcaa taccaccatt 540 tctcaggacc cagagtccga gctgtacacc atctccagcc agctcgactt taacaccacc 600 agaaaccaca ccatcaagtg cctgattaag tacggcgacg cccacgtgtc cgaggacttt 660 acttgggaga aacctcctga ggaccctcct gactctggat ctggcggcgg aggttctggc 720 ggaggtggaa gcggaggcgg aggatctgct gagtctaagt atggccctcc ttgtcctcca 780 tgtcctgctc cagaagctgc tggcggaccc tctgtgttcc tgtttcctcc aaagcctaag 840 gaccagctca tgatctctcg gacccctgaa gtgacctgcg tggtggtgga tgtgtctcaa 900 gaggaccctg aggtgcagtt caattggtac gtggacggcg tggaagtgca caacgccaag 960 accaagccta gagaggaaca gttcaactcc acctatagag tggtgtccgt gctgaccgtg 1020 ctgcaccagg attggctgaa cggcaaagag tacaagtgca aggtgtccaa caagggcctg 1080 ccttccagca tcgaaaagac catcagcaag gctaagggcc agcctaggga accccaggtt 1140 tacaccctgc ctccaagcca agaggaaatg accaagaacc aggtgtccct gacctgcctg 1200 gtcaagggct tctacccttc cgacattgcc gtggaatggg agtccaatgg ccagcctgag 1260 aacaactaca agaccacacc tcctgtgctg gactccgacg gctccttctt tctgtactct 1320 cgcctgaccg tggacaagtc taggtggcaa gagggcaacg tgttctcctg ctctgtgctg 1380 cacgaggctc tgcacaacca ctacacccag aagtccctgt ctctgtctct tggaggtggt 1440 ggcggttctg cccctacctc cagctctacc aagaaaaccc agctccagtt ggagcatctg 1500 ctgctggacc tccagatgat cctgaatggc atcaacaatt acaagaaccc caagctgacc 1560 gccatgctga ccgctaagtt ctacatgccc aagaaggcca ccgagctgaa gcacttgcag 1620 tgcctggaag aggaactgaa gcccctggaa gaagtgctga atctggccca gtccaagaac 1680 ttccacctga ggcctaggga cctgatctcc aacatcaacg tgatcgtgct ggaactgaaa 1740 ggctccgaga caaccttcat gtgcgagtac gccgacgaga cagccaccat cgtggaattt 1800 ctgaaccggt ggatcacctt ctgccagagc atcatctcca cactgacc 1848 <210> 15 <211> 616 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (mGI101) <400> 15 Met Asp Ala Met Leu Arg Gly Leu Cys Cys Val Leu Leu Leu Cys Gly 1 5 10 15 Ala Val Phe Val Ser Pro Ser His Ala Val Asp Glu Gln Leu Ser Lys 20 25 30 Ser Val Lys Asp Lys Val Leu Leu Pro Cys Arg Tyr Asn Ser Pro His 35 40 45 Glu Asp Glu Ser Glu Asp Arg Ile Tyr Trp Gln Lys His Asp Lys Val 50 55 60 Val Leu Ser Val Ile Ala Gly Lys Leu Lys Val Trp Pro Glu Tyr Lys 65 70 75 80 Asn Arg Thr Leu Tyr Asp Asn Thr Thr Tyr Ser Leu Ile Ile Leu Gly 85 90 95 Leu Val Leu Ser Asp Arg Gly Thr Tyr Ser Cys Val Val Gln Lys Lys 100 105 110 Glu Arg Gly Thr Tyr Glu Val Lys His Leu Ala Leu Val Lys Leu Ser 115 120 125 Ile Lys Ala Asp Phe Ser Thr Pro Asn Ile Thr Glu Ser Gly Asn Pro 130 135 140 Ser Ala Asp Thr Lys Arg Ile Thr Cys Phe Ala Ser Gly Gly Phe Pro 145 150 155 160 Lys Pro Arg Phe Ser Trp Leu Glu Asn Gly Arg Glu Leu Pro Gly Ile 165 170 175 Asn Thr Thr Ile Ser Gln Asp Pro Glu Ser Glu Leu Tyr Thr Ile Ser 180 185 190 Ser Gln Leu Asp Phe Asn Thr Thr Arg Asn His Thr Ile Lys Cys Leu 195 200 205 Ile Lys Tyr Gly Asp Ala His Val Ser Glu Asp Phe Thr Trp Glu Lys 210 215 220 Pro Pro Glu Asp Pro Pro Asp Ser Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 225 230 235 240 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 245 250 255 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val 260 265 270 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr 275 280 285 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 290 295 300 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 305 310 315 320 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 325 330 335 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 340 345 350 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 355 360 365 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 370 375 380 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 385 390 395 400 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 405 410 415 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 420 425 430 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 435 440 445 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu 450 455 460 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Gly Gly 465 470 475 480 Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln 485 490 495 Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn 500 505 510 Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr 515 520 525 Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu 530 535 540 Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn 545 550 555 560 Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val 565 570 575 Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp 580 585 590 Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys 595 600 605 Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 610 615 <210> 16 <211> 1437 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (GI101C1) <400> 16 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgtgat ccacgtgacc aaagaagtga aagaggtcgc cacactgtcc 120 tgcggccaca acgtttcagt ggaagaactg gcccagacca ggatctactg gcagaaagaa 180 aagaaaatgg tgctgaccat gatgtccggc gacatgaaca tctggcctga gtacaagaac 240 cggaccatct tcgacatcac caacaacctg tccatcgtga ttctggccct gaggccttct 300 gatgagggca cctatgagtg cgtggtgctg aagtacgaga aggacgcctt caagcgcgag 360 cacctggctg aagtgacact gtccgtgaag gccgactttc ccacaccttc catctccgac 420 ttcgagatcc ctacctccaa catccggcgg atcatctgtt ctacctctgg cggctttcct 480 gagcctcacc tgtcttggct ggaaaacggc gaggaactga acgccatcaa caccaccgtg 540 tctcaggacc ccgaaaccga gctgtacgct gtgtcctcca agctggactt caacatgacc 600 accaaccaca gcttcatgtg cctgattaag tacggccacc tgagagtgaa ccagaccttc 660 aactggaaca ccaccaagca agagcacttc cctgacaatg gatctggcgg cggaggttct 720 ggcggaggtg gaagcggagg cggaggatct gctgagtcta agtatggccc tccttgtcct 780 ccatgtcctg ctccagaagc tgctggcgga ccctctgtgt tcctgtttcc tccaaagcct 840 aaggaccagc tcatgatctc tcggacaccc gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtct 900 caagaggacc ctgaggtgca gttcaattgg tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc 960 aagaccaagc ctagagagga acagttcaac tccacctaca gagtggtgtc cgtgctgacc 1020 gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa gagtacaagt gcaaggtgtc caacaagggc 1080 ctgccttcca gcatcgaaaa gaccatctcc aaggctaagg gccagcctag ggaaccccag 1140 gtttacaccc tgcctccaag ccaagaggaa atgaccaaga accaggtgtc cctgacctgc 1200 ctggtcaagg gcttctaccc ttccgacatt gccgtggaat gggagtccaa tggccagcct 1260 gagaacaact acaagaccac acctcctgtg ctggactccg acggctcctt ctttctgtac 1320 tctcgcctga ccgtggacaa gtctaggtgg caagagggca acgtgttctc ctgctctgtg 1380 ctgcacgagg ccctgcacaa tcactacacc cagaagtccc tgtctctgtc cctgggc 1437 <210> 17 <211> 454 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (GI101C1) <400> 17 Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15 Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 25 30 Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 40 45 Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 55 60 Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 75 80 Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 90 95 Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser 100 105 110 Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 115 120 125 Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 130 135 140 Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu 145 150 155 160 Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr 165 170 175 Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn 180 185 190 Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 195 200 205 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 210 215 220 Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 225 230 235 240 Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245 250 255 Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 260 265 270 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280 285 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 290 295 300 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 305 310 315 320 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 325 330 335 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 340 345 350 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 355 360 365 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 370 375 380 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 385 390 395 400 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 405 410 415 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 420 425 430 Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 435 440 445 Leu Ser Leu Ser Leu Gly 450 <210> 18 <211> 1176 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (GI101C2) <400> 18 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccatctc acgccgctga gtctaagtac ggccctcctt gtcctccatg tcctgctcca 120 gaagctgctg gcggaccctc tgtgttcctg tttcctccaa agcctaagga ccagctcatg 180 atctctcgga cccctgaagt gacctgcgtg gtggtggatg tgtctcaaga ggaccctgag 240 gtgcagttca attggtacgt ggacggcgtg gaagtgcaca acgccaagac caagcctaga 300 gaggaacagt tcaactccac ctacagagtg gtgtccgtgc tgaccgtgct gcaccaggat 360 tggctgaacg gcaaagagta caagtgcaag gtgtccaaca agggcctgcc ttccagcatc 420 gaaaagacca tctccaaggc taagggccag cctagggaac cccaggttta caccctgcct 480 ccaagccaag aggaaatgac caagaaccag gtgtccctga cctgcctggt caagggcttc 540 tacccttccg acattgccgt ggaatgggag tccaatggcc agcctgagaa caactacaag 600 accacacctc ctgtgctgga ctccgacggc tccttctttc tgtactctcg cctgaccgtg 660 gacaagtcta ggtggcaaga gggcaacgtg ttctcctgct ctgtgctgca cgaggccctg 720 cacaatcact acacccagaa gtccctgtct ctgtctcttg gcggaggcgg aggatctgct 780 cctacctcca gctccaccaa gaaaacccag ctccagttgg agcatctgct gctggacctc 840 cagatgatcc tgaatggcat caacaattac aagaacccca agctgaccgc catgctgacc 900 gctaagttct acatgcccaa gaaggccacc gagctgaagc acctccagtg cctggaagag 960 gaactgaagc ccctggaaga agtgctgaat ctggcccagt ccaagaactt ccacctgagg 1020 cctagggacc tgatctccaa catcaacgtg atcgtgctgg aactgaaagg ctccgagaca 1080 accttcatgt gcgagtacgc cgacgagaca gccaccatcg tggaatttct gaaccggtgg 1140 atcaccttct gccagtccat catctccaca ctgacc 1176 <210> 19 <211> 367 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (GI101C2) <400> 19 Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 1 5 10 15 Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 20 25 30 Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 35 40 45 Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 50 55 60 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 65 70 75 80 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 85 90 95 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 100 105 110 Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu 115 120 125 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn 130 135 140 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 145 150 155 160 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 165 170 175 Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg 180 185 190 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys 195 200 205 Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 210 215 220 Ser Leu Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser 225 230 235 240 Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu Gln 245 250 255 Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Ala 260 265 270 Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys 275 280 285 His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu 290 295 300 Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile 305 310 315 320 Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr 325 330 335 Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu 340 345 350 Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 355 360 365 <210> 20 <211> 1434 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (mGI101C1) <400> 20 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgtgga cgagcagctc tccaagtccg tgaaggataa ggtcctgctg 120 ccttgccggt acaactctcc tcacgaggac gagtctgagg accggatcta ctggcagaaa 180 cacgacaagg tggtgctgtc cgtgatcgcc ggaaagctga aagtgtggcc tgagtacaag 240 aacaggaccc tgtacgacaa caccacctac agcctgatca tcctgggcct cgtgctgagc 300 gatagaggca cctattcttg cgtggtgcag aagaaagagc ggggcaccta cgaagtgaag 360 cacctggctc tggtcaagct gtccatcaag gccgacttca gcacccctaa catcaccgag 420 tctggcaacc cttccgccga caccaagaga atcacctgtt tcgcctctgg cggcttccct 480 aagcctcggt tctcttggct ggaaaacggc agagagctgc ccggcatcaa taccaccatt 540 tctcaggacc cagagtccga gctgtacacc atctccagcc agctcgactt taacaccacc 600 agaaaccaca ccatcaagtg cctgattaag tacggcgacg cccacgtgtc cgaggacttt 660 acttgggaga aacctcctga ggaccctcct gactctggat ctggcggcgg aggttctggc 720 ggaggtggaa gcggaggcgg aggatctgct gagtctaagt atggccctcc ttgtcctcca 780 tgtcctgctc cagaagctgc tggcggaccc tctgtgttcc tgtttcctcc aaagcctaag 840 gaccagctca tgatctctcg gacccctgaa gtgacctgcg tggtggtgga tgtgtctcaa 900 gaggaccctg aggtgcagtt caattggtac gtggacggcg tggaagtgca caacgccaag 960 accaagccta gagaggaaca gttcaactcc acctatagag tggtgtccgt gctgaccgtg 1020 ctgcaccagg attggctgaa cggcaaagag tacaagtgca aggtgtccaa caagggcctg 1080 ccttccagca tcgaaaagac catcagcaag gctaagggcc agcctaggga accccaggtt 1140 tacaccctgc ctccaagcca agaggaaatg accaagaacc aggtgtccct gacctgcctg 1200 gtcaagggct tctacccttc cgacattgcc gtggaatggg agtccaatgg ccagcctgag 1260 aacaactaca agaccacacc tcctgtgctg gactccgacg gctccttctt tctgtactct 1320 cgcctgaccg tggacaagtc taggtggcaa gagggcaacg tgttctcctg ctctgtgctg 1380 cacgaggctc tgcacaacca ctacacccag aagtccctgt ctctgtccct gggc 1434 <210> 21 <211> 478 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (mGI101C1) <400> 21 Met Asp Ala Met Leu Arg Gly Leu Cys Cys Val Leu Leu Leu Cys Gly 1 5 10 15 Ala Val Phe Val Ser Pro Ser His Ala Val Asp Glu Gln Leu Ser Lys 20 25 30 Ser Val Lys Asp Lys Val Leu Leu Pro Cys Arg Tyr Asn Ser Pro His 35 40 45 Glu Asp Glu Ser Glu Asp Arg Ile Tyr Trp Gln Lys His Asp Lys Val 50 55 60 Val Leu Ser Val Ile Ala Gly Lys Leu Lys Val Trp Pro Glu Tyr Lys 65 70 75 80 Asn Arg Thr Leu Tyr Asp Asn Thr Thr Tyr Ser Leu Ile Ile Leu Gly 85 90 95 Leu Val Leu Ser Asp Arg Gly Thr Tyr Ser Cys Val Val Gln Lys Lys 100 105 110 Glu Arg Gly Thr Tyr Glu Val Lys His Leu Ala Leu Val Lys Leu Ser 115 120 125 Ile Lys Ala Asp Phe Ser Thr Pro Asn Ile Thr Glu Ser Gly Asn Pro 130 135 140 Ser Ala Asp Thr Lys Arg Ile Thr Cys Phe Ala Ser Gly Gly Phe Pro 145 150 155 160 Lys Pro Arg Phe Ser Trp Leu Glu Asn Gly Arg Glu Leu Pro Gly Ile 165 170 175 Asn Thr Thr Ile Ser Gln Asp Pro Glu Ser Glu Leu Tyr Thr Ile Ser 180 185 190 Ser Gln Leu Asp Phe Asn Thr Thr Arg Asn His Thr Ile Lys Cys Leu 195 200 205 Ile Lys Tyr Gly Asp Ala His Val Ser Glu Asp Phe Thr Trp Glu Lys 210 215 220 Pro Pro Glu Asp Pro Pro Asp Ser Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 225 230 235 240 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 245 250 255 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val 260 265 270 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr 275 280 285 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 290 295 300 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 305 310 315 320 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 325 330 335 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 340 345 350 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 355 360 365 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 370 375 380 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 385 390 395 400 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 405 410 415 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 420 425 430 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 435 440 445 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu 450 455 460 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 465 470 475 <210> 22 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> variants of IL-2 (3M, M45) <400> 22 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Ala Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 23 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> variants of IL-2 (3M, M61) <400> 23 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Arg Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 24 <211> 133 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> variants of IL-2 (3M, M72) <400> 24 Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His 1 5 10 15 Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys 20 25 30 Asn Pro Lys Leu Thr Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys 35 40 45 Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 50 55 60 Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Gly Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu 65 70 75 80 Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu 85 90 95 Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 100 105 110 Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile 115 120 125 Ile Ser Thr Leu Thr 130 <210> 25 <211> 1851 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (GI102-M45) <400> 25 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgtgat ccacgtgacc aaagaagtga aagaggtcgc cacactgtcc 120 tgcggccaca acgtttcagt ggaagaactg gcccagacca ggatctactg gcagaaagaa 180 aagaaaatgg tgctgaccat gatgtccggc gacatgaaca tctggcctga gtacaagaac 240 cggaccatct tcgacatcac caacaacctg tccatcgtga ttctggccct gaggccttct 300 gatgagggca cctatgagtg cgtggtgctg aagtacgaga aggacgcctt caagcgcgag 360 cacctggctg aagtgacact gtccgtgaag gccgactttc ccacaccttc catctccgac 420 ttcgagatcc ctacctccaa catccggcgg atcatctgtt ctacctctgg cggctttcct 480 gagcctcacc tgtcttggct ggaaaacggc gaggaactga acgccatcaa caccaccgtg 540 tctcaggacc ccgaaaccga gctgtacgct gtgtcctcca agctggactt caacatgacc 600 accaaccaca gcttcatgtg cctgattaag tacggccacc tgagagtgaa ccagaccttc 660 aactggaaca ccaccaagca agagcacttc cctgacaatg gatctggcgg cggaggttct 720 ggcggaggtg gaagcggagg cggaggatct gctgagtcta agtatggccc tccttgtcct 780 ccatgtcctg ctccagaagc tgctggcgga ccctctgtgt tcctgtttcc tccaaagcct 840 aaggaccagc tcatgatctc tcggacaccc gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtct 900 caagaggacc ctgaggtgca gttcaattgg tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc 960 aagaccaagc ctagagagga acagttcaac tccacctaca gagtggtgtc cgtgctgacc 1020 gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa gagtacaagt gcaaggtgtc caacaagggc 1080 ctgccttcca gcatcgaaaa gaccatctcc aaggctaagg gccagcctag ggaaccccag 1140 gtttacaccc tgcctccaag ccaagaggaa atgaccaaga accaggtgtc cctgacctgc 1200 ctggtcaagg gcttctaccc ttccgacatt gccgtggaat gggagtccaa tggccagcct 1260 gagaacaact acaagaccac acctcctgtg ctggactccg acggctcctt ctttctgtac 1320 tctcgcctga ccgtggacaa gtctagatgg caagagggca acgtgttctc ctgctctgtg 1380 ctgcacgagg ccctgcacaa tcactacacc cagaagtccc tgtctctgtc tcttggaggt 1440 ggtggcggtt ctgcccctac cagctcctct accaagaaaa cccagctcca gttggagcat 1500 ctgctgctgg acctccagat gattctgaac gggatcaaca actataagaa ccccaagctg 1560 accgccatgc tgaccgctaa gttcgccatg cccaagaagg ccaccgagct gaagcacctc 1620 cagtgcctgg aagaagaact gaagcccctg gaagaggtgc tgaatctggc ccagtccaag 1680 aacttccacc tgaggccacg ggacctgatc agcaacatca acgtgatcgt gctggaactg 1740 aagggctccg agacaacctt tatgtgcgag tacgccgacg agacagccac catcgtggaa 1800 tttctgaacc ggtggatcac cttctgccag agcatcatct ccacactgac c 1851 <210> 26 <211> 592 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (GI102-M45) <400> 26 Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15 Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 25 30 Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 40 45 Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 55 60 Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 75 80 Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 90 95 Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser 100 105 110 Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 115 120 125 Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 130 135 140 Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu 145 150 155 160 Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr 165 170 175 Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn 180 185 190 Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 195 200 205 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 210 215 220 Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 225 230 235 240 Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245 250 255 Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 260 265 270 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280 285 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 290 295 300 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 305 310 315 320 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 325 330 335 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 340 345 350 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 355 360 365 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 370 375 380 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 385 390 395 400 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 405 410 415 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 420 425 430 Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 435 440 445 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser 450 455 460 Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu 465 470 475 480 Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr 485 490 495 Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Ala Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu 500 505 510 Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val 515 520 525 Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu 530 535 540 Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr 545 550 555 560 Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe 565 570 575 Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 580 585 590 <210> 27 <211> 1851 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (GI102-M61) <400> 27 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgtgat ccacgtgacc aaagaagtga aagaggtcgc cacactgtcc 120 tgcggccaca acgtttcagt ggaagaactg gcccagacca ggatctactg gcagaaagaa 180 aagaaaatgg tgctgaccat gatgtccggc gacatgaaca tctggcctga gtacaagaac 240 cggaccatct tcgacatcac caacaacctg tccatcgtga ttctggccct gaggccttct 300 gatgagggca cctatgagtg cgtggtgctg aagtacgaga aggacgcctt caagcgcgag 360 cacctggctg aagtgacact gtccgtgaag gccgactttc ccacaccttc catctccgac 420 ttcgagatcc ctacctccaa catccggcgg atcatctgtt ctacctctgg cggctttcct 480 gagcctcacc tgtcttggct ggaaaacggc gaggaactga acgccatcaa caccaccgtg 540 tctcaggacc ccgaaaccga gctgtacgct gtgtcctcca agctggactt caacatgacc 600 accaaccaca gcttcatgtg cctgattaag tacggccacc tgagagtgaa ccagaccttc 660 aactggaaca ccaccaagca agagcacttc cctgacaatg gatctggcgg cggaggttct 720 ggcggaggtg gaagcggagg cggaggatct gctgagtcta agtatggccc tccttgtcct 780 ccatgtcctg ctccagaagc tgctggcgga ccctctgtgt tcctgtttcc tccaaagcct 840 aaggaccagc tcatgatctc tcggacaccc gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtct 900 caagaggacc ctgaggtgca gttcaattgg tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc 960 aagaccaagc ctagagagga acagttcaac tccacctaca gagtggtgtc cgtgctgacc 1020 gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa gagtacaagt gcaaggtgtc caacaagggc 1080 ctgccttcca gcatcgaaaa gaccatctcc aaggctaagg gccagcctag ggaaccccag 1140 gtttacaccc tgcctccaag ccaagaggaa atgaccaaga accaggtgtc cctgacctgc 1200 ctggtcaagg gcttctaccc ttccgacatt gccgtggaat gggagtccaa tggccagcct 1260 gagaacaact acaagaccac acctcctgtg ctggactccg acggctcctt ctttctgtac 1320 tctcgcctga ccgtggacaa gtctagatgg caagagggca acgtgttctc ctgctctgtg 1380 ctgcacgagg ccctgcacaa tcactacacc cagaagtccc tgtctctgtc tcttggaggt 1440 ggtggcggtt ctgcccctac cagctcctct accaagaaaa cccagctcca gttggagcat 1500 ctgctgctgg acctccagat gattctgaac gggatcaaca actataagaa ccccaagctg 1560 accgccatgc tgaccgctaa gttctacatg cccaagaagg ccaccgagct gaagcacctc 1620 cagtgcctgg aaagggaact gaagcccctg gaagaggtgc tgaatctggc ccagtccaag 1680 aacttccacc tgaggccacg ggacctgatc agcaacatca acgtgatcgt gctggaactg 1740 aagggctccg agacaacctt tatgtgcgag tacgccgacg agacagccac catcgtggaa 1800 tttctgaacc ggtggatcac cttctgccag agcatcatct ccacactgac c 1851 <210> 28 <211> 592 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (GI102-M61) <400> 28 Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15 Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 25 30 Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 40 45 Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 55 60 Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 75 80 Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 90 95 Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser 100 105 110 Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 115 120 125 Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 130 135 140 Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu 145 150 155 160 Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr 165 170 175 Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn 180 185 190 Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 195 200 205 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 210 215 220 Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 225 230 235 240 Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245 250 255 Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 260 265 270 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280 285 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 290 295 300 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 305 310 315 320 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 325 330 335 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 340 345 350 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 355 360 365 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 370 375 380 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 385 390 395 400 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 405 410 415 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 420 425 430 Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 435 440 445 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser 450 455 460 Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu 465 470 475 480 Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr 485 490 495 Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu 500 505 510 Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Arg Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val 515 520 525 Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu 530 535 540 Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr 545 550 555 560 Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe 565 570 575 Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 580 585 590 <210> 29 <211> 1857 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (GI102-M72) <400> 29 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgtgat ccacgtgacc aaagaagtga aagaggtcgc cacactgtcc 120 tgcggccaca acgtttcagt ggaagaactg gcccagacca ggatctactg gcagaaagaa 180 aagaaaatgg tgctgaccat gatgtccggc gacatgaaca tctggcctga gtacaagaac 240 cggaccatct tcgacatcac caacaacctg tccatcgtga ttctggccct gaggccttct 300 gatgagggca cctatgagtg cgtggtgctg aagtacgaga aggacgcctt caagcgcgag 360 cacctggctg aagtgacact gtccgtgaag gccgactttc ccacaccttc catctccgac 420 ttcgagatcc ctacctccaa catccggcgg atcatctgtt ctacctctgg cggctttcct 480 gagcctcacc tgtcttggct ggaaaacggc gaggaactga acgccatcaa caccaccgtg 540 tctcaggacc ccgaaaccga gctgtacgct gtgtcctcca agctggactt caacatgacc 600 accaaccaca gcttcatgtg cctgattaag tacggccacc tgagagtgaa ccagaccttc 660 aactggaaca ccaccaagca agagcacttc cctgacaatg gatctggcgg cggaggttct 720 ggcggaggtg gaagcggagg cggaggatct gctgagtcta agtatggccc tccttgtcct 780 ccatgtcctg ctccagaagc tgctggcgga ccctctgtgt tcctgtttcc tccaaagcct 840 aaggaccagc tcatgatctc tcggacaccc gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtct 900 caagaggacc ctgaggtgca gttcaattgg tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc 960 aagaccaagc ctagagagga acagttcaac tccacctaca gagtggtgtc cgtgctgacc 1020 gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa gagtacaagt gcaaggtgtc caacaagggc 1080 ctgccttcca gcatcgaaaa gaccatctcc aaggctaagg gccagcctag ggaaccccag 1140 gtttacaccc tgcctccaag ccaagaggaa atgaccaaga accaggtgtc cctgacctgc 1200 ctggtcaagg gcttctaccc ttccgacatt gccgtggaat gggagtccaa tggccagcct 1260 gagaacaact acaagaccac acctcctgtg ctggactccg acggctcctt ctttctgtac 1320 tctcgcctga ccgtggacaa gtctagatgg caagagggca acgtgttctc ctgctctgtg 1380 ctgcacgagg ccctgcacaa tcactacacc cagaagtccc tgtctctgtc tcttggaggt 1440 ggtggcggtt ctgcccctac cagctcctct accaagaaaa cccagctcca gttggagcat 1500 ctgctgctgg acctccagat gattctgaac gggatcaaca actataagaa ccccaagctg 1560 accgccatgc tgaccgctaa gttctacatg cccaagaagg ccaccgagct gaagcacctc 1620 cagtgcctgg aagaagaact gaagcccctg gaagaggtgc tgaatggggc ccagtccaag 1680 aacttccacc tgaggccacg ggacctgatc agcaacatca acgtgatcgt gctggaactg 1740 aagggctccg agacaacctt tatgtgcgag tacgccgacg agacagccac catcgtggaa 1800 tttctgaacc ggtggatcac cttctgccag agcatcatct ccacactgac ctgatga 1857 <210> 30 <211> 592 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (GI102-M72) <400> 30 Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15 Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 25 30 Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 40 45 Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 55 60 Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 75 80 Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 90 95 Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser 100 105 110 Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 115 120 125 Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 130 135 140 Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu 145 150 155 160 Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr 165 170 175 Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn 180 185 190 Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 195 200 205 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 210 215 220 Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 225 230 235 240 Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245 250 255 Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 260 265 270 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280 285 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 290 295 300 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 305 310 315 320 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 325 330 335 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 340 345 350 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 355 360 365 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 370 375 380 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 385 390 395 400 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 405 410 415 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 420 425 430 Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 435 440 445 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser 450 455 460 Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu 465 470 475 480 Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr 485 490 495 Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu 500 505 510 Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val 515 520 525 Leu Asn Gly Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu 530 535 540 Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr 545 550 555 560 Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe 565 570 575 Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 580 585 590 <210> 31 <211> 1851 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (GI101w) <400> 31 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgtgat ccacgtgacc aaagaagtga aagaggtcgc cacactgtcc 120 tgcggccaca acgtttcagt ggaagaactg gcccagacca ggatctactg gcagaaagaa 180 aagaaaatgg tgctgaccat gatgtccggc gacatgaaca tctggcctga gtacaagaac 240 cggaccatct tcgacatcac caacaacctg tccatcgtga ttctggccct gaggccttct 300 gatgagggca cctatgagtg cgtggtgctg aagtacgaga aggacgcctt caagcgcgag 360 cacctggctg aagtgacact gtccgtgaag gccgactttc ccacaccttc catctccgac 420 ttcgagatcc ctacctccaa catccggcgg atcatctgtt ctacctctgg cggctttcct 480 gagcctcacc tgtcttggct ggaaaacggc gaggaactga acgccatcaa caccaccgtg 540 tctcaggacc ccgaaaccga gctgtacgct gtgtcctcca agctggactt caacatgacc 600 accaaccaca gcttcatgtg cctgattaag tacggccacc tgagagtgaa ccagaccttc 660 aactggaaca ccaccaagca agagcacttc cctgacaatg gatctggcgg cggaggttct 720 ggcggaggtg gaagcggagg cggaggatct gctgagtcta agtatggccc tccttgtcct 780 ccatgtcctg ctccagaagc tgctggcgga ccctctgtgt tcctgtttcc tccaaagcct 840 aaggaccagc tcatgatctc tcggacaccc gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtct 900 caagaggacc ctgaggtgca gttcaattgg tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc 960 aagaccaagc ctagagagga acagttcaac tccacctaca gagtggtgtc cgtgctgacc 1020 gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa gagtacaagt gcaaggtgtc caacaagggc 1080 ctgccttcca gcatcgaaaa gaccatctcc aaggctaagg gccagcctag ggaaccccag 1140 gtttacaccc tgcctccaag ccaagaggaa atgaccaaga accaggtgtc cctgacctgc 1200 ctggtcaagg gcttctaccc ttccgacatt gccgtggaat gggagtccaa tggccagcct 1260 gagaacaact acaagaccac acctcctgtg ctggactccg acggctcctt ctttctgtac 1320 tctcgcctga ccgtggacaa gtctagatgg caagagggca acgtgttctc ctgctctgtg 1380 ctgcacgagg ccctgcacaa tcactacacc cagaagtccc tgtctctgtc tcttggaggt 1440 ggtggcggtt ctgcccctac cagctcctct accaagaaaa cccagctcca gttggagcat 1500 ctgctgctgg acctccagat gattctgaac gggatcaaca actataagaa ccccaagctg 1560 acccgcatgc tgacctttaa gttctacatg cccaagaagg ccaccgagct gaagcacctc 1620 cagtgcctgg aagaagaact gaagcccctg gaagaggtgc tgaatctggc ccagtccaag 1680 aacttccacc tgaggccacg ggacctgatc agcaacatca acgtgatcgt gctggaactg 1740 aagggctccg agacaacctt tatgtgcgag tacgccgacg agacagccac catcgtggaa 1800 tttctgaacc ggtggatcac cttctgccag agcatcatct ccacactgac c 1851 <210> 32 <211> 592 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (GI101w) <400> 32 Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15 Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 25 30 Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 40 45 Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 55 60 Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 75 80 Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 90 95 Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser 100 105 110 Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 115 120 125 Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 130 135 140 Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu 145 150 155 160 Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr 165 170 175 Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn 180 185 190 Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 195 200 205 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 210 215 220 Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 225 230 235 240 Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245 250 255 Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 260 265 270 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280 285 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 290 295 300 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 305 310 315 320 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 325 330 335 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 340 345 350 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 355 360 365 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 370 375 380 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 385 390 395 400 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 405 410 415 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 420 425 430 Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 435 440 445 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser 450 455 460 Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu 465 470 475 480 Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr 485 490 495 Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu 500 505 510 Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val 515 520 525 Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu 530 535 540 Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr 545 550 555 560 Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe 565 570 575 Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 580 585 590 <210> 33 <211> 1848 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotiedes coding fusion protein (mGI102-M61) <400> 33 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgtgga cgagcagctc tccaagtccg tgaaggataa ggtcctgctg 120 ccttgccggt acaactctcc tcacgaggac gagtctgagg accggatcta ctggcagaaa 180 cacgacaagg tggtgctgtc cgtgatcgcc ggaaagctga aagtgtggcc tgagtacaag 240 aacaggaccc tgtacgacaa caccacctac agcctgatca tcctgggcct cgtgctgagc 300 gatagaggca cctattcttg cgtggtgcag aagaaagagc ggggcaccta cgaagtgaag 360 cacctggctc tggtcaagct gtccatcaag gccgacttca gcacccctaa catcaccgag 420 tctggcaacc cttccgccga caccaagaga atcacctgtt tcgcctctgg cggcttccct 480 aagcctcggt tctcttggct ggaaaacggc agagagctgc ccggcatcaa taccaccatt 540 tctcaggacc cagagtccga gctgtacacc atctccagcc agctcgactt taacaccacc 600 agaaaccaca ccatcaagtg cctgattaag tacggcgacg cccacgtgtc cgaggacttt 660 acttgggaga aacctcctga ggaccctcct gactctggat ctggcggcgg aggttctggc 720 ggaggtggaa gcggaggcgg aggatctgct gagtctaagt atggccctcc ttgtcctcca 780 tgtcctgctc cagaagctgc tggcggaccc tctgtgttcc tgtttcctcc aaagcctaag 840 gaccagctca tgatctctcg gacccctgaa gtgacctgcg tggtggtgga tgtgtctcaa 900 gaggaccctg aggtgcagtt caattggtac gtggacggcg tggaagtgca caacgccaag 960 accaagccta gagaggaaca gttcaactcc acctatagag tggtgtccgt gctgaccgtg 1020 ctgcaccagg attggctgaa cggcaaagag tacaagtgca aggtgtccaa caagggcctg 1080 ccttccagca tcgaaaagac catcagcaag gctaagggcc agcctaggga accccaggtt 1140 tacaccctgc ctccaagcca agaggaaatg accaagaacc aggtgtccct gacctgcctg 1200 gtcaagggct tctacccttc cgacattgcc gtggaatggg agtccaatgg ccagcctgag 1260 aacaactaca agaccacacc tcctgtgctg gactccgacg gctccttctt tctgtactct 1320 cgcctgaccg tggacaagtc taggtggcaa gagggcaacg tgttctcctg ctctgtgctg 1380 cacgaggctc tgcacaacca ctacacccag aagtccctgt ctctgtctct tggaggtggt 1440 ggcggttctg cccctacctc cagctctacc aagaaaaccc agctccagtt ggagcatctg 1500 ctgctggacc tccagatgat cctgaatggc atcaacaatt acaagaaccc caagctgacc 1560 gccatgctga ccgctaagtt ctacatgccc aagaaggcca ccgagctgaa gcacttgcag 1620 tgcctggaaa gggaactgaa gcccctggaa gaagtgctga atctggccca gtccaagaac 1680 ttccacctga ggcctaggga cctgatctcc aacatcaacg tgatcgtgct ggaactgaaa 1740 ggctccgaga caaccttcat gtgcgagtac gccgacgaga cagccaccat cgtggaattt 1800 ctgaaccggt ggatcacctt ctgccagagc atcatctcca cactgacc 1848 <210> 34 <211> 616 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> fusion protein (mGI102-M61) <400> 34 Met Asp Ala Met Leu Arg Gly Leu Cys Cys Val Leu Leu Leu Cys Gly 1 5 10 15 Ala Val Phe Val Ser Pro Ser His Ala Val Asp Glu Gln Leu Ser Lys 20 25 30 Ser Val Lys Asp Lys Val Leu Leu Pro Cys Arg Tyr Asn Ser Pro His 35 40 45 Glu Asp Glu Ser Glu Asp Arg Ile Tyr Trp Gln Lys His Asp Lys Val 50 55 60 Val Leu Ser Val Ile Ala Gly Lys Leu Lys Val Trp Pro Glu Tyr Lys 65 70 75 80 Asn Arg Thr Leu Tyr Asp Asn Thr Thr Tyr Ser Leu Ile Ile Leu Gly 85 90 95 Leu Val Leu Ser Asp Arg Gly Thr Tyr Ser Cys Val Val Gln Lys Lys 100 105 110 Glu Arg Gly Thr Tyr Glu Val Lys His Leu Ala Leu Val Lys Leu Ser 115 120 125 Ile Lys Ala Asp Phe Ser Thr Pro Asn Ile Thr Glu Ser Gly Asn Pro 130 135 140 Ser Ala Asp Thr Lys Arg Ile Thr Cys Phe Ala Ser Gly Gly Phe Pro 145 150 155 160 Lys Pro Arg Phe Ser Trp Leu Glu Asn Gly Arg Glu Leu Pro Gly Ile 165 170 175 Asn Thr Thr Ile Ser Gln Asp Pro Glu Ser Glu Leu Tyr Thr Ile Ser 180 185 190 Ser Gln Leu Asp Phe Asn Thr Thr Arg Asn His Thr Ile Lys Cys Leu 195 200 205 Ile Lys Tyr Gly Asp Ala His Val Ser Glu Asp Phe Thr Trp Glu Lys 210 215 220 Pro Pro Glu Asp Pro Pro Asp Ser Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 225 230 235 240 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 245 250 255 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val 260 265 270 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr 275 280 285 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 290 295 300 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 305 310 315 320 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 325 330 335 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 340 345 350 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 355 360 365 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 370 375 380 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 385 390 395 400 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 405 410 415 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 420 425 430 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 435 440 445 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu 450 455 460 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Gly Gly 465 470 475 480 Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln 485 490 495 Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn 500 505 510 Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Ala Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr 515 520 525 Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Arg 530 535 540 Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn 545 550 555 560 Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val 565 570 575 Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp 580 585 590 Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys 595 600 605 Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 610 615 <210> 35 <211> 153 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> wild type hIL-2 <400> 35 Met Tyr Arg Met Gln Leu Leu Ser Cys Ile Ala Leu Ser Leu Ala Leu 1 5 10 15 Val Thr Asn Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu 20 25 30 Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile 35 40 45 Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe 50 55 60 Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu 65 70 75 80 Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys 85 90 95 Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile 100 105 110 Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala 115 120 125 Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe 130 135 140 Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 145 150 <210> 36 <211> 158 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> IL-2 with signal sequence <400> 36 Met Asp Ala Met Leu Arg Gly Leu Cys Cys Val Leu Leu Leu Cys Gly 1 5 10 15 Ala Val Phe Val Ser Pro Ser His Ala Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr 20 25 30 Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met 35 40 45 Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met 50 55 60 Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His 65 70 75 80 Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn 85 90 95 Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser 100 105 110 Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe 115 120 125 Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn 130 135 140 Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 145 150 155 <210> 37 <211> 474 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence coding IL-2 with signal sequence <400> 37 atggatgcta tgctgagagg cctgtgttgc gtgctgctgc tgtgtggcgc tgtgttcgtg 60 tctccttctc acgctgcccc taccagctcc tctaccaaga aaacccagct ccagttggag 120 catctgctgc tggacctcca gatgattctg aacgggatca acaactataa gaaccccaag 180 ctgacccgca tgctgacctt taagttctac atgcccaaga aggccaccga gctgaagcac 240 ctccagtgcc tggaagaaga actgaagccc ctggaagagg tgctgaatct ggcccagtcc 300 aagaacttcc acctgaggcc acgggacctg atcagcaaca tcaacgtgat cgtgctggaa 360 ctgaagggct ccgagacaac ctttatgtgc gagtacgccg acgagacagc caccatcgtg 420 gaatttctga accggtggat caccttctgc cagagcatca tctccacact gacc 474 <210> 38 <211> 591 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> mGI-101 <400> 38 Val Asp Glu Gln Leu Ser Lys Ser Val Lys Asp Lys Val Leu Leu Pro 1 5 10 15 Cys Arg Tyr Asn Ser Pro His Glu Asp Glu Ser Glu Asp Arg Ile Tyr 20 25 30 Trp Gln Lys His Asp Lys Val Val Leu Ser Val Ile Ala Gly Lys Leu 35 40 45 Lys Val Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Leu Tyr Asp Asn Thr Thr 50 55 60 Tyr Ser Leu Ile Ile Leu Gly Leu Val Leu Ser Asp Arg Gly Thr Tyr 65 70 75 80 Ser Cys Val Val Gln Lys Lys Glu Arg Gly Thr Tyr Glu Val Lys His 85 90 95 Leu Ala Leu Val Lys Leu Ser Ile Lys Ala Asp Phe Ser Thr Pro Asn 100 105 110 Ile Thr Glu Ser Gly Asn Pro Ser Ala Asp Thr Lys Arg Ile Thr Cys 115 120 125 Phe Ala Ser Gly Gly Phe Pro Lys Pro Arg Phe Ser Trp Leu Glu Asn 130 135 140 Gly Arg Glu Leu Pro Gly Ile Asn Thr Thr Ile Ser Gln Asp Pro Glu 145 150 155 160 Ser Glu Leu Tyr Thr Ile Ser Ser Gln Leu Asp Phe Asn Thr Thr Arg 165 170 175 Asn His Thr Ile Lys Cys Leu Ile Lys Tyr Gly Asp Ala His Val Ser 180 185 190 Glu Asp Phe Thr Trp Glu Lys Pro Pro Glu Asp Pro Pro Asp Ser Gly 195 200 205 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 210 215 220 Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 225 230 235 240 Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 245 250 255 Gln Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 260 265 270 Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 275 280 285 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 290 295 300 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 305 310 315 320 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 325 330 335 Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu 340 345 350 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn 355 360 365 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 370 375 380 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390 395 400 Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg 405 410 415 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys 420 425 430 Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 435 440 445 Ser Leu Ser Leu Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser 450 455 460 Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu Gln 465 470 475 480 Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Ala 485 490 495 Met Leu Thr Ala Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys 500 505 510 His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu 515 520 525 Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile 530 535 540 Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr 545 550 555 560 Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu 565 570 575 Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr 580 585 590

Claims (27)

  1. IL-2 변이체 및 CD80 단편을 포함하는 융합단백질 이량체를 포함하는 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물로서,
    상기 융합단백질 이량체는 하기 구조식(I)로 이루어진 단량체의 동형이량체인 것인, 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물:
    N'-X-[링커(1)]n-Fc 도메인-[링커(2)]m-Y-C' (I)
    이때, 상기 구조식(I)에 있어서,
    상기 N'은 융합단백질의 N-말단이고,
    상기 C'는 융합단백질의 C-말단이며,
    상기 X는 서열번호 11의 아미노산 서열 중 35번째 내지 242번째의 아미노산 서열을 가지는 CD80 단편이고,
    상기 Y는 서열번호 10의 아미노산 서열에서 R38A 및 F42A 치환이 일어난 아미노산 서열을 가지는 IL-2 변이체이며,
    상기 링커(1) 및 링커(2)는 펩타이드 링커이고,
    상기 n 및 m은 각각 독립적으로, O 또는 1이다.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 제1항에 있어서,
    상기 IL-2 변이체는 서열번호 6의 아미노산 서열을 갖는 것인, 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물.
  9. 삭제
  10. 삭제
  11. 삭제
  12. 삭제
  13. 제1항에 있어서,
    상기 Fc 도메인은 야생형 또는 변이체인 것인, 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물.
  14. 제13항에 있어서,
    상기 Fc 도메인은 서열번호 4의 아미노산 서열을 갖는 것인, 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물.
  15. 제13항에 있어서,
    상기 Fc 도메인의 변이체는 서열번호 12의 아미노산 서열을 갖는 것인, 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물.
  16. 삭제
  17. 제1항에 있어서,
    상기 링커(1)이 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드 링커인 것인, 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물.
  18. 제1항에 있어서,
    상기 링커(2)가 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드 링커인 것인, 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물.
  19. 삭제
  20. 제1항에 있어서,
    상기 융합단백질은 서열번호 9의 아미노산 서열을 갖는 것인, 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물.
  21. 삭제
  22. 제1항에 있어서,
    상기 암은 위암, 간암, 폐암, 대장암, 유방암, 전립선암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 갑상선암, 후두암, 급성 골수성 백혈병, 뇌종양, 신경모세포종, 망막 모세포종, 두경부암, 침샘암 및 림프종으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인, 암에 대한 방사선 치료 증진용 약학적 조성물.
  23. 암에 걸린 인간을 제외한 포유동물의 암 부위에 방사선을 조사하는 단계; 및
    제1항, 제8항, 제13항 내지 제15항, 제17항, 제18항, 제20항 및 제22항 중 어느 한 항의 약학적 조성물을 상기 포유동물에 투여하는 단계;를 포함하는 암에 대한 방사선 치료 방법.
  24. 제23항에 있어서,
    상기 방사선은 조사(irradiation)량을 0.1 Gy 내지 100 Gy로 조사하는 것인, 암에 대한 방사선 치료 방법.
  25. 제23항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 방사선 조사 전 또는 조사 후에 투여되는 것인, 암에 대한 방사선 치료 방법.
  26. 제25항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 방사선 조사 시점을 기준으로 6 내지 48시간 전후로 투여되는 것인, 암에 대한 방사선 치료 방법.
  27. 제23항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 주당 1회 내지 20회 투여되는 것인, 암에 대한 방사선 치료 방법.
KR1020200068456A 2020-06-05 2020-06-05 Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물 KR102373965B1 (ko)

Priority Applications (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200068456A KR102373965B1 (ko) 2020-06-05 2020-06-05 Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물
JP2022574506A JP2023529358A (ja) 2020-06-05 2021-06-01 Ｉｌ－２タンパク質およびｃｄ８０タンパク質を含む融合タンパク質を含む、放射線療法を増強するための医薬組成物
PCT/KR2021/006809 WO2021246757A1 (ko) 2020-06-05 2021-06-01 Il-2 단백질 및 cd80 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물
CN202180039926.XA CN115803045A (zh) 2020-06-05 2021-06-01 用于增强放射治疗的包括含有il-2蛋白和cd80蛋白的融合蛋白的药物组合物
EP21817193.2A EP4162945A4 (en) 2020-06-05 2021-06-01 PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR IMPROVING RADIOTHERAPY COMPRISING A FUSION PROTEIN CONTAINING AN IL-2 PROTEIN AND A CD80 PROTEIN
US18/008,034 US20230233680A1 (en) 2020-06-05 2021-06-01 Pharmaceutical composition for enhancing radiotherapy comprising fusion protein containing il-2 protein and cd80 protein
TW110120470A TW202203982A (zh) 2020-06-05 2021-06-04 包含含有ｉｌ－２蛋白與ｃｄ８０蛋白之融合蛋白的用於增強放射線治療的藥學組成物
KR1020220012346A KR20220020304A (ko) 2020-06-05 2022-01-27 Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200068456A KR102373965B1 (ko) 2020-06-05 2020-06-05 Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220012346A Division KR20220020304A (ko) 2020-06-05 2022-01-27 Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물

Publications (3)

Publication Number Publication Date
KR20210151528A KR20210151528A (ko) 2021-12-14
KR102373965B1 true KR102373965B1 (ko) 2022-03-15
KR102373965B9 KR102373965B9 (ko) 2022-12-05

Family

ID=78831156

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200068456A KR102373965B1 (ko) 2020-06-05 2020-06-05 Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물
KR1020220012346A KR20220020304A (ko) 2020-06-05 2022-01-27 Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220012346A KR20220020304A (ko) 2020-06-05 2022-01-27 Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20230233680A1 (ko)
EP (1) EP4162945A4 (ko)
JP (1) JP2023529358A (ko)
KR (2) KR102373965B1 (ko)
CN (1) CN115803045A (ko)
TW (1) TW202203982A (ko)
WO (1) WO2021246757A1 (ko)

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5229109A (en) 1992-04-14 1993-07-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Low toxicity interleukin-2 analogues for use in immunotherapy
KR20020010206A (ko) * 2000-07-27 2002-02-04 이시우 인터루킨 12와 보조활성인자 ｂ7.1 유전자를 함유하는ｄｎａ 벡터 및 이벡터가 도입된 항암 세포백신
AR080698A1 (es) * 2010-04-01 2012-05-02 Imclone Llc Anticuerpo o fragmento del mismo que especificamente enlaza la variante de csf -1r humano, composicion farmaceutica que lo comprende, su uso para la manufactura de un medicamento util para el tratamiento de cancer y metodo para determinar si un sujeto es candidato para tratamiento de cancer basado e
LT3489255T (lt) 2011-02-10 2021-08-25 Roche Glycart Ag Mutantiniai interleukino-2 polipeptidai
KR20160134989A (ko) * 2015-05-14 2016-11-24 순천향대학교 산학협력단 인간 인터류킨-2 단백질을 포함하는 약학조성물
CR20180306A (es) * 2015-11-02 2018-10-16 Five Prime Therapeutics Inc Polipéptidos del dominio extracelular de cd80 y su uso en el tratamiento del cáncer
JP7085644B2 (ja) * 2018-09-17 2022-06-16 ジーアイ・イノベイション・インコーポレイテッド Ｉｌ－２タンパク質およびｃｄ８０タンパク質を含む融合タンパク質およびその使用
CN110256583B (zh) * 2019-07-11 2022-05-20 中国科学院生物物理研究所 一种il-2突变体与抗体的融合蛋白及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Palata, Ondrej 등, Frontiers in Oncology, 2019.05.22., Vol. 9, Article No. 367, pp.1-14.*

Also Published As

Publication number Publication date
KR102373965B9 (ko) 2022-12-05
US20230233680A1 (en) 2023-07-27
KR20220020304A (ko) 2022-02-18
JP2023529358A (ja) 2023-07-10
CN115803045A (zh) 2023-03-14
EP4162945A1 (en) 2023-04-12
KR20210151528A (ko) 2021-12-14
TW202203982A (zh) 2022-02-01
WO2021246757A1 (ko) 2021-12-09
EP4162945A4 (en) 2023-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109641963A (zh) 癌症的联合治疗
JPWO2019189780A1 (ja) 癌の治療及び／又は予防用医薬組成物
CN104902913A (zh) 使用结合剂的免疫治疗
RU2009132663A (ru) АНТАГОНИСТЫ АКТИВИНА-ActRIIa И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
CA3080640C (en) Cd47 blockade with radiation therapy
CN106714822A (zh) 用于治疗癌症的组合治疗
JP2021535215A (ja) 疾患治療のためのｐａｒｐ阻害と組み合わせたｃｄ４７遮断
CN110494152A (zh) 短trail抗体及使用方法
KR20220126679A (ko) Il-2 단백질 및 cd80 단백질을 포함하는 융합단백질 및 항암제를 포함하는 암 치료용 약학 조성물
ES2186596T3 (es) Uso de inhibidores de la interleucina-18 para inhibir metastasis tumorales.
KR102373965B1 (ko) Ｉｌ-２ 단백질 및 ｃｄ８０ 단백질을 포함하는 융합단백질을 포함하는 방사선 치료 증진용 약학적 조성물
US20230405118A1 (en) Stat-activated macrophages, compositions, and uses thereof
TW202322855A (zh) 人類表皮生長因子第二型受體疫苗組成物以及套組
JP2024505556A (ja) がん、腫瘍および腫瘍細胞の局所および全身処置のための方法
WO2021182571A1 (ja) 癌の治療及び／又は予防のための医薬品
EP3677276A1 (en) Vaccine composition
US20240058420A1 (en) Pharmaceutical composition for cancer treatment comprising fusion protein including il-2 protein and cd80 protein and anticancer drug
US20230255978A1 (en) Methods for treating glioblastoma
KR20230085116A (ko) 종양 치료를 위한 항-cd 19 항체 및 자연살해세포를 포함하는 약학적 조합물
CN110115767A (zh) 免疫调节剂联合检查点抑制剂治疗癌症的方法
Mather et al. Preclinical In Vivo Modeling of Cytokine
Thomas et al. Tofacitinib Suppresses Antibody Responses

Legal Events

Date Code Title Description
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
X091 Application refused [patent]
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant
G170 Re-publication after modification of scope of protection [patent]