KR102287633B1

KR102287633B1 - Composition for enhancing innate immunity and antivirus comprising Puerariae Flos extract as effective component

Info

Publication number: KR102287633B1
Application number: KR1020150047321A
Authority: KR
Inventors: 마진열; 조원경; 이종수
Original assignee: 한국 한의학 연구원
Priority date: 2015-04-03
Filing date: 2015-04-03
Publication date: 2021-08-10
Also published as: KR20160118740A

Abstract

본 발명은 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 약학 조성물, 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 건강기능식품, 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 사료 조성물 및 갈화 추출물을 인간을 제외한 선천면역 증진이 필요한 동물에 투여하는 것을 포함하는 동물의 선천면역 증진 및 항바이러스 활성 증진 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 선천면역 증진 및 항바이러스용 갈화 조성물은 항바이러스 활성 및 선천면역 증진 효능을 나타내어, 박테리아 및 바이러스 감염성 질환의 예방 및 치료용으로 적용될 수 있고, 면역이 저하되거나 면역이 억제된 환자의 면역력 증진 및 조절을 위한 의약이나 건강기능식품, 및 동물의 항 질병 강화를 목적으로 하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 사료 등으로 광범위하게 이용될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 선천면역 증진 및 항바이러스용 조성물은 독성이나 부작용을 거의 일으키지 않으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.The present invention relates to a pharmaceutical composition for enhancing innate immunity and antiviral containing brown flower extract as an active ingredient, a health functional food for innate immunity enhancement and antiviral containing brown flower extract as an active ingredient, and innate immunity containing brown flower extract as an active ingredient It relates to a method for enhancing innate immunity and enhancing antiviral activity of an animal, comprising administering a feed composition for enhancement and antiviral use and a brown extract to animals in need of enhancement of innate immunity, except for humans. The brown rice composition for enhancing innate immunity and antiviral according to the present invention exhibits antiviral activity and innate immunity enhancing efficacy, and thus can be applied for the prevention and treatment of bacterial and viral infectious diseases, It can be widely used as medicine or health functional food for immunity enhancement and control, and as feed for innate immunity enhancement and antiviral for the purpose of strengthening animal anti-disease. In addition, since the composition for enhancing innate immunity and antiviral according to the present invention hardly causes toxicity or side effects, it can be safely used even when taken for a long period of time for preventive purposes.

Description

Composition for enhancing innate immunity and antivirus comprising Puerariae Flos extract as effective component

본 발명은 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 약학, 건강기능식품 또는 사료 조성물로 이용될 수 있는 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an innate immunity enhancement and antiviral composition containing a brown flower extract as an active ingredient, and more particularly, to an innate immunity enhancement and antiviral composition containing a brown flower extract that can be used as a pharmaceutical, health functional food or feed composition as an active ingredient. and antiviral compositions.

면역은 태어날 때부터 지니고 있는 선천 면역(innate immunity)과 후천적으로 생활하면서 적응되어 얻어지는 획득 면역(acquired immunity)으로 구분될 수 있다. 선천 면역은 일명 '자연 면역'이라고도 하며, 항원에 대해 비특이적으로 반응하고, 특별한 기억작용은 없는 것을 특징으로 한다.Immunity can be divided into innate immunity, which is possessed from birth, and acquired immunity, which is acquired by living adaptively. Innate immunity, also called 'natural immunity', is characterized by non-specific responses to antigens and no special memory action.

최근 들어, 생체 내 선천적 방어 면역시스템 중에서 인터페론(interferon)에 의해 유도되는 선천성 면역분야가 주목을 받고 있는데, 인터페론 매개 면역의 활성화는 다양한 전염병 병원체에 대한 근본적인 예방 방법이 될 수 있기 때문이다. 이에, 인터페론 활성화 기전 연구 및 인터페론을 유도시킬 수 있는 면역조절제제의 개발 연구가 활발하게 진행되고 있다. Recently, the field of innate immunity induced by interferon among the innate defense immune system in vivo has been attracting attention, because the activation of interferon-mediated immunity can be a fundamental prevention method against various infectious disease pathogens. Accordingly, studies on the mechanism of interferon activation and development of immunomodulatory agents capable of inducing interferon are being actively conducted.

한편, 병원체의 감염에 따른 선천 면역의 방어 기작의 하나로 사이토카인 같은 면역 인자가 분비되는데, 이들에 의해 면역 반응이 일어나고 병원체에 대한 방어가 이루어진다. 따라서 선천 면역 반응을 유도함으로써 다양한 전염병 병원체에 대한 예방 및 치료 방법이 될 수 있으며, 이를 유도시킬 수 있는 선천면역의 증진 제제에 대한 연구가 필요하다.On the other hand, immune factors such as cytokines are secreted as one of the defense mechanisms of innate immunity according to infection with a pathogen, and an immune response occurs and defense against the pathogen is made. Therefore, it can be a preventive and therapeutic method for various infectious disease pathogens by inducing an innate immune response, and there is a need for research on agents for enhancing innate immunity that can induce it.

바이러스(virus)는 라틴어로 독성물질을 의미하며, 세균여과지(0.22㎛)를 통과하는 일군의 감염형 병원성 입자이다. 바이러스는 숙주세포의 종류에 따라 박테리오파지, 식물 바이러스, 동물 바이러스로 분류하기도 하며, 핵산의 종류에 따라 DNA 바이러스, RNA 바이러스로 분류할 수 있다. 최근 신종 플루, AI 및 구제역 등 다양한 바이러스 질병이 사회적으로 큰 문제를 일으켰으며, 이에 따라 바이러스 질병의 효과적인 대책에 대한 고민이 사회적으로 큰 관심을 불러일으키고 있다. Virus means a toxic substance in Latin, and is a group of infectious pathogenic particles that pass through a bacterial filter paper (0.22㎛). Viruses can be classified into bacteriophages, plant viruses, and animal viruses according to the type of host cell, and can be classified into DNA viruses and RNA viruses according to the types of nucleic acids. Recently, various viral diseases such as swine flu, AI, and foot-and-mouth disease have caused great social problems, and accordingly, concerns about effective countermeasures for viral diseases are arousing great social interest.

현재 바이러스성 질병을 예방하기 위한 가장 좋은 방법은 백신접종이지만, 바이러스에 의한 질병의 경우, 대체로 많은 바이러스 혈청형(아형) 생성 등에 따른 백신의 효율성 문제가 중요하게 제기되고 있다. 이러한 백신의 문제점을 보완해 줄 수 있는 바이러스 예방용 억제제의 개발 및 보급은 중요한 사항이며, 이를 위해 특히 바이러스에 대한 초기 방어시스템인 생체 내 선천적 면역시스템을 자극하여 개체 동물의 면역력을 높여주는 예방제제의 발굴 및 개발은 중요한 제제 개발 방법이 될 수 있다.Currently, the best way to prevent viral diseases is vaccination, but in the case of diseases caused by viruses, the effectiveness of vaccines due to the generation of many viral serotypes (subtypes) is being raised as an important issue. The development and dissemination of inhibitors for virus prevention that can supplement the problems of these vaccines are important. The discovery and development of drugs can be an important drug development method.

인플루엔자바이러스의 증식을 억제하는 대표적인 항바이러스 제제로는 아만타딘(amantadine)과 리만타딘(rimantadine)이 있으나, 이들 두 가지 항바이러스 제제들은 혈청형 A형 인플루엔자바이러스에만 효과적이며, M2 단백질이 없는 혈청형 B형 인플루엔자바이러스에는 효과가 없는 것으로 확인되었다. 또한, 아만타딘과 리만타딘은 사용 시 인플루엔자바이러스 M2 단백질의 이온채널기능에 영향을 미치지 못하는 변이 바이러스의 출현이 매우 쉽게 일어나는 단점이 있는 것으로 확인되고 있다. 이러한 단점을 보완하기 위하여 16종의 모든 혈청형 A형 인플루엔자바이러스와 혈청형 B형 인플루엔자바이러스에 효과적인 항바이러스 제제로 자나미비르(zanamivir)와 오셀타미비르(oseltamivir)가 개발되었다. 그러나 자나미비르는 흡입 및 정맥 투여해야 하는 단점이 있으며, 오셀타미비르는 경구투여가 가능하나 최근 내성 바이러스의 출현 보고와 경구투여 시 구토와 현기증 등의 부작용이 있어 단점으로 지적되고 있다.Representative antiviral agents that inhibit the proliferation of influenza virus include amantadine and rimantadine, but these two antiviral agents are effective only for serotype A influenza virus, and serotype B without M2 protein It was confirmed that it had no effect on the influenza virus type. In addition, it has been confirmed that amantadine and rimantadine have a disadvantage in that the appearance of a mutant virus that does not affect the ion channel function of the influenza virus M2 protein occurs very easily when used. In order to compensate for these shortcomings, zanamivir and oseltamivir have been developed as effective antiviral agents against all 16 serotype A influenza viruses and serotype B influenza viruses. However, zanamivir has the disadvantages of inhalation and intravenous administration, and although oseltamivir can be administered orally, recent reports of the emergence of resistant viruses and side effects such as vomiting and dizziness when administered orally have been pointed out as disadvantages.

또한, 수포성구내염바이러스(Vesicular stomatitis virus)의 주된 통제 방법은 질병의 완전 치료가 불가능하기 때문에, 구제역과 마찬가지로 예방 및 차단 방역과 발생 지역 내 감수성 가축의 박멸이 최선의 방법이다.In addition, since the main control method for Vesicular stomatitis virus is that it is impossible to completely cure the disease, the best method is to prevent and block quarantine and eradication of susceptible livestock in the area where it occurs, like foot-and-mouth disease.

또한, 뉴캐슬병 바이러스에 대한 백신은 크게 생독 백신과 사독 백신으로 구분되는데, 가장 널리 이용되어온 대표적인 뉴캐슬병 생독 백신주인 B1주와 La Sota주(Clone주 포함)는 백신 접종 반응을 유발하는 것으로 알려져 있으며, 전 세계적으로 사용되고 있는 뉴캐슬병 사독 백신인 다가 혼합 사독 오일 백신은 1회 백신 접종으로 3종 이상의 질병이 동시에 예방될 수 있으나, 산란계 농장의 경우 면역력 저하로 인한 뉴캐슬병 발생 피해 사례가 늘어나고 있다. In addition, vaccines against Newcastle disease virus are largely divided into live venom vaccine and dead venom vaccine. B1 and La Sota (including Clone), which are the most widely used representative Newcastle disease live venom vaccines, are known to induce a vaccination reaction, The multivalent mixed dead poison oil vaccine, which is a worldwide used Newcastle disease dead poison vaccine, can prevent three or more diseases at the same time with a single vaccination.

또한, RNA 바이러스 가운데에서도 비교적 크기가 작은 바이러스들이 있다. 이들은 작다는 뜻의 'pico'라는 말과 'RNA'를 합쳐 피코나바이러스라고 부르며, 여기에 속한 바이러스들을 통틀어 피코나바이러스과 (Picona viridae)라고 부른다. 피코나바이러스 과에 속하는 엔테로바이러스는 무균성 수막염, 수족구병, 포진성 구협염, 확장성 심근염, 급성 출혈성 결막염 등의 다양한 임상증상을 일으키는 약 70가지 혈청형을 포함하고 있으며, 폴리오바이러스(Poliovirus), 콕사키바이러스(Cossackie virus) 및 에코바이러스(Echo virus)와 기타 엔테로바이러스로 분류된다. 엔테로바이러스의 직경이 20~30nm 정도이며, 단일 가닥의 RNA를 유전자로 가지고 있다. 대부분이 등뼈동물의 소화기관을 비롯하여 호흡기관 및 중추신경계까지 감염되지만 뚜렷한 증상을 나타내지 않는 경우가 많다. 콕사키바이러스(Coxsackie virus, CXV)는 피코나바이러스 과에 속하는 인간 엔테로바이러스(human enterovirus)로서, 크게 A형과 B형으로 구분된다(Pallansch MA and Roos RP, Fields Virology, 4th edi, pp723-775, 2001). Also, among RNA viruses, there are viruses that are relatively small in size. They are called piconaviruses by combining the word 'pico' meaning small and 'RNA', and the viruses belonging to this group are collectively called the piconavirus family (Picona viridae). Enteroviruses belonging to the piconavirus family include about 70 serotypes that cause various clinical symptoms such as aseptic meningitis, hand, foot and mouth disease, herpetic stomatitis, dilated myocarditis, and acute hemorrhagic conjunctivitis. , Cossackie virus, Echo virus, and other enteroviruses. Enterovirus has a diameter of about 20-30 nm and has single-stranded RNA as its gene. Most of them infect the digestive system of vertebrates as well as the respiratory tract and the central nervous system, but in many cases they do not show any obvious symptoms. Coxsackie virus (CXV) is a human enterovirus belonging to the piconavirus family, and is largely divided into types A and B (Pallansch MA and Roos RP, Fields Virology, 4th edi, pp723-775). , 2001).

또한, 최근 세계 곳곳에서 고 위험성 엔테로바이러스 및 변종 바이러스(엔테로바이러스 71형(EV-71), 콕사키바이러스 A24 변이주)가 새롭게 발견되어 유행되고 있어 이를 조기에 탐지하기 위한 국가 간 공동감시체계 구축이 요구되고 있다. In addition, recently high-risk enteroviruses and mutant viruses (enterovirus type 71 (EV-71), coxsackievirus A24 mutant) have been newly discovered and prevalent all over the world. is being demanded

콕사키바이러스를 포함하는 엔테로바이러스는 척추동물의 소화기관을 비롯하여 호흡기관 및 중추신경계까지 감염되어 다양한 임상증상을 유발하기 때문에 국가 차원의 대책 마련이 시급히 요구되고 있으나 바이러스의 종류와 혈청형이 매우 다양하여 효과적인 상용화 백신이나 치료제가 개발되어 있지 못한 실정이다.Enteroviruses, including coxsackie virus, infect the digestive, respiratory and central nervous systems of vertebrates and cause various clinical symptoms. Therefore, national countermeasures are urgently required. Therefore, an effective commercial vaccine or therapeutic agent has not been developed.

또한, 단순포진바이러스(Herpes Simplex Virus; 이하 HSV)는 헤르페스 바이러스 속에 속하는 DNA 바이러스로서 약 175nm의 크기를 가지는 비교적 큰 바이러스이며, 인간에게 널리 퍼져 있는 감염체이다. 단순포진 감염은 HSV 1형(이하, 'HSV-1'라 함) 및 HSV 2형(이하, 'HSV-2'라 함)의 감염으로써, 점막이나 피부를 침범하는 급성 수포성 질환이며 아토피가 있는 사람에게서 흔히 볼 수 있는 감염질환이다. HSV-1은 주로 입과 안구 주위에, HSV-2는 성기주위에 수포를 형성시킨다. 이러한 HSV의 감염은 면역기능이 저하되어 있는 환자들에게는 그 정도가 심하게 진행되며 경부암의 원인으로도 작용하는 것으로 보고되어 있다(Melnick, J. L., Adam, E. and Rawls, W., Concer, 34, 1355-1385, 1974). 또한, 신생아나 태아의 경우에는 스스로 HSV 항체를 생성하지 못할 뿐 아니라 모체의 항체가 태아에게 넘어가지 못하기 때문에, 일단 감염되면 대부분 치명적인 결과를 초래하게 된다고 알려져 있다. 현재, HSV-1에 의한 안구질환의 경우는 미국 내에서만 1년에 약 50만 명의 환자가 발생하며 이중 1000명 이상은 안구 이식수술을 받고 있는 것으로 알려져 있다. HSV-2의 경우 약 95%는 활동성 병변이 있는 상대방과의 성적 접촉을 통해 감염되는 것으로 알려져 있는데, 미국 성인 중 약 20~30%가 HSV-2에 감염되어 있으며, 이중 20 내지 50%는 재발성 성기 포진을 갖는 것으로 보고되어 있다(Johnson R. E. et al., N. Engl. J. Med., 321, 7,1989). In addition, Herpes Simplex Virus (hereinafter referred to as HSV) is a DNA virus belonging to the genus Herpes virus and is a relatively large virus having a size of about 175 nm, and is an infectious agent widespread in humans. Herpes simplex infection is an infection of HSV type 1 (hereinafter referred to as 'HSV-1') and HSV type 2 (hereinafter referred to as 'HSV-2'). It is a common infectious disease in people with HSV-1 primarily causes blisters around the mouth and eyeballs, and HSV-2 around the genitals. It has been reported that HSV infection progresses severely in patients with weakened immune function and acts as a cause of cervical cancer (Melnick, JL, Adam, E. and Rawls, W., Concer, 34, 1355-1385, 1974). In addition, in the case of a newborn or a fetus, it is known that most of the time, once infected, fatal results are caused because not only cannot generate HSV antibodies by itself, but also the antibodies of the mother cannot pass to the fetus. Currently, in the case of eye disease caused by HSV-1, about 500,000 patients a year in the United States alone, and it is known that more than 1,000 of them are undergoing eye transplant surgery. About 95% of HSV-2 is known to be transmitted through sexual contact with a partner with active lesions. It has been reported to have genital herpes (Johnson RE et al., N. Engl. J. Med., 321, 7,1989).

HSV는 초기 감염 후에 피부나 점막 표피세포에서 복제를 시작하여 신경조직을 따라 이동한 후, 전 생애에 걸쳐 척추 신경절에 잠복하고 있다가 면역기능이 저하될 경우 재활성화되어 감염부위로부터 여러 가지 질환을 발생시키는 것으로 알려져 있다. HSV에 의한 감염질환에 대한 치료제로는 뉴클레오사이드(nucleoside) 유도체인 아시클로비르(Acyclovir)가 초기감염에 매우 효과적인 것으로 알려져 있으나(Bryson, Y. J. et al., N. Engl. J. Med., 308, 916, 1983), 이 약제의 효과를 유지하기 위해서는 약제를 계속해서 투여해야 하며, 투여가 중단될 경우 HSV에 의한 감염질환이 재발하는 것으로 알려져 있다(Mindel A. et al., Lancet i: 926-928(1988); Straus S.E. et al., N. Engl. J. Med., 310, 1545(1984)). 또한 HSV의 최초 감염에 대한 치료 후 재발하는 경우에는 치사율이 높다고 보고되어 있다(Nahmias, A. J. and Coleman, R. M., Immunobiology of Herpes Simplex Virus Infection CRC Press, Boca Raton, 92-102,1984).After initial infection, HSV begins to replicate in the skin or mucosal epithelial cells, migrates along the nervous tissue, remains dormant in the spinal ganglion throughout life, and is reactivated when the immune function is lowered to prevent various diseases from the infected site. known to cause As a treatment for infectious diseases caused by HSV, acyclovir, a nucleoside derivative, is known to be very effective in initial infection (Bryson, YJ et al., N. Engl. J. Med., 308, 916, 1983), it is known that the drug must be continuously administered to maintain the effect of this drug, and when the administration is stopped, infectious diseases caused by HSV recur (Mindel A. et al., Lancet i: 926-928 (1988); Straus SE et al., N. Engl. J. Med., 310, 1545 (1984)). In addition, it has been reported that the mortality rate is high when the HSV recurs after treatment for the initial infection (Nahmias, A. J. and Coleman, R. M., Immunobiology of Herpes Simplex Virus Infection CRC Press, Boca Raton, 92-102, 1984).

지금까지 이러한 HSV의 감염을 예방하기 위한 백신이 개발되어 왔으나, 바이러스 자체를 약화시켜 사용하는 생백신(live attenuated vaccine)은 HSV의 게놈이 종양발생(oncogenesis)에 직접 관여한다는 사실이 밝혀짐으로 인해서 그 사용이 금지되어 왔다(Cappel, R., Sprecher, S., De Cuyper, F. and De Braekeleer, J., J. Med. Virol., 16, 137-145,1985).Vaccines to prevent HSV infection have been developed so far, but live attenuated vaccines used by attenuating the virus itself have been found to be directly involved in the oncogenesis of the HSV genome. Its use has been banned (Cappel, R., Sprecher, S., De Cuyper, F. and De Braekeleer, J., J. Med. Virol., 16, 137-145, 1985).

이러한 상황하에서, 최근 해외 및 국내에서 기존의 항바이러스 제제의 단점을 극복하고자 하는 많은 노력들이 이루어지고 있으며, 그 중의 하나로 국내에서는 생약 추출물 및 식물 추출물을 대상으로 항바이러스 효능에 대한 연구가 진행중이기는 하지만, 아직까지는 미비한 실정이므로, 기존의 항바이러스 제제의 단점을 극복하여 독성 및 부작용이 거의 없이 우수한 선천면역 증진 효과 및 항바이러스 활성을 발휘할 수 있는 생약 추출물을 유효성분으로 하는 조성물의 개발이 필요한 실정이다.Under this circumstance, many efforts have been made to overcome the shortcomings of the existing antiviral agents in recent years abroad and in Korea. , is still insufficient, so it is necessary to overcome the disadvantages of the existing antiviral agents and develop a composition using a herbal extract as an active ingredient that can exhibit excellent innate immunity enhancing effect and antiviral activity with almost no toxicity and side effects. .

한편, 갈화(Puerariae Flos)는 칡의 꽃이며, 전통의학을 바탕으로 주독(酒毒)이나 하혈(下血)을 푸는 데 쓰여왔으며(산림경제 치약 갈근), 칡잎은 갈엽(葛葉)이라 하여 외상의 지혈에 쓰고 칡줄기는 갈만(葛蔓)이라 하여 종기와 인후염에 태워서 가루를 내어 외용하거나 내복해 왔다. 이와 같이, 한약으로 사용되어온 천연추출물인 갈화 추출물에 대해, 2004년도 종족약물학회지에 항염증 대응 효과에 대한 연구(J Ethnopharmacol. 2004 Sep;94(1):165-73)가 발표되었으며, 성장호르몬 분비에 미치는 영향에 대한 연구(Horm Metab Res. 2004 Feb;36(2):86-91.)가 발표되었다. 또한, 2005년 일본약학회지에 갈화를 비롯한 콩과(Leguminosae) 식물 유래의 물질들이 에스트로겐 활성에 미치는 영향이 보고되었다(Biol Pharm Bull. 2005 Mar;28(3):538-40). 또한, Agriculture Food 화학회지에 갈화 추출물 유래의 물질이 베타-하이드록시-베타-메틸글루타릴 코엔자임 에이(beta-hydroxy-beta-methylglutaryl coenzyme A; HMG CoA)의 환원효과를 저해하는 것이 보고되었으며(J Agric Food Chem. 2005 Jul 27;53(15):5882-8), 이 조효소의 억제제는 콜레스테롤의 생합성과정을 억제하여 간에서 콜레스테롤 생합성을 저해함이 보고되었다. 아울러, 2006년에는 갈화 추출물 유래의 다이진(Daidzin) 물질이 신경전달 물질인 아세틸콜린의 합성 효소인 콜린 아세틸트랜스퍼라제(choline acetyltransferase)를 활성화하여 약물 중독에 기인하는 건망증 개선에 도움을 줄 수 있다는 연구논문이 일본 농예화학회지에 발표되었다(BiosciBiotechnol Biochem. 2006 Jan;70(1):107-11). 또한, 갈화 추출물에 포함된 주성분으로서 카카라이드(kakkalide) 및 텍토리딘(tectoridin)이 확인되었으며(J Nat Med. 2010 Jul;64(3):313-20. Epub 2010 Mar 31), 상기 카카라이드(kakkalide) 및 텍토리딘(tectoridin) 물질이 에스트로겐 수용체(estrogen receptor, ER) 및 에스트로겐 관련 수용체(estrogen related receptor; ERR1/2)에 작용하여 에스트로겐 효과(estrogen effect)를 나타내는 것을 폐경기 이후의 여성들을 대상으로 한 연구 성과가 보고된바 있다(Biol Pharm Bull. 2006 Jun;29(6):1202-6).On the other hand, Puerariae Flos is the flower of arrowroot, and has been used to relieve poisoning and bleeding (下血) based on traditional medicine. It is used for hemostasis in medicine, and arrowroot stems are called galman (葛蔓), so they have been burned for boils and sore throats to make powder and used externally or internally. As such, a study on the anti-inflammatory response effect (J Ethnopharmacol. 2004 Sep;94(1):165-73) was published in the 2004 Journal of Ethnic Pharmacology for the brown extract, a natural extract that has been used as a herbal medicine, and growth hormone A study on the effect on secretion (Horm Metab Res. 2004 Feb;36(2):86-91.) was published. In addition, the effect of substances derived from leguminosae plants including brown algae on estrogen activity was reported in the Journal of the Japanese Pharmacopoeia in 2005 (Biol Pharm Bull. 2005 Mar;28(3):538-40). In addition, it was reported in the Journal of Agriculture Food that substances derived from brown extracts inhibit the reducing effect of beta-hydroxy-beta-methylglutaryl coenzyme A (HMG CoA) ( J Agric Food Chem. 2005 Jul 27;53(15):5882-8), it has been reported that this coenzyme inhibitor inhibits cholesterol biosynthesis in the liver by inhibiting the cholesterol biosynthesis process. In addition, in 2006, it was reported that a daidzin substance derived from brown algae extract can help improve forgetfulness caused by drug addiction by activating choline acetyltransferase, an enzyme synthesizing acetylcholine, a neurotransmitter. The research paper was published in the Journal of Agricultural Chemistry of Japan (Biosci Biotechnol Biochem. 2006 Jan; 70(1): 107-11). In addition, kakkalide and tectoridin were identified as main components contained in the brown extract (J Nat Med. 2010 Jul;64(3):313-20. Epub 2010 Mar 31), and the kakkalide (kakkalide) and tectoridin (tectoridin) substances act on estrogen receptor (ER) and estrogen related receptor (ERR1/2) to show an estrogen effect (estrogen effect) in postmenopausal women The results of this study have been reported (Biol Pharm Bull. 2006 Jun;29(6):1202-6).

또한, 한국등록특허 제1357119호에 갈화 추출물을 유효성분을 함유하는 자궁내막증의 예방 및 치료용 약학적 조성물로 개시되어 있고, 한국등록특허 제0552995호에 뇌기능 개선 효과가 있는 갈화 추출물 및 이의 제조방법에 대해 개시되어 있다. 하지만 아직까지는 갈화 추출물을 이용한 선천면역 증진 효과 및 항바이러스 활성에 관해 보고된 바 없다. In addition, Korean Patent No. 1357119 discloses a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of endometriosis containing an extract of brown seaweed as an active ingredient, and Korean Patent No. 0552995 discloses a brown extract having an effect of improving brain function and preparation thereof A method is disclosed. However, there has been no report on the effect of enhancing innate immunity and antiviral activity using brown extracts so far.

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 갈화 추출물이 선천 면역의 주요 세포인 대식 세포를 활성화시켜 다양한 바이러스의 증식을 억제할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다. 또한, 본 발명은 독성 및 부작용이 거의 없어 장기간 안전성을 확보하면서, 각종 바이러스 또는 세균에 의한 감염성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물, 건강기능식품 또는 가축 사료 조성물 등에 효과적으로 이용될 수 있는 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스 조성물, 동물의 선천면역 증진 및 항바이러스 활성 증진 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.The present invention has been derived from the above needs, and the present invention has been completed by confirming that the brown seaweed extract can inhibit the proliferation of various viruses by activating macrophages, which are major cells of innate immunity. In addition, the present invention is effective in securing long-term safety as it has almost no toxicity and side effects, and can be effectively used in pharmaceutical compositions for the prevention or treatment of infectious diseases caused by various viruses or bacteria, health functional foods or livestock feed compositions, etc. An object of the present invention is to provide an innate immunity enhancement and antiviral composition containing as a component, and a method for enhancing animal innate immunity and antiviral activity.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 약학 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for enhancing innate immunity and antiviral containing an extract of brown seaweed as an active ingredient.

또한, 본 발명은 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 건강기능식품을 제공한다.In addition, the present invention provides a health functional food for enhancing innate immunity and antiviral containing brown extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 사료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a feed composition for enhancing innate immunity and antiviral containing a brown extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 인간을 제외한 선천면역 증진이 필요한 동물에 갈화 추출물을 투여하는 것을 특징으로 하는 동물의 선천면역 증진 및 항바이러스 활성의 증진 방법을 제공한다. In addition, the present invention provides a method for enhancing innate immunity and antiviral activity in animals, characterized in that the extract is administered to an animal in need of enhancement of innate immunity, except for humans.

본 발명에 따르면 우수한 선천면역 증진 효능을 발휘하는 갈화 추출물을 이용함으로써 각종 바이러스 및 세균 감염성 질병의 예방 및 치료에 효과적으로 적용될 수 있으며, 면역력 증진에 기여할 수 있다.According to the present invention, it can be effectively applied to the prevention and treatment of various viral and bacterial infectious diseases, and can contribute to the enhancement of immunity, by using the brown extract which exhibits excellent innate immunity enhancement effect.

또한, 본 발명에 따른 갈화 추출물을 포함하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 조성물은 독성이나 부작용을 거의 일으키지 않으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다. 따라서 본 발명에 따른 조성물은 박테리아 및 바이러스에 의한 감염성 질환의 예방 및 치료용으로 적용될 수 있고, 면역이 저하되거나 면역이 억제된 환자의 면역력 증진 및 조절을 위한 약학 조성물이나 건강기능식품, 및 동물의 항 질병 강화를 목적으로 하는 면역증진용 사료 조성물 등으로 광범위하게 이용될 수 있다.In addition, since the composition for enhancing innate immunity and antiviral containing the brown extract according to the present invention hardly causes toxicity or side effects, it can be safely used even when taken for a long period of time for prophylactic purposes. Therefore, the composition according to the present invention can be applied for the prevention and treatment of infectious diseases caused by bacteria and viruses, and pharmaceutical compositions or health functional foods for enhancing and controlling immunity of immunocompromised or immunosuppressed patients, and animal products. It can be widely used as a feed composition for enhancing immunity for the purpose of strengthening anti-disease.

또한, 본 발명에 따르면 갈화 추출물을 선천면역 증진에 필요한 동물에 투여함으로써 동물의 면역을 효과적으로 안전하게 증진시킬 수 있다.In addition, according to the present invention, it is possible to effectively and safely enhance the immunity of animals by administering the brown extract to animals necessary for enhancing innate immunity.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 갈화 추출물의 인플루엔자바이러스(PR8-GFP virus)에 대한 항바이러스 활성을 확인한 결과이며, 칡의 꽃 부위인 갈화와 뿌리 부위인 갈근의 효능을 비교하여 실험하였다. 그 결과, 갈근 추출물보다 갈화 추출물에서의 항바이러스 효능이 뛰어남을 확인하였다.
Medium은 음성 대조군으로 아무것도 처리하지 않은 세포군; PR8-GFP는 바이러스 감염군; IFN-β/PR8-GFP는 양성대조군으로, PR8-GFP 바이러스 감염 및 1,000Units/㎖의 IFN-β 처리군; 갈근/PR8-GFP는 PR8-GFP 바이러스 감염 및 갈근 추출물 처리군; 갈화/PR8-GFP는 PR8-GFP 바이러스 감염 및 갈화 추출물 처리군이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 갈화 추출물의 수포성구내염바이러스(VSV-GFP virus)에 대한 항바이러스 활성을 확인한 결과이며, 칡의 꽃 부위인 갈화와 뿌리 부위인 갈근의 효능을 비교하여 실험하였다. 그 결과, 갈근 추출물보다 갈화 추출물에서의 항바이러스 효능이 뛰어남을 확인하였다.
Medium은 음성 대조군으로 아무것도 처리하지 않은 세포군; VSV-GFP는 바이러스 감염군; IFN-β/VSV-GFP는 양성대조군으로, VSV-GFP 바이러스 감염 및 1,000Units/㎖의 IFN-β 처리군; 갈근/VSV-GFP는 VSV-GFP 바이러스 감염 및 갈근 추출물 처리군; 갈화/VSV-GFP는 VSV-GFP 바이러스 감염 및 갈화 추출물 처리군이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 갈화 추출물의 단순포진바이러스(HSV-GFP virus)에 대한 항바이러스 활성을 확인한 결과이며, 칡의 꽃 부위인 갈화와 뿌리 부위인 갈근의 효능을 비교하여 실험하였다. 그 결과, 갈근 추출물보다 갈화 추출물에서의 항바이러스 효능이 뛰어남을 확인하였다.
Medium은 음성 대조군으로 아무것도 처리하지 않은 세포군; HSV-GFP는 바이러스 감염군; IFN-β/HSV-GFP는 양성대조군으로, HSV-GFP 바이러스 감염 및 1,000Units/㎖의 IFN-β 처리군; 갈근/HSV-GFP는 HSV-GFP 바이러스 감염 및 갈근 추출물 처리군; 갈화/HSV-GFP는 HSV-GFP 바이러스 감염 및 갈화 추출물 처리군이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 갈화 추출물의 뉴캐슬병바이러스(NDV-GFP virus)에 대한 항바이러스 활성을 확인한 결과이며, 칡의 꽃 부위인 갈화와 뿌리 부위인 갈근의 효능을 비교하여 실험하였다. 그 결과, 갈근 추출물보다 갈화 추출물에서의 항바이러스 효능이 뛰어남을 확인하였다.
Medium은 음성 대조군으로 아무것도 처리하지 않은 세포군; NDV-GFP는 바이러스 감염군; IFN-β/NDV-GFP는 양성대조군으로, NDV-GFP 바이러스 감염 및 1,000Units/㎖의 IFN-β 처리군; 갈근/NDV-GFP는 NDV-GFP 바이러스 감염 및 갈근 추출물 처리군; 갈화/NDV-GFP는 NDV-GFP 바이러스 감염 및 갈화 추출물 처리군이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 갈화 추출물의 엔테로바이러스(EV-71 virus)에 대한 항바이러스 활성분석 결과이다. Medium은 음성 대조군으로 아무것도 처리하지 않은 세포군; EV-71는 바이러스 감염군; IFN-β/EV-71은 양성대조군으로, EV-71 바이러스 감염 및 1,000Units/㎖의 IFN-β 처리군; 갈화/EV-71는 EV-71 바이러스 감염 및 갈화 추출물 처리군이다.
도 6은 본 발명의 실시예에 따른 갈화 추출물 및 갈근 추출물에 의한 전 염증성 사이토카인 유도 분석결과를 나타낸다.
도 7은 본 발명의 실시예에 따른 갈화 추출물에 의한 인플루엔자바이러스(H1N1 및 H5N2)의 감염 억제를 확인한 결과이다. H1N1 및 H5N2는 인플루엔자바이러스만 처리(1.0 MOI)된 군이고, Medium은 음성대조군으로 아무것도 처리되지 않은 MDCK 세포군이며, 갈화/H1N1 및 갈화/H5N2는 1㎍/㎖의 갈화 추출물과 인플루엔자바이러스(1.0 MOI)를 동시에 처리한 군이다.1 is a result of confirming the antiviral activity of an extract of brown berry according to an embodiment of the present invention against influenza virus (PR8-GFP virus). . As a result, it was confirmed that the antiviral efficacy of the brown extract was superior to that of the brown root extract.
Medium is a negative control, untreated cell group; PR8-GFP is a virus-infected group; As a positive control, IFN-β/PR8-GFP was treated with PR8-GFP virus and 1,000 Units/ml of IFN-β; galgeun/PR8-GFP was treated with PR8-GFP virus and galgeun extract; Brown flower/PR8-GFP is the PR8-GFP virus infection and brown rice extract treatment group.
Figure 2 is the result of confirming the antiviral activity of the brown extract according to an embodiment of the present invention against vesicular stomatitis virus (VSV-GFP virus). experimented. As a result, it was confirmed that the antiviral efficacy of the brown extract was superior to that of the brown root extract.
Medium is a negative control, untreated cell group; VSV-GFP is a virus-infected group; IFN-β/VSV-GFP was a positive control group, including VSV-GFP virus infection and 1,000 Units/ml IFN-β treatment group; Garlic/VSV-GFP was treated with VSV-GFP virus and Garlic root extract; Brown pepper/VSV-GFP is a group treated with VSV-GFP virus infection and brown rice extract.
Figure 3 is the result of confirming the antiviral activity of the brown extract according to an embodiment of the present invention against herpes simplex virus (HSV-GFP virus). did. As a result, it was confirmed that the antiviral efficacy of the brown extract was superior to that of the brown root extract.
Medium is a negative control, untreated cell group; HSV-GFP is a virus-infected group; IFN-β/HSV-GFP was a positive control group, including HSV-GFP virus infection and 1,000 Units/ml IFN-β treatment group; galgeun/HSV-GFP was treated with HSV-GFP virus infection and galgeun extract; The brown seaweed/HSV-GFP is a group treated with HSV-GFP virus infection and brown seaweed extract.
Figure 4 is the result of confirming the antiviral activity of the brown seaweed extract according to an embodiment of the present invention against Newcastle disease virus (NDV-GFP virus). . As a result, it was confirmed that the antiviral efficacy of the brown extract was superior to that of the brown root extract.
Medium is a negative control, untreated cell group; NDV-GFP is a virus-infected group; IFN-β/NDV-GFP was a positive control, NDV-GFP virus infection and 1,000 Units/ml IFN-β treatment group; Garlic/NDV-GFP was treated with NDV-GFP virus and Garlic root extract; Brownflower/NDV-GFP is a group treated with NDV-GFP virus infection and Brownflower extract.
5 is a result of antiviral activity analysis against enterovirus (EV-71 virus) of a brown extract according to an embodiment of the present invention. Medium is a negative control, untreated cell group; EV-71 is a virus-infected group; As a positive control, IFN-β/EV-71 was treated with EV-71 virus infection and 1,000 Units/ml of IFN-β; Brown flower/EV-71 is the EV-71 virus infection and brown rice extract treatment group.
6 shows the results of analysis of pro-inflammatory cytokine induction by the extracts of brown algae and brown root according to an embodiment of the present invention.
7 is a result of confirming the inhibition of infection of influenza virus (H1N1 and H5N2) by the extract of brown rice according to an embodiment of the present invention. H1N1 and H5N2 are groups treated with influenza virus only (1.0 MOI), Medium is a group of MDCK cells that are not treated with anything as a negative control group, and H1N1 and H5N2 are brown extracts at 1 μg/ml and influenza virus (1.0 MOI). ) were treated simultaneously.

본 발명은 갈화 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 약학 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a pharmaceutical composition for enhancing innate immunity and antiviral containing an extract of brown seaweed as an active ingredient.

상기 갈화 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 중에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출하는 것이 바람직하고, 더 바람직하게는 물, 메탄올, 에탄올, 또는 부탄올의 용매를 이용하여 추출하는 것이며, 더욱더 바람직하게는 물을 용매로 이용하여 열수 추출한 것이다. 상기 열수 추출은 1) 갈화 중량을 기준으로, 5 내지 30배의 증류수를 첨가하는 단계; 2) 100~130℃의 온도에서 2~5시간 동안 열수 추출하는 단계; 및 3) 상기 열수 추출물을 여과하는 단계;를 거쳐 수행하는 것이 바람직하지만 이에 한정하지 않는다.The brown extract is preferably extracted with one or more solvents selected from water and alcohols having 1 to 4 carbon atoms, more preferably extracted using a solvent of water, methanol, ethanol, or butanol, even more preferably It was extracted with hot water using water as a solvent. The hot water extraction includes the steps of 1) adding distilled water 5 to 30 times the weight of browning; 2) extracting hot water at a temperature of 100 to 130° C. for 2 to 5 hours; and 3) filtering the hot water extract; preferably, but not limited thereto.

또한, 상기 갈화 추출물은 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 조정제물 또는 정제물 중 어느 하나를 포함하는 것으로 한다.In addition, the said brown extract shall contain any one of an extract obtained by extraction treatment, a diluted or concentrated liquid of the extract, a dried product obtained by drying the extract, and a crude product or a purified product.

본 발명의 갈화 추출물이 항바이러스 활성을 갖는 바이러스의 일례는 오르토믹소비리대(Orthomixoviridae), 랍도비리대(Rhabdoviridae), 파라믹소비리대(Paramixoviridae), 허피스비리대(Herpesviridae) 및 피코나비리대(Picornaviridae) 중에서 선택된 하나 이상의 바이러스이며, 바람직하게는 인플루엔자바이러스, 뉴캐슬병바이러스, 수포성구내염바이러스(Vesicular stomatitis virus), 콕사키바이러스(Cossackie virus), 엔테로바이러스 71형(Enterovirus-71), 단순포진바이러스(Herpes Simplex Virus), 리노바이러스(Rhinovirus), 호흡기세포융합바이러스(respiratory syncytial virus; RSV), 구제역바이러스(Foot and mouth disease virus), 콜로라도참진드기열바이러스, 레오바이러스, 인간면역 결핍 바이러스, B형 간염바이러스, C형 간염바이러스, 돼지열병바이러스, 소바이러스성설사바이러스(Bovine Viral Diarrhea Virus), 돼지생식기호흡기증후군바이러스(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus), 돼지오제스키병바이러스, 로타바이러스, 파보바이러스, 돼지유행성설사바이러스(Porcine epidemic diarrhea virus) 등이 있으며, 더 바람직한 바이러스의 일례는 인플루엔자바이러스, 뉴캐슬병바이러스, 수포성구내염바이러스, 단순포진바이러스, 엔테로바이러스 71형, 리노바이러스(Rhinovirus), 호흡기세포융합바이러스(respiratory syncytial virus; RSV)이지만 이에 제한하지 않는다.An example of a virus in which the brown extract of the present invention has antiviral activity is Orthomixoviridae, Rhabdoviridae, Paramixoviridae, Herpesviridae and piconaviridae (Picornaviridae) is one or more viruses selected from, preferably influenza virus, Newcastle disease virus, vesicular stomatitis virus, Cossackie virus (Cossackie virus), enterovirus type 71 (Enterovirus-71), herpes simplex virus (Herpes Simplex Virus), Rhinovirus, respiratory syncytial virus (RSV), Foot and mouth disease virus, Colorado tick virus, reovirus, human immunodeficiency virus, type B Hepatitis Virus, Hepatitis C Virus, Swine Fever Virus, Bovine Viral Diarrhea Virus, Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, Swine Ozeski Virus, Rotavirus, Parvovirus, Pig There are epidemic diarrhea virus (Porcine epidemic diarrhea virus), etc., and more preferred examples of viruses include influenza virus, Newcastle disease virus, vesicular stomatitis virus, herpes simplex virus, enterovirus type 71, rhinovirus (Rhinovirus), respiratory syncytial virus ( respiratory syncytial virus (RSV), but is not limited thereto.

본 발명의 갈화 추출물은 면역 인자 유도능을 강하게 나타내며, 개체의 선천면역을 증가시켜 바이러스의 감염 및 증식을 억제하는 효과가 있을 뿐만 아니라, 세포 독성이나 부작용을 거의 나타내지 않으므로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있는 것을 특징으로 한다. 병원체의 감염 시 선천 면역의 방어 기작의 하나로 면역 인자가 분비되는데, 이들 면역 인자들(TNF-α, IL-6 및 IFN-β)의 분비가 병원체를 방어하므로, 적정한 수준의 사이토카인의 반응 유도는 다양한 전염병 병원체에 대한 예방 및 치료 방법이 될 수 있다. 특히 바이러스에 대한 면역력을 증강시킬 수 있는 것이다.The brown extract of the present invention strongly exhibits immune factor inducing ability, has the effect of suppressing virus infection and proliferation by increasing the individual's innate immunity, and exhibits almost no cytotoxicity or side effects, so it can be safely used even when taken for a long period of time. can be characterized. During infection with a pathogen, immune factors are secreted as one of the defense mechanisms of innate immunity. Since secretion of these immune factors (TNF-α, IL-6, and IFN-β) protects the pathogen, an appropriate level of cytokine response is induced. can be a preventive and therapeutic method for various infectious disease pathogens. In particular, it can enhance immunity against viruses.

본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 약학 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명에 이용될 수 있는 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 본 발명의 효과를 해하지 않는 한 특별히 제한되지 않으며, 예를 들어 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제의 대표적인 예로는, 락토즈, 덱스트로스, 슈크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 전분, 젤라틴, 글리세린, 아카시아 고무, 알지네이트, 칼슘포스페이트, 칼슘카보네이트, 칼슘실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 식물성 오일, 주사가능한 에스테르, 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우리지 등을 들 수 있다. 본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 약학 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽제, 에어로졸, 외용제, 좌제 및 주사제로 이루어진 군으로부터 선택되는 형태일 수 있다. 약학 조성물의 제제화 방법은 기술분야에 공지된 통상의 방법에 따라 수행될 수 있으며, 특별히 제한되지 않는다. The pharmaceutical composition for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention may further include a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent. Pharmaceutically acceptable carriers, excipients or diluents that can be used in the present invention are not particularly limited as long as they do not impair the effects of the present invention, and include, for example, fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrants, surfactants, lubricants, sweetening agents, flavoring agents, preservatives, and the like. Representative examples of pharmaceutically acceptable carriers, excipients or diluents include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, maltitol, starch, gelatin, glycerin, gum acacia, alginate, calcium phosphate, calcium carbonate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, mineral oil, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil, injectable Ester, Witepsol, Macrogol, Tween 61, cacao butter, laurage, etc. are mentioned. The pharmaceutical composition for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention may be in a form selected from the group consisting of tablets, pills, powders, granules, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, external preparations, suppositories and injections. The method for formulating the pharmaceutical composition may be carried out according to a conventional method known in the art, and is not particularly limited.

본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 약학 조성물은 경구 또는 비경구 투여될 수 있으며, 투여량은 투여 대상의 연령, 성별, 체중, 상태, 질병의 정도, 약물의 형태, 투여 경로 및 기간에 따라 적절히 선택될 수 있으나, 일반적으로 약 5~500㎎/㎏, 바람직하게는 약 100~250㎎/㎏을 1일 1~3회 투여할 수 있다.The pharmaceutical composition for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention may be administered orally or parenterally, and the dosage may vary depending on the age, sex, weight, condition, degree of disease, type of drug, administration route and period of the subject. Although it may be appropriately selected, in general, about 5 to 500 mg/kg, preferably about 100 to 250 mg/kg, may be administered 1 to 3 times a day.

본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 약학 조성물의 제제화 방법, 투여량, 투여 경로, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있음이 통상의 기술자에게 명백하다. It is clear to those skilled in the art that the formulation method, dosage, administration route, components, etc. of the pharmaceutical composition for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention can be appropriately selected from conventional techniques known in the art.

본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 약학 조성물은 박테리아 감염성 질병 또는 바이러스 감염성 질병의 예방 및 치료에 이용될 수 있다. 본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 약학 조성물은 유효 성분으로 갈화 추출물 외에 다른 약학적 활성 성분을 함께 포함하거나, 또는 다른 유효 성분을 포함하는 약학 조성물과 혼합되어 이용될 수 있다. The pharmaceutical composition for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention can be used for the prevention and treatment of bacterial or viral infectious diseases. The pharmaceutical composition for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention may include other pharmaceutically active ingredients in addition to the brown extract as an active ingredient, or may be used in combination with a pharmaceutical composition including other active ingredients.

또한, 본 발명은 갈화 추출물을 포함하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 건강기능식품에 관한 것이다. 본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 건강기능식품은 식품학적으로 허용가능한 식품 보조 첨가제를 더 포함할 수 있다. 본 발명에 이용될 수 있는 식품학적으로 허용가능한 식품 보조 첨가제는 포도당, 과당, 말토오스, 슈크로스, 덱스트린, 시클로덱스트린과 같은 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당 알코올과 같은 천연 탄수화물, 타우마틴, 스테비아 추출물 등의 천연 향미제, 사카린, 아스파르탐산 등의 합성 향미제, 착색제, 펙트산 또는 그의 염, 알긴산 또는 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산화제 등을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 건강기능식품은 분말, 과립, 정제, 캡슐, 캔디, 츄잉검, 젤리 및 음료로 이루어진 군으로부터 선택되는 형태일 수 있다. 선천면역 증진 및 항바이러스용 건강기능식품 중의 갈화 추출물의 함량은 식품의 형태, 풍미, 맛 등을 고려하여 적절하게 선택될 수 있으며, 예를 들어 건강기능식품 전체 중량에 대하여 0.01~30 중량%의 범위일 수 있다. 본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 건강기능식품의 형태, 조성 및 제조방법 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있음이 통상의 기술자에게 명백하다.In addition, the present invention relates to a health functional food for enhancing innate immunity and antiviral containing a brown extract. The health functional food for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention may further include a food additive that is pharmaceutically acceptable. The pharmaceutically acceptable food supplement additives that can be used in the present invention include sugars such as glucose, fructose, maltose, sucrose, dextrin, and cyclodextrin, and natural carbohydrates such as sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol, thaumatin , natural flavoring agents such as stevia extract, synthetic flavoring agents such as saccharin and aspartamic acid, coloring agents, pectic acid or salts thereof, alginic acid or salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH regulators, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents, and the like. The health functional food for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention may be in a form selected from the group consisting of powder, granule, tablet, capsule, candy, chewing gum, jelly and beverage. The content of brown extract in health functional food for enhancing innate immunity and antiviral can be appropriately selected in consideration of the form, flavor, taste, etc. of the food, for example, 0.01 to 30% by weight based on the total weight of the health functional food. can be a range. It is clear to those skilled in the art that the form, composition and manufacturing method of the health functional food for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention can be appropriately selected from conventional techniques known in the art.

또한, 본 발명은 갈화 추출물을 포함하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 사료 조성물에 관한 것이다. 선천면역 증진 및 항바이러스용 사료 조성물 중의 갈화 추출물의 함량은 급여 가축의 종, 주령, 체중, 및 사육 조건 등에 따라 적절히 선택될 수 있으며, 사료 조성물 전체 중량에 대하여 0.01~95중량%, 바람직하게는 0.1~80중량%의 비율일 수 있다. 본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 사료 조성물은 기술분야에 공지된 사료 제조방법에 따라 제조될 수 있으며, 예를 들어, 각종 사료 원료 또는 배합사료와 본 발명의 갈화 추출물을 혼합한 후, 추가적인 가공 공정, 예를 들어 펠렛 형태로의 성형 또는 과립 등의 형태로의 절단 단계 등을 더 수행함으로써 제조될 수 있다. 본 발명의 선천면역 증진 및 항바이러스용 사료 조성물의 구성성분, 조성, 제조방법, 급여방법 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있음이 통상의 기술자에게 명백하다. In addition, the present invention relates to a feed composition for enhancing innate immunity and antiviral comprising a brown extract. The content of brown extract in the feed composition for enhancing innate immunity and antiviral may be appropriately selected according to the species, age, weight, and breeding conditions of the fed livestock, and is 0.01 to 95% by weight, preferably based on the total weight of the feed composition. It may be in a ratio of 0.1 to 80% by weight. The feed composition for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention can be prepared according to a feed manufacturing method known in the art, for example, after mixing various feed raw materials or compound feed with the brown algae extract of the present invention, additional It may be manufactured by further performing a processing process, for example, molding into pellets or cutting into granules or the like. It is clear to those skilled in the art that the components, composition, manufacturing method, feeding method, etc. of the feed composition for enhancing innate immunity and antiviral of the present invention can be appropriately selected from conventional techniques known in the art.

또한, 본 발명은 인간을 제외한 선천면역 증진이 필요한 동물에 갈화 추출물을 투여하는 것을 특징으로 하는 동물의 선천면역 증진 및 항바이러스 활성의 증진 방법에 관한 것이다. 본 발명의 동물의 선천면역 증진 및 항바이러스 활성 증진에 있어서, 갈화 추출물의 투여량, 투여경로, 투여 시기 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있음이 통상의 기술자에게 명백하다.
In addition, the present invention relates to a method for enhancing innate immunity and antiviral activity in animals, characterized in that the extract is administered to an animal in need of enhancement of innate immunity, except for humans. It is clear to those skilled in the art that, in the enhancement of animal innate immunity and antiviral activity of the present invention, the dosage, route of administration, and timing of administration of the brown extract can be appropriately selected from conventional techniques known in the art. .

이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail using examples. These examples are only for illustrating the present invention in more detail, and it will be apparent to those of ordinary skill in the art that the scope of the present invention is not limited thereto.

실시예Example 1. One. 갈화brown flower 추출물의 제조 Preparation of extracts

갈화 추출물은 갈화의 중량을 기준으로, 20배의 증류수를 갈화에 첨가하여 115℃에서 180분간 열수 추출하고, 0.45㎛로 1차 여과한 후, 0.22㎛로 2차 여과하여 침전물을 제거하였다. 이어서, pH를 7.0으로 조정하여 1.5㎖ Ep-튜브에 1㎖씩 분주하고 -20℃에서 저장하여 모든 분석에 사용하였다. 비교예로서 사용된 갈근 추출물도 갈화 추출물과 동일한 방법으로 제조하였다.
The brown extract was extracted with hot water at 115° C. for 180 minutes by adding 20 times distilled water to the brown rice based on the weight of the brown rice, and then filtered through the primary filter at 0.45 μm, followed by secondary filtration at 0.22 μm to remove the precipitate. Then, the pH was adjusted to 7.0, and 1 ml was dispensed into 1.5 ml Ep-tube, and stored at -20° C. to be used for all analyses. The brown root extract used as a comparative example was also prepared in the same way as the brown rice extract.

실시예Example 2. 갈화 추출물의 항바이러스 활성 분석 2. Analysis of Antiviral Activity of Brown Flower Extract

인플루엔자바이러스(Influenza virus; PR8), 수포성구내염바이러스(Vesicular stomatitis virus), 단순포진바이러스(Herpes simplex virus; HSV), 뉴캐슬병바이러스(Newcastle disease virus) 및 엔테로바이러스 71형(Enterovirus-71; EV-71)에 대한 갈화 추출물의 항바이러스 활성 분석을 수행하였다. 비교예로서 사용된 갈근 추출물도 갈화 추출물과 동일한 방법으로 항바이러스 활성 분석을 실시하였다.
Influenza virus (PR8), Vesicular stomatitis virus, Herpes simplex virus (HSV), Newcastle disease virus and Enterovirus type 71 (Enterovirus-71; EV-71) ) was analyzed for the antiviral activity of brown extracts against The brown root extract used as a comparative example was also analyzed for antiviral activity in the same way as the brown pepper extract.

(1) 항바이러스 활성 분석 방법(1) Antiviral activity assay method

인플루엔자바이러스(Influenza virus; PR8), 수포성구내염바이러스(Vesicular stomatitis virus; VSV), 단순포진바이러스(HSV-GFP) 및 뉴캐슬병바이러스(Newcastle disease virus) 를 마우스 대식세포주인 Raw 264.7 세포(8×10⁵cell/well)에 감염시켜 분석하였고, 엔테로바이러스 71형(Enterovirus-71; EV-71)은 Hela 세포에 감염시켜 분석하였다.Influenza virus (Influenza virus; PR8), vesicular stomatitis virus (Vesicular stomatitis virus; VSV), a Raw 264.7 cells (8 × 10 ⁵ to herpes simplex virus (HSV-GFP) and Newcastle disease virus (Newcastle disease virus) mouse macrophage cell line cell/well), and enterovirus 71 (Enterovirus-71; EV-71) was analyzed by infecting Hela cells.

12-웰 TC 플레이트에 세포를 배양한 후, 1% FBS가 첨가된 DMEM에 상기 실시예 1에서 제조한 1㎍/㎖의 갈화 추출물(pH 조정) 및 갈근 추출물을 각각 처리하였다. 음성 대조군은 1% FBS가 첨가된 DMEM만을 처리하였고, 양성 대조군(Positive control)은 마우스 IFN-β(500units/㎖)를 처리하였다. 갈화 추출물 및 갈근 추출물의 처리 12시간 후, PR8-GFP(MOI:1.0), VSV-GFP(MOI:1.0), HSV-GFP(MOI:3.0), NDV-GFP(MOI:3.0) 및 EV-71(MOI:1.0)를 각각 접종하였다. 접종하고 2시간 후 접종액을 제거하고, PBS로 3회 세척하고, 12 및 24시간 후, 바이러스 감염 정도를 확인하였다.
After culturing the cells in a 12-well TC plate, 1 ㎍ / ㎖ of brown rice extract prepared in Example 1 (pH adjusted) and brown root extract prepared in Example 1 were treated in DMEM with 1% FBS, respectively. The negative control group was treated only with DMEM supplemented with 1% FBS, and the positive control group was treated with mouse IFN-β (500 units/ml). After 12 hours of treatment with brown algae extract and brown root extract, PR8-GFP (MOI: 1.0), VSV-GFP (MOI: 1.0), HSV-GFP (MOI: 3.0), NDV-GFP (MOI: 3.0) and EV-71 (MOI:1.0) were inoculated respectively. After 2 hours of inoculation, the inoculum was removed, washed 3 times with PBS, and after 12 and 24 hours, the degree of virus infection was checked.

(2) 항바이러스 활성 분석결과(2) Antiviral activity assay result

1) 인플루엔자바이러스(1) Influenza virus ( PR8PR8 -- GFPGFP virusvirus )의 분석결과) analysis result

인플루엔자바이러스에 대한 항바이러스 활성 분석결과를 도 1에 개시하였다. 도 1(a)는 감염 12시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내고, 도 1(b)는 감염 24시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내며, 도 1(c)는 감염 24시간 후의 세포 내에 존재하는 바이러스의 개수를 나타낸 것이다. 갈화 추출물로 처리한 결과, 인플루엔자바이러스의 감염률이 현저하게 떨어진 것을 확인할 수 있었으며, 도 1에 개시한 바와 같이, 갈근 추출물과는 달리 갈화 추출물 처리군에서 인플루엔자바이러스의 감염률이 현저하게 감소해 GFP 형광이 나타나지 않았고, 바이러스 역가도 감소한 것을 확인할 수 있었다. 따라서 인플루엔자바이러스에 대한 항바이러스 활성은 칡의 모든 부위에 있는 것이 아니라 특정한 부위인 갈화에서 있는 것으로 판단하였다.
Antiviral activity assay results for influenza virus are disclosed in FIG. 1 . Figure 1 (a) shows a GFP (green fluorescent protein) fluorescence image 12 hours after infection, Figure 1 (b) shows a GFP (green fluorescent protein) fluorescence image 24 hours after infection, Figure 1 (c) is 24 hours after infection Shows the number of viruses present in the cell after time. As a result of treatment with the brown extract, it was confirmed that the infection rate of influenza virus was significantly reduced, and as shown in FIG. It did not appear, and it was confirmed that the virus titer was also decreased. Therefore, it was determined that the antiviral activity against influenza virus was not present in all parts of arrowroot, but in a specific part, brown flower.

2) 2) 수포성구내염바이러스(VSV-GFP virus)의of vesicular stomatitis virus (VSV-GFP virus) 분석결과 Analysis

수포성구내염바이러스에 대한 항바이러스 활성 분석 결과를 도 2에 개시하였다. 도 2(a)는 감염 12시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내고, 도 2(b)는 감염 24시간 후의 GFP(green fluorescent protein) 형광이미지를 나타내며, 도 2(c)는 감염 24시간 후의 세포 내에 존재하는 바이러스의 개수를 나타낸 것이다. 도 2에 개시한 바와 같이, 갈근 추출물과는 달리 갈화 추출물 처리군에서 수포성구내염바이러스의 감염률이 현저하게 감소해 GFP 형광이 나타나지 않았고, 바이러스 역가도 감소한 것을 확인할 수 있었다. 따라서 수포성구내염바이러스에 대한 항바이러스 활성은 칡의 모든 부위에 있는 것이 아니라 특정한 부위인 갈화에서 있는 것으로 판단하였다.
The results of the antiviral activity assay for vesicular stomatitis virus are shown in FIG. 2 . Figure 2 (a) shows a GFP (green fluorescent protein) fluorescence image 12 hours after infection, Figure 2 (b) shows a GFP (green fluorescent protein) fluorescence image 24 hours after infection, Figure 2 (c) shows the infection 24 Shows the number of viruses present in the cell after time. As shown in FIG. 2 , unlike the brown root extract, the infection rate of vesicular stomatitis virus was significantly reduced in the brown extract treated group, so GFP fluorescence did not appear, and it was confirmed that the virus titer was also reduced. Therefore, it was determined that the antiviral activity against vesicular stomatitis virus was not in all parts of arrowroot, but in a specific part, brown flower.

3) 단순포진바이러스(3) Herpes simplex virus ( HSVHSV -- GFPGFP virusvirus )의 분석결과) analysis result

단순포진바이러스에 대한 항바이러스 활성 분석결과를 도 3에 개시하였다. 도 3(a)는 감염 12시간 후의 GFP 형광이미지를 나타낸 것이다. 도 3에 개시한 바와 같이, 갈근 추출물에 비해 갈화 추출물 처리군에서 단순포진바이러스의 감염률이 현저하게 감소해 GFP 형광이 나타나지 않았다는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 단순포진바이러스에 대한 항바이러스 활성은 칡의 모든 부위에 있는 것이 아니며, 특히, 특정 부위인 갈화에서 단순포진바이러스에 대한 항바이러스 효과가 큰 것으로 판단하였다.
The results of the analysis of antiviral activity against herpes simplex virus are shown in FIG. 3 . Figure 3 (a) shows the GFP fluorescence image 12 hours after infection. As shown in FIG. 3 , it was confirmed that the infection rate of herpes simplex virus was significantly reduced in the brown extract treated group compared to the brown root extract, so that GFP fluorescence did not appear. Therefore, antiviral activity against herpes simplex virus is not present in all areas of arrowroot, and in particular, it was determined that the antiviral effect against herpes simplex virus was large in a specific site, brown rice.

4) 뉴캐슬병바이러스(NDV-GFP virus)의 분석결과 4 ) Analysis result of Newcastle disease virus (NDV-GFP virus)

뉴캐슬병바이러스에 대한 항바이러스 활성 분석결과를 도 4에 개시하였다. 도 4(a)는 감염 24시간 후의 GFP 형광이미지를 나타내며, 도 4(b)는 상대적인 GFP 형광량을 나타낸 것이다. 도 4에 개시한 바와 같이, 갈근 추출물과는 달리 갈화 추출물 처리군에서 뉴캐슬병바이러스의 감염률이 현저하게 감소해 GFP 형광이 나타나지 않았다. 따라서 뉴캐슬병바이러스에 대한 항바이러스 활성은 칡의 모든 부위에 있는 것이 아니라, 특정한 부위인 갈화에서 있는 것으로 판단하였다.
Antiviral activity assay results for Newcastle disease virus are shown in FIG. 4 . Figure 4 (a) shows the GFP fluorescence image 24 hours after infection, Figure 4 (b) shows the relative GFP fluorescence amount. As shown in FIG. 4 , unlike the brown root extract, the infection rate of Newcastle disease virus was significantly reduced in the brown extract treated group, so that GFP fluorescence did not appear. Therefore, it was determined that the antiviral activity against Newcastle disease virus was not present in all areas of arrowroot, but in a specific site, brown flower.

5) 엔테로바이러스 ( EV -71 virus ) 71형의 분석결과 5 ) Result of analysis of enterovirus ( EV- 71 virus) 71

엔테로바이러스 71형에 대한 항바이러스 활성 분석결과를 도 5에 개시하였다. 도 5(a)는 감염 12시간 후의 광학이미지를 나타내고, 도 5(b)는 감염 24시간 후의 광학이미지를 나타낸 것이다. 도 5에 개시한 바와 같이, 엔테로바이러스 71형이 감염된 세포에 갈화 추출물을 처리한 결과, 엔테로바이러스 71형이 현저하게 감소한 것을 확인하였다.
The results of the antiviral activity assay for enterovirus type 71 are shown in FIG. 5 . Figure 5 (a) shows the optical image 12 hours after infection, Figure 5 (b) shows the optical image 24 hours after infection. As shown in FIG. 5 , it was confirmed that the enterovirus type 71-infected cells were treated with the brown extract, as a result, the enterovirus type 71 was significantly reduced.

실시예Example 3. 마우스 대식 세포주를 이용한 3. Using mouse macrophage cell lines 갈화의brownish 전 염증성 사이토카인 유도( Induction of pro-inflammatory cytokines ( propro -- inflammatoryinflammatory CytokineCytokines InductionInduction ) 분석) analysis

갈화 추출물 및 갈근 추출물의 면역인자 유도효과를 확인하기 위하여 전 염증성 사이토카인 유도 분석을 수행하였다.A pro-inflammatory cytokine induction assay was performed to confirm the immune factor-inducing effect of the brown algae extract and the brown root extract.

(1) 전 염증성 사이토카인 유도 분석방법(1) Pro-inflammatory cytokine induction analysis method

마우스 대식세포주인 Raw 264.7을 키워 분석에 사용하였다. 6-웰 TC 플레이트에 세포를 배양한 후, 1% FBS가 첨가된 DMEM에 상기에서 제조된 갈화 추출물(pH 조정)을 첨가하여 처리하였다. 음성 대조군은 1% FBS가 첨가된 DMEM만을 처리하였고, 양성 대조군은 바이러스, 암세포 등의 외부 물질에 반응하여 분비되는 사이토카인으로, 세포 내 항암 및 항바이러스 작용을 일으켜 면역반응을 유도하는 물질인 인터페론-β(IFN-β)를 1000Units/㎖ 처리하였다. 시료는 1㎍/㎖의 갈화 추출물 및 갈근 추출물을 처리하고 12시간 후와 24시간 후의 세포에 대하여 TNF-α, IL-6 및 IFN-β의 생성량(pg/㎖)을 ELISA로 측정하였다.
Raw 264.7, a mouse macrophage cell line, was grown and used for analysis. After culturing the cells in a 6-well TC plate, 1% FBS was added to DMEM and treated by adding the brown algae extract (pH adjustment) prepared above. The negative control group was treated only with DMEM supplemented with 1% FBS, and the positive control group was a cytokine secreted in response to external substances such as viruses and cancer cells. -β (IFN-β) was treated with 1000 Units/ml. The samples were treated with 1 μg/ml of brown algae extract and brown root extract, and the amount of TNF-α, IL-6 and IFN-β production (pg/ml) in cells after 12 hours and 24 hours was measured by ELISA.

(2) 전 염증성 사이토카인 유도 분석결과(2) Pro-inflammatory cytokine induction analysis result

갈화 추출물 및 갈근 추출물에 의한 전 염증성 사이토카인 유도 분석결과를 도 6에 개시하였다. 종양괴사인자 알파(tumor necrosis factor-; TNF-α)는 주로 활성화된 대식세포에 의해 분비되며, 가장 중요한 역할은 면역세포의 조절이다. 또한 바이러스 복제를 억제하는 능력이 있는 것으로 알려져 있다. 인터루킨 6(Interleukin 6; IL-6는 B-세포를 활성화시켜 항체생산을 증가시켜 항원특이적 면역반응을 촉진하는 중요한 사이토카인이다. 인터페론(Interferon; IFN)은 세포의 조절물질로서 그 기능이 아주 다양하다. 예를 들면, 바이러스로부터의 세포보호, 조직배양에서나 골수에서의 세포분열 억제, T세포의 작용 조절, 자연면역세포(NK세포)의 기능 항진을 유도하여 식균작용을 상승시키고, 특수 암세포의 분열 억제하는 것으로 알려져 있다.The results of the pro-inflammatory cytokine induction analysis by the brown extract and the brown root extract are shown in FIG. 6 . Tumor necrosis factor-alpha (tumor necrosis factor-; TNF-α) is mainly secreted by activated macrophages, and the most important role is the regulation of immune cells. It is also known to have the ability to inhibit viral replication. Interleukin 6 (IL-6) is an important cytokine that activates B-cells to increase antibody production and promotes antigen-specific immune response. Interferon (IFN) is a cellular regulator, and its function is very For example, cell protection from viruses, inhibition of cell division in tissue culture or bone marrow, regulation of T cells, enhancement of natural immune cells (NK cells), induction of phagocytosis, and special cancer cells known to inhibit the division of

도 6에 개시한 바와 같이, Raw 264.7 세포에서 갈화 추출물에 의해 IL-6 및 IFN-β가 강하게 유도되는 것을 확인할 수 있었으며, 이와 같은 결과와는 대조적으로 갈근 추출물은 IL-6 및 IFN-β이 전혀 유도되지 않은 것을 확인하였다. 따라서 특이적으로 갈화 추출물에서 선천면역 증진을 유도하는 것으로 판단하였다.
As shown in FIG. 6 , it was confirmed that IL-6 and IFN-β were strongly induced by the brown rice extract in Raw 264.7 cells, and in contrast to these results, IL-6 and IFN-β were It was confirmed that it was not induced at all. Therefore, it was determined that the innate immunity enhancement was specifically induced in the brown extract.

실시예Example 4. 갈화 추출물에 의한 4. By brown algae extract H1N1H1N1 및 and H5N2H5N2 바이러스 감염 억제 분석 Virus Infection Suppression Assay

(1) 분석방법(1) Analysis method

MDCK 세포주에 1㎍/㎖의 갈화 추출물과 1.0 MOI(multiplicity of infection) 바이러스를 동시에 처리하고 24시간 후, 세포독성을 측정하기 위하여 10㎕의 Ez-Cytox 시약을 처리하고 12시간 동안 배양하고 450nm에서 흡광도를 측정하였다.
MDCK cell line was treated with brown extract at 1 μg/ml and 1.0 MOI (multiplicity of infection) virus at the same time, and 24 hours later, 10 μl of Ez-Cytox reagent was treated to measure cytotoxicity, incubated for 12 hours, and then incubated at 450 nm. Absorbance was measured.

(2) 분석결과(2) Analysis result

갈화 추출물에 의한 H1N1 및 H5N2 바이러스 감염에 의한 세포 생존도를 분석한 결과, H1N1 및 H5N2 바이러스 감염에 의해 세포 생존률이 약 20%로 감소하였으며, 1㎍/㎖의 갈화 추출물과 1 MOI 바이러스를 동시에 처리한 군의 경우, 세포 생존률이 80~90%로 나타나, 바이러스 감염에 의한 세포 생존률의 감소를 막아주는 것을 확인하였다(도 7).
As a result of analyzing the cell viability due to H1N1 and H5N2 virus infection with the brown flower extract, the cell viability was reduced to about 20% due to the H1N1 and H5N2 virus infection. In the case of one group, the cell viability was 80 to 90%, confirming that the decrease in cell viability due to virus infection was prevented ( FIG. 7 ).

제조예manufacturing example 1. 주사제 1. Injection

상기 실시예 1에서 제조한 갈화 추출물: 100㎎Brown flower extract prepared in Example 1 above: 100 mg

소듐 메타비설파이트: 3.0㎎Sodium metabisulfite: 3.0 mg

메틸파라벤: 0.8㎎Methylparaben: 0.8 mg

프로필파라벤: 0.1㎎Propylparaben: 0.1mg

주사용 멸균 증류수: 적량Sterile distilled water for injection: appropriate amount

상기 성분을 혼합하고 통상의 방법으로 최종 부피가 2 ㎖이 되도록 제조하여, 앰플에 충전하고 멸균하여 주사제를 제조하였다.
The above ingredients were mixed and prepared to have a final volume of 2 ml by a conventional method, filled in an ampoule, and sterilized to prepare an injection.

제조예manufacturing example 2. 정제 2. Refining

상기 실시예 1에서 제조한 갈화 추출물: 200㎎Brown flower extract prepared in Example 1 above: 200 mg

감자 전분: 100㎎Potato Starch: 100mg

락토오스: 100㎎Lactose: 100mg

콜로이드성 규산: 16㎎Colloidal silicic acid: 16 mg

스테아린산 마그네슘: 적량Magnesium Stearate: Appropriate amount

통상의 정제 제조방법에 따라 상기 성분을 혼합하고 타정하고 정제를 제조하였다.
According to a conventional tablet manufacturing method, the above ingredients were mixed and compressed to prepare a tablet.

제조예manufacturing example 3. 3. 캡슐제capsules

유당: 50㎎Lactose: 50mg

전분: 50㎎Starch: 50 mg

탈크: 2㎎Talc: 2 mg

스테아린산 마그네슘: 적량Magnesium Stearate: Appropriate amount

통상의 캡슐 제조방법에 따라 상기 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
According to a conventional capsule manufacturing method, the above ingredients were mixed and filled in a gelatin capsule to prepare a capsule.

제조예manufacturing example 4. 4. 환제pill

상기 실시예 1에서 제조한 갈화 추출물: 120㎎Brown flower extract prepared in Example 1: 120 mg

옥수수 전분: 100㎎Corn Starch: 100 mg

멸균 증류수: 적량Sterile Distilled Water: Appropriate amount

상기 성분을 혼합하고, 통상의 환제 제조방법에 따라 적절한 크기를 갖는 구형으로 제환하여 환제를 제조하였다.
The above ingredients were mixed, and a pill was prepared by forming a pill into a spherical shape having an appropriate size according to a conventional pill manufacturing method.

제조예manufacturing example 5. 건강 기능 식품 5. Health Functional Foods

1) 건강 음료1) Healthy drinks

올리고당(2%), 액상과당(0.5%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%) 등의 음료 재료에 상기 실시예 1에서 제조된 갈화 추출물을 적량 혼합하여, 살균함으로써 음료를 제조하였다. An appropriate amount of the brown extract prepared in Example 1 is mixed with beverage ingredients such as oligosaccharide (2%), high fructose (0.5%), sugar (2%), salt (0.5%), and water (75%), and sterilized Thus, a beverage was prepared.

2) 기능성 식품2) Functional food

상기 실시예 1에서 제조한 갈화 추출물을 각종 비타민 및 미네랄 함유 기능성 식품에 적량 혼합하여 갈화 추출물이 함유된 기능성 식품을 제조하였다.
An appropriate amount of the brown flower extract prepared in Example 1 was mixed with various vitamins and minerals-containing functional food to prepare a functional food containing the brown seaweed extract.

제조예manufacturing example 6. 사료 조성물 6. Feed composition

동물용 배합 사료에 상기 실시예 1에서 제조된 갈화 추출물을 적량 혼합하여, 사료 조성물을 제조한 후, 펠렛화 및 과립화하였다.An appropriate amount of the brown extract prepared in Example 1 was mixed with a compound feed for animals to prepare a feed composition, and then pelletized and granulated.

Claims

Influenza virus, vesicular stomatitis virus, Newcastle disease virus, and herpes simplex virus characterized in that it contains hot water extract of brown seaweed as an active ingredient. Pharmaceutical composition for antiviral in Korea.

delete

According to claim 1, Influenza virus (Influenza virus), Vesicular stomatitis virus (Vesicular stomatitis virus), Newcastle disease virus (Newcastle disease virus) and simple, characterized in that it further comprises a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent. An antiviral pharmaceutical composition for any one viral infection selected from herpesvirus.

The influenza virus (Influenza) according to claim 1, wherein the pharmaceutical composition has a formulation selected from the group consisting of tablets, pills, powders, granules, capsules, suspension emulsions, syrups, aerosols, external preparations, suppositories, and injections. virus), vesicular stomatitis virus, Newcastle disease virus (Newcastle disease virus), and a pharmaceutical composition for an antiviral against any one virus infection selected from herpes simplex virus.

Antiviral use for any one virus infection selected from influenza virus, vesicular stomatitis virus, Newcastle disease virus, and herpes simplex virus containing hot water brown extract as an active ingredient health functional food.

According to claim 7, wherein the health functional food influenza virus (Influenza virus), vesicular stomatitis virus (Vesicular stomatitis virus), Newcastle disease virus (Newcastle disease virus), characterized in that it further comprises a food supplementary additive that is pharmaceutically acceptable. ) and a health functional food for antiviral against any one virus infection selected from herpes simplex virus.

According to claim 7, wherein the health functional food is an influenza virus (Influenza virus), characterized in that it has a formulation selected from the group consisting of powder, granules, tablets, capsules, candy, chewing gum, jelly, and beverages. (Vesicular stomatitis virus), Newcastle disease virus (Newcastle disease virus) and a health functional food for antiviral against any one virus infection selected from herpes simplex virus.

delete

Antiviral use for any one virus infection selected from influenza virus, vesicular stomatitis virus, Newcastle disease virus, and herpes simplex virus containing hot water extract of brown seaweed as an active ingredient feed composition.

Any one selected from influenza virus, vesicular stomatitis virus, Newcastle disease virus and herpes simplex virus of animals, characterized in that the hot water extract of brown seaweed is administered to animals other than humans. A method of enhancing antiviral activity against a single viral infection.