KR102194417B1 - A composition for preserving body fluids, and a preparation method thereof - Google Patents
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Abstract
본 발명은 체액 보존용 조성물, 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 타액 시료로부터 정확한 유전자형을 분석하기 위해서는 타액 내 세포를 변성없이 보존하는 것이 매우 중요하다. 그러나 타액 내에는 다수의 단백분해효소, 핵산분해효소, 비인두 분비물, 음식물 잔사, 세균, 및 바이러스가 포함되어 있어 세포를 변질시키고, 이는 유전자형 분석의 정확성을 감소시킨다. 따라서 타액 채취 순간부터 실제로 유전자형 분석이 수행되기 전까지 타액 내 세포를 변성없이 보존하기 위한 조성물의 개발 필요성이 현저하다.
따라서 본 발명은 상기와 같은 종래의 기술상의 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 체액 보존용 조성물, 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 타액의 특징을 반영하여 세포가 안정적으로 보존되도록 개발되었으므로, 의학 및 보건 분야에서 크게 이용될 것으로 기대된다.The present invention relates to a composition for preserving body fluids, and a method for preparing the same. It is very important to preserve cells in saliva without degeneration in order to analyze the correct genotype from saliva samples. However, the saliva contains a number of proteases, nucleases, nasopharyngeal secretions, food residues, bacteria, and viruses, which degrade cells, which reduces the accuracy of genotyping. Therefore, the necessity of developing a composition for preserving cells in saliva without degeneration from the moment of saliva collection until the genotyping is actually performed is remarkable.
Accordingly, the present invention is conceived to solve the problems of the prior art as described above, and relates to a composition for preserving body fluids, and a method of manufacturing the same. Since the composition of the present invention was developed to stably preserve cells by reflecting the characteristics of saliva, it is expected to be widely used in the fields of medicine and health.
Description
본 발명은 체액 보존용 조성물, 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for preserving body fluids, and a method for preparing the same.
타액은 침샘에서 하루에 약 1 내지 1.5ℓ가 분비된다. 타액의 성분은 대부분이 물이고 (99.3%) 나머지는 뮤신 (0.3%)과 아밀라아제, 아미노산 등 무기물과 유기물이 나머지를 구성하고 있다. 침은 귀밑샘, 턱밑샘, 혀밑샘 등의 큰 침샘과 작은 침샘 등에서 분비된다. 타액은 유전자 검출 시료로서 매우 중요하다. 최근 개인의 유전적 질병 가능성을 예측하거나, 범죄수사 분야에서 증거물로서의 타액 시료가 큰 폭으로 증가하고 있다. 정제 과정을 거치지 않고 순수하게 획득된 타액에는 항상 구강 상피 세포가 같이 존재하고, 적은 양의 시료에서도 유전자분석이 가능하므로, 타액 내에 존재하는 구강 상피 세포로부터 유전자형을 분석할 수 있다. 또한 타액 시료는 비침습적으로 시간/공간에 구애받지 않고 편리하게 채취가 가능하다. 따라서 유전자형 분석 시료로서 타액의 가치가 크다고 할 것이다.Saliva is secreted from about 1 to 1.5 ℓ per day from the salivary glands. Most of saliva consists of water (99.3%), and the rest consists of inorganic and organic substances such as mucin (0.3%), amylase, and amino acids. Saliva is secreted from large and small salivary glands such as the parotid gland, submandibular gland, and sublingual gland. Saliva is very important as a gene detection sample. Recently, the number of saliva samples as evidence in the field of predicting an individual's genetic disease or as evidence has increased significantly. Since the oral epithelial cells are always present in the saliva purely obtained without going through the purification process, and genetic analysis is possible even in a small amount of samples, genotype can be analyzed from the oral epithelial cells present in the saliva. In addition, saliva samples are non-invasive and can be conveniently collected regardless of time/space. Therefore, it would be said that saliva is of great value as a genotyping sample.
타액 시료로부터 정확한 유전자형을 분석하기 위해서는 타액 내 세포를 변성없이 보존하는 것이 매우 중요하다. 그러나 타액 내에는 다수의 단백분해효소, 핵산분해효소, 비인두 분비물, 음식물 잔사, 세균, 및 바이러스가 포함되어 있어 세포를 변질시키고, 이는 유전자형 분석의 정확성을 감소시킨다. 따라서 타액 채취 순간부터 실제로 유전자형 분석이 수행되기 전까지 타액 내 세포를 변성없이 보존하기 위한 조성물의 개발 필요성이 현저하다. 세포 시료의 보존과 관련하여, 한국 등록특허 제 10-0763686호에 "생체 시료의 항산화 보존액" 발명이 개시되었고, 한국 공개특허 제 2010-0015578 호에 "세포 또는 거대분자의 보존 및 안정화를 위한 조성물" 발명이 개시되었으나, 상기 선행문헌들은 모두 타액 시료의 특징을 제대로 반영하지 못했다는 문제점이 있었다.It is very important to preserve cells in saliva without degeneration in order to analyze the correct genotype from saliva samples. However, the saliva contains a number of proteases, nucleases, nasopharyngeal secretions, food residues, bacteria, and viruses, which degrade cells, which reduces the accuracy of genotyping. Therefore, the necessity of developing a composition for preserving cells in saliva without degeneration is remarkable from the moment of saliva collection until the genotyping is actually performed. Regarding the preservation of cell samples, the invention of “antioxidant preservation solution for biological samples” was disclosed in Korean Patent No. 10-0763686, and “Composition for preservation and stabilization of cells or macromolecules” in Korean Patent No. 2010-0015578 "Although the invention has been disclosed, there is a problem that all of the prior documents did not properly reflect the characteristics of the saliva sample.
따라서 본 발명은 상기와 같은 종래의 기술상의 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 체액 보존용 조성물, 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 타액의 특징을 반영하여 세포가 안정적으로 보존되도록 개발되었으므로, 의학 및 보건 분야에서 크게 이용될 것으로 기대된다.Accordingly, the present invention has been devised to solve the problems of the prior art as described above, and relates to a composition for preserving body fluids, and a method of manufacturing the same. Since the composition of the present invention has been developed to stably preserve cells by reflecting the characteristics of saliva, it is expected to be widely used in the fields of medicine and health.
본 발명은 상기와 같은 종래의 기술상의 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 체액 보존용 조성물, 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention is conceived to solve the problems of the prior art as described above, and relates to a composition for preserving body fluids, and a method for preparing the same.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.However, the technical problem to be achieved by the present invention is not limited to the problems mentioned above, and other problems that are not mentioned may be clearly understood by those of ordinary skill in the art from the following description.
이하, 본원에 기재된 다양한 구체예가 도면을 참조로 기재된다. 하기 설명에서, 본 발명의 완전한 이해를 위해서, 다양한 특이적 상세사항, 예컨대, 특이적 형태, 조성물 및 공정 등이 기재되어 있다. 그러나, 특정의 구체예는 이들 특이적 상세 사항 중 하나 이상 없이, 또는 다른 공지된 방법 및 형태와 함께 실행될 수 있다. 다른 예에서, 공지된 공정 및 제조 기술은 본 발명을 불필요하게 모호하게 하지 않게 하기 위해서, 특정의 상세사항으로 기재되지 않는다. "한 가지 구체예" 또는 "구체예"에 대한 본 명세서 전체를 통한 참조는 구체예와 결부되어 기재된 특별한 특징, 형태, 조성 또는 특성이 본 발명의 하나 이상의 구체예에 포함됨을 의미한다. 따라서, 본 명세서 전체에 걸친 다양한 위치에서 표현된 "한 가지 구체예에서" 또는 "구체예"의 상황은 반드시 본 발명의 동일한 구체예를 나타내지는 않는다. 추가로, 특별한 특징, 형태, 조성, 또는 특성은 하나 이상의 구체예에서 어떠한 적합한 방법으로 조합될 수 있다.Hereinafter, various embodiments described herein are described with reference to the drawings. In the following description, for a thorough understanding of the invention, various specific details, such as specific forms, compositions and processes, etc. are set forth. However, certain embodiments may be practiced without one or more of these specific details, or with other known methods and forms. In other instances, well-known processes and manufacturing techniques have not been described in specific details in order not to unnecessarily obscure the present invention. Reference throughout this specification to “one embodiment” or “an embodiment” means that a particular feature, form, composition, or characteristic described in connection with the embodiment is included in one or more embodiments of the invention. Thus, the context of “in one embodiment” or “an embodiment” expressed in various places throughout this specification does not necessarily represent the same embodiment of the invention. Additionally, particular features, shapes, compositions, or properties may be combined in one or more embodiments in any suitable manner.
명세서에서 특별한 정의가 없으면 본 명세서에 사용된 모든 과학적 및 기술적인 용어는 본 발명이 속하는 기술분야에서 당업자에 의하여 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다.Unless otherwise defined in the specification, all scientific and technical terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which the present invention belongs.
본 발명의 일 구체예에서 “체액”이란, 동물의 체내의 혈관 또는 조직의 사이를 이동하는 액상의 총칭이다. 혈액, 혈장, 림프액, 방수액, 뇌척수액, 흉수, 누액(눈물), 소변, 타액(침), 쓸개즙, 양수, 정액, 조직액 등을 포함한다. 본 발명에서 있어서, 체액은 바람직하게는 타액을 의미하는 것이나, 이에 제한되는 것은 아니다.In one embodiment of the present invention, "body fluid" is a generic term for a liquid that moves between blood vessels or tissues in the body of an animal. It includes blood, plasma, lymph, aqueous humor, cerebrospinal fluid, pleural fluid, tear fluid (tears), urine, saliva (saliva), gallbladder, amniotic fluid, semen, tissue fluid, and the like. In the present invention, the bodily fluid preferably means saliva, but is not limited thereto.
본 발명의 일 구체예에서 “타액”이란, 침샘으로부터 입 안으로 분비되는 분비액이다. 타액의 성분은 99% 이상이 물(수분)이며, 그 이외에 구강 건강에 매우 중요한 역할을 하는 다양한 전해질들(나트륨, 칼륨, 칼슘, 염화물, 마그네슘, 중탄산염, 인산염)과 단백질들, 다양한 효소들, 여러 종류의 면역글로불린(immunoglobulins), 항균 물질들(antimicrobial factors), 점막 당단백질들(mucosal glycoproteins), 극소량의 알부민(albumin), 몇 종류의 폴리펩타이드들(polypeptides)와 올리고펩타이드들(olygopeptides) 등이 포함된다. 건강한 성인에게서 생산되는 침의 양은 하루에 약 1 내지 1.5 L 정도이며, 침샘에서 혈관에 흐르는 혈액으로부터 필요한 성분을 축출하여 침으로 변환되는데, 변환 시간은 거의 실시간이다.In one embodiment of the present invention, "saliva" is a secretion fluid secreted from the salivary gland into the mouth. Saliva contains more than 99% of water (moisture), in addition to various electrolytes (sodium, potassium, calcium, chloride, magnesium, bicarbonate, phosphate) and proteins, various enzymes that play a very important role in oral health. Several types of immunoglobulins, antimicrobial factors, mucosal glycoproteins, trace amounts of albumin, several types of polypeptides and oligopeptides, etc. This includes. The amount of saliva produced by healthy adults is about 1 to 1.5 L per day, and the necessary components are extracted from the blood flowing in the blood vessels from the salivary glands and converted into saliva, and the conversion time is almost real time.
외부로 배출된 타액에는 구강 상피 세포가 같이 존재하고, 타액 내에 존재하는 구강 상피 세포로부터 유전자형을 분석할 수 있으므로, 타액 시료는 유전자형 분석 시료로서 중요하게 이용된다.Since oral epithelial cells are present in the saliva discharged to the outside, and genotyping can be performed from the oral epithelial cells present in the saliva, the saliva sample is importantly used as a genotyping sample.
본 발명의 일 구체예에서, Tris-HCl, EDTA, SDS, 및 Tween20을 포함하는 체액 보존용 조성물을 제공하고, 상기 Tris-HCl은 0.01 내지 0.5 M, EDTA는 0.001 내지 0.5 M, SDS는 0.01 내지 10.0 중량%, Tween20은 0.000001 내지 0.0001 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 체액 보존용 조성물을 제공하며, 상기 조성물은 NaCl을 추가로 포함하는 체액 보존용 조성물을 제공하며, 상기 NaCl은 0.01 내지 1.0 M 포함되는 것을 특징으로 하는 체액 보존용 조성물을 제공하며, 상기 조성물은 KH2PO4를 추가로 포함하는 체액 보존용 조성물을 제공하며, 상기 KH2PO4는 0.001 내지 0.05 M 포함되는 것을 특징으로 하는 체액 보존용 조성물을 제공하며, 상기 체액은 타액인 체액 보존용 조성물을 제공한다.In one embodiment of the present invention, it provides a composition for preserving body fluids containing Tris-HCl, EDTA, SDS, and Tween20, wherein the Tris-HCl is 0.01 to 0.5 M, EDTA is 0.001 to 0.5 M, SDS is 0.01 to 10.0% by weight, Tween20 provides a composition for preserving body fluids, characterized in that it contains 0.000001 to 0.0001% by weight, the composition provides a composition for preserving body fluids further comprising NaCl, the NaCl containing 0.01 to 1.0 M and to provide a body fluid preservation composition, characterized in that the composition is fluid, characterized in that is provides a composition for body fluid retention, further comprising a KH 2 PO 4, comprising the KH 2 PO 4 0.001 to 0.05 M It provides a composition for preservation, wherein the bodily fluid is saliva, providing a composition for preserving bodily fluids.
본 발명의 다른 구체예에서, Tris-HCl, EDTA, SDS, 및 Tween20을 포함하는 체액 보존용 조성물을 포함하는 체액 보존용 키트를 제공한다.In another embodiment of the present invention, it provides a kit for preserving body fluids comprising a composition for preserving body fluids comprising Tris-HCl, EDTA, SDS, and Tween20.
본 발명의 또 다른 구체예에서, Tris-HCl, EDTA, SDS, 및 Tween20을 혼합하는 단계를 포함하는 체액 보존용 조성물의 제조방법을 제공하고, 상기 조성물에 NaCl을 혼합하는 단계를 추가로 포함하는 체액 보존용 조성물의 제조방법을 제공하며, 상기 조성물에 KH2PO4를 혼합하는 단계를 추가로 포함하는 체액 보존용 조성물의 제조방법을 제공하며, 상기 체액은 타액인 체액 보존용 조성물의 제조방법을 제공한다.In another embodiment of the present invention, it provides a method of preparing a composition for preserving body fluids comprising mixing Tris-HCl, EDTA, SDS, and Tween20, and further comprising mixing NaCl in the composition. It provides a method for preparing a composition for preserving body fluids, and provides a method for preparing a composition for preserving body fluids, further comprising the step of mixing KH 2 PO 4 with the composition, wherein the body fluid is saliva Provides.
이하 상기 본 발명을 단계별로 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail step by step.
본 발명은 체액 보존용 조성물, 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명의 조성물은 타액의 특징을 반영하여 세포가 안정적으로 보존되도록 개발되었으므로, 의학 및 보건 분야에서 크게 이용될 것으로 기대된다.The present invention relates to a composition for preserving body fluids, and a method for preparing the same, and the composition of the present invention has been developed to stably preserve cells by reflecting the characteristics of saliva, and is expected to be widely used in the fields of medicine and health.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른, 본 발명의 타액 보존용 조성물로 1일, 3일, 5일, 7일, 또는 14일 보존된 타액으로부터 추출한 DNA의 순도를 측정한 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른, 본 발명의 타액 보존용 조성물로 1일, 또는 14일 보존된 타액으로부터 추출한 DNA의 순도를 측정한 결과이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른, 본 발명의 타액 보존용 조성물로 1일, 3일, 5일, 7일, 또는 14일 보존된 타액으로부터 추출한 DNA의 농도를 측정한 결과이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른, 본 발명의 타액 보존용 조성물로 1일, 또는 14일 보존된 타액으로부터 추출한 DNA의 농도를 측정한 결과이다.1 is a result of measuring the purity of DNA extracted from saliva preserved for 1, 3, 5, 7 or 14 days with the composition for preserving saliva of the present invention according to an embodiment of the present invention.
2 is a result of measuring the purity of DNA extracted from saliva preserved for 1 day or 14 days with the composition for preserving saliva of the present invention according to an embodiment of the present invention.
3 is a result of measuring the concentration of DNA extracted from saliva preserved for 1, 3, 5, 7, or 14 days with the composition for preserving saliva of the present invention according to an embodiment of the present invention.
4 is a result of measuring the concentration of DNA extracted from saliva stored for 1 or 14 days with the composition for preserving saliva of the present invention according to an embodiment of the present invention.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are only for describing the present invention in more detail, and it will be apparent to those of ordinary skill in the art that the scope of the present invention is not limited by these examples according to the gist of the present invention. .
실시예 1: 체액 보존용 조성물의 제조Example 1: Preparation of a composition for preserving body fluids
타액 보존용 조성물로서 다양한 성분과 농도를 포함하는 조성물들을 제조하여 멸균하였다. 조성물들의 구체적인 정보를 하기 표 1에 기재하였다.As a composition for preserving saliva, compositions containing various components and concentrations were prepared and sterilized. Specific information of the compositions is shown in Table 1 below.
EDTA: Ethylenediaminetetraacetic acid
SDS: Sodium dodecyl sulfate
NaCl: Sodium Chloride
KH2PO4: Potassium phosphate monobasic
Tween20: Polysorbate 20
% 표시는 모두 중량%Tris-HCl: Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride
EDTA: Ethylenediaminetetraacetic acid
SDS: Sodium dodecyl sulfate
NaCl: Sodium Chloride
KH 2 PO 4 : Potassium phosphate monobasic
Tween20:
All% marks are% by weight
실시예 2: 체액 보존용 조성물의 효과 분석Example 2: Analysis of the effect of the composition for preserving body fluids
상기 실시예 `1의 제조예 1 내지 5의 조성물로 타액 시료를 채취하였다. 본 발명에서 제조한 조성물들의 대조군으로는 ㈜제노텍에서 시판되는 오라젠(Oragene·DNA OG-510, DNA Genotek Inc.)의 제품을 사용하였다. 각각의 타액 보존용 조성물에 동일한 양의 타액을 첨가하고, 시료를 실온에 보관하였다. 타액 채취로부터 1일, 3일, 5일, 7일, 또는 14일이 되는 날에 시료로부터 DNA 추출 키트(AccuPrep® Genomic DNA Extraction Kit, ㈜바이오니아)를 이용하여 제조사의 권장 프로토컬에 따라 DNA를 추출하였다. 추출된 DNA를 A260/280 파장에서 흡광도 측정하여, DNA의 순도 및 농도를 평가하였다. 그 결과를 도 1 내지 도 4에 나타내었다.Saliva samples were collected with the compositions of Preparation Examples 1 to 5 of Example `1. As a control for the compositions prepared in the present invention, a product of Oragen (Oragene·DNA OG-510, DNA Genotek Inc.) sold by Genotech was used. The same amount of saliva was added to each saliva preserving composition, and the sample was stored at room temperature. On the 1st, 3rd, 5th, 7th, or 14th day from saliva collection, DNA was extracted from the sample using a DNA extraction kit (AccuPrep® Genomic DNA Extraction Kit, Bioneer) according to the manufacturer's recommended protocol. Extracted. The extracted DNA was measured for absorbance at A260/280 wavelength to evaluate the purity and concentration of the DNA. The results are shown in FIGS. 1 to 4.
실험 결과, 본 발명의 조성물 제조예 1 내지 5와 대조군이 1일 내지 14일의 조건에서 모두 1.8 내지 2.0의 DNA 순도를 나타내어, 모든 조성물이 유전자형 분석을 위해 적합한 수준의 세포 보존 효과가 있는 것을 알 수 있었다(도 2). 그러나 DNA 농도 검출에 있어서는 조성물별로 검출되는 DNA 농도에 차이가 크게 나타났다. 1일 결과에서는 제조예 4를 제외하고 대부분 비슷한 DNA 농도가 검출되었으나, 타액 채취로부터 14일이 경과한 후에는 가장 낮은 DNA 농도가 검출된 조성물(제조예 4)과 가장 높은 DNA 농도가 검출된 조성물(제조예 5) 사이가 크게 벌어졌다. 특히 제조예 5의 경우 대조군과 비교하여 DNA 검출 농도가 약 57% 증가하여, 타액 보존용 조성물로서 매우 우수한 것을 알 수 있었다(도 4).As a result of the experiment, it was found that the compositions of Preparation Examples 1 to 5 and the control group of the present invention all showed a DNA purity of 1.8 to 2.0 under conditions of 1 to 14 days, so that all compositions had a cell preservation effect at a level suitable for genotyping. Could be (Fig. 2). However, in the detection of DNA concentration, there was a large difference in the detected DNA concentration for each composition. In the results of 1 day, most similar DNA concentrations were detected except for Preparation Example 4, but after 14 days from saliva collection, the composition in which the lowest DNA concentration was detected (Preparation Example 4) and the composition in which the highest DNA concentration was detected (Production Example 5) There was a large gap. In particular, in the case of Preparation Example 5, the DNA detection concentration was increased by about 57% compared to the control, and it was found that it is very excellent as a composition for preserving saliva (FIG.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.As described above, specific parts of the present invention have been described in detail, and it is clear that these specific techniques are only preferred embodiments, and the scope of the present invention is not limited thereto for those of ordinary skill in the art. Therefore, it will be said that the practical scope of the present invention is defined by the appended claims and their equivalents.
Claims (12)
상기 Tris-HCl은 1.5 내지 1.6 중량%, EDTA는 0.7 내지 0.8 중량%, SDS는 1.4 내지 1.6 중량%, Tween20은 0.000001 내지 0.0001 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하고,
상기 체액은 타액인 것을 특징으로 하는, 조성물.
As a composition for preserving body fluids comprising Tris-HCl, EDTA, SDS, and Tween20,
The Tris-HCl is 1.5 to 1.6% by weight, EDTA is 0.7 to 0.8% by weight, SDS is 1.4 to 1.6% by weight, Tween20 is characterized in that it is contained in 0.000001 to 0.0001% by weight,
The composition, characterized in that the body fluid is saliva.
A kit for preserving body fluids, comprising the composition for preserving body fluids of claim 1.
상기 Tris-HCl은 1.5 내지 1.6 중량%, EDTA는 0.7 내지 0.8 중량%, SDS는 1.4 내지 1.6 중량%, Tween20은 0.000001 내지 0.0001 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하고,
상기 체액은 타액인 것을 특징으로 하는, 제조방법.As a method for preparing a composition for preserving body fluids comprising the step of mixing Tris-HCl, EDTA, SDS, and Tween20,
The Tris-HCl is 1.5 to 1.6% by weight, EDTA is 0.7 to 0.8% by weight, SDS is 1.4 to 1.6% by weight, Tween20 is characterized in that it is contained in 0.000001 to 0.0001% by weight,
The method of manufacturing, characterized in that the bodily fluid is saliva.
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Patent Citations (1)
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