KR102182938B1 - 위험의 계층화, 진단 및 예후를 위한 sCD14 또는 그의 단편 또는 유도체의 사용 - Google Patents

Abstract

발명은 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 경화증의 진단 방법 및 피검자의 이들 발병 위험을 평가하는 방법에 관한 것이다. 또한, 피검자의 사망 위험 평가 방법, 피검자가 특정 치료를 받아 유리하게 될지 여부, 또는 피검자가 입원할 필요가 있는지 여부 또는 피검자가 퇴원할 수 있는지 여부를 평가하는 방법이 제공된다. 본 발명은 일반적으로 심혈관 위험에 대한 신규 마커로서, 보다 특별하게는 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증에 대한 마커로서, (특히 sCD14-ST를 포함하여) sCD14, 그의 단편 또는 유도체를 제공한다.

Description

위험의 계층화, 진단 및 예후를 위한 sCD14 또는 그의 단편 또는 유도체의 사용{Use of sCD14 or its fragments or derivatives for risk stratisfaction, diagnosis and prognosis}

본 발명은 심혈관 질환이나 상태, 또는 죽상 동맥 경화증(atherosclerosis)에 관한 진단 또는 예후를 평가하기 위한 수단 분야에 관한 것이며, 그리고 피검자의 심혈관 위험 또는 죽상 동맥 경화증 위험을 평가하기 위한 방법에 관한 것이다.

보다 구체적으로, 본 발명은　심혈관 질환 또는 상태, 또는 죽상 동맥 경화증을 진단하는 신규한 방법에 관한 것이다. sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체가 심혈관 질환 또는 상태, 또는 죽상 동맥 경화증의 진단을 위한 신규한 마커(marker)로서 제공된다. 본 발명은 또한 미래에 생길 심혈관 질환 또는 상태, 또는 죽상 동맥 경화증에 대한 피검자의 위험을 평가하는 방법을 포함한다. 또한, 심혈관 질환이나 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 징후를 보여주는 피검자에 있어서의 급성 심장 이벤트의 진단을 위한 방법이 제공된다. 바람직하게는, 본 발명에 따른 방법은 피검자가 병원에 또는 집중 주의 치료 병동(Intensive care treatment)에 입원할 것인지 또는 피검자가 퇴원할 수 있는 지를 확인하는 것을 가능하게 한다. 본 발명의 방법들은 또한 다양한 심혈관 질환 또는 상태 사이에서 식별하기 위해 사용될 수 있다. 또한, 전술한 방법들을 수행하기 위한 장치 및 키트들이 본 발명에 포함된다.

피검자가 어떤 종류의 불편함 때문에 응급실에 있게 될 때, 그의 불편함의 기저를 이루는 원인을 확인하고 그리고 피검자의 건강에 미치는 영향을 막기 위해서, 피검자의 병리 상태의 신속한 진단은 의무적이다. 매우 관련 있는 주제는 환자를 병원에 입원시킬 것인지- 나아가, 시간이 소요되는 분석 및/또는 집중 주의 치료를 받게 할 것인지- 또는 상기 환자를 가정으로 퇴원시킬 것인지에 대한 결정이다.

예를 들면, 급성 심혈관 이벤트의 경우에 있어서, 대개, 짧은 시간 내에 어떤 치료 요법을 할 것인가에 대한 결정이 이루어져야만 한다. 심혈관 질환, 특히 심장 질환은 서반구에서 이환율(morbidity) 및 사망률(mortality)의 가장 중요한 원인이다. 심혈관 질환은 장시간 동안 무증상인 채로 있을 수 있다. 그러나 예컨대 심근 경색(MI:myocardial infarction) 또는 급성 비대상성 심부전(ADHF: acute decompensated heart failure)과 같은 급성 심혈관 이벤트가 일단 발생하면, 이들은 심각한 결과를 가져올 수 있다. 따라서, 일반적으로 응급실에서, 의사에게 환자를 보이고 그리고 환자가 급성 관상동맥 증후군(ACS:acute coronary syndrome) (즉, 불안정 협심증(UAP:Unstable angina pectoris) 또는 심근 경색 (MI)) 또는 급성 비대상성 심부전(ADHF, 참조 J.Am.Coll.Cardiol. 2000; 36, pages 959-969)으로 고통 받는 것으로 의심을 두는, 신속한 진단을 위한 지침이 존재한다. 급성 심근 경색이 있는 것으로 의심을 받은 피검자의 경우에서, 심전도가 기록되고, 트로포닌T 또는 트로포닌I 의 수준(cTn)이 결정된다. 또한, 의심을 받는 피검자가　 가슴 통증, 호흡 곤란, 두근거림, 구역, 구토와 같은 사건 증후군 및 또한 당업자에게 공지된 증후군을 보이는 지가 분석될 것이다. 상기 피검자가 3개의 기준 중 2개에서 양성이면, 그는 추가 검사를 위해서 병원에 입원 된다. 급성 비대상성 심부전(ADHF)을 가지는 것으로 의심되는 피검자의 경우에서, 심부전과 호환되는 징후 또는 증후군을 가지는 환자가 호흡 곤란으로 평가되는 때는, 혈장 BNP 또는 NT-proBNP의 농도 결정이 추천된다, 참조 J Card Fail 2010;16(6): pages e134-155.

그러나, 응급실에 있는 피검자의 구성은, 약 50%의 (급성, 즉 허혈성(ischemic) 상태 및 비허혈성 상태를 모두 포함하는) 심혈관 질환 또는 상태를 겪고 있는 피검자, 약 10%의 폐합병증을 겪고 있는 피검자 그리고 다른 합병증, 예를 들어, 종양 그리고 심혈관 질환이나 상태로 추가 고생할 수 있는, 약 40%의 피검자로 이루어져서, 이질적이다. 종래의 진단 기술은, 특히 응급 상황에서는, 대개 이러한 다양한 병리학적인 상태를 포함하는 신뢰할 수 있는 진단 및/또는 위험 평가를 허용하지 않는다. 또한, 정교한 진단 기술 및 분석을 수행하기 위한 충분한 인력의 부족 및 응급실에서의 상황에 따라 변하는 수용인원이 결점이 된다.

현재, 의사가 응급 부서에서 직면할 수 있는 다양한 심혈관 질환 및 상태를 포함하는 표준화된 진단 절차가 존재하지 않는다. 따라서, 피검자가 퇴원할 수 있는지(rule out, 가능성 배제/추정) 또는 추가 검사 또는 (생명을 살릴 수 있는) 집중 주의 치료를 위해 병원에 입원하는 지(rule in, 용인)에 대한 결정을 가능하게 하는 심혈관 질환 또는 상태에 대한 신속하고 정확한 진단은, 응급 부서에서 충분한 정확성을 가지고 이루어질 수 없다. 그 결과로, 많은 환자들이 부당하게 입원하거나 또는 부당하게 퇴원할 것이다.

몇몇 경우에 있어서, 소위 분자 마커(molecular markers)로 불리는 것이 환자의 병리 상태를 신속하고 충분히 정확하게 진단하는 것을 허용한다. 현저한 예로서, 이전에 언급된 바와 같이, 급성 심근 경색 진단에는 cTn 이 또는 다양한 비허혈성 심장 질환, 예를 들면 심부전에는 나트륨이뇨펩타이드, 특히 BNP와 NT-proBNP가 있다. cTn의 혈액 수준은, 급성 심근 경색의 진단에 관례적으로 사용되는, 심근 괴사에 민감한 특이 마커이다. 허혈성 마커의 예로서 cTn의 결정에 대해서는, 카츄(Katus) 등 (Mol Cell Cardiol 1989; 21: 1349-53), 햄(Hamm) 등 (NEJM 1992; 327 :146-50), 오만(Ohmann) 등 (NEJM 1996; 335 : 1333-34), 크리스텐슨(Christenson)등 (ClinChem 1998; 44 : 494-501), 및 EP-A-0 394 819에서 언급됐다. 비록 고감도 cTn 시험의 신세대가 도입되었으나, 심근 경색의 진단에서 진단 감도와 특이성의 부족은 특히 응급실에 있는 증상 환자에 있어서 여전히 남아 있다, 참조 Apple and Christenson (Clin Chem 2012; 58: 54-61); 및 Thygesen 등. (JACC 2012, 60(16):1581-98).

연구결과 노인에 있어서 sCD14 수준과 심혈관 위험 사이에 상관 관계가 있음이 주장되었다 (라이너 에이피 (Reiner AP) 등: 노인에 있어서의 가용성 CD14: 전체유전체 관련 분석 및 심혈관 위험과 사망률의 관계 (Soluble CD14: Genomewide Association Analysis and Relationship to Cardiovascular Risk and Mortality in Older Adults). Arterioscler Thromb Vasc Biol; 2012. 11. 15 온라인 공개). 중년 남성에서의 또 다른 연구는, 그러나, sCD14와 관상 동맥 심장 질환을 가진 피검자 사이에는 상관 관계가 없다는 것을 나타낸다 (모렌지 피이(Morange PE) 등: TLR4/Asp299Gly, CD14/C-260T, 가용성 수용체CD14의 혈장 수준 및 관상 심장 질병의 험위 간의 혈장 수준: The PRIME Study. Eur J Hum Genet. 2004; 12:1041-1049).

따라서, 특히 증상 발현 후 초기에 응급 부서에 있는 피검자에 대한 평가 및/또는 개별적 위험 계층화를 허용하는, 진단 또는 예후 측정에 대한 필요성이 존재한다. 상기 측정은 이전에 심혈관 질환 또는 상태 때문에 진단받은 적이 없는, 특히 급성 심혈관 질환으로 진단받은 적이 없는 피검자에 대해서도 이 평가/위험 계층화를 가능하게 해야 한다.

본 발명에서 근원적인 기술적 문제는 전술한 요구를 준수하기 위한 수단 및 방법의 제공으로 보여질 수 있다.

상기 기술적 문제들은 청구항들 및 하기에서 특징적으로 묘사된 실시예들에 의해서 해결된다.

본 발명은 하기의 관점, 발명들 및 바람직한 실시예들을 제공하며, 이들은 각각 단독으로 또는 결합하여, 본 발명의 목적을 해결하는 데 기여한다.:

1. a) 피검자의 샘플에서 sCD14, sCD14-ST 또는 sCD14-ST 외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 단계,

b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및

c) b)단계에서 얻은 결과에 기초하여 심혈관 질환 또는 상태의 발병에 대한 피검자의 개별적인 위험을 평가하는 단계를 포함하는, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증 발병에 대한 피검자의 위험을 평가하기 위한 방법.

2. a) 피검자의 샘플에서 sCD14, sCD14-ST 또는 sCD14-ST 외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 단계,

b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및

c) b)단계에서 얻은 결과에 기초하여 심혈관 질환 또는 상태의 존재 또는 부재를 결정하는 단계를 포함하는, 피검자에 대한 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 진단하기 위한 방법.

3. a) 피검자의 샘플에서 sCD14, sCD14-ST 또는 sCD14-ST 외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 단계,

b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및

c) b)단계에서 얻은 결과에 기초하여 피검자의 사망 위험을 결정하는 결정하는 단계를 포함하는, 심혈관 질환이나 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자에 있어서 사망 위험을 평가하기 위한 방법.

4. a) 피검자의 샘플에서, sCD14, sCD14-ST 또는 sCD14-ST 외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 단계,

b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및

c) 상기 b) 단계에서 얻은 결과에 기초하여 가능성을 평가하는 단계를 포함하는, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 상기 피검자가 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로오스로 구성된 군으로부터 선택된 물질로 치료를 받아서 유익하게 될지 여부에 대한 평가를 위한 방법.

5. a) 피검자의 샘플에서, sCD14, sCD14-ST 또는 sCD14-ST 외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 단계,

b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및

c) 상기 b) 단계에서 얻은 결과에 기초하여 상기 피검자가 입원할 필요가 있는 지를 결정하는 단계를 포함하는, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증 을 가지는 상기 피검자의 입원 필요 여부를 결정하는 방법.

6. 항목1 내지 항목5 중의 어느 하나에 있어서,

a') 동일 개인의 동일 또는 다른 샘플에서 적어도 하나의 추가 마커를 결정하는 단계,

b') a')에서 결정된 상기 적어도 하나의 추가 마커의 양을 상기 추가 마커의 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및

c') b)단계에서 상기 화합물을 위해 획득된 결과와 상기 b')단계에서 상기 적어도 하나의 추가 마커를 위해 획득된 결과를 결합함으로써 각각의 c)단계를 수행하는 단계를 더욱 포함하는 방법.

7. 항목6에 있어서, c') 단계는, 상기 화합물 및 상기 적어도 하나의 추가 마커를 위해 b)단계에서 획득된 결과들을 결합함으로써 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발병할지에 대한 피검자 개개인의 위험을 평가하는 단계를 포함하는, 방법.

8. 항목6에 있어서, c') 단계는, 상기 화합물 및 상기 적어도 하나의 추가 마커를 위해 b)단계에서 획득된 결과들을 결합함으로써 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 존재 또는 부재를 결정하는 단계를 포함하는, 방법.

9. 항목6항에 있어서, c') 단계는, 상기 화합물 및 상기 적어도 하나의 추가 마커를 위해 b)단계에서 획득된 결과들을 결합함으로써 피검자의 사망 위험을 결정하는 단계를 포함하는, 방법.

10. 항목6에 있어서, c') 단계는, 상기 화합물 및 상기 적어도 하나의 추가 마커를 위해 b)단계에서 획득된 결과들을 결합함으로써, 피검자가 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로오스로 구성된 군으로부터 선택된 물질로 치료를 받아서 유익하게 될 지 여부에 대한 결정하는 단계를 포함하는, 방법.

11. 항목6에 있어서, c') 단계는, 상기 화합물 및 상기 적어도 하나의 추가 마커를 위해 b)단계에서 획득된 결과들을 결합함으로써, 피검자가 입원할 필요가 있는 지를 결정하는 단계를 포함하는, 방법.

12. 항목4 또는 항목6에 있어서, 상기 항생제는 상기 장내에서 재흡수되지 않는 것인, 방법.

13. 항목4, 항목6 또는 항목12 중의 어느 하나에 있어서, 상기 항생제는 아미노글리코사이드(aminoglycoside)인, 방법.

14. 항목4, 항목6, 항목12 또는 항목13 중의 어느 하나에 있어서, 상기 항생제는 네오마이신(neomycin) 또는 파로마이신(paromycin)인, 방법.

15. 항목4, 항목6, 항목12 내지 14 중의 어느 하나에 있어서, 상기 피검자는 심혈관 질환 또는 상태, 바람직하게는 급성 심부전을 가지는 것인, 방법.

16. 항목6에 있어서, c')단계는 단계에서 상기 화합물 및 상기 적어도 하나의 추가 마커를 위해 b)단계에서 획득된 결과들을 결합함으로써, 피검자가 입원할 필요가 있는 지를 결정하는 단계를 포함하는, 방법.

17. 항목6 내지 항목16 중의 어느 하나에 있어서, 상기 적어도 하나의 추가 마커는 신경 호르몬 마커, 수분 균형 조정기(regulators of water balance), 허혈성 심장 마커, 사이토카인, 염증성 마커 및 세포 부착 분자로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 방법.

18. 항목6 내지 항목17 중의 어느 하나에 있어서, 바람직하게는 상기 적어도 하나의 추가 마커는 프로칼시토닌, C-반응성 단백질, 코페틴(copeptin) 및 형질 전환 성장 인자-β 사이토카인 슈퍼 패밀리의 마커들로 구성된 군, 및/또는 신경 호르몬 마커, 허혈성 심장 마커; 염증 마커와 선택적으로 인터루킨 -1 수용체 패밀리 마커로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 방법.

19. 항목1 내지 항목18 중의 어느 하나에 있어서, 상기 피검자는, 급성 관상 동맥 증후군, 급성 심부전, 만성 심부전, 관상 동맥 질환, 협심증, 심근 경색, 허혈성 뇌졸증, 출혈성 뇌졸증 및 일과성 허혈성 발작으로 이루어진 군으로부터 선택되는 심혈관 질환 또는 상태의 하나 또는 그 이상의 증후군을 보이는 것인, 방법.

20. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 만성 심부전을 진단하기 위한 것이며, 바람직하게는 여기서 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 115 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 150 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 260 pg/ml인, 방법.

21. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 만성 심부전을 진단하기 위한 것이며, 바람직하게는 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST) 는 115 pg/ml와 4000 pg/ml 사이이며, 더욱 바람직하게는 150 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 260 pg/ml와 2000 pg/ml사이인, 방법.

22. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 불안정 협심증을 진단하기 위한 것이며, 바람직하게는 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 214 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 216 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 222 pg/ml이상인 방법.

23. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법 불안정 협심증을 진단하기 위한 것이며, 바람직하게는 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 214 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게는 216 pg/ml와 3000 pg/ml사이, 더욱더 바람직하게는 222 pg/ml와 2000 pg/ml 사이인, 방법.

24. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 급성 심부전을 진단하기 위한 것이며, 바람직하게는 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 295 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 354 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 455 pg/ml 이상인, 방법.

25. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 급성 심부전을 진단하기 위한 것이며, 바람직하게는 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 295 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게는 354 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 455 pg/ml와 2000 pg/ml 사이인, 방법.

26. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나, 24항 또는 25항에 있어서, 상기 방법은 급성 비대상성 심부전 (ADHF)을 진단하기 위한 것인, 방법.

27. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 심근 경색을 진단하기 위한 것이며, 바람직하게는 sCD14-ST의 양이 260 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 276 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 295 pg/ml 이상인, 방법.

28. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 심근 경색을 진단하기 위한 것이며, 바람직하게는 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 260 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게는 276 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 295 pg/ml와 2000 pg/ml 사이인, 방법.

29. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나, 항목27 또는 항목28에 있어서, 상기 방법은 비-ST-상승 심근경색(NSTEMI:non-ST-elevated myocardial infarction)을 진단하기 위한 것인, 방법.

30. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은, 만성 심부전과 급성 심부전을 식별하기 위한 것이며, 급성 심부전을 가진 피검자로부터 얻은 샘플에서 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 바람직하게는 340 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 354 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 455 pg/ml 이상인, 방법.

31. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 상승된 사망 위험을 가지는, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자를 확인하기 위한 방법이며, 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 500 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 800 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 1300 pg/ml이상인, 방법.

32 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 상승된 사망 위험을 가지는, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자를 확인하기 위한 방법이며, 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 500 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게는 800 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 1300 pg/ml와 2000 pg/ml사이인, 방법.

33. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나, 항목31 또는 항목32에 있어서, 상기 방법은 상승된 사망 위험을 가지는 급성 심부전을 가지는 피검자의 서브군(subgroup)을 확인하기 위한 것인, 방법.

34. 항목1 내지 항목33 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자의 예후를 평가하기 위한 것인, 방법.

35. 항목1 내지 항목19 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 임상 징후가 없는 피검자에게 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 생길 위험을 평가하기 위한 것인, 방법.

36. 항목35에 있어서, 피검자로부터 얻은 샘플에서 결정된 상기 화합물(바람직하게는, sCD14-ST)의 양이 225 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 240 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 260 pg/ml 이상이라면, 상기 피검자는 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발생될 상승 위험을 가지는 것인, 방법.

37. 항목1 내지 항목36 중의 어느 하나에 있어서, 건강한 피검자에서의 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 기준양은 바람직하게 223 pg/ml와 262 pg/ml 사이인, 방법.

38. 항목1 내지 항목37 중의 어느 하나에 있어서, 상기 샘플은 혈액 샘플인, 방법.

39. 항목38에 있어서, 상기 샘플은 피검자로부터 분리된 샘플인 것인, 방법.

40. 항목1 내지 항목39 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법이 체외(in vitro)에서 실시되는 것인, 방법.

41. 항목1 내지 항목40 중의 어느 하나에 있어서, 상기 화합물의 양 및/또는 상기 적어도 하나의 추가 마커의 양을 결정하는 단계는, (i) 펩타이드를 특정 리간드에 접촉하는 단계, (ii) (선택적으로) 비결합 리간드를 제거하는 단계, (iii) 결합 리간드의 양을 측정하는 단계를 포함하는 것인, 방법.

42. 항목1 내지 항목41 중의 어느 하나에 있어서, 상기 화합물의 양 및/또는 상기 적어도 하나의 추가 마커의 양은 면역 분석법에 의해 결정되는 것인, 방법.

43. 항목1 내지 항목42 중의 어느 하나에 있어서, 상기 화합물은 sCD14-ST이며 그리고 상기 sCD14-ST의 양은 sCD14-ST에 대한 특이 항체를 사용하여 결정되는 것인, 방법.

44. 항목43에 있어서, 상기 sCD14-ST에 대한 특이 항체는 sCD14에 결합하지 않는 것인, 방법.

45. 항목1 내지 항목44 중의 어느 하나에 있어서, b) 단계 또는 b')단계에서의 비교는, 각각 컴퓨터로 보조되는 것인, 방법.

46. 항목45에 있어서, 상기 화합물, sCD14-ST 및/또는 상기 적어도 하나의 추가 마커의 결정된 양의 값들은 컴퓨터 프로그램에 의한 각각의 기준양에 대응하는 값들과 비교되는 것인, 방법.

47. 항목46에 있어서, 상기 컴퓨터 프로그램은 상기 비교의 결과를 평가하고 그리고 적절한 출력 형태로 상기 평가의 결과를 제공하는 것인, 방법.

48. 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 마커로서, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택되는 화합물의 사용.

49. 항목48에 있어서, 상기 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증은, 급성 관상 동맥 증후군, 급성 심부전, 만성 심부전, 관상 동맥 질환, 협심증, 심근 경색, 허혈성 뇌졸증, 출혈성 뇌졸증, 일과성 허혈성 발작증 및 폐색전으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 사용.

50. 항목48 또는 항목49에 있어서, 상기 마커는 시험 관내 분석에서 사용되는 것인, 사용.

51. 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지며 그리고 sCD14, sCD14-ST 또는 sCD14-ST 이외 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 증가된 혈장 수준을 갖는 피검자의 치료에 사용하기 위한 것으로 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로스로 이루어진 군에서 선택되는 물질.

52. 항목51에 있어서, 상기 항생제는 장에서 재흡수되지 않는 것인, 물질.

53.항목51 또는 항목52에 있어서, 상기 항생제는 아미노글리코사이드인, 물질.

54. 항목51 내지 항목53 중의 어느 하나에 있어서, 상기 항생제는 네오마이신(neomycin) 또는 파로마이신(paromycin)인, 물질.

55. 항목51 내지 항목54 중의 어느 하나에 있어서, 패혈증 또는 요독증, 옵소닌(opsonin) 혈청의 활성 감소, 보완 결핍(complement deficiency), 선천성 식균 작용의 장애, 만성 육아 종성 질환(chronic granulomatous disease), 미엘로퍼옥사다아제(myeloperoxidase) 결손, 백혈병, 악성 림프종, 세균성 심내막염, 당뇨병 및 간경변과 같은 식세포 기능 장애와 관련된 질환의 치료에 사용하지 않는 것인, 물질.

56. 항목51 내지 항목55 중의 어느 하나에 있어서, 상기 증가된 혈장 수준이 345 pg/ml 이상, 바람직하게는 800 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 1300 pg/ml 이상인 것인, 물질.

57. 피검자에게 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발병할 위험을 평가하기 위한 것, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가진 피검자가 사망할 위험을 평가하기 위한 것, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자가 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로스로 이루어진 군에서 선택되는 물질로 치료받아서 유익하게 될 가능성의 평가를 위한 것, 및/또는 피검자가 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증 때문에 입원해야 할 필요성이 있는지에 대한 평가를 위한 것인, 키트로서,

a) 피검자로부터의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 수단;

b) a)에 의해 결정된 sCD14-ST의 양에 기초하여 진단 및/또는 위험 평가를 위한 지침서; 및 선택적으로

c) 적어도 하나의 추가 마커의 양을 결정하는 수단 및 상기 적어도 하나의 추가 마커의 결정된 양에 기초하여 진단 및/또는 위험 평가를 위한 지침서를 포함하는, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 진단을 위한 키트.

58. 항목1 내지 47 중의 어느 하나에 있어서, 상기 사망 위험은 심장 수술 후 또는 피검자가 심장 수술을 받는 중의 사망 위험인, 방법.

59. 항목3에 있어서, 상기 사망 위험은 심장 수술 후 또는 피검자가 심장 수술을 받는 중의 사망 위험인, 방법.

60. 피검자의 심장 수술 후의 사망 위험을 평가하기 위한 마커로서, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택되는 화합물의 사용.

61. 가슴 통증을 가진 피검자에서 심장 가슴 통증과 비심장 가슴 통증을 구별하기 위한 방법으로서,

a) 상기 피검자의 샘플에서, sCD14, sCD14-ST 또는 sCD14-ST 외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 단계,

b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및

c) 상기 b) 단계에서 얻은 결과에 기초하여 심장 가슴 통증의 존재 또는 부재를 결정하는 단계를 포함하는, 심장 가슴 통증 구별 방법.

62. 심장 또는 비심장 가슴 통증을 구별하기 위한 마커로서, sCD14, sCD14-ST 또는 sCD14-ST 외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 사용.

도 1: 건강한 대조군과 각양각색의 피검군에서의 sCD14-ST 혈장 농도;
도 2: 건강한 대조군과 CHF를 가지는 피검자 간을 식별하기 위한 ROC 분석;
도 3: 심장 트로포닌 I(cTnI)의 농도와 비교해 볼 때, 건강한 대조군과 응급실에 있을 때의 불안정 협심증(UAP)를 가지는 피검자들의 sCD14-ST 혈장 농도들;
도 4: 불안정 협심증(UAP)를 가지는 피검자들과 건강한 대조군을 식별하기 위한 sCD14-ST (상부 패널) 및 심장 트로포닌I (cTnI; 하부 패널)의 ROC 커브의 비교;
도 5: 건강한 대조군과 응급실에 있을 때의 비-ST-상승 심근경색(NSTEMI:non-ST-elevated myocardial infarction)를 가지는 피검자들의 sCD14-ST 및 심장 트로포닌I (cTnI) 값;
도 6: 응급실에 있을 때의 비-ST-상승 심근경색(NSTEMI: non-ST-elevated myocardial infarction)를 검출하기 위한 sCD14-ST의 진단 유효성을 위한 ROC 분석: 건강한 대조군과 NSTEMI를 가지고 응급실에 들어간 환자 사이의 AUC 커브의 비교; 문턱치: sCD14-ST= 276 pg/ml; cTnI=0.012 ng/ml;
도 7: 비-ST-상승 심근경색(NSTEMI)의 진단을 위한 sCD14-ST (하부 패널) 및PATHFAST cTnI (상부 패널)의 상호작용 도트 다이어그램(dot diagrams)의 비교;
도 8: 급성 호흡 곤란으로 응급실에 들어간 피검자들에서 급성 비대상성 심부전(ADHF)을 검출하기 위한 sCD14-ST의 진단 유효성을 위한 ROC 분석들; AUC = 1.000 (95% CI: 0.976-1.000); SENS=100%, SPEC=100%; 문턱값=311 pg/ml;
도 9: 급성 비대상성 심부전 (ADHF)과 만성 심부전(CHF) 사이를 식별하기 위한 sCD14-ST의 ROC 커브; AUC = 0.993 (95% CI: 0.951-1.000); SENS= 98.3%, SPEC=95%; 문턱값=354 pg/ml;
도10: 건강한 대조군 대 급성 비대상성 심부전(ADHF; 문턱값 311 pg/ml) 그리고 만성 심부전(CHF) 대 ADHF(문턱값354 pg/ml) 사이를 식별하기 위한 sCD14-ST의 비교;
도 11: NT-proBNP를 비교해 볼 때 생존자와 비생존자에서의 sCD14-ST 값들;
도 12: 사망 예측의 위험에 대한 sCD14-ST의 ROC 커브;
도 13: 사망 예측의 위험에 대한 ROC 커브의 비교;
도 14:NT-proBNP를 비교해 볼 때 생존자와 비생존자에서의 sCD14-ST 값들;
도 15: 대기(elective) 심장 수술 후의 사망 예측의 위험에 대한 sCD14-ST의 ROC 커브;
도 16:대기 심장 수술 후의 사망 예측의 위험에 대한 ROC 커브의 비교;
도 17: 불안정 협심증(UAP) 그리고 비심장 가슴 통증을 가지는 환자에서의 sCD14-ST;
도 18: 심장 가슴 통증 및 비심장 가슴 통증을 식별하기 위한 sCD14-ST의 ROC 커브;
도 19: (A) 연구 군 전체 및 (B) 급성 심부전(AHF)를 가지는 환자에 있어서 sCD14-ST 및 sCD14 수준에 의한 사망 예측을 위한 ROC 커브의 비교;
도 20: 심장병에서의 sCD14-ST 및 sCD14의 방법 비교: 바블록-패싱(Bablok-Passing) 회귀 분석은 sCD14 및 sCD14-ST에 대한 충분한 상관 관계(급성 심부전(AHF)를 가지는 환자에 있어서의 사망 예측)를 보여준다;
도 21: sCD14-ST와 추가 마커들과의 결합: 생존자와 비생존자를 식별하기 위한 ROC 커브.

본 발명은 바람직한 실시예 및 실시예들에 의해 더욱 상세하게 설명될 것이며, 그러나 이러한 실시예들은 단지 예시적인 목적으로 제시된 것이며 그리고 어떤 식으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.

본 발명은, 심혈관 질환 또는 죽상 동맥 경화증의 어떤 임상적 징후는 없으나 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발생할 상승된 위험을 가지는 피검자뿐만 아니라, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지고 있는 피검자에게서 sCD14-ST가 상승한다는, 뜻밖의 발견에 기초한다.

sCD14-ST는 이전에는 심혈관 질환이나 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 분야와 관련이 없는 응용 분야의 마커로서 사용되어 왔다. 소위 현장 진단(point-of-care)으로 불리는 상황뿐만 아니라 표준 실험실 양측에 적용되는, 진단 기술은 패혈증에 유효하게 되었는데, sCD14-ST의 측정에 기초한 시스템을 채용함으로써 손쉽게 평가될 수 있다(EP 1 746 104 A1). sCD14-ST는 식세포의 기능을 평가하기 위해 제안되어왔다 (EP 2 280 279 A1).

현재는 놀랍게도, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물을 결정하고 그리고 이를 상기 화합물의 각 기준량과 비교하는 것이, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증에 대해서, 뛰어난 진단력을 가진다는 것이, 밝혀졌다. 또한, 이러한 화합물이, 심혈관 질환 또는 진단 또는 죽상 동맥 경화증으로 이전에 진단받았던 피검자이거나 또는 심혈관 질환 또는 진단 또는 죽상 동맥 경화증의 임상적 징후가 없는 피검자에 대해서, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 예측하는데 사용될 수 있음이, 밝혀졌다. 또한, 피검자에 대해서 이러한 화합물의 수준을 결정하는 것은 특정 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증 사이를 식별할 수 있게 한다.

특히, 본 발명에 따른 방법은, 피검자에 있어서의 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양의 결정에 근거하여 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 진단하는 수단을 제공한다. 또한, 본 발명의 방법은, 피검자의 전반적 사망 위험을 평가하는 것 뿐만 아니라 피검자에 대한 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 발생 위험을 평가하는 것을 가능하게 한다. 바람직한 실시예에 있어서, 본 발명에 따른 방법은 또한 피검자에 대한 특정 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증 간의 식별을 위한 수단을 제공한다. 다른 대안으로, 상기 방법은, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자가 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로스로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 물질로 치료를 받아서 유익하게 될 지 여부를 평가하는 것을 가능하게 한다. 또한, 본 발명은, 상기 피검자로부터 얻은 샘플에 존재하는 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양에 기초하여, 피검자가 입원할 필요가 있는지를 결정하기 위해서 사용될 수 있다.

바람직한 실시예에 있어서, 본 발명에 따른 방법은,

a) 피검자의 샘플에 있는 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 단계,

b) 상기 a) 단계에서 결정된 상기 화합물의 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및,

c) 상기 b) 단계에서 얻은 결과에 기초하여 진단 또는 위험/유익성을 면밀히 평가하는 단계를 포함한다.

구체적으로는, 전술한 바와 같은 진단 또는 평가는 다른 어떤 임상적 징후 또는 증후군과는 독립적이다.

피검자에 있어서 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 것이 충분하고 그리고 피검자에게 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 진단 및/또는 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발생할 위험의 평가에 대한 상당한 이점을 제공한다는 점이 유리하게 발견되었다. 종래 방법에 대하여(특히 심장 트로포닌(cTn)의 측정), 본 발명에 따른 방법은, 2차 또는 추가 측정(예를 들면, 마커의 상승 및 하강 또는 다른 반응 속도를 결정하기 위한 것)이 필요하지 않은 이점을 가져서, 따라서 보다 효율적인 진단 및/또는 평가를 가능하게 한다.

또한, 본 발명에 따른 방법의 진단 및 예후력은 종래 기술과 비교하여 우수하다. 놀랍게도 발명에 따른 방법이 우수한 감도 및/또는 특이성으로 특징되는 결과를 제공한다는 것이 밝혀졌다.

바람직한 실시예에 있어서, 본 발명에 따른 방법은, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물과 결합하여, 신경 호르몬 마커, 수분 평형 조절기(regulator of water balance)인 마커, 허혈성 심장 마커, 형질 전환 성장 인자-β 사이토카인(cytokine) 슈퍼페밀리, 및/또는 염증 마커(inflammatory marker)로부터 선택되는, 추가 마커를 동시에 결정하고, 이후에 결정된 양들은 결정된 마커 각각의 기준량과 비교된다. 본 발명에 따르면, 놀랍게도, 상기 피검자의 동일한 또는 다른 샘플에 있어서, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물과 결합하여, 신경 호르몬 마커, 수분 평형 조절기인 마커, 허혈성 심장 마커, 형질 전환 성장 인자-β 사이토카인(cytokine) 슈퍼페밀리, 인터루킨 수용체 패밀리, 예를 들어, IL1RL1및 ST2로 알려진 인터루킨 1 유사 수용체 1(nterleukin 1 receptor-like 1), 또는 호중구 젤라티나제-관련 리포칼린 (neutrophil gelatinase-associated lipocalin;NGAL), 및/또는 염증 마커로부터 선택된, 추가 마커가 결정될 때, 피검체에서 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 진단하는 점에서, 피검자가 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 발병 위험이 상승된 상태인지를 확인하는 점에서, 또는 피검자가 입원할 필요가 있는지를 확인하는 점에서, 또는 피검자의 사망 위험을 예측하는 점에서, 보다 높은 정확성이 달성된다는 것이, 밝혀졌다. 다시 말하자면, 이러한 현저하게 높은 예측 값은, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 임상적 징후 또는 명백한 증후군을 가지지 않는 피검자 있어서도, 다른 진단 또는 피검자의 공지의 질병 상태와 독립적으로 그리고 무관하게, 달성된다.

소정 실시예에 있어서, 바람직하게는 상기 적어도 하나의 추가 마커는 신경 호르몬 마커 (예 : NT-proBNP), 허혈성 심장 마커 (예: hsTnT), 염증 마커 (예: C-반응성 단백질, CRP) 및 인터루킨-1 수용체 패밀리 (예 : IL1RL1 / ST2)의 마커로부터 선택될 수 있다. 이러한 실시예에 있어서, 상기 질환 또는 증상은 본 발명의 의미 내에서 질환 또는 상태, 즉 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이다. 그것은 예를 들면 급성 심부전을 포함할 수 있다. 예를 들면, 상기 질환 또는 상태는 또한 급성 관상 동맥 증후군, 급성 심부전, 만성 심부전, 관상 동맥 질환, 협심증, 심근 경색, 허혈성 뇌졸증, 출혈성 뇌졸증, 및/또는 일과성 허혈성 발작으로부터 선택될 수 있다.

여기서 사용된 상기 용어 "수분 평형 조절기(regulator of water balance)"는 유체 흡수와 출력 간의 균형을 조절 및 유지하기 위해 피검자에서의 향상성 제어 메커니즘에 작용하는 물질을 의미한다.

여기서 사용된 용어 "피검자(subject)"는 동물과 관련되며, 바람직하게는 포유류, 그리고 더욱 바람직하게는 인간과 관련된다.

본 발명의 바람직한 실시예에서, 피검자는 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 어떤 증후군도 나타내서는 안 된다. 특별히, 상기 피검자는, 미국 심장병 학회에 의해 정의된 것과 같은 급성 심혈관 이벤트, 예를 들면, 전술한 바와 같이 흉부 불쾌감, 호흡 곤란, ECG 변화 및 그 밖의 다른 것들을 앓아서는 안 된다. 더욱 바람직하게는, 상기 피검자는 이전 24시간 내에 적어도 5분 동안 지속된 하나 이상의 협심증 에피소드를 나타내서는 안 되고, 그리고 종래의 분석이 사용될 때, 양(positive)의 cTn값을 가지지 않거나 또는 이전에 존재하는 것으로 알려지지 않았으며 그리고 공존하는 신체장애에 기여하지 않는 적어도 0-5 mm의 임시적 또는 영구적인 ST-분절 디프레션(segment depression) 중의 어느 하나를 가지지 않아야 한다. 또한, 상기 피검자는 휴식 중 증가하거나 또는 발현하는 또는 이전 48 시간 내의 마지막 에피소트에 의해 급성 심근 경색의 의심이 보증되는, 허혈성 증후군을 나타내서는 안 된다. 심근 허혈은 심전도 (ST-디프레션(depression) = 0 · 1 mV 또는 T-파 반전 = 0 · 1 mV) 또는 증가된 생화학적 마커(크레아틴 키나제 [CK]-MB > 6 ug/L, 고감도 트로포닌T > 13 pg/ml, 정성적 양성cTn 시험(qualitative cTn test positive), 또는 심근 경색의 로컬 진단 한계보다 큰 CK, CK-B 또는 CK MB의 촉매 활성)에 의해 검증되어야 한다.

본 발명에서 의미하는 "심혈관 질환 또는 상태"는 피검자에 있어서의 어떤 생리학적 상황일 수 있으며, 이는 당업자에 의해 피검자의 이상 상태로 인식되는데, 이것은 심혈관 시스템의 변화를 포함하는 현상을 특징으로 하거나 또는 이 현상에 연관된다. 심혈관 질환 또는 상태는, 예를 들면, 급성 관상 동맥 증후군 (ACS), 급성 심부전, 급성 비대상성 심부전 (ADHF), 만성 심부전, 관상 동맥 질환, 협심증, 심근 경색, 허혈성 뇌졸증, 출혈성 뇌졸증 및 일과성 허혈성 발작이다. ACS 환자는 불안정 협심증(UAP) 또는 심근 경색(MI)을 보일 수 있다. MI는 ST-상승 MI (STEMI) 또는 비-ST-상승 MI (NSTEMI) 일 수 있다. ACS 발생 후에 좌심실 기능 장애(left ventricular dysfunction;LVD) 또는 심부전의 발생이 따라올 수 있다. 더욱 선호되는 심혈관 질환 또는 상태는 심장 돌연사 및 뇌졸중 (뇌혈관 사건이나 사고)를 포함하는 서맥성(brady) 또는 빈맥성(tachy) 심장 부정맥을 포함한다. 가장 바람직하게는, 상기 심혈관 합병증은 ACS및 ADHF이다.

바람직한 실시예에 있어서, 상기 방법은 "용인(rule-in)" 또는 "추정(rule-out)" 진단, 각각을 제공하기 위해 사용된다. 본 발명의 의미에 있어서, "용인"은, 피검자에 있어서 소정의 질환 또는 상태가 존재하는 것을 긍정적으로 판단하는 것을 가능하게 하는 진단을 의미한다. 반면 용어 "추정"은 소정 질환 또는 상태를 배제할 수 있는, 진단을 의미한다. 여기서 사용된 것과 같이, "배제"가 환자 퇴원이 가능하도록 하는 상황을 의미하는 반면, 용어 "용인"은 입원의 허락이 필요한 상태를 의미할 수 있다.

본 발명은 또한, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물을 심장 가슴 통증과 비심장 가슴 통증을 구별하기 위한 마커로서, 사용하는 것을 제공한다. 따라서, 몇몇 실시예에 있어서, 본 발명은 현재 가슴 통증을 가지고 있는 피검자에 있어서 심장 가슴 통증과 비심장 가슴 통증을 구별하기 위한 방법을 제공한다.

가슴 통증은, 예를 들어, sCD14, sCD14-ST 또는 sCD14-ST외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양 -바람직하게는 sCD14-ST의 양-이, 예를 들면 200pg/ml 이상, 210 pg/ml 이상, 220 pg/ml 이상, 230 pg/ml 이상, 240 pg/ml이상, 250 pg/ml 이상, 255 pg/ml 이상, 300 pg/ml 이상, 또는 380 pg/ml 이상일 때, 심장 가슴 통증으로 인식된다. 바람직하게는 상기 화합물의 양은 220 pg/ml 이상 또는 255 pg/ml이상이다.

가슴 통증은, 예를 들어, sCD14-ST의 양이 예를 들면, 200 pg/ml, 210 pg/ml, 220 pg/ml, 230 pg/ml, 240 pg/ml, 250 pg/ml, 255 pg/ml, 300 pg/ml, 또는 380 pg/ml를 초과하지 않을 때, 비심장 가슴 통증으로 인식된다. 바람직하게는 sCD14-ST의 양은 220 pg/ml 또는 255 pg/ml를 초과하지 않는다.

유익하게는, 심장 가슴 통증과 비심장 가슴 통증의 구별은, 가슴 통증을 가진 피검자가 처음 존재할 때, 예를 들면 (예를 들면 응급실로의) 입원 단계에서 수행된다. 바람직하게는 트로포닌이 초기에는 음성이다.

몇몇 실시예에서는, 피검자가 심장 수술, 예를 들면 대기(elective) 심장 수술 또는 응급(emergency) 심장 수술을 받는다. 본 발명은 예를 들면, 심장 수술(예를 들면 대기 심장 수술 또는 응급 심장 수술) 후의 피검자에서의 사망 위험을 평가하거나 또는 예측하는 방법을 제공한다. 본 발명은 예를 들면, 심장 수술(예를 들면 대기 심장 수술 또는 응급 심장 수술) 후의 증가된 사망 위험을 가지는 피검자를 확인하는 방법을 제공한다. 따라서, 본 발명은, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물을, 심장 수술(예를 들면 대기 심장 수술 또는 응급 심장 수술) 후의 피검자에서의 사망 위험을 평가하거나 또는 예측하기 위한 마커로서 사용하는 것을 제공한다.

피검자가 심장 수술을 받을 때, 이 방법은 수술 전, 수술 중, 또는 수술 후에 수행될 수 있다. 이 방법은 수술의 1, 2, 3, 4 또는 5일 내, 예를 들면 수술 후 첫번째 날에 수행될 수 있다.

피검자가 심장 수술을 받는 경우, 예를 들면, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 예를 들면, 300 pg/ml 이상, 예를 들면 325 pg/ml 이상, 예를 들면 350 pg/ml 이상, 371 pg/ml 이상, 375 pg/ml 이상, 400 pg/ml 이상, 500 pg/ml 이상, 600 pg/ml 이상, 800 pg/ml 이상, 1000 pg/ml 이상, 1300 pg/ml 이상, 1600 pg/ml 이상, 또는 1900 pg/ml 이상일 때, 증가된 사망 위험이 존재하는 것으로 판단될 수 있다.

상기 용어 "샘플"은 체액 샘플, 분리된 세포 샘플 또는 조직이나 기관으로부터 얻은 샘플을 의미한다. 체액 샘플들은 공지된 기술로 획득될 수 있으며, 그리고 바람직하게는 혈액, 혈장, 혈청 또는 소변 샘플, 더욱 바람직하게는 혈액, 혈장 또는 혈청 샘플을 포함한다. 조직 또는 기관 샘플은 예를 들면 조직 검사에 의해 얻은 조직 또는 기관으로부터 획득될 수 있다. 분리된 세포는 원심 분리 또는 세포 분리(cell sorting)과 같은 분리 기술에 의한 체액, 조직 또는 기관으로부터 얻을 수 있다. 바람직하게는, 세포 샘플, 조직 샘플 또는 기관 샘플은, 여기서 마커로서 언급되는 펩타이드를 발현하고 또는 생산하는, 세포, 조직 또는 기관으로부터 얻어진다.

가장 바람직하게는, 본 발명에 따른 방법 및 사용에 따른 화합물은 sCD14-ST이다.

여기서, 단편 또는 유도체는 예를 들면, sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체 일 수 있다.

여기서, sCD14의 단편 또는 유도체 (예를 들면 sCD14-ST 또는 sCD14-ST이외의 단편 또는 유도체)는,

- 여기서 정의된 단편, 유도체 또는 시퀀스 내에 위치된 에피토프(epitope),

- 여기서 정의된 단편, 유도체 또는 시퀀스를 포함하거나 또는 이들로 구성되는 펩타이드 아미노산 시퀀스에,

특이적으로 결합된 하나 이상의 항체,

또는, 펩타이드 아미노산 시퀀스를 사용함으로써 준비된 하나 이상의 항체와의 특이 결합에 의해서 정의될 수 있다.

sCD14의 단편 또는 유도체 (예를 들면 sCD14-ST 또는 sCD14-ST이외의 단편 또는 유도체)는,

-시퀀스 ID NO:1의 아미노산 17-26 내에 위치한 에피토프에 특이적으로 결합된 항체, 및/또는

-시퀀스 ID NO:1의 아미노산 53-68 내에 위치한 에피토프에 특이적으로 결합된 항체, 및/또는

-시퀀스 ID NO:1의 아미노산 17-26으로 구성된 펩타이드 아미노산 시퀀스에 특이적으로 결합된 항체, 및/또는

-시퀀스 ID NO:1의 아미노산 53-68으로 구성된 펩타이드 아미노산 시퀀스에 특이적으로 결합된 항체, 및/또는

-시퀀스 ID NO:1의 아미노산 17-26을 포함하거나 또는 시퀀스 ID NO:1의 아미노산 17-26로 구성되는 펩타이드를 사용함으로써 준비되는 항체, 및/또는

-시퀀스 ID NO:1의 아미노산 53-68을 포함하거나 또는 시퀀스 ID NO:1의 아미노산 53-68로 구성되는 펩타이드를 사용함으로써 준비되는 항체에 특이적으로 결합될 수 있다.

여기서, sCD14의 단편 또는 유도체 (예를 들면, sCD14-ST 이외의 단편 또는 유도체)는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 10, 15, 16, 20, 30, 40, 50, 51, 52, 60, 68, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 150 또는 200 연속 아미노산을 포함할 수 있다. 바람직하게는 sCD14의 단편 또는 유도체 (예를 들면, sCD14-ST 이외의 단편 또는 유도체)는, 시퀀스 ID NO:1의 적어도 10 연속 아미노산을 포함한다. 소정의 바람직한 실시예에서, 단편 또는 유도체는 시퀀스 ID NO:1의 적어도 20 또는 30 연속 아미노산을 포함할 수 있다. 단편 또는 유도체는 또한 시퀀스 ID NO:1의 적어도 52, 68, 또는 예를 들면 75 연속 아미노산을 포함할 수 있다. 또한, 단편 및 유도체는 시퀀스 ID NO:1의 적어도 90 또는 100 연속 아미노산을 포함할 수 있다.

소정 실시예에서, 단편 또는 유도체는 시퀀스 ID NO: 1의 N-말단 아미노산, 또는 N-말단 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12 (바람직하게는, 예를 들면 11) 아미노산을 포함한다. 다른 대안으로서 단편 또는 유도체는 시퀀스 ID NO: 1의 C-말단 또는 C-말단 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12 (바람직하게 예를 들면 11) 아미노산을 포함한다. 소정 실시예에서, 단편 또는 유도체는 시퀀스 ID NO: 1의 N-말단과 C-말단 어느 것도 포함하지 않는다. 소정 실시예에서, 단편 또는 유도체의 N-말단은 시퀀스 ID NO: 1의 N-말단의 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 150 또는 200 아미노산 내에 놓여 있다. 소정 실시예에서, 단편 또는 유도체의 N-말단은 시퀀스 ID NO: 1의 N-말단으로부터 적어도 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 150 또는 200 아미노산에 놓여 있다. 소정 실시예에 있어서, 단편 또는 유도체의 C-말단은 시퀀스 ID NO: 1의 C-말단의 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 150 또는 200 아미노산 내에 놓여 있다. 소정 실시예에 있어서, 단편 또는 유도체의 C-말단은 시퀀스 ID NO: 1의 C-말단으로부터 적어도 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 150 또는 200 아미노산에 놓여 있다.

소정 실시예에 있어서, 단편 또는 유도체는 예를 들면 시퀀스 ID NO: 1 의 적어도 10 연속 아미노산을 포함하며 그리고 그의 N-말단은 시퀀스 ID NO: 1의 N- 말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

소정 실시예에서, 단편 또는 유도체는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 20 연속 아미노산을 포함할 수 있으며 그리고 그의 N-말단은 시퀀스 ID NO:1의 N-말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

소정 실시예에 있어서, 단편 또는 유도체는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 40 연속 아미노산을 포함하며 그리고 그의 N-말단은 시퀀스 ID NO:1의 N-말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

소정 실시예에 있어서, 단편 또는 유도체는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 60 연속 아미노산을 포함하며 그리고 그의 N-말단은 시퀀스 ID NO:1의 N-말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

소정 실시예에 있어서, 단편 또는 유도체는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 100 연속 아미노산을 포함하며 그리고 그의 N-말단은 시퀀스 ID NO:1의 N-말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

소정 실시예에 있어서, 단편 또는 유도체는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 10 연속 아미노산을 포함하며 그리고 그의 C-말단은 시퀀스 ID NO:1의 C-말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

소정 실시예에서, 단편 또는 유도체는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 20 연속 아미노산을 포함할 수 있으며 그리고 그의 C-말단은 시퀀스 ID NO:1의 C-말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

소정 실시예에서, 단편 또는 유도체는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 40 연속 아미노산을 포함할 수 있으며 그리고 그의 C-말단은 시퀀스 ID NO:1의 C-말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

소정 실시예에서, 단편 또는 유도체는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 60 연속 아미노산을 포함할 수 있으며 그리고 그의 C-말단은 시퀀스 ID NO:1의 C-말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

소정 실시예에서, 단편 또는 유도체는, 예를 들면 시퀀스 ID NO:1의 적어도 100 연속 아미노산을 포함할 수 있으며 그리고 그의 C-말단은 시퀀스 ID NO:1의 C-말단의 10, 20 또는 30 아미노산 내에 위치된다.

다른 실시예에서, 예를 들면 단편 또는 유도체의 N-말단은 시퀀스 ID NO:1의 N-말단으로부터 10 아미노산 내에 위치된다, 그리고 상기 단편 또는 유도체의 C-말단은 시퀀스ID NO:1의 C-말단으로부터 적어도 30, 50 또는 100 아미노산에 위치된다.

다른 실시예에서, 예를 들면 단편 또는 유도체의 N-말단은 시퀀스 ID NO:1의 N-말단으로부터 30 아미노산 내에 위치된다, 그리고 상기 단편 또는 유도체의 C-말단은 시퀀스ID NO:1의 C-말단으로부터 적어도 30, 50 또는 100 아미노산에 위치된다.

다른 실시예에서, 예를 들면 단편 또는 유도체의 N-말단은 시퀀스 ID NO:1의 N-말단으로부터 30 아미노산에 위치된다, 그리고 상기 단편 또는 유도체의 C-말단은 시퀀스ID NO:1의 C-말단으로부터 적어도 30, 50 또는 100 아미노산에 위치된다.

소정 실시예에 있어서, 단편 또는 유도체는, 시퀀스 ID NO:1의 아미노산 1-350, 5-356, 1-10, 1-11, 1-15, 1-16, 1-17,1-20, 1-26, 1-30, 1-40, 1-50, 1-52, 1-53, 1-60, 1-68, 1-80, 1-100, 1-120, 1-140, 1-160, 1-180, 1-200, 1-220, 1-240, 1-260, 1-280, 1-300, 1-320, 1-340, 및/또는 1-356 을 포함할 수 있다.

소정 실시예들에 있어서, 단편 또는 유도체는 시퀀스 ID NO:1의 아미노산 17-26 및/또는 53-68, 또는 시퀀스 ID NO.:1의 아미노산 17-68을 포함할 수 있다.

소정 실시예들에 있어서, 단편 또는 유도체는 예를 들면 아래의 것으로부터 선택되는 2 또는 그 이상의 특성이 결합될 수 있다.:

-비환원 조건 하에서 전기 영동법(예를 들면, SDS-PAGE )에 의해 측정된 것과 같은 13±2 kDa의 분자량을 가지는 점;

-시퀀스 ID NO:1의 위치 1-11의 아미노산 시퀀스를 포함하는 점; 및/또는

-시퀀스 ID NO:1의 위치 53-68의 아미노산 시퀀스로 구성되는 펩타이드를 사용함으로써 준비된 항체 (및/또는 시퀀스 ID NO:1의 아미노산 내 53-68에 위치된 에피토프에 특이적으로 결합된 항체; 및/또는 시퀀스 ID NO:1의 아미노산 53-68을 포함하거나 또는 이로 구성되는 펩타이드 아미노산 시퀀스에 특이적으로 결합된 항체)에 특이적으로 결합하는 점.

다른 실시예에 있어서, 단편 또는 유도체는 아래에서 선택된 하나 또는 그 이상의 특성을 가지지 않는다.:

-비환원 조건 하에서 전기 영동법(예를 들면 SDS-PAGE )에 의해 측정된 것과 같은 13±2 kDa의 분자량을 가지는 점;

-시퀀스 ID NO:1의 위치 1-11의 아미노산 시퀀스를 포함하는 점; 및/또는

-시퀀스 ID NO:1의 위치 53-68의 아미노산 시퀀스로 구성되는 펩타이드를 사용함으로써 준비된 항체 (및/또는 시퀀스 ID NO:1의 아미노산 53-68 내에 위치된 에피토프에 특이적으로 결합된 항체; 및/또는 시퀀스 ID NO:1의 아미노산 53-68을 포함하거나 또는 이로 구성되는 펩타이드 아미노산 시퀀스에 특이적으로 결합된 항체)에 특이적으로 결합하는 점.

시퀀스 ID NO:1의 상기 356-아미노산 시퀀스는, 예를 들면 젠뱅크(Genbank) 입수 번호(accession No) AAH10507.1에 따른 인간 CD14 분자의 공지 시퀀스의 위치 20-375에 대응된다.

시퀀스 ID NO: 1:

여기서 사용된 상기 용어 "sCD14-ST" 는 펩타이드를 의미하며, 이는 또한 "가용성 CD14 서브타입" 또는 "프리셉신(presepsin)으로 공지된다. sCD14-ST 는 sCD14 (가용성 CD14)로부터 유래하는 것이며, 그 중 적어도 2가지 형태의 고분자(49 kDa 및 55 kDa)가 존재하며 그리고 sCD14-ST는 단편이다. sCD14의 단백질 분해는 sCD14-ST의 생성으로 이어진다. sCD14-ST는, 비환원 조건 하에서 전기 영동시, 13 ± 2 kDa의 겉보기 분자량을 갖는다. sCD14에 결합하지 않고 sCD14 ST에 특이적으로 결합하는 항체가 유용하며, 따라서 sCD14 ST와 sCD14 사이의 식별을 가능하게 한다. 다른 한편, sCD14에 결합할 수 있는 항체는 유익하게 배제될 수 있으며 그러나 sCD14 ST를 인식하지 못한다.

여기서 사용된 용어 "펩타이드 또는 폴리펩타이드" 또는 "마커" 는 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물 또는 여기서 기재된 다른 적합한 예측 마커(가장 바람직한 것은 sCD14-ST이다)를 의미하며, 본 발명의 특정 실시예에 따르면, 위에서 각각 설명된 것과 같은, 신경 호르몬 마커, 허혈성 심장 마커, 형질 전환 성장 인자-β 사이토카인(cytokine) 슈퍼페밀리, 인터루킨 수용체 패밀리, 예를 들어, IL1RL1및 ST2로 알려진 인터루킨 1 유사 수용체 1(nterleukin 1 receptor-like 1), 또는 호중구 젤라티나제-관련 리포칼린 (neutrophil gelatinase-associated lipocalin;NGAL), 및/또는 염증 마커를 포함하는 그러나 이에 한정되는 것은 아닌, 마커들의 조합이 결정된다. 상기 용어 "펩타이드 또는 폴리펩타이드" 또는 "마커"는 추가로 위험 마커로서 당 기술에서 공지인 다른 펩타이드를 의미할 수 있다.

신경 호르몬 마커, 수분 평형 조절기인 마커, 허혈성 심장 마커, 형질 전환 성장 인자-β 사이토카인(cytokine) 슈퍼페밀리인 마커들, 인터루킨 수용체 패밀리, 예를 들어, IL1RL1및 ST2로 알려진 인터루킨 1 유사 수용체 1(nterleukin 1 receptor-like 1), 또는 호중구 젤라티나제-관련 리포칼린 (neutrophil gelatinase-associated lipocalin;NGAL), 및 염증 마커가, 독립적인 위험 지표 군을 나타냄이 밝혀졌다. 따라서, 새로운 심혈관 마커로서 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물과 본 발명에서 제공되는 상기 마커군의 마커들과의 조합에 의해, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 진단에 있어서, 또는 피검자에게 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발병할 위험을 평가함에 있어서, 또는 피검자의 사망 위험을 평가함에 있어서, 더욱 증가된 민감도 및 특이성 그리고 따라서 보다 높은 정확성이 야기된다. 또한 증가된 정확성으로 소정의 치료에 의한 혜택을 받을 피검자를 확인하는 것이 가능하다. 또한 증가된 정확성은 만성 심부전과 급성 심부전 사이의 식별과 같은 각종 심혈관 질환 또는 상태 사이의 식별을 가능하게 한다. 추가로, 본 발명에 따른 방법의 정확성은 퇴원할 수 있는 피검자들로부터 입원 필요가 있는 피검자들을 구별하는 수단을 제공한다. 보다 바람직한 실시예에 있어서, 증가된 정확성은 심근 경색을 가지는 피검자(룰-인)와 심근 경색을 앓지 않는 피검자(룰-아웃)를 식별할 수 있게 한다.

이 바람직한 실시예에 따른 본 발명의 방법은, sCD14, sCD14-ST, 또는sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물을 결정하는 것을 포함하며, 그리고 신경 호르몬 마커, 수분 평형 조절기, 허혈성 심장 마커, 형질 전환 성장 인자-β 사이토카인(cytokine) 슈퍼페밀리, 인터루킨 수용체 패밀리, 예를 들어, IL1RL1및 ST2로 알려진 인터루킨 1 유사 수용체 1(nterleukin 1 receptor-like 1), 또는 호중구 젤라티나제-관련 리포칼린 (neutrophil gelatinase-associated lipocalin;NGAL), 및/또는 염증 마커의 양뿐만 아니라 상기 화합물의 양이, 동일 피검자로부터 얻은 동일 또는 다른 샘플에서 결정된다.

신경 호르몬 마커는, 예를 들면, 심방성 나트륨이뇨펩타이드(atrial natriuretic peptide, ANP), 브레인 (B-형) 나트륨이뇨펩티트(brain (B-type) natriuretic peptide , BNP), 또는 NT-proANP, proANP 및 NT-proBNP의 N-말단 단편들로부터 선택될 수 있으며, NT-proBNP가 신경 호르몬 마커로서 바람직하다. 수분 평형 조절 마커는 예를 들면 프리-프로바소프레신(pre-provasopressin)으로부터 유래되는 펩타이드, 바람직하게는 코펩틴(copeptin)으로부터 선택된다, 코펩틴은 프리-프로바소프레신의 C- 말단 부분이다.

cTn은, 예를 들면 허혈성 심장 마커로서, 바람직하게는 심근 경색을 위한 마커로서 결정될 수 있다. 멀티-마커 접근법에서는, 허혈성 심장 마커는 바람직하게 cTnT 또는 cTnI 이며, 그리고 더욱 바람직하게 고감도 cTnT (hsTnT) 또는 고감도 cTnI이며 그리고 상기 허혈성 심장 마커의 기준양은 바람직하게 약 8　pg/ml이다.

상기 염증성 마커는, 예를 들면 C-반응성 프로테인(C-reactive protein,CRP), 인터루킨, 특히 IL-6 및 VCAM 및 ICAM과 같은 접착 분자들로부터 선택될 수 있다. CRP 또는 IL-6 이 상기 염증성 마커로서 결정됨이 바람직하다.

특별한 실시예에 따른 염증성 마커의 사용에 대해서는, C-반응성 프로테인(CRP), 특히 고감도 CRP(hs-CRP)의 양은, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 것에 추가하여, 피검자의 동일 또는 다른 샘플에서 결정되며, 바람직한 실시예는 결정 결과에 대한 상당히 향상된 감도 및 입원되어서 궁극적으로는 개입의 대상이 되는 피검자 또는 사망 위험에 있는 피검자와, 추가 임상 또는 의학적 치료가 고려되지 않는 피검자 사이의 식별의 향상된 특이성을 제공한다. C-반응성 프로테인은, 예를 들면 비율 비탁법(rate nephelometry) 또는 단일 클론 항체(monoclonal-antibody), CRP 면역분석법에 대한 세계 보건 기구의 국제 기준 표준(85/506) (WHO Expert Committee on Biological Standardization. Thirty-seventh report. World Health Organ Tech Rep Ser 1987; 760:21-22.)으로 조절된, 고체 상, 샌드위치-타입 효소면역 분석법(solid-phase, sandwich-type enzyme immunoassay) (예를 들면 IMX, Abbott Laboratories, North Chicago)에 의한, 공지의 방법(로버트(Roberts) 등, Clin Chem 2001, 47: 418-425 [Erratum, Clin Chem 2001;47:980.]　),으로 분석될 수 있다. 분석에 의해 검출된 값의 범위는 전형적으로 0.05 내지 30 μg/ml이다. C-반응성 프로테인에 대한 중앙 정상 값은 전형적으로 0.8 μg/ml이며, 정상 값의 90퍼센트는 <3 μg/ml 이고 99퍼센트는 <10.0 μg/ml이다. 기준량, 즉 ≥ 4 μg/ml의 C-반응성 프로테인의 수준 그리고 특별하게는 >10 μg/ml 의 C-반응성 프로테인 의 수준인 기준량은 입원을 허여하기 위한 문턱값이여야 함이 바람직하다. 멀티-마커 접근법에 있어서, 염증성 마커는 바람직하게 프로칼시토닌(procalcitonin, PCT)이며, PCT의 기준양은 약 0.5　ng/ml, 2.0 ng/ml 및 10 ng/ml이다.

형질 전환 성장 인자-β 사이토카인(cytokine) 슈퍼페밀리 마커는, 예를 들면 TGF-β 아이소포름(isoforms),으로부터 선택될 수 있으며, 바람직하게는 MIC-1 또는 GDF-15 가 결정된다; 형질 전환 성장 인자-β사이토카인 슈퍼페밀리 마커의 기준양은 바람직하게 대략 1.0 ng/ml이다.

인터루킨 수용체 패밀리의 마커로서, 바람직하게는 IL1RL1/ST2 가 선택될 수 있다.

수분 평형 조절 마커는 예를 들면, 프리-프로바소프레인 유래 팹타이드로부터 선택될 수 있고, 바람직하게는 코펩틴이다. 코펩핀의 기준양은 바람직하게 11.25 pmol/L이다.

신장 손상의 마커로서, 바람직하게는 호중구 젤라티나아제-관련 리포칼린 (NGAL)이 선택될 수 있다.

소정 실시예에 있어서, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체의 양은, 신경 호르몬 마커 (예를 들며 NT-proBNP), 허혈성 심장 마커 (예를 들면 hsTnT), 염증 마커(예를 들면 c-반응성 프로테인, CRP) 및 인터루킨-1 수용체 패밀리의 마커(예를 들면 IL1RL1/ST2)로부터 선택되는 적어도 하나의 추가 마커의 양에 추가하여, 결정된다. 이러한 실시예에서, 상기 질환 또는 상태는 본 ㅂ라명의 의미내에서의 질환 또는 상태이며, 즉, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 결화증이다. 그것은, 예를 들면 급성 심부전을 포함할 수 있으며, 예를 들어 상기 질환 또는 상태는 급성 관상 동맥 증후군, 급성 심부전, 만성 심부전, 관상 동맥 질환, 협심증, 심근 경색, 허혈성 뇌졸증, 출혈성 뇌졸증, 및/또는 일과성 허혈성 발작으로 구성되는 군으로부터 선택될 수 있다.

바람직하게, 본 발명에 따른 피검자는 응급 부서, 바람직하게는 입원실, 더욱 바람직하게는 의료 응급 부서에 출석한다.

본 발명의 문맥에 있어서, 상기 용어 "응급 부서(emergency department)"는, 의학적 배경을 가지는 사람, 바람직하게는 의사에게 조언을 구하기 위해, 피검자가 몸이 편치 않음을 느끼거나 또는 피검자가 존재하는 소정 질환이 생길 것에 대한 각 개인의 위험 평가를 찾아서, 그들의 생리적 상태 및/또는 불편함의 기본 원인에 대한 분석을 획득하는 장소를 의미한다. 전형적인 예는 응급 부서 또는 병원 내 응급실, 엠블런스, 의사 업무실 또는 의사 사무실 그리고 피검자의 진단 및/또는 치료에 적합한 다른 기관이다.

본 발명에 따른 방법은 바람직하게, 체외(in vitro) 방법이다. 또한 그것은 전술한 것들에 추가하여 명시적으로 위에서 언급된 단계들을 포함할 수 있다. 예를 들면 추가 단계들은 상기 방법에 의해 얻은 샘플의 전처리 또는 결과의 평가와 관련될 수 있다. 상기 방법은 수동으로 또는 자동화의 도움을 받아 수행될 수 있다. 바람직하게는, 예를 들면 (a) 단계에서의 결정 또는 (b) 단계에서의 컴퓨터로 구현되는 비교를 위한 적당한 로봇 감각 장비(robotic and sensory equipment)에 의해, 단계 (a) 및/또는 (b) 는 모두 또는 부분적으로 자동화의 도움을 받을 수 있다.

여기서 사용된 상기 용어 "평가(evaluating)"는 피검자가 심혈관 질환 또는 상태를 발생시킬 증가된 위험에 있는지를, 피검자가 입원할 필요가 있는지를, 또는 피검자가 특정 치료로 유익하게 될지를 평가하는 것을 의미한다. 당업자라면 이해할 수 있듯 그러한 평가는 통상적으로 피검자의 모두 100%가 확인되도록 보정되는 것은 아니다. 그러나 상기 용어는, 통계적으로 피검자의 상당 일부가 확인될 수 있음(예를 들면 집단(코호트) 연구의 집단(cohort))부분)을 요구한다. 일부가 통계적으로 중요한지 여부는, 예를 들면, 신뢰 구간 결정, p-값 결정, 스튜던트 t-테스트(Student‘s t-test), 맨-휘트니 테스트(Mann-Whitney test) 등의 다양한 공지된 통계 평가 툴을 사용하여 당업자에 의한 추가 노고 없이 결정될 수 있다. 상세한 내용은 도우디 및 웨어든(Dowdy and Wearden) 저, 연구를 위한 통계(Statistics for Research, John Wiley & Sons, New York 1983)에서 발견할 수 있다. 바람직한 신뢰 구간은 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 97%, 적어도 98% 또는 적어도 99%이다. 상기 p-값은 바람직하게, 0.1, 0.05, 0.01, 0.005, 또는 0.0001이다. 보다 바람직하게는 피검자 모집단의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80% 또는 적어도 90% 가 본 발명의 방법에 의해서 제대로 식별될 수 있다.

여기서 사용된 용어 "예측(predicting)" 은 피검자가 미래의 한정된 시간창(time window)(예측창)내에 사망할 것인지에 대한 확률을 평가하는 것을 의미한다. 상기 예측장은 피검자가 예측된 확률에 따라 사망할 간격이다. 상기 예측창은 본 발명에 따른 방법에 의한 분석 시, 피검자의 전체 잔존 수명일 수 있다. 바람직하게는, 그러나 상기 예측장은 심혈관 합병증이 나타난 후(더욱 바람직하게 그리고 정밀하게는, 본 발명의 방법에 의해 분석될 샘플이 획득된 후)1개월, 6개월 또는 1, 2, 3, 4, 5 또는 10년일 수 있다. 당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 그러한 평가는 통상적으로 피검자의 모두 100%가 분석되도록 보정되는 것은 아니다. 그러나 상기 용어는, 상기 평가가 분석될 피검자의 상당 일부분에 대해서는 유효할 것임을 필요로 한다. 일부가 통계적으로 중요한지 여부는, 예를 들면, 신뢰 구간 결정, p-값 결정, 스튜던트 t-테스트, 맨-휘트니 테스트(Mann-Whitney test) 등의 다양한 공지된 통계 평가 툴을 사용하여 당업자에 의한 추가 노고 없이 결정될 수 있다. 상세한 내용은 도우디 및 웨어든(Dowdy and Wearden) 저, 연구를 위한 통계(Statistics for Research, John Wiley & Sons, New York 1983)에서 발견할 수 있다. 바람직한 신뢰 구간은 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 97%, 적어도 98% 또는 적어도 99%. 상기 p-값은 바람직하게 0.1, 0.05, 0.01, 0.005, 또는 0.0001이다. 바람직하게, 본 발명에 의해 예상된 확률은, 상기 예측이 주어진 소정 집단(cohort)의 피검자의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 적어도 90%에 대해서는 정확할 것임을 허용한다.

여기서 사용된 상기 용어 "사망(mortality)" 은 심혈관계 합병증, 폐질환, 폐 색전증, 혈전증, 혈전 색전성 합병증, 뇌졸중, 종양과 악성 질환, 패혈증, 패혈성 쇼크, 출혈 장애, 장기 부전, 급성 신장 질환, 감염성 질환, 위장관 합병증, 췌장염(pancreatits), 류마티스 질환 등에 의해 유발된 사망에 관한 것이다.

여기서 사용된 "사망 위험을 평가하는 것(evaluating the risk of mortality)"은, 본 발명의 방법에 의해 분설될 피검자가 정상, 즉 비상승된 사망 위험을 가지는 피검자 군 모집단과 상당히 증가된 위험을 가지는 피검자 군 중의 어느 하나에 할당되는 것을 의미한다. 본 발명에 따라 언급된 바와 같은 상승된 위험은, 피검자에 대한 미리 설정된 예측창의 위험이, 피검자 모집단에서의 사망에 대한 평균적 위험에 대비하여 상당히 상승된 것을 의미한다. 바람직하게는, 1년의 예측창에 대해, 평균 위험은 0.5 과 3.0%의 범위 이내, 바람직하게는 1.5%이다. 여기서 사용된 것과 같은 상승된 위험은, 1년의 예측창에 대하여, 바람직하게, 3.0%를 초과하는 위험, 바람직하게는 5.0% 초과, 그리고 가장 바람직하게는 3.0% 와 8.0% 이내와 관련된다. 이러한 위험 계층화가 적용될 수 있는 시간 범위(즉, 예후 위험이 예측될 수 있는 기간)는 1일부터 5일이며, 더욱 바람직하게는 1주 내지 2년이고 그리고 1달 내지 1년이다.

일반적으로, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물 또는 적어도 하나의 추가 마커의 양은, 소정의 생리학적 상태와 관련된 기준 마커에 대한 기준 값과 문턱 값을 각각 결정하기 위해서, 건강한 기준 집단 및 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증으로 고생하는 피검자에서 결정된다. 측정값의 결과는 ROC(receiver operating characteristic)분석과 같은 당업자에게 공지된 통게적 방법에 의해 분석된다. 문턱값은 특정 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증에 대해서 또는 피검자의 소정의 위험 상태에 대해서 결정되며, 여기서 상기 문턱값은, 특정 용도에 적합한, 분석 특이도 및/또는 감도를 얻도록 하는 방법으로 선택된다.

바람직한 실시예에서, 상기 문턱값은 모집단에서 값의 분포 관점에서 선택된다. 기준값 및 문턱값을 각각 설정하기 위해서, 예를들면 건강군 및/또는 비건강군의 중앙값, 60, 70, 80, 90, 95, 98번째 또는 99번째 백분위 수를 선택하는 것이 유용할 수 있다.

다음으로, 피검자의 샘플에서 결정된, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양은, 건강한 기준 모집단에서의 상기 화합물의 양과 비교된다. 진단/평가는 소정의 생리적 상태에 대해 설정된 문턱값에 기초하여 이루어진다.

본 발명에 따른 결합된 판단은, 상기 마커의 평행 판단(parallel determinations)이 조사받을 환자로부터 얻은 하나 또는 그 이상의 샘플에서 수행될 수 있도록, 수행되는 것이 바람직하다. 바람직하게, 상기 환자로부터 수집된 하나 또는 그 이상의 샘플들, 예를 들면, 전혈 샘플, 혈장 샘플, 혈청 샘플은, 동시에 또는 바로 순차적으로 하나 또는 그 이상의 테스트로 조사된다. 상기 결정은 특히 바람직하게는 단일 환자 샘플에서 수행된다.

상기 마커의 결합된 판단은, 원칙적으로, 일반 상업용 분석기를 사용하는 공지의 방법에 기초하여, 수행된다. 예를 들면, 자동화된 분석장치가 상기 결정에 이용될 수 있다. 또한, 다른 대안으로서, 응급실, 입원 병동 또는 집중 치료지, 앰블런스 또는 의사의 사무실에서 사용하고 또는 환자 자체 테스트로서 사용하기 위한 신속 분석기(rapid assays ) 또는 현장 치료(Point of Care, POC) 분석 시스템의 분석기들이 사용될 수 있다.

sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물 또는 이 명세서에서 언급된 다른 펩타이트 또는 폴리펩타이드(여기서 마커로서 사용됨)의 양을 결정하는 것은, 바람직하게는 반정량적으로 또는 정량적으로, 양 또는 농도를 측정하는 것과 관련된다. 측정은 직접 또는 간접적으로 이루어질 수 있다. 직접 측정은, 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드 그 자체로부터 얻은 신호 그리고 상기 샘플내에 있는 펩타이드의 분자 수와 직접적으로 상호관계를 가지는 강도에 기초하여, 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드의 양 또는 농도를 측정하는 것과 관련된다. 이러한 신호-때때로 여기서는 강도 신호로 언급됨-는 예를 들면 펩타이드 또는 폴리펩타이드의 특정 물리적 또는 화학적 특성의 강도값을 측정함으로써, 획득될 수 있다. 간접 측정은 2차 성분(예를 들면 펩타이드 또는 폴리펩타이드 그 자체가 아닌 성분) 또는 생물학적 판독 시스템, 예를 들면 측정 세포 반응, 리간드, 라벨 또는 효소 반응 생성물로부터 얻은 신호의 측정을 포함한다.

바람직하게, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양 측정은, 상기와 같은 화합물에 특이적인 폴리클론 항체, 바람직하게는 모노클론 항체와 같은 항체를 사용하여, 수행된다. 바람직한 실시예에 있어서, 상기 항체는 sCD14 또는 CD14에 결합하지 않고 sCD14-ST에 특별히 결합한다. 예를 들어, 항체가 CD14 이차 구조(예를 들면 인간 CD14 내의 아미노산 36 내지 79)내의 b3 및 b4 사이의 영역에서 증가된다면, 이러한 특이성은 획득된다.

본 발명에 따르면, 펩타이드 또는 폴리펩타이드(여기서 마커로서 사용됨)의 양을 결정하는 것은 샘플 내의 펩타이드의 양을 결정하는 모든 공지 수단에 의해 달성될 수 있다. 상기 수단은, 샌드위치, 경쟁 또는 다른 분석 형식 등 각종 형식으로 표지된 분자를 이용할 수 있는 면역분석 장치 및 방법을 포함한다. 상기 분석장치는 펩타이트 또는 폴리펩타이드의 존재 또는 부재를 나타내는 신호를 발현시킬 것이다. 또한, 상기 신호 강도는 바람직하게 샘플 내에 있는 양과 직접 또는 간접적으로(예를 들면, 역비례) 상관관계를 가질 수 있다. 추가의 적합한 방법은, 그것의 정확한 분자 스펙트럼이나 NMR 스펙트럼과 같은 펩타이드 또는 폴리펩타이드에 특이적인 물리적 또는 화학적 특성을 측정하는 것을 포함한다. 상기 방법은, 바람직하게 바이오 센서, 면역 분석 장치에 연결된 광학 장치, 바이오칩, 질량 분광계, NMR-분석기와 같은 분석 장치 또는 크로마토그래피 장치를 포함한다. 또한, 방법은, 마이크로-플레이트 ELISA-기반의 방법들, 완전-자동 또는 로봇 면역 분석법 (AccuTnI, 베크만-쿨터(Beckmann-Coulter) 다이그노틱스; 아키텍트 cTnI 및 AxSYM cTnI, 애보트(Abbott) 다이그노틱스; ADVIA 센타우로스(Centaur) XP cTNI, 바이엘 헬스케어; 이뮬라이트(Immulite) 2500 cTnI, 다이그노틱스 프로덕트 코포레이션(Diagnostics Product Corporation); Elecsys cTnT, 로슈다이그노스틱스 (Roche Diagnostics)), CBA (an enzymatic Cobalt Binding Assay, 예를 들면 로슈-히타치 분석기(Roche-Hitachi analyzers)로 이용가능), LIAISON^®BRAHMS PCT^®, KRYPTOR 랜덤 억세스 분석기(Random Access Analyser), BRAHMS PCT LIA, BRAHMS PCT-Q 및 라텍스 응집 분석기 (예를 들면 로슈-히타치 분석기(Roche-Hitachi^TM analyzers), PATHFAST 화학 발광 효소 면역 시스템 (CLEIA) 로 이용 가능, 미쯔비시 케미칼 메디언스 코포레이션(Mitsubishi Chemical Medience Corporation), Tokyo, Japan)를 포함한다.

바람직하게, 펩타이드 또는 폴리펩타이드(여기서 마커로 사용됨)의 양의 결정은 (a) 세포 반응의 강도가 상기 펩타이드 또는 폴리 펩타이드의 양을 나타내는 상기 세포 반응을 유도할 수 있는 세포를, 적절한 주기 동안 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드에 접촉시키는 단계, (b) 상기 세포 반응을 측정하는 단계를 포함한다. 상기 세포 반응을 측정하기 위해서, 상기 샘플 또는 처리된 샘플은 바람직하게, 세포 배양에 첨가되고 그리고 내부 또는 외부 세포 반응이 측정된다. 상기 세포 반응은 리포터 유전자의 계측 가능한 발현 또는 물질, 예를 들면 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 소분자와 같은 물질의 분비를 포함한다. 발현 또는 물질은 펩타이드 또는 폴리 펩타이드의 양에 상관하는 강도 신호를 생성한다.

또한, 바람직하게, 펩타이드 또는 폴리펩타이드(여기서 마커로 사용됨)의 양의 결정은 시료에서 펩타이드 또는 폴리펩타이드로부터 얻을 특정 강도 신호를 측정하는 단계를 포함한다. 전술한 바와 같이, 이러한 신호는, 펩타이드 또는 폴리펩타이드에 특이한 질량 스펙트럼 또는 NMR 스펙트럼에서 관찰된 펩타이드 또는 폴리펩타이드에 대해 특이한 m/z 변수에서 관찰된 신호 강도일 수 있다.

펩타이드 또는 폴리펩타이드(여기서 마커로 사용됨)의 양의 결정은, 바람직하게, (a) 상기 펩타이드를 특정 리간드에 접촉시키는 단계, (b) (선택적으로) 비-결합 리간드를 제거하는 단계, (c) 결합 리간드의 양을 측정하는 단계를 포함한다. 상기 결합 리간드는 강도 신호를 발생시킬 것이다. 본 발명에 따른 결합은 공유 결합 및 비공유 결합 양자를 포함한다. 본 발명에 따른 리간드는 화합물, 예를 들면, 펩타이드, 폴리펩타이드, 핵산 또는 전술한 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드에 결합하는 소분자 일 수 있다. 바람직한 리간드는 항체, 핵산, 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드에 대한 수용체 또는 결합 파트너 그리고 상기 펩타이드에 대한 결합 도메인을 포함하는 그들의 단편과 같은 펩타이드 또는 폴리펩타이드, 그리고 압타머(aptamer), 예를 들면 핵산 또는 펩타이드 압타머를 포함한다. 이러한 리간드를 제조하기 위한 방법은 이 기술 분야에서 공지되어 있다. 예를 들면, 적당한 항체 또는 압타머의 식별 및 생산은 또한 상업상의 공급업자로부터 제공된다. 당업자는 보다 높은 친화력 또는 특이성을 가지는 이러한 리간드의 유도체를 전개하는 방법에 익숙하다. 예를 들면, 무작위 돌연변이가 핵산, 펩타이드 또는 폴리펩타이드 내로 도입될 수 있다. 그리고 이들 유도체는 이 기술에서 공지된 스크리닝 절차(screening procedure), 예를 들면 파지 디스플레이(phage display) 에 따라 결합을 위한 테스트를 받을 수 있다. 여기서 언급된 항체는, 항원 또는 합텐(hapten)을 결합시킬 수 있는 Fv, Fab 및 F(ab)₂ 단편들과 같은 폴리클론 항체 및 모노클론 항체의 단편 뿐만 아니라, 폴리클론 항체 및 모노클론 항체 양자를 포함한다. 또한 본 발명은 단일 사슬 항체 및 인간화된 하이브리드 항체를 포함하며, 여기서 원하는 항원-특이성을 보이는 비-인간 도너 항체의 아미노산 시퀀스는 인간 수용체 항체의 시퀀스에 결합된다. 상기 도너 시퀀스는 일반적으로 적어도 도너의 항원-결합 아미노산 잔기를 포함할 것이며, 그러나 물론 도너 항체의 아미노산의 구조적 및/또는 기능적으로 관련된 다른 것도 포함할 수도 있다. 이러한 하이브리드는 이 분야에서 공지된 몇몇 방법으로 제조될 수 있다. 바람직하게는, 상기 리간드 또는 에이전트는 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드에 특이적으로 결합한다. 본 발명에 따른 특이적 결합은 상기 리간드 또는 에이전트가 분석될 샘플에 존재하는 다른 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 물질에 실질적으로 결합(교차-반응(cross-react))하지 않아야 함을 의미한다. 바람직하게는, 특이적으로 결합된 펩타이드 또는 폴리펩타이드는 다른 관련 펩타이드 또는 폴리펩타이드 보다 적어도 3배 이상, 더욱 바람직하게는 적어도 10배 이상 그리고 보다 더욱 바람직하게는 50 배 이상 큰 친화도를 가지고 결합되어야 한다. 예를 들어, 비-특이 결합이 웨스턴 볼트(Western Blot)에서의 그의 크기에 따라서 또는 샘플에 그것이 상대적으로 많은 풍부함에 의해서, 그것이 상대적으로 여전히 구별될 수 있고 그리고 명백히 측정된다면, 비-특이 결합은 허용될 수 있다. 상기 리간드의 결합은 이 기술의 어떠한 공지 기술에 의해서 측정될 수 있다. 바람직하게는, 상기 방법은 반정량적 또는 정량적이다. 적당한 방법들은 하기에서 설명된다.

첫째, 리간드의 결합은 예를 들면 NMR 또는 표면 플라즈몬 공명(surface plasmon resonance)에 직접 측정될 수 있다.

둘째, 상기 리간드가 관심의 펩타이드 또는 폴리펩타이드의 효소 활성의 기질(substrate)로서 또한 작용한다면, 효소 반응 생성물은 측정될 수 있다 (예를 들면, 프로테아제의 양이 예를 들면 웨스턴 볼트(Western Blot)에서의 절단된 기질의 양을 측정함으로써, 측정될 수 있다.). 다른 대안으로, 상기 리간드는 효소 특성 자체를 나타낼 수 있으며 그리고 상기 "리간드/펩타이드 또는 폴리펩타이드" 합성물 또는 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드에 의해 결합된 리간드 각각은 강도 신호의 발생에 의해 검출을 가능하게 하는 적당한 기질에 접촉될 수 있다. 효소 반응 생성물의 측정을 위해서, 바람직하게는 상기 기질의 양은 포화이다. 또한 상기 기질은 반응 이전에 검출 가능한 라벨로 표지화될 수 있다. 바람직하게는 상기 샘플은 적당한 주기 동안에 상기 기질에 접촉된다. 적당한 주기는 생성될 생성물의 검출 가능한, 바람직하게는 측정 가능한 양에 필요한 시간을 의미한다. 상기 생성물의 양을 측정하는 대신에, 생성물의 소정(예를 들면 검출 가능한) 양의 출현에 필요한 시간이 측정될 수 있다.

세째, 상기 리간드는 상기 리간드의 검출 및 측정을 가능하게 하는 라벨에 공유적으로 또는 비공유적으로 연결될 수 있다. 라벨링은 직접법 또는 간접법으로 이루어질 수 있다. 직접 라벨링은 상기 라벨을 상기 리간드에 직접 연결(공유적으로 또는 비공유적으로)하는 것을 포함한다. 간접 라벨링은 2차 리간드를 1차 리간드에 결합(공유적으로 또는 비공유적으로)하는 것을 포함한다. 상기 2차 리간드는 상기 1차 리간드에 특이적으로 결합해야 한다. 상기 2차 리간드는 적당한 라벨 및/또는 상기 2차 리간드에 결합하는 3차 리간드의 목표(수용체)에 연결될 수 있다. 2차, 3차 또는 나아가 더 큰 고차 리간드의 사용은 때때로 신호를 증가시키기 위해서 이용된다. 적합한 2차 및 고차 리간드는 항체, 2차 항체 및 공지된 스트렙타비딘-비오틴 시스템(streptavidin-biotin system, Vector Laboratories, Inc.)을 포함할 수 있다. 상기 리간드 또는 기재는 또한 기술분야에서 공지된 하나 또는 그 이상의 태그(tag)로 "태그(꼬리표가 붙여지다, tagged)" 될 수 있다. 이러한 태그는 고차 리간드를 위한 목표가 될 수 있다. 적당한 태그는 비오틴(biotin), 디그옥시제닌(digoxygenin), 히스택(His-Tag), 글루타디온-S-전달효소(Glutathion-S-Transferase), FLAG, GFP, 미크택(myc-tag), 인플루엔자 A 바이러스 해마글루티닌(influenza A virus haemagglutinin, HA), 말토스 결합 단백질 등을 포함한다. 펩타이드 또는 폴리펩타이드의 경우에 있어서, 상기 태그는 바람직하게 N-말단 및/또는 C-말단에 있는 것이 바람직하다. 적당한 라벨은 적당한 검출 방법에 의해 검출 가능한 라벨이다. 전형적인 라벨은 금 입자, 라텍스 구슬, 아크리단(acridan) 에스테르, 루미놀, 루테늄, 효소 활성 라벨, 방사성 라벨, 자기 레이블 (예 : 상자성과 초상 자성 라벨을 포함하여 "자기 구슬"), 형광 라벨을 포함한다. 효소 활성 라벨은 예를 들면, 호스래디쉬 퍼옥시다제, 알칼리성 포스파타제, 베타-갈락토시다제, 루시페라제, 및 이들의 유도체를 포함한다. 검출을 위한 적당한 기재는 디-아미노-벤지딘(di-amino-benzidine, DAB), 3,3'-5,5'-테트라메틸벤지딘, NBT-BCIP (4-nitro blue tetrazolium chloride and 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate, 로슈 다이그노스틱스로부터 이미 만들어진 저장 용액으로 입수할 수 있음), CDP-Star™ (Amersham Biosciences), ECF™ (Amersham Biosciences)를 포함한다. 적합한 효소 -기질 조합은 이 기술 분야에서 공지된 방법(예를 들면, 감광 필름 또는 적당한 카메라 시스템을 사용하여)에 따라 측정될 수 있는, 착색된 반응 생성물, 형광 또는 화학 발광을 초래할 수 있다. 상기 효소 반응을 측정함에 있어서, 위에 주어진 기준이 유사하게 적용된다. 전형적인 형광 라벨은 형광 단백질 (GFP 및 그 유도체와 같은 것), Cy3, Cy5, 텍사스 레드(Texas Red), 플루오레세인(Fluorescein), 그리고 알렉사 염료(Alexa dyes, 예를 들면 Alexa 568)를 포함한다. 또한 형광 라벨은, 예를 들면 몰리큘러 프로브즈(Molecular Probes, 오레건 주)사로부터 입수할 수 있다. 또한, 형괄 라벨로서의 양자점(quantum dots)의 사용도 고려된다. 전형적인 방사성 라벨은 ³⁵S, ¹²⁵I, ³²P, ³³P 등을 포함한다. 방사성 라벨은 예를 들어 감광 필름 또는 형광 이미저(phosphor imager)와 같은 공지되고 적당한 방법에 의해서 검출될 수 있다. 본 발명에 따른 적합한 측정 방법은 침전 (특별히 면역 침전), 전기화학 발광 (전자 생성되는 화학 발광, RIA (radioimmunoassay), ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), 샌드위치 효소 면역 테스트(sandwich enzyme immune tests), 전기화학 발광 샌드위치 면역측정(electrochemiluminescence sandwich immunoassays, ECLIA), 해리-강화 란탄 플루오로 면역 분석(dissociation-enhanced lanthanide fluoro immuno assay, DELFIA), 섬광 근접 분석법(scintillation proximity assay, SPA), 비탁 분석(turbidimetry), 네펠로 측정법(nephelometry), 라텍스-강화 비탁 분석 또는 네펠로 측정법 또는 고체상 면역 검사(solid phase immune tests)를 포함한다. 또한 이 기술 분야에서 공지된 방법(겔 전기 영동법, 2D 겔 전기 영동법, SDS 폴리아크릴아미드 겔 전기영동법 (SDS-PAGE), 웨스턴 블로팅(Western Blotting), 및 질량분석법(mass spectrometry))은, 단독으로 또는 전술한 라벨링 또는 다른 검출 방법과 조합하여 사용될 수 있다.

또한, 펩타이드 또는 폴리펩타이드(여기서 마커로 사용됨)의 양은 바람직하게 아래와 같이 결정될 수 있다: (a) 위에서 규정된 것과 같은 펩타이드 또는 폴리펩타이드를 위한 리간드를 포함하는 고체 지지체를 펩타이드 또는 폴리펩타이드를 포함하는 샘플에 접촉시키는 단계, 및 (b) 상기 지지체에 결합된 펩타이드 또는 폴리펩타이드의 양을 측정하는 단계. 리간드, 바람직하게는 핵산, 펩타이드, 폴리펩타이드, 항체 및 압타머로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드는 바람직하게 고정화된 형태로 상기 고체 지지체 위에 존재한다. 고체 지지체를 제조하기 위한 재료는 당 업계에 잘 알려져 있고, 그리고 특히, 시판의 칼럼 물질, 폴리스티렌 비드, 라텍스 비드, 자성 비드, 콜로이드 금속 입자, 유리 및/또는 실리콘 칩 및 표면, 니트로셀룰로오스 스트립, 멤브레인, 시트, 듀라사이트(duracytes), 반응 트레이의 웰(well) 및 벽, 플라스틱 튜브 등을 포함한다. 상기 리간드 또는 어이전트는 다수의 상이한 캐리어에 결합될 수 있다. 잘 알려진 캐리어의 예는 유리, 폴리스티렌, 폴리염화비닐, 폴리프로필렌, 폴리에틸렌, 폴리카보네이트, 덱스트란, 나일론, 아밀로세스(amyloses), 천연 및 개질된 셀룰로오스, 폴리 아크릴 아미드, 아가로스(agarose) 및 자철광을 포함한다. 상기 캐리어의 성질은 본 발명의 목적에 맞게 수용성 또는 불용성일 수 있다. 상기 리간드를 고정 시키기 위한 적당한 방법은 공지되었으며 그리고, 이에 한정되는 것은 아니나, 이온, 소수성, 공유 결합 상호 작용 등을 포함한다. 또한, 본 발명에 따른 어레이로 "현탁액 어레이"를 사용하도록 고려된다 (Nolan 2002, Trends Biotechnol. 20(1):9-12). 이런 현탁액 어레이에 있어서, 상기 캐리어, 예를 들면 마이크로비드 또는 마이크로스피어는 현탁액에 존재한다. 상기 어레이는, 가능하게는 표지되며, 상이한 리간드를 운반하는 상이한 마이크로비드 또는 마이크로스피어로 구성된다. 예를 들어 고체-페이스 화학 및 광-불안 보호군(solid-phase chemistry and photo-labile protective groups )에 기초하는 이러한 어레이를 생산하는 방법은, 일반적으로 알려졌다 (US 5,744,305).

여기서 사용된 용어 "양(amount)"은 폴리펩타이드 또는 펩타이드(마커로서 사용)의 절대 양, 상기 폴리펩타이드 또는 펩타이드의 상대적 양 또는 농도를 포함하고, 또한, 이들과 상호 관련되는 그리고 이들로부터 유도될 수 있는 어떤 값 또는 매개변수도 포함한다. 이러한 값 또는 매개변수는 상기 펩타이드로부터 직접 측정법에 의해서 얻은 특정 물리적 또는 화학적 성질로부터 얻은 강도 신호 값, 예를 들어 질량 스펙트럼 또는 NMR 스펙트럼에서의 강도 값을 포함한다. 또한, 이 명세서의 어디에서든 언급된 간접 측정에 의해 획득된 모든 값 또는 매개 변수, 예를 들어 특이적으로 결합된 리간드로부터 얻어진 펩타이드 또는 강도 신호에 응답하여 생물학적 판독 시스템으로부터 결정되는 반응 수준도 포함된다. 전술한 양 또는 매개변수와 상관 관계를 가지는 값은 모두 표준 수학 연산에 의해 얻어질 수 있음이 이해된다.

여기서 사용된 용어 "비교하기(comparing)"는 분석될 샘플에 의해 포함되는 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드(여기서 마커로 사용됨)의 양을 이 명세서의 다른 어떤 곳에서 열거된 적당한 기준 소스의 양과 비교하기를 포함한다. 여기서 사용된 비교하기는 대응하는 매개 변수 또는 값의 비교를 의미하는 것으로, 예를 들면 농도가 기준 농도에 비교되고 또는 테스트 샘플에서 얻은 강도 신호가 기준 샘플에 있는 동일 타입의 의 강도 신호에 비교되면서, 절대양이 절대 기준양에 비교되는 것을 의미한다는 것이 이해된다. 본 발명의 방법의 단계(b)에서 언급된 상기 비교는 수동적으로 또는 컴퓨터 도움을 받아 수행될 수 있다. 컴퓨터 도움을 받은 비교를 위해서는, 결정된 양의 값은 컴퓨터 프로그램에 의해 데이터베이스에 저장된 적당한 기준에 대응하는 값에 비교될 수 있다. 또한, 상기 컴퓨터 프로그램은 비교의 결과를 평가한다, 즉 자동적으로 원하는 평가를 적당한 출력 형태로 제공한다. 단계(a)에서 결정된 양과 기준양을 비교함에 기초하여, 피검자가 심장 중재술(cardiac intervention)을 허용할 수 있는지, 즉 피검자가 심장 중재술로 성공적으로 치료받을 수 있는 피검자 군에 속하는 지 여부를 평가하는 것이 가능하다. 따라서, 기준양은, 비교된 양의 차이나 유사성이 그들이 심장 중재술을 허용할 수 있는 피검자 군에 속하는 테스트 피검자인지를 식별하고 또는 그들이 심장 중재술을 허용할 수 없는 피검자 군에 속하는 지를 식별하는 것을 가능하게 하도록, 선택된다.

따라서, 여기서 사용된 용어 "기준양(reference amount)"은, 피검자가 병원 또는 집중 주의 치료 병동에 입원해야 하는 지, 또는 퇴원할 수 있는 지를 평가하는 것을 가능하게 하는, 여기서 사용된 각 마커의 양을 의미한다. 따라서, 상기 기준은 예를 들면, (i) 성공적으로 입원해온 것으로 알려진 피검자, 즉, 사망과 같은 부작용 또는 비적응 치료 요법(non-adapted treatment regimen)에 의해 야기된 부작용의 발생이 없이, 추가 심사 및 추가 검사의 결과에 기초하여 후속 치료 또는 집중 주의 치료의 대상이었던 피검자, 또는 (ii) 병원에 입원하지 않았으며 그리고 사망하거나 비적응 치료 요범에 의해 야기된 부작용이 발생한 것으로 알려진 피검자로부터 유도된다. 또한, 상기 기준양은 문턱양을 한정할 수 있으며, 이에 의해 상기 문턱보다 큰 양은, 추가 검사 및/또는 집중 치료를 위해 병원에 입원해야만 하는 피검자를 나타내며, 반면 상기 문턱보다 적은 양은 집으로 퇴원할 수 없는 피검자에 대한 표지가 된다. 피검자 개개인에 적용될 수 있는 기준양은, 여기서 언급된 폴리펩타이드 또는 펩타이드(여기서 마커로 사용됨)를 위해 사용된 수단 뿐만 아니라, 나이, 성 또는 하위 집단과 같은 다양한 생리학적 매개 변수에 따라서 변할 수 있다. 적합한 기준양은 함께, 즉, 테스트 샘플과 동시에 또는 이에 후속하여, 분석될 기준 샘플로부터 본 발명의 방법에 의해 결정될 수 있다. 문턱으로 작용하는 바람직한 기준양은 정상의 상부 기준 한계(upper reference limit, URL), 즉 외관상 건강한 피검자 집단에서 발견된 생리적인 양의 상부 한계로부터 유도될 수 있다. 소정의 피검자 집단에 대한 URL은 각종 공기 기술에 의해 결정될 수 있다. 적합한 기술은 본 발명의 방법에서 결정되는 펩타이드 또는 폴리펩타이드 양에 대한 모집단의 중앙값을 결정하는 것일 수 있다. sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물에 대한 바람직한 문턱(즉, 기준양)은 하부 검출 한계의 적어도 1 내지 2배이다. 예를 들면, 이 문맥에서 언급된 PATHFAST sCD14-ST 분석의 하부 검출 한계는 바람직하게, 20 pg/ml이다.

따라서, 본 발명의 바람직한 실시예에서, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물-바람직하게는 sCD14-ST-에 대한 문턱양을 한정하는 기준양은, 20 pg/ml이며 그리고 외견상 명백히 건강한 집단의 99번째 백분위 수 이하, 또는 97.5번째 이하 또는 95번째 백분위수 이하 또는90번째 백분위수 이하이다.

기준양 보다 많은 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양은, 더욱 바람직하게, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 결화증을 가지는 피검자 또는 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 생길 상승된 위험을 가지는 피검자를 나타낸다. 더욱 바람직한 실시예에 있어서는, 상기 기준양보다 많은 양은 생리학적 상태가 적절한 치료 및/또는 입원의 개시를 요구하는 피검자의 특징이다. 상기 기준양 보다 많은 상기 화합물의 양은, 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로스로 이루어진 군에서 선택되는 물질로 치료를 받으면 유익하게 될 피검자를 나타낸다. 다른 바람직한 실시예에서는, 상기 기준양 보다 많은 상기 화합물의 양은, 사망 위험이 증가된 상태에 있는 피검자를 나타낸다.

유리하게는, 본 발명의 기초가 되는 연구에서, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물은, 이를 필요로 하는 피검자, 즉, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증으로 고생하는 피검자, 특히 예를 들어 급성 심혈 관계 질환 또는 심부전, 예를 들면 급성 심부전에 의해 영향을 받는 피검자에 대한 심장 중재술의 성공을 평가할 수 있는 신뢰할 만한 예후 바이오마커임이, 밝혀졌다. 본 발명 덕분에, 위험/성공 계층화가, 환자가 심장 중재술을 받기 이전에, 용이하게 실행될 수 있다. 환자가 심장 중재술을 허용할 수 없는 것으로 판명될 경우, 상기 위험하고, 시간 및/또는 비용이 소요되는 집중 치료는 회피될 수 있다. 따라서, 환자가 심장 중재술에 수반하는 역작용 및 심각한 부작용을 받는 것을 방지하는 것 외에, 본 발명의 방법은, 자원이 저장될 것이라는 점에서 의료 시스템에도 유익할 것이다. 여기서 위부분 및 아래에서 설명된 본 발명의 방법에 따라서, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물 양 또는 이를 결정하는 수단은, 피검자가 심장 중재술을 허용하는지를 확인하기 위한 진단 조성물의 제조에도 사용될 수 있다.

바람직한 실시예에 있어서, 본 발명에 따른 방법은 다발성 장기부전 증후군(multiple organ dysfunction syndrome, (MODS)을 가지는 피검자에서의 위험 평가에 사용된다.

추가로 또는 다른 대안으로, 본 발명의 전술한 방법은 집중 주의 병동에서 집중 주의 치료를 받기 쉬운 피검자를 확인하는데 사용될 수 있다. 상기 집중 주의 치료는 추가 진단 절차, 예를 들어, 경흉부 심초음파 (transthoratic, TTE), 경식도 심초음파 (transesophageal echocardiography ,TEE), 복부 초음파 검사, 흉부CT-스캔, 흉부 방사선, 고해상도 CT 스캔, 심장 도관 삽입(cardiac catheterisation, 왼쪽 6 오른쪽 심장), 관류/흡입 신티그라피(perfusion/inhalation scintigraphy), 압축 초음파 검사, 운동 부하 심전도(treadmill exercise ECG), 기관지 내시경, 정맥 조영법(phlebography), 혈관 조영술 및 CT 동맥 조영술 (CT arteriogram, CTA) 또는 뇌의 자기 공명 조영술 (magnetic resonance arteriogram, MRA)를 포함할 수 있다. 심장 질환, 혈전 색전성 합병증, 뇌졸중 또는 폐색전(pulmonary embolismen), 암 및 다른 심장질환의 경우에서, 치료는, PCI, 다른 수술 절차, 예를 들면 색전 제거술, 그리고 특정 약물, 예를 들어 산소, 비타민 K 길항제를 가지는 경구 항응고제(oral anticoagulation with vitamin K antagonists), 미분획 헤파린을 가지는 항응고제(anticoagulation with unfractionated heparins), LMW 헤파린, 다른 항혈전제(anti-thrombotica), 혈전 용해제(thrombolytic drugs), 아세틸살리실산(acetylsalicyclic acid), 클로피디그렐(clopidigrel), 루프 이뇨제 및 기타 이뇨제, 베타 차단제, ACE 억제제, 강심제(digitalis), 칼슘 길항제, 질산염, 스테로이드, 테오필린(theophyllin), 베타-2 미메틱스(mimetics), 다른 기관지 확장제, 비스테로이드성 소염 진통제(NSAIDs), 아편, 항생제 등을 포함한다. 치료 중재술은 수술과 약물의 모든 종류를 포함한다.

바람직하게는, 본 발명의 방법에 의해 피검자에 대해서 선택될 상기 치료법은 약물-기반 치료법이다. 더욱 상세하게는, 상기 약제는, ACE 억제제, 바람직하게는 캡토프릴(captopril), 에날라프릴(enalapril), 포시노프릴(fosinopril), 리시노프릴(lisinopril), 페린도프릴(perindopril), 퀴나프릴(quinapril), 라미프릴(ramipril), 또는 트란돌라프릴(trandolapril), AT-1수용체 차단제, 바람직하게는 칸데사르탄(candesartan), 로사르탄(losartan) 또는 발사르탄(valsartan), β-수용체 차단제, 바람직하게는, 비소프로롤(bisoprolol), 카르베딜롤(carvedilol), 메토프로롤(metoprolol) 또는 숙신산 또는 알도스테론 길항제, 바람직하게는, 스피로노락톤(spironolacton) 또는 에플레논(eplerenone), 락툴로스, 프로바이오틱스 및 항생제에 의한 치료이다.

발명의 바람직한 실시예에 있어서, 항생제는 치료에 사용되는 것이며, 장 내에서 재흡수되지 않는다. 보다 바람직한 실시예에 있어서, 아미노글리코사이드 항생제가 사용된다. 바람직하게는, 네오마이신과 파로마이신이 사용된다.

본 발명에 따라 피검자를 위해 선택되는 다른 바람직한 치료는 중재적 치료이다. 여기서 언급된 중재적 치료는, 예를 들어 PCI, 수술, 및/또는 전기생리적 중재에 의해 피검자에게 물리적 중재를 하는 것에 기초한 치료이다. 보다 바람직하게는 상기 중재적 치료는 심장 재동기화 치료(cardiac resynchronisation therapy, CRT) 또는 제세동기의 주입(implantation of a cardioverter defibrillator, ICD)에 기초한다.

나아가 본 발명에, 발명의 방법을 수행하도록 입원할 피검자를 확인하기 위한 것으로서, 상기 피검자의 샘플에서, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 수단 그리고 상기 양을 기준양에 비교하는 수단을 포함하는 장치를 포함하며, 이에 의해서 적절한 치료의 개시를 필요로하거나 또는 입원해야만 하는 피검자를 나타내는 상승된 위험에 있는 피검자가 확인된다.

여기서 사용된 용어 "장치(device)"는 동작면에서 상호 연결되어서 예측을 가능하게 하는 적어도 하나의 전술한 수단을 포함하는 수단들의 시스템과 관련된다. sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 바람직한 수단 및 상기 비교를 수행하는 수단은, 본 발명의 방법과 관련하여 위에서 개시된다. 동작면에서 상기 수단들을 연결하는 방법은 장치 내에 포함된 수단의 형태에 의존할 것이다. 예를 들면, 상기 펩타이드의 양을 자동적으로 결정하기 위한 수단이 적용되는 경우에, 원하는 결과를 얻기 위해서, 상기 자동적으로 동작하는 수단에 의해 얻어진 데이터가 예를 들면 컴퓨터 프로그램에 의해 처리될 수 있다. 바람직하게는, 이러한 경우에 상기 수단은 단일의 장치로 구성된다. 따라서 상기 장치는 펩타이드 또는 폴리펩타이드의 양을 측정하기 위한 분석 유니트 그리고 평가를 위해 결과 데이터를 처리하기 위한 컴퓨터 유니트를 포함한다. 다른 방법으로, 테스트 스트립과 같은 수단이 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드의 양을 결정하기 위해 사용되는 경우에는, 비교를 위한 수단은 결정된 양을 기준양에 할당하는 제어 스트립 또는 테이블을 포함할 수 있다. 상기 테스트 스트립은 바람직하게는, 여기서 언급된 펩타이드 또는 폴리펩타이드에 특이적으로 결합된 리간드에 연결된다. 상기 스트립 또는 장치는 바람직하게 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드가 상기 리간드에 결합됨을 검출하는 수단을 포함한다. 바람직한 검출 수단 위에서 본 발명의 방법과 관련된 실시예에 관해서 개시된다. 이러한 경우에서, 시스템의 사용자가 수동의 지시 및 해석에 의해 양의 결정의 결과와 그의 진단 또는 예후값을 함께 가져온다는 점에서, 상기 수단은 동작적으로 연결된다. 상기 수단은 이러한 실시예에는 별도의 장치로 나타날 수 있으며, 그리고 바람직하게는, 키트로 함께 포장된다. 당업자라면 별도의 추가 노고 없이 상기 수단을 연결하는 방법을 알 것이다. 바람직한 장치는 전문적인 임상 지식 없이 적용될 수 있는 것으로, 예를 들면 샘플의 적재를 단순히 요구하는 테스트 스트립 또는 전자 장치이다. 상기 결과는 전문 임상의에 의한 임상적 해석을 필요로하는 원본 데이터(raw data)의 출력으로 주어질 수 있다. 바람직하게는 상기 장치의 출력은 그러나 처리되며, 즉 해석을 위해서 임상의를 필요로 하지 않은, 평가된 원본 데이터이다. 더욱 바람직한 장치는 본 발명의 방법에 따라서 위에서 언급된 분석 유니트/장치(예를 들면, 바이오센서, 어레이, 나트륨이뇨 펩타이드를 인식하는 리간드에 연결된 고체 지지대, 플라즈몬 표면 진공 장치, NMR 스펙트럼, 질량 스펙트럼 등) 또는 평가 유니트/장치를 포함한다.

또한, 본 발명은, 피검자의 동일 또는 다른 샘플에서 상기 펩타이드 또는 폴리펩타이드의 양을 결정하는 수단 그리고 상기 양을 기준양과 비교하는 수단을 포함하여, 본 발명의 방법을 수행하도록 된 피검자에 대해서, 사망 위험 또는 또한 급성 심혈관 이벤트를 예측하기 위한 장치에 관한 것이며, 이에 의해 피검자가 사망 위험 상태인지 또는 급성 심혈관 이벤트 상태인지가 예측된다.

또한 상기 피검자의 샘플에서 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물 또는 그의 변종의 양을 결정하는 수단 및 상기 양을 기준양과 비교하는 수단을 포함하여, 본원 발명의 방법을 수행하도록 된, 피검자를 입원시킬지를 결정하기 위한 장치가 예상되며, 이에 의해 상기 피검자가 입원해야 하는 지가 결정된다.

또한, 본 발명은, 피검자의 샘플에서, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 수단 그리고 상기 양을 기준양과 비교하는 수단을 포함하여, 적합한 치료의 개시를 필요로 하는, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 상승된 위험을 평가하는 장치와 관련되며, 이에 의해 이에 의해서 피검자가 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 발생시킬 위험 상태에 있는지가 예측된다.

또한, 본 발명은, 피검자의 샘플에서, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 양을 결정하는 수단 그리고 상기 양을 기준양과 비교하는 수단을 포함하며, 본원 발명의 방법을 수행하도록 된, 피검자의 사망 위험을 평가하기 위한 장치에 관련되며, 이에 의해서 피검자가 사망 위험 상태에 있는 지가 예측된다.

또한, 본 발명에 의해, 본 발명의 방법을 수행하기 위한 키트, 피검자가 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발생할 상승된 위험 상태에 있는지 또는 병원에 입원해야 하는 지를 확인하고, 병원 입원을 결정하고 또는 피검자의 사망 위험을 예측하는 키트가, 예상된다. 상기 키트는 피검자의 샘플에서, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물 또는 그의 변종의 양을 결정하는 수단 그리고 상기 양을 기준양에 비교하는 수단을 포함하며, 여기서 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 발생할 상승된 위험상태에 있거나 또는 입원해야하는 피검자의 확인이 이루어지고, 적절한 치료의 개시 또는 피검자의 병동 입원 또는 집중 주의 치료 병동으로의 입원, 또는 피검자의 사망 위험에 대한 결정이 예측된다.

여기서 사용된 "키트(kit)"는 전술한 수단들의 집합체, 바람직하게는 하나의 용기 내에서 개별적으로 마련된 집합체를 의미한다. 상기 용기는 또한, 바람직하게 본원 발명의 방법을 수행하기 위한 지침서를 포함한다.

전술한 위부분 및 아래에서 이루어진 용어들의 정의 및 설명이, 따라서 이 명세서 및 첨부된 특허 청구 범위에 기술된 모든 실시예에 적용됨을 이해되어야 한다.

1.피검자에 심혈관 질환이 발생할 위험의 평가

sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 결정하는 것 그리고 이를 각각의 기준양과 비교하는 것은, 피검자가 적절한 치료 조치를 요구하는 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발생할 상승된 위험 상피 인지를 확인하기 위한 높은 예측 값을 제공한다. 특히, 이 방법은 또한, 이러한 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 나타내는 어떠한 임상적 징후 또는 증후군이 없는 피검자에게서 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발생할 위험을 결정하는 것을 가능하게 한다.

바람직하게는, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발생의 상승된 위험을 가지는 피검자는, 상기 피검자로부터의 샘플에서 결정된 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물-바람직하게는 sCD14-ST-의 양이 바람직하게는 225 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 240 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 260 pg/ml 이상임을, 특징으로 한다.

전형적으로, 건강한 기준 집단과의 비교는, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 상승된 수준에 대해 문턱을 확인하기 위해서, 적용된다. 건강한 기준 집단에서의 이러한 화합물(가장 바람직하게는 sCD14-ST)의 기준양은 223 pg/ml와 262 pg/ml 사이이다.

2. 피검자에서의 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 진단

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 피검자에서의 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 진단하기 위한 방법이 제공된다. 바람직하게는, 급성 관상 동맥 증후군, 급성 심부전, 만성 심부전, 관상 동맥 질환, 협심증, 심근 경색, 허혈성 뇌졸증, 출혈성 뇌졸증 및 일과성 허혈성 발작으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 심혈관 질환 또는 상태에 대한 진단이 제공된다.

또한 본 발명은, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자의 예후를 평가하는데 유용하다.

바람직한 실시예에 있어서, 상기 방법은 각종 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 구별하는데 사용된다.

a) 만성 심부전의 진단

본 발명에 따라서, 만성 심부전을 진단하기 위한 방법이 제공되며, 여기서 바람직하게는 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물(가장 바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 115 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 150 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 260 pg/ml 이상이다. 다른 실시예에서, 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양은 115 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게는 150 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 260 pg/ml와 2000 pg/ml 사이이다.

b) 협심증의 진단

본 발명의 또 다른 실시예로서, 협심증을 진단하는 방법이 제공되며, 여기서 바람직하게는 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물(가장 바람직하게 는sCD14-ST)의 양이 214 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 216 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 222 pg/ml 이상이다. 다른 방법으로는, 협심증이 있는 피검자에서 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양은 214 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게는 216 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 222 pg/ml와 2000 pg/ml 사이이다.

c) 급성 심부전의 진단

본 발명에 따른 방법에 의해 급성 심부전이 진단될 수 있다. 여기서 급성 심부전을 가지는 피검자에서의 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물-가장 바람직하게는 sCD14-ST ㅡ의 양은 295 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 354 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 455 pg/ml 이상이다. 다른 방법으로는, 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양은 295 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게는 354 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 455 pg/ml과 2000 pg/ml 사이이다.

또 다른 바람직한 실시예에서, 상기 방법은 피검자에 있어서, 급성 비대사성 심부전(ADHF)을 진단하는데 적용된다.

또한, 본 발명에 따른 방법은 성 심부전과 급성 심부전을 구별하는 것을 가능하게 한다. 여기서, 급성 심부전을 가지는 피검자로부터 얻은 상기 샘플에서의 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물-가장 바람직하게는 sCD14-STㅡ의 양은, 바람직하게 340 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게 354 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 455 pg/ml 이상이다.

d) 심근 경색증의 진단

본 발명의 바람직한 실시예에서, 심근 경색증을 진단하기 위한 방법이 제공된다. 심근 경색증은, 피검자로부터 얻은 샘플에서의 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물-가장 바람직하게는 sCD14-STㅡ의 양이 바람직하게는 260 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게는 276 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게는 295 pg/ml 이상 존재하는 것을 특징으로 하는 것이 밝혀졌다. 다른 대안으로서, 심근 경색증을 나타내는 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양이 260 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게는 276 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 295 pg/ml와 2000 pg/ml 사이이다.

본 발명의 발명을 사용함으로써, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물을 사용하는 심근 경색증의 추정(rule-out)이 응급 부서로 들어갈 때에 이미 가능하다. 유리하게는, 본 발명에 따라서, 상기 화합물에 기초한 진단은 즉시 제공될 수 있으며 그리고 하나의 샘플이면 충분하다. 이것은, cTn에서의 상승 및/또는 하강의 검출에 의존하여 적어도 2개의 cTn 측정들을 요구하는, 종래의 cTn 측정들에 대비하여, 특별히 유익하다. 또한, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 진단력 및 예후력은 cTn과 같은 종래 기술의 마커들과 비교하여 우수하다.

또한, cTn 수준은 정확도를 더욱 상승시키기 위해서, sCD14-ST의 양과 결합하여 결정될 수 있다.

3. 피검자의 사망 위험의 평가

본 발명에 따르면, 상승된 사망 위험을 가지는 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자를 확인하기 위한 방법이 제공된다.

여기서, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물- 가장 바람직하게는 sCD14-ST-의 양은 바람직하게 500 pg/ml 이상, 더욱 바람직하게 800 pg/ml 이상, 더욱더 바람직하게 1300 pg/ml 이상이다.

다른 대안으로서, 상승된 사망 위험을 가지는 피검자에서의 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 양은 500 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게는 800 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 1300 pg/ml와 2000 pg/ml 사이이다.

특히, 급성 심부전을 가지고 있는 환자에서의 사망 위험은 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 결정을 사용하여 평가될 수 있다. 심부전을 가지는 환자들, 특히 급성 심부전을 가지는 환자들은 일반적으로 높은 사망을 보인다. sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 농도는 상승된 사망 위험을 가지는 심부전 환자를 확인할 수 있다. sCD14-ST 농도에 의해 평가된 것과 같이 상승된 사망 위험을 가지는 환자들은 일반적으로 생존자들보다도 더 진척된 심부전을 가졌다.

4. 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자가 특정 치료에 의해 유익하게 될 지 여부에 대한 평가

염증과 관련된 부종성 심부전(edematous heart failure)에서 장내 국소성 빈혈(intestinal ischemia) 및 높은 리포다당류(lipopolysaccharid,LPS)의 결과로서, 활성 캐리어-매개 장내 운송(Active carrier-mediated intestinal transport)이 상피 기능 장애(epithelial dysfunction)을 나타내는 급성 심부전에서 감소된다. 이 발견은, 간경변(liver cirrhosis) 및 문맥압 항진증(portal hypertension)을 가지는 환자에 있어서 자발세균 복막염(spontaneous bacterial peritonitis)에서 발견된 것과 같이, 상피 장벽 기능의 붕괴 및 박테리아 침투를 야기하는, 저산소성 및/또는 부종성 소장(edematous intestine)의 관찰과 일치한다.

sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 상승된 수준은 피검자, 특히 심부전을 가지고 있으며, 항생제의 사용으로 유익하게 될 피검자를 나타내는 것이, 밝혀졌다. 따라서, 본 발명에 따른 방법은, 피검자가 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로오스로 구성된 군으로부터 선택된 물질로 치료를 받아서 유익하게 될 지 여부를 평가하기 위한 것이다.

바람직하게, 네오마이신 또는 파로마이신과 같이 장내에서 흡수되지 않는 항생제가 채용된다. 일반적으로, 아미노글리코사이드(aminoglycoside)항생제가 선호된다. 또한, 장의 플로라(flora)를 변화시킬 수 있는, 락툴로스와 프로바이오틱으로의 추가 치료가 이들 피검자에 적용될 때 특히 유리하다.

이 발견에 기초하여, 상기 발명은, 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로스로 구성되는 군으로부터 선택된 물질이, sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 증가된 혈장 수준을 가지는 피검자의 치료에 사용되기 위해 제공된다는, 신규의 치료 개념을 제공한다. 바람직하게, 상기 화합물(바람직하게는 sCD14-ST)의 혈장 수준은 345 pg/ml 이상, 바람직하게는 800 pg/ml이상, 더욱 바람직하게는 1300 pg/ml 이상이다.

본 발명에 따르면, 이는 패혈증의 치료 또는 요독증(uremia) 등과 같은 식세포 기능 장애(phagocyte dysfunction)와 관련된 질병, 혈청 옵소닌(serum opsonin)의 활동 감소, 보체 결손증(complement deficiency), 선천성 식균 작용 장애(congenital phagocytosis dysfunction), 만성 육아 종성 질환(chronic granulomatous disease), 마이엘로퍼옥시다제의 결함(myeloperoxidase defect), 백혈병, 악성 림프종, 세균성 심내막염, 당뇨병 및 간경변의 치료가 아닌, 치료에 사용되는 물질이 제공된다.

5. 개별 피검자의 입원 필요 결정

바람직하게는, 본 발명에 따른 방법은 피검자가 병원 또는 집중 주의 치료 병동에 입원하는 것("rule-in) 또는 퇴원("rule out") 될 수 있는 지를 확인하는 것을 허락한다. 대부분의 경우에 있어서, 상기 피검자는 응급 부서에 참석한다. 상기 방법은 상기 피검자의 샘플에서의 sCD14, sCD14-ST, 또는 sCD14-ST 이외의 sCD14의 단편 또는 유도체로부터 선택된 화합물의 결정에 기초한다. 따라서, 피검자가 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증 때문에 입원할 필요가 있는지를 판단하기 위한 방법이 제공된다.

피검자의 입원은, 화합물(바람직하게 sCD140ST)의 양이 260 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱 바람직하게 276 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게 295 pg/ml 와 2000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게 340 pg/ml와 4000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게는 354 pg/ml와 3000 pg/ml 사이, 더욱더 바람직하게 455 pg/ml와 2000 pg/ml 사이일때, 일반적으로 요구된다.

실시예1

우리는, sCD14-ST의 진단력 및 예후력을 평가하고 그리고 심혈관 질환 또는 상태에서의 퇴원, 병원 입원, 집중 주의 처리, 예방 그리고 치료 방법에 대한 결정을 하도록 인도된 sCD14-ST 농도의 임상적 영향을 전향적으로 조사함으로써, sCD14-ST의 사용이, 응급 부서에 들어와 있는 환자의 응급실에서 결정 및 전반적인 관리뿐만 ·아니라, 심혈관 질환 또는 상태의 발생이 상승된 위험 상태에 있는 피검자의 검출, 급성 관상 동맥 증후군 (ACS), 급성 심근 경색증 (MI), 급성 심부전의 진단 (AHF)을 향상시킨다는 것을, 여기서 증명한다. sCD14-ST는 건강한 개인들로 이루어진 대조군과 상이한 심혈관 질환을 가지는 환자들로부터 얻은 샘플로부터 측정된다.

ㆍ만성 심부전 (HF), n = 40

ㆍ협심증 (AP) 및 불안정 협심증 (UAP), n = 17

ㆍ 비-ST-상승 심근경색 (NSTEMI), n = 29

ㆍ 급성 비대상성 심부전 (ADHF), n = 60

ㆍ 대조군, n = 119

상기 측정된 sCD14-ST 수준은, 상이한 환자군 사이 뿐만 아니라 건강한 대조군과 환자들 사이에도 매우 유의하게 달랐다 (도1).

sCD14-ST는 PATHFAST 프레셉신(Presepsin) 분석기 (Mitsubishi Chemical Medience)를 사용하여 결정된다.

실시예 2

기준 간격

하기의 기준을 준수하는 남자 60명 및 여자 59명(연령 21 내지 69, 연 령 중앙값 42세)을 포함하는 건강한 대조군(기준 집단)이 사용되었다.: 만성 질환자 및 약믈 섭취자는 설문에 의해 제외된다.; 신체 검사, 혈압 평가, ECG 등록 및 경구 당 부하 시험(oral glucose tolerance tests )이 병리학적 소견을 나타내지 않았다.; N-말단 프로-B-형 나트륨이뇨 펩타이드의 혈장 농도는 ≤ 125 pg/ml이었다; TSH, 크레아티닌(creatinine) 및 HbA1c 의 농도는 정상이었다; 심혈관 질환은 도부타민 스트레스 테스트(a dobutamine stress test)를 포함하여 심장 자기 공명 영상에 의해 제외되었다.

sCD14-ST 농도는 대조군의 EDTA 혈장 샘플에서 PATHFAST 분석기를 사용하여 결정 되었다. CLSI(Clinical Laboratory Standard Institute ) 가이드라인 C28-A3 에 따른 99번째 백분위 수 상단 기준 한계(URL; upper reference limit)는 258 (90% CI: 237-276) pg/ml 이었다, 상기 결과는 표 1에 표시된다.

표 1: 건강한 기준 집단의 sCD14-ST 농도 (N=119):

평균	151 (95% CI: 141 - 159) pg/ml
중앙값	143 (95% CI: 133 - 150)
최소	60 pg/ml
최대	311 pg/ml
IQR	115 - 174 pg/ml
99% 상단 기준 제한 (URL)*)	258 (90% CI: 237 - 276) pg/ml

*) 로버스트법 CLSI C28-A3

실시예 3

만성 심부전( CHF )을 가지는 환자들에서의 sCD14 -ST 수준

sCD14-ST 농도는 만성 심부전을 가지는 40명의 환자로부터 획득된 EDTA 혈장 샘플에서 측정되었다 (NYHA(New York Health Association ) 분류 I- III).

상기 sCD14-ST 값은, 대조군과 비교하여 CHF 환자에게서 상당히 (p=0.0004) 상승되었다(표2). 상기 ROC 분석 (참조 표3)은 건강한 대조군과 CHF를 가지는 환자 간의 차별력을 보이는 sCD14-ST의 0.689의 AUC (감도=70%, NPV=86%; 특이도=64%, PPV=41.2%)를 보였다(참조, 도 2). 이 효과는 심장 질환의 발병에 관여하는 근본 염증 과정에 의한 것일 수 있다.

실시예 4

불안정 협심증( UAP )을 가지는 환자에서의 sCD14 -ST 수준

응급실에서 불안정 협심증이 있는 환자에게서 상기 sCD14-ST 값이 측정되었다(표4). 건강한 대조군의 대응 값에 대한 차이는 큰 의미(p<0.0001)를 나타냈는데, 이는 심장 트로포닌I 보다 우수하다 (cTnI; 참조 도 3).

표 4: 불안정 협심증을 가지는 환자에 있어서의 sCD14-ST (UAP, n=17):

평균	475 (95%CI: 380 - 570) pg/ml
중앙값	452 (95%CI: 333 - 602)
최소	223 pg/ml
최대	928 pg/ml
25번째 백분위 수	324 (95% CI: 250 - 447) pg/ml
75번째 백분위 수	604 (95% CI: 460 - 780) pg/ml

이와 병행하여, cTnI를 농도는 PATHFAST cTnI 분석법을 사용하여 측정되었다. 놀랍게도, sCD14-ST는 cTnI과 비교하여 건강한 대조군과 UAP 환자 간의 높은 차별력을 보였다. 이 발견은 sCD14-ST (0.996 대 0.681, P= 0.0001)에 대해 상당히 높은 AUC를 보이는 ROC 분석 (도. 4)에 의해 확인될 수 있다.

상기 결과는, 상기 상승된 sCD14-ST의 농도는 죽상 동맥 경화와 심혈관 질환의 병인에서의 염증 과정을 반영한다, 라는 발견을 설명하며, 이는 급성 심혈관 질환이 없는 환자에서 sCD14-ST의 증가에 의해 설명될 수 있다. 이 발견은, cTnI값이 sCD14-ST에 비해 대조군과 UAP 환자 사이에서 차이가 상당히 적다는 관찰에 의해 강조될 수 있다. 요약하면, CHF 또는 협심증과 같은 급성 심혈관 질환 또는 상태가 없는 환자에서의 sCD14-ST 농도의 증가는 죽상 동맥 경화증 및 심혈관 질환의 발병 기전에서의 염증 효과를 반영한다.

실시예 5

비ST -상승 심근 경색증을 가지는 환자에서의 sCD14 -ST 값들

sCD14-ST 농도는 응급실에 입원한 잇따른 환자의 혈장 샘플에서 PATHFAST 분석법을 사용하여 측정되었다. 혈액 샘플링은 입원 즉시 이루어졌다. 비ST-상승 심근 경색증 (NSTEMI)을 가진 28명의 환자가 포함되었다.

sCD14-ST 측정의 결과는, 환자의 임상 과정 중에 독립적으로 설정된, 피검자의 퇴원 시의 퇴원 진단에 대해서, 해석되었다.

표 5: NSTEMI를 가진 환자에서의 sCD14-ST (N=28):

평균	1001 (95% CI: 640 - 1361) pg/ml
중앙값	721 (95% CI: 600 - 904)
최소	295 pg/ml
최대	4070 pg/ml
25번째 백분위 수	495 (95% CI: 377 - 656) pg/ml
75번째 백분위 수	984 (95% CI: 841 - 2434) pg/ml

응급실에서 NSTEMI를 가진 환자로부터 입원 시 획득된 혈장 샘플에서 측정된 sCD14-ST 값은 표 5에 표시된다.

건강한 대조군과 NSTEMI를 가지는 환자 간의 차이는 매우 유의 (P<0.0001) (표. 6)하였다. cTnI는 동시에 결정되었다. 도 5에 표시된 바와 같이, 두개의 마커가 건강한 대조군과 NSTEMI를 가지는 환자 사이에 매우 큰 차이가 있지만, ROC 분석에서 얻은 AUC 커브의 비교는, sCD14-ST가 높은 변별력을 보인다는 것을 증명한다 (도. 6).

응급실에서 가슴 통증을 가지고 있는 환자에 있어서, NSTEM의 진단을 위한 우수한 진단 정확성은, sCD14-ST의 ROC 파생 문턱 값과 PATHFAST cTnI의 99번째 백분위 수 컷오프 (0.02 ng/m)을 포함함으로써, 확인될 수 있다. 결과가 도 7에 도시되는데, 국제 가이드라인에 따라 건강한 기준 집단의 99번째 백분위 수의 권장된 컷어프 제조자를 이용함으로써 PATHFAST cTnI이 74.1 %의 감도를 보이는 반면 컷어프290 pg/㎖에서 sCD14-ST의 100 %의 민감도를 증명한다. 상기 가이드라인은 초기 측정된 cTn 값이 컷어프 이하이고 그리고 적어도 1개의 값으로 상승 및 /또는 하강의 검출이 99 번째 백분위 수 컷오프 위이면, 상기 가이드라인은 cTn 결정에 입원 후 3 내지 6시간을 추천했다.

실시예 6

급성 심부전의 진단

sCD14-ST 농도는, 급성 호흡 곤란으로 응급실에 입원한 60명의 환자로부터 얻은 혈장 시료에서, PATHFAST 분석법을 사용하여 결정되었으며, 이들에서 300 pg/ml의 문턱 농도를 초과하는 상승된 NT-proBNP의 값에 의해 급성 심부전이 평가되었다. 모든 환자는 ≥361/ml의 NT-proBNP의 혈장 수준을 보여서 급성 심부전의 진단을 확인하였다 (표. 7).

상기 ROC 분석 결과는, 급성 심부전의 "용인(rule-in)" 및 "배제(rule-out)"가, 건강한 대조군과 ADHF를 가지는 환자 사이의 차별을 위한 311pg/ml의 sCD14-ST의 문턱에서, 감도 및 특이도 각각 100 %로 가능함을, 보였다(도. 8). CHF를 가진 환자와 급성 심부전을 가지는 환자 사이의 차별을 위해서, ROC 분석은 311 pg/ml의 sCD14-ST의 문턱 및 0.993의 AUC에서 98.3%의 감도와 95.0%의 특이도를 나타냈다 (도. 9).

이러한 결과는 응급실에서 급성 호흡곤란을 가지는 환자에서 급성 심부전의 "용인(rule-in)" 및 "배제(rule-out)"가, sCD14-ST 혈장 농도를 사용하여 명확하게 가능하다는 것을 보여 주었다 (도 10).

실시예 7

급성 심부전을 가지는 환자에서의 사망 위험 예측

본 연구에 급성 호흡곤란으로 응급실에 입원한 60명의 환자가 포함되었으며, 상기 환자는 300 pg/ml의 문턱 농도를 초과하는 상승된 NT-proBNP값에 의해 급성 심부전이 평가되었고, 환자 중 25명이 이후 2년 동안 사망하였다 (Chen AA, et al. NT-proBNP levels, echocardiographic findings, and outcomes in breathless were patients: results from the ProBNP Investigating of Dyspnea in the Emergency Room (PRIDE) echocardiographic substudy. Euer Heart J 2006;27:839-845).

sCD14-ST는 생존자와 비생존자들 사이에 매우 유의한 차이가 있는 반면, NT-proBNP의 값은 그룹간에 유의한 차이를 보이지 않았다.

이미 일상적인 진단 또는 임상 연구에 설립되어 있는 9개의 염증 및 심혈관 바이오 마커로써 sCD14-ST의 결과 예측 비교를 하기 위한 ROC 분석 결과는 급성 심혈관을 가지는 환자에서 sCD14-ST의 우수한 예후 유효성을 보였다(도 13).

실시예 8

대기 심장 수술 이후의 환자에서의 사망 예측의 위험

대기 심장 수술을 한 49명의 환자로부터 수술 후 1일에 얻은 EDTA 혈장 샘플에서 sCD14-ST 및 NT-proBNP 농도가 측정되었다. 24명의 환자는 이후 2년 동안 사망하였다.

sCD14-ST 및 NT-proBNP는 생존자와 비생존자 사이에서 상당히 달랐으나, NT-proBNP는 이들 군 간에는 미소한 차이만을 보였다 (도 14).

결과 예측을 위한 sCD14-ST(AUC = 0.957, 컷어프 371 pg/ml, 감도 100%, 특이도 = 92.0%)를 NT-proBNP(AUC = 0.895, 컷어프 = 4249 pg/ml, 감도 87.5%, 특이도 84.0%)와의 비교를 위한 ROC 분석의 결과는, 대기 심장 수술을 받은 환자에서 sCD14-ST의 우수한 예후 유효성을 나타냈다 (도 15 및 16).

실시예 9

입원시 심장 및 비 심장 가슴 통증 사이의 차별화

목적 및 방법들

응급실에 입원한 급성 심근 경색증(AMI)로 의심되는 가슴 통증을 가지는 30명의 환자가 본 연구에 포함되었다. 트로포닌은 초기에 음성이었다. AMI, 급성 관상 동맥 증후군 (ACS), 또는 불안정 협심증 (UAP)은, 일련의 트로포닌 측정, 심전도 (ECG) 및 초기 가슴 통증 증후군의 비심장 기원을 확인하기 위한 추가 주의를 포함하는 현재의 가이드라인에 따른 기준 진단 과정에 의해 배제되었다. sCD14-ST는, 입원시 결정되고 그리고 AMI가 없으나 심장 가슴 통증을 가지며 최종 진단에서 UAP가 있는 것으로 된 17명의 환자로 된 군에서 입원시 측정된 sCD14-ST 값과 비교되었다.

결과

UAP를 가지며 초기에 심장 가슴 통증을 가진 환자는 비심장 가슴 통증을 가진 환자에 비교하여 sCD14-ST가 상당히 큰 값을 가짐을 나타냈다 (p<0.0001; 표 9, 도 17).

[표 9]

심장 및 비심장 가슴 통증을 차별하기 위한 수신기 조작기 특성(Receiver Operator Characteristic, ROC) 분석은 대응하는 94.1% 감도 및 96.0% 특이도를 가지는 0.981의 AUC값을 나타냈다 (참조 도 18).

결론

ROC 분석의 결과는 심장과 비심장 가슴 통증 사이의 차별에 대한 sCD14-ST의 높은 차별력을 보여 주었다. ROC 파생 컷오프 값은 255 pg/ml이며 그리고 심장 질환의 진단에 설립된 sCD14-ST의 다른 임계 값에 따랐다.

상기 결과는 255 pg/ml의 컷오프 아래의 sCD14-ST 값을 가지는 가슴 통증 환자가 비심장 가슴 환자에 할당되어서 추가 진단 절차, 예를 들어 일련의 트로포닌 측정, ECG 또는 추가 주의 진단 과정 없이 응급실로부터 퇴원할 수 있음을 보여줬다.

실시예 10

급성 심부전(AHF)를 가지는 환자에서의 사망 예측 위험을 위한 마커로서의 sCD14 및 sCD14-ST

방법들

sCD14와 sCD14-ST 농도는 응급실에 들어간 35명(연령 32-89세, 중앙값 67세; 여성 13명, 남성 22명)의 환자로부터 얻은 베이스-라인 혈장 샘플에서 측정되었다. 급성 심부전(AHF)의 진단은 프라이드 연구(PRIDE) (Januzzi J et al.: The N-terminal Pro-BNP investigation of dyspnea in the emergency department (PRIDE) study. Am J Cardiol 2005;95:948-54)에 따라 컷어프값을 이용하는 NT-proBNP 결정에 의해서 확인되었다. 결과 측정은 28일 이내에 사망이었다. sCD14는 퀀티카인 인간 sCD14 면역 분석법(Quantikine Human sCD14 Immunoassay) (R&D Systems Inc. Minneapolis, MN, USA)를 사용하여 측정되었다. sCD14-ST는 PATHFAST 프레셉신 분석법 (Mitsubishi ChemicalMedience)을 사용하여 측정되었다. NT-proBNP는 ELECSYS proBNP 분석법 (Roche Diagnostics)을 사용하여 측정되었다.

결과

본 연구군의 기준 농도는, NT-proBNP, sCD14, 및 sCD14-ST 각각에 대해 17 내지2264 ng/L, 중앙값 = 208 ng/L, 6677-26000 ng/L, 중앙값 = 12800 ng/L, 그리고 300-8893 ng/L, 중앙값 952 ng/L이다. 15명의 환자는 AHF의 진단을 확인하는 컷어프 수준 300ng/L 위의 NT-proBNP 값을 나타냈다. 28일 후속 동안에 전체 연구 군 중의 5명(14.3%) 그리고 AHF 군의 3명의 환자(20.0%)가 사망했다. 전체 연구 군 및 AFH군에서 생존자와 비생존자 간의 차별을 위한 ROC 분석으로부터 얻은 커브들(AUCs) 아래의 영역은 표 10에 표시되며 그리고 ROC 커브들은 도 19에 도시된다( 패널(A): 전체 연구군; 패널(B): AHF군). 비록 sCD14의 농도가 sCD14-ST의 것 보다 대략 10배 큰 것으로 발견되었지만, 이들 양자 마커는 바블록-패싱 회귀(Bablok - Passing regression)에 의해 증명된 것처럼 충분한 상관 관계를 보여줬다 (도 20). sCD40, sCD14-ST 및 NT-proBNP 용 ROC-AUCs는 AHF군의 생존자와 비생존자 간의 식별력이 전체 연구군의 것 보다 상당히 큰 것임을 보여줬다 (표 10, 도 19).

표 10: ROC 분석 결과

전체 연구군		AHF를 가지는 환자
	AUC	95% CI	AUC	95% CI
BNP	0,6	0,44 - 0,78	0,8	0,53 - 0,96
sCD14	0,7	0,53 - 0,86	0,9	0,64 - 0,99
sCD14_ST	0,8	0,60 - 0,90	0,9	0,62 - 0,99

결론

sCD14 및 sCD14-ST는, sCD14와 sCD14-ST가 심장 마커로서 사용될 수 있음을 증명하는 이전에 설립된 심장 마커 NT-proBNP에 비교하여, 급성 심부전을 가지는 환자에서의 사망 예측 위험에 대한 ROC 분석으로부터 우수한 결과를 보여줬다.

실시예 11

급성 심부전( AHF )을 가지는 환자의 위험 계층화에 대한 다중- 마커 (multi-marker) 접근법

이 연구는 추가 마커와 결합하여 sCD14-ST를 동시에 평가하는 추가 진단 및 예후값을 증명한다. 급성 심부전 환자에 있어서, sCD14-ST는 아래의 것과 쌍을 이루는 조합으로 평가되었다.:

- 인터루킨-1 수용체 패밀리 마커(ST2 - 가용성 ST2의 혈장 농도는 염증성

질환 및 심장 질환, 특히 급성 심부전증에서 증가된다),

- 신경 호르몬 마커 (NT-proBNP),

- 허혈성 심장 마커 (고감도 cTnT, i.e. hsTnT), 또는

- 염증성 마커 (CRP).

방법:

마커 농도는 응급실에 입원하는 급성 심부전을 가지는 60명(50-90세의 연령, 중앙값 77세; 여성 26명, 남성 34명)의 환자에게서 얻은 베이스라인 혈장 샘플에서 측정된다. 급성 심근 경색증 또는 패혈증을 가지는 환자들은 제외되었다. 출력 측정은 2년에서의 사망이었다. ST2는 프레세이지(Presage) ST2 분석법 (Critical Diagnostics, San Diego, CA, USA)을 이용하여 측정되었다. sCD14-ST는 PATHFAST 프레셉신 분석법(MitsubishiChemical Medience)을 사용하여 측정되었다. 아미노-말단 프로 B-타입 나트륨이뇨 펩타이드(NT-proBNP), 고감도 심장 트로포닌 T (hscTnT) 및 C-반응성 프로테인 (CRP) 은 ELECSYS 테스트 (Roche Diagnostics)를 이용하여 측정되었다.

결과:

상기 연구군의 기준선 NT-proBNP 농도는 361-27287 ng/L이었으며, 중앙값(IQR) = 5773 (2207-8488) ng/L 이어서 급성 심부전 진단을 확인한다. 후속 2년의 기간동안, 25명의 환자(41.7%)가 사망했다. 생존자와 비생존자 간을 구별하기 위한 맨-히트니(Mann-Whitney) 독립 샘플 테스트 및 ROC-분석이 표 11에 요약된다.

표 12는 ROC 분석 및 마커들 ST2, CRP, hsTnT 및 NT-proBNP과 sCD14-ST와의 조합에 대한 순 재분류(Net Reclassification) 의 결과를 포함한다. 마커 조합의 동시 평가는 ACU값과 순 재분류 인덱스의 증가에 의해 나타난 바와 같이 예후 유효성을 향상시켰다.

표 11: AHF에서의 사망 예측에 대한 예후 유효성 기준

	생존자, n=35 중앙값 (IQR)	비생존저, n=25 중앙값 (IQR)	p-값	AUC (ROC 분석)
sCD14-ST, ng/L	763(601-1144)	1414(1069-1712)	0.0001	0.794
ST2, μg/L	57(34-83)	79(56-99)	0.0351	0.661
CRP, g/L	13(3.8-25.3)	25.6(8.2-62.5)	0.0704	0.640
hscTnT, μg/L	21(12-33)	31(20-47)	0.0280	0.646
NT-proBNP, ng/L	5453(1901-6919)	6161(3518-9664)	0.1609	0.607

표 12: sCD14-ST와 마커의 결합을 사용한 사망 예측 위험

마커	AUC 단독	AUC 조합	AUC 차이	순 재분류 % 수정 분류
ST2	0.661	0.806	0.145	73.33
CRP	0.640	0.808	0.168	68.97
hscTnT	0.646	0.808	0.162	71.67
NT-proBNP	0.607	0.803	0.196	73.33

결론:

급성 심부전을 가지는 환자에서의 sCD14-ST and ST2, sCD14-ST 및a NT-proBNP, sCD14-ST 및 hsTnT, 또는 sCD14-ST 및 CRP의 동시 평가는 마커 단독의 결정에 비해서 사망 예측 위험을 향상시킨다.

<110> LSI MEDIENCE CORPORATION <120> Use of sCD14 or its fragments or derivatives for risk stratisfaction, diagnosis and prognosis <130> PI10627jp <150> EP 12199701.9 <151> 2012-12-28 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 356 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Thr Thr Pro Glu Pro Cys Glu Leu Asp Asp Glu Asp Phe Arg Cys Val 1 5 10 15 Cys Asn Phe Ser Glu Pro Gln Pro Asp Trp Ser Glu Ala Phe Gln Cys 20 25 30 Val Ser Ala Val Glu Val Glu Ile His Ala Gly Gly Leu Asn Leu Glu 35 40 45 Pro Phe Leu Lys Arg Val Asp Ala Asp Ala Asp Pro Arg Gln Tyr Ala 50 55 60 Asp Thr Val Lys Ala Leu Arg Val Arg Arg Leu Thr Val Gly Ala Ala 65 70 75 80 Gln Val Pro Ala Gln Leu Leu Val Gly Ala Leu Arg Val Leu Ala Tyr 85 90 95 Ser Arg Leu Lys Glu Leu Thr Leu Glu Asp Leu Lys Ile Thr Gly Thr 100 105 110 Met Pro Pro Leu Pro Leu Glu Ala Thr Gly Leu Ala Leu Ser Ser Leu 115 120 125 Arg Leu Arg Asn Val Ser Trp Ala Thr Gly Arg Ser Trp Leu Ala Glu 130 135 140 Leu Gln Gln Trp Leu Lys Pro Gly Leu Lys Val Leu Ser Ile Ala Gln 145 150 155 160 Ala His Ser Pro Ala Phe Ser Cys Glu Gln Val Arg Ala Phe Pro Ala 165 170 175 Leu Thr Ser Leu Asp Leu Ser Asp Asn Pro Gly Leu Gly Glu Arg Gly 180 185 190 Leu Met Ala Ala Leu Cys Pro His Lys Phe Pro Ala Ile Gln Asn Leu 195 200 205 Ala Leu Arg Asn Thr Gly Met Glu Thr Pro Thr Gly Val Cys Ala Ala 210 215 220 Leu Ala Ala Ala Gly Val Gln Pro His Ser Leu Asp Leu Ser His Asn 225 230 235 240 Ser Leu Arg Ala Thr Val Asn Pro Ser Ala Pro Arg Cys Met Trp Ser 245 250 255 Ser Ala Leu Asn Ser Leu Asn Leu Ser Phe Ala Gly Leu Glu Gln Val 260 265 270 Pro Lys Gly Leu Pro Ala Lys Leu Arg Val Leu Asp Leu Ser Cys Asn 275 280 285 Arg Leu Asn Arg Ala Pro Gln Pro Asp Glu Leu Pro Glu Val Asp Asn 290 295 300 Leu Thr Leu Asp Gly Asn Pro Phe Leu Val Pro Gly Thr Ala Leu Pro 305 310 315 320 His Glu Gly Ser Met Asn Ser Gly Val Val Pro Ala Cys Ala Arg Ser 325 330 335 Thr Leu Ser Val Gly Val Ser Gly Thr Leu Val Leu Leu Gln Gly Ala 340 345 350 Arg Gly Phe Ala 355

Claims (24)

1. a) 피검자의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 단계,
   b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및
   c) b)단계에서 얻은 결과에 기초하여 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 발병에 대한 피검자의 개별적인 위험을 평가하는 단계를 포함하는,
   심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증 발병에 대한 피검자의 위험을 평가하는 정보를 제공하는 방법.
2. a) 피검자의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 단계,
   b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및
   c) b)단계에서 얻은 결과에 기초하여 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 존재 또는 부재를 결정하는 단계를 포함하는,
   피검자에 대한 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 진단하기 위한 정보를 제공하는 방법.
3. a) 피검자의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 단계,
   b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및
   c) b)단계에서 얻은 결과에 기초하여 피검자의 사망 위험을 결정하는 단계를 포함하는,
   심혈관 질환이나 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자에서 사망 위험을 평가하기 위한 정보를 제공하는 방법.
4. 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자가 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로오스로 구성된 군으로부터 선택된 물질로 치료를 받아서 유익하게 될지 여부를 평가하는 방법으로서,
   a) 피검자의 샘플에서, sCD14-ST의 양을 결정하는 단계,
   b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및
   c) 상기 b) 단계에서 얻은 결과에 기초하여 상기 유익하게 될지 여부를 평가하는 단계를 포함하는, 방법.
5. 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증 때문에 피검자가 입원할 필요가 있는지 여부를 결정하는 방법으로서,
   a) 피검자의 샘플에서, sCD14-ST의 양을 결정하는 단계,
   b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및
   c) 상기 b) 단계에서 얻은 결과에 기초하여 상기 입원할 필요가 있는지 여부를 결정하는 단계를 포함하는, 방법.
6. 청구항 1 내지 청구항 5 중의 어느 하나에 있어서,
   a') 동일 개인의 동일 또는 다른 샘플에서 적어도 하나의 추가 마커를 결정하는 단계,
   b') a')에서 결정된 상기 적어도 하나의 추가 마커의 양을 상기 추가 마커의 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및
   c') b)단계에서 상기 sCD14-ST에 대해 획득된 결과와 상기 b')단계에서 상기 적어도 하나의 추가 마커를 위해 획득된 결과를 결합함으로써 각각의 c)단계를 수행하는 단계를 더욱 포함하는 방법.
7. 청구항 6에 있어서, 상기 적어도 하나의 추가 마커는 신경 호르몬 마커, 수분 균형 조정기, 허혈성 심장 마커, 사이토카인, 염증성 마커 및 세포 부착 분자로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 방법.
8. 청구항 1 내지 청구항 5 중의 어느 하나에 있어서, 상기 피검자는, 급성 관상 동맥 증후군, 급성 심부전, 만성 심부전, 관상 동맥 질환, 협심증, 심근 경색, 허혈성 뇌졸증, 출혈성 뇌졸증 및 일과성 허혈성 발작으로 이루어진 군으로부터 선택되는 심혈관 질환 또는 상태의 하나 또는 그 이상의 증후군을 보이는 것인, 방법.
9. 청구항 1 내지 청구항 5 중의 어느 하나에 있어서, 상기 심혈관 질환 또는 상태는, (i) 만성 심부전, 상기 sCD14-ST의 양이 115 pg/ml 이상이며;
   (ii) 불안정 협심증, 상기 sCD14-ST의 양이 214 pg/ml 이상이며,
   (iii) 급성 심부전, 상기 sCD14-ST의 양이 295 pg/ml 이상이며,
   (iv) 심근 경색, 상기 sCD14-ST의 양이 260 pg/ml 이상인,
   것 중의 어느 하나인, 방법.
10. 청구항 1 내지 청구항 5 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 상승된 사망 위험을 가지는, 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자를 확인하기 위한 방법이며, 상기 sCD14-ST의 양이 500 pg/ml 이상인, 방법.
11. 청구항 1 내지 청구항 5 중의 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증의 임상 징후가 없는 피검자에게 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 생길 위험을 평가하기 위한 것인, 방법.
12. 삭제
13. i) 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지며 그리고 ii) sCD14-ST의 증가된 혈장 수준을 갖는, 피검자의 치료에 사용하기 위한 것으로 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로스로 이루어진 군에서 선택되는 물질.
14. 청구항 13에 있어서, 상기 증가된 혈장 수준이 345 pg/ml 이상인 것인, 물질.
15. 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 진단하기 위한 키트로서,
    a) 피검자로부터의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 수단;
    b) a)에 의해 결정된 sCD14-ST의 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서; 및 선택적으로
    c) 적어도 하나의 추가 마커의 양을 결정하는 수단 및 상기 적어도 하나의 추가 마커의 결정된 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서를 포함하는, 키트.
16. 청구항3에 있어서, 상기 사망 위험은 심장 수술 후 또는 피검자가 심장 수술을 받는 중의 사망 위험인, 방법.
17. 삭제
18. 가슴 통증을 가지고 있는 피검자에서 심장 가슴 통증과 비심장 가슴 통증을 구별하기 위한 정보를 제공하는 방법으로서,
    a) 상기 피검자의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 단계,
    b) a)단계에서 결정된 양을 적어도 하나의 기준량과 비교하는 단계, 및
    c) 상기 b) 단계에서 얻은 결과에 기초하여 심장 가슴 통증의 존재 또는 부재를 결정하는 단계를 포함하는, 상기 방법.
19. 삭제
20. 삭제
21. 피검자에게 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증이 발병할 위험을 평가하기 위한 키트로서,
    a) 피검자로부터의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 수단;
    b) a)에 의해 결정된 sCD14-ST의 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서; 및 선택적으로
    c) 적어도 하나의 추가 마커의 양을 결정하는 수단 및 상기 적어도 하나의 추가 마커의 결정된 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서를 포함하는, 키트.
22. 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자가 사망할 위험을 평가하기 위한 키트로서,
    a) 피검자로부터의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 수단;
    b) a)에 의해 결정된 sCD14-ST의 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서; 및 선택적으로
    c) 적어도 하나의 추가 마커의 양을 결정하는 수단 및 상기 적어도 하나의 추가 마커의 결정된 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서를 포함하는, 키트.
23. 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증을 가지는 피검자가 항생제, 프로바이오틱스 및 락툴로스로 이루어진 군에서 선택되는 물질로 치료받아서 유익하게 될 가능성의 평가를 위한 키트로서,
    a) 피검자로부터의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 수단;
    b) a)에 의해 결정된 sCD14-ST의 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서; 및 선택적으로
    c) 적어도 하나의 추가 마커의 양을 결정하는 수단 및 상기 적어도 하나의 추가 마커의 결정된 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서를 포함하는, 키트.
24. 피검자가 심혈관 질환 또는 상태 또는 죽상 동맥 경화증 때문에 입원해야 할 필요성이 있는지에 대한 평가를 위한 키트로서,
    a) 피검자로부터의 샘플에서 sCD14-ST의 양을 결정하는 수단;
    b) a)에 의해 결정된 sCD14-ST의 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서; 및 선택적으로
    c) 적어도 하나의 추가 마커의 양을 결정하는 수단 및 상기 적어도 하나의 추가 마커의 결정된 양에 기초하여 '진단', 또는 '위험 평가', 또는 '진단 및 위험 평가'를 위한 지침서를 포함하는, 키트.

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