KR102155187B1 - Composition for functional food having atopic dermatitis treatment property and antioxidant property and method for manufacturing the same - Google Patents

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Abstract

본 발명은 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 함유하는 복합성 혼합물을 유효 성분으로 하는 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물에 관한 것이다. 이를 통해 본 발명은 독성을 유발하지 않고, 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물을 제공한다.The present invention is a health functional food having anti-oxidative and atopic dermatitis treatment ability as an active ingredient comprising a complex mixture containing Nandamban, Jajuk salt, Garlic extract, Malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract It relates to the composition. Through this, the present invention provides a composition for a health functional food that does not cause toxicity and has atopic dermatitis treatment and antioxidant activity.

Description

아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물 및 이의 제조 방법{COMPOSITION FOR FUNCTIONAL FOOD HAVING ATOPIC DERMATITIS TREATMENT PROPERTY AND ANTIOXIDANT PROPERTY AND METHOD FOR MANUFACTURING THE SAME}A composition for a health functional food having atopic dermatitis treatment and antioxidant activity, and a manufacturing method thereof {COMPOSITION FOR FUNCTIONAL FOOD HAVING ATOPIC DERMATITIS TREATMENT PROPERTY AND ANTIOXIDANT PROPERTY AND METHOD FOR MANUFACTURING THE SAME}

본 발명은 난담반을 함유하는 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for a health functional food having anti-oxidative ability and atopic dermatitis treatment ability containing Nandamban and a method for producing the same.

피부는 인체에서 가장 큰 조직으로 체온조절, 분비, 배설, 흡수 등의 다양한 작용을 하고, 특히 몸의 가장 바깥쪽에 위치하며 외부로부터 물리적, 화학적, 생물학적으로 인체를 보호하는 보호의 기능을 가지고 있다. 외부의 환경적 스트레스에 지속적으로 노출되는 피부는 세포막지질의 과산화, 면역 약화, 염증 반응, 세포외 기질의 붕괴 등으로 인하여 피부 탄력의 저하, 수분의 손실 등이 일어나게 되고 결국 피부의 노화를 일으키게 된다. 이러한 피부의 노화를 방지하고 손상된 피부의 기능을 회복하기 위하여 비타민, 미네랄 및 항산화 물질 등을 섭취하거나 피부에 직접 도포하는 것은 피부의 정상적인 상태를 유지하는 데 있어서 매우 중요하다. The skin is the largest tissue in the human body and performs various functions such as body temperature regulation, secretion, excretion, and absorption. It is located on the outermost part of the body and has the function of protecting the human body physically, chemically, and biologically from the outside. In the skin that is constantly exposed to external environmental stress, skin elasticity decreases and moisture loss occurs due to peroxidation of cell membrane lipids, weakening of immunity, inflammatory reaction, and disruption of extracellular matrix, resulting in skin aging. . In order to prevent aging of the skin and restore the function of damaged skin, ingesting vitamins, minerals, antioxidants, etc. or directly applying it to the skin is very important in maintaining the normal condition of the skin.

아토피성 피부염은 주로 유아기 또는 소아기에 발병하며 만성적으로 홍진, 부종, 소양증, 표피박리 및 피부 건조증을 동반하는 염증성 피부질환이다. 발병원인은 환경적 요인, 유전적 소인, 면역학적 반응 등이 추정된다. 인구통계학적 연구에서 아토피성 피부염은 산업화된 국가 인구의 0.5~1%(유아의 경우, 5~10%)에서 발병하며 공업지역 및 건조한 지역에 거주하는 주민의 발병률이 높다고 보고되었다. Atopic dermatitis is an inflammatory skin disease that occurs mainly in infancy or childhood and is chronically accompanied by redness, edema, pruritus, epidermal peeling, and dry skin. The cause of the disease is estimated from environmental factors, genetic predisposition, and immunological responses. In demographic studies, atopic dermatitis is reported to occur in 0.5 to 1% of the population of industrialized countries (5 to 10% for infants), and the incidence of residents living in industrial and dry areas is high.

아토피성 피부염에 관여하는 인자에는 IgE, TNF-α 및 IL-1β와 같은 염증매개 사이토카인(cytokines), 히스타민(histamine), 프로스타글란딘(prostaglandin) 및 류코트리엔(leukotriene)과 같은 지질성 염증매개인자, COX-2(cyclooxygenase-2), LO(lipoxygenase) 및 iNOS(inducible nitric oxide synthase) 같은 염증유발 효소 등이 있다. 아토피성 피부염에 관여하는 면역세포로는 비만세포(mast cells), 대식세포(macrophage), 각종 림프구(lymphocyte) 등이 있다. Factors involved in atopic dermatitis include inflammatory mediator cytokines such as IgE, TNF-α and IL-1β, histamine, prostaglandin, and lipid inflammatory mediators such as leukotriene, COX. Inflammatory enzymes such as -2 (cyclooxygenase-2), LO (lipoxygenase), and iNOS (inducible nitric oxide synthase). Immune cells involved in atopic dermatitis include mast cells, macrophages, and various lymphocytes.

현대의학이 발달하였지만 증가 추세에 있는 아토피성 피부질환에 대한 완치 의학 기술은 아직 없고, 증상완화 위주의 치료(국소 스테로이드, 국소 면역조절제, 전신 스테로이드, 전신 면역억제제, 항히스타민제, 인터페론 감마 등)가 주로 행해지고 있다. 따라서 환자들은 합성의약품의 부작용이 없고 질환의 재발이 없는 근본적인 치료를 위하여 천연물질에 대한 기대를 많이 하고 있다.Although modern medicine has developed, there is no cure medical technology for atopic skin disease, which is on the rise, and treatments focusing on symptom relief (topical steroids, local immunomodulators, systemic steroids, systemic immunosuppressants, antihistamines, interferon gamma, etc.) are available. It is mainly done. Therefore, patients are expecting a lot of natural substances for fundamental treatment with no side effects of synthetic drugs and no recurrence of disease.

한편, 담반은 황산구리로 이루어진 황산염 광물의 일종으로, 주성분으로 CuSO4·5H2O를 함유하는 천연 광물이며, 상기 주성분과 그 외 미량의 부존 미네랄이 혼합되어 있는 청색의 결정이다. 담반은 광물성 생약이므로 독성의 염려가 있어, 실제 약용으로 이용하기에는 한계가 있었다. On the other hand, gallbladder is a kind of sulfate mineral composed of copper sulfate, a natural mineral containing CuSO 4 ·5H 2 O as a main component, and is a blue crystal in which the main component and other trace minerals are mixed. Gallbladder is a mineral herbal medicine, so there is a risk of toxicity, so there is a limit to its practical use.

따라서, 세포독성을 유발하지 않아 안전성 및 유효성이 우수하면서도, 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능이 우수한 건강 기능성 식품용 조성물에 대한 대중적 수요가 증가하고 있다.Therefore, there is an increasing public demand for a composition for a health functional food having excellent safety and efficacy because it does not induce cytotoxicity, and has excellent atopic dermatitis treatment and antioxidant activity.

본 발명의 하나의 목적은 독성을 유발하지 않으면서도, 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물을 제공하는 것이다.One object of the present invention is to provide a composition for a health functional food that does not cause toxicity and has atopic dermatitis treatment and antioxidant activity.

본 발명의 다른 목적은 난담반을 함유하는 복합성 혼합물에 대한 안전성 및 유효성을 우수한 정도로 달성할 수 있고, 독성을 유발하지 않으면서도, 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물의 산업적으로 유용한 제조 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to achieve the safety and effectiveness of the complex mixture containing Nandamban to an excellent degree, and without causing toxicity, but without causing atopic dermatitis treatment and antioxidant activity of a composition for health functional foods It is to provide a useful manufacturing method.

본 발명의 일 구현예는 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 함유하는 복합성 혼합물을 유효 성분으로 하는 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물에 관한 것이다.One embodiment of the present invention has a therapeutic and antioxidant activity for atopic dermatitis using a complex mixture containing Nandamban, Jajuk salt, Garlic extract, Malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract as an active ingredient. It relates to a composition for health functional food.

상기 난담반은 가열 및 탈수 처리한 담반 분말 및 계란의 난백을 1:0.2 내지 1:1의 중량비로 혼합한 것일 수 있다.The Nandamban may be obtained by mixing heated and dehydrated gallbladder powder and egg white of eggs in a weight ratio of 1:0.2 to 1:1.

본 발명의 다른 구현예는 전술한 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물 제조 방법에 관한 것이다.Another embodiment of the present invention relates to a method for preparing a composition for a health functional food having the above-described atopic dermatitis treatment ability and antioxidant ability.

상기 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물 제조 방법은 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 각각 준비하는 단계; 및 상기 각각의 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 혼합하여 복합성 혼합물을 제조하는 단계; 를 포함한다.The method for preparing a composition for a health functional food having atopic dermatitis treatment and antioxidant activity includes preparing Nandamban, Jajuk salt, garlic extract, malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract, respectively; And preparing a complex mixture by mixing the respective Nandamban, Jajuk salt, garlic extract, malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract; Includes.

상기 준비하는 단계에서, 난담반의 준비는 담반을 100℃ 내지 150℃ 에서 가열하여, 함수율이 0.001% 내지 5%가 되도록 탈수한 후, 상온에서 완전 냉각 후에 분말화하여 담반 분말을 제조하고, 상기 담반 분말에 계란의 난백을 1:0.2 내지 1:1의 중량비로 혼합한 것일 수 있다.In the preparing step, in the preparation of the Nandamban, the gallbladder is heated at 100°C to 150°C, dehydrated so that the moisture content is 0.001% to 5%, and then completely cooled at room temperature, and then powdered to prepare the damban powder. It may be obtained by mixing the egg white of the egg with the gallbladder powder in a weight ratio of 1:0.2 to 1:1.

상기 복합성 혼합물은 난담반 0.1 중량% 내지 50 중량%, 자죽염 1 중량% 내지 90 중량%, 마늘 추출물 1 중량% 내지 20 중량%, 맥아 추출물 0.5 중량% 내지 40 중량%, 금은화 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량%, 포공영 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량%, 유근피 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량% 및 백강잠 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량%를 함유하는 것일 수 있다.The complex mixture is Nandamban 0.1% to 50% by weight, Jajuk salt 1% to 90% by weight, 1% to 20% by weight of garlic extract, 0.5% to 40% by weight of malt extract, from 0.5% by weight of gold and silver extract It may contain 5% by weight, 0.5% to 5% by weight of Pogongyeong extract, 0.5% to 5% by weight of Yugeunpi extract, and 0.5% to 5% by weight of Baekgangsam extract.

본 발명은 독성을 유발하지 않으면서도, 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물을 제공하고, 난담반을 함유하는 복합성 혼합물에 대한 안전성 및 유효성을 우수한 정도로 달성할 수 있는 상기 건강 기능성 식품용 조성물의 산업적으로 유용한 제조 방법을 제공한다.The present invention provides a composition for a health functional food having an anti-oxidative ability and atopic dermatitis treatment ability without causing toxicity, and the above health that can achieve the safety and effectiveness of a complex mixture containing Nandamban to an excellent degree. It provides an industrially useful manufacturing method of a composition for functional food.

도 1은 실험예 1의 항산화능 평가 실험 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 실험예 2의 COX-2 관련 효소 활성저해 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 실험예 3의 COX-2 관련 면역세포화학염색 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 실험예 4의 iNOS 관련 면역세포화학염색 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 실험예 5의 아토피성 피부염 동물모델에서의 피부조직 병변 관찰 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 실험예 5의 아토피성 피부염 동물모델에서의 조직병리학적 검사 결과를 나타낸 것이다.
1 shows the results of the antioxidant activity evaluation experiment of Experimental Example 1.
2 shows the result of measuring the inhibition of enzyme activity related to COX-2 of Experimental Example 2.
3 shows the results of COX-2-related immunocytochemical staining of Experimental Example 3.
Figure 4 shows the results of iNOS-related immunocytochemical staining of Experimental Example 4.
5 shows the results of observation of skin tissue lesions in the animal model of atopic dermatitis of Experimental Example 5.
6 shows the results of histopathological examination in the animal model of atopic dermatitis of Experimental Example 5.

본 명세서에서 사용하는 용어 “추출물”은 각각의 대상 원료로부터 일반적인 추출 방식에 의해 얻어지는 것으로 물질의 상태(pahse)에 따라 제한되지 않으며, 예를 들면 액상, 고상, 혼합상 등일 수 있다.The term “extract” used in the present specification is obtained by a general extraction method from each target raw material, and is not limited according to the state (pahse) of the material, and may be, for example, a liquid phase, a solid phase, or a mixed phase.

본 발명의 일 구현예는 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 함유하는 복합성 혼합물을 유효 성분으로 하는 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물에 관한 것이다. 이를 통해 본 발명은 독성을 유발하지 않으면서도, 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물을 제공한다.One embodiment of the present invention has a therapeutic and antioxidant activity for atopic dermatitis using a complex mixture containing Nandamban, Jajuk salt, Garlic extract, Malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract as an active ingredient. It relates to a composition for health functional food. Through this, the present invention provides a composition for a health functional food having an anti-oxidative ability and atopic dermatitis treatment ability without causing toxicity.

또한, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 염증 유발 효소인 COX-2(cyclooxygenase-2)의 활성 저해 및 발현 억제를 하며 비만 세포(mast cell)의 탈과립을 억제하고, 히스타민 유리를 억제하며, 염증성 cytokine의 분비를 억제하고, 우수한 항산화능을 구현할 수 있다.In addition, the composition for health functional food of the present invention inhibits the activity and expression of the inflammation-inducing enzyme COX-2 (cyclooxygenase-2), inhibits degranulation of mast cells, inhibits histamine release, and has inflammatory properties. It suppresses the secretion of cytokine and can realize excellent antioxidant activity.

특히, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 유효 성분으로 이용되는 복합성 혼합물에 함유된 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물의 전체적인 복합 상승 작용에 의해 각각의 성분을 동량으로 사용한 경우에 비해, 현저하게 향상된 COX-2(cyclooxygenase-2)의 활성 저해를 구현할 수 있다. 이를 통해, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 우수한 항염 효과를 구현할 뿐만 아니라, 염증성 단백질에 의해 촉진되는 아토피성 피부염의 발생을 방지하고, 아토피성 피부염 개선능, 아토피성 피부염 치료능을 구현한다.In particular, the composition for health functional foods of the present invention is effective in the overall synergistic action of Nandamban, Jajuk salt, garlic extract, malt extract, gold silver flower extract, pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract contained in the complex mixture used as an active ingredient. As a result, compared to the case where each component is used in the same amount, it is possible to achieve remarkably improved inhibition of the activity of cyclooxygenase-2 (COX-2). Through this, the composition for health functional food of the present invention not only realizes excellent anti-inflammatory effect, but also prevents the occurrence of atopic dermatitis promoted by inflammatory proteins, and implements atopic dermatitis improvement ability and atopic dermatitis treatment ability.

전체 복합성 혼합물 중 난담반은 계란의 난백과 담반의 혼합 반응물로, 가열 및 탈수 처리한 담반(CuSO4·5H2O를 주성분으로 하는 천연 광물)을 분말화한 후, 계란 난백을 혼합하여 반응시켜 제조한다. 이렇게 제조된 난담반은 담반 특유의 독성이 계란 난백에 의해 중화되어, 독성이 감소 내지 제거되고 약성은 증강되게 된다. Among the total complex mixtures, Nandamban is a mixture of egg white and gallbladder from eggs, and the heated and dehydrated gallbladder (a natural mineral containing CuSO 4 5H 2 O as a main component) is powdered, and then the egg white is mixed and reacted. To manufacture. In the Nandamban prepared in this way, the toxicity peculiar to the gallbladder is neutralized by egg white, so that the toxicity is reduced or eliminated, and the drug properties are enhanced.

상기 난담반은 담반 분말에 대해 계란의 난백을 1:0.2 내지 1:1, 구체적으로 1:0.2 내지 1:0.9, 보다 구체적으로 1:0.3 내지 1:0.7의 중량비로 혼합한 것일 수 있다. 상기 범위 내에서, 상기 난담반은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항염능, COX-2의 활성 저해능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The Nandamban may be obtained by mixing the egg white of the egg with respect to the gallbladder powder in a weight ratio of 1:0.2 to 1:1, specifically 1:0.2 to 1:0.9, and more specifically 1:0.3 to 1:0.7. Within the above range, the Nandamban may not cause toxicity, and may implement more excellent anti-inflammatory activity, activity inhibiting activity of COX-2, and treatment of atopic dermatitis.

상기 전체 복합성 혼합물 중 난담반의 함량은 0.1 중량% 내지 50 중량%, 구체적으로 0.5 중량% 내지 30 중량%, 보다 구체적으로 1 중량% 내지 20 중량%일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항염능, COX-2의 활성 저해능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The content of Nandamban in the total composite mixture may be 0.1 wt% to 50 wt%, specifically 0.5 wt% to 30 wt%, and more specifically 1 wt% to 20 wt%. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and can implement more excellent anti-inflammatory activity, activity inhibition activity of COX-2, and atopic dermatitis treatment capacity.

전체 복합성 혼합물 중 자죽염(bamboo salt)은 대나무 통 속에 천일염 또는 죽염을 투입하여, 고온처리에 의한 용융을 반복하여 제조되는 것으로, 일반적인 자죽염이라면 특별히 제한되지 않는다. 이와 같이 제조된 자죽염은 위장을 튼튼히 하고, 해독작용이 우수할 뿐 아니라 백혈구를 증가시켜 살균력을 강화시키고, 정혈, 소염, 해열에 탁월하며, 공기를 정화하고 악취를 제거하고 식욕을 촉진시키는 등의 효능이 있다. 또한, 자죽염은 천일염과 달리 중금속이 완전히 제거되며, 각종 미네랄이 더욱 풍부하고, 알칼리성을 나타내는 것을 특징으로 한다. Among the total complex mixtures, bamboo salt is prepared by repeatedly melting by hot treatment by adding natural sea salt or bamboo salt in a bamboo barrel, and if it is a general bamboo salt, it is not particularly limited. The so-prepared jacquard salt not only strengthens the stomach and has excellent detoxification effects, but also increases white blood cells to enhance sterilization, is excellent for blood purification, anti-inflammatory, and antipyretic, purifies the air, removes odor, and promotes appetite. Has the efficacy of. In addition, unlike sea salt, heavy metals are completely removed, and various minerals are more abundant, and it is characterized by showing alkalinity.

상기 자죽염에 사용되는 죽염은 시판되는 것을 사용하거나, 직접 제조하여 사용할 수 있다. 구체적으로, 자죽염의 제조에 이용되는 죽염은 서해안 천일염을 왕대나무에 넣어 황토로 마개를 한 후 쇠 용기에 차곡차곡 넣은 다음, 소나무로 불을 때어 왕 대나무가 타면 남은 소금 기둥을 빻아서, 첫 번째와 같이 다시 새 왕대나무에 넣어 황토로 밀봉하여 쇠 용기에서 소나무로 태우기를 8회 반복한 후 마지막 9회째는 송진을 첨가하여 화력을 높여 소금을 녹여 내린 9회 용융 죽염 제조 방법으로 제조되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The bamboo salt used for the bamboo salt may be commercially available, or may be directly prepared and used. Specifically, for bamboo salt used in the manufacture of bamboo salt, the western coastal sea salt is put in king bamboo, capped with ocher, then put in a metal container, and then, after burning with pine, the remaining salt pillars are crushed. As in the first step, it is again put in a new bamboo tree, sealed with ocher, and burned with pine in a steel container 8 times.The last ninth time is manufactured by the ninth molten bamboo salt manufacturing method in which the salt is dissolved by adding rosin to increase the heat. However, it is not limited thereto.

구체적으로, 상기 자죽염은 우리나라 천일염을 지리산 왕대나무에 다져 넣고, 소나무 장작으로 태우는 공정을 8번 반복하고 9번째는 송진으로 1,400℃ 이상의 고열로 녹여 내린 9회 자죽염일 수 있다. 이러한 9회 자죽염은 위염, 위궤양 등 위장병 계통환자에게 총 91.95%의 유효 개선율을 구현하며, 위나 장의 점막에 독성 또는 인체 손상 작용이 없다. 또한, 산성인 종래의 소금, 천일염과 달리 pH 8~13의 알칼리성으로, 산성화된 식단을 중화시키는 효과가 있으며, 염증을 일으키는 물질의 생성을 억제시키는 효과를 구현할 수 있다. Specifically, the jajuk salt may be 9-time jajuk salt obtained by crushing Korean sea salt into the king bamboo of Jirisan, and repeating the process of burning it with pine firewood 8 times, and the ninth, melted with pine resin over high heat of 1,400°C. These 9-time jajukitis achieve an effective improvement rate of 91.95% for gastrointestinal patients such as gastritis and gastric ulcers, and there is no toxicity or damage to the human body of the stomach or intestine. In addition, unlike conventional salts and sea salts, which are acidic, they are alkaline with a pH of 8 to 13, have an effect of neutralizing an acidified diet, and can implement an effect of suppressing the production of substances that cause inflammation.

상기 전체 복합성 혼합물 중 자죽염의 함량은 1 중량% 내지 90 중량%, 구체적으로 5 중량% 내지 87 중량%, 보다 구체적으로 20 중량% 내지 85 중량%일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 간독성을 저감하는 효과를 구현할 수 있으며, 더욱 우수한 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The content of jajuk salt in the total complex mixture may be 1% by weight to 90% by weight, specifically 5% by weight to 87% by weight, and more specifically 20% by weight to 85% by weight. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, can implement an effect of reducing liver toxicity, and can implement more excellent anti-inflammatory properties and atopic dermatitis treatment ability.

전체 복합성 혼합물 중 마늘 추출물은 마늘 열매의 껍질을 제거한 생육의 추출물이라면 특별히 제한되지 않는다. 상기 마늘 추출물은 마늘 생육으로부터 유래된 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 C, 글루탐산(glutamic acid), 칼슘, 철, 인, 아연, 셀레늄, 알리신 등의 성분을 고함량으로 포함하여, 항암, 항염증 및 면역력 증진 효능을 구현하며, 강력한 항산화 효과를 구현할 수 있어, 건강 보조적 효능이 우수하다.The garlic extract of the total complex mixture is not particularly limited as long as it is an extract obtained by removing the skin of garlic fruit. The garlic extract contains a high content of components such as vitamin B1, vitamin B2, vitamin C, glutamic acid, calcium, iron, phosphorus, zinc, selenium, and allicin derived from garlic growth, anti-cancer, anti-inflammatory and It realizes the immunity enhancement effect and can implement a strong antioxidant effect, so it has excellent health supplementary efficacy.

또한, 상기 마늘 추출물은 살균, 살충, 거악생신하는 작용이 뛰어나고, 여러 질환에 효능이 있어(본초강목), 장기 복용해도 인체에 해가 없으며(산농본초), 살균, 정장(整腸), 각기 개선, 백일해 개선, 폐결핵 개선, 강장 등의 효과를 발휘할 수 있다.In addition, the garlic extract is excellent in sterilizing, insecticidal, and vicious growth, and is effective against various diseases (herbal herb gangmok), no harm to the human body even if taken for a long time (Sanong herbal), sterilization, intestinal tract, respectively. It can improve, improve whooping cough, improve pulmonary tuberculosis, and exert effects such as tonic.

상기 마늘 추출물은 특별히 제한되지 않으나, 마늘 생육에 대해 2 배수 내지 6 배수의 물 또는 10 v/v% 내지 60 v/v% 함수 에탄올을 첨가한, 후 80℃ 내지 100℃에서 가열 추출한 추출물일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The garlic extract is not particularly limited, but may be an extract extracted by heating at 80°C to 100°C after adding 2 to 6 folds of water or 10 v/v% to 60 v/v% hydrated ethanol for garlic growth. have. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and can implement more excellent antioxidant activity, anti-inflammatory activity, and atopic dermatitis treatment ability.

상기 마늘 추출물의 고형분 함량은 마늘 추출물 중 2 중량% 내지 15 중량%일 수 있다. 이러한 경우, 마늘 추출물은 항염 및 항산화 유효 성분을 높은 함량으로 제공하면서도, 건강 기능성 식품용 조성물으로 적용하기에 우수한 향미를 제공할 수 있다.The solid content of the garlic extract may be 2% to 15% by weight of the garlic extract. In this case, the garlic extract can provide an excellent flavor for application as a composition for health functional foods while providing anti-inflammatory and antioxidant active ingredients in a high content.

상기 전체 복합성 혼합물 중 마늘 추출물의 함량은 1 중량% 내지 20 중량%, 구체적으로 5 중량% 내지 20 중량%, 보다 구체적으로 10 중량% 내지 20 중량%일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The content of the garlic extract in the total complex mixture may be 1% to 20% by weight, specifically 5% to 20% by weight, and more specifically 10% to 20% by weight. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and can implement more excellent antioxidant activity, anti-inflammatory activity, and atopic dermatitis treatment ability.

전체 복합성 혼합물 중 맥아 추출물은 벼과인 대맥((Hordeum vulgare Linn, 大麥, 겉보리)의 싹을 띄운 것을 볶은 것이라면, 특별히 제한되지 않는다. 상기 맥아추출물은 맥아로부터 유래된 비타민 B, 철분, 엽산, 레시틴 및 칼륨 등의 성분을 높은 함량으로 제공하여 간 보호 및 담즙 생산 촉진으로 소화를 돕고 항산화 효과를 부여할 수 있어, 건강 보조적 효능이 우수하다.The malt extract of the whole complex mixture is not particularly limited as long as it is roasted sprouts of the rice family, Hordeum vulgare Linn, and the malt extract is vitamin B derived from malt, iron, folic acid, lecithin and By providing ingredients such as potassium in a high content, it can help digestion by protecting the liver and promoting bile production and provide antioxidant effects, so it has excellent health supplemental efficacy.

상기 맥아 추출물은 특별히 제한되지 않으나, 2 배수 내지 10 배수의 물 또는 10 v/v% 내지 60 v/v% 함수 에탄올을 첨가한 후 80℃ 내지 100℃에서 가열 추출한 추출물일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The malt extract is not particularly limited, but may be an extract extracted by heating at 80° C. to 100° C. after adding 2 to 10 times water or 10 v/v% to 60 v/v% hydrated ethanol. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and can implement more excellent antioxidant activity, anti-inflammatory activity, and atopic dermatitis treatment ability.

상기 맥아 추출물의 고형분 함량은 2 중량% 내지 10 중량%일 수 있다. 이러한 경우, 맥아 추출물은 항염 및 항산화 유효 성분을 높은 함량으로 제공하면서도, 건강 기능성 식품용 조성물으로 적용하기에 우수한 향미를 제공할 수 있다.The solid content of the malt extract may be 2% by weight to 10% by weight. In this case, the malt extract may provide an anti-inflammatory and antioxidant active ingredient in a high content, and provide excellent flavor for application as a composition for health functional food.

상기 전체 복합성 혼합물 중 맥아 추출물의 함량은 0.5 중량% 내지 40 중량%, 구체적으로 1 중량% 내지 40 중량%, 보다 구체적으로 4 중량% 내지 30 중량%일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현하면서도, 인체 독성 저감 효과를 더욱 증진시킬 수 있다.The content of the malt extract in the total complex mixture may be 0.5% to 40% by weight, specifically 1% to 40% by weight, more specifically 4% to 30% by weight. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and while implementing more excellent antioxidant, anti-inflammatory and atopic dermatitis treatment capabilities, it is possible to further enhance the effect of reducing human toxicity.

전체 복합성 혼합물 중 금은화 추출물은 인동덩굴(Lonicerae Japonica Thunberg) 건조물의 추출물이라면 특별히 제한되지 않는다. 구체적으로 상기 금은화 추출물은 인동덩굴에 속하는 금은화 꽃의 추출물일 수 있다. 상기 금은화 추출물은 루테올린(luteolin), 아피제닌(apigenin), 퀘르세틴(quercetin) 등의 플라보노이드 성분을 고함량으로 포함하여, 항암, 항염증 및 면역력 증진 효능을 구현하며, 식중독 예방, 치은염 예방 등의 효과를 부여할 수 있어, 건강 보조적 효능이 더욱 우수하다.In the total complex mixture, the extract of gold and silver is not particularly limited as long as it is an extract of dried honeysuckle (Lonicerae Japonica Thunberg). Specifically, the gold and silver flower extract may be an extract of a gold and silver flower belonging to the honeysuckle. The gold and silver flower extract contains flavonoid components such as luteolin, apigenin, and quercetin in a high content, thereby implementing anticancer, anti-inflammatory and immunity enhancing effects, and preventing food poisoning, preventing gingivitis, etc. As it can impart an effect, health supplemental efficacy is more excellent.

상기 금은화 추출물은 특별히 제한되지 않으나, 2 배수 내지 6 배수의 물 또는 10 v/v% 내지 60 v/v% 함수 에탄올을 첨가한 후, 80℃ 내지 100℃에서 가열 추출한 추출물일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The gold and silver flower extract is not particularly limited, but may be an extract extracted by heating at 80° C. to 100° C. after adding 2 to 6 folds of water or 10 v/v% to 60 v/v% hydrated ethanol. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and can implement more excellent antioxidant activity, anti-inflammatory activity, and atopic dermatitis treatment ability.

상기 금은화 추출물의 고형분 함량은 1 중량% 내지 8 중량%일 수 있다. 이러한 경우, 금은화 추출물은 항염 및 항산화 유효 성분을 높은 함량으로 제공하면서도, 건강 기능성 식품용 조성물으로 적용하기에 우수한 향미를 제공할 수 있다.The solid content of the gold and silver extract may be 1% to 8% by weight. In this case, the extract can provide an excellent flavor to be applied as a composition for health functional food while providing anti-inflammatory and antioxidant active ingredients in a high content.

상기 전체 복합성 혼합물 중 금은화 추출물은 0.5 중량% 내지 5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현하면서도, 인체 독성 저감 효과를 더욱 증진시킬 수 있다.In the total complex mixture, the extract may be included in an amount of 0.5% to 5% by weight. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and while implementing more excellent antioxidant, anti-inflammatory and atopic dermatitis treatment capabilities, it is possible to further enhance the effect of reducing human toxicity.

전체 복합성 혼합물 중 포공영 추출물은 민들레(Taraxacum platycarpum H. Dahlstedt), 털민들레 (Taraxacum mongolicum Handel-Mazzetti), 흰민들레(Taraxacum coreanum Nakai) 및 서양민들레(Taraxacum officinale Weber) 등의 동속 근연식물의 전초 건조물의 추출물이라면, 특별히 제한되지 않는다. 상기 포공영 추출물은 타라크사신(taraxacin), 타락사롤(taraxarol), 아스파라긴(asparagin) 등의 성분을 고함량으로 포함하여, 항암, 항염증 및 면역력 증진 효능을 구현하며, 해열, 소염, 이뇨, 건위, 해열해독, 항균 효과를 부여할 수 있어, 건강 보조적 효능이 더욱 우수하다.Among the total complex mixtures, pogongyoung extracts were dried outposts of similar plants such as dandelion (Taraxacum platycarpum H. Dahlstedt), hairy dandelion (Taraxacum mongolicum Handel-Mazzetti), white dandelion (Taraxacum coreanum Nakai) and western dandelion (Taraxacum officinale Weber). If it is an extract, it is not particularly limited. The pogongyoung extract contains a high content of ingredients such as taraxacin, taraxarol, asparagin, etc., and implements anticancer, anti-inflammatory and immunity enhancing effects, and antipyretic, anti-inflammatory, diuretic, and dry stomach , Antipyretic detoxification, antibacterial effect can be imparted, health supplemental efficacy is more excellent.

상기 포공영 추출물은 특별히 제한되지 않으나, 2 배수 내지 6 배수의 물 또는 10 v/v% 내지 60 v/v% 함수 에탄올을 첨가한 후 80℃ 내지 100℃에서 가열 추출한 추출물일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항균능, 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The pogongyeong extract is not particularly limited, but may be an extract extracted by heating at 80° C. to 100° C. after adding 2 to 6 times water or 10 v/v% to 60 v/v% hydrated ethanol. Within the above range, the composition for health functional food of the present invention does not cause toxicity, and can implement more excellent antimicrobial, antioxidant, anti-inflammatory and atopic dermatitis treatment capabilities.

상기 포공영 추출물의 고형분 함량은 1 중량% 내지 8 중량%일 수 있다. 이러한 경우, 포공영 추출물은 항균, 항염 및 항산화 유효 성분을 높은 함량으로 제공하면서도, 건강 기능성 식품용 조성물으로 적용하기에 우수한 향미를 제공할 수 있다.The solid content of the pogongyeong extract may be 1% to 8% by weight. In this case, the pogongyeong extract can provide an excellent flavor for application as a composition for health functional foods while providing antibacterial, anti-inflammatory and antioxidant active ingredients in a high content.

상기 전체 복합성 혼합물 중 포공영 추출물은 0.5 중량% 내지 5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현하면서도, 인체 독성 저감 효과를 더욱 증진시킬 수 있다.Pogongyeong extract of the total complex mixture may be included in 0.5% by weight to 5% by weight. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and while implementing more excellent antioxidant, anti-inflammatory and atopic dermatitis treatment capabilities, it is possible to further enhance the effect of reducing human toxicity.

전체 복합성 혼합물 중 유근피 추출물은 느릅나무(Ulmus davidiana var. japonica) 뿌리의 껍질을 말린 건조물의 추출물을 의미한다. 상기 유근피 추출물은 루테올, 피토스테롤 성분을 고함량으로 포함하여, 세포 보호, 항염, 천식 및 면역력 증진에 효과를 구현할 수 있어 건강보조적 효능이 더욱 우수하다.Among all the complex mixtures, the extract of Yugeunpi refers to the extract of dried bark of the root of Ulmus davidiana var. japonica. The Yugeunpi extract contains a high content of luteol and phytosterol components, and can implement effects on cell protection, anti-inflammatory, asthma and immunity enhancement, and thus has more excellent health supplemental efficacy.

상기 유근피 추출물은 특별히 제한되지 않으나, 4 배수 내지 10 배수의 물 또는 10 v/v% 내지 60 v/v% 함수 에탄올을 첨가한 후, 80℃ 내지 100℃에서 가열 추출한 추출물일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 세포 보호능, 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The Yugeunpi extract is not particularly limited, but may be an extract extracted by heating at 80° C. to 100° C. after adding 4 to 10 times water or 10 v/v% to 60 v/v% hydrated ethanol. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and can implement more excellent cell protection, antioxidant, anti-inflammatory and atopic dermatitis treatment.

상기 유근피 추출물의 고형분 함량은 2 중량% 내지 10 중량%일 수 있다. 이러한 경우, 유근피 추출물은 세포 보호능, 항염 및 항산화 유효 성분을 높은 함량으로 제공하면서도, 건강 기능성 식품용 조성물으로 적용하기에 우수한 향미를 제공할 수 있다.The solid content of the Yugeunpi extract may be 2% by weight to 10% by weight. In this case, the Yugeunpi extract can provide excellent flavor for application as a composition for health functional foods, while providing a high content of cell-protective, anti-inflammatory and antioxidant active ingredients.

상기 유근피 추출물은 전체 복합성 혼합물 중 0.5 중량% 내지 5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 세포 보호능, 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현하면서도, 인체 독성 저감 효과를 더욱 증진시킬 수 있다.The Yugeunpi extract may be included in 0.5% to 5% by weight of the total complex mixture. Within the above range, the composition for health functional food of the present invention does not cause toxicity, and while implementing more excellent cell protection, antioxidant, anti-inflammatory and atopic dermatitis treatment, can further enhance the effect of reducing human toxicity. have.

복합성 혼합물 중 백강잠 추출물은 누에 Bombyx mori (Batrytis bassiana)가 백강병균 (Beauveria bassiana (Bals.) Vuill.)의 감염에 의하여 백강병으로 죽은 충체의 추출물을 의미한다. 상기 백강잠 추출물은 한방에서 주로 중풍과 같은 순환기계 질환에 사용하며 다른 한약재와 혼방하여 두통, 간질병, 인후통, 소양증 등에 효과를 부여할 수 있어, 건강 보조적 효능이 더욱 우수하다.Among the complex mixtures, the extract of white ganglia refers to the extract of the body of the silkworm Bombyx mori (Batrytis bassiana) killed by leukemia caused by the infection of the white ganglia (Beauveria bassiana (Bals.) Vuill.). The Baekgangjam extract is mainly used in oriental medicine for circulatory diseases such as stroke, and can be mixed with other herbal medicines to give an effect to headache, epilepsy, sore throat, pruritus, etc., and thus, has more excellent health supplemental efficacy.

상기 백강잠 추출물은 특별히 제한되지 않으나, 2 배수 내지 6 배수의 물 또는 10 v/v% 내지 60 v/v% 함수 에탄올을 첨가한 후 80℃ 내지 100℃에서 가열 추출한 추출물일 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 아토피성 피부염에 의해 촉발되는 가려움증 및 통증을 저감하고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The extract of Baek chinensis is not particularly limited, but may be an extract extracted by heating at 80° C. to 100° C. after adding 2 to 6 folds of water or 10 v/v% to 60 v/v% hydrated ethanol. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, reduces itching and pain triggered by atopic dermatitis, and realizes more excellent antioxidant activity, anti-inflammatory activity, and therapeutic ability for atopic dermatitis. have.

상기 백강잠 추출물의 고형분 함량은 0.5 중량% 내지 10 중량%일 수 있다. 이러한 경우, 백강잠 추출물은 가려움증 및 통증 저감 유효 성분, 항염 및 항산화 유효 성분을 높은 함량으로 제공하면서도, 건강 기능성 식품용 조성물으로 적용하기에 우수한 향미를 제공할 수 있다.The solid content of the extract of Baekgang champa may be 0.5% to 10% by weight. In this case, Baekgangjam extract may provide an itching and pain reducing active ingredient, anti-inflammatory and antioxidant active ingredients in a high content, while providing excellent flavor for application as a composition for health functional foods.

상기 백강잠 추출물은 전체 복합성 혼합물 중 0.5 중량% 내지 5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 범위 내에서, 본 발명의 건강 기능성 식품용 조성물은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The Baek glacius extract may be included in an amount of 0.5% to 5% by weight of the total complex mixture. Within the above range, the composition for a health functional food of the present invention does not cause toxicity, and can implement more excellent antioxidant activity, anti-inflammatory activity, and atopic dermatitis treatment ability.

본 발명의 다른 구현예는 전술한 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물 제조 방법에 관한 것이다. 이를 통해, 본 발명은 난담반을 함유하는 복합성 혼합물에 대한 안전성 및 유효성을 우수한 정도로 달성할 수 있고, 독성을 유발하지 않으면서도, 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물의 제조 표준화 되고, 산업적으로 유용한 제조 방법을 제공한다.Another embodiment of the present invention relates to a method for preparing a composition for a health functional food having the above-described atopic dermatitis treatment ability and antioxidant ability. Through this, the present invention can achieve the safety and effectiveness of the complex mixture containing Nandamban to an excellent degree, and without causing toxicity, the preparation of a composition for a health functional food having atopic dermatitis treatment and antioxidant activity It provides a standardized, industrially useful manufacturing method.

상기 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물 제조 방법은 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 각각 준비하는 단계; 및 상기 각각의 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 혼합하여 복합성 혼합물을 제조하는 단계; 를 포함한다.The method for preparing a composition for a health functional food having atopic dermatitis treatment and antioxidant activity includes preparing Nandamban, Jajuk salt, garlic extract, malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract, respectively; And preparing a complex mixture by mixing the respective Nandamban, Jajuk salt, garlic extract, malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract; Includes.

상기 준비하는 단계에서, 난담반의 준비는 구체적으로 담반(CuSO4·5H2O를 함유하는 천연광물)을 100℃ 내지 150℃에서 가열하여, 함수율이 0.001% 내지 5%가 되도록 탈수한 후, 상온에서 완전 냉각 후에 분말화하여 담반 분말을 제조하고, 상기 담반 분말에 계란의 난백을 1:0.2 내지 1:1의 중량비로 혼합하는 것일 수 있다. 이와 같은 난담반의 준비 방법을 통해, 상기 난담반은 담반이 갖는 독성이 제거되고 약성은 증강되어, 아토피성 피부염 치료를 위한 약학적 또는 식품학적 조성물로 적용되기에 유리한 효과를 갖는다.In the preparing step, the preparation of Nandamban is specifically by heating the damban (a natural mineral containing CuSO 4 ·5H 2 O) at 100°C to 150°C, dehydrating so that the moisture content becomes 0.001% to 5%, After complete cooling at room temperature, it may be powdered to prepare a gallbladder powder, and the egg white of an egg may be mixed with the damban powder in a weight ratio of 1:0.2 to 1:1. Through the method of preparing the Nandamban, the toxicity of the Nandamban is eliminated and the drug properties are enhanced, so that it has an advantageous effect to be applied as a pharmaceutical or food composition for the treatment of atopic dermatitis.

담반의 가열 및 탈수는 가마솥에 넣고, 가스불이나 장작불 또는 숯불에서 100℃ 내지 150℃ 온도 범위를 유지하면서 굽는 방법으로 수행될 수 있다. 가열 시에는 3 시간 내지 5 시간 간격으로 색깔이 변하는 것을 지켜보면서 아래위를 혼합하여 열을 균일하게 가하여 담반의 효능 및 균일성을 더욱 증진시킬 수 있다. 가열 시간은 1회에 가열되는 담반의 양에 따라 조정될 수 있으나, 예를 들면, 600g을 기준으로 5 내지 24 시간 정도 가열될 수 있다. 담반의 가열 및 탈수는 담반 전량의 색이 회색으로 변해 무수물 상태이거나 수분 함량이 0 % 내지 5 %가 될 때까지 수행될 수 있다.The heating and dehydration of the damban may be performed by putting it in a cauldron and baking it while maintaining a temperature range of 100°C to 150°C over a gas fire, wood fire or charcoal fire. During heating, while watching the color change at intervals of 3 to 5 hours, heat is uniformly applied by mixing the top and bottom to further enhance the efficacy and uniformity of the gallbladder. The heating time may be adjusted according to the amount of gallbladder heated at one time, but may be heated for 5 to 24 hours based on, for example, 600 g. The heating and dehydration of the gallbladder may be performed until the color of the entire amount of the gallbladder turns gray to become anhydrous or the moisture content is 0% to 5%.

이와 같이 가열 및 탈수된 담반은 열이 완전히 제거될 때까지 상온에서 냉각될 수 있다. 상온 냉각된 담반은 곱게 갈아 분말화하고, 분말화한 담반을 습기가 흡수되지 않도록 비닐봉지나 밀폐용기에 담아 건조한 장소에 보관하는 것이 바람직하다.The heated and dehydrated gallban may be cooled at room temperature until heat is completely removed. It is desirable to finely grind and powder the wall plate cooled at room temperature, and store the powdered wall plate in a plastic bag or airtight container to prevent moisture from being absorbed.

난백은 계란으로부터 난황을 분리하여 제거한 뒤 남은 난백만을 이용한다. 계란은 토종 계란을 사용하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 오골계 계란을 사용할 수 있다.For egg white, the remaining egg is used after removing the yolk from the egg. As for the egg, it is preferable to use a native egg, and more preferably, an Ogol-based egg may be used.

담반 분말과 난백의 혼합 방법은 특별히 제한되지 않으나, 나무 주걱과 같이 반응성이 거의 없는 도구를 이용하여 섞어주는 것이 최종적으로 제조되는 난담반의 효능을 균일하게 제조할 수 있다. 또한, 상기 혼합은 화학 반응이 일어나지 않는 용기, 예를 들어, 질그릇이나 도자기, 맥반석 용기를 사용하여 혼합하는 것이 바람직하다. 상기 혼합 과정에서 반응열에 의한 높은 열이 발생할 수 있다. 상기 담반 분말과 난백의 혼합 시 난백은 반응의 진행에 따라 소량씩 나누어 첨가될 수 있으며, 이를 통해 반응성이 조절되어 담반 분말의 독성을 중화시키는 효과가 더욱 향상되고, 반응열에 의해 난담반의 혼화성이 더욱 향상될 수 있다. 담반 분말과 난백의 혼합물을 충분히 혼합시킨 뒤에는 반응할 때 일어났던 반응열이 완전히 사라질 때까지 열을 식히는 것이 바람직하다.The method of mixing the gallbladder powder and the egg white is not particularly limited, but mixing with a tool that has little reactivity such as a wooden spatula can uniformly produce the efficacy of the finally produced Nandamban. In addition, the mixing is preferably carried out using a container in which a chemical reaction does not occur, for example, an earthenware, ceramic, or elvan stone container. In the mixing process, high heat may be generated due to the heat of reaction. When mixing the gallbladder powder and the egg white, the egg white can be added in small portions according to the progress of the reaction, through which the reactivity is adjusted to further improve the effect of neutralizing the toxicity of the gallbladder powder, and the miscibility of the Nandamban by the reaction heat This can be further improved. After sufficiently mixing the mixture of gall powder and egg white, it is preferable to cool the heat until the reaction heat generated during the reaction completely disappears.

상기 담반 분말과 난백의 혼합물은 담반 분말에 대해 계란의 난백을 1:0.2 내지 1:1, 구체적으로 1:0.2 내지 1:0.9, 보다 구체적으로 1:0.3 내지 1:0.7의 중량비로 혼합하여 반응시킬 수 있다. 상기 범위 내에서, 상기 난담반은 독성을 유발하지 않고, 더욱 우수한 항염능, COX-2의 활성 저해능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.The mixture of the gallbladder powder and the egg white is reacted by mixing the egg white of the egg with respect to the gallbladder powder in a weight ratio of 1:0.2 to 1:1, specifically 1:0.2 to 1:0.9, and more specifically 1:0.3 to 1:0.7 I can make it. Within the above range, the Nandamban may not cause toxicity, and may implement more excellent anti-inflammatory activity, activity inhibiting activity of COX-2, and treatment of atopic dermatitis.

상기 준비하는 단계에서, 난담반의 준비는 반응열이 완전히 제거된 후, 분말화하는 것을 더 포함할 수 있다. 상기 분말화 방법은 특별히 제한되지 않으나, 예를 들면, 고체 덩어리 상태의 난담반을 갈아 곱게 분말화하는 것일 수 있다. 이와 같이 난담반을 분말화함으로써, 약학적 또는 식품학적 제제에 효율적으로 이용될 수 있으며, 난담반의 반응성 면적이 증대되어 질병 치료적 활성을 극대화시킬 수 있게 된다.In the preparing step, the preparation of the Nandamban may further include powdering after the reaction heat is completely removed. The powdering method is not particularly limited, but may be, for example, grinding and finely powdering a solid lumpy Nandamban. By powdering the Nandamban in this way, it can be effectively used in pharmaceutical or food preparations, and the reactive area of the Nandamban can be increased, thereby maximizing the therapeutic activity of the disease.

상기 준비하는 단계에서, 자죽염의 준비는 우리나라 천일염을 지리산 왕대나무에 다져 넣고, 소나무 장작으로 태우는 공정을 8번 반복하고 9번째는 송진으로 1,400℃ 이상의 고열로 녹여 내리는 것일 수 있다. 이와 같은 자죽염의 준비 방법을 통해, 상기 자죽염은 독성 또는 인체 손상 작용이 없고, 산성화된 식단을 중화시키는 효과가 있으며, 염증을 일으키는 물질의 생성을 억제시키는 효과를 더욱 향상시켜, 아토피성 피부염 치료를 위한 약학적 또는 식품학적 조성물로 적용되기에 유리한 효과를 갖는다.In the above preparation step, the preparation of birch salt may be to chop Korean sea salt into the king bamboo of Jirisan, repeat the process of burning it with pine firewood 8 times, and melt the ninth with pine resin at high heat of 1,400°C or higher. Through the preparation method of such salt, the salt has no toxic or damaging effect on the human body, has an effect of neutralizing an acidified diet, and further enhances the effect of inhibiting the production of substances that cause inflammation, so that atopic dermatitis It has an advantageous effect to be applied as a pharmaceutical or food composition for treatment.

상기 준비하는 단계에서, 각각의 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물의 준비 단계는 특별히 제한되지 않는다. In the above preparation step, the preparation steps of each of the garlic extract, malt extract, gold silver flower extract, pogongyeong extract, yugeunpi extract and Baekgangjam extract are not particularly limited.

구체적으로는 각각의 추출 대상이 되는 재료에 2 배수 내지 10 배수의 물 또는 10 v/v% 내지 60 v/v% 함수 에탄올을 첨가한 후, 80℃ 내지 100℃에서 가열 추출한 추출물일 수 있다. 이와 같은 각 추출물의 준비 방법을 통해, 상기 각 추출물은 독성을 유발하지 않고, 아토피성 피부염에 의해 촉발되는 가려움증 및 통증을 저감하고, 더욱 우수한 항산화능, 항염능 및 아토피성 피부염 치료능을 구현할 수 있다.Specifically, it may be an extract obtained by heating at 80°C to 100°C after adding 2 to 10 times water or 10 v/v% to 60 v/v% hydrated ethanol to each material to be extracted. Through such a preparation method of each extract, each extract does not cause toxicity, reduces itching and pain triggered by atopic dermatitis, and realizes more excellent antioxidant activity, anti-inflammatory activity, and atopic dermatitis treatment ability. have.

복합성 혼합물을 제조하는 단계는 전술한 방법으로 준비된 각각의 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 혼합하는 것을 포함한다.The step of preparing the complex mixture includes mixing each of Nandamban, Jajuk salt, garlic extract, malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract prepared by the above-described method.

상기 복합성 혼합물은 난담반 0.1 중량% 내지 50 중량%, 자죽염 1 중량% 내지 90 중량%, 마늘 추출물 1 중량% 내지 20 중량%, 맥아 추출물 0.5 중량% 내지 40 중량%, 금은화 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량%, 포공영 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량%, 유근피 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량% 및 백강잠 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량%를 함유하는 것일 수 있다.The complex mixture is Nandamban 0.1% to 50% by weight, Jajuk salt 1% to 90% by weight, 1% to 20% by weight of garlic extract, 0.5% to 40% by weight of malt extract, from 0.5% by weight of gold and silver extract It may contain 5% by weight, 0.5% to 5% by weight of Pogongyeong extract, 0.5% to 5% by weight of Yugeunpi extract, and 0.5% to 5% by weight of Baekgangsam extract.

상기 복합성 혼합물에 포함되는 각 성분에 대한 구체적인 내용은 전술한 바와 같다. Details of each component included in the complex mixture are as described above.

본 발명의 아토피성 피부염 치료능 및 항산화능을 갖는 건강 기능성 식품용 조성물 제조 방법은 상기와 같이 준비된 복합성 혼합물을 식품에 첨가하여 적용하는 단계; 를 더 포함할 수 있다. The method for preparing a composition for a health functional food having atopic dermatitis treatment ability and antioxidant ability of the present invention comprises the steps of adding and applying the complex mixture prepared as described above to food; It may further include.

상기 식품은 건강 기능성 식품용 조성물으로 활용될 수 있는 것이고, 본 발명의 복합성 혼합물의 효능을 저해하지 않는 한 특별히 제한되지 않는다. 상기 식품은 건강 기능성 식품 예를 들면, 엑기스, 드링크 등의 음료; 과자, 빵, 떡 등의 제과제빵 제품; 등으로 사용가능한 종류일 수 있다.The food is not particularly limited as long as it can be used as a composition for a health functional food and does not impair the efficacy of the complex mixture of the present invention. The food is a health functional food, for example, beverages such as extracts and drinks; Confectionery products such as confectionery, bread, and rice cakes; It may be a kind that can be used as such.

본 발명의 또 다른 구현예는 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 함유하는 복합성 혼합물을 유효 성분으로 하는 아토피성 피부염 치료용 조성물에 관한 것이다. 이를 통해 본 발명은 독성을 유발하지 않으면서도, 아토피성 피부염 개선능 및 항산화능을 갖는 아토피성 피부염 치료용 조성물을 제공할 수 있다.Another embodiment of the present invention relates to a composition for the treatment of atopic dermatitis comprising a complex mixture containing Nandamban, Jajuk salt, garlic extract, malt extract, gold silver flower extract, pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract as an active ingredient. . Through this, the present invention can provide a composition for treating atopic dermatitis, which does not cause toxicity, and has atopic dermatitis improving ability and antioxidant activity.

상기 아토피성 피부염 치료용 조성물에 유효 성분으로 포함되는 복합성 혼합물에 대한 구체적인 내용은 전술한 바와 동일하다. Details of the complex mixture included as an active ingredient in the composition for treating atopic dermatitis are the same as described above.

상기 아토피성 피부염 치료용 조성물은 복합성 혼합물과 약학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용가능한 담체의 종류는 본 발명의 복합성 혼합물의 효능을 저해하지 않는 한, 특별히 제한되지 않는다. The composition for treating atopic dermatitis may include a complex mixture and a pharmaceutically acceptable carrier. The kind of the pharmaceutically acceptable carrier is not particularly limited as long as it does not impair the efficacy of the complex mixture of the present invention.

상기 아토피성 피부염 치료용 조성물은 예를 들면, 타정, 분말, 캡슐 등의 제약품으로 제형화되어 이용될 수 있다.The composition for treating atopic dermatitis may be formulated and used as pharmaceuticals such as tablets, powders, and capsules.

실시예 Example

이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 작용을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 다만, 이는 본 발명의 바람직한 예시로 제시된 것이며 어떠한 의미로도 이에 의해 본 발명이 제한되는 것으로 해석될 수는 없다. Hereinafter, the configuration and operation of the present invention will be described in more detail through preferred embodiments of the present invention. However, this is presented as a preferred example of the present invention and cannot be construed as limiting the present invention in any sense.

본 명세서에서 기재되지 않은 내용은 이 기술 분야에서 숙련된 자이면 충분히 기술적으로 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략하기로 한다.Contents not described in the present specification can be sufficiently technically inferred by those skilled in the art, and thus description thereof will be omitted.

제조예 1Manufacturing Example 1

담반 600g을 140℃, 4시간 가열하여 완전 탈수시킨 후 상온에서 냉각하고 막자사발로 분말화하였다. 이와 같이 제조된 담반 분말에 난황을 분리하여 준비한 계란 난백을 담반 분말 : 계란 난백이 1 : 0.9의 중량비가 되도록 혼합하고 반응열을 냉각한 후, 막자 사발로 분말화하여 난담반 분말을 제조하였다.600g of gallbladder was heated at 140° C. for 4 hours to completely dehydrate, cooled at room temperature, and powdered with a mortar. The egg white prepared by separating the egg yolk into the thus-prepared gallbladder powder was mixed so that the weight ratio of the gallbladder powder: egg white was 1:0.9, the reaction heat was cooled, and then powdered with a mortar to prepare Nandamban powder.

제조예 2Manufacturing Example 2

서해안 천일염을 왕대나무에 넣어 황토로 마개를 한 후 죽염로(쇠 용기)에 차곡차곡 넣은 다음 소나무 장작불로 800℃ 온도에서 태우고 남은 소금 기둥을 분쇄하고 첫 번째와 같이 다시 새 왕대나무에 넣어 황토로 밀봉하여 죽염로(쇠 용기)에서 소나무로 태우기를 8회 반복한 후 마지막 9회째는 송진을 첨가하여 1400℃로 온도를 높여 소금 기둥이 용융된 액체를 상온에서 12시간 냉각하고 분쇄하여 9회 자죽염을 제조하였다.After putting sea salt of the west coast in king bamboo, capping it with loess, then putting it in a bamboo salt furnace (iron container), burning it at 800℃ over a pine wood fire, crushing the remaining salt pillars, and putting it in a new king bamboo tree to make loess. After sealing and burning pine trees in a bamboo salt furnace (metal container) eight times, the last ninth time, add rosin and raise the temperature to 1400℃, cool the molten salt column at room temperature for 12 hours, pulverize, and cut 9 times. Bamboo salt was prepared.

제조예 3Manufacturing Example 3

마늘 생육에 4 배수의 식용수를 가하여 100℃에서 2 시간 동안 열수 추출하여 마늘 추출물을 수득하였다. 상기와 같이 제조된 마늘 추출물 중 고형분의 함량은 7.8 중량%였다.The garlic extract was obtained by hot water extraction at 100° C. for 2 hours by adding 4 times of drinking water to the growth of garlic. The content of solids in the garlic extract prepared as described above was 7.8% by weight.

제조예 4Manufacturing Example 4

맥아에 4 배수의 식용수를 가하여 100℃에서 2시간 동안 열수 추출하여 마늘 추출물을 수득하였다. 상기와 같이 제조된 맥아 추출물 중 고형분의 함량은 4.5 중량%였다.Drinking water of 4 folds was added to the malt, followed by hot water extraction at 100° C. for 2 hours to obtain a garlic extract. The content of solids in the malt extract prepared as described above was 4.5% by weight.

제조예 5Manufacturing Example 5

금은화 건조물에 4 배수의 식용수를 가하여 100℃에서 4시간 동안 열수 추출하여 금은화 추추물을 수득하였다. 상기와 같이 제조된 금은화 추출물 중 고형분의 함량은 4.5 중량%였다.Drinking water of 4 times was added to the dried gold and silver coins, and hot water extraction was performed at 100° C. for 4 hours to obtain a gold and silver extract. The solid content in the gold and silver extract prepared as described above was 4.5% by weight.

제조예 6Manufacturing Example 6

포공영 건조물에 4 배수의 식용수를 가하여 100℃에서 4시간 동안 열수 추출하여 포공영 추출물을 수득하였다. 상기와 같이 제조된 포공영 추출물 중 고형분의 함량은 3.2 중량%였다.Pogongyoung extract was obtained by hot water extraction at 100°C for 4 hours by adding 4 times of drinking water to the dry matter. The solid content of the pogongyeong extract prepared as described above was 3.2% by weight.

제조예 7Manufacturing Example 7

유근피 건조물에 10 배수의 식용수를 가하여 100℃에서 4 시간 동안 열수 추출하여 유근피 추출물을 수득하였다. 상기와 같이 제조된 유근피 추출물 중 고형분의 함량은 6.7 중량%였다.10 times of drinking water was added to the dried yugeun-pi, and hot water extraction was performed at 100° C. for 4 hours to obtain a yugeun-pi extract. The content of solids in the Yugeunpi extract prepared as described above was 6.7% by weight.

제조예 8Manufacturing Example 8

백강잠에 4 배수의 식용수를 가하여 100℃에서 4 시간 동안 열수 추출하여 유근피 추출물을 수득하였다. 상기와 같이 제조된 백강잠 추출물 중 고형분의 함량은 4.8 중량%였다.Four folds of drinking water was added to Baekgangjam and extracted with hot water at 100°C for 4 hours to obtain a Yugeunpi extract. The content of the solid content in the extract of Baekgangjam prepared as described above was 4.8% by weight.

실시예 1Example 1

상기 제조예 1 내지 8에서 준비된 난담반 5 중량%, 자죽염 87 중량%, 마늘 추출물 4 중량%, 맥아 추출물 0.8 중량%, 금은화 추출물 0.8 중량%, 포공영 추출물 0.8 중량%, 유근피 추출물 0.8 중량% 및 백강잠 추출물 0.8 중량%를 혼합하여 실시예 1의 건강 기능성 식품용 조성물을 제조하였다. Nandamban prepared in Preparation Examples 1 to 8, 5% by weight, birch salt 87% by weight, garlic extract 4 A composition for health functional foods of Example 1 was prepared by mixing wt%, 0.8 wt% malt extract, 0.8 wt% gold silver hwa extract, 0.8 wt% pogongyeong extract, 0.8 wt% Yugeunpi extract, and 0.8 wt% Baekgangjam extract.

비교예 1Comparative Example 1

상기 제조예 1에서 준비된 난담반을 단독으로 사용하여 비교예 1의 건강 기능성 식품용 조성물을 제조하였다.The Nandamban prepared in Preparation Example 1 was used alone to prepare a health functional food composition of Comparative Example 1.

비교예 2 내지 8Comparative Examples 2 to 8

상기 제조예 1에서 준비된 난담반 대신 제조예 2 내지 8에서 준비된 동량의 자죽염(비교예 2), 마늘 추출물(비교예 3), 맥아 추출물(비교예 4), 금은화 추출물(비교예 5), 포공영 추출물(비교예 6), 유근피 추출물(비교예 7), 백강잠 추출물(비교예 8)을 각각 단독으로 사용하여 비교예 2 내지 8의 건강 기능성 식품용 조성물을 제조하였다.Instead of the Nandamban prepared in Preparation Example 1, the same amount of birch salt prepared in Preparation Examples 2 to 8 (Comparative Example 2), garlic extract (Comparative Example 3), malt extract (Comparative Example 4), gold and silver extract (Comparative Example 5), Pogongyeong extract (Comparative Example 6), Yugeunpi extract (Comparative Example 7), Baekgangjam extract (Comparative Example 8) was used alone, respectively, to prepare a composition for health functional food of Comparative Examples 2 to 8.

<실험예><Experimental Example>

상기 실시예 1 및 비교예 1 내지 8에서 제조된 건강 기능성 식품용 조성물 시료에 대하여 하기와 같이 실험예 1 내지 5의 실험을 통해 효능을 평가하였다. Efficacy was evaluated through the experiments of Experimental Examples 1 to 5 as follows with respect to the sample of the composition for health functional food prepared in Example 1 and Comparative Examples 1 to 8.

실험예 1. 항산화능 평가 실험Experimental Example 1. Antioxidant ability evaluation experiment

아토피성 피부염 치료에 영향을 미치는 항산화능을 분석하기 위해 매우 안정한 프리 라디칼(free radical)인 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)가 수소 양성자 라디칼 스캐빈저(hydrogen proton-radical scavenger)에 의해 보라색에서 노란색의 1,1-다이페닐-2-파이크릴하이드라진 (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazine)으로 변색되는 현상을 이용하여 각 샘플의 전자 공여능을 측정하였다.DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl), a very stable free radical, was added to a hydrogen proton-radical scavenger to analyze antioxidant activity that affects the treatment of atopic dermatitis. The electron donating ability of each sample was measured using the phenomenon of discoloration from purple to yellow 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazine.

실험방법 : 실시예 1 및 비교예 2 내지 8의 시료를 농도별 0.1, 0.05, 0.025, 0.0125, 0.00625 %)로 정제수에 용해 후 각각 75μl를 DPPH(0.2mM in ethanol)용액 750μl와 3차 정제수 675μl으로 혼합하였다. 상온에서 30분간 반응시킨 후, 96well plate에 반응액 200μl를 옮긴 후 ELISA reader 기기(Molecular Devices, CA, USA)로 520nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다.Experimental method: After dissolving the samples of Example 1 and Comparative Examples 2 to 8 in purified water at concentrations of 0.1, 0.05, 0.025, 0.0125, 0.00625%), 75 μl each was added to 750 μl of DPPH (0.2 mM in ethanol) solution and 675 μl of tertiary purified water. Mixed with. After reacting at room temperature for 30 minutes, 200 μl of the reaction solution was transferred to a 96 well plate, and absorbance was measured at a wavelength of 520 nm with an ELISA reader device (Molecular Devices, CA, USA).

각 시료의 DPPH 라디칼 소거 활성(%)은 하기 식 1의 계산식으로 산출하였다.The DPPH radical scavenging activity (%) of each sample was calculated by the following formula (1).

[식 1][Equation 1]

DPPH 라디칼 소거활성(%) = 1 - (시료 첨가구의 흡광도/시료 무첨가군의 흡광도 X 100DPPH radical scavenging activity (%) = 1-(absorbance of the sample added group/absorbance of the no sample added group X 100

구분division 원료Raw material SC50값 (mg/ml)SC 50 value (mg/ml) 실시예 1Example 1 난담반 혼합조성물Mixed composition 0.11 ± 0.020.11 ± 0.02 비교예 1Comparative Example 1 난담반Retreat 0.94 ± 0.070.94 ± 0.07 비교예 2Comparative Example 2 자죽염Bamboo salt 0.80 ± 0.010.80 ± 0.01 비교예 3Comparative Example 3 마늘 추추물Garlic extract 0.24 ± 0.060.24 ± 0.06 비교예 4Comparative Example 4 맥아 추추물Malt extract 0.48 ± 0.020.48 ± 0.02 비교예 5Comparative Example 5 금은화 추출물Gold and silver extract 0.17 ± 0.010.17 ± 0.01 비교예 6Comparative Example 6 포공영 추출물Pogongyoung extract 0.15 ± 0.020.15 ± 0.02 비교예 7Comparative Example 7 유근피 추출물Yugeun blood extract 0.78 ± 0.030.78 ± 0.03 비교예 8Comparative Example 8 백강잠 추출물White River Extract 1.91 ± 0.211.91 ± 0.21

도 1 및 표 1을 통해 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1의 시료가 비교예 1 내지 8의 시료 대비 DPPH 라디칼을 50% 소거하는 최소값인 SC50값이 0.11 ± 0.02 mg/ml로 항산화능이 가장 우수하였다. As can be seen from Figure 1 and Table 1, the sample of Example 1 is the minimum value for scavenging DPPH radicals 50% compared to the samples of Comparative Examples 1 to 8, the SC 50 value is 0.11 ± 0.02 mg / ml, the antioxidant activity is the most It was excellent.

또한, 상기 결과를 통해 본 발명의 실시예 1은 비교예 1 내지 8의 시료의 혼합을 통해 달성할 수 있는 정도에 비해 현저하게 향상된 항산화능을 구현하는 것으로, 전체 조성에 의해 복합 상승적인 항산화능 향상 효과가 있음을 알 수 있다.In addition, from the above results, Example 1 of the present invention implements remarkably improved antioxidant activity compared to the degree achievable through mixing of the samples of Comparative Examples 1 to 8, and a complex synergistic antioxidant activity by the total composition It can be seen that there is an improvement effect.

실험예 2. COX-2(cyclooxygenase-2)의 효소 활성저해 측정Experimental Example 2. Measurement of inhibition of enzyme activity of COX-2 (cyclooxygenase-2)

아토피성 피부염에서 염증을 유발하는 주요 효소(enzyme)인 COX-2 (cyclooxygenase-2)의 활성을 저해하는 효능을 알아보기 위해서 COX-2 효소의 기질인 아라키돈산(arachidonic acid)을 사용하여 hematin의 산화를 유도하여 변색되는 현상을 이용하여 측정하였다.To investigate the effect of inhibiting the activity of COX-2 (cyclooxygenase-2), a major enzyme that causes inflammation in atopic dermatitis, arachidonic acid, a substrate of COX-2 enzyme, was used to determine the effect of hematin. It was measured using the phenomenon of discoloration by inducing oxidation.

실험방법 : 1.5ml 튜브에 COX-2 효소 10μl, heme 10μl, 반응 완충액 950μl을 넣고 샘플 20μl 첨가한 후 5분간 37℃에서 안정화하고 여기에 아라키돈산 10μl을 넣고 2분간 37℃에서 반응시킨 후 1M HCl 50μl를 넣고 반응을 정지하였다. SnCl2 100μl를 넣고 잘 섞어준 후 상온에서 5분간 안정화시키고 반응액을 EIA 완충액으로 2000배, 4000배 희석하고 이를 프로스타그란딘 항체가 코팅된 96well plate에 50μl 분주 후 PGs screening AChE tracer를 50μl와 Antiserum을 50μl 첨가한 후 18시간 동안 상온에서 반응시켰다. 96well을 완충액으로 5회 세척한 후 Ellman's reagent를 200μl 넣고 60분간 발색한 후 410nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다. COX 활성억제의 정도는 제조사의 방법을 준용하여 50% 억제하는 농도인 IC50 값으로 표시하였다.Experimental method: COX-2 enzyme 10μl, heme 10μl, reaction buffer 950μl were added to a 1.5ml tube, 20μl of sample was added, stabilized at 37℃ for 5 minutes, arachidonic acid 10μl was added and reacted at 37℃ for 2 minutes, and then 1M HCl 50 μl was added and the reaction was stopped. Add 100 μl of SnCl 2, mix well, stabilize at room temperature for 5 minutes, dilute the reaction solution 2000 times and 4000 times with EIA buffer, and dispense 50 μl into a 96 well plate coated with prostaglandin antibody, and 50 μl of PGs screening AChE tracer and 50 μl of Antiserum After addition, it was reacted at room temperature for 18 hours. After washing the 96 wells 5 times with a buffer solution, 200 μl of Ellman's reagent was added and color was developed for 60 minutes, and the absorbance was measured at a wavelength of 410 nm. The degree of inhibition of COX activity was expressed as an IC 50 value, which is a concentration that inhibits 50% according to the manufacturer's method.

구분division 원료Raw material IC50값 (μg/ml)IC 50 value (μg/ml) 실시예 1Example 1 난담반 혼합조성물Mixed composition 87.29 ± 5.8387.29 ± 5.83 비교예 1Comparative Example 1 난담반Retreat 94.61 ± 18.4594.61 ± 18.45 비교예 2Comparative Example 2 자죽염Bamboo salt 292.6 ± 15.62292.6 ± 15.62 비교예 3Comparative Example 3 마늘 추추물Garlic extract 145.2 ± 28.10145.2 ± 28.10 비교예 4Comparative Example 4 맥아 추추물Malt extract 185.6 ± 21.05185.6 ± 21.05 비교예 5Comparative Example 5 금은화 추출물Gold and silver extract 135.5 ± 11.91135.5 ± 11.91 비교예 6Comparative Example 6 포공영 추출물Pogongyoung extract 117.9 ± 8.84117.9 ± 8.84 비교예 7Comparative Example 7 유근피 추출물Yugeun blood extract 402.4 ± 52.18402.4 ± 52.18 비교예 8Comparative Example 8 백강잠 추출물White River Extract 158.1 ± 44.40158.1 ± 44.40

도 2 및 표 2을 통해 알 수 있는 바와 같.이 실시예 1의 시료가 비교예 1 내지 8의 시료 대비 COX-2을 50% 저해하는 최소값인 IC50값이 87.29 ± 5.83 μg/ml로 염증 유발 억제효과가 가장 우수하였다.As can be seen from Fig. 2 and Table 2, the sample of Example 1 has an IC 50 value of 87.29 ± 5.83 μg/ml, which is the minimum value that inhibits COX-2 by 50% compared to the samples of Comparative Examples 1 to 8. Inducing inhibitory effect was the best.

또한, 상기 결과를 통해 본 발명의 실시예 1은 비교예 1 내지 8의 시료의 혼합을 통해 달성할 수 있는 정도에 비해 현저하게 향상된 COX-2 억제효과를 구현하는 것으로, 전체 조성에 의해 복합 상승적인 항염증 효과가 있음을 알 수 있다.In addition, from the above results, Example 1 of the present invention implements a remarkably improved COX-2 inhibitory effect compared to the degree achievable through mixing of the samples of Comparative Examples 1 to 8, and the composite increase by the total composition It can be seen that it has an anti-inflammatory effect.

실험예 3. COX-2(cyclooxygenase-2)의 세포 내 발현억제 실험Experimental Example 3. Intracellular expression inhibition experiment of COX-2 (cyclooxygenase-2)

COX는 정상적인 생리기능을 조절하기 위해 여러 종류의 세포에서 발현하는 COX-1과 염증에 의해 대식세포 및 비만세포와 같은 염증관련 세포에서 발현이 유도되는 COX-2로 구분되며 아토피성 피부염에서는 주로 COX-2가 대량으로 발현된다. COX-2는 아라키돈산을 기질로 하여 지질성 염증 및 통증 매개체인 prostaglandin 또는 leukotriene을 생성한다.COX is divided into COX-1, which is expressed in various types of cells to regulate normal physiological functions, and COX-2, which is expressed in inflammation-related cells such as macrophages and mast cells by inflammation. In atopic dermatitis, COX is mainly -2 is expressed in large quantities. COX-2 uses arachidonic acid as a substrate to produce prostaglandin or leukotriene, a mediator of lipid inflammation and pain.

따라서 본 발명에서는 LPS로 자극된 Raw 264.7 세포에서 실시예 1의 농도에 따른 COX-2 단백질의 발현을 억제하는 효과를 면역세포화학염색법(Immunocytochemistry)을 이용하여 확인하였다. Therefore, in the present invention, the effect of inhibiting the expression of the COX-2 protein according to the concentration of Example 1 in Raw 264.7 cells stimulated with LPS was confirmed using immunocytochemistry (Immunocytochemistry).

실험방법 : 24well plate에 12mm coverslip을 넣고 RAW 264.7 세포를 1×10cells/ml의 농도로 1ml/well seeding 후 배양 (at 37℃, for 24hours)하고 각 농도별로 샘플을 처리하고 1시간 후 LPS (1μg/ml) 처리하고 다시 배양 (at 37℃, for 24 hours)한 후 배지를 PBS로 씻어내고 4% formalin으로 고정하고 일차항체인 COX-2 (Cell signaling Technology, MA, USA)와 2차 항체(Santa Cruz Biotechnology, CA, USA)를 이용하여 항원을 표지하고 DAB로 발색하고 Mayer’s hematoxylin으로 배경 염색하였다.Experimental method: Put a 12mm coverslip in a 24well plate and seed RAW 264.7 cells at a concentration of 1×10 4 cells/ml at 1 ml/well and incubate (at 37°C, for 24 hours), treat samples at each concentration, and after 1 hour LPS (1μg/ml) and incubated again (at 37℃, for 24 hours), the medium was washed with PBS, fixed with 4% formalin, and secondary antibody with COX-2 (Cell signaling Technology, MA, USA) The antigen was labeled using an antibody (Santa Cruz Biotechnology, CA, USA), developed with DAB, and background stained with Mayer's hematoxylin.

상기 Raw 264.7 세포에 인산염완충식염수(PBS)만을 처리한 것을 정상 세포군으로, LPS(1 μg/ml)를 단독으로 처리하여 대조군을 준비하였다. 또한, LPS(1 μg/ml) 및 Ibuprofen (50 μg/ml)을 처리한 양성 대조군과, LPS(1 μg/ml) 및 실시예 1을 각각 10mg/mL, 20mg/mL, 40mg/mL의 농도로 처리한 실험군을 준비하였다.The Raw 264.7 cells were treated with only phosphate buffered saline (PBS) as a normal cell group, and LPS (1 μg/ml) alone was treated to prepare a control group. In addition, the positive control treated with LPS (1 μg/ml) and Ibuprofen (50 μg/ml), and LPS (1 μg/ml) and Example 1 at concentrations of 10 mg/mL, 20 mg/mL, and 40 mg/mL, respectively An experimental group treated with was prepared.

상기 정상 세포군(PBS), 대조군 (LPS), 양성 대조군 (IBU) 및 실시예 1을 처리한 실험군 1-1(10mg/mL), 1-2(20mg/mL), 1-3(40mg/mL)에 대한 COX-2의 면역세포화학염색 결과를 도 3에 나타내었다.The normal cell group (PBS), control (LPS), positive control (IBU) and experimental group 1-1 (10 mg/mL), 1-2 (20 mg/mL), 1-3 (40 mg/mL) treated with Example 1 ) The results of immunocytochemical staining of COX-2 are shown in FIG. 3.

도 3을 통해 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 실시예 1이 처리된 실험군에서 농도 의존적으로 COX-2의 발현이 억제됨을 확인하였다.As can be seen from FIG. 3, it was confirmed that the expression of COX-2 was suppressed in a concentration-dependent manner in the experimental group treated with Example 1 of the present invention.

실험예 4. iNOS (inducible nitric oxide synthase)의 세포내 발현 억제 실험Experimental Example 4. Intracellular expression inhibition experiment of iNOS (inducible nitric oxide synthase)

아토피성 피부염과 같은 염증반응에서 대식세포 및 비만세포는 iNOS(inducible nitric oxide synthase)를 과발현하여 생성물인 NO(nitric oxide)를 세포 밖으로 과량 분비함으로써 염증반응이 증폭된다. In inflammatory reactions such as atopic dermatitis, macrophages and mast cells overexpress iNOS (inducible nitric oxide synthase) and secrete excess NO (nitric oxide) out of the cells, thereby amplifying the inflammatory reaction.

따라서 본 발명에서는 LPS로 자극된 Raw 264.7 세포에서 실시예 1의 농도에 따른 iNOS 단백질의 발현을 억제하는 효과를 면역세포화학염색법(Immunocytochemistry)을 이용하여 확인하였다. Therefore, in the present invention, the effect of inhibiting the expression of the iNOS protein according to the concentration of Example 1 in Raw 264.7 cells stimulated with LPS was confirmed by using immunocytochemistry.

실험방법 : 24 well plate에 12mm coverslip을 넣고 RAW 264.7 세포를 1×10 cells/ml의 농도로 1 ml/well seeding 후 배양 (at 37℃, for 24 hours)하고 각 농도별로 샘플을 처리하고 1시간 후 LPS (1 μg/ml) 처리 후 다시 배양 (at 37℃, for 24 hours)한 후 배지를 PBS로 씻어낸 후 4% formalin으로 고정하고 일차항체인 iNOS (Santa Cruz Biotechnology, CA, USA)와 2차 항체(Santa Cruz Biotechnology, CA, USA)를 이용하여 항원을 표지하고 DAB로 발색하였다. Mayer’s hematoxylin으로 배경 염색을 하였다.Experimental method: Put a 12mm coverslip in a 24 well plate and seed RAW 264.7 cells at a concentration of 1×10 4 cells/ml at 1 ml/well, then incubate (at 37℃, for 24 hours), and treat the samples at each concentration. After an hour, LPS (1 μg/ml) treatment, culture (at 37°C, for 24 hours), the medium was washed with PBS, fixed with 4% formalin, and the primary antibody, iNOS (Santa Cruz Biotechnology, CA, USA) And a secondary antibody (Santa Cruz Biotechnology, CA, USA) to label the antigen and develop color with DAB. Background staining was performed with Mayer's hematoxylin.

상기 Raw 264.7 세포에 인산염완충식염수(PBS)만을 처리한 것을 정상 세포군으로, LPS(1 μg/ml)를 단독으로 처리하여 대조군을 준비하였다. 또한, LPS(1 μg/ml) 및 Ibuprofen (50 μg/ml)을 처리한 양성 대조군과, LPS(1 μg/ml) 및 실시예 1을 각각 10mg/mL, 20mg/mL, 40mg/mL의 농도로 처리한 실험군을 준비하였다.The Raw 264.7 cells were treated with only phosphate buffered saline (PBS) as a normal cell group, and LPS (1 μg/ml) alone was treated to prepare a control group. In addition, the positive control treated with LPS (1 μg/ml) and Ibuprofen (50 μg/ml), and LPS (1 μg/ml) and Example 1 at concentrations of 10 mg/mL, 20 mg/mL, and 40 mg/mL, respectively An experimental group treated with was prepared.

상기 정상 세포군(PBS), 대조군 (LPS), 양성 대조군 (IBU) 및 실시예 1을 처리한 실험군 2-1(10mg/mL), 2-2(20mg/mL), 2-3(40mg/mL)에 대한 iNOS의 면역세포화학염색 결과를 도 4에 나타내었다.The normal cell group (PBS), control (LPS), positive control (IBU) and experimental group 2-1 (10 mg/mL), 2-2 (20 mg/mL), 2-3 (40 mg/mL) treated with Example 1 ) Is shown in Fig. 4 shows the results of immunocytochemical staining of iNOS.

도 4를 통해 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 실시예 1이 처리된 실험군에서 농도 의존적으로 iNOS의 발현이 억제됨을 확인하였다.As can be seen from Figure 4, it was confirmed that the expression of iNOS was suppressed in a concentration-dependent manner in the experimental group treated with Example 1 of the present invention.

실험예 5. NC/Nga mice를 이용한 아토피성 피부질환 개선 효능시험Experimental Example 5. Atopic skin disease improvement efficacy test using NC/Nga mice

NC/Nga mice에 아토피성 피부염을 유발하는 DNCB(2.4-Dinitrochlorbenzene)를 6주간 피부에 도포하여 아토피 동물모델을 유도하였고 조직병리학적검사(피부조직 병변 관찰, Mast cells 관찰, Eosinophils 관찰)를 실시하였다.Atopic animal model was induced by applying DNCB (2.4-Dinitrochlorbenzene), which causes atopic dermatitis, to NC/Nga mice for 6 weeks, and histopathological examination (skin tissue lesion observation, mast cells observation, Eosinophils observation) was performed. .

실험방법 : 아토피성 피부염 유도는 마우스 등을 전기면도기를 이용하여 1 차 제모를 실시하고 제모크림을 이용하여 2 차 제모를 실시하여 완전히 털을 제거하였다. 1 차 감작 단계(induction stage)에서 입수 후 6 일 째 200㎕ 1% DNCB를 제모된 피부에 도포하였다. 2 차 감작 단계(induction stage)에서는 1 차 감작 후 2 일 째 200㎕ 1% DNCB를 제모된 피부에 도포하였다. 반응 유도 단계(challenge stage)는 2 차 감작 후 4 일 째 부터 150㎕ 0.4 % DNCB를 제모된 피부에 도포하고, 6 주간 주 3회(월/수/금) 반복적으로 도포하여 피부염을 유도하였다.Experimental method: To induce atopic dermatitis, first hair removal was performed on mice, etc. using an electric razor, and second hair removal was performed using a hair removal cream to completely remove hair. On the 6th day after acquisition in the first induction stage, 200 μl 1% DNCB was applied to the depilated skin. In the second induction stage, 200 µl 1% DNCB was applied to the depilated skin on the second day after the first sensitization. In the challenge stage, from the 4th day after the second sensitization, 150µl 0.4% DNCB was applied to the depilated skin and repeatedly applied 3 times a week (Mon/Wed/Fri) for 6 weeks to induce dermatitis.

시험물질 투여는 경구투여용 존데를 이용하여 시험물질 및 양성대조물질을 강제 경구투여 하였다. 투여횟수 및 시각은 1 회/일, 7 일/주, 4 주간, 투여 당일 16 시 이전에 투여하였다. 투여액량은 가장 최근에 측정한 체중을 기준으로 10 ㎖/㎏의 투여액량으로 계산하였다. 시험군의 구성은 아래 표 3과 같다.For the administration of the test substance, the test substance and the positive control substance were forcibly administered orally using the sonde for oral administration. The number and time of administration were administered once/day, 7 days/week, 4 weeks, and before 16:00 on the day of administration. The dose amount was calculated as a dose amount of 10 ml/kg based on the most recently measured body weight. The composition of the test group is shown in Table 3 below.

group 성별gender 동물수
(마리)
Number of animals
(Marie)
투여액량
(㎖/㎏)
Dosage
(Ml/kg)
실시예 1 투여용량
(㎎/㎏/day)
Example 1 dosage
(Mg/kg/day)
G1G1 정상대조군Normal control MaleMale 1010 1010 00 G2G2 AD 대조군AD control MaleMale 1010 1010 00 G3G3 AD 실시예 1(저농도)AD Example 1 (low concentration) MaleMale 1010 1010 200200 G4G4 AD 실시예 1(중농도)AD Example 1 (medium concentration) MaleMale 1010 1010 400400 G5G5 AD 실시예 1(고농도)AD Example 1 (high concentration) MaleMale 1010 1010 800800 G6G6 AD 양성대조군AD positive control MaleMale 1010 1010 00 * G1 : 정상대조군, G2 : 유도 대조군, G3~G5 : 유도 시험군, G6 : 유도 양성대조군
* AD(atopic dermatitis)
* G1: normal control, G2: induction control, G3~G5: induction test group, G6: induction positive control
* Atopic dermatitis (AD)

부검 후 피부조직을 절취하여 조직병리학적 검사를 실시한다. 피부조직의 병변을 확인하기 위하여 hematoxylin & eosin stain을 실시하고, toluidine-blue 염색을 하여 mast cell과 congo red 염색을 하여 eosinophil의 침윤 정도를 확인한다. H&E 염색 상에서는 표피과다형성(hyperplasia, dermal), 진피염증(inflammtion, dermal), 표피의 미란/궤양(erosion/ulcer, epidermal), 각화과다증(hyperkeratosis) 및 진피섬유화(fibrosis, dermal)로 분류하여 각각 Score 0~4(0:normal, 1: minimal, 2: mild, 3: moderate, 4: severe)로 평가하고, 결과를 하기 표 4에 나타내었다.After autopsy, the skin tissue is cut and histopathological examination is performed. To check the lesions of the skin tissue, hematoxylin & eosin stains are performed, and the mast cells and congo red stains are performed with toluidine-blue staining to check the degree of eosinophil infiltration. On H&E staining, it is classified into hyperplasia, dermal, inflammtion, dermal, erosion/ulcer, epidermal, hyperkeratosis, and fibrosis, dermal, respectively. Scores 0-4 (0: normal, 1: minimal, 2: mild, 3: moderate, 4: severe) was evaluated, and the results are shown in Table 4 below.

또한, 실험예 5의 아토피성 피부염 동물모델에서의 결과를 도 5에, 실험예 5의 아토피성 피부염 동물모델에서의 조직병리학적 검사 결과를 도 6에 나타내었다.In addition, the results of the atopic dermatitis animal model of Experimental Example 5 in FIG. 5 and the histopathological test results in the atopic dermatitis animal model of Experimental Example 5 are shown in FIG.

GROUP(㎎/㎏)GROUP(mg/kg) Histopathological criteriaHistopathological criteria G1(0)G1(0) G2(0)G2(0) G3(200)G3(200) G4(400)G4(400) G5(800)G5(800) G6(1)G6(1) Hyperplasia, epidermalHyperplasia, epidermal 0.000.00 2.702.70 2.30 2.30 2.22 2.22 1.60 1.60 1.80 1.80 Inflammation, dermalInflammation, dermal 0.000.00 1.701.70 1.40 1.40 1.11 1.11 1.00 1.00 0.60 0.60 Erosion/Ulcer, epidermalErosion/Ulcer, epidermal 0.000.00 0.300.30 0.10 0.10 0.33 0.33 0.20 0.20 0.20 0.20 HyperkeratosisHyperkeratosis 0.000.00 1.001.00 1.00 1.00 1.00 1.00 0.70 0.70 1.00 1.00 Fibrosis, dermalFibrosis, dermal 0.000.00 1.101.10 1.00 1.00 1.11 1.11 0.60 0.60 1.00 1.00 Total scoreTotal score 0.000.00 6.806.80 5.80 5.80 5.78 5.78 4.10 4.10 4.60 4.60

* G1 : 정상대조군, G2 : 유도 대조군, G3~G5 : 유도 시험군, G6 : 유도 양성대조군* G1: normal control, G2: induction control, G3~G5: induction test group, G6: induction positive control

표 4 및 도 5 내지 도 6을 통해 알 수 있는 바와 같이 피부조직의 병변 관찰결과, 정상대조군군은 이상소견이 관찰되지 않아 모든 항목 점수가 0.00점으로 산정되었으며, 아토피 피부염만 유발시킨 유발대조군은 표피과다형성 및 진피염증 항목에서 다른 시험군과 비교 시 가장 높은 점수를 보였다. 유발 시험군에서는 저농도에서 고농도로 갈수록 표피과다형성 및 진피염증의 점수가 낮아지는 경향을 보였으며, 특히 800 ㎎/㎏/day 투여군에서 각화과다증과 진피섬유화 점수가 낮아지는 경향도 동반되었다. 그리고 전체 합산 점수에서도 유발대조군이 가장 높은 점수를 보였고, 농도가 증가할수록 산정점수가 낮아지는 경향을 보였다. As can be seen from Table 4 and FIGS. 5 to 6, as a result of observing the lesion of the skin tissue, the normal control group did not have any abnormal findings, so all the item scores were calculated as 0.00 points, and the triggering control group that caused only atopic dermatitis was In terms of epidermal hyperplasia and dermal inflammation, it showed the highest score compared to other test groups. In the induction test group, scores of epidermal hyperplasia and dermal inflammation tended to decrease from low concentration to high concentration. In particular, hyperkeratosis and dermal fibrosis scores tended to decrease in the 800 mg/kg/day group. In addition, the triggered control group showed the highest score in the total sum score, and the calculated score tended to decrease as the concentration increased.

실험예 6. Experimental Example 6. in vitroin vitro 유전독성시험 (복귀돌연변이시험) Genotoxicity test (reversion mutation test)

실시예 1의 미생물에 대한 돌연변이 유발성 여부를 확인하기 위해 히스티딘 요구성 균주인 Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535, TA1537과 트립토판 요구성 균주인 Escherichia coli WP2uvrA를 사용하여 직접법과 대사활성법으로 복귀돌연변이시험을 실시하였다. In order to confirm the mutagenicity of the microorganism of Example 1, the histidine-requiring strains Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535, and TA1537 and the tryptophan-requiring strain Escherichia coli WP2uvrA were used to test for return mutations by direct method and metabolic activity method. Was carried out.

식품의약품안전처 고시 제 2015-82 호 (2015 년 11 월 11 일) ‘의약품등의 독성시험기준', OECD Guideline for Testing of Chemicals No. 471 ‘Bacterial Reverse Mutation Test’ (21st July 1997)에 따라 시험을 실시하였다. Preincubation법을 이용하였으며 대사활성계를 적용하는 방법과 적용하지 않는 방법을 병행하여 진행하였다.Ministry of Food and Drug Safety Notification No. 2015-82 (November 11, 2015)'Standards for Toxicity Tests for Pharmaceuticals', OECD Guideline for Testing of Chemicals No. The test was conducted according to 471'Bacterial Reverse Mutation Test' (21st July 1997). Preincubation method was used, and the method of applying and not applying the metabolic activity system was carried out in parallel.

관찰, 측정, 검사 및 분석방법은 아래와 같다Observation, measurement, inspection and analysis methods are as follows.

(1) 콜로니 수의 측정(1) Measurement of the number of colonies

90 ㎜ 직경의 plate (내경 86 ㎜)에 생성된 콜로니를 콜로니카운터 (Model 570, SUNTEX, Taiwan)를 사용하여 계수하였다.Colonies generated on a 90 mm diameter plate (86 mm inner diameter) were counted using a colony counter (Model 570, SUNTEX, Taiwan).

(2) 생육저해유무의 확인방법(2) How to check whether growth is inhibited

육안으로 모든 plate를 관찰하여 확인하였다.All plates were observed and confirmed with the naked eye.

(3) 균 농도의 측정방법(3) Method of measuring bacterial concentration

본 시험기관의 표준작업지침서의 단계희석법에 의한 생균수 측정방법에 따라 균농도를 측정하였다.The bacterial concentration was measured according to the method of measuring the number of viable cells by the step dilution method in the standard work manual of this laboratory.

(4) 무균시험(4) Sterility test

최소글루코즈 한천배지에 0.1 ㎖의 S9 mix 및 시험물질용매를 각각 top agar와함께 중층 시켜 37℃에서 48 시간 배양 후 관찰한 결과 균이 자라지 않은 것을확인할 수 있었다. 이를 통해 시험이 무균적으로 수행되었음을 알 수 있었다.0.1 ml of S9 mix and test substance solvent were layered on the minimum glucose agar medium with top agar, and incubated for 48 hours at 37°C. As a result, it was confirmed that the bacteria did not grow. Through this, it could be seen that the test was performed aseptically.

시험결과의 판정 : 본시험의 결과는 각 플레이트의 복귀돌연변이 콜로니 수에 대한 실측값과 평균값 및 표준편차를 표시한다. 결과의 판정은 대사활성계 존재 유무에 관계없이 최소 1 개 균주에서 플레이트 당 복귀된 집락 수에 있어서 농도 의존적이거나 하나 이상의 농도에서 재현성 있는 증가를 나타낼 때 양성으로 판정하였다. 단, 음성대조군에 비해 2 배 이상 명확히 증가함을 보여야 한다.Judgment of test result: The result of this test is the actual measured value, average value and standard deviation of the number of colonies of the return mutant of each plate. The determination of the results was determined as positive when the number of colonies returned per plate in at least one strain, regardless of the presence or absence of the metabolic activity system, was concentration dependent or showed a reproducible increase in one or more concentrations. However, it should show a clear increase of more than two times compared to the negative control group.

본 시험에서 시험물질을 각 농도 별로 처리한 결과, 직접법의 경우 음성대조군과 비교하여 양성으로 판단할 만한 복귀집락 수의 증가가 관찰되지 않았다. 대사활성법의 경우, TA1537 균주의 5000 ㎍/plate 농도에서 세포독성이 관찰되었으며, 모든 균주에서 음성대조군과 비교하여 양성으로 판단할 만한 복귀집락 수의 증가가 관찰되지 않았다. 이상의 결과를 통해 실시예 1은 본 시험조건 하에서 복귀돌연변이를 유발하지 않는 것으로 판단되었다.In this test, as a result of treating each concentration of the test substance, there was no increase in the number of colonies that could be judged as positive in the case of the direct method compared to the negative control group. In the case of the metabolic activity method, cytotoxicity was observed at the concentration of 5000 μg/plate of the TA1537 strain, and no increase in the number of return colonies that could be judged as positive was observed in all strains compared to the negative control group. Through the above results, it was determined that Example 1 did not induce a return mutation under this test condition.

실험예 7. Experimental Example 7. in vitroin vitro 유전독성시험 (염색체이상시험) Genotoxicity test (chromosome abnormality test)

실시예 1의 염색체이상 유전독성을 평가하기 위하여 Chinese hamster 유래의 난소유아세포 (CHO-k1 cell)를 이용하여 대사활성효소계 (S9)를 적용한 대사활성화법 (+S9 mix) 및 적용하지 않은 직접법 (-S9 mix)에서 염색체이상시험을 실시하였다. 시험물질은 멸균증류수에 분산시킨 후 희석하여 조제하였다.In order to evaluate the genotoxicity of chromosomal abnormalities of Example 1, metabolic activation method (+S9 mix) and direct method without applying metabolic activating enzyme system (S9) using Chinese hamster-derived ovarian infant cells (CHO-k1 cells) ( -S9 mix) chromosomal abnormality test was performed. The test substance was prepared by dispersing in sterile distilled water and then diluting.

본시험의 시험물질 처리농도를 결정하기 위해 세포증식억제시험을 수행한 다음 본시험을 위한 시험물질 최고처리농도를 결정하여 공비 3의 3 단계 농도군으로 다음과 같이 정하였다.In order to determine the treatment concentration of the test substance in the main test, a cell proliferation inhibition test was performed, and the maximum treatment concentration of the test substance for the main test was determined, and the concentration group of the three levels of azeotrope 3 was determined as follows.

직접법 (-S9 mix, 24 시간 연속처리군) : 61.73, 185.19, 555.56 ㎍/㎖Direct method (-S9 mix, 24-hour continuous treatment group): 61.73, 185.19, 555.56 ㎍/㎖

직접법 (-S9 mix, 6 시간 처리 18 시간 회복군) : 61.73, 185.19, 555.56 ㎍/㎖Direct method (-S9 mix, 6 hours treatment 18 hours recovery group): 61.73, 185.19, 555.56 ㎍/㎖

대사활성법 (+S9 mix, 6 시간 처리 18 시간 회복군) : 6.86, 20.58, 61.73 ㎍/㎖Metabolic activity method (+S9 mix, 6 hours treatment 18 hours recovery group): 6.86, 20.58, 61.73 ㎍/㎖

본 시험 결과 대사활성화를 적용시키지 않은 직접법의 24 시간 연속처리군 및 6 시간 처리 18 시간 회복군의 경우 이상중기상의 빈도가 음성대조군과 비교하여 모든 처리농도에서 통계적으로 유의한 증가를 관찰할 수 없었다.As a result of this test, in the 24-hour continuous treatment group and the 6-hour treatment 18-hour recovery group of the direct method without metabolic activation, no statistically significant increase was observed at all treatment concentrations compared to the negative control group. .

대사활성법 (6 시간 처리 18 시간 회복군)의 경우, 모든 처리군에 있어서 이상중기상의 빈도는 음성대조군과 비교하여 통계적으로 유의한 증가를 관찰할 수 없었다.In the case of the metabolic activity method (6 hours treatment and 18 hours recovery group), no statistically significant increase was observed in the frequency of abnormal intermediate phases in all treatment groups compared to the negative control group.

직접법 및 대사활성법에 있어서 배수성(PP) 및 핵내배화(ER)의 빈도는 음성대조군에 비해 통계학적으로 유의한 증가를 나타내지 않았다 (Table 1 & 2). 그러나, 양성대조군에서는 이상중기상의 빈도가 용매대조군에 비해 통계적으로 유의한 증가를 나타내었다 (p<0.05).In the direct method and metabolic activity method, the frequency of ploidy (PP) and endonuclearization (ER) did not show statistically significant increase compared to the negative control group (Tables 1 & 2). However, in the positive control group, the frequency of abnormal intermediate phases showed a statistically significant increase compared to the solvent control group (p<0.05).

이상의 결과를 종합할 때, 본 발명의 실시예 1은 본 시험 조건하에서 CHO-k1 세포에 대해 염색체이상을 유발하지 않는 것으로 판단된다.Taking the above results together, it is judged that Example 1 of the present invention does not induce chromosomal abnormalities in CHO-k1 cells under this test condition.

실험예 8. Experimental Example 8. in vitroin vitro 유전독성시험 (소핵시험) Genotoxicity test (micronucleus test)

실시예 1에 대한 소핵 유발 유무 판단의 기초 자료를 얻기 위하여 유전독성시험 중 ICR 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험을 실시하였다. In order to obtain the basic data for determining the presence or absence of micronucleus induction for Example 1, a micronucleus test was performed using ICR mouse bone marrow cells during the genotoxicity test.

약 8주령의 수컷 마우스에 시험물질 난담반죽염을 2000 ㎎/㎏ bw/day, 1000 ㎎/㎏ bw/day, 500 ㎎/㎏ bw/day의 용량으로 2 일 동안 2 회 경구투여를 실시하였고, 투여 후 18~24 시간에 골수세포를 채취하여 소핵유발빈도와 세포독성을 평가하였다.Male mice of about 8 weeks of age were administered orally twice for 2 days with doses of 2000 mg/kg bw/day, 1000 mg/kg bw/day, and 500 mg/kg bw/day, Bone marrow cells were collected 18 to 24 hours after administration to evaluate micronucleus induction frequency and cytotoxicity.

본 시험에서 적용한 용량범위 내에서 개체 당 약 4000 개의 PCE를 대상으로 MNPCE의 수를 계수한 결과 모든 시험물질 투여군 (2000 ㎎/㎏ bw/day, 1000 ㎎/㎏ bw/day, 500 ㎎/㎏ bw/day)에서 용매대조군과 비교하여 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다. 한편, 양성대조군의 소핵유발빈도는 용매대조군과 비교 시 현저한 증가가 관찰되었다 (p<0.01).As a result of counting the number of MNPCEs targeting about 4000 PCEs per individual within the dose range applied in this study, all test substance administration groups (2000 mg/kg bw/day, 1000 mg/kg bw/day, 500 mg/kg bw /day) showed no statistically significant difference compared to the solvent control group. On the other hand, the micronucleus incidence frequency of the positive control group was significantly increased compared to that of the solvent control group (p<0.01).

세포독성의 지표인 500 개의 적혈구 중 PCE/(PCE+NCE) 비율은 모든 시험물질 투여군에서 용매대조군과 비교 시 뚜렷한 골수세포의 증식억제는 나타나지 않았다.The ratio of PCE/(PCE+NCE) among 500 red blood cells, which is an index of cytotoxicity, did not show any significant inhibition of bone marrow cell proliferation compared to the solvent control group in all test substance administration groups.

이상의 결과로 본 시험 조건하에서 본 발명의 실시예 1은 마우스 골수세포에 대한 소핵을 유발하지 않는 것으로 사료된다.As a result of the above results, it is considered that Example 1 of the present invention does not induce micronuclei in mouse bone marrow cells under this test condition.

실험예 9. Experimental Example 9. in vivoin vivo 단회 경구투여독성시험 Single oral administration toxicity test

본 시험은 시험물질 난담반죽염을 Sprague-Dawley(SD) 계통 암·수 랫드에 단회 경구투여 하였을 때 나타나는 독성증상과 개략적인 치사량을 조사하기 위하여 실시하였다. 시험물질은 320 ㎎/㎏(저용량군), 800 ㎎/㎏(중용량군) 및 2,000 ㎎/㎏(고용량군) 용량으로 실험군을 설정하여 부형제 대조군과 비교하였으며, 실험기간 동안 사망동물의 발생유무, 일반증상, 체중변화 및 실험종료 시 생존동물의 부검소견을 관찰하였다.This test was conducted to investigate the toxicity symptoms and the approximate lethal dose when oral administration of the test substance antifoam kneading salt to Sprague-Dawley (SD) male and female rats. The test substance was set to a dose of 320 mg/kg (low dose group), 800 mg/kg (medium dose group) and 2,000 mg/kg (high dose group) and compared with the excipient control group. General symptoms, weight change and autopsy findings of surviving animals were observed at the end of the experiment.

1) 실험기간 동안 사망동물은 관찰되지 않았고, 암·수 800 ㎎/㎏ 및 2,000 ㎎/㎏ 시험물질 투여군에서 시험물질 투여직후 유연(salivation)이 발생하였다.1) No dead animals were observed during the experiment, and salivation occurred immediately after administration of the test substance in the test substance administration groups of 800 mg/kg and 2,000 mg/kg of male and female.

2) 체중측정결과, 모든 동물에서 정상적인 체중증가가 관찰되었으며, 시험군간 통계학적으로 유의한 변화는 관찰되지 않았다.2) As a result of weight measurement, normal weight gain was observed in all animals, and no statistically significant change was observed between the test groups.

3) 실험종료 시 모든 생존동물의 부검결과, 특이한 육안소견은 관찰되지 않았다.3) At the end of the experiment, no peculiar macroscopic findings were observed as a result of autopsy of all surviving animals.

이상의 결과로 보아, 설치류인 Sprague-Dawley 랫드를 이용하여 시험물질을 단회 경구투여한 결과, 사망동물은 관찰되지 않았고, 시험물질 투여와 관련된 특이한 변화는 관찰되지 않았다.As a result of the above results, a single oral administration of the test substance using rodent Sprague-Dawley rats, no dead animals were observed, and no specific changes related to the administration of the test substance were observed.

= 국책과제정보 == National project information =

과제고유번호 (국가관리번호) : S2424212Assignment identification number (national management number): S2424212

부처명 (출연기관) : 중소벤처기업부Ministry name (contributing institution): Ministry of Small and Medium Venture Business

연구관리전문기관 : 중소기업기술정보진흥원Research Management Professional Institution: Small and Medium Business Technology Information Promotion Agency

연구사업명 (국가연구사업명) : 기술혁신개발사업Research Project Name (National Research Project Name): Technology Innovation Development Project

연구과제명 (국가연구과제명) : 천연물 유래 약용조성물을 활용한 아토피 면역과민성 피부염 개선 기능성 신소재 개발과 사업화Research Project Name (National Research Project Title): Development and commercialization of new functional materials for improving atopic immune hypersensitivity dermatitis using medicinal compositions derived from natural products

기여율 : 1/1Contribution Rate: 1/1

주관기관 : 인산죽염(주)Organizer: Insan Bamboo Salt Co., Ltd.

연구기간 (과제시작일~과제종료일) : 2016년 9월 1일~2018년 8월 31일Research period (project start date ~ project end date): September 1, 2016-August 31, 2018

Claims (5)

난담반 0.1 중량% 내지 50 중량%, 자죽염 1 중량% 내지 90 중량%, 마늘 추출물 1 중량% 내지 20 중량%, 맥아 추출물 0.5 중량% 내지 40중량%, 금은화 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량%, 포공영 추출물 0.5 중량% 내지 5중량%, 유근피 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량% 및 백강잠 추출물 0.5 중량% 내지 5중량%를 함유하는 복합성 혼합물을 유효성분으로 하며,
상기 난담반에 대하여 자죽염은 1 : 17.4의 중랑비로 첨가되고,
상기 복합성 혼합물은 COX-2(cyclooxygenase-2) 효소의 활성을 저해하는 것을 특징으로 하는 아토피성 피부염 개선용 건강 기능성 식품용 조성물.
Nandamban 0.1% to 50% by weight, birch salt 1% to 90% by weight, garlic extract 1% to 20% by weight, malt extract 0.5% to 40% by weight, gold and silver extract 0.5% to 5% by weight, A complex mixture containing 0.5% to 5% by weight of Pogongyeong extract, 0.5% to 5% by weight of Yugeunpi extract, and 0.5% to 5% by weight of Baekanthus extract as active ingredients
For the Nandamban, Jajuk salt is added in a midrange ratio of 1: 17.4,
The complex mixture is a health functional food composition for improving atopic dermatitis, characterized in that it inhibits the activity of the enzyme COX-2 (cyclooxygenase-2).
제1항에 있어서,
상기 난담반은 가열 및 탈수 처리한 담반 분말 및 계란의 난백을 1:0.2 내지 1:1의 중량비로 혼합한 것인 아토피성 피부염 개선용 건강 기능성 식품용 조성물.
The method of claim 1,
The Nandamban is a health functional food composition for improving atopic dermatitis by mixing the heated and dehydrated gallbladder powder and egg white of eggs in a weight ratio of 1:0.2 to 1:1.
삭제delete 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 각각 준비하는 단계; 및
상기 각각의 난담반, 자죽염, 마늘 추출물, 맥아 추출물, 금은화 추출물, 포공영 추출물, 유근피 추출물 및 백강잠 추출물을 혼합하여 복합성 혼합물을 제조하는 단계; 를 포함하고,
상기 준비하는 단계에서, 난담반의 준비는 담반을 100℃내지 150℃에서 가열하여, 함수율이 0.001% 내지 5%가 되도록 탈수한 후, 상온에서 완전 냉각 후에 분말화하여 담반 분말을 제조하고, 상기 담반 분말에 계란의 난백을 1:0.2 내지 1:1의 중량비로 혼합하고,
상기 복합성 혼합물은 난담반 0.1 중량% 내지 50 중량%, 자죽염 1 중량% 내지 90 중량%, 마늘 추출물 1 중량% 내지 20 중량%, 맥아 추출물 0.5 중량% 내지 40 중량%, 금은화 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량%, 포공영 추출물 0.5 중량% 내지 5중량%, 유근피 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량% 및 백강잠 추출물 0.5 중량% 내지 5 중량%를 함유하고,
상기 난담반에 대하여 자죽염은 1 : 17.4의 중랑비로 첨가되며,
상기 복합성 혼합물은 COX-2(cyclooxygenase-2) 효소의 활성을 저해하는 것을 특징으로 하는 아토피성 피부염 개선용 건강 기능성 식품용 조성물 제조 방법.


Preparing each of Nandamban, Jajuk salt, garlic extract, malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract; And
Preparing a complex mixture by mixing the respective Nandamban, Jajuk salt, garlic extract, malt extract, Geumeunhwa extract, Pogongyeong extract, Yugeunpi extract and Baekgangjam extract; Including,
In the preparing step, in the preparation of the Nandamban, the gallbladder is heated at 100°C to 150°C, dehydrated so that the moisture content is 0.001% to 5%, and then completely cooled at room temperature and then powdered to prepare the Gallban powder. The egg white of the egg is mixed with the gallbladder powder in a weight ratio of 1:0.2 to 1:1,
The complex mixture is Nandamban 0.1% to 50% by weight, Jajuk salt 1% to 90% by weight, 1% to 20% by weight of garlic extract, 0.5% to 40% by weight of malt extract, from 0.5% by weight of gold and silver extract It contains 5% by weight, 0.5% to 5% by weight of Pogongyeong extract, 0.5% to 5% by weight of Yugeunpi extract, and 0.5% to 5% by weight of Baekanthus extract,
Jajuk salt is added to the Nandamban at a midrange ratio of 1: 17.4,
The complex mixture is a method for producing a composition for a health functional food for improving atopic dermatitis, characterized in that it inhibits the activity of the enzyme COX-2 (cyclooxygenase-2).


삭제delete
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