KR102101084B1 - Coffee green beans comprising ferment complex extracts including vegetable worms as effective component and manufacturing method thereof - Google Patents

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Abstract

본 발명은 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두 및 그 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 동충하초 특유의 이취가 제거되고, 베타글루칸, 코디세핀 및 폴리페놀의 함량이 증진된 커피생두 및 그 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두 및 그 제조방법에 따르면, 동충하초 특유의 이취가 제거되고, 베타글루칸, 코디세핀 및 폴리페놀의 함량이 증진된 우수한 효과를 가진다.
The present invention relates to coffee green beans containing the cordyceps sinensis fermentation complex as an active ingredient and a method for manufacturing the same, and more specifically, coffee beans having the characteristic odor of cordyceps sinensis removed, and the content of beta glucan, codycepin and polyphenol is improved. It relates to a manufacturing method.
According to the coffee green beans containing the Cordyceps sinensis fermentation complex of the present invention and a manufacturing method thereof, the peculiar smell of Cordyceps sinensis is removed, and the content of beta glucan, codycepin and polyphenol has an excellent effect.

Description

동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두 및 그 제조방법{Coffee green beans comprising ferment complex extracts including vegetable worms as effective component and manufacturing method thereof}Coffee green beans comprising ferment complex extracts including vegetable worms as effective component and manufacturing method thereof

본 발명은 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두 및 그 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 동충하초 특유의 이취가 제거되고, 베타글루칸, 코디세핀 및 폴리페놀의 함량이 증진된 커피생두 및 그 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to coffee green beans containing the cordyceps sinensis fermentation complex as an active ingredient and a method for manufacturing the same, and more specifically, coffee beans having the characteristic odor of cordyceps sinensis removed, and the content of beta glucan, codycepin and polyphenol is improved. It relates to a manufacturing method.

동충하초는 자낭균류이고, 맥각균목이며 동충하초과에 속하는 소형 버섯류로서, 겨울에 벌레상태로 있다가 여름이 되면 버섯이 된다. 동충하초는 곰팡이의 일종인 동충하초균이 살아있는 곤충의 몸으로 들어가 발생하는 곤충기생성 약용버섯으로서, 대표적인 균이 코디셉스(Cordyceps)균이고, 폐를 보호하고 신장을 튼튼하게 함으로 영양 강장제로 사용되고 있으며, 최근 연구에 의하면 높은 항암 성분이 있는 것으로 알려져 있다. 현재까지 알려진 동충하초의 종류는 300 여종에 이르고 있지만, 약용으로 사용되고 있는 동충하초로는 동충하초(sinensis), 번데기동충하초(militaris), 균핵동충하초(ophioglossoides), 매미다발동충하초(sobolifera), 유충흙색다발동충하초(martialis) 또는 백강균(Beauveria bassiana) 등이 있고, 이들 동충하초들은 코디세핀, 코디세핀산 또는 필수 아미노산 등을 성분으로 함유하고 있다.Cordyceps sinensis is an ascending fungus, ermatophyte, and a small mushroom belonging to the Cordyceps superfamily, which remains in the worm state in winter and becomes a mushroom in summer. Cordyceps sinensis is an insect parasitic medicinal mushroom that is caused by the type of fungus, Cordyceps sinensis, which enters the body of a living insect, and is a typical bacterium, Cordyceps, and is used as a nutritional tonic by protecting the lungs and strengthening the kidneys. Studies have shown that it has high anti-cancer properties. There are about 300 species of cordyceps known to date, but the cordyceps used for medicinal purposes are cordyceps (sinensis), pupal cordyceps (militaris), microbial cordyceps (ophioglossoides), cicada multicolor cordyceps (sobolifera), and caterpillar multicolor cordyceps ) Or Baek ganggyun (Beauveria bassiana), and these cordyceps contain codycepin, codycepinic acid, or essential amino acids.

최근 동충하초는 항암뿐만 아니라 면역 증강, 항피로, 노화 방지에 효과가 있음이 밝혀지고 있으며, 일본과 미국에서 발표된 연구결과들 또한 항암 효과, 면역 증강, 신장 이식 후 면역반응 억제, 혈당 강하 효과 등이 있는 것으로 보고된 바 있다. Recently, Cordyceps sinensis has been shown to be effective in enhancing immunity, anti-fatigue, and anti-aging, as well as anti-cancer. Research results published in Japan and the United States also show anti-cancer effects, boosting immunity, suppressing immune responses after kidney transplantation, and lowering blood sugar. It has been reported to exist.

그러나 동충하초는 가격이 고가로 판매되어 일반대중적 식품으로의 활용이 어려울 뿐 아니라 동충하초 특유의 좋지 않은 냄새 때문에 대부분 기능성식품으로 제한적으로 판매되는 등 새로운 시장 창출이 쉽지 않은 형편이다. However, because the price of Dongchunghacho is sold at a high price, it is difficult to utilize it as a general food, and it is not easy to create a new market because it is mostly sold as a functional food due to the bad smell peculiar to Dongchunghacho.

국내에서 동충하초 커피가 시판되어 인터넷을 통해 판매되고 있으나, 알콜분해를 통해 얻은 동충하초 원액을 발효시킨 후 커피에 섞어 제조하는 것이다. 또한, 해외시장에서도 동충하초 커피가 여러종류 시판되고 있으나 이는 인스턴트 커피일뿐아니라 커피 추출액에 동충하초 추출액을 첨가한 형태로 개발되고 있다. Although cordyceps coffee is commercially available in Korea and sold through the Internet, it is produced by fermenting the stock solution of cordyceps obtained through alcohol decomposition and mixing it with coffee. In addition, although several types of Cordyceps coffee are commercially available in the overseas market, this is not only instant coffee, but has been developed in the form of adding Cordyceps extract to coffee extract.

선행특허인 대한민국 등록특허 제10-1371591호는 기능성 커피콩 제조방법에 관한 것으로, 감압 농축된 발효 한약재 추출액과 커피콩을 혼합한 후, 증기를 이용하여 증숙시켜 커피콩에 발효 한약재 추출액 성분을 침투시키고, 커피콩을 멸균, 발효, 건조시킴으로써, 커피콩 외부에 한약재 추출액을 완전히 제거하고, 커피 본래의 맛과 향을 유지하며, 한약재 성분에 의해 커피콩에 함유된 카페인양을 감소시키는 기술을 개시하고 있다.Korean Patent Registration No. 10-1371591, which is a prior patent, relates to a method for manufacturing a functional coffee bean, and after mixing the coffee bean with the fermented herbal extract concentrated under reduced pressure, it is steamed using steam to infiltrate the fermented herbal extract component into the coffee bean. Disclosed is a technique for completely removing the herbal extract from the outside of the coffee bean by sterilizing, fermenting, and drying the coffee bean, maintaining the original taste and aroma of the coffee, and reducing the amount of caffeine contained in the coffee bean by the herbal medicine component Doing.

그러나, 상기한 커피 추출액에 단순히 동충하초 추출액을 첨가한 인스턴트 커피 및 선행특허의 경우에는 동충하초 특유의 이취가 제거되지도 않고 생리활성성분의 증진도 이루어지지 않는다.However, in the case of the instant coffee and the prior patent in which the Cordyceps sinensis extract was simply added to the coffee extract, the odor peculiar to Cordyceps sinensis is not removed and the bioactive component is not enhanced.

따라서, 동충하초 특유의 이취가 제거될 뿐만아니라 생리활성성분도 증진된 커피의 개발에 대한 필요성이 대두되고 있다.Accordingly, there is a growing need for the development of coffee in which odors peculiar to Cordyceps sinensis are not only removed but also bioactive components are enhanced.

대한민국 등록특허 제10-1371591호 (2014. 03. 03)Republic of Korea Registered Patent No. 10-1371591 (2014. 03. 03)

따라서 본 발명의 목적은 동충하초 특유의 이취가 제거되고, 베타글루칸, 코디세핀 및 폴리페놀의 함량이 증진된 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두 및 그 제조방법을 제공하는데 있다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a coffee bean and a method for manufacturing the same, which contain the cordyceps fermentation complex of Cordyceps sinensis, which has a characteristic odor of Cordyceps sinensis and has enhanced beta glucan, codycepin and polyphenol content.

상술한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 실시예에 따른 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두는, 동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물을 포함한다.To achieve the above object, coffee green beans containing the cordyceps sinensis fermentation complex according to an embodiment of the present invention as an active ingredient include cordyceps sinensis extract, Phellinus linteus extract and chaga mushroom extract.

상기 커피생두에 있어서, 상기 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물은 10 내지 90 중량부 : 10 내지 90 중량부의 중량비로 혼합되어 제조된 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물인 것을 특징으로 한다.In the coffee green beans, the situation mushroom extract and chaga mushroom extract is characterized in that the mixed mixture of 10 to 90 parts by weight: 10 to 90 parts by weight prepared by mixing a mixture of situation mushrooms and chaga mushrooms.

상기 커피생두에 있어서, 상기 동충하초 추출물은 70 ~ 80 중량%이고, 상기 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물은 20 ~ 30 중량% 인 것을 특징으로 한다. In the coffee green beans, the Cordyceps sinensis extract is 70 to 80% by weight, and the mixture of the situation mushroom and chaga mushroom is 20 to 30% by weight.

상기 커피생두에 있어서, 상기 추출물은 물로 추출된 것을 특징으로 한다.In the coffee beans, the extract is characterized by being extracted with water.

상기 커피생두에 있어서, 상기 동충하초는 누에동충하초인 것을 특징으로 한다.In the coffee beans, the Cordyceps sinensis is characterized in that the silkworm cordyceps.

상기 커피생두에 있어서, 상기 동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물은 물 1L에 동충하초 분말, 상황버섯 분말 및 차가버섯 분말을 각각 40 내지 60 그램(g) 첨가하여 추출된 것을 특징으로 한다.In the coffee beans, the Cordyceps sinensis extract, Phellinus linteus extract and Chaga mushroom extract are characterized by extracting 40 to 60 grams (g) of Cordyceps sinensis powder, Phellinus linteus powder and Chaga mushroom powder to 1 L of water.

본 발명의 실시예에 따른 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법은, 동충하초 분말을 용매로 추출하여 동충하초 추출물을 수득하는 단계(S10); 상황버섯 분말 및 차가버섯 분말을 각각 용매로 추출하여 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물을 수득하는 단계(S20); 상기 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물을 혼합하여 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물을 제조하는 단계(S30); 및 상기 동충하초 추출물, 및 상기 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물을 혼합하여 동충하초 복합추출물을 제조하는 단계(S40); 상기 동충하초 복합추출물을 발효시켜 동충하초 발효복합물을 제조하는 단계(S50); 상기 동충하초 발효복합물에 커피생두를 침지하여 상기 동충하초 발효복합물을 상기 커피생두에 침투시키는 단계(S60); 상기 동충하초 발효복합물이 침투된 커피생두를 건조하는 단계(S70); 및 상기 건조된 커피생두를 로스팅하는 단계(S80)를 포함한다.A method for preparing coffee green beans containing the Cordyceps sinensis fermentation complex according to an embodiment of the present invention includes extracting Cordyceps sinensis powder with a solvent to obtain Cordyceps sinensis extract (S10); Step of extracting the situation mushroom powder and chaga mushroom powder, respectively, to obtain a situation mushroom extract and chaga mushroom extract (S20); Preparing a mixture of situation mushrooms and chaga mushroom by mixing the situation mushroom extract and chaga mushroom extract (S30); And preparing a compound extract of Cordyceps sinensis by mixing the Cordyceps sinensis extract and the mixture of the situation mushroom and chaga mushroom (S40); Preparing the cordyceps fermentation complex by fermenting the cordyceps complex extract (S50); Immersing the coffee beans in the cordyceps fermentation complex to infiltrate the cordyceps fermentation complex into the coffee beans (S60); Drying the coffee green beans infiltrated with the Cordyceps sinensis (S70); And roasting the dried coffee beans (S80).

상기 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법에서 있어서, 상기 S30단계는, 상기 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물을 10 내지 90 중량부 : 10 내지 90 중량부의 중량비로 혼합하여 상기 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물을 제조하는 것을 특징으로 한다.In the method for preparing coffee green beans containing the Cordyceps fermented complex as an active ingredient, in step S30, the situation mushroom extract and chaga mushroom extract are mixed in a weight ratio of 10 to 90 parts by weight: 10 to 90 parts by weight, And it is characterized in that to prepare a mixture of chaga mushrooms.

상기 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법에서 있어서, 상기 S40단계는, 상기 동충하초 추출물은 70 ~ 80 중량%이고, 상기 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물이 20 ~ 30 중량% 인 것을 특징으로 한다.In the method for producing coffee green beans containing the Cordyceps sinensis fermentation complex as an active ingredient, in step S40, the Cordyceps sinensis extract is 70 to 80% by weight, and the situation mushroom and chaga mushroom extract mixture is 20 to 30% by weight It is characterized by.

상기 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법에서 있어서, 상기 용매는 물인 것을 특징으로 한다.In the method for preparing coffee green beans containing the cordyceps fermentation complex as an active ingredient, the solvent is water.

상기 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법에서 있어서, 상기 동충하초는 누에동충하초인 것을 특징으로 한다.In the method for producing coffee green beans containing the above-mentioned Cordyceps fermented complex as an active ingredient, the Cordyceps sinensis is characterized by being silkworm cordyceps.

상기 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법에서 있어서, 상기 동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물은 물 1L에 동충하초 분말, 상황버섯 분말 및 차가버섯 분말을 각각 40 내지 60 그램(g) 첨가하여 80 ~ 90 ℃에서 추출된 것을 특징으로 한다.In the method for producing coffee green beans containing the Cordyceps sinensis fermentation complex as an active ingredient, the Cordyceps sinensis extract, Phellinus linteus extract and Chaga mushroom extract each contain 40 to 60 grams of Cordyceps sinensis powder, Phellinus linteus powder and Chaga mushroom powder in 1L of water. g) is characterized by being extracted at 80 ~ 90 ℃ by addition.

본 발명의 실시예에 따른 커피는, 동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물을 포함하는 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유한다.The coffee according to the embodiment of the present invention contains the cordyceps fermentation complex comprising cordyceps sinensis extract, Phellinus linteus extract and chaga mushroom extract as an active ingredient.

본 발명의 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두 및 그 제조방법에 따르면, 동충하초 특유의 이취가 제거되고, 베타글루칸, 코디세핀 및 폴리페놀의 함량이 증진된 우수한 효과를 가진다.According to the coffee green beans containing the Cordyceps sinensis fermentation complex of the present invention and its manufacturing method, the peculiar smell of Cordyceps sinensis is removed, and the content of beta-glucan, codycepin and polyphenol has an excellent effect.

도 1은 본 발명에 따른 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물이다.
도 2는 본 발명에 따른 동충하초 발효복합물이다.
도 3은 본 발명에 따른 동충하초 발효복합물을 단순침지한 사진이다.
도 4는 본 발명에 따른 동충하초 발효복합물을 초음파침지한 사진이다.
도 5는 본 발명에 따른 동충하초 발효복합물을 가열침지한 사진이다.
도 6은 본 발명에 따른 단순침지한 커피생두의 로스팅 후 변형된 상태에 대한 사진이다.
도 7은 본 발명의 비교예로 초음파처리한 커피생두의 로스팅 후 변형된 상태에 대한 사진이다.
도 8은 본 발명에 따른 배전 시간에 따른 커피의 품질특성을 나타낸 것이다.
도 9는 본 발명에 따른 코디세핀의 HPLC 크로마토그램 결과이다(A: 스탠다드 B: 샘플).
도 10은 본 발명에 따른 HPLC에 의한 코디세핀의 표준 곡선을 나타내는 그래프이다.
도 11은 본 발명에 따른 다양한 발효 조건에서의 코디세핀의 함량을 나타내는 그래프이다(A: 24시간, B: 48시간, C: 72시간).
도 12는 본 발명에 따른 누에동충하초의 농도 의존적인 코디세핀의 함량을 나타내는 그래프이다(A: 동충하초 5%, B: 동충하초10%, C: 동충하초 15%).
도 13은 대조구(R), 동충하초 단순혼합커피(MIX) 및 동충하초 발효커피(FER)에 대하여 머무름 시간별에 따라 센서로부터 얻어진 진동수의 변화를 미분하여 나타낸 데리버티브 크로마토그램(Derivative chromatogram)이다.
도 14는 대조구(R), 동충하초 단순혼합커피(MIX) 및 동충하초 발효커피(FER)에 대한 베이퍼 프린트(Vapor Print), 폴라 프리퀀시 패턴(Polar Frequency pattern) 및 폴라 데리버티브 패턴(Polar derivative pattern)이다.
Figure 1 is a situation mushroom and chaga mushroom extract mixture according to the present invention.
Figure 2 is a cordyceps fermentation complex according to the present invention.
Figure 3 is a simple immersed picture of the Cordyceps sinensis complex according to the present invention.
Figure 4 is a picture of ultrasonic immersion of the Cordyceps sinensis complex according to the present invention.
5 is a photograph of heating and dipping the cordyceps fermentation complex according to the present invention.
6 is a photograph of a modified state after roasting of simple immersed coffee beans according to the present invention.
7 is a photograph of a modified state after roasting of coffee beans sonicated as a comparative example of the present invention.
8 shows the quality characteristics of coffee according to the roasting time according to the present invention.
9 is a result of the HPLC chromatogram of codycepin according to the present invention (A: Standard B: Sample).
10 is a graph showing a standard curve of codicepin by HPLC according to the present invention.
11 is a graph showing the content of codyspin at various fermentation conditions according to the present invention (A: 24 hours, B: 48 hours, C: 72 hours).
12 is a graph showing the concentration-dependent codysepin content of silkworm cordyceps according to the present invention (A: Cordyceps sinensis 5%, B: Cordyceps sinensis 10%, C: Cordyceps sinensis 15%).
FIG. 13 is a derivative chromatogram showing the differential change of the frequency obtained from the sensor according to the retention time for the control (R), cordyceps simple mixed coffee (MIX) and cordyceps fermented coffee (FER).
FIG. 14 shows Vapor Print, Polar Frequency pattern, and Polar derivative pattern for control (R), Cordyceps simple mixed coffee (MIX) and Cordyceps fermented coffee (FER). to be.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 명세서에 개시된 실시 예를 상세히 설명하되, 도면 부호에 관계없이 동일하거나 유사한 구성요소는 동일한 참조 번호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다. 이하의 설명에서 사용되는 구성요소에 대한 접미사 "모듈" 및 "부"는 명세서 작성의 용이함만이 고려되어 부여되거나 혼용되는 것으로서, 그 자체로 서로 구별되는 의미 또는 역할을 갖는 것은 아니다. 또한, 본 명세서에 개시된 실시 예를 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 명세서에 개시된 실시 예의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다. 또한, 첨부된 도면은 본 명세서에 개시된 실시 예를 쉽게 이해할 수 있도록 하기 위한 것일 뿐, 첨부된 도면에 의해 본 명세서에 개시된 기술적 사상이 제한되지 않으며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. Hereinafter, exemplary embodiments disclosed herein will be described in detail with reference to the accompanying drawings, but the same or similar elements are assigned the same reference numbers regardless of the reference numerals, and overlapping descriptions thereof will be omitted. The suffixes "modules" and "parts" for the components used in the following description are given or mixed only considering the ease of writing the specification, and do not have meanings or roles distinguished from each other in themselves. In addition, in describing the embodiments disclosed in the present specification, when it is determined that detailed descriptions of related known technologies may obscure the gist of the embodiments disclosed herein, detailed descriptions thereof will be omitted. In addition, the accompanying drawings are only for easy understanding of the embodiments disclosed in the present specification, and the technical spirit disclosed in the specification is not limited by the accompanying drawings, and all modifications included in the spirit and technical scope of the present invention , It should be understood to include equivalents or substitutes.

제1, 제2 등과 같이 서수를 포함하는 용어는 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 상기 구성요소들은 상기 용어들에 의해 한정되지는 않는다. 상기 용어들은 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다.Terms including ordinal numbers such as first and second may be used to describe various components, but the components are not limited by the terms. The terms are used only for the purpose of distinguishing one component from other components.

어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "연결되어" 있다거나 "접속되어" 있다고 언급된 때에는, 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되어 있거나 또는 접속되어 있을 수도 있지만, 중간에 다른 구성요소가 존재할 수도 있다고 이해되어야 할 것이다. 반면에, 어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "직접 연결되어" 있다거나 "직접 접속되어" 있다고 언급된 때에는, 중간에 다른 구성요소가 존재하지 않는 것으로 이해되어야 할 것이다.When an element is said to be "connected" or "connected" to another component, it is understood that other components may be directly connected to or connected to the other component, but may exist in the middle. It should be. On the other hand, when a component is said to be "directly connected" or "directly connected" to another component, it should be understood that no other component exists in the middle.

단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. Singular expressions include plural expressions unless the context clearly indicates otherwise.

본 출원에서, "포함한다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.In this application, the terms "comprises" or "have" are intended to indicate the presence of features, numbers, steps, actions, components, parts or combinations thereof described herein, one or more other features. It should be understood that the existence or addition possibilities of fields or numbers, steps, operations, components, parts or combinations thereof are not excluded in advance.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 그러나 하기의 실시예는 단지 설명의 목적을 위한 것이며, 본 발명의 범위를 한정하고자 하는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. However, the following examples are for illustrative purposes only and are not intended to limit the scope of the invention.

실시예Example

실시예Example 1: 동충하초 추출물 및 상황버섯/차가버섯 추출복합액 제조 1: Preparation of compound extract of Cordyceps sinensis and Phellinus linteus / chaga

1) 상황버섯 및 차가버섯발효물 추출액 제조1) Preparation of extracts of situational mushrooms and chaga mushrooms

① 상황버섯을 50∼100㎛의 크기로 분쇄하여 정제수 1 L당 상황버섯분말 50g을 첨가하여 80∼90℃에서 추출한 다음 여과하여 추출액을 수득하였다.     (1) Phellinus linteus was pulverized to a size of 50 to 100 μm, 50 g of phellinus linteus powder per 1 L of purified water was added, extracted at 80 to 90 ° C., and then filtered to obtain an extract.

② 차가버섯을 50∼100㎛의 크기로 분쇄하여 정제수 1L당 차가버섯분말 50g을 첨가하여 60∼70℃에서 추출한 다음 여과하였다.    ② Chaga mushrooms were crushed to a size of 50-100 μm, 50 g of chaga powder per 1L of purified water was added, extracted at 60-70 ° C., and filtered.

③ 상황버섯추출액 + 차가버섯추출액을 40 : 60의 중량비율로 혼합하여 상황버섯 및 차가버섯 추출복합액을 제조하였다(도 1 참조).    ③ A mixture of situational mushroom extract + chaga mushroom extract at a weight ratio of 40: 60 was prepared to extract a situational mushroom and chaga mushroom extract (see FIG. 1).

2) 동충하초발효물 추출액 제조  2) Preparation of extract from Cordyceps sinensis

① 동충하초를 50∼100㎛의 크기로 분쇄하여 정제수 1L당 동충하초분말 50g을 첨가하여 80∼90℃에서 추출한 다음 여과하여 추출액 수득하였다.     ① Cordyceps sinensis was pulverized to a size of 50-100 μm, 50 g of cordyceps powder per liter of purified water was added, extracted at 80-90 ° C., and then filtered to obtain an extract.

② 동충하초추출액 : 상황버섯 및 차가버섯 추출복합액을 90 : 10, 80 : 20, 70 : 30의 중량비율로 혼합하여 24시간 숙성 후 동충하초 이취를 측정하였다. 도 2는 동충하초 발효물 추출액의 사진이다.     ② Cordyceps sinensis extract: The mixed extract of situation mushrooms and chaga mushrooms was mixed at a weight ratio of 90: 10, 80: 20, 70: 30, aged for 24 hours, and then measured for Cordyceps odor. Figure 2 is a photograph of the extract of Cordyceps sinensis.

③ 동충하초 이취 측정 결과    ③ Measurement results of Cordyceps sinensis

동충하초의 이취를 제거하기 위해 상황버섯 및 차가버섯 추출물복합액을 사용하였으며, 여러 가지 조합의 배합비를 적용하여 최적의 배합비를 확립하고자 하였다.   In order to remove the odor of Cordyceps sinensis, a mixed extract of Phellinus linteus and Chaga mushroom was used, and various blending ratios were applied to establish an optimal blending ratio.

동충하초 추출액Cordyceps extract 상황버섯 및 차가버섯 추출복합액Phellinus linteus and chaga extract extract 이취여부Offensive 90%90% 10%10% 이취가 많아 부적절함Inadequate odor 80%80% 20%20% 이취가 제거되어 적절함Odor removed and appropriate 70%70% 30%30% 이취가 제거되어 적절함 Odor removed and appropriate

상기의 결과와 같이 상황버섯 및 차가버섯 추출복합액을 최소한 20% 이상 투입할 때 동충하초의 이취가 효과적으로 제거되는 것으로 보여진다. 본 발명에서 목표로 하는 것은 동충하초의 유효성분인 Cordycepin 함량을 극대화하면서 이취를 최소화하는 것이므로 가장 효과적인 배합비는 80:20의 비율인 것으로 판단된다.     As shown in the above results, it is shown that the odor of Cordyceps sinensis is effectively removed when at least 20% of the medicinal mushroom and chaga extract is added. The goal in the present invention is to maximize the Cordycepin content, which is the active ingredient of Cordyceps sinensis, and minimize odor, so it is determined that the most effective compounding ratio is 80:20.

실시예Example 2: 동충하초 복합액이 침투된  2: Infiltrated cordyceps sinensis complex 커피생두Coffee beans (Green Bean) 제조(Green Bean) Manufacturing

동충하초 발효물복합액을 커피생두에 침투시키기 위한 가장 효율적인 공정을 찾기 위하여 단순침지, 초음파침지 및 가열침지 등 세가지 공정을 시험하였다. 이때 동충하초발효물 복합액과 커피생두의 혼합비율은 2 : 1의 중량비, 즉, 동충하초발효물 복합액 2kg + 커피생두 1kg으로 혼합하여 실험하였으며, 일정 시간이 경과한 후 생두에 흡수되지 않고 남은 잔여량을 측정하여 판단하였다. Simple immersion, ultrasonic immersion, and heating immersion to find the most efficient process for penetrating Cordyceps sinensis fermentation product into coffee beans Three processes were tested. At this time, the mixing ratio of the cordyceps sinensis complex liquid and coffee green beans was tested by mixing with a weight ratio of 2: 1, that is, 2 kg of the cordyceps extract fermentation solution + 1 kg of coffee green beans, and the remaining amount that was not absorbed into the green beans after a certain time has elapsed. It was judged by measuring.

또한, 장시간 침투시 동충하초발효물 복합액이 변질될 우려가 있으므로 최적의 시간 결정은 필수적이다. 따라서 본 실험에서는 상기 3가지 공정으로 처리한 생두를 1, 3, 5일로 비교하여 최적의 침투시간을 결정하고자 하였다. In addition, since there is a possibility that the compound solution of Cordyceps sinensis may be deteriorated during a long time infiltration, it is essential to determine the optimal time. Therefore, in this experiment, the green beans treated with the above three processes were compared to 1, 3, and 5 days to determine the optimal penetration time.

(1) 단순침지 : 동충하초발효물 복합액에 커피생두를 침지하는 방법(도 3 참조) (1) Simple immersion : Method of immersing coffee green beans in the compound solution of Cordyceps sinensis (see FIG. 3)

① 23∼30℃의 온도에서 1일동안 침지하였다. 침지 결과, 커피에 흡수되지 아니한 동충하초발효물 복합액의 잔여량은 175g으로 나타났다.      ① It was immersed for 1 day at a temperature of 23 ~ 30 ℃. As a result of immersion, the residual amount of the compound solution of Cordyceps sinensis that was not absorbed in coffee was 175 g.

② 23∼30℃의 온도에서 3일동안 침지하였다. 침지 결과, 커피에 흡수되지 아니한 동충하초발효물 복합액의 잔여량 없이 전량 흡수되었다.      ② It was immersed for 3 days at a temperature of 23 ~ 30 ℃. As a result of immersion, the whole amount was absorbed without residual amount of the compound solution of Cordyceps sinensis that was not absorbed by coffee.

③ 23∼30℃의 온도에서 5일동안 침지하였다. 침지 결과, 커피에 흡수되지 아니한 동충하초발효물 복합액의 잔여량 없이 전량 흡수되었다.      ③ It was immersed for 5 days at a temperature of 23 ~ 30 ℃. As a result of immersion, the whole amount was absorbed without residual amount of the compound solution of Cordyceps sinensis that was not absorbed by coffee.

(2) 초음파침지 : Ultrasonic water bath를 응용하여 커피생두에 동충하초발효물 복합액을 침투시키는 방법(도 4 참조) (2) ultrasonic immersion : Method of infiltrating the green bean extract fermentation compound into coffee green beans by applying an ultrasonic water bath (see FIG. 4)

① Ultrasonic water bath를 30분동안 적용한 후 1일동안 침지하였다. 침지 결과, 커피에 흡수되지 아니한 동충하초발효물 복합액의 잔여량은 83g으로 나타났다.① Ultrasonic water bath was applied for 30 minutes and then immersed for 1 day. As a result of immersion, the residual amount of the compound solution of Cordyceps sinensis that was not absorbed in coffee was 83 g .

② Ultrasonic water bath를 30분동안 적용한 후 3일동안 침지하였다. 침지 결과, 커피에 흡수되지 아니한 동충하초발효물 복합액의 잔여량 없이 전량 흡수되었다.      ② Ultrasonic water bath was applied for 30 minutes and then immersed for 3 days. As a result of immersion, the whole amount was absorbed without residual amount of the compound solution of Cordyceps sinensis that was not absorbed by coffee.

③ Ultrasonic water bath를 30분동안 적용한 후 5일동안 침지하였다. 침지 결과, 커피에 흡수되지 아니한 동충하초발효물 복합액의 잔여량 없이 전량 흡수되었다.      ③ Ultrasonic water bath was applied for 30 minutes and then immersed for 5 days. As a result of immersion, the whole amount was absorbed without residual amount of the compound solution of Cordyceps sinensis that was not absorbed by coffee.

(3) 가열침지 : 생두와 동충하초발효물 복합액을 함께 장시간 가열하는 방법(도 5 참조) (3) Heating immersion : a method of heating a mixture of fresh green beans and cordyceps fermented for a long time together (see Fig. 5)

① 90∼100℃의 온도에서 1시간 동안 가열한 후 1일동안 침지하였다. 침지 결과, 커피에 흡수되지 아니한 동충하초발효물 복합액의 잔여량은 38g으로 나타났다.① It was immersed for 1 day after heating for 1 hour at a temperature of 90 ~ 100 ℃. As a result of immersion, the residual amount of the compound solution of Cordyceps sinensis that was not absorbed in coffee was 38 g .

② 90∼100℃의 온도에서 1시간 동안 가열한 후 3일동안 침지하였다. 침지 결과, 커피에 흡수되지 아니한 동충하초발효물 복합액의 잔여량 없이 전량 흡수되었다.      ② It was immersed for 3 days after heating for 1 hour at a temperature of 90 ~ 100 ℃. As a result of immersion, the whole amount was absorbed without residual amount of the compound solution of Cordyceps sinensis that was not absorbed by coffee.

③ 90∼100℃의 온도에서 1시간 동안 가열한 후 5일동안 침지하였다. 침지 결과, 커피에 흡수되지 아니한 동충하초발효물 복합액의 잔여량없이 전량 흡수되었다.       ③ It was immersed for 5 days after heating for 1 hour at a temperature of 90 ~ 100 ℃. As a result of immersion, the whole amount was absorbed without remaining amount of the compound solution of Cordyceps sinensis that was not absorbed by coffee.

(4) 침지 결론 (4) conclusion of immersion

침지공정별 최적의 침지조건은 다음과 같다.  The optimum immersion conditions for each immersion process are as follows.

① 단순침지 : 23∼30℃의 온도에서 3일       ① Simple immersion: 3 days at a temperature of 23 ~ 30 ℃

② 초음파침지 : Ultrasonic water bath를 30분동안 적용한 후 3일       ② Ultrasonic immersion: 3 days after applying the ultrasonic water bath for 30 minutes

③ 가열침지 : 90∼100℃의 온도에서 1시간 동안 가열한 후 3일       ③ Heating immersion: 3 days after heating for 1 hour at a temperature of 90 ~ 100 ℃

2) 2) 각 공정별로For each process 제조한  Manufactured 커피원두의Coffee beans 로스팅Roasting  after 변형정도Deformation degree

각 침지공정에 의하여 침지가 완료된 커피생두를 수분 함유율 10%로 건조한 후 roasting한 커피원두의 상태를 관찰하였다. 로스팅에 의해 변형될 수 있는 커피원두의 상태는 커피의 맛과 아로마에 매우 중요한 영향을 주며 상품성에 결정적이기 때문에 변형을 최소화 할수 있는 공정을 선택하는 것이 중요하다. After the coffee beans, which had been immersed in each immersion process, were dried to a moisture content of 10%, the state of the roasted coffee beans was observed. The condition of coffee beans that can be transformed by roasting has a very important effect on the taste and aroma of coffee, and it is important to select a process that minimizes the deformation because it is crucial to the productability.

표 2에서와 같이 단순침지한 경우 깨짐성이 3%로 가장 낮았고, 초음파 처리한 생두는 44%에 이르는 커피빈이 깨진 것으로 나타났다. 커피원두의 깨짐현상이 높을수록 상품성이 저하되는 바, 최적의 침지방법은 커피원두의 단순침지 공정인 것으로 판단된다.    As shown in Table 2, in the case of simple immersion, the friability was the lowest at 3%, and the soybeans treated were 44% broken in coffee beans. The higher the cracking phenomenon of the coffee beans, the lower the marketability. The optimal immersion method is considered to be a simple immersion process for coffee beans.

공정분류Process classification 로스팅Roasting 후 깨진  Broken after 커피원두Coffee beans 비율 ratio 단순침지 커피생두Simple immersion coffee green beans 3%3% 초음파침지 커피생두Ultrasonic immersion coffee 44%44% 가열침지 커피생두Heated coffee beans 37%37%

3) 결론   3) Conclusion

생두에의 효율적인 침투율과 로스팅 후 커피원두의 깨짐성으로 분석한 결과 최적의 침지시간 및 침지방법은 단순침지법으로 3일간 처리하는 공정인 것으로 판단된다. 이는 초음파침지나 가열침지 방법처럼 추가로 발생되는 비용이 없다는 점에서 생산비가 절감되는 장점이 있기 때문에 현장에서 적용하기 가장 유리한 공정으로 판단된다.      As a result of analyzing the effective penetration rate of green beans and the friability of coffee beans after roasting, it is determined that the optimal immersion time and immersion method is a process for 3 days with a simple immersion method. This is considered as the most advantageous process to be applied in the field because it has the advantage of reducing the production cost in that there is no additional cost, such as ultrasonic immersion or heat immersion.

실시예Example 3: 동충하초  3: Cordyceps sinensis 커피생두의Coffee beans 건조 및 배전 최적조건 확립 Establish optimal conditions for drying and distribution

동충하초 복합액이 침투된 커피생두의 품질변화 없는 건조 및 배전조건을 확립하기 위하여 다음과 같은 실험을 진행하였다.The following experiment was conducted to establish the drying and distribution conditions without changing the quality of coffee beans infiltrated with Cordyceps sinensis.

가. 방법end. Way

1)   One) 생두의Green beans 건조방법 및 시간  Drying method and time

① 고온건조 (130℃) : 130℃의 온도에서 고온건조를 진행하여 4시간 후부터 30분 간격으로 수분함유율 12%에 도달할 때까지 수분측정을 시행하였다.    ① High-temperature drying (130 ℃): High-temperature drying was performed at a temperature of 130 ℃, and moisture measurement was performed from 4 hours to 30% intervals until the moisture content reached 12%.

② 열풍건조(60℃) : 60℃의 온도에서 열풍건조를 진행하여 18시간 후부터 30분 간격으로 수분함유율 12%에 도달할 때까지 수분측정을 시행하였다.    ② Hot air drying (60 ℃): Hot air drying was performed at a temperature of 60 ℃, and moisture measurement was performed from 18 hours to 30% of the water content until it reached 12%.

2) 배전(Roasting) 온도 및 시간   2) Roasting temperature and time

동종업계에서 통상적으로 시행하는 배전온도 180℃를 기준으로 하여 배전을 실시하였으며, 배전시간을 10분, 12분, 14분, 16분, 20분 및 25분 등으로 달리하여 최적의 배전시간을 결정하고자 하였다.      The distribution was performed based on the distribution temperature 180 ℃, which is usually performed in the same industry, and the optimal distribution time was determined by varying the distribution time to 10 minutes, 12 minutes, 14 minutes, 16 minutes, 20 minutes, and 25 minutes. I wanted to.

나. 결과I. result

1)   One) 생두의Green beans 건조방법 및 시간  Drying method and time

최적의 생두 건조방법과 시간을 결정하기 위하여 고온건조와 열풍건조 공정을 시험한 결과는 다음과 같다. The results of testing the high-temperature drying and hot-air drying processes to determine the optimal method of drying green beans and time are as follows.

① 고온건조 (130℃) : 수분함량 12% 건조 소요시간 = 6.5시간  ① High temperature drying (130 ℃): Water content 12% Drying time = 6.5 hours

② 열풍건조 (60℃) : 수분함량 12% 건조 소요시간 = 22시간  ② Hot air drying (60 ℃): Moisture content 12% Drying time = 22 hours

따라서 효율적인 최적의 생두 건조는 고온에서 단시간에 처리하는 것이지만, 130℃의 고온에서 처리할 경우 지나친 열처리에 의해 커피원두의 열화현상이 우려되므로 온화한 조건인 열풍건조법을 선택하였다.    Therefore, the efficient optimal drying of green beans is a short-time treatment at a high temperature, but when treating at a high temperature of 130 ° C., the hot air drying method, which is a mild condition, was selected because the coffee beans may be deteriorated due to excessive heat treatment.

2) 배전(Roasting) 시간에 따른 커피의 품질특성 결과를 도 8에 나타내었다. 배 전온도 180℃에서 배전시간은 14분이 최적조건인 것으로 나타났다.   2) Results of quality characteristics of coffee according to roasting time are shown in FIG. 8. At the distribution temperature of 180 ℃, the distribution time was found to be optimal for 14 minutes.

실시예Example 4:  4: HPLC에HPLC 의한 동충하초 커피의  Of cordyceps coffee 코르디세핀Cordipine (( CordycepinCordycepin ) 함량 분석) Content analysis

가. 방법end. Way

1) 실험 재료1) Experimental materials

본 실험에 사용한 동충하초 시료는 ㈜가화에프앤비(충북, 진천)에서 구매한 cordycepin 고함유 Cordyceps militaris 누에동충하초 시료를 건조시킨 후 분말화하여 사용하였다. 동충하초 분말은 외관상 옅은 갈색을 띄었으며 동충하초 특유의 냄새를 지니고 있었다. Cordyceps sample used in this experiment was used in powdered, dried and containing a cordycepin Cordyceps militaris silkworm Cordyceps sample purchased from ㈜ gahwa epeuaen ratio (Chungbuk, Jincheon). The cordyceps powder had a light brown appearance and had a peculiar smell of cordyceps.

2) 2) HPLC에HPLC 의한  by CordycepinCordycepin 함량 분석  Content analysis

Cordycepin 함량분석을 위해 커피분말 시료를 3차 증류수에 넣어 초음파 추출 후 0.22 μsyringe filter로 여과한 것을 검액으로 사용하였다. Cordycepin 표준물질(Cordycepin from Cordyceps militaris, Sigma C3394)을 각각 농도별로 용매에 희석하여 표준용액으로 하고 각 농도에 따른 peak area로 계산하여 정량곡선을 작성하였다. 용액 시료 내 cordycepin 함량을 표 3의 HPLC(High Performance Liquid Chromatograph) 분석조건에서 측정하였다.For cordycepin content analysis, a coffee powder sample was placed in tertiary distilled water, ultrasonically extracted, and filtered with a 0.22 μsyringe filter as a sample solution. Cordycepin standard (Cordycepin from Cordyceps militaris and Sigma C3394) were diluted in a solvent for each concentration to make a standard solution, and calculated as a peak area for each concentration to prepare a quantitative curve. The cordycepin content in the solution sample was measured under HPLC (High Performance Liquid Chromatograph) analysis conditions of Table 3.

Figure 112018079901526-pat00001
Figure 112018079901526-pat00001

나. 결과I. result

1)   One) CordycepinCordycepin 표준품 확인 및  Standard product confirmation and 검량곡선Calibration curve 작성  write

Cordycepin 분석을 위한 표준품의 peak에 대한 retention time(RT) 확인 및 농도에 따른 검량선 작성 결과는 다음과 같다. 표 3에서와 같은 분석조건에서 cordycepin은 RT 12.5 min에서 peak가 확인되었다. 이에 따라 동충하초 커피의 발효조건 등을 확립하기 위하여 분석을 실시하였다(도 9 및 도 10 참조). The results of checking the retention time (RT) for the peak of the standard for Cordycepin analysis and preparing the calibration curve according to the concentration are as follows. In the analysis conditions as shown in Table 3, cordycepin peak was observed at RT 12.5 min. Accordingly, analysis was conducted to establish the fermentation conditions of Dongchunghacho coffee (see FIGS. 9 and 10).

2) 동충하초의 첨가량 결정  2) Determination of the amount of cordyceps

① 발효시간에 따른 cordycepin 함량 ① Cordycepin content according to fermentation time

동충하초 커피의 발효시간을 24, 48, 72시간으로 하였을 때 cordycepin은 검출되지 않았다.      Cordycepin was not detected when the fermentation time of Cordyceps coffee was 24, 48, or 72 hours.

② 문제점 발견 및 해결  ② Problem detection and resolution

커피생두의 발효에 사용한 동충하초는 현미를 기주로 하여 인공배양된 제품이었으며 해당 동충하초에 cordycepin 함량이 극히 미미하여 커피생두로 이행되지 못했음이 발견되어 동충하초 원료 자체를 타사 제품으로 교체하였다.    The cordyceps used for fermentation of coffee beans was artificially cultured based on brown rice, and the cordycepin content was very insignificant in the cordyceps.

③ 누에동충하초를 사용하여 발효한 커피의 Cordycepin 확인  ③ Check Cordycepin of fermented coffee using silkworm cordyceps

누에동충하초를 사용한 발효커피의 cordycepin 함량은 동충하초 첨가량에 따라 농도의존적으로 나타남이 확인되었다. 즉, 누에동충하초를 5, 10 및 15% (w/w)로 첨가량을 증가시킴에 따라 cordycepin 함량은 597.14 mg/kg, 1,224.56 mg/kg 및 2,274.70 mg/kg 으로 증가하였다(도 12 참조).     It was confirmed that the cordycepin content of the fermented coffee using silkworm cordyceps was concentration-dependent depending on the amount of cordyceps. That is, the cordycepin content increased to 597.14 mg / kg, 1,224.56 mg / kg and 2,274.70 mg / kg as silkworm cordyceps was increased to 5, 10 and 15% (w / w) (see Fig. 12).

본 발명에서 설정한 정량지표로서 cordycepin 목표 함량은 1~10 mg/100g 이었으며, 누에동충하초를 5% 첨가시에도 충분함이 확인되어 발효커피 제조시 첨가할 누에동충하초의 양은 5%로 결정하였다.      As a quantitative indicator set in the present invention, the target content of cordycepin was 1-10 mg / 100g, and it was confirmed that 5% of silkworm cordyceps was sufficient, and the amount of silkworm cordyceps to be added during the preparation of fermented coffee was determined to be 5%.

동충하초 (%)Cordyceps (%) 커피 내 코디세핀 함량 (mg/kg)Codycepine content in coffee (mg / kg) 55 597.14  597.14 1010 1,224.561,224.56 1515 2,274.702,274.70

실시예Example 5: 동충하초 커피의 β-글루칸( 5: β-glucan of Cordyceps coffee ( glucanglucan ) 함량 분석) Content analysis

가. 방법end. Way

β-glucan 분석은 Megazyme kit의 방법을 사용하여 분석하였다. 즉, Total glucan을 먼저 구한 후 α-glucan 량을 빼서 β-glucan 정량하였다.     β-glucan analysis was performed using the method of Megazyme kit. That is, the total glucan was first obtained, and then the amount of α-glucan was subtracted to quantify β-glucan.

Total glucan은 시료 0.1 g 을 tube에 넣어 37% HCl 1.5 mL을 넣고 45분간 30℃ water bath에 넣어 분해하였다. 그 후 증류수 10 mL을 넣어 vortex하고, 100℃에서 2시간 incubation 시켰다. 그 후 실온에서 식히면서 2 N KOH를 10 mL씩 넣고 200 mM Sodium acetate buffer로 100 mL로 양을 조절 한 후 충분히 mixing 하였다. 그 후 상등액 0.1 mL에 200 mM sodium acetate buffer에 녹인 exo-1,3-β-glucanase plus β-glucosidase 0.1 mL을 넣고, reagent blank는 acetate buffer 0.2 mL을 넣고, D-glucose standard는 D-glucose standard 0.1 mL와 acetate buffer 0.1 mL을 넣고 mixing 후 40℃에서 60분 동안 incubation 하였다. Glucose oxidase/peroxidase mixture(GOPOD) 3 mL을 넣고 40℃에서 20분 동안 incubation 한 후, 510 nm에서 흡광도를 측정하였다.     Total glucan was decomposed by placing 0.1 g of sample in a tube, adding 1.5 mL of 37% HCl, and placing it in a 30 ° C water bath for 45 minutes. After that, 10 mL of distilled water was added to vortex and incubated at 100 ° C for 2 hours. Then, while cooling at room temperature, 10 mL of 2 N KOH was added, and the amount was adjusted to 100 mL with 200 mM Sodium acetate buffer, followed by sufficient mixing. Then, 0.1 mL of exo-1,3-β-glucanase plus β-glucosidase dissolved in 200 mM sodium acetate buffer in 0.1 mL of supernatant, 0.2 mL of acetate buffer for reagent blank, and D-glucose standard for D-glucose standard 0.1 mL and 0.1 mL of acetate buffer were added, followed by mixing and incubation at 40 ° C for 60 minutes. After adding 3 mL of a Glucose oxidase / peroxidase mixture (GOPOD) and incubating at 40 ° C. for 20 minutes, absorbance was measured at 510 nm.

α-Glucan은 시료 0.1 mL을 tube에 넣고 2 M KOH 2 mL씩 넣고 20분간 mixing 하였다. 1.2 M Sodium acetate buffer 8 mL를 넣고 섞은 후 amyloglucosidase plus invertase 0.2 mL을 넣고, 잘 섞어서 40℃ water bath에서 30 분간 incubation 하였다. 상등액 0.1 mL에 200 mM sodium acetate buffer 0.1 mL와 GOPOD 3 mL을 넣고 40℃에서 20분간 incubation 한 후, 510 nm 흡광도에서 측정하였다.    For α-Glucan, 0.1 mL of the sample was placed in a tube, and 2 mL of 2 M KOH was added, followed by mixing for 20 minutes. After adding 8 mL of 1.2 M Sodium acetate buffer and mixing, add 0.2 mL of amyloglucosidase plus invertase, mix well, and incubate for 30 minutes in a 40 ℃ water bath. 0.1 mL of 200 mM sodium acetate buffer and 3 mL of GOPOD were added to 0.1 mL of the supernatant, followed by incubation at 40 ° C for 20 minutes, and measured at 510 nm absorbance.

Total Glucan (% w/w) = ΔE x F x 100/0.1 x 1/1000 x 100/W x 162/180Total Glucan (% w / w) = ΔE x F x 100 / 0.1 x 1/1000 x 100 / W x 162/180

= ΔE x F/W x 90                      = ΔE x F / W x 90

α-Glucan (% w/w) = ΔE x F x 1000(or 103) x 1/1000 x 100/W x 162/180 α-Glucan (% w / w) = ΔE x F x 1000 (or 103) x 1/1000 x 100 / W x 162/180

= ΔE x F/W x 90 (final volume 100 mL)                   = ΔE x F / W x 90 (final volume 100 mL)

= ΔE x F/W x 9.27 (final volume 10.3 mL)                  = ΔE x F / W x 9.27 (final volume 10.3 mL)

∴ β-Glucan = Total Glucan - α-Glucan∴ β-Glucan = Total Glucan-α-Glucan

ΔE = 반응흡광도 - 공시료흡광도ΔE = reaction absorbance-sample absorbance

F = ug D-glucose 전환계수 = 100/D-glucose STD 흡광도F = ug D-glucose conversion factor = 100 / D-glucose STD absorbance

W = 시료무게W = sample weight

나. 결과I. result

β-glucan의 함량을 분석한 결과를 표 5에 나타내었다. 상황버섯과 차가버섯으로 발효한 커피의 경우 1.28%로 나타났고, 상황/차가버섯과 동충하초로 발효한 경우 2.03%로 훨씬 증가하였다. 결과적으로 β-glucan 함량은 0.1~1.0%로 목표한 지표를 훨씬 상회하고 있어 본 발명에서 개발한 발효커피는 β-glucan 함량이 우수한 기능성 커피라 할수 있다.     Table 5 shows the results of analyzing the content of β-glucan. In the case of coffee fermented with yellow oyster mushroom and chaga mushroom, it was 1.28%, and when fermented with yellow oyster mushroom and chaga mushroom, it increased significantly to 2.03%. As a result, the β-glucan content is much higher than the target index of 0.1 to 1.0%, so the fermented coffee developed in the present invention can be said to be a functional coffee with excellent β-glucan content.

구 분division Total-glucan(%)Total-glucan (%) α-glucan(%)α-glucan (%) β-glucan(%)β-glucan (%) 상황/차가/동충 발효커피Situation / Chaga / Cordyceps Coffee 3.113.11 1.081.08 2.03±0.112.03 ± 0.11 상황/차가 발효커피Situation / Chaga Fermented Coffee 2.422.42 1.151.15 1.28±0.051.28 ± 0.05

실시예Example 6: 동충하초 커피의 총 폴리페놀화합물 함량 분석 6: Analysis of total polyphenol compound content in Cordyceps choco coffee

가. 방법end. Way

폴리페놀성 물질에 의해 Folin-Ciocalteu reagent가 환원되면 몰리브덴 청색으로 발색하는 원리를 이용하여 다음과 같이 분석하였다. 즉, 시료 메탄올 추출물을 50 mg/mL의 농도로 각각의 용매에 녹인 후 이중 20 uL를 취해 2 mL tube에서 증류수 1.4 mL로 희석하고 Folin-Denis reagent를 0.1 mL 가하여 진탕하였다. 3분후 0.2 mL sodium carbonate 포화용액을 가하고 전체를 2 mL로 정용하여 잘 혼합한 후 40℃에서 1시간 동안 방치 후 spectrophotometer(DU 650, Beckman Coulter Inc., Miami, FL, USA)로 765 nm에서 흡광도를 측정하였으며 이때의 표준곡선은 gallic acid를 이용하여 작성하였다.    When the Folin-Ciocalteu reagent was reduced by a polyphenolic substance, it was analyzed as follows using the principle of developing a molybdenum blue color. That is, the sample methanol extract was dissolved in each solvent at a concentration of 50 mg / mL, and 20 uL was taken, diluted with distilled water 1.4 mL in a 2 mL tube, and 0.1 mL of Folin-Denis reagent was added and shaken. After 3 minutes, add 0.2 mL sodium carbonate saturated solution, mix the whole with 2 mL, mix well, leave at 40 ° C for 1 hour, and absorbance at 765 nm with a spectrophotometer (DU 650, Beckman Coulter Inc., Miami, FL, USA). The standard curve at this time was prepared using gallic acid.

나. 결과I. result

총폴리페놀 화합물을 정량하기 위해 gallic acid를 농도별로 달리하여 작성한 standard curve는 다음과 같이 직선성이 거의 완벽하게 얻어졌고(R²= 0.9887), 이를 바탕으로 커피시료의 총폴리페놀 화합물의 양을 측정하였다.    In order to quantify the total polyphenol compound, the standard curve prepared by varying gallic acid for each concentration obtained almost perfectly the linearity as follows (R² = 0.9887), and based on this, measures the amount of the total polyphenol compound in the coffee sample. Did.

폴리페놀(polyphenol)은 식물에서 발견되는 화학물질의 일종으로서 분자 하나에 페놀 그룹이 두 개 이상 있는 것이 특징이다. 폴리페놀의 종류는 수천 가지가 넘는데 녹차에 든 카테킨, 포도주의 레스베라트롤, 양파의 쿼세틴 등이 대표적이다. 과일에 많은 플라보노이드와 콩에 많은 이소플라본도 폴리페놀의 일종이다. 이러한 폴리페놀은 광합성에 의해 생성되며 대개 식물의 색소와 쓴맛 성분에 기여한다.     Polyphenol (polyphenol) is a kind of chemical found in plants characterized by having more than one phenol group in a molecule. There are more than thousands of polyphenols, such as catechins in green tea, resveratrol in wine, and onyx quercetin. Many flavonoids in fruits and isoflavones in soybeans are also polyphenols. These polyphenols are produced by photosynthesis and usually contribute to plant pigments and bitterness.

총폴리페놀 함량을 측정한 결과 상황/차가버섯과 동충하초를 사용하여 발효한 커피는 39.10 mg/g coffee bean과 같이 매우 높은 함량을 나타내어 고무적이었다. 이는 상황버섯 원물의 22.30 mg/g 및 상황버섯만으로 발효한 커피의 28.11 mg/g 보다 월등히 높은 값이어서 상황버섯 및 동충하초를 동시에 사용하면 시너지효과(synergic effect)가 나타나는 것으로 사료된다. 본 발명의 평가목표로 한 총폴리페놀 함량은 450 mg/100g 으로 이를 충분히 달성하는 수치로 나타났다.     As a result of measuring the total polyphenol content, the coffee fermented using the situation / chaga mushroom and cordyceps showed a very high content, such as 39.10 mg / g coffee bean, which was encouraging. This is significantly higher than 22.30 mg / g of raw mushrooms and 28.11 mg / g of coffee fermented with only mushrooms, so synergic effects appear when both mushrooms and cordyceps are used simultaneously. The total polyphenol content as an evaluation target of the present invention was found to be 450 mg / 100 g, which is sufficient to achieve this.

Coffee SamplesCoffee Samples Total polyphenol (mg/g coffee bean)Total polyphenol (mg / g coffee bean) 상황버섯 원물Raw mushrooms 22.3022.30 상황단순혼합커피Simple coffee mix 31.5931.59 상황발효커피Situation Coffee 28.1128.11 상황/차가/동충 발효커피Situation / Chaga / Cordyceps Coffee 39.1039.10

실시예Example 7: 동충하초 커피의 관능평가 7: Sensory evaluation of Dongchunghacho coffee

가. 방법end. Way

동충하초를 첨가하기 전후의 커피추출액에 대한 패널요원 관능평가를 실시하였다. 총 3차에 걸쳐 실시하였으며 단계별로 목적에 맞는 관능검사법을 적용하여 평가하였다.    Sensory evaluation of panel agents on coffee extracts before and after adding cordyceps was performed. It was conducted over a total of 3 times and evaluated by applying sensory test methods suitable for the purpose in stages.

나. 결과 I. result

1) 1차 관능평가 1) 1st sensory evaluation

① 목표 : 동충하초 특유의 쿰쿰한 냄새가 소비자들에게 식별이 되는지 알기 위하여 오리지널 커피에 동충하초 분말을 단순히 혼합하여 대조구(동충하초가 없는 오리지널 커피빈)와 맛이 다른지를 찾아내도록 함.   ① Goal: To find out if the unique smell of Dongchunghacho is discernable to consumers, simply mix the powder of Dongchunghacho with the original coffee to find out if the taste is different from the control (original coffee bean without cordyceps).

② 방법 : 삼점검사(Triangle Test)  ② Method: Triangle Test

▶3개의 시료 중 2개는 같은 시료를 제시하고 나머지 1개는 다른 시료를 제시하여 패널로 하여금 다른 1개를 선택하게 하고 선택된 1개가 나머지 것과의 기호도에 대하여 평가하는 방법으로 2점법에 비하여 통계적 유의성이 높은 측정법이다. ▶ Two of the three samples present the same sample, and the other one presents a different sample, allowing the panel to select the other one, and evaluating the preference of the selected one to the other one. This is a highly meaningful measure.

▶동일한 2개의 검사물과 서로 다른 1개의 검사물(모두 3개)을 패널요원에게 제시하여, 제시된 순서대로 왼쪽에서부터 시료를 맛보고 서로 다른 검사물을 선택하도록 지시한다.     ▶ Present the same 2 specimens and 1 different specimen (all 3) to the panelists, instruct them to taste the samples from the left in the order presented and select different specimens.

▶두 검사물 A, B가 있다고 가정하면 A나 B중에서 어느 하나가 이중으로 등장하게 되며, 이들로 이루어지는 검사물의 조합은 다음과 같다.    ▶ Assuming that there are two test objects A and B, either one of A or B will appear in duplicate, and the combination of the test items consisting of them is as follows.

ABB BAB BBAABB BAB BBA

BAA ABA AABBAA ABA AAB

③ 패널요원 : “관능평가및실습”정규 수업과정을 이수한 세명대 식품영양학과 3학년 학생들 35명   ③ Panelists: 35 students from the third year of food and nutrition at Semyung University who have completed the regular course of “Sensory Evaluation and Practice”

④ 평가결과 : 총 35명 중 25명이 동충하초 혼합커피를 찾아내었다. 즉, 동충하초는 그 특유의 맛과 향으로 소비자들에게 쉽게 구분이 되는 것으로 결론을 내릴수 있다.  ④ Evaluation result: 25 out of 35 people found cordyceps mixed coffee. That is, it can be concluded that Dongchunghacho is easily distinguished from consumers by its unique taste and aroma.

제시한 시료번호Sample number provided 커피 종류 Coffee type 응답인원수Number of respondents 정답여부The correct answer 941941 오리지널 대조구Original control 5명5 people XX 387387 오리지널 대조구Original control 5명5 people XX 249249 동충하초 발효커피 Cordyceps fermented coffee 25명25 people OO

2) 2차 관능평가 2) Secondary sensory evaluation

① 목표 : 1차 관능평가 결과를 바탕으로 본 발명에서 개발한 동충하초 발효커피가 과연 동충하초 단순혼합한 커피와도 차이 식별이 되는지를 확인하고자 함.   ① Goal: To check whether the fermented coffee from Cordyceps sinensis developed in the present invention is distinguished from coffee mixed with cordyceps simply by using the results of the first sensory evaluation.

② 방법 : 평점법 =채점법(Rating) ② Method: Rating Method = Rating Method

▶ 주어진 시료들의 특성 강도가 어떻게 다른지를 조사할 때 사용           ▶ Used to investigate how the characteristic strength of a given sample is different

▶ 기준 시료 없이 여러개의 시료(3-7개)를 제시하여 정해진 척도에 따라 평가함           ▶ Several samples (3-7) are presented without a reference sample and evaluated according to a prescribed scale.

▶ 각 특성에 따른 강한 정도의 수량적 인지와 특성간의 영향 오차를 줄이기 위하여 강도 높은 훈련이 필요하며, 검사요원은 8명 이상의 훈련된 패널요원이 참여함            ▶ In order to reduce the quantitative error of the strong degree according to each characteristic and the influence error between the characteristics, intensive training is required, and more than 8 trained panel personnel participate in the inspection.

③ 패널요원 : “관능평가및실습”정규 수업과정을 이수한 세명대 식품영양학과 3학년 학생들 35명   ③ Panelists: 35 students from the third year of food and nutrition at Semyung University who have completed the regular course of “Sensory Evaluation and Practice”

④ 시료준비   ④ Sample preparation

제시한 시료번호Sample number provided 커피 종류 Coffee type 472472 오리지널 대조구Original control 813813 오리지널 커피 100g + 동충하초 분말 10gOriginal coffee 100g + Cordyceps powder 10g 596596 동충하초 발효커피 Cordyceps fermented coffee

⑤ 제시순서 : 커피를 시음하는 순서에 따른 영향을 배제하기 위하여 표와 같이 여러 가지 순서의 조합으로 시료를 제시함   ⑤ Order of presentation: To exclude the influence of the order of tasting coffee, samples are presented in a combination of several orders as shown in the table.

1st 시료1st sample 2nd 시료2nd sample 3rd 시료3rd sample 596596 813813 472472 472472 813813 813813 472472 596596 596596 472472 472472 813813 596596 596596 813813

⑥ 평가방법    ⑥ Evaluation method

- 커피의 향, 맛, 전체적인 기호도에 대해 1점(매우 좋지않다)~5점(매우 좋다) 범위내에서 채점을 하게 하고, “최고의 커피”는 어떤 것인지 순위를 매기게 함.      -For the aroma, taste, and overall preference of the coffee, it is scored within the range of 1 point (not very good) to 5 points (very good) and ranks what is the best coffee.

⑦ 평가결과 : 총 35명 중 17명이 동충하초 발효커피를 “최고의 커피”로 평가하였고, 오리지널 기본커피도 11명이 좋아하였다. 동충하초를 단순히 혼합한 커피는 7명만이 좋다고 평가하였다. 결론적으로 본 발명에서 개발한 동충하초 발효커피는 소비자들에게 좋은 점수를 받아 어필할 수 있을 것으로 사료된다.    ⑦ Evaluation result: 17 out of 35 people evaluated Dongchunghacho fermented coffee as “the best coffee,” and 11 people liked the original basic coffee. It was evaluated that only 7 coffees were simply mixed with Cordyceps. In conclusion, it is considered that the cordyceps fermented coffee developed in the present invention can appeal to consumers with good scores.

제시한 시료번호Sample number provided 커피 종류 Coffee type 최고의 커피 응답인원수Best coffee respondents 472472 오리지널 대조구Original control 11명11 people 813813 동충하초 단순혼합커피Cordyceps simple mixed coffee 7명7 people 596596 동충하초 발효커피 Cordyceps fermented coffee 17명17 people

3) 3차 관능평가 3) 3rd sensory evaluation

① 목표 : 1~2차 관능평가 결과를 바탕으로 본 발명에서 개발한 동충하초 발효커피가 대조구에 비해서 향, 신맛, 쓴맛, 쿰쿰한 냄새 등의 항목에 대해 어떻게 차이가 나는지, 기호도는 어떤지를 평가하고자 하였다.  ① Goal: To evaluate how the Dongchunghacho fermented coffee developed in the present invention, based on the results of the 1st and 2nd sensory evaluation, differs in terms of flavor, sour taste, bitter taste, and mild smell compared to the control, and how the preference degree is Did.

② 방법 : 척도법 (Likert 7 point scale 법 사용) ② ways: scaling (Likert 7 point scale method used)

▶ 주어진 시료들의 특성 강도 및 기호도가 어떻게 다른지를 조사할 때 사용           ▶ Used to investigate how the characteristic strength and preference of different samples are different

▶ 구획척도로는 보통 1~9점 항목척도가 사용 됨           ▶ 1 ~ 9 item scale is usually used for parcel scale

▶ 비구획 척도로는 15cm 선척도가 사용 됨           ▶ A 15cm scale is used as a non-compartment scale.

▶ 항목척도의 사용시에는 패널요원들이 시료를 맛을 본 후 평가한 특성의 해당 강도 항목을 선택하여 숫자를 표시하도록 함            ▶ When using the item scale, panel agents should taste the sample and select the corresponding strength item of the evaluated property to display the number.

기호도 검사            Preference check

▶ 소비자의 선호도 또는 기호도를 평가하는 방법           ▶ How to evaluate consumer preferences or preferences

▶ 새로운 제품의 개발과 개선을 위해 주로 사용 됨           ▶ Mainly used for new product development and improvement

▶ 일반적으로 차이식별검사나 묘사분석검사 후 실시 됨           ▶ In general, it is performed after the difference identification test or the description analysis test

▶ 기호도 검사 또는 선호도 검사, 소비자 검사라고도 함           ▶ Also called preference test, preference test, and consumer test

③ 패널요원 : “관능평가및실습”정규 수업과정을 이수한 세명대 식품영양학과 3학년 학생들 35명 + 2학년 학생 10명 + 산학협력단 직원 12명 = 총 57명   ③ Panelists: 35 students in the 3rd grade students of the Department of Food and Nutrition, 10 students in the 2nd grade, and 12 employees in the industry-academic cooperation group who completed the regular course of “Sensory Evaluation and Practice”

④ 시료준비   ④ Sample preparation

제시한 시료번호Sample number provided 커피 종류 Coffee type 472472 오리지널 대조구Original control 596596 동충하초 발효커피 Cordyceps fermented coffee

⑤ 평가방법    ⑤ Evaluation method

- 강도평가 + 기호도 평가와 같이 이원화함.     -Strength evaluation + preference is also dualized as evaluation.

- 예를 들어 커피의 “신맛”강도평가에서 “강하다”라고 느꼈을 때 어떤 사람은 이 강한 신맛이 “좋다”라고 기호도를 평가할 수도 있고, “싫다”라고 평가할 수도 있기 때문이다.     -For example, when you feel “strong” in the “sour” strength evaluation of coffee, some people may evaluate the preference for “strong” or “no” for this strong sour taste.

- 커피의 향, 신맛, 쓴맛, 쿰쿰한 냄새, 전체적인 기호도에 대해 1점(매우 좋지않다)~7점(매우 좋다) 범위내에서 채점을 하게 하고, “최고의 커피”는 어떤 것인지 순위를 매기게 함.     -For coffee aroma, sour taste, bitter taste, pungent smell, and overall preference, make a score within the range of 1 point (not very good) to 7 points (very good), and rank what is the best coffee box.

⑥ 평가결과 : 관능평가 결과 향, 신맛, 쓴맛, 쿰쿰한 냄새 및 전체적인 기호도의 전 항목에 걸쳐 동충하고 발효커피가 훨씬 높은 점수를 받았다. 각 특성별 강도와 기호도를 비교해 보면 다음과 같이 매우 흥미로운 사실을 알 수 있다.  ⑥ Evaluation result: The sensory evaluation results show that the flavor, sour taste, bitter taste, cumulative smell, and overall preference are all agreed and the fermented coffee scores are much higher. Comparing the strength and preference for each characteristic reveals the following very interesting facts.

- 향 : 대조구의 향이 더 강하며 이를 좋아하지 않았다.        -Fragrance: The control had a stronger scent and didn't like it.

- 신맛 : 대조구의 신맛은 3.28점, 동충하초 발효커피는 2.32점으로 큰 차이가 났으며, 커피의 약한 신맛을 훨씬 더 좋아하였다. (기호도 4.83점과 4.03점 비교)      -Sour: The sour taste of the control was 3.28 points, and the fermented coffee of Dongchunghacho was 2.32 points, which was a big difference, and the weak sour taste of coffee was much better. (Comparison of symbol 4.83 and 4.03)

- 쓴맛 : 대조구의 쓴맛이 4.21점으로 훨씬 강하게 느껴졌으며, 이 또한 동충하초 발효커피가 3.49점으로 약하여 이를 더 좋아하였다.      -Bitter taste: The bitter taste of the control group was much stronger with 4.21 points, and the fermented coffee from Dongchunghacho was weak at 3.49 points, so I liked it more.

- 쿰쿰한 냄새 : 본 특성은 동충하초가 함유된 발효커피보다 오히려 대조구에서 더 강하게 느껴진 것으로 나타나 개발된 커피에서 동충하초의 쿰쿰한 냄새가 효과적으로 제거되었음을 시사한다.      -Quiet smell: This property appears to be felt stronger in the control than the fermented coffee containing Cordyceps, suggesting that the cordy smell of Cordyceps was effectively removed from the developed coffee.

결과적으로 동충하초 발효커피가 전체적인 기호도 5.64점으로 월등히 높은 점수를 받았으며 총 57명 중 40명이 동충하초 발효커피를 “최고의 커피”로 평가하였다.      As a result, Dongchunghacho fermented coffee scored significantly higher with an overall preference of 5.64 points, and 40 out of 57 evaluated Dongchunghacho fermented coffee as the “best coffee”.

이로써 동충하초 발효커피는 동충하초 특유의 불쾌한 냄새를 극복하였을 뿐만 아니라 오리지널커피보다 신맛과 쓴맛은 감소하여 훨씬 부드러운 맛으로 소비자들에게 어필할 수 있는 것으로 평가되었다(표 12. 동충하초 발효커피에 대한 특성별 강도 및 기호도 검사(7점 만점 척도법) 참조).     As a result, the Dongchung Hacho fermented coffee not only overcomes the unpleasant smell peculiar to Dongchung Hacho, but also reduces the sour taste and bitter taste than the original coffee, and is evaluated to be able to appeal to consumers with a much softer taste (Table 12. Strength by Characteristics for Dongchung Hacho Fermented Coffee) And palatability test (7-point scale).

특성characteristic 472 (대조구)472 (Daejo-gu) 596 (동충하초 발효커피)596 (Dongchunghacho fermented coffee) 강도burglar 기호도Preference 강도burglar 기호도Preference incense 4.11±1.534.11 ± 1.53 4.12±1.584.12 ± 1.58 4.07±1.414.07 ± 1.41 5.00±1.495.00 ± 1.49 신맛Sour taste 3.28±1.993.28 ± 1.99 4.03±1.594.03 ± 1.59 2.32±1.202.32 ± 1.20 4.83±1.584.83 ± 1.58 쓴맛bitterness 4.21±1.634.21 ± 1.63 3.88±1.353.88 ± 1.35 3.49±1.673.49 ± 1.67 4.19±1.724.19 ± 1.72 쿰쿰한 냄새Scent 2.75±1.602.75 ± 1.60 3.47±1.603.47 ± 1.60 2.39±1.402.39 ± 1.40 3.65±1.783.65 ± 1.78 전체적인 기호도Overall preference -- 4.39±1.234.39 ± 1.23 -- 5.64±1.295.64 ± 1.29

실시예 8: 전자코에 의한 향기성분 분석Example 8: Analysis of fragrance components by electronic nose

본 발명의 동충하초 발효커피의 향기성분을 전자코(Electric Nose)로 패턴분석을 함으로써 대조구인 오리지널 커피와 다른 이취가 있는지 여부를 확인하기 위한 것이다. 대조구와 비슷한 패턴을 보일 경우 발효커피는 원래의 향기성분과 유사함을 의미하므로 동충하초의 이취가 효과적으로 제거되었음을 의미한다. The purpose of the present invention is to confirm whether there is a different odor from the original coffee, which is a control, by performing a pattern analysis on the fragrance component of the Dongchung Hacho fermented coffee of the present invention with an electric nose. If it shows a pattern similar to the control, it means that the fermented coffee is similar to the original scent component, so that the odor of cordyceps was effectively removed.

가. 방법end. Way

커피 향기의 발효전후 변화를 살펴보기 위하여 전자코(Electronic Nose)로 향기패턴의 변화를 분석하였다. 대조구커피(R), 동충하초 단순혼합커피(MIX) 및 동충하초 발효커피(FER)를 반자동 커피머신(EC 680.M, Delonghi사, 이태리)으로 추출한 에스프레소 커피시료를 40 mL 바이얼(vial. Supelco, Bellefonte, PA, USA)에 넣고 테프론 코팅이 된 셉타(septa. PTFE/silicone septa, Supelco)로 밀봉한 후 바로 측정하였다. 전자코는 GC/SAW 전자코 시스템(Model 7100 Fast GC Analyzer, Electronic Sensor Technology, Newbury park, CA, USA)을 사용하였으며 이 기기는 GC 시스템에 표면탄성파소자(Surface Acoustic Wave sensor: SAW) 센서를 검출기로 장착하고 있다. 준비된 시료가 평형이 이루어졌을 때 내장 된 펌프가 가동되면서 시료의 주입구를 통하여 시료의 휘발 성분만 주입되었고 20초 동안 향기성분을 채취하였다. 기기분석 조건으로는 운반기체는 고순도 헬륨을 사용하였고 컬럼은 DB-624 캐필러리 컬럼(capillary column. 0.33 μm, 0.25 mm×1 m, J&W Scientific, Folsom, CA, USA)을 이용하여 온도를 30℃ 에서 120℃까지 3℃/sec의 속도로 프로그램하였다. 런타임(Run time)은 30초로 설정하였고, 센서/컬럼/밸브/주입구의 각각 30/40/50/50℃로 하였다.     In order to examine the change before and after the fermentation of coffee aroma, the change in the aroma pattern was analyzed with an electronic nose. 40 mL vials (vial. Bellefonte, PA, USA) and sealed with Teflon coated septa (Septa. PTFE / silicone septa, Supelco). Electronic nose used GC / SAW electronic nose system (Model 7100 Fast GC Analyzer, Electronic Sensor Technology, Newbury park, CA, USA) .This device detects a surface acoustic wave sensor (SAW) sensor in the GC system. It is equipped with. When the prepared sample was in equilibrium, the built-in pump was operated, and only the volatile component of the sample was injected through the sample inlet, and the fragrance component was collected for 20 seconds. As a device analysis condition, high purity helium was used as the carrier gas, and the column was heated using a DB-624 capillary column (0.33 μm, 0.25 mm × 1 m, J & W Scientific, Folsom, CA, USA). From ℃ to 120 ℃ was programmed at a rate of 3 ℃ / sec. The run time was set to 30 seconds, and each of the sensor / column / valve / inlet was 30/40/50/50 ° C.

나. 결과I. result

전자코의 크로마토그램에서 보여지는 바와 같이 대조구(R), 동충하초 단순혼합커피(MIX) 및 동충하초 발효커피(FER)는 확연히 다른 향기성분 패턴을 보이는 것으로 나타났다. 각 시료는 3번 반복 분석하여 편차가 없는지를 확인하였기 때문에 동일한 크로마토그램을 3개씩 나타내었다.    As shown in the electronic nose chromatogram, the control (R), Cordyceps simple mixed coffee (MIX) and Cordyceps fermented coffee (FER) showed a distinctly different fragrance component pattern. Each sample was analyzed three times repeatedly, so it was confirmed that there was no deviation.

여기서 데리버티브 크로마토그램(Derivative chromatogram)이란 머무름 시간별에 따라 센서로부터 얻어진 진동수의 변화를 미분하여 나타낸 크로마토그램이고, 베이퍼 프린트(Vapor Print)란 머무름 시간을 각변수(auaular variables)로 하고, 전자코의 응답정도를 반경변수(radial variable)로 사용하여 초기의 머무름시간으로부터 마지막 성분이 검출된 머무름 시간까지를 360 ° 원형모양으로 이미지한 그래프이며, 폴라 프리퀀시 패턴(Polar Frequency pattern)이란 머무름 시간별에 따라 센서로부터 얻어진 진동수의 변화를 헤르쯔(herz) 단위로 나타낸 패턴 이미지, 폴라 데리버티브 패턴(Polar derivative pattern)이란 주파수(frequency)를 미분하여 나타낸 패턴 이미지를 의미한다.    Derivative chromatogram (Derivative chromatogram) is a chromatogram showing the differential change of the frequency obtained from the sensor according to the retention time, Vapor Print (Vapor Print) is the retention time as a variable (auaular variables), electronic nose It is a graph that imaged from the initial retention time to the retention time at which the last component was detected in a 360 ° circular shape by using the response level of as a radial variable, and the polar frequency pattern depends on the retention time. A pattern image representing a change in frequency obtained from a sensor in hertz, and a polar derivative pattern refers to a pattern image obtained by differentiating the frequency.

도 13 및 도 14에서 붉은 화살표로 표시한 부분과 같이 동충하초 단순혼합커피(MIX) 시료의 경우 다른 두 시료와는 다르게 특정피크가 유난히 강하게 나타났고, 전반적으로 동충하초 발효커피(FER)는 대조구(R)와 거의 동일한 패턴을 나타내었다. 이는 동충하초 발효커피가 원래의 오리지널 커피와 거의 유사한 아로마를 지니기 때문에 동충하초에 의한 이취를 감지하지 못하게 됨을 의미한다. 따라서 본 발명에서 개발한 동충하초 발효공정은 매우 효율적으로 동충하초의 유효성분을 보유하면서도 원래의 커피와 다름없는 맛과 향기를 즐길 수 있는 우수한 효과를 가지고 있다.    13 and 14, as shown by the red arrow, in the case of the sample of the Cordyceps sinensis simple mixed coffee (MIX), unlike the other two samples, the specific peak was exceptionally strong, and overall, the Cordyceps fermented coffee (FER) was the control (R ). This means that the Cordyceps fermented coffee has an aroma almost similar to that of the original coffee, so it is impossible to detect the odor caused by Cordyceps. Therefore, the dongchunghacho fermentation process developed in the present invention has an excellent effect to enjoy the taste and aroma similar to that of the original coffee while retaining the active ingredient of dongchunghacho very efficiently.

한편, 이상의 상세한 설명은 모든 면에서 제한적으로 해석되어서는 아니되고 예시적인 것으로 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 첨부된 청구항의 합리적 해석에 의해 결정되어야 하고, 본 발명의 등가적 범위 내에서의 모든 변경은 본 발명의 범위에 포함된다.Meanwhile, the above detailed description should not be construed as limiting in all respects and should be considered as illustrative. The scope of the present invention should be determined by rational interpretation of the appended claims, and all changes within the equivalent scope of the present invention are included in the scope of the present invention.

Claims (13)

동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물을 포함하는 동충하초 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 커피생두로서,
상기 동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물은 물 1L에 동충하초 분말, 상황버섯 분말 및 차가버섯 분말을 각각 40 내지 60 그램(g) 첨가하여 추출되고,
상기 동충하초 복합추출물은 상기 동충하초 추출물이 70 ~ 80 중량%이고, 상기 상황버섯추출물 및 차가버섯추출물이 40 : 60의 중량비로 혼합되어 제조된 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물이 20 ~ 30 중량%인 것을 특징으로 하는 동충하초 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 커피생두.
As a coffee bean containing the compound extract of Cordyceps sinensis containing Cordyceps sinensis extract, Phellinus linteus extract and Chaga mushroom extract as an active ingredient,
The Cordyceps sinensis extract, Phellinus linteus extract and Chaga mushroom extract are extracted by adding 40 to 60 grams (g) of Cordyceps sinensis powder, Phellinus linteus powder and Chaga mushroom powder to 1 L of water,
In the compound extract of Cordyceps sinensis, the extract of Cordyceps sinensis is 70 to 80% by weight, and the mixture of situational mushrooms and chaga mushrooms prepared by mixing the situational mushroom extract and chaga mushroom extract in a weight ratio of 40: 60 is 20 to 30% by weight. Coffee green beans containing the compound extract of Cordyceps sinensis as an active ingredient.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서,
상기 동충하초는 누에동충하초인 것을 특징으로 하는 동충하초 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 커피생두.
According to claim 1,
The Cordyceps sinensis is a coffee bean containing the Cordyceps sinensis complex extract as an active ingredient.
삭제delete 동충하초 분말을 용매로 추출하여 동충하초 추출물을 수득하는 단계(S10);
상황버섯 분말 및 차가버섯 분말을 각각 용매로 추출하여 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물을 수득하는 단계(S20);
상기 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물을 혼합하여 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물을 제조하는 단계(S30); 및
상기 동충하초 추출물, 및 상기 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물을 혼합하여 동충하초 복합추출물을 제조하는 단계(S40);
상기 동충하초 복합추출물에 커피생두를 침지하여 상기 동충하초 복합추출물을 상기 커피생두에 침투시키는 단계(S60);
상기 동충하초 복합추출물이 침투된 커피생두를 건조하는 단계(S70); 및
상기 건조된 커피생두를 로스팅하는 단계(S80);를 포함하는 동충하초 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법에 있어서,
상기 동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물은 물 1L에 동충하초 분말, 상황버섯 분말 및 차가버섯 분말을 각각 40 내지 60 그램(g) 첨가하여 추출되고,
상기 동충하초 복합추출물은 상기 동충하초 추출물이 70 ~ 80 중량%이고, 상기 상황버섯추출물 및 차가버섯추출물이 40 : 60의 중량비로 혼합되어 제조된 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물이 20 ~ 30 중량%인 것을 특징으로 하는 동충하초 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법.
Extracting Cordyceps sinensis powder with a solvent to obtain Cordyceps sinensis extract (S10);
Step of extracting the situation mushroom powder and chaga mushroom powder, respectively, to obtain a situation mushroom extract and chaga mushroom extract (S20);
Preparing a mixture of situation mushrooms and chaga mushroom by mixing the situation mushroom extract and chaga mushroom extract (S30); And
Preparing the compound extract of Cordyceps sinensis by mixing the Cordyceps sinensis extract and the mixture of the situation mushroom and chaga mushroom (S40);
Immersing the coffee beans in the compound extract of Cordyceps sinensis to infiltrate the extract of Cordyceps sinensis into the coffee beans (S60);
Drying the green coffee beans permeated with the Cordyceps sinensis complex extract (S70); And
Roasting the dried coffee beans (S80); In the manufacturing method of coffee beans containing the Cordyceps sinensis complex extract containing as an active ingredient,
The Cordyceps sinensis extract, Phellinus linteus extract and Chaga mushroom extract are extracted by adding 40 to 60 grams (g) of Cordyceps sinensis powder, Phellinus linteus powder and Chaga mushroom powder to 1 L of water,
In the compound extract of Cordyceps sinensis, the extract of Cordyceps sinensis is 70 to 80% by weight, and the mixture of situational mushrooms and chaga mushrooms prepared by mixing the situational mushroom extract and chaga mushroom extract in a weight ratio of 40: 60 is 20 to 30% by weight. A method for producing coffee green beans containing the compound extract of Cordyceps sinensis as an active ingredient.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 제7항에 있어서,
상기 동충하초는 누에동충하초인 것을 특징으로 하는 동충하초 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법.
The method of claim 7,
The method of manufacturing coffee green beans containing the compound extract of Cordyceps sinensis, characterized in that the Cordyceps sinensis is silkworm cordyceps.
제7항에 있어서,
상기 동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물은 물 1L에 동충하초 분말, 상황버섯 분말 및 차가버섯 분말을 각각 40 내지 60 그램(g) 첨가하여 80 ~ 90 ℃에서 추출된 것을 특징으로 하는 동충하초 발효복합물을 유효성분으로 함유하는 커피생두의 제조방법.
The method of claim 7,
The Cordyceps sinensis extract, Phellinus linteus extract and Chaga mushroom extract are extracted at 80 to 90 ℃ by adding 40 to 60 grams (g) of Cordyceps sinensis powder, Phellinus linteus powder and Chaga mushroom powder to 1 L of water, respectively. Method for producing coffee beans containing as an active ingredient.
동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물을 포함하는 동충하초 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 커피생두를 이용하여 제조된 커피로서,
상기 동충하초 추출물, 상황버섯 추출물 및 차가버섯 추출물은 물 1L에 동충하초 분말, 상황버섯 분말 및 차가버섯 분말을 각각 40 내지 60 그램(g) 첨가하여 추출되고,
상기 동충하초 복합추출물은 상기 동충하초 추출물이 70 ~ 80 중량%이고, 상기 상황버섯추출물 및 차가버섯추출물이 40 : 60의 중량비로 혼합되어 제조된 상황버섯 및 차가버섯 추출혼합물이 20 ~ 30 중량%인 것을 특징으로 하는 동충하초 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 커피생두를 이용하여 제조된 커피.
As a coffee produced using coffee beans containing the Cordyceps sinensis extract, the extract of Cordyceps sinensis, and Chaga mushroom extract as an active ingredient,
The Cordyceps sinensis extract, Phellinus linteus extract and Chaga mushroom extract are extracted by adding 40 to 60 grams (g) of Cordyceps sinensis powder, Phellinus linteus powder and Chaga mushroom powder to 1 L of water,
In the compound extract of Cordyceps sinensis, the extract of Cordyceps sinensis is 70 to 80% by weight, and the mixture of situational mushrooms and chaga mushrooms prepared by mixing the situational mushroom extract and chaga mushroom extract in a weight ratio of 40: 60 is 20 to 30% by weight. Coffee made using coffee green beans containing the compound extract of Cordyceps sinensis as an active ingredient.
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