KR102037897B1 - Composition for Preventing or Treating Obesity Comprising Lactic Acid Bacteria from Kefir and Grape Seed Flour - Google Patents

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Abstract

본 발명은 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 포함하는 조성물은 포도씨 분말이 프리바이오틱스로 작용하고 케피어에서 분리한 유산균 복합균체가 프로바이오틱스로 작용하여 고지방식이로 인한 체중 증가를 방지하고, 총 콜레스테롤 수치를 낮추며, 인슐린 저항성의 효과가 있어 비만의 예방 또는 치료용 기능성 식품 또는 약학 조성물로서 활용될 수 있다.The present invention relates to a composition for the prevention or treatment of obesity, including grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria. The composition comprising kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder according to the present invention, grape seed powder acts as a prebiotic and lactic acid bacteria complex cells isolated from kefir act as probiotics to prevent weight gain due to high fat diet, total It lowers cholesterol levels and has the effect of insulin resistance, which can be utilized as a functional food or pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity.

Description

케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물{Composition for Preventing or Treating Obesity Comprising Lactic Acid Bacteria from Kefir and Grape Seed Flour}Composition for Preventing or Treating Obesity Comprising Lactic Acid Bacteria from Kefir and Grape Seed Flour}

본 발명은 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 포함하는 비만의 개선, 예방 또는 치료용 기능성 식품 및 약학 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to functional foods and pharmaceutical compositions for improving, preventing or treating obesity, including kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder.

지질대사의 장애인 비만(obesity)은 대사장애를 동반하는 경우가 많고, 전 세계적으로 그 인구가 증가 추세이며, 최근 비만 인구가 저영양 및 전염병 인구를 넘어서기도 하였다. 비만의 원인은 내분비적, 유전적, 그리고 환경적인 요소들까지 다양하다. Obesity, which is a disorder of geological metabolism, is often accompanied by metabolic disorders, and its population is increasing worldwide. Recently, the obese population has surpassed the low nutritional and infectious diseases population. The causes of obesity can range from endocrine, genetic and environmental factors.

케피어(Kefir)는 코카서스 산간 지방에서 유래한 발효유의 일종으로, 티벳지방 승려들이 건강을 위해 음용하던 것이 대중화된 음료이다. 케피어의 구성영양소로는 단백질 및 다당류가 포함되어 있고 비타민 A, 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 비타민 D, 비타민 K2, 엽산, 니코틴산, 칼슘, 철분, 요오드 등을 고루 포함하고 있다. 이러한 케피어는 유산균과 효모 복합체인 케피어 그레인으로 불리우는 균종(케피어 과립균이라고도 한다)을 개시제로 하여 우유를 발효시켜 얻어진 요구르트상의 음료이다. Kefir is a type of fermented milk derived from the Caucasus mountainous region and popularized by Tibetan monks for health. Kefir's nutrients include proteins and polysaccharides, and include vitamin A, vitamin B1, vitamin B2, vitamin B6, vitamin D, vitamin K2, folic acid, nicotinic acid, calcium, iron, and iodine. Such kefir is a yoghurt-like beverage obtained by fermenting milk using a strain (also referred to as kefir granules) called lactic acid bacteria and kefir grains as a yeast complex as an initiator.

케피어 그레인에 의하여 발효된 음료인 케피어는 인체에 유익한 유산균을 포함하고 있어 장 활동을 원활히 하여 변비를 억제하고 위장 장애를 개선하는데 도움이 되며 면역체계의 강화에 효능이 있다고 알려져 있다. 예를 들어, 대한민국 공개특허공보 제10-2017-0115820호에서는 케피어를 유효성분으로 포함하는 식중독 예방 또는 치료용 조성물을 제공하고 있고, 대한민국 등록특허공보 제10-1426399호에서는 변비 개선용 케피어 및 이의 제조방법을 제공하고 있다. 그러나, 케피어의 장 건강 외에 다른 대사장애의 예방 또는 치료에 미치는 영향에 대해서는 아직 제대로 밝혀진 바가 없다.Kefir, a beverage fermented by kefir grains, contains lactic acid bacteria that are beneficial to the human body, which is known to be effective in inhibiting constipation, improving gastrointestinal disorders by promoting intestinal activity, and enhancing the immune system. For example, Korean Unexamined Patent Publication No. 10-2017-0115820 provides a composition for preventing or treating food poisoning comprising kefir as an active ingredient, and Korean Patent Publication No. 10-1426399 discloses kefir for improving constipation And it provides a manufacturing method thereof. However, the effects of kefir on the prevention or treatment of metabolic disorders other than intestinal health are not well understood.

프로바이오틱스(probiotics)는 건강에 도움이 되는 장내 세균총, 즉, 숙주의 건강에 이로움을 제공하는 살아있는 미생물 즉 생균류를 의미한다. 일반적으로 프로바이오틱스는 요거트 등의 발효식품의 일부 또는 식이보충제로서 소비된다. 프로바이오틱스로 알려진 미생물에는 유산균, 비피도박테리아(bifidobacteria), 바실러스 등이 있다.Probiotics are gut flora that is good for health, ie living microorganisms, or live fungi, that benefit the health of the host. Probiotics are generally consumed as part of fermented foods such as yoghurt or as a dietary supplement. Microorganisms known as probiotics include lactic acid bacteria, bifidobacteria, and Bacillus.

프로바이오틱스와 유사한 개념으로, 프리바이오틱스(prebiotics)는 장내 유익한 균의 생장을 돕는 난소화성 성분으로서 프로바이오틱스(probiotics)의 영양원이 되어 장내 환경을 개선하는 데 도움을 주는 물질을 말한다. 어떠한 식품 성분이, 대장 내 유용 미생물에 의해 이용되어 미생물의 생육이나 활성을 촉진함으로써 숙주 건강에 좋은 효과를 나타내게 하는 프리바이오틱스로 활용되기 위해서는, 위장관의 상부에서 소화 또는 흡수되지 않아야 하고 대장 내 미생물 중 유용 세균을 선택적으로 활성화시키고 병원균 등의 유해균은 억제할 수 있어야 한다.Similar to probiotics, prebiotics are indigestible ingredients that help the growth of beneficial organisms in the gut, and are substances that help improve the intestinal environment by becoming a source of probiotics. In order for any food ingredient to be used by a useful microorganism in the large intestine to be used as a prebiotics that promotes the growth or activity of the microorganism and thus has a beneficial effect on host health, it must not be digested or absorbed from the upper part of the gastrointestinal tract, It should be able to selectively activate the medium useful bacteria and suppress harmful bacteria such as pathogens.

한편, 포도에는 식물에서 발견되는 항산화물질인 폴리페놀(polyphenol) 계열의 레스베라트롤(resveratrol)이 많이 함유되어 있으며, 레스베라트롤은 항균, 항암, 항바이러스, 항알레르기, 및 항염증 감소효과를 지니며 강력한 항산화 활성의 기능이 있는 물질로 포도부산물인 과피, 씨, 송이 가지에 다량 함유되어 있으므로 포도부산물을 그대로 폐기할 경우 농산물에 함유된 유용한 성분을 손실하게 되는 것은 물론이고, 환경오염의 문제가 되므로 포도부산물의 효용가치를 높이는 연구가 활발하게 진행되고 있다. On the other hand, grapes contain a lot of polyphenol-based resveratrol, an antioxidant found in plants, and resveratrol is a powerful antioxidant that has antibacterial, anticancer, antiviral, antiallergic, and anti-inflammatory effects. As a substance that has an active function, it contains a large amount of grape by-products such as peel, seed, and pine branches, so if you discard the grape by-products, you will not only lose useful components contained in the agricultural products, but also by-products of environmental pollution. Increasing the utility value of research is being actively conducted.

본 발명자들은 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말이 각각 프로바이오틱스 및 프리바이오틱스로 작용하여 비만의 예방 또는 치료에 효과적이라는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다. The present inventors completed the present invention by confirming that kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder act as probiotics and prebiotics, respectively, and are effective for the prevention or treatment of obesity.

이와 같은 과제를 해결하기 위한 본 발명의 목적은 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 포함하는 비만 개선용 식품을 제공하는 것이다. An object of the present invention for solving such a problem is to provide a food for improving obesity, including kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder.

본 발명의 다른 목적은 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity, including kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder.

상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 케피어(Kefir) 유래 유산균 및 포도씨 분말을 유효성분으로 포함하는 비만 개선용 기능성 식품을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention provides a functional food for improving obesity comprising kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder as an active ingredient.

본 발명에 있어서, 상기 케피어 유래 유산균은 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides), 락토바실러스 케피리(Lactobacillus kefiri) 또는 이들의 복합 균체일 수 있으며, 바람직하게는 류코노스톡 메센테로이데스 LCM4(leuconostoc mesenteroides LCM4, 기탁번호: KCCM12117P) 및 락토바실러스 케피리 DH5(Lactobacillus kefiri DH5, 기탁번호: KCCM11837P)의 복합 균체일 수 있다. In the present invention, the kefir-derived lactic acid bacterium may be Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus kefiri, or a combination thereof, and preferably, Lyukconstock mesenteroides LCM4 ( leuconostoc mesenteroides LCM4, Accession No .: KCCM12117P) and Lactobacillus kefiri DH5 (Accession No .: KCCM11837P).

본 발명에 있어서, 상기 복합 균체는 류코노스톡 메센테로이데스 LCM4 및 락토바실러스 케피리 DH5를 1:5 내지 1:20의 농도비로 포함할 수 있다. In the present invention, the complex cells may include leukonostock mesenteroides LCM4 and Lactobacillus kepyri DH5 in a concentration ratio of 1: 5 to 1:20.

본 발명에 있어서, 상기 케피어 유래 유산균은 포도씨 분말의 질량에 대하여 0.1 내지 10중량%로 포함될 수 있다. In the present invention, the kefir-derived lactic acid bacteria may be included in an amount of 0.1 to 10% by weight based on the mass of the grape seed powder.

본 발명에 있어서, 상기 포도씨 분말은 와인 제조 부산물일 수 있으며, 샤르도네(Chardonnay) 품종의 포도로 제조된 것일 수 있다. In the present invention, the grape seed powder may be a byproduct of wine production, and may be made of grapes of Chardonnay varieties.

본 발명의 기능성 식품은 장내 단쇄지방산을 증가시킴으로써 비만을 개선할 수 있다. The functional food of the present invention can improve obesity by increasing intestinal short-chain fatty acids.

본 발명에서, 상기 기능성 식품은 발효식품일 수 있다. In the present invention, the functional food may be fermented food.

본 발명은 또한, 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다. The present invention also provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity, including kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder as an active ingredient.

본 발명에 따른 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 포함하는 조성물은 포도씨 분말이 프리바이오틱스로 작용하고 케피어에서 분리한 유산균 복합균체가 프로바이오틱스로 작용하여 고지방식이로 인한 체중 증가를 방지하고, 총 콜레스테롤 수치를 낮추며, 인슐린 저항성의 효과가 있어 비만의 예방 또는 치료용 기능성 식품 또는 약학 조성물로서 활용될 수 있다. The composition comprising kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder according to the present invention, grape seed powder acts as a prebiotic and lactic acid bacteria complex cells isolated from kefir act as probiotics to prevent weight gain due to high fat diet, total It lowers cholesterol levels and has the effect of insulin resistance, which can be utilized as a functional food or pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity.

도 1은 본 발명의 실시예 및 비교예의 식이를 섭취한 실험쥐의 체중 변화를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 실시예 및 비교예의 식이를 섭취한 실험쥐의 지방 세포 이미지를 나타낸다.
도 3은 포도씨 분말을 섭취한 실험쥐의 부고환 지방 조직에서 포도씨 분말을 섭취하지 않은 실험쥐에 대하여 1.8배 이상의 비율로 발현된 대표적 유전자 목록을 나타낸다.
도 4는 케피어 유래 유산균 복합 균체를 섭취한 실험쥐의 부고환 지방 조직에서 케피어 유래 유산균 복합 균체를 섭취하지 않은 실험쥐에 대해 8배 이상의 비율로 발현된 대표적 유전자 목록을 나타낸다.
도 5은 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균 복합 균체를 섭취한 실험쥐의 부고환 지방 조직에서 이를 섭취하지 않은 실험쥐에 대하여 1.8배 이상의 비율로 발현된 유전자 목록을 나타낸다.
도 6은 포도씨 분말을 섭취한 실험쥐의 지방 조직에 대한 ingenuity pathway analysis(IPA) 분석 결과를 나타낸다.
도 7은 케피어 유래 유산균을 섭취한 실험쥐의 지방 조직에 대한 IPA 분석 결과를 나타낸다.
도 8은 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 섭취한 실험쥐의 지방 조직에 대한 IPA 분석 결과를 나타낸다.
도 9는 포도씨 분말을 섭취한 실험쥐의 유전자 변화를 종합하여 나타낸 것이다.
도 10은 케피어 유래 유산균을 섭취한 실험쥐의 유전자 변화를 종합하여 나타낸 것이다.
도 11은 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 섭취한 실험쥐의 유전자 변화를 종합하여 나타낸 것이다.
Figure 1 is a graph showing the weight change of the mice ingested the diet of the Examples and Comparative Examples of the present invention.
Figure 2 shows the fat cell images of the mice ingested the diet of the Examples and Comparative Examples of the present invention.
Figure 3 shows a list of representative genes expressed at a rate of 1.8 times or more for the mice that did not take the grape seed powder in the epididymal adipose tissue of the mice fed the grape seed powder.
Figure 4 shows a list of representative genes expressed more than 8 times in the epididymal adipose tissue of mice fed Kefir-derived Lactobacillus complex cells, but not in mice fed Kefir-derived Lactobacillus complex cells.
Figure 5 shows a list of genes expressed at a rate of 1.8 times or more for the mice that did not ingest the epididymal adipose tissue of mice fed grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria complex cells.
Figure 6 shows the results of ingenuity pathway analysis (IPA) analysis of the adipose tissue of mice fed grape seed powder.
Figure 7 shows the results of IPA analysis of the adipose tissue of the mice ingested kefir-derived lactic acid bacteria.
Figure 8 shows the results of IPA analysis of the adipose tissue of the mice ingested grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria.
Figure 9 shows the synthesis of the genetic changes of the mice ingested grape seed powder.
10 shows a summary of the genetic changes of the mice ingested kefir-derived lactic acid bacteria.
Figure 11 shows the synthesis of the genetic changes of the mice ingested grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria.

다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술 분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. In general, the nomenclature used herein is well known and commonly used in the art.

본 발명은 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 유효성분으로 함유하는 비만의 개선용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for improving obesity containing kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder as an active ingredient.

본 발명에서 "프로바이오틱스(probiotics)"란, 섭취되어 장에 도달하였을 때에 장내 환경에 유익한 작용을 하는 균주를 의미한다. In the present invention, "probiotics" means a strain that has a beneficial effect on the intestinal environment when ingested and reaches the intestine.

본 발명에서 "프리바이오틱스(Prebiotics)"란, 장내 유익한 박테리아의 생장을 돕는 난소화성 성분으로서 프로바이오틱스(probiotics)의 영양원이 되어 장내 환경을 개선하는 데 도움을 주는 물질을 말한다.In the present invention, "Prebiotics" is an indigestible ingredient that helps the growth of beneficial bacteria in the intestine, and refers to a substance that helps to improve the intestinal environment by becoming a nutrient source of probiotics.

본 발명에서, 케피어(kefir)는 코카서스 산간 지방에서 유래한 발효유의 일종으로, 케피어는 유산균과 효모 복합체인 케피어 그레인으로 불리우는 균종을 개시제로 하여 우유를 발효시켜 얻어진 요구르트상의 음료를 의미한다.In the present invention, kefir (kefir) is a kind of fermented milk derived from Caucasus mountainous fat, kefir refers to a yogurt-like beverage obtained by fermenting milk with an initiator of a species called lactic acid bacteria and kefir grains, a yeast complex. .

본 발명에서 사용가능한 케피어 유래 유산균은 류코노스톡 메센테로이데스(leuconostoc mesenteroides), 락토바실러스 케피리(Lactobacillus kefiri), 또는 이들의 복합 균체일 수 있다.Kefir-derived lactic acid bacteria that can be used in the present invention may be leuconostoc mesenteroides , Lactobacillus kefiri , or complex cells thereof.

바람직하게는, 본 발명에 사용가능한 케피어 유래 유산균은 류코노스톡 메센테로이데스 LCM4(leuconostoc mesenteroides LCM4, 기탁기관: 한국미생물보존센터, 수탁번호: KCCM12117P, 수탁일자: 2017년 9월 21일), 락토바실러스 케피리 DH5(Lactobacillus kefiri DH5, 기탁기관: 한국미생물보존센터, 수탁번호: KCCM11837P, 수탁일자: 2016년 4월 29일), 또는 이들의 복합 균체일 수 있다. 가장 바람직하게는, 류코노스톡 메센테로이데스 LCM4 및 락토바실러스 케피리 DH5의 복합 균체를 사용하는 것이 비만의 예방 또는 치료에 적합하다. 상기 복합 균체는 류코노스톡 메센테로이데스 LCM4 및 락토바실러스 케피리 DH5를 1:1 내지 1:100의 농도로 혼합하여 사용할 수 있으며, 바람직하게는 1:5 내지 1:20의 농도로 혼합하여 사용할 수 있다.Preferably, the kefir-derived lactic acid bacterium usable in the present invention may be leuconostoc LCM4 ( leuconostoc). mesenteroides LCM4, Depositary: Korea Center for Conservation of Microorganisms, Accession No .: KCCM12117P, Date of Deposit: September 21, 2017), Lactobacillus kefiri DH5, Depositary Organization: Korea Microorganism Conservation Center, Accession No .: KCCM11837P, Accession Date: April 29, 2016), or complex cells thereof. Most preferably, the use of a complex cell of leukonostock mesenteroides LCM4 and Lactobacillus kepyri DH5 is suitable for the prevention or treatment of obesity. The complex cells may be used by mixing the leukonostock mesenteroides LCM4 and Lactobacillus kepyri DH5 in a concentration of 1: 1 to 1: 100, preferably used in a concentration of 1: 5 to 1:20. Can be.

본 발명자들은 포도씨 분말이 케피어 유래 유산균의 프로바이오틱스 활성에 유익한 영향을 미치는 프리바이오틱스(prebiotics)로서 작용한다는 것을 확인하였다. The inventors have confirmed that grape seed powder acts as a prebiotics which has a beneficial effect on the probiotic activity of kefir-derived lactic acid bacteria.

본 발명에 이용되는 포도의 품종, 산지 또는 수확시기 등에는 특별한 제한은 없으나, 샤르도네(Chardonnay) 포도를 이용하는 것이 가장 바람직하다.There is no particular limitation on the variety, production region or harvesting time of the grapes used in the present invention. Chardonnay grapes are most preferably used.

본 발명의 포도씨 분말은 포도를 재료로 하는 음료나 주류의 제조과정에서 발생되는 부산물로부터 생성될 수 있다. 바람직하게는, 상기 포도씨 분말은 포도주 또는 와인(wine)의 제조과정에서 발생되는 부산물로부터 생성될 수 있다.The grape seed powder of the present invention may be produced from by-products generated during the manufacture of beverages or liquors based on grapes. Preferably, the grape seed powder may be produced from by-products generated during the production of wine or wine.

여기서, "부산물"은 포도를 원료로 하여 파쇄 및 발효 공정을 거친 후 증류 공정에서 생성되는 와인 또는 포도주 증류액을 제외한 나머지 생성물을 총칭한다.Here, "by-product" is a generic term for the remaining products other than wine or wine distillate produced in the distillation process after the crushing and fermentation process using grape as a raw material.

통상적으로, 와인 또는 포도주 제조시 발생되는 부산물들은 폐기되고 있다. 그러나 이러한 폐기물은 원료 포도의 40% 정도에 이르러 경제적으로 큰 손실이 아닐 수 없다. 본 발명에 따르면, 와인 제조시 발생되는 부산물을 프리바이오틱스로 활용할 수 있기 때문에, 환경적, 경제적으로도 큰 이점이 있다.Typically, by-products of wine or wine making are discarded. However, these wastes account for 40% of the raw grapes, which is a significant economic loss. According to the present invention, since by-products generated during wine production can be utilized as prebiotics, there is a great environmental and economic advantages.

본 발명의 일 실시예에 따른 "포도씨 분말"(Grape seed flour, GSF)은 와인을 생산하고 남은 부산물로부터 포도씨를 분리, 건조한 뒤, "냉각프레스", "열프레스" 기법 등을 이용하여 포도씨로부터 오일을 추출한 다음, 가루로 분쇄함으로써 생성될 수 있다. 포도씨 분말의 분리, 건조, 압축, 분쇄 방법은 종래 알려진 기술들에 의해 다양한 형태로 수행될 수 있다.According to one embodiment of the present invention, "Grape seed flour" (Grape seed flour, GSF) is produced by separating the grape seed from the by-products remaining from the wine, dried, and then from the grape seed using the "cool press", "heat press" technique, etc. It can be produced by extracting the oil and then grinding it into powder. Separation, drying, compacting and grinding methods of the grape seed powder may be carried out in various forms by conventionally known techniques.

포도씨 분말의 입자 크기는 분쇄 환경에 따라 다양하게 조절할 수 있으며, 더 작은 입자를 가진 분말을 생성하기 위해 체로 거르는 작업을 추가할 수 있다. 포도씨 분말의 입자 크기는 식품, 의약품 등 활용 용도와 목적에 맞게 조절 가능하다.The particle size of the grape seed powder can be varied according to the grinding environment, and an additional sifting operation can be added to produce a powder with smaller particles. The particle size of the grape seed powder can be adjusted to suit the intended use and purpose of food and medicine.

본 발명에서는 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 섭취하는 경우 고지방식이로 인한 비만 개선에 우수한 효과를 나타낸다는 것을 발견하였다. 특히, 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균은 함께 섭취되었을 때 시너지 효과를 발휘하여 이들을 각각 섭취하였을 경우로부터 예측하기 어려운 현저한 효과를 나타낸다는 것을 확인하였다. In the present invention, when the grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria were found to have an excellent effect on improving obesity due to high fat diet. In particular, it was confirmed that the grape seed powder and the kefir-derived lactic acid bacteria exhibited synergistic effects when ingested together and showed remarkable effects that were difficult to predict from the ingestion of each of them.

구체적으로, 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 함께 섭취하는 경우 고지방식이로 인한 체중 증가를 억제할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 고지방식이로 유도된 비만 실험쥐에게 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 고지방식이와 함께 9주간 섭취시킨 경우 오히려 체중이 감소한다는 것을 확인하여 본 발명의 조성물이 비만의 예방 또는 치료에 우수한 효과를 발휘할 수 있다는 것을 확인하였다. Specifically, when ingested together with grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria can suppress weight gain due to high fat diet. In one embodiment of the present invention, when the high-fat diet-induced obese mice were ingested with grape seed powder and kefir-derived lactic acid for 9 weeks with a high-fat diet, it was confirmed that the weight is reduced, and thus the composition of the present invention is obese It was confirmed that it can exert an excellent effect on prevention or treatment.

본 발명의 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 섭취한 실험쥐는 실제로 지방 조직의 크기가 뚜렷이 감소한다는 것을 확인하였으며, 총 콜레스테롤 수치 및 인슐린 수치를 크게 감소시킬 수 있다는 것을 확인하였다. 인슐린은 지방세포의 분화를 유도하는 호르몬으로 지방세포 대사 조절에 관여하는 주요 외부 인자이다.The rats ingested grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria of the present invention actually confirmed that the size of adipose tissue was significantly reduced, and it was confirmed that the total cholesterol and insulin levels could be greatly reduced. Insulin is a hormone that induces differentiation of fat cells and is a major external factor involved in the regulation of fat cell metabolism.

또한, 본 발명의 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균은 체내에 흡수되어 아세트산 또는 프로피온산과 같은 단쇄지방산(short chain fatty acid)를 증가시킨다. 단쇄지방산은 항비만과 항염증에 효과적인 것으로 알려져 있다. In addition, the grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria of the present invention are absorbed into the body to increase short chain fatty acids such as acetic acid or propionic acid. Short-chain fatty acids are known to be effective in anti-obesity and anti-inflammatory.

상기 케피어 유래 유산균은 포도씨 분말의 질량에 대하여 0.1 내지 10중량%로 사용되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 0.5 내지 5중량%로 사용될 수 있다.The kefir-derived lactic acid bacteria is preferably used in an amount of 0.1 to 10% by weight, and more preferably 0.5 to 5% by weight, based on the mass of the grape seed powder.

본 발명의 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 함유하는 조성물은 기능성 식품으로서 활용될 수 있다.The composition containing the grape seed powder and kefir derived lactic acid bacteria of the present invention can be utilized as a functional food.

상기 기능성 식품은 발효식품인 것이 바람직하지만, 이에 제한되지는 않는다. 예를 들어서, 기능성 식품은 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류일 수 있으며, 더욱 자세히는, 유제품, 제과물, 조미료, 음료 및 드링크제, 스낵, 캔디류, 젤리류, 아이스크림 및 냉동용 디저트, 아침 곡물류, 영양바, 스낵 바 초콜렛 제품, 가공 식품, 곡물 제품 및 파스타, 스프, 소스 및 드레싱, 과자 제품, 오일 및 지방 제품, 유제품 음료 (dairy drink) 및 우유 음료, 차, 두유 및 콩 유제품 (soy dairy-like product), 냉동식품, 조리 음식 및 대체 음식, 육류 제품, 치즈, 요구르트, 빵 및 롤빵, 케이크, 쿠키 및 크래커로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나일 수 있다. The functional food is preferably a fermented food, but is not limited thereto. For example, the functional food may be beverages, gums, teas, vitamin complexes, dietary supplements, and more specifically, dairy products, confectionery, condiments, beverages and drinks, snacks, candies, jelly, ice cream and frozen desserts. , Breakfast cereals, nutrition bars, snack bars chocolate products, processed foods, grain products and pastas, soups, sauces and dressings, confectionery products, oils and fats products, dairy drinks and milk drinks, tea, soy milk and soy milk products (soy dairy-like product), frozen foods, cooked foods and substitutes, meat products, cheese, yogurt, bread and buns, cakes, cookies and crackers.

또한, 상기 기능성 식품은 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 포함하는 캡슐, 정제, 분말, 액상 현탁액, 환제 및 과립제 등의 제형으로 제조될 수 있다.In addition, the functional food may be prepared in the form of capsules, tablets, powders, liquid suspensions, pills and granules, including kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder.

또한, 상기 기능성 식품은 유효성분으로서 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말 뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 추가로 포함할 수 있다.In addition, the functional food may further include components normally added during food production, as well as kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder as an active ingredient.

본 발명의 기능성 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있으며, 과일주스나 야채 음료 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.Functional foods of the present invention include various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors such as synthetic and natural flavors, coloring and neutralizing agents (such as cheese, chocolate), pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof , Organic acids, protective colloid thickeners, pH regulators, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, carbonation agent used in carbonated drinks, and the like, and may contain fruit juice or pulp for preparing vegetable drinks.

본 발명의 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 함유하는 조성물은 또한, 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물로서 활용될 수 있다.The composition containing the grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria of the present invention can also be utilized as a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity.

본 발명에 따른 약학 조성물은 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 유효성분으로서 함유하며, 통상의 방법에 따른 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 상기 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. The pharmaceutical composition according to the present invention contains kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder as active ingredients, and may further include a suitable carrier, excipient or diluent according to a conventional method. The pharmaceutically acceptable carrier is conventionally used in the preparation, lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, Polyvinylpyrrolidone, cellulose, water, syrup, methyl cellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil, and the like.

본 발명의 약학 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제화에 관해서는 레밍턴의 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)]에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may further include lubricants, wetting agents, sweeteners, flavoring agents, emulsifiers, suspending agents, preservatives, etc. in addition to the above components. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and formulations may be preferably formulated according to each component using the methods disclosed in Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995).

본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구 투여 모두 가능하며, 비경구 투여는 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등을 포함한다. The pharmaceutical composition of the present invention can be oral or parenteral administration, and parenteral administration includes intravenous injection, subcutaneous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, transdermal administration and the like.

경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경질, 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/ 또는 폴리에틸렌 글리콜)를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제를 함유할 수 있다. 상기 제형은 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.Formulations for oral administration include, for example, tablets, pills, hard capsules, soft capsules, solutions, suspensions, emulsifiers, syrups, granules, etc. These formulations may contain diluents (e.g., lactose, dextrose, water, etc.) in addition to the active ingredients. Cross, mannitol, sorbitol, cellulose and / or glycine), lubricants such as silica, talc, stearic acid and its magnesium or calcium salts and / or polyethylene glycols. The tablets may also contain binders such as magnesium aluminum silicate, starch paste, gelatin, tragacanth, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose and / or polyvinylpyrrolidine, optionally starch, agar, alginic acid. Or disintegrant or boiling mixtures such as sodium salts thereof and / or absorbents, colorants, flavors and sweeteners. The formulations may be prepared by conventional mixing, granulating or coating methods.

또한, 비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제제이며, 주사용 제제의 용매로서 물, 링거액, 등장성 생리 식염수 또는 현탁액을 들 수 있다. 상기 주사용 제제의 멸균 고정 오일은 용매 또는 현탁 매질로서 사용할 수 있으며 모노-, 디-글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있다. 또한, 상기 주사용 제제는 올레산과 같은 지방산을 사용할 수 있다.Representative formulations for parenteral administration are also injectable preparations, which include water, Ringer's solution, isotonic physiological saline or suspension as solvents for injectable preparations. Sterile fixed oils of the injectable preparations may be used as solvents or suspending media and any non-irritating fixed oil may be used for this purpose, including mono- and di-glycerides. In addition, the injectable preparation may use a fatty acid such as oleic acid.

본 발명에 따른 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, “약학적으로 유효한 양”은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 통상의 지식을 가진 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.The composition according to the invention is administered in a pharmaceutically effective amount. In the present invention, “pharmaceutically effective amount” means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to medical treatment, and an effective dose level refers to the type, severity, and activity of the patient's disease. , Sensitivity to the drug, time of administration, route of administration and rate of release, duration of treatment, factors including concurrent use of the drug, and other factors well known in the medical arts. The composition according to the present invention may be administered as a separate therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents, and may be single or multiple doses. Taking all of the above factors into consideration, it is important to administer an amount that can achieve the maximum effect with a minimum amount without side effects, which can be easily determined by those skilled in the art.

구체적으로, 본 발명에 따른 조성물의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1kg 당 0.001 내지 150mg, 바람직하게는 0.01 내지 100mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Specifically, the effective amount of the composition according to the present invention may vary depending on the age, sex and weight of the patient, and generally 0.001 to 150 mg, preferably 0.01 to 100 mg per 1 kg of body weight is administered daily or every other day or 1 to 1 day. It can be divided into three doses. However, the dosage may be increased or decreased depending on the route of administration, sex, weight, age, etc., and the above dosage does not limit the scope of the present invention in any way.

실시예Example

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only to illustrate the invention, it will be apparent to those of ordinary skill in the art that the scope of the present invention is not to be construed as limited by these examples.

실험 준비Experiment preparation

대사성 비만 Metabolic obesity 질환을 가진Disease 실험쥐 준비 Rat Preparation

C57BL/6J 실험쥐 86마리에게 고지방식이인 "western diet" 사료를 5주 동안 섭취시켜 대사성 비만 질환을 유도하였다. Metabolic obesity disorders were induced in 86 C57BL / 6J mice by ingesting a high-fat diet "western diet" for 5 weeks.

상기 사료 및 아래의 실험예에서 사용될 고지방식이의 구체적인 성분은 아래의 표 1에 나타낸 바와 같다. Specific components of the high-fat diet to be used in the feed and the experimental examples below are shown in Table 1 below.

성분(g/kg)Ingredient (g / kg) 고지방식이High-fat diet 포도씨 분말 Grape seed powder
함유 식이Containing diet
Lard fatLard fat 225.0225.0 225.0225.0 Soybean OilSoybean oil 21.121.1 13.513.5 CholesterolCholesterol 0.80.8 0.80.8 MCC
(Microcrystalline cellulose)
MCC
(Microcrystalline cellulose)
57.357.3 00
CaseinCasein 199.2199.2 191.0191.0 Corn StarchCorn starch 145.6145.6 118.7118.7 SucroseSucrose 300.0300.0 300.0300.0 L CysteinL Cystein 3.03.0 3.03.0 Choline BitartrateCholine bitartrate 3.03.0 3.03.0 Mineral MixMineral mix 35.035.0 35.035.0 Vitamin Mix 93GVitamin Mix 93G 10.010.0 10.010.0 GSFGSF 00 100.0100.0 Total Diet weightTotal Diet weight 1000.01000.0 1000.01000.0

케피어Kefir 유래 유산균 준비 Lactic Acid Bacteria Preparation

케피어로부터 분리된 유산균 류코노스톡 메센테로이데스 LCM4 및 락토바실러스 케피리 DH5를 각각 MRS 배지에서 배양한 후, 분말화하여 대량생산 하였다. Lactobacillus leukonostock mesenteroides LCM4 and Lactobacillus kepyri DH5 isolated from kefir were cultured in MRS medium, and then powdered and mass-produced.

MRS 고체 배지에서 류코노스톡 메센테로이데스 LCM4는 1 x 1010CFU/mg, 락토바실러스 케피리 DH5는 1 x 109CFU/mg가 되도록 각각 배양한 후, 자란 균을 긁어 모아 멸균생리식염수가 들어있는 교반기 위의 플라스크에 조금씩 넣으며 LCM4 균의 경우 탁도 3.9, DH5 균의 경우 탁도 2.0에 맞추었다. In MRS solid medium, leuconosstock mesenteroides LCM4 was incubated at 1 x 10 10 CFU / mg, and Lactobacillus kepyri DH5 at 1 x 10 9 CFU / mg, respectively, and the cultivated bacteria were collected by sterile physiological saline solution. The flask was placed in a flask on a stirrer and adjusted to turbidity 3.9 for LCM4 bacteria and 2.0 for DH5 bacteria.

이후, 4℃, 3,000rpm에서 10분간 원심분리를 수행하였다. 상등액을 버리고, 멸균생리식염수를 넣어준 뒤 동결건조시켜 분말화하였다. Thereafter, centrifugation was performed at 4 ° C. and 3,000 rpm for 10 minutes. The supernatant was discarded, sterile saline was added and lyophilized to powder.

분말화된 케피어 유래 유산균은 이를 투여 하기 전 1시간 정도 멸균 증류수 6mL에 넣어 상온에서 재수화시킨 후, 두 균주의 샘플을 1:1의 비율로 잘 섞어 튜브식(gavage) 투여를 통해 최종적으로 실험쥐에게 투여하였다.The powdered kefir-derived lactic acid bacteria were rehydrated at room temperature in 6 mL of sterile distilled water for about 1 hour before administration, and the samples of the two strains were mixed well in a ratio of 1: 1 and finally administered through tube administration (gavage). The mice were administered.

포도씨 분말 준비Grape Seed Powder Preparation

샤르도네(Chardonnay) 포도씨 가루를 미국 ApresVin Enterprises, Inc.에서 구매하여 사용하였다. Chardonnay grape seed powder was purchased from ApresVin Enterprises, Inc., USA.

상기 포도씨 가루는 샤르도네(Chardonnay) 포도를 이용하여 와인을 만들고 남은 부산물을 냉압착(cold-pressed)하여, 포도씨에서 기름을 제거하고, 남은 생성물을 열풍 건조하고, air blow를 이용하여 껍질 부분을 제거한 다음, 남은 생성물을 100메쉬(150마이크론) 사이즈를 가진 체를 이용하여 거른 고운 입자의 포도씨 분말(Grape seed flour, GSF)의 형태이다. The grape seed powder is made by using Chardonnay grapes and cold-pressed the remaining by-products (cold-pressed), to remove the oil from the grape seed, hot air drying the remaining product, remove the skin portion using air blow Next, the remaining product is in the form of a fine seed grape seed powder (GSF) filtered using a sieve having a size of 100 mesh (150 microns).

실험예Experimental Example 1: 체중 증가 분석 1: weight gain analysis

대사성 비만 질환을 가진 실험쥐 60마리를 4개의 그룹으로 나누어 하기 표 2의 식이를 각각 9주간 제공하였다. 하기 표 1에서, 각 수치는 30g의 실험쥐를 기준으로 1회에 투여된 무게를 의미한다. Sixty mice with metabolic obesity disease were divided into four groups to provide the diet of Table 2 for 9 weeks each. In Table 1 below, each value means the weight administered once based on 30g of mice.

비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교예 3Comparative Example 3 실시예 1Example 1 고지방식이
(포도씨 분말 함량, %)
High-fat diet
(Grape seed powder content,%)
4g
(-)
4 g
(-)
4g
(10)
4 g
10
4g
(-)
4 g
(-)
4g
(10)
4 g
10
케피어 유래 유산균
복합 균체
Kefir-derived lactic acid bacteria
Complex cells
-- -- 300μg300 μg 300μg300 μg

9주간 식이를 섭취하기 전과 후의 체중 변화를 도 1에 나타내었다.The weight change before and after ingesting the diet for 9 weeks is shown in FIG. 1.

도 1에서, 고지방식이만을 섭취한 비교예 1의 실험쥐는 9주간 약 13.5g의 체중증가가 관찰되었다. In Figure 1, the rat of Comparative Example 1 ingested only high fat diet was observed weight gain of about 13.5g for 9 weeks.

포도씨 분말을 고지방식이와 함께 섭취한 비교예 2의 실험쥐는 체중 변화가 거의 없었으며, 케피어 유래 유산균 복합 균체를 함께 섭취한 비교예 3의 실험쥐는 9주간 약 7.5g의 체중 증가가 관찰되었다. The rats of Comparative Example 2 ingesting grape seed powder with high fat diet showed little change in weight, and the rats of Comparative Example 3 incorporating Kefir-derived lactic acid bacteria complex body weight gained about 7.5g for 9 weeks. .

한편, 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균 복합 균체를 고지방식이와 함께 섭취한 실시예 1의 실험쥐는 오히려 체중이 1g 가량 감소하였다. On the other hand, the rats of Example 1 ingested grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria combined with a high-fat diet, the weight of the body rather reduced by about 1g.

즉, 포도씨 분말과 케피어 유래 유산균 복합 균체가 서로 시너지 효과로 작용하여 이들을 각각 섭취할 경우에는 예측하기 어려운 현저한 효과를 나타낸다는 것을 확인할 수 있다. That is, it can be confirmed that the grape seed powder and the kefir-derived lactic acid bacteria complex act as synergistic effects with each other, and when they are ingested, they show a remarkable effect that is difficult to predict.

실험예Experimental Example 2: 지방 세포 크기 분석 2: fat cell size analysis

상기 실험예 1에서 9주간 실시예 및 비교예의 식이를 섭취한 실험쥐에 대하여, 부고환 지방 조직을 적출하고 10% 포르말린에 고정시킨 후 헤마톡실린-에오신 2중 염색(H&E stain)을 수행하였다. 그 결과를 도 2에 나타내었다. Experimental rats ingesting the diet of Example and Comparative Example for 9 weeks in Experimental Example 1 were extracted with epididymal adipose tissue and fixed in 10% formalin, and then hematoxylin-eosin double staining (H & E stain) was performed. The results are shown in FIG.

도 2에서, 실시예 1의 식이를 섭취한 실험쥐의 세포 크기가 비교예 1 내지 3 중 어느 것과 비교해도 가장 작다는 것을 알 수 있다. 이는 포도씨 분말과 케피어 유래 유산균 복합 균체를 각각 섭취하는 것보다 이들을 함께 섭취하는 것이 가장 우수한 비만 억제 효과를 발휘할 수 있다는 것을 알려준다.In Figure 2, it can be seen that the cell size of the mice ingesting the diet of Example 1 is the smallest compared to any of Comparative Examples 1 to 3. This suggests that ingestion of grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria complexes together may provide the best anti-obesity effect.

실험예Experimental Example 3: 생화학적 검사 3: biochemical test

상기 실험예 1에서 9주간 실시예 및 비교예의 식이를 섭취한 실험쥐의 혈액으로부터 생화학자동분석기(7020, HITACHI)를 이용하여 다음 항목들의 검사를 수행한 결과를 표 3에 나타내었다. Table 3 shows the results of the following items from the blood of the rats fed the diet of Example and Comparative Example for 9 weeks in Experimental Example 1 using a biochemical automatic analyzer (7020, HITACHI).

검사 항목:Inspection items:

트리글리세라이드(Triglyceride : TG, mg/dL)Triglyceride (TG, mg / dL)

총콜레스테롤(Total cholesterol : T.C, mg/dL)Total cholesterol (T.C, mg / dL)

글루코오즈(Glucose, mg/dL), Glucose (mg / dL),

인슐린(Insulin, ng/mL)Insulin (ng / mL)

비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교예 3Comparative Example 3 실시예 1Example 1 T.G
(mg/dL)
TG
(mg / dL)
51.2±5.151.2 ± 5.1 30±3.630 ± 3.6 37.1±3.637.1 ± 3.6 31.2±2.231.2 ± 2.2
T.C
(mg/dL)
TC
(mg / dL)
266.1±23.4266.1 ± 23.4 174.2±18.3174.2 ± 18.3 233.1±15.7233.1 ± 15.7 161.2±10.1161.2 ± 10.1
Glucose (mg/dL)Glucose (mg / dL) 172.1±6.2172.1 ± 6.2 134.2±5.3134.2 ± 5.3 156.6±10.1156.6 ± 10.1 135.9±5.7135.9 ± 5.7 Insulin (ng/mL)Insulin (ng / mL) 2.7±0.32.7 ± 0.3 1.0±0.11.0 ± 0.1 1.1±0.31.1 ± 0.3 0.8±0.10.8 ± 0.1

상기 표 3에서, TG 및 글루코오즈에 대해서는 특별한 시너지 효과가 관찰되지 않았지만, TC 및 인슐린 수치에 있어서 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균 복합 균체를 함께 섭취한 실시예 1의 실험쥐가 이들을 각각 섭취한 비교예 2 또는 3의 실험쥐의 평균값보다 현저히 낮은 값을 나타낸다는 것을 확인할 수 있다. In Table 3, no special synergistic effect was observed for TG and glucose, but the rats of Example 1 in which grape seed powder and kefir-derived lactic acid complex cells were ingested in TC and insulin levels were compared with each of them. It can be seen that it represents a significantly lower value than the average value of the mouse of Example 2 or 3.

실험예Experimental Example 4:  4: 단쇄지방산Short-chain fatty acid 측정 Measure

상기 실험예 1에서 9주간 실시예 및 비교예의 식이를 섭취한 실험쥐로부터 맹장(cecum)을 적출한 시료에 탈염수에 Na2CO3를 3.6mM로 용해시킨 용리액을 1.5 mL까지 채운 후 1시간 초음파 분쇄하여 용출시켰다. 용출한 시료를 원심분리하여 상등액을 취하였다. 상등액을 시린지 필터(Syringe filter)로 필터링한 후, 상기 용리액으로 100배 희석하여 IC 분석하여 그 결과를 아래의 표 4에 나타내었다.In the experimental example 1, the cecum extracted from the rats ingesting the diets of the Examples and Comparative Examples for 9 weeks was filled with eluent dissolved in Na 2 CO 3 in 3.6 mM in demineralized water to 1.5 mL, and then sonicated for 1 hour. It was ground and eluted. The eluted sample was centrifuged to obtain a supernatant. The supernatant was filtered with a syringe filter, diluted 100-fold with the eluent, and analyzed by IC. The results are shown in Table 4 below.

비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교예 3Comparative Example 3 실시예 1Example 1 아세트산 (mg/L)Acetic acid (mg / L) 52.5±20.752.5 ± 20.7 84.1±16.584.1 ± 16.5 7.1±6.57.1 ± 6.5 100.5±41.4100.5 ± 41.4 프로피온산 (mg/L)Propionic acid (mg / L) 9.8±4.99.8 ± 4.9 28.3±7.928.3 ± 7.9 15.8±11.915.8 ± 11.9 49.9±8.049.9 ± 8.0

상기 표 4에서, 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균 복합 균체를 함께 섭취한 실시예 1의 실험쥐는 이들을 각각 섭취한 비교예 2 또는 3의 실험쥐의 단순 합산보다 더 많은 함량의 단쇄지방산(아세트산 및 프로피온산)을 갖는 것으로 나타났다. In Table 4, the mice of Example 1, which were ingested together with grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria complex cells, had higher amounts of short-chain fatty acids (acetic acid and propionic acid) than the simple summation of the mice of Comparative Example 2 or 3, respectively. ).

실험예Experimental Example 5: 부고환 지방조직에서  5: in the epididymal adipose tissue microarraymicroarray 분석에 의한 gene profiling Gene profiling by analysis

상기 실험예 1에서 9주간 실시예 및 비교예의 식이를 섭취한 실험쥐의 부고환 조직에서 RNA를 분리한 후 Agilent microarray chip을 사용하여 microarray 분석을 실시하였다. After RNA was isolated from the epididymal tissue of the rats fed the diet of Example and Comparative Example for 9 weeks in Experimental Example 1, microarray analysis was performed using an Agilent microarray chip.

대조군(비교예 1)과 실시예 1, 및 비교예 1 및 2를 비교하여 통계적으로 유의미하고 변화가 큰 것들을 도 3 내지 5에 나열하였다. 또한, Ingenuity pathway analysis(IPA)를 통해 각각 유의적인 경로를 도 6 내지 8에 나타내었다.Comparison of the control group (Comparative Example 1) and Example 1, and Comparative Examples 1 and 2 are listed in Figures 3 to 5 statistically significant and large change. In addition, significant pathways are shown in FIGS. 6 to 8 through Ingenuity pathway analysis (IPA), respectively.

Microarray 분석 및 IPA 분석 결과를 도 9 내지 11에 정리하여 나타내었다. The results of the microarray analysis and the IPA analysis are shown in FIGS. 9 to 11.

도 9에서, 포도씨 분말을 섭취한 실험쥐는 대조군에 비해 특이적으로 혈관형성(angiogenesis), 지질다당류에 반응(response to LPS), 리포테이코산(lipoteichoic acid) 및 펩티도글리칸(peptidoglycan)에 관련된 유전자들이 크게 감소된 것을 확인할 수 있다. In Fig. 9, mice fed grape seed powder were specifically related to angiogenesis, response to LPS, lipoichoic acid, and peptidoglycan compared to the control group. We can see that the genes are greatly reduced.

도 10에서, 케피어 유래 유산균을 섭취한 실험쥐는 대조군에 비해 특이적으로 식이-유도된 열발생(diet-induced thermogenesis), WNT 유전자 저해(inhibition of Wnts), 세라미드 합성(ceramide synthesis) 및 디펜신(defensin)에 관련된 유전자들이 크게 영향을 받은 것을 알 수 있다. In Figure 10, the mice ingested kefir-derived lactic acid bacteria specifically diet-induced thermogenesis, WNT inhibition of Wnts, ceramide synthesis and defensin compared to the control group The genes involved in defensin are significantly affected.

마지막으로, 도 11에서, 포도씨 분말과 케피어 유래 유산균을 함께 섭취한 실험쥐는 대조군에 비해 특이적으로 NLRP inflammasone complex assembly에 관한 유전자들이 감소되었다. Finally, in FIG. 11, mice ingested with grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria specifically reduced genes related to the NLRP inflammasone complex assembly compared to the control group.

즉, 포도씨 분말 및 케피어 유래 유산균을 함유하는 조성물을 섭취하는 경우 이러한 유전자의 변화로 인하여, 고지방식이에 의한 비만, 인슐린 저항성, 염증, 산화 스트레스 등을 향상시키는 중요한 역할을 한다는 것을 확인하였다. That is, when ingesting a composition containing grape seed powder and kefir-derived lactic acid bacteria, it was confirmed that due to the change of these genes, it plays an important role in improving obesity, insulin resistance, inflammation, oxidative stress, etc. by the high-fat diet.

이상으로 본 발명의 내용의 특정부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.As described above in detail a specific part of the content of the present invention, for those of ordinary skill in the art, such a specific description is only a preferred embodiment, which is not limited by the scope of the present invention Will be obvious. Thus, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

Claims (10)

케피어(Kefir) 유래 유산균 및 포도씨 분말을 유효성분으로 포함하되,
상기 케피어 유래 유산균이 류코노스톡 메센테로이데스 LCM4(leuconostoc mesenteroides LCM4, 기탁번호: KCCM12117P) 및 락토바실러스 케피리 DH5(Lactobacillus kefiri DH5, 기탁번호: KCCM11837P)를 1:5 내지 1:20의 농도비로 포함하는 복합 균체인 것을 특징으로 하는, 비만 개선용 기능성 식품.
Kefir derived lactic acid bacteria and grape seed powder as an active ingredient,
The kefir-derived lactic acid bacteria contained leuconostoc mesenteroides LCM4 ( leucoostoc mesenteroides LCM4, Accession No .: KCCM12117P) and Lactobacillus kepyri DH5 ( Lactobacillus kefiri DH5, Accession No .: KCCM11837P) at a concentration ratio of 1: 5 to 1:20. Functional food for improving obesity, characterized in that the complex cells containing.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 제 1 항에 있어서,
상기 포도씨 분말이 와인 제조 부산물인 것을 특징으로 하는, 비만 개선용 기능성 식품.
The method of claim 1,
Functional food for improving obesity, characterized in that the grape seed powder is a wine production by-product.
제 1 항에 있어서,
상기 포도씨 분말이 샤르도네(Chardonnay) 품종의 포도로 제조된 것을 특징으로 하는, 비만 개선용 기능성 식품.
The method of claim 1,
The grape seed powder is characterized in that the chardonnay (Chardonnay) varieties, characterized in that the functional food for improving obesity.
제 1 항에 있어서,
상기 케피어 유래 유산균이 포도씨 분말의 질량에 대하여 0.1 내지 10중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는, 비만 개선용 기능성 식품.
The method of claim 1,
The kefir-derived lactic acid bacteria, characterized in that contained in 0.1 to 10% by weight based on the mass of the grape seed powder, functional food for improving obesity.
제 1 항에 있어서,
장내 단쇄지방산을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 비만 개선용 기능성 식품.
The method of claim 1,
Functional food for improving obesity, characterized by increasing the intestinal short-chain fatty acid.
제 1 항에 있어서,
상기 기능성 식품이 발효식품인 것을 특징으로 하는, 비만 개선용 기능성 식품.
The method of claim 1,
Functional food for improving obesity, characterized in that the functional food is a fermented food.
케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 유효성분으로 포함하되,
상기 케피어 유래 유산균이 류코노스톡 메센테로이데스 LCM4(leuconostoc mesenteroides LCM4, 기탁번호: KCCM12117P) 및 락토바실러스 케피리 DH5(Lactobacillus kefiri DH5, 기탁번호: KCCM11837P)를 1:5 내지 1:20의 농도비로 포함하는 복합 균체인 것을 특징으로 하는, 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
Kefir-derived lactic acid bacteria and grape seed powder as an active ingredient,
The kefir-derived lactic acid bacteria contained leuconostoc mesenteroides LCM4 ( leucoostoc mesenteroides LCM4, Accession No .: KCCM12117P) and Lactobacillus kepyri DH5 ( Lactobacillus kefiri DH5, Accession No .: KCCM11837P) at a concentration ratio of 1: 5 to 1:20. A pharmaceutical composition for preventing or treating obesity, characterized in that the complex cells comprising.
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