KR102037185B1 - A method of synthesis of conjugated linoleic acid using fraction of linoleic acid from by-product of pork - Google Patents

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Abstract

본 발명은 돈육 부산물 유래 리놀레산 분획을 이용한 공액 리놀레산(CLA)의 합성 방법에 관한 것으로, 현재 많은 양의 돈육 부산물이 잉여 및 폐기되고 있는 상황에서 상기 돈육 부산물을 활용하여 고부가가치 유용 물질인 CLA를 합성하는데 목적이 있다. 본 발명에 따른 CLA 합성 방법은 기존에 효소를 이용하여 CLA를 합성하는 방법보다 간편하고, 시간적인 이점과 함께 대량 생산 및 안정성 문제에 있어서 큰 이점이 있으며, 훨씬 경제적이면서 CLA의 취득 수율을 높일 수 있다. 또한, 무엇보다도 폐기 부산물인 돈육 부산물을 활용하여 체지방 감소, 항암 작용, 면역 기능 증가, 동맥경화증, 당뇨, 고혈압 치료 및 예방 등의 효과가 있는 고부가가치 CLA를 제공하므로 경제적으로도 이점이 있다.The present invention relates to a method for synthesizing conjugated linoleic acid (CLA) using a linoleic acid fraction derived from pork by-products, and synthesizing CLA, a high value-added useful substance, by utilizing the pork by-products in a situation where a large amount of pork by-products are surplus and discarded. The purpose is to. The method for synthesizing CLA according to the present invention is simpler than the method for synthesizing CLA using an enzyme, and has a great advantage in terms of time and mass production and stability issues, and is much more economical and can increase the yield of CLA. have. In addition, by utilizing the pork by-products, which are waste by-products above all, it is economically advantageous because it provides a high value-added CLA that is effective in reducing body fat, anticancer action, increasing immune function, atherosclerosis, diabetes, hypertension, and the like.

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Description

돈육 부산물 유래 리놀레산 분획을 이용한 공액 리놀레산의 합성 방법 {A method of synthesis of conjugated linoleic acid using fraction of linoleic acid from by-product of pork}Method of synthesis of conjugated linoleic acid using fraction of linoleic acid from by-product of pork}

본 발명은 돈육 부산물 유래 리놀레산 분획을 이용한 공액 리놀레산의 합성 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for synthesizing conjugated linoleic acid using a linoleic acid fraction derived from pork by-products.

CLA(Conjugated linoleic acid)는 리놀레산(linoleic acid)의 이성질체로서 공액 리놀레산으로 불린다. Linoleic acid는 탄소수가 18개이며, 2개의 이중결합을 갖고 있는 불포화 지방산이다. Linoleic acid는 다양한 종류의 이성질체가 존재하나 그 중에서도 cis-9, trans-11; trans-10, cis-12의 이중결합을 가진 CLA가 가장 많이 존재하는 것으로 알려져 있고, 생리활성 기능이 많은 것으로 알려져 있다. CLA는 반추동물이 섭취하는 linoleic acid로부터 반추동물에서 생장하는 미생물로 인하여 합성되는 중간 대사산물이다. 때문에 자연적으로는 주로 소고기, 양고기와 같은 반추동물의 고기와 우유, 치즈 등의 유제품에 많이 함유되어 있으나 가금류나 난류, 식물성 유지에는 반추동물의 육류나 유제품에 비하여 훨씬 낮은 농도로 존재하고 있다.Conjugated linoleic acid (CLA) is an isomer of linoleic acid called conjugated linoleic acid. Linoleic acid is an unsaturated fatty acid with 18 carbon atoms and two double bonds. Linoleic acid has various kinds of isomers, among others cis -9, trans -11; It is known that CLA having a double bond of trans -10 and cis -12 is most present, and is known to have many bioactive functions. CLA is an intermediate metabolite synthesized by ruminant-derived linoleic acid due to microorganisms growing in ruminants. Naturally, it is mainly contained in ruminant meat such as beef and lamb, and dairy products such as milk and cheese. However, poultry, eggs, and vegetable oils are present in much lower concentrations than meat or dairy products of ruminants.

CLA의 대표적인 효능은 체지방 감소로, 체내에는 리포단백 라이페이스(lipoprotein lipase)라는 효소가 있어 단백질과 결합된 상태로 혈액 중에 존재하는 지방단백질(lipoprotein)을 분해하여 지방을 지방세포에 저장하는 역할을 하며, CLA는 이 효소의 활성을 낮추어 체내에 지방이 축적되는 것을 억제한다. 인체에서 지방을 분해하여 칼로리를 발생하는 것은 세포 내의 미토콘드리아가 담당하는데, 지방산을 미토콘드리아로 운반하는 역할을 하는 것이 카르니틴(Carnitine)이며, CLA는 카르니틴의 활동을 원활하게 하여 체지방의 소모를 촉진시킨다. 또한 CLA는 지방세포가 세포분열을 통해 크기가 줄어들고, 스스로 죽어가는 지방세포의 자가 소멸을 촉진시켜 체지방을 감소시키는 효과도 있다.The main effect of CLA is to reduce body fat, and there is an enzyme called lipoprotein lipase in the body that decomposes lipoproteins in the blood and stores fat in adipocytes. In addition, CLA lowers the activity of this enzyme and inhibits the accumulation of fat in the body. The body's mitochondria are responsible for breaking down fat and generating calories. Carnitine is responsible for transporting fatty acids to the mitochondria, and CLA promotes the consumption of body fat by facilitating the activity of carnitine. In addition, CLA decreases the size of fat cells through cell division and promotes the self-disappearance of fat cells dying on their own, thereby reducing body fat.

또한, CLA는 항암효과에 대해서도 보고되었으며, 더불어 동물실험에서 대식세포의 기능을 향상시켜 면역기능을 증가시키고 항산화 효과가 있는 것으로 보고되었다. 뿐만 아니라 CLA 섭취를 통해 혈중 콜레스테롤을 감소시킨다는 연구 결과가 있으며, 천식 감소, 근육량 증가, 고혈압 완화, 동맥경화증, 당뇨병의 치료와 예방 등의 효과가 있는 것으로 알려져 있다.In addition, CLA has been reported for anticancer effects, and in animal experiments, it has been reported to increase the function of macrophages to increase immune function and have an antioxidant effect. In addition, there are studies that reduce blood cholesterol through the intake of CLA, and is known to be effective in reducing asthma, increasing muscle mass, relieving hypertension, arteriosclerosis, and diabetes.

이러한 다양한 생리활성 기능을 가지고 있는 CLA를 생산하는 기술은 크게 두 가지가 알려져 있다. 첫 번째는 Linoleic acid를 고온(180℃ 이상)에서 알칼리(주로 NaOH)로 반응시키는 알칼리 이성질화법이다. 이 방법은 대량생산과 높은 순도의 제품 생산이 가능하고, 수율이 비교적 높아 경제적인 측면에서 여러 장점이 있지만 합성 과정에서 여러 종류의 산화물 및 불순물이 발생한다는 단점이 있으므로 정제를 통하여 유해한 물질을 제거하는 것이 필수적이다. 이 방법으로 합성한 CLA는 cis-9, trans-11 이성질체와 trans-10, cis-12 이성질체가 70~80%로 대부분 차지하고 나머지 CLA 이성질체는 소량 존재한다.There are two known techniques for producing CLA having various bioactive functions. The first is the alkali isomerization method in which linoleic acid is reacted with alkali (mainly NaOH) at high temperature (above 180 ℃). This method is capable of mass production and production of high purity products, and has high yield and economical advantages, but there are disadvantages that various kinds of oxides and impurities are generated in the synthesis process. It is essential. CLA synthesized by this method is mostly cis -9, trans -11 isomer and trans -10, cis -12 isomer accounting for 70 ~ 80%, and the remaining CLA isomer is present in small amount.

CLA를 합성할 수 있는 다른 방법으로는 효소를 이용하는 방법이다(한국등록특허 제 1446309호 참조). 이는 자연 상태에서 합성하기 때문에 앞서 설명한 화학적인 합성 방법보다 독성에 대한 우려가 상대적으로 적다는 이점이 있다. 그러나 리놀레산 이성화효소(linoleic acid isomerase)의 안전성이 확실하게 입증되지 않았고, 대량 생산이 용이하지 않다는 단점이 있다. 또한 화학적 합성 방법보다 순도가 높지 않으며 가격이 훨씬 비싸 경제성이 떨어진다.Another method for synthesizing CLA is by using an enzyme (see Korean Patent No. 1446309). Since it is synthesized in its natural state, there is an advantage that the concern about toxicity is relatively lower than the chemical synthesis method described above. However, the safety of linoleic acid isomerase has not been reliably proven, and there are disadvantages in that mass production is not easy. It is also less expensive than chemical synthesis and is much more expensive and less economical.

여러 기능성을 가진 CLA는 합성 과정에서 잔존하는 산화물 및 여러 불순물들로 인해 섭취 시 부작용을 일으킬 수 있는 문제점이 있다. 뿐만 아니라 고농도의 처리 시 세포에 독성을 유발할 수 있는 위험성 역시 존재한다. 또한 물에서의 낮은 용해도로 인해 섭취 과정 시 제한을 받는 문제점이 존재한다. 이러한 문제점으로 인하여 CLA의 많은 효과에도 불구하고 섭취와 이용이 제한적으로 이루어지고 있는 현실이다.CLA having various functionalities has a problem that may cause side effects upon ingestion due to remaining oxides and various impurities in the synthesis process. In addition, there is a risk of toxicity to cells at high concentrations of treatment. In addition, there is a problem that is limited in the intake process due to low solubility in water. Due to these problems, despite the many effects of CLA, intake and use are limited.

따라서 CLA 합성 과정에서 산화물 및 독성 물질을 발생할 수 있는 단계를 줄이거나 대체 방법을 구상하고, 잔존 물질을 처리할 수 있는 연구가 진행되어야 하고, CLA 섭취 시 흡수 및 구체적 조절기작에 관한 연구가 필요하다. 뿐만 아니라 현재 CLA의 합성은 대부분 홍화씨유(safflower oil)를 사용한 방법만 진행되고 있는데 계속해서 단편적인 생산보다는 다른 원료와 잉여 및 폐기되고 있는 원료들을 사용한 합성 방법의 개발이 필요한 실정이다.Therefore, research should be conducted to reduce or devise alternative methods for the generation of oxides and toxic substances in the CLA synthesis process, to treat residual substances, and to study absorption and specific control mechanisms when ingesting CLA. . In addition, most of the CLA synthesis is using only safflower oil, but it is still necessary to develop a synthesis method using other raw materials and surplus and discarded raw materials rather than fragmentary production.

한편, 돼지 도체 중 내장은 횡경막을 중심으로 상단부에 위치하는 심장, 허파 및 간과 같은 장기인 적내장과 하단부위에 있는 위, 소장, 대장과 같은 소화기관인 백내장으로 구분된다. 돼지 적내장의 경우에는 대부분 순대 또는 순대국으로 소비되고 있고, 간의 경우에는 헤파린과 같은 소재가 추출되고 있으나 소량에 불과하다. 돼지 백내장 중 소장의 경우 외국에서는 내부의 점막물질을 기계적으로 제거한 후 주로 소시지의 케이싱원료로 사용하나 우리나라에서는 대부분 순대의 껍질로 이용되고 있다. 대장의 소비는 주로 곱창볶음 또는 순대국의 재료로 사용되고 있으며 특유의 냄새를 제거하기 위해 강한 양념류와 함께 섭취하는 것이 일반적이다. 순대 또는 소시지 케이싱으로 일부 사용되는 돼지 소장에 비해, 돼지 대장의 경우는 케이싱 용도로 가공이 이루어지지 못하고 있을 뿐 아니라, 자체 이취 발생은 물론 질긴 조직감으로 인해 식품으로의 가치가 매우 떨어져 소비가 열악한 형편이어서 생산량의 약 20~30% 가량만이 도축장 판매 기준 400원/kg의 낮은 가격으로 유통되는 한편, 나머지 70~80%는 비용(약 5만원/톤)을 발생업체인 도축장에서 부담하여 폐기되고 있는 실정이다.On the other hand, intestines of pig carcasses are divided into cataracts, which are organs such as the heart, lungs and liver, located in the upper part of the diaphragm, and digestive organs such as the stomach, small intestine, and intestine in the lower part. Most pig intestines are consumed as sundae or sundae, and in the liver, heparin is extracted, but only in small amounts. Small intestine in pig cataracts is used as casing raw material for sausages after mechanically removing the internal mucous substances in foreign countries, but most of them are used as skin of sundae in Korea. The consumption of large intestine is mainly used as the ingredients of fried giblets or sundae soup, and it is generally consumed with strong seasonings to remove the peculiar smell. Compared to the pig small intestine, which is partially used for sundae or sausage casing, the pig large intestine is not processed for casing, and its consumption is poor due to its low value as a food due to its own off-flavor and tough texture. Subsequently, only about 20-30% of the production is distributed at a low price of 400 won / kg based on slaughterhouse sales, while the remaining 70-80% is disposed of at the cost of the slaughterhouse. There is a situation.

국외의 경우 중국, 태국, 말레이시아, 필리핀 등 동남아시아 국가에서는 전통적으로 돼지 내장류를 이용한 식품이 대중적인 인기를 얻고 있으나, 단순 식품 섭취 소비에 불과하고, 현지에서 생산 판매 되고 있는 돼지 내장류 관련 제품의 품질 및 기호성은 매우 열악한 수준이므로 이를 개선한 고품질 돼지 내장류 가공제품의 개발이 필요한 실정이다. 유럽지역에서도 돼지 또는 소의 내장류를 전통적으로 섭취는 해왔지만 소시지와 햄류를 제외하고 다른 소비 형태는 나타나지 않고 우리나라와 마찬가지로 많은 양의 돼지 도축 부산물이 잉여 및 폐기되고 있는 상황이며, 돼지 도축 부산물은 농림축산식품부 조사에 따르면 백내장 기준으로 2009년 61,100톤, 2010년 64,200톤, 2011년 48,300톤, 2012년 62,900톤, 2013년 71,800톤, 2014년 70,200톤으로 매년 많은 양이 생산되고 있다. In the Southeast Asian countries such as China, Thailand, Malaysia, and the Philippines, traditionally, foods using pork intestines have gained popularity, but they are merely consumed and consumed. Since quality and palatability are very poor, it is necessary to develop a high-quality processed pig internal organs processed product. In Europe, pig or cattle viscera have been traditionally consumed, but other forms of consumption except for sausages and hams are not seen. Likewise, a large amount of pig slaughter by-products are surplus and discarded. According to a survey by the Ministry of Food and Livestock, a large amount is produced annually at 61,100 tons in 2009, 64,200 tons in 2010, 48,300 tons in 2011, 62,900 tons in 2012, 71,800 tons in 2013, and 70,200 tons in 2014.

돼지 도축 부산물의 소비가 이루어지지 않아 많은 양이 폐기되고 있는 상황에서도 부산물의 수입량은 줄지 않고 있다. 한국육류유통수출협회에 따르면 2013년 소 5만 8593톤, 돼지 11만 2584톤으로 총 17만 1177톤이 수입됐고, 지난해 역시 11월까지 소 5만 1839톤, 돼지 12만 9335톤으로 총 18만 1174톤이 수입된 것으로 조사됐다. 이러한 이유는 국내에서 생산되는 도축 부산물을 처리 및 가공하는 비용보다 외국에서 수입하는 부산물의 가격이 더 낮기 때문이다. 이와 같은 상황이 지속되면서 도축비용과 관련한 제반비용을 부산물 판매비로 충당하던 축산농가의 어려움은 커지고 있으며, 유통업계 역시 재고 누적으로 보관비를 더욱 걱정해야 하는 실정이다. Imports of by-products have not declined even when large quantities are being discarded due to the lack of consumption of pig slaughter by-products. According to the Korea Meat Distribution Export Association, 17,177 tons were imported in 2013, with 5,8593 tons of beef and 11,584 tons of pigs. 1174 tons were imported. This is because the price of by-products imported from abroad is lower than the cost of processing and processing slaughter by-products produced in Korea. As this situation continues, the difficulties of livestock farmers, which cover all costs related to slaughter costs with the sale of by-products, are increasing, and the distribution industry needs to worry more about storage costs due to inventory accumulation.

이에, 본 발명자들은 CLA를 합성할 수 있는 다른 원료를 모색하다 잉여 및 폐기되고 있는 돼지 도축 부산물에서의 CLA 합성 방법을 발명함으로써, 폐기 자원을 활용한 고부가 가치 상품을 생산하여 축산 농가의 새로운 시장 개척을 활성화 시키고자 하였다.Therefore, the present inventors have searched for other raw materials capable of synthesizing CLA. By inventing a method of synthesizing CLA from the surplus and discarded pig slaughter by-products, the inventors have produced high value-added products utilizing waste resources to open up new markets for livestock farmers. Was to activate.

본 발명자들은 현재 많은 양의 돼지 도축 부산물이 잉여 및 폐기되고 있는 상황에서 이를 활용하여 고부가가치 유용 물질인 CLA를 합성하는 방법에 대해 개발함으로써 본 발명을 완성하였다.The present inventors have completed the present invention by developing a method for synthesizing a high value-added useful CLA by using it in a situation where a large amount of pig slaughter by-products are surplus and discarded.

이에, 본 발명은 (a) 돈육 부산물 유래 유용지방을 추출하는 단계;Thus, the present invention comprises the steps of (a) extracting the useful fat derived from pork by-products;

(b) 상기 (a)에서 추출한 유용지방으로부터 리놀레산을 분획하는 단계; 및(b) fractionating linoleic acid from the useful fat extracted in (a); And

(c) 상기 (b)에서 분획한 리놀레산으로부터 공액 리놀레산을 합성하는 단계; (c) synthesizing conjugated linoleic acid from the linoleic acid fractionated in (b);

를 포함하는, 돈육 부산물 유래 리놀레산 분획을 이용한 공액 리놀레산의 합성 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.It is an object to provide a method for synthesizing conjugated linoleic acid using a pork by-product-derived linoleic acid fraction comprising a.

그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당해 기술분야의 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다. However, the technical problem to be achieved by the present invention is not limited to the above-mentioned problem, another task that is not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the following description.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (a) 돈육 부산물 유래 유용지방을 추출하는 단계;In order to achieve the above object, the present invention comprises the steps of (a) extracting useful fat derived from pork by-products;

(b) 상기 (a)에서 추출한 유용지방으로부터 리놀레산을 분획하는 단계; 및(b) fractionating linoleic acid from the useful fat extracted in (a); And

(c) 상기 (b)에서 분획한 리놀레산으로부터 공액 리놀레산을 합성하는 단계; (c) synthesizing conjugated linoleic acid from the linoleic acid fractionated in (b);

를 포함하는, 돈육 부산물 유래 리놀레산 분획을 이용한 공액 리놀레산의 합성 방법을 제공한다.It provides a method for the synthesis of conjugated linoleic acid using a pork by-product-derived linoleic acid fraction comprising a.

본 발명의 일구현예로, 상기 (a)에서 돈육 부산물은 돼지의 간, 허파, 심장, 위, 소장, 또는 대장일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the pork by-product in (a) may be liver, lungs, heart, stomach, small intestine, or large intestine of the pig.

본 발명의 다른 일구현예로, 상기 (b)에서 리놀레산은 지방산의 녹는점을 이용하여 분획될 수 있다.In another embodiment of the present invention, the linoleic acid in (b) can be fractionated using the melting point of the fatty acid.

본 발명의 또 다른 일구현예로, 상기 (b)에서 리놀레산을 분획하는 단계는, 상기 (a)에서 추출한 유용지방을 0 내지 10℃에 방치하여 고체가 되는 포화지방산을 제거하는 단계; 및In another embodiment of the present invention, the step of fractionating linoleic acid in (b), the step of leaving the useful fat extracted in (a) at 0 to 10 ℃ to remove the saturated fatty acid to become a solid; And

상기 포화지방산이 제거된 유용지방을 -4.9 내지 -4.1℃에 방치하여 고체가 되는 불포화지방산을 제거하여 액체 상태로 존재하는 고순도의 리놀레산을 분획하는 단계; 를 포함할 수 있다.Leaving the useful fatty acid from which the saturated fatty acid has been removed at -4.9 to -4.1 ° C to remove unsaturated fatty acid which becomes a solid to fractionate high purity linoleic acid present in a liquid state; It may include.

본 발명의 또 다른 일구현예로, 상기 (c)에서 공액 리놀레산은 알칼리 이성질체화 반응에 의해 합성될 수 있다.In another embodiment of the present invention, the conjugated linoleic acid in (c) can be synthesized by an alkali isomerization reaction.

본 발명의 또 다른 일구현예로, 상기 알칼리 이성질체화 반응은 100 내지 250℃에서 수행될 수 있다.In another embodiment of the present invention, the alkali isomerization reaction may be performed at 100 to 250 ° C.

본 발명의 또 다른 일구현예로, 상기 공액 리놀레산은 시스-9/트랜스-11 또는 트랜스-10/시스-12 공액 리놀레산을 포함할 수 있다.In another embodiment of the present invention, the conjugated linoleic acid may comprise cis-9 / trans-11 or trans-10 / cis-12 conjugated linoleic acid.

본 발명에 따른 돈육 부산물 유래 리놀레산 분획을 이용한 공액 리놀레산(CLA) 합성 방법은 기존에 효소를 이용하여 CLA를 합성하는 방법보다 간편하고, 시간적인 이점과 함께 대량 생산 및 안정성 문제에 있어서 큰 이점이 있으며, 훨씬 경제적이면서 CLA의 취득 수율을 높일 수 있다. 또한, 무엇보다도 폐기 부산물인 돈육 부산물을 활용하여 체지방 감소, 항암 작용, 면역 기능 증가, 동맥경화증, 당뇨, 고혈압 치료 및 예방 등의 효과가 있는 고부가가치 CLA를 제공한다는 점에서 경제적인 이점이 클 것으로 기대된다. The conjugated linoleic acid (CLA) synthesis method using the pork by-product-derived linoleic acid fraction according to the present invention is simpler than the conventional method of synthesizing CLA using an enzyme, and has great advantages in terms of mass production and stability with time. In addition, it is much more economical and can increase the yield of CLA. In addition, the economic benefits will be significant in that it provides high value-added CLA that is effective in reducing body fat, anticancer activity, increasing immune function, treating atherosclerosis, diabetes, hypertension, etc. by utilizing pork by-products, which are waste by-products. It is expected.

도 1은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물 유래 리놀레산 분획을 이용한 CLA 합성 및 분석 과정을 4단계로 분류하여 나타낸 도면이다.
도 2는 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물(간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장)의 처리 과정을 순서대로 나타낸 도면이다.
도 3은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물의 지방 변패도 분석 과정을 순서대로 나타낸 도면이다.
도 4는 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물의 저장 기간별 지방 변패도 변화를 나타낸 도면이다.
도 5는 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물의 미생물 측정 분석 과정을 순서대로 나타낸 도면이다.
도 6은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물의 미생물 측정 예시를 나타낸 도면이다.
도 7은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물의 저장 기간별 총 균 수 측정 결과를 나타낸 도면이다.
도 8은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물의 저장 기간별 대장균 수 측정 결과를 나타낸 도면이다.
도 9는 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물에서 유용지방을 추출하는 과정을 순서대로 나타낸 도면이다.
도 10은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물에서 추출한 유용지방으로부터 리놀레산(linoleic acid)을 분획하는 과정을 순서대로 나타낸 도면이다.
도 11은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육 부산물로부터 추출한 유용지방에서 분획한 리놀레산을 사용하여 CLA(Conjugated linoleic acid)를 합성하는 과정을 순서대로 나타낸 도면이다.
도 12는 본 발명의 일구현예에 따른 합성된 CLA를 가스 크로마토그래피로 분석하는 과정을 순서대로 나타낸 도면이다.
도 13은 본 발명의 일구현예에 따른 standard CLA(cis-9/trans-11) 함량을 가스 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 14는 본 발명의 일구현예에 따른 standard CLA(trans-10/cis-12) 함량을 가스 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 15는 본 발명의 일구현예에 따른 standard CLA mixture 함량을 가스 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 16은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육의 간에서 추출한 유용지방으로부터 합성한 CLA 함량을 가스 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 17은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육의 허파에서 추출한 유용지방으로부터 합성한 CLA 함량을 가스 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 18은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육의 심장에서 추출한 유용지방으로부터 합성한 CLA 함량을 가스 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 19는 본 발명의 일구현예에 따른 돈육의 위에서 추출한 유용지방으로부터 합성한 CLA 함량을 가스 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 20은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육의 소장에서 추출한 유용지방으로부터 합성한 CLA 함량을 가스 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 21은 본 발명의 일구현예에 따른 돈육의 대장에서 추출한 유용지방으로부터 합성한 CLA 함량을 가스 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.1 is a diagram illustrating the CLA synthesis and analysis process using the pork by-product-derived linoleic acid fraction according to an embodiment of the present invention divided into four stages.
Figure 2 is a view showing in sequence the processing of pork by-products (liver, lungs, heart, stomach, small intestine, large intestine) according to an embodiment of the present invention.
Figure 3 is a view showing the fat decay analysis process of pork by-products in accordance with an embodiment of the present invention in order.
4 is a view showing a change in fat deterioration by storage period of pork by-product according to an embodiment of the present invention.
5 is a view showing the microbial measurement analysis process of the pork by-product according to an embodiment of the present invention in order.
6 is a view showing a microbial measurement example of pork by-products according to an embodiment of the present invention.
7 is a view showing the results of measuring the total number of bacteria by storage period of pork by-product according to an embodiment of the present invention.
8 is a view showing the results of measuring the number of E. coli by storage period of pork by-product according to an embodiment of the present invention.
9 is a view showing a sequence of extracting the useful fat from the pork by-product according to an embodiment of the present invention in order.
FIG. 10 is a view showing a sequence of fractionating linoleic acid from useful fats extracted from pork by-products according to an embodiment of the present invention.
FIG. 11 is a diagram illustrating a process of synthesizing CLA (Conjugated linoleic acid) using linoleic acid fractionated from useful fat extracted from pork by-product according to one embodiment of the present invention.
FIG. 12 is a diagram sequentially illustrating a process of analyzing the synthesized CLA by gas chromatography according to an embodiment of the present invention.
FIG. 13 is a diagram illustrating a result of analyzing standard CLA (cis-9 / trans-11) content using gas chromatography according to one embodiment of the present invention. FIG.
FIG. 14 is a diagram illustrating a result of analyzing standard CLA (trans-10 / cis-12) content according to one embodiment of the present invention using gas chromatography. FIG.
15 is a view showing the results of analyzing the standard CLA mixture content using gas chromatography according to an embodiment of the present invention.
16 is a view showing the results of analyzing the CLA content synthesized from the useful fat extracted from the liver of pork according to an embodiment of the present invention using gas chromatography.
17 is a view showing the results of analyzing the CLA content synthesized from the useful fat extracted from the lungs of pork according to an embodiment of the present invention using gas chromatography.
18 is a view showing the results of analyzing the CLA content synthesized from the useful fat extracted from the heart of pork in accordance with one embodiment of the present invention using gas chromatography.
19 is a view showing the results of analyzing the CLA content synthesized from the useful fat extracted from the stomach of pork according to an embodiment of the present invention using gas chromatography.
20 is a view showing the results of analyzing the CLA content synthesized from the useful fat extracted from the small intestine of pork according to an embodiment of the present invention using gas chromatography.
21 is a view showing the results of analyzing the CLA content synthesized from the useful fat extracted from the large intestine of pork according to an embodiment of the present invention using gas chromatography.

본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.As the invention allows for various changes and numerous embodiments, particular embodiments will be illustrated in the drawings and described in detail in the written description. However, this is not intended to limit the present invention to specific embodiments, it should be understood to include all transformations, equivalents, and substitutes included in the spirit and scope of the present invention. In the following description of the present invention, if it is determined that the detailed description of the related known technology may obscure the gist of the present invention, the detailed description thereof will be omitted.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 (a) 돈육 부산물 유래 유용지방을 추출하는 단계;The present invention (a) extracting useful fat derived from pork by-products;

(b) 상기 (a)에서 추출한 유용지방으로부터 리놀레산을 분획하는 단계; 및(b) fractionating linoleic acid from the useful fat extracted in (a); And

(c) 상기 (b)에서 분획한 리놀레산으로부터 공액 리놀레산을 합성하는 단계; (c) synthesizing conjugated linoleic acid from the linoleic acid fractionated in (b);

를 포함하는, 돈육 부산물 유래 리놀레산 분획을 이용한 공액 리놀레산의 합성 방법을 제공한다.It provides a method for the synthesis of conjugated linoleic acid using a pork by-product-derived linoleic acid fraction comprising a.

본 발명의 일실시예에서는 상기 방법으로 공액 리놀레산을 합성하기 전에 돈육 부산물의 안정성 확인 및 이용 가능한 내장 부산물 선별을 위해 돈육 부산물의 성분 함량 분석 및 저장 품질 분석을 실시하였다. In one embodiment of the present invention, before the synthesis of conjugated linoleic acid by the above method, the component content analysis and storage quality analysis of pork by-products were carried out to confirm the stability of pork by-products and to select available internal by-products.

먼저, 상기 돈육 부산물(간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장)을 부위별로 분할 및 세척하고(실시예 1-1 및 도 2 참조), 상기 돈육 부산물의 성분 함량 확인을 위해 일반 성분 분석(수분, 조단백, 조지방, 회분)을 실시하였다. 일반 성분 분석은 A.O.A.C(1995) 방법에 의해 실시하였으며 그 결과, 수분이 많은 비중(75.15% ~ 83.41%)을 차지하고 있는 것을 확인할 수 있었다. 본 발명에서 사용하고자 하는 조지방의 경우에는 소장, 대장이 가장 많은 함량(11.32%, 9.27%)을 나타냈고, 간, 위, 심장, 허파 (4.82%, 4.68%, 3.65%, 2.34%)순으로 많은 함량이 나타났지만 상대적으로 적은 함량을 포함하였다(실시예 1-2 및 표 1 참조).First, the pork by-products (liver, lungs, heart, stomach, small intestine, large intestine) are divided and washed by portions (see Examples 1-1 and 2), and the general component analysis to check the component content of the pork by-products ( Moisture, crude protein, crude fat, and ash). The general component analysis was conducted by the A.O.A.C (1995) method, and as a result, it was confirmed that the water occupies a large proportion (75.15% ~ 83.41%). In the case of crude fat to be used in the present invention, the small intestine and large intestine showed the highest content (11.32%, 9.27%), and liver, stomach, heart, and lungs (4.82%, 4.68%, 3.65%, 2.34%) in order. A large amount appeared but contained a relatively low content (see Examples 1-2 and Table 1).

또한, 상기 돈육 부산물의 저장 품질 특성을 파악하기 위해 지방 변패도(TBARS)를 측정하였고 그 결과, 모든 부위에서 저장 기간이 경과 할수록 지방 변패도(TBA)가 증가하는 경향을 보였으며 저장 기간이 경과 할수록 간, 위, 심장, 허파, 소장, 대장 순으로 지방 변패가 많이 발생하였다(실시예 2-1 및 도 3 내지 4 참조).In addition, to determine the storage quality characteristics of the pork by-products, the fat stiffness (TBARS) was measured, and as a result, the fat stiffness (TBA) tended to increase with the storage period in all parts, and the storage period was elapsed. Fatty degeneration occurred in order of liver, stomach, heart, lungs, small intestine, and large intestine (see Example 2-1 and FIGS. 3 to 4).

또한, 상기 돈육 부산물의 저장기간 별 미생물 측정 (총균, 대장균, 살모넬라, 리스테리아, 곰팡이)을 실시하였고 그 결과, 저장 기간이 경과 할수록 허파에서 총균이 가장 많이 증가하였고 위, 소장, 간, 심장, 대장 순으로 증가량이 나타났으며, 저장 기간이 경과 할수록 허파에서 대장균이 가장 많이 증가하였고 간, 심장, 위, 소장, 대장 순으로 증가량이 나타났으나, 황색포도상구균, 곰팡이, 살모넬라, 리스테리아 측정 결과 저장 기간이 경과하여도 측정되지 않았다(실시예 2-2 및 도 5 내지 8 참조).In addition, microbial measurements by storage period of the pork by-product (total bacteria, Escherichia coli, Salmonella, Listeria, mold) were performed. As a result, the total bacteria increased in the lungs as the storage period increased, and stomach, small intestine, liver, heart and large intestine. Increasing amounts of E. coli increased in the lung as the storage period increased, and in the order of liver, heart, stomach, small intestine, and large intestine, however, Staphylococcus aureus, mold, Salmonella, and Listeria were measured. It was not measured even after the passage of time (see Example 2-2 and FIGS. 5 to 8).

다음으로, 상기 (a) 내지 (d) 단계로 분류된 CLA의 합성 방법을 사용하여 돈육 부산물로부터 CLA를 합성하였다.Next, CLA was synthesized from pork by-products using the method of synthesizing CLA classified into (a) to (d).

상기 (a) 단계는 돈육 부산물에서 유래하는 유용지방을 파악하고, 공액 리놀레산(CLA) 합성 시 사용할 유용지방을 추출하는 단계이다. 이 때, 상기 돈육 부산물은 돼지의 간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. Step (a) is to identify useful fats derived from pork by-products, and extract useful fats to be used in the synthesis of conjugated linoleic acid (CLA). At this time, the pork by-products may be pig liver, lungs, heart, stomach, small intestine, large intestine, but is not limited thereto.

본 발명의 일실시예에서는 돈육 부산물에 유기용매를 사용하여 녹는 지방을 추출하고, 유기용매를 증발시켜 유용지방을 획득하였다(실시예 3-1 및 도 9 참조).In one embodiment of the present invention, by using an organic solvent in pork by-products to extract the soluble fat, and evaporated the organic solvent to obtain a useful fat (see Example 3-1 and Figure 9).

상기 (b) 단계는 상기 (a) 단계에서 추출한 유용지방으로부터 CLA 순도와 수율을 증가시키기 위한 방안으로 CLA 합성 시 이성질화가 발생하는 linoleic acid를 유용지방으로부터 분획하는 단계이다. 이 때, 상기 linoleic acid는 지방산의 녹는점을 이용하여 분획할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. Linoleic acid는 불포화지방산으로 녹는점이 -5℃이고, 대부분의 포화지방산의 경우 녹는점이 상온(20℃)보다 높기 때문에 0 내지 10℃에 방치할 경우 포화지방산은 고체상태가 되고 불포화지방산은 액체상태가 되어 포화지방산을 제거할 수 있으므로, 상기 (a) 단계에서 추출한 유용지방을 0 내지 10℃에 방치하는 것이 바람직하나, 이에 제한되지는 않는다. 또한, 불포화지방산의 경우 대부분을 차지하는 Myristoleic aicd (14:1), Palmitoleic acid (16:1), Oleic acid (18:1)의 녹는점은 linoleic acid의 녹는점(-5℃)보다 높기 때문에 -4.9 내지 -4.1℃에 방치할 경우 불포화지방산을 최대한 제거하여 액체 상태로 존재하는 고순도의 linoleic acid를 분획할 수 있으므로, 상기 포화지방산을 제거한 유용지방을 -4.9 내지 -4.1℃에 방치하는 것이 바람직하나, 이제 제한되지 않는다.Step (b) is a step to increase the CLA purity and yield from the useful fat extracted in the step (a) is the step of fractionating linoleic acid isomerization occurs from the useful fat in the synthesis of CLA. At this time, the linoleic acid may be fractionated using the melting point of the fatty acid, but is not limited thereto. Linoleic acid is unsaturated fatty acid, its melting point is -5 ℃. For most saturated fatty acids, melting point is higher than room temperature (20 ℃), so when it is left at 0 ~ 10 ℃, saturated fatty acid becomes solid state and unsaturated fatty acid becomes liquid state. Since it is possible to remove the saturated fatty acid, it is preferable to leave the useful fat extracted in the step (a) at 0 to 10 ℃, but is not limited thereto. Also, the melting point of Myristoleic aicd (14: 1), Palmitoleic acid (16: 1), and Oleic acid (18: 1), which occupy most of unsaturated fatty acids, is higher than that of linoleic acid (-5 ℃). If left at 4.9 to -4.1 ℃ can remove the high purity linoleic acid in the liquid state by removing the unsaturated fatty acid as much as possible, it is preferable to leave the useful fat to remove the saturated fatty acid at -4.9 to -4.1 ℃ , Now it is not limited.

본 발명의 일실시예에서는 돈육 부산물에서 추출한 유용지방에서 냉장 온도(4℃)에서 고체가 되는 포화지방산을 제거하고, 상기 포화지방산이 제거된 유용지방을 -4.5℃에 방치하여 고체가 되는 불포화지방산을 제거하고 액체 상태로 존재하는 고순도의 linoleic acid를 분획하였다(실시예 3-2 및 도 10 참조).In an embodiment of the present invention, the saturated fatty acid which becomes a solid at a refrigeration temperature (4 ° C.) is removed from the useful fat extracted from pork by-products, and the unsaturated fatty acid which becomes a solid by leaving the useful fat from which the saturated fatty acid is removed at −4.5 ° C. And linoleic acid of high purity present in the liquid state was fractionated (see Example 3-2 and FIG. 10).

상기 (c) 단계는 상기 (b) 단계에서 분획한 고순도의 linoleic acid를 사용하여 고온에서 알칼리 이성질체화 반응을 통해 CLA를 합성하는 단계이다. 이 때, 상기 알칼리 이성질체화 반응은 100 내지 250℃, 바람직하게는 150 내지 200℃에서 수행될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.Step (c) is a step of synthesizing CLA through alkali isomerization at high temperature using linoleic acid of high purity fractionated in step (b). At this time, the alkali isomerization reaction may be performed at 100 to 250 ° C, preferably 150 to 200 ° C, but is not limited thereto.

본 발명의 일실시예에서는 돈육 부산물로부터 추출한 유용지방에서 분획한 linoleic acid를 180℃에서 KOH를 사용해 알칼리 이성질체화 반응을 시켜 CLA를 합성하고 회수하였다(실시예 3-3 및 도 11 참조).In one embodiment of the present invention, the linoleic acid fractionated from the useful fat extracted from pork by-products was subjected to an alkali isomerization reaction using KOH at 180 ° C. to synthesize and recover CLA (see Example 3-3 and FIG. 11).

또한, 본 발명의 일실시예에서는 상기 (c) 단계에서 합성한 CLA의 합성 여부와 수율을 파악하기 위해 CLA 중에서도 가장 많이 존재하는 것으로 알려진 cis-9/trans-11, trans-10/cis-12, 및 CLA mixture를 standard로 설정하여 합성한 CLA 물질과 gas chromatograph로 비교 분석하였다. 그 결과, 돈육 부산물 유래 CLA 합성 물질의 linoleic acid 함량이 감소하고, CLA 함량이 증가한 것으로 나타났고, 이를 상기 CLA standard와 비교 분석하여 합성된 물질이 CLA임을 확인하였다(실시예 4 및 도 12 내지 21 참조). In addition, in one embodiment of the present invention cis-9 / trans-11, trans-10 / cis-12 is known to be the most present among the CLA to determine the synthesis and yield of the CLA synthesized in step (c) , And CLA mixtures were set to standard and compared with the synthesized CLA material by gas chromatograph. As a result, the linoleic acid content of the pork by-product-derived CLA synthetic material was decreased, and the CLA content was increased, and it was confirmed that the synthesized material was CLA by comparing with the CLA standard (Example 4 and FIGS. 12 to 21). Reference).

이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 첨부도면을 참조하여 상세히 설명하기로 한다. 다만, 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다 할 것이다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. However, these Examples are only for illustrating the present invention, and the scope of the present invention will not be construed as being limited by these Examples.

실시예1Example 1 . 돈육 부산물 시료의 준비 및 일반 성분 분석. Preparation and General Component Analysis of Pork By-Product Samples

1-1. 1-1. CLACLA 합성과 분석을 위한 돈육 부산물의 처리  Treatment of Pork By-Products for Synthesis and Analysis

CLA 합성과 분석을 위한 시료는 국내에서 정상 유통되고 있는 당일 도축된 일반적인 돼지 도축 부산물을 사용하였다. 돼지 도축 부산물은 돼지의 간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장을 사용하였으며 도축장에서 받아온 부산물을 부위별로 분할 과정을 실시하였고, 부위별로 세척 과정을 실시하였다. 상기 과정은 도 2에 순서대로 나타내었으며, 이 때 처리하는 장소의 온도를 10℃ 내외로 유지하였고, 세척 과정을 마친 부산물은 부위별로 갈아 소분하여 냉동 저장하였다. Samples for CLA synthesis and analysis were used for the day-to-day common pig slaughter by-products that are normally distributed in Korea. Pig slaughter by-products were made using pig liver, lungs, heart, stomach, small intestine, and large intestine. The by-products received from the slaughterhouse were divided into parts and washed by parts. The process is shown in order in Figure 2, at this time the temperature of the treatment place was maintained at about 10 ℃, the by-products after the cleaning process by subdividing by part and stored frozen.

1-2. 돈육 부산물 성분 함량 파악을 위한 일반 성분 분석1-2. General Component Analysis for Determination of Pork By-Product Components

시료는 상기 실시예 1-1에서 처리한 돈육 부산물을 사용하였으며, 일반 성분 분석은 A.O.A.C(1995) 방법에 의해 진행하였다.The sample used the pork by-product treated in Example 1-1, the general component analysis was carried out by the A.O.A.C (1995) method.

수분 측정은 먼저 drying oven에서 건조시킨 crucible의 무게를 측정하였다. 일정량의 시료를 1~2g 정도 정확히 취하여 crucible에 담았다. Drying oven에서 105℃로 3시간 건조로 수분을 제거한 후 다시 무게를 측정하여 전과 후 무게의 차이를 수분 함량으로 산출하였다. Moisture determination was first made by weighing the crucibles dried in a drying oven. A certain amount of sample was accurately taken in 1-2g and placed in crucible. After removing water by drying at 105 ° C. for 3 hours in a drying oven, the weight was measured again, and the difference in weight before and after was calculated as the moisture content.

Figure 112018014192741-pat00001
Figure 112018014192741-pat00001

조지방 측정은 Folch 등의 방법을 이용하여 측정하였다. 시료 2g을 50㎖ test tube에 넣고 Folch 시약 (Chloroform : Methanol = 2:1)을 20㎖ 혼합 후 14,000 rpm으로 10초간 균질화 후 냉장 온도(4℃)에서 3시간 방치하였다. 30분마다 시료 혼합액을 섞어주었다. 방치 후 filter paper를 통해 messcylinder에 여과하였다. 여과액의 25%에 해당하는 0.88% NaCl을 혼합하여 messcylinder의 뚜껑을 덮은 후 24시간 냉장 온도(4℃)에서 층 분리가 일어나게 하였다. 층 분리 후 messcylinder의 눈금으로 하층의 양을 소수점 둘째자리까지 읽고 기록하였다. 층 분리가 끝난 시료는 aspirator를 이용하여 상층을 제거하고, 하층 5㎖을 취하여 이미 무게를 알고 있는 dish에 넣고 완전히 건조시켰다. 완전히 건조가 된 후 dish의 무게를 측정하였다. Crude fat was measured using the method of Folch et al. 2 g of the sample was placed in a 50 ml test tube, and 20 ml of Folch reagent (Chloroform: Methanol = 2: 1) was mixed, homogenized at 14,000 rpm for 10 seconds, and left at refrigeration temperature (4 ° C.) for 3 hours. The sample mixture was mixed every 30 minutes. After standing it was filtered through a filter paper to messcylinder. 0.88% NaCl corresponding to 25% of the filtrate was mixed to cover the messcylinder and allowed to separate at 24 ° C. (4 ° C.) for 24 hours. After separating the layers, the amount of the lower layer was read and recorded to the second decimal place with the scale of the messcylinder. After separating the layers, the upper layer was removed by using an aspirator, and 5 ml of the lower layer was taken and placed in a dish of known weight, and dried completely. After drying completely, the weight of the dish was measured.

Figure 112018014192741-pat00002
Figure 112018014192741-pat00002

조단백 측정은 질소의 양을 측정하여 단백질 계수를 곱하는 Kjeldahl 방법을 사용하여 산출하였다. 1g의 시료를 황산지로 싼 후 Kjeldahl flask에 넣은 후 1~2g 분해촉진제와 비등석을 넣고, H2SO4 20㎖을 넣어 1시간 정도 가열하였다. 시료를 식힌 후 증류수 250㎖을 넣었다. 4% Boric acid와 NaOH 55ml을 넣고 증류시켰다. 액화된 암모니아를 0.1N HCl을 통해 적정하였다.Crude protein measurements were calculated using the Kjeldahl method, which measures the amount of nitrogen and multiplies the protein count. 1 g of the sample was wrapped in sulfate paper, placed in a Kjeldahl flask, 1 to 2 g of decomposition accelerator and boiling stone were added, and 20 ml of H 2 SO 4 was added and heated for about 1 hour. After cooling the sample, 250 ml of distilled water was added. 4% Boric acid and 55ml NaOH were added and distilled. Liquefied ammonia was titrated through 0.1N HCl.

Figure 112018014192741-pat00003
Figure 112018014192741-pat00003

회분 측정은 먼저 drying oven에서 건조시킨 crucible의 무게를 측정하였다. 일정량의 시료를 1~2g 정도 정확히 취하여 crucible에 담았다. 회화기에서 550℃로 4시간 이상 회화시켰다. 회화 후 무게를 측정하여 전과 후 무게의 차이를 수분 함량으로 산출하였다. The batch measurement first weighed the crucibles dried in a drying oven. A certain amount of sample was accurately taken in 1-2g and placed in crucible. The incubator was incubated at 550 ° C. for at least 4 hours. The weight difference after incineration was measured to calculate the difference between the weight before and after.

Figure 112018014192741-pat00004
Figure 112018014192741-pat00004

일반 성분 분석 결과 표 1에 나타낸 바와 같이 수분이 많은 비중(75.15% ~ 83.41%)을 차지하고 있는 것을 확인할 수 있었다. 본 발명에서 사용하고자 하는 조지방의 경우에는 소장, 대장이 가장 많은 함량(11.32%, 9.27%)을 나타냈고, 간, 위, 심장, 허파 (4.82%, 4.68%, 3.65%, 2.34%)순으로 많은 함량이 나타났지만 상대적으로 적은 함량을 포함하였다. As a result of the general component analysis, it was confirmed that the water occupies a specific gravity (75.15% ~ 83.41%) as shown in Table 1. In the case of crude fat to be used in the present invention, the small intestine and large intestine showed the highest content (11.32%, 9.27%), and liver, stomach, heart, and lungs (4.82%, 4.68%, 3.65%, 2.34%) in order. A large amount appeared but contained a relatively low content.

수분(%) moisture(%) 조지방(%)Crude fat (%) 조단백(%)Crude Protein (%) 회분(%)Ash content (%) 간liver 75.1575.15 4.824.82 18.9518.95 1.081.08 허파lights 82.1382.13 2.342.34 14.2814.28 1.251.25 심장Heart 79.2279.22 3.653.65 16.2016.20 0.930.93 위top 81.8081.80 4.684.68 12.7812.78 0.740.74 소장Intestine 78.2978.29 11.3211.32 9.489.48 0.910.91 대장Leader 83.4183.41 9.279.27 6.986.98 0.340.34

실시예Example 2. 돈육 부산물의 저장 품질 특성 파악을 위한 분석 2. Analysis of Storage Quality Characteristics of Pork By-Products

2-1. 돈육 부산물의 저장 기간별 지방 2-1. Fat by Storage Period of Pork By-Products 변패도Decay 분석 analysis

돈육 부산물을 얼마동안 저장이 가능한지 파악하기 위해 상기 실시예 1-1에서 세척한 돈육 부산물을 냉장 온도(4℃)에서 저장하였고, 저장 기간 별로 시료를 채취하여 지방 변패도 분석을 실시하였다.The pork by-products washed in Example 1-1 were stored at a refrigeration temperature (4 ° C.) in order to determine how long the pork by-products can be stored, and samples were collected for each storage period to analyze fat decay.

지방 변패도 측정은 저장 기간 별로 채취한 시료 5g을 50㎖ tube에 넣고, 50㎕ BHT와 15㎖ 증류수를 혼합하였다. 혼합 용액은 15~30초간 7,500 rpm에서 30초간 균질화 하였다. 균질화한 시료에서 1㎖을 취하여 15㎖ tube에 넣고 TBA/TCA 혼합 용액(TBA 2.883g/100㎖ + TCA 150g/750㎖) 2㎖을 넣어 교반기로 완전히 섞었다. 혼합액을 90℃에서 15분간 가열한 후 차가운 물에 완전히 냉각시킨 후 냉각한 시료를 3,000 rpm에서 5분간 원심분리 하였다. 원심분리 후 상층액을 회수하여 분광광도계를 이용하여 531nm로 흡광도를 측정하여 분석하였다. 상기 과정은 도 3에 순서대로 나타내었다. To measure the fat rot, 5 g of the sample collected for each storage period was put in a 50 ml tube, and 50 µl BHT and 15 ml distilled water were mixed. The mixed solution was homogenized for 30 seconds at 7,500 rpm for 15-30 seconds. 1 ml of the homogenized sample was taken and placed in a 15 ml tube. 2 ml of a TBA / TCA mixed solution (TBA 2.883g / 100ml + TCA 150g / 750ml) was added and mixed thoroughly with a stirrer. After the mixed solution was heated at 90 ° C. for 15 minutes, it was completely cooled in cold water, and the cooled sample was centrifuged at 3,000 rpm for 5 minutes. After centrifugation, the supernatant was collected and analyzed by measuring the absorbance at 531 nm using a spectrophotometer. The process is shown in order in FIG.

그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이 모든 부위에서 저장 기간이 경과 할수록 지방 변패도(TBA)가 증가하는 경향을 보였다. 0일차 지방 변패도 측정 결과 0.09(malonaldehyde/kg) ~ 0.22 (malonaldehyde/kg)로 측정되었으며 허파에서 가장 많은 지방 변패가 나타났고, 심장에서 가장 적은 지방 변패가 나타났다. 12일차 지방 변패도 측정 결과 0.15(malonaldehyde/kg) ~ 0.44(malonaldehyde/kg)로 측정되었으며 간에서 가장 많은 지방 변패가 나타났고, 대장에서 가장 적은 지방 변패가 나타났다. 저장 기간이 경과 할수록 간, 위, 심장, 허파, 소장, 대장 순으로 지방 변패가 많이 발생하였다. 적내장이 백내장보다 지방 변패가 활발하게 발생하였고, 저장 기간이 경과 할수록 지방 변패의 정도가 증가하는 특이점이 나타났다. 따라서, 도축 후 부산물 처리 과정에 있어서 적내장이 백내장보다 먼저 처리하는 것이 효율적이고, 이른 시간 안에 처리하는 것이 옳다고 평가되었다.  As a result, as shown in FIG. 4, the fat stiffness (TBA) tended to increase as the storage period elapsed at all sites. Day 0 fat loss was measured from 0.09 (malonaldehyde / kg) to 0.22 (malonaldehyde / kg), with the most fat loss in the lungs and the least fat loss in the heart. Day 12 fat stiffness was measured from 0.15 (malonaldehyde / kg) to 0.44 (malonaldehyde / kg) and showed the most fat loss in the liver and the least fat loss in the large intestine. As the storage period elapsed, fat loss occurred in the order of liver, stomach, heart, lung, small intestine, and large intestine. Fatty degeneration was more active in cataracts than cataracts, and the extent of fat degeneration increased with storage period. Therefore, it was evaluated that it is efficient to treat cataracts before cataracts in the by-product treatment process after slaughter, and to treat them within an early time.

지방 변패도를 기준으로 낮은 온도 (4℃)에서는 약 2주 동안 저장이 가능한 것으로 나타났다. 유용 지방의 경우 부산물 전체 저장 기간보다 더 짧은 저장 기간을 보였다. 따라서, CLA 합성을 위한 유용 지방 추출 시 도축 후 부산물 처리 과정을 7일 이내에 실시하는 것이 옳다고 평가되었다. At low temperatures (4 ° C) based on fat decay, storage was possible for about two weeks. Useful fats have a shorter shelf life than the byproducts. Therefore, it was evaluated that it is correct to perform the by-product treatment process within 7 days after slaughter when extracting useful fat for CLA synthesis.

2-2. 돈육 부산물의 저장 기간별 미생물 측정 및 분석2-2. Microbial Measurement and Analysis by Storage Period of Pork By-Products

돈육 부산물을 얼마동안 저장이 가능한지 파악하기 위해 상기 실시예 1-1에서 세척한 돈육 부산물을 냉장 온도(4℃)에서 저장하였고, 저장 기간 별로 시료를 채취하여 미생물 측정 및 분석을 실시하였다.The pork by-products washed in Example 1-1 were stored at a refrigeration temperature (4 ° C.) in order to determine how long the pork by-products can be stored, and samples were taken for each storage period to measure and analyze microorganisms.

미생물 분석 항목은 총균, 대장균, 살모넬라, 리스테리아, 및 곰팡이를 측정하였으며, 균질화한 후 시료 희석에는 0.85% NaCl을 사용하여 10-1~10-6으로 희석하여 도 6에 나타낸 바와 같이 각각 미생물 별 측정 film 배지 (총균, 대장균, 황색포도상구균. 곰팡이 사용), plate 배지 (살모넬라, 리스테리아 사용)에 1㎖씩 배양하여 측정하였다. 총균, 대장균, 황색포도상구균, 살모넬라, 리스테리아는 37℃ incubator에서 배양하였고, 곰팡이는 25 incubator에서 배양하였다. 상기 과정은 도 5에 순서대로 나타내었다.For microbial analysis items, total bacteria, E. coli, Salmonella, Listeria, and mold were measured. After homogenization, the samples were diluted to 10 -1 to 10 -6 using 0.85% NaCl for dilution of the sample, and as shown in FIG. It was measured by incubating 1 ml in film medium (total bacteria, E. coli, Staphylococcus aureus, mold) and plate medium (Salmonella, Listeria). Total bacteria, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella and Listeria were cultured in a 37 ° C incubator, and fungi were incubated in a 25 incubator. The process is shown in order in FIG.

총균 (Total Plate Count) 측정 결과 도 7에 나타낸 바와 같이 저장 기간이 경과 할수록 전체적으로 증가하는 경향을 보였다. 0일차 총균 측정 결과 2.15(Log CFU/g) ~ 3.47 (Log CFU/g)로 나타났고 대장에서 가장 많은 총균이 검출되었다. 12일차 총균 측정 결과 5.10(Log CFU/g) ~ 6.23(Log CFU/g)로 나타났고 위에서 가장 많은 총균이 검출되었다. 저장 기간이 경과 할수록 허파에서 총균이 가장 많이 증가하였고 위, 소장, 간, 심장, 대장 순으로 증가량이 나타났다. 오랜 시간이 지날수록 총균이 증가하는 속도가 증가하는 것으로 나타났다. 때문에 도축 후 부산물 처리 과정에 있어서 이른 시간 안에 처리하는 것이 옳다고 평가되었다. As a result of measuring the total plate count, as shown in FIG. 7, the total plate count increased as the storage period elapsed. Day 0 total bacterial counts ranged from 2.15 (Log CFU / g) to 3.47 (Log CFU / g). Day 12 total bacterial counts ranged from 5.10 (Log CFU / g) to 6.23 (Log CFU / g). As storage period elapsed, total bacteria in lungs increased most, followed by stomach, small intestine, liver, heart, and large intestine. Over time, the rate at which total bacteria increase increases. For this reason, it was judged that it is correct to treat the by-product in the early time after the slaughter.

대장균 (Violet Red Bile for enterobacteriae) 측정 결과 도 8에 나타낸 바와저장 같이 시간이 경과 할수록 증가하는 경향을 보였다. 0일차 대장균 측정 결과 0(Log CFU/g) ~ 2.37(Log CFU/g)로 나타났고 대장에서 가장 많은 대장균이 검출되었다. 15일차 대장균 측정 결과 1.33(Log CFU/g) ~ 2.75(Log CFU/g)로 나타났고 허파에서 가장 많은 대장균이 검출되었다. 저장 기간이 경과 할수록 허파에서 대장균이 가장 많이 증가하였고 간, 심장, 위, 소장, 대장 순으로 증가량이 나타났다. 적내장이 백내장보다 초기 대장균은 적지만 시간이 경과할수록 대장균이 증가하는 특이점이 나타났다. 따라서, 도축 후 부산물 처리 과정에 있어서 적내장이 백내장보다 먼저 처리하는 것이 효율적이고, 이른 시간 안에 처리하는 것이 옳다고 평가되었다. As a result of the measurement of E. coli (Violet Red Bile for enterobacteriae) showed a tendency to increase with time as shown in FIG. Day 0 E. coli measurement results ranged from 0 (Log CFU / g) to 2.37 (Log CFU / g), the largest number of E. coli was detected in the colon. The results of E. coli measurement on Day 15 ranged from 1.33 (Log CFU / g) to 2.75 (Log CFU / g). As the storage period elapsed, Escherichia coli increased the most in lung, followed by liver, heart, stomach, small intestine, and large intestine. Although early stage E. coli is less than cataract, the specificity of E. coli increased as time goes by. Therefore, it was evaluated that it is efficient to treat cataracts before cataracts in the by-product treatment process after slaughter, and to treat them within an early time.

황색포도상구균, 곰팡이, 살모넬라, 리스테리아 측정 결과 저장 기간이 경과하여도 측정되지 않았다. 총균, 대장균의 경우에도 증가하는 속도가 지연되었지만 낮은 온도 (4℃)에서도 약 2주 밖에 저장할 수 없는 것으로 나타났다. Staphylococcus aureus, mold, salmonella, and Listeria were not measured even after the storage period. In the case of total and E. coli, the rate of increase was delayed, but it could only be stored for about 2 weeks at low temperature (4 ℃).

실시예Example 3. 돈육 부산물로부터의  3. From Pork By-Products 공액Conjugate 리놀레산( Linoleic acid ( CLACLA ) 합성) synthesis

3-1. 돈육 부산물 유래 유용지방 추출3-1. Extraction of useful fats derived from pork by-products

상기 실시예 1-1에서 처리한 돈육 부산물(간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장) 각각을 추출이 용이하게 분쇄기로 잘게 분쇄시킨 후 Folch 시약 (Chloroform : Methanol = 2:1)을 시료의 6배 첨가하였다. 시료와 시약을 혼합한 후 균질화하여 냉장 온도(4℃)에서 3시간 방치하였다. 30분마다 시료 혼합액을 섞어주었다. 방치 후 filter paper를 통해 필터링을 실시한 후 용액의 0.88% NaCl 200㎖을 혼합하여 24시간 동안 냉장 온도(4℃)에서 층분리가 일어나게 하였다. 방치 후 상층액을 제거하고 하층액을 건조시켜 유용지방을 추출하였다. 추출된 유용지방은 냉장 온도(4℃)에서 보관하였다. 상기 과정은 도 9에 나타내었다.Each of the pork by-products (liver, lung, heart, stomach, small intestine, and large intestine) treated in Example 1-1 were finely ground with a grinder for easy extraction, and then a Folch reagent (Chloroform: Methanol = 2: 1) 6 times addition. After mixing the sample and the reagent, it was homogenized and left for 3 hours at the refrigeration temperature (4 ℃). The sample mixture was mixed every 30 minutes. After standing, the filter was filtered through a filter paper, and 200 ml of 0.88% NaCl solution was mixed to allow layer separation at a refrigeration temperature (4 ° C.) for 24 hours. After standing, the supernatant was removed and the lower layer was dried to extract useful fat. The extracted useful fats were stored at refrigeration temperature (4 ℃). The process is shown in FIG.

또한, 선택적 방안으로, 상기 1-1에서 처리한 돈육 부산물(간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장)에 혈액을 넣고 섞은 후 갈아서 만든 액체를 가만히 두어 지방층이 분리되도록 한 후, 상층의 지방층을 떠내는 과정을 수회 반복함으로써 유용지방을 분리할 수도 있다.In addition, as an optional method, the blood by-products (liver, lungs, heart, stomach, small intestine, large intestine) treated in 1-1 above, mixed with a mixture of blood and leave the liquid layer to separate the fat layer, the fat layer of the upper layer You can also separate the useful fat by repeating the process several times.

3-2. 리놀레산(3-2. Linoleic acid ( LinoleicLinoleic acid) 분획 acid) fraction

CLA 합성 순도와 수율을 증가시키기 위해 상기 실시예 3-1에서 돈육 부산물(간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장) 각각으로부터 추출한 유용지방으로부터 CLA의 전구물질인 linoleic acid 분획을 실시하였으며, 이 때 지방산의 물리적인 특성인 녹는점을 이용하여 간단히 분획하는 방법을 사용하였다. Linoleic acid는 불포화지방산으로 녹는점이 -5℃이며, 대부분의 포화지방산의 경우 녹는점이 상온(20℃)보다 높기 때문에 냉장 온도(4℃)에서 방치할 경우 고체상태가 되고, 불포화지방산은 액체상태가 된다. 원심분리를 통해 고체상의 포화지방산과 액체상의 불포화지방산을 분리하여 포화지방산을 제거하였다. 또한, 불포화지방산의 경우 대부분을 차지하는 Myristoleic aicd (14:1), Palmitoleic acid (16:1), Oleic acid (18:1)의 녹는점은 linoleic acid의 녹는점(-5℃)보다 높기 때문에 상기 포화지방산을 제거한 유용지방을 -4.5℃에 방치하여 포화지방산을 제거하는 방법과 동일하게 불포화지방산을 최대한 제거하여 액체 상태로 존재하는 고순도의 linoleic acid를 분획하였다. 상기 과정은 도 10에 순서대로 나타내었다.In order to increase the purity and yield of CLA synthesis, in Example 3-1, linoleic acid fraction, a precursor of CLA, was performed from useful fats extracted from each of pork by-products (liver, lung, heart, stomach, small intestine, and large intestine). In this case, a simple fractionation method using a melting point, which is a physical property of fatty acids, was used. Linoleic acid is unsaturated fatty acid and its melting point is -5 ℃. For most saturated fatty acids, the melting point is higher than room temperature (20 ℃), so it becomes solid when left at refrigeration temperature (4 ℃). do. Saturated fatty acids and solid unsaturated fatty acids were separated by centrifugation to remove saturated fatty acids. In addition, the melting point of Myristoleic aicd (14: 1), Palmitoleic acid (16: 1), and Oleic acid (18: 1), which accounts for most of unsaturated fatty acids, is higher than that of linoleic acid (-5 ° C). In the same way as the method of removing saturated fatty acids by leaving the useful fats from which saturated fatty acids were removed at -4.5 ° C, the highly purified linoleic acid was fractionated by removing the unsaturated fatty acids as much as possible. The process is shown in order in FIG.

3-3. 3-3. 공액Conjugate 리놀레산( Linoleic acid ( CLACLA ) 합성) synthesis

상기 실시예 3-2에서 분획한 linoleic acid를 180℃ 이상 가열하여 이성질화를 해야 하기 때문에 propylene glycol을 사용하여 고온에서의 안정성을 확보하였다. Propylene glycol을 round flask에 넣고 질소 주입관과 냉각관, 온도계를 flask에 연결하였다. 작은 방울이 생기도록 질소를 계속해서 주입하였다. Flask를 heating mentle에 넣고 180℃까지 가열하여 10분간 유지시킨 후 160℃로 식혀주고, 26g의 KOH를 첨가하였다. 다시 온도를 180℃까지 가열하여 10분간 유지시켰다. 상기 실시예 3-2에서 돈육 부산물(간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장)에서 각각 추출한 유용지방으로부터 분획한 linoleic acid를 5g씩 넣고 180℃에서 2시간 반응시켰다. 반응 후 실온으로 온도를 식힌 후 methanol (HPLC grade) 200㎖을 첨가하였다. Separatory funnel로 옮긴 후 6N HCl을 넣고 여러 번 혼합하였다. 추가적으로 hexane, 증류수 200㎖을 넣고 잘 섞어준 후 층분리가 일어나게 하였다. 층분리 후 아래층을 흘려버린 후 상층액에 Na2SO4를 넣어 수분을 제거하고, 진공농축기를 통해 hexane을 제거하여 합성된 CLA를 회수하였다. 상기 과정은 도 11에 순서대로 나타내었다.Since linoleic acid fractionated in Example 3-2 should be isomerized by heating at least 180 ° C., propylene glycol was used to ensure stability at high temperature. Propylene glycol was added to a round flask, and a nitrogen inlet tube, a cooling tube, and a thermometer were connected to the flask. Nitrogen was continuously injected to produce a small drop. The flask was placed in a heating mentle and heated to 180 ° C. for 10 minutes, cooled to 160 ° C., and 26 g of KOH was added thereto. The temperature was again heated to 180 ° C. and maintained for 10 minutes. In Example 3-2, 5 g of linoleic acid fractionated from useful fats extracted from pork by-products (liver, lung, heart, stomach, small intestine, and large intestine) were added and reacted at 180 ° C. for 2 hours. After the reaction was cooled to room temperature, 200ml of methanol (HPLC grade) was added. After transferring to Separatory funnel, 6N HCl was added and mixed several times. Additional hexane and 200ml of distilled water were added and mixed well to separate the layers. After separating the layers, the lower layer was poured and Na 2 SO 4 was added to the supernatant to remove water, and hexane was removed through a vacuum concentrator to recover the synthesized CLA. The procedure is shown in order in FIG.

실시예Example 4. Gas chromatograph를 통한  4. Through gas chromatograph CLACLA 분석 analysis

각각의 돈육 부산물(간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장)로부터 추출한 유용지방에서 분획한 linoleic acid를 사용하여 합성한 CLA에 chloroform으로 용해시킨 후 0.5N NaOH 1㎖을 첨가한 후 90℃에서 10분간 가열하였다. 가열 후 실내 온도로 식힌 후 Boron Trifloride Methanol solution 1㎖을 첨가한 후 90℃에서 10분간 가열하였다. 가열 후 hexane 3㎖와 3차 증류수 8㎖를 첨가하여 섞은 후 3000 rpm에서 10분 동안 원심분리 하였다. 원심분리가 끝난 시료의 상층부를 약 1ml정도를 회수한 후 Na2SO4 한 스푼을 넣어 수분을 제거하였다. 수분 제거 후 vial로 회수하여 GC(gas chromatograph) 분석을 실시하였다. 상기 과정은 도 12에 나타내었으며, 이 때 GC 조건은 표 2와 같다. After dissolving with chloroform in CLA synthesized using linoleic acid fractionated from useful fats extracted from each pork by-product (liver, lung, heart, stomach, small intestine and large intestine), 1 ml of 0.5N NaOH was added, and then at 90 ° C. Heated for 10 minutes. After heating, the mixture was cooled to room temperature and 1 ml of Boron Trifloride Methanol solution was added thereto, followed by heating at 90 ° C. for 10 minutes. After heating, 3 ml of hexane and 8 ml of tertiary distilled water were added and mixed, followed by centrifugation at 3000 rpm for 10 minutes. After recovering approximately 1ml of the upper layer of the sample after centrifugation, Na 2 SO 4 A tablespoon was added to remove moisture. After removal of water, the cells were recovered into a vial and subjected to gas chromatograph (GC) analysis. The process is shown in Figure 12, wherein the GC conditions are shown in Table 2.

ItemsItems ConditionsConditions InstrumentInstrument Hewlett Packard 6890 Gas chromatographyHewlett Packard 6890 Gas chromatography colummcolumm Supelcowax 10 fused silica capillary
columm 60 m×0.32 i.dSupelcowax 10 fused silica capillary
columm 60 m × 0.32 id DetectorDetector Flame ionization detector(FID)Flame ionization detector (FID) Initial temperatureInitial temperature 50℃50 ℃ Initial timeInitial time 1 min1 min Final temperatureFinal temperature 200℃200 ℃ Final timeFinal time 40 min40 min Injector temperatureInjector temperature 250℃250 ℃ Detector temperatureDetector temperature 250℃250 ℃ Oven temperatureOven temperature 180℃(6min hold)→5℃/min climb,
220℃(2min hold)→2℃/min climb,
240℃(20min hold)180 ℃ (6min hold) → 5 ℃ / min climb,
220 ℃ (2min hold) → 2 ℃ / min climb,
240 ℃ (20min hold) Carrier gasCarrier gas N2 N 2 Split ratioSplit ratio 10:110: 1

또한, CLA 중에서도 가장 많이 존재하는 것으로 알려진 cis-9/trans-11, trans-10/cis-12, 및 CLA mixture를 standard로 설정하여, 상기 합성한 CLA 물질과 gas chromatograph를 이용해 비교 분석하기 위하여 상기와 동일한 방법으로 GC 분석을 실시하였다. In addition, cis -9 / trans -11, trans -10 / cis -12, and CLA mixture, which are known to be present most frequently among CLA, are set as standard, and the above-mentioned compounds can be compared and analyzed using the synthesized CLA material and gas chromatograph. GC analysis was performed in the same manner as.

돈육 부산물(간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장) 유래 유용 지방을 사용한 각각의 CLA 합성 물질의 GC 분석 결과를 도 16 내지 21에 나타내었으며 그 결과, linoleic acid의 함량이 감소하고, CLA 함량이 증가한 것으로 나타났다. 이를 도 13 내지 15에 나타낸 CLA standard와 비교 분석하여 합성된 물질이 CLA임을 확인 하였다. The results of GC analysis of each CLA synthetic substance using useful fats derived from pork by-products (liver, lung, heart, stomach, small intestine, and large intestine) are shown in FIGS. 16 to 21. As a result, the content of linoleic acid was decreased, It appeared to have increased. This was compared with the CLA standard shown in FIGS. 13 to 15 to confirm that the synthesized material was CLA.

CLA 합성 결과, 표 3에 나타낸 바와 같이 linocleic acid 100g 기준으로 대장을 사용하였을 때 60.02g으로 가장 많은 CLA를 합성하였다. 그 다음으로는 허파(56.73g), 소장(50.07g), 간(25.17g), 위(20.18g), 심장(8.05g) 순으로 CLA 합성량이 많았으며, 전체 부산물을 혼합하여 CLA를 합성했을 경우 36.70g의 CLA를 합성하였다. As shown in Table 3, when the large intestine was used as the basis for linocleic acid 100g, the most CLA was synthesized as 60.02g. Next, CLA was synthesized in the order of lungs (56.73g), small intestine (50.07g), liver (25.17g), stomach (20.18g), and heart (8.05g), and CLA was synthesized by mixing the whole by-products. Case 36.70 g of CLA was synthesized.

간liver 허파lights 심장Heart 위top 소장Intestine 대장Leader 혼합1 Mixed 1 부산물 100g 기준 CLA 합성량 (g)
CLA Synthesis Amount by 100g by Product (g)
0.150.15 0.080.08 0.040.04 0.070.07 0.400.40 0.530.53 0.210.21 조지방 100g 기준 CLA 합성량 (g)
CLA compound amount based on crude fat 100g (g)
3.113.11 3.433.43 1.211.21 1.581.58 3.523.52 5.715.71 3.093.09 지방산 100g 기준 CLA 합성량 (g)
CLA Synthesis Amount Based on 100g Fatty Acid (g)
3.773.77 4.174.17 1.431.43 1.611.61 3.663.66 5.815.81 3.413.41 불포화 지방산 100g기준 CLA 합성량 (g)
CLA synthesis amount based on 100 g of unsaturated fatty acid (g)
8.958.95 11.9111.91 2.262.26 3.323.32 8.018.01 11.7111.71 7.697.69 Linoleic acid 100g 기준 CLA 합성량 (g)
CLA Synthesis Amount Based on 100g of Linoleic Acid (g)
25.1725.17 56.7356.73 8.058.05 20.1820.18 50.0750.07 60.0260.02 36.7036.70

혼합1 : 돈육 부산물(간, 허파, 심장, 위, 소장, 대장)을 혼합하여 처리Blend 1 : Mix and process pork by-products (liver, lung, heart, stomach, small intestine, large intestine)

또한, 분획물 별 CLA 합성 전/후의 지방산 함유량 및 CLA 합성량을 측정한 결과를 표 4에 나타내었다. 현재 상용화된 CLA를 합성하고 있는 홍화씨의 경우 CLA를 40.78g 합성하였다. 조지방의 경우 2.40g이 합성되었고, 포화지방과 불포화지방을 분획하여 CLA를 합성한 결과 포화지방은 7.23g이 합성되었고, 불포화지방은 28.77g이 합성되어 불포화지방산을 분획 후 CLA를 합성하였을 때 CLA 합성량이 월등히 증가하는 것으로 나타났다. In addition, the results of measuring the fatty acid content and the amount of CLA synthesis before and after CLA synthesis for each fraction are shown in Table 4. In the case of safflower seed, which is currently synthesizing commercially available CLA, 40.78 g of CLA was synthesized. 2.40 g of crude fat was synthesized, and CLA was synthesized by dividing saturated and unsaturated fats. 7.23 g of saturated fats were synthesized, and 28.77 g of unsaturated fats were synthesized. The amount of synthesis was found to increase significantly.

(단위 : g/100g fatty acid)(Unit: g / 100g fatty acid) FA FA SFASFA USFAUSFA LALA CLACLA 홍화씨Safflower seed 98.1998.19 8.638.63 89.5689.56 74.5874.58 -- 홍화씨 CLASafflower CLA 97.2197.21 9.169.16 88.0588.05 4.434.43 40.7840.78 조지방Crude fat 98.3198.31 36.8736.87 61.4461.44 15.4915.49 -- 조지방 CLACrude Fat CLA 98.3198.31 36.8736.87 61.4461.44 2.072.07 2.402.40 포화지방Saturated fat 98.4298.42 41.0941.09 57.3357.33 13.5613.56 -- 포화지방 CLASaturated Fat CLA 98.2398.23 41.9641.96 56.4656.46 0.370.37 7.237.23 불포화 지방Unsaturated fats 97.8297.82 31.6931.69 66.1366.13 15.7415.74 -- 불포화 지방 CLAUnsaturated Fat CLA 97.5497.54 27.0027.00 70.5470.54 0.380.38 28.7728.77

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.The specific parts of the present invention have been described in detail above, and it is apparent to those skilled in the art that such specific descriptions are merely preferred embodiments, and thus the scope of the present invention is not limited thereto. something to do. Therefore, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

Claims (7)

(a) 돈육 부산물에 유기용매를 사용하여 상기 유기용매에 녹는 지방을 추출하는 단계;
(b) 상기 (a)에서 추출한 지방으로부터 리놀레산을 분획하는 단계; 및
(c) 상기 (b)에서 분획한 리놀레산으로부터 공액 리놀레산을 합성하는 단계;
를 포함하는, 돈육 부산물 유래 리놀레산 분획을 이용한 공액 리놀레산의 합성 방법으로서,
상기 (b) 단계는 상기 (a)에서 추출한 지방으로부터 0 내지 10℃에서 고체가 되는 포화지방산을 제거하는 단계 및 -4.9 내지 -4.1℃에서 고체가 되는 불포화지방산을 제거하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 공액 리놀레산의 합성 방법.
(a) extracting fat soluble in the organic solvent using an organic solvent in pork by-products;
(b) fractionating linoleic acid from the fat extracted in (a); And
(c) synthesizing conjugated linoleic acid from the linoleic acid fractionated in (b);
A method for synthesizing conjugated linoleic acid using a pork by-product-derived linoleic acid fraction, comprising:
The step (b) comprises the step of removing the saturated fatty acid which becomes a solid at 0 to 10 ℃ from the fat extracted in (a) and the unsaturated fatty acid that becomes a solid at -4.9 to -4.1 ℃ The synthesis method of conjugated linoleic acid.
제1항에 있어서,
상기 (a)에서 돈육 부산물은 돼지의 간, 허파, 심장, 위, 소장, 또는 대장인 것을 특징으로 하는, 공액 리놀레산의 합성 방법.
The method of claim 1,
Pork by-products in (a) is pig liver, lungs, heart, stomach, small intestine, or intestine, characterized in that the conjugated linoleic acid synthesis method.
제1항에 있어서,
상기 (b)에서 리놀레산은 지방산의 녹는점을 이용하여 분획되는 것을 특징으로 하는, 공액 리놀레산의 합성 방법.
The method of claim 1,
In (b), linoleic acid is fractionated using the melting point of fatty acids, characterized in that the synthesis of conjugated linoleic acid.
삭제delete 제1항에 있어서,
상기 (c)에서 공액 리놀레산은 알칼리 이성질체화 반응에 의해 합성되는 것을 특징으로 하는, 공액 리놀레산의 합성 방법.
The method of claim 1,
Conjugated linoleic acid in the above (c) is characterized in that synthesized by alkali isomerization reaction, the synthesis method of conjugated linoleic acid.
제5항에 있어서,
상기 알칼리 이성질체화 반응은 100 내지 250℃에서 수행되는 것을 특징으로 하는, 공액 리놀레산의 합성 방법.
The method of claim 5,
The alkaline isomerization reaction is characterized in that it is carried out at 100 to 250 ° C, the synthesis method of conjugated linoleic acid.
제1항에 있어서,
상기 공액 리놀레산은 시스-9/트랜스-11 또는 트랜스-10/시스-12 공액 리놀레산을 포함하는 것을 특징으로 하는, 공액 리놀레산의 합성 방법.


The method of claim 1,
Wherein said conjugated linoleic acid comprises cis-9 / trans-11 or trans-10 / cis-12 conjugated linoleic acid.


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