KR102010471B1 - Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain and use thereof - Google Patents

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KR102010471B1 KR1020180111793A KR20180111793A KR102010471B1 KR 102010471 B1 KR102010471 B1 KR 102010471B1 KR 1020180111793 A KR1020180111793 A KR 1020180111793A KR 20180111793 A KR20180111793 A KR 20180111793A KR 102010471 B1 KR102010471 B1 KR 102010471B1
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최정섭
고영관
김영숙
김재덕
곽화숙
김혜진
이윤미
이일영
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한국화학연구원
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    • C12R2001/465Streptomyces

Abstract

The present invention relates to a Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain deposited with accession number KCTC 13357BP and uses thereof. The Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain or culture medium thereof of the present invention exhibits herbicidal activity against Solanum nigrum, Aeschynomene indica, Abutilon avicennae, Xanthium strumarium, and Calystegia japonica, which are broadleaf weeds, and Sorghum bicolor, Echinochloa crus-galli, Digitaria sanguinalis, Agropyron smithii, and Panicum dichotomiflorum, which are grassy weeds, and thus can be advantageously used in herbicide compositions for weed control and a weed control method.

Description

스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주 및 이의 용도{Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain and use thereof}Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain and use approximately}

본 발명은 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주 및 이의 용도에 관한 것이다. The present invention relates to a Streptomyces drosedowicki KRA16-334 strain and its use.

잡초 혹은 잡풀은 절대적인 것이 아니고 상대적인 개념으로 인간이 농경생활을 시작하면서 발생한 것으로 때와 장소에 적절하지 않은 식물을 말한다. 잡초는 식물분류학적 분류, 형태학적 분류에 따라 화본과 잡초, 광엽 잡초 및 방동사니과 잡초로, 생활형에 따라 일년생잡초, 월년생잡초 및 다년생잡초로 나누고 있다. Weeds or weeds are not absolute, but relative. They are plants that originate from the beginning of agricultural life and are not appropriate for the time and place. Weeds are divided into plant weeds, weeds, broadleaf weeds, and moths and weeds according to plant taxonomic and morphological classifications. Weeds are divided into annual weeds, monthly weeds and perennial weeds.

화본과(grasses) 잡초는 줄기에 명확히 구분되는 마디와 마디 사이가 있고, 잎은 마디로부터 어긋나기로 나있으며 잎은 줄기를 둘러싸서 보호하는 잎집(leaf sheath)과 잎몸(leaf blade)으로 나누어지는데 잎몸은 좁고 기다란 모양으로 잎맥(leaf vein)이 평행하게 형성된 것이 특징이다. 피, 바랭이, 뚝새풀, 강아지풀, 갈대, 억새 등이 이에 속한다. 방동사니과(sedges)에 속하는 잡초들은 화본과와 비슷한 점이 있으나 대부분 줄기 횡단면이 삼각형 모양이며 잎혀나 잎귀가 없다는 점으로 구분이 된다. 잎은 좁고 능선이 있으며 끝이 뾰족하고 소수에 작은 꽃이 달린다. 방동사니, 너도방동사니, 올방개, 매자기, 올챙이고랭이 등이 속한다. 광엽(broad leaves) 잡초는 화본과 잡초나 방동사니과 잡초에 속하지 않는 식물로서 말 그대로 잎이 비교적 넓은 잡초이다. 잎은 주로 타원형, 난형, 피침형이며 엽맥이 그물처럼 얽혀 있는 것이 특징이다. 우리 주변에서 흔히 발생하는 망초, 토끼풀, 쑥, 냉이, 비름, 물달개비, 가래, 가막사리 등 많은 잡초가 이 범주에 속한다.Grasses Weeds have a distinct segment between the nodes and the nodes, the leaves are separated from the nodes, and the leaves are divided into leaf sheaths and leaf blades that surround and protect the stems. Narrow and elongated leaf vein (leaf vein) is characterized in that formed in parallel. Blood, winter, grass, dog grass, reeds, silver grass, etc. belong to this. Weeds belonging to the sedges have similarities to the flower, but most are distinguished by the fact that the stem cross section is triangular and there are no leaf tongues or leaf ears. The leaves are narrow, ridged, pointed at the end, with a small number of small flowers. Bangdongsani, beebangbangsani, olbang, barberry, tadpoles, etc. belong. Broad leaves Weeds are plants that do not belong to flower beds, weeds, or larvae and weeds, and are literally broad-leaved weeds. The leaves are mainly oval, ovoid and lanceolate, with leaf veins intertwined like a net. Many of the weeds in this category are common, such as forget-me-not, shamrock, mugwort, horseradish, amaranth, stilt, sputum, and ferns.

잡초는 작물재배에서 광, 양분, 수분 등의 경합 및 탈취하여 생산성과 상품성을 크게 저하시키거나 병해충의 매개, 농작업을 곤란하게 하는 주요 방제 대상이다. 잡초는 장소, 계절, 환경 등에 상관없이 연중 발생하며, 방제에 많은 노력과 비용이 소요된다. 현재 잡초방제를 위하여 저렴한 비용으로 높은 제초 활성을 나타내는 여러 가지 유기합성 제초제를 사용하고 있으나, 저항성 잡초 출현, 환경에 대한 유해성 및 잔류 독성이 문제로 지적되고 있다. 특히 유기합성 제초제의 장기 사용으로 인한 저항성 잡초의 출현은 심각한 사회경제적 문제로까지 인식되고 있다(Riches 등 1996). 그러나 우수한 방제효과를 나타내는 벤조비사이클론(benzobicyclon)과 메조트리온(mesotrione), 테푸릴트리온(tefuryltrione) 등과 같은 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase(DPPH) 저해제가 개발된 이후 새로운 작용점을 갖는 제초제의 개발 성과가 없는 실정이다(Prisbylla 등 1993; Schultz등 1993). 따라서 새로운 구조의 신규 작용점을 갖는 합성 제초제에 대한 개발이 요구되고 있지만, 소득 향상과 삶의 질을 중시하는 풍토가 조성되면서 친환경 농업에 대한 관심이 높아지고 화학농약의 사용을 저감시키려는 각국의 강력한 규제 때문에 유기합성 제초제 개발 여건은 녹록하지 않은 것이 현실이다.Weeds are the main targets for the control of crops, nutrients, moisture, etc., which deteriorate productivity and commerciality, or make pests difficult and agricultural work difficult. Weeds occur throughout the year regardless of location, season, environment, etc., and they require a lot of effort and expense to control them. At present, various organic synthetic herbicides having high herbicidal activity at low cost are used for weed control, but the emergence of resistant weeds, environmental hazards and residual toxicity has been pointed out as problems. In particular, the emergence of resistant weeds due to the long-term use of organic herbicides has been recognized as a serious socioeconomic problem (Riches et al. 1996). However, since the development of 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase (DPPH) inhibitors such as benzobicyclon, mesotrione and tefuryltrione, which have excellent control effects, the development of herbicides having a new action point has been developed. (Prisbylla et al. 1993; Schultz et al. 1993). Therefore, the development of synthetic herbicides with new action points with a new structure is required, but due to the strong interest of eco-friendly agriculture and the strong regulation of each country to reduce the use of chemical pesticides with the development of a climate that emphasizes income improvement and quality of life. The conditions for developing organic herbicides are not green.

본 발명의 목적은 신규한 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주를 제공하는 것이다. It is an object of the present invention to provide a novel Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain.

본 발명의 다른 목적은 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 잡초 방제용 조성물 및 상기 조성물을 이용한 잡초 방제 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a weed control composition comprising Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain or a culture thereof as an active ingredient, and a method for weed control using the composition.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 수탁번호 KCTC 13357BP로 기탁된 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주를 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention is also a Streptomyces deurojeu deposited as accession number of KCTC 13357BP wick Che (Streptomyces drozdowiczii ) provides a KRA16-334 strain.

또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 13357BP로 기탁된 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 잡초 방제용 제초제 조성물을 제공한다. The present invention also provides a herbicide composition for weed control comprising Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain or its culture solution deposited with accession number KCTC 13357BP as an active ingredient.

또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 13357BP로 기탁된 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주 또는 이의 배양액을 잡초, 이의 종자 또는 이의 서식지에 처리하는 단계를 포함하는 잡초 방제 방법을 제공한다. The present invention also provides a method for controlling weeds, comprising the step of treating Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain or its culture deposited with weed number KCTC 13357BP to weeds, seeds or habitats thereof. do.

본 발명의 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주 또는 이의 배양액은 광엽 잡초인 까마중, 자귀풀, 어저귀, 도꼬마리 및 메꽃과 화본과 잡초인 수수, 돌피, 바랭이, 개밀 및 미국개기장에 제초 활성을 나타내므로, 잡초 방제용 제초제 조성물 및 잡초 방제 방법에 유용하게 사용될 수 있다. Streptomyces of the present invention ( Streptomyces) drozdowiczii ) KRA16-334 strain or its cultures are herbicide compositions for weed control because they exhibit herbicidal activity in broad-leaf weeds, nymphs, larvae, larvae, hawks and buckwheat and weeds, sorghum, snails, barley, wheat and US cultivars. It can be usefully used for weed control methods.

도 1은 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주의 배양여액(배양액에서 균체를 제거한 상등액)을 처리하고, 5일 후 바랭이의 모습을 나타낸 도이다
(왼쪽: 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주 배양여액 처리한 지 5일 후;
오른쪽: 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주 배양여액 처리하기 전).
도 2는 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주의 16S rRNA 염기서열 정보를 바탕으로 작성한 계통수(phylogenetic tree) 결과이다.
도 3은 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주 배양여액의 원액, 배양여액의 2배 희석액 및 배양여액의 4배 희석액을 각각 처리하고 5일 후, 광엽 잡초 5종(까마중, 자귀풀, 어저귀, 도꼬마리 및 메꽃)과 화본과 잡초 5종(수수, 돌피, 바랭이, 개밀 및 미국개기장)의 모습을 나타낸 도이다.
1 is Streptomyces ( Dreptomyces) drozdowiczii ) Treated culture filtrate of the KRA16-334 strain (supernatant from which the cells were removed from the culture solution) and 5 days after the treatment
(Left: 5 days after treatment with Streptomyces drosedowicki KRA16-334 strain culture filtrate;
Right: before treatment with Streptomyces drosedowicki KRA16-334 strain culture filtrate).
Figure 2 Streptomyces ( Dreptomyces) drozdowiczii ) Phylogenetic tree results based on 16S rRNA sequence information of KRA16-334 strain.
Figure 3 Streptomyces ( Dreptomyces) drozdowiczii ) 5 days after treatment with the stock solution of the culture filtrate of KRA16-334 strain, the 2-fold dilution of the culture filtrate, and the 4-fold dilution of the culture filtrate, respectively, five broad-leaf weeds (cranium, larvae, larvae, skeletal and buckthorn), flowers and weeds were treated. This diagram shows the appearance of five species (sorghum, dolpi, barren, wheat, and American total).

이하, 본 발명을 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 수탁번호 KCTC 13357BP로 기탁된 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주를 제공한다. The present invention provides Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain deposited with accession number KCTC 13357BP.

본 발명에 따른 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주(이하, KRA16-334 균주)는 충남 보령군 풍산리 일대 산림 토양으로부터 분리 배양을 통해 동정하였다. Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain (hereinafter referred to as KRA16-334 strain) according to the present invention was identified through separation culture from the forest soil of Pungsan-ri, Boryeong-gun, Chungcheongnam-do.

상기 KR16-334 균주는 16S rRNA 유전자 상동성 검색에서, 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이와 99.9%의 상동성을 나타내는 신규한 균주로 확인되었는 바, 이는 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) 균주로 분류되었다. The KR16-334 strain was identified as a novel strain showing 99.9% homology with Streptomyces drozdock chy in 16S rRNA gene homology search, which is a Streptomyces drozdowiczii strain. Classified as

본 발명자들은 상기 신규한 균주를 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주로 명명하여 한국생명공학연구원 생명자원센터(KCTC)에 2017년 9월 29일자로 기탁하여 수탁번호 KCTC 13357BP를 부여받았다.The inventors named the novel strain Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain and deposited it on September 29, 2017 at the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology (KCTC) with accession number KCTC 13357BP. Was granted.

또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 13357BP로 기탁된 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 잡초 방제용 제초제 조성물을 제공한다. The present invention also provides a herbicide composition for weed control comprising Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain or its culture solution deposited with accession number KCTC 13357BP as an active ingredient.

상기 잡초는 화본과 잡초 또는 광엽 잡초일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 상기 화본과 잡초는 수수(Sorghum bicolor), 돌피(Echinochloa crus - galli), 바랭이(Digitaria sanguinalis), 개밀(Agropyron smithii), 및 미국개기장(Panicum dichotomiflorum)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 상기 광엽 잡초는 까마중(Solanum nigrum), 자귀풀(Aeschynomene indica), 어저귀(Abutilon avicennae), 도꼬마리(Xanthium strumarium) 및 메꽃(Calystegia japonica)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. The weeds may be flower beds and weeds or broadleaf weeds, but are not limited thereto. The flower and weeds are Sorghum bicolor , Echinochloa crus - galli ) and dianthus sanguinalis ), wheatgrass ( Agropyron smithii ), and American open field ( Panicum) dichotomiflorum ) may be any one selected from the group consisting of, but is not limited thereto. The broadleaf weed is Solanum nigrum), Aeschynomene indica (Aeschynomene indica), Abutilon theophrasti (Abutilon avicennae), Xanthium strumarium (Xanthium strumarium ) and calystegia japonica may be any one selected from the group consisting of, but is not limited thereto.

상기 배양액은 균주를 배양한 GSS 액체 배지일 수 있으나 이에 제한되지 않으며 통상의 미생물 배양 배지일 수 있다. 또한, 상기 배양액은 균주를 배양한 배양액 또는 상기 배양액을 물리적으로 여과한 배양여액일 수 있으며, 상기 배양액은 희석하지 않거나 희석하여 잡초에 처리할 수 있다. 상기 배양액은 잡초에 제초 활성을 나타내는 한, 여과, 농축, 희석 등의 처리 과정을 거쳐 잡초에 처리될 수 있다. The culture solution may be a GSS liquid medium in which the strain is cultured, but is not limited thereto, and may be a conventional microbial culture medium. In addition, the culture solution may be a culture solution cultured strain or a culture filtrate physically filtered the culture solution, the culture solution may be diluted or treated to weeds. The culture solution may be treated to the weeds through treatments such as filtration, concentration, dilution, as long as they exhibit herbicidal activity to the weeds.

상기 잡초 방제용 제초제 조성물은 담체 및/또는 희석제를 포함할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어, '담체'는 처리되어야 할 식물 또는 다른 대상체를 대상으로 이의 적용, 또는 이의 저장, 수송 및/또는 취급이 편리하도록 혼합되거나 만들어진 활성 성분을 갖는, 비활성의, 유기 또는 무기 물질을 의미한다. 상기 희석제 또는 담체의 예로는 물, 우유, 에탄올, 광유, 글리세롤을 포함하나 이에 한정되지 않는다.The herbicide composition for weed control may include a carrier and / or a diluent. As used herein, the term 'carrier' refers to an inert, organic or inorganic, having the active ingredient mixed or made to facilitate its application, or storage, transport and / or handling thereof, to a plant or other subject to be treated. Mean material. Examples of such diluents or carriers include, but are not limited to, water, milk, ethanol, mineral oil, glycerol.

본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 산림 토양 시료로부터 신규한 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주를 분리하고(도 2 참조), 상기 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주의 배양여액이 광엽 잡초 5종(까마중, 자귀풀, 어저귀, 도꼬마리 및 메꽃)과 화본과 잡초 5종(수수, 돌피, 바랭이, 개밀 및 미국개기장)에 대하여 제초 활성을 나타냄을 확인하였다 (표 1 참조).In a specific embodiment of the present invention, the inventors have isolated a novel Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain from forest soil samples (see FIG. 2), and said Streptomyces drozdowic tooth KRA16. The culture filtrate of the -334 strain showed herbicidal activity against five broadleaf weeds (Crownia, Albizia julibrissin, estuary, doe and buckwheat), and five species of weeds and sorghum, sorghum, barley, wheat, and US herbicides. See Table 1).

따라서, 본 발명의 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주 또는 이의 배양액은 잡초 방제용 제초제 조성물로 유용하게 사용될 수 있다. Therefore, the Streptomyces drosedowicki KRA16-334 strain of the present invention or its culture may be usefully used as a herbicide composition for weed control.

또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 13357BP로 기탁된 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주 또는 이의 배양액을 잡초, 이의 종자 또는 이의 서식지에 처리하는 단계를 포함하는 잡초 방제 방법을 제공한다. The present invention also provides a method for controlling weeds, comprising the step of treating Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain or its culture deposited with weed number KCTC 13357BP to weeds, seeds or habitats thereof. do.

상기 처리는 식물의 줄기와 잎에 직접 살포하는 경엽 처리, 식물의 종자에 처리하는 종자 처리 또는 토양에 적용하는 토양 처리일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. The treatment may be, but is not limited to, a foliage treatment applied directly to the stems and leaves of the plant, a seed treatment applied to the seeds of the plant, or a soil treatment applied to the soil.

상기 잡초는 화본과 잡초 또는 광엽 잡초일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 상기 화본과 잡초는 수수(Sorghum bicolor), 돌피(Echinochloa crus - galli), 바랭이(Digitaria sanguinalis), 개밀(Agropyron smithii), 및 미국개기장(Panicum dichotomiflorum)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 상기 광엽 잡초는 까마중(Solanum nigrum), 자귀풀(Aeschynomene indica), 어저귀(Abutilon avicennae), 도꼬마리(Xanthium strumarium) 및 메꽃(Calystegia japonica)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. The weeds may be flower beds and weeds or broadleaf weeds, but are not limited thereto. The flower and weeds are Sorghum bicolor , Echinochloa crus - galli ) and dianthus sanguinalis ), wheatgrass ( Agropyron smithii ), and American open field ( Panicum) dichotomiflorum ) may be any one selected from the group consisting of, but is not limited thereto. The broadleaf weed is Solanum nigrum), Aeschynomene indica (Aeschynomene indica), Abutilon theophrasti (Abutilon avicennae), Xanthium strumarium (Xanthium strumarium ) and calystegia japonica may be any one selected from the group consisting of, but is not limited thereto.

본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주의 배양여액을 광엽 잡초 5종(까마중, 자귀풀, 어저귀, 도꼬마리 및 메꽃)과 화본과 잡초 5종(수수, 돌피, 바랭이, 개밀 및 미국개기장)에 대하여 경엽 처리한 결과, 처리된 잡초 10종에 대하여 제초 활성을 나타냄을 확인하였다(표 1 참조).In a specific embodiment of the present invention, the inventors of the culture filtrate of Streptomyces drosedowicki KRA16-334 strain 5 broadleaf weeds (Crown, larvae, motherbird, skeletal and buckwheat) and flower and weeds (sorghum, dolpi) , Fructus, wheatgrass, and US herbicide), as a result of foliage treatment, it was confirmed that exhibited herbicidal activity against 10 treated weeds (see Table 1).

따라서, 본 발명의 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주 또는 이의 배양액은 잡초 방제 방법에 유용하게 사용될 수 있다. Therefore, the Streptomyces drosedowicki KRA16-334 strain or its culture solution of the present invention can be usefully used for weed control methods.

이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following examples.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.However, the following examples are merely to illustrate the invention, but the content of the present invention is not limited by the following examples.

<< 실시예Example 1>  1> KRA16KRA16 -334 균주의 분리 및 Isolation of -334 strain 계대Passage 배양 culture

충남 보령군 풍산리일대 산림으로부터 얻은 토양시료를 HV한천(humic acid-vitamin agar) 배지 [0.1% 휴민산(humic acid) (0.2 N NaOH에 용해), 0.05% Na2HPO4, 0.171% KCl, 0.005% MgSO4, 0.001% FeSO4·7H2O, 0.002% CaCO3, 비타민 B 복합체 미량, 50 ppm 사이클로헥시미드(cycloheximide), pH 7.0]에 배양하여 KRA16-334 균주를 분리하고, 베넷(Bennett) 아가 (BA; 1% 글루코스, 0.1% 효모 추출물(yeast extract), 0.2% 박토-펩톤(bacto-peptone), 0.1% 육 추출물(beef extract), 2% 아가(agar), 1 L 물) 플레이트에 계대 배양하였다. Soil samples from the forests of Poongsan-ri, Boryeong-gun, Chungcheongnam-do, Korea (HV acid-vitamin agar) [0.1% humic acid (dissolved in 0.2 N NaOH), 0.05% Na 2 HPO 4 , 0.171% KCl, 0.005 % MgSO 4 , 0.001% FeSO 4 · 7H 2 O, 0.002% CaCO 3 , traces of vitamin B complex, 50 ppm cycloheximide, pH 7.0], isolated KRA16-334 strain, Bennett ) Agar (BA; 1% glucose, 0.1% yeast extract, 0.2% bacto-peptone, 0.1% bee extract, 2% agar, 1 L water) plate Subcultured at.

<< 실시예Example 2>  2> KRA16KRA16 -334 균주의 Of -334 strain 배양여액Culture filtrate 제조 Produce

실시예 1에서 분리한 KRA16-334 균주를 활성배지인 GSS 액체배지(1% 가용성 전분(soluble starch), 2% 글루코스, 2.5% 대두박(soybean meal), 0.1% 육 추출물(beef extract), 0.4% 효모 추출물(yeast extract), 0.2% NaCl, 0.025% K2HPO4 및 0.2% CaCO3)에 접종하고 27℃, 160 rpm으로 7일간 진탕 배양한 후, 이를 원심분리(8,000 rpm, 15분)하여 균체를 제거하고 감압농축(EYELA, N-1200A)하였다. 상기 배양여액을 제초활성 평가를 위한 시료로 사용하였다.The KRA16-334 strain isolated in Example 1 was used as an active medium, GSS liquid medium (1% soluble starch, 2% glucose, 2.5% soybean meal, 0.1% bee extract, 0.4% Inoculated with yeast extract (yeast extract), 0.2% NaCl, 0.025% K 2 HPO 4 and 0.2% CaCO 3 ) and incubated for 7 days at 27 ℃, 160 rpm and centrifuged (8,000 rpm, 15 minutes) The cells were removed and concentrated under reduced pressure (EYELA, N-1200A). The culture filtrate was used as a sample for the evaluation of herbicidal activity.

<< 실시예Example 3>  3> KRA16KRA16 -334 균주 -334 strain 배양여액의Of culture filtrate 바랭이 제초 활성 평가 Evaluation of Barley Herbicide Activity

실시예 2에서 제조한 KRA16-334 균주 배양여액의 바랭이 제초활성을 평가하고자 하였다. 구체적으로, 바랭이 폿트(pot) 당 실시예 2에서 제조한 KRA16-334 균주 배양여액을 5 ㎖씩 분무 살포하고 5일 후에 외형적인 증상을 기준으로 달관 조사하였다 (0: 효과없음; 100: 완전고사). To evaluate the herbicidal herbicidal activity of the culture filtrate of KRA16-334 strain prepared in Example 2. Specifically, 5 ml of the KRA16-334 strain culture filtrate prepared in Example 2 per spray pot was spray-sprayed and sprayed at 5 ml after 5 days to examine the crown based on the external symptoms (0: no effect; 100: complete test) ).

KRA16-334 균주 배양여액을 바랭이에 경엽처리한 결과, 24시간 이내에 시들음(wilting) 증상을 보이기 시작하여 5일 경과 후 완전히 고사하였다(도 1).KRA16-334 strain culture filtrate was subjected to foliage treatment in the bark as a result, began to wither (wilting) symptoms within 24 hours and completely died after 5 days (Fig. 1).

<실시예 4> KRA16-334 균주의 동정 및 계통 분류Example 4 Identification and Lineage of KRA16-334 Strains

실시예 1에서 분리한 KRA16-334 균주를 16S rRNA 유전자 염기서열 분석을 통해 동정하였으며 이때 분석은 GenBank database 통해 실시하였다. 염기서열 비교결과로 얻은 후보군 중에서 가장 유사도가 높은 후보군 20종을 clustal w를 이용하여 정렬하고 neighbour-joining method (PHYDIT program version 3.0)를 통해 계통수(phylogenetic tree)를 작성하였다.KRA16-334 strain isolated in Example 1 was identified by 16S rRNA gene sequencing analysis, the analysis was carried out through GenBank database. Among the candidate groups obtained from the base sequence comparison, 20 candidate groups with the highest similarity were sorted using clustal w, and a phylogenetic tree was prepared through the neighbor-joining method (PHYDIT program version 3.0).

실시예 1에서 분리한 KRA16-334 균주의 16S rRNA 유전자 염기서열 분석 결과, 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii)와 99.9% 유전자 상동성을 보였으며, 16S rRNA 염기서열을 이용하여 계통수를 작성한 결과, 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii)와 가장 가까운 것으로 나타났다 (도 2). 본 발명의 KRA16-334 균주를 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주로 명명하고, 생명공학연구원 생물자원센터에 기탁하였다(균주 기탁번호: KCTC13357BP).16S rRNA gene sequencing of the KRA16-334 strain isolated from Example 1 showed 99.9% homology with Streptomyces drozdowiczii , and a phylogenetic tree was prepared using the 16S rRNA sequence. Results, Streptomyces drozdowiczii ), and the closest (Fig. 2). The KRA16-334 strain of the present invention was named Streptomyces drosedowicki KRA16-334 strain and deposited in the Biotechnology Center of Biotechnology Research Institute (Strain No .: KCTC13357BP).

<실시예 5> 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주의 살초 활성 평가Example 5 Evaluation of Herbicidal Activity of KRA16-334 Strain from Streptomyces Drosedowick

광엽 잡초 및 화본과 잡초에 대한 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주 배양여액 및 희석액의 살초 활성을 평가하였다.The herbicidal activity of Streptomyces drosedowicki KRA16-334 strain culture filtrate and dilution against broadleaf weeds and flower and weeds was evaluated.

구체적으로, 원예용 상토를 충진한 표면적 350 cm2 사각 플라스틱 폿트(pot)에 광엽 잡초 5종(까마중, 자귀풀, 어저귀, 도꼬마리 및 메꽃)과 화본과 잡초 5종(수수, 돌피, 바랭이, 개밀 및 미국개기장)을 파종하여 온실조건(35/25±5℃, Light/Dark=14/10h)에서 12일 동안 생육시킨 후 실시예 2의 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주의 배양여액 원액 및 희석액(2배 및 4배 희석)을 각각 폿트당 14 ㎖씩 경엽 분무처리하였다. 살초활성 평가는 경엽 분무처리 5일 후에 외형적인 증상을 기준으로 하여 달관조사하였다 (0; 효과 없음, 100; 완전고사).Specifically, five broad-leaved weeds (Crownwood, Albizia julibrissus, Black-tailed larvae and buckwheat) and five flowers and weeds (sorghum, snails, barley, wheatgrass, and the United States) in a 350 cm 2 square plastic pot filled with gardening topsoil. Open field) and seedlings were grown for 12 days in greenhouse conditions (35/25 ± 5 ℃, Light / Dark = 14 / 10h), and then the stock solution of the culture filtrate of the strain Streptomyces drosedowicki KRA16-334 of Example 2. And dilutions (two- and four-fold dilutions) were leaf sprayed at 14 ml per pot, respectively. The herbicidal activity was assessed on the basis of external symptoms 5 days after foliage spray treatment (0; no effect, 100; complete test).

스트렙토마이세스 드로즈도윅치이 KRA16-334 균주의 배양여액의 농도별로 살초활성을 평가한 결과, 화본과 잡초 5종 및 어저귀를 제외한 광엽 잡초 4종에 대하여 배양여액 원액 및 2배 희석액에서 100% 살초활성을 보였으며, 4배 희석액 처리 시에도 수수 60%, 메꽃 80%, 돌피, 바랭이, 미국개기장, 까마중, 자귀풀 및 도꼬마리에서 100%의 높은 활성을 보였다 (표 1 및 도 3).As a result of evaluating the herbicidal activity according to the concentration of the culture filtrate of Streptomyces drozdowicki KRA16-334 strain, 100% herbicidal activity was obtained in the culture filtrate stock and the 2-fold dilutions of four broadleaf weeds except the flower weed and five weeds. In the 4-fold dilution, 100% of the sorghum was 60%, cornflower 80%, Dolphin, barley, American larvae, crows, larvae and larvae (Table 1 and Figure 3).

잡초명Weed 제초 활성 (%)Herbicide activity (%) 원액Stock solution 2배 희석액2-fold dilution 4배 희석액4-fold dilution 수수Sorghum 100100 100100 6060 돌피Dolphin 100100 100100 100100 바랭이wire grass 100100 100100 100100 미국개기장United States 100100 100100 100100 까마중Under the hood 100100 100100 100100 자귀풀Silkworm 100100 100100 100100 어저귀Bead 4040 3030 4040 도꼬마리Macaw 100100 100100 100100 메꽃convolvulus 100100 100100 8080

한국생명공학연구원Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology KCTC13357BPKCTC13357BP 2017092920170929

Claims (9)

수탁번호 KCTC 13357BP로 기탁된 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주.
The Streptomyces deurojeu deposited as accession number of KCTC 13357BP also wick Che (Streptomyces drozdowiczii ) KRA16-334 strain.
수탁번호 KCTC 13357BP로 기탁된 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 잡초 방제용 제초제 조성물.
A herbicide composition for weed control comprising Streptomyces drozdowiczii KRA16-334 strain or its culture solution deposited as accession number KCTC 13357BP as an active ingredient.
제2항에 있어서, 상기 잡초는 화본과 잡초 또는 광엽 잡초인, 잡초 방제용 제초제 조성물.
The herbicide composition for weed control according to claim 2, wherein the weeds are flower beds and weeds or broadleaf weeds.
제3항에 있어서, 상기 화본과 잡초는 수수(Sorghum bicolor), 돌피(Echinochloa crus - galli), 바랭이(Digitaria sanguinalis), 개밀(Agropyron smithii), 및 미국개기장(Panicum dichotomiflorum)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인, 잡초 방제용 제초제 조성물.
The method of claim 3, wherein the flower and weeds are Sorghum bicolor , Echinochloa crus - galli ), dianthus ( Digitaria sanguinalis ), wheat flour ( Agropyron) smithii ), and Panicum dichotomiflorum ) any one selected from the group consisting of, herbicide composition for weed control.
제3항에 있어서, 상기 광엽 잡초는 까마중(Solanum nigrum), 자귀풀(Aeschynomene indica), 어저귀(Abutilon avicennae), 도꼬마리(Xanthium strumarium) 및 메꽃(Calystegia japonica)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인, 잡초 방제용 제초제 조성물.
The method according to claim 3, wherein the broadleaf weed is Solanum nigrum), Aeschynomene indica (Aeschynomene indica), Abutilon theophrasti (Abutilon avicennae), Xanthium strumarium (Xanthium strumarium ) and cauliflower ( Calystegia japonica ) is any one selected from the group consisting of, herbicide composition for weed control.
수탁번호 KCTC 13357BP로 기탁된 스트렙토마이세스 드로즈도윅치이(Streptomyces drozdowiczii) KRA16-334 균주 또는 이의 배양액을 잡초, 이의 종자 또는 이의 서식지에 처리하는 단계를 포함하는 잡초 방제 방법.
The Streptomyces deurojeu deposited as accession number of KCTC 13357BP also wick Che (Streptomyces drozdowiczii ) Weed control method comprising the step of treating the KRA16-334 strain or its culture in the weeds, seeds or habitat thereof.
제6항에 있어서, 상기 잡초는 화본과 잡초 또는 광엽 잡초인, 잡초 방제 방법.
The weed control method according to claim 6, wherein the weeds are flower beds and weeds or broadleaf weeds.
제7항에 있어서, 상기 화본과 잡초는 수수(Sorghum bicolor), 돌피(Echinochloa crus - galli), 바랭이(Digitaria sanguinalis), 개밀(Agropyron smithii), 및 미국개기장(Panicum dichotomiflorum)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인, 잡초 방제 방법.
The method of claim 7, wherein the flower and weeds are Sorghum bicolor , Echinochloa crus - galli , Digitaria sanguinalis ), wheatgrass ( Agropyron smithii ), and Panicum dichotomiflorum ) any one selected from the group consisting of, weed control method.
제7항에 있어서, 상기 광엽 잡초는 까마중(Solanum nigrum), 자귀풀(Aeschynomene indica), 어저귀(Abutilon avicennae), 도꼬마리(Xanthium strumarium) 및 메꽃(Calystegia japonica)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인, 잡초 방제 방법.The method according to claim 7, wherein the broadleaf weed is Solanum nigrum), Aeschynomene indica (Aeschynomene indica), Abutilon theophrasti (Abutilon avicennae , macaw ( Xanthium) strumarium ) and Caystegia japonica , any one selected from the group consisting of weed control method.
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