KR102007576B1 - Beverage composition of Aronia melanocarpa containing active ginsenosides and preparation method thereof - Google Patents

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Abstract

본 발명에는 활성형 진세노사이드인 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2을 함유하고 생리활성성분인 페놀산 및 플라보놀이 증진된 아로니아 음료조성물 및 그 제조방법이 개시된다. 본 발명에 따른 아로니아 음료는 활성형 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2 및 컴파운드 케이를 함유하고 페놀산 및 플라보놀이 증진되고, 더불어 우수한 알파-글루코시다제 저해활성과 췌장 리파제 저해활성도 가져서 항산화 활성, 항당뇨 활성 및 항비만 활성이 증진되어 기능성 식품의약품의 소재로 사용될 수 있다.  The present invention discloses a phenolic acid and flavonol enhanced aronia beverage composition containing the active ginsenosides ginsenosides Rd, Rd2, Rg3, F2, and physiologically active ingredients, and a preparation method thereof. Aronia beverages according to the present invention contains the active ginsenosides Rd, Rd2, Rg3, F2 and compound K, and enhance the phenolic acid and flavonol, and also has excellent alpha-glucosidase inhibitory activity and pancreatic lipase inhibitory activity Antioxidant activity, antidiabetic activity and anti-obesity activity are enhanced and can be used as a material for functional food and pharmaceuticals.

Description

활성형 진노세사이드 함유 아로니아 음료조성물 및 그 제조방법{Beverage composition of Aronia melanocarpa containing active ginsenosides and preparation method thereof}Beverage composition of Aronia melanocarpa containing active ginsenosides and preparation method

본 발명은 활성형 진노세사이드 함유 아로니아 음료조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 더 상세하게는 산양삼 전초를 이용하고 특정조건의 고온숙성을 거쳐서 제조된 활성산양삼 농축액을 포함하여, 활성형 진세노사이드인 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2 및 컴파운드 케이를 함유하고 생리활성성분인 페놀산 및 플라보놀이 증진된 아로니아 음료조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다. The present invention relates to an active ginsenoside-containing aronia beverage composition and a method for preparing the same, and more particularly, to an active ginseng concentrate prepared by using a goat goat outpost and undergoing high temperature aging under specific conditions. The present invention relates to a phenolic acid and flavonol-enhanced aronia beverage composition containing sidesides ginsenosides Rd, Rd2, Rg3, F2 and compound k, and physiologically active ingredients.

고려인삼의 속명인 Panax는 그리스어의 Pan(모든)과 Akok(치료하다)의 복합어로서 '모든 병을 치료한다'라는 의미로 예로부터 식약용으로 가장 널리 이용되고 있는 약용작물이다. 인삼은 약 60%의 탄수화물, 8~15%의 조단백질, 1~3%의 조지방, 4~6%의 회분, 3~7%의 조사포닌, 그 외 미량성분들로 구성되어 있다. 인삼은 중추신계를 비롯하여 내분비계, 면역계, 대사계 등에 영향을 미쳐 신체기능 조절에 다양한 약리효과를 나타낸다고 보고되어 있으며, 이와 같은 약리효과는 특히 활성 진세노사이드의 기인에 기인하는 것으로 알려져 있다.Panax, a generic name of Korean ginseng, is a compound word of Greek Pan (all) and Akok (to cure). It is a medicinal crop that has been widely used for food and medicine since ancient times. Ginseng consists of about 60% carbohydrates, 8-15% crude protein, 1-3% crude fat, 4-6% ash, 3-7% irradiated ponin, and other minor components. Ginseng has been reported to have various pharmacological effects on the regulation of physical function by affecting the central nervous system, endocrine system, immune system, metabolic system, and such pharmacological effects are known to be due to the origin of active ginsenosides.

활성형 진세노사이드는 인체 장내에서 흡수가 용이한 진세노사이드로서 진세노사이드 Rg1, Rg3, Rd, Rf, Rh, F2, 컴파운드 케이(compound K) 등이 있다. 진세노사이드 Rg1은 학습기능 개선, 항피로 작용, 진세노사이드 Rf는 뇌신경세포 진통작용, 지질과산화 억제작용, 진세노사이드 Rg3는 암세포 전이억제, 간보호 작용, 항암제 내성억제 작용, 진세노사이드 Rd는 부신피질 호르몬 분비 촉진 작용, 진세노사이드 컴파운드 케이는 항암작용, 간보호 작용, 피부보호 작용, 종양증식억제 작용, 항산화 작용, 항알레르기 작용이 밝혀져 있다. 특히, 진세노사이드 컴파운드 케이 (20-O-beta-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxadiol)는 진세노사이드 대사체로서 특히 체내 흡수율이 탁월하고 약리학적 활성도 우수한 것으로 알려져 있으며, 최근에는 황반변성질환 치료, 신경변증성 통증 치료도 보고되고 있다 (등록특허 10-1539573). Active ginsenosides include ginsenosides Rg1, Rg3, Rd, Rf, Rh, F2, and compound K, which are easily absorbed by the human intestine. Ginsenoside Rg1 improves learning function, anti-fatigue, ginsenoside Rf acts on cranial nerve cell analgesic, inhibits lipid peroxidation, ginsenoside Rg3 inhibits cancer cell metastasis, hepatoprotective action, anticancer drug inhibitory action, ginsenoside Rd Cortical hormone secretion promoting action, ginsenoside compound K has been shown to be anti-cancer action, hepatoprotective action, skin protection action, tumor growth inhibitory action, antioxidant action, anti-allergic action. In particular, ginsenoside compound k (20-O-beta-D-glucopyranosyl-20 (S) -protopanaxadiol) is a ginsenoside metabolite, which is known for its excellent absorption in the body and excellent pharmacological activity. Disease treatment, neurodegenerative pain treatment is also reported (registered patent 10-1539573).

삼에 대한 선호도가 인삼에서 홍삼으로 그리고 최근에는 무농약 산양삼(야생삼)으로 변화하고 있어 산양삼을 이용한 기능성식품의 요구가 급증하고 있는 실정이다. As the preference for ginseng is changing from ginseng to red ginseng and recently, no-pesticide wild ginseng (wild ginseng), the demand for functional foods using wild ginseng is increasing rapidly.

아로니아 (블랙쵸크베리; Aronia melanocarpa)는 장미과에 속하는 베리류로 북미의 동부 아메리카 지역에서 자생하는 최근 몇 년 사이에 우리나라에서도 전국적으로 지배되고 있으며, 그 생산량이 증가하고 있다. 아로니아의 성분에 관한 연구는 폴란드의 바르샤바대학을 중심으로 지속적으로 연구되었으며, 최근에 국내에서 많은 연구결과들을 발표하고 있다. Aronia melanocarpa is a rose family belonging to the family Rosaceae, which has been dominant in Korea in recent years, growing in eastern America in North America, and its production is increasing. Research on the composition of Aaronia has been conducted continuously in the Warsaw University of Poland, and has recently published many research results in Korea.

아로니아에는 비타민 A, C, E, B2, B6, B9, B12, 엽산(folic acid), 퀴닌산(quinic acid), 페놀산(phenolicacids), 안토시아닌(anthocyanin), 타닌(tannin), 카테킨(catechins), 쿼르시틴(quercitin), 루테인 & 제아잔틴 (lutein & zeaxanthin), 루틴(rutin), 헤스페리딘(hesperidin), 레스베라트롤 (resveratrol), 베타카로틴(beta-carotene)을 비롯해 칼슘, 철분, 마그네슘, 아연, 칼륨, 망간과 같은 다양한 유기미네랄이 포함되어 있고 특히 강력한 항산화물질인 안토시아닌과 폴리페놀의 함량은 베리류의 과일 중 가장 높다고 알려져 있다. 아로니아는 항산화 효능뿐만 아니라 심혈관질환, 암, 당뇨, 위염 및 알러지성 피부질환 등의 개선에 효과가 있는 것으로 알려져 최근 아로니아를 음료의 원재료로 많이 활용하고 있는 추세이다. 그 일례로 아로니아에 포도나 배와 같은 당도가 높은 과일과의 혼합하여 제조한 아로니아 음료의 제조에 관한 기술들이 개발된 바 있다 (공개특허 제10-2017-0093087호, 등록특허 제10-1772014호).Aaronia contains vitamins A, C, E, B2, B6, B9, B12, folic acid, quinic acid, phenolic acids, anthocyanin, tannin, and catechins. ), Quercitin, lutein & zeaxanthin, rutin, hesperidin, resveratrol, beta-carotene, calcium, iron, magnesium, zinc, It contains various organic minerals such as potassium and manganese, and the content of particularly powerful antioxidants, anthocyanins and polyphenols, is known to be the highest among berries. Aronia is known to be effective in improving cardiovascular disease, cancer, diabetes, gastritis and allergic skin diseases as well as antioxidant effects. Recently, aronia is widely used as a raw material for beverages. As an example, techniques related to the production of Aaronia beverages prepared by mixing with fruits of high sugar such as grapes and pears have been developed in Aaronia (Patent No. 10-2017-0093087, Patent No. 10- 1772014).

그러나 활성형 진세노사이드가 함유된 아로니아 음료조성물 및 그 제조방법에 대해서는 알려진 바는 없다.However, there is no known Aaronia beverage composition containing active ginsenosides and a preparation method thereof.

이에 본 발명자들은 종래 기술의 요구에 부응하기 위한 연구를 지속한 결과, 산양삼 전초를 이용하고 특정조건의 고온숙성을 거쳐서 제조된 활성산양삼 농축액을 아로니아 과즙에 첨가하여 제조한 아로니아 음료가 활성형 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2 및 컴파운드 케이를 함유하고, 생리활성성분인 페놀산 및 플라보놀이 상당히 증진됨을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.Therefore, the present inventors have continued the research to meet the demands of the prior art, the result is that the Aaronia beverage prepared by adding a goat goat concentrate prepared by using a goat goat outpost and undergoing high temperature aging under specific conditions to the Aaronia juice Ginsenosides containing Rd, Rd2, Rg3, F2 and compound K, and confirmed that the physiologically active phenolic acid and flavonol are significantly enhanced, the present invention was completed.

따라서 본 발명의 목적은 활성형 진세노사이드를 함유하는 아로니아 음료조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.It is therefore an object of the present invention to provide a process for preparing an Aaronia beverage composition containing an active ginsenoside.

본 발명의 목적은 또 다른 목적은 상기 제조방법에 의해 제조되고, 활성형 진세노사이드를 함유하고 페놀산 및 플라보놀이 증진된 아로니아 음료조성물을 제공하는 것이다.It is another object of the present invention to provide an aronia beverage composition prepared by the above method, containing active ginsenosides and having enhanced phenolic acid and flavonol.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 아로니아 음료조성물을 포함하여 증진된 항산화 활성, 항당뇨 활성 및 항비만 활성을 갖는 기능성식품을 제공하는 것이다.Still another object of the present invention is to provide a functional food having enhanced antioxidant activity, antidiabetic activity and anti-obesity activity, including the Aaronia beverage composition.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기와 같은 단계들을 포함하는 활성형 진세노사이드를 함유하는 아로니아 음료조성물의 제조방법을 제공한다:In order to achieve the above object, the present invention provides a method for preparing an Aaronia beverage composition containing an active ginsenoside comprising the following steps:

ⅰ) 산양삼 전초를 100℃에서 30~60분간 증숙하고 70~90℃에서 2~3일간 고온숙성을 3~5회 반복하여 활성산양삼을 제조하는 단계;Iii) steaming goat goat outpost at 100 ° C. for 30 to 60 minutes and repeating high temperature aging 3 to 5 times at 70 to 90 ° C. for 2-3 days to produce active goat ginseng;

ⅱ) 활성산양삼을 분말화하고 정제수를 첨가하여 추출하는 단계;Ii) powdering active goat ginseng and extracting by adding purified water;

ⅲ) 활성산양삼 추출물을 여과하고 15~25 브릭스로 농축하는 단계;Iii) filtering the active goat ginseng extract and concentrating to 15-25 briquettes;

ⅳ) 아로니아 과즙 100 중량부(v/v)에 활성산양삼 농축액을 2~10 중량부를 혼합하는 단계; 및Iii) mixing 2-10 parts by weight of the active goat ginseng concentrate to 100 parts by weight (v / v) of the aronia juice; And

ⅴ) 혼합액에 부재료 첨가하여 음료를 제조하는 단계. Iii) adding a subsidiary material to the mixed liquid to prepare a beverage.

필요에 따라서, 본 발명의 제조방법은, ⅵ) 음료를 살균하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. If necessary, the production method of the present invention may further comprise the step of iii) sterilizing the beverage.

본 발명에서 ‘산양삼’은 산지에서 차광막 등 인공시설을 설치하지 아니하고 무농약으로 재배되는 삼을 의미한다. In the present invention, 'mountain ginseng' refers to ginseng cultivated as pesticide-free without installing an artificial facility such as a light shielding film in the mountains.

본 발명에서 '전초(全草)'는 삼의 뿌리, 줄기 및 잎을 포함한 전체를 의미한다. In the present invention, 'outpost (全 草)' means the whole, including the root, stem and leaves of hemp.

단계 ⅰ): 활성산양삼 제조Step iii): Preparation of Active Goats

산양삼 전초를 100℃에서 30~60분간 증숙하고 70~90℃에서 2~3일간 고온숙성을 3~5회 반복하여 활성산양삼을 제조한다. Goat ginseng is steamed at 100 ° C. for 30-60 minutes, and high temperature aging is repeated three to five times at 70-90 ° C. to prepare active goat ginseng.

산양삼 전초를 증숙(steaming process)한다. 본 발명에서 산양삼은 3년근 이상을 사용한다. 산양삼을 흐르는 물에 3회 세척하고 물기를 제거한 후 증숙한다. 증숙은 통상의 찜기와 같은 증숙기를 사용하여 수행할 수 있다. 증숙 시간이 30분 미만인 경우 충분한 증숙이 진행되지 않아 숙성과 같은 후속 단계가 원활하지 않을 수 있고 잡균의 오염이 발생될 수 있으며, 60분 초과하여 증숙될 경우는 오랜 열처리로 산양삼 전초의 생리활성성분이 파괴될 수 있으며 특히 잎과 줄기의 생리활성성분이 과다하게 파괴될 수 있다.Steaming goat ginseng outpost (steaming process). Goat ginseng in the present invention uses more than three years. Wash goat ginseng three times in running water, remove water and steam. Steaming can be carried out using a steamer such as a conventional steamer. If the steaming time is less than 30 minutes, sufficient steaming does not proceed, so subsequent steps such as ripening may not be smooth and contamination of various bacteria may occur. This can be destroyed, especially the bioactive components of the leaves and stems can be excessively destroyed.

고온 숙성은 숙성 온도가 70℃ 미만이거나 숙성기간이 2일 미만이거나 숙성 횟수가 3회 미만인 경우 숙성이 원활히 이루어지지 않으며, 숙성온도가 90℃ 초과거나 숙성기간이 3일 초과거나 숙성 횟수가 5회 초과인 경우 생성된 생리활성물질이 분해되어 함량이 감소될 수 있다.High temperature aging is less than 70 ℃, ripening period is less than 2 days, or less than 3 times of aging, aging is not smooth, aging temperature is above 90 ℃, aging period is more than 3 days or 5 times If exceeded, the produced bioactive substance may be decomposed and the content may be reduced.

상기와 같이 제조된 활성산양삼은 산양삼 특유의 삽싸래한 맛이 저감되어 기호성이 향상되면서도 활성형 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2 및 컴파운드 케이의 함량이 현저히 증진된다 (표 1). The active goat ginseng prepared as described above has a reduced taste of goat ginseng, which improves palatability while significantly increasing the contents of the active ginsenosides Rd, Rd2, Rg3, F2 and compound k (Table 1).

단계 ⅱ): 활성산양삼 추출Step ii) Extracting Active Goat

활성산양삼을 분말화하고 정제수를 첨가하여 추출한다. Active ginseng is powdered and extracted by adding purified water.

분말화는 활성산양삼은 50∼55℃에서 2~3일 건조하여 100메쉬 이하로 분쇄하여 수행한다.Powdering is carried out by drying the active goat ginseng 2 to 3 days at 50-55 ℃ to grind to less than 100 mesh.

추출은 활성산양삼 분말에 15~25배 부피(v/w)의 정제수를 가하여 95∼100℃에서 4∼6시간 추출하는 과정을 2~3회 반복하여 추출하여 활성산양삼 추출물을 제조한다.Extraction is performed by adding 15-25 times the volume (v / w) of purified water to the active goat ginseng powder and extracting it repeatedly for two to three times for 4 to 6 hours at 95-100 ° C. to prepare the active goat ginseng extract.

단계 ⅲ): 활성산양삼 농축액 제조Step iii): Preparation of Active Goat Ginseng Concentrate

활성산양삼 추출물을 여과하고 15~25 브릭스로 농축한다. Filter the active goat ginseng extract and concentrate to 15-25 brics.

여과는 9 mm 여과지에 여과하는데, 활성산양삼 분말을 건더기를 제거하여 추출 후 일정한 품질의 활성산양삼 농축액을 제조하기 위함이다.Filtration is filtered on a 9 mm filter paper, to remove the active goat ginseng powder to remove the active goat ginseng concentrate of a certain quality after extraction.

여과액을 70∼100℃로 가열하여 가용성 고형분이 15~25 브릭스(brix)가 되도록 농축하여 활성산양삼 농축액을 제조한다.The filtrate is heated to 70 to 100 ° C. to concentrate the soluble solids to 15 to 25 brics, thereby preparing an active goat ginseng concentrate.

단계 ⅳ) 아로니아 과즙과 활성산양삼 농축액 혼합Step iii) Mixing Aaronia Juice with Active Goat Ginseng Concentrate

아로니아 과즙 100 중량부에 활성산양삼 농축액을 2~10 중량부를 혼합한다. To 100 parts by weight of Aaronia juice Mix 2 to 10 parts by weight.

아로니아 과즙은 1~2배(v/w)의 정제수를 첨가하여 믹서기로 파쇄한 후 여과한 것을 사용하는 것이 바람직하다.Aaronia juicer 1 ~ 2 times (v / w) It is preferable to use purified water after crushing with a blender by adding purified water.

정제수는 아로니아의 떫은맛을 상쇄시키고, 아로나아 과즙 수득율이 높이기 위해 필요에 따라 첨가한다. Purified water counteracts the astringent taste of Aaronia and is added as needed to increase the yield of Aronia juice.

아로니아 과즙 100 중량부에 활성산양삼 농축액을 2~10 중량부를 혼합하는 것이 바람직한데, 2 중량부 미만인 경우인 활성산양삼 유래 활성형 진세노사이드 함량이 충분하지 않을 수 있고, 10 중량부 초과인 경우 원료단가의 상승과 삼 특유 맛과 향이 지나치게 진하여 기호성이 나빠질 수 있다.To 100 parts by weight of Aaronia juice It is preferable to mix 2 to 10 parts by weight, but the active ginseng-derived active ginsenoside content, which is less than 2 parts by weight, may be insufficient. It can be dark and deteriorate in palatability.

단계 ⅴ): 음료 제조Step iii): Beverage Manufacturing

단계 ⅳ)로부터의 혼합액에 부재료 첨가하여 음료를 제조한다. Substances are added to the mixed solution from step iii) to prepare a beverage.

딸기, 사과, 배 등의 과일 농축액, 벌꿀, 구연산, 타우린 등의 부재료를 첨가하여 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물을 완성한다.Fruit concentrates such as strawberries, apples and pears, honey, citric acid and taurine are added to complete the composition of the Aaronia beverage containing the active ginseng.

부재료의 첨가량은 당업자가 기호에 따라 적절하게 정할 수 있으며, 바람직하게는 혼합액의 2 ~ 5 %(v/v) 이다. The addition amount of the subsidiary material can be appropriately determined by those skilled in the art according to the preference, and preferably 2 to 5% (v / v) of the mixed liquid.

단계 ⅵ): 살균Step iii): Sterilization

활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물을 살균하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. Sterilizing active goat ginseng-containing Aaronia beverage composition may be further included.

살균은 과즙 음료에 사용되는 통상의 방식으로 수행할 수 있으며, 바람직하게는 90 ~ 115℃에서 1 ~ 5분간 살균한다. Sterilization can be carried out in the usual manner used for juice drinks, preferably sterilization for 1 to 5 minutes at 90 ~ 115 ℃.

살균은 음료를 용기에 충전한 채, 또는 충전하기 전에 행해질 수 있다. 용기로는 통상의 음료 용기인 유리 용기, PET 용기, 파우치 용기, 도자기 등이 사용될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. Sterilization can be done with or before filling the beverage into the container. As a container, glass containers, PET containers, pouch containers, ceramics, etc., which are conventional beverage containers, may be used, but are not limited thereto.

본 발명의 제조방법에 의해 제조된 아로니아 음료조성물은 활성형 진세노사이드 화합물인 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2 및 컴파운드 케이를 함유하고, 페놀산 및 플라보놀이 증진되어, 우수한 항산화 활성, 항당뇨 활성 및 항비만 활성을 갖는다 (표 3~ 표 5, 도 3a ~ 5b). Aronia beverage composition prepared by the preparation method of the present invention contains the active ginsenoside compounds ginsenosides Rd, Rd2, Rg3, F2 and compound k, and phenolic acid and flavonol enhanced, excellent antioxidant activity , Antidiabetic and anti-obesity activity (Tables 3-5, Figures 3a-5b).

본 발명의 또 다른 목적은 상기 제조방법에 의해 제조된, 활성형 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2 및 컴파운드 케이를 함유하고 페놀산 및 플라보놀이 증진된 아로니아 음료조성물을 제공하는 것이다. It is a further object of the present invention to provide a phenolic acid and flavonol enhanced Aaronia beverage composition containing active ginsenosides Rd, Rd2, Rg3, F2 and compound k, prepared by the above process.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 아로니아 음료조성물을 포함하여 증진된 항산화 활성, 항당뇨 활성 및 항비만 활성을 갖는 기능성식품(음료 등)을 제공하는 것이다. Another object of the present invention to provide a functional food (drinks, etc.) having enhanced antioxidant activity, antidiabetic activity and anti-obesity activity, including the Aaronia beverage composition.

본 발명의 제조방법은 활성형 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2 및 컴파운드 케이를 함유하고, 페놀산 및 플라보놀이 증진된 아로니아 음료조성물을 생산케 한다. The process of the present invention contains the active ginsenosides Rd, Rd2, Rg3, F2 and compound k, and produces phenolic acid and flavonol enhanced Aaronia beverage compositions.

본 발명에 따른 아로니아 음료는 활성형 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2 및 컴파운드 케이를 함유하고 페놀산 및 플라보놀이 증진되고, 더불어 우수한 알파-글루코시다제 저해활성과 췌장 리파제 저해활성도 가져서 항산화 활성, 항당뇨 활성 및 항비만 활성이 증진되어 기능성식품의 소재로 사용될 수 있다.Aronia beverages according to the present invention contains the active ginsenosides Rd, Rd2, Rg3, F2 and compound K, and enhance the phenolic acid and flavonol, and also has excellent alpha-glucosidase inhibitory activity and pancreatic lipase inhibitory activity Antioxidant activity, antidiabetic activity and anti-obesity activity is enhanced and can be used as a material for functional foods.

본 발명에 따른 기능성식품은 우수한 항당뇨 및 항비만 기능성을 가져서, 지방생성 억제효과, 체중 조절, 콜레스테롤 저하, 고지혈증 개선, 동맥경화 완화, 당뇨병 완화, 혈액순환 개선, 면역력 개선용으로 유용하다. Functional food according to the present invention has excellent anti-diabetic and anti-obesity functionality, useful for inhibiting fat production, weight control, cholesterol lowering, hyperlipidemia, arteriosclerosis relief, diabetes relief, blood circulation improvement, immunity improvement.

도 1은 본 발명에 따른 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물의 제조공정의 일례를 나타낸 도면이다.
도 2는 본 발명에 따른 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물의 진세노사이드 HPLC 크로마토그램을 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명에 따른 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물의 생리활성물질 함량을 나타낸 것이다. 도 3a는 총 페놀릭스 함량을 나타낸 것이며, 도 3b는 총 플라보노이드 함량을 나타낸 것이며, 도 3c는 총 안토시안 함량을 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명에 따른 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물의 항산화 활성을 나타낸 것이다. 도 4a는 DPPH 라디칼 소거활성을 나타낸 것이며, 도 4b는 ABTS 라디칼 소거활성을 나타낸 것이며, 도 4c는 하이드록실 라디칼 소거활성을 나타낸 것이며, 도 4d는 FRAP 환원력을 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명에 따른 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물의 소화효소 저해활성을 나타낸 것이다. 도 5a는 알파-글루코시다아제 저해활성을 나타낸 것이며, 도 5b는 췌장-리파아제 저해활성을 나타낸 것이다.
1 is a view showing an example of the manufacturing process of the active goat ginseng-containing Aaronia beverage composition according to the present invention.
Figure 2 shows the ginsenoside HPLC chromatogram of active ginseng-containing Aaronia beverage composition according to the present invention.
Figure 3 shows the bioactive material content of the active goat ginseng-containing Aaronia beverage composition according to the present invention. Figure 3a shows the total phenolics content, Figure 3b shows the total flavonoid content, Figure 3c shows the total anthocyanin content.
Figure 4 shows the antioxidant activity of the active goat ginseng-containing Aaronia beverage composition according to the present invention. FIG. 4A shows DPPH radical scavenging activity, FIG. 4B shows ABTS radical scavenging activity, FIG. 4C shows hydroxyl radical scavenging activity, and FIG. 4D shows FRAP reducing power.
Figure 5 shows the digestive enzyme inhibitory activity of the active goat ginseng-containing Aaronia beverage composition according to the present invention. 5a shows alpha-glucosidase inhibitory activity, and FIG. 5b shows pancreatic-lipase inhibitory activity.

다음의 실시예들에 의해 본 발명이 더 상세히 설명된다. 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되어서는 안된다.The invention is explained in more detail by the following examples. These examples are intended to illustrate the invention and the scope of the invention should not be limited by them.

제조예 1. 활성산양삼 농축액 제조Preparation Example 1 Preparation of Active Goat Ginseng Concentrate

함양군 서상면 일대 해발 500 m 이상에서 재배된 3년근 이상 산양삼을 구입하여 사용하였다. 산양삼 전초 10 kg을 흐르는 물에 3회 세척하고 완전히 물기를 제거한 후 찜기에 담았다. 그리고 나서 100℃에서 30분간 증숙한 후 증숙된 산양삼을 건조 채반에 나란히 담은 후 75℃의 고온에서 수분이 증발되게 하여 2일간 숙성시키는 과정 (증숙 및 고온 숙성 과정)을 4회 반복하여 수행하여 활성산양삼을 제조한 후, 55℃에서 2일 건조시킨 후 분쇄기로 100메쉬 이하로 분쇄하여 분말화하였다 (활성산양삼 분말). 비교를 위하여 산양삼 전초를 55℃에서 2일 건조시킨 후 동일한 방식으로 분말화하였다 (산양삼 분말).Mountain ginseng over 3 years old was grown and used at 500 m above sea level in Seosang-myeon, Hamyang-gun. 10 kg of wild ginseng outposts were washed three times in running water, completely drained, and placed in a steamer. Then, steamed for 30 minutes at 100 ℃ and put the steamed goat ginseng side by side in a dry tray to allow the water to evaporate at a high temperature of 75 2 days of aging (steaming and high temperature aging process) was performed four times repeated Goat ginseng was prepared, dried at 55 ° C. for 2 days, and then pulverized to 100 mesh or less using a grinder to powder (active goat ginseng powder). For comparison, goat ginseng outpost was dried for two days at 55 ° C. and then powdered in the same manner (goat ginseng powder).

활성산양삼 분말 100 g에 정제수를 2 L를 첨가하고 100℃에서 5시간 추출하는 과정을 2회 반복하여 활성산양삼 추출물을 얻었다. 이 활성산양삼 추출물을 9 mm 여과필터를 사용하여 여과하여 얻은 여과액을 100℃ 열을 가하여 가용성 고형분이 20 브릭스(brix)되게 농축하여 활성산양삼 농축액을 제조하였다. 산양삼 분말도 동일하게 진행하여 농축액을 제조하였다. 2 g of purified water was added to 100 g of activated ginseng powder, and the extraction process was repeated twice to obtain an active goat ginseng extract at 100 ° C. for 5 hours. The active goat ginseng extract was filtered using a 9 mm filtration filter, and the filtrate obtained by applying 100 ° C. heat was concentrated to 20 brix so as to prepare an active goat ginseng concentrate. Goat ginseng powder was carried out in the same manner to prepare a concentrate.

<진세노사이드 함량 분석>Ginsenoside Content Analysis

활성산양삼 농축액과 산양삼 농축액 각각 5 ml에 HPLC용 물을 동량으로 가한 후 0.45 ㎛ 여과필터로 여과한 분석시료를 사용하여 진세노사이드 화합물 함량을 분석/비교하였다.5 ml each of active goat ginseng concentrate and goat ginseng concentrate were added with the same amount of HPLC water, and the ginsenoside compound content was analyzed and compared using an analytical sample filtered through a 0.45 μm filtration filter.

진세노사이드 분석은 기능성식품분석법에 기술된 방법을 약간 변형하여 고압액체크로마토그래피(HPLC, high press liquid chromatograph)로 분석하였다. 분석 컬럼은 TSKgel ODS-100Z을 사용하여 시료주입량 10㎕, 온도는 30℃ 측정파장은 203 nm, 유속은 1.0 ml/min으로 하였고 이동상으로는 A용액은 HPLC water, B용액은 아세토니트릴을 사용하였다. HPLC 분석 조건은 이동상 용액은 0분때 A용액 81%:B용액 19%로 흘려주고 15분때에는 A용액 80%:B용액 20%로 흘려주고 40분때 A용액 77%:B용액 23%, 42분때 A용액 70%:B용액 30%, 75분때에 A용액 65%:B용액 35%, 80분때에 A용액 30%:B용액 70%, 90분때에 A용액 10%:B용액 90%로 이동상을 흘려주었다. 활성산양삼 농축액 및 산양삼 농축액의 각각의 진세노사이드 함량을 표 1에 나타내었다.Ginsenoside analysis was analyzed by high press liquid chromatography (HPLC) with a slight modification of the method described in the functional food assay. As an analytical column, TSKgel ODS-100Z was used for the sample injection amount of 10 μl, the temperature was 30 ° C., the wavelength was 203 nm, the flow rate was 1.0 ml / min. As the mobile phase, HPLC solution A and solution B were acetonitrile. HPLC analysis conditions indicated that mobile phase solution flowed into A solution 81%: B solution 19% at 0 minutes, A solution 80%: B solution 20% at 40 minutes, A solution 77%: B solution 23% at 42 minutes, and 42 minutes A solution 70%: B solution 30%, A solution 65% at 75 minutes: A solution 35%, A solution 30% at 80 minutes: B solution 70%, A solution 10% at 90 minutes: B solution 90% Shed it. The ginsenoside contents of the active goat ginseng concentrate and goat ginseng concentrate are shown in Table 1.

진세노사이드 함량1)
(mg/g d.w.)
Ginsenoside content 1)
(mg / g dw)
산양삼 농축액 Goat Ginseng Concentrate 활성산양삼 농축액Active Goat Ginseng Concentrate
Ginsenoside Rg1   Ginsenoside Rg1 ndnd 0.040.04 Ginsenoside Re  Ginsenoside re ndnd 0.020.02 Ginsenoside Ro  Ginsenoside ro 1.441.44 1.461.46 Ginsenoside Rf  Ginsenoside Rf 0.150.15 0.170.17 Ginsenoside F3  Ginsenoside F3 ndnd 0.080.08 Ginsenoside Rg2  Ginsenoside Rg2 0.420.42 0.520.52 Ginsenoside Rh1  Ginsenoside Rh1 0.480.48 0.550.55 Ginsenoside Rb1  Ginsenoside Rb1 0.460.46 0.520.52 Ginsenoside Rd Ginsenoside Rd 0.470.47 0.670.67 Ginsenoside Rd2 Ginsenoside Rd2 0.140.14 0.540.54 Ginsenoside F2 Ginsenoside F2 0.780.78 1.511.51 Ginsenoside Rg3 Ginsenoside Rg3 0.430.43 1.011.01 Ginsenoside Compound K Ginsenoside Compound K 0.470.47 1.381.38 Ginsenoside Rh2  Ginsenoside Rh2 0.050.05 0.100.10 Total GinsenosideTotal Ginsenoside 5.295.29 8.578.57 1)모든 실험은 삼반복 수행하였다.
2)nd, 검출되지 않음.
1) All experiments were repeated three times.
2) nd, not detected.

표 1에 나타낸 바와 같이, 진세노사이드는 각각 5.29 mg/g 8.57 mg/g로 본 발명에 따른 활성산양삼 농축액이 산양삼 농축액 보다 약 1.6배 높은 함량을 보였다. 특히 활성형 진세노사이드인 진세노사이드 Rd, Rd2, F2, Rg3 및 컴파운드 케이(compound K)는 약 2.9배 증진되었다. As shown in Table 1, ginsenosides were 5.29 mg / g 8.57 mg / g, respectively, and the active goat ginseng concentrate according to the present invention showed about 1.6 times higher content than the goat ginseng concentrate. In particular the active ginsenosides ginsenosides Rd, Rd2, F2, Rg3 and compound K (compound K) were enhanced about 2.9-fold.

제조예 2. 활성산양삼 함유 아로니아 음료 제조Preparation Example 2 Preparation of Aronia Beverage Containing Active Goat Ginseng

함양군 서상면 일대에서 재배된 아로니아를 구입하여 사용하였다. 아로니아 10 kg을 흐르는 물에 3회 세척하고 완전히 물기를 제거한 후 동량의 정제수를 가한 후 믹서기를 이용하여 분쇄하고 여과하여 아로니아 과즙을 제조하였다. Aaronia grown in Seosang-myeon, Hamyang-gun was purchased and used. Aronia was washed three times in flowing water 10 kg and completely drained, the same amount of purified water was added, and then pulverized and filtered using a blender to prepare a Aaronia juice.

아로니아 과즙 95 ml에 제조예 1에서 제조한 활성산양삼 농축액 2 ml과 그 외 부재료로서 딸기 농축액 1 ml, 벌꿀 1 ml, 구연산 0.5 g과 타우린 0.5 g을 혼합하고 용기에 담은 후 100℃에서 3분간 살균하여 아로니아 음료조성물(실시예)을 제조하였다. 2 ml of the active goat ginseng concentrate prepared in Preparation Example 1 and 95 ml of aronia fruit juice and 1 ml of strawberry concentrate, 1 ml of honey, 0.5 g of citric acid and 0.5 g of taurine were mixed and placed in a container at 100 ° C. Sterilization for 3 minutes to prepare an Aaronia beverage composition (Example).

산양삼 농축액을 첨가하여 상기와 동일한 방식으로 아로니아 음료(비교예)를 제조하였다.A goat drink (Comparative Example) was prepared in the same manner as above by adding a goat goat concentrate.

<이화학적 특성 분석>Physicochemical Characterization

상기에서 제조된 각각의 음료의 pH는 pH 미터기를 사용하여 측정하였고 총산도는 중화적정법을 통해 수행하여 젖산으로 환산하였으며, 환원당은 Miller의 DNS법을 이용하여 포도당으로 환산하였고, 가용성 고형분은 굴절당도계를 사용하여 측정한 결과를 표 2에 나타내었다.The pH of each beverage prepared above was measured using a pH meter and the total acidity was converted into lactic acid by neutralization titration, and the reducing sugar was converted into glucose using Miller's DNS method, and the soluble solids were refractometer. Table 2 shows the results measured using.

비교예Comparative example 실시예Example pHpH 3.923.92 3.863.86 산도(%, 젖산기준)Acidity (%, lactic acid basis) 1.141.14 1.261.26 환원당(mg/ml)Reducing Sugar (mg / ml) 3.543.54 3.643.64 가용성 고형분(Brix)Soluble Solids (Brix) 18.018.0 21.121.1

상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따라 제조된 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물은 비교예에 비하여 pH는 약간 감소하였고 총산도, 환원당 가용성 고형분은 약간 증가하였다. pH가 높을 경우에는 식품위해미생물 등의 증식이 가능하고, 너무 낮을 경우에는 과다 산이 생성되면 신맛이 강화하여 기호성에 문제가 발생할 수 있는데, 본 발명의 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물은 적당한 산과 당이 생성되어 신맛과 단맛이 적절히 이루어져 있다.As shown in Table 2, the active goat ginseng-containing Aaronia beverage composition prepared according to the present invention had a slight decrease in pH and a slight increase in total acidity and reducing sugar soluble solids compared to the comparative example. If the pH is high, it is possible to proliferate food microorganisms, etc. If the pH is too low, excessive acid is produced, sour taste is enhanced, which may cause problems in palatability. The active goat ginseng-containing Aaronia beverage composition of the present invention has a suitable acid and sugar, so that the acidity and sweetness are appropriately made.

시험예 1. 아로니아 음료조성물의 활성형 진세노사이드 함량 분석Test Example 1 Analysis of Active Ginsenoside Content of Aaronia Beverage Composition

상기 제조예 2에서 제조된 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물에 대한 활성형 진세노사이드 함량을 분석하였다. The active ginsenoside content of the active goat ginseng-containing Aaronia beverage composition prepared in Preparation Example 2 was analyzed.

<분석시료 및 진세노사이드 화합물 분석>Analytical Sample and Ginsenoside Compound Analysis

제조예 2에서 제조된 각각의 아로니아 음료 (실시예, 비교예)를 3,000 rpm의 속도로 원심분리하여 상등액만을 취하여 0.45μm 필터로 여과하고 이 여과액을 시료로 사용하여 상기 제조예 1에 기술된 대로 진세노사이드 함량을 분석하였고, 각 HPLC 크로마토그램을 도 2에 나타내고, 활성형 진세노사이드 화합물의 함량을 표 3에 나타내었다. Each Aaronia beverage (Example, Comparative Example) prepared in Preparation Example 2 was centrifuged at a rate of 3,000 rpm, and only the supernatant was collected and filtered through a 0.45 μm filter, and the filtrate was used as a sample to describe the preparation in Example 1. The ginsenoside content was analyzed as shown, and each HPLC chromatogram is shown in FIG. 2 and the content of the active ginsenoside compound is shown in Table 3.

진세노사이드 함량1 )
(mg/g d.w.)
Ginsenoside content 1 )
(mg / g dw)
비교예
(산양삼 함유 아로니아 음료)
Comparative example
(Goat Ginseng-containing Aaronia Drink)
실시예
(활성산양삼 함유 아로니아 음료)
Example
(Aronia drink containing active wild ginseng)
Ginsenoside Rd  Ginsenoside Rd ndnd 0.040.04 Ginsenoside Rd2  Ginsenoside Rd2 ndnd 0.030.03 Ginsenoside F2  Ginsenoside F2 ndnd 0.100.10 Ginsenoside Rg3  Ginsenoside Rg3 ndnd 0.090.09 Ginsenoside Compound K  Ginsenoside Compound K ndnd 0.090.09 총 GinsenosideTotal Ginsenoside 00 0.350.35 1)모든 실험은 삼반복 수행하였다.
2)nd, 검출되지 않음.
1) All experiments were repeated three times.
2) nd, not detected.

표 3과 도 2에 나타낸 바와 같이, 비교예의 산양삼 함유 아로니아 음료는 활성형 진세노사이드가 전혀 검출되지 않은 반면에, 본 발명에 따른 실시예의 활성산양삼 함유 아로니아 음료는 활성형 진세노사이드 Rd, Rd2, F2, Rg3 및 컴파운드 케이가 유의한 함량으로 함유됨이 확인되었다.As shown in Table 3 and Fig. 2, while the active ginseng-containing aronia beverage of the comparative example was not detected at all active ginsenoside, the active ginseng-containing aronia beverage of the example according to the present invention was activated ginsenoside Rd. , Rd2, F2, Rg3 and compound k was found to contain a significant amount.

시험예 2. 아로니아 음료조성물의 생리활성물질 함량 분석Test Example 2 Analysis of Biologically Active Compound Content in Aaronia Beverage Composition

아로니아 음료조성물의 생리활성성분인 총 페놀릭스, 총 플라보노이드, 총 안토시안 함량을 분석하였다.The total phenolics, total flavonoids, and total anthocyanin contents of bioactive components of the Aronia beverage composition were analyzed.

<총 페놀릭스 함량><Total Phenolic Content>

총 페놀릭스 함량은 Folin Denis법(1912)으로 측정하였다. Total phenolic content was measured by Folin Denis method (1912).

구체적으로는 시험예 1에서와 같이 준비된 각각의 여과액 시료를 시험관에 0.5 ml 분주한 후, 25% Na2CO3 용액 0.5 ml를 첨가하여 3분간 정치시켰다. 다시 2N-Folin-Ciocalteu 페놀 시약 0.25 ml를 첨가하여 혼합한 다음 30℃에서 1시간 동안 정치시킨 후 750 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 총 페놀릭스 함량은 갈산을 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 함량을 구하여 갈산(Gallic acid)에 상당하는 양으로 계산하였고 그 결과를 도 3a에 나타냈다.Specifically, 0.5 ml of each filtrate sample prepared as in Test Example 1 was dispensed into a test tube, and then 0.5 ml of 25% Na 2 CO 3 solution was added thereto and allowed to stand for 3 minutes. Then, 0.25 ml of 2N-Folin-Ciocalteu phenolic reagent was added thereto, mixed, and allowed to stand at 30 ° C. for 1 hour, and then absorbance was measured at 750 nm. At this time, the total phenolics content was calculated from the standard curve prepared by using gallic acid to calculate the amount corresponding to gallic acid, and the results are shown in FIG. 3A.

<총 플라보노이드 함량>Total Flavonoid Content

총 플라보노이드 함량은 Davis 변법으로 측정하였다. Total flavonoid content was determined by the Davis method.

시험예 1에서와 같이 준비된 각각의 여과액 시료 0.1 ml에 1 N NaOH 0.01 ml를 첨가한 후 디에틸렌글리콜 1.0 ml를 첨가하여 37℃에서 1시간 방치 후 420 nm 흡광도를 측정하였다. 이때 총 플라보노이드 함량은 루틴(rutin)의 최종 농도를 0, 0.25, 0.5, 1.0 mg/ml로 제조하여 작성한 표준곡선으로부터 함량을 구하였고 그 결과는 도 3b에 나타내었다. 0.01 ml of 1 N NaOH was added to 0.1 ml of each filtrate sample prepared as in Test Example 1, and 1.0 ml of diethylene glycol was added thereto, and the absorbance was measured at 420 nm for 1 hour. In this case, the total flavonoid content was calculated from a standard curve prepared by preparing final concentrations of rutin at 0, 0.25, 0.5, and 1.0 mg / ml, and the results are shown in FIG. 3B.

<총 안토시안 함량><Total Anthocyanin Content>

총 안토시안(anthocyanins)은 Francis(1989)가 제안한 방법으로 Lambert-Beer 법칙을 적용하여 정량하였다. Total anthocyanins were quantified by applying the Lambert-Beer law by the method proposed by Francis (1989).

시험예 1에서와 같이 준비된 각각의 여과액 시료를 3차 증류수로 10배 희석하고, 원심분리한 후 상등액을 1 ml를 두께 10 mm quartz cell에 분주한 다음 분광광도계 530 nm에서 측정한 후 다음 식으로 안토시안 함량을 구하였고, 그 결과를 도 3c에 나타내었다:Each filtrate sample prepared as in Test Example 1 was diluted 10-fold with tertiary distilled water, and after centrifugation, 1 ml of the supernatant was dispensed into a 10 mm thick quartz cell and measured at 530 nm. The anthocyanin content was determined as shown in FIG. 3C:

총 안토시안 = 흡광도(OD530 nm) ÷98.2 (안토시안의 흡광계수)Total anthocyanate = absorbance (OD530 nm) ÷ 98.2 (absorption coefficient of anthocyanin)

도 3a ~ 도 3c에 나타낸 바와 같이, 비교예 아로니아 음료(산양삼 함유)에 비하여, 본 발명에 따른 실시예의 아로니아 음료(활성산양삼 함유)의 총 페놀릭스, 총 플라보노이드 및 총 안토시안 함량이 더 높았다 (각각 2.72, 13.66 및 2.87 mg/ml).As shown in Figs. 3a to 3c, the total phenolics, total flavonoids and total anthocyanin contents of the Aaronia beverages (containing active goat ginseng) of the examples according to the present invention were higher than those of the comparative example Aaronia beverages (containing goats). (2.72, 13.66 and 2.87 mg / ml, respectively).

시험예Test Example 3.  3. 아로니아Aaronia 음료조성물의 페놀산 및  Phenolic Acids in Beverage Compositions 플라보놀Flavonol 분석 analysis

아로니아 음료조성물의 페놀산 및 플라보놀을 분석하였다.Phenolic acid and flavonols of the Aaronia beverage composition were analyzed.

페놀산과 플라보놀 함량 분석은 시험예 1에서와 같이 준비된 각각의 여과액 시료에 대해 HPLC(high performance liquid chromatography)를 사용하여 분석하였다.Phenolic acid and flavonol content analysis was performed using high performance liquid chromatography (HPLC) for each filtrate sample prepared as in Test Example 1.

분석 컬럼은 XBridgeTM C18(4.6mm, 5 ㎛, Waters Corp., Milford, MA, USA) 컬럼을 사용하였고 0.5% 글라시알 아세트산 (glacial acetic acid, 이동상 용매 A)와 100% 메탄올(이동상 용매 B)을 0~100% 선형 구배(linear gradient)로 30℃에서 60분간 1분당 1 ml의 속도로 가동하면서 UV 검출기로 페놀산(280 nm)과 플라보놀(270 nm)을 검출하였고 결과는 표 4와 표 5에 나타내었다.The analytical column used an XBridge C18 (4.6 mm, 5 μm, Waters Corp., Milford, MA, USA) column, with 0.5% glacial acetic acid (mobile phase solvent A) and 100% methanol (mobile phase solvent B) Phenolic acid (280 nm) and flavonol (270 nm) were detected by UV detector while operating at a rate of 1 ml per minute for 60 minutes at 30 ° C with a 0-100% linear gradient. Table 5 shows.

함량 (μg/ml)1) Content (μg / ml) 1) 비교예
(산양삼 함유 아로니아 음료)
Comparative example
(Goat Ginseng-containing Aaronia Drink)
실시예 (활성산양삼 함유 아로니아 음료)Example (Active Goat Ginseng-containing Aaronia Drink)
Gallic acidGallic acid 10.39 10.39 11.37 11.37 Protocatechuic acidProtocatechuic acid ndnd 3.25 3.25 Chlorgenic acidChlorgenic acid 228.24 228.24 239.34 239.34 p-Hydrobenzoic acidp-Hydrobenzoic acid 134.77 134.77 151.19 151.19 Vanillic acidVanillic acid 14.05 14.05 18.03 18.03 Ferulic acidFerulic acid 13.3313.33 22.30 22.30 1)모든 실험은 삼반복 수행하였음.
2)nd, 검출되지 않음.
1) All experiments were repeated three times.
2) nd, not detected.

표 4에 나타낸 바와 같이, 비교예에 비하여, 본 발명에 따른 아로니아 음료가 모든 페놀산의 함량이 높았고, 특히 프로토카테큐산은 새로이 생성되었다. As shown in Table 4, compared to the comparative example, the Aaronia beverage according to the present invention had a high content of all phenolic acids, in particular protocatecuic acid was newly produced.

함량 (μg/ml)1) Content (μg / ml) 1) 비교예
(산양삼 함유 아로니아 음료)
Comparative example
(Goat Ginseng-containing Aaronia Drink)
실시예 (활성산양삼 함유 아로니아 음료)Example (Active Goat Ginseng-containing Aaronia Drink)
EpigallocatechinEpigallocatechin 228.51 228.51 231.96231.96 EpicatechinEpicatechin 34.72 34.72 49.15 49.15 RutinRutin 79.14 79.14 89.55 89.55 QuercetinQuercetin 123.44123.44 149.16 149.16 NaringinNaringin 67.28 67.28 86.92 86.92 1)모든 실험은 삼반복 수행하였음. 1) All experiments were repeated three times.

표 5에 나타낸 바와 같이, 비교예에 비하여, 본 발명에 따른 아로니아 음료가 모든 플라보놀의 함량이 높았고, 특히 에피카테킨, 쿼르세틴 등은 훨씬 증진되었다. As shown in Table 5, compared to the comparative example, the Aronia beverages according to the present invention had a high content of all flavonols, especially epicatechin, quercetin, and the like.

시험예Test Example 4.  4. 아로니아Aaronia 음료조성물의 항산화 활성 분석 Antioxidant Activity Analysis of Beverage Composition

본 발명에 따른 아로니아 음료조성물의 항산화 활성은 DPPH, ABTS, 하이드록실(

Figure 112017116845377-pat00001
OH) 라디칼 소거활성 및 FRAP 환원력을 측정하여 분석하였다. Antioxidant activity of the Aaronia beverage composition according to the present invention is DPPH, ABTS, hydroxyl (
Figure 112017116845377-pat00001
OH) radical scavenging activity and FRAP reducing power were measured and analyzed.

<분석시료><Analysis sample>

시험예 1에서와 같이 준비된 각각의 여과액 시료의 원액(0배), 5배, 10배 부피(v/v)로 희석하여 제조한 분석시료를 사용하였다.An analytical sample prepared by diluting the stock solution (0 times), 5 times and 10 times volume (v / v) of each filtrate sample prepared as in Test Example 1 was used.

<DPPH 라디칼 소거활성>DPPH radical scavenging activity

DPPH 라디칼 소거활성은 상기에서 준비된 분석시료 (각각의 원액, 5배 희석, 10배 희석의 농도 3가지) 0.2 ml에, DPPH 용액(1.5-4 M) 0.8 ml를 첨가하여 균일하게 혼합한 30분간 방치한 후 525 nm에서 흡광도를 측정하여 수행하였다. DPPH 라디칼 소거활성의 음성 대조구는 시료 대신 증류수를 사용하여 동일한 방법으로 진행하여 흡광도의 차이를 다음 식에 의해 백분율(%)로 산출하였으며, 그 결과를 도 4a에 도시하였다. DPPH radical scavenging activity was added to 0.2 ml of the analytical sample prepared above (three concentrations of each stock solution, 5 times dilution, and 10 times dilution), and 0.8 ml of DPPH solution (1.5 -4 M) was added and mixed for 30 minutes. After standing, absorbance was measured at 525 nm. Negative control of DPPH radical scavenging activity was carried out in the same manner using distilled water instead of the sample to calculate the difference in absorbance as a percentage (%) by the following equation, the results are shown in Figure 4a.

라디칼 소거활성(%) = [1-(음성대조구 흡광도 ÷실험구 흡광도)]% Radical scavenging activity = [1- (negative control absorbance ÷ experimental absorbance)]

<ABTS 라디칼 소거활성>ABTS radical scavenging activity

ABTS 라디칼 소거활성은 7 mM ABTS 시약 5 ml과 140 mM K2S2O8 (FW 270.3, Sigma 9392) 5 ml을 섞어 어두운 곳에 16시간 방치시켜 양이온 라디칼을 생성시킨 후, 이를 메탄올로 섞어 732 nm에서 대조구의 흡광도 값이 0.7가 되도록 조절한 ABTS 용액을 사용하였다. 상기에서 준비된 분석시료 (각각 원액, 5배 희석, 10배 희석의 농도 3가지) 0.1 ml과 ABTS 용액 0.9 ml를 혼합하여 3분간 반응시키고 732 nm에서 흡광도를 측정하였다. ABTS 라디칼 저해활성 역시 음성 대조구는 시료 대신 증류수를 사용하여 동일한 방법으로 진행하여 흡광도의 차이를 상기 식에 의해 백분율(%)로 산출하였으며, 그 결과를 도 4b에 도시하였다. For ABTS radical scavenging activity, 5 ml of 7 mM ABTS reagent and 5 ml of 140 mM K 2 S 2 O 8 (FW 270.3, Sigma 9392) were mixed and left for 16 hours in a dark place to generate a cationic radical. ABTS solution was adjusted so that the absorbance value of the control was 0.7. 0.1 ml of the analyte sample prepared above (three stock solutions, 5 times dilution and 10 times dilution, respectively) and 0.9 ml of ABTS solution were mixed for 3 minutes and absorbance was measured at 732 nm. The negative control of ABTS radical inhibition activity was also proceeded in the same manner using distilled water instead of the sample to calculate the difference in absorbance as a percentage (%) by the above formula, and the results are shown in FIG. 4B.

<하이드록실(OH) 라디칼 소거활성><Hydroxyl (OH) radical scavenging activity>

하이드록실(OH) 라디칼 소거활성 측정은 10 mM FeSO4 .7H20-EDTA 0.2ml, 10 mM 2-데옥시리보스 0.2 ml, 10 mM H2O2 0.2 ml, 상기에서 준비된 분석시료 (각각 원액, 5배 희석, 10배 희석의 농도 3가지) 1.4 ml 혼합한 뒤 37℃에서 4시간 동안 반응시켜 혼합액을 만든 후, 이 혼합액에 1% 티오바르비투르산(thiobarbituric acid)/증류수와 2.8% 트리클로로아세트산(trichloroaceric acid)/증류수를 각각 1 ml를 가하여 100℃에서 20분간 발색시켜 냉각시킨 후 520 nm에서 흡광도를 측정하여 행하였다. 하이드록실 라디칼 소거활성은 시료 용액의 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도의 차이를 상기 식에 의해 % 값을 산출하였고, 그 결과를 도 4c에 나타냈다.The hydroxyl (OH) radical scavenging activity was measured in 10 mM FeSO 4 . 7 ml of 7H 2 0-EDTA, 0.2 ml of 10 mM 2-deoxyribose, 0.2 ml of 10 mM H 2 O 2 , 1.4 ml of the assay sample prepared above (stock, 5 times dilution, 3 concentrations of 10 times dilution) 1.4 ml After mixing, the mixture was reacted at 37 ° C. for 4 hours to form a mixed solution. To the mixed solution, 1 ml of 1% thiobarbituric acid / distilled water and 2.8% trichloroaceric acid / distilled water were added to 100 ml. After cooling by developing for 20 minutes at ℃, absorbance was measured at 520 nm. As for the hydroxyl radical scavenging activity, the difference in absorbance between the added and non-added spheres of the sample solution was calculated as a% value by the above formula, and the results are shown in FIG. 4C.

<FRAP 환원력 분석><FRAP reducing power analysis>

FRAP (Ferric reducing antioxidant power) 환원력 분석은 화합물의 환원력을 측정하는 방법으로 Fe3+를 Fe2+로 환원시키는 힘을 측정하는 방법이다. 구체적으로는 FeⅢ-TPTZ(ferric tripyridyl triazine)가 시료의 환원력에 의하여 푸른색의 FeⅡ-TPTZ(ferrous tripyridyl triazine)으로 환원될 때 흡광도를 측정하여 항산화성을 알아보는 것이다. Ferric reducing antioxidant power (FRAP) is a method of measuring the reducing power of a compound. Specifically, when the Fe III-TPTZ (ferric tripyridyl triazine) is reduced to blue Fe II-TPTZ (ferrous tripyridyl triazine) by the reducing power of the sample to determine the antioxidant properties by measuring the absorbance.

FRAP 환원력 분석에서 반응액으로는 30 mM 아세테이트 완충액(pH 3.6), 40 mM 염산에 녹인 10 mM 2,4,6-트리피리딜-s-트리아진(TPTZ, T1253, C18H12N6, MW312.33) 및 20mM FeCl3(F7134, MW 162.20, in DW)를 준비하였으며, 아세테이트 완충액, TPTZ 용액 및 FeCl3 용액을 10:1:1 (v/v/v)로 혼합하여 37℃에서 15분간 예비반응을 시켜두었다. 상기에서 준비된 시료(각각 원액, 5배 희석, 10배 희석의 농도 3가지) 50 ㎕와 FRAP 시약 950 ㎕를 시험관에 분주한 후 약 15분간 반응시키고 마이크로플레이트 리더 (Biorad 3055, Sweden)를 사용하여 593 nm에서 흡광도를 측정하여 그 결과를 도 4d에 나타냈다.The reaction solution in FRAP reducing power assay was 30 mM acetate buffer (pH 3.6), 10 mM 2,4,6-tripyridyl-s-triazine (TPTZ, T1253, C18H12N6, MW312.33) dissolved in 40 mM hydrochloric acid, and 20 mM FeCl 3 (F7134, MW 162.20, in DW) was prepared, and the acetate buffer, the TPTZ solution and the FeCl 3 solution were mixed at 10: 1: 1 (v / v / v) and preliminarily reacted at 37 ° C. for 15 minutes. Dispense 50 μl of the sample prepared above (three concentrations of the stock solution, 5 times dilution, and 10 times dilution) and 950 μl of FRAP reagent into a test tube, and react for about 15 minutes using a microplate reader (Biorad 3055, Sweden). The absorbance was measured at 593 nm and the result is shown in FIG. 4D.

도 4a ~ 도 4d에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예의 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물은, 비교예 (산양삼 함유 아로니아 음료)에 비하여, DPPH, ABTS, 하드록실 라디칼의 소거활성 및 FRAP 환원력이 상당히 증진되었고, 특히 낮은 농도에서 더 두드러졌다. 5배 희석 농도의 경우, DPPH 라디칼 소거활성은 비교예가 55.76%, 실시예가 65.33%이었고, ABTS 라디칼 소거활성은 비교예가 79.77%, 실시예가 96.44%였고, 하이드록실 라디칼 소거활성은 비교예가 32.19%, 실시예가 46.77%였고, FRAP 환원력은 비교예가 1.366, 실시예가 1.714였다. As shown in Figures 4a to 4d, the active goat ginseng-containing aronia beverage composition of the embodiment according to the present invention, compared to the comparative example (goats ginseng-containing aronia beverage), scavenging activity and FRAP of DPPH, ABTS, hardoxy radicals Reducing power was significantly enhanced, especially at lower concentrations. In case of 5-fold dilution concentration, DPPH radical scavenging activity was 55.76% in the comparative example and 65.33% in the example, ABTS radical scavenging activity was 79.77% in the comparative example and 96.44% in the example, and hydroxyl radical scavenging activity was 32.19% in the comparative example, The Example was 46.77%, the FRAP reducing power was Comparative Example 1.366 and Example 1.714.

시험예Test Example 5.  5. 아로니아Aaronia 음료조성물의 소화효소 저해활성 검정 Digestive enzyme inhibitory activity assay of beverage composition

본 발명에 따른 아로이나 음료조성물에 대해 항당뇨(당뇨 개선) 효과의 지표인 알파-글루코시다아제 저해활성을 검정하였고, 항비만(비만 개선) 지표인 췌장 리파아제 저해활성을 검정하였다. Alpha-glucosidase inhibitory activity, which is an indicator of antidiabetic (diabetic improvement) effect, was assayed, and pancreatic lipase inhibitory activity, which is an indicator of anti-obesity (improved obesity), was assayed.

<알파-글루코시다아제 저해활성>Alpha-glucosidase inhibitory activity

알파-글루코시다아제 저해활성은 상기 시험예 4에서 준비된 분석시료 (각각 원액, 5배 희석, 10배 희석의 농도 3가지) 50 ㎕에 0.5 U/ml 알파-글루코시데이즈 효소액 50 ㎕를 첨가하고 200 mM 인산나트륨 완충액(pH 6.8) 50 ㎕를 혼합하여 37℃에서 10분간 예비 배양한 후, 인산나트륨 완충액(pH 6.8)을 100 ㎕ 첨가하여 37℃에서 10 분간 반응시켰다. 반응액에 100 mM Na2CO3 0.75 ml를 첨가하여 반응을 정지시키고 420 nm에서 흡광도를 측정하였으며 음성 대조구는 시료 대신 증류수를 사용하여 동일한 방법으로 진행하여 흡광도의 차이를 다음 식에 의해 백분율(%)로 산출하였으며, 그 결과를 도 5a에 도시하였다. To the alpha-glucosidase inhibitory activity, 50 μl of 0.5 U / ml alpha-glucosidase enzyme solution was added to 50 μl of the assay sample prepared in Test Example 4 (three concentrations of the stock solution, 5 times dilution, and 10 times dilution, respectively). 50 μl of 200 mM sodium phosphate buffer (pH 6.8) was mixed and preincubated at 37 ° C. for 10 minutes, and then 100 μl of sodium phosphate buffer (pH 6.8) was added and reacted at 37 ° C. for 10 minutes. 0.75 ml of 100 mM Na 2 CO 3 was added to the reaction mixture to stop the reaction, and the absorbance was measured at 420 nm. The negative control proceeded in the same manner using distilled water instead of the sample. ), And the result is shown in FIG. 5A.

저해활성(%) = [1-(음성대조구 흡광도 ÷실험구 흡광도)] ×100Inhibitory activity (%) = [1- (negative control absorbance ÷ experimental absorbance)] × 100

도 5a에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예의 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물은, 비교예 (산양삼 함유 아로니아 음료)에 비하여, 알파-글루코시다아제 저해활성이 현저히 증진되었고, 특히 5배 희석 농도의 경우 약1.4배 증진된 것을 확인할 수 있다.As shown in Figure 5a, the active goat ginseng-containing aronia beverage composition of the embodiment according to the present invention, compared with the comparative example (goat ginseng-containing aronia beverage), the alpha-glucosidase inhibitory activity was significantly enhanced, especially 5 times In the case of dilution concentration, it can be seen that the improvement was about 1.4 times.

<췌장-리파아제 저해활성>Pancreatic-lipase inhibitory activity

췌장-리파아제 저해활성은 상기 시험예 4에서 준비된 분석시료(각각 원액, 5배 희석, 10배 희석의 농도 3가지) 50 ㎕, 1.0 U/ml 췌장 리파아제 효소액 50 ㎕, 200 mM 인산나트륨 완충액(pH 6.8) 50 ㎕를 혼합하여 37℃에서 10분간 예비 배양한 후, 인산나트륨 완충액(pH 6.8)을 100 ㎕ 가하여 37℃에서 10 분간 반응시켰다. 이 반응액에 100 mM Na2CO3 0.75 ml를 첨가하여 반응을 정지시키고 420 nm에서 흡광도를 측정하고 음성 대조구는 증류수를 사용하여 동일한 방법으로 진행하여 흡광도의 차이를 상기 식에 의해 백분율(%)로 산출하였으며, 그 결과를 도 5b에 도시하였다. Pancreatic-lipase inhibitory activity was measured in 50 μl of the sample prepared in Test Example 4 (three concentrations of the stock solution, 5 times dilution and 10 times dilution, respectively) 50 μl of 1.0 U / ml pancreatic lipase enzyme solution and 200 mM sodium phosphate buffer (pH). 6.8) 50 μl of the mixture was preincubated at 37 ° C. for 10 minutes, and then 100 μl of sodium phosphate buffer (pH 6.8) was added thereto, followed by reaction at 37 ° C. for 10 minutes. 0.75 ml of 100 mM Na 2 CO 3 was added to the reaction solution to stop the reaction, and the absorbance was measured at 420 nm. The negative control proceeded in the same manner using distilled water, and the difference in absorbance was expressed by the percentage (%) according to the above formula. It was calculated as, and the result is shown in Figure 5b.

도 5b에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예의 활성산양삼 함유 아로니아 음료조성물은, 비교예 (산양삼 함유 아로니아 음료)에 비하여, 췌장 리파아제 저해활성이 상당히 증진되었다 (원액의 경우 비교예는 38.57%, 실시예는 46.22%).As shown in Figure 5b, the active goat ginseng-containing aronia beverage composition of the embodiment according to the present invention, the pancreatic lipase inhibitory activity was significantly improved compared to the comparative example (goat ginseng-containing aronia beverage) (Comparative example for the stock solution 38.57%, Example 46.22%).

상기 기능성 검정 결과들로부터, 본 발명에 따른 활성산양삼 함유 아로니아 음료는 활성형 진세노사이드인 진세노사이드 Rd, Rd2, Rg3, F2와 컴파운드 케이를 함유하고, 페놀산 및 플라보놀이 증진될 뿐만 아니라 항산화 활성, 알파-글루코시다제 저해활성과 췌장 리파제 저해활성도 증진되어 우수한 항산화, 항당뇨 및 항비만 활성을 갖는 기능성 음료라는 것을 알 수 있다.From the above functional assay results, the active goat ginseng-containing aronia beverage according to the present invention contains the active ginsenosides ginsenosides Rd, Rd2, Rg3, F2 and compound k, and not only phenolic acid and flavonol are enhanced. In addition, antioxidant activity, alpha-glucosidase inhibitory activity and pancreatic lipase inhibitory activity is also enhanced, it can be seen that it is a functional beverage having excellent antioxidant, antidiabetic and anti-obesity activity.

Claims (4)

활성형 진세노사이드를 함유하고 페놀산 및 플라보놀이 증진된 아로니아 음료조성물의 제조방법으로, 상기 방법은
ⅰ) 산양삼 전초를 100℃에서 30~60분간 증숙하고 70~90℃에서 2~3일간 고온숙성을 3~5회 반복하여 활성산양삼을 제조하는 단계;
ⅱ) 활성산양삼을 분말화하고 정제수를 첨가하여 95∼100℃에서 4~6시간 추출하는 과정을 2~3회 반복하여 추출하는 단계;
ⅲ) 활성산양삼 추출물을 여과하고 100℃로 가열하여 15~25 브릭스로 농축하는 단계;
ⅳ) 아로니아 과즙 100 중량부에 활성산양삼 농축액을 2~10 중량부를 혼합하는 단계; 및
ⅴ) 혼합액에 부재료를 2~5 %(v/v) 첨가하여 음료를 제조하는 단계를 포함하고,
상기 부재료는 딸기, 사과 및 배로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 과일 농축액과, 벌꿀, 구연산 및 타우린이고,
상기 활성형 진세노사이드는 진세노사이드 Rd 0.04 mg/g 이상, Rd2 0.03 mg/g 이상, F2 0.10 mg/g 이상 및 컴파운드 케이 0.09 mg/g 이상을 포함하고, 상기 페놀산은 프로토카테큐산 3.25 ㎍/ml 이상을 포함하고, 상기 플라보놀은 에피카테킨 49.15 ㎍/ml 이상 및 쿼르세틴 149.16 ㎍/ml 이상을 포함하는 것인 제조방법.
A process for preparing an Aaronia beverage composition containing active ginsenosides and having enhanced phenolic acid and flavonol,
Iii) steaming goat goat outpost at 100 ° C. for 30 to 60 minutes and repeating high temperature aging 3 to 5 times at 70 to 90 ° C. for 2-3 days to produce active goat ginseng;
Ii) pulverizing the active goat ginseng and extracting the extracted ginseng 2 to 3 times by adding purified water for 4 to 6 hours at 95 to 100 ° C .;
Iii) filtering the active goat ginseng extract, heating to 100 ° C. and concentrating to 15-25 brix;
Iii) mixing 2 to 10 parts by weight of the active goat ginseng concentrate to 100 parts by weight of aronia juice; And
Iii) adding a 2-5% (v / v) subsidiary material to the mixed solution to prepare a beverage,
The submaterial is at least one fruit concentrate selected from the group consisting of strawberries, apples and pears, honey, citric acid and taurine,
The active ginsenoside comprises at least 0.04 mg / g ginsenoside, at least 0.03 mg / g Rd2, at least 0.10 mg / g F2 and at least 0.09 mg / g compound K, wherein the phenolic acid is 3.25 μg of protocatecuic acid. / ml or more, wherein the flavonol is 49.15 μg / ml or more of epicatechin and 149.16 μg / ml or more of quercetin.
삭제delete 제 1항에 따른 방법에 의해 제조되고, 활성형 진세노사이드를 함유하고 페놀산 및 플라보놀이 증진된 아로니아 음료조성물로,
상기 활성형 진세노사이드는 진세노사이드 Rd 0.04 mg/g 이상, Rd2 0.03 mg/g 이상, F2 0.10 mg/g 이상 및 컴파운드 케이 0.09 mg/g 이상을 포함하고, 상기 페놀산은 프로토카테큐산 3.25 ㎍/ml 이상을 포함하고, 상기 플라보놀은 에피카테킨 49.15 ㎍/ml 이상 및 쿼르세틴 149.16 ㎍/ml 이상을 포함하는 것인 아로니아 음료조성물.
Prepared by the process according to claim 1, containing active ginsenosides, phenolic acid and flavonol enhanced Aaronia beverage compositions,
The active ginsenoside comprises at least 0.04 mg / g ginsenoside, at least 0.03 mg / g Rd2, at least 0.10 mg / g F2 and at least 0.09 mg / g compound K, wherein the phenolic acid is 3.25 μg of protocatecuic acid. / ml or more, wherein the flavonol is at least 49.15 μg / ml of epicatechin and quercetin 149.16 μg / ml or more of the Aaronia beverage composition.
제 3항에 있어서, 상기 아로니아 음료조성물은 증진된 항당뇨 활성 및 항비만 활성을 갖는 것인 아로니아 음료조성물.4. The Aaronia beverage composition of claim 3, wherein the Aaronia beverage composition has enhanced antidiabetic and anti-obesity activity.
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