KR101972947B1 - Method for evaluating the pretreatment state of biomass - Google Patents

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Abstract

본 발명은 바이오매스의 전처리 상태 평가방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 물리적 방법 또는 화학적 방법에 의해 전처리된 바이오매스의 전처리 상태를 간단한 방법으로 비교적 정확하게 평가할 수 있는 바이오매스의 전처리 상태 평가방법에 관한 것이다. 이를 위해 바이오매스의 전처리 상태 평가방법은 바이오매스를 전처리하는 제1단계; 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루(astra blue) 용액을 혼합하는 제2단계; 및 원심분리하여 바이오매스를 가라 앉히고, 상층액을 분리하여 흡광도를 측정하는 제3단계;를 포함하는 것을 특징으로 한다.The present invention relates to a method for evaluating a pretreatment state of a biomass, and more particularly, to a method for evaluating a pretreatment state of a biomass, which can relatively accurately evaluate a pretreatment state of a biomass pretreated by a physical method or a chemical method . For this purpose, a method for evaluating the pretreatment state of biomass includes a first step of pretreatment of biomass; A second step of mixing the pretreated biomass with an astra blue solution; And a third step of centrifugally separating the biomass, separating the supernatant, and measuring absorbance.

Description

바이오매스의 전처리 상태 평가방법{METHOD FOR EVALUATING THE PRETREATMENT STATE OF BIOMASS}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to biomass,

본 발명은 바이오매스의 전처리 상태 평가방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 물리적 방법 또는 화학적 방법에 의해 전처리된 바이오매스의 전처리 상태를 아스트라 블루 용액을 이용하여 비교적 정확하게 평가할 수 있는 바이오매스의 전처리 상태 평가방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for evaluating a pretreatment state of a biomass, and more particularly, to a pretreatment state of a biomass that can be relatively accurately evaluated using an astra blue solution, by pretreatment of a biomass pretreated by a physical method or a chemical method And an evaluation method.

바이오매스는 일반적으로 에너지로 이용할 수 있는 식물이나 생물을 의미하며, 신재생에너지의 한 분야인 바이오에너지의 자원이라 할 수 있다. 바이오매스는 에너지전용 작물과 나무, 농산품과 사료작물, 농작 폐기물과 찌꺼기, 임산 폐기물과 부스러기, 수초, 축산 폐기물 등이 있다. 바이오매스는 광역 분산형 자원이라는 특성상 지역 에너지원으로 주목받고 있으며, 에너지원으로서의 장점은 재생이 가능하고, 물과 온도 조건만 맞으면 지구상 어느 곳에서나 얻을 수 있다는 것이다.Biomass refers to a plant or organism that can be used as energy in general, and it is a resource of bioenergy, a field of renewable energy. Biomass includes energy-only crops and trees, agricultural and forage crops, agricultural waste and debris, forest waste and debris, aquatic plants and livestock waste. Biomass is attracting attention as a regional energy source due to the nature of wide-spread dispersive resources. The merit of the energy source is that it can be regenerated, and it can be obtained anywhere on the earth if the water and temperature conditions are met.

목질계 바이오매스란 농작물, 목재, 폐목재 또는 부산물, 식물(수상식물 포함), 잔디, 잔류섬유, 축산분뇨, 도시 쓰레기 등의 재생에너지로 쓰일 수 있는 모든 유기물 중 셀룰로오스(cellulose), 헤미 셀룰로오스(hemi cellulose) 및 리그닌(lignin)으로 구성된 목질계 자원(lignocellulosic resource)으로 주로 목본식물과 초본식물을 의미하며, 이들에서 파생된 제품이나 그것의 폐기물, 즉, 목재, 옥수수대, 볏짚, 밀대, 거대억새 등을 포함한다.Woody biomass refers to all organic matter that can be used as renewable energy such as crops, wood, waste wood or by-products, plants (including water plants), grasses, residual fibers, livestock manure, municipal waste, etc. Cellulose, hemicellulose lignocellulosic resources consisting of hemi cellulose and lignin, mainly woody plants and herbaceous plants, and products derived therefrom or their waste, such as wood, cornstalks, rice straw, And the like.

목질계 바이오매스는 단단한 구조로 인해 이를 이용한 발효당 생산시 셀룰로오스 전환 효율이 떨어지기 때문에 이를 향상시키기 위해 전처리 공정이 필요하다. 즉, 전처리를 통해서 효소 당화의 원료로 사용되는 셀룰로오스나 헤미 셀룰로오스가 외부로 잘 노출되도록 함으로써 당을 만드는 효소인 셀룰라아제(cellulase)가 쉽게 접근할 수 있도록 해야 한다.Since the woody biomass has a hard structure, the conversion efficiency of cellulose is lowered in the production per fermentation using it, and therefore, a pretreatment process is required to improve it. That is, through the pretreatment, cellulose or hemicellulose, which is used as a raw material of the enzyme saccharification, is exposed to the outside, so that the cellulase, which is an enzyme for making sugar, should be easily accessible.

기존에는 바이오매스의 전처리를 수행한 후 전처리가 잘 되었는지 확인하기 위해서 직접적으로 셀룰라아제(cellulose)를 넣고 효소 반응을 수행하여 발생하는 글루코오스의 발생량을 측정하여 직접적으로 영향을 평가하였다. 하지만 이런 방법을 사용할 경우 효소 반응 시간만 해도 96시간 이상 걸리고, 고가의 셀룰라아제 가격으로 인해 비용적인 측면에서도 효과적이지 않으며, 발생하는 글루코오스의 농도를 측정하려면 HPLC(High performance liquid chromatography)를 사용(분석 시간이 하루 가량 소요)해야 한다는 문제도 있었다.Previously, pretreatment of biomass was performed, and cellulose was directly added to the wells to determine whether the pretreatment was successful. The amount of generated glucose was measured by an enzyme reaction, and the effect was directly evaluated. However, when this method is used, it takes more than 96 hours only for the enzymatic reaction time, and it is not effective from the viewpoint of cost because of the high price of the cellulase. To measure the concentration of glucose occurring, high performance liquid chromatography (HPLC) This takes about a day).

이에 단순하게 바이오매스가 분쇄된 정도를 보고 평가하거나 X-ray diffraction(XRD)를 이용하여 바이오매스의 전처리 상태를 파악하는 방법이 사용되었다. 그러나, 이렇게 셀룰로오스의 결정성을 통하여 평가하는 방법도 비교적 짧은 시간에 측정은 가능하나, 바이오매스의 크기가 당화효율과 직접적인 영향이 있는 것이 아니고, 또한 결정성은 효소당화 효과와 직접적인 관련이 없다는 최근의 연구결과로부터, 이러한 간접적인 방법은 전처리에 의한 효소당화 향상 효과를 직접적으로 확인하는 데에는 활용할 수 없다.Therefore, a simple method of estimating the degree of biomass pulverization or using a method of X-ray diffraction (XRD) to determine the pretreatment of biomass was used. However, the method of evaluating through the crystallinity of cellulose can be performed in a comparatively short time. However, since the size of biomass does not have a direct influence on the saccharification efficiency, and the crystallinity is not directly related to the enzyme saccharifying effect From the results of the study, this indirect method can not be used for directly confirming the effect of pretreatment on the glycosylation of the enzyme.

이에, 간단하면서도 보다 정확하게 바이오매스의 전처리 상태를 평가할 수 있는 방법의 개발에 대한 요구가 이어지고 있다.Therefore, there is a demand for development of a simple and accurate method for evaluating the pretreatment state of biomass.

대한민국 등록특허공보 제 10-1391686호Korean Patent Registration No. 10-1391686

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 본 발명의 목적은 아스트라 블루를 이용하여 간단하면서도 정확하게 바이오매스의 전처리 상태를 평가할 수 있는 방법을 제공하는데 있다.It is an object of the present invention to provide a simple and accurate method for evaluating the pretreatment state of biomass using Astra Blue.

본 발명의 상기 및 다른 목적과 이점은 바람직한 실시예를 설명한 하기의 설명으로부터 분명해질 것이다.These and other objects and advantages of the present invention will become apparent from the following description of a preferred embodiment.

상기 목적은, 바이오매스를 전처리하는 제1단계; 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루(astra blue)를 혼합하는 제2단계; 및 원심분리하여 바이오매스를 가라 앉히고, 상층액을 분리하여 흡광도를 측정하는 제3단계;를 포함하는 바이오매스의 전처리 상태 평가방법에 의해 달성될 수 있다.The object is achieved by a biomass comprising: a first step of pretreating biomass; A second step of mixing the pretreated biomass with astra blue; And a third step of centrifugally separating the biomass, separating the supernatant, and measuring the absorbance of the biomass.

이때, 제1단계는, 약산 또는 알칼리 촉매를 사용하여 바이오매스를 전처리 할 수 있고, 또는 바이오매스를 물리적으로 분쇄하여 전처리할 수 있다.At this time, the first step may be a pretreatment of the biomass using a weak acid or an alkali catalyst, or a pretreatment by physically pulverizing the biomass.

또한, 제2단계에서, 아스트라 블루의 농도는 10~80 ㎍/㎖일 수 있고, 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루는 1000~5000 : 1~8의 중량비로 혼합할 수 있으며, 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루는 5~15분 혼합하는 것이 바람직하다.In the second step, the concentration of astra blue may be 10 to 80 占 퐂 / ml, the pretreated biomass and astra blue may be mixed at a weight ratio of 1000 to 5000: 1 to 8, and the pretreated biomass Astra blue is preferably mixed for 5 to 15 minutes.

본 발명에 따르면, 간단하면서도 빠른 시간에 비교적 정확하게 바이오매스의 전처리 상태를 평가할 수 있는 효과를 가진다.INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, it is possible to evaluate the pretreatment state of biomass relatively easily and quickly.

다만, 본 발명의 효과들은 이상에서 언급한 효과로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.However, the effects of the present invention are not limited to the above-mentioned effects, and other effects not mentioned can be clearly understood by those skilled in the art from the following description.

도 1은 목질계 바이오매스의 구조에 대해 개략적으로 나타낸 도면이다.
도 2는 전처리 되지 않은 목질계 바이오매스의 효소 접근성 제한 상태를 개략적으로 나타낸 도면이다.
도 3은 전처리된 목질계 바이오매스의 효소 접근성을 개략적으로 나타낸 도면이다.
도 4는 목질계 바이오매스를 밀링 전처리한 후, 당화 효율과 아스트라 블루 흡수율을 나타낸 그래프이다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a schematic view showing the structure of woody biomass. FIG.
Fig. 2 is a diagram schematically showing an enzyme accessibility restricted state of untreated woody biomass. Fig.
Figure 3 is a schematic representation of the enzymatic accessibility of pretreated woody biomass.
4 is a graph showing saccharification efficiency and astra blue absorption rate after milling pretreatment of woody biomass.

이하, 본 발명의 실시예와 도면을 참조하여 본 발명을 상세히 설명한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위해 예시적으로 제시한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가지는 자에 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to embodiments and drawings of the present invention. It will be apparent to those skilled in the art that these embodiments are provided by way of illustration only for the purpose of more particularly illustrating the present invention and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments .

또한, 달리 정의하지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 숙련자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 가지며, 상충되는 경우에는, 정의를 포함하는 본 명세서의 기재가 우선할 것이다.Also, unless otherwise defined, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention pertains and, where contradictory, Will be given priority.

도면에서 제안된 발명을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 유사한 부분에 대해서는 유사한 도면 부호를 붙였다. 그리고, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다. 또한, 명세서에서 기술한 "부"란, 특정 기능을 수행하는 하나의 단위 또는 블록을 의미한다.In order to clearly illustrate the claimed invention, parts not related to the description are omitted, and like reference numerals are used for like parts throughout the specification. And, when a section is referred to as " including " an element, it does not exclude other elements unless specifically stated to the contrary. In addition, " part " described in the specification means one unit or block performing a specific function.

각 단계들에 있어 식별부호(제1, 제2, 등)는 설명의 편의를 위하여 사용되는 것으로 식별부호는 각 단계들의 순서를 설명하는 것이 아니며, 각 단계들은 문맥상 명백하게 특정 순서를 기재하지 않는 이상 명기된 순서와 다르게 실시될 수 있다. 즉, 각 단계들은 명기된 순서와 동일하게 실시될 수도 있고 실질적으로 동시에 실시될 수도 있으며 반대의 순서대로 실시될 수도 있다.In each step, the identification code (first, second, etc.) is used for convenience of explanation, the identification code does not describe the order of each step, and each step does not explicitly list a specific order in the context May be performed differently from the above-described sequence. That is, each of the steps may be performed in the same order as described, or may be performed substantially concurrently or in the reverse order.

본 발명의 일 실시예에 따른 바이오매스의 전처리 상태 평가방법은 바이오매스를 전처리하는 제1단계; 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루(astra blue)를 혼합하는 제2단계; 및 원심분리하여 바이오매스를 가라 앉히고, 상층액을 분리하여 흡광도를 측정하는 제3단계;를 포함한다. 본 발명은 아스트라 블루가 셀룰로오스 또는 헤미 셀룰로오스에 선택적으로 흡착하는 성질을 이용하여 바이오매스의 전처리 상태를 간단하면서도 정확하게 평가할 수 있다. A method for evaluating a pretreatment state of a biomass according to an embodiment of the present invention includes a first step of pretreating a biomass; A second step of mixing the pretreated biomass with astra blue; And a third step of centrifugally separating the biomass, separating the supernatant, and measuring the absorbance. The present invention can easily and precisely evaluate the pretreatment state of biomass using the property that Astra Blue adsorbs selectively to cellulose or hemicellulose.

도 1 내지 도 3을 통해 보다 구체적으로 설명하면, 도 1은 목질계 바이오매스의 구조에 대해 개략적으로 나타낸 도면이고, 도 2는 전처리 되지 않은 목질계 바이오매스의 효소 접근성 제한 상태를 개략적으로 나타낸 도면이며, 도 3은 전처리된 목질계 바이오매스의 효소 접근성을 개략적으로 나타낸 도면으로, 목질계 바이오매스의 리그닌은 셀룰라아제 효소와 셀룰로오스 또는 헤미 셀룰로오스가 결합하는 것을 방해하고, 리그닌이 전처리에 의해 파괴되면, 셀룰라이제 효소와 셀룰로오스 또는 헤미 셀룰로오스가 결합할 수 있다는 것을 알 수 있다. 즉, 셀룰로오스 또는 헤미 셀룰로오스가 외부로 노출되는 정도를 파악할 수 있으면, 바이오매스의 전처리 상태(정도)를 예측할 수 있다는 것을 알 수 있다. 따라서, 아스트라 블루가 셀룰로오스와 헤미 셀룰로오스에 선택적으로 흡착할 수 있는 성질을 이용하면, 바이오매스의 전처리 상태를 간접적으로 측정할 수 있다.FIG. 1 is a schematic view showing the structure of woody biomass, FIG. 2 is a view schematically showing an enzyme accessibility restricted state of untreated woody biomass, FIG. FIG. 3 is a schematic view showing the enzymatic accessibility of the pretreated woody biomass. The lignin of the woody biomass interferes with the binding between the cellulase enzyme and the cellulose or hemicellulose, and when lignin is destroyed by the pretreatment, Cellular It is now known that enzymes and cellulose or hemicellulose can bind. That is, if the degree of exposure of cellulose or hemicellulose to the outside can be grasped, it can be understood that the pretreatment state (degree) of the biomass can be predicted. Therefore, the pretreatment state of the biomass can be indirectly measured by using the property that Astra Blue can selectively adsorb to cellulose and hemicellulose.

일 실시예에 있어서, 제1단계는 바이오매스를 전처리하는 단계로, 바이오매스는 목질계 바이오매스 뿐만 아니라 여러 종류의 바이오매스를 이용할 수 있다. 바이오매스를 전처리하는 방법은 화학적 방법과 물리적 방법을 사용할 수 있다. 화학적 방법은 약산 또는 알칼리 촉매를 사용하여 셀룰로오스를 둘러싸고 있는 헤미셀룰로오스를 분해하여 제거하고, 이 빈 공간을 통해 효소인 셀룰라아제가 잘 침투하여 셀룰로오스를 분해할 수 있게 한다. 알칼리 촉매의 경우, 부분적으로, 혹은 완전하게 리그닌을 제거하여 셀룰라아제의 접근성을 향상시켜서 효소 반응 효율을 향상시킬 수 있다. 약산 또는 알칼리 촉매는 공지된 다양한 촉매를 사용할 수 있고, 특별히 제한되는 것은 아니다. 물리적 방법은 직접적인 파쇄, 분쇄 방법으로, 볼밀 공정이나 드럼밀, 열수공정, 마이크로웨이브 공정 등이 있고, 주로 바이오매스 입자 크기를 작게하여 효소 접근성을 향상시키거나, 바이오매스 구조를 팽창시켜서 효소가 투입될 수 있는 통로를 확보함으로써 효소 반응 효율을 향상시킬 수 있다.In one embodiment, the first step is to pre-treat the biomass. The biomass may utilize various types of biomass as well as woody biomass. Biomass can be pretreated by chemical and physical methods. The chemical method decomposes and removes the hemicellulose surrounding the cellulose by using a weak acid or an alkali catalyst, and the cellulase, which is an enzyme, permeates through the empty space and can decompose the cellulose. In the case of the alkali catalyst, the efficiency of the enzyme reaction can be improved by improving the accessibility of the cellulase by partially or completely removing lignin. As the weak acid or alkali catalyst, various catalysts known in the art can be used, and they are not particularly limited. Physical methods are direct crushing and crushing methods, such as ball milling, drum milling, hydrothermal processing, microwave processing, etc. Mainly improving the accessibility of the enzyme by reducing the size of the biomass particles or expanding the biomass structure, It is possible to improve the enzyme reaction efficiency.

일 실시예에 있어서, 제2단계는 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루(astra blue)를 혼합하는 단계로, 아스트라 블루가 셀룰로오스 또는 헤미 셀룰로오스에 대해 선택적으로 흡착하는 성질을 이용한다. 아스트라 블루는 C47H52CuN14O6S3의 분자식을 갖는 시약으로, 하기 화학식 1과 같은 구조를 갖는다. 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루의 혼합 시간은 특별히 제한되는 것은 아니나, 5~15분 정도로 혼합하는 것이 바람직하다.In one embodiment, the second step is to mix pretreated biomass with astra blue, which utilizes the property that Astra Blue selectively adsorbs to cellulose or hemicellulose. Astra Blue is a reagent having a molecular formula of C 47 H 52 CuN 14 O 6 S 3 and has a structure represented by the following formula (1). The mixing time of the pretreated biomass and astra blue is not particularly limited, but is preferably about 5 to 15 minutes.

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure 112017046709963-pat00001
Figure 112017046709963-pat00001

또한, 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루를 혼합하는 데 있어, 아스트라 블루의 농도는 10~80 ㎍/㎖인 것이 바람직하다. 아스트라 블루의 농도가 10 ㎍/㎖ 미만인 경우, 바이오매스에 흡착이 많이 되어 잔류 용액 상에 아스트라 블루가 너무 낮은 농도로 존재하여 흡광도를 측정(제3단계)하기 제한되고, 80 ㎍/㎖을 초과하는 경우, 흡광도 값이 너무 높아서 측정이 부정확하다는 단점이 있다.In mixing the pretreated biomass with Astra Blue, the concentration of astra blue is preferably 10 to 80 占 퐂 / ml. When the concentration of astra blue is less than 10 μg / ml, absorption of biomass is increased, astra blue is present at a too low concentration on the residual solution, so that the absorbance is limited to be measured (the third step), and exceeding 80 μg / , The absorbance value is too high and the measurement is inaccurate.

또한, 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루를 혼합하는 데 있어, 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루는 1000~5000 : 1~8의 중량비로 혼합하는 것이 바람직하다. 상기 범위를 벗어나 바이오매스가 많아지면 아스트라 블루가 너무 많이 흡착되어 흡착 정도의 차이가 구별되지 않고, 상기 범위를 벗어나 바이오매스가 적어지면 바이오매스의 흡착량이 적어서 상층액에 흡광도 차이가 발생하지 않게 된다는 단점이 있다.Also, in mixing the pretreated biomass with Astra blue, the pretreated biomass and Astra blue are preferably mixed at a weight ratio of 1000 to 5000: 1 to 8. If the biomass exceeds the above range, astra blue is adsorbed too much and the difference in the degree of adsorption is not distinguished. If the biomass is less than the above range, the adsorption amount of the biomass is small and the absorbance difference does not occur in the supernatant There are disadvantages.

일 실시예에 있어서, 제3단계는, 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루가 혼합된 용액을 원심분리하여 바이오매스를 가라 앉히고, 상층액을 분리하여 흡광도를 측정하는 단계로, 약 13,000 rpm에서 약 2분 동안 원심분리한 후, 상층액을 분리하여 흡광도를 측정하는 것이 바람직하다. 흡광도는 하기 수학식 1에 따라 606nm에서 측정할 수 있다.In one embodiment, the third step comprises centrifuging the mixture of pretreated biomass and astra blue to calibrate the biomass, separating the supernatant and measuring the absorbance, and measuring the absorbance at about 13,000 rpm to about 2 After centrifugation for one minute, the supernatant is separated and the absorbance is measured. The absorbance can be measured at 606 nm according to the following equation (1).

[수학식 1][Equation 1]

Figure 112017046709963-pat00002
Figure 112017046709963-pat00002

여기에서, A606은 606nm에서의 흡광도를 의미하고, 초기 희석액이란, 전처리된 바이오매스와 혼합하기 전의 아스트라 블루를 의미하며, 시료반응 용액이란, 전처리된 바이오매스와 아스트라 블루를 혼합한 후, 원심분리하여 분리된 상층액을 의미한다.Herein, A 606 means the absorbance at 606 nm, and the initial diluent means Astra blue before mixing with the pretreated biomass. The sample reaction solution means a mixture of pretreated biomass and Astra blue, Means a separated supernatant.

이하, 구체적인 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 그에 따른 효과를 보다 상세히 설명하고자 한다. 그러나, 본 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the structure and effect of the present invention will be described in more detail with reference to specific examples. However, this embodiment is intended to explain the present invention more specifically, and the scope of the present invention is not limited to these embodiments.

[실시예][Example]

옥수수대를 볼밀 공정으로 전처리하되, 공정 시간을 각각 0, 20, 40, 60분으로 한 후, 각각 25mg을 준비하여 4개의 튜브(tube)에 넣었다. 이어서, 30㎍/㎖의 아스트라 블루 1.25㎖를 각각의 튜브에 넣어 10분 동안 옥수수대와 혼합하였다. 10분 후, 13,000rpm에서 2분 동안 원심분리하여 바이오매스를 가라앉히고 상층액만 따로 분리하여 606nm에서 흡광도를 측정하였고, 그 결과는 도 4에 나타내었다.The cornstalks were pretreated with a ball mill process, and the process time was set to 0, 20, 40 and 60 minutes, respectively, and 25 mg of each was prepared and put into four tubes. Then, 1.25 mL of 30 μg / mL Astra Blue was added to each tube and mixed with corn bran for 10 minutes. After 10 minutes, the biomass was centrifuged at 13,000 rpm for 2 minutes, and the supernatant was separated. The absorbance was measured at 606 nm. The results are shown in FIG.

도 4로부터, 당화 효율이 더 높은 시료에서 아스트라 블루의 흡수율도 더 높다는 것을 알 수 있고, 이를 통해 바이오매스의 전처리 정도를 간접적으로 측정할 수 있다는 것을 알 수 있었다.From FIG. 4, it can be seen that the absorption rate of astra blue is higher in a sample with higher glycation efficiency, and it is found that the degree of pretreatment of biomass can be indirectly measured.

본 명세서에서는 본 발명자들이 수행한 다양한 실시예 가운데 몇 개의 예만을 들어 설명하는 것이나 본 발명의 기술적 사상은 이에 한정하거나 제한되지 않고, 당업자에 의해 변형되어 다양하게 실시될 수 있음은 물론이다.It is to be understood that the present invention is not limited to the above embodiments and various changes and modifications may be made by those skilled in the art without departing from the spirit and scope of the invention.

Claims (6)

바이오매스를 전처리하는 제1단계;
전처리된 바이오매스와 아스트라 블루(astra blue)를 혼합하는 제2단계; 및
원심분리하여 바이오매스를 가라 앉히고, 상층액을 분리하여 흡광도를 측정하는 제3단계;를 포함하며,
상기 제1단계는, 약산 또는 알칼리 촉매를 사용하여 바이오매스를 전처리 하는 것을 특징으로 하고,
상기 제2단계는, 전처리된 바이오매스와 아스트라블루를 1000~5000 : 1~8의 중량비로 5~15분 동안 혼합하는 것을 특징으로 하는, 바이오매스의 전처리 상태 평가방법.A first step of pretreating the biomass;
A second step of mixing the pretreated biomass with astra blue; And
Separating the supernatant and measuring the absorbance of the biomass,
The first step is characterized by pretreating the biomass using a weak acid or alkali catalyst,
Wherein the second step comprises mixing the pretreated biomass and Astra blue at a weight ratio of 1000 to 5000: 1 to 8 for 5 to 15 minutes. 삭제delete 제1항에 있어서, 제1단계는,
바이오매스를 물리적으로 분쇄하는 것을 특징으로 하는, 바이오매스의 전처리 상태 평가방법.2. The method according to claim 1,
A method for evaluating a pretreatment state of biomass, characterized by physically pulverizing the biomass. 제1항에 있어서, 제2단계에서,
아스트라 블루의 농도는 10~80 ㎍/㎖인 것을 특징으로 하는, 바이오매스의 전처리 상태 평가방법.2. The method according to claim 1, wherein, in the second step,
Wherein the concentration of astra blue is 10 to 80 占 퐂 / ml. 삭제delete 삭제delete
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