KR101926384B1 - 담배 식물의 수경재배 방법 - Google Patents

담배 식물의 수경재배 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 담배식물의 수경재배 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 담배식물(Nicotiana benthamiana)의 묘목을 수경재배하는 단계를 포함하는 담배식물의 수경재배 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따라 담배식물을 밀폐형 식물 생산 시스템에서 수경재배 할 경우, 담배식물의 친환경적인 생산과 생육 촉진의 효과를 얻을 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 담배식물의 재배 방법을 형질전환 담배식물에 적용하는 경우, 고품질의 돼지열병 항원 백신 원료 등과 같은 목적물을 효율적으로 생산 할 수 있다.

Description

담배 식물의 수경재배 방법{METHOD FOR HYDROPONICS OF NICOTINA BENTHAMIANA}
본 발명은 담배식물의 수경재배 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 밀폐형 식물 생산 시스템에서 생육 환경 및 적합한 양액을 공급함으로써 담배식물의 생육을 촉진시킬 수 있는 수경재배 방법에 관한 것이다.
1년생 초본 식물인 담배식물은 가지과 담배속 식물로 호주가 원산지이다. 식물학적으로 담배는 연초의 원료인 담배(Nicotina tabacum)와는 구별되며, 초장은 최대 1.5m 폭은 0.2m를 넘지 않는다. 일반적으로 담배식물은 담배(Nicotina tabacum)와는 달리 상업용으로 재배되고 있지 않으며, 대학 및 연구 기관 등에서 연구용으로 이용되고 있다.
담배식물은 대표적인 단일성 식물로서, 개화는 한계일장 이하에서 이루어지게 된다. 즉, 밤의 길이가 길어지면 꽃눈 분화가 유도되는데, 형질전환 담배식물의 경우 개화가 이루어지게 되면 꽃가루가 방출되는 문제가 발생할 수 있어 밀폐가 이루어진 시스템 하에서 재배하여야 생태적 교란 없이 안전하게 생산할 수 있다.
따라서, 일반적인 연구 시설에서는 유리 온실이나 식물 생장상을 이용하여 담배식물을 재배하고 있으며, 이때 재배 방법은 포트를 이용한 토경재배와 두상관수의 형태로 이루어지고 있다. 한편, 실험실 수준에서 확인 및 검증된 형질전환 식물은 대량 생산을 통해 재검증과 경제성 분석을 하게 되는데, 이 때 양산을 위해서는 토경재배보다 단위 면적당 생산량이 높고 생육 기간을 단축시킬 수 있으며, 작물의 생육에 적합한 양액 관리가 용이한 수경재배가 월등히 유리하다. 더불어 수경 재배는 토경 재배 대비 약 10%의 공급 원수만으로도 재배가 가능하고 비료의 손실이 없는 이점 등이 있다(Burrage, S.W. 1992. NFT in protected cultivation. Acta Hort. 323:25-38).
이에, 한국특허공개 제10-2014-0045111호에 기재된 바와 같이 배양액을 이용한 수경재배 방법이 특용 작물에는 일부 도입되어 있지만, 형질전환 식물 등에 대한 수경재배 방법에 관한 연구는 미흡한 실정이다.
한편, 돼지열병 바이러스는 가축 1종 관리 대상 전염병으로 전파율이 높고 감염 시 폐사율이 높은 특징을 지니고 있다. 돼지열병이 발생되면, 폐사 등 직접적인 피해뿐 아니라 돈육 수출 중단 및 판로에 큰 걸림돌이 되고 있다. 국내에서는 돼지열병의 대응책으로 효능이 뛰어난 롬백신(생백신)을 사용하고 있지만, 혈청학적으로 백신축과 야외감염축을 감별할 수 없는 단점이 있어, 돼지열병 청정국의 지위를 얻는데 문제가 되고 있다. 한편, 최근 한국특허출원 제10-2014-0185686호에 개시된 바와 같이, 백신축과 야외감염축의 혈청학적 구별이 가능한 마커 백신 생산용 형질전환 식물 개발이 완료되었으며, 이와 같이 형질전환된 담배식물(Nicotiana benthamiana)에서 추출 정제한 백신으로 목적 동물 효능 검증이 완료된 바 있다.
따라서, 밀폐형 식물생산 시스템에 적용되어 담배식물을 효율적으로 재배할 수 있는 수경재배 기술이 개발되는 경우, 상기와 같은 돼지열병 항원백신용 원료 물질의 효율적인 생산 및 이를 포함하는 관련 분야에서 널리 적용될 수 있을 것으로 기대된다.
이에 본 발명의 일 측면은 담배식물의 수경재배 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 견지에 의하면, 담배식물(Nicotiana benthamiana)의 묘목을 수경재배하는 단계를 포함하는 담배식물의 수경재배 방법이 제공된다.
상기 담배식물은 돼지열병 항원백신 생산용 형질전환 담배식물인 것이 바람직하다.
상기 수경재배는 순환 담액 수경재배(DFT) 또는 순환 박막 수경재배(NFT) 방식에 의해 수행되는 것이 바람직하다.
상기 수경재배 시 온도는 20.5 내지 32.5℃인 것이 바람직하다.
상기 수경재배 시 명암주기 중 명기는 14 내지 18 시간인 것이 바람직하다.
상기 명기는 120 내지 300 μmol/m2/s의 광도로 광조사되어 이루어지는 것이 바람직하다.
상기 수경재배 시 상대습도는 55 내지 65%인 것이 바람직하다.
상기 수경재배 기간은 7일 내지 28일인 것이 바람직하다.
상기 담배식물의 묘목은 원예용 상업용토, 상업용토와 버미큘라이트가 1:1 내지 3:1의 부피비로 혼합된 혼합토, 암면 및 이들의 조합으로 이루어진 배지에서 수행되는 육묘 단계에 의해 획득되는 것이 바람직하다.
상기 배지는 암면 상에 상업용토가 복토된 배지인 것이 바람직하다.
상기 육묘 단계가 수행되는 기간은 15일 내지 20일인 것이 바람직하다.
본 발명에 따라 담배식물을 밀폐형 식물 생산 시스템에서 수경재배할 경우, 담배식물의 친환경적인 생산과 생육 촉진의 효과를 얻을 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 담배식물의 재배 방법을 형질전환 담배식물에 적용하는 경우, 고품질의 돼지열병 항원 백신 원료 등과 같은 목적물을 효율적으로 생산할 수 있다.
도 1은 형질전환 담배의 육묘 시 배지 종류별 입모율의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 형질전환 담배의 육묘 시 배지 종류별 생체중의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 형질전환 담배의 육묘 일수별 생체중의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 형질전환 담배의 재배 방법별 지상부 생체중의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 형질전환 담배의 재배 시 광도(a) 및 온도(b) 별 순광합성률의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 형질전환 담배의 재배 시 재배 기간 별 지상부 생체중(Shoot F.W.)(a)과 재배 기간별 돼지열병 항원 단백질 함량(농도)(b)의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 형질전환 담배의 수경재배 시 양액 조성 별 생육과 돼지열병 항원 단백질의 생중량 결과를 나타낸 결과이다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시 형태를 설명한다. 그러나, 본 발명의 실시 형태는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 이하 설명하는 실시 형태로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 기재된 "밀폐형 식물 생산 시스템"은 밀폐된 시설 안에서 빛, 온습도, 양액 등의 생육 환경을 인위적으로 조절하여 외부 기후와 관계없이 식물을 연중 연속 생산하는 장치 및 설비를 의미한다.
본 명세서에 기재된 "육묘(育苗)"는 작물을 재배하기 위하여 종자를 파종해서 어린 식물체 즉 모를 생산하는 것을 의미한다.
본 명세서에 기재된 "순환형 담액 수경 방식"은 인공배지와 함께 파종된 식물체가 원수와 수용성 영양분으로 제조된 배양액 속에서 생육되는 시스템으로 일정시간 수조에 배양액이 일정 높이로 유지되다가 일정시간 배수조로 퇴수되는 일련의 과정을 순환하는 방식을 의미한다.
본 명세서에 기재된 "순환형 박막 수경 방식"은 육묘된 모가 정식(定植)되어 재배될 때 일정 기울기를 가진 재배대에서 배양액이 연속적으로 흘러 작물의 뿌리가 배양액을 흡수하고 일부는 공기에 노출될 수 있도록 설치되는 방식을 의미한다.
본 명세서에 기재된 "정식(定植)"은 파종 후 빛과 온습도가 제어되는 곳에서 기른 모종을 일정 기간이 지난 후 재배하고자 하는 곳에 옮겨 심기 하는 것을 의미한다.
본 발명에 의하면 담배식물의 생육을 촉진시킬 수 있는 수경재배 방법이 제공되며, 보다 구체적으로 본 발명은 담배식물(Nicotiana benthamiana)의 묘목을 수경재배하는 단계를 포함하는 것이다.
본 명세서에서 상기 니코티나 벤타미아나(Nicotiana benthamiana)은 니코티나타바쿰(Nicotina tabacum)과는 구별되는 것으로, 이들은 서로 구별하여 각각 "담배식물" 및 "담배"라고 칭한다.
상기 본 발명의 담배식물은 돼지열병 항원백신 생산용 형질전환 담배식물일 수 있으며, 돼지열병 항원백신 생산용 형질전환 담배식물을 대상으로 본 발명의 수경재배 방법을 적용하면 담배식물의 생육을 촉진시켜 목적으로 하는 항원 백신을 효율적으로 생산할 수 있다.
본 발명의 수경재배 방법이 적용되는 묘목을 획득하기 위한 발아 단계는 특히 제한되는 것은 아니나, 28 내지 30℃의 온도에서, 명암 주기는 12h/12h로 하고, 광도는 120 내지 300 μmol/m2/s로 유지시켜 수행될 수 있다. 한편, 상기 담배 식물의 파종은 포수된 암면 셀에 실시하고, 복토는 일반 원예용 상업용토(상토)로 수행할 수 있다. 즉, 본 발명의 수경재배 방법은 담배식물 종자를 발아시키는 단계를 거쳐 획득된 묘목에 대해 수행되거나 또는 발아된 묘목을 상업적으로 획득하여 적용할 수도 있다.
본 발명의 상기 수경재배는 순환 담액 수경재배(DFT) 또는 순환 박막 수경재배(NFT) 방식에 의해 수행될 수 있으며, 바람직하게는 순환 박막 수경재배(NFT) 방식에 의해 수행되는 것이다.
상기 수경재배 시 명암주기 중 명기는 14 내지 18 시간인 것이며, 바람직하게는 14 내지 17 시간, 더욱 바람직하게는 약 16 시간인 것이다. 상기 명암주기 중 명기가 14 시간 미만인 경우에는 개화가 일찍 유도되는 문제가 있으며, 18 시간을 초과하는 경우에는 생육의 차이가 없어 전력 소비 측면에서 비경제적인 문제가 있다. 예를 들어, 상기 광조사는 육묘 및 재배 기간 동안 명암주기 16h/8h으로 이루어질 수 있다.
한편, 상기 명암주기 중 상기 명기는 120 내지 300 μmol/m2/s의 광도로 광조사 되어 이루어지는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 170 내지 200 μmol/m2/s의 광도로 광조사되는 것이다. 상기 광조사가 120μmol/m2/s 미만의 광도로 수행되는 경우에는 순광합성률이 불충분한 문제가 있으며, 상기 광조사가 300μmol/m2/s을 초과하는 광도로 수행되는 경우에는 광도 증가에 따른 순광합성률의 상승 정도가 크지 않아 비경제적인 경향이 있다.
상기 광도는 광원으로부터 약 20cm거리에서 측정하였을 경우의 광도를 기준으로 하는 것이다.
본 발명에 있어서, 광조사는 형광등 또는 발광다이오드 소자 등을 이용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 상기 광조사(artificial lighting)는 담배식물의 파종 이후 모든 육묘 및 재배 기간 동안 이루어질 수 있다.
상기 수경재배 시 온도는 20.5 내지 32.5℃인 것으로, 바람직하게는 23 내지 27℃인 것이다. 상기 수경재배 시 온도가 20.5℃ 미만이거나 32.5℃를 초과하는 경우에는 순 광합성률이 저하되는 문제가 있다.
상기 수경재배 시 상대습도는 55 내지 65%인 것이 바람직하며, 상기 상대습도가 55% 미만인 경우에는 공급되는 양액의 손실 문제가 있으며, 65%를 초과하는 경우에는 과습하여 곰팡이 병이 발생하는 문제가 있다.
본 발명의 담배식물의 수경재배는 상술한 바와 같이 바람직한 온도 및 습도 범위를 유지할 수 있는 밀폐형 항온항습실에서 수행될 수 있다.
본 발명에 있어서, 수경재배 기간은 7일 내지 28일인 것이 바람직하다. 보다 구체적으로, 정식 후 7일 및 14일째의 단백질 함량(농도)이 상대적으로 높고, 이 기간을 경과하여 정식 21일 및 28일째에는 단백질의 함량(농도)이 낮아지나, 묘목의 생중량은 28일까지 증가하므로, 이들을 통합적으로 고려한 재배 기간은 7일 내지 28일인 것이 바람직하다. 수경재배 기간이 7일 미만인 경우에는 단백질 함량이 불충분한 경향이 있고, 수경재배 기간이 28일을 초과하는 경우에는 단백질 함량이 오히려 낮아지는 경향이 있다.
한편, 본 발명의 수경재배 방식이 적용되는 상기 담배식물의 묘목은 원예용 상업용토, 상업용토와 버미큘라이트가 1:1 내지 3:1의 부피비로 혼합된 혼합토, 암면 및 이들의 조합으로 이루어진 배지에서 수행되는 육묘 단계에 의해 획득되는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게 상기 배지는 암면 상에 상업용토가 복토된 배지인 것이다.
이때, 상기 육묘 단계가 수행되는 기간은 15일 내지 20일인 것이 바람직하며, 상기 육묘 기간이 15일 미만인 경우에는 뿌리가 활착되지 못하는 문제가 있으며, 20일을 초과하는 경우에는 묘의 노화 문제가 있다.
본 발명에 사용될 수 있는 배양액은 특히 제한되는 것은 아니나, 오오츠카(Otsuka) 파프리카 배양액 또는 야마자키(Yamazaki) 상추전용 배양액 등을 조제로 하여 사용할 수 있다.
본 발명에 의해 담배식물을 밀폐형 식물 생산 시스템에서 수경재배 할 경우, 담배식물의 친환경적인 생산과 생육 촉진의 효과를 얻을 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 담배식물의 재배 방법을 형질전환 담배식물에 적용하는 경우, 고품질의 돼지열병 항원 백신 원료 등과 같은 목적물을 효율적으로 생산 할 수 있다.
이하, 구체적인 실시예를 통해 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 예시에 불과하며, 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.
실시예
1. 담배 식물의 획득
본 발명의 수경재배 방법을 적용하기 위한 대상 식물로써 돼지열병 항원백신 생산용 형질전환 담배식물(Nicotiana benthamiana)의 씨앗을 ㈜바이오앱으로부터 입수하여, 포수된 암면셀에서 파종하였고, 복토는 일반 원예용 상토로 하여, 온도는 28 내지 30℃로 유지하여 발아하였다. 이때, 명암주기는 12h/12h로 하며, 광도는 120 내지 300 μmol/m2/s로 유지시켰다.
2. 담배 식물의 육모 방식 실험
본 발명의 밀폐형 식물 생산 시스템 하에서 상기 1.에서 획득한 형질전환 담배의 육묘 생산을 위해 배지 종류 및 육묘 기간을 달리한 실험을 수행하였다.
(1) 배지 종류 별 입모율 및 생중량 확인 실험
원예용 상업용토(CS, 이하 상토), 버미큘라이트(VL) 그로우폼(GF), 스펀지(S) 및 암면(RW)을 이용하여 배지를 하기와 같이 구성하였다.
1) 원예용 상업용토(CS, 이하 상토)
2) 상토와 버미큘라이트(VL)를 상토:버미큘라이트(VL)의 부피비가 3:1이 되도록 혼합한 혼합토
3) 상토와 버미큘라이트(VL)를 상토:버미큘라이트(VL)의 부피비가 1:1이 되도록 혼합한 혼합토
4) 상토와 버미큘라이트(VL)를 상토:버미큘라이트(VL)의 부피비가 1:3이 되도록 혼합한 혼합토
5) 버미큘라이트(VL)
6) 그로우폼(GF)
7) 스펀지(S)
8) 암면(RW)
상기 1.에서 획득된 형질전환 담배식물의 파종 후 14일째 입모율을 확인하였으며, 그 결과 도 1에서 확인할 수 있는 바와 같이, 1), 2), 3), 6) 및 8)에서 각각 85% 이상 높게 나왔다. 반면, 버미큘라이트 배지와 스펀지(S)에서는 입모율이 현저히 낮은 것을 확인할 수 있었다.
한편, 상기 1.에서 획득된 형질전환 담배식물의 배지 별 파종 후 14일째 유묘의 생중량을 측정한 결과 도 2에서 확인할 수 있는 바와 같이 암면(RW)을 사용한 8)의 처리구에서 0.4g 이상으로 가장 높게 나타났고, 5)의 버미큘라이트 배지를 사용한 처리구에서 가장 낮게 나타났다.
그 결과 본 실험에서는 형질전환 담배의 육묘 시 암면을 이용하고 상토로 복토하는 것이 가장 바람직한 것을 확인할 수 있다.
(2) 육묘 기간에 따른 생중량 확인 실험
상기 2.(1)에서 확인된 바와 같이 육묘 시 암면 배지에 원예용 상토로 복토한 후, 육묘 기간 별 1.의 형질전환 담배식물 묘의 생중량을 측정하였다.
그 결과, 도 3에서 확인할 수 있는 바와 같이, 치상 후 육모 일수 5일에서 15일까지 생체중이 크게 증가하였으며, 15일에서 20일까지는 완만하게 증가하였다. 따라서 묘의 노화를 고려할 때 형질전환 담배의 육묘기간은 치상 후 15일 내외가 적당함을 확인할 수 있다.
3. 재배 방법 별 생육 변화 확인 실험
묘의 정식 후 관수방법 별 형질전환 담배의 생육 변화를 실험하기 위하여, 상기 담배식물을 각각 상토(CS)를 이용한 두상관수로 급액하고, 순환식 담액 수경(DFT) 및 순환식 박막 수경(NFT)으로 하여 수행하였다.
정식 후 24일째 생육 변화를 관찰한 결과, 도 4에서 확인할 수 있는 바와 같이, 지상부 생중량이 순환 박막수경방식(NFT)에서 약 70.5g으로 가장 높았으며, 상토를 이용한 두상관수 처리 시 가장 낮게 나타났으며, 그 결과 형질전환 담배의 재배는 순환식 박막수경방식(NFT)이 형질전환 담배의 수경재배로 효과적인 것을 확인할 수 있었다.
4. 수경재배 조건에 따른 생육 변화 확인 실험
수경재배를 위해 재배 기간, 온도 및 광도 처리, 그리고 배양액을 달리하여 담배식물의 생장과 돼지열병 항원단백질의 함량을 조사 분석하는 실험을 수행하였다. 본 실험에서는 순환 박막 수경방식(NFT)을 적용하였다.
(1) 온도와 광도가 순광합성률에 미치는 영향 확인 실험
순환 박막 수경 재배 시 온도와 광도가 형질전환 담배식물의 순광합성률에 미치는 영향을 조사히였다.
그 결과, 도 5(b)에 나타난 바와 같이 25℃ 전후의 온도에서 순광합성률이 현저하게 높았으며, 도 5(a)에 나타난 바와 같이 120 내지 200 μmol/m2/s의 광도에서 순광합성률이 급격히 상승하는 것으로 나타났다.
따라서, 형질전환 담배의 순환 박막 수경재배 시 순광합성 효율을 고려할 때 온도는 25℃ 내외, 인공 광원의 광도는 광원으로부터 20cm 거리에서 측정하였을 경우 최소 120 μmol/m2/s 이상이 확보되는 것이 바람직한 것을 확인할 수 있었다.
(2) 재배 기간 별 생육 실험
형질전환 담배식물의 정식 후 순환 박막 수경재배 시 재배 기간 별 생육을 조사하였다.
그 결과, 도 6(a)에 나타난 바와 같이 생중량은 28일까지 급격히 증가하였고 28일째 지상부의 생중량은 128g으로 나타났다. 한편, 항원 단백질을 정량 분석한 결과는 도 6(b)에 나타난 바와 같이 정식 후 7일 및 14일째의 형질전환 담배에서의 단백질 함량이 상대적으로 높았고, 이 기간을 경과하여 정식 21일 및 28일째에는 단백질의 함량이 낮아지는 것을 확인할 수 있었다.
그러나, 상기 도 6(a)의 지상부의 생중량 증가 경향을 종합적으로 고려할 때 정식 후 28일째까지 재배하는 것이 바람직한 재배 기간임을 도출할 수 있다.
(3) 양액 조성 별 생육 실험
형질전환 담배식물의 정식 후 순환 박막 수경재배 시 양액의 조성 별 생육 실험을 수행하였다.
이때 사용된 배양액은 하기 표 1과 같으며, 각각 로스(Ross), 소네벨드(Soneveld), 야마자키(Yamazaki) 및 오오츠카(Otsuka)를 조제하여 사용하였고, 각 배양액의 농도는 1.2ds/m의 농도로 하여 급액하였다.
배양액 로스 소네벨드 오오츠카 야마자키
농도(g·100L-1)
Ca(NO3)2·4H2O 31.86 24.78 135.7 23.6
KNO3 16.16 9.09 51.8 40.4
Fe-EDTA 1.5 1.5 2.0 1.6
NH4NO3 8.0 8.0 0.00 5.7
NH4H2PO4 0.00 0.00 5.7 0.00
KH2PO4 13.6 13.6 46.0 12.3
MgSO4·7H2O 14.76 17.22 26.0 0.00
Mg(NO3)·6H2O 10.24 0.00 0.00 0.00
K2SO4 0.00 8.70 26.2 0.00
H3BO3 0.056 0.123 0.857 0.12
MnSO4·4H2O 0.000 0.231 0.633 0.072
ZnSO4·7H2O 0.087 0.114 0.04 0.009
CuSO4·5H2O 0.42 0.000 0.012 0.004
NaMoO4·2H2O 0.002 0.010 0.007 0.001
도 7(a)에 나타난 바와 같이 야마자키 및 오오츠카 배양액에서 생중량이 가장 높아 생육 결과가 가장 좋은 것을 확인할 수 있었으며, 다만 배양액 조성간 항원 단백질 농도(함량)의 차이는 크지 않았다(b).
이상에서 본 발명의 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고, 청구범위에 기재된 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다는 것은 당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게는 자명할 것이다.

Claims (11)

  1. 상업용토 또는 상업용토와 버미큘라이트가 1:1 내지 3:1의 부피비로 혼합된 혼합토 배지에서 15일 내지 20일 동안 수행되는 담배식물(Nicotiana benthamiana) 묘?의 육모 단계; 및
    담배식물(Nicotiana benthamiana)의 묘목을 7일 내지 28일간 순환 박막 수경재배(NFT) 하는 단계를 포함하며,
    상기 수경재배 시 명암주기 중 명기는 14 내지 16 시간이고, 상기 명기는 120 내지 300 μmol/m2/s의 광도로 광조사되어 이루어지는, 돼지열병 항원백신 생산용 담배식물의 수경재배 방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서, 상기 수경재배 시 온도는 20.5 내지 32.5℃인, 담배식물의 수경재배 방법.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 제1항에 있어서, 상기 수경재배 시 상대습도는 55 내지 65%인, 담배식물의 수경재배 방법.
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 제1항에 있어서, 상기 배지는 암면 상에 상업용토 또는 상업용토와 버미큘라이트가 1:1 내지 3:1의 부피비로 혼합된 혼합토가 복토된 배지인, 담배식물의 수경재배 방법.
  11. 삭제
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