KR101878430B1 - Process for preparing fermented-red ginseng using aspergillus spp. koji mold - Google Patents

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Abstract

본 발명은 아스퍼질러스 속 국균을 이용한 발효홍삼의 제조방법에 관한 것으로, 홍삼에 아스퍼질러스 속 국균을 접종하여 발효시키는 본 발명의 발효홍삼의 제조방법을 이용하면, 진세노사이드를 고함량으로 포함하되 홍삼 특유의 향미를 감소시킨 발효홍삼을 제조할 수 있다. 나아가, 본 발명의 제조방법에 의해 제조된 홍삼 발효물을 이용하여 혼탁이 방지되고 침전 안정성이 향상된 홍삼 음료를 제조할 수 있다. The present invention relates to a method for producing fermented red ginseng using Aspergillus genus, and more particularly, it relates to a method for producing fermented red ginseng by inoculating aspergillus species into red ginseng, And fermented red ginseng with reduced specific flavor of red ginseng can be produced. Further, the red ginseng fermented product produced by the production method of the present invention can be used to produce red ginseng beverages which are prevented from clouding and improved in precipitation stability.

Description

아스퍼질러스 속 국균을 이용한 발효홍삼의 제조방법{PROCESS FOR PREPARING FERMENTED-RED GINSENG USING ASPERGILLUS SPP. KOJI MOLD}TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a process for preparing fermented red ginseng from Aspergillus sp. KOJI MOLD}

본 발명은 아스퍼질러스 속 국균을 이용한 발효홍삼의 제조방법 및 이에 의해 제조된 홍삼 발효물에 관한 것이다.
The present invention relates to a process for producing fermented red ginseng using Aspergillus genus, and fermented red ginseng produced thereby.

홍삼은 수삼으로부터 특수한 증숙, 건조 및 가공 공정을 통해 제조된 생약의 일종이다. 열처리에 따른 성분 변화로 인해 홍삼에는 진세노사이드(Rb1, Rb2, Rc, Rd, Rg1, Re 등) 및 항산화 활성 물질이 수삼이나 백삼에 비해 다량 함유되어 있고, 특유의 진세노사이드가 생성되기도 한다. 상기 여러 종류의 진세노사이드는 자양강장, 중추신경계 증상개선효과, 학습기능 증진, 기억력 향상, 생체 저항력 증진, 생체의 항상성 유지, 혈당 강하 기능, 해독 촉진 작용, 간 보호 및 재생, 심근세포보호 및 심기능 강화, 혈중콜레스테롤 함량저하, 혈압조절, 항암효과 등의 다양한 약리 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 특히, 상기 진세노사이드 Rd는 타 성분들에 비해 홍삼에 미량 포함되나 항비만, 노화방지, 피로 회복 등의 효과가 뛰어나고, 진세노사이드 Rg1은 면역력 증진, 감기예방, 숙취 해소, 스트레스 해소 등에 효과가 뛰어난 것으로 알려져 있다.
Red ginseng is a kind of herbal medicine produced through special cooking, drying and processing process from ginseng. Due to the changes in the composition due to the heat treatment, ginsenosides (Rb1, Rb2, Rc, Rd, Rg1, Re, etc.) and antioxidative active substances are contained in a larger amount than ginseng and white ginseng in the red ginseng and a unique ginsenoside . The above-mentioned various types of ginsenosides may be used for the treatment of various diseases such as nourishment, improvement of central nervous system symptoms, improvement of learning function, improvement of memory, enhancement of biocompatibility, maintenance of homeostasis of blood, hypoglycemic function, It is known that there are various pharmacological effects such as enhancement of cardiac function, lowering of blood cholesterol content, blood pressure control, and anti-cancer effect. In particular, the ginsenoside Rd contains a trace amount of red ginseng in comparison with other components, but it has excellent effects such as anti-obesity, anti-aging and fatigue recovery. Ginsenoside Rg1 is effective for improving immunity, preventing cold, relieving hangover, Is said to be superior.

이에, 홍삼 특유의 유효성분인 진세노사이드를 포함하는 다양한 제품들이, 예컨대, 농축, 분말, 캡슐, 액상 제제, 음료 등의 다양한 형태로 가공되어 판매되고 있다. 이 중 액상 제제, 음료 등은 복용이 간편하고 흡수가 빠르다는 장점이 있어 소비자에게 높은 선호도를 보인다. 그러나, 상기 액상 제제, 음료 등은 저장 및 유통 과정에서 시간이 증가함에 따라 혼탁이 발생하거나 침전물이 생성되어 제품의 외관과 품질을 저하시킨다는 단점이 있다.
Accordingly, various products including ginsenoside, an active ingredient specific to red ginseng, are processed and sold in various forms such as, for example, concentrated, powdered, capsules, liquid formulations, beverages and the like. Among them, liquid formulations and beverages have a high preference for consumers because they are easy to take and fast to absorb. However, the above-mentioned liquid formulations, beverages and the like have disadvantages in that appearance and quality of the product are deteriorated due to the occurrence of turbidity or precipitation as the time increases during storage and distribution.

나아가, 홍삼 제품의 제조에 있어서, 유효성분의 증대, 복용 편의성 등을 위해 발효, 효소 처리 등의 공정이 더 수반될 수 있다. Furthermore, in the production of red ginseng products, fermentation, enzyme treatment and the like may be further carried out in order to increase the effective ingredient and convenience of taking it.

일례로 대한민국 등록특허 10-1093062는 고초균(Bacillus spp.)을 이용한 홍삼박 발효물의 제조 방법을 개시하고 있다. 그러나, 상기 특허는 고체 및 액체 발효의 공정을 통해 제조된 발효물의 유효성분, 특히 진세노사이드의 함량에 대해서는 전혀 개시하고 있지 않다. Korean Patent No. 10-1093062, for example, discloses a method for producing red ginseng fermented product using Bacillus spp . However, the patent does not disclose at all the content of active ingredient, in particular ginsenoside, of the fermented product produced through solid and liquid fermentation processes.

다른 예로, 대한민국 공개특허 10-2015-0050726는 홍삼 추출물을 포함하는 발효홍삼 농축액 조성물 및 이의 제조방법으로서, 홍삼 추출물에 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)을 접종하여 발효시키는 방법을 개시하고 있다.
As another example, Korean Patent Laid-Open Publication No. 10-2015-0050726 discloses a fermented red ginseng concentrate composition containing red ginseng extract and a method for producing the same, which discloses a method of fermenting red ginseng extract by inoculating Lactobacillus plantarum .

그러나, 기존의 방법들은, 홍삼의 유효성분인 진세노사이드가 발효 공정을 통해 당이 제거됨으로써 비극성이 높아져 액상 제제로 제품화할 때 혼탁도를 높이거나 침전을 형성하는 것을 억제하는 것에 대해서는 만족할 만한 결과를 보이지 못하고 있다.
However, the conventional methods are not satisfactory for increasing the turbidity or suppressing the formation of the precipitate when commercialized as a liquid preparation because the non-polarity is increased by removing sugar through the fermentation process as the active ingredient of red ginseng .

이에 본 발명에서는 발효홍삼을 제조함에 있어서 특정 유용 진세노사이드를 고함량으로 포함할 뿐만 아니라, 이로부터 제조된 추출물의 혼탁 및 침전 안정성을 개선할 수 있는 발효홍삼, 및 이의 제조방법을 개발함으로써 본 발명을 완성하였다.
Accordingly, the present invention provides a fermented red ginseng which not only contains a high content of a particular useful ginsenoside in the preparation of fermented red ginseng, but also can improve the turbidity and precipitation stability of the extract prepared therefrom, Thereby completing the invention.

대한민국 등록특허 10-1093062Korean Patent No. 10-1093062 대한민국 공개특허 10-2015-0050726Korean Patent Publication No. 10-2015-0050726

따라서, 본 발명의 목적은 유용 진세노사이드를 고함량으로 포함하는 발효홍삼의 제조방법을 제공하는 것이다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a process for producing fermented red ginseng comprising a high content of useful ginsenoside.

나아가, 본 발명의 다른 목적은 혼탁 및 침전 안정성을 향상시킨 홍삼 발효물 및 이를 포함하는 음료를 제공하는 것이다.
Further, another object of the present invention is to provide a red ginseng fermented product improved in turbidity and precipitation stability and a beverage containing the same.

상기 목적을 달성하기 위해 본 발명은, 홍삼에 아스퍼질러스 속(Aspergillus spp.) 국균을 접종하여 발효시키는 것을 포함하는, 발효홍삼의 제조방법을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention provides a method for producing fermented red ginseng comprising fermenting red ginseng by inoculation with Aspergillus spp .

상기 다른 목적을 달성하기 위해 본 발명은, 상기 제조방법에 의해 제조된 홍삼 발효물을 제공한다. To achieve the above other objects, the present invention provides a red ginseng fermented product produced by the above production method.

상기 또 다른 목적을 달성하기 위해 본 발명은, 상기 홍삼 발효물을 포함하는 음료를 제공한다.
According to another aspect of the present invention, there is provided a beverage comprising the red ginseng fermented product.

본 발명의 발효홍삼의 제조방법을 이용하면 특정 진세노사이드를 고함량으로 포함하되 홍삼 특유의 향미를 감소시킨 발효홍삼을 제조할 수 있다. 나아가, 상기 제조방법에 의해 제조된 홍삼 발효물을 이용하여 혼탁이 방지되고 침전 안정성이 향상된 홍삼 음료를 제조할 수 있다.
The fermented red ginseng containing the specific ginsenoside in a high content but having reduced flavor peculiar to red ginseng can be prepared using the fermented red ginseng production method of the present invention. Furthermore, the red ginseng fermented product manufactured by the above-described method can be used to produce red ginseng beverages which are prevented from clouding and improved in precipitation stability.

도 1은 실시예 2에서 제조된 발효홍삼 및 비발효홍삼의 추출물을 60℃에서 보관할 때, 시간 경과에 따른 혼탁도 변화를 나타낸 그래프이다. FIG. 1 is a graph showing changes in turbidity with time of the fermented red ginseng and non-fermented red ginseng extract prepared in Example 2 at 60.degree.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 홍삼에 아스퍼질러스 속(Aspergillus spp .) 국균을 접종하여 발효시키는 것을 포함하는, 발효홍삼의 제조방법을 제공한다. The present invention is Aspergillus the ginseng's in (Aspergillus spp . ) Fermented by inoculating inoculated germ cells.

상기 아스퍼질러스 속 국균은 아스퍼질러스 카와치(Aspergillus kawachii), 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae ), 아스퍼질러스 니제르(Aspergillus niger), 아스퍼질러스 우사미(Aspergillus usamii), 아스퍼질러스 시로우사미(Aspergillus shirousamii), 아스퍼질러스 아와모리(Aspergillus awamori) 등일 수 있고, 자세하게는 아스퍼질러스 카와치, 아스퍼질러스 오리재, 아스퍼질러스 니제르 등일 수 있고, 보다 자세하게는 아스퍼질러스 카와치일 수 있다.
The Aspergillus genus Aspergillus is Aspergillus Kawachi (Aspergillus kawachii , Aspergillus oryzae), Aspergillus niger (Aspergillus niger), Usami Aspergillus (Aspergillus usamii), Aspergillus Shiro Usami (Aspergillus shirousamii , Aspergillus awamori , and the like, and in detail can be Aspergillus oryzae, Aspergillus oryzae, Aspergillus niger or the like, more specifically Aspergillus oryzae.

상기 발효는 고체발효일 수 있다. 구체적으로, 상기 고체발효는 멸균된 홍삼 고형분(예컨대, 홍삼 분말)에 고형분 1g 당 0.05 내지 2ml, 자세하게는 0.1 내지 1ml, 보다 자세하게는 0.1 내지 0.5ml의 물을 가하고, 얻어진 혼합물에 국균을 접종한 후 25℃ 내지 40℃에서 1일 내지 20일, 자세하게는 3일 내지 20일 동안 발효시키는 것을 포함할 수 있다. 상기 국균의 접종량은 상기 홍삼 고형분 총 중량을 기준으로 0.01 내지 1.0 중량%, 자세하게는 0.05 내지 0.5 중량%, 보다 자세하게는 0.05 내지 0.3 중량%, 보다 더 자세하게는 약 0.1 중량%일 수 있다.
The fermentation may be a solid fermentation. Specifically, in the solid fermentation, water is added in an amount of 0.05 to 2 ml, more specifically 0.1 to 1 ml, more specifically 0.1 to 0.5 ml, per 1 g of solid content to a sterilized red ginseng solid (for example, red ginseng powder) Followed by fermentation at 25 占 폚 to 40 占 폚 for 1 day to 20 days, more specifically 3 days to 20 days. The inoculum amount of the germs may be 0.01 to 1.0 wt%, more preferably 0.05 to 0.5 wt%, more specifically 0.05 to 0.3 wt%, and still more preferably about 0.1 wt%, based on the total weight of the red ginseng solid.

또한, 상기 발효는 액체발효일 수 있다. 구체적으로 상기 액체발효는 멸균된 홍삼 고형분(예컨대, 홍삼 분말)에 고형분 1g 당 5 내지 50ml, 자세하게는 5 내지 20ml의 물이 첨가된 혼합물에 국균을 접종하고, 25℃ 내지 40℃에서 1일 내지 20일, 자세하게는, 3일 내지 20일 동안 발효시키는 것을 포함할 수 있다. 상기 국균의 접종량은 상기 홍삼 고형분 총 중량을 기준으로 0.01 내지 1.0 중량%, 자세하게는 0.05 내지 0.5 중량%, 보다 자세하게는 0.05 내지 0.3 중량%, 보다 더 자세하게는 약 0.1 중량%일 수 있다.
Further, the fermentation may be liquid fermentation. Specifically, the liquid fermentation may be carried out by inoculating the germ with the mixture of sterilized red ginseng solid (for example, red ginseng powder) in which 5 to 50 ml of water is added per 1 g of solid content, specifically 5 to 20 ml, 20 days, in detail, for 3 to 20 days. The inoculum amount of the germs may be 0.01 to 1.0 wt%, more preferably 0.05 to 0.5 wt%, more specifically 0.05 to 0.3 wt%, and still more preferably about 0.1 wt%, based on the total weight of the red ginseng solid.

상기 고체 또는 액체발효 후 얻어진 발효홍삼, 또는 발효물은 고온의 조건에서도 진세노사이드를 고함량으로 포함할 뿐만 아니라, 혼탁이 발생하지 않는다. 구체적으로, 상기 발효홍삼, 또는 발효물은 50 내지 70℃에서 효소 반응을 유도하여 보관하는 경우, 자세하게는 60℃에서 보관하는 경우에도, 혼탁이 거의 발생하지 않으며 오히려 진세노사이드의 함량이 증가할 수 있다(시험예 3 참조).
Fermented red ginseng or fermented product obtained after the solid or liquid fermentation not only contains a high content of ginsenoside even at high temperature, but also does not cause turbidity. Specifically, when the fermented red ginseng or fermented product is stored at 50 to 70 ° C for inducing an enzymatic reaction, even when stored at 60 ° C, the amount of ginsenoside is increased (See Test Example 3).

더 나아가, 본 발명은 상기 제조방법에 의해 제조된 홍삼 발효물을 제공한다. Furthermore, the present invention provides a red ginseng fermented product produced by the above production method.

상술한 바와 같이 아스퍼질러스 속 국균을 홍삼에 접종한 후 고체 또는 액체발효시킴으로써 제조된 홍삼 발효물은 발효 전보다 Rg1, Rd 등의 특정 유용 진세노사이드의 함량이 증가한다. 자세하게, 본 발명의 홍삼 발효물은 3 내지 20 μmole/g의 진세노사이드 Rd를 포함할 수 있다. 또한, 1.5 내지 15.0 μmole/g의 진세노사이드 Rg1을 포함할 수 있다.
As described above, the content of certain useful ginsenosides such as Rg1 and Rd is increased in fermented red ginseng produced by solid or liquid fermentation after inoculation of Aspergillus species into red ginseng before fermentation. In detail, the red ginseng fermented product of the present invention may contain 3 to 20 占 퐉ole / g of ginsenoside Rd. It may also contain ginsenoside Rg1 from 1.5 to 15.0 μmole / g.

또한, 본 발명의 홍삼 발효물은 발효 전보다 증가한 pH값을 갖는다. 진세노사이드는 알칼리 환경에서 보다 안정하여 침전 및 혼탁 유발 가능성이 낮은 것으로 알려져 있으므로, 본 발명의 홍삼 추출물을 이용하면 침전 안정성이 향상된 발효홍삼 용액을 얻을 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는, 아스퍼질러스 카와치를 접종하여 고체 또는 액체 발효시킨 발효홍삼의 진세노사이드 함량, 및 상기 발효홍삼을 포함하는 추출물의 보관 안정성(침전 및 혼탁 발생 감소)에 대한 시험 결과를 개시하고 있다(시험예 2 및 3 참조).
In addition, the fermented red ginseng of the present invention has an increased pH value before fermentation. Since ginsenoside is known to be more stable in an alkaline environment and less likely to cause precipitation and turbidity, fermented red ginseng solution with improved precipitation stability can be obtained by using the red ginseng extract of the present invention. In one embodiment of the present invention, the test results of the ginsenoside content of the fermented red ginseng obtained by inoculating Aspergillus kavai with solid or liquid fermentation and the storage stability (reduction in sedimentation and turbidity occurrence) of the extract containing the fermented red ginseng (See Test Examples 2 and 3).

본 발명은 또한 상기 홍삼 발효물을 포함하는 음료를 제공한다. 상기 홍삼 발효물은 고체발효 또는 액체 발효에 의해 제조될 수 있으며, 자세하게는 고체 발효에 의해 제조된 것일 수 있다.
The present invention also provides a beverage comprising the red ginseng fermented product. The red ginseng fermentation product may be prepared by solid fermentation or liquid fermentation, in detail, by solid fermentation.

본 발명의 음료는 상기 홍삼 발효물을 식품 분야의 공지의 방법에 따라 가공하여 제조할 수 있다. 예컨대, 상기 홍삼 발효물을 물, 메탄올, 주정, 부탄올, 아세톤, 에탄올, 에틸아세테이트, 이산화탄소, 이소프로판올, 클로로포름, 헥산 등의 식품학적으로 허용되는 용매를 이용하여 추출하거나, 상기 용매에 현탁시킬 수 있다. 이 때, 상기 홍삼 발효물로부터 1차적으로 얻어진 추출물 또는 현탁액을 여과함으로써 침전을 제거하여, 보다 침전 발생이 적고 혼탁도가 낮은 음료를 제조할 수 있다.
The beverage of the present invention can be prepared by processing the red ginseng fermented product according to a known method in the food field. For example, the fermented red ginseng can be extracted or suspended in the above-mentioned solvent using a pharmaceutically acceptable solvent such as water, methanol, alcohol, butanol, acetone, ethanol, ethyl acetate, carbon dioxide, isopropanol, chloroform or hexane . At this time, the extract or the suspension primarily obtained from the fermented red ginseng is filtered to remove the precipitate, whereby a beverage having less sedimentation and low turbidity can be produced.

상기 음료는 식품학적으로 허용가능한 첨가제를 더 포함할 수 있다. 상기 식품학적으로 허용가능한 첨가제로는, 감미료, 산미료, 비타민류, 미네랄류, 아미노산류, 검류 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다. 상기 감미료는 포도당, 설탕, 올리고당, 과당 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 산미료는 구연산, 사과산, 젖산, 주석산 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
The beverage may further comprise a pharmaceutically acceptable additive. Examples of the pharmaceutically acceptable additives include sweeteners, acidifiers, vitamins, minerals, amino acids, gums or mixtures thereof. The sweetener may be glucose, sugar, oligosaccharides, fructose, or a mixture thereof. The acidulant may be citric acid, malic acid, lactic acid, tartaric acid, or a mixture thereof.

본 발명의 음료는 발효에 의해 홍삼 특유의 향미가 감소되고, 혼탁 및 침전이 억제됨으로써 우수한 관능성을 나타낸다. The beverage according to the present invention exhibits excellent functionality by reducing fermentation-specific flavor of red ginseng, suppressing turbidity and precipitation.

이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following examples. However, the following examples are intended to be illustrative of the present invention, but the present invention is not limited thereto.

[[ 실시예Example ]]

실시예Example 1 : 액체발효에 의한  1: due to liquid fermentation 발효홍삼의Fermented red ginseng 제조 Produce

홍삼 분말 2g(고려홍삼분말, 한국인삼유통공사) 및 RO수(Reverse osmotic water) 20ml를 혼합한 후 121℃에서 15분간 멸균하였다. 멸균된 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 아스퍼질러스 카와치(Aspergillus kawachii) 균주(HIGUCHI MATSUNOSUKE SHOTEN사)를 상기 홍삼 분말의 총 중량을 기준으로 0.1중량% 접종하였다. 이후, 150rpm의 속도로 진탕하면서 37℃에서 13일 동안 배양한 후 국균에서 분비된 효소의 반응을 위해 60℃에서 3시간 처리하여 발효홍삼을 제조하였다.
2 g of red ginseng powder (Korean red ginseng powder, Korean ginseng broth) and 20 ml of reverse osmotic water were mixed and sterilized at 121 ° C for 15 minutes. The sterilized mixture was cooled to room temperature, and then Aspergillus ( Aspergillus) kawachii strain (HIGUCHI MATSUNOSUKE SHOTEN) was inoculated 0.1% by weight based on the total weight of the red ginseng powder. After incubation at 37 ° C for 13 days with shaking at a speed of 150 rpm, fermented red ginseng was prepared by treating the enzyme at 60 ° C for 3 hours for reaction of the enzyme secreted from the germ line.

실시예Example 2 : 액체발효에 의한  2: by liquid fermentation 발효홍삼의Fermented red ginseng 제조 Produce

아스퍼질러스 카와치(Aspergillus kawachii) 균주 대신 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주(HIGUCHI MATSUNOSUKE SHOTEN사)를 상기 홍삼 분말의 총 중량을 기준으로 0.1중량%를 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 발효홍삼을 제조하였다.
Aspergillus kawachii ) aspergillus ( Aspergillus oryzae strain (HIGUCHI MATSUNOSUKE SHOTEN) was used in an amount of 0.1 wt% based on the total weight of the red ginseng powder, to thereby produce fermented red ginseng.

실시예Example 3 : 액체발효에 의한  3: by liquid fermentation 발효홍삼의Fermented red ginseng 제조 Produce

아스퍼질러스 카와치(Aspergillus kawachii) 균주 대신 아스퍼질러스 니제르(Aspergillus niger) 균주(HIGUCHI MATSUNOSUKE SHOTEN사)를 상기 홍삼 분말의 총 중량을 기준으로 0.1중량%를 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 발효홍삼을 제조하였다.
Aspergillus except that 0.1% by weight of Aspergillus niger strain (HIGUCHI MATSUNOSUKE SHOTEN) was used instead of the kawachii strain in terms of the total weight of the red ginseng powder. Red ginseng was prepared.

실시예Example 4 : 고체발효에 의한  4: by solid fermentation 발효홍삼의Fermented red ginseng 제조 Produce

홍삼 분말 20g(고려홍삼분말, 한국인삼유통공사)을 121℃에서 15분간 멸균한 다음 실온으로 냉각시켰다. 상기 홍삼 분말에 멸균수 10 ml를 분무한 후, 아스퍼질러스 카와치 균주(HIGUCHI MATSUNOSUKE SHOTEN사)를 상기 홍삼 분말의 총 중량을 기준으로 0.1중량% 접종하였다. 이후, 37℃, 상대습도(RH) 99%에서 13일 동안 배양하여 고체홍삼을 제조하였다. 이후 100ml의 멸균수를 첨가하여 60℃에서 3시간 반응하여 고체발효홍삼 추출물을 제조하였다.
20 g of red ginseng powder (Korean red ginseng powder, Korean ginseng broth) was sterilized at 121 ° C for 15 minutes and then cooled to room temperature. The red ginseng powder was sprayed with 10 ml of sterilized water, and the Aspergillus sp. Strain (HIGUCHI MATSUNOSUKE SHOTEN) was inoculated 0.1% by weight based on the total weight of the red ginseng powder. Thereafter, solid red ginseng was prepared by culturing at 37 DEG C and 99% relative humidity (RH) for 13 days. Then, 100 ml of sterilized water was added and reacted at 60 ° C for 3 hours to prepare solid fermented red ginseng extract.

[ [ 시험예Test Example ]]

시험예Test Example 1 :  One : 아스퍼질러스Aspergillus 카와치Kawachi 균주를 접종하여 발효시킨  The strain was inoculated and fermented 발효홍삼의Fermented red ginseng 진세노사이드Gin Senocide 함량 측정 Content measurement

실시예 1에서 제조된 발효홍삼 시료의 진세노사이드 함량을 측정하기 위하여 발효홍삼의 추출물을 제조하였다.An extract of fermented red ginseng was prepared to measure the ginsenoside content of fermented red ginseng samples prepared in Example 1.

구체적으로, 실시예 1 내지 3에서 제조된 발효홍삼 시료 각각을 90℃에서 10 분동안 열수 추출한 후, 4500rpm으로 15분동안 원심분리하고 상층액 14ml을 분리하여 극성 진세노사이드를 분리하였다. 상층액 분리 후 남은 시료 6ml에 100% 메탄올 14ml를 첨가하여 최종 농도 70% 메탄올추출물을 제조하고 상온에서 24시간 추출하여 4500rpm으로 15분동안 원심분리한 후 상층액(비극성 진세노사이드) 14ml를 얻었다. 상기 각각의 상층액을 37℃에서 밤새(overnight) 보관하였다. 각 상층액을 4500rpm으로 15분동안 원심분리하고 얻어진 상층액을 1μm 멤브레인 필터로 여과하여 추출액 1 및 2를 제조하였다. 상기 추출액 1 및 2를 하기 시험예에서 각각 분석한 후 데이터를 합하여 각 시료의 데이터로 나타내었으며, 아스퍼질러스 카와치 균주를 접종하지 않고 동일한 과정을 반복한 대조군과 비교하였다. Specifically, each of the fermented red ginseng samples prepared in Examples 1 to 3 was subjected to hot water extraction at 90 ° C for 10 minutes, followed by centrifugation at 4500 rpm for 15 minutes, and 14 ml of the supernatant was separated to separate polar ginsenosides. After removing the supernatant, 14 ml of 100% methanol was added to the remaining 6 ml of the sample to prepare a final 70% methanol extract. The extract was extracted at room temperature for 24 hours and centrifuged at 4500 rpm for 15 minutes to obtain 14 ml of supernatant (nonpolar ginsenoside) . Each of the supernatants was stored overnight at 37 < 0 > C. Each supernatant was centrifuged at 4500 rpm for 15 minutes, and the obtained supernatant was filtered with a 1 μm membrane filter to prepare Extractants 1 and 2. The extracts 1 and 2 were analyzed in the following test examples, respectively, and the data were summed and compared with the control group in which the same procedure was repeated without inoculating the Aspergillus oryzae strains.

상기 발효홍삼 추출물 및 대조군의 진세노사이드의 함량을 UPLC(Ultra Performance(Pressure) Liquid Chromatography) 방법을 통하여 하기 조건에서 진세노사이드의 함량을 측정하였다. The content of ginsenoside in the fermented red ginseng extract and the control group was measured by UPLC (Ultra Performance (Pressure) Liquid Chromatography) method under the following conditions.

- 기기 : Acquity UPLC(Waters)- Appliance: Acquity UPLC (Waters)

- 컬럼 : Cortecs UPLC C18+Column(1.6μm, 2.1x 50mm, Waters)Column: Cortecs UPLC C18 + Column (1.6 [mu] m, 2.1x 50mm, Waters)

- 검출기: PDA detector 사용(203nm)- Detector: Using PDA detector (203nm)

- 이동상 : 물, 아세토니트릴(하기 표 1의 농도 기울기 사용)- mobile phase: water, acetonitrile (using the concentration gradient shown in Table 1 below)

- 시료주입량 5μl, 분석온도 30℃, Runtime 15분- Sample injection amount 5 μl, analysis temperature 30 ° C, Runtime 15 minutes

시간(분)Time (minutes) 유속(mL/min)Flow rate (mL / min) 물(%)water(%) 아세토니트릴(%)Acetonitrile (%) CurveCurve 0(초기)0 (initial) 0.70.7 8282 1818 66 0.50.5 0.70.7 8282 1818 66 33 0.70.7 81.481.4 18.618.6 66 1010 0.70.7 5757 4343 66 10.510.5 0.70.7 5757 4343 66 12.512.5 0.70.7 3838 6262 66 1313 0.70.7 2020 8080 66 13.513.5 0.70.7 2020 8080 66 1515 0.70.7 8282 1818 1One

그 결과를 하기 표 2에 나타내었다. The results are shown in Table 2 below.

진세노사이드Gin Senocide 함량(μmole/g)Content (μmole / g) 대조군Control group 실시예 1
(A. kawachii)
Example 1
( A. kawachii )
실시예 2
(A. oryzae)
Example 2
( A. oryzae )
실시예 3
(A.niger)
Example 3
( A.niger )
Rg1Rg1 6.246.24 2.072.07 1.921.92 1.191.19 ReRe 2.572.57 0.130.13 0.300.30 1.151.15 Rb1Rb1 3.103.10 1.281.28 0.060.06 0.110.11 RcRc 1.061.06 0.210.21 0.290.29 0.560.56 Rb2Rb2 1.191.19 0.720.72 1.221.22 1.501.50 RdRd 3.413.41 11.2011.20 9.509.50 9.039.03 C-0C-0 0.000.00 0.000.00 0.000.00 0.000.00 C-F2C-F2 0.000.00 0.190.19 0.110.11 0.080.08 Rg3(S)Rg3 (S) 1.011.01 2.502.50 1.911.91 1.781.78 Rg3(R)Rg3 (R) 0.540.54 1.641.64 1.451.45 1.331.33 C-YC-Y 0.000.00 0.000.00 0.000.00 0.000.00 C-KC-K 0.000.00 0.170.17 0.000.00 0.000.00 Rh2(S)Rh2 (S) 0.000.00 0.000.00 0.000.00 0.000.00 Rh2(R)Rh2 (R) 0.6010.601 0.000.00 0.000.00 0.000.00 합계Sum 19.7319.73 20.1220.12 16.7516.75 16.7316.73

상기 표 2의 결과를 살펴보면, 상기 아스퍼질러스 카와치, 아스퍼질러스 오리재 및 아스퍼질러스 니제르 균주를 이용하여 제조된 발효홍삼의 추출물은, 대조군에 비하여 Rd, C-F2, Rg3(S), Rg3(R) 등과 같은 유용 진세노사이드의 함량이 대부분 우수하게 나타났다. 특히 실시예 1 내지 3의 Rd 함량은 대조군에 비하여 약 3.3배, 2.8배 및 2.7배가량 증가하였다.
The extracts of fermented red ginseng prepared using the Aspergillus oryzae, Aspergillus oryzae and Aspergillus niger strains showed higher values of Rd, C-F2 and Rg3 (S) than those of the control group, , Rg3 (R), and the like. In particular, the Rd content of Examples 1 to 3 was increased by about 3.3 times, 2.8 times, and 2.7 times as compared with the control.

시험예Test Example 2 : 액체 및 고체발효에 의한  2: by liquid and solid fermentation 발효홍삼의Fermented red ginseng 진세노사이드Gin Senocide 함량 측정 Content measurement

실시예 1 및 4에서 얻어진 발효시간을 달리한 발효홍삼 시료들을 이용하여 시간 경과(발효일 수)에 따른 진세노사이드의 함량을 측정하였다. 상기 각각의 발효홍삼 시료들로부터 시험예 1과 동일한 방법으로 추출물을 제조하였으며, 이들의 진세노사이드 함량을 측정해 그 결과를 하기 표 3 및 4에 나타내었다.
The content of ginsenoside according to the elapsed time (number of days of fermentation) was measured using the fermented red ginseng samples obtained in Examples 1 and 4 with different fermentation times. The extracts were prepared from each of the fermented red ginseng samples in the same manner as in Test Example 1 and their ginsenoside contents were measured and the results are shown in Tables 3 and 4.

하기 표 3은 실시예 1에서 제조된 액체발효홍삼에 대하여 0일, 6일, 13일 및 20일의 발효 기간에 따른 진세노사이드의 함량을 측정한 결과이다.Table 3 below shows the results of measuring the content of ginsenosides according to the fermentation periods of 0 day, 6 days, 13 days and 20 days for the fermented liquid red ginseng prepared in Example 1. [

진세노사이드
(μmole/g)
Gin Senocide
(μmole / g)
액체발효 기간Liquid fermentation period
0일(대조군)0 day (control group) 6일6 days 13일13th 20일20 days Rg1Rg1 1.371.37 2.402.40 1.591.59 1.541.54 ReRe 1.001.00 0.200.20 0.680.68 0.000.00 Rb1Rb1 3.313.31 0.000.00 0.000.00 0.000.00 RcRc 0.980.98 0.320.32 0.310.31 0.280.28 Rb2Rb2 0.870.87 0.860.86 0.970.97 1.041.04 RdRd 0.380.38 5.395.39 6.236.23 5.835.83 C-0C-0 0.000.00 0.010.01 0.030.03 0.040.04 C-F2C-F2 0.000.00 0.200.20 0.190.19 0.150.15 Rg3(S)Rg3 (S) 1.401.40 1.401.40 1.691.69 1.861.86 Rg3(R)Rg3 (R) 0.900.90 0.980.98 1.081.08 1.211.21 C-YC-Y 0.000.00 0.000.00 0.000.00 0.000.00 C-KC-K 0.000.00 0.080.08 0.250.25 0.340.34 Rh2(S)Rh2 (S) 0.070.07 0.070.07 0.070.07 0.040.04 Rh2(R)Rh2 (R) 0.120.12 0.000.00 0.000.00 0.000.00 합계Sum 10.4110.41 11.9111.91 13.1013.10 12.3212.32

상기 표 3의 결과를 살펴보면, 액체발효홍삼은 시간이 경과함에 따라 대조군에 비해 Rd 함량이 약 14 내지 16배로 크게 증가하였고, Rg1 함량은 약 1.1 내지 1.8배 증가하였다. 또한, 진세노사이드의 총 함량은 6일, 13일 및 20일 발효홍삼에서 각 11.91, 13.10 및 12.32 μmole/g로 대조군의 10.41 μmole/g에 비해 약 11 내지 26% 높게 나타났다.
As shown in Table 3, Rd content in liquid fermented red ginseng increased to about 14 to 16 times and Rg1 content increased about 1.1 to 1.8 times as time passed. The total content of ginsenoside was 11.91, 13.10 and 12.32 μmole / g in fermented red ginseng on days 6, 13 and 20, respectively, which was about 11 to 26% higher than that of the control group of 10.41 μmole / g.

하기 표 4는 실시예 4에서 제조된 고체발효홍삼에 대하여 0일, 3일, 6일 및 13일의 발효 기간에 따른 진세노사이드의 함량을 측정한 결과이다.Table 4 below shows the results of measuring the content of ginsenosides according to the fermentation periods of 0 day, 3 days, 6 days and 13 days for the solid fermented red ginseng prepared in Example 4.

진세노사이드
(μmole/g)
Gin Senocide
(μmole / g)
고체발효 기간Solid fermentation period
0일(대조군)0 day (control group) 3일3 days 6일6 days 13일13th Rg1Rg1 5.615.61 3.403.40 6.796.79 13.4913.49 ReRe 5.905.90 3.323.32 6.536.53 0.310.31 Rg2(S)Rg2 (S) 0.460.46 1.221.22 0.570.57 0.000.00 Rg2(R)Rg2 (R) 0.000.00 0.190.19 0.000.00 0.000.00 Rb1Rb1 5.815.81 0.120.12 0.110.11 0.140.14 RcRc 1.951.95 0.430.43 0.380.38 0.000.00 Rb2Rb2 1.631.63 1.301.30 1.711.71 2.002.00 RdRd 2.002.00 8.838.83 12.6812.68 14.6214.62 C-0C-0 0.000.00 0.000.00 0.000.00 0.010.01 C-F2C-F2 0.000.00 0.000.00 0.000.00 0.110.11 Rg3(S)Rg3 (S) 0.140.14 0.860.86 0.130.13 0.170.17 Rg3(R)Rg3 (R) 0.050.05 0.540.54 0.050.05 0.050.05 C-YC-Y 0.000.00 0.000.00 0.000.00 0.000.00 C-KC-K 0.000.00 0.000.00 0.090.09 0.450.45 Rh2(S)Rh2 (S) 0.000.00 0.020.02 0.000.00 0.040.04 Rh2(R)Rh2 (R) 0.000.00 0.000.00 0.000.00 0.000.00 합계Sum 23.5623.56 20.2420.24 29.0329.03 31.3931.39

상기 표 4의 결과를 살펴보면, 고체발효홍삼은 발효 기간 6일인 시료부터 Rg1 함량이 증가하기 시작하여 발효 기간 13일 시료에서는 발효 0일째의 대조군에 비해 약 2.4배 높은 13.49μmole/g이 검출되었다. 나아가, Rd 함량이 대조군에 비해 약 4.4 내지 7.3 배로 크게 증가한 것을 확인할 수 있었다. 또한, 진세노사이드의 총 함량은 6일, 13일 발효 시 29.03, 31.39 μmole/g로 대조군의 23.56 μmole/g에 비해 약 23%, 33% 증가하였다.
As shown in Table 4, the content of Rg1 from solid fermented red ginseng samples increased from 6 days in the fermentation period, and 13.49 μmol / g was detected in the fermentation period 13 days. Furthermore, it was confirmed that the Rd content was significantly increased to about 4.4 to 7.3 times as compared with the control group. The total content of ginsenoside was 29.03 and 31.39 μmole / g on the 6th and 13th days of fermentation, respectively, which was about 23% and 33% higher than that of the control group of 23.56 μmole / g.

시험예Test Example 3: 안정성 평가 3: Stability evaluation

상기 시험예 2의 결과를 기초로 진세노사이드 함량이 보다 우수한 고체발효홍삼의 액상에서의 안정성을 평가하기 위하여 다음과 방법으로 추출물 시료를 얻어 탁도, pH 및 진세노사이드 함량을 측정하였다. Based on the results of Test Example 2, in order to evaluate the stability of solid fermented red ginseng in liquid phase, which has better ginsenoside content, turbidity, pH and ginsenoside content were measured by extracting samples by the following method.

구체적으로, 실시예 4의 고체발효홍삼과 비발효홍삼(대조군)을 90℃에서 10분동안 가열하고 4500rpm으로 15분 동안 원심분리하였다. 상층액 15ml을 얻어 RO수 85ml으로 희석하였다. 그 다음 카트리지로 여과(Absolute 1μm 필터)하고 110℃에서 90초동안 살균하여 추출물을 얻었다.Specifically, the solid fermented red ginseng and the non-fermented red ginseng (control group) of Example 4 were heated at 90 占 폚 for 10 minutes and centrifuged at 4500 rpm for 15 minutes. 15 ml of supernatant was obtained and diluted with 85 ml of RO. The extract was then obtained by filtration through a cartridge (Absolute 1 [mu] m filter) and sterilization at 110 [deg.] C for 90 seconds.

상기 얻어진 추출물을 60℃에서 보관하면서 2일, 5일, 8일 및 16일째에 샘플링을 실시하여 pH, 진세노사이드 함량 및 탁도를 측정하였다. The obtained extracts were sampled at 2 days, 5 days, 8 days and 16 days while being stored at 60 占 폚 to measure pH, ginsenoside content and turbidity.

그 결과를 하기 표 5 및 도 1에 나타내었다.
The results are shown in Table 5 and FIG.

표 5는 초기 진세노사이드의 초기 함량을 100%로 하여 시간 경과에 따른 진세노사이드의 함량과, 이에 따른 pH를 나타낸 것이다. Table 5 shows the content of ginsenoside over time with the initial content of the initial ginsenoside as 100% and the pH accordingly.

보관일 수
(60℃)
Days to keep
(60 DEG C)
대조군
(비발효홍삼)
Control group
(Non-fermented red ginseng)
실시예 4
(아스퍼질러스 속 국균 접종 고체발효홍삼)
Example 4
(Aspergillus spp. Inoculated solid fermented red ginseng)
진세노사이드Gin Senocide pHpH 진세노사이드Gin Senocide pHpH 00 100%100% 5.605.60 100%100% 6.666.66 88 115%115% 5.855.85 123%123% 6.036.03 1616 97%97% 5.925.92 106%106% 5.875.87

상기 표 5의 결과를 살펴보면, 실시예에 따른 발효홍삼의 진세노사이드 함량은 비발효홍삼보다 높았으며, 시간 경과에 따라 꾸준히 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 나아가, pH값이 약 6 정도로 비발효홍삼보다 높았으며, 시간이 경과하여도 거의 변화하지 않아 비발효홍삼에 비해 알칼리성을 띄고 있는 것을 알 수 있었다. 진세노사이드가 알칼리 환경에서 비교적 안정한 것으로 알려져 있기 때문에 본 발명의 고체발효홍삼은 장기 안정성이 높을 것으로 판단된다. As shown in Table 5, the content of ginsenoside of fermented red ginseng according to the present invention was higher than that of non-fermented red ginseng, and it was found that the ginsenoside content was steadily increased with time. Further, the pH value was about 6 higher than that of non-fermented red ginseng, and it showed almost no change even after a lapse of time, indicating that it was alkaline compared to non-fermented red ginseng. Since ginsenoside is known to be relatively stable in an alkaline environment, the solid fermented red ginseng of the present invention is considered to have a high long-term stability.

또한, 진세노사이드 함량은 초기 농도를 100%로 하였을 때 비발효홍삼은 최종 97%, 실시예 4의 고체발효홍삼은 최종 106%로 본 발명의 고체발효홍삼의 안정성이 더 뛰어난 것을 확인할 수 있었다.
When the initial concentration of the ginsenoside was set at 100%, the final fermented red ginseng of the present invention was found to be more stable than that of the non-fermented red ginseng at the final stage of 97% and the fermented red ginseng of Example 4 at the final stage of 106% .

도 1은 60℃ 에서 보관일 수에 따른 탁도 변화를 나타낸 그래프이다.FIG. 1 is a graph showing the turbidity change according to the number of days stored at 60.degree.

도 1의 탁도 측정 결과를 살펴보면, 실시예 4의 발효홍삼의 추출물은 0, 2, 8 및 16일째의 탁도가 1.56 NTU, 1.47 NTU, 1.69 NTU 및 1.53 NTU의 낮은 수준의 탁도를 보이고 있는 반면, 비발효홍삼은 14.5 NTU, 28.1 NTU, 25.2 NTU 및 11.2 NTU로, 실시예 2의 발효홍삼에 비해 최대 약 18배 높은 수준의 탁도를 보이고 있음을 확인하였다.
1, the fermented red ginseng extract of Example 4 showed turbidity at low levels of 1.56 NTU, 1.47 NTU, 1.69 NTU and 1.53 NTU on days 0, 2, 8 and 16, The non-fermented red ginseng showed 14.5 NTU, 28.1 NTU, 25.2 NTU, and 11.2 NTU, showing up to about 18 times higher turbidity than the fermented red ginseng of Example 2.

이와 같이, 본 발명의 발효홍삼은 알칼리성에 가까워 진세노사이드를 보다 안정하게 함유하고 있어 액상에서 침전 안정성이 우수하다. 또한, 낮은 혼탁도를 나타내어 홍삼 음료에 유용하게 적용 가능하다. As described above, the fermented red ginseng of the present invention contains senoside, which is close to alkaline, more stably and is excellent in stability in the liquid phase. In addition, it exhibits low turbidity and is applicable to red ginseng beverages.

Claims (13)

홍삼에 아스퍼질러스 속(Aspergillus spp.) 국균을 접종하여 발효시키는 것을 포함하는, 발효홍삼의 제조방법으로서,
상기 아스퍼질러스 속 국균이 아스퍼질러스 카와치(Aspergillus kawachii)인, 발효홍삼의 제조방법.
A method for producing fermented red ginseng comprising fermenting red ginseng by inoculating Aspergillus spp.
Wherein the Aspergillus genus is Aspergillus kawachii .
삭제delete 제1항에 있어서,
상기 발효가 고체발효인, 발효홍삼의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the fermentation is a solid fermentation.
제3항에 있어서,
상기 고체발효가 멸균된 홍삼 고형분에 고형분 1g 당 0.5 내지 2ml의 물을 가하고, 얻어진 혼합물에 국균을 접종한 후, 25 내지 40℃에서 1일 내지 20일 동안 발효시키는 것을 포함하는, 발효홍삼의 제조방법.
The method of claim 3,
Adding 0.5 to 2 ml of water per 1 g of solid matter to the solid red germ-sterilized solid fermentation broth, inoculating the obtained mixture with the germ bacteria, and then fermenting the mixture at 25 to 40 ° C for 1 to 20 days. Way.
제4항에 있어서,
상기 국균이 상기 홍삼 고형분 총 중량을 기준으로 0.01 내지 1.0 중량%의 양으로 접종되는, 발효홍삼의 제조방법.
5. The method of claim 4,
Wherein the germ can be inoculated in an amount of 0.01 to 1.0 wt% based on the total weight of the red ginseng solid.
제1항에 있어서,
상기 발효가 액체발효인 것을 특징으로 하는, 발효홍삼의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the fermentation is liquid fermentation.
제6항에 있어서,
상기 액체발효가 멸균된 홍삼 고형분에 고형분 1g 당 5 내지 50ml의 물을 가하고, 얻어진 혼합물에 국균을 접종한 후, 25 내지 40℃에서 1일 내지 20일 동안 발효시키는 것을 포함하는, 발효홍삼의 제조방법.
The method according to claim 6,
Preparing fermented red ginseng by adding 5 to 50 ml of water per 1 g of solid content to the solid red ginseng fermented with liquid fermentation and inoculating the obtained mixture with fermented ginseng at 25 to 40 DEG C for 1 to 20 days. Way.
제7항에 있어서,
상기 국균이 상기 홍삼 고형분 총 중량을 기준으로 0.01 내지 1.0 중량%의 양으로 접종되는, 발효홍삼의 제조방법.
8. The method of claim 7,
Wherein the germ can be inoculated in an amount of 0.01 to 1.0 wt% based on the total weight of the red ginseng solid.
제1항 및 제3항 내지 제8항 중 어느 한 항의 제조방법에 의해 제조된, 홍삼 발효물.
A red ginseng fermented product produced by the production method of any one of claims 1 and 3 to 8.
제9항에 있어서,
상기 홍삼 발효물이 3 내지 20 μmole/g의 진세노사이드 Rd를 포함하는, 홍삼 발효물.
10. The method of claim 9,
Wherein the fermented red ginseng comprises 3 to 20 占 퐉ole / g of ginsenoside Rd.
제10항에 있어서,
상기 홍삼 발효물이 1.5 내지 15.0 μmole/g의 진세노사이드 Rg1을 포함하는, 홍삼 발효물.
11. The method of claim 10,
Wherein the fermented red ginseng comprises ginsenoside Rg1 of 1.5 to 15.0 占 퐉ole / g.
제9항의 홍삼 발효물을 포함하는 음료.
A beverage comprising the red ginseng fermented product of claim 9.
제12항에 있어서,
상기 홍삼 발효물이 고체 발효에 의해 제조된 것인, 음료.
13. The method of claim 12,
Wherein said fermented red ginseng is produced by solid fermentation.
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