KR101800802B1 - Method for manufacturing Glycyrrhiza uralensis extract and composition for treating or preventing oral diseases comprising the extract - Google Patents

Method for manufacturing Glycyrrhiza uralensis extract and composition for treating or preventing oral diseases comprising the extract

Info

Publication number
KR101800802B1
KR101800802B1 KR1020160011285A KR20160011285A KR101800802B1 KR 101800802 B1 KR101800802 B1 KR 101800802B1 KR 1020160011285 A KR1020160011285 A KR 1020160011285A KR 20160011285 A KR20160011285 A KR 20160011285A KR 101800802 B1 KR101800802 B1 KR 101800802B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
extract
oil
water
licorice
soluble
Prior art date
Application number
KR1020160011285A
Other languages
Korean (ko)
Other versions
KR20160093568A (en
Inventor
김욱환
심재현
최봉규
최유정
최형길
오인선
Original Assignee
쿼럼바이오 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 쿼럼바이오 주식회사 filed Critical 쿼럼바이오 주식회사
Publication of KR20160093568A publication Critical patent/KR20160093568A/en
Application granted granted Critical
Publication of KR101800802B1 publication Critical patent/KR101800802B1/en

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789Magnoliopsida [dicotyledons]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/484Glycyrrhiza (licorice)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9794Liliopsida [monocotyledons]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/30Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/312Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on dental health

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

본 발명은 감초 추출물의 제조방법 및 이로부터 수득된 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물에 대한 것이다. 본 발명에 따르면, 감초로부터 쉽고 간편하게 글리시리진을 제거하고 구강질환에 효과가 있는 물질들을 농축하여 추출할 수 있다. 또한, 이러한 방법으로 수득된 감초 추출물은 유해한 용매를 포함하지 않아 인체에 안전하며, S. mutans 균의 억제 활성이 높아 치아 우식증을 비롯한 구강질환의 예방 및 치료에 효과적으로 적용할 수 있다.The present invention relates to a method for producing licorice extract and a composition for preventing or treating oral diseases comprising the extract obtained therefrom. According to the present invention, it is possible to easily and easily remove glycyrrhizin from licorice and concentrate and extract substances having an effect on oral diseases. In addition, the licorice extract obtained by this method does not contain a harmful solvent and is safe for human body, and has a high inhibitory activity of S. mutans. Thus, it can be effectively applied for prevention and treatment of oral diseases including dental caries.

Description

감초 추출물의 제조방법 및 이로부터 수득된 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물{Method for manufacturing Glycyrrhiza uralensis extract and composition for treating or preventing oral diseases comprising the extract}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to a method for preparing a licorice extract and a method for preparing the same,

본 발명은 감초 추출물의 제조방법 및 이로부터 수득된 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물에 대한 것이다. The present invention relates to a method for producing licorice extract and a composition for preventing or treating oral diseases comprising the extract obtained therefrom.

보다 상세하게는, 인체에 안전한 식용 오일을 이용하여 글리시리진을 제거하고 구강질환에 효과가 있는 기능성 물질들을 농축할 수 있는, 감초 추출물의 제조방법 및 이로부터 수득된 감초 추출물을 포함하는, 구강질환 예방 또는 치료용 조성물에 대한 것이다.More particularly, the present invention relates to a method for producing a licorice extract, which is capable of removing glycyrrhizin by using human-safe cooking oil and concentrating functional substances effective for oral diseases, and a method for preventing oral diseases Or < / RTI >

감초는 '약방의 감초' 라는 속담이 있을 정도로 우리에게 친숙한 한약재이다. Glycyrrhiza uralensis라는 학명을 가진 감초는, 동의보감에 성질은 평하고 맛이 달며 독이 없다고 기술되어 있다. 이런 감초의 단맛은 글리시리진(glycyrrhizin)이라는 성분 때문인데, 약리적으로 글리시리진이 항알레르기 작용, NK 세포 활성화 작용, 인테페론 유리작용, 위산 분비 억제, 위 점막을 보호하는 항궤양 작용, 항염증 작용 등을 한다고 알려져 있다. Licorice is a medicinal herb familiar to us so that there is a proverb called "licorice of drugstore". Glycyrrhiza uralensis licorice, which has a scientific name, Dongbibo, the property is described as plain, flavorless and poisonous. The sweetness of this licorice is due to glycyrrhizin, which is pharmacologically known as glycyrrhizin because of its antiallergic action, NK cell activation, interferon-free action, inhibition of gastric secretion, anti-ulcerative action, anti-inflammatory action It is known.

감초 추출물에 미량 들어있는 물질들이 치아 우식의 주 원인균으로 알려져 있는 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans, S. mutans) 균을 효과적으로 억제할 수 있기에, 감초 추출물을 이용하여 치아 우식을 예방하고자 하는 여러 시도들이 있어왔다. Since the substances contained in the licorice extract can effectively inhibit Streptococcus mutans (S. mutans), which is known to be a major causative agent of dental caries, various attempts to prevent dental caries using licorice extract I have been.

그러나, Wen D. 등은 글리시리진을 과량 복용시, 심한 고혈압, 저칼륨 혈증, 신장에서 코티졸이 코티손으로 전환되는 과정을 막아 생길 수 있는 광물질 대사 과잉 등의 질병을 유발할 수 있는 글리시레틴산(glycyrrhetic acid)이 과량 생성될 수 있기 때문에 주의가 필요하다고 보고하였다(Separation methods for antibacterial and antirheumatism agents in plant medicines. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2004;812:101-17). 이에 미국식품의약국(FDA)에서는 식품에 첨가할 수 있는 글리시리진의 양을 규제하고 있다.However, Wen D. et al. Have found that excessive doses of glycyrrhizin can result in severe hypertension, hypokalemia, and glycyrrhetic acid, which can cause diseases such as mineral metabolism excess that may prevent the conversion of cortisol to cortisone in the kidney ) Were reported to require caution because they can be overproduced (Separation methods for antibacterial and antirheumatism agents in plant medicines. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2004; 812: 101-17). The US Food and Drug Administration (FDA) regulates the amount of glycyrrhizin that can be added to food.

이에, S. J. Ahn 등은 감초 추출물에서 S. mutans균 억제 효과는 없고 과량 복용시 인체에 유해할 수 있는 글리시리진을 제거하고자 HPLC를 사용하였고, 글리시리진이 제거된 추출물이 S. mutans균을 효과적으로 억제했다고 보고하였다(The antimicrobial effects of deglycyrrhizinated licorice root extract on Streptococcus mutans UA159 in both planktonic and biofilm cultures. Anaerobe. 2012;18:590-6). 그러나 상기 방법을 이용하여 수득된 감초 추출물을 첨가제로 사용하기 위해서는, 사용한 유기 용매를 한국식품의약품안전처(KFDA) 기준 이하로 제거하고, 이를 증명해야 하는 번거로움이 있고, HPLC법의 특성상 대량 생산이 쉽지 않다는 한계를 가지고 있다.Therefore, SJ Ahn et al. Used HPLC to remove glycyrrhizin, which has no inhibitory effect on S. mutans in licorice extract, and which may be harmful to humans when overdosed, and that glycyrrhizin-free extract effectively inhibited S. mutans (The antimicrobial effects of deglycyrrhizinated licorice root extract on Streptococcus mutans UA159 in both planktonic and biofilm cultures. Anaerobe . 2012; 18: 590-6). However, in order to use the licorice extract obtained by using the above method as an additive, it is troublesome to remove the used organic solvent below the KFDA standard and to prove it. Due to the nature of the HPLC method, This is not easy.

상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하고자, 본 발명의 목적은 인체에 유해한 화학 용매 대신에 식용 오일을 사용하여 감초로부터 글리시리진을 제거하고 감초에 있는 다양한 기능성 물질들을 농축하여 추출할 수 있으며, 대량 생산에 적용하기 쉬운, 감초 추출물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 수득된 감초 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.In order to solve the problems of the prior art as described above, an object of the present invention is to remove glycyrrhizin from licorice by using edible oil instead of a chemical solvent harmful to the human body, to extract various functional materials in licorice, , A method for producing a licorice extract and a composition for preventing or treating an oral disease, which comprises the licorice extract obtained by the method.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 측면은,According to an aspect of the present invention,

감초와 제 1 수용성 용매를 혼합하여 제 1 수용성 추출물을 수득하는 제 1 단계;Mixing the licorice and the first water-soluble solvent to obtain a first water-soluble extract;

상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일을 혼합하여 오일 추출물을 수득하는 제 2 단계;A second step of mixing the first aqueous extract and the edible oil to obtain an oil extract;

상기 오일 추출물과 제 2 수용성 용매를 혼합하여 제 2 수용성 추출물을 수득하는 제 3 단계; 및A third step of mixing the oil extract and the second water-soluble solvent to obtain a second water-soluble extract; And

상기 제 2 수용성 추출물에서 제 2 수용성 용매를 제거하는 제 4 단계를 포함하는, 감초 추출물의 제조방법을 제공한다. And a fourth step of removing the second water-soluble solvent from the second water-soluble extract.

또한 본 발명의 다른 일 측면은, 상기 방법으로 수득된 감초 추출물을 유효 성분으로 포함하는, 구강질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.Another aspect of the present invention provides a composition for preventing or treating oral diseases, which comprises the licorice extract obtained by the above method as an active ingredient.

본 발명의 감초 추출물의 제조방법에 따르면, 감초로부터 쉽고 간편하게 글리시리진을 제거하고 구강질환에 효과가 있는 물질들을 분배계수의 차이에 의해서 농축하여 추출할 수 있으며, 대량 생산이 용이한 이점이 있다. According to the method for preparing licorice extract of the present invention, it is possible to easily and easily remove glycyrrhizin from licorice and to extract substances which are effective for oral diseases by the difference in distribution coefficient, and it is advantageous in mass production.

또한, 이러한 방법으로 수득된 감초 추출물은 유해한 용매를 포함하지 않아 인체에 안전하며, S. mutans 균의 억제 활성이 높아 치아 우식증을 비롯한 구강질환의 예방 및 치료에 효과적으로 적용할 수 있을 것으로 기대된다. In addition, the licorice extract obtained by this method does not contain harmful solvents and is safe for human body, and it is expected that it can be effectively applied for prevention and treatment of oral diseases including dental caries due to high inhibitory activity of S. mutans.

본 발명의 감초 추출물의 제조방법에 따르면, 감초로부터 쉽고 간편하게 글리시리진을 제거하고 구강질환에 효과가 있는 물질들을 분배계수의 차이에 의해서 농축하여 추출할 수 있으며, 대량 생산이 용이한 이점이 있다.
또한, 이러한 방법으로 수득된 감초 추출물은 유해한 용매를 포함하지 않아 인체에 안전하며, S. mutans 균의 억제 활성이 높아 치아 우식증을 비롯한 구강질환의 예방 및 치료에 효과적으로 적용할 수 있을 것으로 기대된다.
According to the method for preparing licorice extract of the present invention, it is possible to easily and easily remove glycyrrhizin from licorice and to extract substances which are effective for oral diseases by the difference in distribution coefficient, and it is advantageous in mass production.
In addition, the licorice extract obtained by this method does not contain harmful solvents and is safe for human body, and it is expected that it can be effectively applied for prevention and treatment of oral diseases including dental caries due to high inhibitory activity of S. mutans.

본 발명에서, 제 1, 제 2 등의 용어는 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용되며, 상기 용어들은 하나의 구성 요소를 다른 구성 요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다. In the present invention, the terms first, second, etc. are used to describe various components, and the terms are used only for the purpose of distinguishing one component from another.

또한, 본 명세서에서 사용되는 용어는 단지 예시적인 실시 예들을 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도는 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다", "구비하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 실시된 특징, 숫자, 단계, 구성 요소 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 구성 요소, 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.Moreover, the terminology used herein is for the purpose of describing exemplary embodiments only and is not intended to be limiting of the present invention. The singular expressions include plural expressions unless the context clearly dictates otherwise. In this specification, the terms "comprising," "comprising," or "having ", and the like are intended to specify the presence of stated features, But do not preclude the presence or addition of one or more other features, integers, steps, components, or combinations thereof.

본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 형태를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 예시하고 하기에서 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 개시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.While the invention is susceptible to various modifications and alternative forms, specific embodiments thereof are shown by way of example in the drawings and will herein be described in detail. It should be understood, however, that the invention is not intended to be limited to the particular forms disclosed, but includes all modifications, equivalents, and alternatives falling within the spirit and scope of the invention.

이하, 본 발명의 감초 추출물의 제조방법 및 이로부터 수득된 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물을 보다 상세히 설명한다.Hereinafter, the composition for preventing or treating oral diseases including the method for producing licorice extract of the present invention and the extract obtained therefrom will be described in detail.

감초(학명: Glycyrrhiza uralensis)에는 뮤탄스 연쇄상구균을 감소시킬 수 있는 여러 물질들이 미량 존재한다고 알려져 있다. 이러한 물질들로는 예를 들어, glycyrrhizol A, licoricidin, licorisoflavan A, licorisoflavan C, licorisoflavan D, licorisoflavan E 등이 알려져 있으며, glycyrrhizol A를 함유한 무설탕 막대 사탕을 먹게 하면 구강 내 뮤탄스 연쇄상구균을 효과적으로 감소시킬 수 있다는 임상결과들이 보고되어 있다. Licorice (Scientific name: Glycyrrhiza uralensis ) is known to contain a number of substances that can reduce mutans streptococci. These substances are known, for example, glycyrrhizol A, licoricidin, licorisoflavan A, licorisoflavan C, licorisoflavan D, and licorisoflavan E. Eating an unsweetened lollipop containing glycyrrhizol A effectively reduces the oral streptococcal strain Have been reported.

그러나, 감초에 포함되어 있는 글리시리진(glycyrrhizin)이라는 성분은 뮤탄스 연쇄상구균 억제 효과는 없으면서 과량 복용시 심한 고혈압, 저칼륨 혈증, 광물질 대사 과잉 등의 질병을 유발할 수 있는 글리시레틴산(glycyrrhetic acid)이 생성될 수 있기 때문에, 감초 추출물을 인체에 적용하기 위해서는 추출물 중 글리시리진을 최대한 배제하면서 뮤탄스 연쇄상구균을 감소시킬 수 있는 유효 성분만을 포함하도록 하는 것이 매우 중요하다. However, glycyrrhizin, which is contained in licorice, is a glycyrrhetic acid that can induce diseases such as hypertension, hypokalemia, mineral metabolism excess, and the like when there is no mutant streptococcal inhibiting effect and excessive use of glycyrrhizin It is very important that the licorice extract be applied to the human body so as to contain only the active ingredient capable of decreasing the mutans streptococci while minimizing glycyrrhizin in the extract.

이에, 본 발명의 발명자들은, 감초의 수용성 용매 추출물에 대하여 식용 오일(oil)을 이용하여 2차적으로 추출한 오일 추출물에 글리시리진의 함량이 낮아지고 glycyrrhizol A와 같은 S. mutans균의 억제 활성을 나타내는 기능성 물질들의 성분이 추출되며, 이러한 오일 추출물을 다시 수용성 용매로 추출한 2차 추출물에서 수용성 용매를 제거함으로써 상기 기능성 물질들이 감초 추출물 중에 농축되는 것에 기초하여 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the inventors of the present invention have found that the content of glycyrrhizin in the oil extract extracted secondarily using an oil for the water-soluble solvent extract of licorice is lowered and the content of glycyrrhizin is lowered in functional extracts showing the inhibitory activity of S. mutans such as glycyrrhizol A The present invention has been accomplished on the basis that the functional substances are concentrated in the licorice extract by removing components of the substances and removing the water-soluble solvent from the second extract obtained by extracting the oil extract again with a water-soluble solvent.

보다 자세히 설명하면, 감초 추출물에 존재하는 물질들에 있어서, 이들 물질들의 물리·화학적 특성 중 하나인 오일-물 분배계수(Oil-water partition coefficient)값의 차이가 큰 것을 이용하여 글리시리진을 제거하고 유효 물질들을 농축할 수 있는 점에 착안하여 본 발명에 이르게 되었다. 즉, 글리시리진은 오일-물 분배계수가 상대적으로 작은 반면, 반대로 구강질환에 효과가 있는 다른 기능성 물질들은 글리시리진보다 오일-물 분배계수가 상당히 크다. 이러한 분배계수의 차이에 의해서 감초를 오일을 이용하여 추출할 경우 글리시리진은 오일에는 거의 녹지 않고 오일-물 분배계수가 큰 기능성 물질들은 대부분 오일에 녹아 나오게 된다.More specifically, in the substances present in the licorice extract, glycyrrhizin is removed and used in the presence of a large difference in oil-water partition coefficient, which is one of the physical and chemical properties of these substances. The present inventors came to the present invention in consideration of the fact that the substances can be concentrated. In other words, glycyrrhizin has a relatively low oil-water partition coefficient, while other functional substances that have an effect on oral diseases have a significantly higher oil-water partition coefficient than glycyrrhizin. Glycyrrhizin is virtually insoluble in oil when it is extracted with oil due to the difference in the partition coefficient. Most of the functional materials having a large oil-water partition coefficient are dissolved in the oil.

감초에 존재하는 성분들의 오일-물 분배계수는 알려져 있지는 않지만 옥탄올과 물에 대한 분배계수(octanol/water partition coefficient; Kow)는 보고되어 있다. 예를 들면 글리시리진, glycyrrhizol A, licoricidin, licorisoflavan A, licorisoflavan C, licorisoflavan D, licorisoflavan E의 Kow값은 각각 3.194, 8.514, 7.980, 8.541, 7.771, 7.771, 7.771로 보고되어 있다. 이 Kow의 값이 클수록 물보다는 옥탄올에 더 잘 용해되게 된다. 옥탄올은 탄소 사슬이 10개인 알코올로 비극성이므로, 비극성 화합물인 오일도 옥탄올-물 분배계수와 유사한 경향을 보일 것으로 추측할 수 있다. 따라서, 본 발명은 감초 추출물의 옥탄올-물 분배계수 차이를 이용한 물질의 분리 방법의 원리를 오일에 적용하여 감초 추출물에서 기능성 물질을 추출하는 방법에 응용함으로써 완성되었다. The oil-water partition coefficients of the components present in licorice are not known, but the octanol / water partition coefficient (K ow ) has been reported. For example, the K ow values of glycyrrhizin, glycyrrhizol A, licoricidin, licorisoflavan A, licorisoflavan C, licorisoflavan D, and licorisoflavan E are reported as 3.194, 8.514, 7.980, 8.541, 7.771, 7.771, 7.771, respectively. The larger the value of K ow , the more soluble it is in octanol than in water. Since octanol is nonpolar with an alcohol with 10 carbon chains, it can be assumed that the nonpolar oil will show a similar trend to the octanol-water partition coefficient. Accordingly, the present invention has been completed by applying the principle of the method of separating the substance using the difference of the octanol-water partition coefficient of the licorice extract to the method of extracting the functional substance from the licorice extract by applying to the oil.

본 발명의 일 측면에 따르면, 감초와 제 1 수용성 용매를 혼합하여 제 1 수용성 추출물을 수득하는 제 1 단계; 상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일을 혼합하여 오일 추출물을 수득하는 제 2 단계; 상기 오일 추출물과 제 2 수용성 용매를 혼합하여 제 2 수용성 추출물을 수득하는 제 3 단계; 및 상기 제 2 수용성 추출물에서 제 2 수용성 용매를 제거하는 제 4 단계를 포함하는, 감초 추출물의 제조방법을 제공한다. According to one aspect of the present invention, there is provided a method for producing a water soluble extract comprising: a first step of mixing licorice and a first water-soluble solvent to obtain a first water-soluble extract; A second step of mixing the first aqueous extract and the edible oil to obtain an oil extract; A third step of mixing the oil extract and the second water-soluble solvent to obtain a second water-soluble extract; And a fourth step of removing the second water-soluble solvent from the second water-soluble extract.

먼저, 감초에 제 1 수용성 용매를 혼합하여 제 1 수용성 추출물을 수득한다(제 1단계).First, licorice is mixed with a first water-soluble solvent to obtain a first water-soluble extract (Step 1).

이때 상기 감초는 유효 성분이 보다 잘 용해될 수 있도록 바람직하게는 분말 형태로 사용할 수 있다. At this time, the licorice may be used in powder form so that the active ingredient can be more easily dissolved.

상기 제 1 수용성 용매로는 물, 탄소수 4 이하의 저급 알코올, 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 에탄올을 사용할 수 있다. 또한, 상기 제 1 수용성 용매로 물을 사용할 경우, 감초의 유효 성분들이 보다 잘 용해될 수 있도록 온도가 80℃ 이상인 열수(hot water)를 사용할 수 있다.As the first water-soluble solvent, water, a lower alcohol having 4 or less carbon atoms, or a mixture thereof may be used, preferably ethanol. In addition, when water is used as the first water-soluble solvent, hot water having a temperature of 80 ° C or higher may be used so that the active ingredients of licorice are more easily dissolved.

상기 감초와 제 1 수용성 용매의 혼합비는 특별히 제한되는 것은 아니나, 감초 : 제 1 수용성 용매의 중량비가 약 1:1 내지 약 1: 20, 또는 약 1:5 내지 약 1:10이 되도록 할 수 있다. The mixing ratio of the licorice and the first water-soluble solvent is not particularly limited, but the weight ratio of licorice: first water-soluble solvent may be about 1: 1 to about 1:20, or about 1: 5 to about 1:10 .

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 감초와 제 1 수용성 용매는 잘 혼합하여 간헐적으로 교반하면서 상온 내지 60℃의 온도에서 일정시간 동안, 예를 들어 약 12시간 내지 약 100시간, 또는 약 24시간 내지 약 72시간 동안 두어, 감초의 유효 성분이 제 1 수용성 용매에 충분히 용해되도록 한다. 이후 상기 감초와 제 1 수용성 용매의 혼합물을 여과하여 감초 분말을 제거함으로써 감초의 제 1 수용성 추출물만을 얻는다.According to one embodiment of the present invention, the licorice and the first water-soluble solvent are mixed well and stirred intermittently at a temperature of from room temperature to 60 ° C for a certain period of time, for example from about 12 hours to about 100 hours, To about 72 hours so that the active ingredient of licorice is sufficiently dissolved in the first water-soluble solvent. Thereafter, the mixture of the licorice and the first water-soluble solvent is filtered to remove the licorice powder to obtain only the first water-soluble extract of licorice.

다음에, 상기 제 1 수용성 추출물에 식용 오일을 혼합하여 감초의 오일 추출물을 수득한다(제 2 단계). Next, an edible oil is mixed with the first water-soluble extract to obtain an oil extract of licorice (step 2).

상기 식용 오일의 종류는 특별히 제한되지 않으나, 예를 들어 포도씨유, 카놀라유, 올리브유, 홍화씨유, 해바라기씨유, 옥수수유, 콩기름, 또는 들기름 등 주변에서 손쉽게 구할 수 있고 인체에 해가 없는 식물성의 식용 오일을 사용할 수 있다. 바람직하게는 포도씨유를 사용할 수 있다.The type of the edible oil is not particularly limited. For example, the edible oil can be easily recovered from the environment such as grape seed oil, canola oil, olive oil, safflower seed oil, sunflower seed oil, corn oil, soybean oil, Oil can be used. Preferably, grape seed oil can be used.

상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일의 혼합비는 특별히 제한되는 것은 아니나, 상기 제 1 수용성 추출물 : 식용 오일의 부피비가 약 1:1 내지 약 1:20, 또는 약 1:1 내지 약 1:10이 되도록 할 수 있다.The mixing ratio of the first water-soluble extract to the edible oil is not particularly limited, but the volume ratio of the first water-soluble extract: edible oil is about 1: 1 to about 1:20, or about 1: 1 to about 1:10 can do.

감초의 오일 추출물을 수득하기 위해서, 상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일을 충분히 섞어준 후, 제 1 수용성 용매층과 오일층으로 분리되도록 상온 내지 60℃의 온도에서 일정시간 동안, 예를 들어 약 1시간 내지 약 48시간, 또는 약 6시간 내지 약 36시간 동안 가만히 방치한다.In order to obtain an oil extract of licorice, the first aqueous extract and the edible oil are thoroughly mixed, and then the mixture is stirred at a temperature ranging from room temperature to 60 ° C for a predetermined time, for example, about 1 Hour to about 48 hours, or about 6 hours to about 36 hours.

상기 제 1 수용성 용매층과 오일층으로 완전히 분리된 것을 확인하고, 상기 제 1 수용성 용매층은 제거하고 오일층만을 분리함으로써 오일 추출물을 수득할 수 있다. An oil extract can be obtained by confirming that the oil phase is completely separated into the first water soluble solvent layer and the oil layer and removing the first water soluble solvent layer and separating only the oil layer.

이때 상기 제 1 수용성 추출물에 대한 식용 오일의 부피비를 낮게 하면, 감초의 유효 성분 중 옥탄올-물 분배계수(Kow값)가 높은 물질의 농도가 높은 오일 추출물을 얻을 수 있고, 반대로 상기 제 1 수용성 추출물에 대한 식용 오일의 부피비를 높게 하면, 감초의 유효 성분 중 옥탄올-물 분배계수(Kow값)가 낮은 물질의 농도가 높은 오일 추출물을 얻을 수 있다.At this time, when the volume ratio of the edible oil to the first water-soluble extract is lowered, an oil extract having a high concentration of a substance having a high octane-water partition coefficient (K ow value) among the active ingredients of licorice can be obtained, When the volume ratio of the edible oil to the water-soluble extract is increased, an oil extract having a high concentration of substances having a low octanol-water partition coefficient (K ow value) among the active ingredients of licorice can be obtained.

이처럼 농축하고자 하는 기능성 물질의 Kow값에 기초하여, 상기 식용 오일 : 제 1 수용성 추출물의 부피비를 다르게 함으로써, 원하는 기능성 물질이 상대적으로 더 많이 농축된 오일 추출물을 얻을 수 있다.By varying the volume ratio of the edible oil: first aqueous extract on the basis of the K ow value of the functional substance to be concentrated as described above, an oil extract having a relatively higher concentration of the desired functional substance can be obtained.

이러한 원리를 이용하여, 상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일을 혼합하여 오일 추출물을 수득하는 제 2 단계는, 상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일의 부피비를 달리하여 2회 이상 수행할 수 있다.Using this principle, the second step of mixing the first aqueous extract with the edible oil to obtain an oil extract may be carried out more than twice with different volume ratios of the first aqueous extract and the edible oil.

즉, 상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일을 혼합한 후 오일층과 제 1 수용성 용매층으로 분리하여 1차로 오일 추출물을 수득하고, 상기 분리된 1 수용성 용매층에 다시 식용 오일을 혼합하여 오일층과 제 1 수용성 용매층으로 분리하여 2차로 오일 추출물을 수득하는 등 오일 추출물 수득 단계를 2회 이상 반복할 수 있다.That is, the first water-soluble extract and the edible oil are mixed and then separated into an oil layer and a first water-soluble solvent layer to obtain an oil extract, and then the edible oil is mixed with the separated water- The step of obtaining the oil extract can be repeated twice or more, for example, by separating into a first water-soluble solvent layer to obtain an oil extract secondarily.

상기 제 2 단계를 반복함으로써 얻어지는 오일 추출물들은 서로 합치거나, 또는 각각 별도로 후술하는 제 3 단계 및 제 4 단계를 거쳐 최종 감초 추출물로 제조할 수 있다. The oil extracts obtained by repeating the second step may be combined with each other, or may be separately prepared as a final licorice extract through the third and fourth steps described below.

이와 같이 상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일과의 혼합 및 분리 과정을 부피비를 달리하여 수행할 때, 혼합 횟수와 상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일의 혼합 부피비에 따라 각각의 오일 추출물에 추출되어 나오는 기능성 물질들의 분포 및 농도가 달라지게 된다. 이렇게 하여 여러 번 추출 과정을 거치는 경우 각 추출물마다 기능성 물질의 분포가 다른 오일 추출물을 수득할 수 있다. 이런 방법을 이용하여 원하는 유효 성분들이 선택적으로 농축된 오일 추출물을 수득할 수 있다.When the mixing and separation processes of the first aqueous extract and the edible oil are carried out at different volume ratios, the functionalities extracted from the respective oil extracts according to the mixing frequency and the mixing volume ratio of the first aqueous extract and the edible oil The distribution and concentration of the substances will vary. Thus, when the extract is subjected to the extraction process several times, an oil extract having different distribution of the functional substance can be obtained for each extract. This method can be used to obtain an oil extract in which the desired active ingredients are selectively concentrated.

상기 제 2 단계에서 수득한 오일 추출물에서 오일에 용해되어 있는 유효 성분들을 다시 추출하기 위해서, 상기 오일 추출물과 제 2 수용성 용매를 혼합하여 감초의 제 2 수용성 추출물을 수득한다(제 3 단계). In order to re-extract the active ingredients dissolved in the oil from the oil extract obtained in the second step, the oil extract and the second water-soluble solvent are mixed to obtain a second water-soluble extract of licorice (step 3).

이처럼 다시 오일 추출물에 포함된 성분들을 다시 제 2 수용성 용매로 추출하는 이유는, 식용 오일은 끓는점이 매우 높아서(예를 들어, 올리브유의 경우 약 220도) 오일 추출물에서 오일을 효과적으로 제거하고 기능성 성분들이 농축된 감초의 2차 추출물을 얻기가 매우 힘들기 때문이다. The reason why the components contained in the oil extract again are extracted with the second water-soluble solvent is that the edible oil has a very high boiling point (for example, about 220 degrees in the case of olive oil) and effectively removes the oil from the oil extract, This is because it is very difficult to obtain a secondary extract of concentrated licorice.

이에, 상기 오일 추출물에서 유효 성분들을 다시 농축하기 위해서 제거하기 용이한 제 2 수용성 용매을 이용하여 기능성 성분들을 다시 추출한다. Kow값이 높은 기능성 성분들을 오일에 더 잘 녹지만 제 2 수용성 용매로 여러 번 추출하면 조금씩 제 2 수용성 용매층에 녹아 나오기 때문에 유효 성분들이 수용성 용매층으로 옮겨올 수 있다. In order to concentrate the active ingredients again in the oil extract, the functional ingredients are re-extracted using a second water-soluble solvent which is easy to remove. Functional components with high K ow values are better soluble in oil, but when extracted several times with a second water-soluble solvent, the active components can be transferred to the water-soluble solvent layer since they are dissolved in the second water-soluble solvent layer little by little.

보다 구체적으로, 상기 제 2 수용성 추출물을 수득하기 위하여, 상기 오일 추출물과 제 2 수용성 용매를 혼합하여 충분히 섞어준 후, 제 2 수용성 용매층과 오일층으로 분리되도록 상온 내지 60℃의 온도에서 일정시간 동안, 예를 들어 약 1시간 내지 약 48시간, 또는 약 6시간 내지 약 36시간 동안 가만히 방치한다. More specifically, in order to obtain the second water-soluble extract, the oil extract and the second water-soluble solvent are mixed and thoroughly mixed, and then the mixture is stirred at a temperature of 60 ° C to 60 ° C for a predetermined time , For example from about 1 hour to about 48 hours, or from about 6 hours to about 36 hours.

상기 제 2 수용성 용매층과 오일층으로 완전히 분리된 것을 확인하고, 상기 제 2 수용성 용매층만을 분리하여, 감초의 제 2 수용성 추출물을 수득한다.The second water-soluble solvent layer and the oil layer are completely separated, and only the second water-soluble solvent layer is separated to obtain a second water-soluble extract of licorice.

이때, 상기 오일 추출물에 있는 유효 성분들을 보다 많이 제 2 수용성 용매층으로 옮겨오기 위하여, 상기 제 2 수용성 용매층을 분리하고 남은 오일층에 대하여 다시 제 2 수용성 용매를 혼합하여 섞어준 후 제 2 수용성 용매층과 오일층으로 분리하여 이로부터 재추출된 제 2 수용성 용매층을 1차로 추출한 제 2 수용성 추출물에 추가적으로 더할 수 있다. 또한, 이와 같은 과정을 필요에 따라 1회 이상 또는 2회 이상 반복할 수 있다.At this time, in order to transfer more active ingredients in the oil extract to the second water-soluble solvent layer, the second water-soluble solvent layer is separated and the second water-soluble solvent is mixed again with the remaining oil layer, The second water-soluble solvent layer separated from the solvent layer and the oil layer and further re-extracted from the second water-soluble solvent layer may be added to the first water-extracted second water-soluble extract. Such a process may be repeated one or more times or two or more times as required.

상기 제 2 수용성 용매는 물, 탄소수 4 이하의 저급 알코올, 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있으며, 상기 제 1 수용성 용매와 동일하거나 다른 종류를 사용할 수 있다. 상기 제 2 수용성 용매로 바람직하게는 에탄올을 사용할 수 있다. 또한, 상기 제 2 수용성 용매로 물을 사용할 경우, 감초의 유효 성분들이 보다 잘 용해될 수 있도록 온도가 80℃ 이상인 열수를 사용할 수 있다.The second water-soluble solvent may be water, a lower alcohol having 4 or less carbon atoms, or a mixture thereof. The first water-soluble solvent may be the same or different from the first water-soluble solvent. As the second water-soluble solvent, ethanol may preferably be used. When water is used as the second water-soluble solvent, hot water having a temperature of 80 ° C or higher may be used so that the active ingredients of licorice are more easily dissolved.

상기 오일 추출물과 제 2 수용성 용매의 혼합비 또한 특별히 제한되는 것은 아니며, 상기 오일 추출물 : 제 2 수용성 용매의 부피비가 약 20:1 내지 약 1:20, 또는 약 10:1 내지 약 1:10이 되도록 할 수 있다. The mixing ratio of the oil extract and the second water-soluble solvent is not particularly limited, and the volume ratio of the oil extract: second water-soluble solvent is about 20: 1 to about 1:20, or about 10: 1 to about 1:10 can do.

상기 제 3 단계에서 수득한 제 2 수용성 추출물에서 진공 등을 이용하여 제 2 수용성 용매를 제거함으로써 본 발명의 감초 추출물을 수득할 수 있다(제 4 단계).The second water-soluble extract obtained in the third step can be used to remove the second water-soluble solvent using vacuum or the like to obtain the licorice extract of the present invention (step 4).

이와 같은 과정으로 최종적으로 수득된 감초 추출물은 글리시리진이 거의 존재하지 않거나, 극히 미량만 남아 있어 인체에 대한 독성이 매우 낮아 다량 섭취시에도 비교적 안전하여 구강질환 예방 또는 치료용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다. 또한, 추출시 유해한 유기 용매를 전혀 사용하지 않고 에탄올 또는 물과 같은 수용성 용매와, 식물성의 식용 오일만을 이용하여 추출하며, 최종적으로는 수용성 용매를 실질적으로 완전히 제거함으로써, 인체에 안전하게 적용할 수 있다. The thus-obtained licorice extract finally obtained through the above process is substantially free of glycyrrhizin or remains in an extremely small amount, so that the toxicity to the human body is so low that it is relatively safe even when ingested in large quantities, have. Further, it is possible to safely apply to human body by extracting only a water-soluble solvent such as ethanol or water and vegetable edible oil without using harmful organic solvent at the time of extraction and finally removing substantially the water-soluble solvent .

또한, 본 발명의 감초 추출물 제조 방법은 비교적 간단한 공정으로 복잡한 설비를 필요로 하지 않아, 대량 생산에 적용이 용이한 장점이 있다. In addition, the method for producing licorice extract of the present invention is advantageous in that it is easy to apply to mass production since a complicated facility is not required by a relatively simple process.

본 발명의 일 측면에 따르면, 상술한 과정으로 수득된 감초 추출물을 유효 성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다. According to an aspect of the present invention, there is provided a composition for preventing or treating oral diseases, which comprises the licorice extract obtained as described above as an active ingredient.

상술한 과정으로 수득된 감초 추출물은 S. mutans균에 대한 MIC90값이 약 100μg/mL 이하, 또는 약 90μg/mL 이하, 또는 약 80μg/mL 이하로 낮아, S. mutans균의 억제 활성이 뛰어난 특성을 가지며, 글리시리진을 거의 포함하지 않아 인체에 독성이 없다. The licorice extract obtained by the above-mentioned process has an MIC 90 value of about 100 μg / mL or less, about 90 μg / mL or less, or about 80 μg / mL or less for S. mutans, , And it contains little glycyrrhizin and is not toxic to human body.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 본 발명의 제조 방법에 따라 수득되는 감초 추출물은 글리시리진의 농도(ppm)가 약 95% 이상, 바람직하게는 약 97% 이상 감소되는 효과를 보일 수 있다.According to one embodiment of the present invention, the licorice extract obtained according to the production method of the present invention may exhibit an effect of reducing the concentration (ppm) of glycyrrhizin by about 95% or more, preferably by about 97% or more.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 감초 추출물을 유효 성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물은 상기 감초 추출물의 농도가 약 1 내지 약 100 μg/mL 로 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. According to one embodiment of the present invention, the composition for preventing or treating oral diseases comprising the licorice extract as an active ingredient may contain the licorice extract at a concentration of about 1 to about 100 μg / mL, no.

본 발명의 구강질환 예방 또는 치료용 조성물은 상기 구강질환은 치아 우식증, 및 치주질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. The composition for preventing or treating an oral disease of the present invention may include at least one selected from the group consisting of dental caries, periodontal disease, but is not limited thereto.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 감초 추출물을 유효 성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물은 약학적 조성물일 수 있다. 상기 구강질환 예방 또는 치료용 조성물이 약제, 의약 또는 약학적 용도로 사용되는 경우, 상기 감초 추출물을 유효 성분으로 단독으로 포함하거나, 조성물의 제형, 사용 방법 및 사용 목적에 따라 그 외 약제학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 희석제, 다른 유효 성분 또는 부성분을 추가로 포함할 수 있다. According to one embodiment of the present invention, the composition for preventing or treating oral diseases comprising the licorice extract as an active ingredient may be a pharmaceutical composition. When the composition for preventing or treating oral diseases is used for medicines, medicines or pharmaceutical uses, the licorice extract may be contained alone as an active ingredient, or may be pharmacologically acceptable depending on the composition of the composition, Acceptable carriers, excipients, diluents, other active ingredients or subcomponents.

또한 본 발명의 다른 일 실시예에 따르면, 상기 감초 추출물을 유효 성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물은 치약, 양치 용액, 구강 세정제, 및 구강 스프레이로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있다. 본 발명의 구강질환 예방 또는 치료용 조성물이 치약의 제형일 경우, 본 발명이 속하는 기술분야에서 일반적으로 사용되는 방법에 따라 제조할 수 있으며, 연마제, 습윤제, 결합제, 기포제, 감미제, pH조절제, 방부제, 약효성분, 향료, 증백제, 색소, 용제 등을 함유할 수 있다. According to another embodiment of the present invention, the composition for preventing or treating an oral disease comprising the licorice extract as an active ingredient may be any one selected from the group consisting of a toothpaste, a mouthwash, a mouthwash, and an oral spray. When the composition for preventing or treating oral diseases of the present invention is a formulation of toothpaste, it may be prepared according to a method generally used in the technical field of the present invention, and may be selected from the group consisting of abrasives, wetting agents, binders, foaming agents, sweeteners, , A pharmaceutical active ingredient, a flavoring, a brightening agent, a pigment, a solvent, and the like.

또한 본 발명의 다른 일 실시예에 따르면, 상기 감초 추출물을 유효 성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물은 식품 첨가물일 수 있다. According to another embodiment of the present invention, the composition for preventing or treating oral diseases comprising the licorice extract as an active ingredient may be a food additive.

본 발명의 조성물을 식품 첨가물로 사용하는 경우, 식품, 또는 음료에 상기 감초 추출물을 그대로 첨가하거나 또는 다른 식품 첨가물과 함께 조합하여 사용할 수 있다. 본 발명의 감초 첨가물을 식품 또는 음료의 제조시에 첨가할 경우, 이의 첨가량은 특별히 제한되지 않으며 안전성 면에서 문제가 없는 범위 내에서 적절한 양으로 사용될 수 있다.When the composition of the present invention is used as a food additive, the licorice extract may be added to the food or beverage as it is or in combination with other food additives. When the licorice additive of the present invention is added at the time of preparation of a food or beverage, the amount thereof is not particularly limited and may be used in an appropriate amount within a range that does not cause any safety problems.

아울러, 상기 식품 또는 음료의 종류는 일반 기호 식품, 건강기능식품, 건강보조식품, 각종 음료수, 기능성 음료 등을 모두 포함하고, 예를 들어 초콜릿, 캔디류, 젤리류, 스넥류, 과자류, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류, 음료수, 차, 드링크제, 또는 알콜 음료 등을 예로 들 수 있으나, 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니다. In addition, the above food or beverage includes all kinds of general preference foods, health functional foods, health supplements, various beverages, functional beverages and the like, and examples thereof include chocolate, candy, jelly, snack, confectionery, , Gums, ice cream, beverage, tea, drink, or alcoholic drinks, but the present invention is not limited thereto.

이하, 발명의 구체적인 실시예를 통해, 발명의 작용 및 효과를 보다 상술하기로 한다. 다만, 이러한 실시예는 발명의 예시로 제시된 것에 불과하며, 이에 의해 발명의 권리범위가 정해지는 것은 아니다.Best Mode for Carrying Out the Invention Hereinafter, the function and effect of the present invention will be described in more detail through specific examples of the present invention. It is to be understood, however, that these embodiments are merely illustrative of the invention and are not intended to limit the scope of the invention.

<실시예><Examples>

실시예 1Example 1

유리병에 감초 분말(아가페식품 판매, 국내산 감초 분말) 100g과 에탄올 800 mL를 넣은 후 잘 섞어주고, 간헐적으로 교반시키며 상온에서 72시간 동안 두었다. 와트만(Whatman) 여과지로 3회 여과하여 감초 분말을 완전히 제거하고 감초의 에탄올 추출물만을 얻었다(제 1 단계).100 g of licorice powder (agave food sale, domestic licorice powder) and 800 mL of ethanol were put in a glass bottle, mixed well, intermittently stirred, and left at room temperature for 72 hours. The mixture was filtered three times with Whatman filter paper to completely remove the licorice powder and obtain only the ethanol extract of licorice (step 1).

이렇게 얻은 에탄올 추출물 150 mL을 새로운 병에 옮겨 담았다. 여기에 포도씨유(판매처: 대상 청정원) 200 mL를 넣고 충분히 섞어준 후 층 분리가 이루어지도록 상온에서 가만히 두었다. 24시간 후 오일층과 에탄올층으로 분리된 상태에서 조심스럽게 오일층만을 새로운 병으로 옮겨 담았다(제 2 단계). 150 mL of the thus obtained ethanol extract was transferred into a new bottle. 200 mL of grape seed oil (supplier: Target Chung Jung Won) was added to the mixture, and the mixture was thoroughly mixed and allowed to stand at room temperature for layer separation. After 24 hours, only the oil layer was transferred to a new bottle with the oil layer and the ethanol layer separated (Step 2).

분리한 오일층에서 기능성 물질을 다시 에탄올층으로 옮겨오기 위해서 상기 오일층에 다시 새로운 에탄올 150 mL를 넣고 충분히 섞어준 후 상온에서 12시간 정도 가만히 두었다. 오일층과 에탄올층으로 분리된 상태에서 조심스럽게 에탄올층만을 새로운 병(A)으로 옮겨 담았다(제 3 단계, 1차 추출). To transfer the functional material from the separated oil layer to the ethanol layer again, add 150 mL of fresh ethanol to the oil layer, mix thoroughly, and allow to stand for 12 hours at room temperature. Separated into an oil layer and an ethanol layer, only the ethanol layer was carefully transferred into a new bottle (A, step 3, first extraction).

에탄올층을 분리한 오일층에 다시 새로운 에탄올 150 mL를 넣고 충분히 섞어준 후 층 분리가 이루어지도록 상온에서 12시간 정도 가만히 두었다. 오일층과 에탄올층으로 분리된 상태에서 조심스럽게 에탄올층만을 상기 병(A)에 옮겨 담았다(제 3 단계, 2차 추출). 150 mL of fresh ethanol was added to the oil layer from which the ethanol layer was separated, and the mixture was thoroughly mixed. Only the ethanol layer was carefully transferred to the bottle (A) in the state of being separated into the oil layer and the ethanol layer (third step, second extraction).

에탄올층을 분리한 오일층에 다시 새로운 에탄올 100 mL를 넣고 충분히 섞어준 후 층 분리가 이루어지도록 상온에서 12시간 정도 가만히 두었다. 오일층과 에탄올층의 층분리를 확인한 후 에탄올층만을 조심스럽게 상기 병(A)에 옮겨 담아, 총 3회에 걸쳐 추출한 에탄올 추출물을 수득하였다(제 3 단계, 3차 추출). 100 mL of fresh ethanol was added to the oil layer from which the ethanol layer was separated, and the mixture was thoroughly mixed. After the layer separation of the oil layer and the ethanol layer was confirmed, only the ethanol layer was carefully transferred to the bottle (A) to obtain an ethanol extract extracted three times in total (third step, third extraction).

상기 병(A)의 에탄올 추출물에서 진공 회전 농축기를 이용해 에탄올을 제거하고, 추가로 남아있는 에탄올의 완전한 제거를 위해 고진공 상태에서 24시간 동안 방치하여 최종적인 감초 추출물을 수득하였다(제 4 단계).Ethanol was removed from the ethanol extract of the bottle (A) using a vacuum rotary condenser, and further left in a high vacuum for 24 hours to completely remove the remaining ethanol to obtain a final licorice extract (Step 4).

실시예 2Example 2

오일로 포도씨유 대신 카놀라유(판매처: CJ 제일제당)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일한 방법으로 감초 추출물을 수득하였다. The licorice extract was obtained in the same manner as in Example 1 except that canola oil (CJ Cheiljedang Co., Ltd.) was used instead of grape seed oil as an oil.

실시예 2Example 2

오일로 포도씨유 대신 올리브유(판매처: Filippo Berio)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일한 방법으로 감초 추출물을 수득하였다. Licorice extract was obtained in the same manner as in Example 1, except that olive oil (Filippo Berio) was used instead of grape seed oil as an oil.

비교예 1Comparative Example 1

유리병에 감초 분말(아가페식품 판매, 국내산 감초 분말) 100g과 에탄올 800 mL를 넣은 후 잘 섞어주고, 간헐적으로 교반시키며 상온에서 72시간 동안 두었다. 와트만(Whatman) 여과지로 3회 여과하여 감초 분말을 완전히 제거하고 감초의 에탄올 추출물을 얻었다. 진공 회전 농축기를 이용해 남아있던 에탄올을 제거하고, 고진공 상태에서 24시간 동안 방치하여 감초 추출물을 수득하였다.100 g of licorice powder (agave food sale, domestic licorice powder) and 800 mL of ethanol were added to a glass bottle, mixed well, intermittently stirred, and left at room temperature for 72 hours. The mixture was filtered three times with Whatman filter paper to completely remove the licorice powder and obtain an ethanol extract of licorice root. The remaining ethanol was removed using a vacuum rotary condenser, and left in a high vacuum for 24 hours to obtain a licorice extract.

<실험예><Experimental Example>

1) MIC (Minimum Inhibitory Concentration) 측정1) Measurement of Minimum Inhibitory Concentration (MIC)

MIC는 National Committee for Clinical Laboratory Standards에 따른 micro-dilution assay를 통해 측정하였다. MIC was measured by micro-dilution assay according to National Committee for Clinical Laboratory Standards.

보다 구체적으로, S. mutans (ATCC25175)균을 TSB (Trypticase Soy Broth) 배지를 이용해 37℃에서 배양하였다. 용매로 사용할 DMSO의 S. mutans균에 대한 영향을 검증하기 위해 96-웰 플레이트에 각 웰 당 104개의 S. mutans균을 넣고 웰 당 최종 농도가 0.5%, 1.0%, 1.5%, 2.0%, 2.5% 3.0%가 되도록 DMSO를 넣었다. 각 DMSO 농도당 3개의 웰을 사용하였다. 양성 대조군은 DMSO 없이 배지만 넣은 것을, 음성 대조군은 S. mutans균 없이 배지만 넣은 것을 사용하였다. 37℃에서 16시간 배양 후 600 nm서의 광학밀도 값인 OD600을 측정하였다. More specifically, S. mutans (ATCC 25175) was cultured in TSB (Trypticase Soy Broth) medium at 37 ° C. In order to examine the effect of DMSO used as a solvent on S. mutans, 10 4 S. mutans bacteria per well were added to a 96-well plate, and final concentrations of 0.5%, 1.0%, 1.5%, 2.0% 2.5% 3.0% DMSO was added. Three wells were used per concentration of DMSO. The positive control group was used in the absence of DMSO and the negative control group was used in the absence of S. mutans. After incubation at 37 ° C for 16 hours, OD 600 , the optical density value at 600 nm, was measured.

DMSO의 농도에 따른 S. mutans균의 성장 저해 정도를 확인한 결과, 2% 농도의 DMSO 까지는 S. mutans균 성장에 영향을 주지 않는 것으로 나타났다. 이러한 사전 실험 결과에 기초하여, 실시예 1 내지 3 및 비교예 1의 추출물에 대한 MIC값 측정시 웰 당 최종 DMSO 농도는 1.0%가 되도록 하였다.The inhibition of growth of S. mutans by DMSO concentration did not affect the growth of S. mutans until 2% DMSO concentration. Based on these preliminary experimental results, the final DMSO concentration per well in the MIC values of the extracts of Examples 1 to 3 and Comparative Example 1 was adjusted to 1.0%.

MIC 측정을 위해 상기 실시예 1 내지 3 및 비교예 1의 추출물을 40 mg/mL의 농도가 되도록 DMSO로 완전히 녹인 후. 웰 당 최종 농도가 각각 400, 200, 100, 50, 25, 12.5, 6.25, 3.125 μg/mL이 되도록 추출물을 첨가하였다. 각 농도당 3개씩의 웰을 사용했다. For MIC measurement, the extracts of Examples 1 to 3 and Comparative Example 1 were completely dissolved in DMSO to a concentration of 40 mg / mL. The extract was added so that final concentrations per well were 400, 200, 100, 50, 25, 12.5, 6.25, and 3.125 μg / mL. Three wells were used for each concentration.

음성 대조군을 제외한 각 웰 당 104개의 S. mutans균을 넣고 37℃에서 16시간 배양 후 OD600을 측정하였다. S. mutans균의 성장을 90% 억제하는 값을 MIC90으로 계산하여, 하기 표 1에 나타내었다. 또한 MIC90 값을 Systat 사의 SigmaPlot 13.0을 이용해 S자 곡선에 접합시켜 그래프를 도 1에 나타내었다.10 4 S. mutans bacteria were added to each well except the negative control, and the OD 600 was measured after culturing at 37 ° C for 16 hours. The value for inhibiting the growth of S. mutans by 90% is calculated by MIC 90 and is shown in Table 1 below. In addition, the graph is shown in FIG. 1, in which the MIC 90 value is connected to the S curve using SigmaPlot 13.0 from Systat.

MIC 실험은 농도당 3개씩의 웰을 사용했으며, 독립적으로 3회 반복하여 측정하였다. MIC값의 통계적 유의성을 살펴보기 위해 Graphpad 사의 Prism 6.0을 이용해 one-way ANOVA 분석을 하였으며, Dunnett's multiple comparisons test를 수행해 비교예 1 및 실시예 1 내지 3의 MIC값의 차이를 검증하여 그 결과를 도 2에 나타내었다.MIC experiments were performed using 3 wells per concentration and 3 independent measurements. To examine the statistical significance of the MIC values, one-way ANOVA analysis was performed using Prism 6.0 from Graphpad. The Dunnett's multiple comparisons test was performed to verify the difference between the MIC values of Comparative Example 1 and Examples 1 to 3, Respectively.

실시예 1Example 1 실시예 2Example 2 실시예 3Example 3 비교예 1Comparative Example 1 MIC90 MIC 90 52.952.9 99.799.7 86.386.3 123.9123.9

* 상기 표 1에서, MIC90의 단위는 μg/mL이다.* In Table 1, the unit of MIC 90 is μg / mL.

상기 표 1 및 도 1을 참고하면, R2값이 모두 0.99 이상으로 S자 곡선에 잘 접합됨을 알 수 있었다. MIC90값은 포도씨유로 추출한 실시예 1이 가장 낮았으며, 에탄올만으로 추출한 비교예 1이 가장 높았다. Referring to Table 1 and FIG. 1, it can be seen that the R 2 values are all 0.99 or more and are well bonded to the S curve. MIC 90 value was the lowest in Example 1 extracted with grape seed oil, and Comparative Example 1 extracted with ethanol alone was the highest.

또한, 도 2를 참고하면, 실시예 1과 비교예 1을 비교시 MIC90값은 P<0.01로 통계적 유의성을 보였다. Also, referring to FIG. 2, the MIC 90 value was statistically significant at P <0.01 when Example 1 and Comparative Example 1 were compared.

2) 포도씨유에 의한 S. mutans균 억제 효과 확인2) Confirming the inhibitory effect of grape seed oil on S. mutans

실시예 1에서, 추출에 사용했던 포도씨유의 특정 성분들이 에탄올로 재추출하는 과정에서 최종 추출물로 옮겨져 S. mutans균의 성장을 억제하지 않았는지 여부를 확인하였다. 이를 위해, 실시예 1에서, 감초 분말 없이 포도씨유만에 대해 에탄올을 이용하여 제 3 단계를 3회 반복하여 3회 추출하고 용매를 제거한 후 상기 1)의 MIC 측정법으로 농도에 따른 S. mutans균에 대한 성장 억제 효과를 확인하여 그 결과를 도 3에 나타내었다. In Example 1, it was confirmed whether the specific components of the grape seed oil used for the extraction were transferred to the final extract in the course of re-extraction with ethanol to inhibit the growth of S. mutans. For this purpose, in Example 1, the third step was repeated three times using ethanol for grape seed oil without licorice powder, and the solvent was removed. After the solvent was removed, the S. mutans strain The growth inhibitory effect was confirmed and the results are shown in Fig.

그 결과, 포도씨유 자체만을 에탄올로 추출해 얻은 물질은 최고 농도 400 μg/mL에서도 S. mutans균의 성장을 거의 억제하지 못하여, 실시예 1의 S. mutans균에 대한 억제 효과는 감초 추출물에 의한 것임을 확인하였다. As a result, the substance obtained by extracting only grape seed oil with ethanol showed almost no inhibition of the growth of S. mutans even at a maximum concentration of 400 μg / mL, and the inhibitory effect of Example 1 against S. mutans was due to the licorice extract Respectively.

3) 글리시리진 제거 효과 3) Glycyrrhizin removal effect

실시예 1에서 사용한 추출 전의 감초 분말과, 실시예 1에 의해 추출한 최종 감초 추출물에 대해 각각 HPLC로 글리시리진(glycyrrhizin)의 함량을 분석하였다. 분석 결과, 추출 전의 감초 분말에는 글리시리진이 9,320 ppm이 존재하였으나, 실시예 1의 추출방법에 의해 추출한 감초 추출물에서는 218ppm이 포함되어 약 97.7%의 감소율을 보였다.The content of glycyrrhizin was analyzed by HPLC on the licorice powder before extraction used in Example 1 and the final licorice extract extracted by Example 1, respectively. As a result of analysis, 9,320 ppm of glycyrrhizin was present in the licorice powder before extraction, but 218 ppm was contained in the licorice extract extracted by the extraction method of Example 1, showing a reduction rate of about 97.7%.

Claims (11)

감초와 제 1 수용성 용매를 혼합하여 제 1 수용성 추출물을 수득하는 제 1 단계;
상기 제 1 수용성 추출물과 식용 오일을 혼합하여 오일 추출물을 수득하는 제 2 단계;
상기 오일 추출물과 제 2 수용성 용매를 혼합하여 제 2 수용성 추출물을 수득하는 제 3 단계; 및
상기 제 2 수용성 추출물에서 제 2 수용성 용매를 제거하여 감초 추출물을 수득하는 제 4 단계를 포함하는, 감초 추출물의 제조방법.
Mixing the licorice and the first water-soluble solvent to obtain a first water-soluble extract;
A second step of mixing the first aqueous extract and the edible oil to obtain an oil extract;
A third step of mixing the oil extract and the second water-soluble solvent to obtain a second water-soluble extract; And
And a fourth step of removing the second water-soluble solvent from the second water-soluble extract to obtain a licorice extract.
제1항에 있어서,
상기 제 1 및 제 2 수용성 용매는 서로 동일하거나 상이하며, 물, 탄소수 4 이하의 저급 알코올, 또는 이들의 혼합물인, 감초 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the first and second water-soluble solvents are the same or different from each other and are water, a lower alcohol having 4 or less carbon atoms, or a mixture thereof.
제1항에 있어서,
상기 제 2 단계를 2회 이상 반복하는, 감초 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the second step is repeated twice or more.
제1항에 있어서,
상기 제 3 단계를 2회 이상 반복하는, 감초 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the third step is repeated two or more times.
제1항에 있어서,
상기 식용 오일은 포도씨유, 카놀라유, 올리브유, 홍화씨유, 해바라기씨유, 옥수수유, 콩기름, 및 들기름으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는, 감초 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the edible oil comprises at least one selected from the group consisting of grape seed oil, canola oil, olive oil, safflower seed oil, sunflower seed oil, corn oil, soybean oil, and perilla oil.
제1항에 있어서,
상기 감초 추출물은 추출 전의 감초와 비교하여 글리시리진(glycyrrhizin)의 함량이 95 (중량)% 이상 감소되는, 감초 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the content of glycyrrhizin is reduced by 95% or more by weight, compared with the licorice before extraction.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete
KR1020160011285A 2015-01-29 2016-01-29 Method for manufacturing Glycyrrhiza uralensis extract and composition for treating or preventing oral diseases comprising the extract KR101800802B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020150014509 2015-01-29
KR20150014509 2015-01-29

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20160093568A KR20160093568A (en) 2016-08-08
KR101800802B1 true KR101800802B1 (en) 2017-12-20

Family

ID=56543785

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020160011285A KR101800802B1 (en) 2015-01-29 2016-01-29 Method for manufacturing Glycyrrhiza uralensis extract and composition for treating or preventing oral diseases comprising the extract

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR101800802B1 (en)
WO (1) WO2016122262A1 (en)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102506599B1 (en) * 2018-02-06 2023-03-06 주식회사 엘지생활건강 Composition for prevention or treatment of oral disease comprising Sunflower oil
KR102248812B1 (en) * 2019-05-29 2021-05-06 국민대학교산학협력단 Composition for Inhibiting Biofilm Formation Comprising Glycyrrhizin and Glycyrrhetic Acid Having Synergistic Effect, and Composition for Preventing, Improving or Treating Dental Disease

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101107237B1 (en) * 2011-07-22 2012-01-25 주식회사 닥터앤푸드 Method for removing glycyrrhizin of liquorice, liquorice extract removed glycyrrhizin and method for manufacturing the same, and anti-cariogenic composition

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100454226B1 (en) * 2001-01-05 2004-10-26 한국식품개발연구원 Processing method of licorice extract and its' utilization on developing anti-cariogenic products
KR100937511B1 (en) * 2009-04-13 2010-01-19 주식회사 닥터앤푸드 The extraction method of antibiotic material from licorice root
KR101372458B1 (en) * 2011-03-22 2014-03-11 (주)애드바이오텍 Extraction of functional components from Glycyrrhiza inflata and use of its extract

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101107237B1 (en) * 2011-07-22 2012-01-25 주식회사 닥터앤푸드 Method for removing glycyrrhizin of liquorice, liquorice extract removed glycyrrhizin and method for manufacturing the same, and anti-cariogenic composition

Also Published As

Publication number Publication date
WO2016122262A1 (en) 2016-08-04
KR20160093568A (en) 2016-08-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101054594B1 (en) Liver Function Enhancer Composition
KR101676043B1 (en) Process for preparing a eucalyptus extract
JP4127875B2 (en) Anti-Helicobacter pylori
KR101800802B1 (en) Method for manufacturing Glycyrrhiza uralensis extract and composition for treating or preventing oral diseases comprising the extract
KR101934794B1 (en) Composition for preventing, improving or treating atopic dermatitis comprising extract mixture of Diospyros lotus leaf and grape fruit stem as effective component
KR101924389B1 (en) Composition for improving male sexual function using ginsenoside compound K and a maca extract
US8663718B2 (en) Cactus fruit extract
WO2018134848A1 (en) Dietary supplements for inhibiting pde5 and increasing cgmp levels
KR20090117202A (en) The cosmetic composition for improvement of acne containing the natural antibiotic-complex consisted of the nelumbo nucifera leaf extracts, kochia scoparia extracts and lycium chinense extracts
US6638523B1 (en) Method of treating ulcers
JP6980791B2 (en) Composition for the prevention or treatment of gastritis or gastric ulcer
KR20190006285A (en) Antibacterial composition comprising an extract of schisandra chinesis
KR101561441B1 (en) Composition for preventing or treating periodontal disease comprising Solanum carolinense extract as effective component
KR101105472B1 (en) Cream Type Cosmetic Composition Comprising Cucumber and Preparation method thereof
KR101217715B1 (en) Edible composition for prevention of dental caries and periodontal disease by growth of bacteria in the mouth
KR101574678B1 (en) Composition for preventing or treating periodontal disease comprising Lactuca scariola extract as effective component
KR101078765B1 (en) Edible composition for prevention of periodontal disease by growth of bacteria in the mouth
KR20180013140A (en) Method for preparing plant extract
KR101634210B1 (en) Composition for preventing or treating cavity and periodontal disease comprising kaempferol as effective component
KR20160081358A (en) Composition for improving wrinkles containing plant extract
KR101750854B1 (en) A antibiotic composition for Helicobacter pylori containing the propolis extraction fractions thereof or subfractional extrats isolated therefrom
KR102328028B1 (en) Jelly type composition for enhancing concentration
KR102542555B1 (en) Cosmetic composition for anti-inflammatory and anti-acne comprising vegetable mucin
KR102277824B1 (en) Method for preparing a natural anti-inflammatory composition comprising sulfate as an active ingredient
CA2496358A1 (en) Hair growth stimulants for oral use

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant