KR101792919B1 - Method for manufacturing Aronia melanocarpa fortified with higher GABA content using Lactic acid bacteria - Google Patents

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Abstract

본 발명은 GABA 생산 젖산균을 이용한 아로니아 발효물 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 GABA를 생산하는 젖산균인 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014(KCCM11545P)를 이용하여 고농도 GABA가 함유된 아로니아 젖산 발효물 제조방법에 대한 것이다. 아로니아를 열처리 없이 당절임에 의해서 저장성을 높히고 발효시킴으로써, 아로니아의 고유의 색, 맛과 향을 그대로 살리면서 기능성 물질인 GABA가 증진된 젖산균이 함유된 기능성 발효제품을 개발하고자 하였다.The present invention relates to a method for producing fermented Aronia using GABA-producing lactic acid bacteria. More particularly, the present invention relates to a method for producing fermented aronia using Lactobacillus plantarum EJ2014 (KCCM11545P), which is a lactic acid bacterium producing GABA, Lacto-lactic acid fermentation product. We tried to develop functional fermented product containing Lactobacillus bacillus, which is a functional substance, which enhances the functional substance, GABA, while maintaining the inherent color, flavor and aroma of Aronia, by enhancing storage stability and fermentation of Aronia by fermentation without heat treatment.

Description

젖산균을 이용한 고농도 GABA 함유 아로니아 발효물 제조방법{Method for manufacturing Aronia melanocarpa fortified with higher GABA content using Lactic acid bacteria}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to a method for producing high-concentration GABA-containing Aronia fermented with lactic acid bacteria,

본 발명은 젖산균을 이용한 고농도 GABA 함유 아로니아 발효물 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 GABA를 생산하는 젖산균인 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014(KCCM11545P)를 이용하여 고농도 GABA가 함유된 아로니아 젖산 발효물 제조방법에 대한 것이다.The present invention relates to a method for producing high-concentration GABA-containing Aronia fermented with lactic acid bacteria, and more particularly, to a method for producing high-concentration GABA-containing Aronia fermented product using lactic acid bacterium. More specifically, Lactobacillus plantarum EJ2014 (KCCM11545P) The present invention relates to a method for producing fermented aronia lactic acid.

자연계에 존재하는 식물 중에 질병의 방지와 노화 억제 등 생체조절기능을 가지는 기능성 성분들이 다량 함유되어 있다는 것이 밝혀져 천연식품소재에 관한 연구가 활발히 이루어지고 있다.It has been found that plants present in the natural environment contain a large amount of functional components having biological control functions such as prevention of disease and suppression of aging, and studies on natural food materials have been actively conducted.

아로니아(Aronia)는 북미가 원산지인 관목으로서, 장미과에 속하며, 작고 신맛이 나는 열매가 열리는데, 늦여름에 열매가 익고 곧바로 떨어진다. 잎은 부드럽고 윤이 나며 연한 녹색이다. 특히 아로니아 열매는 쥬스나, 음료, 농축물, 와인, 잼, 젤리, 건조과일, 과일차 등 다양한 식재료로 뿐만아니라 새롭게 각광받고 있는 건강기능식품의 소재로 사용되고 있다. 아로니아 열매(Aronia berry)는 통상 색깔에 따라 2 종류로 구분하는데, 열매가 붉은색인 것을 레드 쵸코베리(학명; Aronia arbutifolia)라 하고, 검은색인 것을 블랙 쵸코베리(학명; Aronia melanocarpa)라 한다. 이러한 아로니아 열매는 다량의 당류(20%)와 안토시아닌(Antocyanins), 폴리페놀(Polyphenol), 비타민 B1, B2, 판토텐산, 플라보노이드(Flavonoid) 등을 함유하고 있다. 이중에서 특히 안토시아닌과 폴리페놀은 인체 내에서 혈액순환에 도움을 주고, 미세혈관의 투과성, 혈관의 탄력성, 혈압의 정상화 등에 도움을 주며, 특히 눈의 미세혈관에 긍정적인 효과를 제공하여 시력 증진효과를 나타낸다고 보고되어 있다. 최근 세계 음료시장에서는 건강 기능성을 지닌 추출물을 이용한 음료가 차지하는 비중이 점차 커지는 추세이며 위와 같은 특징으로 인하여 아로니아는 상품성 높은 원료로서 새롭게 주목받고 있다.Aronia (Aronia) is a shrub native to North America, belonging to the Rosaceae, with small, sour fruits, which ripen in the late summer and fall immediately. The leaves are soft, glazed and light green. Especially, Aronia fruit is used not only as a diverse ingredient such as juice, beverage, concentrate, wine, jam, jelly, dried fruit and fruit tea, but also as a material of health functional food which is newly attracting attention. Aronia berry is classified into two kinds according to the color. Aronia berry (Aronia arbutifolia) is red, and black is blackberry (Aronia melanocarpa). These Aronia fruits contain a large amount of saccharides (20%), anthocyanins, polyphenols, vitamins B1 and B2, pantothenic acid, and flavonoids. In particular, anthocyanin and polyphenol contribute to the blood circulation in the human body, and contribute to microvessel permeability, vascular resilience, normalization of blood pressure, and particularly, to provide a positive effect on the microvascularity of the eye, . ≪ / RTI > In the recent global beverage market, the proportion of beverages that use health functional extracts is gradually increasing. Due to these characteristics, Aronia has attracted attention as a high-quality raw material.

감마 아미노부티르산(gama amino butyric acid; GABA)은 4-아미노부틸산으로써 L-글루타메이트(L-glutamate) 기질이 탈탄산 반응에 의해 생성되며, 이에 관여하는 효소로는 글루타메이트 디카르복실라제(glutamate decarboxylase; GAD)가 있으며 피리독시드-5'-포스페이트(pyridoxid-5'-phosphate) 의존성 경로로 합성된다. GABA는 단백질에서는 발견이 되지 않는 비단백질성 아미노산으로 뇌나 척수에 존재하는 신경전달물질로 혈류를 개선하며 뇌의 산소공급을 증가시켜 뇌의 대사촉진 및 뇌 기억을 증진시키는 뇌의 영양제로 알려져 있다. GABA는 글루타메이트(glutamate)가 신경을 활성화시키는 것과는 달리 신경활성을 억제하는 것으로 알려져 있으며, 이러한 기능은 신경세포의 기능과 정보처리에 지대한 영향을 미치게 되는데 특히 감각 뇌에서 방향 민감성, 각도 민감성 반응 등을 결정하며 정교한 운동기능도 조율하는 것으로 알려져 있다. GABA의 뇌혈류 촉진 효과와 산소공급 증가효과는 뇌세포의 대사를 촉진시킴으로써 뇌졸중의 후유증 및 뇌동맥경화증 등에 개선효과가 나타나 의약품으로 사용되고 있다. GABA의 기능성이 알려지면서 의약품으로서 뿐만 아니라 기능성 식품소재로 이용하고자 하는 연구가 많이 시도되고 있으며, 이들 연구들은 현미, 녹차, 맥아, 배추 등에 자연적으로 약간 함유되어 있는 GABA의 함량을 증대시키는 데 집중되어 있다. 그러나 자연계의 식물을 원재료로 한 GABA의 생산에는 한계가 있으므로 대량 생산하기 위해서는 미생물을 이용한 연구가 필요한 실정이다.Gamma amino butyric acid (GABA) is a 4-aminobutyric acid which is produced by a decarboxylation reaction of L-glutamate substrate, and glutamate decarboxylase (glutamate decarboxylase) ; GAD) and is synthesized as a pyridoxid-5'-phosphate dependent pathway. GABA is a nonprotein amino acid that is not found in proteins. It is a neurotransmitter in the brain or spinal cord. It is known as a brain nutrient that promotes blood flow through the brain and promotes brain metabolism and brain memory by increasing oxygen supply to the brain. GABA is known to inhibit neuronal activity as opposed to glutamate activating neurons, and this function has a profound effect on the function and information processing of neurons, especially in sensory brains such as direction sensitivity, angle sensitivity It is also known to coordinate and elaborate exercise functions. GABA stimulates the cerebral blood flow and increases oxygen supply, promotes the metabolism of brain cells, and the after effects of cerebral stroke and cerebral atherosclerosis is improving and is being used as medicine. As the function of GABA is known, many studies have been made to use it as a functional food material as well as pharmaceuticals. These studies have focused on increasing the content of GABA, which is naturally contained in brown rice, green tea, malt and cabbage have. However, since there is a limit to the production of GABA using natural plant materials, studies using microorganisms are required for mass production.

한국공개특허 제10-2014-0032678호(2014.03.17 공개)Korean Patent Publication No. 10-2014-0032678 (published on Mar. 17, 2014)

본 발명의 목적은 GABA 생성 젖산균을 이용한 감마-아미노뷰티르산(gamma-aminobutyric acid; GABA)이 증진된 아로니아 젖산 발효물 제조방법을 제공하는데 있다. It is an object of the present invention to provide a process for producing fermented aronia lactic acid in which gamma-aminobutyric acid (GABA) is enhanced using GABA-producing lactic acid bacteria.

또한, 본 발명의 목적은 상기 방법에 의해 제조된 아로니아 젖산 발효물을 포함하는 GABA 증진된 아로니아 발효음료를 제공하는데 있다. It is also an object of the present invention to provide a GABA enhanced enriched fermented Aronia fermented beverage comprising the fermented Aronia lactic acid produced by the above method.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (1) 아로니아와 당을 혼합하여 아로니아 당절임액을 제조하는 단계; (2) 상기 아로니아 당절임액을 희석하는 단계; (3) 상기 아로니아 당절임 희석액 전체 100 중량부에 대해 모노소듐 글루타메이트(mono sodium glutamate; MSG) 1 내지 5 중량부, 효모 추출물(yeast extract) 0.1 내지 1 중량부, 스킴 밀크(skim milk) 0.5 내지 5 중량부 및 CaCO3 0.1 내지 0.5 중량부를 첨가하여 혼합하는 단계; (4) 상기 혼합물에 젖산균 스타터(starter)를 접종하고 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 감마-아미노뷰티르산(gamma-aminobutyric acid; GABA)이 증진된 아로니아 젖산 발효물 제조방법을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a method for preparing an ascorbic acid solution, comprising the steps of: (1) (2) diluting the ascorbic acid solution; (3) 1 to 5 parts by weight of monosodium glutamate (MSG), 0.1 to 1 part by weight of yeast extract, 0.5 part by weight of skim milk, 0.5 to 1 part by weight of yeast extract per 100 parts by weight of the above- To 5 parts by weight of CaCO 3 and 0.1 to 0.5 parts by weight of CaCO 3 ; (4) a step of inoculating a lactic acid bacteria starter into the mixture, followed by culturing and fermenting the lactic acid bacteria starter; and (4) a gamma-aminobutyric acid (GABA) -enhanced lactic acid fermentation product.

또한, 본 발명은 상기의 방법에 의해 제조된 아로니아 젖산 발효물을 포함하는 GABA 증진 아로니아 발효음료를 제공한다.The present invention also provides a GABA-enhanced Aronia fermented beverage comprising the fermented Aronia lactic acid produced by the above method.

본 발명은 GABA 생산 젖산균을 이용한 아로니아 발효물 제조방법에 관한 것으로서, 상세하게는 아로니아를 당절임하여 1-7일 동안 자연발효한 후, 아로니아 당절임액을 젖산균 발효하여 물성과 기능성이 강화된 제품을 제조하는 방법에 대한 것이다. 약리효과가 우수한 아로니아에 젖산균을 이용한 젖산발효를 통하여 GABA가 함유되어 있는 기능성 발효식품개발을 목표로 수행하였으며, 아로니아의 고유의 색, 맛과 향을 그대로 살리면서 기능성 물질인 GABA가 증진된 젖산균이 함유된 기능성 발효제품을 개발하고자 하였다. The present invention relates to a method for producing fermented Aronia using GABA-producing lactic acid bacteria. More particularly, the fermented fermented milk is fermented by fermentation of Aronia fermented product for 1 to 7 days, And to a method of manufacturing an enhanced product. The purpose of this study was to develop a functional fermented food containing GABA through lactic acid fermentation using lactic acid bacteria in Aronia with excellent pharmacological effect. GABA, which is a functional substance, was promoted while preserving intrinsic color, taste and aroma of Aronia And to develop a functional fermented product containing lactic acid bacteria.

도 1은 아로니아에 설탕을 첨가하여 자연발효 후, 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014(KCCM11545P)로 젖산 발효물을 제조하는 모식도이다.
도 2는 아로니아 당절임액의 희석배수에 따른 젖산 발효물의 pH, 산도를 나타낸다.
도 3은 아로니아 당절임액의 희석배수에 따른 GABA 생성능 비교한 결과이다.
도 4는 아로니아 당절임액의 homogenizer 방법에 따른 희석배수 별 pH와 산도 변화를 나타낸다. (a)Homogenizer, (b)Hand blender
도 5는 아로니아 당절임액의 homogenizer, hand blender 방법에 따른 희석배수 별 색 변화를 나타낸다. (a) Homogenizer, (b) Hand blender
도 6은 아로니아 당절임액의 homogenizer, hand blender 방법에 따른 희석배수 TLC 변화를 나타낸다. (a) Homogenizer, (b) Hand blender
도 7은 아로니아 당절임액의 희석배수별과 호일로 동봉 유무에 따른 시간변화의 색도 변화를 나타낸다.
도 8은 아로니아 당절임액의 MSG 첨가에 따른 젖산 발효 pH 및 산도 변화를 나타낸다.
도 9는 아로니아 당절임액의 MSG 첨가에 따른 젖산 발효 TLC 변화를 나타낸다.
도 10은 포도당(GLU) 및 MSG 첨가 농도에 따른 아로니아 당절임액의 젖산 발효 시간에 따른 pH, 산도 변화를 나타낸다.
도 11은 GLU 및 MSG 첨가 농도에 따른 아로니아 당절임액의 젖산 발효 시간에 따른 생균수를 나타낸다.
도 12는 GLU 및 MSG 첨가 농도에 따른 아로니아 당절임액의 젖산 발효 시간에 따른 GABA 및 MSG 변화 비교 결과를 나타낸다.
도 13은 아로니아 당절임액에 Y.E, S.M 또는 CaCO3 첨가별에 따른 발효 pH 및 산도 변화를 나타낸다.
도 14는 아로니아 당절임액에 Y.E, S.M 또는 CaCO3 첨가별에 따른 발효 생균수 변화를 나타낸다.
도 15는 아로니아 당절임액에 Y.E, S.M 또는 CaCO3 첨가별에 따른 발효 TLC 변화를 나타낸다.
도 16은 Y.E와 SM의 첨가 농도에 따른 아로니아 젖산 발효물의 pH, 산도 변화를 나타낸다.
도 17은 Y.E와 SM의 첨가 농도에 따른 아로니아 젖산 발효물의 생균수 변화를 나타낸다.
도 18은 Y.E와 SM의 첨가 농도에 따른 아로니아 젖산 발효물의 GABA 생성능 비교 결과를 나타낸다. (a) ×5 희석, (b) 희석하지 않음.
도 19는 아로니아 당절임액에 Y.E 또는 S.M 첨가별에 따른 발효 pH 및 산도 변화를 나타낸다.
도 20은 아로니아 당절임액에 Y.E, S.M 첨가별에 따른 발효 생균수 변화를 나타낸다.
도 21은 아로니아 당절임액에 Y.E, S.M 첨가별에 따른 발효 TLC 변화를 나타낸다. (a) 발효시간 5일, (b) 발효시간 9일
도 22는 아로니아 당절임액에 Y.E, S.M 첨가별에 따른 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014(KCCM11545P) 발효 pH 및 산도 변화를 나타낸다.
도 23은 아로니아 당절임액에 Y.E, S.M 첨가별에 따른 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014(KCCM11545P) 발효 생균수 변화를 나타낸다.
도 24는 아로니아 당절임액에 Y.E, S.M 첨가별에 따른 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014(KCCM11545P) 발효 TLC 변화를 나타낸다.
도 25는 아로니아 설탕 당절임액과 젖산 발효물에 따른 배합 사진을 나타낸다.
도 26은 아로니아 프락토올리고당 당절임액과 젖산 발효물에 따른 배합 사진을 나타낸다.
도 27은 잔탄 검(Xanthan gum), 카라기난 검(Carrageenan gum) 첨가량에 따른 점조도 변화를 나타낸다.
Fig. 1 is a schematic diagram showing the production of fermented lactic acid by Lactobacillus plantarum EJ2014 (KCCM11545P) after natural fermentation with addition of aroniae sugar.
Fig. 2 shows the pH and acidity of the fermented lactic acid according to the dilution ratio of the ascorbic acid solution.
Fig. 3 shows the results of comparing the GABA production ability according to the dilution ratios of the ascorbic acid solution.
FIG. 4 shows changes in pH and acidity according to the dilution ratio according to the homogenizer method of the Aronia starch solution. (a) Homogenizer, (b) Hand blender
Figure 5 shows the change in color by dilution ratio according to the homogenizer, hand blender method of the Aronia starvation solution. (a) Homogenizer, (b) Hand blender
FIG. 6 shows changes in dilution factor TLC according to the homogenizer, hand blender method of the Aronia starvation solution. (a) Homogenizer, (b) Hand blender
FIG. 7 shows changes in chromaticity with time depending on the presence or absence of dilution by foil of diluted solution of Aronia sugar solution.
8 shows the pH and acidity change of lactic acid fermentation according to addition of MSG of the ascorbic acid solution.
9 shows the change in TLC of lactic acid fermentation according to addition of MSG of the ascorbic acid solution.
FIG. 10 shows changes in pH and acidity depending on the lactic acid fermentation time of the ascorbic acid solution depending on the concentrations of glucose (GLU) and MSG.
Fig. 11 shows the number of viable cells according to the lactic acid fermentation time of the ascorbic acid-containing solution according to the concentration of GLU and MSG.
FIG. 12 shows the results of comparing GABA and MSG changes according to the lactic acid fermentation time of the Aronia starvation solution according to the concentrations of GLU and MSG.
FIG. 13 shows changes in fermentation pH and acidity according to the addition of YE, SM or CaCO 3 to the pickling solution of Aronia.
FIG. 14 shows changes in the number of fermented live bacteria depending on the addition of YE, SM or CaCO 3 to the pickling solution of Aronia.
FIG. 15 shows changes in fermentation TLC according to the addition of YE, SM or CaCO 3 to the pickling solution of Aronia.
FIG. 16 shows changes in pH and acidity of the fermentation product of Aronia lactic acid according to the addition concentration of YE and SM.
Fig. 17 shows changes in the viable cell count of the fermented arnoyl lactic acid according to the addition concentration of YE and SM.
18 shows the results of comparing the GABA production ability of the fermented arnoyl lactic acid according to the addition concentration of YE and SM. (a) 5 dilution, (b) not diluted.
FIG. 19 shows changes in fermentation pH and acidity according to the addition of YE or SM in the pickling solution of Aronia.
20 shows changes in the number of fermented live cells according to the addition of YE and SM in the fermented milk of Aronia.
FIG. 21 shows changes in fermentation TLC according to the addition of YE and SM in the ascorbic acid solution of Aronia. (a) fermentation time 5 days, (b) fermentation time 9 days
FIG. 22 shows the fermentation pH and acidity of Lactobacillus plantarum EJ2014 (KCCM11545P) fermented according to the addition of YE and SM to the pickling solution of Aronia.
FIG. 23 shows changes in the number of fermented live bacteria of Lactobacillus plantarum EJ2014 (KCCM11545P) according to the addition of YE and SM in the pickles of Aronia.
24 shows the TLC change of fermentation of Lactobacillus plantarum EJ2014 (KCCM11545P) according to the addition of YE and SM to the ascorbic acid solution.
Fig. 25 shows a photograph of a mixture according to the pickling solution of aronia sugar and lactic acid fermented product.
Fig. 26 shows a photograph of a mixture of Aronia fructo-oligosaccharide per se and a lactic acid fermented product.
FIG. 27 shows the change of the consistency according to the addition amount of xanthan gum and carrageenan gum.

본 발명은 (1) 아로니아와 당을 혼합하여 아로니아 당절임액을 제조하는 단계; (2) 상기 아로니아 당절임액을 희석하는 단계; (3) 상기 아로니아 당절임 희석액 전체 100 중량부에 대해 모노소듐 글루타메이트(mono sodium glutamate; MSG) 1 내지 5 중량부, 효모 추출물(yeast extract) 0.1 내지 1 중량부, 스킴 밀크(skim milk) 0.5 내지 5 중량부 및 CaCO3 0.1 내지 0.5 중량부를 첨가하여 혼합하는 단계; (4) 상기 혼합물에 젖산균 스타터(starter)를 접종하고 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 감마-아미노뷰티르산(gamma-aminobutyric acid; GABA)이 증진된 아로니아 젖산 발효물 제조방법을 제공한다. The present invention relates to (1) a method for producing an ascorbic acid solution, comprising the steps of: (2) diluting the ascorbic acid solution; (3) 1 to 5 parts by weight of monosodium glutamate (MSG), 0.1 to 1 part by weight of yeast extract, 0.5 part by weight of skim milk, 0.5 to 1 part by weight of yeast extract per 100 parts by weight of the above- To 5 parts by weight of CaCO 3 and 0.1 to 0.5 parts by weight of CaCO 3 ; (4) a step of inoculating a lactic acid bacteria starter into the mixture, followed by culturing and fermenting the lactic acid bacteria starter; and (4) a gamma-aminobutyric acid (GABA) -enhanced lactic acid fermentation product.

바람직하게는, 상기 아로니아 당절임액을 제조하는 단계는 아로니아 및 당을 1:1-4의 중량비로 혼합하여, 1일 내지 6달 동안 실온에서 당절임 할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.Preferably, the step of preparing the ascorbic acid solution may be carried out by mixing the ascorbic acid and the saccharide in a weight ratio of 1: 1 to 4, and then pickling at room temperature for 1 to 6 months, but the present invention is not limited thereto .

바람직하게는, 상기 (2) 단계는 아로니아 당절임액을 물로 1 내지 10배 희석할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.Preferably, the step (2) may dilute the ascorbic acid solution to 1 to 10 times with water, but is not limited thereto.

바람직하게는, 상기 젖산균은 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014 (KCCM11545P) 균주일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.Preferably, the lactic acid bacteria may be, but is not limited to, Lactobacillus plantarum EJ2014 (KCCM11545P).

바람직하게는, 상기 (4) 단계의 발효는 25 내지 30℃에서, 1 내지 9일 동안 발효할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. Preferably, the fermentation in the step (4) may be performed at 25 to 30 DEG C for 1 to 9 days, but is not limited thereto.

본 발명의 실시예에서 사용된 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014 균주는 한국미생물보존센터에 KCCM11545P로 수탁하였다.The Lactobacillus plantarum strain EJ2014 used in the examples of the present invention was deposited as KCCM11545P in the Korean Microorganism Conservation Center.

본 발명에 있어서, "스타터(starter)"란 발효물을 제조하는 경우에 사용하는 미생물 배양액을 말한다. 따라서 스타터 미생물의 종류는 그 제품의 특성을 결정하게 되며 제품의 품질에 중요한 영향을 미친다. 미생물 중에서 스타터로 사용되고 있는 것은 박테리아, 곰팡이, 효모 등을 들 수 있으며, 이것을 단독 혹은 혼합하여 사용할 수 있다.In the present invention, the term "starter" refers to a culture medium of microorganisms used for producing a fermented product. Therefore, the types of starter microorganisms determine the characteristics of the product and have an important influence on the quality of the product. Bacteria, fungi, yeast, etc., which are used as starters in microorganisms, can be used alone or in combination.

본 발명에 있어서, "감마 아미노부티르산(gama amino butyric acid; GABA)"은 4-아미노부틸산으로써 L-글루타메이트(L-glutamate) 기질이 탈탄산 반응에 의해 생성되며, 이에 관여하는 효소로는 글루타메이트 디카르복실라제(glutamate decarboxylase; GAD)가 있으며 피리독시드-5'-포스페이트(pyridoxid-5'-phosphate) 의존성 경로로 합성된다. GABA는 단백질에서는 발견이 되지 않는 비단백질성 아미노산으로 뇌나 척수에 존재하는 신경전달물질로 혈류를 개선하며 뇌의 산소공급을 증가시켜 뇌의 대사촉진 및 뇌 기억을 증진시키는 뇌의 영양제로 알려져 있다. GABA는 글루타메이트(glutamate)가 신경을 활성화시키는 것과는 달리 신경활성을 억제하는 것으로 알려져 있으며, 이러한 기능은 신경세포의 기능과 정보처리에 지대한 영향을 미치게 되는데 특히 감각 뇌에서 방향 민감성, 각도 민감성 반응 등을 결정하며 정교한 운동기능도 조율하는 것으로 알려져 있다. GABA의 뇌혈류 촉진 효과와 산소공급 증가효과는 뇌세포의 대사를 촉진시킴으로써 뇌졸중의 후유증 및 뇌동맥경화증 등에 개선효과가 나타나 의약품으로 사용되고 있다.In the present invention, "gama amino butyric acid (GABA)" is a 4-aminobutyric acid, which is produced by a decarboxylation reaction of an L-glutamate substrate. Glutamate It has a glutamate decarboxylase (GAD) and is synthesized as a pyridoxid-5'-phosphate dependent pathway. GABA is a nonprotein amino acid that is not found in proteins. It is a neurotransmitter in the brain or spinal cord. It is known as a brain nutrient that promotes blood flow through the brain and promotes brain metabolism and brain memory by increasing oxygen supply to the brain. GABA is known to inhibit neuronal activity as opposed to glutamate activating neurons, and this function has a profound effect on the function and information processing of neurons, especially in sensory brains such as direction sensitivity, angle sensitivity It is also known to coordinate and elaborate exercise functions. GABA stimulates the cerebral blood flow and increases oxygen supply, promotes the metabolism of brain cells, and the after effects of cerebral stroke and cerebral atherosclerosis is improving and is being used as medicine.

또한, 본 발명은 상기의 방법에 의해 제조된 아로니아 젖산 발효물을 포함하는 GABA 증진 아로니아 발효음료를 제공한다. The present invention also provides a GABA-enhanced Aronia fermented beverage comprising the fermented Aronia lactic acid produced by the above method.

상기 아로니아 발효음료는 상기 아로니아 젖산 발효물, 아로니아 당절임액, 잔탄 검(xanthan gum) 및 스테비오 사이드를 포함하여 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. The fermented Aronia fermented beverage can be prepared by fermentation of the above-mentioned Aronia lactic acid fermented product, Aronia fermented solution, xanthan gum and stevioside, but is not limited thereto.

이하, 하기 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 다만, 이러한 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the present invention is not limited by these examples.

<< 실시예Example 1>  1> 아로니아Aronia 당절임액Sugar pickle 제조 및 분석  Manufacturing and Analysis

1. 재료 및 방법1. Materials and Methods

상주 호호줌마스 영농조합법인에서 제공된 아로니아(Aronia melanocarpa)를 냉동(-20℃)에서 보관하여 사용하였다.Aronia ( Aronia melanocarpa ) provided by the Sangju Hoho jummax farming association was stored at -20 ℃ for freezing.

아로니아 1.5 kg을 살균된 핸드믹서기를 이용하여 균질화하였으며 설탕 또는 올리고당은 아로니아와 1:1-4 비율로 첨가하여 상온에서 1-7일 동안 자연발효하였다.  1.5 kg of Aronia were homogenized using a sterilized hand mixer and sugar or oligosaccharide was added to the mixture at 1: 1-4 ratio and then spontaneously fermented at room temperature for 1-7 days.

2. 결과 및 고찰2. Results and discussion

아로니아 원물을 clean bench 안에서 으깬 후, 10배 희석하여 실험을 진행하였다. pH와 산도, 당도는 10배 희석하여 실험을 진행하였다. 폴리페놀 함량 측정 시에는 용매를 증류수를 이용하여 추출 후 실험하였다. The raw material of Aronia was crushed in a clean bench and diluted 10 times to conduct the experiment. The pH, acidity and sugar content were diluted 10 times. For the determination of polyphenol content, the solvent was extracted with distilled water and then tested.

아로니아 원액의 기본 성분Basic ingredient of stock solution of Aronia AroniaAronia pHpH 4.23±0.014.23 + - 0.01 산도(Acidity) (%)Acidity (%) 0.60±0.000.60 ± 0.00 당도(Sugar content) (°Brix)Sugar content (° Brix) 9.00±0.009.00 ± 0.00 생존 세포수(Viable cell counts) (CFU/mL)Viable cell counts (CFU / mL) 3.93×106 3.93 × 10 6 페놀계 화합물(Phenolic compound) (mg/g)Phenolic compound (mg / g) 31.99±5.3031.99 ± 5.30

<< 실시예Example 2>  2> 아로니아Aronia 당절임액을The amount of pickled sugar 이용한 젖산발효  Lactic acid fermentation using

1. 재료 및 방법1. Materials and Methods

7일 동안 자연발효한 아로니아를 핸드믹서기로 균질화 한 후 90℃, 30분 열처리 하였다. 아로니아 젖산 발효물의 배지 조성은 표 2와 같이 3%(w/w) MSG, 0.5%(w/w) 효모추출물(yeast extract; Y.E)을 첨가하고, 아로니아 당절임액을 1, 2, 5, 10배 희석하였다. MSG broth에서 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014를 30℃, 1일간 배양한 스타터(starter)를 1% 접종하여, 30℃에서 3일간 발효하여 아로니아 젖산 발효물을 제조하여 분석하였다(도 1). The natural fermented Aronia was homogenized with a hand mixer for 7 days and then heat treated at 90 ° C for 30 minutes. As for the medium composition of the fermentation product of lactic acid lactic acid, 3% (w / w) MSG and 0.5% (w / w) yeast extract (YE) were added as shown in Table 2, 5, and 10 times. Lactobacillus plantarum EJ2014 was inoculated at 1% in a starter cultured at 30 ° C for 1 day, and fermented at 30 ° C for 3 days to prepare fermented arnoyl lactic acid. One).

아로니아 당절임액의 젖산발효 조성비Lactic acid fermentation composition ratio 아로니아
희석배수
Aronia
Dilution factor
아로니아 배지 조성Composition of aronia media
아로니아 당절임액(g)Aronia sugar pickles (g) 증류수(mL)Distilled water (mL) MSG1 ) (g)MSG 1 ) (g) Y.E2) (g)YE 2) (g) 1One 150150 -- 33 0.750.75 22 7575 7575 55 3030 120120 1010 1515 135135

1) MSG: 모노 소듐 글루타메이트(Mono sodium glutamate) 1) MSG: monosodium glutamate (monosodium glutamate)

2) Y.E: 효모추출물(Yeast extract) 2) YE: Yeast extract

2. 결과 및 고찰2. Results and discussion

(1) pH, 산도 및 생균수 측정(1) pH, acidity and number of living cells

아로니아 당절임액의 희석배수에 따른 젖산발효 pH와 산도변화는 도 2와 같다. 희석배수에 따른 pH의 변화는 발효 초기 4.8-5.62로 희석배수가 높아짐에 따라 pH는 증가하였다. 발효 시간에 따른 아로니아 젖산 발효물의 pH 변화는 원액과 2배 희석액에서는 발효 3일까지 pH의 변화는 없었으며, 5배 희석액은 pH 5.38에서 4.04로, 10배 희석액은 5.62에서 4.07으로 감소하였다. The pH and acidity change of lactic acid fermentation according to the dilution ratio of the ascorbic acid solution are shown in FIG. The change of pH with dilution factor was 4.8-5.62 at the initial stage of fermentation and the pH increased as the dilution ratio increased. The pH of fermented Aronia lactic acid fermented with fermentation time decreased from pH 5.38 to 4.04 and from 5.62 to 4.07 in the 5 - fold diluted solution and 4.04%, respectively.

아로니아 젖산 발효물의 산도는 5배 희석액과 10배 희석액이 가장 많이 증가하여 초기 0.20%에서 1.37, 1.21%로 각각 증가하였다.The acidity of the fermented product of Aronia lactic acid was increased by 5 times dilution and 10 times dilution, respectively, from 0.20% to 1.37% and 1.21% respectively.

아로니아 당절임액은 90℃, 30분 열처리 시 균이 사멸되었으며, 젖산발효 시간에 따라 균의 변화는 5, 10배 발효물이 발효 1일에 1.12×108, 1.08×109 CFU/mL로 나타났으며, 10배 희석 발효물에서 발효 3일 째 1.58×109 CFU/mL로 가장 높게 나타났다(표 3). The fermented broth was fermented at 90 ℃ for 30 min and the bacteria were killed by lactic acid fermentation. The fermented broth was fermented at 1.12 × 10 8 and 1.08 × 10 9 CFU / mL (Table 3). In the 10-fold diluted fermented product, fermentation was the highest on the third day at 1.58 × 10 9 CFU / mL (Table 3).

아로니아 당절임액의 희석배수에 따른 생균수 변화 (CFU/mL)Changes in viable counts according to the dilution ratio of the ascorbic acid solution (CFU / mL) 희석배수Dilution factor 발효시간 (일)Fermentation time (days) 00 1One 22 33 1One 2.90×107 2.90 × 10 7 -1) - 1) -- -- 22 2.90×107 2.90 × 10 7 -- -- -- 55 2.90×107 2.90 × 10 7 1.12×108 1.12 x 10 8 5.90×108 5.90 × 10 8 1.10×109 1.10 x 10 9 1010 2.90×107 2.90 × 10 7 1.08×109 1.08 × 10 9 1.42×109 1.42 x 10 9 1.58×109 1.58 × 10 9

1)-: 검출되지 않음. 1) -: Not detected.

(2) 색도 측정(2) Chromaticity measurement

아로니아의 발효 시간에 따른 색도의 변화를 colorimeter (Color Reader, CR-10, MINOLTA, Osaka, Japan)를 이용하여, L: 밝기(Lightness), a: 적색도(redness), b: 황색도(yellowness) 값을 측정하였다. 희석배수가 증가함에 따라 L 값은 감소하였으며, a 값은 2.21에서 4.98으로 증가하였으며, b값은 -1.35에서 0.26으로 증가하였다. L: brightness, a: redness, b: yellowness (redness) were measured using a colorimeter (Color Reader, CR-10, MINOLTA, Osaka, Japan) yellowness) were measured. As the dilution factor increased, the L value decreased, the a value increased from 2.21 to 4.98, and the b value increased from -1.35 to 0.26.

발효시간에 따른 색도의 변화는 4가지 희석배수에서 L 값은 발효 3일째 감소하였으며, a 값과 b 값은 큰 차이가 없었다(표 4).The L value was decreased on the third day of fermentation at 4 dilution ratios, and a and b values were not significantly different (Table 4).

아로니아 당절임액의 희석배수에 따른 색도 변화Chromaticity change according to the dilution ratio of the pickling solution of Aronia 희석배수 Dilution factor 색도Chromaticity 발효시간 (일)Fermentation time (days) 00 1One 22 33 1One LL 18.13±0.0318.13 + 0.03 20.09±0.0220.09 + 0.02 18.27±0.2518.27 ± 0.25 16.17±0.0516.17 ± 0.05 aa 2.21±0.08 2.21 ± 0.08 2.63±0.092.63 ± 0.09 2.46±0.092.46 ± 0.09 1.31±0.021.31 + 0.02 bb -1.35±0.05 -1.35 ± 0.05 -1.51±0.03-1.51 + 0.03 -1.38±0.06-1.38 + 0.06 -0.77±0.02-0.77 + 0.02 22 LL 17.12±0.0317.12 + 0.03 16.24±0.0116.24 + - 0.01 16.90±0.1416.90 + 0.14 14.72±0.0114.72 ± 0.01 aa 4.37±0.174.37 ± 0.17 3.88±0.133.88 + 0.13 4.36±0.014.36 ± 0.01 4.34±0.014.34 ± 0.01 bb -0.91±0.09-0.91 + 0.09 -0.78±0.06-0.78 ± 0.06 -0.77±0.06-0.77 ± 0.06 0.32±0.030.32 ± 0.03 55 LL 16.29±0.1716.29 ± 0.17 16.98±0.0516.98 ± 0.05 16.68±0.0616.68 ± 0.06 14.97±0.0314.97 + 0.03 aa 4.94±0.204.94 0.20 5.43±0.015.43 + - 0.01 6.54±0.096.54 ± 0.09 4.34±0.104.34 ± 0.10 bb -0.10±0.11-0.10 0.11 -0.18±0.03-0.18 + 0.03 0.11±0.110.11 + - 0.11 0.03±0.030.03 0.03 1010 LL 16.41±0.3516.41 + - 0.35 17.43±0.0917.43 + 0.09 18.26±0.2518.26 ± 0.25 15.40±0.0315.40 ± 0.03 aa 4.98±0.044.98 + 0.04 6.62±0.126.62 + - 0.12 7.40±0.067.40 + 0.06 4.35±0.064.35 + 0.06 bb 0.26±0.260.26 ± 0.26 0.32±0.120.32 ± 0.12 0.43±0.130.43 + 0.13 0.43±0.050.43 + - 0.05

(3) GABA 함량 측정(3) Measurement of GABA content

희석 배수에 따른 아로니아 젖산 발효물의 GABA 생성을 TLC를 통해 측정하였다(도 3). 아로니아 당절임액을 5배, 10배 희석하여 3일간 젖산 발효한 아로니아 젖산 발효물에서 GABA는 약 0.25% 이하로 생성되었다. 균의 생육 및 GABA의 생성능을 비교해보았을 때, 5배 이상 희석한 조건에서 젖산발효가 진행됨을 알 수 있다. GABA production of fermented arnoyl lactate according to the dilution factor was measured by TLC (Fig. 3). GABA was produced in fermented lactic acid fermented lactic acid fermented for 3 days at 5 times and 10 times diluted with Aronii 's pickles. When the growth of bacteria and the ability to produce GABA were compared, lactic acid fermentation proceeded at a dilution of 5 times or more.

<< 실시예Example 3>  3> 아로니아Aronia 당절임액의Per capita 분쇄방법 및 희석배수에 따른 젖산균 발효 Fermentation of lactic acid bacteria by pulverization method and dilution drainage

1. 재료 및 방법1. Materials and Methods

아로니아와 설탕을 1:1로 혼합한 아로니아 당절임액을 homogenizer와 hand blender를 이용하여 분쇄하고, 90℃, 30분 열처리하였다. 아로니아 당절임액을 5-10배 희석하고, 3% MSG와 0.5% Y.E를 첨가하여 아로니아 배지를 제조하였다(표 5). 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014 스타터(starter)를 1% 접종하여, 30℃에서 3일간 발효하여 아로니아 젖산 발효물을 제조하여 분석하였다.A mixture of Aronia and sugar in a ratio of 1: 1 was pulverized using a homogenizer and a hand blender and heat-treated at 90 ° C for 30 minutes. The ascorbic acid solution was diluted 5 to 10 times, and 3% MSG and 0.5% YE were added to prepare an Aronia culture medium (Table 5). A 1% Lactobacillus plantarum EJ2014 starter was inoculated and fermented at 30 ° C for 3 days to produce fermented arnoyl lactic acid.

아로니아 당절임액의 젖산발효 조성비Lactic acid fermentation composition ratio 아로니아
희석배수
Aronia
Dilution factor
아로니아 배지 조성Composition of aronia media
아로니아 당절임액(g)Aronia sugar pickles (g) 증류수(mL)Distilled water (mL) MSG1 ) (g)MSG 1 ) (g) Y.E2) (g)YE 2) (g) 55 2020 8080 33 0.50.5 7.57.5 1313 8787 1010 1010 9090

1) MSG: 모노 소듐 글루타메이트(Mono sodium glutamate) 1) MSG: monosodium glutamate (monosodium glutamate)

2) Y.E: 효모추출물(Yeast extract) 2) YE: Yeast extract

2. 결과 및 고찰2. Results and discussion

(1) 분쇄방법과 희석농도에 따른 pH, 산도 및 생균수 측정(1) pH, acidity and number of viable cells according to milling method and dilution concentration

Homogenizer를 이용하여 분쇄한 아로니아 젖산 발효물의 초기 pH는 5.38-5.62로 나타났으며, 2일 후 4.22-4.20으로 감소하고, 그 이후 pH의 변화는 없었다. 산도의 경우 초기 0.17- 0.20%에서 3일 발효시 1.21-1.15%까지 계속적으로 증가하였으며, 희석배수에 따라서 pH와 산도의 차이는 거의 없었다(도 4a). Hand blender를 이용하여 분쇄한 아로니아 젖산 발효물의 초기 pH는 5.38-5.62로 나타났으며, 발효 2일 후 4.19-4.20으로 감소하였으며, 이후 pH 변화는 없었다. 산도의 경우 초기 0.17-0.20%에서 3일 발효시 1.09-1.15%로 증가하였으며, 희석배수와 분쇄방법에 따른 pH와 산도의 변화는 없었다(도 4b). The initial pH of the fermented lactobacillus acidified with homogenizer was 5.38-5.62, decreased to 4.22-4.20 after 2 days, and thereafter, the pH did not change. In the case of acidity, the initial pH of 0.17-0.20% increased continuously from 1.21-1.15% at 3 days of fermentation, and there was almost no difference in pH and acidity according to the dilution ratio (FIG. 4A). The initial pH of the fermented lactic acid lactobacilli pulverized by hand blender was 5.38-5.62 and decreased to 4.19-4.20 after 2 days of fermentation. The acidity increased from 0.17-0.20% at the initial stage to 1.09-1.15% at the 3-day fermentation stage and there was no change in pH and acidity according to the dilution factor and milling method (FIG. 4b).

L. plantarum EJ2014의 초기 생균수는 2.13×106 CFU/mL으로 나타났다. Homogenizer를 이용한 1일 발효 이후 3.18×108-6.88×108 CFU/mL으로 증가하였으며, 이후 3일 발효에서 3.63×108-7.20×108 CFU/mL으로 108 CFU/mL을 유지하며 생균수가 다소 증가 하였다. Hand blender를 이용한 1일 발효 이후 1.13×108-9.06×108 CFU/mL으로 증가 하였으며, 이후 3일 발효에서 5.25×108-5.55×108 CFU/mL으로 108 CFU/mL을 유지 하였다(표 6).The initial viable count of L. plantarum EJ2014 was 2.13 × 10 6 CFU / mL. Since 1 fermentation using a Homogenizer 3.18 × 10 8 -6.88 × 10 8 increased the CFU / mL, after maintaining a 3.63 × 10 8 -7.20 × 10 8 CFU / mL to 10 8 CFU / mL in 3 days fermentation and the viable cells . After 1-day fermentation using a hand blender, the fermentation time was increased to 1.13 × 10 8 -9.06 × 10 8 CFU / mL, and then maintained at 10 8 CFU / mL from 5.25 × 10 8 -5.55 × 10 8 CFU / mL for 3 days fermentation (Table 6).

아로니아 당절임액의 분쇄방법에 따른 희석배수 별 생균수 변화 (CFU/mL)Changes in the number of viable cells per dilution ratio according to the grinding method of the ascorbic acid solution (CFU / mL) 희석배수Dilution factor 발효시간 (일)Fermentation time (days) 00 1One 22 33 homogenizerhomogenizer 55 1.68×106 1.68 × 10 6 3.86×108 3.86 x 10 8 9.70×108 9.70 x 10 8 7.20×108 7.20 x 10 8 7.57.5 2.13×106 2.13 × 10 6 3.18×108 3.18 × 10 8 6.65×108 6.65 x 10 8 3.63×108 3.63 × 10 8 1010 2.22×106 2.22 × 10 6 6.88×108 6.88 × 10 8 7.05×108 7.05 x 10 8 5.33×108 5.33 x 10 8 hand blenderhand blender 55 1.76×106 1.76 x 10 6 1.13×109 1.13 × 10 9 1.06×108 1.06 x 10 8 5.55×108 5.55 × 10 8 7.57.5 2.12×106 2.12 × 10 6 8.77×108 8.77 × 10 8 5.25×108 5.25 x 10 8 5.25×108 5.25 x 10 8 1010 2.33×106 2.33 × 10 6 9.06×108 9.06 × 10 8 8.73×108 8.73 × 10 8 5.55×108 5.55 × 10 8

(2) 분쇄방법과 희석농도에 따른 색 변화(2) Color change according to crushing method and dilution concentration

발효시간이 지남에 따라 희석배수별 색의 차이를 확인하기 위하여 투명 4 mL 바이알에 시료를 넣어 비교하였다. 모든 조건에서 발효가 진행됨에 따라 적색이 옅어지는 모습을 볼 수 있었으며, 희석배수가 높은 10배에서 가장 색이 옅어지는 것을 알 수 있었다(도 5).As the fermentation time progressed, samples were placed in transparent 4 mL vials to determine the color difference by dilution factor. As the fermentation proceeded under all conditions, the red color became thinner and the color became thinner at 10 times the dilution factor (Fig. 5).

(3) 분쇄방법과 희석농도에 따른 TLC 변화 및 색도 변화(3) TLC and chromaticity change according to pulverization method and dilution concentration

분쇄방법과 희석농도에 따른 아로니아 젖산 발효물의 GABA 생산능을 TLC를 이용하여 정성분석하였다. homogenizer와 hand blender 모두 아로니아 젖산 발효물은 희석배수 10배, 3일 발효시에 약 0.3%로 가장 높게 나타났으며, 희석배수가 높아짐에 따라 GABA 생산이 증가하는 것을 확인하였다(도 6).The GABA production ability of the fermented Ahnonia lactic acid according to the pulverization method and dilution concentration was qualitatively analyzed by TLC. Both the homogenizer and the hand blender showed the highest fermentation rate of the fermented ARNA lactase at 10 times of dilution and about 0.3% at 3 days of fermentation, and that GABA production was increased as the dilution ratio increased (FIG. 6).

두 가지 분쇄방법에 따른 색도의 변화를 관찰하기 위해 아로니아 당절임액을 hand blender로 희석배수 10배 희석하여 3일 발효한 발효물을 실온에서 3주간 보관하여 색도의 변화를 관찰하였다(도 7, 표 7). 시간이 지남에 따라 밝기 변화는 큰 차이를 보이지 않았으나, a 값은 증가하였으며, b 값도 증가하는 경향을 보였다. 또한 호일을 씌우지 않은 군과 호일을 씌운 군을 비교하면 호일을 씌우지 않은 결과의 군이 a 값과 b 값이 더 크게 증가하는 경향으로 알 수 있듯이, 아로니아의 색소는 빛에 영향을 받는 것을 알 수 있다. 따라서 제품화 할 시에는 불투명한 용기나 파우치에 제품을 넣어 안정성을 높여 주여야 된다고 생각된다. In order to observe the change of the chromaticity according to the two grinding methods, the fermented material fermented for 3 days by diluting 10 times of the dilution ratio with the hand blender was kept at room temperature for 3 weeks to observe the change of the chromaticity , Table 7). As time went on, the change in brightness did not show a significant difference, but a value increased and b value also increased. In addition, comparing the uncoiled group with the foil-covered group, the group of unfilled results showed that the a and b values increased more significantly, indicating that the color of Aronia was affected by light . Therefore, when it comes to commercialization, it is considered that the stability should be improved by putting the product in an opaque container or pouch.

아로니아 당절임액의 희석배수별과 호일로 동봉 유무에 따른 시간변화의 색도 변화Variation of chromaticity of temporal change according to presence or absence of dilution multiples and foil of Aronia saccharide solution 시간time 색도Chromaticity 아로니아 희석배수 Dilution of Aromania dilution 호일 ×Foil × 호일 oFoil o ×5× 5 ×7.5× 7.5 ×10× 10 ×5× 5 ×7.5× 7.5 ×10× 10 77 LL 18.13±0.0318.13 + 0.03 19.08±0.0119.08 ± 0.01 20.09±0.0220.09 + 0.02 18.27±0.2518.27 ± 0.25 18.27±0.2518.27 ± 0.25 19.17±0.0519.17 ± 0.05 aa 2.21±0.08 2.21 ± 0.08 2.44±0.062.44 ± 0.06 2.63±0.092.63 ± 0.09 2.46±0.092.46 ± 0.09 2.46±0.092.46 ± 0.09 1.31±0.021.31 + 0.02 bb -1.35±0.05 -1.35 ± 0.05 -1.41±0.03-1.41 + 0.03 -1.51±0.03-1.51 + 0.03 -1.38±0.06-1.38 + 0.06 -1.38±0.06-1.38 + 0.06 -0.77±0.02-0.77 + 0.02 1414 LL 18.88±0.1218.88 + - 0.12 19.22±0.1219.22 + - 0.12 19.94±0.0619.94 0.06 18.33±0.0618.33 ± 0.06 18.96±0.0718.96 + 0.07 19.11±0.0419.11 + 0.04 aa 6.44±0.086.44 ± 0.08 3.25±0.063.25 ± 0.06 3.85±0.143.85 ± 0.14 4.63±0.744.63 ± 0.74 4.68±0.064.68 ± 0.06 2.28±0.062.28 ± 0.06 bb 1.12±0.141.12 + - 0.14 2.18±0.062.18 ± 0.06 1.14±0.161.14 ± 0.16 1.28±0.071.28 + 0.07 2.18±0.112.18 ± 0.11 2.14±0.082.14 ± 0.08 2121 LL 19.24±0.1419.24 + 0.14 19.65±0.1619.65 + 0.16 19.88±0.1219.88 ± 0.12 18.97±0.0418.97 + 0.04 19.72±0.0419.72 + 0.04 19.10±0.0619.10 ± 0.06 aa 7.86±0.127.86 ± 0.12 7.22±0.127.22 ± 0.12 6.82±0.066.82 + 0.06 8.06±0.128.06 ± 0.12 7.77±0.067.77 ± 0.06 4.25±0.084.25 + 0.08 bb 3.88±0.083.88 ± 0.08 4.12±0.084.12 + 0.08 4.13±0.064.13 + 0.06 4.06±0.054.06 ± 0.05 4.25±0.124.25 + - 0.12 3.65±0.043.65 + 0.04

<< 실시예Example 3> MSG 첨가에 따른  3> Addition of MSG 아로니아Aronia 당절임액의Per capita GABAGABA 생산 최적화 Optimize production

1. 재료 및 방법1. Materials and Methods

7일 동안 당절임 하여 자연발효 한 아로니아를 핸드믹서기로 균질화 한 후 90℃, 30분 열처리 하였다. 아로니아 젖산 발효물의 배지조성은 아로니아 당절임액을 10배 희석하고 MSG 첨가별에 따른 젖산 발효를 진행하였다(표 8). 0-2%(w/w) MSG, 0.5%(w/w) Y.E를 첨가하여, MSG broth에서 30℃, 1일 간 배양한 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014 스타터(starter)를 1% 접종 후, 30℃에서 9일간 발효하여 아로니아 젖산 발효물을 제조하여 분석하였다.After 7 days of fermentation, the natural fermented Aronia was homogenized with a hand mixer and heat-treated at 90 ° C for 30 minutes. The medium composition of the fermented lactic acid lactobacillus was diluted 10 times with the ascorbic acid fermented solution and lactic acid fermentation was performed according to the addition of MSG (Table 8). Lactobacillus plantarum EJ2014 starter, which was cultured in MSG broth at 30 ° C for 1 day by adding 0-2% (w / w) MSG and 0.5% (w / After inoculation, the fermented product was fermented at 30 ° C for 9 days, and the fermented product was analyzed.

MSG 첨가 농도에 따른 아로니아 젖산균 발효 조성비The composition ratio of lactic acid bacteria fermented by MSG 아로니아
희석배수
Aronia
Dilution factor
아로니아 배지 조성Composition of aronia media
아로니아 당절임액(g)Aronia sugar pickles (g) 증류수(mL)Distilled water (mL) MSG1 ) (g)MSG 1 ) (g) Y.E2) (g)YE 2) (g) 1010 1010 9090 00 0.50.5 1One 22

1) MSG: 모노 소듐 글루타메이트(Mono sodium glutamate) 1) MSG: monosodium glutamate (monosodium glutamate)

2) Y.E: 효모추출물(Yeast extract) 2) YE: Yeast extract

2. 결과 및 고찰2. Results and discussion

(1) 아로니아 젖산균 발효의 MSG 첨가 농도에 따른 pH, 산도 및 생균수 측정(1) Measurement of pH, acidity and viable cell count according to the concentration of MSG added to fermentation of lactobacillus acidophilus

MSG 첨가농도에 따른 pH 및 산도변화는 도 8과 같다. 발효 1일에는 4.29-4.57이였으며, 2일에는 MSG 0%의 경우 산도가 4.46으로 약간 증가한 후 3일 발효시에 4.32로 큰 차이를 나타나지 않았다. MSG 1-2%는 pH가 약간 감소하였으며 2일 발효시에 4.05-4.12이였다. 3일 발효에는 3.90-4.03으로 약간 감소하였다. MSG 0%는 발효기간동안 산도의 변화가 크게 나타나지 않았으며, MSG 농도가 높아짐에 따라 산도도 크게 높아지는 것을 확인하였다. MSG 2%에서 발효 3일째 산도 1.12%로 나타났다.The change in pH and acidity according to the concentration of MSG added is shown in FIG. In the case of MSG 0% on the 2nd day, the acidity increased slightly to 4.46 and the difference on the 3rd day was 4.32. MSG 1-2% had slightly decreased pH and 4.05-4.12 at 2 days fermentation. But slightly decreased to 3.90-4.03 for 3 days fermentation. MSG 0% showed no significant change of acidity during fermentation period, and it was confirmed that acidity increases with increasing MSG concentration. MSG 2% and acidity on the third day of fermentation was 1.12%.

MSG 첨가 농도에 따른 아로니아 젖산 발효물의 생균수 변화를 관찰하였다(표 9). 스타터(starter)로 사용한 L. platarum EJ2014의 초기 생균수는 2.90×107 CFU/mL에서 MSG 0%는 영양성분의 부족으로 젖산균의 생육을 억제하는 것으로 사료되며, MSG 1, 2%에서는 발효 1일째 7.20×109-9.70×108 CFU/mL로 균수가 가장 높게 나타났다. 발효 3일까지 균수가 조금씩 감소하였지만 5.33×108 CFU/mL이상으로 균이 유지되는 것을 확인 할 수 있었다. 발효 3일까지 진행되면서 MSG를 첨가하지 않았을 시에는 균의 생육이 어려웠으며 산도도 증가하지 않았다. 이에 따라 MSG를 첨가하여 균의 생육을 유지하여 젖산발효가 진행되는데 기여를 한다고 판단된다.The changes in viable counts of fermented Aronia lactic acid according to MSG concentration were observed (Table 9). The initial viable cell count of L. platarum EJ2014 used as a starter was 2.90 × 10 7 CFU / mL and 0% of MSG inhibited the growth of lactic acid bacteria due to lack of nutrients. In MSG 1 and 2%, fermentation 1 And 7.20 × 10 9 -9.70 × 10 8 CFU / mL at day 1, respectively. The bacterial counts were slightly decreased until the third day of fermentation, but it was confirmed that the bacteria were maintained above 5.33 × 10 8 CFU / mL. When MSG was not added until the third day of fermentation, the growth of the bacteria was difficult and the acidity did not increase. Therefore, MSG was added to maintain the growth of the microorganism and contribute to lactic acid fermentation.

아로니아 당절임액의 MSG 첨가별에 따른 생균수 변화 (CFU/mL)Changes in viable cell counts according to the addition of MSG in ascorbic acid (CFU / mL) 희석배수Dilution factor 발효시간 (일)Fermentation time (days) 00 1One 22 33 00 2.907 2.90 7 -1) - 1) -- -- 1One 9.70×108 9.70 x 10 8 6.65×108 6.65 x 10 8 7.05×108 7.05 x 10 8 22 7.20×108 7.20 x 10 8 3.63×108 3.63 × 10 8 5.33×108 5.33 x 10 8

1)-: 검출되지 않음. 1) -: Not detected.

(2) 아로니아 젖산균 발효의 MSG 첨가별에 따른 GABA 생성능 비교(2) Comparison of GABA production by MSG addition of lactobacillus acidophilus fermentation

MSG 첨가별에 따른 GABA 생성능을 비교하기 위해 시료를 3배 희석하여 사용 하였다. MSG 2% 첨가군에서 GABA가 가장 많이 생성되었으며 발효 1일 이후에 MSG 소진 또는 GABA 전환의 차이가 거의 나타나지 않았다(도 9).To compare the GABA production by MSG addition, samples were diluted 3 times. GABA was most abundant in the MSG 2% added group and there was little difference in MSG depletion or GABA conversion after 1 day of fermentation (FIG. 9).

<< 실시예Example 5> 포도당 및 MSG 첨가 농도에 따른  5> Dependent on concentration of glucose and MSG 아로니아Aronia 당절임액의Per capita 젖산발효 Lactic acid fermentation

1. 재료 및 방법1. Materials and Methods

7일 동안 자연발효 한 아로니아 당절임액을 핸드믹서기로 균질화 한 후 90℃, 30분 열처리 하였다. 아로니아 젖산 발효물의 배지 조성은 2%(w/w) MSG, 0.5%(w/w) Y.E를 첨가하고, 포도당 0-2%(g)를 첨가하여 아로니아 당절임액을 5배 희석한 후 실험하였다(표 10). MSG broth에서 L. plantarum EJ2014를 30℃, 1일간 배양한 스타터(starter)를 1% 접종 후, 30℃에서 3일간 발효하여 아로니아 젖산 발효물을 제조하여 분석하였다. 이전 실험에서 아로니아 당절임액을 10배 희석하였을 시 보다 5배 희석한 당절임액이 포도당 양이 많으므로 발효 시 먹이로써 이용율이 높은 것으로 사료되므로, 포도당 첨가량을 달리하고, MSG 함량을 달리하여 실험을 진행하였다.After 7 days, the fermented Aronia fermented liquid was homogenized with a hand mixer and heat treated at 90 ℃ for 30 minutes. The medium composition of the lactic acid lactofermentation product was prepared by adding 2% (w / w) MSG and 0.5% (w / w) YE, adding glucose 0-2% (g) (Table 10). From the MSG broth, L. plantarum EJ2014 was inoculated with 1% starter cultured at 30 ℃ for 1 day and fermented at 30 ℃ for 3 days to produce fermented arnoyl lactic acid. In the previous experiment, the fermented milk was more diluted with 5 times dilution than that diluted 10 times. Therefore, it was considered that the fermentation efficiency was higher than that of fermentation. Therefore, The experiment was carried out.

포도당 및 MSG 첨가 농도에 따른 아로니아 당절임액의 젖산발효 배지 조성Lactic acid Fermentation Medium Composition of Aronia Glucose Fermented with Different Glucose and MSG Concentration 아로니아
희석배수
Aronia
Dilution factor
아로니아 배지 조성Composition of aronia media
아로니아
당절임액(mL)
Aronia
Capsicum solution (mL)
증류수(mL)Distilled water (mL) MSG1 ) (g)MSG 1 ) (g) 포도당
(Glucose)
0-2% (g)
glucose
(Glucose)
0-2% (g)
Y.E2) (g)YE 2) (g)
55 2020 8080 22 22 0.50.5 00 22 22 00

1) MSG: 모노 소듐 글루타메이트(Mono sodium glutamate) 1) MSG: monosodium glutamate (monosodium glutamate)

2) Y.E: 효모추출물(Yeast extract) 2) YE: Yeast extract

2. 결과 및 고찰2. Results and discussion

(1) pH, 산도 및 생균수 측정(1) pH, acidity and number of living cells

아로니아 당절임액에 YE 0.5%와 MSG 0-2%, 포도당 0-2%를 첨가하여 발효한 아로니아 젖산 발효액의 pH와 산도 변화는 도 10과 같다. 발효 시간에 따른 pH 변화는 포도당 2% 첨가군에서는 발효 7일 동안 pH와 산도의 변화가 나타나지 않았으며, MSG 2%가 첨가된 2가지 시험군에서 pH 5.26에서 발효 5일째 3.93으로 감소하였다. 산도는 발효 초기 0.23%에서 발효 7일까지 계속 증가하여 1.56%로 나타났다(도 10). The changes in pH and acidity of the fermented fermented Aronia lactic acid fermented by addition of YE 0.5%, MSG 0-2%, and glucose 0-2% to the pickles of Aronia were shown in FIG. The change of pH with fermentation time did not change pH and acidity during 7 days of fermentation in 2% glucose supplement group and decreased from pH 5.26 to 3.93 on 5th day of fermentation in 2 test groups containing 2% MSG. The acidity increased from 0.23% at the beginning of fermentation to 7 days of fermentation, indicating 1.56% (FIG. 10).

L. plantarum EJ2014의 초기 생균수는 5.33×107 CFU/mL에서 포도당 2% 첨가 군에서는 발효 7일까지 균수가 계속 감소되어 발효 7일째 3.25×105 CFU/mL로 나타났으며, MSG가 첨가된 2가지 시험군에서는 발효 7일까지 균수가 유지되어 6.58×108 CFU/mL 이상으로 나타났다(도 11). 아로니아 당절임액을 이용한 젖산발효 생육에는 포도당 보다 MSG가 영양성분으로 적합하다고 사료된다. The initial viable cell count of L. plantarum EJ2014 was 5.33 × 10 7 CFU / mL and the number of microorganisms was continuously decreased until the 7th day of fermentation in the 2% glucose supplemented group, which was 3.25 × 10 5 CFU / mL on the 7th day of fermentation. In the two test groups, the bacterial count was maintained until the 7th day of fermentation and was found to be 6.58 × 10 8 CFU / mL or more (FIG. 11). It is considered that MSG is more suitable as a nutrient than glucose in growth of fermentation of lactic acid by using Aronia starch solution.

(2) TLC 변화(2) TLC change

포도당 및 MSG 첨가 농도에 따른 아로니아 젖산 발효액의 TLC 변화를 비교하기 위해 시료 원액을 사용하였다. GABA의 전구물질인 MSG가 첨가되지 않은 군에서는 GABA가 전혀 생성되지 않았으며, MSG 2% 첨가군에서는 포도당의 첨가 유무에 따른 GABA 생성의 차이는 크게 보이지 않았다(도 12).In order to compare TLC of fermentation broth of ascorbic acid with glucose and MSG concentration, sample stock solution was used. GABA was not produced in the group without MSG, which is a precursor of GABA, and GABA was not significantly different according to the presence or absence of glucose in MSG 2% added group (FIG. 12).

<< 실시예Example 7> 효모 추출물(Yeast extract)과  7> Yeast extract and 스킴Scheme 밀크milk (skim milk), (skim milk), CaCOCaCO 33 The 가별에 따른 아로니아 당절임액의 Of the pickles of Aronia GABAGABA 생산 최적화 Optimize production

1. 재료 및 방법1. Materials and Methods

7일 동안 자연발효 한 아로니아 당절임액을 핸드믹서기로 균질화 한 후 90℃, 30분 열처리 하였다. 아로니아 젖산 발효물의 배지 조성은 이전과 동일하게 진행 하였으며, 다음과 같이 2%(w/w) MSG, 0.5-1%(w/w) Y.E를 첨가하고, 스킴 밀크(skim milk) 0-1%(g)를 첨가하고, CaCO3를 0.25%(w/w)를 첨가하여 아로니아 당절임액을 10배 희석한 후 실험하였다(표 11). MSG broth에서 L. plantarum EJ2014를 30℃, 1일간 배양한 스타터(starter)를 1% 접종 후, 30℃에서 7일간 발효하여 아로니아 젖산 발효물을 제조하여 분석하였다. After 7 days, the fermented Aronia fermented liquid was homogenized with a hand mixer and heat treated at 90 ℃ for 30 minutes. The culture medium of the fermentation product of Aronia lactic acid was the same as before, and 2% (w / w) MSG and 0.5-1% (w / w) YE were added as follows and skim milk 0-1 After adding 0.25% (w / w) of CaCO 3 and adding 10% of diluted ascorbic acid solution (Table 11),% (g) was added. L. plantarum EJ2014 from MSG broth was inoculated with 1% starter cultured at 30 ℃ for 1 day and fermented at 30 ℃ for 7 days to produce fermented aronia lactic acid.

아로니아 당절임액에 Y.E 첨가별, S.M 첨가별, CaCO3 첨가별에 따른 발효 조성비Fermentation composition ratio according to YE addition, SM addition, and CaCO 3 addition in Aronia starch solution 아로니아
희석배수
Aronia
Dilution factor
아로니아 배지 조성Composition of aronia media
아로니아
당절임액
(mL)
Aronia
Sugar pickle
(mL)
증류수
(mL)
Distilled water
(mL)
MSG1 ) (g)MSG 1 ) (g) Y.E2) (g)YE 2) (g) S.M3) (g)SM 3) (g) CaCO3
0.25% (g)
CaCO 3
0.25% (g)
1010 1010 9090 22 0.50.5 00 0.250.25 1One 00 1One 1One

1) MSG: 모노 소듐 글루타메이트(Mono sodium glutamate) 1) MSG: monosodium glutamate (monosodium glutamate)

2) Y.E: 효모추출물(Yeast extract) 2) YE: Yeast extract

3) S.M: 스킴 밀크(Skim milk) 3) SM: Skim milk

2. 결과 및 고찰2. Results and discussion

(1) pH, 산도 및 생균수 측정(1) pH, acidity and number of living cells

아로니아 당절임액에 스킴 밀크(skim milk)와 MSG 첨가 농도별에 따른 pH 및 산도 변화는 도 13과 같다. 발효시간에 따른 pH 변화는 발효 0일째 4.18-4.41에서 발효 7일째 4.11-1.22로 다소 감소거나 큰 차이를 보이지 않는 경향을 보였다. 산도의 변화는 스킴 밀크(skim milk)를 첨가한 군에서 5일 이후 산도가 계속적으로 감소하는 경향을 보였으며, 스킴 밀크(skim milk)를 첨가하지 않은 두 군에서는 5일 발효에는 1.04-1.21%으로 나타난 후. 7일 발효에는 1.18-1.37%으로 다시 증가하는 경향을 보였다.The change in pH and acidity according to skim milk and MSG concentration in the saline solution of Aronia was as shown in FIG. The pH change with fermentation time tended to decrease somewhat from 4.18-4.41 on the 0th day of fermentation to 4.11-1.22 on the 7th day of fermentation. The changes in acidity tended to decrease continuously after 5 days in the skim milk supplemented group, and 1.04-1.21% in the 5-day fermentation in the two groups without skim milk. After that, But increased again to 1.18-1.37% at 7 days of fermentation.

L. plantarum EJ2014의 초기 생균수는 6.31×107FU/mL에서 모든 군에서 발효 1일에 2.10-2.45×109 CFU/mL로 증가한 후 3일 발효시에는 1.16-2.45×109 CFU/mL로 109 CFU/mL로 유지되었다. 이후 7일 발효시에 7.38×108 CFU/mL이상으로 유지되었다. 아로니아 당절임액을 이용한 젖산발효 생육에는 Y.E를 첨가하는 것이 영양성분으로 적합하며, 스킴 밀크(skim milk)를 첨가한 군에서도 균의 생육에 도움을 준다고 사료된다(도 14). L. plantarum initial number of live cells EJ2014 is 6.31 × 10 7 FU / to the fermentation 1 day in all groups mL 2.10-2.45 × 10 9 after an increase in CFU / mL at the time of three days fermentation 1.16-2.45 × 10 9 CFU / mL as it was maintained at 10 9 CFU / mL. And then maintained at 7.38 × 10 8 CFU / mL or higher at 7 days fermentation. The addition of YE to the fermentation of lactic acid fermentation using Aronia starch solution is considered to be a nutritional component, and it is believed that the addition of skim milk helps the growth of bacteria (FIG. 14).

(2) TLC 변화(2) TLC change

Y0.5, Y1, YS1의 경우에 따른 TLC 변화는 시료 원액을 사용하였으며, Y0.5의 실험군에서는 7일 발효 시 GABA 함량이 약 0.2% 나타났으며, Y1의 경우의 군에서는 약 0.6%의 GABA가 생성되었고, YS1 경우의 군에서는 약 1.2%의 GABA가 생성되었다(도 15). 스킴 밀크(Skim milk)를 첨가하였을 시에 GABA 생성능에 기여하는 역할을 한다고 사료된다.The TLC of Y0.5, Y1 and YS1 was determined by using the stock solution. In the Y0.5 experimental group, the GABA content was about 0.2% at 7 days of fermentation and about 0.6% at Y1 GABA was generated, and about 1.2% of GABA was produced in the case of YS1 case (Fig. 15). The addition of skim milk may play a role in GABA production.

<< 실시예Example 8> 효모 추출물(Yeast extract)과  8> Yeast extract and 스킴Scheme 밀크milk (skim milk) 첨가에 따른 아로니아 당절임액의 GABA 생산 최적화(skim milk) supplementation of GABA

1. 재료 및 방법1. Materials and Methods

7일 동안 자연발효 한 아로니아 당절임액을 핸드믹서기로 균질화 한 후 90℃, 30분 열처리 하였다. 아로니아 젖산 발효물의 배지조성은 아로니아 당절임액을 10배 희석하고 2%(w/w) MSG, 0.5-1%(w/w) Y.E, 스킴 밀크(skim milk; S.M) 0-5%(g), CaCO3를 0.25%(w/w)를 첨가하여, MSG broth에서 30℃, 1일간 배양한 L. plantarum EJ2014 스타터(starter)를 1% 접종 후, 30℃에서 9일간 발효하여 아로니아 젖산 발효물을 제조하여 분석하였다(표 12). After 7 days, the fermented Aronia fermented liquid was homogenized with a hand mixer and heat treated at 90 ℃ for 30 minutes. The culture medium of the lactic acid fermentation product of Aronia was prepared by diluting the ascorbic acid solution 10 times with 2% (w / w) MSG, 0.5-1% (w / w) YE, skim milk (SM) (g) and 0.25% (w / w) of CaCO 3 were added, and 1% L. plantarum EJ2014 starter cultured in MSG broth at 30 ° C for 1 day was inoculated. Loner lactic acid fermentation products were prepared and analyzed (Table 12).

Y.E와 S.M 첨가농도에 따른 아로니아 당절임액의 발효 조성비Fermentation Composition Ratio of Aronia Fermented Liquid by the Addition of Y.E and S.M 아로니아
희석배수
Aronia
Dilution factor
아로니아 배지 조성Composition of aronia media
아로니아
당절임액
(mL)
Aronia
Sugar pickle
(mL)
증류수
(mL)
Distilled water
(mL)
MSG1 ) (g)MSG 1 ) (g) Y.E2) (g)YE 2) (g) S.M3) (g)SM 3) (g) CaCO3
0.25% (g)
CaCO 3
0.25% (g)
1010 1010 9090 22 0.50.5 00 0.250.25 1One 00 1One 1One 1One 33 1One 55

1) MSG: 모노 소듐 글루타메이트(Mono sodium glutamate) 1) MSG: monosodium glutamate (monosodium glutamate)

2) Y.E: 효모추출물(Yeast extract) 2) YE: Yeast extract

3) S.M: 스킴 밀크(Skim milk) 3) SM: Skim milk

2. 결과 및 고찰2. Results and discussion

(1) pH, 산도 및 생균수 측정(1) pH, acidity and number of living cells

Y.E와 S.M의 첨가 농도에 따른 아로니아 젖산 발효물의 pH와 산도 변화이다(도 16). 발효 전 pH는 Y.E 0.5% 첨가군에서 6.60으로 가장 높게 나타났으며, 발효 1일째 모든 조건에서 pH가 감소하여 pH 4.25-4.42로 나타났다. 모든 조건에서 발효시간에 따른 pH의 변화는 크게 없었으나, 스킴 밀크(skim milk) 첨가군에서는 발효 3일 이후에 pH가 약간 증가하는 경향을 보였다. 아로니아 젖산 발효물의 초기 산도는 0.11-0.28%로 나타났으며, YE 0.5%, YE 1% 조건에서는 발효 9일까지 산도가 계속해서 증가하였으며, YE 1%, SM 3%, 5%에서는 발효 5일째 이후 산도가 조금씩 감소하는 경향을 보였다.The change in pH and acidity of the fermented Aronia lactic acid according to the concentration of Y.E and S.M (Fig. 16). The pH before fermentation was the highest at 6.60 in Y.E 0.5% supplemented group and the pH was decreased to 4.25-4.42 at 1 day after fermentation. There was no significant change in pH over fermentation time under all conditions, but pH slightly increased after 3 days of fermentation in skim milk added group. The initial acidity of fermented lactic acid lactic acid was 0.11-0.28%, and the acidity was continuously increased until the 9th day of fermentation under the conditions of YE 0.5% and YE 1%. Fermentation at YE 1%, SM 3% and 5% The acidity tended to decrease slightly after the first day.

Y.E와 S.M의 첨가 농도에 따른 아로니아 젖산 발효물의 생균수 변화를 나타내었다(도 17). 스타터(starter)로 첨가된 L. platarum EJ2014의 초기 생균수는 2.30×107 CFU/mL에서 발효 1일째 1.50×109-3.15×109 CFU/mL로 증가하였다. 발효 3일째까지는 YE 1% 첨가군에서 3.65×109 CFU/mL로 가장 높게 나타났으며, 발효 1일 또는 3일 이후부터 균수가 감소하여 발효 9일째 1.50×108-3.60×108 CFU/mL로 나타났다. 발효 9일까지 진행되면서 생균수가 108 CFU/mL 이상으로 유지되는 것은 초기에 첨가된 CaCO3으로 젖산발효가 진행되면서 증가하는 산도에도 균의 생육을 유지시키고 GABA 생성을 증진시키는 영향을 미치는 것으로 판단된다(도 17).And the number of viable cell counts of fermented Aronia lactic acid according to the concentration of YE and SM added (FIG. 17). The initial viable cell count of L. platarum EJ2014 added as a starter increased from 2.30 × 10 7 CFU / mL to 1.50 × 10 9 -3.15 × 10 9 CFU / mL on the first day of fermentation. In the YE 1% supplemented group, the highest level was 3.65 × 10 9 CFU / mL until the third day of fermentation. From day 1 or 3 after fermentation, the number of bacteria decreased, and on the 9th day of fermentation, 1.50 × 10 8 -3 .60 × 10 8 CFU / mL. As the fermentation progresses to the 9th day, the viable cell count is maintained above 10 8 CFU / mL because it increases lactic acid fermentation with the addition of CaCO 3 and maintains the growth of bacteria and promotes GABA production (Fig. 17).

(2) TLC를 이용한 GABA 전환율 및 MSG 소진율 비교(2) Comparison of GABA conversion and MSG consumption using TLC

TLC를 이용하여 아로니아 젖산 발효물의 GABA 생성능 및 MSG 소진율을 확인하기 위해 샘플(sample)을 5배 희석하여 실험하였다(도 18). YE 첨가량과 SM 첨가량에 따른 GABA 전환율을 비교한 결과, YE 농도에 따른 GABA 전환율의 차이는 크게 없으며 발효 7일까지 GABA량은 증진되지 않았다. 스킴 밀크(skim milk) 1-5% 첨가군에서 발효 7일째 대부분의 MSG가 GABA로 전환된 것을 확인하였다(도 18a). 이 결과로 보아 스킴 밀크(skim milk)가 아로니아 젖산발효에서 GABA 생성능을 증진시키는 것으로 판단된다. YE 농도를 1%로 하여 스킴 밀크(skim milk)를 0-5% 첨가하고 아로니아 발효를 9일까지 하였을 때 GABA 생성능은 스킴 밀크(skim milk) 0%에서 발효 9일에 MSG가 조금 감소하였지만 약 1% 가량 남아있는 것을 확인하였으며, GABA는 약 1% 정도 생성되었다. YE 1%, SM 5% 첨가군에서 발효 9일에 MSG가 모두 소진되었으며 GABA 함량도 2.5% 이상으로 가장 많이 생성되는 것을 확인하였다(도 18b). A sample was diluted 5-fold to confirm the GABA production ability and MSG dissolution rate of the fermented arnoyl lactic acid using TLC (FIG. 18). As a result of comparing GABA conversion according to YE addition amount and SM addition amount, there was no significant difference in GABA conversion according to YE concentration and GABA amount was not improved until fermentation day 7. On the 7th day of fermentation, most MSGs were converted to GABA in the skim milk 1-5% added group (Fig. 18A). These results suggest that skim milk enhances GABA production in the fermentation of Aronia lactic acid. When 0% of skim milk was added at 1% YE concentration and the fermentation of Aronia was continued until 9 days, the GABA production was slightly decreased at 0% skim milk at 9 days after fermentation And about 1% of GABA was produced, and about 1% of GABA was produced. MSG was completely depleted on the 9th day of fermentation in the YE 1% and SM 5% added groups, and the GABA content was found to be the most produced by more than 2.5% (FIG. 18B).

<< 실시예Example 9>  9> 아로니아Aronia 당절임액에To the sugar pickle 효모 추출물(Yeast extract)  Yeast extract 첨가별By addition , , 스킴Scheme 밀크(Skim milk)  Milk (Skim milk) 첨가별에On an additive star 따른 9일간 젖산균 발효 Lactic acid bacteria fermentation for 9 days

1. 재료 및 방법1. Materials and Methods

7일 동안 자연발효 한 아로니아 당절임액을 핸드믹서기로 균질화 한 후 90℃, 30분 열처리 하였다. 아로니아 젖산 발효물의 배지 조성은 이전과 동일하게 진행하였으며, 다음과 같이 2%(w/w) MSG, 0.5-1%(w/w) Y.E를 첨가하고, 스킴 밀크(skim milk) 0-5%(g)를 첨가하고, 이전 실험과는 다르게 CaCO3를 0.25%(w/w)를 첨가하지 않고 아로니아 당절임액을 10배 희석한 후 실험하였다(표 13). MSG broth에서 L. plantarum EJ2014를 30℃, 1일 간 배양한 스타터(starter)를 1% 접종 후, 30℃에서 9일간 발효하여 아로니아 젖산 발효물을 제조하여 분석하였다.After 7 days, the fermented Aronia fermented liquid was homogenized with a hand mixer and heat treated at 90 ℃ for 30 minutes. The medium composition of the fermented lactic acid lactoferment was the same as before and 2% (w / w) MSG and 0.5-1% (w / w) YE were added as follows, skim milk 0-5 % (g) was added to the solution, and the diluted solution was diluted 10 times without addition of 0.25% (w / w) CaCO 3 . From the MSG broth, L. plantarum EJ2014 was inoculated at 1% in a starter incubated at 30 ℃ for 1 day, and fermented at 30 ℃ for 9 days.

아로니아 당절임액에 Y.E 첨가별, S.M 첨가별에 따른 발효 조성비The composition ratio of fermentation according to the addition of Y.E and S.M in the pickles of Aronia 아로니아
희석배수
Aronia
Dilution factor
아로니아 배지 조성Composition of aronia media
아로니아
당절임액(mL)
Aronia
Capsicum solution (mL)
증류수(mL)Distilled water (mL) MSG1 ) (g)MSG 1 ) (g) Y.E2) (g)YE 2) (g) S.M3) (g)SM 3) (g)
1010 1010 9090 22 0.50.5 00 1One 00 1One 1One 1One 33 1One 55

1) MSG: 모노 소듐 글루타메이트(Mono sodium glutamate) 1) MSG: monosodium glutamate (monosodium glutamate)

2) Y.E: 효모추출물(Yeast extract) 2) YE: Yeast extract

3) S.M: 스킴 밀크(Skim milk) 3) SM: Skim milk

2. 결과 및 고찰2. Results and discussion

(1) pH, 산도 및 생균수 측정(1) pH, acidity and number of living cells

아로니아 당절임액에 Y.E와 MSG 첨가별에 따른 발효 Y0.5, Y1, Y1S1, Y1S3, Y1S5의 pH는 발효 0일째에 Y1S5가 6.25로 가장 높았다. 그 다음은 Y1S3으로 6.15였으며, Y0.5, Y1, YS1은 5.53-5.64로 큰 차이를 보이지 않았다. 이후 발효 1일째에 4.15-4.04로 감소하였으며 발효 9일째까지 3.97-4.17로 모든 조건에서 발효시간에 따른 pH의 변화는 크게 없었다. 아로니아 젖산 발효물의 산도는 발효 0일째에 0.16-0.28%이였으며, 발효 1일째에 0.80-1.75%로 모든 조건에서 증가하였으며, 발효 3일째에 1.28-1.88%로 다소 증가하였으며, Y1S5에서 발효 5일째에 다소 감소한 후 7일째에 다시 증가한 경향을 보였으나, 모든 조건에서 산도는 발효시간이 지남에 따라 증가 한 후 유지되는 경향을 보였다(도 19).The pH of Y0.5, Y1, Y1S1, Y1S3, Y1S5 fermented according to the addition of Y.E and MSG to the pickles of Aronia was highest at 6.25 for Y1S5 on the 0th day of fermentation. Y1S3 was followed by 6.15 and Y0.5, Y1 and YS1 were 5.53-5.64. Thereafter, the pH decreased to 4.15-4.04 on the first day of fermentation and to 3.97-4.17 until the 9th day of fermentation. The acidity of fermented Ahnonia lactic acid was 0.16-0.28% on the 0th day of fermentation and increased to 0.80-1.75% on the 1st day of fermentation, and increased to 1.28-1.88% on the 3rd day of fermentation. (Fig. 19). However, the acidity tended to be maintained after increasing the fermentation time at all conditions (Fig. 19).

L. platarum EJ2014의 초기 생균수는 2.85×107 CFU/mL에서 발효 1일째 1.80×108-4.55×108 CFU/mL로 증가하였다. 발효 3일째까지는 YE 1% 첨가군에서 3.65×109 CFU/mL로 가장 높게 나타났으며, 발효 1일 또는 3일 이후부터 균수가 다소 감소하여 발효 9일째 1.50×108-3.60×108 CFU/mL로 나타났다(도 20). 발효 9일까지 진행되면서 생균수가 108 CFU/mL 이상으로 유지되는 것은 스킴 밀크(skim milk)가 젖산균 발효시에 GABA 생성을 증진시키는 영향을 미치는 것으로 판단된다.The initial viable cell count of L. platarum EJ2014 increased from 2.85 × 10 7 CFU / mL to 1.80 × 10 8 -4.55 × 10 8 CFU / mL on the first day of fermentation. In the YE 1% supplemented group until the third day of fermentation, the highest value was 3.65 × 10 9 CFU / mL. From day 1 or 3 after fermentation, the number of bacteria decreased slightly, and on the 9th day of fermentation, 1.50 × 10 8 -3 .60 × 10 8 CFU / mL (Fig. 20). The maintenance of the viable cell count above 10 8 CFU / mL during the fermentation to 9 days indicates that skim milk enhances GABA production during fermentation with lactic acid bacteria.

(2) TLC 변화(2) TLC change

TLC 변화는 시료 원액을 사용하였으며 5일 발효까지 측정하였다. 또한, 이전 실험과 비교하기 위해 CaCO3 0.25% 첨가하지 않고 실험을 하였다. 스킴 밀크(skim milk)를 첨가한 군이 이전과 동일하게 GABA 함량을 증진시키는데 기여를 하였지만, CaCO3를 첨가하지 않아서 GABA 함량이 이전 실험보다 높게 나타나진 않았다(도 21a).TLC changes were measured using the stock solution until fermentation for 5 days. For comparison with previous experiments, CaCO 3 The experiment was carried out without adding 0.25%. The group supplemented with skim milk contributed to the enhancement of GABA content as before, but the content of GABA was not higher than that of the previous experiment due to the absence of CaCO 3 (FIG. 21A).

이전 TLC와 다른 점은 9일 발효까지 측정한 것이다. 스킴 밀크(skim milk)를 첨가한 군이 이전과 동일하게 GABA 함량을 증진시키는데 기여를 하였지만, CaCO3를 첨가하지 않은 군은 GABA 함량이 약 0.5% 정도만 생성 되었다. 이전 실험에서 CaCO3를 첨가하고, 스킴 밀크(skim milk)를 함께 첨가하였을 경우가 약 2.5% 이상으로 가장 GABA 함량을 증진시켰다. 아로니아 발효 시에는 CaCO3와 스킴 밀크(skim milk)를 함께 첨가하여 발효를 하여야 한다고 생각된다(도 21b).The difference from the previous TLC is the measurement until 9 days fermentation. The group supplemented with skim milk contributed to the enhancement of GABA content as before, but only about 0.5% of GABA was produced in the group without addition of CaCO 3 . In the previous experiment, the addition of CaCO 3 and skim milk increased the GABA content more than about 2.5%. It is considered that CaCO 3 and skim milk should be added together for fermentation during the fermentation of Aronia (FIG. 21B).

<< 실시예Example 10>  10> 아로니아Aronia 당절임액에To the sugar pickle 효모 추출물(Yeast extract)  Yeast extract 첨가별By addition , , 스킴Scheme 밀크(Skim milk) 첨가별에 따른 9일간  9 days according to the addition of skim milk L. plantarumL. plantarum EJ2014 발효 EJ2014 Fermentation

1. 재료 및 방법1. Materials and Methods

7일 동안 자연발효 한 아로니아 당절임액을 핸드믹서기로 균질화 한 후 90℃, 30분 열처리 하였다. 아로니아 젖산 발효물의 배지 조성은 이전과 동일하게 진행 하였으며, 다음과 같이 2%(w/w) MSG, 0.5-1%(w/w) Y.E를 첨가하고, 스킴 밀크(skim milk) 0-1%(g)를 첨가하고, CaCO3를 0.25%(w/w)를 첨가하고, L. plantarum EJ2014를 접종하여 실험을 진행하였다(표 14). 아로니아 당절임액을 10배 희석한 후 실험하였다. MRS broth에서 L. plantarum EJ2014를 30℃, 1일 간 배양한 스타터(starter)를 1% 접종 후, 30℃에서 9일간 발효하여 아로니아 젖산 발효물을 제조하여 분석하였다. After 7 days, the fermented Aronia fermented liquid was homogenized with a hand mixer and heat treated at 90 ℃ for 30 minutes. The culture medium of the fermentation product of Aronia lactic acid was the same as before, and 2% (w / w) MSG and 0.5-1% (w / w) YE were added as follows and skim milk 0-1 The experiment was carried out by adding 0.25% (w / w) of CaCO 3 and adding L. plantarum EJ2014 (Table 14). The diluted solution of Aronia was diluted 10 times and then tested. Fermentations of Lactobacillus acid lactic acid were prepared by fermenting L. plantarum EJ2014 in MRS broth at 30 ℃ for 1 day after 1 day of starter incubated at 30 ℃ for 9 days.

아로니아 당절임액에 Y.E 첨가별, S.M 첨가별에 따른 발효 조성비The composition ratio of fermentation according to the addition of Y.E and S.M in the pickles of Aronia 아로니아
희석배수
Aronia
Dilution factor
아로니아 배지 조성Composition of aronia media
아로니아
당절임액(mL)
Aronia
Capsicum solution (mL)
증류수(mL)Distilled water (mL) MSG1 ) (g)MSG 1 ) (g) Y.E2) (g)YE 2) (g) S.M3) (g)SM 3) (g)
1010 1010 9090 22 0.50.5 00 1One 00 1One 1One

1) MSG: 모노 소듐 글루타메이트(Mono sodium glutamate) 1) MSG: monosodium glutamate (monosodium glutamate)

2) Y.E: 효모추출물(Yeast extract) 2) YE: Yeast extract

3) S.M: 스킴 밀크(Skim milk) 3) SM: Skim milk

2. 결과 및 고찰2. Results and discussion

(1) pH, 산도 및 생균수 측정(1) pH, acidity and number of living cells

아로니아 당절임액에 Y.E 첨가별과 S.M 첨가별에 따른 발효 pH 및 산도 변화는 도 22와 같다. pH는 발효 0일째에 Y0.5가 6.85로 가장 높았다. 그 다음은 Y1으로 6.61였으며, Y1S1은 5.94로 큰 차이를 보이지 않았다. 이후 발효 1일째에 4.59-4.37로 감소하였으며 발효 9일째까지 4.09-4.25로 모든 조건에서 발효시간에 따른 pH의 변화는 0일째에서 1일째 발효 후 크게 감소 한 후 큰 차이가 없었다. 아로니아 젖산 발효물의 산도는 발효 0일째에 0.10-0.20%이였으며, 발효 1일째에 0.15-0.56%로 모든 조건에서 증가하였으며, 발효 3일째에 1.16-1.35%로 다소 증가하였으며, 발효 9일째에 1.25-1.45%로 모든 조건에서 산도는 발효시간이 지남에 따라 증가 한 후 유지되는 경향을 보였다.The changes in fermentation pH and acidity according to the addition of Y.E and S.M to the pickles of Aronia were shown in FIG. The pH of Y0.5 was the highest at 6.85 on the 0th day of fermentation. Next, Y1 was 6.61 and Y1S1 was 5.94. After the fermentation, the pH was decreased from 4.59 to 4.37 on the 1st day of fermentation and 4.09-4.25 until 9th day of fermentation. The acidity of fermented Ahnonia lactic acid was 0.10-0.20% on the 0th day of fermentation and 0.15-0.56% on the 1st day of fermentation. The acidity was increased to 1.16-1.35% on the 3rd day of fermentation, 1.25-1.45%, the acidity tended to be maintained after increasing the fermentation time at all conditions.

L. platarum EJ2014의 초기 생균수는 1.38×107 CFU/mL에서 발효 1일째 3.50×108-4.55×108 CFU/mL로 증가하였다. 발효 3일째까지는 Y1S1 첨가군에서 8.75×109 CFU/mL로 가장 높게 나타났으며, 발효 1일 또는 3일 이후부터 균수가 다소 감소하여 발효 9일째 2.20×108-4.35×108 CFU/mL로 나타났다. 발효 9일까지 진행되면서 생균수가 108 CFU/mL 이상으로 유지되는 것은 스킴 밀크(skim milk)가 젖산균 발효시에 젖산균의 생존을 유지시키며 GABA 생성을 증진시키는 영향을 미치는 것으로 판단된다(도 23).The initial viable cell count of L. platarum EJ2014 increased from 1.38 × 10 7 CFU / mL to 3.50 × 10 8 -4.55 × 10 8 CFU / mL on the first day of fermentation. In the Y1S1 supplemented group, the highest level was 8.75 × 10 9 CFU / mL until the third day of fermentation. After 1 or 3 days of fermentation, the number of bacteria decreased slightly, and on the 9th day of fermentation, 2.20 × 10 8 -4.35 × 10 8 CFU / mL Respectively. It is considered that skim milk maintains the survival of lactic acid bacteria and promotes GABA production when skim milk is fermented (FIG. 23), since the viable cell count is maintained above 10 8 CFU / .

(2) TLC 변화(2) TLC change

Y.E 첨가별과 S.M 첨가별에 따른 MSG 및 GABA 함량 변화는 도 24와 같다. 시료를 5배 희석하여 사용하였으며 9일 발효까지 측정하였다. Y.E 0.5% 보다는 9일 발효 시 Y.E 1%가 GABA 함량이 더 높았으며, 스킴 밀크(skim milk)를 첨가한 군이 이전과 동일하게 GABA 함량을 증진시키는데 기여를 하였다. L. platarum EJ2014는 GABA 함량이 약 2.5%를 나타냈으며, MSG 잔존율도 Y1S1에서 약 0.1%로 크게 감소하는 것을 알 수 있었다. L. platarum EJ2014을 이용한 GABA 함량을 증진시키는 데에도 Y.E 1%와 MSG 2%, CaCO3 0.25%가 기여를 한다고 사료된다.The changes of MSG and GABA contents according to YE addition and SM addition were as shown in FIG. The samples were diluted 5 times and used until 9 days of fermentation. YE 1% showed higher GABA content on 9 days fermentation than YE 0.5%, and skim milk supplementation contributed to the increase of GABA content as before. L. platarum EJ2014 showed a GABA content of about 2.5%, and MSG remained significantly decreased to about 0.1% in Y1S1. 1%, MSG 2% and CaCO 3 0.25% contribute to the enhancement of GABA content by L. platarum EJ2014.

<< 실시예Example 11>  11> 아로니아Aronia 당절임액과The amount of pickled sugar 젖산 발효액의 혼합 음료 시제품 Mixed beverage prototype of lactic acid fermentation broth

젖산발효 후에 GABA 물질이 강화된 아로니아 젖산 발효액의 색상은 산도 상승과 9일 발효 하여 시간이 지남에 따라 퇴색되는 경향을 보였다. 따라서, 아로니아 젖산 발효액에 아로니아 당절임액을 일정 비율로 혼합한 후 최종 아로니아 발효액의 시제품을 완성하였다(표 15). 아로니아 당절임액을 20, 25%의 수준으로 첨가하였을 때 자색의 아로니아 색상을 얻을 수 있었다. 도 25는 아로니아 젖산 발효액을 단계적으로 혼합한 후 최종 제품의 성상을 나타내고 있다. 따라서 아로니아 열매를 이용하여 유용 젖산균의 발효조건을 최적화함으로써 발효가 안 되는 아로니아를 당절임과 9일 동안 젖산 발효를 통해 GABA가 다량 함유되고 probiotic 젖산균이 발효시킨 젖산균 아로니아 제품을 완성하였다. After fermentation with lactic acid, the color of fermented Ahnonia lactic acid with enhanced GABA substance tended to fade over time due to acidity and fermentation for 9 days. Therefore, the crude fermented broth of Aronia lactic acid was mixed with a certain ratio of Aronia's fermented broth (Table 15). When the solution of Aronia was added at the level of 20% and 25%, purple Aronia color could be obtained. 25 shows the properties of the final product after stepwise mixing of the fermentation broth of Aronia lactic acid. Therefore, by optimizing the fermentation conditions of the useful lactic acid bacteria by using the Aronia fruit, the fermentation of the fermented lactobacillus product was completed by fermentation of lactobacillus containing a large amount of GABA and lactose fermentation for 9 days.

이는 기존의 아로니아 열매를 섭취할 시, 폴리페놀 성분이 강하여 쓴맛과 신맛이 강한 원물을 섭취하기가 힘들었으나, 발효를 통하여 쓴맛을 감소시키고 기능성 물질인 GABA 성분을 강화하며, 당절임액으로 사용된 프락토 올리고당을 최종 제품에 첨가함으로써, 기호도와 영양 및 기능적인 면에서 우수한 발효제품으로 사료된다. 또한, 천연감미료인 스테비오 사이드를 사용하여 저감미료 용량으로 단맛을 부여하고 잔탄 검(Xanthan gum)을 첨가함으로써 점도를 조절하여 식감을 증진시켰다. It was difficult to consume raw bitterness and sour taste of raw materials when they were consumed with conventional polyphenols. However, fermentation decreased bitter taste, strengthened functional GABA ingredient, and was used as a sugar pickling solution. By adding the fructo-oligosaccharide to the final product, it is considered to be a fermented product excellent in taste, nutrition and function. In addition, sweetness was imparted with low sweetener capacity using stevioside, which is a natural sweetener, and viscosity was controlled by adding xanthan gum to improve texture.

1. One. 아로니아Aronia 젖산  Lactic acid 발효물과Fermented water 설탕  Sugar 당절임액에To the sugar pickle 따른 배합 시 pH, 산도( PH, acidity ( %% ), 당도, 색도 변화), Sugar content, color change

9일간 발효한 젖산 발효물의 색도가 L 값이 커지면서 a와 b 값이 감소하여 밝은 색을 보이는 것을 알 수 있었다. 이로 인하여 아로니아 고유의 색이 나도록 아로니아 당절임액 20%를 첨가하였을 시에 아로니아 원물의 고유한 색을 나타냈으며, 다른 40-100%와 큰 차이를 보이지 않았다. 당도의 경우는 젖산 발효물이 9.57로 가장 낮았으며, 당절임액을 20% 첨가한 군에서 25.77로 나타났다. pH와 산도는 당절임액일 경우 가장 낮았으며 젖산 발효물을 첨가할수록 pH가 증가하였고 산도는 높아졌다(도 25, 표 15). 이로써 당절임액의 양을 최소화로 넣으면서 색을 부여할 수 있었고 당도도 높지 않아 건강 기능성 발효음료로는 20%의 배합비율이 좋다고 판단된다.The L value of lactic acid fermented fermented for 9 days showed that the color values of a and b decreased and the color was bright. Therefore, the color of Aronia was intrinsic to the original color of Aronia when added with 20% of Aronia 's pickles, and there was no significant difference from the other 40-100%. The lactic acid fermented product showed the lowest value of 9.57 in the case of sugar content and 25.77 in the case of the 20% added sugar cane solution. The pH and acidity were the lowest in the case of the sugar pickles and the pH was increased and the acidity was increased as the lactic acid fermented product was added (FIG. 25 and Table 15). As a result, it was possible to impart color while minimizing the amount of sugar pickling solution, and the sugar content was not high, and it was judged that the compounding ratio of 20% as a functional functional fermented beverage was good.

아로니아 설탕 당절임액과 젖산 발효물에 따른 배합 시 pH, 산도(%), 당도, 색도PH, acidity (%), sugar content, coloration in combination with ascorbic acid and fermented lactic acid 1One 22 33 44 55 66 당절임액Sugar pickle 100100 8080 6060 4040 2020 00 젖산 발효물Lactic acid fermentation product 00 2020 4040 6060 8080 100100 pHpH 3.583.58 3.83.8 3.943.94 4.014.01 4.064.06 4.14.1 산도 (%)Acidity (%) 0.770.77 0.860.86 1.111.11 1.21.2 1.391.39 1.721.72 당도(°Brix)Brix (° Brix) 58.8358.83 52.4752.47 41.9041.90 35.0035.00 25.7725.77 9.579.57 LL 16.7616.76 17.0717.07 16.3716.37 16.7816.78 17.3917.39 25.8025.80 색도Chromaticity aa 2.032.03 2.502.50 3.273.27 4.234.23 5.565.56 2.852.85 bb 0.660.66 0.620.62 0.750.75 0.890.89 0.930.93 1.321.32

2. 2. 아로니아Aronia 젖산  Lactic acid 발효물과Fermented water 프락토올리고당Fructooligosaccharide 당절임액에To the sugar pickle 따른 배합 시 pH, 산도(%), 당도, 색도 변화 PH, acidity (%), sugar content, chromaticity change

설탕 당절임액보다 프락토올리고당으로 당절임하여 추출 혼합한 시제품이 설탕 당절임 한 시료들 보다 당도가 낮으며, 색도도 a 값이 크게 나타나 색의 부여를 더욱 증진시켰다(도 26, 표 16). 또한, 당을 낮춰줌으로써 건강 기능성 식품에 더욱 더 적합하다고 판단된다.The sugar content of the protozygous product extracted and mixed with fructo-oligosaccharide was lower than that of the sugar-pickled sugar, and the a degree of coloration was higher than that of the sugar-picked samples, thereby further enhancing the application of color (FIG. 26 and Table 16) . It is also considered to be more suitable for health functional food by lowering sugar.

아로니아 프락토올리고당 당절임액과 젖산 발효물에 따른 배합 시 pH, 산도(%), 당도, 색도 변화Aroniofructo oligosaccharide pH, acidity (%), sugar content, and color change in combination with fermented milk and fermented lactic acid 1One 22 33 44 당절임액Sugar pickle 100100 5050 25 / 물 : 2525 / water: 25 100100 젖산 발효물Lactic acid fermentation product 00 5050 5050 00 pHpH 3.613.61 4.084.08 4.144.14 4.14.1 산도Acidity 0.550.55 0.050.05 0.010.01 1.721.72 당도(°Brix)Brix (° Brix) 43.843.8 2727 15.615.6 9.479.47 LL 17.8217.82 17.9317.93 17.8217.82 20.7520.75 색도Chromaticity aa 4.644.64 5.115.11 4.174.17 2.042.04 bb 1.281.28 1.521.52 1.371.37 2.172.17

3. 3. 아로니아Aronia 젖산  Lactic acid 발효물과Fermented water 프락토올리고당Fructooligosaccharide 당절임액Sugar pickle , 잔탄 검(, Xanthan gum ( xanthanxanthan gum), 스테비오 사이드에 따른 배합 시 pH, 산도( gum), pH during formulation with stevioside, acidity ( %% ), 당도, 색도 변화 ), Sugar content, color change

9일 동안 발효시킨 아로니아 젖산 발효물과 프락토올리고당 당절임액(아로니아:프락토올리고당=1:3 비율), 물, 잔탄 검(xanthan gum), 스테비오 사이드를 첨가한 배합비의 pH, 산도(%), 당도의 결과이다(표 17). 아로니아 발효음료의 pH는 4.18-4.35로 큰 차이를 보이지 않았으며, 산도(%) 또한 0.55-0.77%로 큰 차이를 보이지 않았다. 이 중 스테비오 사이드를 2% 첨가한 군에서 산도가 0.55%로 가장 낮게 나타났다. 당도의 경우 잔탄 검(xanthan gum)을 0.25g 첨가한 군에서 17.4 °Brix로 나타났으며 잔탄 검(xanthan gum)을 0.5g으로 더 첨가 한 군에서 당도가 더 낮게 16.8 °Brix로 나타났다. 또한, 잔탄 검(xanthan gum)을 0.25g 첨가한 후 스테비오 사이드를 1g 첨가 하였을 시 18.1°Brix로 천연감미료를 첨가하지 않은군에 비하여 약 2°Brix 정도가 증가하였으며 스테비오 사이드를 2g 첨가하였을 시에는 20.3°Brix로 나타났다.PH, and pH of a mixture of fermented arnoyl lactic acid fermented for 9 days with fructooligosaccharide fermented milk (aronia: fructooligosaccharide = 1: 3 ratio), water, xanthan gum and stevioside (%) And sugar content (Table 17). The pH of the fermented beverage of Aronia was 4.18-4.35 and there was no significant difference in pH (0.55-0.77%). Among these, the acidity was lowest at 0.55% in the group containing 2% stevioside. Brix of 17.4 ° Brix was observed in the case of adding 0.25g of xanthan gum and 16.8 ° Brix in the case of adding 0.5g of xanthan gum. When 1 g of stevioside was added after adding 0.25 g of xanthan gum, it was increased to about 2 ° Brix by 18.1 ° Brix compared to the case without natural sweetener. When 2 g of stevioside was added 20.3 ° Brix.

아로니아 프락토올리고당 당절임액과 젖산 발효물, 잔탄 검(xanthan gum), 스테비오 사이드 첨가량에 따른 pH, 산도(%), 당도 변화Aronia fructooligosaccharide Fermented milk of fermented lactic acid, pH, acidity (%), sugar content according to xanthan gum, stevioside addition 1One 22 33 44 당절임액Sugar pickle 2525 2525 2525 2525 젖산 발효물Lactic acid fermentation product 5050 5050 5050 5050 water 2525 2525 2525 2525 Xanthan gum
(g)
Xanthan gum
(g)
0.250.25 0.50.5 0.250.25 0.250.25
스테비오사이드 (g)Stevioside (g) 1)- 1) - -- 1One 22 pHpH 4.184.18 4.304.30 4.304.30 4.354.35 산도Acidity 0.750.75 0.770.77 0.770.77 0.550.55 당도Sugar content 17.417.4 16.816.8 18.118.1 20.320.3

1)-: 검출되지 않음. 1) -: Not detected.

4. 잔탄 검( xanthan gum), 카라기난 검( carrageenan gum) 첨가량에 따른 점조도 변화 4. The consistency changes in xanthan gum (xanthan gum), carrageenan gum (carrageenan gum) amount

또한, 검류를 첨가함으로써 점조도를 증가시켜 맛의 풍미와 기호성을 증진 시킬 수 있다고 생각된다. 잔탄 검(Xanthan gum)의 경우 0.25%를 첨가하였을 시 Consistency index (Pa·n)가 6.59로 크게 증가하였으며 0.5%일 때에서 유지하는 모습이였다. 하지만 카라기난 검(carrageenan gum)의 경우에는 크게 증가하지 않은 모습을 보였다(도 27). 이로써 아로니아 발효물을 이용할 시에는 잔탄 검(xanthan gum)을 사용할 시에 점조도 값을 증진시켜 기호성을 증가시킬 수 있다고 생각된다. It is also believed that by adding gums, the viscosity can be increased to enhance the taste and palatability of the taste. In the case of xanthan gum, the consistency index (Pa · n ) increased significantly to 6.59 when 0.25% was added and maintained at 0.5%. However, carrageenan gum did not show a significant increase (Fig. 27). This suggests that the use of xanthan gum can increase the value of viscosities and increase the palatability when using the fermented product of Aronia.

한국미생물보존센터(국외)Korea Microorganism Conservation Center (overseas) KCCM11545PKCCM11545P 2014060920140609

Claims (7)

(1) 아로니아와 당을 혼합하여 아로니아 당절임액을 제조하는 단계;
(2) 상기 아로니아 당절임액을 희석하는 단계;
(3) 상기 아로니아 당절임 희석액 전체 100 중량부에 대해 모노소듐 글루타메이트(mono sodium glutamate; MSG) 1 내지 5 중량부, 효모 추출물(yeast extract) 0.1 내지 1 중량부, 스킴 밀크(skim milk) 0.5 내지 5 중량부 및 CaCO3 0.1 내지 0.5 중량부를 첨가하여 혼합하는 단계;
(4) 상기 혼합물에 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014 (KCCM11545P) 균주 스타터(starter)를 접종하고 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 감마-아미노뷰티르산(gamma-aminobutyric acid; GABA)이 증진된 아로니아 젖산 발효물 제조방법.
(1) preparing an ascorbic acid solution by mixing the atorvastatin and the saccharide;
(2) diluting the ascorbic acid solution;
(3) 1 to 5 parts by weight of monosodium glutamate (MSG), 0.1 to 1 part by weight of yeast extract, 0.5 part by weight of skim milk, 0.5 to 1 part by weight of yeast extract per 100 parts by weight of the above- To 5 parts by weight of CaCO 3 and 0.1 to 0.5 parts by weight of CaCO 3 ;
(4) gamma-aminobutyric acid (GABA), which comprises fermenting the mixture by inoculating and culturing Lactobacillus plantarum EJ2014 (KCCM11545P) strain starter, Wherein the fermented product is fermented.
제1항에 있어서, 상기 아로니아 당절임액을 제조하는 단계는 아로니아 및 당을 1:1-4의 중량비로 혼합하여, 1일 내지 6달 동안 실온에서 당절임하는 것을 특징으로 하는 아로니아 젖산 발효물 제조방법.The method according to claim 1, wherein the step of preparing the ascorbic acid solution comprises mixing Aronia and a saccharide at a weight ratio of 1: 1-4, and pickling at room temperature for 1 to 6 months. A method for producing fermented lactic acid. 제1항에 있어서, 상기 (2) 단계는 아로니아 당절임액을 물로 중량 대비 1 내지 10배 희석하는 것을 특징으로 하는 아로니아 젖산 발효물 제조방법. [Claim 2] The method according to claim 1, wherein the step (2) comprises diluting the ascorbic acid solution with water by 1 to 10 times by weight. 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 (4) 단계의 발효는 25 내지 30℃에서, 1 내지 9일 동안 발효하는 것을 특징으로 하는 아로니아 젖산 발효물 제조방법.The method according to claim 1, wherein the fermentation in step (4) is performed at 25 to 30 ° C for 1 to 9 days. (1) 아로니아와 당을 혼합하여 아로니아 당절임액을 제조하는 단계;
(2) 상기 아로니아 당절임액을 희석하는 단계;
(3) 상기 아로니아 당절임 희석액 전체 100 중량부에 대해 모노소듐 글루타메이트(mono sodium glutamate; MSG) 1 내지 5 중량부, 효모 추출물(yeast extract) 0.1 내지 1 중량부, 스킴 밀크(skim milk) 0.5 내지 5 중량부 및 CaCO3 0.1 내지 0.5 중량부를 첨가하여 혼합하는 단계;
(4) 상기 혼합물에 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) EJ2014 (KCCM11545P) 균주 스타터(starter)를 접종하고 배양하여 발효시켜 GABA가 증진된 아로니아 젖산 발효물을 제조하는 단계; 및
(5) 아로니아 음료 전체 100중량부에 대해 상기 (1) 단계에서 제조된 아로니아 당절임액 10 내지 30 중량부, 상기 (4) 단계에서 제조된 아로니아 젖산 발효물 40 내지 60 중량부, 물 10 내지 30 중량부, 잔탄검 0.1 내지 1 중량부 및 스테비오사이드 0.1 내지 3 중량부를 혼합하는 단계를 포함하는 아로니아 발효음료 제조방법.
(1) preparing an ascorbic acid solution by mixing the atorvastatin and the saccharide;
(2) diluting the ascorbic acid solution;
(3) 1 to 5 parts by weight of monosodium glutamate (MSG), 0.1 to 1 part by weight of yeast extract, 0.5 part by weight of skim milk, 0.5 to 1 part by weight of yeast extract per 100 parts by weight of the above- To 5 parts by weight of CaCO 3 and 0.1 to 0.5 parts by weight of CaCO 3 ;
(4) preparing Lactobacillus plantarum EJ2014 (KCCM11545P) strain starter inoculated with the mixture, fermenting the Lactobacillus plantarum strain to cultivate fermented Lactobacillus acid lactis enhanced with GABA; And
(5) 10 to 30 parts by weight of the ascorbate fermented solution prepared in the step (1), about 40 to 60 parts by weight of the fermentation product of the arnoyl lactate prepared in the step (4) 10 to 30 parts by weight of water, 0.1 to 1 part by weight of xanthan gum and 0.1 to 3 parts by weight of stevioside.
삭제delete
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