KR101776439B1 - Methods for Screening Antimicrobial Agents against Geobacillus toebii - Google Patents

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KR101776439B1
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Abstract

본 발명은 공조장치 내 악취를 유발하는 미생물을 제어할 수 있는 항균제의 스크리닝 방법 및 공조장치 내 악취를 제거하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 공조장치 내 악취 유발 미생물은 신규 항균제 개발 또는 상기 미생물의 대사산물의 화학적 성질을 규명하여 악취를 차단하기 위한 방향제의 개발에 이용될 수 있다. 또한, 공조장치에서 상기 미생물이 서식할 수 없는 환경을 미리 조성하여 근본적으로 악취의 원인을 제거하기 위한 용도로 이용될 수 있는 등 다양한 산업상 유용성을 갖는다.TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method of screening an antimicrobial agent capable of controlling microorganisms causing odor in an air conditioner, and a method of removing odor in an air conditioner. The odor-inducing microorganisms in the air conditioning system of the present invention can be used for the development of a novel antimicrobial agent or the development of a fragrance for blocking the odor by identifying the chemical properties of the metabolites of the microorganism. Further, the present invention has various industrial advantages such as being capable of being used in an air conditioner to preliminarily prepare an environment in which the microorganism can not be inhabited and to fundamentally remove the cause of the odor.

Description

항-지오바실러스 퇴비 항균제 스크리닝 방법 {Methods for Screening Antimicrobial Agents against Geobacillus toebii}Methods for Screening Antimicrobial Agents against Geobacillus toebii

본 발명은 공조장치 내 악취를 유발하는 미생물을 제어할 수 있는 항균제의 스크리닝 방법 및 공조장치 내 악취를 제거하는 방법에 관한 것이다.
TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method of screening an antimicrobial agent capable of controlling microorganisms causing odor in an air conditioner, and a method of removing odor in an air conditioner.

깨끗한 공기는 인간의 건강과 웰빙에 기본으로 인식되고 있으며, 불쾌한 냄새를 유발하거나 오염된 공기는 쾌적한 환경을 방해하는 주된 요소로 작용한다. 예를 들면, 밀폐된 조건에서 불만족스러운 실내 공기질은 다음의 두 가지 중요한 요인에 의해서 야기된다. 하나는 밀폐된 환경을 구성하는 구성 물질 자체(건물 또는 차량)으로부터 직접 발생되는 실내공기오염물질과, 다른 한 요인은 인간 활동에 의해 발생되거나 외부로부터 유입된 물질이 원인이 되어 발생된 냄새이다.Clean air is recognized as the basis for human health and well-being, and unpleasant odors or contaminated air act as a major factor impeding a pleasant environment. For example, unsatisfactory indoor air quality in enclosed conditions is caused by two important factors: One is the indoor air pollutant generated directly from the constituent material itself (building or vehicle) constituting the enclosed environment, and the other factor is the smell generated by the material generated by human activity or from the outside.

공조 시스템은 건물, 차량, 철도, 선박, 항공기 등에 있어 공기의 온도, 습도, 기류 및 청정도를 조화시키는 공기 조화에 목적을 두어 실내의 온도를 낮추고 실내 환경을 최적화시키는 시스템이다. 이러한 공조 시스템은 생활수준의 향상으로 인해 보급률이 점점 증가하고 있다. 공조 시스템의 보급률의 증가로 기본적인 기능은 많은 발전이 있어왔으나, 실내 공기의 질을 위한 환경적 측면으로는 아직 해결해야 할 문제가 많이 남아있다.Air conditioning system is a system that optimizes the indoor environment by lowering indoor temperature by aiming to harmonize air temperature, humidity, air flow and cleanliness in buildings, vehicles, railways, ships, and aircraft. These air conditioning systems are increasing in penetration rate due to the improvement of living standards. There have been many improvements in the basic functions due to the increase of the air conditioning system, but there are still many problems to solve due to the environmental aspect for the indoor air quality.

공조 시스템 중에 특히, 에어컨 냄새의 원인은 곰팡이와 세균의 대사 물질에 기한 것으로 알려져 있으나, 해당 곰팡이와 세균의 종류 및 상기 미생물들이 구체적으로 어떠한 대사 물질을 얼마나 분비하는지에 대한 구체적인 자료는 아직까지 밝혀지지 않은 상태에 있다.In air conditioning systems, air-conditioner odor is known to be attributed to fungi and the metabolites of bacteria, but specific data on the types of fungi and bacteria and how the microorganisms specifically secrete certain metabolites have yet to be found It is in a state that it is not.

공조 장치의 구조상, 블로워를 통과한 모든 공기는 에바코어를 통과하게 되는데, 차가운 냉매와 공기의 열교환 시, 에바코어 표면에는 온도차에 따른 응축수 응결 현상이 발생되고, 이 응축수 응결이 지속되면 에바코어 표면에는 곰팡이 및 세균이 서식, 번식하기 좋은 환경이 제공된다. 외부 공기에 노출된 에바코어에 곰팡이 및 세균이 증식한 상태에서, 에바코아 표면에 증식한 세균의 대사 물질로 미생물의 휘발성유기화합물(mVOCs)이 발생하며, 에바코어를 통과한 공기가 실내로 송풍되면, 이때 미생물에 의해 발생한 휘발성유기화합물에 의해서, 장기간 사용시에 실내는 곰팡이 및 세균에 의한 악취에 노출될 수 있다. In the structure of the air conditioner, all the air passing through the blower passes through the evaporator core. When heat exchange is performed between the cold refrigerant and the air, condensation condensation occurs depending on the temperature difference on the evaporator core surface. Is provided with a good environment for fungi and bacteria to form and propagate. When fungi and bacteria are proliferated on the EVA core exposed to the outside air, volatile organic compounds (mVOCs) of the microorganisms are generated as the metabolites of the bacteria that have proliferated on the surface of the EVA core, and air passing through the EVA core is blown into the room The volatile organic compounds generated by the microorganisms may expose the room to odors caused by fungi and bacteria during long-term use.

악취가 발생하는 에바코어 표면은 장기간의 사용에 따라 바이오 필름으로 덮여 있고, 이들은 박테리아, 셀클러스터, EPS로 구성되는데, EPS는 단백질(Protein), 폴리사카라이드, 폴리우론산(Polyuronic acid), 핵산(Nucletic), 지질(Lipid) 등의 다양한 성분을 포함하는 바, 에바코어 표면에서는 다양한 세균, 곰팡이가 바이오 필름을 양분 삼아 증식하며 대사물질로 미생물에 의한 유기화합물(mVOCs)를 배출하게 되며 이것이 에어컨 악취의 여러 요인 중에 부패취로 알려져 있다.The EVA core surface, which generates bad odors, is covered with biofilm according to long-term use. They are composed of bacteria, cell clusters and EPS. EPS is composed of protein, polysaccharide, polyuronic acid, Nucletic, and Lipid. On the surface of EVA core, various bacteria and fungi multiply as biofilm, and organic compounds (mVOCs) by microorganisms are emitted as metabolites. Many factors of odor are known as corruption.

상기 악취를 제거하기 위하여 다양한 종류의 방향제들이 시판되고 있으나, 이는 상기 에바코어에 서식하는 곰팡이 및 세균을 근본적으로 제거하지 못하고 단지 일시적으로 불쾌한 냄새를 희석하는 역할에 지나지 않는 경우가 많으며, 현재 시판 중인 항균제들 역시도 에바코어에 서식하는 특정 곰팡이 또는 세균에 특이적으로 작용하도록 개발된 사례는 전무한 실정이며, 단지 통상적인 병원균에 대한 항균력이 있다는 이유로 판매되고 있는 상황이다.Various types of fragrances are commercially available to remove the odor. However, it is often the case that the fungi and germs living in the EVA core can not be fundamentally removed, but merely temporarily serve to dilute an unpleasant smell. Antimicrobial agents have not yet been developed to act specifically on certain fungi or bacteria in the eva core, and are sold only because of the antimicrobial activity against common pathogens.

따라서, 상기 에바코어에 서식하는 곰팡이 및 세균의 종류에 대한 명확한 규명과 이의 번식을 특이적으로 차단 또는 예방함으로써 쾌적한 실내 공기 환경 조성이 가능한 항균제 및 이를 이용하여 불쾌한 냄새를 제거할 수 있는 기술의 개발이 절실한 상황이다. Accordingly, the present invention provides an antimicrobial agent capable of forming a pleasant indoor air environment by specifically isolating and preventing the fungi and bacteria of the eva core from being specifically blocked or preventing the propagation thereof, and a technique capable of removing unpleasant odors using the antimicrobial agent This is an urgent situation.

상기한 배경기술로서 설명된 사항들은 본 발명의 배경에 대한 이해 증진을 위한 것일 뿐, 이 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 이미 알려진 종래기술에 해당함을 인정하는 것으로 받아들여져서는 안 될 것이다.
It should be understood that the foregoing description of the background art is merely for the purpose of promoting an understanding of the background of the present invention and is not to be construed as adhering to the prior art already known to those skilled in the art.

본 발명자들은 공조장치 내에 서식하며 악취를 유발하는 미생물을 규명하고 이들을 효과적으로 제어할 수 있는 방법을 찾고자 노력하였다. 그 결과, 상기 공조장치 내에서 바이오필름을 형성하고 생육하는 악취 미생물 6종을 분리하는데 성공하고 이들을 제어할 경우 공조장치에서 유발되는 악취를 유의적으로 차단할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
The present inventors have sought to identify microorganisms that live in an air conditioner and cause odor and to find a way to effectively control them. As a result, the present inventors completed the present invention by confirming that it is possible to successfully isolate six kinds of malodorous microorganisms forming a biofilm in the air conditioner, and to control the odor microbes effectively, thereby preventing the odor caused by the air conditioner.

따라서, 본 발명의 목적은 공조장치 내 악취를 유발하는 미생물인 지오바실러스 퇴비( Geobacillus toebii ) 에 대한 항균제 스크리닝 방법을 제공하는 데 있다.Therefore, it is an object of the present invention to provide a microbial microorganism which is odor- to provide a screening method for the antimicrobial toebii).

본 발명의 다른 목적은 공조장치 내 악취 유발 미생물을 제공하는데 있다.Another object of the present invention is to provide a malodor generating microorganism in an air conditioner.

본 발명의 또 다른 목적은 항균제를 공조장치 내에 도포 또는 분사하는 단계를 포함하는 공조장치 내 악취 유발 미생물의 생육 억제 방법을 제공하는데 있다.Another object of the present invention is to provide a method for inhibiting the growth of a malodor-inducing microorganism in an air conditioner, which comprises the step of applying or spraying an antibacterial agent in the air conditioner.

본 발명의 또 다른 목적은 공조장치로부터 악취 유발 미생물을 분리 또는 사멸시키는 단계를 포함하는 공조장치 내 악취 제거 방법을 제공하는데 있다.It is still another object of the present invention to provide a method of removing odor in an air conditioner, which comprises separating or killing odor-inducing microorganisms from the air conditioning apparatus.

본 발명의 또 다른 목적은 공조장치 내에서 악취 유발 미생물의 생육을 억제시키는 단계를 포함하는 공조장치 내 악취 제거 방법을 제공하는데 있다.
It is still another object of the present invention to provide a method for removing odor in an air conditioner, which comprises suppressing the growth of odor-inducing microorganisms in the air conditioner.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
Other objects and advantages of the present invention will become more apparent from the following detailed description of the invention, claims and drawings.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 다음의 단계를 포함하는 공조장치 내 악취를 유발하는 미생물에 대한 항균제 스크리닝 방법을 제공한다:According to one aspect of the present invention, the present invention provides a method for screening an antimicrobial agent for a microorganism that causes an odor in an air conditioner comprising the steps of:

(a)상기 지오바실러스 퇴비(Geobacillus toebii) 또는 이의 배양물을 준비하는 단계; (a) preparing said Geobacillus toebii or a culture thereof;

(b)상기 지오바실러스 퇴비 또는 이의 배양물에 시료를 접촉시키는 단계;(b) contacting the sample to the Geobacillus compost or culture thereof;

(c)상기 지오바실러스 퇴비 의 생육 억제를 측정하는 단계; 및 (c) the geometry Bacillus Measuring inhibition of growth of compost ; And

(d)상기 지오바실러스 퇴비 의 생육이 억제되었을 때, 상기 시료가 상기 지오바실러스 퇴비 가 발생시키는 공조장치 내 악취를 저감 시키는 항균활성을 갖는 것으로 판별하는 단계.
(d) the geo Bacillus When the growth of the compost is inhibited, it said sample is a geo Bacillus Determining that the compost has an antibacterial activity that reduces the odor in the air conditioner in which the compost is generated.

본 발명자들은 공조장치 내에 서식하며 악취를 유발하는 미생물을 규명하고 이들을 효과적으로 제어할 수 있는 방법을 찾고자 노력하였다. 그 결과, 상기 공조장치 내에서 바이오필름을 형성하고 생육하는 악취 미생물 6종을 분리하는데 성공하고 이들을 제어할 경우 공조장치에서 유발되는 악취를 유의적으로 차단할 수 있음을 확인하였다.
The present inventors have sought to identify microorganisms that live in an air conditioner and cause odor and to find a way to effectively control them. As a result, it was confirmed that the six kinds of odor microorganisms forming the biofilm in the air conditioner were successfully separated and the odor caused by the air conditioner could be significantly blocked when they were controlled.

본 명세서에서, 용어 "공조장치"라 함은 외부 환경으로부터 일부 또는 전부가 분리된 공간에서 온도, 습도, 공기의 청정도, 흐름 등을 쾌적하게 유지하는 시스템을 총칭하는 의미로 사용된다. 상기 분리된 공간의 바람직한 예로는 건물 내부 또는 차량, 철도, 선박, 항공기 등의 내부와 같이 외부로부터 부분적 또는 전체적으로 분리된 내부의 공간이 될 수 있다. 상기 공조장치의 바람직한 예로는 에어컨을 들 수 있다.In the present specification, the term "air conditioner" is generally used to mean a system for comfortably maintaining temperature, humidity, cleanliness and flow of air in a space partially or entirely separated from the external environment. Preferable examples of the separated space may be an internal space partially or totally separated from the outside such as inside of a building or inside of a vehicle, a railroad, a ship, an aircraft, and the like. A preferable example of the air conditioner is an air conditioner.

공조장치는 그 구조상 블로워를 통과한 모든 공기가 에바코어를 통과하게 되며, 상기 에바코어 표면에는 온도차에 따른 응축수 응결 현상이 지속되어 미생물이 생육하기 좋은 환경이 되어, 장기간의 시간이 지날 경우 바이오 필름(biofilm)이 형성된다. 이때, 미생물들은 공기 중에 존재하는 실내 및 실외의 다양한 물질들을 영양분으로 대사하며, 대사결과 발생된 휘발성유기화합물(mVOCs)에 의해 악취가 발생되게 된다. In the air conditioner, all the air passing through the blower is passed through the evaporator core, and the condensation condensation phenomenon according to the temperature difference is continued on the surface of the evaporator core so that the environment becomes good for the growth of the microorganisms. (biofilm) is formed. At this time, the microorganisms metabolize various substances in the air, which are indoor and outdoor, as nutrients, and the odor is generated by the volatile organic compounds (mVOCs) generated as a result of metabolism.

바이오 필름은 미생물들이 군집되어 살아가는 군집형태로서, 하나의 막으로 둘러싸인 층의 구조이며, 상기 막은 미생물을 외부 환경으로부터 보호하고 영양분을 공급하는 역할을 한다. 막을 구성하는 성분으로 EPS(exopolymeric substances)가 있으며, 이는 단백질, 폴리사카라이드, 폴리우론산, 핵산, 지질 등의 다양한 성분을 포함하는 바, 에바코어 표면에서는 다양한 미생물이 이를 양분 삼아 증식하며 대사물질로 악취를 배출하게 된다.Biofilm is a type of community surrounded by microorganisms, which is surrounded by a single membrane. The membrane protects microorganisms from external environment and supplies nutrients. Exopolymeric substances (EPS) are included in the membrane, and they contain various components such as proteins, polysaccharides, polyuronic acids, nucleic acids and lipids. On the surface of EVA cores, various microorganisms proliferate as their nutrients, So that the odor is discharged.

본 발명자들은 상기 에바코어로부터 악취를 유발하는 미생물을 분리하였으며, 이들을 배양한 결과 콜로니를 형성하는 미생물들 중에서 우점 균주를 분리 배양하였다. 우점 균주를 분리 및 배양하는 방법은 당업계에 공지된 다양한 방법을 이용할 수 있으며, 예를 들어, 희석비율, 콜로니의 색, 크기, 모양 등의 morphology적인 접근을 통하여 우점 미생물을 선발할 수 있다. The present inventors isolated odor-causing microorganisms from the above-mentioned EVA cores. As a result of culturing these microorganisms, a dominant strain was isolated and cultured among the microorganisms forming the colonies. Methods for isolating and culturing the dominant strains can be carried out by various methods known in the art. For example, dominant microorganisms can be selected through a morphological approach such as dilution ratio, color, size and shape of colonies.

상기 우점 미생물은 피브렐라 속 미생물, 크리세오박테리움 속 미생물, 스피로소마 속 미생물, 지오바실러스 속 미생물, 또는 페로모나스 속 미생물을 포함하며, 바람직하게는 피브렐라 에어스투아리나 ( Fibrella aestuarina ), 크리세오박테리움 지오카포스페레 ( Chryseobacterium geocarposphaerae ), 스피로소마 링구얼( Spirosoma linguale ), 스피로소마 라디오톨러런스( Spirosoma radiotolerans), 지오바실러스 퇴비( Geobacillus toebii ), 또는 페로모나스 푸라퀘( Pelomonas puraquae ) 를 포함한다.The dominant microorganism blood Brela Genus Microorganism, Chrysosobacterium Genus microorganism, spirosoma Genus microorganism, geobacillus Genus, or Feromonas Microorganism, preferably fibrillar Air Stu arena (Fibrella aestuarina), Cri Seo tumefaciens Geo-Force car Tampere (Chryseobacterium geocarposphaerae), spiro Soma ringgu Earl (Spirosoma linguale), spiro Soma Radio tolerance (Spirosoma radiotolerans), Geo Bacillus compost (Geobacillus toebii), or ferro Pseudomonas furanyl Quebec (Pelomonas puraquae ) .

상기 미생물들은 한국미생물보존센터에 2015년 4월 17일자로 기탁되어 다음의 기탁번호를 부여받았다: 피브렐라 에어스투아리나 ( Fibrella aestuarina ) HKMC-115(기탁번호:KCCM 11691P), 크리세오박테리움 지오카포스페레 (Chryseobacterium geocarposphaerae ) HKMC-116(기탁번호:KCCM 11692P), 스피로소마 링구얼 ( Spirosoma linguale ) HKMC-117(기탁번호:KCCM 11693P), 스피로소마 라디오톨러런스( Spirosoma radiotolerans ) HKMC-114(기탁번호:KCCM 11690P), 지오바실러스 퇴비( Geobacillus toebii ) HKMC-118(기탁번호:KCCM 11694P), 페로모나스 푸라퀘( Pelomonas puraquae ) HKMC-113(기탁번호:KCCM 11689P).The microorganisms are deposited on April 17, 2015 Date of the Korea Culture Center of Microorganisms were given the following accession numbers: blood Brela Air Stu arena (Fibrella aestuarina) HKMC-115 (Accession No: KCCM 11691P), Cri Seo tumefaciens Geo car force ferret (Chryseobacterium geocarposphaerae) HKMC-116 (Accession No: KCCM 11692P), spiro Soma Ringgu Earl (Spirosoma linguale) HKMC-117 (Accession No: KCCM 11693P), spiro Soma radio tolerance (Spirosoma radiotolerans) HKMC-114 (Accession No: KCCM 11690P), Bacillus Geo compost (Geobacillus toebii) HKMC-118 (Accession No: KCCM 11694P), Ferro Pseudomonas furanyl Quebec (Pelomonas puraquae ) HKMC-113 (Accession No .: KCCM 11689P).

상기 악취 유발 미생물들은 다양한 산업적 유용성을 보유한다. 예를 들어, 상기 미생물의 생육을 억제할 수 있는 신규 항균제 개발, 상기 미생물의 대사산물의 화학적 성질을 규명하여 악취를 차단하기 위한 방향제의 개발에 이용될 수 있다. 또한, 공조장치에서 상기 미생물이 서식할 수 없는 환경을 미리 조성하여 근본적으로 악취의 원인을 제거하기 위한 용도로 이용될 수 있다.These odor-inducing microorganisms have various industrial usefulness. For example, the present invention can be used to develop a novel antimicrobial agent capable of inhibiting the growth of the microorganism, and to develop a fragrance for blocking offensive odors by identifying the chemical properties of the metabolite of the microorganism. In addition, an environment in which the microorganisms can not be habituated in the air conditioner can be prepared in advance to fundamentally remove the cause of the odor.

본 발명의 항생제 스크리닝 방법에서 이용하는 시료는 상기 미생물들에 대한 항균 활성 보유 여부를 확인하기 위한 것이다. 예를 들어, 특정 시료가 지오바실러 스 퇴비(Geobacillus toebii)에 항균 활성을 보유하면, 상기 시료는 지오바실러스 퇴비( Geobacillus toebii )에 대한 항균제로 스크리닝될 수 있다.The sample used in the antibiotic screening method of the present invention is to confirm whether or not the microorganisms have antimicrobial activity. For example, when pictures of antimicrobial activity in a particular sample chipping sealer's compost (Geobacillus toebii), the sample geometry Bacillus compost (Geobacillus toebii ) . < / RTI >

본 발명의 스크리닝 방법으로 판별된 항균제는 바람직하게는 지오바실러스 퇴비( Geobacillus toebii )에 항균활성을 보유하며, 보다 바람직하게는 상기 미생물과 더불어 다른 종류의 미생물들에 대하여도 항균활성을 보유할 수 있다.The antibacterial agent identified by the screening method of the present invention is preferably a Geobacillus compost toebii , and more preferably, it may have antimicrobial activity against other microorganisms in addition to the above microorganisms.

예를 들어, 어떤 항균제는 상기 6종의 미생물 모두에 대해 항균활성을 보유할 수 있으며, 다른 항균제는 하나 또는 일부의 종에 대해 항균활성이 전혀 없을 수도 있다. 또한, 상기 6종의 미생물 모두에 대해 항균활성을 보유하는 항균제들에 있어서도 각 미생물의 종류에 따라 항균활성이 다를 수 있다(표 8).For example, some antimicrobial agents may have antimicrobial activity against all six microorganisms, and other antimicrobial agents may have no antimicrobial activity against one or some species. Also, antimicrobial activity of antimicrobial agents having antimicrobial activity against all of the six microorganisms may vary depending on the type of each microorganism (Table 8).

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 스크리닝 방법으로 판별된 항균제는 지오바실러스 퇴비(Geobacillus toebii) HKMC-118 (기탁번호:KCCM 11694P)에 항균활성을 갖는 것이다.According to a preferred embodiment of the present invention, the antibacterial agent identified by the screening method of the present invention has antibacterial activity against Geobacillus toebii HKMC-118 (accession number: KCCM 11694P).

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 스크리닝 하고자 하는 시료는 단일 화합물 및 화합물의 혼합물, 동식물의 추출물, 뉴클레오타이드, 폴리펩타이드 등 유전정보를 담고 있는 생물학적 제제, 화합물 및 생물학적 제제의 혼합물을 포함한다.
According to a preferred embodiment of the present invention, the sample to be screened includes a mixture of a biological compound, a compound and a biological preparation containing genetic information such as a mixture of a single compound and a compound, an extract of an animal or a plant, a nucleotide, a polypeptide and the like.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 공조장치 내 악취 유발 미생물을 제공한다.According to another aspect of the present invention, there is provided a malodor generating microorganism in an air conditioner.

상기 악취 유발 미생물은 바람직하게는 지오바실러스 퇴비(Geobacillus toebii) 인 것이며, 보다 바람직하게는 지오바실러스 퇴비(Geobacillus toebii) HKMC-118 (기탁번호: KCCM 11694P)인 것이다.
The odor-inducing microorganism is preferably Geobacillus toebii , more preferably Geobacillus toebii HKMC-118 (accession number: KCCM 11694P).

본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 항균제를 공조장치 내에 도포 또는 분사하는 단계를 포함하는 공조장치 내 악취 유발 미생물의 생육 억제 방법을 제공한다.According to still another aspect of the present invention, there is provided a method for inhibiting the growth of an odor-inducing microorganism in an air conditioner, comprising the step of applying or spraying an antibacterial agent in an air conditioner.

본 발명에서 이용 가능한 항균제는 지오바실러스 퇴비 또는 이를 포함하는 미생물들에 대한 항균활성을 보유하는 것으로 판별되거나 될 수 있는 모든 항균제가 적용될 수 있다. 상기 항균제는 공조장치 내에 도포 또는 분사되어 악취 유발 지오바실러스 퇴비 또는 이를 포함하는 미생물들의 생육을 억제하며, 상기 도포 또는 분사는 기체상, 액체상, 겔(gel)상 또는 고체 형태를 현탁시킨 현탁액 등 당업계에 공지된 다양한 형태로 이루어질 수 있다.The antimicrobial agent usable in the present invention may be any antimicrobial agent which can be judged to have or have antibiotic activity against Geobacillus compost or microorganisms containing it. The antibacterial agent is applied or sprayed in the air conditioner to inhibit the growth of odor-induced Geobacillus compost or microorganisms containing the same, and the application or spraying may be carried out in a suspension in which a gas phase, a liquid phase, a gel phase, Can be made in various forms known in the art.

또한, 상기 도포 또는 분사는 공조장치 내부 표면 또는 내부 구성들 중 일부 또는 전체에 걸쳐 행하여질 수 있으며, 바람직하게는 공조장치 내 에바코어에 도포 또는 분사된다. 상기 생육의 억제는 이미 지오바실러스 퇴비 또는 이를 포함하는 미생물들이 바이오 필름을 형성한 상태에 도포 또는 분사되거나, 지오바실러스 퇴비 또는 이를 포함하는 미생물들이 바이오 필름을 형성하기 전 생육 예방차원에서 도포 또는 분사될 수도 있다.
Further, the application or injection may be carried out over part or all of the inner surface or the inner structure of the air conditioner, and is preferably applied or sprayed onto the eva core in the air conditioner. Inhibition of growth is already geo Bacillus compost or microorganisms or coated or sprayed in a state forming a bio-film containing the same, geo Bacillus compost or be micro-organisms is applied or sprayed on the entire growth preventive forming a biofilm comprising the same It is possible.

본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 항균제를 공조장치 내에 도포 또는 분사하는 단계를 포함하는 공조장치 내 악취 제거 방법을 제공한다.According to still another aspect of the present invention, there is provided a method for removing odor in an air conditioner, comprising the step of applying or spraying an antibacterial agent in an air conditioner.

본 발명의 악취 제거는 악취의 전부 또는 일부의 제거를 포함하며, 악취의 예방차원에서 악취발생 전 도포 또는 분사하는 것도 포함한다.The smell removal of the present invention includes removal of all or a part of the smell, and includes coating or spraying before the generation of the malodor in order to prevent the smell.

공조장치 내에는 다양한 미생물들이 생육하고 있으며, 이러한 미생물들은 크게 악취를 유발하는 미생물과 악취를 유발하지 않는 미생물로 구분할 수 있다. 따라서, 상기 항균제가 악취를 유발하는 미생물에 특이적으로 작용하거나, 악취를 유발하는 미생물 중 우점종의 전부 또는 일부에 생육 억제 활성을 가질 경우, 상기 공조장치의 악취는 전부 또는 일부가 제거 또는 개선될 수 있다.
Various microorganisms are growing in the air conditioner, and these microorganisms can be classified into microorganisms that cause bad odors and microorganisms that do not cause bad odors. Therefore, when the antibacterial agent specifically acts on microorganisms causing malodor, or has a growth inhibitory activity on all or a part of the dominant species among microorganisms causing malodour, all or part of the odor of the air conditioner is removed or improved .

본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 공조장치 내에서 악취 유발 미생물인 지오바실러스 퇴비 를 상기 공조장치로부터 분리 또는 사멸시키는 단계를 포함하는 공조장치 내 악취 제거 방법을 제공한다.According to still another aspect of the present invention, there is provided an air conditioning system comprising a gas- And separating or killing the compost from the air conditioning apparatus.

본 발명의 분리 또는 사멸은 상기 미생물 또는 이를 포함하는 미생물의 전부 또는 일부를 물리적, 화학적 및 생물학적 방법에 의하여 수행할 수 있다. 물리적 방법으로는 인위적으로 상기 미생물 또는 이를 포함하는 미생물들을 물리적 장치를 이용하여 인위적으로 분리 또는 사멸할 수 있으며, 화학적 방법으로는 상기 미생물 또는 이를 포함하는 미생물들에 대한 항균제 또는 살균제를 이용하여 공조장치로부터 분리되도록 하거나 사멸시킬 수 있으며, 생물학적 방법으로는 상기 미생물에 독성이 있는 생물학적 제제 또는 상기 미생물과 생존 경쟁관계에 있는 다른 미생물을 이용하여 분리 또는 사멸시킬 수 있으나, 상기 예들에 제한되는 것은 아니다.
Separation or death of the present invention can be carried out by physical, chemical and biological methods in whole or in part of the microorganism or the microorganism containing the microorganism. As a physical method, the microorganism or the microorganisms including the microorganism can be artificially separated or killed by using a physical device. In chemical methods, the microorganism or the microorganisms containing the microorganism can be artificially separated or killed using an antibacterial or fungicide. And the biological method may be separated or killed by using a biological agent toxic to the microorganism or other microorganisms competing for survival with the microorganism, but the present invention is not limited thereto.

본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 공조장치 내에서 악취 유발 미생물인 지오바실러스 퇴비의 생육을 억제시키는 단계를 포함하는 공조장치 내 악취 제거 방법을 제공한다.
According to another aspect of the present invention, there is provided a method for removing odor in an air conditioner, comprising the step of suppressing the growth of the odor-causing microorganism, Geobacillus compost , in the air-conditioning apparatus.

본 발명은 공조장치 내 악취를 유발하는 미생물을 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 미생물을 제어할 수 있는 항균제의 스크리닝 방법을 제공한다. 추가적으로, 본 발명은 상기 미생물을 제어하여 공조장치 내 악취를 제거하는 방법을 제공한다.The present invention provides a microorganism causing an odor in an air conditioner. The present invention also provides a method for screening an antimicrobial agent capable of controlling the microorganism. In addition, the present invention provides a method for controlling the microorganisms to remove odor in the air conditioner.

본 발명의 공조장치 내 악취 유발 미생물은 신규 항균제 개발 또는 상기 미생물의 대사산물의 화학적 성질을 규명하여 악취를 차단하기 위한 방향제의 개발에 이용될 수 있다. 또한, 공조장치에서 상기 미생물이 서식할 수 없는 환경을 미리 조성하여 근본적으로 악취의 원인을 제거하기 위한 용도로 이용될 수 있는 등 다양한 산업상 유용성을 갖는다.
The odor-inducing microorganisms in the air conditioning system of the present invention can be used for the development of a novel antimicrobial agent or the development of a fragrance for blocking the odor by identifying the chemical properties of the metabolites of the microorganism. Further, the present invention has various industrial advantages such as being capable of being used in an air conditioner to preliminarily prepare an environment in which the microorganism can not be inhabited and to fundamentally remove the cause of the odor.

도 1은 악취발생 중고차의 에바코어로부터 샘플링한 시편을 나타낸 사진이다.
도 2는 본 발명에 따른 항균도 테스트 방법을 나타낸 그림이다.
도 3은 우점 무취 미생물들의 조합을 에바코어의 재질인 알루미늄 핀을 이용하여 배양하는 모습을 나타낸 그림이다.
1 is a photograph showing a specimen sampled from an eva core of a malodorous used car.
FIG. 2 is a diagram illustrating a method of testing an antimicrobiality according to the present invention.
FIG. 3 is a view showing a state where a combination of high-purity odorless microorganisms is cultured using an aluminum pin, which is a material of Eva core.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for describing the present invention in more detail and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention .

실시예Example 1: 악취 유발  1: Odor induced 우점Dominance 미생물의 선별 Selection of microorganisms

1. 악취 차종의 확보 및 공조장치의 분리1. Securing odor vehicle and separation of air conditioner

본 발명자들은 차량 내부와 같은 밀폐된 환경에서 발생되는 악취의 원인을 규명하기 위해, 계절별(동절기: 2-3월, 하절기: 6-7월)로 악취 냄새가 발생하는 중고차 10종을 확보하여 각각의 차량에 장착되어 있는 공조장치를 분리하고, 공조장치 내 악취유발 미생물들에 의한 바이오필름이 형성되어 있을 것으로 예상되는 에바코어를 떼어내어 시편을 샘플링하고자 하였다(표 1).
The inventors of the present invention have found 10 kinds of used cars that smell bad odors in season (winter season: 2-3 months, summer season: 6-7 months) in order to identify the cause of odor generated in an enclosed environment such as a car interior (Fig. 1). Fig. 1 (a) is a graph showing the results of the experiment. Fig. 2 (a) is a graph showing the relationship between the biofilm and the biofilm.

No. No. 차량 주행거리 Vehicle mileage 계절season 1 One 89,000 ㎞89,000 km 동절기
(2-3월)
Winter season
(2-3 months)
2 2 70,000 ㎞70,000 km 3 3 10,300 ㎞10,300 km 4 4 37,100 ㎞37,100 km 5 5 149,970 ㎞149,970 km 66 35,000 ㎞35,000 km 하절기
(6-7월)
Summer
(June-July)
77 28,000 ㎞28,000 km 88 42,000 ㎞42,000 km 99 110,000 ㎞110,000 km 1010 90,000 ㎞90,000 km

2. 2. 에바코어Eva Core 시편 샘플링 Sample Sampling

상기 악취 중고차 1 내지 10으로부터 확보한 에바코어로부터 에바코어 샘플을 사용하기 전까지 4℃에서 냉장 보관되었으며, 폴리에틸렌 백으로 밀봉하여 보관하였다. 미생물을 분리 배양하기 위해 각각의 에바코어의 전면부 및 후면부를 포함한 임의의 부위에서 멸균된 롱 노즈 플라이어를 사용하여 각 5 g씩 시료를 채취한 후 혼합하여 사용하였다(도 1).
The EVA core obtained from the used odors 1 to 10 was refrigerated at 4 ° C. until the EVA core sample was used, and then sealed with a polyethylene bag. In order to isolate and cultivate the microorganisms, 5 g of each sample was collected using a sterilized long nose plier at an arbitrary site including the front part and the rear part of each EVA core (FIG. 1).

3. 미생물의 3. Microbial 탈리Tally

상기 에바코어로부터 채취된 시료로부터의 미생물의 탈리는 다음의 과정을 통하여 진행되었다:The elimination of the microorganism from the sample collected from the EVA core proceeded through the following procedure:

① 에바코어에서 추출한 시료를 섞어 교반기에 넣는다.① Mix the samples extracted from Eva core and put them in a stirrer.

② 멸균된 1 X PBS(Phosphate Buffed Saline) 200ml를 상기 교반기에 넣는다. (2) 200 ml of sterilized 1 X PBS (Phosphate Buffed Saline) is added to the agitator.

③ 혼합된 시료와 PBS를 30초간 교반한다.③ Mixed sample and PBS are stirred for 30 seconds.

④ 교반기를 아이스(ice)에 1분간 둔다. ④ Place the stirrer in ice for 1 minute.

⑤ 상기 ③ 내지 ④ 과정을 2회 추가 반복한다. ⑤ Repeat steps 3 to 4 above twice.

⑥ 현탁액을 4℃에서 3분간 13,000 rpm으로 원심분리한다. ⑥ Centrifuge the suspension at 13,000 rpm for 3 minutes at 4 ° C.

⑦ 상등액만을 취해서 새 튜브에 옮겨 담는다.⑦ Take only the supernatant and transfer it to a new tube.

⑧ 멸균된 면봉을 상등액에 적셔 샘플을 채취한 에바코어의 표면을 수회 닦아낸다. ⑧ Wet the sterilized cotton swab with the supernatant and wipe the surface of the Eva core sample several times.

⑨ 닦아낸 면봉은 상등액에 헤드부분 만을 넣고 볼텍싱(vortexing) 한다.⑨ The wiped swab should be vortexed with only the head part in the supernatant.

⑩ 상기 ⑥번 과정에서 획득한 침전물과 ⑨번 혼합물을 섞어 접종원액으로 사용한다. ⑩ Mix the precipitate obtained in ⑥ above with the mixture ⑨ and use it as the inoculum solution.

상기 ① 내지 ⑩의 과정을 차종 1 내지 10에 장착되어 있는 에바코어에 대하여 각각 물리적 탈리를 시행하여 미생물을 분리하였다.
The above processes (1) to (10) were physically removed from the EVA cores mounted on the vehicle types 1 to 10 to isolate the microorganisms.

4. 악취 유발 미생물의 분리 및 우점종 선별 4. Separation of odor-inducing microorganisms and selection of dominant species

에어컨의 세균의 분리는 일반적으로 일반세균이라 하는 호기성 종속영양 세균을 종속영양 평판 배양을 통하여 분리한다. 일반세균의 분리는 PTYG agar medium 및 R2A agar medium의 복합영양배지를 이용하여 28-30℃에서 14 일간 배양(PTYG agar medium은 Peptone 0.25 g(Difco), Triptone 0.25 g(Difco), Yeast extract 0.5 g(Difco), Glucose 0.5 g(Difco), MgSO4 30 ㎎(Sigma), CaCl2 3 ㎎(Sigma), Bacto agar 15 ㎎(Difco)을 증류수 980 ㎖에 넣고 pH 7.0으로 맞춘 후 121℃에서 15분간 고압멸균하여 사용하였으며, R2A agar medium은 Yeast extract 0.5 g(Difco), Proteose peptone No.3 0.5 g(Difco), Casamino acids 0.5 g(Difco), Dextrose 0.5 g(Difco), Soluble starch 0.5 g(Difco), Sodium pyruvate 0.3 g(Difco), Dipotassium sulfate 0.3 g(Difco), Magnesium sulfate 0.05 g(Difco), Bacto agar 15 g(Difco)을 증류수 980 ㎖에 넣고 pH 7.2를 맞춘 뒤(최종 1000 ㎖) 121℃에서 15분간 고압멸균하여 사용)하였으며, 비우점 세균의 분리를 위해 Kanamycin, Ampicillin 및 Chloramphenicol을 100 ppm 농도로 필터멸균 후 배지온도가 50℃가 되었을 때 접종하여 항생제 배지를 제작하였다.
The separation of airborne germs is generally accomplished by heterotrophic culture of aerobic heterotrophic bacteria, commonly referred to as general germs. The bacterial isolates were cultured for 14 days at 28-30 ℃ using PTYG agar medium and R2A agar medium (PTYG agar medium was 0.25 g (Difco), 0.25 g (Difco), 0.2 g of Tryptone and 0.5 g of Yeast extract (Difco), Glucose 0.5 g (Difco), MgSO4 30 mg (Sigma), CaCl2 3 mg (Sigma) and Bacto agar 15 mg (Difco) were added to 980 ml of distilled water and adjusted to pH 7.0. (Difco), 0.5 g (Difco) of casamino acids, 0.5 g (Difco) of Dextrose, 0.5 g (Difco) of Soluble starch, and 0.5 g Add 0.1 g Sodium pyruvate (Difco), 0.3 g Dipotassium sulfate (Difco), 0.05 g Magnesium sulfate (Difco) and 15 g Bacto agar (Difco) in 980 ml distilled water and adjust the pH to 7.2 After sterilizing Kanamycin, Ampicillin and Chloramphenicol at a concentration of 100 ppm for the isolation of non-bacterium bacteria, the medium temperature was 50 ° C Inoculation was prepared by the antibiotic medium.

우점균주를 분리배양하기 위해서는 우선 희석비율과 콜로니 색, 크기, 모양 등 morphology적인 접근을 통하여 여러 가지 우점 균주를 선별하였다. In order to separate and cultivate the dominant strains, several dominant strains were selected through a morphological approach such as dilution ratio, colony color, size and shape.

① 분리배양된 배지에서 곰팡이와 박테리아를 구분하여 분리한다. Separation Separate fungi and bacteria from the culture medium.

② morphology가 다른 여러 가지 세균을 loop를 사용하여 복합배지에 접종 순수 분리한다.② Inoculate various bacterial strains of different morphology into a complex medium using a loop and isolate them pure.

③ 접종된 배지 중 가장 생육이 좋은 배지를 선택하여 계대 배양한다.③ Select the best growth medium among the inoculated medium and subculture.

④ 곰팡이는 균사의 끝부분을 scalpel을 사용하여 분리한 뒤 복합배지에 접종한다.④ The mold is separated from the end of the hypha using scalpel and then inoculated into the complex medium.

⑤ 곰팡이 균주도 접종된 배지 중 가장 생육이 좋은 배지를 선택하여 계대 배양한다.
⑤ Select the medium that has the best growth among the medium inoculated with the fungal strain and subculture.

5. 5. 우점Dominance 미생물의 동정  Identification of microorganisms

상기 분리 미생물의 정확한 동정을 위해, 다음의 단계를 포함하는 16s rRNA 동정을 시행하였다.
For accurate identification of the isolated microorganism, 16s rRNA identification including the following steps was performed.

a) REP-a) REP- PCRPCR 패턴 분석을 통한  Through pattern analysis 핑거프린트Fingerprint (Fingerprints) 조사(Fingerprints) survey

REP-PCR은 세균 염색체의 구조를 분석하는 분자생물학적 방법으로서 각 세균 균주를 다른 세균과 구별하여 식별할 수 있는 fingerprinting 방법이다. REP-PCR을 수행하기 위해 하기의 각 절차에 따라 유전적 특성을 분석하였다.
REP-PCR is a molecular biologic method for analyzing the structure of bacterial chromosomes. It is a fingerprinting method that distinguishes each bacterial strain from other bacteria. To perform REP-PCR, genetic characteristics were analyzed according to the following procedures.

(1) Cell lysis 절차(1) Cell lysis procedure

① Lyse-N-Go PCR Reagent(Thermo) 2.5 ㎕를 PCR tube에 담는다.1) Transfer 2.5 μl of Lyse-N-Go PCR Reagent (Thermo) into PCR tube.

② 클린벤치에서 콜로니를 피펫으로 따서 위 tube에 넣고 pipetting한다. 이 때 따는 양은 용액이 약간 뿌옇게 될 정도로 되지 않도록 주의한다.② Pipet the colonies on a clean bench and pipet into the upper tubes. Be careful not to get enough amount of solution to pour.

③ Manufacturer의 지시에 따라 PCR machine에서 배양한다.
③ Cultivate in PCR machine according to manufacturer's instructions.

(2) PCR reaction(2) PCR reaction

하기 표 2에 기재된 성분을 이용하여 하기 표 3에 기재된 바와 같이, 예비 변성 단계(pre-denaturation) 93℃에서 7 분, 변성 단계(denaturation) 92℃에서 1분, 냉각 단계(annealing)에서 51.5℃에서 1분, 연장(extension) 단계에서 65℃에서 8분간 변성, 냉각, 연장 과정을 33회 반복하여 PCR 증폭 과정을 수행하였다.
Using the components listed in Table 2 below, pre-denaturation was carried out at 93 ° C for 7 minutes, denaturation at 92 ° C for 1 minute, annealing at 51.5 ° C And denaturation, cooling, and extension at 65 ° C for 8 minutes in an extension step were repeated 33 times to perform PCR amplification.

① dNTP (2.5 mM each)1) dNTP (2.5 mM each) 12.5 ㎕12.5 μl ② Gitschier buffer② Gitschier buffer 5.0 ㎕5.0 μl ③ DMSO (100%)③ DMSO (100%) 2.5 ㎕2.5 μl ④ Autoclaved 3oD.W.④ Autoclaved 3 o DW 0.3 ㎕0.3 μl ⑤ BOXA1R primer(50 pmole/㎕)
5'CTACGGCAAGGCGACGCTGACG
(5) BOXA1R primer (50 pmole / l)
5'CTACGGCAAGGCGACGCTGACG
1.0 ㎕1.0 μl
⑥ BSA (10 ㎎/㎖)⑥ BSA (10 mg / ml) 0.4 ㎕0.4 μl ⑦ Bacterial DNA⑦ Bacterial DNA 2.5 ㎕2.5 μl ⑧ Taq polymerase(Roche) (5 U/㎕)⑧ Taq polymerase (Roche) (5 U / ㎕) 0.8 ㎕0.8 μl

step 1step 1 93℃93 ℃ 7 min7 min step 2step 2 92℃92 ° C 1 min1 min step 3step 3 51.5℃51.5 DEG C 1 min1 min step 4step 4 65℃65 ℃ 8 min8 min step 2,3,4 : additional 33 cyclesstep 2,3,4: additional 33 cycles step 6step 6 65℃65 ℃ 16 min16 min step 7step 7 4℃4 ℃

(3) Gel electrophoresis(3) Gel electrophoresis

각각의 PCR에 의해 증폭된 DNA 단편을 취하여 EtBr을 첨가한 1.2-1.5% agarose gel을 사용하며, 6 x dye를 sample과 1:5 비율로 섞어 가능한 많은 양을 loading하였다. 대부분의 PCR product들은 100-1000 bp 사이에 있으므로 100 bp ladder를 함께 loading하여, 가능한 한 천천히(50 V) bromophenol blue와 xylene cyanol dye의 중간이 전체 gel의 중간까지 가도록 전기영동하였다. gel상의 DNA pattern이 같은 균주는 동일한 균주로 간주하였다.
The DNA fragments amplified by each PCR were taken and 1.2 - 1.5% agarose gel with EtBr was used and 6 x dye was mixed with sample in 1: 5 ratio and as much as possible. Since most PCR products were between 100-1000 bp, a 100 bp ladder was loaded together and electrophoresed as slowly as possible (50 V) between the bromophenol blue and xylene cyanol dye to the middle of the entire gel. The same strain of the same DNA pattern on the gel was regarded as the same strain.

b) 에어컨 b) Air conditioning 우점Dominance 박테리아의 16S  16S of bacteria rRNArRNA 유전자 분석을 통한 동정 Identification through gene analysis

16S rRNA(ribosomal Ribonucleic acid) 유전자는 박테리아의 유전학적 분류 동정을 위해 사용되며, REP-PCR을 통하여 분류된 박테리아의 속(genus) 및 종(species) 수준에서의 동정이 가능하다.
The 16S rRNA (ribosomal ribonucleic acid) gene is used for identification of bacterial genomic classification and can be identified at the genus and species level of bacteria classified by REP-PCR.

(1) Cell lysis 절차(1) Cell lysis procedure

①Lyse-N-Go PCR Reagent(Thermo) 5 ㎕를 PCR tube에 담는다.1) Transfer 5μl of Lyse-N-Go PCR Reagent (Thermo) into PCR tube.

②클린벤치에서 콜로니를 피펫으로 따서 위 tube에 넣고 pipetting한다. 이 때 따는 양은 용액이 약간 뿌옇게 될 정도로 한다.② Pipet the colonies on a clean bench and pipet into the upper tubes. The amount of the solution should be such that the solution becomes slightly cloudy.

③Manufacturer의 지시에 따라 PCR machine에서 lysis한다(표 4).
③ Lysate in a PCR machine according to the manufacturer's instructions (Table 4).

CycleCycle Temperature(℃)Temperature (° C) Time(seconds)Time (seconds) 1One 6565 3030 22 88 3030 33 6565 9090 44 9797 180180 55 88 6060 66 6565 180180

(2) 16S rRNA 유전자 PCR(2) 16S rRNA gene PCR

PCR 조건(Total 50 ㎕): DNA와 Taq를 제외한 나머지 용액을 하기 표 5에 기재되어 있는 것과 같이 필요량만큼 혼합하여 위 lysis 용액에 44.5 ㎕를 가하였다. 이 후 표 6에 기재되어 있는 바와 같이 예비 변성 단계(pre-denaturation) 94℃에서 5분, 변성 단계(denaturation) 94℃에서 1분, 냉각 단계(annealing) 55℃에서 1분, 연장 단계(extension) 72℃에서 1분 30초를 수행하고, 변성, 냉각 및 연장 단계를 29회 수행하여 PCR 증폭 과정을 수행하였다.
PCR conditions (Total 50 ㎕): The remaining solutions except for DNA and Taq were mixed as necessary as shown in Table 5 below, and 44.5 ㎕ was added to the above lysis solution. Denaturation at 94 ° C for 1 minute, denaturation at 94 ° C for 1 minute, annealing at 55 ° C for 1 minute, extension step (extension) as described in Table 6, pre-denaturation at 94 ° C for 5 minutes, denaturation at 94 ° C for 1 minute, ) At 72 DEG C for 1 minute and 30 seconds, and denaturation, cooling and extension steps were performed 29 times to perform PCR amplification.

Autoclaved 3oD.W.Autoclaved 3 o DW 22 ㎕22 μl 10xbuffer (Roche)10xbuffer (Roche) 5 ㎕5 μl dNTP (Roche, 2.5 mM)dNTP (Roche, 2.5 mM) 5 ㎕5 μl DMSODMSO 5 ㎕5 μl BSA (10 ㎎/㎖)BSA (10 mg / ml) 2.5 ㎕2.5 μl 27mf (20 pmole/㎕)27 mf (20 pmoles / l) 2.5 ㎕2.5 μl 1492r (20 pmole/㎕)1492 r (20 pmole / l) 2.5 ㎕2.5 μl DNADNA 5 ㎕5 μl Taq (Roche)Taq (Roche) 0.5 ㎕0.5 μl

step 1step 1 94℃94 ° C 5 min5 min step 2step 2 94℃94 ° C 1 min1 min step 3step 3 55℃55 ° C 1 min1 min step 4step 4 72℃72 1 min 30 sec1 min 30 sec Go to step 2 : additional 29 cyclesGo to step 2: additional 29 cycles step 6step 6 72℃72 ℃ 10 min10 min step 7step 7 4℃4 ℃ holdhold

(3) PCR purification (3) PCR purification

16S rRNA 유전자 PCR을 통해 증폭한 산물을 Qiaquick PCR purifcation kit를 이용하여 하기의 절차에 따라 Purification하였다.The 16S rRNA gene PCR product was purified using the Qiaquick PCR purifcation kit according to the following procedure.

① PCR product의 5배의 PB buffer를 넣는다.① Put 5 times PB buffer of PCR product.

② 혼합된 액을 QIAquick column에 분주한다. ② Divide the mixed solution in the QIAquick column.

③ DNA를 binding하기 위하여 1분간 centrifuge 한 후 통과된 혼합액을 제거한다. ③ Centrifuge for 1 minute to bind DNA and remove the mixed solution.

④ wash를 위하여 750 ㎕의 PE buffer를 QIAquick column에 넣고 1분간 centrifuge한 뒤 통과된 혼합액을 제거한다. ④ Add 750 μl of PE buffer to the QIAquick column for wash, centrifuge for 1 minute and remove the mixed solution.

⑤ 1분간 다시 centrifuge한다. ⑤ Centrifuge again for 1 minute.

⑥ QIAquick column 새 tube에 옮긴다. ⑥ Move the QIAquick column to a new tube.

⑦ DNA를 추출하기 위하여 30 ㎕의 EB buffer를 넣고 1분간 둔다. ⑦ To extract DNA, add 30 μl of EB buffer and leave for 1 minute.

⑧ 1분간 centrifuge하여 EB에 녹은 DNA를 tube에 모이게 한다. ⑧ Centrifuge for 1 minute to collect the DNA dissolved in EB in the tube.

상기 실험 수행 결과, 순수 분리된 미생물의 악취 발생여부를 확인하기 위해 다음과 같은 방법으로 배양하여 관능평가를 실시하였다:As a result of the above-mentioned experiment, in order to confirm whether or not the odor of the purely isolated microorganism was generated, the sensory evaluation was carried out by cultivating in the following manner:

① 순수분리배양된 미생물을 액체영양배지에 접종한다.① Pure separation Separate the cultured microorganisms into liquid nutrient medium.

② 접종된 배지를 28℃에서 5-7일간 배양한다.② The inoculated medium is incubated at 28 ℃ for 5-7 days.

③ 고체영양배지에 액체배지에서 배양된 균체를 100 ㎕ 취하여 접종한다.③ Inoculate the solid nutrient medium with 100 ㎕ of cells cultured in liquid medium.

④ 접종한 균체를 spreader를 이용하여 골고루 퍼지게 한다.④ Spread the inoculated cells evenly using a spreader.

⑤ 패트리디쉬를 밀봉하여 28℃에서 10일간 배양한다.
⑤ Seal the Petri dishes and incubate at 28 ℃ for 10 days.

관능평가는 총 7명의 패널을 이용하여 5점 척도법을 이용하여 냄새 강도 평가 후 평균치를 이용하여 악취유발 우점 미생물을 선별하였고, 상기 16S rRNA 유전자 분석을 통한 동정을 통해 하기 표 7과 같은 총 6가지 우점종을 동정하였으며, 이들을 한국미생물보존센터에 2015년 4월 17일자로 기탁하였다.
The sensory evaluation was carried out using a panel of seven persons, and the odor-causing microorganisms were selected using the average value after evaluating the odor intensity using the 5-point scale method. Through the identification by the 16S rRNA gene analysis, And they were deposited on April 17, 2015 at the Korea Microorganism Conservation Center.

No.No. 식별번호Identification number 미생물 명Microorganism name 기탁번호Accession number 1One HKMC-113HKMC-113 페로모나스Feromonas 푸라퀘Puraqua
(( PelomonasPelomonas puraquaepuraquae ))
KCCMKCCM 11689P 11689P
22 HKMC-114HKMC-114 스피로소마Spirosoma 라디오톨러런스Radio Tolerance
(( SpirosomaSpirosoma radiotoleransradiotolerans ))
KCCMKCCM 11690P 11690P
33 HKMC-115HKMC-115 피브렐라Fibrela 에어스투아리나Air Stu Arena
(( FibrellaFibrella aestuarinaaestuarina ))
KCCMKCCM 11691P 11691P
44 HKMC-116HKMC-116 크리세오박테리움Cryptobacterium 지오카포스페레Geocafos Ferre
(( ChryseobacteriumChryseobacterium geocarposphaeraegeocarposphaerae ))
KCCMKCCM 11692P 11692P
55 HKMC-117HKMC-117 스피로소마Spirosoma 링구얼Ringgold
(( SpirosomaSpirosoma lingualelinguale ))
KCCMKCCM 11693P 11693P
66 HKMC-118HKMC-118 지오바실러스Geo Bacillus 퇴비 compost
(( GeobacillusGeobacillus toebiitoebii ) )
KCCMKCCM 11694P 11694P

실시예Example 2: 선별된 악취 유발 미생물에 대한 항균제별 항균도 평가 2: Evaluation of antibacterial activity against selected odor-inducing microorganisms

1. 실험과정 1. Experimental process

본 발명자들은 현재 시판 중인 다양한 항균제를 이용하여 상기 실시예 1에서 선별된 우점 미생물에 대한 항균도를 평가하였다. 본 발명에서 이용된 항균제들은 다음과 같다:The present inventors evaluated antimicrobial activity against the dominant microorganisms selected in Example 1 using various commercially available antimicrobial agents. The antibacterial agents used in the present invention are as follows:

A 항균제: 킴케어 (유한킴벌리사)A Antimicrobial agent: Kim Care (Yuhan-Kimberly)

B 항균제: 페브리즈 (P&G 사)B Antimicrobial agent: Pebble (P & G)

C 항균제: 메틸알콜 45~50%, 황산크롬(CAS 10101-53-8) 1~5%, 브롬계 1~5% 및 물을 포함하는 양산 항균제
C Antimicrobial agent: Mass production antimicrobial agent containing 45 to 50% of methyl alcohol, 1 to 5% of chromium sulfate (CAS 10101-53-8), 1 to 5%

항균도 평가는 다음의 단계를 통하여 수행되었다:The evaluation of antibacterial activity was carried out through the following steps:

① 멸균된 여과지 준비① Preparation of sterilized filter paper

② 3가지 종류의 항균제 준비(대조군: 항균제 무처리군, 실험군: 항균제 A, 항균제 B, 항균제 C)② Preparation of three kinds of antimicrobial agents (Control group: no antimicrobial agent, experimental group: antimicrobial agent A, antimicrobial agent B, antimicrobial agent C)

③ 항균제에 여과지 투입③ Put filter paper in antibacterial agent

④ 각각의 악취 유발 미생물을 영양배지에 도포④ Apply each odor-inducing microorganism to the nutrient medium

⑤ 악취 유발 미생물이 도포된 영양배지에 각각의 항균제가 포함된 여과지 올리기⑤ Put the filter paper containing each antimicrobial agent in the nutrient medium to which odor-inducing microorganism is applied

⑥ 28 내지 30℃에서 5일간 배양⑥ Culture at 28 to 30 ℃ for 5 days

⑦ 생육억제 구역의 측정
⑦ Measurement of growth inhibition zone

상기 생육억제 구역의 측정은 버니어 캘리퍼를 이용하여 생육억제 구역의 지름을 측정하였으며, 구체적인 방법은 도 2에 도시된 바와 같다.
The growth inhibition zone was measured by using a vernier caliper to measure the diameter of the growth inhibition zone. The specific method is as shown in FIG.

2. 실험결과 2. Experimental results

악취 유발 미생물 6종에 대해 각각 3번씩 상기 방법을 통해 실험하여 생육억제 구역의 지름을 측정한 것들의 평균값을 표 8에 나타내었다.
The mean values of the diameters of the growth inhibition zones measured by the above-mentioned method for each of 6 kinds of odor-inducing microorganisms were shown in Table 8.

No.No. 미생물명(Microorganism name ( 기탁명Depositor )) 향균제Antimicrobial agent  No AA BB CC 1One Pelomonas puraquae HKMC-113 Pelomonas puraquae HKMC-113 00 1.171.17 2.072.07 3.933.93 22 Spirosoma radiotolerans HKMC-114 Spirosoma radiotolerans HKMC-114 00 2.032.03 2.172.17 4.574.57 33 Fibrella aestuarina HKMC-115 Fibrella aestuarina HKMC-115 00 2.132.13 2.632.63 4.304.30 44 Chryseobacterium geocarposphaerae HKMC-116 Chryseobacterium geocarposphaerae HKMC-116 00 0.970.97 1.571.57 2.702.70 55 Spirosoma linguale HKMC-117 Spirosoma linguale HKMC-117 00 1.831.83 2.102.10 4.834.83 66 Geobacillus toebii strain R-35642 HKMC-118
Geobacillus toebii strain R-35642 HKMC-118
00 1.731.73 1.931.93 2.202.20

(단위: cm)(Unit: cm)

표 8에서와 같이, 항균제 A의 경우 크리세오박테리움 지오카포스페레 에 대하여는 항균력이 상대적으로 약하였으며, 항균제 B의 경우 피브렐라 에어스투아리나에 대하여는 항균력이 강한 편이나, 크리세오박테리움 지오카포스페레 에 대하여는 항균력을 약하게 발휘됨을 알 수 있었다.As it is shown in Table 8, in the case of antimicrobial agents A Cri Seo tumefaciens Geocafos Ferre , The antimicrobial activity was relatively weak, and in the case of antimicrobial agent B , The strong antimicrobial activity with respect to the air side or Stu arena, Cri Seo tumefaciens Geocafos Ferre It was found that the antimicrobial activity was weak.

또한, 항균제 C의 경우에는 지오바실러스 퇴비에 대하여 상대적으로 항균력이 약하나, 6종의 미생물 모두에 대해 전반적으로 항균제 A, B에 비하여 높은 항균력을 발휘함을 확인하였다.
In case of the antimicrobial agent C, the antimicrobial activity against Geobacillus compost is relatively weak, but the antimicrobial agents A and B And it showed high antibacterial activity.

실시예Example 3: 악취 유발 미생물이 제거된  3: odor-inducing microorganism removed 에바코어에On Eva Core 대한 냄새 평가 Odor evaluation for

본 발명자들은 악취 미생물이 제거 또는 분리된 상태의 에바코어를 재현하기 위해 상기 에바코어에 서식하는 우점 미생물 중 실시예 1의 악취 미생물이 제외된 무취 미생물들의 조합을 에바코어의 재질인 알루미늄 핀을 이용하여 배양하였다(표 9, 도 3).In order to reproduce the eva core in which the bad odor microorganisms have been removed or separated, the present inventors have used a combination of odorless microorganisms excluding the bad odor microorganisms of Example 1 among the dominant microorganisms living in the eva cores by using an aluminum pin (Table 9, Fig. 3).

무취 미생물은 상기 에바코어에 서식하는 미생물들 중 배양시 콜로니를 형성하는 미생물 중 악취를 유발하지 않는 우점종들로 선정하였으며, 배양방법은 하기와 같이 하였다.The odorless microorganisms were selected as the dominant species which did not cause malodour among the microorganisms forming colonies during culturing among the microorganisms in the above Eva core. The culture method was as follows.

① 순수분리 배양된 무취 미생물을 R2A 약체 배지에 접종한다.① Pure isolation Separately cultivated microorganisms are inoculated into R2A medium.

② 접종된 배지를 28℃에서 5-7일간 배양한다.② The inoculated medium is incubated at 28 ℃ for 5-7 days.

③ 121℃에서 20분간 고압 멸균한 알루미늄 핀(fin)을 준비한다. ③ Prepare an aluminum pin (sterilized at 121 ℃ for 20 minutes).

④ 각 각의 항균제에 담궈 표면을 골고루 코팅 되도록 한다.④ Immerse each antimicrobial agent so that the surface is evenly coated.

⑤ 코팅된 알루미늄 핀(fin)을 패트리디쉬에 올려 놓는다.⑤ Place the coated aluminum fins on the Patri dish.

⑥ 배양된 무취 미생물 접종액 1 ㎖를 원심분리하여 상등액을 버린다.⑥ Discard the supernatant by centrifuging 1 ml of the inoculated microorganism culture.

⑦ 멸균된 1 x PBS를 1 ㎖ 넣어 또다시 원심분리 한다.⑦ Add 1 ml of sterilized 1 x PBS and centrifuge again.

⑧ 상기 ⑦ 방법을 2번 반복한다.⑧ Repeat ⑦ above twice.

⑨ PBS로 워싱(washing)한 무취 미생물을 100 ㎕ 씩 알루미늄 핀 중간에 떨어뜨린다. ⑨ Add 100 μl of odorless microorganism washed with PBS to the middle of aluminum pin.

⑩ 준비된 알루미늄 핀(fin)위에 접종 후 실온에서 말린다.⑩ Inoculate on prepared aluminum fin and dry at room temperature.

⑪ 패트리디쉬를 밀봉하여 28℃에서 1달간 배양한다.
⑪ Seal the Patry Dish and incubate at 28 ℃ for 1 month.

그 결과, 1달 뒤 하기 표 9(악취 미생물이 제거된 에바코어 서식 미생물의 배양 시 냄새 결과)의 조합에서 모두 악취가 나지 않는 것으로 판명되었다.
As a result, it was found that after one month, the combination of the following Table 9 (the smell result in the culture of the eva-core-habitat microorganism from which the malodorous microorganism was removed) was found to be odorless.

조합Combination 미생물microbe 1개월 후 냄새평가 Odor evaluation after 1 month 1One MethylobacteriumMethylobacterium brachiatumbrachiatum 무취Odorless 22 MethylobacteriumMethylobacterium plataniplatani 무취Odorless 33 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani 무취Odorless 44 MethylobacteriumMethylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatumbrachiatum 무취Odorless 55 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatumbrachiatum 무취Odorless 66 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatum +  brachiatum + AcinetobacterAcinetobacter johnsoniijohnsonii 무취Odorless 77 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatum + Bacillus  brachiatum + Bacillus vietnamensisvietnamensis 무취Odorless 88 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatum +  brachiatum + BrevibacillusBrevibacillus invocatusinvocatus 무취Odorless 99 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatum +  brachiatum + DeinococcusDeinococcus ficusficus 무취Odorless 1010 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatum +  brachiatum + LeifsoniaLeifsonia solileft 무취Odorless 1111 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatum +  brachiatum + MethylobacteriumMethylobacterium komagataekomagatae 무취Odorless 1212 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatum +  brachiatum + PseudomonasPseudomonas nitroreducensnitroreducens 무취Odorless 1313 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium plataniplatani +  + MethylobacteriumMethylobacterium brachiatum +  brachiatum + SphingomonasSphingomonas aquatilisaquatilis 무취Odorless 1414 SphingomonasSphingomonas aquatilisaquatilis +  + BrevibacillusBrevibacillus invocatus  invocatus 무취Odorless 1515 LeifsoniaLeifsonia solileft +  + MethylobacteriumMethylobacterium komagatae  komagatae 무취Odorless 1616 AcinetobacterAcinetobacter johnsoniijohnsonii +  + SphingomonasSphingomonas aquatilis +  aquatilis + MethylobacteriumMethylobacterium komagataekomagatae 무취Odorless 1717 PseudomonasPseudomonas nitroreducensnitroreducens 무취Odorless 1818 AcinetobacterAcinetobacter johnsoniijohnsonii +  + PseudomonasPseudomonas nitroreducensnitroreducens 무취Odorless 1919 BrevibacillusBrevibacillus invocatusinvocatus +  + AcinetobacterAcinetobacter johnsonii +  johnsonii + PseudomonasPseudomonas nitroreducensnitroreducens 무취Odorless 2020 LeifsoniaLeifsonia solileft +  + PseudomonasPseudomonas nitroreducensnitroreducens 무취Odorless 2121 BrevibacillusBrevibacillus invocatusinvocatus +  + SphingomonasSphingomonas aquatilis +  aquatilis + PseudomonasPseudomonas nitroreducensnitroreducens 무취Odorless 2222 AcinetobacterAcinetobacter johnsoniijohnsonii +  + SphingomonasSphingomonas aquatilis +  aquatilis + PseudomonasPseudomonas nitroreducensnitroreducens 무취Odorless 2323 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium komagataekomagatae + Bacillus vietnamensis +  + Bacillus vietnamensis + DeinococcusDeinococcus ficusficus 무취Odorless 2424 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium komagataekomagatae +  + CurtobacteriumCurtobacterium flaccumfaciens +  flaccumfaciens + DeinococcusDeinococcus apachensisapachensis + Bacillus  + Bacillus subtilissubtilis subspsubsp . . subtilissubtilis 무취Odorless 2525 MethylobacteriumMethylobacterium aquaticumaquaticum + Methylobacterium  + Methylobacterium komagataekomagatae +  + SpirosomaSpirosoma linguale +  linguale + SphingomonasSphingomonas dokdonensisdokdonensis + Leifsonia  + Leifsonia solileft 무취Odorless

상기 실험결과와 같이, 공조장치 내에 서식하고 있는 미생물 중 악취 유발 미생물을 화학적 또는 물리적 방법 등을 이용하여 제거하여 악취를 유발하지 않는 미생물들로만 조합을 형성할 경우, 공조장치에서 발생되는 악취를 유의적으로 제거할 수 있다.
As a result of the above experiment, when the malodor generating microorganisms in the air conditioner are removed by chemical or physical methods to form only the microorganisms which do not cause malodor, the odor generated in the air conditioner is significantly .

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the present invention. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

한국미생물보존센터Korea Microorganism Conservation Center KCCM11689PKCCM11689P 2015041720150417 한국미생물보존센터Korea Microorganism Conservation Center KCCM11690PKCCM11690P 2015041720150417 한국미생물보존센터Korea Microorganism Conservation Center KCCM11691PKCCM11691P 2015041720150417 한국미생물보존센터Korea Microorganism Conservation Center KCCM11692PKCCM11692P 2015041720150417 한국미생물보존센터Korea Microorganism Conservation Center KCCM11693PKCCM11693P 2015041720150417 한국미생물보존센터Korea Microorganism Conservation Center KCCM11694PKCCM11694P 2015041720150417

<110> Hyundai Motor Company <120> Method for Screening Antimicrobial Agents against Pelomonas puraquae <160> 6 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1460 <212> DNA <213> Pelomonas puraquae HKMC-113 <220> <221> rRNA <222> (1)..(1460) <223> 16s rRNA <400> 1 tggctcagat tgaacgctgg cggcatgcct tacacatgca agtcgaacgg taacaggtta 60 agctgacgag tggcgaacgg gtgagtaata tatcggaacg tgcccagtcg tgggggataa 120 ctgctcgaaa gagcagctaa taccgcatac gacctgaggg tgaaagcggg ggatcgcaag 180 acctcgcgcg attggagcgg ccgatatcag attaggtagt tggtggggta aaagcctacc 240 aagccaacga tctgtagctg gtctgagagg acgaccagcc acactgggac tgagacacgg 300 cccagactcc tacgggaggc agcagtgggg aattttggac aatggacgca agtctgatcc 360 agccatgccg cgtgcgggaa gaaggccttc gggttgtaaa ccgcttttgt cagggaagaa 420 aaggttctgg ttaatacctg gaactcatga cggtacctga agaataagca ccggctaact 480 acgtgccagc agccgcggta atacgtaggg tgcaagcgtt aatcggaatt actgggcgta 540 aagcgtgcgc aggcggttat gcaagacaga tgtgaaatcc ccgggctcaa cctgggaact 600 gcatttgtga ctgcatggct agagtgcggc agagggggat ggaattccgc gtgtagcagt 660 gaaatgcgta gatatgcgga ggaacaccga tggcgaaggc aatcccctgg gcctgcactg 720 acgctcatgc acgaaagcgt ggggagcaaa caggattaga taccctggta gtccacgccc 780 taaacgatgt caactggttg ttgggagggt ttcttctcag taacgtagct aacgcgtgaa 840 gttgaccgcc tggggagtac ggccgcaagg ttgaaactca aaggaattga cggggacccg 900 cacaagcggt ggatgatgtg gtttaattcg atgcaacgcg aaaaacctta cctacccttg 960 acatgtctgg aatcctgaag agatttggga gtgctcgaaa gagagccaga acacaggtgc 1020 tgcatggccg tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa 1080 cccttgtcat tagttgctac gaaagggcac tctaatgaga ctgccggtga caaaccggag 1140 gaaggtgggg atgacgtcag gtcatcatgg cccttatggg tagggctaca cacgtcatac 1200 aatggccggg acagagggct gccaacccgc gagggggagc taatcccaga aacccggtcg 1260 tagtccggat cgtagtctgc aactcgactg cgtgaagtcg gaatcgctag taatcgcgga 1320 tcagcttgcc gcggtgaata cgttcccggg tcttgtacac accgcccgtc acaccatggg 1380 agcgggttct gccagaagta gttagcctaa ccgcaaggag ggcgattacc acggcagggt 1440 tcgtgactgg ggtgaagtcg 1460 <210> 2 <211> 1451 <212> DNA <213> Spirosoma radiotolerans HKMC-114 <220> <221> rRNA <222> (1)..(1451) <223> 16s rRNA <400> 2 tttgatcatg gctcaggatg aacgctagcg gcaggcctaa tacatgcaag tcgaacgggt 60 cgcaagacca gtggcaaacg ggtgcgtaac gcgtaagcaa cctgcctcat actgggggat 120 agcccggcga aagctggggt aaacccgcac ggtcccctga actcacctgg gttttggggt 180 aaacatttat gggtatgaga ggggcttgcg tctgattagt tagttggcag ggtaacggcc 240 taccaagacg atgatcagta ggggttctga gaggattggc ccccacatgg gtactgagat 300 acggacccaa ctcctacggg aggcagcagt agggaatatt gggcaatgga ggcaactctg 360 acccagccat gccgcgtgca ggatgaaggc gctcagcgtt gtaaactgct tttatcgatg 420 aagaactgta gatctgcgga tttatttgac ggtaatcgag gaataagcac cggctaactc 480 cgtgccagca gccgcggtaa tacggagggt gcgagcgttg tccggattta ttgggtttaa 540 agggtgcgta ggtgggatcg taagtctgat ttgaaagcag gcggcttaac cgtctgatgt 600 ggttggaaac tgcggttctt gaatgggttg gcggtagccg gaatgggtca tgtagcggtg 660 aaatgcatag atatgacccg gaacaccgat tgcgaaggca ggctactacg acttgattga 720 cactgaggca cgagagcatg ggtagcgaac aggattagat accctggtag tccatgccgt 780 aaacgatgat tactggctgt ttgcccgata gggtgagtgg ctgagcgaaa gcgttaagta 840 atccacctgg ggagtacgct ggcaacagtg aaactcaaag gaattgacgg gggtccgcac 900 aagcggtgga gcatgtggtt taattcgatg atacgcgagg aaccttacct gggctagaat 960 gtgcgtgaag gtatcagaaa tggtgccgtg tagcaataca cacaaaacaa ggtgctgcat 1020 ggctgtcgtc agctcgtgcc gtgaggtgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaacccct 1080 gtacttagtt gccagcatgt aatgatgggc actctaagta gactgcctgc gcaagcagag 1140 aggaaggagg ggacgacgtc aagtcatcat ggcccttacg cccagggcga cacacgtgct 1200 acaatggtcg gtacagcggg tcgctacaca gtaatgtgat gccaatcttg taaagccggt 1260 cacagttcgg attggggtct gcaacccgac cccatgaagc tggaatcgct agtaatcgcg 1320 catcagccat ggcgcggtga atacgttccc ggaccttgta cacaccgccc gtcaagccat 1380 gggagttggg gggacctgaa ggtcggtatg atagccgggc aagggtaaac tcggtaacta 1440 gggctaagtc g 1451 <210> 3 <211> 1457 <212> DNA <213> Fibrella aestuarina HKMC-115 <220> <221> rRNA <222> (1)..(1457) <223> 16s rRNA <400> 3 tttgatcatg gctcaggatg aacgctagcg gcaggcctaa tacatgcaag tcgagcgggt 60 agcaatacca gcggcaaacg ggtgcgtaac gcgtaaataa cctgccctca actgggagat 120 agctttgcga aagcggaggt aataccccat agtcttcttg gttcacctgg actgattagt 180 aaagcagcaa tgtggttgag gagggatttg cgtctgatta gttagttggc agggtagtgg 240 cctaccaaga cgatgatcag tcggggctct gagaggaggg tcccccacat gggcactgag 300 acacgggccc aactcctacg ggaggcagca gtagggaata ttgggcaatg ggcggaagcc 360 tgacccagcc atgccgcgtg ccggatgaag gccctctggg ttgtaaacgg cttttatctg 420 ggaagaagag cagggatgcg tccctgtgtg acggtaccag aggaatcagc accggctaac 480 tccgtgccag cagccgcggt aatacggagg gtgcaagcgt tgtccggatt tattgggttt 540 aaagggtgcg taggtggcct gataagtcag ctttgaaagt ggcttgctta acaagacagg 600 gtgggttgat actgtcaggc ttgaatggga tggaggttac tggaacgggt cgtgtagcgg 660 tgaaatgcat agatatgacc cagaactcca attgcgaagg caggtggcta catcccgatt 720 gacactgagg cacgagagca tggggagcaa acaggattag ataccctggt agtccatgcc 780 gtaaacgatg ataactgact gtgtgatttt cggattgcgt ggttaagcga aagcgttaag 840 ttatccacct ggggagtacg ccggcaacgg tgaaactcaa aggaattgac gggggtccgc 900 acaagcggtg gagcatgtgg tttaattcga tgatacgcga ggaaccttac ccggattaga 960 atgcgcgtga agtactcaga gatgggtacg tccagcaatg gacacaaagc aaggtgctgc 1020 atggctgtcg tcagctcgtg ccgtgaggtg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc 1080 ctggaatcag ttgccagcac gtcaaggtgg ggactctggt tcgactgcct gcgcaagcag 1140 agaggaaggc ggggacgacg tcaagtcatc atggccctta catccggggc gacacacgtg 1200 ctacaatggc cggtacagcg ggtcacgatc ccgcaagggg gagtcaatct cagcaaagcc 1260 ggtcacagtt cggattgggg tctgcaactc gaccccatga agctggaatc gctagtaatc 1320 gcgcatcagc catggcgcgg tgaatacgtt cccggacctt gtacacaccg cccgtcaagc 1380 catgggagtc ggggggacct gaagcggggt gtcacatccc ttcaagggta aatctggcga 1440 ctggggctaa gtcgtaa 1457 <210> 4 <211> 1457 <212> DNA <213> Chryseobacterium geocarposphaerae HKMC-116 <220> <221> rRNA <222> (1)..(1457) <223> 16s rRNA <400> 4 tggctcagga tgaacgctag cgggaggcct aacacatgca agctgagcgg tagagttcct 60 tcggggactt gagagcggcg tacgggtgcg gaacacgtgt gcaacctgcc tttatcaggg 120 ggatagcctt tcgaaaggaa gattaatacc ccataatata attgatggca tcattgatta 180 ttgaaaactc cggtggataa agatgggcac gcgcaagatt agatagttgg tgaggtaacg 240 gctcaccaag tcgatgatct ttagggggcc tgagagggtg atccccccac actggtactg 300 agacacggac cagactccta cgggaggcag cagtgaggaa tattggacaa tgggttagcg 360 cctgatccag ccatcccgcg tgaaggacga cggccctatg ggttgtaaac ttcttttgta 420 cagggataaa cctttccacg tgtggaaagc tgaaggtact gtacgaataa gcaccggcta 480 actccgtgcc agcagccgcg gtaatacgga gggtgcaagc gttatccgga tttattgggt 540 ttaaagggtc cgtaggcgga tctgtaagtc agtggtgaaa tctcacagct taactgtgaa 600 actgccattg atactgcagg tcttgagtaa ggtagaagtg gctggaataa gtagtgtagc 660 ggtgaaatgc atagatatta cttagaacac caattgcgaa ggcaggtcac tatgtcttaa 720 ctgacgctga tggacgaaag cgtggggagc gaacaggatt agataccctg gtagtccacg 780 ctgtaaacga tgcttactcg tttttgggct ttcgggttca gagactaagc gaaagtgata 840 agtaagccac ctggggagta cgaacgcaag tttgaaactc aaaggaattg acgggggccc 900 gcacaagcgg tggattatgt ggtttaattc gatgatacgc gaggaacctt accaaggctt 960 aaatgggaat tgatcggttt agaaatagac cttccttcgg gcaattttca aggtgctgca 1020 tggttgtcgt cagctcgtgc cgtgaggtgt taggttaagt cctgcaacga gcgcaacccc 1080 tgtcactagt tgccatcatt aagttgggga ctctagtgag actgcctacg caagtagaga 1140 ggaaggtggg gatgacgtca aatcatcacg gcccttacgc cttgggccac acacgtaata 1200 caatggccgg tacagagggc agctacacag cgatgtgatg caaatctcga aagccggtct 1260 cagttcggat tggagtctgc aactcgactc tatgaagctg gaatcgctag taatcgcgca 1320 tcagccatgg cgcggtgaat acgttcccgg gccttgtaca caccgcccgt caagccatgg 1380 aagtctgggg tacctgaagt cggtgaccgt aaaaggagct gcctagggta aaacaggtaa 1440 ctagggctaa gtcgtaa 1457 <210> 5 <211> 1443 <212> DNA <213> Spirosoma linguale HKMC-117 <220> <221> rRNA <222> (1)..(1443) <223> 16s rRNA <400> 5 tggctcagga tgaacgctag cggcaggcct aatacatgca agtcgaacgg gccgcaaggt 60 cagtggcaaa cgggtgcgta acgcgtaagc aacctgccct caactggggg atagcccggc 120 gaaagctggg gtaaacccgc acggtcccac ggaatcacct ggttttttgg gtaaacattt 180 atgggttgag gaggggcttg cgtctgatta gctagttggc ggggtaacgg cccaccaagg 240 cgatgatcag taggggttct gagaggattg gcccccacat gggtactgag atacggaccc 300 aactcctacg ggaggcagca gtagggaata ttgggcaatg ggcgcaagcc tgacccagcc 360 atgccgcgtg caggatgaag gcgctcagcg ttgtaaactg cttttatcgg tgaagaacgg 420 cagtcctgcg ggattgtgtg acggtagccg aggaataagc accggctaac tccgtgccag 480 cagccgcggt aatacggagg gtgcaagcgt tgtccggatt tattgggttt aaagggtgcg 540 taggtggtcg tctaagtctg gttttaaagt tggctgctta acagtcaaag gtggctggaa 600 actggacgac ttgaatggga tggcggtagc cggaatgggt catgtagcgg tgaaatgcat 660 agatatgacc cggaacaccg attgcgaagg caggctacta cgtcccgatt gacactgagg 720 cacgagagca tgggtagcga acaggattag ataccctggt agtccatgcc gtaaacgatg 780 attactggct gtgtggtctt tgggctgcgt ggctgagcga aagcgttaag taatccacct 840 ggggagtacg ctggcaacag tgaaactcaa aggaattgac gggggtccgc acaagcggtg 900 gagcatgtgg tttaattcga tgatacgcga ggaaccttac ctgggctaga atgtgaagga 960 agttatcaga aatggtagcg tgtagcaata cacctgaaac aaggtgctgc atggctgtcg 1020 tcagctcgtg ccgtgaggtg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc ctatgatttg 1080 ttgccagcat gtaatgatgg ggactcaagt cagactgcct gcgcaagcag agaggaagga 1140 ggggacgacg tcaagtcatc atggccctta cgcccagggc gacacacgtg ctacaatggt 1200 cggtacagcg ggtagcgaaa cggtaacgtt gagccaatct tgtaaagccg gtcacagttc 1260 ggattggggt ctgcaacccg accccatgaa gctggaatcg ctagtaatcg cgcatcagcc 1320 atggcgcggt gaatacgttc ccggaccttg tacacaccgc ccgtcaagcc atgggagttg 1380 gggggacctg aagttcggtg tgacatccgg acaagggtaa actcggcgac tggggctaag 1440 tcg 1443 <210> 6 <211> 478 <212> DNA <213> Geobacillus toebii HKMC-118 <220> <221> rRNA <222> (1)..(478) <223> 16s rRNA <400> 6 catggctcag gacgaacgct ggcggcgtgc ctaatacatg caagtcgagc ggaccgaacg 60 gaagcttgct tctgtttggt tagcggcgga cgggtgagta acacgtgggt aacctgcccg 120 taagaccggg ataactccgg gaaaccgggg ctaataccgg ataacaccga agaccgcatg 180 gtcttcggtt gaaaggtggc ttttgctacc acttacggat gggcccgcgg cgcattagct 240 agttggtgag gtaacggctc accaaggcga cgatgcgtag ccggcctgag agggtgaccg 300 gccacactgg gactgagaca cggcccagac tcctacggga ggcagcagta gggaatcttc 360 cgcaatggac gaaagtctga cggagcgacg ccgcgtgagc gaagaaggtc ttcggatcgt 420 aaagctctgt tgttagggaa gaagaagtac cgttcgaata gggcggtacg gtgacgta 478 <110> Hyundai Motor Company <120> Method for Screening Antimicrobial Agents against Pelomonas          puraquae <160> 6 <170> Kopatentin 1.71 <210> 1 <211> 1460 <212> DNA <213> Pelomonas puraquae HKMC-113 <220> <221> rRNA &Lt; 222 > (1) .. (1460) <223> 16s rRNA <400> 1 tggctcagat tgaacgctgg cggcatgcct tacacatgca agtcgaacgg taacaggtta 60 agctgacgag tggcgaacgg gtgagtaata tatcggaacg tgcccagtcg tgggggataa 120 ctgctcgaaa gagcagctaa taccgcatac gacctgaggg tgaaagcggg ggatcgcaag 180 acctcgcgcg attggagcgg ccgatatcag attaggtagt tggtggggta aaagcctacc 240 aagccaacga tctgtagctg gtctgagagg acgaccagcc acactgggac tgagacacgg 300 cccagactcc tacgggaggc agcagtgggg aattttggac aatggacgca agtctgatcc 360 agccatgccg cgtgcgggaa gaaggccttc gggttgtaaa ccgcttttgt cagggaagaa 420 aaggttctgg ttaatacctg gaactcatga cggtacctga agaataagca ccggctaact 480 acgtgccagc agccgcggta atacgtaggg tgcaagcgtt aatcggaatt actgggcgta 540 aagcgtgcgc aggcggttat gcaagacaga tgtgaaatcc ccgggctcaa cctgggaact 600 gcatttgtga ctgcatggct agagtgcggc agagggggat ggaattccgc gtgtagcagt 660 gaaatgcgta gatatgcgga ggaacaccga tggcgaaggc aatcccctgg gcctgcactg 720 acgctcatgc acgaaagcgt ggggagcaaa caggattaga taccctggta gtccacgccc 780 taaacgatgt caactggttg ttgggagggt ttcttctcag taacgtagct aacgcgtgaa 840 gttgaccgcc tggggagtac ggccgcaagg ttgaaactca aaggaattga cggggacccg 900 cacaagcggt ggatgatgtg gtttaattcg atgcaacgcg aaaaacctta cctacccttg 960 acatgtctgg aatcctgaag agatttggga gtgctcgaaa gagagccaga acacaggtgc 1020 tgcatggccg tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa 1080 cccttgtcat tagttgctac gaaagggcac tctaatgaga ctgccggtga caaaccggag 1140 gaaggtgggg atgacgtcag gtcatcatgg cccttatggg tagggctaca cacgtcatac 1200 aatggccggg acagagggct gccaacccgc gagggggagc taatcccaga aacccggtcg 1260 tagtccggat cgtagtctgc aactcgactg cgtgaagtcg gaatcgctag taatcgcgga 1320 tcagcttgcc gcggtgaata cgttcccggg tcttgtacac accgcccgtc acaccatggg 1380 agcgggttct gccagaagta gttagcctaa ccgcaaggag ggcgattacc acggcagggt 1440 tcgtgactgg ggtgaagtcg 1460 <210> 2 <211> 1451 <212> DNA <213> Spirosoma radiotolerans HKMC-114 <220> <221> rRNA <222> (1). (1451) <223> 16s rRNA <400> 2 tttgatcatg gctcaggatg aacgctagcg gcaggcctaa tacatgcaag tcgaacgggt 60 cgcaagacca gtggcaaacg ggtgcgtaac gcgtaagcaa cctgcctcat actgggggat 120 agcccggcga aagctggggt aaacccgcac ggtcccctga actcacctgg gttttggggt 180 aaacatttat gggtatgaga ggggcttgcg tctgattagt tagttggcag ggtaacggcc 240 taccaagacg atgatcagta ggggttctga gaggattggc ccccacatgg gtactgagat 300 acggacccaa ctcctacggg aggcagcagt agggaatatt gggcaatgga ggcaactctg 360 acccagccat gccgcgtgca ggatgaaggc gctcagcgtt gtaaactgct tttatcgatg 420 aagaactgta gatctgcgga tttatttgac ggtaatcgag gaataagcac cggctaactc 480 cgtgccagca gccgcggtaa tacggagggt gcgagcgttg tccggattta ttgggtttaa 540 agggtgcgta ggtgggatcg taagtctgat ttgaaagcag gcggcttaac cgtctgatgt 600 ggttggaaac tgcggttctt gaatgggttg gcggtagccg gaatgggtca tgtagcggtg 660 aaatgcatag atatgacccg gaacaccgat tgcgaaggca ggctactacg acttgattga 720 cactgaggca cgagagcatg ggtagcgaac aggattagat accctggtag tccatgccgt 780 aaacgatgat tactggctgt ttgcccgata gggtgagtgg ctgagcgaaa gcgttaagta 840 atccacctgg ggagtacgct ggcaacagtg aaactcaaag gaattgacgg gggtccgcac 900 aagcggtgga gcatgtggtt taattcgatg atacgcgagg aaccttacct gggctagaat 960 gtgcgtgaag gtatcagaaa tggtgccgtg tagcaataca cacaaaacaa ggtgctgcat 1020 ggctgtcgtc agctcgtgcc gtgaggtgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaacccct 1080 gtacttagtt gccagcatgt aatgatgggc actctaagta gactgcctgc gcaagcagag 1140 aggaaggagg ggacgacgtc aagtcatcat ggcccttacg cccagggcga cacacgtgct 1200 acaatggtcg gtacagcggg tcgctacaca gtaatgtgat gccaatcttg taaagccggt 1260 cacagttcgg attggggtct gcaacccgac cccatgaagc tggaatcgct agtaatcgcg 1320 catcagccat ggcgcggtga atacgttccc ggaccttgta cacaccgccc gtcaagccat 1380 gggagttggg gggacctgaa ggtcggtatg atagccgggc aagggtaaac tcggtaacta 1440 gggctaagtc g 1451 <210> 3 <211> 1457 <212> DNA <213> Fibrella aestuarina HKMC-115 <220> <221> rRNA &Lt; 222 > (1) .. 1457 <223> 16s rRNA <400> 3 tttgatcatg gctcaggatg aacgctagcg gcaggcctaa tacatgcaag tcgagcgggt 60 agcaatacca gcggcaaacg ggtgcgtaac gcgtaaataa cctgccctca actgggagat 120 agctttgcga aagcggaggt aataccccat agtcttcttg gttcacctgg actgattagt 180 aaagcagcaa tgtggttgag gagggatttg cgtctgatta gttagttggc agggtagtgg 240 cctaccaaga cgatgatcag tcggggctct gagaggaggg tcccccacat gggcactgag 300 acacgggccc aactcctacg ggaggcagca gtagggaata ttgggcaatg ggcggaagcc 360 tgacccagcc atgccgcgtg ccggatgaag gccctctggg ttgtaaacgg cttttatctg 420 ggaagaagag cagggatgcg tccctgtgtg acggtaccag aggaatcagc accggctaac 480 tccgtgccag cagccgcggt aatacggagg gtgcaagcgt tgtccggatt tattgggttt 540 aaagggtgcg taggtggcct gataagtcag ctttgaaagt ggcttgctta acaagacagg 600 gtgggttgat actgtcaggc ttgaatggga tggaggttac tggaacgggt cgtgtagcgg 660 tgaaatgcat agatatgacc cagaactcca attgcgaagg caggtggcta catcccgatt 720 gacactgagg cacgagagca tggggagcaa acaggattag ataccctggt agtccatgcc 780 gtaaacgatg ataactgact gtgtgatttt cggattgcgt ggttaagcga aagcgttaag 840 ttatccacct ggggagtacg ccggcaacgg tgaaactcaa aggaattgac gggggtccgc 900 acaagcggtg gagcatgtgg tttaattcga tgatacgcga ggaaccttac ccggattaga 960 atgcgcgtga agtactcaga gatgggtacg tccagcaatg gacacaaagc aaggtgctgc 1020 atggctgtcg tcagctcgtg ccgtgaggtg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc 1080 ctggaatcag ttgccagcac gtcaaggtgg ggactctggt tcgactgcct gcgcaagcag 1140 agaggaaggc ggggacgacg tcaagtcatc atggccctta catccggggc gacacacgtg 1200 ctacaatggc cggtacagcg ggtcacgatc ccgcaagggg gagtcaatct cagcaaagcc 1260 ggtcacagtt cggattgggg tctgcaactc gaccccatga agctggaatc gctagtaatc 1320 gcgcatcagc catggcgcgg tgaatacgtt cccggacctt gtacacaccg cccgtcaagc 1380 catgggagtc ggggggacct gaagcggggt gtcacatccc ttcaagggta aatctggcga 1440 ctggggctaa gtcgtaa 1457 <210> 4 <211> 1457 <212> DNA <213> Chryseobacterium geocarposphaerae HKMC-116 <220> <221> rRNA &Lt; 222 > (1) .. 1457 <223> 16s rRNA <400> 4 tggctcagga tgaacgctag cgggaggcct aacacatgca agctgagcgg tagagttcct 60 tcggggactt gagagcggcg tacgggtgcg gaacacgtgt gcaacctgcc tttatcaggg 120 ggatagcctt tcgaaaggaa gattaatacc ccataatata attgatggca tcattgatta 180 ttgaaaactc cggtggataa agatgggcac gcgcaagatt agatagttgg tgaggtaacg 240 gctcaccaag tcgatgatct ttagggggcc tgagagggtg atccccccac actggtactg 300 agacacggac cagactccta cgggaggcag cagtgaggaa tattggacaa tgggttagcg 360 cctgatccag ccatcccgcg tgaaggacga cggccctatg ggttgtaaac ttcttttgta 420 cagggataaa cctttccacg tgtggaaagc tgaaggtact gtacgaataa gcaccggcta 480 actccgtgcc agcagccgcg gtaatacgga gggtgcaagc gttatccgga tttattgggt 540 ttaaagggtc cgtaggcgga tctgtaagtc agtggtgaaa tctcacagct taactgtgaa 600 actgccattg atactgcagg tcttgagtaa ggtagaagtg gctggaataa gtagtgtagc 660 ggtgaaatgc atagatatta cttagaacac caattgcgaa ggcaggtcac tatgtcttaa 720 ctgacgctga tggacgaaag cgtggggagc gaacaggatt agataccctg gtagtccacg 780 ctgtaaacga tgcttactcg tttttgggct ttcgggttca gagactaagc gaaagtgata 840 agtaagccac ctggggagta cgaacgcaag tttgaaactc aaaggaattg acgggggccc 900 gcacaagcgg tggattatgt ggtttaattc gatgatacgc gaggaacctt accaaggctt 960 aaatgggaat tgatcggttt agaaatagac cttccttcgg gcaattttca aggtgctgca 1020 tggttgtcgt cagctcgtgc cgtgaggtgt taggttaagt cctgcaacga gcgcaacccc 1080 tgtcactagt tgccatcatt aagttgggga ctctagtgag actgcctacg caagtagaga 1140 ggaaggtggg gatgacgtca aatcatcacg gcccttacgc cttgggccac acacgtaata 1200 caatggccgg tacagagggc agctacacag cgatgtgatg caaatctcga aagccggtct 1260 cagttcggat tggagtctgc aactcgactc tatgaagctg gaatcgctag taatcgcgca 1320 tcagccatgg cgcggtgaat acgttcccgg gccttgtaca caccgcccgt caagccatgg 1380 aagtctgggg tacctgaagt cggtgaccgt aaaaggagct gcctagggta aaacaggtaa 1440 ctagggctaa gtcgtaa 1457 <210> 5 <211> 1443 <212> DNA <213> Spirosoma linguale HKMC-117 <220> <221> rRNA &Lt; 222 > (1) .. (1443) <223> 16s rRNA <400> 5 tggctcagga tgaacgctag cggcaggcct aatacatgca agtcgaacgg gccgcaaggt 60 cagtggcaaa cgggtgcgta acgcgtaagc aacctgccct caactggggg atagcccggc 120 gaaagctggg gtaaacccgc acggtcccac ggaatcacct ggttttttgg gtaaacattt 180 atgggttgag gaggggcttg cgtctgatta gctagttggc ggggtaacgg cccaccaagg 240 cgatgatcag taggggttct gagaggattg gcccccacat gggtactgag atacggaccc 300 aactcctacg ggaggcagca gtagggaata ttgggcaatg ggcgcaagcc tgacccagcc 360 atgccgcgtg caggatgaag gcgctcagcg ttgtaaactg cttttatcgg tgaagaacgg 420 cagtcctgcg ggattgtgtg acggtagccg aggaataagc accggctaac tccgtgccag 480 cagccgcggt aatacggagg gtgcaagcgt tgtccggatt tattgggttt aaagggtgcg 540 taggtggtcg tctaagtctg gttttaaagt tggctgctta acagtcaaag gtggctggaa 600 actggacgac ttgaatggga tggcggtagc cggaatgggt catgtagcgg tgaaatgcat 660 agatatgacc cggaacaccg attgcgaagg caggctacta cgtcccgatt gacactgagg 720 cacgagagca tgggtagcga acaggattag ataccctggt agtccatgcc gtaaacgatg 780 attactggct gtgtggtctt tgggctgcgt ggctgagcga aagcgttaag taatccacct 840 ggggagtacg ctggcaacag tgaaactcaa aggaattgac gggggtccgc acaagcggtg 900 gagcatgtgg tttaattcga tgatacgcga ggaaccttac ctgggctaga atgtgaagga 960 agttatcaga aatggtagcg tgtagcaata cacctgaaac aaggtgctgc atggctgtcg 1020 tcagctcgtg ccgtgaggtg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc ctatgatttg 1080 ttgccagcat gtaatgatgg ggactcaagt cagactgcct gcgcaagcag agaggaagga 1140 ggggacgacg tcaagtcatc atggccctta cgcccagggc gacacacgtg ctacaatggt 1200 cggtacagcg ggtagcgaaa cggtaacgtt gagccaatct tgtaaagccg gtcacagttc 1260 cgcatcagcc 1320 atggcgcggt gaatacgttc ccggaccttg tacacaccgc ccgtcaagcc atgggagttg 1380 gggggacctg aagttcggtg tgacatccgg acaagggtaa actcggcgac tggggctaag 1440 tcg 1443 <210> 6 <211> 478 <212> DNA <213> Geobacillus toebii HKMC-118 <220> <221> rRNA &Lt; 222 > (1) .. (478) <223> 16s rRNA <400> 6 catggctcag gacgaacgct ggcggcgtgc ctaatacatg caagtcgagc ggaccgaacg 60 gaagcttgct tctgtttggt tagcggcgga cgggtgagta acacgtgggt aacctgcccg 120 taagaccggg ataactccgg gaaaccgggg ctaataccgg ataacaccga agaccgcatg 180 gtcttcggtt gaaaggtggc ttttgctacc acttacggat gggcccgcgg cgcattagct 240 agttggtgag gtaacggctc accaaggcga cgatgcgtag ccggcctgag agggtgaccg 300 gccacactgg gactgagaca cggcccagac tcctacggga ggcagcagta gggaatcttc 360 cgcaatggac gaaagtctga cggagcgacg ccgcgtgagc gaagaaggtc ttcggatcgt 420 aaagctctgt tgttagggaa gaagaagtac cgttcgaata gggcggtacg gtgacgta 478

Claims (17)

지오바실러스 퇴비( Geobacillus toebii )가 공조장치 내에서 발생시키는 악취를 저감시키기 위한 공조장치 내 악취저감용 항균제의 스크리닝 방법으로서,
(a)상기 지오바실러스 퇴비 또는 이의 배양물을 준비하는 단계;
(b)상기 지오바실러스 퇴비 또는 이의 배양물에 시료를 접촉시키는 단계;
(c)상기 지오바실러스 퇴비의 생육 억제를 측정하는 단계; 및
(d)상기 지오바실러스 퇴비의 생육이 억제되었을 때, 상기 시료가 상기 지오바실러스 퇴비가 발생시키는 공조장치 내 악취를 저감 시키는 항균활성을 갖는 것으로 판별하는 단계;
를 포함하는 공조장치 내 악취저감용 항균제의 스크리닝 방법.
Geo Bacillus compost (Geobacillus toebii) is a screening method of the antimicrobial agent for reducing odor in the air conditioning apparatus for reducing the occurrence of odor in the air conditioner,
(a) preparing the above-mentioned Geobacillus compost or a culture thereof;
(b) contacting the sample to the Geobacillus compost or culture thereof;
(c) measuring inhibition of growth of the Geobacillus compost ; And
(d) determining that the sample has an antimicrobial activity to reduce the odor in the air conditioner generated by the Geobacillus compost when the growth of the Geobacillus compost is inhibited;
And a method for screening an odor-reducing antimicrobial agent in an air conditioner.
제 1 항에 있어서, 상기 공조장치는 에어컨인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
The screening method according to claim 1, wherein the air conditioner is an air conditioner.
제 1 항에 있어서, 상기 지오바실러스 퇴비는 공조장치 내 에바코어에 바이오필름을 형성하여 악취를 유발하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
According to claim 1, wherein said geo Bacillus compost is a screening method which comprises causing the odor to form a biofilm in the EVA core air conditioner.
제 3 항에 있어서, 상기 에바코어는 재질이 알루미늄, 알루미늄 합금, 동 또는 동 합금인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
4. The screening method according to claim 3, wherein the eva core is made of aluminum, aluminum alloy, copper or copper alloy.
제 1 항에 있어서, 상기 지오바실러스 퇴비지오바실러스 퇴비( Geobacillus toebii ) HKMC-118 (기탁번호:KCCM11694P)인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
The method of claim 1, wherein the Geobacillus compost is selected from the group consisting of Geobacillus toebii) HKMC-118 (Accession No: KCCM11694P) a screening method characterized in that the.
제 1 항에 있어서, 상기 항균제는 피브렐라 에어스투아리나( Fibrella aestuarina) 에 대한 항균활성을 추가적으로 보유하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
The method of claim 1 wherein the antimicrobial agent is a screening method characterized in that additionally holding the antimicrobial activity of the blood Brela air Stu arena (Fibrella aestuarina).
제 6 항에 있어서, 상기 피브렐라 에어스투아리나피브렐라 에어스투아리나( Fibrella aestuarina ) HKMC-115 (기탁번호: KCCM11691P)인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
7. The method according to claim 6 , Air Stu arena is blood Brela air Stu arena (Fibrella aestuarina ) HKMC-115 (accession number: KCCM11691P).
제 1 항에 있어서, 상기 항균제는 스피로소마 링구얼 ( Spirosoma linguale ), 및 스피로소마 라디오톨러런스( Spirosoma radiotolerans )로 구성된 군으로부터 선택되는 1 이상의 스피로소마 속 미생물에 대한 항균활성을 추가적으로 보유하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
The method of claim 1 wherein the antimicrobial agent is spiro Soma Ringgu Earl (Spirosoma linguale), and Spiro radio Soma tolerance (Spirosoma at least one selected from the group consisting of radiotolerans) spiro Soma Wherein the microorganism further has an antimicrobial activity against the genus Microorganism.
제 8 항에 있어서, 상기 스피로소마 속 미생물은 스피로소마 링구얼( Spirosoma linguale ) HKMC-117(기탁번호: KCCM11693P), 및 스피로소마 라디오톨러런스( Spirosoma radiotolerans ) HKMC-114(기탁번호: KCCM11690P)로 구성된 군으로부터 선택되는 1 이상인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
The method of claim 8, wherein the spiro Soma Microorganisms in Spiro Soma ringgu Earl (Spirosoma linguale) HKMC-117 (Accession No: KCCM11693P), and spiro Soma radio tolerance (Spirosoma radiotolerans) HKMC-114 (Accession No: KCCM11690P) a screening method characterized in that at least one selected from the group consisting of.
제 1 항에 있어서, 상기 항균제는 크리세오박테리움 지오카포스페레 (Chryseobacterium geocarposphaerae )에 대한 항균활성을 추가적으로 보유하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
The method of claim 1, wherein the antimicrobial agent is selected from the group consisting of Chrysosobacterium A screening method characterized in that additionally holding the antimicrobial activity of the geo-car forces ferret (Chryseobacterium geocarposphaerae).
제 10 항에 있어서, 상기 크리세오박테리움 지오카포스페레 크리세오박테 리움 지오카포스페레 ( Chryseobacterium geocarposphaerae ) HKMC-116(기탁번호: KCCM11692P) 인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
11. The method of claim 10, wherein Cri Seo tumefaciens Geocafos Ferre Is Cri Seo tumefaciens geo-car forces ferret (Chryseobacterium geocarposphaerae ) HKMC-116 (accession number: KCCM11692P).
제 1 항에 있어서, 상기 항균제는 페로모나스 푸라퀘 ( Pelomonas puraquae ) 에 대한 항균활성을 추가적으로 보유하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
The method of claim 1, wherein the antimicrobial agent is feromonas Furanyl Quebec (Pelomonas lt ; RTI ID = 0.0 & gt; puraquae. & lt ; / RTI & gt ;
제 12 항에 있어서, 상기 페로모나스 푸라퀘페로모나스 푸라퀘( Pelomonas puraquae) HKMC-113(기탁번호: KCCM11689P)인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법.
13. The method of claim 12, wherein the ferromonus Furanyl Quebec is Perot Pseudomonas furanyl Quebec (Pelomonas puraquae) HKMC-113 (Accession No: KCCM11689P) a screening method characterized in that the.
삭제delete 삭제delete 공조장치 내에서 악취 유발 미생물인 지오바실러스 퇴비( Geobacillus toebii)를 상기 공조장치로부터 분리 또는 사멸시키는 단계를 포함하는 공조장치 내 악취 제거 방법.
The odor-causing microorganisms in compost Geo Bacillus (Geobacillus toebii) in the air conditioning system method within a deodorizing air conditioner, comprising the step of separating or death from the air conditioner.
공조장치 내에서 악취 유발 미생물인 지오바실러스 퇴비( Geobacillus toebii)의 생육을 억제시키는 단계를 포함하는 공조장치 내 악취 제거 방법.
Method in deodorizing the air conditioning apparatus, comprising the step of inhibiting the growth of odor-causing microorganisms in compost Geo Bacillus (Geobacillus toebii) in the air conditioner.
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