KR101750909B1 - Water-soluble cutting oil comprising culture medium of photosynthetic bacteria - Google Patents

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Abstract

본 발명은 광합성 세균 배양액을 포함하는 방청능 및 내부패성이 증진된 수용성 절삭유에 관한 것이다. 상기 광합성 세균 배양액을 포함하는 수용성 절삭유는 방부제를 포함하지 않아도 내부패성이 우수할 뿐만 아니라, 방청성이 증진되어 금속 가공에 유용하게 사용될 수 있다.The present invention relates to an anti-corrosive agent including a photosynthetic bacterial culture solution and an aqueous cutting oil with improved perishability. The water-soluble cutting oil including the photosynthetic bacterial culture liquid is not only excellent in internal perishability but also improves rustproofing property without containing a preservative and can be usefully used in metal processing.

Description

광합성 세균 배양액을 포함하는 수용성 절삭유{WATER-SOLUBLE CUTTING OIL COMPRISING CULTURE MEDIUM OF PHOTOSYNTHETIC BACTERIA}BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention [0001] The present invention relates to a water-soluble cutting oil containing a photosynthetic bacterial culture liquid,

본 발명은 광합성 세균 배양액을 포함하는 방청성 및 내부패성이 증진된 수용성 절삭유에 관한 것이다.
The present invention relates to a water-soluble cutting oil having enhanced rustproofing property and corrosion resistance including a photosynthetic bacterial culture liquid.

철, 알루미늄 및 각종 합금을 비롯한 금속, 유리, 세라믹 등을 절·연삭하기 위한 가공은, 절삭공구에 의하여 공작물로부터 불필요한 부분을 제거하는 가공작업의 하나이다. 이러한 가공작업을 통해 공작물을 원하는 형상, 치수, 혹은 표면으로 가공할 수 있다. 절삭가공의 과정에서 공작물과 공구 사이의 접촉면에서 큰 마찰이 일어나고, 이에 의해 발생하는 열에 의해서 공구나 공작물에 손상이 가거나, 가공이 원하는 대로 되지 않는 문제가 발생한다. 이 문제를 해결하기 위하여 절삭가공 시, 절삭유가 사용되고 있다. 절삭유는 공작물과 공구 사이의 마찰을 감소시켜 윤활성을 부여한다. 또한, 절삭유는 금속 공작물의 냉각 성능 향상 및 공구의 수명을 연장시킨다. 이와 같은 절삭유는 수용성 및 비-수용성 절삭유가 있다.Processing for cutting and grinding iron, aluminum, various metals, glass, ceramics and the like is one of the processing operations for removing unnecessary portions from the workpiece by the cutting tool. Through this machining operation, the workpiece can be machined into a desired shape, dimension, or surface. A large friction occurs at the contact surface between the workpiece and the tool in the course of the cutting process, the tool or the workpiece is damaged by the heat generated thereby, or the machining is not performed as desired. In order to solve this problem, cutting oil is used in the cutting process. The cutting oil reduces the friction between the workpiece and the tool to impart lubricity. Further, the cutting oil improves the cooling performance of the metal workpiece and prolongs the tool life. These cutting oils include water-soluble and non-water-soluble cutting oils.

비-수용성 절삭유는 광물유를 기초로 하여 황이나 염소를 함유하는 유제이다. 그러나 이와 같은 비-수용성 절삭유는 절삭가공 중 유제의 온도가 올라가면 발화의 위험이 있다. 또한, 고속회전 가공으로 인한 유제 입자의 비산으로 주변환경이 오염되고, 공장 바닥이 미끄러워져 안전 사고의 위험성이 증가한다. 또한, 인체 유해성이 증가하는 문제점을 갖는다. 따라서, 비-수용성 절삭유는 절삭되는 부분이 클때 주로 사용되고, 대부분이 수용성 절삭유를 사용한다.Non-water soluble cutting oil is an emulsion containing sulfur or chlorine based on mineral oil. However, such non-water soluble cutting oil has a risk of ignition if the temperature of the emulsion increases during the cutting process. In addition, the scattering of the emulsion particles due to high-speed rotation causes contamination of the surrounding environment, and the floor of the factory slips, increasing the risk of safety accidents. Further, there is a problem that the harmfulness of the human body is increased. Therefore, non-water-soluble cutting oil is mainly used when a portion to be cut is large, and water-soluble cutting oil is mostly used.

수용성 절삭유는 윤활기유, 윤활제, 극압첨가제, 지방산, 방청첨가제, 유화제, 방부제 등의 원료를 포함한다. 상기 수용성 절삭유는 물에 희석하여 사용되는데, 이로 인해 절삭 작업시 수반되는 높은 마찰열, 금속 칩(chip) 혼입, 유제의 산화 및 노화 등에 의해 방청 성능이 저하될 수 있다. 따라서, 가공된 금속의 녹발생, 또는 비철금속의 변색 또는 부식이 진행될 수 있다. 또한, 미생물에 의한 부패로 절삭유에서 악취가 발생하고, 그에 따라 빈번한 유제 교환 및 첨가제 보충으로 경제적 문제를 유발시킨다.Water soluble cutting oil includes raw materials such as lubricating oil, lubricant, extreme pressure additive, fatty acid, rust inhibitor additive, emulsifier, preservative. The water-soluble cutting oil is used by being diluted with water. As a result, the rustproofing performance may be lowered due to high frictional heat involved in the cutting operation, incorporation of a metal chip, oxidation and aging of the emulsion. Accordingly, rusting of the processed metal or discoloration or corrosion of the non-ferrous metal may proceed. Also, due to the microbial spoilage, odor is generated in the cutting oil, which frequently causes economic problems due to frequent exchange of emulsions and addition of additives.

일반적으로 절삭유의 부패를 방지하기 위하여 살균능(bactericidal activity) 또는 살진균능(fungicide activity)이 있는 물질이 방부제로서 첨가된다. 그 예로는 포르말린 또는 그 유도체, BIT, MIT, IPBC, 소듐 2-피리딘티올-1-옥사이드(sodium 2-pyridinethiol-1-oxide, C5H4NOSNa) 등이 있다. 대한민국 특허 제0134087호에서는 수용성 절삭유의 부패를 방지하기 위해 아민류의 화합물을 첨가하여 항균성이 우수한 수용성 절삭유를 제조하였다. 그러나 이와 같은 방부제는 인체에 대한 독성을 나타내는 문제점이 있다.In general, substances with bactericidal activity or fungicide activity are added as preservatives to prevent decay of cutting oil. Examples thereof include formalin or a derivative thereof, BIT, MIT, IPBC, sodium 2-pyridinethiol-1-oxide and C 5 H 4 NOSNa. In Korean Patent No. 0134087, a water-soluble cutting oil having excellent antimicrobial activity was prepared by adding a compound of amines to prevent decay of water-soluble cutting oil. However, such a preservative has a problem indicating toxicity to human body.

이에, 금속에 대한 부식방지, 절삭유의 부패방지 및 인체 유해성을 감소시키기 위한 절삭유 조성물의 개발이 연구되고 있으나, 미미한 실정이다.Accordingly, research has been conducted on the development of a cutting oil composition for preventing corrosion on metal, preventing decay of cutting oil, and reducing harmfulness to human body, but this is a trivial matter.

본 발명자들은 광합성 미생물 및 유용미생물군(EM)을 포함하고 산화 안정성 및 내부패성을 갖는 수용성 절삭유를 제조하였다.
The present inventors have produced a water-soluble cutting oil containing a photosynthetic microorganism and a group of useful microorganisms (EM) and having oxidative stability and endosperity.

대한민국 특허 제0134087호Korea Patent No. 0134087

본 발명의 목적은 인체에 유해한 방부제 대신 광합성 세균 배양액을 포함하는 수용성 절삭유를 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a water-soluble cutting oil containing a photosynthetic bacterial culture liquid in place of a preservative harmful to human body.

본 발명의 다른 목적은 상기 수용성 절삭유의 제조방법을 제공하는 것이다.
Another object of the present invention is to provide a process for producing the water-soluble cutting oil.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 광합성 세균 배양액을 포함하는 절삭유를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cutting oil including a photosynthetic bacterial culture liquid.

상기 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 광합성 세균을 1차 배양하는 단계; 상기 배양한 광합성 세균을 EM과 혼합하여 2차 배양하는 단계; 및 상기 2차 배양액을 수용성 절삭유에 혼합하는 단계를 포함하는, 방청 효과가 증진된 절삭유 제조방법을 제공한다.
According to another aspect of the present invention, there is provided a method for culturing photosynthetic bacteria, Mixing the cultured photosynthetic bacteria with EM to secondary culture; And mixing the secondary culture liquid with a water-soluble cutting oil, wherein the rust-inhibiting effect is enhanced.

본 발명의 광합성 세균 배양액을 포함하는 수용성 절삭유는 방부제를 포함하지 않아도 내부패성이 우수할 뿐만 아니라, 방청성이 증진되어 금속 가공에 유용하게 사용될 수 있다.
The water-soluble cutting oil containing the photosynthetic bacterial culture liquid of the present invention is not only excellent in internal perishability but also improves rustproofing property without containing a preservative and can be usefully used in metal processing.

도 1은 방청 효과를 비교하기 위하여, 수용성 절삭유에 못과 금속 칩을 넣은 직후 촬영한 사진이다. 구체적으로, 수용성 절삭유로서, 시판중인 삼육사의 1종1호 수용성 절삭유, 및 상기 수용성 절삭유에, 본 발명의 광합성 세균 배양액(BIOFM), 또는 시판중인 광합성 세균(A사 광합성 미생물: 아쿠아리더스 PSB(하비월드사, 한국); B사 광합성 미생물: Jell Na 광합성 미생물 생균제(한 바이오, 한국); C사 EM 발효액: EM 활성액(코넴바이오사, 한국); 및 D사 EM 발효액: EM-K(이엠팜, 한국))을 첨가한 것을 사용하였다.
도 2는 수용성 절삭유에 본 발명의 광합성 세균 배양액, 또는 시판중인 광합성 세균을 첨가하였을 때의 방청 효과를 비교한 결과 사진이다. 구체적으로, 시판중인 수용성 절삭유에 시판중인 광합성 세균을 첨가하고, 녹이 발생한 시점에 본 발명의 광합성 세균 배양액을 첨가한 수용성 절삭유와 비교한 것이다:
A: 하비월드사의 광합성 세균과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(4시간 후 촬영);
B: 한 바이오사의 광합성 세균과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(6시간 후 촬영);
C: 코넴바이오사의 EM 발효액과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(1일 후 촬영);
D: 이엠팜의 EM 발효액과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(1일 후 촬영);
E: 1차 배양한 광합성 미생물과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(6시간 후 촬영); 및
F: 음성 대조군과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(1일 후 촬영).
도 3은 수용성 절삭유에 못과 금속 칩을 넣은 직후 촬영한 사진이다. 구체적으로 시판중인 제우스사의 1종1호 수용성 절삭유, 및 상기 수용성 절삭유에, 본 발명의 광합성 세균 배양액, 또는 시판중인 광합성 세균을 첨가하였을 때 방청 효과를 비교하였다.
도 4는 본 발명의 광합성 세균 배양액, 또는 시판중인 광합성 세균의 방청 효과를 비교한 결과 사진이다. 구체적으로 시판중인 수용성 절삭유에 시판중인 광합성 세균을 첨가하고, 녹이 발생한 시점에 본 발명의 광합성 세균 배양액을 첨가한 수용성 절삭유와 비교한 것이다:
A: 하비월드사의 광합성 세균과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(2시간 후 촬영);
B: 한 바이오사의 광합성 세균과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(1시간 후 촬영);
C: 코넴바이오사의 EM 발효액과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(27시간 후 촬영);
D: 이엠팜의 EM 발효액과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(20시간 후 촬영);
E: 1차 배양한 광합성 미생물과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(2시간 후 촬영); 및
F: 음성 대조군과 본 발명의 광합성 세균 배양액의 비교(1일 후 촬영).
도 5는 방부제 및 방청제가 첨가되지 않은 수용성 절삭유에 철제 못과 주철 주물 칩을 넣은 직후 촬영한 사진이다.
도 6은 본 발명의 광합성 세균 배양액을 첨가한 수용성 절삭유의 방청 효과를 확인한 결과 사진이다(S-1: 비교예 9; S-2: 비교예 10; S-3: 비교예 11; S-4: 비교예 12; S-5: 실시예 19; S-6: 실시예 20; 및 S-7: 실시예 21).
Fig. 1 is a photograph taken immediately after placing a nail and a metal chip in a water-soluble cutting oil in order to compare the rust prevention effect. Specifically, as the water-soluble cutting oil, commercially available water-soluble cutting oil of No. 1 in No. 1 and water-soluble cutting oil of the present invention were added to the photosynthetic bacterial culture solution (BIOFM) of the present invention or commercially available photosynthetic bacteria (A-type photosynthetic microorganism: AquaReader PSB Ltd.) and D Company EM fermentation broth: EM-K (EM Farm, Korea); B photosynthetic microorganism: Jell Na photosynthetic microorganism Probiotics , Korea)) was used.
FIG. 2 is a photograph showing the results of comparing the rust inhibition effect of the photosynthetic bacterial culture liquid of the present invention or commercially available photosynthetic bacteria added to the water-soluble cutting oil. Specifically, commercially available photosynthetic bacteria were added to commercially available water-soluble cutting oil and compared with the water-soluble cutting oil to which the photosynthetic bacterial culture solution of the present invention was added at the time of rusting:
A: Comparison of photosynthetic bacteria of Harvey World with photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after 4 hours);
B: Comparison between photosynthetic bacteria of a biotechnology company and photosynthetic bacteria culture of the present invention (photographed after 6 hours);
C: Comparison of the EM fermentation broth of Comem Biotech with the photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after 1 day);
D: Comparison of EM fermentation broth of Emm Farm with photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after 1 day);
E: Comparison of photosynthetic microorganism primary cultured with photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after 6 hours); And
F: Comparison between the negative control and the photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after one day).
Fig. 3 is a photograph taken immediately after placing a nail and a metal chip in a water-soluble cutting oil. The rust inhibitive effect was compared when the photosynthetic bacterial culture liquid of the present invention or commercially available photosynthetic bacteria were added to commercially available water-soluble cutting oil No. 1 of No. 1 and the above water-soluble cutting oil.
Fig. 4 is a photograph showing the anti-rust effect of the photosynthetic bacterial culture solution of the present invention or commercially available photosynthetic bacteria. Specifically, commercially available photosynthetic bacteria were added to a commercially available water-soluble cutting oil and compared with the water-soluble cutting oil to which the photosynthetic bacterial culture solution of the present invention was added at the time of rusting:
A: Comparison of photosynthetic bacteria of Harvey World with photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after 2 hours);
B: Comparison between the photosynthetic bacteria of one bio company and the photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after one hour);
C: Comparison between the EM fermentation broth of Konem Biotech and the photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after 27 hours);
D: Comparison of the EM fermentation broth of EM Farm with the photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after 20 hours);
E: Comparison of photosynthetic microorganism primary cultured with photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after 2 hours); And
F: Comparison between the negative control and the photosynthetic bacterial culture of the present invention (photographed after one day).
Fig. 5 is a photograph taken immediately after putting an iron nail and a cast iron casting chip into a water-soluble cutting oil to which preservatives and rust preventives are not added.
6 is a photograph (S-1: Comparative Example 9; S-2: Comparative Example 10; S-3: Comparative Example 11; S-4 : Comparative Example 12; S-5: Example 19; S-6: Example 20; and S-7: Example 21).

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 광합성 세균 배양액을 포함하는 절삭유를 제공한다.The present invention provides a cutting oil containing a photosynthetic bacterial culture liquid.

본 명세서에서 사용된 용어 "광합성 세균(photosynthetic bacteria)"은 빛 에너지를 이용하여 생육하는 세균을 의미한다. 상기 광합성 세균은 광합성 원핵생물이 있고, 여기에는 남조, 프로클로론(prochloron), 광합성 세균 등이 있다. 구체적으로, 일 실시예에 의하면, 상기 광합성 세균은 자색 비유황 세균일 수 있다.The term " photosynthetic bacteria "as used herein refers to bacteria that grow using light energy. The photosynthetic bacteria include photosynthetic prokaryotes, such as turmeric, prochloron, and photosynthetic bacteria. Specifically, according to one embodiment, the photosynthetic bacteria may be purplish non-sulfur bacteria.

상기 자색 비유황 세균은 자색 세균 중에서 주로 말산 또는 락트산과 같은 저분자 유기 화합물 또는 H2를 광합성의 전자 공급체로 이용한다. 또한, 상기 세균은 CO2를 환원동화하여 생육할 수 있는 광합성 세균으로, Rhodospirillaceae 과에 속한다. 본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 자색 비유황 세균은 로도박터 속(Rhodobacter sp.) 균으로서, 로도박터 스페로이드스(Rhodobacter sphaeroides)일 수 있다.The purple non-sulfur bacteria use mainly low-molecular organic compounds such as malic acid or lactic acid or H 2 as purplish electronic materials in purple bacteria. The bacterium is a photosynthetic bacterium capable of reducing and assimilating CO 2 and growing, and belongs to Rhodospirillaceae. According to an embodiment of the present invention, the purple non-sulfur bacteria may be Rhodobacter sp., Rhodobacter sphaeroides .

상기 로도박터 스페로이드스는 그람 음성균으로, 통성혐기성균이다.The Rhodobacter spp. Is a gram-negative bacterium and is a tuberous anaerobic bacterium.

본 명세서에서 사용된 용어 "광합성 세균 배양액"은 상기와 같은 광합성 세균을 단독으로 또는 유용미생물군(EM)과 함께 배양시킨 것을 의미한다. 상기 광합성 세균 배양액은 광합성 세균을 단독으로 배양하여 수득한 배양액; 유산균, 효모 및 고초균에서 선택되는 적어도 하나의 미생물을 광합성 세균과 혼합 배양하여 수득한 배양액; 또는 유용미생물군(EM)과 광합성 세균을 혼합 배양하여 수득한 배양액일 수 있다.As used herein, the term "photosynthetic bacterial culture fluid" means a culture of the above-described photosynthetic bacteria alone or in combination with a useful microorganism group (EM). The photosynthetic bacterial culture solution may be a culture solution obtained by culturing the photosynthetic bacteria alone; A culture solution obtained by mixing at least one microorganism selected from lactic acid bacteria, yeast and Bacillus subtilis with photosynthetic bacteria; Or a culture obtained by mixing and culturing a useful microorganism group (EM) and photosynthetic bacteria.

본 명세서에서 사용된 용어 "유용미생물군(effective microorganisms, EM)"은 자연계에 존재하는 많은 미생물 중에서 사람에게 유익한 미생물 수십 종을 조합하여 배양한 것이다. 광합성 세균, 유산균, 효모, 고초균 및 방선균 등이 EM을 구성하고 있는 주요 균종이며, 이들 균들 간의 복잡한 공존관계에 의해 생성되는 발효 생성물이 EM의 효과를 나타낸다. 구체적으로, 상기 EM은 광합성 세균, 유산균 및 효모를 포함할 수 있다. 또한, 고초균을 더 포함할 수 있다. 이와 같은 유용미생물군은 'EM-1', 'EM-5', 'EM-X', 'EM-Z', 'EM Bokashi', 'EM Ceramics', 'EM FPE', "Activated EM' 등과 같은 상품명으로 시판되고 있으며, 누구나 용이하게 이를 구입하여 사용할 수 있을 정도로 공지된 것이다.As used herein, the term "effective microorganisms (EM)" is a combination of dozens of microorganisms beneficial to humans among many microorganisms present in nature. Photosynthetic bacteria, lactic acid bacteria, yeast, Bacillus subtilis, and actinomycetes are the major organisms constituting the EM. The fermentation products produced by the complex coexistence relationship of these bacteria exhibit the effect of EM. Specifically, the EM may include photosynthetic bacteria, lactic acid bacteria, and yeast. It may further contain Bacillus subtilis. These useful microorganisms are classified into 'EM-1', 'EM-5', 'EM-X', 'EM-Z', 'EM Bokashi', 'EM Ceramics', 'EM FPE', 'Activated EM' It is commercially available under the same brand name and is known to anyone so that it can be easily purchased and used.

상기 유산균은 글루코스와 같은 당류를 분해하여 젖산을 생성하는 세균이다. 유산균은 젖산발효에 의해 젖산을 생성하며, 유제품, 김치류, 양조식품 등의 식품 제조에 이용한다. 또한, 포유류의 장 내에 서식하여 잡균에 의한 이상발효를 방지하는 역할을 하기도 한다. 그람 양성균이며, 통성혐기성균 또는 혐기성균이다. 유산균은 락토바실러스속과 스트렙토코커스속의 여러 종류가 알려져 있다.The lactic acid bacteria are bacteria that decompose saccharides such as glucose to produce lactic acid. Lactic acid bacteria produce lactic acid by lactic acid fermentation, and are used in the manufacture of foods such as dairy products, kimchi, and brewed foods. It also plays a role in preventing abnormal fermentation by germs inhabiting mammalian gut. Gram-positive bacteria, tuberous anaerobic bacteria or anaerobic bacteria. Lactobacillus is known to be a variety of Lactobacillus and Streptococcus spp.

상기 효모는 빵, 맥주, 포도주 등을 만드는데 사용되는 미생물로, 광합성능이나 운동성도 갖지 않는 단세포 생물의 총칭이다. 효모는 육탄당과 같은 단당류를, 무기호흡을 통해 산소의 공급이 없이도 분해하여 에너지를 얻을 수 있으며, 이 과정에서 알콜과 이산화탄소를 배출한다. 효모는 10℃ 내지 37℃의 온도 조건에서 성장할 수 있다.The yeast is a microorganism used for making bread, beer, wine, and the like, and is a collective term for single celled organisms that do not have photosynthetic ability or motility. Yeast can dissolve monosaccharides, such as hexoses, through inorganic respiration, without the supply of oxygen, to produce energy, which in turn releases alcohol and carbon dioxide. The yeast can grow under temperature conditions of 10 占 폚 to 37 占 폚.

상기 고초균은 자연계에 널리 분포하는 비병원성 세균으로, 특히 공기, 마른 풀, 하수, 토양 속에 존재한다. 막대 모양의 간균으로 편모가 있어 활발히 운동하며, 균체의 중앙에 원형 또는 난원형의 아포(芽胞)를 형성한다. 고초균은 글리코겐을 함유하는 그람 양성균이고, 다수의 탄수화물을 분해하여 산을 생성한다. 또한, 30℃ 내지 70℃의 온도 조건에서 잘 성장한다.The Bacillus subtilis is a non-pathogenic bacterium widely distributed in nature, particularly in air, dry grass, sewage and soil. It is a rod-like bacterium, which is acted upon by a flagella, and forms round or ovoid spores at the center of the cells. Bacillus subtilis is a gram-positive bacterium containing glycogen, and it decomposes a large number of carbohydrates to produce an acid. It also grows well under the temperature condition of 30 캜 to 70 캜.

상기 방선균은 토양, 식물체, 동물체, 하천, 해수 등에 균사체 및 포자체로 존재하는 미생물로서, 세균에 가까운 원핵생물 즉, 세균의 방선균목으로 분류된다. 세포의 크기가 세균과 비슷하며 세포가 마치 곰팡이의 균사처럼 실 모양으로 연결되어 발육하며 그 끝에 포자를 형성한다. 토양 중 방선균은 각종 유기물의 분해, 특히 난분해성 유기물 분해에 중요한 역할을 하며 항생물질을 만들기도 한다.Actinomycetes are microorganisms that exist as mycelium and sporophyll in soil, plant, animal, river, and seawater, and are classified into prokaryotes close to bacteria, that is, actinomycetes of bacteria. The cell size is similar to that of bacteria, and the cells grow like a mycelium of fungus in a threadlike shape and form spores at the end. Actinic actinomycetes play an important role in decomposition of various organic matter, especially degradation of organic matter, and also produce antibiotics.

본 발명에 따른 EM에 포함되는 광합성 세균의 농도는 1.0x104 내지 1.0x106 cfu/g, 1.0x105 내지 9.0x105 cfu/g, 또는 2.0x105 내지 3.5x105 cfu/g일 수 있다. 한편, 유산균의 농도는 1.0x105 내지 1.0x1010 cfu/g, 1.0x106 내지 5.0x109 cfu/g 또는 3.0x106 내지 2.0x109 cfu/g일 수 있다. 또한, 상기 효모의 농도는 1.0x104 내지 1.0x108 cfu/g, 1.0x105 내지 5.0x107 cfu/g 또는 3.0x105 내지 3.0x107 cfu/g일 수 있다. 또한, EM에 포함되는 고초균의 농도는 1.0x103 내지 1.0x105 cfu/g, 1.0x104 내지 5.0x104 cfu/g 또는 3.0x104 내지 4.0x104 cfu/g일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 광합성 세균, 유산균, 효모 및 고초균의 농도는 각각 약 3.1x105 cfu/g, 약 1.9x109 cfu/g, 약 2.8x107 cfu/g 및 약 3.1x104 cfu/g일 수 있다The concentration of photosynthetic bacteria contained in the EM according to the invention may be 1.0x10 4 to 1.0x10 6 cfu / g, 1.0x10 5 to 9.0x10 5 cfu / g, or 2.0x10 5 to 3.5x10 5 cfu / g. On the other hand, the concentration of lactic acid may be 1.0x10 5 to 1.0x10 10 cfu / g, 1.0x10 6 to 5.0x10 9 cfu / g or 3.0x10 6 to 2.0x10 9 cfu / g. In addition, the concentration of the yeast may be 1.0x10 4 to 1.0x10 8 cfu / g, 1.0x10 5 to 5.0x10 7 cfu / g or 3.0x10 5 to 3.0x10 7 cfu / g. In addition, the concentration of Bacillus subtilis contained in the EM may be 1.0x10 3 to 1.0x10 5 cfu / g, 1.0x10 4 to 5.0x10 4 cfu / g or 3.0x10 4 to 4.0x10 4 cfu / g. In one embodiment of the invention, the concentration of the photosynthetic bacteria, lactobacillus, yeasts, and Bacillus subtilis of about 3.1x10 5 cfu / g, about 1.9x10 9 cfu / g, approximately 2.8x10 7 cfu / g and about 3.1x10 4, respectively cfu / g

본 발명에 따른 배양액은 당밀, 밀기울, 쌀겨 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 배지를 사용하여 광합성 세균을 혼합 배양하여 수득할 수 있고, 구체적으로는 당밀을 사용할 수 있다.The culture solution according to the present invention can be obtained by mixing and culturing photosynthetic bacteria using a medium selected from the group consisting of molasses, wheat bran, rice bran, and a mixture thereof, and molasses can be used specifically.

본 명세서에서 사용된 용어 "당밀" 또는 "당밀 활성액"은 동일한 의미로 사용되었으며, 이는 광합성 세균 및 EM이 발효 과정에서 먹이로 사용하는 물질로, 세균의 활성화에 필요한 주성분을 의미한다. 상기 당밀은 1 내지 3%(w/w)의 칼륨, 1.5 내지 3%(w/w)의 마그네슘, 0.1 내지 1%(w/w)의 칼슘, 15 내지 35%(w/w)의 수분 및 45 내지 55%(w/w)의 당을 포함한다. 본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 당밀은 1.85%(w/w)의 칼륨, 2.24%(w/w)의 마그네슘, 0.79%(w/w)의 칼슘, 20 내지 30%(w/w)의 수분 및 50 내지 60%(w/w)의 당을 포함한다.As used herein, the term " molasses "or" molasses active liquid "is used interchangeably, meaning photosynthetic bacteria and EM that are used as food during fermentation and are essential components for the activation of bacteria. Wherein the molasses is selected from the group consisting of 1-3% (w / w) potassium, 1.5-3% (w / w) magnesium, 0.1-1% (w / w) calcium, 15-35% (w / And 45 to 55% (w / w) sugar. According to one embodiment of the present invention, the molasses comprises 1.85% (w / w) potassium, 2.24% (w / w) magnesium, 0.79% (w / w) calcium, 20-30% ) Of water and 50 to 60% (w / w) sugar.

상기 배지는 항산화 물질을 더 포함할 수 있다. 상기 항산화 물질로는 항산화 효과가 있다고 알려진 물질이면 모두 사용할 수 있다. 구체적으로, 상기 항산화 물질은 인진쑥, 사자발쑥, 개똥쑥, 민들레, 고추씨, 솔잎 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있다. 상기 인진쑥, 사자발쑥, 개똥쑥, 민들레, 고추씨 또는 솔잎은 별도의 가공 없이 이용할 수 있으나, 절단하여 사용하거나, 추출물 또는 가루형태로 사용할 수 있다. 추출물 또는 가루형태로 가공하여 절삭유에 첨가하는 과정은 통상의 기술자에 의해 적절히 수행될 수 있다.The medium may further comprise an antioxidant. Any antioxidant may be used as long as it is a substance known to have an antioxidative effect. Specifically, the antioxidant may be any one selected from the group consisting of Artemisia, Lepidoptera, Dogwood, Dandelion, Red Pepper, Pine Needle, and Mixture thereof. The above-mentioned Inosugi, Lepidoptera, Cryptomeria japonica, Dandelion, Red pepper seeds or Pine needle can be used without any processing, but they can be used by cutting or in the form of an extract or powder. The process of processing into an extract or powder form and adding it to the cutting oil may be suitably carried out by a person skilled in the art.

본 발명에서는 배양한 광합성 세균을 EM 및 영양원(배지)이 1:1 내지 1:5, 구체적으로 1:3의 부피비로 혼합된 혼합물에 접종하여 광합성 세균 배양액을 제조한다. 이때, 발효 온도는 10℃ 이상, 구체적으로는 10℃ 내지 30℃, 더욱 구체적으로는 15℃ 내지 25℃에서 수행될 수 있고, 발효기간은 1일 이상, 구체적으로 3 내지 10일, 더욱 구체적으로 5 내지 8일 동안 수행될 수 있다. 발효 과정에서 접종되는 광합성 세균의 함량은, 총 발효량을 기준으로 0.1 내지 20 부피%, 구체적으로는 1 내지 10 부피%, 더욱 구체적으로는 3 내지 9 부피%일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 광합성 세균의 함량은 3, 5, 8 또는 10 부피%일 수 있다.In the present invention, the photosynthetic bacterial culture is prepared by inoculating cultured photosynthetic bacteria into a mixture of EM and nutrient medium (medium) mixed at a volume ratio of 1: 1 to 1: 5, specifically 1: 3. In this case, the fermentation temperature may be 10 ° C or higher, specifically 10 ° C to 30 ° C, more specifically 15 ° C to 25 ° C, and the fermentation period is 1 day or more, specifically 3 to 10 days, 5 to 8 days. The content of photosynthetic bacteria to be inoculated in the fermentation process may be from 0.1 to 20% by volume, specifically from 1 to 10% by volume, more specifically from 3 to 9% by volume, based on the total fermentation amount. According to an embodiment of the present invention, the content of the photosynthetic bacteria may be 3, 5, 8 or 10% by volume.

본 명세서에서 사용된 용어 "수용성 절삭유"는 금속 절삭에서 절삭성, 가공의 정도 향상(금속의 표면조도) 및 냉각, 및 공구의 수명을 연장하기 위해 사용되는 기름을 의미한다. 상기 수용성 절삭유는 일반적으로 물에 희석하여 사용된다. 수용성 절삭유는 윤활기유, 윤활제, 유화제, 계면활성제, 물 등을 포함하고 있다. 또한, 이외에도 기타 첨가제로 소포제, 방부제, 색소, 향(perfume) 등을 포함할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에 의하면, 본 발명의 수용성 절삭유는 윤활기유, 유화제, 극압첨가제 및 소포제를 포함할 수 있다.As used herein, the term "water soluble cutting oil" means machinability at the metal cutting, improvement in the degree of machining (surface roughness of the metal) and cooling, and oil used to extend tool life. The water-soluble cutting oil is generally used by being diluted with water. Water-soluble cutting oils include lubricating oils, lubricants, emulsifiers, surfactants, and water. In addition, other additives may include antifoaming agents, preservatives, coloring matters, perfumes, and the like. According to one embodiment of the present invention, the water-soluble cutting oil of the present invention may include a lubricating oil, an emulsifier, an extreme pressure additive and a defoaming agent.

상기 절삭유는 윤활기유, 유화제, 극압첨가제 및 소포제에서 선택되는 하나 이상의 성분을 포함할 수 있다. 이때, 상기 윤활기유, 유화제, 극압첨가제 및 소포제의 종류는 당업자에 의해 적절히 선택되어 질 수 있으며, 혼합 비율은 요구되는 절삭유의 물성에 따라 적절히 선택될 수 있다.The cutting oil may comprise one or more components selected from lubricating oils, emulsifiers, extreme pressure additives and defoamers. At this time, the types of the lubricating oil, the emulsifier, the extreme pressure additive and the defoaming agent can be appropriately selected by those skilled in the art, and the mixing ratio can be appropriately selected according to the required properties of the cutting oil.

본 발명에 따른 수용성 절삭유에 포함될 수 있는 윤활기유는 광유기유, 채종유, 해바라기유, 대두유, 겨자유, 폴리에틸렌글리콜 에스테르(polyethylene glycol(PEG) ester), 알콜 에스테르, PEG, PAG(poly alkylene glycol), E/O(ethylene oxide), P/O(propylene oxide), 코폴리머(copolymer), 염화파라핀(C10-13 chlorinated paraffin), 황을 함유하는 에스테르, 인계 극압 첨가제, PAO(poly alpha olefin) 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것일 수 있다. 상기 황을 함유하는 에스테르의 예는 폴리설파이드(polysulfides), 디-tert-도데실(di-tert-dodecyl), KENLUBE SX 202 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것일 수 있다. 또한, 인계 극압 첨가제의 예는 레오포스 65(Reofos 65)일 수 있다.The lubricant oil that can be included in the water-soluble cutting oil according to the present invention includes mineral oil, vegetable oil, sunflower oil, soybean oil, mustard oil, polyethylene glycol (PEG) ester, alcohol ester, PEG, poly (Ethylene oxide), P / O (propylene oxide), copolymer, C10-13 chlorinated paraffin, sulfur containing ester, phosphorus extreme pressure additive, polyolefin (PAO) ≪ / RTI > and mixtures thereof. Examples of such sulfur containing esters may be selected from the group consisting of polysulfides, di-tert-dodecyl, KENLUBE SX 202, and mixtures thereof. An example of a phosphorus-containing extreme-pressure additive may be Reofos 65.

한편, 상기 수용성 절삭유에 포함될 수 있는 유화제는 PEG, 아민, 알콜, TOFA(tall oil fatty acid), 올레산, INA(isononanoic acid), NDA(neo decanoic acid), OTA(octanoic acid), 폴리옥시에틸렌(9) 옥틸페놀에스테르, 폴리옥시에틸렌 라우릴에스테르, PEG 에스테르, 폴리옥시에틸렌트리데실에스테르, 소르비탄 모노올레이트류, SM30(polyoxyethylene(30) stearyl amine), 아크릴화 지방산 아미드, 폴리에틸렌 글리콜 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것일 수 있다. Meanwhile, emulsifiers that can be included in the water soluble cutting oil include PEG, amine, alcohol, tall oil fatty acid, oleic acid, isononanoic acid (INA), neodecanoic acid (NDA), octanoic acid (OTA) 9) octylphenol esters, polyoxyethylene lauryl esters, PEG esters, polyoxyethylene tridecyl esters, sorbitan monooleates, SM30 (polyoxyethylene (30) stearyl amines), acrylated fatty acid amides, polyethylene glycols and mixtures thereof Lt; / RTI >

또한, 상기 극압첨가제는 염화파라핀, 인계에스테르, 황 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것일 수 있다. 상기 소포제는 2-에틸헥산올, 무정형 실리카 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것일 수 있다. 무정형 실리카는 변성된 실리콘의 계통이며, AFE1226, AFE1266, LZ5674 등을 포함한다.Further, the extreme pressure additive may be selected from the group consisting of chlorinated paraffin, phosphorous ester, sulfur, and a mixture thereof. The antifoaming agent may be selected from the group consisting of 2-ethylhexanol, amorphous silica, and mixtures thereof. Amorphous silica is a family of denatured silicones, including AFE1226, AFE1266, LZ5674, and the like.

본 발명에 따른 수용성 절삭유는 필요에 따라 방청제 또는 방부제를 더 포함할 수 있다.
The water-soluble cutting oil according to the present invention may further contain an antirusting agent or an antiseptic agent if necessary.

본 발명은 광합성 세균을 1차 배양하는 단계; 상기 배양한 광합성 세균을 EM과 혼합하여 2차 배양하는 단계; 및 상기 2차 배양액을 수용성 절삭유에 혼합하는 단계를 포함하는, 방청 효과가 증진된 절삭유 제조방법을 제공한다.The present invention relates to a method for culturing photosynthetic bacteria, Mixing the cultured photosynthetic bacteria with EM to secondary culture; And mixing the secondary culture liquid with a water-soluble cutting oil, wherein the rust-inhibiting effect is enhanced.

본 발명에 따른 광합성 세균, EM 또는 배양액은 상기 서술한 바와 같다.The photosynthetic bacteria, EM or culture liquid according to the present invention are as described above.

상기 제조방법에서, 본 발명에 따른 광합성 세균은 총 발효량을 기준으로 0.1 내지 20 부피%, 1 내지 10 부피%, 3 내지 9 부피%로 포함될 수 있다.In the above production method, the photosynthetic bacteria according to the present invention may be contained in an amount of 0.1 to 20% by volume, 1 to 10% by volume and 3 to 9% by volume based on the total fermentation amount.

상기 발효는 10℃ 이상, 10℃ 내지 30℃, 15℃ 내지 25℃의 온도에서, 1일 이상, 3 내지 10일, 5 내지 8일 동안 수행될 수 있다.
The fermentation can be carried out at a temperature of 10 ° C or higher, 10 ° C to 30 ° C, 15 ° C to 25 ° C, 1 day or more, 3 to 10 days or 5 to 8 days.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples. However, the following examples are intended to illustrate the present invention, but the present invention is not limited by the following examples.

I. 광합성 세균 배양액의 방청 효과 확인I. Confirmation of rust inhibition effect of photosynthetic bacterial culture

실시예 1. 광합성 세균 1차 배양액의 제조-(1)Example 1 Production of Photosynthetic Bacterium Primary Culture Solution- (1)

광합성 세균인 로도박터 스페로이드스(Rhodobacter sphaeroides)(빛모음, 이삭, 한국)를 배양하였다. 구체적으로, 500 ㎖의 상기 광합성 세균을, 20 g의 염화암모늄, 20 g의 탄산수소나트륨, 20 g의 초산나트륨, 20 g의 염화나트륨, 40 g의 인산수소칼륨, 40 g의 유산마그네슘, 2 g의 효모 엑기스를 물에 용해시켜 총량이 2 ℓ로 맞춰진 액체 배지에서 배양하였다. 이때, 배양 온도는 20℃이며, 접종되는 광합성 세균은 4.0x107 cfu/㎖ 이상이 되도록 하였다.Photosynthetic bacteria, Rhodobacter sphaeroides (Light Collection, Isaac, Korea), were cultured. Specifically, 500 ml of the photosynthetic bacteria were mixed with 20 g of ammonium chloride, 20 g of sodium hydrogencarbonate, 20 g of sodium acetate, 20 g of sodium chloride, 40 g of potassium hydrogen phosphate, 40 g of magnesium lactate, 2 g Of yeast extract was dissolved in water and cultured in a liquid medium with a total volume of 2 l. At this time, the incubation temperature was 20 ° C, and the photosynthetic bacteria to be inoculated was 4.0 x 10 7 cfu / ml or more.

미생물의 성장 곡선 중 감쇄기에 위치한 미생물을 선별하여 다음 실험에 사용하였다. 배양 4일 후, 가스 발생량이 줄고 세균의 사체가 관찰되어 감쇄기에 도달했다고 판단하여, 배양 4일 후의 배양액으로 2차 배양을 수행하기로 하였다.
Among the growth curves of the microorganisms, microorganisms located at the attenuator were selected and used in the following experiments. After 4 days of cultivation, it was determined that the amount of gas generation was reduced and the dead body of the bacteria was observed and attained the attenuator, and the secondary culture was performed with the culture liquid after 4 days of culture.

실시예 2. 광합성 세균 1차 배양액의 제조-(2)Example 2: Preparation of photosynthetic bacterial primary culture - (2)

광합성 세균인 로도박터 스페로이드스(두산에코비즈넷, 한국)를 배양하였다. 상기 광합성 세균은 배양 배지(DS-PSB, 두산에코비즈넷, 한국)와 함께 제공되는 균주로서, 이를 상기 배양 배지에서 배양하였다. 구체적으로, 1 ℓ의 광합성 세균을 분말형태의 배지 1(비료성분) 및 액상형태의 배지 2(증식촉진성분)를 물에 용해시켜 총량을 100 ℓ로 맞춘 배지에서 배양하였다. 이때 배양은 35℃에서 수행되었고, 상기와 동일하게 미생물의 성장 곡선이 감쇄기에 도달하였을 때의 배양액을 2차 배양에 사용하였다.
Rhodobacter spheroids (Doosan Eco Biznet, Korea), a photosynthetic bacterium, were cultured. The photosynthetic bacteria were cultivated in the culture medium provided with the culture medium (DS-PSB, Doosan Eco-Biznet, Korea). Specifically, 1 L of photosynthetic bacteria was cultured in a medium in which the total amount was adjusted to 100 L by dissolving the medium 1 (fertilizer component) in powder form and medium 2 (growth promoting component) in liquid form. At this time, the culture was carried out at 35 ° C, and the culture broth when the growth curve of the microorganism reached the attenuator was used for the secondary culture as described above.

실시예 3. 광합성 세균의 2차 배양액의 제조-(1)Example 3: Preparation of secondary culture of photosynthetic bacteria - (1)

상기 실시예 1에서 배양한 배양 4일째의 로도박터 스페로이드스 배양액을 유용미생물군(EM, EM바이오, 한국) 및 당밀 활성액(EM바이오, 한국)에 접종하여 실온에서 7일간 배양하였다. 이때, 0.4 ㎏의 당밀 및 0.3 ㎏의 EM 원액을 19.2 ㎏의 물에 용해시킨 배양 배지에 0.1 ㎏의 실시예 1의 광합성 세균을 접종하여 이를 배양하였다.
Four days after culturing in Example 1, Rhodobacter sphaeroids were inoculated into a group of useful microorganisms (EM, EM Bio, Korea) and molasses activity (EM Bio, Korea) and cultured at room temperature for 7 days. At this time, 0.1 kg of the photosynthetic bacteria of Example 1 was inoculated into a culture medium in which 0.4 kg of molasses and 0.3 kg of EM stock solution were dissolved in 19.2 kg of water, and cultured.

실시예 4. 광합성 세균의 2차 배양액의 제조-(2)Example 4: Preparation of secondary culture of photosynthetic bacteria - (2)

상기 실시예 2에서 배양한 배양 4일째의 광합성 세균 배양액을 다양한 농도로, EM(코넴바이오, 한국) 및 당밀 활성액(코넴바이오, 한국)에 접종하여 실온에서 7일간 배양하였다. 이때, 0.4 ㎏의 당밀 및 0.3 ㎏의 EM 원액을 19.2 ㎏의 물에 용해시킨 배양 배지에 0.1 ㎏의 실시예 2의 광합성 세균을 접종하여 이를 배양하였다.
The photosynthetic bacterial culture fluid on the fourth day of culturing in Example 2 was inoculated to various concentrations of EM (Comembaio, Korea) and molasses activity (Comembe Bio, Korea) at various concentrations and cultured at room temperature for 7 days. At this time, 0.1 kg of the photosynthetic bacteria of Example 2 was inoculated into a culture medium in which 0.4 kg of molasses and 0.3 kg of EM stock solution were dissolved in 19.2 kg of water and cultured.

실시예 5 내지 8. 광합성 세균의 2차 배양액의 제조-(3)Examples 5 to 8. Preparation of secondary cultures of photosynthetic bacteria - (3)

상기 실시예 2에서 배양한 광합성 세균 배양액을 하기 표 1의 조성을 갖는 배양 배지에 접종하여 실온에서 7일간 배양하였다.The culture of photosynthetic bacteria cultured in Example 2 was inoculated into a culture medium having the composition shown in the following Table 1 and cultured at room temperature for 7 days.

실시예 2 배양액
(kg)
Example 2 Culture medium
(kg)
당밀
(kg)
molasses
(kg)
EM 원액
(kg)
EM solution
(kg)
소금
(kg)
Salt
(kg)
설탕
(kg)
Sugar
(kg)

(kg)
water
(kg)
합계
(kg)
Sum
(kg)
실시예 5Example 5 3.03.0 1010 2.02.0 55 55 75.075.0 100100 실시예 6Example 6 5.05.0 1010 2.02.0 55 55 73.073.0 100100 실시예 7Example 7 8.08.0 1010 2.02.0 55 55 70.070.0 100100 실시예 8Example 8 10.010.0 1010 2.02.0 55 55 68.068.0 100100

실시예 9. 인진쑥이 첨가된 광합성 세균 2차 배양액의 제조Example 9. Preparation of secondary culture of photosynthetic bacteria added with Artemisia sp.

배양 배지에 0.1 ㎏의 인진쑥(Artemisia capillaris Thunb.) 가루를 추가로 첨가한 것을 제외하고는, 상기 실시예 8과 동일한 조건 및 방법으로 인진쑥이 첨가된 광합성 세균 2차 배양액을 제조하였다.
A secondary culture of photosynthetic bacteria supplemented with Artemisia mugwort was prepared in the same manner as in Example 8, except that 0.1 kg of Artemisia capillaris Thunb. Powder was further added to the culture medium.

실시예 10. 사자발쑥이 첨가된 광합성 세균 2차 배양액의 제조Example 10: Preparation of secondary cultures of photosynthetic bacteria added with wild mugwort

인진쑥 대신 사자발쑥(Artemisia princeps Pampanini)을 첨가한 것을 제외하고는, 상기 실시예 9와 동일한 방법으로 사자발쑥이 첨가된 광합성 세균 2차 배양액을 제조하였다.
A secondary culture of photosynthetic bacteria supplemented with Artemisia princeps Pampanini was prepared in the same manner as in Example 9 except that Artemisia princeps Pampanini was added instead of Artemisia mugwort.

실시예 11. 개똥쑥이 첨가된 광합성 세균 2차 배양액의 제조Example 11 Preparation of Secondary Culture Medium of Photosynthetic Bacteria Containing Clam Mugwort

인진쑥 대신 개똥쑥(Artemisia annua Linne)을 첨가한 것을 제외하고는, 상기 실시예 9와 동일한 방법으로 개똥쑥이 첨가된 광합성 세균 2차 배양액을 제조하였다.
A secondary culture of photosynthetic bacteria added with Artemisia annua Linne was prepared in the same manner as in Example 9, except that Artemisia annua Linne was added instead of Artemisia mugwort.

실시예 12. 민들레가 첨가된 광합성 세균 2차 배양액의 제조Example 12: Preparation of secondary culture of photosynthetic bacteria added with dandelion

인진쑥 대신 민들레(Taraxacum platycarpum)를 첨가한 것을 제외하고는, 상기 실시예 9와 동일한 방법으로 민들레가 첨가된 광합성 세균 2차 배양액을 제조하였다.
A secondary culture of photosynthetic bacteria added with dandelion was prepared in the same manner as in Example 9 except that taraxacum platycarpum was added instead of arginine .

실시예 13. 고추씨가 첨가된 광합성 세균 2차 배양액의 제조Example 13. Preparation of secondary culture of photosynthetic bacteria added with red pepper seeds

인진쑥 대신 고추(Capsicum annuum)의 씨를 첨가한 것을 제외하고는, 상기 실시예 9와 동일한 방법으로 고추씨가 첨가된 광합성 세균 2차 배양액을 제조하였다.
A secondary culture of photosynthetic bacteria added with red pepper seeds was prepared in the same manner as in Example 9, except that seeds of Capsicum annuum were added instead of Artemisia sp.

실시예 14. 솔잎이 첨가된 광합성 세균 배양액의 제조Example 14: Preparation of photosynthetic bacteria culture solution with pine needle

인진쑥 대신 소나무(Pinus densiflora)의 잎을 첨가한 것을 제외하고는, 상기 실시예 9와 동일한 방법으로 솔잎이 첨가된 광합성 세균 2차 배양액을 제조하였다.
A secondary culture of photosynthetic bacteria added with pine needle was prepared in the same manner as in Example 9, except that the leaves of Pinus densiflora were added instead of Artemisia sp .

실험예 1. 광합성 세균 배양액의 방청 효과 확인Experimental Example 1. Confirmation of the rust prevention effect of the photosynthetic bacterial culture liquid

상기 실시예 2 내지 4에서 제조된 광합성 세균 배양액을 각각 하기 표 2에 기재된 바와 같은 농도가 되도록 수용액을 만든 뒤, 상기 수용액에 30 g의 철제 못을 넣고 실온에서 녹의 발생을 관찰하였다.The photosynthetic bacterial culture solutions prepared in Examples 2 to 4 were each prepared to have an aqueous solution as shown in Table 2 below. Then, 30 g of iron pellets were added to the aqueous solution and the occurrence of rust was observed at room temperature.

사용된 광합성
세균 배양액
Used photosynthesis
Bacterial culture solution
광합성 세균 배양액의
희석 농도(부피%)
Of photosynthetic bacterial culture
Dilution concentration (vol%)
녹 발생 여부Whether rust is generated 녹 발생까지의 시간Time until rust occurs
대조군(물)Control (water) 0.00.0 발생Occur 3 시간3 hours 실시예 2Example 2 0.30.3 발생Occur 4 시간4 hours 실시예 3Example 3 0.10.1 발생Occur 4 시간4 hours 0.30.3 발생Occur 5 시간5 hours 0.60.6 발생Occur 7 시간7 hours 1.01.0 발생Occur 8 시간8 hours 2.02.0 발생Occur 5일 이후After 5 days 3.03.0 발생Occur 13일 이후After 13 days 실시예 4Example 4 0.10.1 발생Occur 5 시간5 hours 0.30.3 발생Occur 6 시간6 hours 0.60.6 발생Occur 8 시간8 hours 1.01.0 발생Occur 9 시간9 hours 실시예 5Example 5 1.01.0 발생Occur 9 시간9 hours 실시예 6Example 6 1.01.0 발생Occur 3일 이후After 3 days 실시예 7Example 7 1.01.0 발생Occur 4일 이후After 4 days 실시예 8Example 8 1.01.0 발생Occur 6일 이후After 6 days

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 본원 실시예 2 내지 8에서 제조된 광합성 세균 1차 배양액 및 광합성 세균 2차 배양액은 방청 효과를 증진시켰다. 이는 첨가된 광합성 세균 2차 배양액의 양과 비례하였다.
As shown in Table 2, the photosynthetic primary bacterial culture and the secondary culture of photosynthetic bacteria produced in Examples 2 to 8 of the present invention improved the anti-rust effect. This was proportional to the amount of the secondary culture of photosynthetic bacteria added.

또한, 상기 실시예 9 내지 14에서 제조한 항산화 물질이 포함된 광합성 세균 2차 배양액의 방청 효과를 상기와 동일한 방법으로 확인하였다. 이때 배양액은 0.5 또는 1.0 부피%의 농도로 희석하여 사용하였다.In addition, the anticorrosive effects of the photosynthetic bacterial secondary culture solutions containing the antioxidant substances prepared in Examples 9 to 14 were confirmed in the same manner as described above. At this time, the culture was diluted to a concentration of 0.5 or 1.0% by volume.

광합성 세균 배양액의
희석 농도(부피%)
Of photosynthetic bacterial culture
Dilution concentration (vol%)
녹 발생 여부Whether rust is generated 녹 발생까지의 시간Time until rust occurs
대조군(물)Control (water) 0.00.0 발생Occur 3 시간3 hours 실시예 9Example 9 0.50.5 발생Occur 3일 이후After 3 days 1.01.0 발생Occur 7일 이후After 7 days 실시예 10Example 10 0.50.5 발생Occur 3일 이후After 3 days 1.01.0 발생Occur 7일 이후After 7 days 실시예 11Example 11 0.50.5 발생Occur 3일 이후After 3 days 1.01.0 발생Occur 7일 이후After 7 days 실시예 12Example 12 0.50.5 발생Occur 3일 이후After 3 days 1.01.0 발생Occur 7일 이후After 7 days 실시예 13Example 13 0.50.5 발생Occur 3일 이후After 3 days 1.01.0 발생Occur 7일 이후After 7 days 실시예 14Example 14 0.50.5 발생Occur 3일 이후After 3 days 1.01.0 발생Occur 7일 이후After 7 days

그 결과, 상기 표 3에서 보여지는 바와 같이 광합성 세균 배양액의 희석 농도에 비례하여 방청 효과가 증진되었고, 이와 같은 효과는 항산화 물질의 첨가에 의해 더욱 향상되었다.
As a result, as shown in Table 3, the rust preventing effect was enhanced in proportion to the dilution concentration of the photosynthetic bacterial culture solution, and the effect was further improved by the addition of the antioxidant.

실험예 2. 동결 및 해동 후 방청 효과의 변화 확인Experimental Example 2. Confirmation of change of rust prevention effect after freezing and thawing

본 발명의 광합성 세균 2차 배양액이 동결 및 해동 후에도 방청 효과를 유지하는지 여부를 확인하였다.It was confirmed whether or not the secondary culture of the photosynthetic bacteria of the present invention retained the rust preventing effect even after freezing and thawing.

먼저, 상기 실시예 2에서 제조한 10 ㎏의 광합성 세균 1차 배양액을 4.2 ㎏의 당밀, 2.0 ㎏의 EM 원액, 0.3 ㎏의 소금, 1.4 ㎏의 설탕, 82 ㎏의 물 및 0.1 ㎏의 인진쑥이 혼합된 배양액에서 실온으로 7일간 배양하여 광합성 세균 2차 배양액을 제조하였다. 제조된 2차 배양액을 냉동실(-15℃)에서 22시간 동안 동결시킨 후 이를 상온에서 해동한 것과 계속 상온에서 보관한 것을 사용하여 방청 효과를 비교 확인하였다. 방청 효과는 광합성 세균 2차 배양액을 0.5 부피%로 포함하는 수용액을 만든 뒤, 상기 수용액에 30 g의 철제 못을 넣고 녹의 발생을 관찰하여 확인하였다.First, 10 kg of the photosynthetic bacterial primary culture prepared in Example 2 was mixed with 4.2 kg of molasses, 2.0 kg of EM stock solution, 0.3 kg of salt, 1.4 kg of sugar, 82 kg of water and 0.1 kg of arginine And then cultured at room temperature for 7 days to prepare a secondary culture of photosynthetic bacteria. The resulting secondary culture was frozen for 22 hours in a freezer (-15 ° C), and thawed at room temperature and stored at room temperature. The rust preventive effect was confirmed by preparing an aqueous solution containing 0.5 volume% of the secondary culture of photosynthetic bacteria, and then observing the occurrence of rust by adding 30 g of iron nail into the aqueous solution.

그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.The results are shown in Table 4 below.

동결 여부Whether to freeze 녹 발생 여부Whether rust is generated 녹 발생까지의 시간Time until rust occurs 광합성 세균
2차 배양액
Photosynthetic bacteria
Secondary culture
발생Occur 3일 이후After 3 days
×× 발생Occur 3일 이후After 3 days

표 4에서 보는 바와 같이, 배양액의 동결 여부는 방청 효과에 영향을 미치지 않았다.
As shown in Table 4, the freezing of the culture solution did not affect the antirust effect.

II. 광합성 세균 2차 배양액을 포함한 수용성 절삭유의 방청 효과 확인II. Confirmation of rust inhibition effect of water-soluble cutting oil including photosynthetic bacterial secondary culture

실시예 15 및 16. 광합성 세균 배양액이 첨가된 시판 수용성 절삭유의 제조-(1)Examples 15 and 16. Production of commercial water-soluble cutting oil to which photosynthetic bacterial culture solution was added - (1)

실험예 2에서 제조된 광합성 세균 2차 배양액 및 실시예 2에서 제조된 광합성 세균 1차 배양액을 시판중인 수용성 절삭유인 삼육사의 1종1호 수용성 절삭유에 2 부피%의 농도가 되도록 희석하여 각각 실시예 15 및 16의 광합성 세균 배양액이 포함된 수용성 절삭유를 제조하였다.
The secondary culture of photosynthetic bacteria prepared in Experimental Example 2 and the primary culture of photosynthetic bacteria prepared in Example 2 were diluted to a concentration of 2 vol% in the water-soluble cutting oil of Type 1 of the commercially available water-soluble cutting oil, 15 and 16, respectively, were prepared.

실시예 17 및 18. 광합성 세균 배양액이 첨가된 시판 수용성 절삭유의 제조-(2)Examples 17 and 18. Preparation of commercial water-soluble cutting oil to which photosynthetic bacterial culture solution was added - (2)

삼육사의 1종1호 수용성 절삭유 대신, 제우스사의 1종1호 수용성 절삭유를 사용한 것을 제외하고는, 상기 실시예 15 및 16과 동일한 조건 및 방법으로, 각각 실시예 17 및 18의 광합성 세균 배양액이 포함된 수용성 절삭유를 제조하였다.
The photosynthetic bacterial culture solutions of Examples 17 and 18 were contained in the same conditions and in the same manner as in Examples 15 and 16, except that the water-soluble cutting oil of No. 1 in No. 1 by Zeus Co. was used instead of the water-soluble cutting oil of No. 1 in No. 3 Water soluble cutting oil.

비교예 1 내지 4. 시판 중인 광합성 세균 배양액이 첨가된 시판 수용성 절삭유의 제조-(1)Comparative Examples 1 to 4 Production of commercial water-soluble cutting oil to which commercially available photosynthetic bacterial culture solution was added - (1)

실험예 2의 광합성 세균 배양액 대신, 시판중인 광합성 세균인 아쿠아리더스 PSB(하비월드사, 한국), Jell Na 광합성 미생물 생균제(한 바이오, 한국), EM 활성액(코넴바이오사, 한국) 및 EM-K(이엠팜, 한국)를 첨가한 것을 제외하고는, 상기 실시예 15와 동일한 조건 및 방법으로, 각각 비교예 1 내지 4의 광합성 세균 배양액이 포함된 수용성 절삭유를 제조하였다.
(Japan), EM activated solution (Konem Biosar, Korea), and EM-K (Kobayashi Co., Ltd.) instead of the photosynthetic bacterial culture solution of Experimental Example 2, Water soluble cutting oil containing the photosynthetic bacterial culture solutions of Comparative Examples 1 to 4 was prepared by the same conditions and methods as in Example 15,

비교예 5 내지 8. 시판 중인 광합성 세균 배양액이 첨가된 시판 수용성 절삭유의 제조-(2)Comparative Examples 5 to 8. Preparation of commercial water-soluble cutting oil to which commercially available photosynthetic bacterial culture solution was added - (2)

삼육사의 1종1호 수용성 절삭유 대신, 제우스사의 1종1호 수용성 절삭유를 사용한 것을 제외하고는, 상기 비교예 1 내지 4와 각각 동일한 조건 및 방법으로, 각각 비교예 5 내지 8의 광합성 세균 배양액이 포함된 수용성 절삭유를 제조하였다.
The photosynthetic bacterial culture solutions of Comparative Examples 5 to 8 were prepared in the same manner as in Comparative Examples 1 to 4, except that the water-soluble cutting oil of Type 1 of No. 1 was used instead of the water-soluble cutting oil of No. 1, Water soluble cutting oil was prepared.

실험예 3. 광합성 세균 배양액에 의한 수용성 절삭유의 방청 효과 증진 확인Experimental Example 3: Confirmation of enhancement of rust inhibition effect of water-soluble cutting oil by photosynthetic bacteria culture solution

상기 실시예 15 내지 18과 비교예 1 내지 8에서 제조한 수용성 절삭유의 방청 효과를 확인하였다. 구체적으로, 방청 효과는 상기 절삭유에 30 g의 철제 못 및 주철 주물 칩(chip) 20 g을 넣고 녹의 발생을 관찰하여 확인하였다. 이때, 대조군으로는 광합성 세균 배양액을 첨가하지 않은 삼육사 1종1호 또는 제우스사 1종1호 수용성 절삭유를 사용하였다.The rust inhibitive effect of the water-soluble cutting oil prepared in Examples 15 to 18 and Comparative Examples 1 to 8 was confirmed. Specifically, the rust prevention effect was confirmed by observing occurrence of rust by adding 30 g of iron nail and 20 g of cast iron cast chip to the cutting oil. As a control, water - soluble cutting oil of the first grade or the first grade of Zeus `s No 1, which did not contain the photosynthetic bacterial culture solution, was used.

그 결과, 삼육사의 1종1호 수용성 절삭유를 이용한 방청 효과 확인 결과는 표 5에, 제우스사의 1종1호 수용성 절삭유를 이용한 방청 효과 확인 결과는 표 6에 나타내었다. 또한, 결과를 확인한 사진을 도 1 내지 4에 나타내었다.As a result, the results of confirming the rust inhibitive effect using the water-soluble cutting oil of Type 1 of No. 1, No. 1, and the results of confirming the rust inhibitive effect using the No. 1 No. 1 water-soluble cutting oil of Zeus Co. are shown in Table 6. In addition, photographs confirming the results are shown in Figs. 1 to 4. Fig.

녹 발생 여부Whether rust is generated 녹 발생까지의 시간Time until rust occurs 삼육사 1종1호1 kind of 1 발생Occur 1일 이후After 1 day 실시예 15Example 15 발생Occur 14일 이후After 14 days 실시예 16Example 16 발생Occur 6 시간6 hours 비교예 1Comparative Example 1 발생Occur 4 시간4 hours 비교예 2Comparative Example 2 발생Occur 6 시간6 hours 비교예 3Comparative Example 3 발생Occur 1일 이후After 1 day 비교예 4Comparative Example 4 발생Occur 1일 이후After 1 day

녹 발생 여부Whether rust is generated 녹 발생까지의 시간Time until rust occurs 제우스사 1종1호Zeus 1 kind 1 발생Occur 1일 이후After 1 day 실시예 17Example 17 발생Occur 15일 이후After 15 days 실시예 18Example 18 발생Occur 2 시간2 hours 비교예 5Comparative Example 5 발생Occur 2 시간2 hours 비교예 6Comparative Example 6 발생Occur 1 시간1 hours 비교예 7Comparative Example 7 발생Occur 27 시간27 hours 비교예 8Comparative Example 8 발생Occur 20 시간20 hours

그 결과, 상기 표 5 및 표 6에서 나타난 바와 같이, 본 발명의 광합성 세균 배양액을 첨가하는 경우, 시판되고 있는 수용성 절삭유의 방청 효과를 증진시켰다(실시예 15 및 17). 다만, 비교예 1, 2, 5 및 6과 실시예 16 및 18은 아무것도 첨가하지 않은 삼육사 1종1호 또는 제우스사 1종1호 수용성 절삭유보다 녹 발생까지의 시간이 짧았다. 이는 상기 첨가된 광합성 세균이 수용성 절삭유의 에멀젼 형태를 깨뜨려서 방청 효과를 감퇴시킨 것으로 보인다.
As a result, as shown in Tables 5 and 6, when the photosynthetic bacterial culture solution of the present invention was added, the rust inhibitive effect of commercially available water-soluble cutting oil was enhanced (Examples 15 and 17). However, in Comparative Examples 1, 2, 5 and 6 and Examples 16 and 18, the time to rust generation was shorter than that of the water-soluble cutting oil of No. 1 or No. 1, No. 1, in which no additives were added. This is because the added photosynthetic bacteria break down the emulsion form of the water-soluble cutting oil and thus the anti-rust effect is deteriorated.

III. 방청제 및 방부제를 포함하지 않고 광합성 세균 배양액을 포함한 수용성 절삭유의 방청 효과 확인III. Confirmation of anti-rust effect of water-soluble cutting oil including photosynthetic bacterial culture liquid without rust inhibitor and preservative

실시예 19. 광합성 세균 2차 배양액을 포함하는 수용성 절삭유의 제조-(1)Example 19 Production of water-soluble cutting oil containing photosynthetic bacteria secondary culture solution- (1)

실시예 3에서 제조한 광합성 세균 2차 배양액을 사용하여 방청제 및 방부제가 포함되지 않은 수용성 절삭유를 제조하였다.A water-soluble cutting oil free of rust preventives and preservatives was prepared using the photosynthetic bacterial secondary culture prepared in Example 3.

구체적으로, 2 부피%의 광합성 세균 2차 배양액, 40 부피%의 광유기유(鑛油基油)(제우스 유화, 한국), 10 부피%의 채종유(천경실업, 한국), 5 부피%의 염화파라핀(남덕물산, 한국), 5 부피%의 톨유지방산(tall oil fatty acid, TOFA)(GNO, 한국), 5% 부피의 SM30(stearyl amine 30; 유화제)(동남합성, 한국), 4 부피%의 모노폴 OP1019(polyoxyethylene(9) octylphenol ether; 비이온 계면활성제)(SJ켐, 한국), 15 부피%의 보릭 아미드(boric amide)(코스모스 FNC, 한국), 5 부피%의 이염기산(dibasic acid)(코스모스 FNC, 한국), 2 부피%의 DCHA(dicyclohexylamine)(SPC, 한국), 0.2 부피%의 2-에틸헥산올(2-ethylhexanol; 소포제)(성원PLS, 한국) 및 6.8 부피%의 물을 혼합하여 수용성 절삭유를 제조하였다.
Specifically, 2% by volume of photosynthetic bacteria secondary culture, 40% by volume of mineral oil base oil (Zeus oil base, Korea), 10% by volume of seed oil (Chung Kyung Industry Co., Korea), 5% by volume of chlorinated paraffin 5% by volume of tall oil fatty acid (TOFA) (GNO, Korea), 5% by volume of stearyl amine 30 (emulsifier) 15 vol.% Boric amide (Cosmos FNC, Korea), 5 vol.% Dibasic acid (polyoxyethylene (9) octylphenol ether, SJ Chem, Korea) (Cosmos FNC, Korea), 2 vol% DCHA (dicyclohexylamine) (SPC, Korea), 0.2 vol% 2-ethylhexanol defoamer (Sungwon PLS, Korea) and 6.8 vol% Water soluble cutting oil was prepared.

실시예 20. 광합성 세균 2차 배양액을 포함하는 수용성 절삭유의 제조-(2)Example 20: Preparation of water-soluble cutting oil containing photosynthetic bacteria secondary culture solution - (2)

실시예 3에서 제조한 광합성 세균 2차 배양액 대신 실시예 4에서 제조한 광합성 세균 2차 배양액을 사용한 것을 제외하고는, 상기 실시예 19와 동일한 조건 및 방법으로 수용성 절삭유를 제조하였다.
Instead of the secondary culture of photosynthetic bacteria prepared in Example 3 A water-soluble cutting oil was prepared under the same conditions and in the same manner as in Example 19, except that the photosynthetic bacterial secondary culture prepared in Example 4 was used.

실시예 21. 광합성 세균 2차 배양액을 포함하는 수용성 절삭유의 제조-(3)Example 21: Preparation of water-soluble cutting oil containing photosynthetic bacteria secondary culture solution - (3)

실시예 3에서 제조한 광합성 세균 2차 배양액 대신 실시예 9에서 제조한 광합성 세균 2차 배양액을 사용한 것을 제외하고는, 상기 실시예 19와 동일한 조건 및 방법으로 수용성 절삭유를 제조하였다.
A water-soluble cutting oil was prepared under the same conditions and in the same manner as in Example 19, except that the photosynthetic bacterial secondary culture prepared in Example 9 was used instead of the photosynthetic bacterial secondary culture prepared in Example 3.

비교예 9. 광합성 세균을 포함하지 않는 수용성 절삭유의 제조Comparative Example 9. Preparation of water-soluble cutting oil containing no photosynthetic bacteria

광합성 세균 2차 배양액을 첨가하지 않는 것을 제외하고는, 상기 실시예 19와 동일한 방법으로 수용성 절삭유를 제조하였다.
A water-soluble cutting oil was prepared in the same manner as in Example 19, except that the photosynthetic bacterial secondary culture was not added.

비교예 10. 광합성 세균의 1차 배양액을 포함하는 수용성 절삭유의 제조Comparative Example 10. Preparation of water-soluble cutting oil containing primary culture of photosynthetic bacteria

실시예 3에서 제조한 광합성 세균 2차 배양액 대신 실시예 2에서 제조한 광합성 세균 1차 배양액을 사용한 것을 제외하고는, 상기 실시예 19와 동일한 조건 및 방법으로 수용성 절삭유를 제조하였다.
A water-soluble cutting oil was prepared under the same conditions and in the same manner as in Example 19, except that the photosynthetic bacterial primary culture prepared in Example 2 was used instead of the photosynthetic bacterial secondary culture prepared in Example 3.

비교예 11. 유용미생물군을 포함하는 수용성 절삭유의 제조-(1)Comparative Example 11. Preparation of water-soluble cutting oil containing useful microorganism group- (1)

실시예 3에서 제조한 광합성 세균 2차 배양액 대신 EM 바이오사의 유용미생물군을 첨가한 것을 제외하고는, 상기 실시예 19와 동일한 조건 및 방법으로 수용성 절삭유를 제조하였다.
The photosynthetic bacterial secondary culture prepared in Example 3 A water-soluble cutting oil was prepared in the same manner as in Example 19, except that the useful microorganism group of EM Bioscience was added.

비교예 12. 유용미생물군을 포함하는 수용성 절삭유의 제조Comparative Example 12. Preparation of water-soluble cutting oil containing useful microorganism groups

실시예 3에서 제조한 광합성 세균 2차 배양액 대신 코넴 바이오사의 유용미생물군을 첨가한 것을 제외하고는, 상기 실시예 19와 동일한 조건 및 방법으로 수용성 절삭유를 제조하였다.
The photosynthetic bacterial secondary culture prepared in Example 3 A water-soluble cutting oil was prepared in the same manner as in Example 19, except that the useful microorganism group of Comem Biotech was added instead.

실험예 4. 광합성 세균 2차 배양액을 포함하는 수용성 절삭유의 방청 효과 확인Experimental Example 4. Confirmation of rust-inhibitive effect of water-soluble cutting oil including photosynthetic bacteria secondary culture

상기 실시예 19 내지 21 및 비교예 9 내지 12에서 제조된 수용성 절삭유를 2.0 부피%로 희석한 절삭유 수용액을 제조한 뒤, 상기 수용액에 30 g의 못 및 20 g의 금속 칩(chip)을 넣고 녹의 발생을 관찰하였다.Aqueous coolant solution prepared by diluting the water-soluble cutting oil prepared in Examples 19 to 21 and Comparative Examples 9 to 12 to 2.0 vol% was added with 30 g of nails and 20 g of metal chips into the aqueous solution, Were observed.

그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.The results are shown in Table 7 below.

녹 발생 여부Whether rust is generated 녹 발생까지의 시간Time until rust occurs 실시예 19Example 19 발생Occur 3일 이후After 3 days 실시예 20Example 20 발생Occur 4일 이후After 4 days 실시예 21Example 21 발생Occur 6일 이후After 6 days 비교예 9Comparative Example 9 발생Occur 5 시간5 hours 비교예 10Comparative Example 10 발생Occur 5 시간5 hours 비교예 11Comparative Example 11 발생Occur 6 시간6 hours 비교예 12Comparative Example 12 발생Occur 5 시간5 hours

그 결과, 상기 표 7에서 보여지는 바와 같이, 본 발명의 광합성 세균 2차 배양액을 포함하는 실시예 19 내지 21의 수용성 절삭유에서는 3 내지 6일 이후에 녹이 발생한 반면, 비교예 9 내지 12의 수용성 절삭유에서는 5 내지 6시간 이후에 녹이 발생하였다. 이로부터 본 발명의 광합성 세균 2차 배양액이 우수한 방청 효과를 나타내는 것을 알 수 있었다.
As a result, as shown in Table 7, the water soluble cutting oil of Examples 19 to 21 containing the photosynthetic bacterial secondary culture of the present invention rusted after 3 to 6 days, while the water soluble cutting oil of Comparative Examples 9 to 12 , Rust occurred after 5 to 6 hours. From these results, it was found that the photosynthetic bacterial secondary culture of the present invention exhibits excellent antirust effect.

IV. 수용성 절삭유의 항균력 확인IV. Identification of antibacterial activity of water-soluble cutting oil

본 발명의 광합성 세균 배양액이 포함된 수용성 절삭유의 항균력을 다음의 실험들을 통해 확인하였다.The antibacterial activity of the water-soluble cutting oil containing the photosynthetic bacterial culture solution of the present invention was confirmed through the following experiments.

우선, 무방부제 수용성 절삭유 A-1(식물성 기유 타입), 무방부제 수용성 절삭유 A-2(합성 기유 타입), 방부제 수용성 절삭유 A-3(A-2와 동일한 조성에 BIT, MIT, CMIT 등의 방부제가 추가된 것), 무방부제 수용성 절삭유 B-1(식물성 기유 타입), 무방부제 수용성 절삭유 B-2(합성 기유 타입), 방부제 수용성 절삭유 B-3(B-2와 동일한 조성에 BIT, MIT, CMIT 등의 방부제가 추가된 것)를 다음과 같이 제조하였다.
First, a preservative water-soluble cutting oil A-1 (vegetable base oil type), a water-insoluble water-soluble cutting oil A-2 (synthetic base oil type) and a preservative water-soluble cutting oil A-3 (preservatives such as BIT, MIT, 2 (synthetic base oil type), preservative water-soluble cutting oil B-3 (same composition as B-2, BIT, MIT, CMIT and the like) was prepared as follows.

A-1: 2 부피%의 실시예 9의 광합성 세균 배양액, 40 부피%의 대두유(천경실업, 한국), 10 부피%의 채종유(천경실업, 한국), 5 부피%의 저급 지방산(TOFA)(GNO, 한국), 5 부피%의 SM30(동남합성, 한국), 3 부피%의 모노폴 OP1019(SJ켐, 한국), 15 부피%의 보릭 아미드(코스모스 FNC, 한국), 11 부피%의 이염기산(코스모스 FNC, 한국), 2 부피%의 DCHA(SPC, 한국), 0.2 부피%의 2-에틸헥산올(성원PLS, 한국) 및 6.8 부피%의 물을 혼합하여 수용성 절삭유를 제조하였다.A-1: 2% by volume of the photosynthetic bacterial culture solution of Example 9, 40% by volume of soybean oil (Cheon Kyung Industry Co., Korea), 10% by volume of seed oil (Cheon Kyung Industry Co., 10% by volume of boric acid (Cosmo FNC, Korea), 11% by volume of dibasic acid (GNO, Korea), 5 vol% SM30 (COSMOS FNC, Korea), 2 vol% DCHA (SPC, Korea), 0.2 vol% 2-ethylhexanol (Sungwon PLS, Korea) and 6.8 vol% water were mixed to prepare a water-soluble cutting oil.

A-2: 대두유 대신 합성 기유 (제우스 유화, 한국)를 사용하는 것을 제외하고는, A-1과 동일한 조성으로 수용성 절삭유를 제조하였다.A-2: A water-soluble cutting oil having the same composition as A-1 was prepared, except that synthetic base oil (Zeus oil, Korea) was used instead of soybean oil.

A-3: A-2와 동일한 조성에서 2 부피%의 물 대신에 방부제로서 MBX(대흥상사; 5-클로로-2-메틸-4-아이소티아졸린-3-온(1.1 중량%) 및 1,2-벤즈아이소티아졸린-3-온 (4 중량%) 함유)를 혼합하여 수용성 절삭유를 제조하였다. A-3: MBX (Daicheng Co., 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one (1.1 wt%) and 1, (Containing 4% by weight of 2-benzisothiazolin-3-one) were mixed to prepare a water-soluble cutting oil.

B-1: 2 부피%의 실시예 9의 광합성 세균 배양액, 40 부피%의 대두유(천경실업, 한국), 10 부피%의 채종유(천경실업, 한국), 10 부피%의 저급지방산(GNO, 한국), 7 부피%의 SM30(동남합성, 한국), 7 부피%의 모노폴 OP1019(SJ켐, 한국), 10 부피%의 보릭 아미드(코스모스 FNC, 한국), 7 부피%의 이염기산(코스모스 FNC, 한국), 2 부피%의 DCHA(SPC, 한국), 0.2 부피%의 2-에틸헥산올(성원PLS, 한국) 및 6.8 부피%의 물을 혼합하여 수용성 절삭유를 제조하였다.B-1: 2% by volume of the photosynthetic bacterial culture solution of Example 9, 40% by volume of soybean oil (Cheon Kyung Industry Co., Korea), 10% by volume of seed oil (Cheon Kyung Industry Co., (Cosmos FNC, Korea), 7 vol% dibasic acid (Cosmos FNC, Korea), 7 vol% of SM30 (Dongnam Synthetic Co., Korea), 7 vol% of monopole OP1019 (SPC, Korea), 2 volume% DCHA (SPC, Korea), 0.2 volume% 2-ethylhexanol (Sungwon PLS, Korea) and 6.8 vol% water were mixed to prepare a water-soluble cutting oil.

B-2: 대두유 대신 합성 기유(제우스 유화, 한국)를 사용하는 것을 제외하고는, B-1과 동일한 조성으로 수용성 절삭유를 제조하였다.B-2: A water-soluble cutting oil having the same composition as B-1 was prepared, except that a synthetic base oil (Zeus oil, Korea) was used instead of soybean oil.

B-3: B-2와 동일한 조성에서 2 부피%의 물 대신에 방부제로서 MBX(대흥상사; 5-클로로-2-메틸-4-아이소티아졸린-3-온(1.1 중량%) 및 1,2-벤즈아이소티아졸린-3-온 (4 중량%) 함유)를 혼합하여 수용성 절삭유를 제조하였다.
B-3: MBX (Daicheng Co., 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one (1.1 wt%) and 1, (Containing 4% by weight of 2-benzisothiazolin-3-one) were mixed to prepare a water-soluble cutting oil.

실험예 5: 미생물 오염도 분석Experimental Example 5: Microbial contamination analysis

상기 A-1 내지 B-3의 절삭유 30 ml를 트립틱 소이 아가 배지(tryptic soy agar medium; TSA 배지)에 접종한 후, 30℃에서 3일 동안 배양하였다. 30 ml of the cutting oil of the above A-1 to B-3 was inoculated into a tryptic soy agar medium (TSA medium) and then cultured at 30 ° C for 3 days.

각 시료에서 미생물의 성장 여부를 관찰한 결과, 어느 시료에서도 세균이나 곰팡이와 같은 미생물이 검출되지 않았다. 따라서, 모든 시료가 미생물에 의해 오염되지 않았음을 알 수 있다.
As a result of observing the growth of microorganisms in each sample, microorganisms such as bacteria and fungi were not detected in any sample. Therefore, it can be seen that not all samples are contaminated by microorganisms.

실험예 6: 미생물 사멸효과 분석 (Challenge test)Experimental Example 6: Microbial kill effect analysis (Challenge test)

광합성 미생물이 첨가된 절삭유의 항균성을 확인하기 위해, 상기 A-1 내지 B-3의 절삭유에 시험균 혼합액을 106 cfu/㎖의 양으로 각각 접종하였다. To confirm the antimicrobial activity of the cutting oil to which the photosynthetic microorganism was added, the test bacteria mixture was inoculated to the cutting oils of A-1 to B-3 in an amount of 10 6 cfu / ml.

시험균 혼합액은 대장균(Escherichia coli ATCC 8739), 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442), 버크홀데리아 세파시아(Burkholderia cepacia ATCC 15442), 클렙시엘라 뉴모니애(Klebsiella pneumoniae ATCC 4352), 엔테로박터 애로제네스(Enterobacter aerogenes ATCC 13048), 살모넬라 타이피뮤리움(Salmonella typhimurium KCTC 1925), 스태필로코커스 오레우스(Staphylococcus aureus ATCC 6538), 마이크로코커스 루테우스(Mycrococcus luteus ATCC 9341), 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 아가리쿠스 브라실리엔시스(Agaricus brasiliensis)를 포함하였다.The test mixture was prepared from Escherichia coli ATCC 8739, Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Burkholderia cepacia ATCC 15442, Klebsiella pneumoniae ATCC 4352, But are not limited to, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Salmonella typhimurium KCTC 1925, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Mycrococcus luteus ATCC 9341, Candida albicans , , And Agaricus brasiliensis .

균주 접종 직후, 얻어진 시험 용액을 TSA 배지에 도말하여 30℃에서 3일 동안 배양하였다. 또한, 시험 용액을 30℃에서 보관하면서 2일 후에 TSA 배지에 도말하여 상기와 동일하게 배양한 후 균주의 생육을 관찰하였다. Immediately after strain inoculation, the obtained test solution was plated on TSA medium and cultured at 30 ° C for 3 days. In addition, the test solution was stained on TSA medium 2 days after storage at 30 DEG C, and cultured in the same manner as above, and then the growth of the strain was observed.

균주의 생육 관찰 결과를 하기 표 8에 나타내었다.The results of the growth of the strain are shown in Table 8 below.

절삭유 시료Coolant sample 초기Early 2일 후Two days later A-1A-1 33 00 A-2A-2 33 00 A-3A-3 33 00 B-1B-1 33 00 B-2B-2 33 00 B-3B-3 33 00

등급 시스템Rating system

0: 세균 발생 없음 0: No bacteria

1: 미량의 오염 (1-9 콜로니) 3: 중간 정도의 오염(>100 콜로니) 1: trace contamination (1-9 colonies) 3: medium contamination (> 100 colonies)

2: 약한 오염 (10-99 콜로니) 4: 심한 오염(TNTC)
2: Weak pollution (10-99 colonies) 4: Severe contamination (TNTC)

상기 표 8의 결과에서 볼 수 있는 바와 같이, 균주 접종 초기에는 100 콜로니 이상의 균주가 발생되었지만, 배양 2일 후에는 광합성세균 배양액이 첨가된 절삭유와 방부제가 첨가된 절삭유 모두 항균성을 나타내었다.As can be seen from the results of Table 8, 100 colonies or more were produced at the initial stage of the inoculation of the strain, but both of the cutting oil to which the photosynthetic bacterial culture fluid was added and the preservative-added cutting oil showed antimicrobial activity 2 days after the culturing.

Claims (17)

광합성 세균 배양액을 포함하는 수용성 절삭유로서,
상기 절삭유는 방청 효과가 증진된 것이며,
상기 광합성 세균 배양액이 유산균, 효모 및 고초균에서 선택되는 적어도 하나의 미생물을 광합성 세균과 혼합 배양하여 수득된 1차 배양액을 유용미생물군(EM)과 혼합 배양하여 수득된 2차 배양액이고,
상기 광합성 세균이 로도박터 스페로이드스(Rhodobacter sphaeroides)이며,
상기 2차 배양액이 인진쑥, 사자발쑥, 개똥쑥, 민들레, 고추씨, 솔잎 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나를 포함하는 배지에 1차 배양액을 배양하여 수득된 것이고,
상기 광합성 세균 배양액이 수용성 절삭유 총 부피를 기준으로 0.1 내지 5 부피%로 포함되는, 수용성 절삭유.
As a water-soluble cutting oil containing a photosynthetic bacterial culture liquid,
The cutting oil is improved in rust prevention effect,
Wherein the photosynthetic bacterial culture solution is a secondary culture obtained by mixing and culturing at least one microorganism selected from lactic acid bacteria, yeast and Bacillus subtilis with a photosynthetic bacterium and culturing the obtained primary culture with a useful microorganism group (EM)
Wherein the photosynthetic bacteria are Rhodobacter sphaeroides ,
Wherein the secondary culture solution is obtained by culturing a primary culture in a culture medium containing any one selected from the group consisting of Artemisia, Lepidoptera, Dogwood, Dandelion, Red Pepper, Pine Needle and Mixture thereof,
Wherein the photosynthetic bacterial culture fluid is contained in an amount of 0.1 to 5% by volume based on the total volume of water-soluble cutting oil.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 배양액은 당밀, 밀기울, 쌀겨 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 배지에 광합성 세균을 배양하여 수득되는 것을 특징으로 하는, 수용성 절삭유.
The water-soluble cutting oil according to claim 1, wherein the culture liquid is obtained by culturing a photosynthetic bacteria in a medium selected from the group consisting of molasses, wheat bran, rice bran, and a mixture thereof.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 절삭유가 윤활기유, 유화제, 극압첨가제 및 소포제로 구성되는 것을 특징으로 하는, 수용성 절삭유.
The water-soluble cutting oil according to claim 1, wherein the cutting oil is composed of a lubricating oil, an emulsifier, an extreme pressure additive and an antifoaming agent.
제10항에 있어서, 상기 윤활기유는 광유기유, 채종유, 해바라기유, 대두유, 겨자유, 폴리에틸렌글리콜 에스테르(polyethylene glycol(PEG) ester), 알콜 에스테르, PEG, PAG(poly alkylene glycol), E/O(ethylene oxide), P/O(propylene oxide), 코폴리머(copolymer), 염화파라핀(C10-13 chlorinated paraffin), 황을 함유하는 에스테르, PAO(poly alpha olefin) 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 수용성 절삭유.
The method of claim 10, wherein the lubricating oil is selected from the group consisting of mineral oil, vegetable oil, sunflower oil, soybean oil, mustard oil, polyethylene glycol (PEG) ester, alcohol ester, PEG, polyalkylene glycol ethylene oxide, P / O, copolymer, C 10-13 chlorinated paraffin, sulfur containing ester, poly alpha olefin (PAO), and mixtures thereof. And water-soluble cutting oil.
제10항에 있어서, 상기 유화제가 PEG, 아민, 알콜, TOFA(tall oil fatty acid), 올레산, INA(isononanoic acid), NDA(neo decanoic acid), OTA(octanoic acid), 폴리옥시에틸렌(9) 옥틸페놀에스테르, 폴리옥시에틸렌 라우릴에스테르, PEG 에스테르, 폴리옥시에틸렌트리데실에스테르, 소르비탄 모노올레이트류, SM30(stearyl amine 30), 아크릴화 지방산 아미드, 폴리에틸렌 글리콜 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 수용성 절삭유.
11. The method of claim 10, wherein the emulsifier is selected from the group consisting of PEG, amine, alcohol, tall oil fatty acid, oleic acid, isononanoic acid, neodecanoic acid, octanoic acid, Octylphenol ester, polyoxyethylene lauryl ester, PEG ester, polyoxyethylene tridecyl ester, sorbitan monooleates, SM30 (stearyl amine 30), acrylated fatty acid amide, polyethylene glycol, and mixtures thereof And water-soluble cutting oil.
제10항에 있어서, 상기 극압첨가제가 염화파라핀, 인계에스테르, 황 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 수용성 절삭유.
11. The water soluble cutting oil according to claim 10, wherein said extreme pressure additive is selected from the group consisting of chlorinated paraffin, phosphorous ester, sulfur and mixtures thereof.
제10항에 있어서, 상기 소포제가 2-에틸헥산올, 무정형 실리카 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 수용성 절삭유.
The water-soluble cutting oil according to claim 10, wherein the defoaming agent is selected from the group consisting of 2-ethylhexanol, amorphous silica and mixtures thereof.
광합성 세균을 1차 배양하는 단계;
상기 배양된 광합성 세균을 유용미생물군(EM)과 혼합하여 2차 배양하는 단계; 및
상기 2차 배양액을 수용성 절삭유에 혼합하는 단계를 포함하고,
상기 1차 배양이 유산균, 효모 및 고초균에서 선택되는 적어도 하나의 미생물을 광합성 세균과 혼합 배양하는 것이며,
상기 광합성 세균이 로도박터 스페로이드스(Rhodobacter sphaeroides)이고,
상기 2차 배양이 인진쑥, 사자발쑥, 개똥쑥, 민들레, 고추씨, 솔잎 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나를 포함하는 배지에서 배양하는 것이며,
상기 혼합이 2차 배양액을 수용성 절삭유 총 부피를 기준으로 0.1 내지 5 부피%의 양으로 혼합하는, 방청 효과가 증진된 절삭유 제조방법.
Primary culturing photosynthetic bacteria;
Mixing the cultured photosynthetic bacteria with a useful microorganism group (EM) to secondary culture; And
Mixing the secondary culture with water-soluble cutting oil,
Wherein the primary culture comprises mixing at least one microorganism selected from lactic acid bacteria, yeast and Bacillus subtilis with photosynthetic bacteria,
Wherein the photosynthetic bacteria are Rhodobacter sphaeroides ,
Wherein the secondary culture is cultivated in a culture medium containing any one selected from the group consisting of Artemisia, Lepidoptera, Dogwood, Dandelion, Red Pepper, Pine Needle, and Mixture thereof,
Wherein said mixing is carried out in an amount of 0.1 to 5% by volume based on the total volume of water-soluble cutting oil.
삭제delete 제15항에 있어서, 상기 2차 배양이 15℃ 내지 25℃의 온도에서 수행되는 것을 특징으로 하는, 절삭유 제조방법.The method according to claim 15, characterized in that the secondary culture is carried out at a temperature of 15 캜 to 25 캜.
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