KR101750436B1 - Manufacturing method for coffee extract by bioconversion of imitation luwak coffee path generating and coffee extract manufactured thereof - Google Patents

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Abstract

본 발명은 사양 고양이의 소화기관과 소화 효소의 기능을 바탕으로 하여 분쇄한 생두에 엿기름, 파파인, 아주까리 추출물을 첨가하여 반응시킨 혼합물에 미생물을 접종하고 배양하여 생물전환 커피 추출물을 제조함으로써, 커피의 추출방법이 매우 간단할 뿐만 아니라 종래 사양 고양이에 의해 얻어지는 루왁 커피의 경우에는 고양이의 장내에서 각종의 성분들이 흡수 또는 소모되어 성분들의 함유량이 매우 낮은데 비해 본 발명의 경우에는 생두 등의 혼합물과 접종된 미생물이 어우러져 새롭게 생물 전환되어 생성됨으로 인해 폴리페놀, 플라보노이드와 같은 각종 성분들의 함유량이 매우 높고 그리고 루왁 커피의 특성을 확정 짖는 아미노산 함량이 종래의 사양 고양이의 소화 산물에 의해 얻은 루왁 커피에 비해 매우 높으면서 커피의 특이한 취향을 유발할 수 있는 것에 장점이 있다.According to the present invention, microorganisms are inoculated and cultured in a mixture obtained by adding maltose, papain, and aquaculture extract to pulverized green beans, based on the function of digestive organs and digestive enzymes of the specification cats, The extraction method is very simple, and in case of the luwak coffee obtained by the conventional cat, various components are absorbed or consumed in the intestines of the cat, and the content of the components is very low. In contrast, in the case of the present invention, Due to the microbial harmonization and new biotransformation, the content of various components such as polyphenols and flavonoids is very high, and the amino acid content that determines the characteristics of the luwak coffee is very high compared with the luwak coffee obtained by the digestive products of the conventional cat The unusual taste of coffee There are advantages to what you can cause.

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Figure 112016097468331-pat00002

Description

루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법 및 이 방법에 의해 제조된 커피추출물{Manufacturing method for coffee extract by bioconversion of imitation luwak coffee path generating and coffee extract manufactured thereof} TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method for producing a bio-converted coffee extract based on a luwak coffee production pathway and a coffee extract prepared by the method,

본 발명은 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법 및 이 방법에 의해 제조된 커피추출물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 사양 고양이의 소화기관과 소화 효소의 기능을 바탕으로 하여 분쇄한 생두에 엿기름, 파파인, 아주까리 추출물을 각 단계별로 첨가하여 반응시킨 혼합물에 미생물을 접종하여 배양함으로써, 생두 등의 혼합물과 미생물이 어우러져 새롭게 생물 전환됨으로 인해 각종성분들의 함량이 매우 높은 커피 추출을 얻을 수 있는 것을 특징으로 하는 루왁 커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법 및 이 방법에 의해 제조된 커피추출물에 관한 것이다.
The present invention relates to a process for producing a bioconverted coffee extract based on the route of producing luwak coffee and a coffee extract prepared by the process. More particularly, the present invention relates to a coffee extract prepared by pulverizing By adding microorganisms to a mixture of maltose, papain, and mackerel extract in each step, the mixture is inoculated and cultivated. Thus, a coffee extract having a very high content of various components can be obtained due to the biotransformation of the mixture of microorganisms such as green beans The present invention relates to a process for the production of a bioconverted coffee extract based on the route of producing luwak coffee and a coffee extract prepared by this process.

커피는 독특한 향기와 색깔로 인해 예로부터 사람들에게 널리 애호되고 있는 기호식품으로 예전에는 아프리카, 아시아 대륙의 산악지역에서 야생으로 서식하였으나 오늘날에는 야생으로 서식하는 곳은 아프리카의 일부 지역에 남아 있을 뿐이고 유통되는 대부분의 커피는 사람들에 의해 재배되고 있다.
Coffee is a favorite food for people from ancient times due to its unique fragrance and color. It used to be wild in mountainous regions of Africa and Asia continent in the past, but nowadays wildlife remains in some parts of Africa. Most coffee being grown is grown by people.

이와 같은 커피는 시대의 흐름에 따라 다양한 향기와 색깔을 나타내기 위해 지속적으로 연구개발하여 사람들의 입맛을 사로잡고 있으며, 근래에는 새로운 기술 플랫폼으로서 생전환 기술을 적용한 커피들이 많이 각광을 받고 있으나 아직까지 현대인들의 다양한 입맛을 사로잡기에는 많은 어려움이 있는 것이 현실이다. Such coffee has continuously attracted the taste of people by continuously researching and developing various fragrances and colors according to the trend of the times. In recent years, coffee using bio-conversion technology has attracted much attention in recent years as a new technology platform. It is a reality that there are many difficulties to catch various taste of modern people.

왜냐하면 생전환 기술이란 살아 있는 미생물을 다루는 것으로 미생물 조작에 대한 충분한 이해가 필요하며, 더불어 기질의 종류와 특성, 저해 반응, 효소, 부산물, 결과물에 대한 피드백 저해, 배지의 조성 등에 대한 이해력이 확보되어야 하나 이들의 부족으로 인해 미생물의 배양시간 등이 길어지는데 비해 현실적으로 얻어지는 커피의 량이 적은 문제점이 있었다.
Because bio-conversion technology requires a thorough understanding of microbial manipulation by dealing with living microorganisms, it is necessary to understand the types and characteristics of substrates, inhibition reactions, inhibition of enzymes, by-products, feedback on the products, However, there is a problem in that the amount of coffee to be obtained is small as compared with the time required for culturing the microorganisms.

이러한 문제점을 해결하기 위해 많은 연구 및 개발자들은 기질 특이적 효소의 연구와 미생물의 생장조절 인자, 기질, 물질 대사 연구 등에 매진하고 있으며, 이의 일환으로 미생물을 이용한 생전환 기술을 적용하여 특허출원된 기술을 살펴보면, 미국공개특허공보 제20090220645호(2009.09.03)에는 루왁(Luwak)의 소화 효소를 각 단계의 효소로 대체하여 커피의 쓴맛을 감소시키고 좋은 향을 내기 위해 커피 빈스의 품질을 개량하는 것을 특징으로 하는 산과 효소 처리에 의한 커피 빈스의 품질 개선 시스템에 관한 기술이 알려져 있으나, 상기 기술의 경우에는 장내 미생물을 고가인 정제된 미생물을 사용함으로써, 커피의 생산량에 비해 생산비용의 과다 지출로 발생하는 경제적인 문제점으로 인해 지속적인 생산에 어려움이 있다.
In order to solve these problems, many researchers and developers have been devoted to the study of substrate-specific enzymes, microorganism growth regulators, substrates, and metabolism studies. As part of this research, biotechnology- , US Patent Publication No. 20090220645 (Sep. 3, 2009) describes a method for improving the quality of coffee beans by reducing the bitter taste of coffee and replacing digestive enzymes of Luwak with enzymes of each step The technology of improving the quality of coffee beans by acid and enzyme treatment is known, but in the case of the above technology, the intestinal microorganisms are produced by using expensive microorganisms which are expensive, There is a difficulty in continuous production due to the economical problem of

상기와 같은 문제점으로 인해 최근에는 인도네시아나 베트남 등에서 서식하는 사양 고양이가 원두를 먹고 배설한 소화 산물로부터 커피 씨앗을 채취하여 로스팅 한 루왁 커피가 큰 인기를 끌고 있으나 커피 가격이 통상적인 커피가격보다 10배 이상으로 매우 높은 문제점이 있다.
Due to the above-mentioned problems, recently, roasted luwak coffee is extracted from the digestion product which is consumed by the specification cat living in Indonesia or Vietnam. However, the coffee price is 10 times higher than the usual coffee price There is a very high problem.

따라서, 상기와 같은 문제점을 해결하기 위한 방안으로 본 발명은 사양 고양이의 소화기관과 소화 효소의 기능을 바탕으로 하여 분쇄한 생두에 엿기름, 파파인, 아주까리 추출물을 첨가한 혼합물에 미생물을 접종하여 배양함으로써, 커피 추출물에 함유된 각종 성분들이 사양 고양이의 수화 산물에 의해 얻어지는 루왁 커피에 비해 생두 등의 혼합물과 미생물이 어우러져 새롭게 생물 전환이 이루어지므로 인해 각종 성분들의 함량이 매우 높은 커피 추출물을 얻을 수 있는 것을 특징으로 하는 루왁 커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법 및 이 방법에 의해 제조된 커피추출물을 제공함에 그 목적이 있다.
Accordingly, in order to solve the above-mentioned problems, the present invention relates to a method for producing a microorganism by inoculating and culturing microorganisms in a mixture of maltose, papain, and aquaculture extract added with ground soybeans based on the function of digestive organs and digestive enzymes , A coffee extract having a very high content of various components can be obtained because a new bio-conversion is achieved by mixing a microbe with a mixture of green beans and the like compared with luwak coffee obtained by the various products contained in the coffee extract, The present invention provides a method for producing a bio-converted coffee extract based on the luwak coffee production pathway and a coffee extract prepared by the method.

상기 과제를 해결하기 위한 본 발명은 1) 커피의 생두를 선별하여 세척하고 건조시켜 0.3~0.5cm로 분쇄하는 생두 분쇄단계;In order to solve the above-mentioned problems, the present invention provides a method for grinding coffee beans, comprising the steps of: 1) grinding fresh beans of a coffee, washing and drying the coffee beans to 0.3 to 0.5 cm;

2) 상기 1)단계의 생두에 엿기름가루와 정제수를 혼합하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 엿기름 처리단계;2) a malt processing step of mixing the malt flour and the purified water at the beginning of the step 1) and allowing to stand at 24 ± 1 ° C for 1 day;

3) 상기 2)단계의 혼합물에 파파인을 첨가하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 파파인 처리단계;3) a papain treatment step in which papain is added to the mixture of step 2) and left at 24 ± 1 ° C for 1 day;

4) 상기 3)단계의 혼합물에 아주까리 추출물을 첨가하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 아주까리 추출물 처리단계;4) a step of treating the extract of Angelicae sativa L. in which the extract of Angelica keiskei is added to the mixture of step 3) and left at 24 ± 1 ° C for 1 day;

5) 상기 4)단계의 혼합물에 미생물을 접종하여 37~38℃에서 3일 동안 배양한 후 여기에 정제수를 투입하여 여과하는 미생물 접종단계;5) a microorganism inoculation step in which microorganisms are inoculated to the mixture of step 4), incubated at 37 to 38 ° C for 3 days, and then purified water is added thereto for filtration;

6) 상기 5)단계에서 여과한 혼합물을 방부처리하는 방부제처리 단계;를 거처 제조되는 것을 특징으로 하는 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법을 과제 해결 수단으로 한다.6) a preservative treatment step of preserving the mixture filtered in the step 5); and a method of manufacturing a bio-converted coffee extract based on the Lewack coffee production path.

상기에서 생두는 카페아 아라비카종, 카페아 로부스타종, 커페아 리베리카종 중에서 1종 또는 2종 이상을 선택하여 사용하며, 상기 생두에 혼합되는 엿기름가루과 정제수는 엿기름가루 100 중량부와 정제수 715 중량부를 혼합하여 24±1℃에서 1일 동안 방치한 후 여과한 여액을 생두와 1 : 1의 중량비로 혼합하고, The maltose powder and purified water mixed in the soybean sprouts are prepared by mixing 100 parts by weight of malt flour and 715 parts by weight of purified water, The mixture was allowed to stand at 24 ± 1 ° C. for 1 day, and then filtered. The filtrate was mixed with the green beans at a weight ratio of 1: 1,

상기 아주까리 추출물은 -4~-2℃에서 10~12일 동안 저장한 후 상온에서 싹을 틔워 싹이 튼 것을 선별하여 껍질을 제거하고 5분 동안 분쇄한 후 n-Hexane를 투입하여 저어면서 1일 동안 방치한 후 여과하며, The extracts were stored at -4 to -2 ° C for 10 to 12 days, then shoots were germinated at room temperature. After removing the husks, they were pulverized for 5 minutes. Then, n-hexane was added thereto, After filtration,

상기 4)단계의 미생물은 커피 원두의 장내미생물인 Lactobacillus plantarum sp. Bifidobacterium bifidum sp . Lactobacillus acidophilus sp . Lactobacillus salivarius sp . Bifidobacterium infantis sp . Lactobacillus lactis sp . Lactobacillus reuteri sp . Lactobacillus brevis sp . Streptococcus thermophilus sp. Bifidobacterium longum sp . Lactobacillus bulgaricus sp . Lactobacillus acidophilus DDS -1 sp . Lactobacillus casei sp . Lactobacillus rhamnosus sp .와 사향 고양이의 장내미생물인 Uncultured Clostridium sp . Staphylococcus sp . Uncultured Chryseobacterium sp . Uncultured Raoultella sp . Uncultured Sphingopyxis sp . Uncultured soil bacterium , Uncultured Bifidobacterium sp . Eubacterium tarantellae strain UM87 , Clostridium sardiniense strain 1025_1 중에서 선택된 1종 또는 그 이상을 선택하여 사용하는 것을 특징으로 한다.
The microorganism in step 4) is Lactobacillus plantarum sp. Bifidobacterium bifidum sp . Lactobacillus acidophilus sp . Lactobacillus salivarius sp . Bifidobacterium infantis sp . Lactobacillus lactis sp . Lactobacillus reuteri sp . Lactobacillus brevis sp . Streptococcus thermophilus sp. Bifidobacterium longum sp . Lactobacillus bulgaricus sp . Lactobacillus acidophilus DDS -1 sp . Lactobacillus casei sp . Lactobacillus rhamnosus sp . And intramuscular microorganism Uncultured Clostridium sp . Staphylococcus sp . Uncultured Chryseobacterium sp . Uncultured Raoultella sp . Uncultured Sphingopyxis sp . Uncultured soil bacterium , Uncultured Bifidobacterium sp . Eubacterium tarantellae strain UM87 , Clostridium sardiniense strain 1025_1 is selected and used.

그리고 본 발명은 상기 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법에 의해 제조되는 생물전환 커피 추출물을 다른 과제 해결 수단으로 한다.
The present invention also provides a bio-converted coffee extract prepared by the method for producing a bio-converted coffee extract based on the Lewack coffee-producing pathway as another solution.

상기의 구성을 갖는 본 발명은 사양 고양이의 소화기관과 소화 효소의 기능을 바탕으로 분쇄한 생두에 엿기름, 파파인, 아주까리 추출물을 각 단계별로 첨가한 혼합물에 미생물을 접종하여 배양한 후 여과하여 커피 추출물을 제조함으로써, 커피의 추출방법이 매우 간단할 뿐만 아니라 종래의 사양 고양이에 의해 얻어지는 루왁 커피의 경우에는 고양이의 장내에서 각종의 성분들이 흡수 또는 소모되어 성분들의 함유량이 매우 낮은데 비해 본 발명의 경우에는 생두 등의 혼합물과 미생물이 어우러져 새롭게 생물 전환되어 생성됨으로 인해 폴리페놀, 플라보노이드와 같은 각종 성분들의 함유량이 매우 높고 그리고 루왁 커피의 특성을 확정 짖는 아미노산 함량이 종래의 사양 고양이의 소화 산물에 의해 얻은 루왁 커피에 비해 매우 높으면서 커피의 특이한 취향을 유발할 수 있는 것에 장점이 있다.
According to the present invention having the above-described structure, microorganisms are inoculated into a mixture of maltose, papain, and aquaculture extract, which are ground in soy sauce and ground, based on the function of digestive organs and digestive enzymes, The method of extracting coffee is very simple. In addition, in the case of luwak coffee obtained by conventional cats, various components are absorbed or consumed in the intestines of cats, and the content of components is very low. In contrast, It has a very high content of various components such as polyphenols and flavonoids due to a new biotransformation due to the combination of microbes and mixtures of green beans, etc., and the amino acid content which determines the characteristics of the luwak coffee is the luwak It is very high compared to coffee, It has the advantage of being able to cause the taste.

도 1은 사양 고양이의 배설물인 소화 산물에서 유용한 대장균을 분획하여 배양하는 과정을 나타낸 흐름도이다.
도 2는 본 발명에 따른 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물을 제조하는 과정을 나타낸 공정의 블럭도이다.
FIG. 1 is a flow chart showing a process of fractionating and culturing Escherichia coli useful in a digestion product, which is a feces waste of a specification cat.
FIG. 2 is a block diagram of a process for producing a bio-converted coffee extract based on the Lewack coffee production pathway according to the present invention.

상기의 효과를 달성하기 위한 본 발명은 루왁 커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법에 관한 것으로서, 본 발명을 이해하는데 필요한 부분만이 설명되며, 그 이외의 설명은 본 발명의 요지를 흩트리지 않는 범위 내에서 생략될 것이라는 것을 유의하여야 한다.
The present invention relates to a method for producing a bio-converted coffee extract based on the route of producing luwak coffee. The present invention will be described in more detail below, It will be omitted within the scope of not disturbing.

일반적으로 사양 고양이의 소화 산물에 의해 생산되는 루왁 커피의 생성경로를 살펴보면 커피 열매를 먹은 사향 고양이(Luwak 또는 Civet, 학명 : Paradoxurus hermaphroditus)가 배설한 소화 산물에서 커피 씨앗을 채취하여 유용한 대장균을 분획한 후 이를 배양하여 가공한 커피로서, 도 1에 나타낸 바와 같이 커피 생두의 생산과정에서 습식법(Wet Method)에 해당하는 과정을 사향 고양이의 소화기관을 거치게 되므로 독특한 향과 맛을 지니게 되고, 소화기관에서 효소와 미생물의 작용으로 화학적 변화에 의해 생두의 색은 더욱 갈변화 되어 짙어지고 단단한 루왁을 생산하는 것이다.Generally, when looking at the production route of luwak coffee produced by the digestive products of the specification cats, coffee seeds were collected from the digestion products excreted by a musk cat (Luwak or Civet, scientific name: Paradoxurus hermaphroditus ) As shown in Fig. 1, the process corresponding to the wet method in the production process of coffee beans is passed through the digestive organs of musk cat, so that it has a unique flavor and taste. Due to the action of enzymes and microorganisms, the color of the green beans is further changed by chemical change to thicken and produce hard luuck.

하지만 상기와 같이 사양 고양이에 의해 루왁을 생산하기 위해서는 사양 고양이를 사육해야하는데 최근의 사양 고양이는 향을 얻거나 식용의 용도로 무차별 포획됨으로 인해 국제적 희귀종인 멸종단계에 진입해 보존이 시급할 뿐만 아니라 사양 고양이의 소화 산물인 생두의 경우에는 고양이의 장내에서 각종의 성분들이 흡수 또는 소모되어 그 함유량이 매우 낮은 문제점이 있다.
However, in order to produce luwak by the specification cats as described above, the specification cats must be raised. Recently, the cats have entered the stage of extinction, which is an internationally rare species due to the fragrance or the indiscriminate capture for edible purposes, Species In the case of green bean, which is a digestive product of cats, various components are absorbed or consumed in the intestines of cats, and the content thereof is very low.

그러나 본 발명에 의해 생성되는 루왁 커피 추출물은 사양 고양이의 소화기관과 소화 효소의 기능을 바탕으로 분쇄한 생두에 엿기름, 파파인, 아주까리 추출물 등을 각 단계별로 첨가한 혼합물에 미생물을 접종하여 배양 및 여과하여 커피 추출물을 제조함으로써, 커피의 추출방법이 매우 간단할 뿐만 아니라 종래 사양 고양이에 의해 얻어지는 루왁 커피에 비해 생두 등의 혼합물과 미생물이 어우러져 새롭게 생물 전환되어 각 성분들이 생성됨으로 인해 폴리페놀, 플라보노이드와 같은 성분들의 함유량이 매우 높고 그리고 루왁 커피의 특성을 확정 짖는 아미노산 함량도 종래의 사양 고양이의 소화 산물에 의해 얻은 루왁 커피에 비해 매우 높으면서 커피의 특이한 취향을 유발하는 특징이 있다.
However, the luwak coffee extract produced by the present invention is prepared by inoculating a microorganism into a mixture prepared by adding maltose, papain, and mackerel extract, which have been pulverized and ground, to each other according to the function of digestive organs and digestive enzymes of the cat. The coffee extract is very easy to extract, and besides the louwake coffee obtained by the conventional specification cat, the mixture of green bean and the like is mixed with the microorganism and newly bioconverted to produce the respective components. Thus, the polyphenol, flavonoid and flavonoid The content of the same ingredients is very high, and the amino acid content that determines the characteristics of the luwak coffee is also very high compared to the luwak coffee obtained by the digestive products of the conventional specification cats, and has a characteristic of inducing a peculiar taste of coffee.

본 발명을 첨부된 도면인 도 2를 중심으로 상세히 설명하면 아래의 내용과 같다.The present invention will now be described in detail with reference to FIG.

본 발명은 1) 커피의 생두를 선별하여 세척하고 건조시켜 0.3~0.5cm로 분쇄하는 생두 분쇄단계;The present invention relates to a method for grinding raw beans, which comprises the steps of: 1) grinding fresh beans of coffee, washing and drying the beans to 0.3 to 0.5 cm;

2) 상기 1)단계의 생두에 엿기름가루와 정제수를 혼합하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 엿기름 처리단계;2) a malt processing step of mixing the malt flour and the purified water at the beginning of the step 1) and allowing to stand at 24 ± 1 ° C for 1 day;

3) 상기 2)단계의 혼합물에 파파인을 첨가하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 파파인 처리단계;3) a papain treatment step in which papain is added to the mixture of step 2) and left at 24 ± 1 ° C for 1 day;

4) 상기 3)단계의 혼합물에 아주까리 추출물을 첨가하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 아주까리 추출물 처리단계;4) a step of treating the extract of Angelicae sativa L. in which the extract of Angelica keiskei is added to the mixture of step 3) and left at 24 ± 1 ° C for 1 day;

5) 상기 4)단계의 혼합물에 미생물을 접종하여 37~38℃에서 3일 동안 배양한 후 여기에 정제수를 투입하여 여과하는 미생물 접종단계;5) a microorganism inoculation step in which microorganisms are inoculated to the mixture of step 4), incubated at 37 to 38 ° C for 3 days, and then purified water is added thereto for filtration;

6) 상기 5)단계에서 여과한 혼합물을 방부처리하는 방부제처리 단계;를 거처 제조되는 것을 특징으로 한다.
6) a preservative treatment step of preserving the mixture filtered in the step 5).

본 발명에서 상기 1)단계는 커피의 생두를 선별하여 세척하고 건조시켜 0.3~0.5cm로 분쇄하는 생두 분쇄단계이다.
In the present invention, step (1) is a step of grinding raw beans, which is selected from coffee beans, washed, dried and ground to 0.3 to 0.5 cm.

본 발명에서 사용되는 생두는 꼭두서니과에 속하는 커피 나무로부터 얻어지며 열대성 식물로서, 생두의 외관에 흠집 등이 없는 것을 선별하여 세척하고 건조시켜 분쇄기로 0.3~0.5cm로 분쇄한 생두를 사용하는 것이 바람직하다.The green bean used in the present invention is preferably a tropical vegetable obtained from a coffee tree belonging to the madagascar family and selected from those having no scratches on the appearance of green bean, washed, dried and ground to a size of 0.3 to 0.5 cm by a grinder .

그리고 상기에서 생두를 분쇄하는 분쇄기는 특별히 한정하는 것은 아니고 소비자의 요구나 제조자의 필요에 따라 적절한 분쇄기로 분쇄하면 된다. 또한 세척한 생두를 건조시키는 방법도 특별히 한정하는 것은 아니고 그늘진 곳에서 건조시키면 된다.
The pulverizer for pulverizing the green bean is not particularly limited and may be pulverized by a suitable pulverizer according to the needs of the consumer or the needs of the manufacturer. Also, the method of drying the washed green beans is not particularly limited, and it may be dried in a shady place.

한편, 상기에서 사용되는 생두는 향이 우수하며 깊은 신맛이 있고 카페인이 비교적 적은 카페아 아라비카종과 아시아 대륙에서 대량으로 재배되는 카페아 로부스타종과 쓴맛이 매우 강하고 향이 거의 없는 커페아 리베리카종 중에서 1종 또는 2종 이상을 혼합하여 사용하면 된다.
On the other hand, the fresh beans used in the above are excellent in flavor, deep in sourness, relatively low in caffeine and in caffea rubusa species cultivated in large quantities in Asian continent, and one kind of caffea liberica radish having a very bitter taste and almost no fragrance Or a mixture of two or more of them may be used.

본 발명에서 상기 2)단계는 상기 1)단계의 생두에 엿기름가루와 정제수를 혼합하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 엿기름 처리단계이다.
In the present invention, the step 2) is a malt processing step in which the malt flour and the purified water are mixed at the green beans of the step 1) and allowed to stand at 24 ± 1 ° C for 1 day.

본 발명에서 첨가되는 엿기름은 밀, 보리 등에 물을 주어 싹을 내서 말린 것을 사용하여 만든 식용 당화 분해효소로서, 엿기름에 함유되어 있는 β-아밀라아제는 녹말을 엿당으로 분해하여 생두 고유의 맛과 향을 내는 역할을 한다.
The maltol added in the present invention is an edible saccharification decomposition enzyme produced by using sprouts and dried by giving water to wheat, barley, etc. The? -Amylase contained in malt decomposes the starch into the saccharide, It plays a role.

한편, 상기 생두에 첨가되는 엿기름가루와 정제수는 엿기름가루 100 중량부에 정제수 715 중량부를 혼합하여 24±1℃에서 1일 동안 방치한 후 여과한 여액을 생두 1 : 여액 1의 중량비로 혼합하여 사용하는 것이 바람직하다. On the other hand, the malt flour and purified water added to the soybean flour were mixed with 100 parts by weight of malt flour and 715 parts by weight of purified water, and the mixture was allowed to stand at 24 ± 1 ° C. for 1 day. The filtrate was mixed in a weight ratio of 1: .

그리고 상기에서 첨가되는 정제수의 혼합량이 상기 범위를 벗어나 혼합될 경우에는 엿기름 여액의 농도가 너무 높아지거나 낮아져 생두의 고유 성분이 변질될 우려가 있다. If the mixing amount of the purified water to be added is beyond the above range, the concentration of the malt filtrate becomes excessively high or low, and the intrinsic component of the malt be changed.

본 발명에서 상기 3)단계는 상기 2)단계의 혼합물에 파파인을 첨가하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 파파인 처리단계이다.
In the present invention, step 3) is a papain treatment step in which papain is added to the mixture of step 2), and the mixture is allowed to stand at 24 ± 1 ° C for 1 day.

상기에서 파파인은 열대 과일 파파야(Carica papaya)의 과일 및 잎에서 추출되는 시스테인 단백질 가수분해 효소로서, 상기 2)단계의 혼합물에 소화효소를 분비하여 생두를 잘게 부수는 역할을 하며, 그 혼합량은 생두 100 중량부에 대하여 10~15 중량부를 첨가하는 것이 바람직하다. 상기 파파인의 첨가량이 10 중량부 미만일 경우에는 소화효소의 분비가 작아 생두가 잘게 부서지지 않을 우려가 있고, 상기 파파인의 첨가량이 15 중량부를 초과할 경우에는 소화효소의 분비 과다로 생두가 요구하는 이상으로 잘게 부서질 우려가 있다.
In the above, papain is a cysteine protein hydrolyzing enzyme extracted from fruits and leaves of tropical fruit papaya (Carica papaya). It secretes digestive enzymes into the mixture of step 2) It is preferable to add 10 to 15 parts by weight to 100 parts by weight. When the added amount of the papain is less than 10 parts by weight, the secretion of the digestive enzyme is small, and the papilla is not finely divided. When the added amount of the papain exceeds 15 parts by weight, There is a risk that it will be broken down into small pieces.

한편, 상기와 같이 파파인을 혼합한 혼합물은 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 것이 바람직하다. 상기 방치하는 조건이 상기 범위를 벗어날 경우에는 소화효소의 한계로 얻고자 하는 혼합물이 발현되지 않을 우려가 있다.
On the other hand, it is preferable that the mixture containing papain as described above is allowed to stand at 24 占 폚 for 1 day. If the above-mentioned conditions for leaving remain outside the above range, there is a possibility that the mixture to be obtained is not expressed due to the limitation of digestive enzymes.

본 발명에서 상기 4)단계는 상기 3)단계의 혼합물에 아주까리 추출물을 첨가하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 아주까리 추출물 처리단계이다. 상기에서 아주까리 추출물을 첨가한 혼합물을 방치하는 조건이 상기 조건을 벗어날 경우에는 아주까리 추출물의 분해력이 저하될 우려가 있다.
In the present invention, step 4) is a step of treating the extract of Angelicae sativa L. in which the extract of Angelica keismani is added to the mixture of step 3) and left at 24 ± 1 ° C for 1 day. If the above condition is not satisfied, the decomposition ability of the extract can be lowered.

본 발명에서 사용되는 아주까리는 라이페이스, 리파아제 등을 다량 함유하고 있어 지방을 분해하여 지방산과 글리세린으로 분해시키는 효소로서, 아주까리를 -4~-2℃에서 10~12일 동안 저장한 후 상온에서 싹을 틔워 그중 싹이 튼 것을 선별하여 껍질을 제거하고 3~5분 동안 분쇄한 후 n-핵산(n-Hexane)를 투입하여 저어면서 1일 동안 방치하여 여과한 것을 첨가하는 것이 바람직하다. 상기 아주까리의 저장 조건이 상기 조건을 벗어날 경우에는 싹을 틔울 때 요구하는 기간 내에 싹이 충분히 틔지 않을 우려가 있다.
The enzyme used in the present invention, which contains a large amount of lipase, lipase and the like, decomposes fat to decompose into fatty acid and glycerin. The enzyme is stored at -4 to -2 ° C for 10 to 12 days, And remove the bark. It is then pulverized for 3 to 5 minutes. Then, n-nucleic acid (n-Hexane) is added to the solution, which is left to stand for 1 day and filtered. If the storage conditions of the castor sprouts are out of the above-mentioned range, there is a fear that the sprouts will not be sufficiently squeezed within a period required for sprouting.

그리고 상기 n-핵산의 첨가량은 분쇄한 아주까리 100 중량부에 대하여 10~15 중량부인 것이 바람직하다. 상기 n-핵산의 첨가량이 10 중량부 미만일 경우에는 n-핵산의 첨가량 부족으로 아주까리 추출물이 충분히 추출되지 않을 우려가 있고, 상기 n-핵산의 첨가량이 15 중량부를 초과할 경우에는 아주까리 추출물은 충분히 추출될 수 있으나 첨가량에 비해 그 효과가 미약하다.
The amount of the n-nucleic acid to be added is preferably 10 to 15 parts by weight based on 100 parts by weight of crushed sugar castor. If the amount of the n-nucleic acid to be added is less than 10 parts by weight, there is a possibility that the extract of the mugwort can not be extracted sufficiently due to the insufficient amount of the n-nucleic acid. If the amount of the n-nucleic acid is more than 15 parts by weight, But its effect is weak compared to the addition amount.

본 발명에서 상기 5)단계는 상기 4)단계의 혼합물에 미생물을 접종하여 37~38℃에서 3일 동안 배양한 후 여기에 정제수를 투입하는 미생물 접종단계이다.In the present invention, step 5) is a step of inoculating microorganisms into the mixture of step 4), incubating the mixture at 37-38 ° C for 3 days, and then adding purified water thereto.

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상기에서 미생물을 접종한 혼합물의 배양조건이 상기 조건을 벗어날 경우에는 미생물의 활동성 차이로 인해 생물 전환이 원활하게 이루어지지 않아 폴리페놀, 플라보노이드와 같은 각종 성분들의 함유량이 저하될 우려가 있다.
When the culture conditions of the mixture inoculated with the microorganisms are out of the above-described conditions, the biological conversion is not smoothly performed due to the difference in activity of the microorganisms, and the contents of various components such as polyphenols and flavonoids may be lowered.

그리고 본 발명에서 사용되는 미생물은 혼합물에 새롭게 생물 전환이 원활하게 생성되어 각종 성분들의 함량을 높이는 역할을 하는 것으로서, 바람직하게는 커피 원두를 장내미생물인 Lactobacillus plantarum sp. Bifidobacterium bifidum sp. Lactobacillus acidophilus sp. Lactobacillus salivarius sp. Bifidobacterium infantis sp. Lactobacillus lactis sp. Lactobacillus reuteri sp. Lactobacillus brevis sp. Streptococcus thermophilus sp. Bifidobacterium longum sp. Lactobacillus bulgaricus sp. Lactobacillus acidophilus DDS-1 sp. Lactobacillus casei sp. Lactobacillus rhamnosus sp. 또는 사향 고양이의 장내미생물인 Uncultured Clostridium sp. Staphylococcus sp. Uncultured Chryseobacterium sp. Uncultured Raoultella sp. Uncultured Sphingopyxis sp. Uncultured soil bacterium, Uncultured Bifidobacterium sp. Eubacterium tarantellae strain UM87, Clostridium sardiniense strain 1025_1 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상을 선택하여 사용하는 것이 바람직하다.The microorganism used in the present invention plays a role of newly inducing a biotransformation to the mixture smoothly and enhancing the content of various components. Preferably, the coffee beans are introduced into intestinal microorganism Lactobacillus plantarum sp. Bifidobacterium bifidum sp. Lactobacillus acidophilus sp. Lactobacillus salivarius sp. Bifidobacterium infantis sp. Lactobacillus lactis sp. Lactobacillus reuteri sp. Lactobacillus brevis sp. Streptococcus thermophilus sp. Bifidobacterium longum sp. Lactobacillus bulgaricus sp. Lactobacillus acidophilus DDS-1 sp. Lactobacillus casei sp. Lactobacillus rhamnosus sp. Or intramuscular intestinal microorganism Uncultured Clostridium sp. Staphylococcus sp. Uncultured Chryseobacterium sp. Uncultured Raoultella sp. Uncultured Sphingopyxis sp. Uncultured soil bacterium, Uncultured Bifidobacterium sp. Eubacterium tarantellae strain UM87, Clostridium sardiniense strain 1025_1 , and the like.

또한 상기 혼합물에 접종시키는 미생물의 접종량은 생두 100 중량부에 대하여 3~5 중량부인 것이 바람직하다. 상기 혼합물에 미생물을 접종하는 량이 3 중량부 미만일 경우에는 미생물의 접종량 부족으로 혼합물로부터 원활하게 생물 전환이 생성되지 않을 우려가 있고, 상기 혼합물에 미생물을 접종하는 량이 5 중량부를 초과할 경우에는 혼합물로부터 생물 전환은 원활하게 생성될 수 있으나 접종량에 비해 그 효과가 미약하다.
It is also preferable that the inoculation amount of the microorganism to be inoculated into the mixture is 3 to 5 parts by weight based on 100 parts by weight of the green bean. If the amount of the microorganism to be inoculated into the mixture is less than 3 parts by weight, there is a fear that the bioconversion is not smoothly generated from the mixture due to the insufficient amount of microorganisms to be inoculated. If the amount of microorganisms to be inoculated into the mixture exceeds 5 parts by weight, Biotransformation can be produced smoothly, but its effect is weak compared to inoculation amount.

한편, 상기와 같이 미생물을 접종하여 배양한 혼합물은 적합하게는 혼합물 100 중량부에 대하여 정제수 500~1000 중량부를 첨가하여 혼합한 후 여과하는 것이 바람직하다. 상기에서 정제수의 첨가량이 500 중량부 미만일 경우에는 배양된 혼합물의 높은 농도로 인해 커피 생물전환 추출물의 량이 저하될 우려가 있고, 상기 정제수의 첨가량이 1000 중량부를 초과할 경우에는 배양된 혼합물의 농도가 떨어져 커피 생물전환 추출물의 량은 향상시킬 수 있으나 함유된 각종 성분이 저하될 우려가 있다.
On the other hand, it is preferable that 500-1000 parts by weight of purified water is added to and mixed with 100 parts by weight of the mixture after culturing the microorganisms inoculated as described above. If the amount of the purified water is less than 500 parts by weight, the amount of the coffee bean conversion extract may decrease due to the high concentration of the cultured mixture. If the amount of the purified water is more than 1000 parts by weight, The amount of the coffee bean conversion extract can be improved, but various components contained therein may be deteriorated.

그리고 상기와 같이 정제수를 첨가한 혼합물은 5~8㎛ 여과체로 여과한 후 1㎛ 여과체로 여과하고 이어서 0.25㎛ 여과체로 여과한 다음 UV필터를 거쳐 제균하는 것이 바람직하다. 이와 같이 제균처리된 여과액은 폴리페놀, 플라보노이드와 같은 각종 성분들의 함유량이 매우 높고 그리고 루왁 커피의 특성을 확정 짖는 아미노산 함량이 종래의 사양 고양이의 소화 산물에 의해 얻은 루왁 커피에 비해 매우 높은 커피 추출물을 얻을 수 있는 것이다.
The mixture containing purified water as described above is preferably filtered through a 5-8 μm filter, followed by filtration through a 1 μm filter, followed by filtration through a 0.25 μm filter, followed by filtration through a UV filter. In this way, the filtered solution has a very high content of various components such as polyphenols and flavonoids, and the amino acid content, which determines the characteristics of the luwak coffee, is much higher than that of the luwak coffee obtained by the digestive products of the conventional cat Can be obtained.

본 발명에서 상기 6)단계는 상기 5)단계에서 여과한 생물전환 커피 추출물에 방부처리하는 단계로서, 방부처리하는 방법은 특별히 한정하는 것은 아니고 필요에 따라 적절한 방법으로 처리하면 된다.In the present invention, the step 6) is a step of preserving the biologically converted coffee extract filtered in the step 5). The preservation treatment is not particularly limited and may be appropriately carried out according to need.

그리고 상기 생물전환 커피 추출물에 투입되는 방부제는 생물전환 커피 추출물 100 중량부에 대하여 0.1~0.5 중량부인 것이 바람직하다. 상기 방부제의 투입량이 0.1 중량부 미만일 경우에는 생물전환 커피 추출물의 보존기간이 짧아질 우려가 있고, 상기 방부제의 투입량이 0.5 중량부를 초과할 경우에는 생물전환 커피 추출물의 보존기간이 유효성분들의 보존기간보다 길어질 우려가 있다.
Preferably, the preservative added to the bio-converted coffee extract is 0.1 to 0.5 parts by weight based on 100 parts by weight of the bio-converted coffee extract. If the amount of the preservative added is less than 0.1 part by weight, the preservation period of the bio-converted coffee extract may be short. If the amount of the preservative is more than 0.5 parts by weight, the preservation period of the bio- There is a possibility that it becomes longer.

한편, 본 발명에서 사용되는 방부제는 1,2-헥산디온(1,2-hexanedione), 카프릴릴 글라이콜(Caprylyl Glycol), 트로폴론(Tropolone), 에칠헥실글리세린(Ethylhexylglycerin) 중에서 1종을 선택하여 사용하는 것이 바람직하다.Meanwhile, the preservative used in the present invention is one selected from 1,2-hexanedione, Caprylyl Glycol, Tropolone, Ethylhexylglycerin, It is preferable to use them selectively.

이하 실시 예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시 예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. It is to be understood that the scope of the present invention is not limited by these examples in accordance with the gist of the present invention, and it is to be understood by those skilled in the art that the present invention is not limited thereto It will be obvious.

1. 커피 추출물의 제조1. Preparation of coffee extract

(실시예 1)(Example 1)

흠집이 없는 카페아 아라비카종 생두를 선별하여 세척한 후 건조시켜 분쇄기로 0.3~0.5cm의 크기로 분쇄한 생두 200g에 정제된 엿기름가루와 정제수의 혼합물 200g를 첨가하여 24±1℃의 보관실에서 1일 동안 방치한 다음 파파인 20g을 첨가하여 24±1℃의 보관실에서 1일 동안 방치하고 여기에 아주까리 추출물 30g을 첨가하여 24±1℃의 보관실에서 1일 동안 방치하였다. 그리고 사향 고양이의 장내에서 채취된 Uncultured Clostridium sp . 미생물 10g을 접종하여 38℃의 배양실에서 3일 동안 배양한 후 여기에 정제수 1.5ℓ를 첨가하여 5㎛ 여과체로 여과한 후 1㎛ 여과체로 여과하고 이어서 0,25㎛ 여과체로 여과한 후 UV필터를 거쳐 제균하여 생물전환 커피 추출물을 제조하였다.
100 g of a mixture of refined maltose powder and purified water was added to 200 g of green beans ground to a size of 0.3 to 0.5 cm by a grinder, and the mixture was incubated in a storage room at 24 ± 1 ° C for 1 20 g of papain was added and left for 1 day in a storage room of 24 ± 1 ° C. To the mixture was added 30 g of the extract of Angelica gigas Nakai and the mixture was allowed to stand in a storage room of 24 ± 1 ° C. for 1 day. Uncultured from the intestines of musk cat Clostridium sp . 10 g of microorganism was inoculated and cultured in a culture room at 38 ° C for 3 days. Then, 1.5 L of purified water was added thereto, followed by filtration through a 5 탆 filter, followed by filtration through a 1 탆 filter, followed by filtration through a 0,25 탆 filter, Which was then sterilized to prepare a biologically converted coffee extract.

상기에서 사용한 엿기름가루와 정제수는 엿기름가루 350g과 정제수 2.5ℓ를 첨가하여 24±1℃의 보관실에서 1일 동안 방치한 다음 6㎛ 여과체로 여과한 후 2.5 ㎛ 여과체로 여과하여 얻은 여액을 사용하였다.The malt flour and purified water used in the above were prepared by adding 350 g of malt flour and 2.5 L of purified water, left standing in a storage room at 24 ± 1 ° C for 1 day, filtered through a 6 μm filter, and filtered through a 2.5 μm filter.

상기에서 아주까리 추출물은 -4℃에서 10일 동안 저장한 후 200g을 계량하여 상온에서 싹을 틔우고 껍질을 제거하여 3분 동안 믹스기로 분쇄한 후 여기에 n-핵산 500g을 투입하여 교반하면서 1일 동안 방치한 다음 6㎛ 여과체로 여과한 후 2.5㎛ 여과체로 여과한 여액을 사용하였다.
The extracts were stored at -4 ° C for 10 days, weighed 200 g, and then sprouted at room temperature. The shells were removed, and the mixture was pulverized for 3 minutes with a mixer. 500 g of n-nucleic acid was added thereto, The filtrate was filtered through a 6 mu m filter sieve and then filtered through a 2.5 mu m filter sieve.

(비교예 1)(Comparative Example 1)

시중에 판매 중인 커피의 원료 중에서 선택된 카페아 아라비카종 생두의 추출물이다.It is an extract of caffea arabica japonica which is selected from the raw materials of coffee sold on the market.

(비교예 2)(Comparative Example 2)

시중에 판매 중인 루왁 커피 추출물이다.
It is a luwak coffee extract sold on the market.

2. 총 폴라보노이드 함량시험2. Total Polarbonoid Content Test

총 플라보노이드 함량시험은 상기 1의 실시예 1 및 비교예 1, 2의 각 시료 1㎖에 대하여 디에틸렌글리콜 2㎖와 1N-NaOH 20㎕를 가한 다음 37℃ 항온 수조에서 1시간 동안 방치한 후 420nm에서 분광광도계로 흡광도를 옵티즌(OPTIZEN) 2120UV(메가시스, 대한민국) 분석기기로 각각 5회 측정하여 그중 중간치를 [표 1]에 나타내었다.
For the total flavonoid content test, 2 ml of diethylene glycol and 20 μl of 1N-NaOH were added to 1 ml of each of the samples of Example 1 and Comparative Examples 1 and 2 above, and the mixture was allowed to stand in a constant temperature water bath at 37 ° C for 1 hour, The absorbance was measured with OPTIZEN 2120UV (Megasys, Korea) analytical instrument five times, and the median values thereof were shown in Table 1.

3. 총 페놀함량 시험3. Total phenol content test

총 페놀 함량시험은 페놀성 물질이 인몰리브덴산과 반응하여 청색을 나타내는 원리를 이용한 것으로서, 상기 1의 실시예 1 및 비교예 1, 2의 각 시료 0.5㎖ 용액에 폴린-시오칼토페놀 시약 (Folin-ciocalteu's phenol reagent) 2.5㎖를 첨가하여 잘 혼합하고 5분간 실온에서 방치하여 반응시킨 후, 7.5% Na2CO3 2㎖를 가하여 혼합하고 50℃에서 5분간 발색시킨 후 760nm에서 분광광도계로 흡광도를 옵티즌(OPTIZEN) 2120UV(메가시스, 대한민국) 분석기기로 각각 5회 측정하여 그중 중간치를 [표 1]에 나타내었다.
The total phenol content test was based on the principle that the phenolic substance reacted with the molybdic acid to reveal blue color. To 0.5 ml of each of the samples of Example 1 and Comparative Examples 1 and 2 of the above 1, a Folin-thiocaltophenol reagent (Folin- ciocalteu's phenol reagent) was added, mixed well, allowed to stand at room temperature for 5 minutes, and then reacted with 7.5% Na 2 CO 3 The absorbance was measured with a spectrophotometer at 760 nm for 5 times by means of OPTIZEN 2120 UV (Megasys, Korea) analyzer, and the median values thereof were shown in Table 1 .

4. 황산화 활성시험4. Sulfation activity test

황산화 활성시험은 커피 추출물의 전자공여능인 0.15mM DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazoyl)에탄올의 프리라디칼소거활성(Free Radical Scavenging Activity)를 이용하여 옵티즌(OPTIZEN) 2120UV(메가시스, 대한민국) 분석기기로 각각 5회 측정하여 그중 중간치를 [표 1]에 나타내었다. The sulfation activity test was performed using OPTIZEN 2120UV (Megasys) using free radical scavenging activity of 0.15 mM DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazoyl) ethanol as the electron donating ability of the coffee extract. , Korea). The median values are shown in [Table 1].

상기에서 0.15mM DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazoyl)에탄올은 프리라디칼을 가지는 분자량 394.32의 검보라색 고형 물질이다.
In the above, 0.15 mM DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazoyl) ethanol is a black solid substance having a free radical and a molecular weight of 394.32.

한편, 상기 프리라디칼소거활성을 이용한 DPPH의 반응용액 측정조건은 아래와 같다.The conditions for measuring the reaction solution of DPPH using the free radical scavenging activity are as follows.

1) 실험(Experimental)용액은 상기 1의 실시예 1 및 비교예 1, 2의 각 시료 0.5㎖와 DPPH 용액 0.5㎖를 혼합하여 37℃ 항온조에서 30분 동안 반응시킨 후 517nm에서 분광광도계로 흡광도를 측정하였다.1) Experimental solution was prepared by mixing 0.5 ml of each sample of Example 1 and Comparative Examples 1 and 2 above and 0.5 ml of DPPH solution, reacting in a 37 ° C thermostat for 30 minutes, and then measuring absorbance at 517 nm using a spectrophotometer Respectively.

2) 순수(Blank)용액은 상기 1의 실시예 1 및 비교예 1, 2의 각 시료 0.5㎖와 에탄올 0.5㎖를 혼합하여 37℃ 항온조에서 30분 동안 반응시킨 후 517nm에서 분광광도계로 흡광도를 측정하였다.2) The blank solution was prepared by mixing 0.5 ml of each of the samples of Example 1 and Comparative Examples 1 and 2 above and 0.5 ml of ethanol, reacting in a 37 ° C thermostat for 30 minutes, and then measuring the absorbance at 517 nm using a spectrophotometer Respectively.

3) 조절(Control)용액은 에탄올 0.5㎖와 DPPH용액 0.5㎖를 혼합하여 37℃ 항온조에서 30분 동안 반응시킨 후 517nm에서 분광광도계로 흡광도를 측정하였다.
3) The control solution was prepared by mixing 0.5 ml of ethanol and 0.5 ml of DPPH solution, reacting in a 37 ° C thermostat for 30 minutes, and measuring absorbance at 517 nm with a spectrophotometer.

상기 517nm에서 분광광도계로 측정한 흡광도는 아래의 식에 의해 계산하였으며 그 결과는 [표 1]에 나타내었다. The absorbance measured by the spectrophotometer at 517 nm was calculated by the following equation, and the results are shown in Table 1 below.

- DPPH 황산화활성(%) = {1-(실험용액 흡광도 - 순수용액 흡광도)/조절용액 흡광도}×100
- DPPH sulfation activity (%) = {1- (absorbance of test solution - absorbance of pure solution) / absorbance of controlled solution} × 100

5. 아미노산 분석시험5. Amino acid analysis test

1)시험액은 상기 1의 실시예 1 및 비교예 1, 2의 각 시료 0.2㎖에 6mol-HCl 용액 9.8㎖을 혼합하여 24시간 동안 130℃의 항온조에서 가수분해를 수행한 다음 여기에 초순수 50㎖ 첨가하여 실린지 필터(syringe filter)로 여과한 여액 20uL과 20㎖ HCl 20uL를 혼합하여 시험액을 제조하였다.
1) The test solution was prepared by mixing 0.2 ml of each sample of Example 1 and Comparative Examples 1 and 2 with 9.8 ml of 6 mol-HCl solution, hydrolyzing the mixture in a thermostatic chamber at 130 ° C for 24 hours, adding 50 ml of ultrapure water And 20 μL of the filtrate, which had been filtered with a syringe filter, was mixed with 20 μL of 20 mL of HCl to prepare a test liquid.

2)아미노산 분석은 상기 1)에 의해 제조된 시험액을 6890B GC-FID{애질런트(AGILENT), 미국} 분석기기에 의해 구성 아미노산과 유리 아미노산을 5회 측정하여 그중 중간치를 [표 1]에 나타내었다.
2) Amino acid analysis The amino acid and free amino acid were measured 5 times by the 6890B GC-FID (AGILENT, USA) analyzer and the median values thereof were shown in Table 1 .

시험항목Test Items 단위unit 실시예 1Example 1 비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 총 폴라보노이드 함량Total Polarbanolide Content 킬/㎖Kill / ml 766766 4444 3232 총 페놀함량Total phenol content %% 3095.423095.42 37.7937.79 28.6628.66 황산화 활성Sulfation activity ppmppm 90.5490.54 45.245.2 38.2838.28
아미노산

amino acid
구성Configuration mg/kgmg / kg 1759417594 928928 22222222
유리Glass mg/kgmg / kg 79147914 7272 170170

상기 [표 1]의 시험결과에 나타난 바와 같이 실시예 1의 경우에는 분쇄한 생두에 엿기름, 파파인, 아주까리 추출물을 각 단계별로 첨가한 혼합물에 미생물을 접종하여 배양한 후 이를 여과하여 커피 추출물을 제조함으로써, 커피 추출물에 함유된 총 폴라보노이드 함량, 총 페놀함량, 황산화 활성 및 아미노산의 함량이 매우 높은 것으로 평가되었다.As shown in the test results of Table 1, in the case of Example 1, microorganisms were inoculated and cultured in a mixture prepared by adding crushed soybean maltose, papain, and aquaculture extract to each step, followed by filtration to prepare a coffee extract , The total content of the polycarbonate, the total phenol content, the sulfation activity and the amino acid content in the coffee extract were evaluated to be very high.

이에 비해 비교예 1의 경우에는 단순히 카페아 아라비카종의 생두 추출물을 사용함으로 인해 엿기름, 파파인, 아주까리 추출물 및 미생물을 접종하여 배양한 실시예 1에 비해 각 항목의 성분함유량이 매우 낮은 것으로 평가되었다.On the contrary, in the case of Comparative Example 1, the content of each ingredient was evaluated to be extremely low as compared with Example 1 in which the soybean extract of caffea arabica was simply used and cultured by inoculation with maltose, papain, aquaculture extract and microorganism.

이에 비해 비교예 2의 경우에는 사양 고양이의 수화 산물에서 얻어지는 루왁 커피로서, 고양이가 섭취한 커피 생두에서 생성되는 각종 성분들이 고양이의 장내에서 흡수 또는 소모됨으로 인해 고양이의 소화 산물로부터 대장균을 분획하여 배양하더라도 상기 [표 1]에 나타난 바와 같이 각종 성분들의 함유량이 매우 낮은 것으로 평가되었다.
On the other hand, in the case of Comparative Example 2, the luwak coffee obtained from the product of hydration of the specification cat was fractionated from the digestion products of cats due to the absorption or consumption of various components produced in the coffee intestines of cats, The content of various components was evaluated to be extremely low as shown in Table 1 above.

상기에서 설명 드린 바와 같이 본 발명은 상기의 실시예를 통해 그 물성의 우수성이 입증되었지만 본 발명은 상기의 구성에 의해서만 반드시 한정되는 것이 아니고, 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 여러 가지 치환, 변형 및 변경이 가능하다.As described above, the present invention proves the superiority of the physical properties through the above-mentioned embodiments. However, the present invention is not limited to the above-mentioned constitution, and various substitutions , Variations and modifications are possible.

Claims (8)

1) 커피의 생두를 선별하여 세척하고 건조시켜 0.3~0.5cm로 분쇄하는 생두 분쇄단계;
2) 상기 1)단계의 생두에 엿기름가루와 정제수를 혼합하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 엿기름 처리단계;
3) 상기 2)단계의 혼합물에 파파인을 첨가하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 파파인 처리단계;
4) 상기 3)단계의 혼합물에 아주까리 추출물을 첨가하여 24±1℃에서 1일 동안 방치하는 아주까리 추출물 처리단계;
5) 상기 4)단계의 혼합물에 미생물을 접종하여 37~38℃에서 3일 동안 배양한 후 여기에 정제수를 투입하여 여과하는 미생물 접종단계;
6) 상기 5)단계에서 여과한 혼합물을 방부처리하는 방부제처리 단계;를 거처 제조되는 것을 특징으로 하는 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법.
1) a step of grinding soybeans which is selected by washing the coffee bean, washing and drying and then pulverizing the coffee beans to 0.3 to 0.5 cm;
2) a malt processing step of mixing the malt flour and the purified water at the beginning of the step 1) and allowing to stand at 24 ± 1 ° C for 1 day;
3) a papain treatment step in which papain is added to the mixture of step 2) and left at 24 ± 1 ° C for 1 day;
4) a step of treating the extract of Angelicae sativa L. in which the extract of Angelica keiskei is added to the mixture of step 3) and left at 24 ± 1 ° C for 1 day;
5) a microorganism inoculation step in which microorganisms are inoculated to the mixture of step 4), incubated at 37 to 38 ° C for 3 days, and then purified water is added thereto for filtration;
6) a preservative treatment step of preserving the mixture filtered in the step 5). ≪ / RTI >
제 1항에 있어서,
상기 생두는 카페아 아라비카종, 카페아 로부스타종, 커페아 리베리카종 중에서 1종 또는 2종 이상을 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
A method for producing a biologically converted coffee extract based on a pathway for producing Lewaq coffee characterized by using at least one selected from the group consisting of caffea arabica, caffea robusta, and caffea liberica.
제 1항에 있어서,
상기 생두에 혼합되는 엿기름가루과 정제수는 엿기름가루 100 중량부와 정제수 715 중량부를 혼합하여 24±1℃에서 1일 동안 방치한 후 여과한 여액을 생두와 1 : 1의 중량비로 혼합하는 것을 특징으로 하는 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
100 parts by weight of malt flour and 715 parts by weight of purified water were mixed at a temperature of 24 ± 1 ° C. for 1 day, and the filtrate was mixed at a weight ratio of 1: 1 to the raw meal. A process for the production of a bioconverted coffee extract based on the route of luwak coffee production.
제 1항에 있어서,
상기 아주까리 추출물은 -4~-2℃에서 10~12일 동안 저장한 후 상온에서 싹을 틔워 싹이 튼 것을 선별하여 껍질을 제거하고 5분 동안 분쇄한 후 n-Hexane를 투입하여 저어면서 1일 동안 방치한 후 여과하는 것을 특징으로 하는 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
The extracts were stored at -4 to -2 ° C for 10 to 12 days, then shoots were germinated at room temperature. After removing the husks, they were pulverized for 5 minutes. Then, n-hexane was added thereto, And then filtering the mixture. The method for producing a biologically converted coffee extract according to claim 1,
삭제delete 제 1항에 있어서,
상기 5)단계의 미생물은 커피 원두를 장내미생물인 Lactobacillus plantarum sp. Bifidobacterium bifidum sp. Lactobacillus acidophilus sp. Lactobacillus salivarius sp. Bifidobacterium infantis sp. Lactobacillus lactis sp. Lactobacillus reuteri sp. Lactobacillus brevis sp. Streptococcus thermophilus sp. Bifidobacterium longum sp. Lactobacillus bulgaricus sp. Lactobacillus acidophilus DDS-1 sp. Lactobacillus casei sp. Lactobacillus rhamnosus sp.와 사향 고양이의 장내미생물인 Uncultured Clostridium sp. Staphylococcus sp. Uncultured Chryseobacterium sp. Uncultured Raoultella sp. Uncultured Sphingopyxis sp. Uncultured soil bacterium, Uncultured Bifidobacterium sp. Eubacterium tarantellae strain UM87, Clostridium sardiniense strain 1025_1 중에서 선택된 1종 또는 그 이상을 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
The microorganism of step 5) was prepared by mixing the coffee beans with intestinal microorganisms Lactobacillus plantarum sp. Bifidobacterium bifidum sp. Lactobacillus acidophilus sp. Lactobacillus salivarius sp. Bifidobacterium infantis sp. Lactobacillus lactis sp. Lactobacillus reuteri sp. Lactobacillus brevis sp. Streptococcus thermophilus sp. Bifidobacterium longum sp. Lactobacillus bulgaricus sp. Lactobacillus acidophilus DDS-1 sp. Lactobacillus casei sp. Lactobacillus rhamnosus sp. And intracellular microorganism Uncultured Clostridium sp. Staphylococcus sp. Uncultured Chryseobacterium sp. Uncultured Raoultella sp. Uncultured Sphingopyxis sp. Uncultured soil bacterium, Uncultured Bifidobacterium sp. Eubacterium tarantellae strain UM87, and Clostridium sardiniense strain 1025_1 are selected and used for the production of the brewer 's coffee extract.
제 1항에 있어서,
상기 5)단계의 여과는 5~8㎛ 여과체로 여과한 후 1㎛ 여과체로 하고 이어서 0,25㎛ 여과체로 여과한 다음 UV필터를 거쳐 제균하는 것을 특징으로 하는 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1,
The filtration in step 5) is performed by filtration through a 5- to 8-μm filter, followed by filtration through a 1-μm filter, followed by filtration through a 0.25-μm filter, followed by filtration through a UV filter. Process for the preparation of a converted coffee extract.
제 1항 내지 제 4항, 제 6항 및 제 7항 중 어느 한 항에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 루왁커피 생성경로를 바탕으로 한 생물전환 커피 추출물.
A bioconverted coffee extract based on the route of producing luwak coffee, which is produced by any one of claims 1 to 4, 6 and 7.
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